LU82199A1 - METHOD FOR OBTAINING A NITRATE-FREE SOLUTION FROM A NITRATE-CONTAINING PRODUCT SOLUTION USING PROCAROTIC MICROORGANISMS - Google Patents

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LU82199A1
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H Gaisch
B Krasna
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Tabac Fab Reunies Sa
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    • A24TOBACCO; CIGARS; CIGARETTES; SIMULATED SMOKING DEVICES; SMOKERS' REQUISITES
    • A24BMANUFACTURE OR PREPARATION OF TOBACCO FOR SMOKING OR CHEWING; TOBACCO; SNUFF
    • A24B15/00Chemical features or treatment of tobacco; Tobacco substitutes, e.g. in liquid form
    • A24B15/18Treatment of tobacco products or tobacco substitutes
    • A24B15/20Biochemical treatment

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Description

. . · - 1 - A 28 228 4 l -Ju VERFAHREN ZUR GEWINNUNG EINER VON NITRATEN FREIEN LÖSUNG AUS EINER NITRATE ENTHALTENDEN PRODUKTLÖSUNG UNTER VERWENDUNG VON FROKARpTISCHEN MIKROORGANISMEN__J_. . · - 1 - A 28 228 4 l -Ju METHOD FOR OBTAINING A NITRATE-FREE SOLUTION FROM A NITRATE-CONTAINING PRODUCT SOLUTION USING FROCARPTIC MICROORGANISMS__J_

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Gewinnung einer von Nitraten, Nitriten und Ammoniumverbindungen im wesentlichen freien Ziellösung aus einer durch Auswaschen von Tabakpf1 anzen-teilen als Tabakextrakt gewonnenen,*wässrigen Produktlösung 5 durch Eliminieren der Nitrate, Nitrite und Ammoniumverbindungen mit durch prokarotische Mikroorganismen (Bakterien) hervorgeru— fener, metabolischer, aerober Assimilation unter weitgehendschonender Überführung der übrigen Lösungsbestandteile der Pro-duktlösung in die Ziellösung.The invention relates to a process for obtaining a target solution which is essentially free of nitrates, nitrites and ammonium compounds from an aqueous product solution 5 obtained by washing out tobacco plants as parts of tobacco extract by eliminating the nitrates, nitrites and ammonium compounds by means of prokarotischen microorganisms (bacteria). evoked, metabolic, aerobic assimilation with largely gentle transfer of the remaining solution components of the product solution into the target solution.

1010th

Nitrate, die in Tabak enthalten sind, führen in manchen Fällen durch Umsetzung zu für den menschlichen Genuß unerwünschten :In some cases, nitrates, which are contained in tobacco, lead to undesirable effects for human consumption:

Substanzen, zum Beispiel Stickoxyden im Tabakrauch. Dies kann man vermeiden, wenn man die Nitrate entzieht, ehe sie ihre un- 15* erwünschte Wirkung entfalten können. Zu diesem Zweck werden die .* ~ unerwünschten Verbindungen ausgewaschen und in der wässrigenSubstances, for example nitrogen oxides in tobacco smoke. This can be avoided if the nitrates are removed before they can develop their undesired effect. For this purpose, the. * ~ Unwanted compounds are washed out and in the aqueous

Produktlösung eliminiert. Die beim Auswaschen mit in die wässri-* ge Lösung übergehenden wasserlöslichen Substanzen kann man dann, nachdem die Nitrate nicht mehr in der wässrigen .Lösung enthalten 2o sind, wieder den ausgewaschenen Ausgangssubstanzen zusetzen. Der Entzug der Nitrate soll dabei möglichst vollständig erfolgen.Product solution eliminated. The water-soluble substances which pass into the aqueous solution when washed out can then be added back to the washed-out starting substances after the nitrates are no longer present in the aqueous solution. The nitrates should be removed as completely as possible.

Was für Nitrate gilt, gilt weitgehend auch für Nitrite und Ammoniumverb indun gen, und deshalb ist es wünschenswert, daß ne-ben den Nitraten auch die 'Nitrite und Ammoniumverbindungen ent— 25 fernt werden. Demgegenüber sollen aber andere in der wässrigen Produktlösung enthaltene Stoffe möglichst nicht abgebaut oder / um gebaut werden.What applies to nitrates also largely applies to nitrites and ammonium compounds, and it is therefore desirable that, in addition to the nitrates, the nitrites and ammonium compounds are also removed. In contrast, however, other substances contained in the aqueous product solution should not be degraded or / rebuilt if possible.

I* ' ’ - 2 - A 28 228 *x Aufgabe der Erfindung ist es, ein Verfahren der eingangs ge nannten Art so auszugestalten, daß es unter diesen Bedingungen wirtschaftlich - insbesondere mit möglichst geringem Verbrauch an Zusätzen und Energie - großtechnisch zu betreiben ist·I * '’- 2 - A 28 228 * x The object of the invention is to design a method of the type mentioned at the outset in such a way that it can be operated economically under these conditions - in particular with the lowest possible consumption of additives and energy ·

