LT5740B

LT5740B - FITOCHEMINIU JUNGINIU KOMPOZICIJA, JOS GAVIMO BuDAS IR PANAUDOJIMAS VEZIUI GYDYTI

Info

Publication number: LT5740B
Application number: LT2010062A
Authority: LT
Inventors: Rapolas LIUŽINAS; Karolis JANKEVIČIUS; Virginija BUKELSKIENĖ; Daiva BALTRIUKIENĖ; Aldona BARTUSEVIČIENĖ; Ieva PAUNKSNYTĖ
Original assignee: VšĮ "Grunto valymo technologijos", ,
Priority date: 2010-08-25
Filing date: 2010-08-25
Publication date: 2011-06-27
Also published as: LT2010062A

Abstract

The present invention relates to the composition of phytochemicals fir the treatment of cancer comprising ethereal oils and a solvent, the oils beeing dipenetene, felandren, sequiterpen, caryofilen compounds, the complex of alkaloid piperin present in the fruits of black peppers (Piper nigrum) and/or the complex of phytochemicals carvone, limonene, steroids, flavonoids present in the fruits of caraway (Carum carvi), the solvent being 60-90 ethyl alcohol. The ratio of composition components are as follows (by mass ): mixture of the fruits of black peppers and caraway to 60-96 ethyl alcohol - approximately 1:10. The composition may be used for the treatment of cancer, such as breast cancer, neuroblastoma, lung cancer.

Description

Fitocheminių junginių kompozicija, skirta vėžiui gydyti, apimanti eterinius aliejus ir tirpiklį, kurioje eterinius aliejus sudaro dipenteno, felandreno, seskviterpeno, kariofileno junginiai, alkaloido piperino, esančių juodųjų pipirų (Piper n/ga/m)vaisiuose, kompleksas, ir/arba fitocheminių junginių karvono, limoneno, steroidų, flavonoidų, esančių vaistinio augalo paprastojo kmyno (Carum caivi) vaisiuose, kompleksas, o tirpiklis yra 60-96 % etilo alkoholis, kur kompozicijos komponentai įeina tokiu masės dalių santykiu: juodųjų pipirų ir paprastojo kmyno vaisių mišinio ir 6096 % etilo alkoholio maždaug 1:10. Kompozicija gali būti panaudota gydant tokias vėžio formas kaip krūties vėžys, neuroblastoma, plaučių vėžys.A composition of phytochemical compounds for the treatment of cancer comprising essential oils and a solvent comprising essential oils consisting of dipentene, felandren, sesquiterpene, caryophyllene compounds, a complex of alkaloid piperine present in fruits of black pepper (Piper n / ga / m), and / or phytochemicals. carvone, limonene, steroids, flavonoids contained in the fruits of the medicinal plant caraway (Carum caivi) and the solvent is 60-96% ethyl alcohol, the composition components of which are in the proportion by weight: black pepper and caraway fruit and 6096% ethyl alcohol at about 1:10. The composition may be used in the treatment of cancers such as breast cancer, neuroblastoma, lung cancer.

Išradimas priklauso sveikatos apsaugos sričiai, būtent vaistiniams preparatams, savo sudėtyje turintiems organinių veikliųjų ingredientų ekstraktų derinį ir gali būti panaudojamas gydant tokias vėžio formas kaip krūties vėžys, neuroblastoma, plaučių vėžys.The present invention relates to the field of health care, in particular to pharmaceuticals containing a combination of extracts of organic active ingredients and can be used in the treatment of cancers such as breast cancer, neuroblastoma, lung cancer.

Pasaulinės sveikatos apsaugos organizacijos (PSO) duomenimis kasmet pasaulyje dvylikai milijonų žmonių diagnozuojamas vėžys. 7,6 mln. gyventojų miršta nuo šios ligos. Lietuvoje onkologinėmis ligomis serga apie 80 tūkstančių žmonių. Naujų vėžio atvejų kasmet diagnozuojama per 16 tūkstančių. Gydoma įvairiais būdais. Naudojamas chirurginis gydymo būdas. Jei žmogui negali būti atliekama operacija, tuomet taikoma radioterapija bei chemoterapinis gydymas. Mokslinės organizacijos daug pastangų skiria chemoterapinio metodo tobulinimui. Ieškoma aktyvių fitocheminių junginių, sudaromos vaistinių augalų kompozicijos vėžiui gydyti.According to the World Health Organization (WHO), 12 million people worldwide are diagnosed with cancer every year. $ 7.6 million population is dying of this disease. About 80 thousand people have oncological diseases in Lithuania. Over 16,000 new cases of cancer are diagnosed each year. Treated in many different ways. Surgical treatment is used. If a person cannot undergo surgery, then radiotherapy and chemotherapy are applied. Scientific organizations devote a great deal of effort to improving the chemotherapeutic method. Active phytochemical compounds are being sought, and medicinal herbs are being formulated for the treatment of cancer.

Intensyviausiai šioje srityje dirba kinų specialistai. Jie naudojasi kinų tradicinės medicinos patirtimi (patentai CN 101129527 (A); CN 101214298 (A); CN 101485862 (A)), o taip pat Lietuvoje (patentas LT 5701).Chinese specialists work most intensively in this field. They use the experience of Chinese traditional medicine (patents CN 101129527 (A); CN 101214298 (A); CN 101485862 (A)), as well as in Lithuania (patent LT 5701).

Kinijoje pastaraisiais 2008-2009 metais patentuotos gerokai modifikuotos tradicinės kinų medicinos sukurtos fitocheminių junginių kompozicijos (CN 101455834 (A); CN 101361539 (A); CN 1517030 (A); CN 1337243 (A)). Sukurtos kompozicijos pasižymi onkologines ligas inhibuojančiomis savybėmis, tačiau jų trūkumas yra tas, kad šis inhibavimas yra vertinamas tik patenkinamai (vidutinis inhibavimo lygis).Substantially modified traditional Chinese medicine formulations of phytochemicals (CN 101455834 (A); CN 101361539 (A); CN 1517030 (A); CN 1337243 (A)) have been patented in China in recent years. The formulations developed exhibit oncological disease inhibitory properties, but have the disadvantage that this inhibition is evaluated only satisfactorily (average level of inhibition).

