MX2009002597A - Metodo para prolongar el periodo de almacenamiento de formulaciones nutricionales en polvo que contienen probioticos viables. - Google Patents

Abstract

La invención se relaciona con un método para prolongar el período de almacenamiento de una formulación nutricional en polvo que contiene LGG mediante la reducción y mantenimiento de un umbral de actividad de agua o contenido de humedad en la formulación que contiene LGG en polvo.

Description

METODO PARA PROLONGAR EL PERIODO DE ALMACENAMIENTO DE FORMULACIONES NUTRICIONALES EN POLVO QUE CONTIENEN PROBIOTICOS VIABLES Campo de la Invención La presente invención se relaciona con un método para ampliar el período de almacenamiento de formulaciones nutricionales en polvo que contienen probioticos viables . Antecedentes de la Invención Hay por lo menos 400 diferentes especies de bacterias que habitan el sistema digestivo humano, frecuentemente designadas como flora intestinal. La flora intestinal es necesaria para descomponer los restos de alimento que todavía no se ha digerido así como disuadir bacterias y levaduras dañinas que invaden el cuerpo. Algunas de estas especies son beneficiosas y otras son potencialmente dañinas. Un equilibrio entre los dos es vital para la salud y el bienestar . Enfermedades, dieta pobre, tensión, envejecimiento, intoxicación por alimentos en mal estado y el uso de medicaciones pueden cada uno perturbar el equilibrio entre las bacterias beneficiosas y dañinas . Un exceso de bacterias dañinas puede causar diarrea, infecciones, daño del hígado, carcinogénesis y putrefacción intestinal. En cambio, las bacterias beneficiosas pueden inhibir el crecimiento de Ref.: 19778o bacterias dañinas, estimular las funciones in unitarias , reducir problemas de distensión de gas, mejorar la digestión, absorber nutrientes esenciales, y sintetizar vitaminas. Los probióticos son preparaciones celulares microbianas o componentes de células microbianas que tienen un efecto beneficioso en la salud y bienestar del huésped. Estas bacterias beneficiosas tienen varios beneficios de salud para los consumidores, incluyendo la inhibición de patógenos bacterianos, reducción de riesgo de cáncer en el colon, estimulo de inrnunorespuesta, y reducción de niveles de colesterol de suero. Mientras que la mayoría de las bacterias vivas que son injeridas mueren cuando alcanzan las condiciones ácidas del estómago, las bacterias probióticas son generalmente resistentes a los fluidos gástricos, biliares y pancreáticos y pueden llegar al colon vivas. Los probióticos se fijan a la pared del intestino en donde aumentan el número de bacterias beneficiosas y luchan contra bacterias dañinas, manteniendo un equilibrio entre las dos. Los probióticos también producen ácidos grasos de cadena corta que reducen el pH en el intestino. Un pH reducido en el intestino contribuye a la protección de las células de la mucosa del intestino, supresión de microbios indeseables en el intestino, supresión de infecciones del intestino, captación de calcio y magnesio aumentada, y funciones inmunitarias estimuladas. Mientras que hay varias formas de administrar probioticos a los consumidores, una forma conveniente es agregar probioticos a las composiciones que normalmente serían consumidas. Por ejemplo, los probioticos se administran algunas veces a través de una formulación nutricional en polvo, tal como un suplemento de proteína en polvo, una leche en polvo, alimento para bebés en polvo, o una fórmula infantil en polvo. Con el fin de obtener los beneficios de salud deseados, sin embargo, el probiótico debe ser seleccionado cuidadosamente y agregado a las formulaciones en polvo en cantidades suficientes para asegurar que la dosis recomendada sea consumida. Si se administra a través de un polvo de proteína, leche en polvo, alimentos para bebés en polvo, o fórmula infantil en polvo, las formulaciones deben ser procesadas y manejadas de una forma que mantengan la viabilidad de los microorganismos probioticos durante el proceso de manufactura y durante el tiempo que tales formulaciones pasan en almacén esperando ser vendidas y consumidas. Desafortunadamente, muchos probioticos que se agregan a las formulaciones nutricionales en polvo son eliminados durante el transporte, distribución, o proceso de manufactura, o simplemente mueren mientras que el producto está situado en estantes por períodos prolongados . Debido a que las formulaciones nutricionales están frecuentemente disponibles en el comercio en grandes cantidades, se requiere un período de almacenamiento relativamente largo para el producto. Los probioticos deben mantener viabilidad por lo menos hasta que el producto sea consumido en el curso normal de administración. Un factor que reduce el período de almacenamiento de formulaciones probioticas es la temperatura. Los probioticos son organismos vivos que mueren a una velocidad mucho más rápida cuando no están