MX2008009212A - Composicion que comprende varias toxinas botulicas - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a una composición que comprende al menos:una neurotoxina botúlica tipo A1, y una neurotoxina botúlica tipo A, la secuencia de aminoácido de la cual tiene al menos 5%de diferencia con la secuencia de aminoácido de la neurotoxina botúlica tipo A1.

Description

COMPOSICIÓN QUE COMPRENDE VARIAS TOXINAS BOTULICAS DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención tiene por objeto una composición que comprende varias toxinas botúlicas de tipo A. La toxina botúlica, en particular la toxina botúlica de tipo Al (Dysport® comercializada por Ipsen ou Botox® comercializada por Allergan) , es utilizada desde los años 80 en el hombre para el tratamiento de enfermedades/trastornos distintos y variados. Entre las enfermedades/trastornos pudiendo tratarse por la toxina botúlica, se pueden citar entre otras, los trastornos musculares (por ejemplo, blefaroespasmos, espasticidad del adulto o del infante o también la torticolis) , migraña, dolor de origen muscular, dolor neuropático, hiperhidrosis (o transpiración excesiva) , hipersalivación o incluso las arrugas . Las aplicaciones de toxinas botúlicas continúan hasta ahora tratando a su administración clásica, intramuscular, la cual describe los tratamientos mencionados. La inyección en los músculos provoca su parálisis transitoria, es decir, bloquea las contracciones musculares sobre un cierto periodo de tiempo. Ahora bien, las composiciones de toxinas botúlicas utilizadas hasta ahora, presentan una duración de acción en REF.: 193781 tiempo que es limitada. A fin de responder a las exigencias de los industriales, pasó a ser una necesidad de encontrar un medio para aumentar la duración de acción de la toxina botúlica sin alterar su actividad biológica. Asi, el problema que se propone resolver la presente invención es proporcionar una nueva composición de toxinas butílicas teniendo una duración de acción prolongada. De manera inesperada, los inventores colocan evidencia de que es posible combinar varias toxinas botúlicas. Con este fin, la presente invención propone una composición que comprende al menos: - una neurotoxina botúlica de tipo Al, y - una neurotoxina botúlica de tipo Al de la cual la secuencia de aminoácidos presenta al menos 5% de diferencia con la secuencia de aminoácidos de la neurotoxina botúlica de tipo Al. La invención ofrece las ventajas determinantes, en particular, la presente invención presenta una duración de la parálisis muscular que es mejorada cuando la composición es inyectada en un músculo liso o esquelético. La duración de la parálisis muscular puede alcanzar hasta 10 meses en ciertos casos, y más en general, varía entre 2 a 8 meses. La invención ofrece como otra ventaja, que las composiciones según la invención pueden ser utilizadas a dosis mucho más reducidas comparadas con dosis de toxinas botúlicas actualmente disponibles en el mercado. En otros términos, para obtener la misma relajación de músculos, se inyecta una cantidad inferior de toxina botúlica. Para las mismas indicaciones terapéuticas, una reducción comprende entre 10 a 70%, preferentemente entre 25 a 50% de dosis de administración puede ser observada (comparación entre unidades de toxinas inyectadas para obtener el mismo efecto biológico) . Otra ventaja de las composiciones según la invención, es que provocan pocos efectos secundarios, y notablemente mucho menos efectos secundarios que las composiciones hasta ahora de toxinas botúlicas. En particular, la posibilidad de utilizar dosis reducidas de composición según la invención, permite ventajosamente la reducción de los efectos secundarios . Entre los efectos secundarios que son evitados, se pueden citar los ligados a la inmunogenicidad de la proteína misma, así como la disfagia, ptosis o la debilidad muscular, en general, esta lista no es tan exhaustiva. Además, las composiciones según la invención presentan como otra ventaja, una rapidez de acción mejorada cuando la composición es inyectada en un músculo liso o esquelético. El efecto biológico o clínico puede aparecer 12 horas después de la