Artimiausia siūlomam techniniam sprendimui yra farmacinė kompozicija, kuriai gaminti panaudojami aromatinių augalų eteriniai aliejai (WO 9 637 210 (A2) patentas). Kompoziciją sudaro Origanum vulgaris, Thymus vulgaris, Thymus zugis, Mentha piperita, Thymus serpilum, Saturea hortensis, Saturea montana, Saturea subricata, Carum corticum, Ocimum gratissimum, Moranda punctata, Mosią japonica ir Salvia officinalis augalų eteriniai aliejai. Kompozicija naudojama kolibaciliozės, dermatomikozės, burnos gleivinės uždegimo, pūliuojančių žaizdų gydymui irkt. atvejais.Closest to the proposed technical solution is a pharmaceutical composition which utilizes aromatic plant essential oils (WO 9 637 210 (A2) patent). The composition comprises essential oils of the plants Origanum vulgaris, Thymus vulgaris, Thymus zugis, Mentha piperita, Thymus serpilum, Saturea hortensis, Saturea montana, Saturea subricata, Carum corticum, Ocimum gratissimum, Moranda punctata, Mosia japonica and Salvia officinalis. The composition is used for the treatment of colibacillosis, dermatomycosis, inflammation of the oral mucosa, purulent wounds and the like. cases.

Šio sprendimo trūkumas yra tas, kad palyginti sudėtingos vaistinių augalų kompozicijos ekstraktas pasižymi siauru veikimo spektru, nerodo biologinio aktyvumo gydant krūties vėžį, neuroblastomą plaučių vėžį.The disadvantage of this solution is that the extract of the relatively complex composition of medicinal plants has a narrow spectrum of action, does not show biological activity in the treatment of breast cancer, neuroblastoma lung cancer.

Siūlomo išradimo užduotis - sukurti preparatą - fitocheminių junginių kompoziciją kuri užtikrintų preparato biologinį aktyvumą efektyviai veiktų krūties vėžio (MCF-7), plaučių vėžio (A549) ir neuroblastomos (N2A) linijų ląsteles, būtų stabili, pasižymėtų teigiamu veikimu žmogaus organizmui, būtų pranašesnė, palyginti su kitais žinomais analogiškais preparatais bei gydymo priemonėmis, ir kurios gamyba būtų nesudėtinga bei preparatas būtų nebrangus.SUMMARY OF THE INVENTION The object of the present invention is to provide a formulation, a composition of phytochemical compounds that provides effective biological activity against breast cancer (MCF-7), lung cancer (A549) and neuroblastoma (N2A) cell lines, is stable, has a positive effect on the human body, compared to other known analogue preparations and therapies, the manufacture of which is simple and inexpensive.

Užduotis išsprendžiama sukuriant fitocheminių gydomųjų junginių kompoziciją efektyviai veikiančią krūties vėžio (MCF-7), plaučių vėžio (A549) ir neuroblastomos (N2A) linijų ląsteles, apimančią eterinius aliejus ir tirpiklį, kur eterinius aliejus sudaro dipenteno, felandreno, seskviterpeno, kariofileno junginiai, alkaloido piperino, esančių Piper nigrum (juodųjų pipirų) vaisiuose, kompleksas, ir/arba fitocheminių junginių karvono, limoneno, steroidą flavonoidą esančių vaistinio augalo Carum carvi (paprastojo kmyno) vaisiuose kompleksas, o tirpiklis yra 60-96 % etilo alkoholis, kur kompozicijos komponentai įeina tokiu masės dalių santykiu Carum carvi bei Piper nigrum ir 60-96 % etilo alkoholio maždaug 1:10.The task is solved by providing a composition of phytochemical therapeutic compounds that are effective in breast cancer (MCF-7), lung cancer (A549), and neuroblastoma (N2A) cell lines comprising essential oils and a solvent comprising essential oils dipentene, felandren, sesquiterpene, caryophyllene. piperine in the fruit of Piper nigrum (black pepper), and / or the phytochemicals in carvone, limonene, a steroid flavonoid in the fruit of the medicinal plant Carum carvi (caraway), and the solvent is 60-96% ethyl alcohol, wherein the components of the composition are included. in a weight ratio of Carum carvi and Piper nigrum to 60-96% ethyl alcohol of about 1:10.

Fitocheminių junginių kompoziciją gaunama tokiu būdu: kaip vaistinę žaliavą ima reikiamą kiekį sausų Piper nigrum (juodąų pipirų) vaisių ir/arba Carum carvi (paprastojo kmyno) vaisią juos susmulkina ir ekstrahuoja 60-96 % etilo alkoholiu, geriau 96 % etilo alkoholiu, per 24-72 vai. 18-20 °C temperatūroje kratant. Gaunamas fitocheminių junginių ekstraktas. Ekstraktui gauti ima minėtus vaisius, kaip vaistinę žaliavą turinčius ne daugiau kaip 12 % drėgmės.The composition of the phytochemical compounds is obtained as follows: it is taken as a raw material of medicinal product Piper nigrum (dry pepper) and / or Carum carvi (caraway) fruit, it is crushed and extracted with 60-96% ethyl alcohol, preferably 96% ethyl alcohol. -72 or. Shaking at 18-20 ° C. An extract of phytochemical compounds is obtained. The extract is obtained by taking the fruits mentioned above, containing not more than 12% moisture as a medicinal raw material.

AA

Fitocheminių junginių alkoholiniam ekstraktui gauti panaudoto^ vaistinio augalo Carum carvi (paprastojo kmyno) ir Piper nigrum (juodųjų pipirų) vaisiai. Taip pat buvo įvertintas kmynų ir pipirų ekstraktų mišinio poveikis chemoterapinio vaisto taksolio veikimo efektyvumui.Fruit of the medicinal plant Carum carvi (caraway) and Piper nigrum (black pepper) used to obtain the alcoholic extract of the phytochemical compounds. The effect of a mixture of cumin and pepper extracts on the efficacy of the chemotherapeutic drug taxol was also evaluated.

Paprastojo kmyno vaisiuose randame 3-7 % eterinio aliejaus, o jame yra karvono, limoneno, dihidrokarveolio, dihidropinolio, dihidrokarvono, linaloolio, karvakrolio, karveolio, neodihidrokarveolio, izodihidrokarveolio. Vaisiuose yra kumarino junginių.Cumin fruits contain 3-7% of essential oil and contain carvone, limonene, dihydrocarveol, dihydropinol, dihydrocarvone, linalool, carvacrol, carveol, neodihydrocarveol, isodihydrocarveol. The fruits contain coumarin compounds.

Kmyno vaisių fitocheminių junginių detali charakteristika.Detailed characterization of phytochemical compounds of cumin fruit.