Die Erfindung ist dadurch gekennzeichnet, daß eine vorbestimmte Arbeitsmischungsportion einer aus Produktlösung und Zusätzen gewonnenen und mit den Mikroorganismen versetzten Arbeitsmischung in einen Nitrat, Nitrit und Ammoniumverbindungen abbauen-10 den Assimilationszustand Gehalten wird, indem diese Arbeitsmi— schungsportion mit einer aus der auf eine Kitratkonzentration von 0,1 bis 7,5 g . l-1 (Gramm Nitrat pro Liter Zusatzlösung), eine Phosphatkonzentration von 1,0 bis 10 g . 1 (Gramm Phosphat pro Liter Zusatzlösung) sowie eine Kohlenstoffquelle 15 in einer Konzentration von je 16,5 - 10 assimilierbaren Kohlen-stoffatomen auf je ein Nitratmolekül eingestellten aus der Pro-düktlösung und Zusätzen gewonnenen Zusatzlösung laufend unter Einhaltung einer Verdünnungsrate von 0,1 bis 0,25 1 - l“1 · h~1 (Liter Zusatzlösung pro Liter Arbeitsmischungsportion pro 2o Stunde ) beschickt und dabei im Belüftungsbereich von 1Ί 5 bis 3,0 1 . I“1 . min.“1 (Liter Luft pro Liter Arbeitsmischungsportion pro Minute), im pH-Bereich von 5,5 bis 8 und im Tempe-raturbereich von 30 C (Grad Celsius ) bis 40 C jeweils auf einem Wertetripel gehalten wird, das hinsichtlich eines großen Ver-25 hältnisses von abgebautem Nitrat zu eingesetztem Kohlenstoff » günstig ist, und indem laufend behandelte Mischung aus der Ar-* -beitsmischungsportion abgenommen wird mit einer solchen Abnahme rate, daß das Volumen der Arbeitsmischungsportion konstant bleibt; und daß die Ziellösung durch Abziehen der Biomasse aus der ab genommenen, behandelten Mischung gewonnen wird.The invention is characterized in that a predetermined working mixture portion of a working mixture obtained from product solution and additives and mixed with the microorganisms decompose into a nitrate, nitrite and ammonium compounds-10 the assimilation state is maintained by this working mixture portion with one from which to a kitrate concentration of 0.1 to 7.5 g. l-1 (grams of nitrate per liter of additional solution), a phosphate concentration of 1.0 to 10 g. 1 (gram of phosphate per liter of additional solution) as well as a carbon source 15 in a concentration of 16.5 - 10 assimilable carbon atoms each on a nitrate molecule adjusted from the product solution and additives obtained from the product solution and additives continuously while maintaining a dilution rate of 0.1 to 0.25 1 - l “1 · h ~ 1 (liter of additional solution per liter of working mixture portion per 2o hour) and in the ventilation area from 1Ί 5 to 3.0 1. I “1. min. “1 (liters of air per liter of working mixture portion per minute), in the pH range from 5.5 to 8 and in the temperature range from 30 C (degrees Celsius) to 40 C, each is kept on a triplet of values that is large Ratio of degraded nitrate to carbon used is »favorable, and by continuously removing the treated mixture from the working mixture portion at such a decrease rate that the volume of the working mixture portion remains constant; and that the target solution is obtained by withdrawing the biomass from the treated mixture.

* s » - ‘ - 2 - A 26 228 « *s Wenn bei dem Wertetripel zwei Größen optimiert sind, ist man erfahrungsgemäß m,it der dritter, Größe sehr variabel. So bann . —1 —1 man zum Beispiel bei einer Belüftung mit 2,0 1 · 1 · mm.* s »-’ - 2 - A 26 228 «* s Experience has shown that when two sizes are optimized in the triplet of values, you are very variable with the third size. So spell it. For example, a ventilation with 2.0 1 · 1 · mm.

und einem pH-Wert von 7,0 die Temperatur zwischen 30°C und 40'°Cand a pH of 7.0 the temperature between 30 ° C and 40 '° C

5 wählen und man kann zum Beispiel bei einer Belüftung von 2,0 •“1 · —1 o 1.1 . mm. und einer Temperatur von 37 C den pH-Wert zwi schen 5,5 und8,0 wählen und man kann als weiteres Beispiel bei einem pH-Wert von 7,0 und einer Temperatur von 37°C die Belüf- . * — n 4- n tung im Bereich·] ,5 bis 3,0 1 . 1 . min. wählen und befin- lodet sich immer noch im Bereich sehr günstiger Betriebsbedingungen.Select 5 and you can, for example, with a ventilation of 2.0 • “1 · —1 o 1.1. mm. and a temperature of 37 C choose the pH between 5.5 and 8.0 and, as another example, the aeration at pH 7.0 and a temperature of 37 ° C. * - n 4- n tion in the range ·], 5 to 3.0 1. 1 . min. choose and is still in the range of very favorable operating conditions.

# , Die Erfindung gelangt zu einem kontinuierlichen Verfahren und nur das ermöglicht es (abgesehen von der einmaligen Anlaufphase, 15 deren Produkte man gegebenenfalls verwerfen kann) ständig innerhalb gewisser Toleranz grenzen die für die angestrebte Wirkung als optimal erkannten Betriebsbedingungen aufrechtzuerhalten und gegebenenfalls nachzuregulieren. Im Gegensatz dazu werden bei einem diskontinuierlichen, chargenweisen, sogenannten Batchver-2o fahren die verschiedensten Behandlungsstadien durchlaufen und man muß die ganze Charge verwerfen, wenn dabei ein Fehler unterläuft. Beim Batchverfahren muß man für jeden Batch die Assimilationsbedingungen neu herbeiführen und das erstreckt sich über Stunden. Dadurch wird der Durchsatz begrenzt und es wird höherer Aufwand 25 an Investition und Personal erforderlich als beim erfinderischen Verfahren.# The invention comes to a continuous process and only this makes it possible (apart from the one-off start-up phase, 15 whose products can be discarded if necessary) to maintain and, if necessary, readjust the operating conditions that are recognized as optimal, within a certain tolerance. In contrast, in a discontinuous, batch-wise, so-called batch process, the most varied treatment stages are run through and the entire batch must be discarded if an error is made. In the batch process, the assimilation conditions have to be re-established for each batch and this takes hours. As a result, the throughput is limited and a higher outlay in terms of investment and personnel is required than in the inventive method.