refrigerados. Con el fin de prevenir la muerte de los microorganismos en estos productos, muchos productos nutricionales en polvo que contienen probioticos recomiendan refrigeración o congelado constante. Otro factor que reduce el período de almacenamiento de formulaciones probioticas es la actividad de agua o contenido de humedad. La actividad de agua es la proporción de la presión de vapor de agua en un material con respecto a la presión de vapor de agua pura a la misma temperatura. Describe la continuidad de estados de energía del agua en un sistema. El contenido de humedad se puede definir como porcentaje en peso de agua en relación al peso seco del producto. La exposición incluso a una cantidad mínima de humedad puede destruir rápidamente la potencia de los probioticos. Una barrera técnica especialmente difícil para ampliar el período de almacenamiento de las formulaciones nutricionales que contienen probioticos es el contenido de humedad relativamente alto de los ingredientes que componen el producto nutricional. Un método conveniente para ampliar el período de almacenamiento de una formulación nutricional que contiene probiótico en polvo sin encapsulación, liofilización o utilizando matrices sigue siendo muy limitado. Por lo tanto, sería útil proporcionar un método para ampliar el período de almacenamiento de formulaciones nutricionales en polvo que contienen probióticos viables. Sumario de la Invención Brevemente, por lo tanto, la presente invención está dirigida a un método nuevo para ampliar el período de almacenamiento de una formulación nutricional en polvo que contiene LGG hasta por lo menos 15 meses, el método comprende reducir la actividad de agua de la formulación que contiene LGG hasta menos que aproximadamente 0.16 y manteniendo la temperatura de la formulación a o debajo de 25°C. La presente invención también está dirigida a un método nuevo para ampliar el período de almacenamiento de una formulación nutricional en polvo que contiene LGG hasta por lo menos 15 meses, el método comprende reducir el contenido de humedad de la formulación que contiene LGG hasta menos que aproximadamente 2.3% y manteniendo la temperatura de la formulación a o debajo de 25°C.

Breve Descripción de las Figuras La fig. 1 ilustra la estabilidad de almacenamiento de Nutramigen con LGG 25°C, 2.1% de humedad, 0.14 Aw Lote #S201868. Descripción Detallada de la Invención Ahora se hará referencia detalladamente a las modalidades de la invención, uno o más ejemplos de los cuales se establecen abajo. Cada ejemplo se proporciona en forma de explicación de la invención, no una limitación de la invención. De hecho, será evidente para las personas experimentadas en la técnica que las diferentes modificaciones y variaciones se pueden hacer en la presente invención sin salir del alcance o espíritu de la invención. Por ejemplo, las características ilustradas o descritas como parte de una modalidad, pueden ser utilizadas en otra modalidad para producir una modalidad adicional. De este modo, se tiene la intención que la presente invención cubra tales modificaciones y variaciones tal como vienen dentro del alcance de las reivindicaciones anexas y sus equivalentes. Otros objetos, características y aspectos de la presente invención se describen en o son obvios de la descripción detallada siguiente. Debe ser entendido por una persona experimentada en la técnica que la presente discusión es una descripción de modalidades ejemplares solamente, y no intenta limitar los aspectos más amplios de la presente invención.

El término "período de almacenamiento" ampliado como se utiliza aquí significa un período en el que un producto puede ser almacenado sin que la calidad caiga bajo un cierto nivel mínimo aceptable. El nivel mínimo aceptable para la formulación nutricional en polvo que contiene probiótico de la presente invención requiere que la composición mantenga substancialmente las mismas propiedades físicas y químicas, por ejemplo gusto, olor, color, y similares, por lo menos 15 meses y que las composiciones contengan probióticos viables en una cantidad de por lo menos 80% de la cantidad inoculada cuando las composiciones se almacenan en o debajo de 25°C. El término "condiciones asépticas" como se utiliza aquí significa una atmósfera esencialmente libre de microorganismos e incluye el llenado de una formulación nutricional en polvo esterilizada comercialmente dentro de recipientes preesterilizados seguidos por sellado hermético aséptico con un cierre preesterilizado en una atmósfera esencialmente libre de microorganismos. "Fórmula infantil" como se utiliza aquí significa una composición que satisface los requisitos de nutrientes de un infante que es un substituto para la leche humana. Como se utiliza aquí, el término "probiótico" significa suplemento alimenticio de microorganismos vivos que afecta beneficiosamente el animal huésped mejorando su equilibrio microbiano intestinal.

