MX2015003500A

MX2015003500A - Metodos para tratar hepatitis c.

Info

Publication number: MX2015003500A
Application number: MX2015003500A
Authority: MX
Inventors: David A Degoey; Warren M Kati; John K Pratt; Clarence J Maring; Rolf Wagner; Preethi Krishnan; Tami J Pilot-Matias; Neeta C Mistry; Christine A Collins; Danchun Liu
Original assignee: Abbvie Inc
Priority date: 2012-09-18
Filing date: 2013-09-17
Publication date: 2015-06-22
Also published as: CA2885024A1; ZA201501758B; HK1209320A1; SG11201502108RA; US20140080886A1; AU2013318311A1; WO2014047048A1; RU2015114566A; EP2897609A1; CN104780920A; BR112015006058A2; JP2015528513A; TW201412309A

Abstract

Se describen inhibidores de VHC pan-genotípicos. Esta invención también se relaciona a métodos para utilizar estos inhibidores para tratar infección por VHC.

Description

METODOS PARA TRATAR HEPATITIS C CAMPO DE LA INVENCION La presente invención se refiere a inhibidores de VHC pan-genotípicos y a metodos para utilizar los mismos para tratar la infección por VHC.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION El virus de la hepatitis C (VHC) es un virus de ARN que pertenece al género Hepacivirus en la familia Flaviviridae. El virión de VHC con envoltura contiene un genoma de ARN de cadena positiva que codifica para todas las proteínas específicas de virus conocidas en un marco de lectura abierto, ininterrumpido, individual. El marco de lectura abierto comprende aproximadamente 9500 nucleótidos y codifica para una poliproteína grande individual de aproximadamente 3000 aminoácidos. La poliproteína comprende una proteína central, proteínas de envoltura E1 y E2, una proteína unida a membrana p7, y las proteínas no estructurales NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A y NS5B.

La infección por VHC está asociada con patología hepática progresiva, incluyendo cirrosis y carcinoma hepatocelular. La hepatitis C crónica puede ser tratada con peg-interferón-alfa en combinación con ribavirina. Aún permanecen limitaciones sustanciales para la eficacia y tolerabilidad ya que muchos usuarios padecen de efectos secundarios, y la eliminación viral del cuerpo con frecuencia es inadecuada. Por lo tanto, existe una necesidad de nuevos fármacos para tratar infección por VHC.

BREVE DESCRIPCION DE LA INVENCION Se descubrió de manera sorpresiva que (2S,2’S)-1 , 1’-((2S,2’S)-2,2’-(4,4’-((2S,5S)-1 - (4-ter-buti Ife nil)pirrolid¡n-2 ,5-di-i I) bis(4, 1 -fenilen))bis(azandi-il)bis(oxometilen)bis(pirrolidin-2, 1 -di-il))bis(3-metil-1 -oxobutan-2, 1 -di-il)dicarbamato de dimetilo (de aquí en adelante en la presente solicitud "Compuesto 1") y sus sales farmaceuticamente aceptables son inhibidores de VHC pan-genotípicos. Estos compuestos son efectivos para inhibir un amplio arreglo de genotipos y variantes de VHC, tal como el genotipo 1 , 2, 3, 4, 5, y 6 de VHC.

Por consiguiente, un primer aspecto de la invención presenta métodos para tratar VHC. Los métodos comprenden administrar una cantidad efectiva del Compuesto 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo a un paciente con VHC, independientemente del genotipo o genotipos de VHC específicos que tenga el paciente. Por lo tanto, el paciente de preferencia no ha sido sometido a determinación de genotipo antes del tratamiento, y el tratamiento se puede iniciar sin someter a pre-tamizaje al paciente respecto a genotipos de VHC específicos.

En una modalidad de este aspecto de la invención, el paciente está infectado con el genotipo 2, tal como el genotipo 2a ó 2b. En otra modalidad de este aspecto de la invención, el paciente está infectado con el genotipo 3, tal como el genotipo 3a. En otra modalidad de este aspecto de la invención, el paciente está infectado con el genotipo 4, tal como el genotipo 4a. Incluso en otra modalidad de este aspecto de la invención, el paciente está infectado con el genotipo 5, tal como el genotipo 5a. Incluso en otra modalidad de este aspecto de la invención, el paciente está infectado con el genotipo 6, tal como el genotipo 6a.

En otra modalidad de este aspecto de la invención, el Compuesto 1 o la sal del mismo se combina o co-administra con otro agente anti-VHC. Los ejemplos no limitativos de dicho otro agente anti-VHC incluyen inhibidores de polimerasa de VHC, inhibidores de proteasa de VHC, otros inhibidores deNS5A de VHC, inhibidores de CD81 , inhibidores de ciclofilina, o inhibidores del sitio de entrada de ribosoma interno (IRES). En un ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 2, tal como el genotipo 2a ó 2b. En otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 3, tal como el genotipo 3a. En otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 4, tal como el genotipo 4a. Incluso en otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 5, tal como el genotipo 5a. Incluso en otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 6, tal como el genotipo 6a.

Incluso en otra modalidad de este aspecto de la invención, el Compuesto 1 o la sal del mismo se combina o co- administra con un inhibidor de proteasa de VHC o un inhibidor de polimerasa de VHC. En un ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 2, tal como el genotipo 2a ó 2b. En otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 3, tal como el genotipo 3a. En otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 4, tal como el genotipo 4a. Incluso en otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 5, tal como el genotipo 5a. Incluso en otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 6, tal como el genotipo 6a.

En otra modalidad de este aspecto de la invención, el Compuesto 1 o la sal del mismo se combina o co-administra con un inhibidor de proteasa de VHC. En un ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 2, tal como el genotipo 2a ó 2b. En otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 3, tal como el genotipo 3a. En otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 4, tal como el genotipo 4a. Incluso en otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 5, tal como el genotipo 5a. Incluso en otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 6, tal como el genotipo 6a.

En otra modalidad de este aspecto de la invención, el Compuesto 1 o la sal del mismo se combina o co-administra con un inhibidor de polimerasa de VHC. En un ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 2, tal como el genotipo 2a ó 2b. En otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 3, tal como el genotipo 3a. En otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 4, tal como el genotipo 4a. Incluso en otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 5, tal como el genotipo 5a. Incluso en otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 6, tal como el genotipo 6a.

En otra modalidad de este aspecto de la invención, el Compuesto 1 o la sal del mismo se combina o co-administra con un inhibidor de proteasa de VHC y un inhibidor de polimerasa de VHC. En un ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 2, tal como el genotipo 2a ó 2b. En otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 3, tal como el genotipo 3a. En otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 4, tal como el genotipo 4a. Incluso en otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 5, tal como el genotipo 5a. Incluso en otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 6, tal como el genotipo 6a.

En este aspecto de la invención, así como en todas y cada una de las modalidades y ejemplo descritos más adelante en la presente solicitud, el tratamiento de preferencia dura menos de 24 semanas y no incluye la administración de interferón a dicho paciente. Dicho tratamiento puede comprender, por ejemplo, administrar el Compuesto 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con un inhibidor de proteasa de VHC o un inhibidor de polimerasa de VHC o una combinación de un inhibidor de proteasa de VHC y un inhibidor de polimerasa de VHC, a dicho paciente. Por ejemplo, el tratamiento puede comprender administrar el Compuesto 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con un inhibidor de proteasa de VHC, a dicho paciente. Para otro ejemplo, el tratamiento puede comprender administrar el Compuesto 1 o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, junto con un inhibidor de polimerasa de VHC, a dicho paciente. Incluso para otro ejemplo, el tratamiento puede comprender administrar el Compuesto 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con una combinación de un inhibidor de proteasa de VHC y un inhibidor de polimerasa de VHC, a dicho paciente.

En este aspecto de la invención, así como en todas y cada una de las modalidades y ejemplo descritos más adelante en la presente solicitud, el tratamiento de preferencia dura por no más de 12 semanas (por ejemplo, el tratamiento dura 8, 9, 10, 1 1 , ó 12 semanas; de preferencia, el tratamiento dura 12 semanas), y no incluye la administración de interferón a dicho paciente. Dicho tratamiento puede comprender, por ejemplo, administrar el Compuesto 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con un inhibidor de proteasa de VHC o un inhibidor de polimerasa de VHC o una combinación de un inhibidor de proteasa de VHC y un inhibidor de polimerasa de VHC, a dicho paciente. Por ejemplo, el tratamiento puede comprender administrar el Compuesto 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con un inhibidor de proteasa de VHC, a dicho paciente. Para otro ejemplo, el tratamiento puede comprender administrar el Compuesto 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con un inhibidor de polimerasa de VHC, a dicho paciente. Incluso para otro ejemplo, el tratamiento puede comprender administrar el Compuesto 1 o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, junto con una combinación de un inhibidor de proteasa de VHC y un inhibidor de polimerasa de VHC, a dicho paciente.

En este aspecto de la invención, así como en todas y cada una de las modalidades y ejemplo descritos más adelante en la presente solicitud, el tratamiento puede o puede no incluir la administración de ribavirina a dicho paciente; por ejemplo, el tratamiento puede incluir la administración de ribavirina a dicho paciente.

En un segundo aspecto, la presente invención presenta métodos para tratar VHC. Los métodos comprenden administrar una cantidad efectiva del Compuesto 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo a un paciente con VHC, en el cual dicho paciente está infectado con el genotipo 2, 3, 4, 5, ó 6 de VHC.

En otra modalidad de este aspecto de la invención, el Compuesto 1 o la sal del mismo se combina o co-administra con otro agente anti-VHC. Los ejemplos no limitativos de dicho otro agente anti-VHC incluyen inhibidores de polimerasa de VHC, inhibidores de proteasa de VHC, otros inhibidores deNS5A de VHC, inhibidores de CD8 1 , inhibidores de ciclofilina, o inhibidores del sitio de entrada de ribosoma interno (IRES). En un ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 2, tal como el genotipo 2a ó 2b. En otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 3, tal como el genotipo 3a. En otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 4, tal como el genotipo 4a. Incluso en otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 5, tal como el genotipo 5a. Incluso en otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 6, tal como el genotipo 6a.

