MX2013001687A - Composiciones y metodos para mejorar la preservacion y aceptacion de organos transplantados. - Google Patents

Abstract

La invención proporciona una composición acuosa novedosa para el almacenamiento y preservación de trasplantes, tales como aloinjertos de órganos y tejidos. La composición comprende un compuesto de N-octanoil dopamina en forma solubilizada. La composición también puede ser administrada como un tratamiento previo para los donadores de trasplantes. Además, puede ser utilizada para los receptores de trasplante, opcionalmente en combinación con inmunosupresores.

Description

COMPOSICIONES Y MÉTODOS PARA MEJORAR LA PRESERVACIÓN Y ACEPTACIÓN DE ÓRGANOS TRASPLANTADOS CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención está relacionada con el trasplante de órganos y tejidos. Más específicamente, se relaciona con el tratamiento previo de los donadores de trasplantes, la preservación de los trasplantes antes de su extirpación de los donadores, y el tratamiento de los receptores del trasplante para maximizar sus beneficios del trasplante.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Trasplante significa la extirpación de un órgano o tejido de un cuerpo y su implantación en otro, para el propósito de reemplazar un órgano o tejido severamente dañado o faltante. Para el receptor de un trasplante de órgano mayor tal como el corazón, pulmón, riñon, hígado o páncreas, el trasplante es normalmente la única oportunidad real para supervivencia de mediano o largo plazo en vista de la severidad de la enfermedad subyacente o daño.

Ahora en día, se estima que al menos diez mil trasplantes mayores se han realizado cada año. El órgano que frecuentemente es más trasplantado es el riñon, cerca de 25 ,000 son trasplantados al año solamente en los E.U.A, seguido por el hígado, el corazón, el pulmón y el páncreas. El éxito de estos procedimientos que extienden la vida ha marcado un gran incremento sobre las décadas pasadas. Por ej emplo, la actual tasa de sobrevivencia de un receptor de traspl ante de corazón por cinco años es de 73 % en hombre y 67% en mujeres. En el caso de los ríñones, el paciente común vivirá diez o quince años más con un trasplante que mantenido con diálisis. Para el trasplante de hígado, los receptores tienen un 58 % de sobrevivir por 15 años.

Al mismo tiempo, existe un gran número de trasplantes que han fallado. Las causas de un trasplante fallido están normalmente asociadas con a) alguna enfermedad existente previamente en el donador o algún daño previo al trasplante del órgano, b) daño al trasplante después de la extirpación, es decir, durante el traslado y almacenamiento, y/o c) rechazo al trasplante por el sistema inmunitario del receptor.

La muerte cerebral es considerada una de las causas mayores de la lesión previa al trasplante de aloinjertos. De acuerdo a la hipótesis del daño, las lesiones previas al trasplante tienen un impacto sustancial en el resultado del trasplante. Especialmente en el trasplante de riñon, los inj ertos retirados de donadores por muerte cerebral de hecho muestran un decremento en sobrevivencia a largo plazo comparados a aquellos de donadores vivos. El daño de inj ertos en donadores por muerte cerebral probablemente sucede a través de distintas vías, una de ellas relacionada a los eventos hemodinámicos, otro a las respuestas inflamatorias de los órganos incluyendo los ríñones.

Recientemente, se ha demostrado que un tratamiento previo de donadores con baj a dosis de dopamina antes de la extirpación de ríñones ha tenido un efecto benéfico en la función de los inj ertos (Schnuelle P et al, Effects of donor pre-treatment with dopamine on graft function after kidney transplantation: a randomized controlled trial . JAMA. 2009 Sep 9;302( 1 0): 1 067-75). No obstante, la depuración de la catecolamida en los donadores por muerte cerebral hace que el suministro de la dosis de dopamina sea difícil y pueda llevar a hipertensión o taquicardia.

Además, se propuso que las dopaminas químicamente modificadas, en particular la N-octanoil dopamina (NOD por sus siglas en ingl és), puedan ser incluso más adecuadas para tratamiento previo de donadores que la misma dopamina, y puede que también sea usada de forma ventajosa en las soluciones de preservación de órganos (Losel RM et al ., N-octanoyl dopamine, a non-haemodynamic dopamine derivative, for cell protection during hypothermic organ preservation. PLoS One.2010 Mar 1 6; 5(3 ) : e971 3 ; vea también WO 2009/01 5752 A2). Una ventaj a de estos derivados es que muestran una capacidad fuerte de reducción, pero al mismo tiempo ellos tienen una gran falta de actividad hemodinámica y, a través de su lipofilicidad sobre la dopamina, tiene un potencial para una absorción celular substancialmente incrementada.

Sin embargo, es difícil suministrar eficientemente derivados lipofílicos de la dopamina. Son químicamente inestables, propensos a la oxidación, y pobremente solubles en medios acuosos. Como suspensiones, no pueden inyectarse o hacerse infusión intravenosamente y, cuando se agregan a soluciones para preservación de órganos, se precipitarán y conducirán a una efectividad no confiable.

Aunque la WO 2009/01 5752 se refiere a la posibilidad general de usar excipientes de solubilización o sistemas coloidales para formular derivados lipofílicos de dopamina, no describe ninguna composición específica de una derivado de doapamina que use tal excipiente. Otros documentos que mencionan NOD también callan acerca de las técnicas útiles de formulación para este compuesto, tal como Schentze U et al., J. Cryobiol. Vol . 53 (3 ), p.375, 2006 y Tsagogiorgas C et al. , Transplantation Supplement to vol. 90 [2s], 21 1 5, P. 37, 201 0.

La conservación de los órganos y tejidos durante el transporte y almacenamiento se alcanza típicamente al mantenerlos en una solución de conservación y enfriarlos hasta justo arriba del punto de congelación. Una solución común de conservación se basa en cetoglutarato de histidina-triptofano (HTK), que ayuda en la inactivación de la función de los órganos al retirar el sodio y calcio extracelular, junto con un amortiguamiento intensivo del espacio extracelular por medio de clorhidrato de histidina/histidina, de manera de prolongar el periodo durante el cual los órganos tolerarán la interrupción de la sangre oxigenada. Las soluciones alternas con la solución de Euro-Collins (EC) y de la Universidad de Wisconsin (UW). La última imita las propiedades de los fluidos intracelulares, pero comprende también un polímero (almidón de hidroxietilo) para evitar el edema, y aditivos para captura de radicales libres. Como se menciona, también se ha propuesto agregar dopamina o derivados lipofílicos de dopamina a tales mezclas de perfusión y conservación de órganos, con obj eto de reducir la lesión por conservación en frío.