Die vorgeschriebene Hitratkonzentration wird, wenn sie in der Produktlösung nicht von vornherein vorhanden ist, durch Einengen 3o oder Verdünnen derselben eingestellt. Kohlenstoff und Phosphat wird in der erforderlichen Menge zu gesetzt. Sollte in der Produktlösung eine höhere Konzentration von Phosphat und/oder Kohlenstoff von vornherein vorhanden sein, kann dies unschädlich hingenommen werden. Die Konzentrationen sind so aufeinander 35 abgestimmt, daß der Kohlenstoff und das Phosphat bei der Assimilation des Nitrats von den Mikroorganismen aufgebraucht werden, so daß möglichst keine Reste dieser Zusätze irr die Ziellösung j gelangen.The prescribed hitrate concentration, if it is not present in the product solution from the outset, is adjusted by concentration or dilution. Carbon and phosphate are added in the required amount. If there is a higher concentration of phosphate and / or carbon in the product solution from the outset, this can be safely accepted. The concentrations are matched to one another in such a way that the carbon and the phosphate are used up by the microorganisms when the nitrate is assimilated, so that as far as possible no residues of these additives get into the target solution j.

i - 4 - A 28 228 » ί v Der pH-Wert wird vorzugsweise mit Orthophosphorsäure beziehungs- ! weise Kaliumhydroxyd eingëstellt.i - 4 - A 28 228 »ί v The pH value is preferably related to orthophosphoric acid! wise potassium hydroxide adjusted.

Da es sich bei den zu behandelnden Produktlösungen um aus Natur- \ i 5 Produkten gewonnene Lösungen handelt, deren weitere Lösungsbe standteile von Fall zu Fall unterschiedlich sind, sind auch die optimalen Betriebsbedingungen nicht unter allen Umständen immer die gleichen, liegen, aber inuRahmen der angegebenen Spannen.Since the product solutions to be treated are solutions obtained from natural products, the other components of which differ from case to case, the optimal operating conditions are not always the same under all circumstances, but within the scope of the stated Tighten.

io Die Erfindung ist vorzugsweise anwendbar auf Tabak, sie ist aber nicht auf diese Anwendung beschränkt. Es sind auch Lebensmittel und andere Genußmittel bekannt, die Nitrate, Nitrite und/oder Ammoniumverbindungen enthalten, die durch Umsetzung zu für den menschlichen Genuß unerwünschten Substanzen, zum Bei-15 spiel Nitrosaminen, führen. Dem kann man, entsprechend wie beim ·. Tabak, entge-genwirken, indem man die unerwünschten Verbindungen eliminiert. Wenn diese von vornherein in wässriger Lösung vorliegen, benutzt man diese wässrige Lösung als Produktlösung, andernfalls gelangt man entsprechend wie beim Tabak durch Aus-2o waschen zu einer Produktlösung, in der man die unerwünschten Verbindungen eliminiert und die man dann anschließend dem Ausgangsprodukt wieder zusetzen kann.The invention is preferably applicable to tobacco, but is not limited to this application. Foodstuffs and other luxury foods are also known which contain nitrates, nitrites and / or ammonium compounds which, by reaction, lead to substances which are undesirable for human consumption, for example nitrosamines. You can do this, as in ·. Counteract tobacco by eliminating the unwanted compounds. If these are present in an aqueous solution from the outset, this aqueous solution is used as a product solution, otherwise, as with tobacco, washing out results in a product solution in which the undesired compounds are eliminated and which can then be added to the starting product again .

Beim Tabak kann man sich hinsichtlich der Betriebsbedingungen 25 an der Nitratkonzentration der Produktlösung orientieren, weil * der Prozentsatz der die Nitrate begleitenden Nitrite und Ammoniumverbindungen in den wesentlichen Tabaksorten im Rahmen der-hier erforderlichen Genauigkeit etwa der gleiche ist. Das ist bei Lebensmitteln und anderen Genußmitteln durchaus nicht der Fall.In the case of tobacco, the operating conditions 25 can be based on the nitrate concentration of the product solution, because * the percentage of nitrites and ammonium compounds accompanying the nitrates in the essential types of tobacco is approximately the same within the scope of the accuracy required here. This is by no means the case with food and other luxury foods.

3o Deshalb geht man bei den Betriebsbedingungen statt von einer . Nitratkonzentration von der Konzentration der insgesamt zu eliminierenden Verbindungen, also der Konzentration der Summe aus Nitraten, Nitriten und Ammoniumverbindungen, aus, die Inder Zusatzlösuhg -0,1 bis 7,5 g . 1 betragen sollten. Alle ande-35 l'en Parameter können die gleichen sein wie bei der Tabakbehand-! lung. 1 * » • · ’ - - 5 - A 28 228 \ Die nachfolgenden Ausführungen beziehen sich auf die Anwendung der Erfindung auf Tabak f · sind aber mit den eben gemachten Einschränkungen analog anwendbar auf, die Behandlung von einschlägigen Lebensmitteln und anderen Genußmitteln.3o That is why the operating conditions are used instead of one. Nitrate concentration from the concentration of the compounds to be eliminated altogether, i.e. the concentration of the sum of nitrates, nitrites and ammonium compounds, the Indian solution -0.1 to 7.5 g. Should be 1. All other parameters can be the same as for the tobacco treatment! lung. 1 * »•’ - - 5 - A 28 228 \ The following explanations relate to the application of the invention to tobacco but are applicable analogously with the restrictions just made to the treatment of relevant foods and other stimulants.

