LU501430B1 - Enrichment, detection and characterization of circulating tumor cells with susd2 and enpp1 - Google Patents

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Claims (19)

PAT 1825 LU Translation of claims into German LU501430 Patentansprüche
1. Verfahren zur Isolierung von zirkulierenden Tumorzellen (CTCs) und/oder disseminierten Tumorzellen (DTCs) aus einer Blut-, Lymph- oder Knochenmark-Probe einer Person, umfassend:
a. Gewinnen einer die zu isolierenden Zellen enthaltenden Probe von der Person,
b. Aussetzen der Zellen gegenüber Anti-SUSD2- oder -ENPP1-Antikôrpern, die mit Partikeln oder einer Matrix mit einer Trennfunktionalität konjugiert sind, für eine Zeit, die ausreicht, damit CTCs und/oder DTCs an die Anti-SUSD2- oder -ENPP1-Antikôrper- konjugierten Partikel oder die Anti-SUSD2- oder -ENPP1-Antikôrper-konjugierte Matrix binden,
C. Trennen der Partikel oder der Matrix von der Probe unter Verwendung der Trennfunktionalität der Partikel oder der Matrix, wodurch CTCs und/oder DTCs isoliert werden.
2. Verfahren nach Anspruch 1, wobei die Partikel magnetische Nanopartikel sind und wobei das Trennen den Einsatz eines Magnetfeldes beinhaltet.
3. Verfahren nach Anspruch 2, wobei die an die magnetischen Nanopartikel konjugierten Anti-SUSD2- oder -ENPP1-Antikôrper mit mindestens einem Fluorophor markiert sind oder mindestens ein Fluorophor enthalten.
4. Verfahren nach Anspruch 1, wobei die Anti-SUSD2- oder -ENPP1-Antikôrper gegen Vollängen-SUSD2 oder -ENPP 1gerichtet sind.
5. Verfahren nach Anspruch 1, wobei die Anti-SUSD2- oder -ENPP1-Antikôrper gegen trunkiertes SUSD2 oder ENPP1 gerichtet sind.
6. Verfahren nach Anspruch 1, wobei die Matrix eine organische Matrix mit Anti- SUSD2- oder -ENPP1-Antikôrpern ist, die über reaktive funktionelle Gruppen gekoppelt sind, und wobei die Trennung Sedimentation durch Schwerkraft oder Zentrifugation beinhaltet.
7. Verfahren nach Anspruch 6, wobei die organische Matrix Agarose ist.
PAT 1825 LU Translation of claims into German LU501430
8. Verfahren nach Anspruch 6, wobei die CTCs oder DTCs einen mesenchymalen Phänotyp aufweisen, und wobei die CTCs oder DTCs mit mesenchymalem Phänotyp (MCTC, mDTC) einen überwiegend oder ausschließlich mesenchymalen Phänotyp oder einen hybriden epithelialen/mesenchymalen Phänotyp (emCTC, emDTC) aufweisen.
9. Verfahren nach Anspruch 1, wobei die Anti-SUSD2- oder Anti-ENPP1-Antikörper- konjugierten Partikel Anti-SUSD2-Antikörper konjugierte Partikel sind.
10. Verfahren nach Anspruch 1, wobei Anti-SUSD2- oder Anti-ENPP1-Antikörper- konjugierten Partikel Anti-ENPP1-Antikôrper konjugierte Partikel sind
11. Verfahren zur Isolierung und Detektion von zirkulierenden Tumorzellen (CTCs) und/oder disseminierten Tumorzellen (DTCs) aus einer Blut-, Lymph- oder Knochenmark- Probe einer Person, umfassend:
a. Entnehmen einer Blut-, Lymph- oder Knochenmarkprobe von der Person,
b. Aussetzen der Zellen gegenüber einem ersten Anti-SUSD2- oder -ENPP1-Antikörper,
c. Isolieren von gebundenen SUSD2- oder ENPP1-positiven Zellen aus der Probe,
d. Aussetzen gebundener SUSD2- oder ENPP1-positiver Zellen gegenüber einem zweiten Antikörper zur Detektion von gebundenen SUSD2- oder ENPP1-positiven Zellen.