Incluso en otra modalidad de este aspecto de la invención, el Compuesto 1 o la sal del mismo se combina o co administra con un inhibidor de proteasa de VHC o un inhibidor de polimerasa de VHC. En un ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 2, tal como el genotipo 2a ó 2b. En otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 3, tal como el genotipo 3a. En otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 4, tal como el genotipo 4a. Incluso en otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 5, tal como el genotipo 5a. Incluso en otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 6, tal como el genotipo 6a.

En otra modalidad de este aspecto de la invención, el Compuesto 1 o la sal del mismo se combina o co-administra con an inhibidor de polimerasa de VHC. En un ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 2, tal como el genotipo 2a ó 2b. En otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 3, tal como el genotipo 3a. En otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 4, tal como el genotipo 4a Incluso en otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 5, tal como el genotipo 5a. Incluso en otro ejemplo, el paciente está infectado con el genotipo 6, tal como el genotipo 6a.

En este aspecto de la invención, así como en todas y cada una de las modalidades y ejemplo descritos más adelante en la presente solicitud, el tratamiento de preferencia dura menos de 24 semanas y no incluye la administración de interferón a dicho paciente. Dicho tratamiento puede comprender, por ejemplo, administrar el Compuesto 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con un inhibidor de proteasa de VHC o un inhibidor de polimerasa de VHC o una combinación de un inhibidor de proteasa de VHC y un inhibidor de polimerasa de VHC, a dicho paciente. Por ejemplo, el tratamiento puede comprender administrar el Compuesto 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con un inhibidor de proteasa de VHC, a dicho paciente. Para otro ejemplo, el tratamiento puede comprender administrar el Compuesto 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con un inhibidor de polimerasa de VHC, a dicho paciente. Incluso para otro ejemplo, el tratamiento puede comprender administrar el Compuesto 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con una combinación de un inhibidor de proteasa de VHC y un inhibidor de polimerasa de VHC, a dicho paciente.

En este aspecto de la invención, así como en todas y cada una de las modalidades y ejemplo descritos más adelante en la presente solicitud, el tratamiento de preferencia dura por no más de 12 semanas (por ejemplo, el tratamiento dura 8, 9, 10, 1 1 , ó 12 semanas; de preferencia, el tratamiento dura 12 semanas), y no incluye la administración de interferón a dicho paciente. Dicho tratamiento puede comprender, por ejemplo, administrar el Compuesto 1 o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, junto con un inhibidor de proteasa de VHC o un inhibidor de polimerasa de VHC o una combinación de un inhibidor de proteasa de VHC y un inhibidor de polimerasa de VHC, a dicho paciente. Por ejemplo, el tratamiento puede comprender administrar el Compuesto 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con un inhibidor de proteasa de VHC, a dicho paciente. Para otro ejemplo, el tratamiento puede comprender administrar el Compuesto 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con un inhibidor de polimerasa de VHC, a dicho paciente. Incluso para otro ejemplo, el tratamiento puede comprender administrar el Compuesto 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con una combinación de un inhibidor de proteasa de VHC y un inhibidor de polimerasa de VHC, a dicho paciente.

En este aspecto de la invención, así como en todas y cada una de las modalidades y ejemplo descritos más adelante en la presente solicitud, el tratamiento puede o puede no incluir la administración de ribavirina a dicho paciente; por ejemplo, el tratamiento incluye la administración de ribavirina a dicho paciente.

La presente invención también presenta el Compuesto 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso para tratar a un paciente con VHC independientemente del genotipo o genotipos de VHC específicos que tenga el paciente. Dichos usos se ilustran en el primer aspecto de la invención descrito anteriormente, incluyendo todas y cada una de las modalidades y ejemplos descritos más adelante en la presente invención.

La presente invención tambien presenta el Compuesto 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso para tratar a un paciente con VHC infectado con el genotipo 2, 3, 4, 5, ó 6 de VHC. Dichos usos se ilustran en el segundo aspecto de la invención descrito anteriormente, incluyendo todas y cada una de las modalidades y ejemplos descritos más adelante en la presente invención.

Otras características, objetivos, y ventajas de la presente invención son evidentes en la siguiente descripción detallada. Se debe entender, sin embargo, que la descripción detallada, aunque indica modalidades preferidas de la invención, éstas se dan a manera de ilustración solamente, no de limitación. Diversos cambios y modificaciones dentro del alcance de la invención se harán evidentes para los expertos en la téenica a partir de la descripción detallada.

DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION El Compuesto 1 , también conocido como (2S,2’S)-1 ,1’-((2S,2,S)-2,2’-(4,4,-((2S,5S)-1 -(4-ter-butílfenil)pirrolidin-2 ,5-di-¡l)bis(4, 1 -fenilen))bis(azandi-il)bis(oxometilen)bis(pirrolidin-2, 1 -di-il))bis(3-metil-1 -oxobutan-2, 1 -di-il)dicarbamato de dimetilo, se describe en la publicación de solicitud de patente E.U.A. No. 2010/0317568, cuyo contenido completo se incorpora en la presente solicitud para referencia.

Compuesto 1 Se encontró que el Compuesto 1 tiene valores de CE50 de menos de 20 pM contra muchos genotipos de VHC clínicamente relevantes, tales como el genotipo 1 a, 1 b, 2a, 2b, 3a, 4a, y 5a, y un valor de CE50 de menos de 0.5 nM contra el genotipo 6a de VHC La presente invención presenta el uso del Compuesto 1 o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo para tratar VHC como se describió anteriormente en la presente solicitud. En cualquier método o uso descrito en la presente solicitud, el Compuesto 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo se puede formular en una forma de dosificación líquida o sólida apropiada. De preferencia, el Compuesto 1 o la sal del mismo se formula en una composición sólida que comprende el Compuesto 1 (o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo) en forma amorfa, un polímero hidrofílico farmacéuticamente aceptable, y opcionalmente un agente tensoactivo farmacéuticamente aceptable.

Una manera no limitativa para formar una forma amorfa del Compuesto 1 (o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo) es a través de la formación de dispersiones sólidas con un vehículo polimérico. Tal como se utiliza en la presente solicitud, el término "dispersión sólida" define un sistema en un estado sólido (en oposición a un estado líquido o gaseoso) que comprende por lo menos dos componentes, en el cual un componente está disperso a través del otro componente o componentes. Por ejemplo, un ingrediente activo o una combinación de ingredientes activos se puede dispersar en una matriz constituida por un polímero o polímeros hidrofílico(s) farmacéuticamente aceptable(s) y un agente o agentes tensoactivos farmacéuticamente aceptable(s). El término "dispersión sólida" abarca sistemas que tienen partículas pequeñas de una fase dispersa en otra fase. Estas partículas con frecuencia son de menos de 400 mm de tamaño, tal como menos de 100, 10, ó 1 pm de tamaño. Cuando una dispersión sólida de los componentes es tal que el sistema es químicamente y físicamente uniforme u homogéneo a través de o consiste de una fase (como se define en termodinámica), dicha dispersión sólida se denomina una "solución sólida". Una solución vitrea es una solución sólida en la cual un soluto está disuelto en un solvente vitreo.

Cualquier método descrito en la presente solicitud puede utilizar una composición sólida que comprende (1 ) Compuesto 1 (o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo) en forma amorfa, (2) un polímero hidrofílico farmacéuticamente aceptable, y (3) un agente tensoactivo farmaceuticamente aceptable. El Compuesto 1 (o la sal del mismo) y el polímero de preferencia se formulan en una dispersión sólida. El agente tensoactivo también se puede formular en la misma dispersión sólida; o el agente tensoactivo se puede combinar o mezclar por separado con la dispersión sólida.

El polímero hidrofílico puede, por ejemplo y sin limitación, tener una Tg de por lo menos 50°C, de manera más preferida por lo menos 60°C, y de manera altamente preferida por lo menos 80°C incluyendo pero sin limitarse a desde 80°C hasta 180°C,o desde 100°C hasta 150°C. De preferencia, el polímero hidrofílico es soluble en agua. Los ejemplos no limitativos de polímeros hidrofílicos apropiados incluyen, pero no se limitan a, homopolímeros o copolímeros de N-vinil-lactamas, tales como homopolímeros o copolímeros de N-vinilpirrolidona (por ejemplo, polivinilpirrolidona (PVP), o copolímeros de N-vinilpirrolidona y acetato de vinilo o propionato de vinilo); ésteres de celulosa o éteres de celulosa, tales como alquilcelulosas (por ejemplo, metilcelulosa o etilcelulosa), hidroxialquilcelulosas (por ejemplo, hidroxipropilcelulosa), hidroxialquilalquil-celulosas (por ejemplo, hidroxipropilmetilcelulosa), y ftalatos o succinatos de celulosa (por ejemplo, ftalato de acetato de celulosa y ftalato de hidroxipropilmetilcelulosa, succinato de hidroxipropilmetilcelulosa, o succinato-acetato de hidroxipropilmetilcelulosa); óxidos de polialquileno de alto peso molecular, tal como óxido de polietileno, óxido de polipropileno, y copolímeros de óxido de etileno y óxido de propileno; poliacrilatos o polimetacrilatos, tal como copolímeros de ácido metacrílico/acrilato de etilo, copolímeros de ácido metacrílico/metacrilato de metilo, copolímeros de metacrilato de butilo/metacrilato de 2-dimetilaminoetilo, poli(acrilatos de hidroxialquilo), y poli(metacrilatos de hidroxialquilo); poliacrilamidas; polímeros de acetato de vinilo, tales como copolímeros de acetato de vinilo y ácido crotónico, y poliacetato de vinilo parcialmente hidrolizado (tambien referido como “alcohol polivinílico parcialmente saponificado”; alcohol polivinílico; oligosacáridos o polisacáridos, tales como carrageninas, galactomananos, y goma xantano; poliacrilatos de hidroxialquilo; polimetacrilatos de hidroxialquilo; copolímeros de metacrilato de metilo y ácido acrílico; polietilenglicoles (PEGs); o cualquier mezcla de los mismos.