Die beim Ansetzen hervorgerufene Assimilation erfolgt vorzugs-weise unter Anwendung eines Inoculum von 30 bis 100 g . 1 (Gramm Kulturvolumen pro Liter Arbeitsmischungsportion). Die Assimilation wird vorzugsweise durchgeführt unter Anwendung einer Mikroorganismenkultur des Enterobacter aerogenes DSM 3ΟΟ53. Dieser stamm ist in der Deutschen Sammlung von Mikroorganismen in der für Patentrechtliehe Offenbarung erforderlichen Form hinterlegt und erhältlich.The assimilation caused by the preparation is preferably carried out using an inoculum of 30 to 100 g. 1 (grams of culture volume per liter of working mix portion). The assimilation is preferably carried out using a microorganism culture of the Enterobacter aerogenes DSM 3ΟΟ53. This strain is stored and available in the German Collection of Microorganisms in the form required for patent law disclosure.

* Die Beschreibung des Stammes ergibt sich aus der nachfolgenden* The description of the strain follows from the following

Aufstellung I. In dieser Aufstellung bedeutet: gut; " " schwach; ,,-n abwesend. ~ ' AUFSTELLUNG I; Charakterisierung der DSM 3ΟΟ53List I. In this list means: good; "" weak; ,, - n absent. ~ 'POSITION I; Characterization of the DSM 3ΟΟ53

Zellform kurze Stäbchen; Begeißelung peritrich; Beweglichkeit + ; Sporenbildung Pigment Gramreaktion'-; 0^ Verhalten aerob +; anaerob +; Catalase +; Oxidase -; Nitritbildung aus Nitrat +; Indol -; Methylrot -; Vosges-Proskauer +;Short chopsticks; Flagellation peritrich; Agility +; Spore formation pigment gram reaction '; 0 ^ behavior aerobic +; anaerobic +; Catalase +; Oxidase -; Nitrite formation from nitrate +; Indole -; Methyl red -; Vosges-Proskauer +;

Citrat +; H^S -; Urease -; Gelatine -; Lysindecarboxylase +; ,Arginindihydrolase -; Ornithindecarboylase +; Phenylalanindesaminase -; Malonat +; Gas aus Glucose +;Citrate +; H ^ S -; Urease -; Gelatin -; Lysine decarboxylase +; , Arginine dihydrolase -; Ornithine decarboylase +; Phenylalanine deaminase -; Malonate +; Gas from glucose +;

Lactose +; Saccharose +; Mannit +; Dulcit Salicin +;Lactose +; Sucrose +; Mannitol +; Dulcit salicin +;

Adonit +; Inosit +; Sorbit +; Arabinose +; Raffinose +; Rhamnöse +.Adonit +; Inositol +; Sorbitol +; Arabinose +; Raffinose +; Rhamnöse +.

r \ « Ι-J - 6 - A 28 228r \ «Ι-J - 6 - A 28 228

Die Erfindung wird nun anhand der beigefügten Zeichnung und * einiger Beispiele naher erläutert.The invention will now be explained in more detail with reference to the accompanying drawing and * some examples.

Die Zeichnung zeigt beispielsweise ein verallgemeinertes Fließ-5 schéma zum erfinderischen Verfahren. Die in der Zeichnung verwendeten Bezugs Ziffern haben die aus der nachfolgenden Aufstellung ii ersichtliche Bedeutung; AUFSTELLUNG II : Produktvorrat 1; Wassertank 2; Vorrat für •jo Zusätze 3; Wascher mit Trenneinrichtung 4; Mischer 5; Behandlungszweig 6; Behandlungszweig 7; Mischer 8; Dosierpumpe S; Arbeitsbehälter 10; Zentrifuge 13; Behandlungs zweig 14; Wiederzugabeeinrichtung 15; Steuereinrichtung 16; pH-Wert-Regier 17; Temperaturregler 18; Belüfter 19; Rührer 20; Antischaumzu-15 geber £1; Rekonstitutionseinrichtung 22 und Trockner 23.The drawing shows, for example, a generalized flow scheme for the inventive method. The reference numerals used in the drawing have the meaning shown in the following list ii; POSITION II: Product stock 1; Water tank 2; Stock for • jo accessories 3; Washer with separator 4; Mixer 5; Treatment branch 6; Treatment branch 7; Mixer 8; Dosing pump S; Working container 10; Centrifuge 13; Treatment branch 14; Playback device 15; Control device 16; pH regulator 17; Temperature controller 18; Aerator 19; Stirrer 20; Anti-foam dispenser £ 1; Reconstitution facility 22 and dryer 23.

Aus dem Produktvorrat '1 gelangt Produkt, zum Beispiel Tabakrippen, mit Wasser aus dem Wassertank 2 in den Wascher 4. Dort werden die löslichen Bestandteile ausgewaschen und gelangen als 2o Produktlösung in den Behandlungs zweig 6. In dem Behandlungszweig wird durch Erhitzen sterilisiert und anschließend wieder gekühlt-From the product supply '1, product, for example tobacco ribs, reaches the washer 4 with water from the water tank 2, where the soluble constituents are washed out and reach the treatment branch 6 as a 2o product solution. In the treatment branch, sterilization is carried out by heating and then again chilled-

Die erforderlichen Zusätze, vornehmlich Phosphate und Glukosé, 25 gelangen aus dem Vorrat 3 mit Wasser in den Mischer 5 und als Lösung in den Behandlungs zweig 7, wo sie durch Erwärmen sterilisiert und dann gekühlt werden können. 1The necessary additives, primarily phosphates and glucose, 25 get from the supply 3 with water into the mixer 5 and as a solution in the treatment branch 7, where they can be sterilized by heating and then cooled. 1