12. Verfahren nach Anspruch 11, wobei der zweite Antikörper ein markierter sekundärer Antikörper, der gegen den ersten Anti-SUSD2- oder -ENPP1-Antikörper gerichtet ist, ein zweiter Anti-SUSD2- oder -ENPP1-Antikörper, oder ein markierter zweiter Anti-SUSD2- oder -ENPP1-Antikörper, oder ein markierter sekundärer Antikörper, der gegen einen zweiten gebundenen Anti-SUSD2- oder -ENPP1-Antikörper gerichtet ist, ist.
13. Verfahren nach Anspruch 11, ferner umfassend die Isolierung von T-Zellen aus dem Blut der Person, die genetische Modifikation der T-Zellen zur Erkennung des SUSD2- oder ENPP1-Oberflächenproteins, und die Re-Injektion der genetisch modifizierten T-Zellen in die Person.
PAT 1825 LU Translation of claims into German
14. Verfahren nach Anspruch 11, wobei die Isolierung immunomagnetisch unter LUS01430 Verwendung von Anti-SUSD2- oder -ENPP1-Antikôrpern erfolgt, die direkt oder indirekt an magnetische Nanopartikel gekoppelt sind.
15. Verfahren nach Anspruch 14, wobei mit Anti-SUSD2- oder -ENPP1-Antikôrpern, gekoppelt an magnetische Nanopartikel, markierte Zellen auf eine in einem Magnetfeld positionierte ferromagnetische Fisensäule aufgebracht werden, wobei markierte Zellen in der Säule zurückgehalten werden, und unmarkierte oder Antigen-negative Zellen die Säule passieren und verworfen werden, und wobei die ferromagnetische Fisensäule aus dem Magnetfeld entfernt wird und die markierten Zellen eluiert werden und für eine weitere Analyse verfügbar sind.
16. Verfahren nach Anspruch 11, wobei die zirkulierenden Tumorzellen (CTCs) und/oder disseminierten Tumorzellen (DTCs) einen mesenchymalen Phänotyp oder einen hybriden epithelialen/mesenchymalen Phänotyp aufweisen.
17. Verfahren nach Anspruch 11, wobei der Anti-SUSD2- oder Anti-ENPP1-Antikörper ein Anti-SUSD2-Antikörper ist.
18. Verfahren nach Anspruch 11, wobei der Anti-SUSD2- oder Anti-ENPP1-Antikörper ein Anti-ENPP1-Antikörper ist.
19. Verfahren zur Isolierung und Detektion von zirkulierenden Tumorzellen (CTCs) und/oder disseminierten Tumorzellen (DTCs) aus einer Blut-, Lymph- oder Knochenmark- Probe eines Patienten, umfassend:
a. Entnehmen einer Probe, die die zu testende Zellen enthält,
b. Aussetzen der Zellen gegenüber einem ersten Anti-SUSD2- oder -ENPP1-Antikörper zum Einfangen der Zellen,
c. Isolieren gebundener SUSD2- oder ENPP1-positiver Zellen aus der Probe,
d. Aussetzen gebundener SUSD2- oder ENPP1-positiver Zellen gegenüber einem zweiten Anti-SUSD2- oder -ENPP1-Antikörper und/oder gegenüber einem Anti-Keratin-Antikörper zum Immunfluoreszenznachweis von gebundenen SUSD2- oder -ENPP1-positiven Zellen, wobei der Anti-SUSD2- oder -ENPP1-Antikörper mit einem anderen Fluorophor markiert ist als der Anti-Keratin-Antikörper,
PAT 1825 LU Translation of claims into German e. Klassifizierung von doppelt SUSD2- oder ENPP1/Keratin-positiven isolierten Zellen als LUS01430 eCTC oder emCTC und SUSD2- oder ENPP1-positive/Keratin-negative Zellen als mCTC.
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