El término "prebiotico" significa cualquier ingrediente alimenticio no digerible que afecta beneficiosamente el huésped estimulando selectivamente el crecimiento y/o actividad de bacterias, incluyendo bacterias probióticas, en el colon, con el efecto de mejorar la salud del huésped. De conformidad con la presente invención, un método nuevo se ha descubierto para ampliar el período de almacenamiento de una formulación nutricional en polvo que contiene LGG hasta por lo menos 15 meses. El método comprende reducir la actividad de agua de la formulación que contiene LGG hasta menos que aproximadamente 0.16 y mantener la temperatura de la formulación en o debajo de 25°C. En una modalidad particular, el método comprende reducir la actividad de agua de la formulación que contiene LGG hasta menos de aproximadamente 0.14 y mantener la temperatura de la formulación en o debajo de 25°C. El método también comprende reducir el contenido de humedad de la formulación que contiene LGG hasta menos que aproximadamente 2.3% y mantener la temperatura de la fórmula en o debajo de 25°C. En una modalidad particular, el método comprende reducir el contenido de humedad de la formulación que contiene LGG hasta menos que aproximadamente 2.1% y mantener la temperatura de la fórmula en o debajo de 25°C. En una modalidad, este método proporciona un periodo de almacenamiento en la formulación que contiene LGG por lo menos 15 meses. En otra modalidad, este método puede proporcionar un periodo de almacenamiento en la formulación que contiene LGG por lo menos 18 meses. En aún otra modalidad, este método puede proporcionar un periodo de almacenamiento en la formulación que contiene LGG de por lo menos 21 meses. Con el periodo de almacenamiento prolongado proporcionado por la presente invención, no es necesario agregar conservadores químicos a la formulación nutricional o liofilizar, encapsular, o proporcionar una matriz para el LGG con el fin de preservar su viabilidad. También, debido al periodo de almacenamiento prolongado proporcionado por la presente invención, la formulación nutricional que contiene LGG no requiere refrigeración o congelamiento constante. La formulación es así apropiada para transporte y distribución. La formulación puede ser adquirida en cantidades más grandes, más convenientes o bajos costos, puesto que la viabilidad de los organismos será mantenida por períodos de tiempo más largos . LGG es una cepa probiótica aislada de flora intestinal de humano sano. Fue descrita en la Patente No. 5,032,399 por Gorbach, et al., que se incorpora aquí en su totalidad, por referencia a la misma. LGG es resistente a muchos antibióticos, estables en la presencia de ácido y bilis, y se une ávidamente a las células mucosas del tracto intestinal humano. Sobrevive por 1-3 días en la mayoría de los individuos y hasta 7 días en el 30% de los sujetos. Además de su capacidad de colonización, LGG también afecta beneficiosamente las inmunorespuestas de las mucosas. LGG se deposita con la Autoridad Depositaría de la colección Americana de cultivos Tipo bajo el número de acceso ATCC 53103. En una modalidad de la presente invención, los probióticos adicionales se pueden agregar a la formulación nutricional en polvo. Cualquier probiotico conocido en el arte previo será aceptable en esta modalidad. En una modalidad particular, el probiotico se elige del grupo que consiste de Lactobacillus , Bifidobacteríu y combinaciones de los mismos. Para preparar la presente invención, pueden ser cultivados microorganismos de LGG utilizando los procesos convencionales en el arte previo. El LGG puede ser utilizado en su estado cultivado o puede ser procesado de acuerdo a lo deseado purificándolo, concentrándolo o terminándolo para producir varias preparaciones. La cantidad de LGG en la formulación nutricional en polvo es una cantidad suficiente para proporcionar o liberar el efecto probiotico deseado. Una cantidad suficiente de LGG puede variar dentro de un amplio intervalo, dependiendo de, por ejemplo, la cantidad total de células de LGG, la dosis diaria deseada, y en otras propiedades e ingredientes