Los ejemplos no limitativos de polímeros hidrofílicos preferidos incluyen polivinilpirrolidona (PVP) K17, PVP K25, PVP K30, PVP K90, hidroxipropilmetilcelulosa (HPMC) E3, HPMC E5, HPMC E6, HPMC E15, HPMC K3, HPMC A4, HPMC A15, acetato-succinato de HPMC (AS) LF, HPMC AS MF, HPMC AS HF, HPMC AS LG, HPMC AS MG, HPMC AS HG, ftalato de HPMC (P) 50, HPMC P 55, Etocel 4, Etocel 7, Etocel 10, Etocel 14, Etocel 20, copovidona (copolímero de vinilpirrolidona-acetato de vinilo 60/40), poliacetato de vinilo, copolímero de metacrilato/ácido metacrílico (Eudragit) L100-55, Eudragit L100, Eudragit S100, polietilenglicol (PEG) 400, PEG 600, PEG 1450, PEG 3350, PEG 4000, PEG 6000, PEG 8000, poloxámero 124, poloxámero 188, poloxámero 237, poloxámero 338, y poloxámero 407.

De estos, se prefieren los homopolímeros o copolímeros de N-vinilpirrolidona, tal como los copolímeros de N-vinilpirrolidona y acetato de vinilo. Un ejemplo no limitativo de un polímero preferido es un copolímero de 60% en peso de N-vinilpirrolidona y 40% en peso de acetato de vinilo. Otros polímeros preferidos incluyen, sin limitación, hidroxipropilmetilcelulosa (HPMC, tambien conocida como hipromelosa en USP), tal como hidroxipropilmetilcelulosa grado E5 (HPMC-E5); y acetato-succinato de hidroxipropilmetilcelulosa (HPMC-AS).

El agente tensoactivo farmacéuticamente aceptable utilizado puede ser un agente tensoactivo no iónico. De preferencia, el agente tensoactivo tiene un valor HLB de 2-20. Una composición sólida empleada en la invención también puede incluir una mezcla de agentes tensoactivos farmacéuticamente aceptables, con por lo menos un agente tensoactivo que tenga un valor HLB de por lo menos 10 y por lo menos otro agente tensoactivo que tenga un valor HLB de menos de 10.

Los ejemplos no limitativos de agentes tensoactivos farmacéuticamente aceptables apropiados incluyen derivados de aceite de ricino y polioxietileno, por ejemplo tri-ricinoleato de polioxietilenglicerol o polioxil 35 aceite de ricino (Cremophor® EL; BASF Corp.) u oxiestearato de polioxietilenglicerol tal como polietilenglicol 40 aceite de ricino hidrogenado (Cremophor® RH 40, también conocido como polioxil 40 aceite de ricino hidrogenado o hidroxiestearato de macrogolglicerol) o po lietileng ) ico I 60 aceite de ricino hidrogenado (Cremophor® RH 60); o un monoester de ácido graso de polioxietilen-sorbitán, tal como un mono-ester de ácido graso de polioxietileno (20) sorbitán, por ejemplo mono-oleato de polioxietileno (20) sorbitán (Tween® 80), monoestearato de polioxietileno (20) sorbitán (Tween® 60), monopalmitato de polioxietileno (20) sorbitán (Tween® 40), o monolaurato de polioxietileno (20) sorbitán (Tween® 20). Otros ejemplos no limitativos de agentes tensoactivos apropiados incluyen éteres polioxietilen-alquílicos, por ejemplo éter polioxietileno (3) laurílico, éter polioxietileno (5) cetílico, éter polioxietileno (2) estearílico, éter polioxietileno (5) estearílico; éteres polioxietilen-alquilarílicos, por ejemplo éter polioxietileno (2) nonilfenílico, éter polioxietileno (3) nonilfenílico, éter polioxietileno (4) nonilfenílico, éter polioxietileno (3) octilfenílico; ésteres de ácido graso y polietilenglicol, por ejemplo monolaurato de PEG-200, dilaurato de PEG-200, dilaurato de PEG-300, dilaurato de PEG-400, diestearato de PEG-300, dioleato de PEG-300; monoésteres de ácido graso de alquilenglicol, por ejemplo monolaurato de propilenglicol (Lauroglycol®); ésteres de ácido graso y sacarosa, por ejemplo monoestearato de sacarosa, diestearato de sacarosa, monolaurato de sacarosa, dilaurato de sacarosa; monoésteres de ácido graso y sorbitán tales como monolaurato de sorbitán (Span® 20), mono-oleato de sorbitán, monopalmitato de sorbitán (Span® 40), o estearato de sorbitán. Otros agentes tensoactivos apropiados incluyen, pero no se limitan a, copolímeros de bloque de óxido de etileno y óxido de propileno, tambien conocidos como copolímeros de bloque de polioxietileno y polioxipropileno o polioxietileno polipropilenglicol, tal como Poloxámero® 124, Poloxámero® 188, Poloxámero® 237, Poloxámero® 388, o Poloxámero® 407 (BASF Wyandotte Corp.). Como se describió anteriormente, se puede utilizar una mezcla de agentes tensoactivos en una composición sólida utilizada en la invención.

Los ejemplos no limitativos de agentes tensoactivos preferidos incluyen polisorbato 20, polisorbato 40, polisorbato 60, polisorbato 80, Cremophor RH 40, Cremophor EL, Gelucire 44/14, Gelucire 50/13, succinato de D-alfa-tocoferilo-polietilenglicol 1000 (vitamina E TPGS), laurato de propilenglicol, laurilsulfato de sodio, y monolaurato de sorbitán.

La dispersión sólida utilizada en esta invención de preferencia es una solución sólida, y de manera más preferida una solución vitrea.

En una modalidad, una composición sólida utilizada en la invención comprende una dispersión sólida amorfa o solución sólida la cual incluye el Compuesto 1 (o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo) y un polímero hidrofílico farmacéuticamente aceptable. La composición sólida también incluye un agente tensoactivo farmacéuticamente aceptable el cual de preferencia está formulado en la dispersión sólida amorfa o solución sólida. El polímero hidrofílico se puede seleccionar, por ejemplo, a partir del grupo que consiste de homopolímero de N-vinillactama, copolímero de N-vinil-lactama, ester de celulosa, éter de celulosa, óxido de polialquileno, poliacrilato, polimetacrilato, poliacrilamida, alcohol polivinílico, polímero de acetato de vinilo, oligosacárido, y polisacárido. Como un ejemplo no limitativo, el polímero hidrofílico se selecciona a partir del grupo que consiste de homopolímero de N-vinilpirrolidona, copolímero de N-vinilpirrolidona, copolímero de N-vinilpirrolidona y acetato de vinilo, copolímero de N-vinilpirrolidona y propionato de vinilo, polivinilpirrolidona, metilcelulosa, etilcelulosa, hidroxialquilcelulosas, hidroxipropilcelulosa, h id rox ¡alquila Iqu i I-celulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, ftaiato de celulosa, succinato de celulosa, acetato-ftalato de celulosa, ftaiato de hidroxipropilmetilcelulosa, succinato de hidroxipropilmetilcelulosa, acetato-succinato de hidroxipropilmetilcelulosa, óxido de polietileno, óxido de polipropileno, copolímero de óxido de etileno y óxido de propileno, copolímero de ácido metacrílico/acrilato de etilo, copolímero de ácido metacrílico/metacrilato de metilo, copolímero de metacrilato de butilo/metacrilato de 2-dimetilaminoetilo, poli(acrilato de hidroxialquilo), poli(metacrilato de hidroxialquilo), copolímero de acetato de vinilo y ácido crotónico, poliacetato de vinilo parcialmente hidrolizado, carragenina, galactomanano, y goma xantano. De preferencia, el polímero hidrofílico se selecciona a partir de polivinilpirrolidona (PVP) K17, PVP K25, PVP K30, PVP K90, hidroxipropilmetilcelulosa (HPMC) E3, HPMC E5, HPMC E6, HPMC E15, HPMC K3, HPMC A4, HPMC A15, acetato-succinato de HPMC (AS) LF, HPMC AS MF, HPMC AS HF, HPMC AS LG, HPMC AS MG, HPMC AS HG, ftalato de HPMC (P) 50, HPMC P 55, Etocel 4, Etocel 7, Etocel 10, Etocel 14, Etocel 20, copovidona (copolímero de vinilpirrolidona-acetato de vinilo 60/40), poliacetato de vinilo, copolímero de metacrilato/ácido metacrílico (Eudragit) L100-55, Eudragit L100, Eudragit S100, polietilenglicol (PEG) 400, PEG 600, PEG 1450, PEG 3350, PEG 4000, PEG 6000, PEG 8000, poloxámero 124, poloxámero 188, poloxámero 237, poloxámero 338, o poloxámero 407. De manera más preferida, el polímero h idrof í I ico se selecciona a partir de homopolímeros de vinilpirrolidona (por ejemplo, PVP con valores K de Fikentscher desde 12 hasta 100, o PVP con valores K de Fikentscher desde 17 a 30), o copolímeros de 30 a 70% en peso de N- vinilpirrolidona (VP) y 70 a 30% en peso de acetato de vinilo (VA) (por ejemplo, un copolímero de 60% en peso de VP y 40% en peso de VA). El agente tensoactivo se puede seleccionar, por ejemplo, a partir del grupo que consiste de tri-ricinoleato de polioxietilenglicerol o polioxil 35 aceite de ricino (Cremophor® EL; BASF Corp.) u oxiestearato de polioxietilenglicerol, monoester de ácido graso de polioxietilen-sorbitán, éter polioxietilen-alquílico, éter polioxietilen-alquilarílico, éster de ácido graso y polietilenglicol, monoéster de ácido graso y alquilenglicol, éster de ácido graso y sacarosa, y monoéster de ácido graso y sorbitán. Como un ejemplo no limitado, el agente tensoactivo se selecciona a partir del grupo que consiste de polietilenglicol 40 aceite de ricino hidrogenado (Cremophor® RH 40, también conocido como polioxil 40 aceite de ricino hidrogenado o hidroxiestearato de macrogolglicerol), polietilenglicol 60 aceite de ricino hidrogenado (Cremophor® RH 60), un monoéster de ácido graso de polioxietileno (20) sorbitán (por ejemplo monooleato de polioxietileno (20) sorbitán (Tween® 80), monoestearato de polioxietileno (20) sorbitán (Tween® 60), monopalmitato de polioxietileno (20) sorbitán (Tween® 40), o monolaurato de polioxietileno (20) sorbitán (Tween® 20)), éter polioxietileno (3) laurílico, éter polioxietileno (5) cetílico, éter polioxietileno (2) estearílico, éter polioxietileno (5) estearílico, éter polioxietileno (2) nonilfenílico, éter polioxietileno (3) nonilfenílico, éter polioxietileno (4) nonilfenílico, éter polioxietileno (3) octilfenílico, monolaurato de PEG-200, dilaurato de PEG-200, dilaurato de PEG-300, dilaurato de PEG-400, diestearato de PEG-300, dioleato de PEG-300, monolaurato de propilenglicol, monoestearato de sacarosa, diestearato de sacarosa, monolaurato de sacarosa, dilaurato de sacarosa, monolaurato de sorbitán, mono-oleato de sorbitán, monopalmitato de sorbitán, y estearato de sorbitán. De preferencia, el agente tensoactivo se selecciona a partir de polisorbato 20, polisorbato 40, polisorbato 60, polisorbato 80, Cremophor RH 40, Cremophor EL, Gelucire 44/14, Gelucire 50/13, succinato de D-alfa-tocoferilo-polietilenglicol 1000 (vitamina E TPGS), laurato de propilenglicol, laurilsulfato de sodio, o monolaurato de sorbitán. De manera más preferida, el agente tensoactivo se selecciona a partir de monolaurato de sorbitán o succinato de D-alfa-tocoferilo-pol ietílengl icol 1000.