In dem Mischer 8 werden dann die Lösungen aus den beiden Be-3o handlungszweigen 6 und 7 vermischt und gelangen nun über die Dosierpumpe 9 in den Arbeitsbehälter 10. Durch die Einrichtungen 17 bis 20 wird die im Arbeitsbehälter 10 befindliche Arbeitsmischungsportion hinsichtlich pH-Wert und Temperatur laufend eingestellt, dosiert durchlüftet und intensiv gerührt.The solutions from the two treatment branches 6 and 7 are then mixed in the mixer 8 and now pass into the working container 10 via the metering pump 9. The working mixture portion in the working container 10 in terms of pH value and temperature is transferred through the devices 17 to 20 continuously adjusted, dosed, aerated and stirred intensively.

35 Laufend wird dosiert behandelte Arbeitsmischung aus dem Arbeitsbehälter 10 abgezogen, gegebenenfalls pasteurisiert, was in der35 Dosed treated working mixture is withdrawn from the working container 10, optionally pasteurized, which in the

U - LU - L

Zeichnung nicht dargestellt wird, und gelangt dann an die Zen-U trifuge 13. Dort wird die Biomasse abgezogen und weiterer Ver- » * . ' - 7 - A 28 228Drawing is not shown, and then arrives at the Zen-U trifuge 13. There the biomass is withdrawn and further ver »*. '- 7 - A 28 228

Wendung zugeführt, während die verbleibende Flüssigkeit als * Ziellösung in den Behandlungszweig 14 gelangt, wo sie einge- engt wird. Diese Ziellösung, die im wesentlichen alle Bestandteile der Produktlösung enthält, ausgenommen die Nitrate, Ni-5 trite und Ammoniumverbindung, die restlos entfernt wurden, kann nun beliebig weiterverwendet werden, zum Beispiel entsprechend dem Fließschema dem ausgewaschenen, in dem Trockner 23 auf den ursprünglichen Feuchtigkeitsgehalt des Produktes aus dem Produktvorrat 1 getrockneten oder alternativ in der Rekonstitu-10 tionseinrichtung 22 dem zu tabakblattähnlichen Folienstücken rekonstituierten Produkt in der Wiederzugabeeinrichtung 15 durch Aufsprühen oder auf andere Weise zugesetzt werden.Turned supplied, while the remaining liquid as * target solution in the treatment branch 14, where it is concentrated. This target solution, which contains essentially all components of the product solution, with the exception of the nitrates, Ni-5 trite and ammonium compound, which have been completely removed, can now be used as required, for example according to the flow diagram, washed out in the dryer 23 to the original moisture content of the product from the product supply 1 dried or, alternatively, in the reconstitution device 22, added to the product reconstituted into tobacco leaf-like pieces of film in the replay device 15 by spraying or in some other way.

>>

Zum Anfahren wird in den Arbeitsbehälter 10 eine Arbeitsmi-15 ’ schungsportion gegeben aus der Produktlösung mit den erforderlichen Zusätzen und einem Inoculum dès betreffenden Mikroorganismus. Nach etwa 8 bis 20 stunden sind in dieser Arbeitsmischungsportion alle Nitrate, Nitrite und Ammoniumverbindungen abgebaut und der kontinuierliche Betrieb kann beginnen, indem 2o nun die Dosierpumpe 9 eingeschaltet wird, entsprechend der gewünschten Verdünnungsrate und gesteuert, so daß das Volumen der Füllung des Arbeitsbehälters 10, also das der Arbeitsmischungsportion konstant bleibt.To start up, a working portion is added to the working container 10 from the product solution with the necessary additives and an inoculum of the microorganism concerned. After about 8 to 20 hours, all nitrates, nitrites and ammonium compounds are broken down in this working mixture portion and the continuous operation can begin by switching on the metering pump 9 according to the desired dilution rate and controlled so that the volume of the filling of the working container 10, that is, the working mix portion remains constant.

25 Die Behandlung in den Behandlungs zwei gen 6 und 7 erfolgt durch Vorwärmen auf 100°C, Sterilisieren bei 110°C über <40 Minuten Und anschließendes Kühlen auf 30°C. Im-Behandlungszweig 14 erfolgt Vakuumeindampfung. Die Dosierpumpe 9 hat eine Förderleistung von 50 bis 200 l.l“*1 .h"-1. Der Arbeitsbehälter 10 hat 30 ein Fassungsvermögen von 750 1 und ist bei Betrieb zu 2/3 gefüllt. Dementsprechend beträgt das Volumen einer Arbeitsmischungsportion 500 1.25 Treatment in treatment two genes 6 and 7 is carried out by preheating to 100 ° C, sterilizing at 110 ° C for <40 minutes and then cooling to 30 ° C. Vacuum evaporation takes place in the treatment branch 14. The metering pump 9 has a delivery capacity of 50 to 200 l.l "* 1 .h" -1. The working container 10 has a capacity of 750 1 and is 2/3 full during operation. Accordingly, the volume of a working mixture portion is 500 1.

Die Betriebsbedingungen werden dabei, je nach den zu verarbei-35 tenden Produkten und eingesetzten Mikroorganismen, so eingestellt, daß die in der Produktlösung enthaltenen Nitrate, Nitrite und Ammoniumverbindungen restlos eliminiert werden und die im Mischer 5 zugesetzten Zusätze bei dieser Assimilation y gerade auf gebraucht werden.The operating conditions are set, depending on the products to be processed and the microorganisms used, in such a way that the nitrates, nitrites and ammonium compounds contained in the product solution are completely eliminated and the additives 5 added in the mixer are just used for this assimilation y .