inyección, y más generalmente, en un plazo comprendido entre 12 a 24 horas después de la inyección. Ventajosamente, las composiciones según la invención, proporcionan un efecto miorelajante muy homogéneo. Finalmente, la invención tiene por ventaja de poder ser empleada en todas las industrias, particularmente la industria farmacéutica, veterinaria, cosméticas así como en los dominios de la higiene diaria o de la higiene corporal . Otras ventajas y características de la invención aparecerán claramente en la lectura de la descripción y los ejemplos dados a título puramente ilustrativo y no limitante, siguiente. La presente invención tiene por objeto una composición que comprende al menos: -una neurotoxina botúlica de tipo Al, y -una neurotoxina botúlica de tipo A de la cual la secuencia de aminoácidos presenta al menos, 5% de diferencia con la secuencia de aminoácidos de la neurotoxina botúlica de tipo Al. Por la expresión de neurotoxina botúlica, se entiende una toxina botúlica que es, ya sea una proteína libre (es decir, libre de toda la proteína formadora de complejo) , sea un complejo proteico, el complejo proteico puede comprender por ejemplo, la hemaglutinina (proteína HA) , asociada a la toxina botúlica, o ya sea un fragmento proteico. Por la expresión toxina botúlica, se entiende una molécula que posee la actividad biológica de la toxina botúlica, que puede ser ya sea una proteína, sea un polipéptido, sea un péptido, sea una proteína de fusión, sea una proteína troncal, ser una proteína quimérica, sea una proteína mutada o una proteína recombinante . Por la expresión actividad biológica de la toxina, se entiende en el sentido de la presente invención, ser una parálisis muscular, ser una inhibición de la exocitosa, en particular la exocitosa de acetilcolina o de otro neurotransmisor . Por proteína, polipéptido o péptido, se entiende en el sentido de la presente invención, polímero de aminoácidos, naturales o no, levógiros o no, dextrógiros o no. Por proteína quimérica, se entiende en el sentido de la presente invención, una proteína obtenida después de la asociación de diferentes tipos de moléculas, por ejemplo, después de la asociación de lípidos, glicolípidos, péptidos, polipéptidos, proteínas, glicoproteínas, carbohidratos, polisacáridos, ácidos nucleicos, polietilenglicol, etc. La neurotoxina botúlica, pura o casi pura, puede ser obtenida a partir de un complejo proteico comprendido de la toxina botúlica por ejemplo, según el método descrito en Current topics in Microbiology and Immunology (1995) , 1995, p. 151-153. Una neurotoxina botúlica, pura o casi pura, puede ser obtenida por ejemplo, por purificación de un medio de fermentación o un caldo de cultivo que contiene una cepa de Clostridium Botulinum, y enriquecida por ejemplo, en carne o en alimento proteico. El primer constituyente esencial de la composición está constituido por una neurotoxina botúlica tipo Al. La neurotoxina botúlica de tipo Al corresponde de hecho a la toxina bot?lica clásica que es comúnmente llamada toxina botúlica de tipo A, sin distinción del subtipo. La neurotoxina botúlica de tipo Al es comercializada bajo el nombre de DYSPORT® o BOTOX®. Según la invención, la neurotoxina botúlica de tipo Al, puede corresponder aun complejo de toxina botúlica Al y de hemaglutinina, ser una toxina botúlica de tipo Al libre de todos los formadores de complejos proteicos. El segundo constituyente esencial de la composición está constituido por una neurotoxina botúlica de tipo A de la cual la secuencia de aminoácidos presenta al menos, 5% de diferencia con la secuencia de aminoácidos de la neurotoxina botúlica de tipo Al . Para una lectura más fácil continuada de la exposición, esta neurotoxina esta llamada neurotoxina botúlica de tipo Ax. Por la expresión "una neurotoxina botúlica de tipo A de la cual la secuencia de aminoácidos presenta al menos, ?