Una dispersión sólida utilizada en la invención de preferencia comprende o consiste de una fase individual (definida en termodinámica) en la cual el Compuesto 1 , o una combinación del Compuesto 1 y otro agente anti-VHC, está molecularmente disperso en una matriz que contiene el o los polímeros hidrofílicos farmaceuticamente aceptables. En tales casos, el análisis térmico de la dispersión sólida utilizando calorimetría de barrido diferencial (DSC) típicamente muestra solamente una Tg individual, y la dispersión sólida no contiene ningún Compuesto 1 cristalino detectable según se mide mediante espectroscopia de difracción de polvo de rayos X.

Una composición sólida utilizada en la invención se puede preparar mediante una variedad de téenicas tales como, sin limitación, extrusión en estado fundido, secado por aspersión, co-precipitación, secado por congelamiento, u otras técnicas de evaporación del solvente, siendo preferidas la extrusión en estado fundido y el secado por aspersión. El procedimiento de extrusión en estado fundido típicamente comprende los pasos de preparar un material fundido el cual incluye el o los ingredientes activos, el o los polímeros hidrofílicos y de preferencia el o los agentes tensoactivos, y después enfriar el material fundido hasta que éste solidifique. "Fundir" significa una transición hacia un estado líquido o gomoso en el cual es posible que un componente quede incrustado, de preferencia homogéneamente incrustado, en el otro componente o componentes. En muchos casos, el o los componentes poliméricos se van a fundir y los otros componentes incluyendo el o los ingredientes activos y el o los agentes tensoactivos se van a disolver en el material fundido con lo cual se forma una solución. Fundir usualmente implica calentar por encima del punto de ablandamiento del o los polímeros. La preparación del material fundido puede tomar lugar en una variedad de maneras. El mezclado de los componentes puede presentarse antes, durante o despues de la formación del material fundido. Por ejemplo, los componentes se pueden mezclar primero y después fundir o se pueden mezclar y fundir simultáneamente. El material fundido también se puede homogenizar para dispersar el o los ingredientes activos en una manera eficiente. Además, podría ser conveniente primero fundir el o los polímeros y después mezclar y homogenizar el o los ingredientes activos. En un ejemplo, todos los materiales excepto el o los agentes tensoactivos se mezclan y alimentan al interior de un extrusor, al tiempo que el o los agentes tensoactivos se funden externamente y se bombean durante la extrusión.

Para iniciar un procedimiento de extrusión en estado fundido, el o los ingredientes activos (por ejemplo, el Compuesto 1 , o una combinación del Compuesto 1 y por lo menos otro agente anti-VHC) se pueden utilizar en sus formas sólidas, tal como sus respectivas formas cristalinas. El o los ingredientes activos también se pueden utilizar como una solución o dispersión en un solvente líquido apropiado tal como alcoholes, hidrocarburos alifáticos, ésteres o, en algunos casos, dióxido de carbono líquido. El solvente se puede eliminar, por ejemplo evaporar, despues de preparar el material fundido.

También se pueden incluir en el material fundido diversos aditivos, por ejemplo, reguladores de flujo (por ejemplo, sílice coloidal), aglutinantes, lubricantes, materiales de relleno, desintegrantes, plastificantes, colorantes, o estabilizadores (por ejemplo, antioxidantes, estabilizadores contra la luz, depuradores de radicales, y estabilizadores contra el ataque microbiano).

La fusión y/o mezclado puede tomar lugar en un aparato habitual para este propósito. Los particularmente apropiados son extrusores o amasadores. Los extrusores apropiados incluyen extrusores de tornillo individual, extrusores de tornillos engranados o extrusores de tornillos múltiples, de preferencia extrusores de tornillos gemelos, los cuales pueden ser co-rotatorios o contra rotatorios y, opcionalmente, estar equipados con discos amasadores. Se apreciará que las temperaturas de trabajo quedarán determinadas por el tipo de extrusor o el tipo de configuración dentro del extrusor que se utilicen. Parte de la energía necesaria para fundir, mezclar y disolver los componentes en el extrusor puede ser provista por elementos de calefacción. Sin embargo, la fricción y el esfuerzo de corte tangencial del material en el extrusor también pueden proveer una cantidad sustancial de energía a la mezcla y ayudar en la formación de un material fundido homogéneo de los componentes.

El material fundido puede variar desde delgado a pastoso a viscoso. La conformación del material extruído puede ser llevada a cabo en forma conveniente por una calandria con dos rodillos contra rotatorios que tienen depresiones mutuamente comcidentes sobre sus superficies. El material extruído se puede enfriar y dejar que solidifique. El material extruído tambien se puede cortar en piezas, ya sea antes (cortado en caliente) o después de la solidificación (cortado en frío).

El producto de extrusión solidificado se puede moler, triturar o de alguna otra manera reducir adicionalmente hasta gránulos. El material extruído solidificado, así como cada uno de los gránulos producidos, comprende una dispersión sólida, de preferencia una solución sólida, del o los ingredientes activos en una matriz constituida por el o los polímeros hidrofílicos y opcionalmente el o los agentes tensoactivos farmacéuticamente aceptables. En casos en los que los gránulos no contienen ningún agente tensoactivo, se puede agregar un agente tensoactivo farmacéuticamente aceptable descrito anteriormente y mezclar con los gránulos. El producto de extrusión también se puede mezclar con otro(s) ingrediente(s) activo(s) y/o aditivo(s) antes de ser molido o triturado hasta gránulos. Los gránulos se pueden procesar adicionalmente como formas de dosificación oral sólidas apropiadas.

La estrategia de evaporación del solvente, a través de secado por aspersión, provee la ventaja de permitir la capacidad de procesamiento a temperaturas más bajas, si fuera necesario, y permite otras modificaciones al procedimiento con el fin de mejorar adicionalmente las propiedades del polvo. El polvo secado por aspersión después se puede formular adicionalmente, si fuera necesario, y el producto de fármaco es flexible con respecto a si se desean cápsulas, tabletas o cualquier otra forma de dosificación sólida.

Los procedimientos de secado por aspersión de ejemplo y el equipo para secado por aspersión se describen en K. Masters, SPRAY DRYING HANDBOOK (Halstead Press, New York, 4a ed. , 1985). Los ejemplos no limitativos de dispositivos para secado por aspersión que son apropiados para la presente invención incluyen secadoras por aspersión fabricadas por Niro Inc. o GEA Process Engineering Inc. , Buchi Labortechnik AG, y Spray Drying Systems, Inc. Un procedimiento de secado por aspersión generalmente implica romper una mezcla líquida en gotas muy pequeñas y retirar rápidamente el solvente de las gotas minúsculas en un contenedor (aparato para secado por aspersión) en el cual existe una fuerza impulsora fuerte para evaporar el solvente a partir de las gotas minúsculas. Las téenicas de atomización incluyen, por ejemplo, boquillas para dos fluidos o boquillas a presión, o atomizadores giratorios. La fuerza de impulso fuerte para evaporación del solvente se puede proveer, por ejemplo, manteniendo la presión parcial del solvente en el aparato para secado por aspersión muy por debajo de la presión de vapor del solvente a las temperaturas de las gotas minúsculas que se están secando. Esto se puede lograr ya sea (1 ) manteniendo la presión en el aparato para secado por aspersión a un vacío parcial; (2) mezclando las gotas minúsculas líquidas con un gas para secado caliente (por ejemplo, nitrógeno caliente); o (3) ambos.