Carum carvi (paprastasis kmynas) yra dvimetis arba daugiametis žolinis 50-100 cm aukščio augalas. Stiebas status, šakotas. Žiedynas - sudėtinis skėtis. Žiedai maži, balti arba kiek rausvi. Žydi vidutinio klimato juostoje gegužės-birželio mėn. Vaisiai subręsta birželio-liepos mėn. Jie 3-7 mm ilgio ir 1,0-1,5 mm pločio. Paplitęs Europoje ir Azijoje. Kultivuojamas. Augalo vaisiai naudojami maisto ir konditerijos pramonėje, parfumerijoje, buityje. Carum carvi kaip vaistinis augalas yra įtrauktas į daugelio šalių farmakopėjas.Carum carvi (Caraway) is a biennial or perennial herbaceous plant 50-100 cm high. Stem status, branched. Inflorescence - composite umbrella. The rings are small, white or slightly pink. Blooms in temperate climate zone May-June. The fruits ripen in June-July. They are 3-7 mm long and 1.0-1.5 mm wide. Common in Europe and Asia. Cultivated. The fruits of the plant are used in the food and confectionery industry, perfumery, household. Carum carvi as a medicinal plant is included in the pharmacopoeias of many countries.

Pateikiame detalesnį kmynų (Carum carvi) vaisiuose nustatytų biologiškai aktyvių cheminių junginių sąrašą:Here is a more detailed list of biologically active chemical compounds found in Carum carvi fruits:

- eteriniai aliejai (nuo 2,6 iki 7,67 proc.) (KappueB M. O., Φβρμηκοχημηχ Ηεκοτορυχ οφιιροΜηοηΗΗΗΒΐχ pacTeHHH φπορΜ TypKMeHHH, Auixa6aą, 1973, 154 c.; CoSojieacKaa JI. A., TiopHHa E. B., TycbKOBa H. H. ΘφΗροΜΗοπιηΐΗΐ,ιβ paremia ^ajibHero BocTOKa, Hoboch6hpck, 1972, c. 188; Karrer W. Konstitution und Vorkommen der organischen Pflanzenstoffe, Basei; Stuttgart, 1958, 1207 s). Juos sudaro (proc.): karvonas 41-60, limonenas 30 bei transdihidrokarvonas, eis- dihidrokarvonas, ižo- dihidrokarvonas, dihidrokarveolas, cis-karveolas, trans-karveolas, γ-terpinenas, karvakrolas, izodihidrokarveolas, neodihidrokarveolas, neoizodihidrokarveolas, perilo alkoholis, dihidropinolas, acetaldehidas, diacetilas, a- ir βpinenai, sabinenas, mircenas, ot-fenandrenas, mentenas, linaloolas, triciklenas, a- ir β-tuijonai, β-fenchenas, kamienas, karenas a-terpinenas, β-felandrenas, β-kariofilenas, β-kadinenas, terpinolenas, timolas, trans-anetolas, kamforos, terpinenolo-4, petrozelino rūgštis (Embong M. B., Hudziger D. Molnar S., Essential oils from species grown in Alberta: Caraway oil (Carum carvi) H Can J. Plant. Sci., 1977, vol. 57, N 2, p. 543-549; Ikeda R. M.et ai. The monoterpene hydrocarbon composition on some essential oils // J. Food. Sci., 1962, vol 27, N5, p. 455-458; Karrer W, Konstitution und Vorkommen der organischen Pflanzenstoffe, Basei, Stuttgart, 1958, 1207 s.; Masada Y. Analysis on essential oils by gas chromatography and mass-spektrometry, New York, 1976, 334 p.; Rothbacher H., Suten F. Ūber Hydroxylverbindungen dės Kummel oils //Planta med., 1975, Bd. 28, H. 2, s. 112-123; Salveson A., Baerheim Svendsen A. Gas liųuid chromatographic separation and indication of the constituents of caraway seed oil // Planta med., 1976, Bd 30, H.l, p. 93-96; Schantz M., Huhtikengas A. Ūber die Bildung von Limonen und Carvon in Kummel - Carum carvi II Phytochemistry, 1971, vol 10, N8, p. 1787LT 5740 B- Essential Oils (2.6 to 7.67%) (KappueB MO, Φβρμηκοχημηχ Ηεκοτορυχ οφιιροΜηοηΗΗΗΒΐχ pacTeHHH φπορΜ TypKMeHHH, Auixa6aą, K.H.a.H.a.H.a.K.H.a.K.H.a.H.a.H.a.H.a.H.a.H.a.H.a.a.H.a.H.a.H.a.a.H.a.H.a.H.a.H.a.H.a.H.H. ajibHero BocTOKa, Hoboch6hpck, 1972, c. 188; Karrer W. Constitution and Vommunity Derorganisation, Basei; Stuttgart, 1958, 1207 s. They contain (%): carvone 41-60, limonene 30 and transdihydrocarvone, eis-dihydrocarvone, iodo-dihydrocarvone, dihydrocarveol, cis-carveol, trans-carveol, γ-terpinene, carvacrol, isodihydrocarveol, neodihydrocarveol, neodihydrocarveol, neodihydrocarveol, dihydropinol, acetaldehyde, diacetyl, α- and β-pinene, sabinene, myrcene, ot-phenandren, mentene, linalool, tricyclene, α- and β-thiene, β-fenchene, strain, karen α-terpinene, β-felandren, β-caryophyllene , β-cadine, terpinolene, thymol, trans-anethole, camphor, terpinenol-4, petroselic acid (Embong MB, Hudziger D. Molnar S., Essential oils from species grown in Alberta: Caraway oil (Carum carvi) H Can J. Plant Sci., 1977, vol. 57, N 2, pp. 543-549; Ikeda RMet et al., The monoterpene hydrocarbon composition on some essential oils // J. Food. Sci., 1962, vol. 27, N5, p. 455-458; Karrer W, Constitution and Vorkommen der organischen Pflanzenstoffe, Basei, Stuttgart, 1958, 1 207 p .; Masada Y. Analysis on essential oils by gas chromatography and mass spectrometry, New York, 1976, p. 334; Rothbacher H., Suten F. Uber Hydroxylverbindungen Kummel Oils // Planta Med., 1975, Bd. 28, H. 2, s. 112-123; Salveson A., Baerheim Svendsen A. Gas chromatographic separation and indication of the constituents of caraway seed oil // Planta Med., 1976, Bd 30, H.l, p. 93-96; Schantz, M., Huhtikeng, A. Uber die Bildung von Limonen und Carvon in Kummel - Carum carvi II Phytochemistry, 1971, vol 10, N8, p. 1787LT 5740 B

1793; Zderkiewicz T. Zawartošc oleiku w rožnych fazach dojrzalosci owocow kminku di-i tetraploidalnego - Carum carvi L. //Actą agrobot., 1971, vol. 24, Nl, p. 121-122).1793; Zderkiewicz T. Zawartošc oleiku w rožnych fazach dojrzalosci owocow kminku di-i tetraploidalnego - Carum carvi L. // Act agrobot., 1971, vol. 24, Nl, p. 121-122).