El rechazo de trasplantes es otra causa importante de la falla de inj ertos. En principio, el sistema inmunitario del receptor ataca el injerto como un material extraño en el cuerpo e intenta destruirlo. El rechazo del trasplante puede, de alguna forma, ser reducido de manera importante y frecuente al serotipificar cuidadosamente a los donantes y a los receptores para determinar las compatibilidades más apropiadas. Sin embargo, algún episodio de rechazo ocurre en muchos, no en la mayoría de los receptores de trasplantes, y la severidad de la respuesta inmunitaria solo puede ser manipulada con el uso de fármacos inmunosupresores.

Las reacciones inmunitari as de los receptores pueden ser clasificadas como rechazo hiperagudo, agudo y crónico. El rechazo hiperagudo es una respuesta de complemento mediado en receptores con anticuerpos preexistentes al donador. Tales reacciones pueden ocurrir en minutos y un trasplante debe ser removido inmediatamente para prevenir una respuesta sistemática inflamatoria severa y una aglutinación extensiva de la sangre. El riesgo del rechazo hiperagudo está especialmente relacionado con los trasplantes de riñon.

El rechazo agudo involucra la infiltración de las células T y otras células inmunes en el trasplante. Las células T, a través de varios mecanismos, provocan que se Usen las células en el tejido de trasplante, o producen citocinas lo que lleva a la necrosis del tej ido. Ya que las células T primero deben diferenciar antes de que este tipo de reacción suceda, el rechazo agudo normalmente empieza solo después de una latencia de una o más semanas después del trasplante. El mayor riesgo del rechazo agudo sucede en los primeros tres meses. La severidad del rechazo agudo no siempre es dramática; algunos grados del rechazo pueden ser manej ados con medicación inmunosupresora apropiada.

Los episodios recurrentes y mal controlados del rechazo agudo pueden llevar eventualmente a la manifestación de un rechazo crónico de trasplante, lo que se resume la mayoría de las formas de respuesta crónica inflamatoria e inmune contra el tejido trasplantado. Una condición relacionada es la vasculopatía de aloinjerto crónica, la cual describe la pérdida de función del órgano a largo plazo y se asocia con la fibrosis del tejido vasculativo y trasplantado. El rechazo crónico de trasplante es irreversible y no puede ser tratado de manera efectiva.

Los fármacos inmunosupresores efectivos para controlar el rechazo agudo incluyen corticosteroides, inhibidores de calcineurina, inhibidores mTOR, agentes anti-proliferativos y anticuerpos en contra de las células T y las células B , algunas de las cuales se enfocan en proteínas de superficie (es decir CD20, CD25) . Particularmente importante en la prevención y el manejo de rechazos de trasplante es el inmunosupresor macrolido que actúa como un inhibidor de calcineurina, es decir, ciclosporina A y tacrolimus, o inhibidores mTOR, tales como sirolimus y everolimus. De hecho, se introduj o un beneficio terapéutico substancial para los receptores de trasplantes como resultado de la aparición de los primeros macrolidos, en particular ciclosporina, y después tacrolimus. Después, los componentes con la estructura y actividad relacionada, incluyen primecrolimus, everolimus, sirolimus, deforolimus, everolimus, temsirolimus y zotarolimus.

La mayoría, si no es que todos los macrolidos utilizados para la inmunosupresión son componentes poco solubles con biodisponiblidad problemática. Su uso está asociado con efectos adversos substanciales. La ciclosporina A, por ej emplo, presenta nefrotoxicidad y hepatotoxicidad importantes, pero también lleva a una hiperplasia gingival , convulsiones, úlceras pépticas, pancreatitis, fiebre, vómito, diarrea, confusión, hipercolesterolemia, disnea, adormecimiento y hormigueo particularmente de los labios, prurito, presión alta de la sangre, y una vulnerabilidad incrementada a todos los inmunosupresores y a los hongos e infecciones virales oportunistas. El tacrolimus puede inducir daño cardiaco, hipertensión, visión borrosa, problemas de riñon e hígado, temblores, hipercalemia, hipomagnesemia, hiperglicemia, diabetes mellitus, comezón, insomnio, y problemas neuróticos tales como un síndrome de confusión encefalopática posterior reversible, pérdida de apetito, debilidad, depresión, calambres y neuropatía.

Además, existe evidencia que los inmunosupresores tales como la ciclosporina, el tacrolimus y los parecidos, están asociados con el incremento de riesgo de malignidades, es decir un melanoma y linfoma que no es de Hodgkin, en receptores de trasplantes. El riesgo parece estar relacionado a la dosis y la duración del tratamiento .

Para incrementar además la función fisiológica de aloinj ertos y reducir el riesgo de un fallo de trasplante, existe la necesidad de mejoras en el tratamiento previo del donador para minimizar el daño por isquemia fría. Además, también hay una necesidad para una mejor preservación de trasplantes hasta la implantación para reducir el riesgo del daño por preservación en frío. Finalmente, también hay una necesidad para una farmacoterapia más efectiva y mej or tolerada de los receptores de trasplante para maximizar su beneficio del trasplante y minimizar el riesgo de reacciones severas por rechazo.

Estas necesidades son atendidas por la presente invención, de la cual el obj etivo es dar mejoras en el tratamiento previo del donador, la preservación de aloinj ertos, y el tratamiento del receptor, tales mejoras resultarán en una o más desventaj as de los métodos y composiciones anteriores. Aun los obj etivos serán entendidos en la descripción y las reivindicaciones de la patente.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención da una composición farmacéutica que comprende una cantidad efectiva de N-octanoil dopamina, y un solvente acuoso fisiológicamente aceptable, y un excipi ente anfifílico fisiológicamente aceptable. En la composición, la N-octanoil dopamina está presente en un estado molecular y coloidalmente dispersado.

En la composición de la invención, l a N-octanoil dopamina está incorporada en una forma soluble. Por ej emplo, puede ser formulada como una solución micelar, como una dispersión de liposoma coloidal, o como una microemulsión. En el caso de una solución micelar, es preferible que se disuelva por un humectante no iónico tal como un polisorbato.

Al mismo tiempo, la composición está formulada para proteger de la degradación a la N-octanoil dopamina. Mientras que el compuesto es poco compatible con un número de excipientes solubles, se descubrió por los inventores que ciertos tensoactivos no iónicos, y también ciertos lípidos amfifílicos formados en la vesícula, pueden de hecho ser utilizados para formular N-octanoil dopamina en una formula acuosa soluble y estable.

La composición está adaptada preferentemente para una administración parenteral . Puede ser administrada sistémicamente o localmente a un donador de trasplante para un tratamiento previo y prevención de un daño isquémico.

De acuerdo a una modalidad, se usa in vitro para la preservación de aloinjertos para minimizar los daños por la preservación en frío. Para este propósito, por ej emplo, puede ser añadida a un medio de preservación de órganos.