% de diferencia con la secuencia de aminoácidos de la neurotoxina botúlica de tipo Al", se entiende que estas secuencias de aminoácidos (cadena pesada y cadena ligera) , corresponden a las secuencias de la toxina botúlica libre de todos los formadores de complejos proteínicos . Por ejemplo, 10% de diferencia, significa que 10 aminoácidos son diferentes entre 10 aminoácidos. Se entiende que la diferencia puede significar ausente, en el ejemplo, 10% de diferente puede entenderse por 10 aminoácidos ausentes entre 100 aminoácidos. Más particularmente, la composición según la invención comprende al menos, una neurotoxina botúlica de tipo A de la cual, la secuencia de aminoácidos presenta al menos, 8% de diferencia con la secuencia de aminoácidos de la neurotoxina botúlica de tipo Al. De preferencia, la composición según la invención comprende al menos, una neurotoxina botúlica de tipo A de la cual, la secuencia de aminoácidos presenta al menos, 10% de diferencia con la secuencia de aminoácidos de la neurotoxina botúlica de tipo Al . Todavía más preferiblemente, la composición según la invención comprende al menos, una neurotoxina botúlica de tipo A de la cual la secuencia de aminoácidos presenta al menos, 12% de diferencia con la secuencia de aminoácidos de la neurotoxina botúlica de tipo Al. Entre las neurotoxinas botúlicas de tipo Ax, se pueden citar la toxina botúlica de tipo A2. De preferencia, la composición según la invención comprende al menos : -una neurotoxina botúlica de tipo Al, y -una neurotoxina botúlica de tipo A2. La toxina botúlica de tipo A2 ha sido aislada primero a partir de casos de infantes afectados con botulismo hacia 1990 (Sa aguchi et al., Int . J. Food Microbiol . (1990), 11, 231-242) . Esta toxina es inmunitaria y bioquímicamente diferente de la toxina botúlica de tipo Al. La toxina botúlica de tipo A2 puede ser aislada a partir de las cepas siguientes: Kyoto-F, Chiba-H, Y-8036, 7103-H, 7105-H, KZ1828, NCTC2012 o NCTC9837 (Córdoba et al., System. Appl . Microbiol . (1995), 18, 13-22; Franciosa et al., resumen presentado en la 40th Interagency Botulism Research Coordinating Comittee (IBRCC) Meeting, Noviembre 2003) . De preferencia, la composición según la invención, comprende la toxina botúlica de tipo A2 aislada a partir de la cepa Clostridium botulinum, referenciada y accesible bajo el número NCTC9837, con la National Collection of Type Cultures Central Public Health Laboratory - Londres - UK. La cepa NCTC9837 es a veces llamada cepa Mauritius 1955. Todavía más preferencialmente, la composición según la invención, comprende al menos: -una neurotoxina botúlica de tipo Al y -una neurotoxina botúlica de tipo A2 aislada a partir de la cepa Clostridium botulinum NCTC9837. La toxina botúlica de tipo Al difiere de la toxina Al por entre otras cosas, por su secuencia de aminoácidos, sus pesos moleculares, sus características inmunitarias y genéticas (Kubota et al., Biochem. Biophys . Res . Commun . (1996) , 224(3) , 843-848) . Las diferencias bioquímicas entre la toxina botúlica de tipo A2 y del tipo Al son entre otras cosas, que la toxina botúlica de tipo Al contienen la proteína NTNH (proteína no tóxica y no hemaglutinina) y al menos, 3 he aglutininas (HA17, HA34 y HA70) , mientras que la toxina botúlica de tipo A2 puede contener la proteína NTNH, sin hemaglutinina (Sakaguchi et al., Int . J. Food Microbiol . (1990) , 11, 231-242) . La toxina botúlica de tipo A2 posee una cadena pesada de aproximadamente 101 kDa mientras que la toxina botúlica de tipo Al posee una cadena pesada de aproximadamente 93 kDa (Kozaki et al., Microbiol . Immunol . (1995) , 39(10) , 767-74) . La secuencia de aminoácidos de las toxinas botúlicas de tipo A2 y Al, es significativamente diferente, más particularmente a nivel de la cadena pesada. Por ejemplo, en el caso de la toxina botúlica de tipo A2 originada de la cepa Kyoto-F, 109 aminoácidos entre los 847 de aminoácidos de la cadena pesada son diferentes entre las dos toxinas (13% de diferencia) (Córdoba et al., System. Appl . Microbiol . (1995), 18, 13-22) . De manera general, las cadenas pesadas de toxinas botúlicas de tipos Al aisladas difieren entre ellas por al menos, 2% de diferencia. La cadena pesada de la toxina botúlica participa en actividades biológicas principales de la molécula, que incluyen la unión a un receptor sobre las células objetivo y el transporte intracelular (Zhang et al., Gene (2003), 315, 21-32). Existen diferencias