del producto. Una dosis diaria de la formulación nutricional en polvo de la presente invención puede comprender aproximadamente 106 hasta 1012 unidades de formación de colonias (cfu) de LGG por gramo de formulación. En otra modalidad, una dosis diaria de la formulación nutricional en polvo de la presente invención puede comprender aproximadamente 107 hasta 1010 cfu de LGG por gramo de formulación. En aún otra modalidad, una dosis diaria de la formulación nutricional en polvo de la presente invención puede comprender aproximadamente 108 hasta 1011 cfu de LGG por gramo de formulación. En una modalidad particular, una dosis diaria de la formulación nutricional en polvo de la presente invención puede comprender aproximadamente 109 cfu de LGG por gramo de formulación. En una modalidad, el producto mantiene por lo menos 106 cfu/g de LGG por gramo de formulación por un período de por lo menos aproximadamente 15 meses. En otra modalidad, el producto mantiene por lo menos 106 cfu/g de LGG por gramo de formulación por un período de por lo menos aproximadamente 18 meses. En aún otra modalidad, el producto mantiene por lo menos 106 cfu/g de LGG por gramo de formulación por un período de por lo menos aproximadamente 21 meses. En una modalidad particular, la presente invención comprende la adición de por lo menos un prebiotico para la composición. En esta modalidad, cualquier prebiotico conocido en el arte previo puede ser agregado. En una modalidad particular el prebiotico se puede seleccionar del grupo que consiste de inulina, fructooligosacárido, glucooligosacárido, galactooligosacárido, isomaltooligosacárido , xilooligosacárido , polidextrosa y lactulosa. Opcionalmente , el LGG y el prebiotico utilizados en la presente invención pueden ser adquiridos comercialmente como un polvo premezclado. Las fuentes comerciales para los productos que contienen LGG y varios prebióticos se conocen en el arte previo. En otra modalidad, el LGG y el prebiotico se pueden adquirir por separado y entremezclados utilizando cualquier método apropiado en el arte previo. En esta modalidad, se prefiere que los tamaños de partícula del LGG y el prebiotico sean iguales o similares. La formulación nutricional en polvo de la presente invención se puede adquirir en el comercio o se puede preparar individualmente. Si es preparada individualmente, la fórmula nutricional se puede preparar de cualquier manera apropiada conocida en el arte previo. Por ejemplo, la Patente Norteamericana No. 6,506,422 por Masson, et al., incorporada aquí por referencia, describe un método para la preparación de una fórmula nutricional. Un método similar puede ser utilizado para preparar una formulación nutricional en polvo para la presente invención. En una modalidad, la fórmula infantil para utilizarse en la presente invención es nutricionalmente completa y contiene tipos convenientes y cantidades de lípido, carbohidratos, proteína, vitaminas y minerales. La cantidad de lípido o grasa puede variar típicamente desde aproximadamente 3 hasta aproximadamente 7 g/100 kcal . La cantidad de proteína típicamente puede variar desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 5 g/100 kcal. La cantidad de carbohidrato típicamente puede variar desde aproximadamente 8 hasta aproximadamente 12 g/100 kcal. Las fuentes de proteína se pueden utilizar en el arte previo, por ejemplo, leche sin grasas, proteína de suero, caseína, proteína de soya, proteína hidrolizada, proteína parcialmente hidrolizada, aminoácidos, y similares. En una modalidad, la proteína es una combinación de proteína de suero y caseína en una proporción de 60:40. Las fuentes de carbohidrato se pueden utilizar en el arte previo, por ejemplo, lactosa, glucosa, sólidos de jarabe de maíz, maltodextrinas , sucrosa, almidón, sólidos de jarabe de arroz, y similares. Las fuentes de lípido se pueden utilizar en el arte previo, por ejemplo, aceites vegetales tales como aceite de palma, aceite de soya, oleína de palma, aceite de coco, aceite de triglicérido de cadena media, aceite de girasol alto oleico, aceite de cártamo alto oleico, y similares.