En otra modalidad, la N-octanoil dopamina es administrada a un receptor de aloinj erto, es decir una inyección intravenosa. Normalmente, el receptor es un paciente co-tratado con al menos un fármaco inmunosupresor, tal como un inhibidor de calcineurina, es decir, ciclosporina.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS La Figura 1 muestra la mitigación de una pérdida de ATP en cardiomiocitos después de 8 horas de almacenamiento en frío como se efectúa por la composición en el Ej emplo 1 en comparación con las células no tratadas y convencionalmente tratadas (dopamina).

La figura 2 muestra la inhibición de la liberación de LDH después de 8 horas de almacenamiento frío en la presencia de la composición del Ej emplo 1 , en comparación con las células no tratadas y (convencionalmente) tratadas.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN De acuerdo con la presente invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende una cantidad efectiva de N-octanoil dopamina, y un solvente acuoso fisiológicamente aceptable, y un excipiente anfifílico fisiológicamente aceptable. En la composición, la N- octanoil dopamina está presente en un estado molecular o coloidalmente dispersado.

Los inventores descubrieron que en dicha composición en la cual la N-octanoil dopamina está presente en forma soluble y da un medio para usar el compuesto de manera más efectiva que lo que se conoce hasta ahora. De manera sorprendente, las formulaciones solubilizadas de la invención no solo permiten que el compuesto sea administrado por diferentes rutas parenterales incluyendo la inyección o infusión intravenosa, sino que también incrementa su actividad protectora. Al mismo tiempo, la composición sobrepasa simultáneamente los retos que resultan de las propiedades de la N-octanoil dopamina la cual hace difícil la formulación y administración del compuesto, en particular es poco soluble en agua y por su inestabilidad química pronunciada.

La N-octanoil dopamina, también es referida como N-octanoil-4-(2-aminoetilo) benceno- 1 ,2 diol o N-octanoil-4-2-(3 ,4-dihidroxifenil) etilamina, es un derivado acil lipofílico del neurotransmisor de catecolamida, dopamina. Como se utiliza aquí, el término N-octanoil dopamina también incluye sales, isómeros, y solvatos de N-octanoil dopamina.

Una cantidad efectiva significa una cantidad apropiada para lograr el efecto en el contexto del uso esperado. Las cantidades efectivas de N-octanoil dopamina, por ej emplo, pueden diferenciar entre soluciones para preservación de órganos y las inyecciones de tratamiento previo del donador.

Un solvente acuoso fisiológicamente aceptable es agua o una solución acuosa de componentes, en particular excipientes farmacéuticos, los cuales son considerados seguros con respecto a la cantidad incorporada del uso esperado. Por ejemplo, el solvente acuoso puede ser una solución de cloruro de sodio isotónico estéril, o una solución reguladora estéril.

De manera similar, un excipiente anfifílico fisiológicamente aceptable es un componente anfifílico, en particular un humectante, el cual puede ser usado como un excipiente farmacéutico ya que es seguro y bien tolerable al menos en el nivel incorporado y en vista del uso esperado, tomando en consideración la ruta y la frecuencia de administración.

El estado molecularmente disperso se refiere a una solución molecular real. En una solución líquida, las moléculas de los soluto(s) están individualmente solvatadas y rodeadas por moléculas solventes. En contraste, el estado coloidalmente disperso significa que un material, en este caso la N-octanoil dopamina, está presente en estructuras que tienen el tamaño coloidal, es decir, que son substancialmente más grandes que las molécul as, pero muy pequeñqw para ser visibles en simple vista. Los coloides normalmente tienen un diámetro aproximado de entre 1 a 500 nanómetros. (H. STricker, Physikalishce Pharmazie, 3ra Edición, página 440). Además, las estructuras coloidales son prácticamente invisibles con un microscopio óptico y no resulta en una cambio de turbiedad de la solución, pero si en una opalescencia.

Las estructuras coloidales de varios tipos son conocidas porque existen en diferentes tipos de líquidos coloidales. En soluciones isotrópicas coloidales, las propiedades de la solución son las mismas pese a la dirección de las medidas. En otras palabras, en el estado isotrópico, todas las direcciones son indistinguibles una de la otra. Por ej emplo, una solución micelar puede ser isotrópica. En soluciones coloidales anisotrópicas, existe orientación o alineación de las moléculas, las cuales causan que las propiedades físicas de la solución varíen por diferentes direcciones de medidas. Dichas soluciones anisotrópicas son referidas como cristales líquidos, o fases cristalinas del líquido, o mesofases.

En una de las modalidades preferidas, la composición de la invención comprende N-octanoil dopamina en su estado coloidal disperso. Las partículas coloidales que están dispersas en el solvente acuoso, normalmente, contendrán tanto el excipiente anfifílico como el ingrediente activo. Como se utiliza aquí, la dispersión coloidal también se le refiere como solución coloidal.

De acuerdo a otra modalidad preferida, la composición comprende un excipiente anfifílico seleccionado del grupo de tensoactivos no iónicos. Los tensoactivos no iónicos fisiológicamente aceptables incluyen, por ejemplo, tiloxapol, poloxámeros, tal como el poloxámero 1 88, poloxámero 407, Pluronic F68LF o Lurol F68 , Pluronic F 127, Pluronic L-G2LF y Pluronic L62D, polisorbatos tales como polisorbato 20, polisorbato 60 y polisorbato 80, derivados de aceite de ricino y polioxietileno, esteres de sorbitán, poliexil estarato, y mezclas de dos o más de los mismos. En una modalidad específica, el tensoactivo no iónico es un polisorbato. En otra modalidad específica, el tensoactivo no iónico es polisorbato 80.

Opcionalmente, la composición comprende dos o más excipientes anfifílicos o tensoactivos. En una de las modalidades preferidas, dos o más tensoactivos no iónicos son utilizados en combinación. Por ej emplo, un polisorbato, tal como el polisorbato 20 o 80, puede ser combinado con el Cremophor EL o Cremophor RH.

El excipiente anfifílico o tensoactivo, o combinación de tensoactivos, puede ser incorporado en dicha cantidad que forma micelas en las cuales la N-octanoil dopamina se solubiliza. Generalmente hablando, las micelas son agregados coloidales de moléculas anfifílicas en un solvente. Pueden ser esféricas, pero también pueden tener muchas formas. En un sistema acuoso, una micela esférica comprende moléculas terisoactivas de las cuales las porciones hidrofílicas están en contacto con el solvente que las rodea, aislando las regiones moleculares hidrofóbicas en el centro de la micela. Los componentes lipofílicos poco solubles en agua pueden ser disueltos en el núcleo de dichas micelas.