inmunitarias entre la toxina botúlica de tipo A2 y la del tipo Al. En efecto, los anticuerpos dirigidos contra la toxina botúlica de tipo Al, no reconocen más la toxina botúlica de tipo A2, y viceversa. (Sakaguchi et al., Int . J. Food Microbiol . (1990), 11, 231-242; Kozaki et al., Microbiol . Immunol . (1995), 39(10), 767-74) . La presente composición según la invención, puede además, comprender al menos, un agente analgésico. Entre los agentes analgésicos convenientes según la presente invención, se pueden citar un agente analgésico elegido entre los inhibidores de canales sódicos. La presente invención según la invención, puede además, comprender una mezcla de agentes analgésicos citados más abajo. Por "inhibidores de canales sódicos", se entiende por ejemplo, los compuestos siguientes (eventualmente bajo la forma de sales farmacéuticamente aceptables) : -lidocaína; -tetracaína; -bupicaína; -procaína; -mepivacaína; o -dibucaína; La presente composición según la invención puede además, comprender al menos, un polisacárido o una mezcla de varios polisacáridos . Por polisacárido, se entiende en el sentido de la presente invención,- un polímero que comprende al menos, 2 monómeros, los monómeros siendo los sacáridos. Esta definición incluye los disacáridos . En el marco de la invención, los polisacáridos pueden ser iónicos y/o no iónicos. De preferencia, la composición comprende al menos, un polisacárido que comprende mayoritariamente unidades de glucosa. El término mayoritariamente significa que la glucosa es mayoritaria en nombre de las unidades de monómeros. Como ejemplo de polisacáridos convenientes según la invención, se pueden citar el almidón, derivados de almidón, hidroxietilenalmidón, en particular, 2-hidroxi-etil almidón. Los polisacáridos convenientes según la invención, pueden ser sustituidos, en particular pueden ser sustituidos por los radicales alquilo, alcoxi o todavía por los radicales alquilo y los mismos sustituidos por funciones alcohólicas. Según una variante de la invención, la cantidad de polisacárido que comprende en la composición según la invención, es de por lo menos 1 µg de polisacárido por 1 unidad de toxina botúlica. Según la elección del polisacárido, es posible utilizar al menos, 0.5 µg de polisacárido por 1 unidad de toxina botúlica. La presente composición según la invención, puede además, comprender al menos, un tensoactivo o una mezcla de varios tensoactivos. Por agente tensoactivo, se entiende en el sentido de la invención, un agente emulsificante o un agente solubilizante. En el marco de la invención, los tensoactivos empleados, pueden ser elegidos entre los tensoactivos catiónicos, aniónicos o no iónicos. De preferencia, la composición según la invención comprende al menos, un tensoactivo elegido entre los tensoactivos no iónicos del grupo de polisorbatos . Entre el grupo de polisorbatos, se pueden citar el polisorbato 20, polisorbato 21, polisorbato 40, polisorbato 60, polisorbato 61, polisorbato 65, polisorbato 80, polisorbato 81, polisorbato 85, polisorbato 120, polisorbato 80 acetato. El tensoactivo preferido según una variante de la composición según la invención, es el polisorbato 80. La presente composición según la invención, puede además comprender al menos un vasoconstrictor o una mezcla de varios vasoconstrictores. En el marco de la invención, los vasoconstrictores empleados pueden ser elegidos por ejemplo entre los vasoconstrictores de tipo catecolaminas o no catecolaminas . Entre los vasoconstrictores convenientes según la presente invención, se pueden citar a título de ejemplo, epinefrina, norepinefrina, levonordefrina, anfetaminas, efedrina, fenilefrina, endotelina. La composición según la invención, puede estar bajo la forma de un sólido, por ejemplo, polvos, liofilizados, granulos, comprimidos o liposomas. La composición según la invención bajo la forma sólida puede ser conservada por ejemplo a las temperaturas inferiores a 4aC, o inferiores a 0aC sin que su actividad biológica sea alterada. La composición según la invención, puede presentarse bajo la forma de una dispersión acuosa, las partículas de neurotoxina botúlica en una red gelificada.