Convenientemente, puede ser utilizada la fórmula infantil disponible en el comercio. Por ejemplo, Enfalac, Enfamil®, Fórmula Enfamil® prematuros, Enfamil® con hierro, Lactofree®, Nutramigen®, Pregestimil®, y ProSobee® (disponible de Mead Johnson & Company, de Evansville, IN, USA) pueden ser aditados con niveles convenientes de LGG y utilizados en la práctica del método de la invención. De conformidad con una modalidad particular, la formulación nutricional en polvo de la presente invención es una leche en polvo, un suplemento nutricional en polvo, una fórmula infantil en polvo, o un alimento para bebé en polvo. En una modalidad específica, la formulación nutricional en polvo es un fórmula infantil . Cualquier método conocido en el arte previo para reducir la actividad de agua o el contenido de humedad de la composición puede ser utilizada en la presente invención. En una modalidad de la presente invención, el método para reducir la actividad de agua o contenido de humedad de la composición comprende incorporar una cantidad de desecante en la estructura de empaquetado que contiene la formulación nutricional en polvo y el LGG con el fin de controlar el contenido de humedad del producto en polvo. Cualquier tipo de desecante es conveniente para el uso en esta modalidad. En una modalidad particular, el aluminosilicato de metal deshidratado se utiliza como el material desecante. Tal desecante, Tri-Sorb®, está disponible en el comercio de Texas Techlogies, localizada en Leander, TX. En aún otra modalidad de la presente invención, el método para reducir la actividad de agua o el contenido de humedad de la composición comprende introducir un agente purgante en el proceso de mezclado o combinado. En esta modalidad, la formulación nutricional en polvo y el LGG se introducen en un dispositivo para combinar o mezclar. En una modalidad, el dispositivo para mezclar es un mezclador cónico de tornillo. Una corriente de un agente purgante entonces se puede introducir en o cerca de la base del mezclador cónico de tornillo. En algunas modalidades, las corrientes múltiples del agente purgante se pueden introducir en o cerca de la base del mezclador. Por ejemplo, en una modalidad, se utilizan dos líneas de la inyección de gas. En otra modalidad, se utilizan tres líneas de inyección . En algunas modalidades, las líneas de inyección múltiples están colocadas a varias alturas dentro del recipiente. En esta modalidad, una línea de la inyección podría ser colocada en la base del recipiente, una segunda línea de inyección colocada en una posición que es aproximadamente 1/6 de la altura del recipiente, medida de la base del recipiente, y una tercera línea de inyección colocada en una posición que es aproximadamente 1/3 de la altura del recipiente, medida de la base del recipiente. En modalidades particulares, las líneas de inyección múltiple están colocadas en posiciones que varían aproximadamente la circunferencia del mezclador. En otra modalidad, las líneas de inyección están ubicadas equidistantes una de otra. Introduciendo varias corrientes de un agente purgante dentro del recipiente de un mezclador cónico, el dispositivo llega a ser extremadamente eficaz en mezclado, secado, reducción de esfuerzo de corte, reducción de fricción y eliminación de oxígeno de la atmósfera dentro del recipiente. En una modalidad particular, el agente purgante se selecciona del grupo de nitrógeno y dióxido de carbono, pero puede ser cualquier agente que elimina o substituye oxígeno. El agente purgante se puede introducir en una cantidad que sea suficiente para mover el material que se mezcla hacia arriba y formar un movimiento de lecho de chorro local . En aún otra modalidad de la presente invención, la formulación nutricional en polvo y el LGG se secan cada uno individualmente y después se mezclan secos juntos para controlar la actividad de agua o el contenido de humedad del producto en polvo. Los procesos de secado convencionales para las formulaciones nutricionales en polvo incluyen mezclado en seco, secado por pulverización, aglomeración, o cualquier combinación de esos procesos de secado. En otra modalidad de la presente invención, los métodos enumerados arriba se utilizan en combinación uno con otro. Por ejemplo, una formulación nutricional en polvo y un LGG se secan por separado y se mezclan secos juntos y después se colocan en un paquete sellado que contiene un material desecante. En otro ejemplo, un agente purgante se utiliza en el proceso de mezclado de la formulación nutricional en polvo y LGG y después la mezcla se coloca en un paquete que contiene un material desecante. En aún otro ejemplo, una formulación nutricional en polvo y un LGG en polvo se secan por separado y después mezclan secos juntos en la presencia de un agente purgante. En otro ejemplo, una formulación nutricional en polvo y un LGG se secan por separado, se mezclan secos juntos con una corriente de un agente purgante, y después se colocan en el paquete sellado que contiene un material desecante. En una modalidad, la composición se coloca en recipientes estériles y se sellan con cierres estériles bajo condiciones asépticas. Los recipientes pueden ser purgados bajo condiciones asépticas con un gas inerte estéril, para eliminar oxígeno del recipiente justo