LU508286B1 - Probe for leukemia detection and design method thereof - Google Patents
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Claims (7)
1. Sonde de détection de leucémie et procédé de conception de celle-ci, caractérisée en ce qu'elle comprend les étapes suivantes : étape 1, criblage et optimisation d'aptamères : les aptamères d'acide nucléique qui se lient spécifiquement aux marqueurs de surface des cellules leucémiques ont été criblés par la technologie SELEX ; les aptamères ont une affinité et une spécificité élevées, et reconnaissent et se lient aux cellules leucémiques sans liaison non spécifique aux cellules normales ; étape 2, marquage fluorescent : les aptamères sélectionnés sont marqués avec des molécules fluorescentes pour former des sondes fluorescentes ; les marqueurs fluorescents émettent des signaux fluorescents après que les aptamères se lient aux marqueurs de surface des cellules leucémiques ; étape 3, modification du nanotransporteur et assemblage de la sonde : les aptamères marqués par fluorescence ont été modifiés sur les nanotransporteurs pour améliorer leur stabilité et leur biocompatibilité ; étape 4, capacités de détection multiples : en ajustant la séquence et les marqueurs fluorescents de l'aptamère, une détection multiplex peut être effectuée, c'est-à-dire que plusieurs marqueurs de cellules leucémiques peuvent être identifiés simultanément.
2. Sonde de détection de leucémie et son procédé de conception selon la revendication 1, caractérisée en ce que le procédé de criblage et d'optimisation d'aptamères d'acide nucléique est le suivant : (1) criblage préliminaire en utilisant la technologie SELEX, des aptamères d'acide nucléique ayant une affinité élevée pour des marqueurs de surface cellulaire leucémique spécifiques ont été initialement criblés ; comprenant plusieurs cycles d'étapes de liaison, de séparation et d'enrichissement pour cribler la séquence d'aptamères optimale à partir d'une bibliothèque d'oligonucléotides aléatoires ; LUS08286 (2) optimisation de la séquence d'aptamères les séquences d'aptamères criblées ont été encore optimisées structurellement et des modifications chimiques ont été introduites pour améliorer la résistance de l'aptamère à la dégradation enzymatique et la stabilité de liaison.
3. Sonde de détection de leucémie et son procédé de conception selon la revendication 1, dans laquelle le marqueur fluorescent : (1) marquage moléculaire fluorescent sélectionner des colorants fluorescents appropriés et marquer les molécules fluorescentes sur l'extrémité 5' ou l'extrémité 3' de l'aptamère optimisé par des liaisons covalentes pour préparer des sondes marquées par fluorescence ; (2) vérification de la sonde la spécificité et la sensibilité de la sonde marquée par fluorescence ont été vérifiées par des expériences in vitro pour garantir que la sonde pouvait reconnaître et se lier spécifiquement aux cellules leucémiques cibles et émettre un signal fluorescent puissant après la liaison.
4. Sonde de détection de leucémie et procédé de conception de celle-ci selon la revendication 1, caractérisée en ce que la modification du nanotransporteur et l'assemblage de la sonde : 1) sélection et préparation des nanotransporteurs sélection d'un matériau nanotransporteur approprié avec des groupes actifs sur sa surface auxquels l'aptamère marqué par fluorescence peut se lier ; 2) modification et assemblage de sondes fluorescentes l'aptamère marqué par fluorescence est modifié sur la surface du nanotransporteur par liaison chimique ou adsorption physique pour former un complexe de sondes nanofluorescentes ; la densité de surface de l'aptamère doit être contrôlée pendant le processus de modification pour garantir que chaque nanotransporteur porte un nombre suffisant d'aptameres ;
3) vérification fonctionnelle de la sonde LUS08286 les fonctions de la sonde nanofluorescente, y compris sa stabilité dans des environnements biologiques complexes et sa capacité a se lier spécifiquement aux cellules leucémiques cibles, ont été vérifiées par des tests de biocompatibilité et des expériences de reconnaissance spécifique in vivo et in vitro.
5. Sonde de détection de leucémie et procédé de conception de celle-ci selon la revendication 1, dans laquelle la capacité de détection multiple : 1) conception d'aptamères multiples différents aptamères d'acide nucléique sont conçus pour divers marqueurs à la surface des cellules leucémiques, et différentes molécules fluorescentes sont respectivement marquées ; chaque molécule fluorescente doit avoir des spectres d'excitation et d'émission différents ; 2) combinaisons de sondes multiples une sonde nanofluorescente multifonctionnelle est préparée en combinant une variété d'aptamères marqués par fluorescence avec des nanotransporteurs ; la sonde peut identifier simultanément plusieurs marqueurs de cellules leucémiques et effectuer une analyse de fluorescence multicolore par microscopie à fluorescence ou cytométrie de flux pour obtenir une détection simultanée de différents sous-types de cellules ou de plusieurs marqueurs ; 3) analyse et identification des données.
6. Sonde de détection de leucémie et son procédé de conception selon la revendication 5, caractérisée en ce que l'analyse et l'identification des données : un logiciel ou des algorithmes dédiés sont utilisés pour analyser et interpréter les signaux fluorescents obtenus à partir de multiples tests afin de distinguer différents types de cellules leucémiques ou d'identifier des sous-populations cellulaires présentant différents profils d'expression de marqueurs.
7. Système de conception de sonde pour la détection de leucémie mettant en œuvre 8508286 sonde de détection de leucémie et son procédé de conception selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que le système de conception de sonde pour la détection de leucémie comprend : un module de criblage est utilisé pour cribler des aptamères d'acide nucléique qui se lient spécifiquement aux marqueurs de surface des cellules leucémiques par la technologie SELEX ; les aptamères ont une affinité et une spécificité élevées, reconnaissent et se lient aux cellules leucémiques sans liaison non spécifique aux cellules normales ; le module de marquage fluorescent est utilisé pour marquer les aptamères sélectionnés avec des molécules fluorescentes pour former des sondes fluorescentes ; le marquage fluorescent émet un signal fluorescent après que l'aptamère se lie au marqueur de surface des cellules leucémiques ; un module de modification, utilisé pour modifier l'aptamère marqué par fluorescence sur le nanotransporteur afin d'améliorer sa stabilité et sa biocompatibilité ; le module de détection multiplex est utilisé pour effectuer une détection multiplex en ajustant la séquence de l'aptamère et du marqueur fluorescent, c'est-à-dire pour identifier simultanément plusieurs marqueurs de cellules leucémiques.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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| LU508286A LU508286B1 (en) | 2024-09-17 | 2024-09-17 | Probe for leukemia detection and design method thereof |
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| LU508286A LU508286B1 (en) | 2024-09-17 | 2024-09-17 | Probe for leukemia detection and design method thereof |
Publications (1)
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| LU508286B1 true LU508286B1 (en) | 2025-03-18 |
Family
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Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
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| LU508286A LU508286B1 (en) | 2024-09-17 | 2024-09-17 | Probe for leukemia detection and design method thereof |
Country Status (1)
| Country | Link |
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2024
- 2024-09-17 LU LU508286A patent/LU508286B1/en active IP Right Grant
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