La temperatura y velocidad de flujo del gas para secado, así como el diseño de la secadora por aspersión, se pueden seleccionar de manera tal que las gotas minúsculas esten lo suficientemente secas al momento en que éstas llegan a la pared del aparato. Esto ayuda a asegurar que las gotas minúsculas secas sean esencialmente sólidas y puedan formar un polvo fino y no se adhieran a la pared del aparato. El producto secado por aspersión se puede recolectar retirando el material manualmente, en forma neumática, mecánicamente o mediante otros medios apropiados. La longitud de tiempo real para lograr el nivel preferido de sequedad depende del tamaño de las gotas minúsculas, de la formulación, y del funcionamiento de la secadora por aspersión. Después de la solidificación, el polvo sólido puede permanecer en la cámara de secado por aspersión durante un tiempo adicional (por ejemplo, 5-60 segundos) para evaporar adicionalmente el solvente a partir del polvo sólido. El contenido final de solvente en la dispersión sólida a medida que ésta sale de la secadora de preferencia está a un nivel lo suficientemente bajo como para mejorar la estabilidad del producto final. Por ejemplo, el contenido de solvente residual del polvo secado por aspersión puede ser menor de 2% en peso. De manera bastante preferida, el contenido de solvente residual está dentro de los límites indicados en los lineamientos de la conferencia internacional sobre armonización (ICH). Además, podría ser útil someter la composición secada por aspersión a secado adicional para bajar el solvente residual a niveles incluso más bajos. Los metodos para bajar adicionalmente los niveles de solvente incluyen, pero no se limitan a, secado en lecho fluido, secado con infrarrojo, secado en tambor giratorio, secado al vacío, y combinaciones de estos y otros procedimientos.

Al igual que el material extruído sólido descrito anteriormente, el producto secado por aspersión contiene una dispersión sólida, de preferencia una solución sólida, del o los ingredientes activos en una matriz constituida por el o los polímeros hidrofílicos y opcionalmente el o los agentes tensoactivos farmacéuticamente aceptables. En casos en los que el producto secado por aspersión no contenga ningún agente tensoactivo, se puede agregar al mismo un agente tensoactivo farmacéuticamente aceptable descrito anteriormente y mezclar con el producto secado por aspersión antes de procesamiento adicional.

Antes de alimentar al interior de una secadora por aspersión, el o los ingredientes activos (por ejemplo, el Compuesto 1 , o una combinación del Compuesto 1 y por lo menos otro agente anti-VHC), el o los polímeros hidrofílicos, así como otros ingredientes activos o excipientes opcionales tal como el o los agentes tensoactivos farmacéuticamente aceptables, se pueden disolver en un solvente. Los solventes apropiados incluyen, pero no se limitan a, alcanoles (por ejemplo, metanol, etanol, 1 -propanol, 2-propanol o mezclas de los mismos), acetona, acetona/agua, mezclas de alcanol/agua (por ejemplo, mezclas de etanol/agua), o combinaciones de los mismos. La solución tambien se puede precalentar antes de que se alimente al interior de la secadora por aspersión.

La dispersión sólida que se produce mediante extrusión en estado fundido, secado por aspersión u otras téenicas se puede preparar en cualesquiera formas de dosificación oral sólidas apropiadas. En una modalidad, la dispersión sólida que se prepara mediante extrusión en estado fundido, secado por aspersión u otras técnicas se puede compactar como tabletas. La dispersión sólida se puede compactar ya sea directamente, o moler o triturar hasta gránulos o polvos antes de la compactación. La compactación se puede efectuar en una tableteadora, tal como en un dado de acero entre dos punzones móviles. Cuando una composición sólida de la presente invención comprende el Compuesto 1 y otro agente anti-VHC, es posible preparar por separado dispersiones sólidas de cada ingrediente activo individual y después mezclar las dispersiones sólidas opcionalmente molidas o trituradas antes de compactar. El Compuesto 1 y otro(s) ingrediente(s) activo(s) también se pueden preparar en la misma dispersión sólida, moler y/o mezclar opcionalmente con otros aditivos, y después compactar como tabletas.

Se puede utilizar por lo menos un aditivo que se selecciona a partir de reguladores de flujo, aglutinantes, lubricantes, materiales de relleno, disintegrantes, o plastificantes para compactar la dispersión sólida. Estos aditivos se pueden mezclar con la dispersión sólida triturada o molida antes de compactar. También se pueden utilizar varios otros aditivos en la preparación de una composición sólida de la presente invención, por ejemplo colorantes tales como los colorantes azo, pigmentos orgánicos o inorgánicos tales como óxido de aluminio o dióxido de titanio, o colorantes de origen natural; estabilizadores tales como antioxidantes, estabilizadores contra la luz, depuradores de radicales, estabilizadores contra el ataque microbiano.

En cualquier aspecto, modalidad y ejemplo descritos en la presente solicitud, el Compuesto 1 (o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo) se puede administrar a un paciente con VHC en combinación con otro agente anti-VHC. De preferencia, dicho tratamiento no incluye el uso de interferón a través de todo el régimen de tratamiento. El régimen de tratamiento puede durar, por ejemplo y sin limitación, 24, 23, 22, 21 , 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 1 1 , 10, 9 u 8 semanas. De preferencia, el régimen de tratamiento dura, por ejemplo y sin limitación, 12 semanas. El régimen de tratamiento también puede durar menos de 12 semanas, tal como 1 1 , 10, 9 u 8 semanas.

Los agentes anti-VHC apropiados que se pueden combinar con el Compuesto 1 (o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo) incluyen, pero no se limitan a, inhibidores de polimerasa de VHC (por ejemplo, inhibidores de polimerasa tipo nucleósido o inhibidores de polimerasa de tipo no nucleósido), inhibidores de proteasa de VHC, inhibidores de helicasa de VHC, otros inhibidores de NS5A de VHC, inhibidores del ingreso de VHC, inhibidores de ciclofilina, inhibidores de CD81 , inhibidores de sitio de entrada a ribosoma interno, o cualquier combinación de los mismos. Por ejemplo, dicho otro agente anti-VHC puede ser un inhibidor de polimerasa de VHC. Para otro ejemplo, dicho otro agente anti-VHC puede ser un inhibidor de proteasa de VHC.

Dicho otro agente anti-VHC tambien puede incluir dos o más inhibidores de VHC. Por ejemplo, dicho otro agente anti-VHC puede ser una combinación de un inhibidor de polimerasa de VHC y un inhibidor de proteasa de VHC. Para otro ejemplo, dicho otro agente anti-VHC puede ser una combinación de dos inhibidores diferentes de proteasa de VHC. Para otro ejemplo, dicho otro agente anti-VHC puede ser una combinación de dos inhibidores diferentes de polimerasa de VHC (por ejemplo, uno es un inhibidor de polimerasa tipo nucleósido o nucleótido y el otro es un inhibidor de polimerasa de tipo no nucleósido; o ambos son inhibidores de polimerasa de tipo nucleósido o nucleótido; o ambos son inhibidores de polimerasa de tipo no nucleósido). Incluso en otro ejemplo, dicho otro agente anti-VHC puede ser una combinación de otro inhibidor de NS5A de VHC y un inhibidor de polimerasa de VHC. Incluso en otro ejemplo, dicho otro agente anti-VHC puede ser una combinación de otro inhibidor de NS5A de VHC y un inhibidor de proteasa de VHC. Incluso en otro ejemplo, dicho otro agente anti-VHC puede ser una combinación de otros dos inhibidores de NS5A de VHC.

Los ejemplos específicos de agentes anti-VHC que son apropiados para combinación con el Compuesto 1 (o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo) en cualquier aspecto, modalidad o ejemplo descritos en la presente solicitud incluyen, pero no se limitan a, PSI-7977 (Pharmasset/Gilead), PSI-7851 (Pharmasset/Gilead), PSI-938 (Pharmasset/Gilead), PF-00868554, ANA-598, IDX184, IDX102, IDX375, GS-9190, VCH-759, VCH-916, MK-3281 , BCX-4678, MK-3281 , VBY708, ANA598, GL59728, GL60667, BMS-790052, BMS-791325, BMS-650032, BMS-824393, GS-9132, ACH-1095, AP-H005, A-831 (Arrow Therapeutics), A-689 (Arrow Therapeutics), INX08189 (Inhibitex), AZD2836, telaprevir, boceprevir, ITMN-191 (Intermune/Roche), BI-201335, VBY-376, VX-500 (Vertex), PHX-B, ACH-1625, IDX136, IDX316, VX-813 (Vertex), SCH 900518 (Schering-Plough), TMC-435 (Tibotec), ITMN-191 (Intermune, Roche), MK-7009 (Merck), IDX-PI (Novartis), BI-201335 (Boehringer Ingelheim), R7128 (Roche), MK-3281 (Merck), MK-0608 (Merck), PF-868554 (Pfizer), PF-4878691 (Pfizer), IDX-184 (Novartis), IDX-375, PPI-461 (Presidio), BILB-1941 (Boehringer Ingelheim), GS-9190 (Gilead), BMS-790052 (BMS), CTS-1027 (Conatus), GS-9620 (Gilead), PF-4878691 (Pfizer), RO5303253 (Roche), ALS-2200 (Alios BioPharma/Vertex), ALS-2158 (Alios BioPharma/Vertex), GSK62336805 (GlaxoSmithKIine), o cualesquiera combinaciones de los mismos.

