MX2012005001A - Arilindenopirimidinas sustituidas con alquilo y su uso como antagonistas del receptor de adenosina a2a altamente selectivos. - Google Patents

Abstract

Esta invención se relaciona con una nueva arilindenopirimidina, A, y sus usos terapéuticos y profilácticos; los trastornos que se tratan y/o previenen incluyen la enfermedad de Parkinson. (Ver Formula). En donde X1 R2, R3, y R4 son como se definieron en la descripción.

Description

ARILINDENOPIRIMIDINAS SUSTITUIDAS CON ALQUILO Y SU USO COMO ANTAGONISTAS DEL RECEPTOR DE ADENOSINA A2A ALTAMENTE SELECTIVOS REFERENCIA CRUZADA CON SOLICITUDES RELACIONADAS La presente solicitud reclama el beneficio de la presentación de la Solicitud Provisional de E.U.A. No.61/255,928 presentada el 29 de octubre, 2009. Las descripciones completa de las solicitudes de patente relacionadas antes mencionadas se incorporan a la presente como referencia para cualquier propósito.

CAMPO DE LA INVENCIÓN Esta invención se refiere a arilindenopirimidinas sustituidas con alquilo y sus usos terapéuticos y profilácticos. Los trastornos que se tratan y/o previenen incluyen los trastornos neurodegenerativos y motores que se mejoran por la antagonización de los receptores de adenosina A La presente solicitud se refiere a un subconjunto de un género de compuestos, descrito en la patente de Estados Unidos núm. US 7,468,373 B2.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La adenosina es un nucleótido de purina producido por todas las células metabólicamente activas dentro del organismo. La adenosina ejerce sus efectos a través de cuatro subtipos de receptores de superficie celular (A1, A2A, A2b y A3), que pertenecen a la superfamilia de receptores acoplados a la proteína G. Los subtipos A1 y A3 se acoplan a la proteína G inhibidora, mientras que A2A y A2b se acoplan a la proteína G estimuladora. Los receptores A2A se encuentran principalmente en el cerebro, tanto en las neuronas como en las células gliales (nivel más alto en el cuerpo estriado y núcleo accumbens, nivel moderado a alto en las regiones del tubérculo olfatorio, hipotálamo, hipocampo, etc.).

En los tejidos periféricos, los receptores ?2? se encuentran en las plaquetas, neutrófilos, músculo liso vascular y endotelio. El cuerpo estriado es la región principal del cerebro para regular la actividad motora, especialmente a través de su inervación por parte de neuronas dopaminérgicas que se originan en la sustancia negra. El cuerpo estriado es el objetivo principal de degeneración de neuronas dopaminérgicas en pacientes con la enfermedad de Parkinson (PD, por sus siglas en inglés). Dentro del cuerpo estriado, los receptores A?A se localizan junto con los receptores de dopamina D2, lo que sugiere un sitio importante para la integración de la señalización de la adenosina y dopamina en el cerebro.

Los bloqueadores de los receptores de adenosina ?2? pueden proporcionar una nueva clase de agentes antiparkinsonianos (Impagnatiello, F.; Bastía, E.; Ongini, E.¡ Monopoli, A. Emerging Therapeutic Targets, 2000, 4, 635).

Los antagonistas del receptor A2A constituyen terapias potencialmente útiles para el tratamiento de adicciones. Los principales fármacos de abuso (opiáceos, cocaína, etanol, y similares) modulan directa o indirectamente los mecanismos de señalización de la dopamína en las neuronas, especialmente las que se encuentran en el núcleo accumbens, que contienen altos niveles de receptores de adenosína A2A- Se demostró que la dependencia aumenta con la vía de señalización de la adenosina, y que la administración de un antagonista del receptor A2A reduce el deseo de consumir sustancias adjetivas ("The Critical Role of Adenosine A2A Receptors and Gi ß? Subunits in Alcoholism and Addictíon: From Cell Biology to Behavior", de Ivan Diamond y Lina Yao, (The Cell Biology of Addiction, 2006, págs. 291 -316) y "Adaptations in Adenosine Sígnaling in Drug Dependence: Therapeutic Implications", de Stefen P. Hack y Macdonald J. Christie, Critical Review in Neurobiology, Vol. 15, 235-274 (2003)). Véase también Alcoholism: Clinical and Experimental Research (2007), 31(8), 1302-1307.

Se podría usar un antagonista del receptor A2A para tratar el trastorno de hiperactividad y déficit de atención (ADHD, por sus siglas en inglés), puesto que la cafeína (un antagonista no selectivo de la adenosina) puede ser útil para tratar el ADHD, y existen muchas interacciones entre la dopamina y la adenosina a nivel neuronal. "Clinical Genetics" (2000), 58(1 ), 31 -40 y las referencias incluidas allí.

Puede usarse un antagonista de A2A selectivo para tratar la migraña aguda y profilácticamente. Los antagonistas selectivos de adenosina mostraron actividad en los modelos animales agudos y profilácticos para la migraña ("Effects of K-056, a novel selective adenosine A2A antagonist in animal models of migraine," by Kurokawa M. y otros, Abstract from Neuroscience 2009).

Los antagonistas del receptor A2A constituyen terapias potencialmente útiles para el tratamiento de la depresión. Los antagonistas A2A se conocen por inducir actividad en diversos modelos de depresión, incluidas las pruebas de natación forzada y de suspensión por la cola. La respuesta positiva es mediada por la transmisión dopaminérgica y se causa por una prolongación de la conducta orientada al escape más que por un efecto estimulante motor. Neurology (2003), 61 (supl. 6) S82-S87.

