MD1147Z

MD1147Z - Dispozitiv pentru fixarea etajată a pielii în procesul de decelularizare

Info

Publication number: MD1147Z
Application number: MDS20160140A
Authority: MD
Inventors: Ольга МАКАГОНОВА; Виорел НАКУ; Георге МУШЕТ; Адриан КОЧУГ; Марианна ЖИАН; Виолета САРЕВ; Виталие КОБЗАК
Original assignee: Государственный Медицинский И Фармацевтический Университет "Nicolae Testemitanu" Республики Молдова
Priority date: 2016-11-29
Filing date: 2016-11-29
Publication date: 2017-12-31
Also published as: MD1147Y

Abstract

Invenţia se referă la medicina regenerativă, şi anume la dispozitive pentru fixarea pielii în procesul de decelularizare.Dispozitivul pentru fixarea etajată a pielii în procesul de decelularizare include o carcasă compusă din trei compartimente tubulare (1) cu diametrul tubului de 2 cm, executate în formă de pătrat cu suprafaţa de 10x10 cm, amplasate coaxial şi fixate la colţuri unul de altul prin intermediul a patru tuburi (2) cu lungimea de 10 cm şi diametrul de 1cm, totodată pe partea de sus a compartimentelor (1), la aceeaşi distanţă de la tuburi (2), sunt executate câte patru orificii cu diametrul de 2 mm. Dispozitivul mai conţine nişte tije (3) cu lungimea de 2 cm şi diametrul de 1 mm, un capăt al cărora este executat ascuţit, iar pe celălalt capăt este executat un mâner în formă de cilindru, totodată toate elementele sunt executate din inox.

Description

Invenţia se referă la medicina regenerativă, şi anume la dispozitive pentru fixarea pielii în procesul de decelularizare.

Cea mai apropiată soluţie este dispozitivul, care include un recipient cu diametrul de 3 cm şi înălţimea de 3 cm şi care conţine patru elemente de fixare executate în formă de cilindru, pe centrul cărora sunt executate orificii cu diametrul de 1 mm, precum şi patru tije cu lungimea de 5 cm şi diametrul de 0,9 mm, un capăt al cărora este executat ascuţit, iar pe celălalt capăt este executat un mâner în formă de cilindru [1].

Dezavantajul acestei soluţii constă în faptul că are o eficacitate scăzută, deoarece necesită un timp mai îndelungat şi efort în procesul de decelularizare a pielii.

Problema pe care o rezolvă invenţia constă în crearea unui dispozitiv, care ar permite o decelularizare etajată, adică mai uşoară şi eficace a pielii, favorizând un acces mai bun pentru schimbarea repetată şi succesivă a reactivilor în procesul de decelularizare şi asigurând o mişcare oscilatorie dispozitivului.

Dispozitivul pentru fixarea etajată a pielii în procesul de decelularizare, conform invenţiei, înlătură dezavantajul menţionat mai sus prin aceea că include o carcasă compusă din trei compartimente tubulare cu diametrul tubului de 2 cm, executate în formă de pătrat cu suprafaţa de 10 x10 cm, amplasate coaxial şi fixate la colţuri unul de altul prin intermediul a patru tuburi cu lungimea de 10 cm şi diametrul de 1cm, totodată pe partea de sus a compartimentelor, la aceeaşi distanţă de la tuburi, sunt executate câte patru orificii cu diametrul de 2 mm. Dispozitivul mai conţine nişte tije cu lungimea de 2 cm şi diametrul de 1 mm, un capăt al cărora este executat ascuţit, iar pe celălalt capăt este executat un mâner în formă de cilindru, totodată toate elementele sunt executate din inox.

Avantajele acestui dispozitiv constau în faptul că asigură scufundarea totală a pielii şi permite o decelularizare etajată, adică mai eficace a ei.

Rezultatul tehnic al invenţiei constă în crearea unui dispozitiv pentru fixarea etajată a pielii în procesul decelularizării, care asigură operativ, sigur, calitativ, uşor, atraumatic, precum şi econom fixarea pielii de prelucrat şi obţinerea unei mişcări oscilatorii a dispozitivului în procesul de decelularizare.

Invenţia se explică prin desenele din fig. 1-3, care reprezintă:

- fig. 1, elementele constructive ale dispozitivului;

- fig. 2, vedere de ansamblu a dispozitivului pentru fixarea etajată a pielii în procesul decelularizării.