La composición según la invención puede también presentarse bajo la forma líquida, por ejemplo, soluciones, emulsiones o suspensiones. La administración de la composición según la invención, se hará de preferencia, por inyección como por ejemplo, por inyección intramuscular o sub-cutánea. En el caso de inyecciones, la composición según la invención podrá ser asociada a un agente que facilita la inyección todavía llamada vehículo de inyección o vector de inyección. Según una modalidad, las composiciones según la invención, la relación de fracciones de unidad de neurotoxina botúlica de tipo Al sobre la neurotoxina botúlica de tipo Ax [unidades Al/unidades Ax] , puede estar comprendida entre 1/99 y 99/1, ventajosamente entre 5/95 y 95/5, o entre 10/90 y 90/10. Según una variante de la composición según la invención, la relación de fracciones de unidad de neurotoxina botúlica de tipo Al sobre la neurotoxina botúlica de tipo Ax, es de 50/50. Según una variante de la composición según la invención, la relación de fracciones de unidad de neurotoxina botúlica de tipo Al sobre la neurotoxina botúlica de tipo Ax, es de 60/40. Según una variante de la composición según la invención, la relación de fracciones de unidad de neurotoxina botúlica de tipo Al sobre la neurotoxina botúlica de tipo Ax, es de 40/60. La presente invención tiene igualmente por objeto, la utilización de una composición según la invención, descrita posteriormente, para la obtención de un medicamento destinado para tratar los trastornos musculares, trastornos neuromusculares , trastornos neurológicos, trastornos ortopédicos, trastornos oftalmológicos, patologías particulares, trastornos endocrinos, o trastornos urológicos. La presente invención tiene igualmente por objeto, la utilización de una composición según la invención, descrita posteriormente, para la obtención de un medicamento destinado para tratar la torticolis, torticolis espasmódica, trastornos locales de la espasticidad de los miembros superiores y/o inferiores, dolor, dolor muscular, dolor debido a espasmos musculares, dolor miofacial, dolores postoperatorios, espasmos musculares, espasmo hemifacial, blefaroespasmo, estrabismo, asimetría facial, distonía muscular, parálisis cerebral, cefaleas, migrañas, fibromialgia, mialgia, hiperhidrosis, bromhidrosis, coxartrosis, artrosis de la cadera, epicondilitis del codo, artritis, artritis reumatoide, disquinesias, acalasia, disfuncionamientos de esfínteres de Oddi, pancreatitis, gota, fisuras anales, constipación, anismus, espasmos de la válvula pilórica, vejiga espástica, espasmos de la vejiga, incontinencia urinaria, retención de orina, hiperplasia prostética, endometriosis, psoriasis, rinitis, rinitis alérgica, obesidad, hiperlagrimación, fracturas óseas, rasgones de tendones o la patología de la cofia de los músculos rotadores del hombro. La presente invención tiene igualmente por objeto, la utilización de una composición según la invención, descrita posteriormente, para la obtención de un producto cosmético. La presente invención tiene igualmente por objeto, la utilización de una composición según la invención, descrita posteriormente, para tratar las líneas de fruncimiento de la cara, las arrugas de la cara, las arrugas de la piel, las arrugas del contorno de los ojos, los surcos del entrecejo, calvicie, acné, transpiración excesiva o pérdida de cabello. La presente invención tiene igualmente por objeto, como medicamento, la composición según la invención, descrita posteriormente. La presente invención tiene igualmente por objeto, una composición farmacéutica que comprende la composición según la invención descrita posteriormente. La dosis de la composición según la presente invención, a prever para el tratamiento de enfermedades o trastornos mencionados posteriormente, varía siguiendo el modo de administración, la edad y el peso corporal del sujeto a tratar, así como el estado de este último, y se decidirá en definitiva, por el médico o veterinario que tratará. Un de tales cantidades determinadas por el médico o el veterinario que tratará, es llamada aquí "cantidad terapéuticamente eficaz" . La cantidad terapéuticamente eficaz que es conveniente de inyectar varía igualmente según el nombre del músculo a tratar, así como también según la masa de estos músculos . De preferencia, las dosis de composición según la invención inyectadas comprenderán entre 5 y 2000 Unidades de toxina botúlica, más preferiblemente, de 10 a 1000 unidades de toxina botúlica, todavía además, preferencialmente de 25 a 500 unidades de toxina botúlica. Los ejemplos siguientes ilustran la invención sin limitar el alcance.