Los antagonistas del receptor A2A constituyen terapias potencialmente útiles para el tratamiento de la ansiedad. Se ha demostrado que los antagonistas A2A previenen respuestas emocionales/ansiosas in vivo. Neurobiology of Disease (2007), 28(2) 197-205.

Los antagonistas A2A se describieron en la patente de Estados Unidos núm. US 7,468,373 B2, y la solicitud de patente de Estados Unidos núm. US 2009/0054429 ?1 , y las referencias en ellas.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Las arilindenopirimidinas sustituidas con alquilo seleccionadas de la Fórmula A muestran una selectividad inusualmente alta por A2A por encima del antagonismo del receptor A1. en donde: X es C=O; R2 es 4-fluorofenilo; R4 es NH2; y R3 es alquilo; dichas arilindenopirimidinas de la Fórmula A se seleccionan del grupo que consiste en: y solvatos, hidratos, tautómeros y sales farmacéuticamente aceptables de estos; DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN El género de los compuestos descritos en la patente de los Estados Unidos núm. US 7,468,373 B2 tienen una actividad mezclada de antagonismo del receptor A1 y ?2?· Para muchos trastornos para los que el antagonismo del receptor A2A es terapéuticamente útil, la actividad del receptor A1 es indeseada y puede contribuir a los efectos secundarios o incluso oponerse al efecto beneficioso de la actividad A2A del compuesto primario. Esta invención proporciona un pequeño grupo de compuestos cubiertos por el género descrito en el caso original pero se ha encontrado sorprendente e inesperadamente que tienen selectividad por el receptor A2A. El grupo de compuestos seleccionados de la presente invención tiene relaciones de actividad A2A /A1 de al menos 50/1 , mientras que el miembro promedio del género tiene una relación de actividad de A2A /A1 de 1/1. Así, se espera que los compuestos de la presente invención tengan una eficacia terapéutica mucho mayor y/o menos efectos secundarios.

La invención proporciona arilindenopirimidinas de la Fórmula A JNJ-39928122. en donde: X es C=0; F\2 es 4-fluorofenilo; R4 es NH2; y R3 es alquilo; dichas arilindenopirimidinas de la Fórmula A se seleccionan del grupo que consiste en: ? y solvatos, hidratos, tautómeros y sales farmacéuticamente aceptables de éstos; Esta invención proporciona, además, un método para tratar a un sujeto con un trastorno que se mejora por la antagonización de los receptores de adenosina A2A, que comprende administrar al sujeto una dosis terapéuticamente eficaz de un compuesto de la reivindicación 1 .

Esta invención proporciona, además, un método para prevenir un trastorno que se mejora por la antagonización de los receptores de adenosina A2A en un sujeto; el método comprende administrar al sujeto una dosis profilácticamente eficaz de un compuesto de la reivindicación 1 ya sea antes o después de un evento que se piensa causará un trastorno que se mejora por la antagonización de los receptores de adenosina A2A en el sujeto.

Los compuestos de la presente pueden estar aislados y usarse como bases libres. También pueden estar aislados y usarse como sales farmacéuticamente aceptables.

Algunos ejemplos de estas sales incluyen sales de los ácidos hidrobrómico, hidroyódico, hidroclorhídrico, perclorhídrico, sulfúrico, maleico, fumárico, málico, tartárico, cítrico, adípico, benzoico, mandélico, metanosulfónico, hidroetanosulfónico, bencenosulfónico, oxálico, palmoico, 2 naftalensulfónico, p-toluensulfónico, ciclohexanosulfámico y sacárico.

Esta invención proporciona, además, una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la reivindicación 1 y un portador farmacéuticamente aceptable.

Los portadores farmacéuticamente aceptables son del conocimiento de aquellos con experiencia en la materia e incluyen, pero no se limitan a, de aproximadamente 0.01 a aproximadamente 0.1 M y, preferentemente, 0.05 M de fosfato o 0.8 % de suero salino. Estos portadores farmacéuticamente aceptables pueden ser soluciones acuosas o no acuosas, suspensiones y emulsiones. Algunos ejemplos de solventes no acuosos son propilenglicol, polietilenglicol, aceites vegetales, tales como aceite de oliva y ésteres orgánicos inyectables, tales como oleato de etilo. Los portadores acuosos incluyen agua, etanol, soluciones alcohólicas/acuosas, glicerol, emulsiones o suspensiones, lo que incluye medios salinos y tampones. Los portadores por vía oral pueden ser elixires, jarabes, cápsulas, tabletas, y similares. El portador sólido típico es una sustancia inerte, tal como lactosa, almidón, glucosa, metilcelulosa, estearato de magnesio, fosfato dicalcio, manitol, y similares. Los portadores por vía parenteral incluyen solución de cloruro de sodio, dextrosa en solución de Ringer, dextrosa y cloruro de sodio, lactato de Ringer y aceites fijos. Los portadores por vía intravenosa incluyen reabastecedores de nutrientes y fluidos, reabastecedores de electrolitos, tales como los basados en la dextrosa en solución de Ringer, y similares.

También pueden estar presentes conservantes y otros aditivos, tales como, por ejemplo, antimicrobianos, antioxidantes, agentes quelantes, gases inertes, y similares. Todos los portadores se pueden mezclar según sea necesario con desintegrantes, diluyentes, agentes de granulación, lubricantes, aglutinantes, y similares por medio del uso de técnicas convencionales conocidas en la materia.

Esta invención proporciona, además, un método para tratar a un sujeto con una afección que se mejora por la antagonización de los receptores de adenosina A2A, que comprende administrar al sujeto una dosis terapéuticamente eficaz de un compuesto de la reivindicación 1.