- steroidai - stigmasterinas, palmitatas ir stigmasterino stearatas (Kartnig Th., Scholz G. Ūber einige Lipoid-Inhaltstoffe aus den Friichten von Pimpinella anisum und Carum carvi L. // Fette, Seifen, Anstrich mittel, 1969, Bd 71, H. 4, s. 276-280).- steroids - stigmasterol, palmitate and stigmasterol stearate (Kartnig Th., Scholz G. Uber et al., Lipoid-Inhaltstoffe aus den Friichten von Pimpinella anisum und Carum carvi L. // Fette, Seifen, Anstrich mittel, 1969, Bd 71, H. 4 , pp. 276-280).

- fenolkarboninės rūgštys ir jų dariniai: 4-P-D-gliukopiranoziloksibenzoinė (Dirks V., Hermann K., 4-([l-Glukopyranosyloxy)-benzoic acid, a characteristic phenolic constituent of the Apiaceae // Phytochemistry, 1984, vol. 23, N 8, p. 1811-1812).- Phenolic carbonic acids and their derivatives: 4-PD-glucopyranosyloxybenzoic (Dirks V., Hermann K., 4 - ([l-Glucopyranosyloxy) benzoic acid, a characteristic phenolic constituent of the Apiaceae // Phytochemistry, 1984, vol. 23). N 8, pp. 1811-1812).

- kumarinai - 0,02-0,48 proc. (BanyųKaa A. Γ., TycEKOBa H, A., Coąepx<aHHe KyiviapjiHOB b cn6npcKHX npeACTaBHTeJiax ceM. 30hthhhmx // PacT. pecypcbi, 1972, t. 8, ββιπ. 4, c. 547-554; KappbHeB M. O. ΦΒρΜΒΚΟΧΗΜΕΗ HeKOTOpbIX 3(į)HpOMaCJIHHHbIX paCTeHHH (juiopbi TypKMeHHH, Ainxa6aą, 1973,154 c.): umbeliferonas, skopolitinas, herniarinas.- coumarins 0.02-0.48 percent. (BanyaiKaa A. Γ., TycEKOBa H, A., Coąepx <aHHe KyiviapjiHOB b cn6npcKHX npeACTaBHTeJiax ceM. 30hthhhmx // PacT. Pecypcbi, 1972, vol. 8, ββιπ. 4, c. 547-554B; Kapp. (to) HpOMaCJIHHHbIX paCTeHHH (juiopbi TypKMeHHH, Ainxa6aą, 1973,154 c.): umbeliferone, scopolitin, herniarin.

- flavonoidai - 0,98-1,24 proc. (Kunzemann J., Hermann K. Isolierung und Identifizierung der Flavon(ol)-O-glykoside in Kūmmel (Carum carvi L.), Fenchel (Foeniculum vulgare Mill.), Anis (Pimpinella anisum L.) und Koriander (Coriandrum sativum L.) und von Flavon-C-glykosiden im Anis, Z. Lebensmitteluntersuch. und Forsch., 1977, Bol 164, H. 3, s. 194-200): kvercetino 3gliukoronidas, izokvercizinas, rutinas, kvercetino 3-0-kofeoilgliukozidas, kempferolio 3gliukozidas.- flavonoids 0.98-1.24 percent. (Kunzemann J., Hermann K. Isolation and Identification of Flavon (O) -O-glycoside in Kumel (Carum carvi L.), Fenchel (Foeniculum vulgare Mill.), Anis (Pimpinella anisum L.) and Coriander (Coriandrum sativum L). .) and von Flavon-C-glycosiden im Anis, Z. Lebensmitteluntersuch und Forsch., 1977, Bol 164, H. 3, pp. 194-200): quercetin 3-glucuronide, isoquercin, rutin, quercetin 3-0-caffeoyl-glucoside, campferol 3-glucoside.

- riebalai - 18,4-21,18 proc. Jų sudėtyje yra (proc.): angliavandeniliai 0,2; trigliceridai 66; laisvosios riebalų rūgštys 5,1 (petrozelino, palmitino, stearino, linoleno,oleino). (3apafici<aa E. H., BopriciOK K). Γ. HccneąoBaHite >KHpHbix khcjiot πβοαοβ TMHHa - Carum carvi L. h airnca Pimpinella anisum L. /HeKOTopbie Bonpocbi (jjapMaijHH, KneB, 1956, c. 185-189; OrenaHeHKo Γ. A., TycaKOBa C. JĮ., YMapoB A. Y., JlanH^bi ceMHH Carum carvi h Foeniculum vulgare // Xhmm πρηροΛ. coeąnH., 1980, N 6, c. 827-828; Hondelmann W. Das Vorkommen einer ungewohlingen Fettsaure, der Petroselinsaure, in der Familie der Doldengewachse als Ausganspunkt fur die Entwicklung neuer Olfrūchte // Landbauforsch. Včlkenrode, 1985, Jd 35, H. 4/, s. 185-190; Kleiman R., Spencer C. F., Search for new industrial oils: Umbelliferae seed oils rich in petroselinic acid H J. Americ. Oil Chem. Soc, 1982, vol. 59, N 1, p. 29-38).- fat 18.4-21.18 percent. They contain (per cent): hydrocarbons 0.2; triglycerides 66; free fatty acids 5,1 (petrozelin, palmitic, stearic, linolenic, oleic). (3apafici <aa E. H., BopriciOK K). Γ. HccneąoBaHite> KHpHbix khcjiot πβοαοβ TMHHa - Carum carvi L. h airnca Pimpinella anisum L. / HeKOTopbie Bonpocbi (jjapMaijHH, KneB, 1956, c. 185-189; OrenaHeHKo.J.K.A.K.A.A.A., T. Ya, J.K.A.A., T. Ya. bi ceMHH Carum carvi h Foeniculum vulgare // Xhmm πρηροΛ. coeąnH., 1980, N 6, c 827-828; Hondelmann W. Das Vorkommen einer ungewohlingen Fettsaure, der Petroselinsaure, in der Familie der Doldengewachse als Ausg. // Landbauforsch, Vlkenrode, 1985, Jd 35, H. 4 /, pp. 185-190; Kleiman, R., Spencer, CF, Search for new industrial oils: Umbelliferae seed oils rich in petroselinic acid H J. Americ., Oil Chem. Soc, 1982, vol 59, N 1, pp. 29-38).

Juodųjų pipirų (Piper nigrum) vaisiuose (Fructus Piper nigri) yra 5-9 % alkaloido piperino (piperidino darinys), kuris sukelia deginantį pojūtį. Vaisiuose yra 0,9-2,5 % eterinio aliejaus. Jame randama dipenteno, felandreno, seskviterpeno, kariofileno junginių.Fruit Piper nigri (Piper nigrum) contains 5-9% of the alkaloid piperine (a derivative of piperidine) which causes a burning sensation. The fruit contains 0.9-2.5% of essential oil. It contains dipentene, felandren, sesquiterpene, caryophyllene.