antes del sellado. El gas inerte estéril, puede ser nitrógeno o bióxido de carbono. La eliminación de oxígeno previene la muerte de muchos microorganismos facultativamente anaeróbicos. Si el aire permanece en el recipiente durante el almacenamiento, la toxicidad del oxígeno puede resultar en una pérdida significativa en la concentración de los probióticos durante la producción y almacenamiento. Cualquier recipiente y cierre capaces de mantener un ambiente aséptico, sellado durante el procesamiento y almacenamiento se pueden utilizar para almacenar la formulación nutricional en polvo. Ejemplos aceptables incluyen, pero no se limitan a, botellas de vidrio, latas de metal compuestas, cartones de papel, y botellas de plástico. Preferiblemente, los recipientes tienen permeabilidad con poco oxígeno, son resistentes a la transmisión ligera, y mantienen su integridad durante el manejo. Los siguientes ejemplos describen varias modalidades de la presente invención. Otras modalidades dentro del alcance de las reivindicaciones aquí serán evidentes para una persona experimentada en la técnica de la consideración de la especificación o práctica de la invención de acuerdo a lo descrito aquí. Se tiene la intención que la especificación, junto con los ejemplos, sea considerada que es ejemplar únicamente, con el alcance y espíritu de la invención que es indicada por las reivindicaciones que siguen a los ejemplos. En los ejemplos, todos los porcentajes se dan sobre una base en peso a menos que se indique lo contrario . E emplo 1 Este ejemplo ilustra la determinación de la constante del índice de mortalidad, k, para LGG . La meta era determinar la actividad de agua óptima y el contenido de humedad de una fórmula infantil en polvo que contiene LGG con el fin de mantener su periodo de almacenamiento por lo menos 18 meses. Con el fin de hacerlo así, los inventores primero determinaron la constante del índice de mortalidad (k) para LGG. La destrucción de microorganismos generalmente sigue la primera cinética de orden, que puede ser expresada como sigue: — = -?? dt en donde N: número de sobrevivientes t: tiempo, en semanas k: constante de índice de mortalidad. La ecuación que integra (1) entre tiempo=0 y tiempo=t, da la siguiente N = N0 exp (-kt) (2) en donde NQ es el conteo celular inicial .

La ecuación (2) puede ser expresada como sigue Trazando ln(N/NQ) contra tiempo de almacenamiento, t, se puede obtener la inclinación de la línea recta, que es la constante del índice de mortalidad, k , para LGG . Utilizando la ecuación 3, este cálculo se muestra abajo.

De conformidad con la ecuación, k = 0.05015 /semana . Así, con el fin de permitir un ciclo y medio de la reducción del conteo de LGG, por ejemplo, desde 5.0 x 107 cfu/g hasta 1.0 x 106 en 18 meses (78 semanas), el valor k de LGG tiene que ser menos que o aproximadamente igual a 0.05/semana. Ejemplo 2 Este ejemplo ilustra la determinación del contenido de humedad óptimo y la actividad de agua de una fórmula infantil en polvo que contiene LGG con el fin de mantener su período de almacenamiento. En este ejemplo, tres ingredientes importantes en la fórmula infantil de Nutramigen® fueron entremezclados: Nutramigen® en polvo, sólidos de jarabe de maíz, e hidrolisato de proteína. Los ingredientes componentes de Nutramigen®en polvo se enumeran en la tabla 1.

Tabla 1. Ingredientes componentes de Nutramigen® en Polvo Una cantidad inicial de LGG fue agregada al Nutramigen® base, sólidos de jarabe de maíz, y a la mezcla de hidrolisato de proteína con el fin de preparar un producto que contiene 6.25 x 108 cfu/g de producto. El contenido de humedad y actividad de agua de la mezcla fueron medidos inicialmente en condiciones ambiente utilizando un medidor de Actividad de Agua AquaLab. El método de secado en horno fue utilizado en un laboratorio de control de calidad para medir el contenido de humedad y actividad de agua de la composición. Esto implicó mantener las muestras en un horno a 70°C en por lo menos 24 pulgadas de vacío por cuatro horas. El contenido de humedad inicial fue determinado que es 2.7% y la actividad de agua fue aproximadamente 0.2. La fórmula infantil en polvo que contiene LGG después se colocó en desecadores sellados y diferentes cantidades de paquetes desecantes de Tri-sorb® fueron insertadas en los desecadores para reducir y controlar la actividad de agua y contenido de humedad de la fórmula. La fórmula fue almacenada de este modo por seis meses. Durante el período de almacenamiento de seis meses, el conteo de LGG, el contenido de humedad, y la actividad de agua de la composición fueron probados en incrementos de un mes. Los valores promedio para el contenido de humedad y la actividad de agua fueron calculados y registrados para cada paquete de Tri-sorb®. Con un paquete de tri-sorb® de 5g, el contenido de humedad de la composición fue reducido hasta 2.3 ± 0.2% y la actividad de agua (Aw) de la composición fue reducida hasta 0.16. Con un paquete de Tri-sorb® de 15g, el contenido de humedad fue reducido hasta 2.0 ± 0.2% y la actividad de agua de la composición fue reducida a 0.11 Aw. Con un paquete de Tri-sorb® de 25g, el contenido de humedad y la actividad de agua de la composición fueron reducidos hasta 1.5% ± 0.2% y 0.08 Aw, respectivamente.