En una modalidad el trastorno es un trastorno neurodegenerativo o motor. Algunos ejemplos de trastornos que se pueden tratar con la composición farmacéutica de la presente invención incluyen, sin limitarse a, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Huntington, atrofia sistémica múltiple, degeneración corticobasal, enfermedad de Alzheimer y demencia senil.

En una modalidad preferida el trastorno es la enfermedad de Parkinson.

Como se usa en la presente descripción, el término "sujeto" incluye, sin limitarse a, cualquier animal o animal modificado artificialmente que sufra un trastorno que se mejora por la antagonización de los receptores de adenosina A2A- En una modalidad preferida el sujeto es un ser humano.

La administración de un compuesto de la reivindicación 1 puede efectuarse o llevarse a cabo por medio del uso de varios métodos conocidos por aquellos con experiencia en la materia. Los compuestos de la reivindicación 1 pueden administrarse, por ejemplo, por vía intravenosa, intramuscular, oral y subcutánea.

En la modalidad preferida, los compuestos de la reivindicación 1 se administran oralmente. Además, la administración puede comprender suministrar al sujeto una pluralidad de dosis durante un período adecuado de tiempo. Estos regímenes de administración se pueden determinar de acuerdo con los métodos de rutina.

Como se usa en la presente descripción una "dosis terapéuticamente eficaz" de una composición farmacéutica es una cantidad suficiente para detener, revertir o reducir el avance de un trastorno. Una "dosis profilácticamente eficaz" de una composición farmacéutica es una cantidad suficiente para prevenir un trastorno, es decir, eliminar, mejorar o demorar el inicio del trastorno. En la materia se conocen los métodos para determinar las dosis terapéutica y profilácticamente eficaz para los compuestos de la reivindicación 1. Por ejemplo, la dosis eficaz para administrar la composición farmacéutica a un ser humano se puede determinar matemáticamente a partir de los resultados de estudios practicados en animales.

En una modalidad, la dosis terapéuticamente y/o profilácticamente eficaz es una dosis suficiente para suministrar de aproximadamente 0.001 mg/kg de peso corporal a aproximadamente 200 mg/kg de peso corporal de un compuesto de la reivindicación 1. En otra modalidad la dosis terapéutica o profilácticamente eficaz es una dosis suficiente para suministrar de aproximadamente 0.05 mg/kg de peso corporal a aproximadamente 50 mg/kg de peso corporal. Más específicamente, en una modalidad, las dosis por vía oral varían de aproximadamente 0.05 mg/kg a aproximadamente 100 mg/kg por día. En otra modalidad las dosis por vía oral varían de aproximadamente 0.05 mg/kg a aproximadamente 50 mg/kg por día y, en otra modalidad, de aproximadamente 0.05 mg/kg a aproximadamente 20 mg/kg por día. En aun otra modalidad, las dosis en infusión se encuentran en el intervalo de aproximadamente 1.0 mg/kg/min a aproximadamente 10 mg/kg/min de inhibidor, en mezcla con un portador farmacéutico durante un período en el intervalo de aproximadamente varios minutos a aproximadamente varios días. En otra modalidad para administrarse tópicamente, el compuesto de la invención se puede combinar con un portador farmacéutico en una relación fármaco-portador de aproximadamente 0.001 a aproximadamente 0.1.

La invención proporciona, además, un método para tratar la adicción en un mamífero; el método comprende administrar una dosis terapéuticamente eficaz de un compuesto de la reivindicación 1.

La invención proporciona, además, un método para tratar el ADHD en un mamífero; el método comprende administrar una dosis terapéuticamente eficaz de un compuesto de la reivindicación 1.

La invención proporciona, además, un método para tratar la depresión en un mamífero; el método comprende administrar una dosis terapéuticamente eficaz de un compuesto de la reivindicación 1.

La invención proporciona, además, un método para tratar la ansiedad en un mamífero; el método comprende administrar una dosis terapéuticamente eficaz de un compuesto de la reivindicación 1.

La invención proporciona, además, un método para tratar la migraña en un mamífero; el método comprende administrar una dosis terapéuticamente eficaz de un compuesto de la reivindicación 1.

Definiciones y nomenclatura A menos que se denote de cualquier otra forma, bajo la nomenclatura estándar usada en toda esta descripción, la porción terminal de la cadena lateral designada se describe primero, seguido por la funcionalidad adyacente hacia el punto de unión.

Como se usa en la presente, los siguientes términos químicos tendrán los significados que se exponen en los siguientes párrafos: "independientemente", cuando se refiere a los sustituyentes químicos, significará que cuando existe más de un sustituyente, los sustituyentes pueden ser iguales o diferentes.

"Alquilo" significará alquilo de cadena recta, ramificada o cíclica. A menos que se declare de cualquier otra forma, el grupo alquilo contendrá 1-20 átomos de carbono. A menos que se declare de cualquier otra forma, el grupo alquilo puede ser opcionalmente sustituido con uno o más grupos tales como halógeno, OH, CN, mercapto, nitro, amino, alquilo de CrC8, alcoxilo de Ci-C8, alquiltio de Ci-C8, alquilamino de CrC8, di-alquilamino de (C C8), (mono-, di-, tri-, y per-) haloalquilo, formilo, carboxi, alcoxicarbonilo, alquilo de d-Ce-CO— O— , alquilo de Ci-C8-CO— NH— , carboxamida, ácido hidroxámico, sulfonamida, sulfonilo, tiol, arilo, aril alquilo de (ci-c8), heterociclilo, y heteroarilo.

"Alcoxi" significará— O-alquilo y a menos que se declare de cualquier otra forma, tendrá 1-8 átomos de carbono.

"Halógeno" significará flúor, cloro, bromo o yodo; "PH" o "Ph" significará fenilo; "Ac" significará acilo; "Bn" significará bencilo.