EJEMPLOS La cuantificación de neurotoxinas botúlicas utilizadas según la invención, puede ser realizada por la medida de una dosis letal DL50. Por DL50, se entiende en el sentido de la presente invención, la dosis letal o todavía dosis semi letal de una sustancia dada. Se trata de la dosis (o cantidad) que conduce a la muerte de 50% de los animales probados de un grupo. Una unidad de toxina (U) corresponde a la DL50 en el ratón por vía intraperitoneal.

Composiciones utilizadas en los experimentos: Abajo son descritos los constituyentes esenciales de las composiciones utilizados en los ejemplos. Los otros constituyentes presentes no se han precisado. Composición A: -250 unidades de neurotoxina botúlica de tipo Al (Dysport®) . -205 unidades de neurotoxina botúlica de tipo A2 aislada a partir de la cepa Clostridium botulinum NTCT9837. Composición B: -500 unidades de neurotoxina botúlica de tipo Al (Dysport®) .

Ejemplo 1; Blefaroespasmos (dosis 120 unidades) : Un paciente de unos cincuenta años de edad, que sufre blefaroespasmo, cierre involuntario de los ojos que resulta de la contracción de los músculos citados al rededor de los ojos, ha recibido varias inyecciones intramusculares de la composición A según la invención, la dosis total de la composición A inyectada siendo de 120 unidades de neurotoxina botúlica por un volumen total de 1 mi. El protocolo de inyección es efectuado de la siguiente manera: una aguja estéril es introducida en un frasco que contiene la composición A afín de introducir allí, 2.5 mi de una solución inyectable de cloruro de sodio a 0.9%. Obteniendo así, una solución clara que contiene 200 unidades/mi de neurotoxina botúlica. Un paciente que sufre blefaroespasmos bilateral ha recibido por inyección 120 unidades de neurotoxina botúlica (composición A) por ojo (siendo 0.6 mi, para la dilución de 1 frasco que contiene 500 unidades de neurotoxina botúlica (composición A) en 2.5 mi). Las inyecciones en se efectuaron después de la limpieza de la piel alrededor de los ojos, por la vía sub-cutánea con una jeringa de 1 mi (calibre de aguja 23 o 25) . Una dosis de 0.1 mi (20 unidades) de composición A se inyecta en la parte interna y una dosis de 0.2 mi (40 unidades) de. la composición A en la parte externa de la unión entre las zonas pre-septales y orbitales de los músculos orbiculares superiores de cada ojo. De la misma manera, una dosis de 0.1 mi (20 unidades) de la composición A son inyectadas en la parte interna y una dosis de 0.2 mi (40 unidades) de composición A en la parte externa de la unión entre las zonas presentables y orbitales de los músculos orbiculares inferiores de cada ojo. En la inyección en el párpado superior, la aguja debe orientarse preferiblemente de modo que se evite el centro del párpado, parte en donde se 2O inserta el músculo elevador del párpado. En las administraciones posteriores, la dosis total por ojo podrá ser reducida a 80 unidades (0.4 mi), es decir, 20 unidades por sitio de inyección (siendo 0.1 mi). En este paciente, la parálisis muscular se presentó aproximadamente 12 horas después del comienzo del tratamiento, y la parálisis duró aproximadamente 20 a 21 semanas. Ninguna ptosis parcial o completa se observó. En otro paciente de la misma edad y que presenta los síntomas similares, con el mismo protocolo pero utilizando la composición B con la misma dosificación, la parálisis muscular se presentó aproximadamente 24 horas después del comienzo del tratamiento, y la parálisis duró aproximadamente 12 a 13 semanas .