Piper nigrum priklauso Piperaceae šeimos augalams. Tai liana, turinti orines šaknis, kuriomis prisitvirtina prie atramos. Vaisiai bręsta lėtai. Laikas nuo žydėjimo iki pilno vaisiaus subrendimo užtrunka 4-6 mėnesius. Vaisiai renkami nesubrendę. Džiovinami saulėje pajuosta. Sultingas minkštimas susiraukšlėja. Turi specifinį kvapą. Skonis - deginantis.Piper nigrum belongs to plants of the family Piperaceae. It is a liana with aerial roots that attach to the support. The fruits ripen slowly. It takes 4-6 months from flowering to full maturity. The fruits are harvested immature. Dried in sunshine. The juicy pulp creases. Has a specific odor. Taste - burning.

Trumpai pateikiame tiriamus plaučių vėžį ir neuroblastomą.Briefly, we present lung cancer and neuroblastoma.

Plaučių vėžys - liga, kurios metu plaučių audinio ląstelės pradeda nekontroliuojamai augti ir daugintis. Lietuvoje, kaip ir daugelyje pasaulio šalių, plaučių vėžys labiausiai paplitęs tarp vyrų. Moterys taip pat serga, tik daug rečiau. Tai viena pagrindinių vyrų mirštamumo nuo vėžio priežasčių. Kasmet nuo plaučių vėžio pasaulyje miršta apie 1 mln. žmonių. Lietuvoje kiekvienais metais nustatoma apie 1200 naujų plaučių vėžio atvejų. 2006 m. duomenimis Lietuvoje 100 000 gyventojų užregistruota 1 317 plaučių vėžio atvejai (1 119 vyrų ir 198 moterų). Sergamumas plaučių vėžiu tiesiog proporcingas tabako rūkymui, kuris kasmet didėja. Plaučių vėžio rizika priklauso nuo surūkytų cigarečių skaičiaus: rizika gali padidėti net iki 200 kartų, lyginant su nerūkančiais žmonėmis. Nerūkančiųjų sergamumą plaučių vėžiu (tokių yra apie 15 %) lemia genetiniai faktoriai (Gorlova OY, Weng SF, Zhang Y et ai. (2007). Aggregation of cancer among relatives of never-smoking lung cancer patients. International Journal of Cancer 121 (1): 111-118; Hackshaw AK, Law MR, Wald NJ (1997). The accumulated evidence on lung cancer and environmental tobacco smoke. British Medical Journal 315 (7114): 980-988), radono dujos, asbestas (0‘Reilly KM: Mclaughlin AM, Beckett WS, Sime PJ (2007). Asbestos-related lung disease. American Family Physician 75 (5): 683688), oro tarša (Kabir, Z; Bennett K, Clancy L (2007). Lung cancer and urban air-pollution in Dublin: a temporal association? Irish Medical Journal 100 (2): 367-369; Coyle, YM; Minahjuddin AT, Hynan LS, Minna DJ (2006). An ecological study of the association of metai air pollutants with lung cancer incidence in Texas. Journal of Thoracic Oncology 1 (7): 654661; Chiu, HF; Cheng MH, Tsai SS et ai. 2006). Outdoor air pollution and female lung cancer in Taiwan Inhalation Toxicology 18 (13): 1025-1031) bei pasyvus rūkymas (Carmona, RH (2006). The Health Conseųuences of Involuntary Exposure to Tobacco Smoke: A Report of the Surgeon General. U. S. Department of Health and Human Services.Lung cancer is a disease in which cells in the lung tissue begin to grow and grow uncontrollably. In Lithuania, as in many countries around the world, lung cancer is most prevalent among men. Women are also sick, but much less frequently. It is one of the leading causes of cancer mortality in men. About 1 million people die of lung cancer worldwide every year. people. Every year in Lithuania about 1200 new cases of lung cancer are detected. 2006 According to the data of 2003, there were 1,317 lung cancer cases per 100,000 population (1,119 men and 198 women). The incidence of lung cancer is simply commensurate with tobacco smoking, which is increasing every year. The risk of lung cancer depends on the number of cigarettes smoked: the risk can increase up to 200 times compared to non-smokers. Non-smoking morbidity in lung cancer (about 15%) is determined by genetic factors (Gorlova OY, Weng SF, Zhang Y et al. (2007). Aggregation of cancer among relatives of non-smoking lung cancer patients. International Journal of Cancer 121 (1) ): 111-118; Hackshaw AK, Law MR, Wald NJ (1997) The accumulated evidence on lung cancer and environmental tobacco smoke (British Medical Journal 315 (7114): 980-988), radon gas, asbestos (0'Reilly) KM: Mclaughlin AM, Beckett WS, Sime PJ (2007) Asbestos-related lung disease American Family Physician 75 (5): 683688), air pollution (Kabir, Z; Bennett K, Clancy L (2007). Lung cancer and Urban Air Pollution in Dublin: A Temporal Association? Irish Medical Journal 100 (2): 367-369; Coyle, YM; Minahjuddin AT, Hynan LS, Minna DJ (2006) An ecological study of the year air pollutants with lung cancer incidence in Texas, Journal of Thoracic Oncology 1 (7): 654661; Chiu, HF; Cheng MH, Tsai SS et al., 2006). Outdoor Air Pollution and Female Lung Cancer in Taiwan Inhalation Toxicology 18 (13): 1025-1031) and Passive Smoking (Carmona, RH (2006). The Health Conventions of Involuntary Exposure to Tobacco Smoke: A Report from the Surgeon General, US Department of Health and Human Services.