El término "acilo", como se usa en la presente descripción, usado solo o como parte de un grupo sustituyente, significa un radical orgánico que tiene de 2 a 6 átomos de carbono (cadena ramificada o lineal) derivado de un ácido orgánico mediante la eliminación del grupo hidroxilo. El término "Ac", como se usa en la presente descripción, usado solo o como parte de un grupo sustituyente, significa acetilo.

"Arilo" o "Ar", usado solo o como parte de un grupo sustituyente, es un radical aromático carbocíclico que incluye, pero no se limita a, fenilo, 1- o 2-naftilo y similares. El radical aromático carbocíclico puede ser sustituido por una sustitución independiente de 1 a 5 de los átomos de hidrógeno en él con halógeno, OH, CN, mercapto, nitro, amino, alquilo de CrC8, alcoxilo de CrC8, alquiltio de Ci-C8, alquilamino de CrC8, di-alquilamino de (C-i-Ce), (mono-, di-, tri-, y per-) haloalquilo, formilo, carboxi, alcoxicarbonilo, alquilo de CrC8-CO— O— , alquilo de CrC8-CO— NH— , o carboxamida. Los radicales arilo ilustrativos incluyen, por ejemplo, fenilo, naftilo, bifenilo, fluorofenilo, difluorofenilo, bencilo, benzoiloxifenilo, carboetoxifenilo, acetilfenilo, etoxifenilo, fenoxifenilo, hidroxifenilo, carboxifenilo, trifluorometilfenilo, metoxietilfenilo, acetamidofenilo, tolilo, xililo, dimetilcarbamilfenilo y similares. "Ph" o "PH" o denota fenilo.

Usado solo o como parte de un grupo sustituyente, "heteroarilo" se refiere a un radical completamente insaturado cíclico que tiene de cinco a diez átomos en el anillo, de los cuales un átomo del anillo se selecciona de S, O y N; 0-2 átomos del anillo son heteroátomos adicionales seleccionados independientemente de S, O y N; y el resto de los átomos del anillo son carbono. El radical puede estar unido al resto de la molécula a través de cualquiera de los átomos del anillo. Los grupos heteroarilo ilustrativos incluyen, por ejemplo, piridinilo, pirazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, pirroilo, pirazolilo, imidazolilo, tiazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiadiazolilo, triazolilo, triazinilo, oxadiazolilo, tienilo, furanilo, quinolinilo, isoquinolinilo, indolilo, isotiazolilo, 2-oxazepinilo, azepinilo, N-oxo-piridilo, 1-dioxotienilo, benzotiazolilo, benzoxazolilo, benzotienilo, quinolinilo-N-óxido, bencimidazolilo, benzopiranilo, bencisotiazolilo, bencisoxazolilo, benzodiazinilo, benzofurazanilo, benzotiopiranilo, indazolilo, indolizinilo, benzofurilo, cromonilo, cumarinilo, cinolinilo, quinoxalinilo, indazolilo, pirrolopiridinilo, furopiridinilo (tales como furo[2,3-c]pir¡dinilo, furo[3,2-b]piridinilo, o furo[2,3-b]piridinilo), imidazopiridinilo (tales como imidazo[4,5-b]piridinilo o imidazo[4,5-c]piridinilo), naftiridinilo, ftalazinilo, purinilo, piridopiridilo, quinazolinilo, tienofurilo, tienopiridilo, tienotienilo, y furilo. El grupo heteroarilo puede ser sustituido por una sustitución independiente de 1 a 5 de los átomos de hidrógeno en él con halógeno, OH, CN, mercapto, nitro, amino, alquilo de C^Ce, alcoxilo Ci-Ce, alquiltio de CrCe, alquilamino de C-i-Ce, di-alquilamino de (C Ce), (mono-, di-, tri-, y per-) haloalquilo, formilo, carboxi, alcoxicarbonilo, alquilo de CrCe-CO— O— , alquilo de CrC8-CO— NH— , o carboxamida. El heteroarilo puede sustituirse con un mono-oxo para proporcionar, por ejemplo, una 4-oxo-1 H-quinolina.

Los términos "heterociclo", "heterocíclico" y "heterociclo" se refieren a un grupo cíclico opcionalmente sustituido, completamente o parcialmente saturado que es, por ejemplo, un sistema anular monocíclico de 4 a 7 miembros, biciclico de 7 a 1' miembros o tricíclico de 10 a 15 miembros, que tiene al menos un heteroátomo en al menos un anillo que contiene un átomo de carbono. Cada anillo del grupo heterocíclico que contiene un heteroátomo puede tener , 2 o 3 heteroátomos seleccionados de átomos de nitrógeno, átomos de oxígeno y átomos de azufre, en donde, además, los heteroátomos de nitrógeno y azufre pueden estar opcionalmente oxidados. Los átomos de nitrógeno pueden estar opcionalmente cuaternizados. El grupo heterocíclico puede estar unido a cualquier heteroátomo o átomo de carbono.