Para que la formación de una micela suceda, la concentración de tensoactivo (o tensoactivos) debe estar por arriba de la concentración de micela crítica (CMC). Además, la cantidad de tensoactivo en la composición debe ser seleccionada por encima de esta concentración si una solución micelar se enfoca a esto. Es más, la cantidad de tensoactivo debe ser seleccionada suficientemente alta para solubilizar la cantidad incorporada de N-octanoil dopamina. Al mismo tiempo, la cantidad de tensoactivo debe ser lo suficientemente baj a para evitar efectos indeseables en el donador de un trasplante, el trasplante mismo, o el receptor del trasplante.

En una modalidad particular, la cantidad del excipiente anfifílico es al menos de 0.05% en peso. De acuerdo a otra modalidad, la cantidad es de cerca de 0. 1 % en peso a cerca de 30% en peso, o de cerca de 0.5% en peso a cerca de 20% en peso respectivamente. Por ej emplo, se descubrió que ya a un nivel de 0.5% en peso, el polisorbato 20 y polisorbato 80 son capaces individualmente de solubilizar las cantidades substanciales de N-octanoil dopamina, es decir, 40µp??1/???_<. Sin embargo, si la composición es utilizada como un concentrado para ser añadido a una solución comercial para la preservación de un tejido u órgano, el concentrado mismo también comprende el excipiente anfifílico a una concentración rel ativamente alta, tomando en cuenta el factor de disolución. En otra modalidad, la relación de la N-octanoil dopamina al excipiente anfifílico se selecciona en el intervalo de cerca de 5 : 1 a 1 :50.

En una modalidad preferida adicional, la composición está libre de solventes orgánicos o co-solventes tales como el etanol, glicerol, propilenglicol o polietilenglicol. De acuerdo a otra modalidad preferida, la composición puede contener pequeñas cantidades de dichos solventes o co-solventes, hasta cerca de 2% en peso .

La composición puede comprender ingredientes farmacéuticos inactivos adicionales como sea requerido o como sea apropiado. Por ej emplo, puede comprender de uno o más excipientes para ajustar la tonicidad de la formulación. Es preferible que la composición se adapte para mostrar una presión osmótica de aproximadamente 3 10m0smol/kg, tal como en el intervalo de cerca de 200 a 450 mOsmol/kg o en el intervalo de cerca de 250 a 400 m0smol/kg o en el intervalo de 280 a 350 m0smol/kg, respectivamente. Si el uso esperado es la preservación de aloinj ertos durante el almacenamiento y traslado, se debería asegurar que, opcionalmente, después de la dilución con una solución para preservación de órganos convencional, la composición tiene una osmolaridad fisiológica de cerca de 300 a 330mOsmol/kg. Los excipientes apropiados para ajustar la presión osmótica, por ej emplo, incluyen sales, azúcares, alcoholes de azúcar, y amino ácidos. Entre las sales, la sal reguladora o cloruro de sodio son particularmente adecuados. Azúcares útiles y los alcoholes de azúcar incluyen, por ejemplo, glucosa, rafinosa, trehalosa, sorbitol y manitol, por mencionar algunos.

Es más, la composición puede comprenderse de uno o más excipientes para ajustar el valor de pH, el cual es preferiblemente seleccionado en el intervalo de pH 3 a pH 8. Es más preferible que el pH no sea más alto de 7, tal como de pH 4 a pH 7.0 o de pH 4.5 a pH 6.5. Si el uso esperado es la preservación de aloinjertos durante el almacenamiento y el transporte, se debe asegurar que, opcionalmente después de la dilución con una solución de preservación de un órgano convencional, la composición muestre un pH de cerca de 7.0 a 7.5. Los excipientes apropiados para el ajuste del pH incluyen ácidos orgánicos e inorgánicos, bases y sales reguladoras fisiológicamente aceptables. Estas últimas sales pueden funcionar al mismo tiempo como electrolitos fisiológicos, tales como las sales de sodio, potasio, magnesio y calcio.

La composición puede comprender uno o más estabilizadores tales como agentes complejos o quelantes como el EDTA, y/o antioxidantes tales como la vitamina E o derivados de la vitamina E, ácido ascórbico, sulfitos, sulfitos de hidrógeno, esteres de ácidos gálicos, butil hidroxianisol, butil hidroxitolueno o acetilcisteina; los agentes incrementadores de viscosidad tales como los polímeros solubles en agua; conservadores (en caso de que la composición vaya a empacarse en recipientes de dosis múltiple y utilizados para administración parenteral); el ácido lactobiónico, alopurinol, glutatión, adenosina; aminoácidos tales como la histidina, triptofano, ácido glutámico, ácido aminoglutámico o cetoglutarato.

Opcionalmente, la invención puede ser llevada a cabo al formular un polvo o líquido concentrado del cual una composición como se describe aquí puede ser reconstituida. Por ejemplo, para lograr una vida útil extendida puede ser útil formular el componente solido de la composición como un polvo liofilizado el cual puede, antes de su uso, ser disuelto o dispersado en un portador o diluyente acuoso adecuado . De manera alternativa, un líquido concentrado puede ser formulado el cual diluido con un medio acuoso, produce una composición final para ser utilizada para el tratamiento previo del donador, preservación de aloinj ertos, o tratamiento de receptores de trasplante. Tales concentrados de líquido no solo tienen la ventaj a de tener un bajo peso y volumen, el cual hace más fácil la manufactura, traslado, almacenamiento y manejo, sino también provee una oportunidad de salirse de los parámetros fisiológicos tal como el pH u osmolaridad durante el almacenamiento, es decir, con un oj o en un tiempo de vida extendido. Las propiedades fisiológicas requeridas por su uso son logradas después al solubilizarlas apropiadamente en el concentrado.

En otra modalidad, la composición está en la forma de una microemulsión. Como es usado aquí, una microemulsión es una mezcla ópticamente isotrópica clara, termodinámicamente estable, de un componente lipofílico, un componente hidrofílico y un componente anfifílico. Normalmente, una microemulsión se forma espontáneamente cuando los componentes se combinan y se mezclan, sin necesitar alta energía como normalmente se necesita en la formación de una emulsión "ordinaria". Las microemulsiones pueden tener una fase coloidal lipofílica dispersada en una fase hidrofílica o una fase hidrofílica dispersada coloidalmente en una fase lipofílica. El tamaño de las fases dispersas está normalmente en el intervalo de cerca de 5 nm a 400 nm, y lo más común es debaj o de 200nm. En una de las modalidades de la invención, el tamaño de las partículas es de cerca de 5 nm a cerca de l OOnm. En términos de propiedades Teológicas, la microemulsión puede estar en forma de líquido o gel, es decir, en forma líquida o semi-líquida. En una modalidad preferida, la microemulsión está en una forma líquida. Si una microemulsión se usa, el componente lipofílico es preferentemente seleccionado de excipientes los cuales son adecuados para uso parenteral . Por ej emplo, un aceite triglicérido altamente purificado o triglicéridos semi-sintéticos de media cadena pueden ser utilizados.

