LU93323B1 - Method for diagnosing different forms of malaria - Google Patents

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LU93323B1
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LU
Luxembourg
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malaria
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severe
granzyme
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LU93323A
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Thomas Jacobs
Maria Mackroth
Ellis Owusu-Dabo
Christiane Steeg
Annemieke Abel
Jürgen May
Daniel Eibach
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Univ Hamburg Eppendorf Uke
Bernhard Nocht Inst Fuer Tropenmedizin
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    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
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    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/569Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
    • G01N33/56905Protozoa
    • GPHYSICS
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Claims (15)

1. Verfahren zur Diagnose, um festzustellen, ob ein Subjekt an einer schweren oder einer unkomplizierten Form von Malaria erkrankt ist, bei dem man a) eine Probe einer Körperflüssigkeit von dem Subjekt bereitstellt, bei dem Malaria diagnostiziert wurde; b) die Konzentration von Granzym B in der Probe bestimmt; und c) die in Schritt b) erhaltene Konzentration mit mindestens einem Referenzwert vergleicht; wobei der Vergleich der in Schritt b) erhaltenen Konzentration mit dem mindestens einen Referenzwert anzeigt, ob das Subjekt an einer schweren oder an einer unkomplizierten Form der Malaria erkrankt ist.
2. Verfahren gemäß Anspruch 1, wobei das Verfahren den Vergleich der in Schritt b) erhaltenen Konzentration mit einem ersten Referenzwert umfasst, der auf die unkomplizier-te Form der Malaria verweist, sowie mit einem zweiten Referenzwert, der auf die schwere Form der Malaria verweist.
3. Verfahren gemäß Anspruch 2, wobei (i) das Subjekt an der schweren Form der Malaria erkrankt ist, wenn die in Schritt b) erhaltene Konzentration den ersten Referenzwert übersteigt und dem zweiten Referenzwert entspricht oder nur geringfügig von diesem abweicht; und (ii) das Subjekt an der unkomplizierten Form der Malaria erkrankt ist, wenn die in Schritt b) erhaltene Kon-zentration dem ersten Referenzwert entspricht oder nur geringfügig von diesem abweicht und signifikant niedriger ist als der zweite Referenzwert.
4. Verfahren zur Diagnose, um festzustellen, ob ein Subjekt entweder an (i) einer schweren Form der Malaria oder (ii) einer unkomplizierten Form der Malaria und einer bakteri-ellen Sepsis erkrankt ist, bei dem man a) eine Probe einer Körperflüssigkeit von einem Subjekt bereitstellt, bei dem Malaria diagnostiziert wurde und das offensichtliche Symptôme einer schweren Malaria zeigt; b) die Konzentration von Granzym B in der Probe bestimmt; und c) die in Schritt b) erhaltene Konzentration mit mindestens einem Referenzwert vergleicht; wobei der Vergleich der in Schritt b) erhaltenen Konzentration mit mindestens einem Referenzwert anzeigt, ob das Subjekt an einer schweren Form der Malaria erkrankt ist oder an einer unkomplizierten Form der Malaria, die mit einer bakteriellen Sepsis einhergeht.
5. Verfahren gemäß Anspruch 4, wobei das Verfahren den Vergleich der in Schritt b) erhaltenen Konzentration mit einem ersten Referenzwert umfasst, der auf die unkomplizier-te Form der Malaria verweist, sowie mit einem zweiten Referenzwert, der auf die schwere Form der Malaria verweist.
6. Verfahren gemäß Anspruch 5, wobei (i) das Subjekt an der schweren Form der Malaria erkrankt ist, wenn die in Schritt b) erhaltene Konzentration den ersten Referenzwert übersteigt und dem zweiten Referenzwert entspricht oder nur geringfügig von diesem abweicht; und (ii) das Subjekt an der unkomplizierten Form der Malaria und einer bakteriellen Sepsis erkrankt ist, wenn die in Schritt b) erhaltene Konzentration dem ersten Referenzwert entspricht oder nur geringfügig von diesem abweicht und signifikant niedriger ist als der zweite Referenzwert.
7. Verfahren gemäß einem der Ansprüche 1-6, wobei die Probe eine Blut-, Plasma- oder Serumprobe ist.
8. Verfahren gemäß einem der Ansprüche 1-7, wobei bei dem Subjekt Malaria diagnostiziert wurde, indem man ein oder mehrere Plasmodium-Antigene detektiert hat.
9. Verfahren gemäß einem der Ansprüche 1-8, wobei die Konzentration von Granzym B mittels eines immundiagnostischen Assays bestimmt wird.
10. Verfahren gemäß Anspruch 9, wobei der immundiagnostische Assay ein Enzym-gebundener Immunosorbent Assay (ELISA) ist.
11. Verfahren gemäß einem der Ansprüche 1-10, wobei das Granzym B humanes Granzym B ist, das die Sequenz von SEQ ID NO:1 oder eines enzymatisch aktiven Fragments davon umfasst .
12. Verfahren gemäß einem der Ansprüche 1-11, wobei die Malaria durch Plasmodium falciparum, Plasmodium ovale, Plasmodium vivax, Plasmodium malariae oder Plasmodium knowlesi verursacht wurde.
13. Verfahren gemäß einem der Ansprüche 1-6, wobei der erste Referenzwert, der auf die unkomplizierte Form der Malaria verweist, einer Blutplasma- oder Serumkonzentration von Granzym B von <250 pg/ml entspricht.
14. Verfahren gemäß einem der Ansprüche 1-6, wobei der zweite Referenzwert, der auf die schwere Form der Malaria verweist, einer Blutplasma- oder Serumkonzentration von Granzym B von >250 pg/ml entspricht.
15. Kit zur Durchführung des Verfahrens gemäß einem der Ansprüche 1-14, umfassend: (a) Mittel zur Bestimmung, ob ein Subjekt an Malaria erkrankt ist; (b) Mittel zur Bestimmung der Konzentration von Granzym B; (c) optional Puffer und Verdünnungsmittel.
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