Los grupos heterocíclicos monocíclicos ilustrativos incluyen pirrolidinilo; oxetanilo; pirazolinilo; imidazolinilo, imidazolidinilo; oxazolilo; oxazolidinilo; isoxazolinilo; tiazolidinilo; isotiazolidinilo; tetrahidrofurilo; piperidinilo; piperazinilo; 2-oxopiperazinilo; 2-oxopiperidinilo; 2-oxopirrolidinilo; 4-piperidonilo; tetrahidropiranilo; tetrahidrotiopiranilo; tetrahidrotiopiranilo sulfona; morfolinilo; tiomorfolinilo; tiomorfolinilo sulfóxido; tiomorfolinilo sulfona; 1 ,3-dioxolano; dioxanilo; tietanilo; tiiranilo; y similares. Los grupos heterocíclicos bicíclicos ilustrativos incluyen quinuclidinilo; tetrahidroisoquinolinilo; dihidroisoindolilo; dihidroquinazolinilo (tal como 3,4-dihidro-4-oxo-quinazolinilo); dihidrobenzofurilo; dihidrobenzotienilo; dihidrobenzotiopiranilo; dihidrobenzotiopiranilo sulfona; dihidrobenzopiranilo; indolinilo; isocromanilo; isoindolinilo; piperonilo; tetrahidroquinolinilo; y similares.

El arilo sustituido, el heteroarilo sustituido y el heterociclo sustituido pueden sustituirse, además, con un segundo arilo sustituido, un segundo heteroarilo sustituido o un segundo heterociclo sustituido para proporcionar, por ejemplo, un 4-pirazol-1 -il-fenilo o 4-piridin-2-il-fenilo.

Los números de átomos de carbono designados (por ejemplo, Ci-8) se refieren independientemente al número de átomos de carbono en una porción alquilo o cicloalquilo, o a la porción alquilo de un sustituyente más grande en el que aparece el alquilo como su raíz de prefijo.

Ejemplos: Los compuestos de Fórmula A pueden prepararse por métodos conocidos por aquellos con experiencia en la materia. El siguiente esquema de reacción se representa solamente como un ejemplo de la invención y de ningún modo significa limitar la invención.

El Esquema 1 ilustra la ruta sintética que conduce al compuesto A. Comenzando con 7-metilo indanona I y siguiendo la ruta indicada por las flechas, la condensación en condiciones básicas con 4-fluoro-benzaldehído proporciona bencilideno II. El bencilideno II reacciona después con guanidina (base libre) y da la amino pirimidina intermedia III y se oxida directamente a la cetona IV correspondiente al burbujear aire a través de la solución de N-metilpirrolidinona (NMP) básica. La protección del amino (NH2) puede realizarse por medio del uso de di-terc-butil dicarbonato ((Boc^O) en THF en presencia de dimetilamino piridina (DMAP). El di-Boc protegido V resultante puede experimentar una brominación bencílica iniciada por radicales por medio del uso de 1 ,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoína (DBDMH) y peróxido de benzoílo en benceno a reflujo para dar el bromuro de bencilo Vlcorrespondiente. La amina BOC protegida VI puede desprotegerse después con TFA para dar la amino pirimidina Vllcorrespondiente. Finalmente, el bromuro VII puede reaccionar con ésteres borónicos de la Fórmula R B(OR)2 para dar los compuestos de la Fórmula A.

Ejemplo 1: 2-amino-9-(2,4-dimetil-tiazol-5-ilmetil)-4-(4-fluoro-fenil)-indeno[1 ,2-djpirimidin-5-ona Ejemplo 1 : etapa a 2-(4-fluoro-bencilideno)-7-metilo-indan-1-ona Una solución acuosa (10 mi) de NaOH (3.2 g, 79.5 mmol) se anadió en forma de gotas a una solución de etanol (EtOH) (100 mi) de 7-metilo-indan-1-ona (9.3 g, 63.6 mmol) y 4-fluoro-benzaldehído (7.2 mi, 66.8 mmol). Se formó inmediatamente un precipitado. La suspensión acuosa obtenida se agitó vigorosamente por 1.5 horas. Se enfrió la suspensión acuosa en un baño de hielo, se filtró y lavó con EtOH frío. El sólido recogido se secó al vacío para dar el compuesto del título que se usó sin purificación adicional.

Ejemplo 1 : etapa b 4-(4-fluoro-fenil)-9-metil-5H-indenof1 ,2-d1pirimidin-2-ilamina Se añadió NaOH (13.8 g, 345.0 mmol) en polvo a una solución de EtOH (400 mi) de clorhidrato de guanidina (33.0 g, 345.0 mmol). Después de 30 min, el cloruro de sodio se filtró y el filtrado se añadió a una suspensión de EtOH (100 mi) de 2-(4-fluoro-bencilideno)-7-metilo-indan-1-ona(17.4 g, 69.0 mmol). La mezcla resultante se calentó a reflujo durante la noche. La solución homogénea se enfrió en hielo por 30 minutos y se filtró para dar el compuesto del título el cual se usó sin purificación adicional.

Ejemplo 1 : etapa c 2-amino-4-(4- fluoro-fenil)-9-metil-indeno[1 ,2-dlpirimidin-5-ona Se añadió NaOH en polvo (1.2 g, 30.1 mmol) a una solución de NMP (80 mi) de 4-(4- fluoro-fenil)-9-metilo-5H-indeno[1 ,2-d]pirimidin-2-ilamina (7.0 g, 24.1 mmol). La mezcla obtenida se calentó a 80 °C y se burbujeó aire a través de la solución. Después de 16 horas, la mezcla se enfrió hasta la temperatura ambiente, se añadió agua y el precipitado resultante se filtró y se lavó con agua y EtOH frío. El sólido se secó al vacío para dar el compuesto del título.

Ejemplo 1 : etapa d ter-butil éster del ácido [4-(4- fluoro-fenil)-9-metil-5-oxo-5H-indenof1,2-dlpirimidin-2-ill-bis-carbámico Dimetilamino piridina sólido (DMAP) (293 mg, 2.4 mmol) se añadió a una solución de THF (200 mi) de 2-amino-4-(4- fluoro-fenil)-9-metil-indeno[1 ,2-d]pirimidin-5-ona (4.8 g, 15.7 mmol) y (Boc)20 (13.1 g, 60.3 mmol). Después de 4 horas la mezcla se diluyó con acetato de etilo (EtOAc) y después se lavó con agua y salmuera, se secó (Na2S04), se concentró y se purificó por cromatografía de columna para dar el compuesto del título.