! · · * 1. - 8 - A 28 228 l| , I « Vorteilhafte Betriebsbedingungen ergeben sich aus den in der ! j nachfolgenden Aufstellung III aufgeführten Beispielen. Bei ® diesen Beispielen wird von Täbakrippen aus ge gangen und! · · * 1. - 8 - A 28 228 l | , I «Favorable operating conditions result from the in the! j List III below. In ® these examples it is started from Täbakrippen and

Enterobacter aerogenes DSM 30053 als Mikroorganismus eingesetzt. Bei anderen Tabakpflanzenteilen als Ausgangsprodukt und/oder anderen Mikroorganismen sind die Betriebsbedingungen im Rahmen der eingangs angegebenen Angaben zu modifizieren.Enterobacter aerogenes DSM 30053 used as a microorganism. In the case of parts of tobacco plants other than the starting product and / or other microorganisms, the operating conditions must be modified within the scope of the information given at the beginning.

in der Aufstellung als Konzentration bedeutet ein chemisch unter normalen Analysebedingungen nicht mehr wahrnehmbarer Gehalt, der kleiner ist als jeweils 10 ppm bei Kohlenstoff und . Phosphat und kleiner ist als jeweils 1 ppm bei Nitrat, Nitrit und Ammoniumverbindungen.when presented as a concentration, a content which is no longer perceptible chemically under normal analytical conditions means less than 10 ppm each for carbon and Phosphate and is less than 1 ppm each for nitrate, nitrite and ammonium compounds.

Aufstellung III: . - ’’ *List III:. - ’’ *

Beispiel 12345 6 7 8 .... . __^ I . I -1--- —1Example 12345 6 7 8 ..... __ ^ I. I -1 --- -1

Konzentration der Zusatzlösung in g.l an:Concentration of the additional solution in g.l to:

Nitrat 5 1 7,5 4,5 5 7,5 5 5Nitrate 5 1 7.5 4.5 5 7.5 5 5

Nitrit 00 00,50 0 0 0Nitrite 00 00.50 0 0 0

Ammoniumverbindungen 0,05 0,1 0.05 0,05 0.05 0,05 0,05 0,05Ammonium compounds 0.05 0.1 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05

Phosphat 1,2 0,5 1,5 1,2 10 1,2 1,2 1,2: 40 10 60 40 40 50 40 40Phosphate 1.2 0.5 1.5 1.2 10 1.2 1.2 1.2: 40 10 60 40 40 50 40 40

Betriebsbedingungen der Assimilation:Operating conditions of assimilation:

Temperatur (°c) 37 37 37 37 37 37 33 40 pH-Wert 77 7 7 77 7 7Temperature (° c) 37 37 37 37 37 37 33 40 pH 77 7 7 77 7 7

Belüftungsgrad 22222222 <l.i~1.min.~1 )Degree of ventilation 22222222 <l.i ~ 1.min. ~ 1)

Verdünnünasrate 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 —1Dilution rate 0.15 0.15 0.15 0.15 0.15 0.15 0.15 0.15-1

Konzentration der Ziellösung m g.l an:Concentration of the target solution m g.l to:

Nitrat 0 0 0 0 O0.6 0 0Nitrate 0 0 0 0 O0.6 0 0

Nitrit 00 0 0 00 0 0Nitrite 00 0 0 00 0 0

Ammoniumver- 0000 00 00 | bindungen j Phosphat 0,1 0,1 0,1 0,1 8,6 0,1 0,1 0,1Ammonium ver- 0000 00 00 | bonds j phosphate 0.1 0.1 0.1 0.1 8.6 0.1 0.1 0.1

Glukose_ 0 0 0 ‘ 0__0 0__0 0 » . . · - 9 - A 28 228 N.Glucose_ 0 0 0 '0__0 0__0 0 ». . · - 9 - A 28 228 N.

Aufstellung III: FortsetzungLineup III: continued

Beispiel 9 10 11 12 13 14 15Example 9 10 11 12 13 14 15

Konzentration der Zusatzlösung in g.l-1 an:Concentration of the additional solution in g.l-1:

Nitrat 5 5 ! 5 5 5 5 5Nitrate 5 5! 5 5 5 5 5

Nitrit 0000000Nitrite 0000000

Ammoniumver- 4 Bindungen 0,05 0.05 0,05 0 0 0,05 0,05Ammonium compounds 4 0.05 0.05 0.05 0 0 0.05 0.05

Phosphat 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2Phosphate 1.2 1.2 1.2 1.2 1.2 1.2 1.2

Glukose 40 40 40 40 40 404 40Glucose 40 40 40 40 40 404 40

Betriebsbedingungen der Assimilation:Operating conditions of assimilation:

Temperatur (°c) 37 37 37 37 37 37 37 pH-Wert 8 6 7 77 7.5,6 2 2 31,5 2 2 2 (l.l .mm. )Temperature (° c) 37 37 37 37 37 37 37 pH 8 6 7 77 7.5.6 2 2 31.5 2 2 2 (l. L .mm.)