En una modalidad, el excipiente anfifílico es un fosfolípido formado en vesícula. En este caso, la composición está diseñada como una dispersión coloidal de liposomas, en donde las liposomas se incorporan a la N-octanoil dopamina. Como se usa aquí, una liposoma es una vesícula formada de al menos una bicapa, en donde la bicapa está compuesta de lípidos anfifílicos agregados (o unidos). La bicapa muestra alguna similaridad con las membranas biológicas en lo que es hidrofílico hacia el interior y el exterior de la vesícula, en donde la región lipofílica esta intercalada entre estas dos regiones hidrofílicas. Los liposomas más grandes normalmente tienen dos o más bicapas concéntricas . Los liposomas más pequeños tienden a ser esféricos, pero vesículas mas grandes existen en varias formas.

Dependiendo del método de preparación seleccionado y las condiciones de producción, los liposomas resultantes pueden ser descritos como vesículas multilamelares (MLV por sus siglas en inglés), vesículas unilamelares pequeñas (SUV por sus siglas en inglés), o vesículas unilamelares grandes (LUV por sus siglas en inglés). Las MLV se diferencian de las SUV y las LUV en que las MLV tienen dos o más lípidos bicapa. Además, las MLV parecen útiles en particular por estar cargadas con fármacos lipofílicos las cuales se disuelven en o se asocian con, las regiones lipofílicas de las membranas de la vesícula. Por el contrario, las SUV y las LUV son especialmente útiles para la encapsulación de compuestos hidrofílicos junto con el compartimiento acuoso de liposomas. Normalmente, las MLV tienen un diámetro de 200 nm hasta casi varios micrones. Las SUV normalmente se encuentran en el intervalo de 80 nm a 200 o 300 nm, en donde las LUV normalmente se entiende que son más grandes que 200 a 300nm en promedio. En el contexto de la invención, los diámetros se entienden como promedios z como se miden con la difracción de láser o la espectroscopia de correlación de fotones. En el contexto de la presente invención, los liposomas coloidales deben ser utilizados, y los MLV muy grandes no deben entrar en esta categoría.

Los lípidos anfifílicos de los cuales los liposomas están compuestos, normalmente incluyen al menos un fosfol ípido . Los fosfolípidos son lípidos anfifílicos que comprenden un grupo, el cual está negativamente cargado y de este modo substancialmente hidrofílicos. Los fosfolípidos pueden ser clasificados como glicerofosfolípidos (o fosfoglicéridos, caracterizados por la presencia de porciones de glicerol) o fosfofingolípidos (o ceramidas, tales como la esfingomielina) . Los liposomas pueden contener fosfolípidos nativos, semisintéticos y/o sintéticos.

Normalmente los liposomas comprenden al menos un glicerofosfolípido (o fosfoglicérido). Dichos glicerofosfolípidos son de hecho muy usados en los lípidos formados en la vesícula en liposomas. Los glicerofosfolípidos utilizados comúnmente incluyen aquellos que se derivan de lecitinas nativas, tal como la soya o la lecitina del huevo, o de la hidratación (parcial) de los mismos productos. Las lecitinas contienen altas cantidades de fosfatidilcolinas, pero también comprenden pequeñas cantidades de acido fosfórico, colina, ácidos grasos, glicerol, glicolípidos, triglicéridos, fosfatidiletanolaminas y fosfatidilinositol . Las fosfatidilcolinas son glicerofosfolípidos que comprenden colina como un grupo principal, por el contrario a fosfatidiletanolaminas y los fosfatidilgliceroles.

En las fosfatidilcolinas, dos grupos hidroxilo del residuo del glicerol están conectados a través de los enlaces de los grupos acilo, los cuales están derivados normalmente de los ácidos grasos de cadena larga. Los grupos acilo comunes en fosfatidilcolinas (y también en fosfatidiletanolaminas y fosfatidilgliceroles) utilizados como constituyentes de liposomas incluyen los grupos de miristoilo, palmitoilo, estearoilo y oeloilo.

Debido a la carga negativa del grupo de fosfato y la carga positiva de la colina, las fosfatidilcolinas son siempre zwiteriónicas (algunas veces también se refiere a ellas como neutras). Las fosfatidiletanolaminas son también zwiteriónicas sobre la carga de intervalos de pH pero pueden existir aniones en ambientes básicos. Los fosfatidilgliceroles son aniónicos.

Junto a uno o más glicerofosfolípidos, los liposomas puede comprender uno o más lípidos los cuales no son capaces de formar bicapas por sí mismos, pero los cuales modifican o estabilizan dichas bicapas. Un ej emplo de dicho lípido modificador de membranas es el colesterol.

Loe métodos de preparación y caracterización de liposomas y preparaciones de liposomas se conocen para una persona con experiencia. Normalmente, las vesículas multilamelares se formarán espontáneamente cuando los lípidos anfifílicos son hidratados, en donde la formación de pequeñas vesículas unilamelares normalmente necesita un proceso en donde se involucra un ingreso de energía sustancial, tal como ultrasonido u homogenización de alta presión. Los métodos para preparar y caracterizar los liposomas han sido, por ej emplo, descritos por S . Vemuri et al. [Preparation and characterization of liposomes as therapeutic delivery systems: a review. Pharm Acta Helv. 1995, 70(2) : 95 - l 1 1 ] .

De los liposomas conocidos, esos que pueden ser utilizados de acuerdo a la invención tienen un tamaño predominantemente coloidal, es decir, que el tamaño promedio de su partícula se encuentra por debajo de 500nm. También se prefiere un diámetro de más de 300nm, o no mayor a 200nm, respectivamente. Dicho tamaño de partícula promedio normalmente permitirá una filtración estéril a través de un filtro con un tamaño de poro de 0.22 µ??, el cual es una ventaja significativa en caso de que la composición no esté establ e para resistir la esterilización por calor.

La composición de la invención puede ser utilizada como una medicina o como un medio líquido para la preservación y almacenamiento de un aloinjerto de órgano o tejido. Cuando se utiliza para la preservación de un aloinj erto, puede ser inyectado o infusionado - opcionalmente después de la reconstitución o dilución con una solución de almacenamiento de un órgano convencional - directamente en el sistema vascular de un órgano antes y/o inmediatamente después de su extirpación al donador. De este modo la vasculatura del órgano se limpia con la composición, la cual es dej ada subsecuentemente junto con la vasculatura para almacenamiento y traslado . Después de la implantación y antes de que la perfusión se estabilice en el receptor, el trasplante debe ser limpiado con la solución de preservación y almacenamiento utilizando un tensor fisiológico de volumen de plasma o algo parecido .