Ejemplo 1 : etapa e terc-butil éster del ácido f9-bromometil-4-(4- fluoro-fen¡l)-5-oxo-5H-indenof 1 ,2-dlpirimidin-2-in-bis-carbámico terc-butil éster del ácido [4-(4-fluoro-fenil)-9-metilo-5-oxo-5H-indeno[1 ,2-d]pirimidin-2-il]-bis-carbámico (5.8 g, 11.5 mmol) se disolvió completamente en benceno (50 mi) por calentamiento y después dibromodimetil hidantoína (DBDMH)(1.8 g, 6.3 mmol) y peróxido de benzoílo (223 mg, 0.9 mmol) se añadieron consecutivamente y la mezcla se calentó hasta reflujo. Después de 16 horas, la solución se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con EtOAc y, después, se lavó con NaHCÜ3 saturado acuoso, agua y salmuera. La solución se secó (Na2S04), se concentró y se purificó por cromatografía de columna para dar el compuesto del título.

Ejemplo 1 : etapa f 2-amino-9-bromometil-4-(4-fluoro-fenil)-indenof1 ,2-cnpirimidin-5-ona Ácido trifluoacético puro (TFA)(12 ml, 159 mmol) se añadió a una solución de CH2CI2 (25 mi) de terc-butil éster del ácido [9-bromometil-4-(4-fluoro-fenil)-5-oxo-5H-indeno[1 ,2-d]pirimidin-2-il]-bis-carbámico (3.1 g, 5.3 mmol). Después de 2 horas, la mezcla se concentró, se neutralizó con NaHC03 saturado acuoso y se filtró para dar el compuesto del título que se usó sin purificación adicional.

Ejemplo 1 : Etapa q 2-amino-9-(2,4-dimetil-tiazol-5-ilmetil 5-ona Una solución de 2-amino-9-bromometil-4-(4-fluoro-fenil)-indeno[1 ,2-d]pirimidin-5-ona (100 mg, 0.26 mmol), 2,4-dimetil-5-(4,4,5,5-tetrametil-[1 ,3,2]dioxaborolan-2-il)-tiazol (94 mg, 0.39 mmol), Pd(dppf) Cl2 (dicloro[1,1'-ferrocenilbis(difenil-fosfamina)]paladio(ll), 21 mg, 0.03 mmol), y K2C03 (72 mg, 0.52 mmol) en dioxano (2 mi) y agua (0.5 mi) se calentó hasta 100 °C durante la noche. La mezcla se enfrió hasta la temperatura ambiente y se purificó por cromatografía de columna para dar el compuesto del título. 1H NMR (300MHz, acetona-d) d = 8.00 - 8.20 (m, 2 H), 7.28 - 7.49 (m, 1 H), 6.98 - 7.29 (m, 4 H), 4.41 (s, 1 H), 2.64 - 2.79 (m, 3 H), 2.60 (s, 3 H); MS m/e 417 (M+H).

Ejemplo 2: 2-amino-4-(4-fluoro-fenil)-9-(1 H-pirazol-4-ilmetil)-¡ndenoM .2-dlpirimidin-5-ona El compuesto del título se preparó por medio del uso de 4-(4,4,5,5-tetrametil-[1 ,3,2]dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol en lugar de 2,4-dimetil-5-(4,4,5,5-tetrametil-[1 ,3,2]dioxaborolan-2-il)-tiazol como se describe en el Ejemplo 1. 1H NMR (300MHz, DMSO-d6) d = 8.00 - 8.12 (m, 3 H), 7.47 - 7.67 (m, 3 H), 7.35 (t, J = 8.8 Hz, 2 H), 7.22 (dd, J = 2.2, 6.7 Hz, 1 H), 6.31 (t, J = 1.8 Hz, 1 H), 5.96 - 6.09 (m, 2 H); MS m/e 372 (M+H).

Ejemplo 3: 2-amino-9-(3,5-dimetil-isoxazol-4-ilmetil)-4-(4-fluoro-fenil)-indenoí1.2-dlpirimidin-5-ona El compuesto del título se preparó por medio del uso de 3,5-dimetil-4-(4,4,5,5-tetrametil-[1 ,3,2]dioxaborolan-2-il)-isoxa2ol en lugar de 2,4-dimetil-5-(4,4,5,5-tetrametil-[1 ,3,2]dioxaborolan-2-il)-tiazol como se describe en el Ejemplo 1. 1H NMR (300MHz, acetona-d) d = 8.00 - 8.20 (m, 2 H), 7.28 - 7.49 (m, 1 H), 6.98 - 7.29 (m, 4 H), 4.41 (s, 1 H), 2.64 - 2.79 (m, 3 H), 2.60 (s, 3 H); MS m/e 401 (M+H).

Ejemplo 4: 2-amino-4-(4-fluoro-fenil)-9-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-indenof1 ,2-dlpirimidin-5-ona El compuesto del título se preparó por medio del uso de 1-metil- 4-(4,4,5,5-tetrametil-[1 ,3,2]dioxaborolan-2-il)-1 H-pirazol en lugar de 2,4-dimetil-5-(4,4,5,5-tetrametil-[1 ,3,2]dioxaborolan-2-il)-tiazol como se describe en el Ejemplo 1.1H NMR (DMSO-d6) d: 8.73 (s, 1 H), 8.09 (s, 1 H), 8.02 (dd, J = 8.9, 5.7 Hz, 2H), 7.85 (d, J = 7.0 Hz, 1 H), 7.49 - 7.65 (m, 2H), 7.33 (t, J = 8.9 Hz, 2H), 3.97 (s, 3H); MS m/e 372 (M+H).