Los ejemplos no limitativos de inhibidores de proteasa de VHC que son apropiados para combinación con el Compuesto 1 (o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo) en cualquier aspecto, modalidad o ejemplo descritos en la presente solicitud incluyen ACH-1095 (Achillion), ACH-1625 (Achillion), ACH-2684 (Achillion), AVL-181 (Avila), AVL-192 (Avila), BI-201335 (Boehringer Ingelheim), BMS-650032 (BMS), boceprevir, danoprevir, GS-9132 (Gilead), GS-9256 (Gilead), GS-9451 (Gilead), IDX-136 (Idenix), IDX-316 (Idenix), IDX-320 (Idenix), MK-5172 (Merck), narlaprevir, PHX-1766 (Phenomix), telaprevir, TMC-435 (Tibotec), vaniprevir, VBY708 (Virobay), VX-500 (Vertex), VX-813 (Vertex), VX-985 (Vertex), o cualquier combinación de los mismos. Los ejemplos no limitativos de inhibidores de polimerasa de VHC que son apropiados para combinación con el Compuesto 1 (o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo) en cualquier aspecto, modalidad o ejemplo descritos en la presente solicitud incluyen ANA-598 (Anadys), Bl-207127 (Boehringer Ingelheim), BILB-1941 (Boehringer Ingelheim), BMS-791 325 (BMS), filibuvir, GL59728 (Glaxo), GL60667 (Glaxo), GS-9669 (Gilead), IDX-375 (Idenix), MK-3281 (Merck), tegobuvir, TMC-647055 (Tibotec), VCH-759 (Vertex & ViraChem), VCH-916 (ViraChem), VX-222 (VCH-222) (Vertex & ViraChem), VX-759 (Vertex), GS-6620 (Gilead), IDX-102 (Idenix), IDX-184 (Idenix), INX-189 (Inhibitex), MK-0608 (Merck), PSI-7977 (Pharmasset/Gilead), PSI-938 (Pharmasset/Gilead), RG7128 (Roche), TMC64912 (Medivir), GSK625433 (GlaxoSmithKIine), BCX-4678 (BioCryst), ALS-2200 (Alios BioPharma/Vertex), ALS-2158 (Alios BioPharma/Vertex), o cualquier combinación de los mismos. Un inhibidor de polimerasa puede ser un inhibidor de polimerasa tipo nucleótido, tal como GS-6620 (Gilead), IDX-102 (Idenix), IDX-184 (Idenix), INX-189 (l nhibitex) , MK-0608 (Merck), PSI-7977 (Pharmasset/Gilead), PSI-938 (Pharmasset/Gilead), RG7128 (Roche), TMC64912 (Medivir), ALS-2200 (Alios BioPharma/Vertex), ALS-2158 (Alios BioPharma/Vertex), o cualquier combinación de los mismos. Un inhibidor de polimerasa puede tambien ser un inhibidor de polimerasa de tipo no nucleósido, tal como ANA-598 (Anadys), BI-207127 (Boehringer Ingelheim), BILB-1941 (Boehringer Ingelheim), BMS-791325 (BMS), filibuvir, GL59728 (Glaxo), GL60667 (Glaxo), GS-9669 (Gilead), IDX-375 (Idenix), MK-3281 (Merck), tegobuvir, TMC-647055 (Tibotec), VCH-759 (Vertex & ViraChem), VCH-916 (ViraChem), VX-222 (VCH-222) (Vertex & ViraChem), VX-759 (Vertex), o cualquier combinación de los mismos. Los ejemplos no limitativos de inhibidores de NS5A que son apropiados para combinación con el Compuesto 1 (o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo) en cualquier aspecto, modalidad o ejemplo descritos en la presente solicitud incluyen GSK62336805 (GlaxoSmithKIine), ACH-2928 (Achillion), ACH-3102 (Achillion), AZD2836 (Astra-Zeneca), AZD7295 (Astra-Zeneca), BMS-790052 (BMS), BMS-824393 (BMS), EDP-239 (Enanta/Novartis), GS-5885 (Gilead), IDX-719 (Idenix), MK-8742 (Merck), PPI-1301 (Presidio), PPI-461 (Presidio), o cualquier combinación de los mismos. Los ejemplos no limitativos de inhibidores de ciclofilina que son apropiados para combinación con el Compuesto 1 (o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo) en cualquier aspecto, modalidad o ejemplo descritos en la presente solicitud incluyen alisporovir (Novartis & Debiopharm), NM-81 1 (Novartis), SCY-635 (Scynexis), o cualquier combinación de los mismos. Los ejemplos no limitativos de inhibidores del ingreso de VHC que son apropiados para combinación con el Compuesto 1 (o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo) en cualquier aspecto, modalidad o ejemplo descritos en la presente solicitud incluyen ITX-4520 (¡Therx), ITX-5061 (iTherx), o una combinación de los mismos.

En cualquier aspecto, modalidad o ejemplo descritos en la presente solicitud, el Compuesto 1 (o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo) se puede administrar, por ejemplo y sin limitación, en forma concurrente con dicho otro agente anti-VHC. El Compuesto 1 (o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo) también se puede administrar, por ejemplo y sin limitación, en forma secuencial con dicho otro agente anti-VHC. Por ejemplo, el Compuesto 1 (o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo) se puede administrar inmediatamente antes o después de la administración de dicho otro agente anti-VHC. La frecuencia de administración puede ser la misma o diferente. Por ejemplo, el Compuesto 1 (o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo) y dicho otro agente anti-VHC se puede administrar una vez al día. Para otro ejemplo, el Compuesto 1 (o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo) se puede administrar una vez al día, y dicho otro agente anti-VHC se puede administrar dos veces al día.

En cualquier aspecto, modalidad o ejemplo descritos en la presente solicitud, el Compuesto 1 (o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo) se puede co-formular con dicho otro agente anti-VHC en una forma de dosificación individual. Los ejemplos no limitativos de formas de dosificación apropiadas incluyen formas de dosificación líquidas o sólidas. De preferencia, la forma de dosificación es una forma de dosificación sólida. De manera más preferida, la forma de dosificación es una forma de dosificación sólida en la cual el Compuesto 1 (o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo) está en forma amorfa, o de manera altamente preferida molecularmente dispersa en una matriz la cual comprende un polímero soluble en agua farmacéuticamente aceptable y un agente tensoactivo farmacéuticamente aceptable. Dicho otro agente anti-VHC también puede estar en forma amorfa, o molecularmente disperso en la misma matriz o en una matriz diferente que comprende un polímero soluble en agua farmacéuticamente aceptable y un agente tensoactivo farmacéuticamente aceptable. Dicho otro agente anti-VHC también se puede formular en formas diferentes (por ejemplo, en una forma cristalina).

Como una alternativa no limitante, el Compuesto 1 (o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo) y dicho otro agente anti-VHC se pueden formular en formas de dosificación diferentes. Por ejemplo, el Compuesto 1 (o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo) y dicho otro agente anti-VHC se pueden formular en diferentes formas de dosificación sólida respectivas.

En cualquier aspecto, modalidad o ejemplo descritos en la presente solicitud, el Compuesto 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo se puede administrar en una cantidad apropiada tal como, por ejemplo, en dosis de aproximadamente 0.1 mg/kg hasta aproximadamente 200 mg/kg de peso corporal, o desde aproximadamente 0.25 mg/kg hasta aproximadamente 100 mg/kg, o desde aproximadamente 0.3 mg/kg hasta aproximadamente 30 mg/kg. Como otro ejemplo no limitativo, el Compuesto 1 (o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo) se puede administrar en una cantidad de dosis diaria total de aproximadamente 5 mg hasta aproximadamente 300 mg, o desde aproximadamente 25 mg hasta aproximadamente 200 mg, o desde aproximadamente 25 mg hasta aproximadamente 50 mg o una cantidad entre las mismas. Las composiciones de dosis individual pueden contener dichas cantidades o submúltiplos de las mismas para constituir la dosis diaria.

Se entenderá, sin embargo, que el nivel de dosis específico para cualquier paciente particular depende de una variedad de factores incluyendo la actividad del compuesto específico utilizado, la edad, peso corporal, salud general, género, dieta, tiempo de administración, vía de administración, velocidad de excreción, combinación de fármacos, y de la gravedad de la enfermedad sometida a terapia. También se entenderá que la dosis diaria total de los compuestos y composiciones que se van a administrar serán decididas por el médico encargado dentro del alcance del juicio médico razonado.

La siguiente tabla lista ejemplos no limitativos de una combinación del Compuesto 1 (o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo) y otro agente anti-VHC que se pueden utilizar en cualquier aspecto, modalidad o ejemplo descritos en la presente solicitud. Para cada tratamiento, el Compuesto 1 (o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo) y dicho otro agente anti-VHC se pueden administrar diariamente a un paciente con VHC. Cada tratamiento puede estar libre de interferón. La administración de ribavirina se puede incluir en cada régimen. Sin embargo, la presente invención contempla que cada régimen de tratamiento puede estar libre tanto de interferón como de ribavirina. Además, el interferón y/o ribavirina se pueden incluir en cada régimen de tratamiento si fuera necesario. Cada régimen de tratamiento también puede comprender opcionalmente administrar al paciente uno o más de otros agentes anti-VHC. La duración de cada régimen de tratamiento puede durar, por ejemplo y sin limitación, 8-48 semanas, dependiendo de la respuesta del paciente. En cualquier régimen dado descrito en la Tabla 1 , los fármacos pueden ser, por ejemplo y sin limitación, co formulados en una forma de dosificación sólida individual. Por ejemplo, todos los fármacos utilizados en un régimen pueden estar co-formulados en formas amorfas o molecularmente dispersos en una matriz que comprende un polímero soluble en agua farmacéuticamente aceptable y opcionalmente un agente tensoactivo farmacéuticamente aceptable; para otro ejemplo, el Compuesto 1 se formula en forma amorfa o molecularmente disperso en una matriz que comprende un polímero soluble en agua farmacéuticamente aceptable y opcionalmente un agente tensoactivo farmacéuticamente aceptable, y el otro fármaco está en forma(s) cristalina(s) y combinado con el Compuesto 1 amorfo en una forma de dosificación sólida individual. Incluso para otro ejemplo, el Compuesto 1 está formulado en una forma de dosificación diferente que la del otro fármaco.