De forma alternativa, la composición puede ser inyectada o infusionada sistémicamente, es decir, intravenosa, al donador. De acuerdo a este uso, el donador es tratado previamente con N-octanoil dopamina, la cual es particularmente útil en la función protectora del compuesto que puede ser iniciado más temprano que solo al momento de la extirpación de aloinjerto. Es más, en el caso de una extirpación de varios órganos, es decir, de un donador con muerte cerebral, este régimen permite inicio de una protección simultánea de todos los órganos de interés.

En otra modalidad, la composición es utilizada como una medicina para la administración para el receptor del trasplante, en particular para el propósito de prevención y tratamiento del rechazo de trasplante.

De manera sorprendente, los inventores descubrieron que la N-octanoil dopamina es capaz de inhibir la proliferación de las células T en concentraciones terapéuticamente útiles. La inhibición aparece corriente abajo de los eventos de señalización del receptor temprano de células T, y están asociados con la inhibición de NF D B (el factor nuclear del potenciador de cadena ligera kappa de las células B activadas) y AP- 1 (activador de proteína 1 ). Se descubrió que los efectos son dependientes en la actividad redox, es decir, la N-octanoil dopamina pierde su capacidad inhibidora de células T ya que se oxida.

Además, se descubrió de manera inesperada que la N-octanoil dopamina y los inhibidores de calcineurina tal como la ciclosporina A actúan en su inhibición de células T, para que la concentración de un inhibidor de calcineurina requerido para una inhibición sustancial de células T sea más baja en la presencia de N-octanoil dopamina que en su ausencia. Basados en este descubrimiento, la presente invención enseña, inter alia, que los receptores de trasplante quienes reciben un inhibidor de calcineurina tal como la ciclosporina A puede ser co-tratada ventajosamente con N-octanoil dopamina. La administración concurrente de la N-octanoil dopamina permite una reducción considerable de la dosis del inhibidor de calcineurina, lo que llevara el beneficio de la reducción sustancial en la ocurrencia y severidad de las reacciones adversas dependientes de dosi s del inhibidor de calcineurina. En el caso de ciclosporina A y tacrolimus, por ej emplo, la invención proporciona un medio para reducir en particular su potencial nefrotóxico el cual ha sido una de las mayores desventaj as de su uso terapéutico en los receptores del trasplante.

Por ej emplo, si un paciente recibe la ciclosporina A inhibidora de calcineurina, una dosis inicial diaria de ciclosporina A oral para un receptor de trasplante es de cerca de 10 a 1 4mg por kg de peso corporal , y para un receptor de trasplante de medula ósea o para una reacción de un ya existente inj erto contra portador es de cerca de 12.5 a 15mg/kg, tales dosis después son reducidas a una dosis mantenida por día en el intervalo de 2 a 6mg/kg. Normalmente, se enfocan niveles de sangre en circulación de 1 00 a 400ng/mL. En el caso de la invención, sin embargo, en donde se da la ciclosporina A en combinación con la N-octanoil dopamina, la dosis inicial de ciclosporina A puede ser reducida a menos de 10mg/kg tal como de 2 a menos que 10mg/kg, o de cerca de 4 a 8mg/kg. La dosis de mantenimiento puede ser reducida hasta cerca de 1 a 4mg/kg, tal como para obtener niveles de plasma en circulación de no más de 200ng/mL, o no más de 1 50ng/mL, o incluso menos de 100ng/mL, respectivamente. En algunos casos, a través de los niveles de no más de 80ng/mL probará ser tan vasta para mantenimiento de terapia efectivo en el rechazo de trasplante con ciclosporina A en presencia de N-octanoil dopamina.

En caso de que se utilice otro inhibidor de calcineurina tal como el tacrolimus, la reducción de dosis puede ser lograda en una forma análoga. En general, el estándar recomendado para una dosis diaria puede ser reducido por 20% o más, o cerca del 30% o más, o incluso cerca del 50% o más.

Para el tratamiento de los receptores de trasplante, la N-octanoil dopamina, es opcional en la forma de la composición como se describió anteriormente, puede ser administrada por cualquier ruta lo cual llevará a una disponibilidad sistémica de N-octanoil dopamina, o para su biodisponiblidad local en el trasplante. En particular, la N-octanoil dopamina o la composición de la invención pueden ser administrada parenteralmente u oralmente. Como se utiliza aquí, la administración parenteral se refiere a cualquier tipo de administración invasiva por inyección o infusión, incluyendo la administración intravenosa, intraarterial, subcutánea, intramuscular, locoregional, intraluminal, e intradérmica. En una modalidad preferida, la ruta se selecciona de la administración intravenosa, intraarterial, subcutánea e intramuscular.

Para una administración oral, la N-octanoil dopamina puede, por ej emplo, ser formulada como una tableta, una capsula, o un gel utilizando excipientes farmacéuticos como son conocidos para las personas expertas en el arte.

Otras modalidades se volverán obvias en los siguientes ejemplos, los cuales ilustrarán la invención en algunos de sus mayores aspectos sin limitar el alcance de los mismos.

EJEMPLOS Ej emplo 1 Una formulación de N-octanoil dopamina fue formulada con polisorbato 80 (Tween 80) como excipiente anfifílico. En resumen, la N-octanoil dopamina y polisorbato 80 se añadieron a una solución isotónica (0.9% en peso) de cloruro de sodio pasa así obtener una concentración de N-octanoil dopamina de 1 . 1 1 6mg/mL, (4µp??1/p??) y una concentración de polisorbato de 5mg/mL. El pH se ajustó a un pH de 6.5. La mezcla se colocó dentro de un frasco, cerrado con un tapón de hule y una capa de aluminio, y colocado en autoclave por 1 0 minutos a una temperatura de 121 °C y agitado subsecuentemente durante el enfriamiento. Se obtiene una solución incolora, clara o ligeramente opalescente. La solución fue físicamente y químicamente estable a una temperatura ambiente por al menos 4 semanas.

Ej emplo 2 En analogía del ej emplo 1 , una formulación solubilizada de N-octanoil dopamina fue formulada con poloxámero 407 (Pluronic 127) como excipiente anfifílico. Las mismas cantidades y procedimientos se utilizaron. Otra vez solamente un líquido estable y ligeramente opalescente se obtuvo .

Ej emplo 3 El ej emplo 1 se repitió, excepto que la cantidad de N-octanoil dopamina y la del polisorbato se incrementó por el factor de 1 0 (a 1 1 . 1 6mg/mL y 50mg/mL, respectivamente) . Otra vez, una solución estable, incolora, clara o ligeramente opalescente se obtuvo, demostrando que sorprendentemente unas pequeñas concentraciones del polisorbato son capaces de solubilizar terapéuticamente cantidades relevantes de N-octanoil dopamina.