Ejemplo 2: Blefaroespasmo (dosis 60 unidades) : Un paciente de unos cincuenta años de edad, que sufre blefaroespasmo, cierre involuntario de los ojos que resulta de la contracción de los músculos citados al rededor de los ojos, ha recibido varias inyecciones intramusculares de la composición A según la invención, la dosis total de la composición A inyectada siendo de 60 unidades de neurotoxina botúlica por un volumen total de 1 mi. El protocolo de inyección es efectuado de la siguiente manera: una aguja estéril es introducida en un frasco que contiene la composición A afín de introducir allí, 2.5 mi de una solución inyectable de cloruro de sodio a 0.9%. Obteniendo así, una solución clara que contiene 200 unidades/mi de neurotoxina botúlica. Un paciente que sufre blefaroespasmos bilateral ha recibido por inyección 60 unidades de neurotoxina botúlica (composición A) por ojo (siendo 0.3 mi, para la dilución de 1 frasco que contiene 500 unidades de neurotoxina botúlica (composición A) en 2.5 mi). Las inyecciones en se efectuaron después de la limpieza de la piel alrededor de los ojos, por la vía sub-cutánea. Una dosis de 0.05 mi (10 unidades) de composición A se inyecta en la parte interna y una dosis de 0.1 mi (20 unidades) de la composición A en la parte externa de la unión entre las zonas pre-septales y orbitales de los músculos orbiculares superiores de cada ojo. De la misma manera, una dosis de 0.05 mi (10 unidades) de la composición A son inyectadas en la parte interna y una dosis de 0.1 mi (20 unidades) de composición A en la parte externa de la unión entre las zonas presentables y orbitales de los músculos orbiculares inferiores de cada ojo. En la inyección en el párpado superior, la aguja debe orientarse preferiblemente de modo que se evite el centro del párpado, parte en donde se inserta el músculo elevador del párpado. En las administraciones posteriores, la dosis total por ojo podrá ser reducida a 40 unidades (0.2 mi), es decir, 10 unidades por sitio de inyección (siendo 0.05 mi). En este paciente, la parálisis muscular se presentó aproximadamente 24 horas después del comienzo del tratamiento, y la parálisis duró aproximadamente 12 a 13 semanas . Los resultados son pues similares a aquellos obtenidos con la composición B, pero una dosis de administración reducida de 50% en nombre de unidad de toxina.

Ejemplo 3t Torticolis espasmódica Un paciente de 35 años de edad que sufre torticolis espasmódica, ha recibido varias inyecciones intramusculares de la composición A según la invención, la dosis total de la composición A inyectada siendo de 500 unidades de neurotoxinas botúlicas por un volumen total de 1 mi. El protocolo de inyección es efectuado de la siguiente manera: una aguja estéril es introducida en un frasco que contiene la composición A afín de introducir allí, 1 mi de una solución inyectable de cloruro de sodio a 0.9%. Obteniendo así, una solución clara que contiene 500 unidades/mi de neurotoxina botúlica. Un paciente que sufre torticolis espasmódica ha recibido por inyección, 500 unidades de neurotoxina botúlica (composición A), siendo 1 mi, por la dilución de 1 frasco de 500 unidades en 1 mi. La dosis total se distribuyó entre los 2 o 3 músculos cervicales más aquejados (esterno-cleido-mastoideo, esplenio, trapecio o angular) . En este paciente la parálisis muscular se presentó aproximadamente 18 horas después del comienzo del tratamiento. La parálisis duró aproximadamente 20 a 21 semanas. Ninguna disfagia ha sido comprobada. En otro paciente de la misma edad y que presenta los síntomas similares, con el mismo protocolo pero utilizando la composición B con la misma dosificación, la parálisis muscular se presentó aproximadamente 48 a 60 horas después del comienzo del tratamiento, y la parálisis duró aproximadamente 12 a 13 semanas . Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (6)

1. REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones : 1. Composición, caracterizada porque comprende al menos : -una neurotoxina botúlica de tipo Al y -una neurotoxina botúlica de tipo A de la cual la secuencia de aminoácidos presenta al menos 5% de diferencia con la secuencia de aminoácidos de la neurotoxina botúlica de tipo Al . 2. Composición de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque comprende al menos, una neurotoxina botúlica de tipo A en la que la secuencia de aminoácidos presenta al menos, 10% de diferencia con la secuencia de aminoácidos de la neurotoxina botúlica de tipo Al. 3. Composición de conformidad con una de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque comprende al menos -una neurotoxina botúlica de tipo Al y -una neurotoxina botúlica de tipo A2. 4. Composición de conformidad con una de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque comprende al menos
2. 2.5 -una neurotoxina botúlica de tipo Al, y -una neurotoxina botúlica de tipo A2 aislada a partir de la cepa Clostridium botulinum NCTC9837. . 5. Composición de conformidad con una de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque comprende al menos, un agente analgésico. 6. Composición de conformidad con una de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque comprende al menos, un polisacárido. 7. Composición de conformidad con una de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque comprende al menos, un polisacárido que es el 2-hidroxi-etil almidón. 8. Composición de conformidad con una de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque comprende al menos, un tensoactivo, elegido entre los tensoactivos catiónicos, aniónicos o no aniónicos. 9. Composición de conformidad con una de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque comprende al menos, un tensoactivo elegido entre los tensoactivos no iónicos del grupo de polisorbatos. 10. Composición de conformidad con una de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque comprende al menos, un tensoactivo que es el polisorbato 80. 11. Composición de conformidad con una de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque comprende al menos, un vasoconstrictor. 12. A título de medicamento, caracterizado porque la composición es de conformidad con una de las reivindicaciones 1 a 11. 1
3. 3. Uso de una composición de conformidad con una de las reivindicaciones 1 a 12, para la obtención de un medicamento, destinado a tratar los trastornos musculares, trastornos neuromusculares, trastornos neurológicos, trastornos ortopédicos, trastornos oftalmológicos, patologías articulares, trastornos endocrinos o trastornos urológicos. 1
4. 4. Uso de una composición de conformidad con una de las reivindicaciones 1 a 12, para la obtención de un medicamento destinado a tratar torticolis, torticolis espasmódica, trastornos locales de la espasticidad de los miembros superiores y/o inferiores, dolor, dolor muscular, dolor debido a espasmos musculares, dolor miofacial, dolores post-operatorios, espasmos musculares, espasmo hemifacial, blefaroespasmo, estrabismo, asimetría facial, distonía muscular, parálisis cerebral, cefaleas, migrañas, fibromialgia, mialgia, hiperhidrosis, bromhidrosis, coxartrosis, artrosis de la cadera, epicondilitis del codo, artritis, artritis reumatoide, disquinesias, acalasia, disfuncionamientos de esfínteres de Oddi, pancreatitis, gota, fisuras anales, constipación, anismus, espasmos de la válvula pilórica, vejiga espástica, espasmos de la vejiga, incontinencia urinaria, retención de orina, hiperplasia prostética, endometriosis, psoriasis, rinitis, rinitis alérgica, obesidad, hiperlagrimación, fracturas óseas, rasgones de tendones o la patología de la cofia de los músculos rotadores del hombro. 1
5. 5. Uso de una composición de conformidad con una de las reivindicaciones 1 a 12, para la obtención de un producto cosmético. 1
6. 6. Uso de una composición de conformidad con una de las reivindicaciones 1 a 12, para tratar las líneas de fruncimiento de la cara, las arrugas de la cara, las arrugas de la piel, las arrugas del contorno de los ojos, los surcos del entrecejo, calvicie, acné, transpiración excesiva o pérdida de cabello.