Ensayos y actividad biológica Ensayo de unión de liqandos para el receptor de adenosina A?A.

El ensayo de unión de ligandos del receptor de adenosina A2A se realizó por medio del uso de una membrana plasmática de células HEK293 que contenía el receptor de adenosina A2A (PerkinElmer, RB-HA2A) y el radioligando [3H]CGS21680 (PerkinElmer, NET1021 ). El ensayo se realizó en una placa de polipropileno de 96 pocilios en un volumen total de 200 pl por la adición secuencial de 20 µ? de membrana diluida 1 :20, 130 µ? de amortiguador de ensayo (50 mM Tris HCI, pH 7.4, 10 mM MgCI2 1 mM, EDTA) que contenía [3H] CGS21680, 50 µ? del compuesto diluido (4X) o vehículo de control en el amortiguador de ensayo. Se determinó la unión no específica con 80 mM de ÑECA. La reacción se realizó a temperatura ambiente por 2 horas antes del filtrado a través de una placa de filtro GF/C de 96 pocilios remojada previamente en Tris HCI 50 mM, pH 7.4 que contenía 0.3 % de polietilenimina. Después, las placas se lavaron 5 veces con Tris HCI 50 mM frío, pH 7.4, se secaron y sellaron en el fondo. Se añadió 30 µ? de fluido de microcentelleo en cada pocilio y la parte superior se selló. Las placas se contaron en un contador Packard Topcount para [?H]. El dato se analizó en los programas Microsoft Excel y GraphPad Prism. (Varani, K.; Gessi, S.; Dalpiaz, A.; Borea, P.A. British Journal of Pharmacology, 1996, 1 17, 1693) Ensayo funcional del receptor de adenosina A?A (A2AGAL2) Para comenzar el ensayo funcional se descongelaron células CHO-K1 criopreservadas que sobreexpresaban el receptor de adenosina A2A humana y contenían un gen reportero de la beta-galactosidasa inducible por cAMP, se centrifugaron, se eliminó el medio que contenía DMSO y, después, se sembraron con medio de cultivo fresco en placas tratadas con cultivo de tejido de 384 pocilios transparentes (BD núm. 353961) a una concentración de 10K células/pocilio. Antes del ensayo, estas placas se cultivaron por dos días a 37 °C, 5 % C02, 90 % de humedad relativa. El día del ensayo funcional se eliminaron los medios de cultivo y se reemplazaron con 45 µ? del medio del ensayo (Ham/F-12 Modified (Mediatech, núm. 10-080CV) suplementado con BSA al 0.1 %). Los compuestos de prueba se diluyeron y se crearon curvas de 11 puntos a una concentración de 1000x en 100 % de DMSO. Inmediatamente después de la adición del medio de ensayo a las placas de células, se adicionaron a las placas de células 50 ni de las curvas de control del antagonista o agonista del compuesto de prueba adecuado por medio del uso de un Cartesian Hummingbird. Las curvas del compuesto se dejaron incubar a temperatura ambiente en las placas de célula por aproximadamente 15 minutos antes de la adición de un reto con agonista ECA 15 nM (Sigma E2387) (volumen 5 µ?). Además, en cada placa se incluyó una curva de control de ÑECA, un control DMSO/medio y una sola dosis de Forskolin (Sigma F3917). Después de las adiciones, las placas de células se dejaron incubar a 37 °C, 5 % CO2, 90 % de humedad relativa por 5.5 - 6 horas. Después de la incubación, el medio se eliminó, y las placas de células se lavaron 1x 50 µ? con DPBS sin Ca & Mg (Mediatech 21-031 -CV). En los pocilios secos se añadió 20 µ? de amortiguador de lisis Repórter 1x (Promega E3971 (diluido en dH20 a partir de solución madre 5x)) a cada pocilio y las placas se congelaron a -20 °C durante la noche. Para los ensayos colorimétricos de la enzima ß-galactosidasa, las placas se descongelaron a temperatura ambiente y se añadieron 20 µ? del amortiguador de ensayo 2X (Promega) a cada pocilio. Se dejó que el color se desarrollara a 37 °C, C02 al 5 %, 90 % de humedad relativa por 1 - 1.5 h o hasta que apareciera una señal razonable. La reacción colorimétrica se detuvo con la adición de 60 µ?/pocillo de carbonato sódico 1M. Las placas se contaron a 405 nm en un Lector de microplaca SpectraMax (Molecular Devices). Los datos se analizaron en Microsoft Excel y las curvas de IC/EC50 se ajustaron con una macro estándar.