Ejemplo 4 Los ej emplos 1 y 3 se repitieron, excepto que la acetilcisteina se utilizo como un excipiente adicional a una concentración de 0. 1 89mg/mL. El pH de las mezclas fue de 4.5. El líquido resultante fue incoloro y solamente un poco opalescente. Bajo condiciones de tensión, permaneció incoloro por un mayor tiempo que las formulaciones de los ej emplos 1 y 3.

Ej emplo 5 Dos muestras de la formulación del ej emplo 4 cuentan con una concentración de N-octanoil dopamina de 1 1 .1 6mg/mL que se mezclaron individualmente con la solución de la Universidad de Wisconsin (Viaspan, o UW) o la solución de histidina-triptofan-cetoglutarato (HTK por sus siglas en inglés) (Custodiol) a una relación en volumen de 1 :4 ( 1 parte de la composición inventiva mas 4 partes de la solución convencional). Después de 1 1 7 horas a 4°C, las mezclas siguieron claras y no mostraron señas de oxidación de N-octanoil dopamina, la cual normalmente ocurre de forma rápida cuando se mezcla con UW o HTK, llevando a un color rosa café.

Ej emplo 6 La N-octanoil dopamina ( 1 1 . 1 6mg/mL) y la lecitina de la semilla de soya (Lipoideo S75) (50mg/mL) se añadieron a una solución acuosa de glucosa (5% en peso). El pH se ajustó a pH 6.5. A la mezcla se le aplicó ultrasonido por 4 minutos y subsecuentemente se ingresó en autoclave por 1 0 minutos a 1 2 1 °C . Tras el enfriamiento, un líquido casi claro, solo ligeramente opalescente se obtuvo. Su color era un amarillo suave debido a la lecitina.

Ej emplo 7 El ej emplo 6 se repitió, excepto que se utilizó acetilcisteina como un excipiente adicional a una concentración de 0. 1 89mg/mL. El pH de las mezclas fue de 4.5. El líquido resultante fue física y químicamente estable.

Ejemplo 8 La N-octanoil dopamina (223.2mg), polisorbato 80 ( l OOOmg) y etanol (50mg) fueron pesados, mezclados y calentados a 1 21 °C durante 1 0 minutos. Subsecuentemente, la mezcla se enfrió a una temperatura ambiente bajo agitación. El concentrado resultante se diluyó con agua para inyección o para una solución de cloruro de sodio isotónico estéril en varias relaciones, siempre produciendo soluciones claras y substancialmente incoloras.

Ejemplo 9 La formulación obtenida de acuerdo al ejemplo 1 se probó para saber si es capaz de inhibir la inflamación mediada por de TNF-a. Las células endoteliales de la vena umbilical humana (HUVEC por sus siglas en inglés) fueron simuladas con TNF-a (factor alfa de necrosis de tumor) en la ausencia o presencia de varias concentraciones de las formulaciones de la N-octanoil dopamina. Se llevó a cabo la formación del Perfil de Expresión Genética Affymetrix, PCR cuantitativa, la activación NF- D B y la técnica Western blot para evaluar el potencial antiinflamatorio de la composición de la invención. Como comparador, una dispersión acuosa libre de tensoactivo de N-octanoil dopamina, la cual no es una modalidad de la invención, también se probó.

Como resultado, el perfil de expresión génica reveló que un amplio intervalo de genes pro-inflamatorios fue regulado por la composición, entres estas moléculas de adhesión y quimiocinas. Además HO- 1 (Hemo-oxigenasa 1 ) fue regulada ascendentemente por la N-octanoil dopamina, la expresión HO- 1 no contribuye al efecto antiinflamatorio. Mientras que el HO- 1 fue significativamente inducido a 1 µ? de N-octanoil dopamina, la inhibición de la expresión VCAM- 1 (molécula de adhesión celular vascular-1 ) necesita 50 µ? del compuesto. Aparte del HO- 1 , los genes pertenecientes al Sistema de Ubiquitina Prosteasoma (UPS por sus siglas en inglés), es decir, des-ubiquitinación de enzimas E3 -ligasas y sub-unidades de prosteasoma, fueron significativamente sobrereguladas por la composición. No inhibió la degradación de I D Bo; (factor nuclear del gen potenciador del gen del polipéptido ligero kappa en el inhibidor de células B, alfa), pero fue capaz de inhibir la activación sostenida de NF D B . La formulación del comparador fue mucho menos efectiva, es decir, las altas concentraciones requeridas para lograr los mismos efectos.

Se puede concluir de los resultados que la composición de la invención mostró unos efectos antiinflamatorios potentes. Desde que el daño previo al trasplante afecta de manera severa el resultado, la composición será útil para la condición previa del donador para reducir la inflamación inducida por muerte cerebral y para mantener la calidad del órgano especialmente después de una preservación prolongada en frío.

Ejemplo 10 La formulación obtenida de acuerdo al ejemplo 3 se probó como para ver si muestra efectos antiinflamatorios in vivo. Ratas con falla renal aguda (ARF por sus siglas en inglés) fueron tratadas previamente con una dosis intravenosa en bolo de la composición la cual es equivalente a 0.67mg de N-octanoil dopamina. Los ríñones fueron extraídos después de 1 o 5 días. La función renal fue medida. La inflamación renal fue evaluada por inmunohistoquímica y EMSA (Ensayo de cambio en la corrida electroforética).

Como resultado, la composición de la invención mejoró significativamente la función renal comparada con los controles salinos. La inmunohistoquímica reveló un número reducido de monocitos en las ratas comparadas a los controles. Además el NFkB fue sub-regulado en el tej ido renal tratado con la composición. De este modo se demostró que la composición cuenta con efectos antiinflamatorios potentes in vivo . Su administración no solo mitiga el deterioro en la función renal sino que también reduce la inflamación renal en el entorno de la reperfusión de isquemia.