http://www.surgeongeneral.gov/library/secondhandsmoke. „Secondhand smoke exposure causes disease and premature death in children and adults who do not smoke“. Catelinois O, Rogel A, Laurier D, et ai. (2006). Lung cancer attributable to indoor radon exposure in France: impact of the risk models and uncertainty analysis. Environ. Health Perspect. 114(9): 1361-6). Svarbus faktorius - tinkama mityba. Nustatyta, kad tinkamai maitinantis rizika susirgti plaučių vėžiu galima sumažinti 20-33 procentais. Plaučių vėžys dažniausiai diagnozuojamas per vėlai, todėl itin sunkiai gydomas. Pagrindiniai plaučių vėžio tipai: smulkialąstelinis plaučių vėžys (SCLC smnall cell lung carcinoma) ir nesmulkialąstelinis plaučių vėžys (NSCLC - non-small cell lung carcinoma). Šis skirstymas yra labai svarbus skiriant gydymą. NSCLC dažniausiai gydomas chirurginiu būdu, o SCLC geriau pasiduoda chemoterapijai ir radioterapijai ((Vaporciyan, AA; Nesbitt JC, Lee JS etai. (2000). Cancer Medicine. B C Decker. Pp. 1227-1292). Priklausomai nuo stadijos, penkerius metus išgyvena apie 14 procentų sergančiųjų (Minna, JD (2008). Harrison's Principles of InternalMedicine (17th ed.). McGraw-Hill. Pp. 551-562).http://www.surgeongeneral.gov/library/secondhandsmoke. Secondhand smoke exposure causes disease and premature death in children and adults who do not smoke. Catelinois O, Rogel A, Laurier D, et al. (2006). Lung cancer attributable to indoor radon exposure in France: impact models of risk and uncertainty analysis. Environ. Health Perspect. 114 (9): 1361-6). An important factor is proper nutrition. It has been found that a properly nourished risk of lung cancer can be reduced by 20-33 percent. Lung cancer is often diagnosed too late, making it extremely difficult to treat. The main types of lung cancer are small cell lung cancer (SCLC) and non-small cell lung carcinoma (NSCLC). This distinction is very important in the treatment. NSCLC is usually treated surgically, and SCLC is better suited to chemotherapy and radiotherapy ((Vaporciyan, AA; Nesbitt JC, Lee JS et al. (2000). Cancer Medicine. BC Decker. Pp. 1227-1292). Depending on the stage, survives for five years. in about 14 percent of those affected (Minna, JD (2008). Harrison's Principles of Internal Medicine (17th ed.). McGraw-Hill. pp. 551-562).

Neuroblastoma - tai piktybinis simpatinės nervų sistemos navikas. Neuroblastoma sudaro 8-10 % visų piktybinių vaikų navikų ir yra dažniausias navikas pirmaisiais gyvenimo metais. Didžiajai daliai neuroblastoma diagnozuojama iki 5 metų amžiaus. Berniukai serga dažniau nei mergaitės.Neuroblastoma is a malignant tumor of the sympathetic nervous system. Neuroblastoma accounts for 8-10% of all malignant pediatric tumors and is the most common tumor in the first year of life. Most neuroblastomas are diagnosed before 5 years of age. Boys get sick more often than girls.

Neuroblastomos etiologija nėra visiškai aiški. Kai kuriais atvejais nustatoma paveldima neuroblastoma, kurią sukelia reta mutacija 16 chromosomoje anaplastinės limfomos kinazės gene (Mosse YP, Laudenslager M, Longo L, et ai (2008). Identification of ALK as a major familial neuroblastoma predisposition gene. Nature 455 (7215): 930-5). Lygiagrečiai yra tiriami įvairūs faktoriai, galintys nulemti neuroblastomos vystymąsi. Tai rūkymas, alkoholio, įvairių medikamentų vartojimas ar darbas nėštumo metu su toksiškais chemikalais (Olshan, AF, Bunin, GR (2000) Epidemiology of Neuroblastoma. In: Brodeur, GM, Sawada, T. Tsuchida, Y. Voute, PA eds., Neuroblastoma, Elsevier, Amsterdam, pp 33-39. Menegaux F, Olshan AF, Neglia JP, Pollock BH, Bondy ML (2004). Day care, childhood infections, and risk of neuroblastoma. Am. J. EpidemiolAS) (9): 843-51). Kiti tyrimai ieško ryšio tarp neuroblastomos ir infekcijų ankstyvame amžiuje, hormonų, apvaisinimą skatinančių medikamentų vartojimo (Olshan AF, et ai. Hormone and Fertility Drug Ūse and Risk of Neuroblastoma: A Report from the Children’s Cancer Group and the Pediatric Oncology Group, Am J Epidemiol 1999; 150: 930-8) ar motinos vartotų plaukų dažų (McCall EE, et ai. (2005) Maternal hair dye ūse and risk of neuroblastoma in offspring. Cancer causes and Control 16,6: 743:8; Hech JE, Ritz B, Hung RJ, Hashibe M, Boffetta P (2009) The epidemiology of neuroblastoma: a review. Paediatr Perinai Epidemiol 23 (2): 125-43). Neuroblastomos gydymui naudojamas platus spektras priemonių - chemoterapija, chirurginis gydymas, radioterapija, kaulų čiulpų ir hematopoetinių kamieninių ląstelių transplantacija, 13-ra-retinoinės rūgšties bei imunoterapijos taikymas, tačiau, nepaisant to, vaikų, sergančių pažengusia ligos forma, išgyvenimas yra prastas.The etiology of neuroblastoma is not entirely clear. In some cases, hereditary neuroblastoma is caused by a rare mutation on chromosome 16 in the anaplastic lymphoma kinase gene (Mosse YP, Laudenslager M, Longo L, et al. (2008). Identification of ALK as a major familial neuroblastoma predisposition gene. Nature 455 (7215): 930-5). In parallel, various factors that may determine the development of neuroblastoma are being investigated. These include smoking, alcohol, various medications, or working with toxic chemicals during pregnancy (Olshan, AF, Bunin, GR (2000) Epidemiology of Neuroblastoma. In: Brodeur, GM, Sawada, T. Tsuchida, Y. Voute, PA eds., Neuroblastoma, Elsevier, Amsterdam, pp. 33-39 Menegaux F, Olshan AF, Neglia JP, Pollock BH, Bondy ML (2004) Day care, childhood infections, and risk of neuroblastoma (Am. J. EpidemiolAS) (9): 843-51). Other studies look at the association between neuroblastoma and infections at an early age, the use of hormones, fertilization medication (Olshan AF, et al., Hormone and Fertility Drug Usa, and Risk of Neuroblastoma: A Report from the Children's Cancer Group and Am J Epidemiol 1999; 150: 930-8) or maternal hair dye (McCall EE, et al. (2005) Maternal hair dye in the mustache and risk of neuroblastoma in offspring. Cancer Causes and Control 16.6: 743: 8; Hech JE, Ritz B, Hung RJ, Hashibe M, Boffetta P (2009) The epidemiology of neuroblastoma: a review. Pediatric Perins Epidemiol 23 (2): 125-43). A wide range of treatments are used to treat neuroblastoma, including chemotherapy, surgery, radiotherapy, bone marrow and hematopoietic stem cell transplantation, 13-retinoic acid, and immunotherapy, but the survival of children with advanced disease is nevertheless poor.