Ensayo funcional del receptor de adenosina A1 (A1GAL2) Para comenzar el ensayo funcional se descongelaron células CHO-K1 criopreservadas que sobreexpresaban el receptor de adenosina A1 humana y contenían un gen reportero de la beta-galactosidasa inducible por cAMP, se centrifugaron, se eliminó el medio que contenía DMSO y después se sembraron con medio de cultivo fresco en placas tratadas con cultivo de tejido de 384 pocilios transparentes (BD núm. 353961) a una concentración de 10K células/pocilio. Antes del ensayo, estas placas se cultivaron por dos días a 37 °C, 5 % C02, 90 % de humedad relativa. El día del ensayo funcional se eliminaron los medios de cultivo y se reemplazaron con 45 µ? del medio del ensayo (Ham/F-12 Modified (Mediatech, núm. 10-080CV) suplementado con BSA al 0.1 %). Los compuestos de prueba se diluyeron y se crearon curvas de 1 1 puntos a una concentración de 1000x en 100 % de DMSO. Inmediatamente después de la adición del medio de ensayo a las placas de células, se adicionaron a las placas de células 50 ni de las curvas de control del antagonista o agonista del compuesto de prueba adecuado por medio del uso de un Cartesian Hummingbird. Las curvas del compuesto se dejaron incubar a temperatura ambiente en las placas de células por aproximadamente 15 minutos antes de la adición del reto con agonista r-PIA 4 nM (Sigma P4532)/1 uM forescolina (Sigma F3917) (volumen 5 µ?). Además, en cada placa se incluyó una curva de control de r-PIA en 1 uM Forskolin, un control DMSO/medio y una sola dosis de Forskolin. Después de las adiciones, las placas de células se dejaron incubar a 37 °C, CO2 al 5 %, 90 % de humedad relativa por 5.5 - 6 horas. Después de la incubación, el medio se eliminó, y las placas de células se lavaron 1x 50 µ? con DPBS sin Ca & Mg (Mediatech 21-031 -CV). En los pocilios secos se añadió 20 µ? de amortiguador de lisis Repórter 1x (Promega E3971 (diluido en dH20 a partir de solución madre 5x)) a cada pocilio y las placas se congelaron a -20 °C durante la noche. Para los ensayos colorimétricos de la enzima ß-galactosidasa, las placas se descongelaron a temperatura ambiente y se añadieron 20 µ? del amortiguador de ensayo 2X (Promega) a cada pocilio. Se dejó desarrollar el color a 37 °C, C02 al 5 %, 90 % HR por 1 - 1.5 h o hasta que apareció una señal razonable. La reacción colorimétrica se detuvo con la adición de 60 µ?/pocillo de carbonato sódico 1M. Las placas se contaron a 405 nm en un Lector de microplaca SpectraMax (Molecular Devices). Los datos se analizaron en Microsoft Excel y las curvas de IC/EC50 se ajustaron con una macro estándar.

Datos del ensayo de AgA Los compuestos de la Fórmula A mostraron sorprendente e inesperadamente selectividad por A2A por encima del antagonismo del receptor A1.

Ejemplo A2AGal2^M) A1Gal2( M) A1/A2A 1 0.01 1866 3.27793 276.249 2 0.00075 0.146926 195.975 3 0.041286 2.66563 64.5654 4 0.027171 1.55632 57.2796 Aunque la especificación anterior enseña los principios de la presente invención con ejemplos provistos para fines de ilustración, se entenderá que la práctica de la invención abarca todas las variaciones, adaptaciones o modificaciones usuales que entran dentro del alcance de las siguientes reivindicaciones y sus equivalentes.

Todas las publicaciones descritas en la descripción anterior se incorporan en su totalidad como referencia en la presente descripción.

Claims (16)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES

1 . Arilindenopirimidinas de la Fórmula A: en donde: X es C=0; R2 es 4-fluorofenilo; R4 es NH2; y R3 es alquilo; las arilindenopirimidinas de la Fórmula A se seleccionan del grupo que consiste en: y solvatos, hidratos, tautómeros y sales farmacéuticamente aceptables de estos;

2. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la reivindicación 1 y un portador farmacéuticamente aceptable.

3. El uso de un compuesto de la reivindicación 1 , para preparar un medicamento para tratar un sujeto con un trastorno que se mejora por la antagonización de los receptores de adenosina A^en células adecuadas en el sujeto.

4. El uso de un compuesto de la reivindicación 1 , para preparar un medicamento para prevenir un trastorno que se mejora por la antagonización de los receptores de adenosina A2A en células adecuadas en un sujeto; en donde el medicamento está adaptado para ser administrable ya sea antes o después de un evento que se piensa causará un trastorno que se mejora por la antagonización de los receptores de adenosina A2A en células adecuadas en el sujeto.

5. El uso como el que se reclama en la reivindicación 3, en donde el medicamento comprende una dosis terapéutica o profilácticamente eficaz de la composición farmacéutica de la reivindicación 2.

6. El uso como el que se reclama en la reivindicación 4, en donde el medicamento comprende una dosis terapéutica o profilácticamente eficaz de la composición farmacéutica de la reivindicación 2.

7. El uso como el que se reclama en la reivindicación 3, en donde el trastorno es un trastorno neurodegenerativo o un trastorno motor.

8. El uso como el que se reclama en la reivindicación 3, en donde el trastorno se selecciona del grupo que consiste en enfermedad de Parkinson, enfermedad de Huntington, atrofia sistémica múltiple, degeneración corticobasal, enfermedad de Alzheimer, o demencia senil.

9. El uso como el que se reclama en la reivindicación 4, en donde el trastorno es un trastorno neurodegenerativo o un trastorno motor.

10. El uso como el que se reclama en la reivindicación 4, en donde el trastorno se selecciona del grupo que consiste en enfermedad de Parkinson, enfermedad de Huntington, atrofia sistémica múltiple, degeneración corticobasal, enfermedad de Alzheimer, o demencia senil.

1 1. El uso como el que se reclama en la reivindicación 3, en donde el trastorno es la enfermedad de Parkinson.

12. El uso como el que se reclama en la reivindicación 3, en donde el trastorno es la adicción.

13. El uso como el que se reclama en la reivindicación 3, en donde el trastorno es la hiperactividad y el déficit de atención (ADHD).

14. El uso como el que se reclama en la reivindicación 3, en donde el trastorno es la depresión.

15. El uso como el que se reclama en la reivindicación 3, en donde el trastorno es la ansiedad.

16. El uso como el que se reclama en la reivindicación 3, en donde el trastorno es la migraña.