TABLA 1 Ejemplos no limitativos de regímenes de tratamiento sin interferón (con o sin ribavirina) TABLA 1 ícont.) TABLA 1 (cont.l TABLA 1 (cont.) Las líneas celulares de replicón utilizadas para evaluar las actividades inhibidoras del Compuesto 1 se pueden preparar de conformidad con el siguiente protocolo. Se pueden utilizar dos líneas celulares de replicón subgenómico estable del genotipo 1 para caracterización del compuesto en cultivo celular: una derivada del genotipo 1 a-H77 y la otra derivada del genotipo 1 b-Con1 . Las construcciones de replicón pueden ser replicones subgenómicos bicistrónicos. La construcción de replicón del genotipo 1 a contiene la región codificadora de NS3-NS5B derivada de la cepa H77 de VHC (1 a-H77). El replicón también tiene un reportero de luciferasa de luciérnaga y un marcador seleccionable de neomicina fosfotransferasa (Neo). Estas dos regiones codificadoras, separadas por la proteasa FMDV 2a, comprenden el primer cistrón de la construcción de replicón bicistrónico, en el que el segundo cistrón contiene la región codificadora de NS3-NS5B con adición de las mutaciones adaptativas E1202G, K1691 R, K2040R, y S2204I. La construcción del replicón 1 b-Con1 es identica al replicón 1 a-H77, excepto que la regiones codificadoras de 5' UTR, 3’ UTR, y NS3-NS5B de VHC se derivan a partir de la cepa 1 b-Con 1 , y las mutaciones adaptativas son K1609E, K1846T, y Y3005C. Además, la construcción del replicón 1 b-Con1 contiene un IRES de poliovirus entre el IRES de VHC y el gen de luciferasa. Las líneas celulares de replicón se puede mantener en medio de Eagle modificado de Dulbecco (DMEM) que contiene suero fetal de bovino (FBS) al 10% (v/v), 100 Ul/ml de penicilina, 100 mg/ml de estreptomicina (Invitrogen), y 200 mg/ml de G418 (Invitrogen).

Se debe entender que las modalidades antes descritas y los siguientes ejemplos se brindan a manera de ilustración, no de limitación. Diversos cambios y modificaciones dentro del alcance de la presente invención se harán evidentes a los expertos en la téenica a partir de la presente descripción.

EJEMPLO 1 Actividad antiviral del Compuesto 1 contra replicones de VHC que contienen genes de NS5A obtenidos a partir de humanos infectados con VHC de genotipo 2. 3. 4. 5 ó 6 Con el fin de evaluar la capacidad del compuesto 1 para inhibir NS5A de VHC no de genotipo 1 HCV, se crean un número de líneas de celula de replicón 1 b-Con1 subgenómico estable que contienen una porción de NS5A de VHC de genotipo 2a, 2b, 3a, 4a, 5a ó 6a. Esta construcción de replicón contiene un sitio de restricción Notl hacia el extremo 5’ de NS5A, y un sitio de restricción Blpl justo después del aminoácido 214 de NS5A. Se aísla a ARN viral proveniente de individuos infectados de conformidad con Middleton et al., J VIROL METHODS 145: 137-145 (2007) y Tripathi et al., ANTIVIRAL RES 73:40-49 (2007). Se efectúa RT-PCR en el ARN para generar un fragmento de ADN que codifica para los aminoácidos 1 -214 de NS5A. El fragmento de PCR incorpora los extremos compatibles Notl y Blpl, y este fragmento se liga en un plásmido que contiene el replicón 1 b-Con1 . Se generan líneas de células estables introduciendo estas construcciones en células Huh-7.

El efecto inhibidor del Compuesto 1 sobre la replicación de VHC se determina midiendo la actividad del gen reportero de luciferasa. Brevemente, las células que contienen al replicón se siembran en placas de 96 cavidades a una densidad de 5000 células por cavidad en 100 mI DMEM que contiene FBS al 5%. Al siguiente día, los compuestos se diluyen en sulfóxido de dimetilo (DMSO) para generar una solución de reserva 200x en una serie de ocho diluciones semi-logarítmicas. La serie de diluciones se diluye después adicionalmente 100 veces en el medio que contiene FBS al 5%. Se agrega el medio con el inhibidor a las placas de cultivo celular nocturnas que ya contienen 100 mI de DMEM con FBS al 5%. En las pruebas que miden la actividad inhibidora en presencia de plasma de humano, el medio de las placas de cultivo celular nocturnas se remplaza con DMEM que contiene plasma de humano al 40% y FBS al 5%. Las celulas se incuban durante tres días en las incubadoras para cultivo de tejidos tiempo después del cual se agregan 30 mI de solución amortiguadora para lisis pasiva (Promega) a cada cavidad, y después las placas se incuban durante 15 minutos con balanceo para lisar las células. Se agrega la solución de luciferina (50 mI, Promega) a cada cavidad, y la actividad de luciferasa se mide con un luminómetro Víctor II (Perkin-Elmer). El por ciento de inhibición de la replicación de ARN de VHC se calcula para cada concentración de compuesto y el valor de CE50 se calcula utilizando ajuste de curva de regresión no lineal a la ecuación logística de 4 parámetros y el software GraphPad Prism 4 (Haifman, METHODS ENZYMOL 74 Pt C:481 -497 (1981 )).

Los efectos antivirales del Compuesto 1 se determinan en células de replicón estable midiendo la reducción de la luciferasa de luciérnaga. Con el fin de estimar el efecto de las proteínas de plasma sobre la actividad antiviral, el compuesto se analiza en presencia de FBS al 5%. Los resultados en la Tabla 2 demuestran que el Compuesto 1 tiene potencia excelente contra los replicones del genotipo 1 a y 1 b, con medias de los valores de CE50 que varían entre 5 y 14 pM en presencia de FBS al 5%. La actividad antiviral del Compuesto 1 en presencia de 5% FBS. El Compuesto 1 también tiene potencia excelente contra replicones que contienen NS5A del genotipo 2, 3, 4 y 5. Tambien se provee su actividad contra el genotipo 6a.

TABLA 2 Actividad antiviral del Compuesto 1 en la prueba de cultivo celular de replicón de VHC l i , . . . . . . . . . . . . a. La prueba de % de plasma de humano contiene suero fetal de bovino al 5% b. número de repeticiones independientes EJEMPLO 2 Actividad del Compuesto 1 contra un panel de aislados de pacientes Se utiliza un cassette de vector de lanzadera de VHC para evaluación del fenotipo de genes de NS5A derivados a partir de individuos infectados con VHC de genotipo 1 a y 1 b HCV. El vector contiene la 5' UTR, 3' UTR, y los genes no estructurales NS3-NS5B de la cepa 1 b Con1 , con las mutaciones adaptativas K1609E, K1846T, y Y3005C. Los sitios de restricción Notl y Clal se introducen flanqueando el gen de NS5A, sin cambiar ningún aminoácido o la inserción de aminoácidos adicionales. Se inserta un IRES de poliovirus entre la 5' UTR de VHC y el gen reportero de luciferasa de luciernaga en la forma descrita por Lohmann et al. , J VIROL 77:3007-3019 (2003). Con el fin de evaluar la capacidad del Compuesto 1 para inhibiir NS5A de VHC no de genotipo 1 , se crean un número de líneas de células de replicón 1 b-Con1 subgenómico estable que contienen una porción de NS5A de VHC de genotipo 2a, 2b, 3a, 4a, 5a ó 6a. Esta construcción de replicón contiene un sitio de restricción Notl hacia el extremo 5’ de NS5A, y un sitio de restricción Blpl justo después del aminoácido 214 de NS5A. Se aísla el ARN viral de individuos infectados de conformidad con Middleton et al., J VIROL METHODS 145: 137-145 (2007) y Tripathi et al, ANTIVIRAL RES 73 :40-49 (2007). Se efectúa RT-PCR en el ARN para generar un fragmento de ADN que codifica para los aminoácidos 1 -214 de NS5A. El fragmento de PCR incorpora los extremos compatibles Notl y Blpl, y este fragmento se liga en un plásmido que contiene el replicón 1 b-Con1 .

Se aísla el ARN de VHC a partir del suero de individuos infectados con VHC y se procesa a través del sistema de vector de lanzadera como se describe en Middleton et al, J VIROL METHODS 145 : 137-145 (2007). Brevemente, se aísla el ARN viral a partir de 140 a 280 mI de suero proveniente de individuos infectados con VHC utilizando el kit para aislamiento de ARN viral QiaAmp (QIAgen), de conformidad con las instrucciones del proveedor. Se efectúa un protocolo RT-PCR en el ARN para generar un fragmento de ADN que codifica para el gen NS5A con extremos compatibles Notl y Clal/BIpl . Este fragmento se liga en un plásmido que contiene el vector de lanzadera, y despues el plásmido ligado se transfecta en células E. coli competentes. Después de cultivo nocturno en cultivo líquido, se aísla el ADN del plásmido a partir de la población entera, se purifica y después se hace lineal mediante digestión con Seal. Se utiliza el kit de transcripción de alto rendimiento TranscriptAid T7 (Fermentas) para transcribir el ARN subgenómico de VHC.

El ARN subgenómico de VHC que contiene el gen NS5A proveniente de la muestra clínica se transfecta mediante electroporación en una línea celular derivada de Huh-7 tal como se describe excepto que se electroporan 3 x 106 células con 15 mg de ARN de plantilla y la placa de 96 cavidades se siembra con 7.5 x 103 células por cavidad (Middleton et al, J VIROL METHODS 145: 137-145 (2007). Cuatro horas después de la transfección, se cultivan las cavidades de una placa para la medición de luciferasa. Esta placa provee una medición de la cantidad de ARN de entrada que puede ser traducido, y por lo tanto de la eficiencia de transfección. A las cavidades de las placas restantes, se agrega una serie de diluciones de 3 veces de los compuestos de prueba en DMSO (DMSO al 0.5% concentración final), y las placas se incuban a 37°C, CO2 al 5% en una incubadora humidificada durante 4 días. Despues de este periodo, el medio se elimina y las placas se lavan con 100 mI de solución salina amortiguada con fosfato por cavidad. Para la prueba de luciferasa, se agregan 30 pl de solución amortiguadora para lisis pasiva (Promega) a cada cavidad, y después las placas se incuban durante 15 minutos con balanceo para lisar las células. Se agrega la solución de luciferina (50 mI, Promega) a cada cavidad, y la actividad de luciferasa se mide con un luminómetro Víctor II (Perkin-Elmer). Los valores de CE50 para el Compuesto 1 se calculan utilizando ajuste de curva de regresión no lineal de los datos de inhibición a la ecuación logística de 4 parámetros y el software GraphPad Prism 4 (Halfman, METHODS ENZYMOL 74 Pt C:481 -497 (1981 )).