Ej emplo 1 1 La formulación obtenida de acuerdo al ej emplo 1 se probó para ver su capacidad de influenciar la proliferación de las células T. Un sistema de cultivo celular se utilizó en donde células T recientemente aisladas fueron activadas de manera policlonal con perlas de anti-CD3/anti-CD28. Las células pudieron proliferar por al menos 1 0 días, en la presencia o ausencia de diferentes diluciones de la composición de la invención. La proliferación de células T fue evaluada en los días 3 , 5 , 7 y 1 0 a través de la incorporación de 3H-timidina. En este modelo, la proliferación de las células T está al máximo en el día 3 y gradualmente baj a en el día 10. En la presencia de la composición hubo una dosis de inhibición dependiente en la proliferación, la cual era reversible dependiendo en la concentración utilizada. Por ejemplo, una concentración de 25 µ? de N-octanoil dopamina no tuvo efecto, 50 µ? inhibieron la proliferación de células T en el día 3 (desde aquí las células T comenzaron a proliferar), y con 100 µ?, la proliferación de células T si inhibieron en el día 3 , 5 y parte del día 7. Se descubrió que el efecto inhibidor es dependiente de la actividad redox, desde que la inhibición fue abolida por oxidación de la N-octanoil dopamina y no se observó con compuestos relacionados estructuralmente que les falta actividad redox.

Los experimentos se repitieron, excepto que las células T recientemente aisladas fueron estimuladas con anticuerpos de anti-CD3/anti-CD28 en la presencia de la composición diluida en una concentración de 50µ? en N-octanoil dopamina y varias concentraciones de ciclosporina A o tacrolimus. Concentraciones similares de ciclosporina A y tacrolimus también fueron probadas en l a ausencia de la composición.

Como resultado, tanto la ciclosporina A y el tacrolimus en forma dependiente de la dosis inhibieron la proliferación de células T, con una inhibición máxima de 1 0 µ? para ciclosporina A y 1 µ? para tacrolimus. Cuando 50 µ? de N-octanoil dopamina estuvieron presentes, la proliferación de células T fue totalmente inhibida cuando ? ??? de ciclosporina o I nM de tacrolimus. En vista del hecho que 50µ? de N- octanoil dopamina sola inhibe la proliferación de células T en el día 3 y no después, esto significa que la N-octanoil dopamina y los inhibidores de calcineurina actúan sinérgicamente para inhibir las células T. De hecho, 50 µ? de N-octanoil dopamina pueden reducir la cantidad de inhibidor de calcineurina necesitada para completar la supresión de células-T el menos 1 000 veces más.

Esto demuestra que los requerimientos para los inhibidores de calcineurina pueden ser reducidos por N-octanoil dopamina sin comprometer la inmunosupresión. Ya que la nefrotoxicidad de los inhibidores de calcineurina está directamente relacionada a su dosis, una menor dosis del tratamiento de ciclosporina A o tacrolimus en combinación con la N-octanoil dopamina permanecerá efectiva, pero reducirá la incidencia de nefrotoxicidad.

Ej emplo 12 Los cardiomiocitos fueron recientemente aislados de las ratas recién nacidas y cultivados por tres días. Subsecuentemente, fueron almacenados por 8 horas a 4°C en la ausencia o presencia de diferentes concentraciones de dopamina o N-octanoil dopamina, formulada de acuerdo al ej emplo 1 . Los niveles de ATP y la liberación de LDH fue medida después de 8 horas de preservación en frío y desde aquí los cardiomiocitos fueron calentados nuevamente y se determinó la tasa de concentración por pozo y la regeneración de ATP .

Como resultado, la medida de ATP después de 8 horas de almacenamiento reveló una mitigación dependiente de dosis de pérdida de ATP en todos los cardiomiocitos tratados comparado con las células no tratadas (Figura 1 ). El efecto de la composición de la invención fue visto en dosis mucho menores que en el caso de la composición de dopamina. También, la regeneración de ATP después de recalentar fue mucho más rápida en células tratadas comparadas con células no tratadas. La liberación de LDH después de 8 horas de almacenami ento en frío fue inhibida en células tratadas, pero la formulación de N-octanoil dopamina fue mucho más efectiva en concentraciones pequeñas (figura 2) . Después del recalentamiento de los cardiomiocitos, los niveles de concentración revelaron una taza significativamente mej orada de células tratadas.

Los resultados demuestran que la N-octanoil dopamina formulada de acuerdo a la invención puede prevenir el daño por almacenamiento de los cardiomiocitos, y sigue protegiendo en dosis muy pequeñas, lo cual es lo contrario del tratamiento de dopamina convencional . Ya que los daños por la preservación en frío y la reperfusión son indicadores negativos para el resultado de inj erto cardiaco, se sugiere que la composición de la invención sea útil para la condición previa del donador.

Claims (15)

REIVINDICACIONES

1 . Una composición farmacéutica que comprende: (a) Una cantidad efectiva de N-octanoil dopamina; (b) Un solvente acuoso fisiológicamente aceptable; (c) Un excipiente anfifílico fisiológicamente aceptable; caracterizado porque la N-octanoil dopamina está presente en un estado disperso coloidal o molecular.

2. La composición de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada porque está en la forma de solución micelar o microemulsión.

3. La composición de conformidad con la reivindicación 2, caracterizada porque el excipiente anfifílico es un tensoactivo no iónico.

4. La composición de conformidad con la reivindicación 3 , caracterizada porque el tensoactivo no iónico es un polisorbato.

5. La composición de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada porque está en la forma de una dispersión liposomal .

6. La composición de conformidad con la reivindicación 5, caracterizada porque el excipiente anfifílico es un fosfolípido formado en vesícula.

7. La composición de conformidad con la reivindicación, caracterizada porque cuenta con un pH de no más de alrededor de 7.

8. La composición de conformidad con alguna de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque comprende un ácido y/o un antioxidante.

9. La composición de conformidad con alguna de las reivindicaciones de la 1 a la 8 , caracterizada por el uso como una medicina o como una preparación para la preservación de un órgano o tej ido.

1 0. La composición de conformidad con alguna de las reivindicaciones de la 1 a la 8 para uso de acuerdo a la reivindicación 9, caracterizada porque la composición es administrada a un donador de órgano o tej ido.

1 1 . La composición de conformidad con alguna de las reivindicaciones de la 1 a la 8 para un uso de acuerdo a la reivindicación 9, caracterizada porque la composición es administrada a un receptor de trasplante de órgano o tejido.

12. La composición de conformidad con alguna de las reivindicaciones de la 1 a la 8 para un uso de acuerdo a la reivindicación 1 1 , caracterizada porque la composición es administrada parenteralmente.

13. Una composición farmacéutica no acuosa caracterizada porque comprende una cantidad efectiva de N-octanoil dopamina y un excipiente anfifílico fisiológicamente aceptable, que se adapta para producir una composición de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones 1 a 8, mezclando con un solvente acuoso fisiológicamente aceptable.

14. La N-octanoil dopamina para uso en la prevención del rechazo de un trasplante de órgano o tejido en receptores de trasplante co-tratados con un inhibidor de calcineurina.

15. Una N-octanoil dopamina para uso de conformidad con la reivindicación 14, en donde la dosis del inhibidor de calcineurina es más baj a que la dosis efectiva en la ausencia del co-tratamiento de N-octanoil dopamina.