La enumeración del conteo de LGG fue conducida como sigue: 20g del producto en polvo fueron transferidos a una bolsa stomacher estéril y mezclados con 180 mi de diluyente de peptona salina estéril por 60 segundos a 200 excursiones por minuto. La dilución primaria fue diluida en serie así que la dilución final fue 10-8. Este procedimiento fue seguido tres veces (tres réplicas) para mayor exactitud. La 5a, 6a, 7a y 8a diluciones fueron recubiertas e incubadas a 37 °C por 72 horas. Los resultados fueron reportados como unidades de formación de colonias (cfu) por gramo de producto. El conteo final de LGG fue 3.93xl08 cfu/g. Los conteos de LGG iniciales y finales para la variación de paquetes de Tri-sorb® después fueron trazados contra el tiempo de almacenamiento con base en la ecuación (3) . Se encontró que 5g del desecante Tri-sorb® podía dar la constante del índice de mortalidad de LGG de 0.019 /semana con base en 6 meses (24 semanas) de datos de almacenamiento. Todos los datos anteriores fueron basados en 25°C. Debido a que 5g de Tri-sorb® desecante proporcionó una constante del índice de mortalidad de LGG de menos que 0.05/semana ( 0.019 /semana) , se determinó que 2.3% fue el contenido de humedad crítico y 0.16 Aw fue la actividad de agua crítica para una fórmula infantil en polvo que contiene LGG.

Ejemplo 3 Este ejemplo ilustra la determinación del periodo de almacenamiento de una fórmula infantil en polvo que contiene LGG que tiene un contenido de humedad de 2.1% y actividad de agua de 0.14 Aw. La fórmula infantil en polvo utilizada en este ejemplo era Nutramigen®, disponible de Mead Johnson Nutritionals , Evansville, IN. La composición del polvo de Nutramigen® se enumera en la tabla 2. Tabla 2. Ingredientes de Nutramigen® Ingredientes Por 100 calorías (5 fl oz) Proteína, g 2.8 Grasa, g 5.3 Carbohidrato, g 10.3 Agua, g 133 Vitamina A, IU 300 Vitamina D, IU 50 Vitamina E, IU 2 Vitamina K, yg 8 Tiamina (Vitamina Bl), pg 80 Riboflavina (Vitamina B2 ) , µg 90 Vitamina B6, \ig 60 Vitamina B12, ug 0.3 Niacina, \ig 1000 Acido Fólico (folacina) ig 16 Ingredientes Por 100 calorías (5 fl oz) Acido Pantotenico, yg 500 Biotina, ig 3 Vitamina C (ácido ascorbico) , mg 12 Colina, mg 12 Inositol, mg 17 Carnitina, mg 2 Taurina, mg 6 Proteína, g 2.8 Grasa, g 5.3 Carbohidrato, g 10.3 Calcio, mg 94 Fósforo, mg 63 Magnesio, mg 11 Hierro, mg 1.8 Zinc, mg 1 Manganeso, ]ig 25 Cobre, ig 75 Yodo, ug 15 Selenio, ug 2.8 Sodio, ]ig 47 Potasio, mg 110 Cloruro, mg 86 Los tres componentes principales de la fórmula infantil Nutramigen® son Nutramigen® base, sólidos de jarabe de maíz, e hidrolisato de proteína. En este ejemplo, el Nutramigen® base contuvo 2.0% de humedad, los sólidos de jarabe de maíz contuvieron 1.7% de humedad, y el hidrolisato de proteína contuvo 2.1 % de humedad. Una cantidad inicial de LGG se agregó a la mezcla con el fin de preparar un producto que contenía 5.7 x 107 cfu/g de producto. El contenido de humedad de la composición fue 2.1% y la actividad de agua de la composición fue 0.14 Aw. La composición fue almacenada a 25°C por 21 meses (91 semanas) . Se determinó que después de 21 meses, el contenido de humedad de la composición fue 2.1% y la actividad de agua de la composición fue 0.14 A„. El conteo final de LGG se determinó que es 7.6 x 106 cfu/g de producto. Los conteos iniciales y finales de LGG después que fueron trazados contra el tiempo de almacenamiento con base en la ecuación (3). De acuerdo a lo mostrado en la Fig. 1, la constante del índice de descomposición de LGG es menos que 0.05 /semana. Específicamente, la constante del índice de descomposición es 0.0256 /semana . Estos datos de almacenamiento real muestran que el periodo de almacenamiento del LGG que contiene la fórmula infantil en polvo a 25°C con un contenido de humedad de 2.1% y una actividad de agua de 0.14 Aw puede ser 21 meses o más antes de la reducción de conteo de LGG llegue a un ciclo y medio . Todas las referencias citadas en esta especificación, incluyendo sin limitación, todos los papeles, publicaciones, patentes, solicitudes de patente, presentaciones, textos, informes, manuscritos, folletos, libros, publicaciones