Cistinės Abrazinės krūties ligos - mastopatijos patogenezę sudaro nuo fiziologinės normos nukrypstantys krūties audinio pokyčiai. Šie pokyčiai yra proliferacinio (vešėjimo) ir neproliferacinio (regresinio) pobūdžio. Liga prasideda difuzine ir progresuoja į mazginę (židininę) formą. Supiktybėti gali visų rūšių proliferacinė ir kai kurių rūšių neproliferacinė mastopatija. Įvairių formų mastopatija serga iki 45 % (ypač vyresnio amžiaus) moterų.Cystic abrasive breast disease - The pathogenesis of mastopathy consists of abnormal changes in the breast tissue. These changes are of a proliferative (non-proliferative) and non-proliferative (regressive) nature. The disease begins with diffuse and progresses to nodular (focal) form. All types of proliferative and some types of non-proliferative mastopathy can be confused. Various forms of mastopathy affect up to 45% of women (especially the elderly).

Mastopatijai gydyti (proliferacinė operuojama) vis dažniau naudojami nespecifiniai fitoterapiniai preparatai. Pastaruoju metu (XXI a. pirmajame dešimtmetyje) fitocheminių junginių paieškomis ypač aktyviai užsiima kinų specialistai. Jie naudojasi per ilgą laiką sukaupta kinų tradicinės medicinos patirtimi ir sudaro įvairius vaistinių augalų mišinius mastopatijai gydyti. Žinomos 4-6 tokios vaistinių augalų kompozicijos (patentai: CN 101129527 (A), CN 1657069 (A), CN 1757297 (A), CN 1895441 (A)), į kurių sudėtį įeina Bupleurum, Jasminum, Reynotria, Polygonatum, Ziziphus, Carthamus genčių vaistiniai augalai. Be šių, yra 7-10 vaistinių augalų kompozicijų [patentai CN 101214298 (A); CN 1861183 (A); CN 1493349 (A); CN 1726989 (A); CN 1385202 (A); CN 1883552 (A); CN 101361805 (A); CN 101224249 (A); CN 100998845 (A)], kuriose vyrauja tokie vietinių vaistinių augalų genčių augalai: Angelica, Amygdalus, Scrophularia, Forsythia, Cmnamomum, Pistacia, Myrrhis, Cyperus, Paeonia, Diervilla, Salvia, Philodendron, Rheum, Silphium, Scutellaria, Sesamum, Xeranthemum augalai. Pastaraisiais metais Kinijoje patentuota dar 24-35 vaistinių augalų rūšių kompozicijų įvairiems mastopatijos tipams gydyti (patentai: CN 101485862 (A), 2009-07-22 (A); CN 1695694 (A); CN 1759899 (A)). Šiose kompozicijose be jau paminėtų augalų randame Polygonum, Astragalus, Ραηαχ, Corydalis, Fritillaria, Prunella, Brassica ir kitų genčių vaistinius augalus. Šios kompozicijos pasižymi mastopatiją stabdančiomis savybėmis, tačiau jų trūkumas yra tai, kad stabdymas vertinamas tik patenkinamai (vidutinis inhibavimo lygis).Non-specific phytotherapeutic agents are increasingly used in the treatment of mastopathy (proliferative surgery). Recently (in the first decade of the 21st century), Chinese specialists have been particularly active in the search for phytochemical compounds. They draw on the long-standing experience of Chinese traditional medicine and form various herbal blends to treat mastopathy. 4-6 such medicinal herb formulations are known (patents: CN 101129527 (A), CN 1657069 (A), CN 1757297 (A), CN 1895441 (A)) containing Bupleurum, Jasminum, Reynotria, Polygonatum, Ziziphus, Medicinal plants of the genera Carthamus. In addition to these, there are 7 to 10 herbal compositions [patents CN 101214298 (A); CN 1861183 (A); CN 1493349 (A); CN 1726989 (A); CN 1385202 (A); CN 1883552 (A); CN 101361805 (A); CN 101224249 (A); CN 100998845 (A)], which includes the following indigenous medicinal plants: Angelica, Amygdalus, Scrophularia, Forsythia, Cmnamomum, Pistacia, Myrrhis, Cyperus, Paeonia, Diervilla, Salvia, Philodendron, Rheum, Silphium, Scutumaria, Sesamum . In recent years, another 24-35 compositions of medicinal herb species have been patented in China for the treatment of various types of mastopathy (Patents: CN 101485862 (A), 2009-07-22 (A); CN 1695694 (A); CN 1759899 (A)). In these compositions, besides the plants already mentioned, we find medicinal plants of Polygonum, Astragalus, Ραηαχ, Corydalis, Fritillaria, Prunella, Brassica and other genera. These compositions exhibit mastopathy inhibitory properties, but have the disadvantage that the inhibition is evaluated only satisfactorily (average level of inhibition).

Mastopatijai gydyti vartojami ir vidutinio klimato zonos vaistinių augalų mišiniai (RU patentas 2 066 168 Cl), kuriuos sudaro Matricaria recutita, Melilotus officinale, Leonurus cardiaca, Padus avium, Epilobium angustifolium, Achillea, millefolium, Origanum vulgare, Butula pendula (pumpurai). Šios paskirties preparatui gauti taip pat naudojamos kerpės Cetraria islandica (RU patentas 2034561 Cl). Žinomas gydymo būdas, kai naudojamos radono procedūros (vonia) su kintančių bangų lazerio terapija (RU patentas 2 234 958 C2) veikiant pieno liaukas, o taip pat milimetrinio diapazono elektromagnetinės bangos, veikiant jomis biologiškai aktyvius VC-17 ir RP-6 taškus (RU patentas 2 257 921 C2). Šiomis priemonėmis padidinamas nespecifinis organizmo atsparumas bei slopinama patogenezė, tačiau šis poveikis irgi yra ribotas.Mixtures of herbaceous plants (RU patent 2,066,168 Cl) consisting of Matricaria recutita, Melilotus officinale, Leonurus cardiaca, Padus avium, Epilobium angustifolium, Achillea, millefolium, Origanum vulgare, Butula pendula (buds) are also used for mastopathy treatment. Lichens Cetraria islandica (RU patent 2034561 Cl) are also used for this preparation. Known treatment using radon procedures (bath) with alternating-wave laser therapy (RU patent 2 234 958 C2) on mammary glands as well as millimeter-range electromagnetic waves acting on biologically active points VC-17 and RP-6 (RU patent 2,257,921 C2). These measures increase non-specific resistance in the body and inhibit pathogenesis, but these effects are also limited.