Verdünnungsrate 0,15 0,15 0,15 0,15 0,1 0,22 0,15 (l.l“1.h~1)Dilution rate 0.15 0.15 0.15 0.15 0.1 0.22 0.15 (l.l “1.h ~ 1)

Konzentration der Ziellösung in g.l.“1an:Concentration of the target solution in g.l. “1an:

Nitrat 0 0 0 0 0 0 0Nitrate 0 0 0 0 0 0 0

Nitrit 0 0 0 0 0 0 0 • Ammoniumver- _ bindungen 0 0 0 0 0 0 0Nitrite 0 0 0 0 0 0 0 • Ammonium compounds _ 0 0 0 0 0 0 0

Phosphat 3,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1Phosphate 3.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1

Glukose η n u 0 0 0 0 0 0 Λ / iGlucose η n u 0 0 0 0 0 0 Λ / i

Claims (6)

1t * ' ' - 10 - A 28 228 •1 £ \ Patentansprüche : ί * . ' . , , j 1, Verfahren zur Gewinnung einer von Nitraten, Nitriten und Ammoniumverbindungen im wesentlichen freien Ziellösung aus einer durch Auswaschen von Tabakpflanzenteilen als Tabakextrakt j gewonnenen, wässrigen Produktlösung durch Eliminieren der Ni trate, Nitrite und Ammoniumverbindungen mit durch prokarotische Mikroorganismen (Bakterien) hervorgerufener, metabolischer, aerober Assimilation unter weitgehend schonender Überführung der übrigen Lösungsbestandteile der Prodüktlösung in die Ziellösung, dadurch gekennzeichnet, daß eine vorbestimmte Arbeitsmischungsportion einer aus Produktlösung und Zusätzen gewonnenen und mit den Mikroorganismen versetzten Arbeitsmischung in einen Nitrat, Nitrit "und Ammoniumverbindungen abbauenden Assimilationszustand gehalten wird, indem diese Arbeitsmischungs- * portion mit einer aus der auf eine Nitratkonzentration von —1 0,1 bis 7,5 g . 1 , eine Phosphatkonzentration von 1,0 bis 10 g . 1 sowie eine Kohlenstoff quelle in einer Konzentration von je 16,5 - 10 assimilierbaren Kohlenstoffatomen auf je ein Nitratmolekül eingestellten aus der Produktlösung und Zusätzen gewonnenen Zusatzlösung laufend unter Einhaltung einer Verdünnungsrate von 0,1 bis 0,25 1 . 1 . h beschickt und —1 —1 dabei im Belüftungsbereich von 1,5 bis 3,0 1 .1 . min. , im pH-Bereich von5,5bis 8 und im Temperaturbereich von 30°C bis 40°C jeweils auf einem Wertetripel gehalten wird, das hin-* sichtlich eines großen Verhältnisses von abgebautem Nitrat zu eingesetztem Kohlenstoff günstig ist, und indem laufend behandelte Mischung aus der Arbeitsmischungsportion abgenommen wird mit einer solchen Abnahmerate, daß das Volumen der Arbeitsmischungsportion konstant bleibt; und daß die Ziellösung durch Abziehen der Biomasse aus der abgenoramenen, behandelten Mischung gewonnen wird. 1 _ - s « - π - A 28 228 à A *1t * '' - 10 - A 28 228 • 1 £ \ Claims: ί *. '. ,, j 1, Process for obtaining a target solution essentially free of nitrates, nitrites and ammonium compounds from an aqueous product solution obtained by washing out tobacco plant parts as tobacco extract j by eliminating the nitrates, nitrites and ammonium compounds with those caused by procarotene microorganisms (bacteria), Metabolic, aerobic assimilation with a largely gentle transfer of the remaining solution components of the product solution into the target solution, characterized in that a predetermined working mixture portion of a working mixture obtained from product solution and additives and mixed with the microorganisms is kept in a nitrate, nitrite "and ammonium compounds degrading assimilation state by this working mixture * portion with one of a nitrate concentration of -1 0.1 to 7.5 g. 1, a phosphate concentration of 1.0 to 10 g. 1 and a carbon source in a concentration of 16.5 - 10 assimilable carbon atoms per nitrate molecule adjusted from the product solution and additives obtained from the additional solution continuously while maintaining a dilution rate of 0.1 to 0.25 1. 1 . h and -1-1 in the ventilation range from 1.5 to 3.0 1 .1. min. , in the pH range from 5.5 to 8 and in the temperature range from 30 ° C to 40 ° C each is kept on a triplet of values which is favorable with regard to a large ratio of degraded nitrate to carbon used, and in the mixture which is continuously treated the working mix portion is removed at such a decrease rate that the volume of the working mixture portion remains constant; and that the target solution is obtained by withdrawing the biomass from the abnormal, treated mixture. 1 _ - s «- π - A 28 228 à A * 2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die * Arbeitsmischungsportion mit einer auf eine Nitratkonzentration von 4 bis 6 g . 1 und eine Phosphatkonzentration von 1,1 bis —1 1,5 g . 1 eingestellten Zusatzlösung laufend unter Emhal- —1 —1 tung einer Verdünnungsrate von 0,18 bis 0,22 1 .1 . h beschickt, laufend mit 1,8 bis 2,2 1 . 1~1 . min.""1 belüftet und auf einem pH—Wert zwischen 6,5 bis 7*5 und einer Temperatur zwischen 35°C und 39°C gehalten wird.2. The method according to claim 1, characterized in that the * working mixture portion with a to a nitrate concentration of 4 to 6 g. 1 and a phosphate concentration of 1.1 to -1 1.5 g. 1 set additional solution continuously while maintaining a dilution rate of 0.18 to 0.22 1 .1. h loaded, continuously with 1.8 to 2.2 1. 1 ~ 1. min. "" 1 aerated and maintained at a pH between 6.5 to 7 * 5 and a temperature between 35 ° C and 39 ° C. » 3· Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß die Arbeitsmischungsportion mit einer aus der auf eine Nitratkon-. —1 * zentrat ion von 5,0 g . 1 und auf eine Phosphatkonzentration - Von 1,2 g . 1 sowie eine Glucosekonzentration von 40 g . 