de Internet, artículos de diarios, periódicos, y similares, son incorporados por este medio por referencia en esta especificación en su totalidad. La discusión de las referencias aquí tienen la intención simplemente de resumir las aserciones hechas por sus autores y no se hace ninguna admisión que cualquier referencia constituye el arte previo. Los solicitantes se reservan el derecho a cambios de exactitud y pertinencia de las referencias citadas. Aunque las modalidades preferidas de la invención se han descrito utilizando los términos específicos, dispositivos, y métodos, tal descripción es para propósitos ilustrativos solamente. Las palabras utilizadas son palabras de la descripción en lugar de limitación. Debe ser entendido que los cambios y variaciones se pueden hacer por las personas experimentadas en la técnica sin salir del espíritu o del alcance de la presente invención, que se establece en las reivindicaciones siguientes. Además, debe ser entendido que los aspectos de las diferentes modalidades pueden ser ambos intercambiados completamente o parcialmente. Por ejemplo, mientras que los métodos para la producción de un suplemento nutricional liquido comercialícente estéril hecho de conformidad con aquellos métodos se han ejemplificado, se contemplan otros usos. Por lo tanto, el espíritu y el alcance de las reivindicaciones anexas no se deben limitar a la descripción de las versiones preferidas contenidas aquí. Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por el solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (2)

1. REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones : 1. Un método para prolongar el periodo de almacenamiento de una formulación nutricional en polvo que contiene LGG hasta por lo menos 15 meses, caracterizado porque comprende reducir la actividad de agua de la formulación que contienen LGG hasta menos que aproximadamente 0.16 y mantener la temperatura de la formulación a o debajo de 25°C. 2. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la actividad de agua es reducida hasta menos que aproximadamente 0.14. 3. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el período de almacenamiento de la formulación que contiene LGG es prolongada hasta por lo menos 21 meses. 4. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la reducción de la actividad de agua de la formulación que contiene LGG comprende uno o más de los siguientes pasos: a) proporcionar una estructura de empaque para contener la formulación que contiene LGG e incorporar un material desecante en la estructura de empaque; o b) mezclar la formulación nutricional en polvo y el LGG en un mezclador e introducir una corriente de un agente purgante en la base del mezclador; o c) secar los componentes individuales de la formulación nutricional en polvo, secar el LGG, y mezclar juntos secos los componentes . 5. El método de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque el material desecante es aluminosilicato de metal deshidratado. 6. El método de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque el agente de purga es seleccionado del grupo que consiste de nitrógeno y dióxido de carbono. 7. El método de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque además comprende colocar la formulación nutricional de LGG en un recipiente estéril y sellar el recipiente con un cierre estéril en una atmósfera esencialmente libre de microorganismos . 8. El método de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque el recipiente es purgado bajo condiciones asépticas con un gas inerte estéril antes de ser sellado . 9. Un método para prolongar el periodo de almacenamiento de una formulación nutricional en polvo que contiene LGG hasta por lo menos 15 meses, caracterizado porque comprende reducir el contenido de humedad de la formulación que contiene hasta menos que aproximadamente 2.3% y mantener la temperatura de la formulación a o menor a 25°C. 10. El método de conformidad con la reivindicación 15, caracterizado porque el contenido de humedad es reducido hasta menos que aproximadamente
2. 2.1%.