Dada la diversidad genética del VHC y el grado de polimorfismos dentro de la región N-terminal de NS5A, se evalúa un panel de los aislados clínicos de los genotipos 1 , 2, 3 y 4 sin exposición previa a agentes antivirales de molécula pequeña de investigación. Se calcula la media de los valores de CE50 de 0.66 pM y 1 .0 pM para los 1 1 aislados clínicos del genotipo 1 a y los 11 aislados clínicos del genotipo 1 b, respectivamente (Tabla 3). De las secuencias del genotipo 2a disponibles en Genbank, solamente 1 1 % de las muestras contienen leucina en la posición 31 de NS5A, y esto incluye la cepa 2a-JFH1 . Las 7 muestras analizadas en este panel contienen metionina en la posición 31 , y el Compuesto 1 retiene su actividad contra este panel con una media de CE50 de 3.8 pM (Tabla 4). En el genotipo 2b, hay una variabilidad del 50% en la posición 31 de NS5A con el aminoácido variante siendo leucina o metionina. De las 14 muestras del genotipo 2b incluidas en el panel, 6 muestras contienen la variante M31 y 1 muestra contiene la variante L28F. El Compuesto 1 retiene su actividad contra 13/14 muestras con una CE50 de 1.1 pM, hay una perdida de 75 veces en actividad contra la muestra que contiene la variante L28F (Tabla 5). Se evalúan trece muestras del genotipo 3a, y la media de CE50 contra 12 de las muestras es de 4.5 pM. La CE50 en contra de una de las muestras del genotipo 3a es de 55 pM muy probablemente debido a la presencia de la variante A30K (Tabla 6). Se evalúan nueve muestras del genotipo 4a, dos de las muestras tienen Met en la posición 28; sin embargo, esto no afecta la actividad del Compuesto 1 y se obtiene una media de CE50 de 0.23 pM (Tabla 7). De las muestras del genotipo 6a disponibles en Genebank, hay una variabilidad del 50% en la posición 28 con el aminoácido variante siendo leucina o fenilalanina. Sólo hay una muestra disponible del genotipo 6a con la variante L28. Con el fin de representar de mejor manera los aislados del genotipo 6a, se introduce la mutación L28F en la población. La CE50 del Compuesto 1 es de 42 pM y 68 pM contra la variante L28 contra la variante F28 del genotipo 6a (Tabla 8).

En resumen, el Compuesto 1 retiene su actividad en contra de un panel de muestras de los genotipos 1 a, 1 b, 2a, 2b, 3a, 4a y 6a, a pesar de los polimorfismos en las posiciones de aminoácido de NS5A 28, 30, 31 , 58 y 93.

TABLA 3 Actividad antiviral del Compuesto 1 en replicones de VHC que contienen genes NS5A de humanos infectados con VHC Genotipos 1 a v 1 b Genotipo 1 a Genotipo 1 b # de aislado CE50, p de aislado CE50, pM 594 0.68 4376 0.86 1 155 0.72 4377 1.53 1407 0.56 4386 1.21 4668 0.35 1393 1.15 4674 0.88 4410 1.20 4687 0.51 4413 0.94 4726 0.74 4428 0.74 5056 0.75 9432 1.12 5179 0.64 712 0.93 4429 0.64 1934 0.89 4395 0.74 1694 0.81 Media ± la Dev. Est. 0.66 ± 0. ± la Dev. Est. 1 .03 ± 0.23 TABLA 4 Actividad antivirai del Compuesto 1 en replicones de VHC oue contienen genes NS5A provenientes de humanos infectados con VHC Genotipo 2a Genotipo 2a # de aislado CE50, pM 2q 0.76 84836 11.31 88935 2.56 88939 2.03 91 106 3.39 U01 4.79 10124403 0.87 34021 5.07 10124423 3.46 Media ± la Dev. Est. 3.8 ± 3.2 TABLA 5 Actividad antiviral del Compuesto 1 en replicones de VHC que contienen genes NS5A provenientes de humanos infectados con VHC Genotipo 2b Genotipo 2b # de aislado CE50, pM Variante 2b1 0.86 M31 9992612 5.15 10124418 0.65 10036540 0.61 9810017 0.61 9991749 0.96 M31 10124399 0.54 2b8 0.87 M31 TABLA 5 (cont.) Genotipo 2b # de aislado CE50, pM Variante 42140 0.60 44687 0.70 L/M31 48477 1.11 51666 0.70 M31 49825 0.72 M31 51629 44.74 F28 Media ± la Dev.Est. 1.08 ± 1.23 TABLA 6 Actividad antiviral del Compuesto 1 en replicones de VHC que contienen genes NS5A provenientes de humanos infectados con VHC Genotipo 3a Genotipo 3a # de aislado CE50, pM Variante 7153-55 2.32 9110-47 3.87 9810069 2.52 89241 2.71 V28 85501 3.05 95079 15.16 48557 1 1 .45 55500 55.23 K30 TABLA 6 fcont.l Genotipo 3a # de aislado CE50, pM Variante 55510 3.03 55534 3.28 57223 4.14 57257 0.9 57314 2.02 Media ± la Dev. Est. 4.54 ± 4.26 TABLA 7 Actividad antiviral del Compuesto 1 en replicones de VHC que contienen genes NS5A provenientes de humanos infectados con VHC Genotipo 4a Genotipo 4a # de aislado CE50, pM Variante 1 0251 363 0.26 L28 53008 0.21 M28 52882 0.21 L28 52883 0.24 M28 53038 0.36 L28 55533 0.10 L28 55699 0.21 L28 55700 0.19 L28 55929 0.34 L28 Media ± la Dev. Est. 0.23 ± 0.03 TABLA 8 Actividad antiviral del Compuesto 1 en replicones de VHC que contienen genes NS5A provenientes de humanos infectados con VHC Genotipo 6a Genotipo 4a # de aislado CE50, p M Variante 1 1 10880 42.32 L28 1 1 10880-L28F 68.05 F28 La descripción anterior de la presente invención provee ilustración y descripción, pero no se pretende que sea exhaustiva o que limite la invención a la que se precisa descrita. Son posibles modificaciones y variaciones en vista de las enseñanzas anteriores o se pueden adquirir a partir de la práctica de la invención. Por lo tanto, se indica que el alcance de la invención queda definido por las reivindicaciones y sus equivalentes.

Claims

REIVINDICACIONES

1.- Un metodo de tratamiento para VHC, que comprende administrar una cantidad efectiva del Compuesto 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo a un paciente con VHC, en donde dicho paciente que no ha sido sometido a determinación de genotipo para dicho tratamiento.

2.- El método de conformidad con la reivindicación 1 , en donde dicho paciente está infectado con el genotipo 2 de VHC.

3.- El método de conformidad con la reivindicación 1 , en donde dicho paciente está infectado con el genotipo 3 de VHC.

4.- El método de conformidad con la reivindicación 1 , en donde dicho paciente está infectado con el genotipo 4 de VHC.

5 - El método de conformidad con la reivindicación 1 , en donde dicho paciente está infectado con el genotipo 5 de VHC.

6.- El método de conformidad con la reivindicación 1 , en donde dicho paciente está infectado con el genotipo 6 de VHC.

7.- El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 -6, en donde dicho Compuesto 1 o la sal del mismo se coadministra con otro agente anti-VHC.

8.- El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 -6, en donde dicho Compuesto 1 se coadministra con un inhibidor de proteasa de VHC o un inhibidor de polimerasa de VHC.

9.- El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 -6, en donde dicho Compuesto 1 se coadministra con un inhibidor de proteasa de VHC y un inhibidor de polimerasa de VHC.

10.- El metodo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 -6, en donde dicho tratamiento dura menos de 24 semanas y no incluye la administración de interferón a dicho paciente.

11 .- El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 -6, en donde dicho tratamiento dura no más de 12 semanas y no incluye la administración de interferón a dicho paciente.

12.- El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 -6, en donde dicho Compuesto 1 se coadministra con un inhibidor de proteasa de VHC o una combinación de un inhibidor de proteasa de VHC y un inhibidor de polimerasa de VHC, y en donde dicho tratamiento dura menos de 24 semanas y no incluye la administración de interferón a dicho paciente.

13.- El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 -6, en donde dicho Compuesto 1 se coadministra con un inhibidor de proteasa de VHC o una combinación de un inhibidor de proteasa de VHC y un inhibidor de polimerasa de VHC, y en donde dicho tratamiento dura no más de 12 semanas y no incluye la administración de interferón a dicho paciente.

14.- Un método de tratamiento para VHC, que comprende administrar una cantidad efectiva del Compuesto 1 o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo a un paciente con VHC, en donde dicho paciente está infectado con el genotipo 2, 3, 4, 5, ó 6 de VHC.

15.- El método de conformidad con la reivindicación 13, en donde dicho paciente está infectado con el genotipo 2 de VHC.

16.- El método de conformidad con la reivindicación 13, en donde dicho paciente está infectado con el genotipo 3 de VHC.

17.- El método de conformidad con la reivindicación 13, en donde dicho paciente está infectado con el genotipo 4 de VHC.

18.- El método de conformidad con la reivindicación 13, en donde dicho paciente está infectado con el genotipo 5 de VHC.

19.- El método de conformidad con la reivindicación 13, en donde dicho paciente está infectado con el genotipo 6 de VHC.

20.- El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 14-19, en donde dicho Compuesto 1 se coadministra con un inhibidor de proteasa de VHC o una combinación de un inhibidor de proteasa de VHC y un inhibidor de polimerasa de VHC, y en donde dicho tratamiento dura menos de 24 semanas y no incluye la administración de interferón a dicho paciente.

21.- El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 14-19, en donde dicho Compuesto 1 se coadministra con un inhibidor de proteasa de VHC o una combinación de un inhibidor de proteasa de VHC y un inhibidor de polimerasa de VHC, y en donde dicho tratamiento dura no más de 12 semanas y no incluye la administración de interferón a dicho paciente.