Dispozitivul pentru fixarea etajată a pielii în procesul de decelularizare include o carcasă compusă din trei compartimente tubulare 1 cu diametrul tubului de 2 cm, executate în formă de pătrat cu suprafaţa de 10x10 cm, amplasate coaxial şi fixate la colţuri unul de altul prin intermediul a patru tuburi 2 cu lungimea de 10 cm şi diametrul de 1 cm, totodată pe partea de sus a compartimentelor 1, la aceeaşi distanţă de la tuburi 2, sunt executate câte patru orificii cu diametrul de 2 mm. Dispozitivul mai conţine nişte tije 3 cu lungimea de 2 cm şi diametrul de 1 mm, un capăt al cărora este executat ascuţit, iar pe celălalt capăt este executat un mâner în formă de cilindru, totodată toate elementele sunt executate din inox.

Dispozitivul pentru fixarea etajată a pielii în procesul de decelularizare se utilizează în modul următor.

Acest dispozitiv se utilizează în mediu steril sub o hotă cu flux laminar de aer. Prealabil dispozitivul se sterilizează în autoclavă şi se pregătesc soluţiile pentru decelularizare. Apoi se dezgheaţă o bucată de piele congelată şi cu ajutorul bisturiului se secţionează un fragment de piele cu dimensiunile de 10 x10 cm. După înlăturarea ţesutului adipos de pe partea epidermo-dermală, fragmentul de piele se fixează de colţuri prin intermediul tijelor 3 şi orificiilor executate pe partea de sus a compartimentelor 1. Ulterior carcasa se scufundă într-un vas de sticlă cu soluţie de 0,5% de sodiu dodecil sulfat - 600 ml şi 150 ml EDTA 0,1%, timp de 24 ore. După fiecare 24 ore soluţia se schimbă. După 72 ore pielea decelularizată se spală în soluţie PBS 500 ml. După o spălare minuţioasă, pielea se scufundă în antibiotic.

Curăţarea dispozitivului se efectuează prin dezinfectarea cu detergenţi şi soluţii degresante şi sterilizarea ulterioară în autoclavă.

Exemplu

După o sterilizare prealabilă a dispozitivului şi înlăturarea ţesutului adipos de pe partea epidermo-dermală, fragmentul de piele cu dimensiunile de 10 x10 cm a fost fixat de colţuri prin intermediul tijelor 3 şi orificiilor executate pe partea de sus a compartimentelor 1, fiind scufundat într-un vas de sticlă cu soluţie de 0,5% de sodiu dodecil sulfat - 600 ml şi 150 ml EDTA 0,1%, timp de 24 ore. După 72 ore pielea decelularizată a fost spălată în soluţie PBS 500 ml. După o spălare minuţioasă pielea a fost scufundată în antibiotic.

Toate fragmentele de piele au fost liofilizate şi stocate în desicator până la utilizare. Cu scopul detectării rezidiului celular, a resturilor nucleare, precum şi pentru vizualizarea arhitecturii matricii extracelulare, monstrele de piele au fost fixate şi preparate pentru examen histologic, fiind colorate cu hematoxilin şi eosin. S-a efectuat cuantificarea spectrofotometrică a cantităţii de ADN, s-au obţinut următoarele rezultate:

Rezulatatele cuantificării cantităţii de ADN (ng/µl) Decelularizarea cu NaOH Control (pielea nedecelularizată) 12,5 Repetiţia 1 4,5 Repetiţia 2 4,5 Repetiţia 3 4,5

Dispozitivul corespunde cerinţelor şi normelor sanitare, toate piesele dispozitivului fiind executate din material inoxidabil, şi asigură o uşoară decelularizare a pielii.

Acest dispozitiv se utilizează pentru fixarea pielii în procesul decelularizării în Laboratorul inginerie tisulară şi culturi celulare şi la catedrele universităţii.

1. MD s 2016 0131 U0 2017.03.31

Claims

Dispozitiv pentru fixarea etajată a pielii în procesul de decelularizare, care include o carcasă compusă din trei compartimente tubulare (1) cu diametrul tubului de 2 cm, executate în formă de pătrat cu suprafaţa de 10x10 cm, amplasate coaxial şi fixate la colţuri unul de altul prin intermediul a patru tuburi (2) cu lungimea de 10 cm şi diametrul de 1cm, totodată pe partea de sus a compartimentelor (1), la aceeaşi distanţă de la tuburi (2), sunt executate câte patru orificii cu diametrul de 2 mm, nişte tije (3) cu lungimea de 2 cm şi diametrul de 1 mm, un capăt al cărora este executat ascuţit, iar pe celălalt capăt este executat un mâner în formă de cilindru, totodată toate elementele sunt executate din inox.