1~1 eingestellten Zusatzlösung laufend unter Einhaltung einer Ver- —1 —1 dünnungsrate von 0,2 1 . 1 . h beschickt, laufend mit —1 . —1 2 1.1 . mm. belüftet und auf einem pH-Wert von 7*0 und einer Temperatur von 37°C gehalten wird.»3 · Method according to claim 2, characterized in that the working mixture portion with one from the on a nitrate. —1 * concentration of 5.0 g. 1 and to a phosphate concentration - From 1.2 g. 1 and a glucose concentration of 40 g. 1 ~ 1 additional solution set continuously while maintaining a dilution rate of 0.2 1. 1 . h loaded, running with -1. —1 2 1.1. mm. ventilated and kept at a pH of 7 * 0 and a temperature of 37 ° C. 4. Verfahren nach Anspruch 2 oder 3, dadurch gekennzeichnet, daß die Assimilation durch Anwendung des Enterobacter aerogenes DSM 30053 erfolgt.4. The method according to claim 2 or 3, characterized in that the assimilation is carried out by using the Enterobacter aerogenes DSM 30053. 5. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß als Kohlenstoff quelle ein Kohlenstoff ein- · gesetzt wird aus der Gruppe bestehend aus Glukose, Sucrose, Maltose, Cellobiose, Aethanol, Glycerin, Citrat und Lactose.5. The method according to any one of the preceding claims, characterized in that a carbon is used as carbon source from the group consisting of glucose, sucrose, maltose, cellobiose, ethanol, glycerol, citrate and lactose. 6. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die Zusatzlösung eine Phosphatkonzentration —1 von 1,2 g . 1 hat. 1 verfahren zur Gewinnung einer von Nitraten, Nitriten und Ammoniumverbindungen im wesentlichen freien Ziellösung aus einer Nitrate, Nitrite und/oder Ammoniumverbindungen enthaltenden Produktlösung durch Eliminieren der Nitrate, Nitrite und l Ammoniumverbindungen mit durch prokarotische Mikroorganismen - 12· - A 28 228 * m (Bakterien) hervorgerufener, metabolischer, aerober Assimila- Ition unter weitgehend schonender Überführung der übrigen Lösungsbestandteile der Produktlösung in die Ziellösung, dadurch gekennzeichnet, daß in Anlehnung an Anspruch 1 eine vörbestimm-te Arbeitsmischungsportion einer aus Produktlösung und Zusätzen gewonnenen und mit den Mikroorganismen versetzten Arbeitsmischung in einen Nitrat, Nitrit und Ammoniumverbindungen abbauenden Assimilationszustand gehalten wird, indem diese Arbeitsmischungsportion mit einer auf eine Konzentration der zu . . . —1 * eliminierenden Verbindungen von 0,1 bis 7,5 g · 1 , eine Phosphatkonzentration von 1,0 bis 10 g . 1 sowie eine Kohlenstoff quelle in einer Konzentration von je 16,5 i 10 assimilier- * baren Köhlenstoffatomen auf je ein Molekül der zu eliminierenden Verbindung eingestellten aus der Produktlösung und Zusätzen « gewonnenen Zusatzlösung laufend unter Einhaltung einer Verdün- —1 —1 nungsrate von 0,1 bis 0,25 1 · 1 . h beschickt und dabei —1 —1 im Belüftungsbereich von 1,5 bis 3 1.1 . min. , im pH- Bereich von5»5bis 8 und im Temperaturbereich von 30°C bis 40°C jeweils auf einem Wertetripel gehalten wird, das hinsichtlich eines großen Verhältnisses von abgebauter zu eliminierender Verbindung zu eingesetztem Kohlenstoff günstig ist, und indem laufend behandelte Mischung aus der Arbeitsmischungsportion abgenommen wird mit einer solchen Abnahmeratei daß das Volumen der Arbeitsmischungsportion konstant bleibt; und daß die Ziellösung durch Abziehen der Biomasse aus der abgenommenen, be-. handelten Mischung gewonnen wird. ____ t » 16. The method according to any one of the preceding claims, characterized in that the additional solution has a phosphate concentration -1 of 1.2 g. 1 has. 1 process for obtaining a target solution essentially free of nitrates, nitrites and ammonium compounds from a product solution containing nitrates, nitrites and / or ammonium compounds by eliminating the nitrates, nitrites and 1 ammonium compounds with by procractical microorganisms - 12 · - A 28 228 * m (bacteria ) induced, metabolic, aerobic assimilation with largely gentle transfer of the remaining solution components of the product solution into the target solution, characterized in that, based on claim 1, a predetermined working mixture portion of a working mixture obtained from product solution and additives and mixed with the microorganisms into one Nitrate, nitrite and ammonium decomposition assimilation state is maintained by adding this working mixture portion to a concentration of too. . . —1 * eliminating compounds from 0.1 to 7.5 g · 1, a phosphate concentration from 1.0 to 10 g. 1 as well as a carbon source in a concentration of 16.5 and 10 assimilable * carbon atoms for each molecule of the compound to be eliminated adjusted additional solution obtained from the product solution and additives, while maintaining a dilution rate of 0-1 , 1 to 0.25 1 · 1. h charged with —1 —1 in the ventilation range from 1.5 to 3 1.1. min. , in the pH range from 5 »5 to 8 and in the temperature range from 30 ° C to 40 ° C each is kept on a triplet of values which is favorable with regard to a large ratio of degraded compound to be eliminated to carbon used, and by continuously treating the mixture of Working mix portion is removed with such an acceptance file that the volume of the working mixture portion remains constant; and that the target solution by removing the biomass from the removed, loading. traded mixture is obtained. ____ t »1
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