Taip pat žinoma farmacinė kompozicija, kuriai gaminti panaudojami aromatinių augalų eteriniai aliejai (WO 9 637 210 (A2) patentas). Kompoziciją sudaro Origanum vulgaris, Thymus vulgaris, Thymus zugis, Mentha piperita, Thymus serpilum, Saturea hortensis, Saturea montana, Saturea subricata, Carum corticum, Ocimum gratissimum, Moranda punctata, Mosią japonica ir Salvia officinalis augalų eteriniai aliejai. Kompozicija naudojama kolibaciliozės, dermatomikozės, burnos gleivinės uždegimo, pūliuojančių žaizdų gydymui ir kt. atvejais.Also known is a pharmaceutical composition which utilizes aromatic plant essential oils (WO 9 637 210 (A2) patent). The composition comprises essential oils of the plants Origanum vulgaris, Thymus vulgaris, Thymus zugis, Mentha piperita, Thymus serpilum, Saturea hortensis, Saturea montana, Saturea subricata, Carum corticum, Ocimum gratissimum, Moranda punctata, Mosia japonica and Salvia officinalis. The composition is used for the treatment of colibacillosis, dermatomycosis, inflammation of the oral mucosa, purulent wounds and others. cases.

Indijoje tyrėjų grupė ištyrė (WO patentas 2004/067018 Al) vaistinių augalų Carum carvi (paprastasis kmynas), Zingiber officinale (imbieras tikrasis), Cuminum cyminum (kmyninis kuminas) ir Piper nigrum (juodasis pipiras) kompozicijos ekstrakto sinergetinį poveikį įvairiems gydomiesiems preparatams, siekdami padidinti jų veikimo efektyvumą. Į šių preparatų sąrašą buvo įtraukti onkologijos praktikoje naudojami metotreksatas (methotrexate) ir 5-fluorouracilas (5-fluorouracil). Vaistinių augalų kompozicijos ekstraktas pagerino nurodytų cheminių preparatų veikimą, t.y., pasižymėjo sinergetiniu veikimu.In India, a team of investigators (WO patent 2004/067018 Al) investigated the synergistic effect of the extract of the medicinal herbs Carum carvi (caraway), Zingiber officinale (ginger true), Cuminum cyminum (caraway cumin) and Piper nigrum (black pepper) on various therapeutic preparations. increase their operational efficiency. These preparations included methotrexate (methotrexate) and 5-fluorouracil (5-fluorouracil) used in oncology practice. The extract of the medicinal plant composition improved the performance of the indicated chemicals, i.e., exhibited a synergistic effect.

Pateikiamo išradimo tiriamasis darbas suskirstytas į dvi dalis. Pirmoje dalyje įvertintas j uodų ų pipirų (Piper nigrum) ir kmynų (Carum carvi) bei jų ekstraktų mišinio poveikis krūties vėžio (MCF-7), plaučių vėžio (A549) bei neuroblastomos (N2A) linijų ląstelėms. Antroje dalyje įvertintas juodųjų pipirų ir kmynų ekstraktų mišinio poveikis chemoterapinio vaisto - taksolio veikimo efektyvumui.The research work of the present invention is divided into two parts. The first part evaluated the effect of a mixture of black pepper (Piper nigrum) and caraway (Carum carvi) and their extracts on breast cancer (MCF-7), lung cancer (A549) and neuroblastoma (N2A) cell lines. The second part assesses the effect of a mixture of black pepper and cumin extracts on the effectiveness of the chemotherapeutic drug - taxol.

Naudotos metodikos.Methodologies used.

Kmynų ir juodųjų pipirų fitocheminių junginių kompozicijos gavimas.Preparation of the composition of phytochemical compounds of cumin and black pepper.

Kmynų ir juodųjų pipirų vaisiai mechaniškai susmulkinami (sumalami). Susmulkinta masė ekstrahuojama 60-96 % etilo alkoholiu 24 vai., kambario temperatūroje purtant. Naudotas kmynų ar juodųjų pipirų ir etilo alkoholio santykis maždaug 1:10 (1 g susmulkintų kmynų ar juodųjų pipirų vaisių ekstrahuota 10 ml 60-96 % etilo alkoholiu).The fruits of cumin and black pepper are mechanically crushed (ground). The pulp is extracted with 60-96% ethyl alcohol for 24 hours with shaking at room temperature. The ratio of cumin or black pepper to ethyl alcohol was approximately 1:10 (1 g of crushed cumin or black pepper fruit was extracted with 10 ml of 60-96% ethyl alcohol).

Siekiant įvertinti vaistiniuose augaluose esančių augalų veikliųjų medžiagą tirpstančių etilo alkoholyje, suminį poveikį vėžinių ląstelių gyvybingumui, buvo gauta fitocheminių junginių kompozicija. Tuo tikslu, pradiniai kmynų bei juodųjų pipirų ekstraktų įvairūs tūriai buvo supilami kartu ir praskiedžiami ląstelių auginimo terpe iki 1 mL. Tokiu būdu buvo paruoštos 25 įvairios kmynų ir juodųjų pipirų ekstraktų koncentracijos, kuriomis buvo veikiamos tiriamos vėžinių linijų ląstelės (1 lentelė). Gautos kompozicijos koncentracija buvo išreikšta dimensija ųL/ml, reiškiančia ekstrakto tūrį (pL) 1-me mL terpės.In order to evaluate the cumulative effect of plant-active substances in medicinal herbs on soluble ethyl alcohol, the composition of phytochemical compounds was obtained. To this end, the initial volumes of cumin and black pepper extracts were mixed together and diluted to 1 mL in cell culture medium. In this way, 25 different concentrations of cumin and black pepper extracts were prepared to act on the cells of the cancer lines under investigation (Table 1). The concentration of the resulting formulation was expressed as a dimension ųL / ml, representing the volume of extract (pL) in 1 mL of medium.

Eteriniai aliejai yra svarbi paprastojo kmyno {Carum carvi) bei juodųjų pipirų {Piper nigrum) sudėtinė dalis. Paprastojo kmyno vaisiuose jų randama 3-7 proc., o juoduosiuose pipiruose iki 3 proc. Kadangi eteriniai aliejai yra tirpūs etanolyje, todėl etilo alkoholiu ekstrahuojant smulkintus šių augalų vaisius, aliejai ištirpsta jame. Eterinių aliejų ektrakcija etanoliu yra priimtinas metodas, naudojamas išgaunant ekstraktus ir iš kitų prieskoninių ir/ar vaistinių augalų (Solano et ak, 2006). Tokiu būdu gautame ekstrakte be kitų medžiagų turi būti ir eterinių aliejų dalis. Bendroje dalyje ir skiriamosios dalies pradžioje vaistiniuose augaluose Carum carvi bei Piper nigrum randama eterinių aliejų koncentracija ir jų sudėtis apibrėžiama naudojantis literatūros duomenimis. Šiame darbe mes nekėlėme tikslo nustatyti tikslias eterinių aliejų koncentracijas mūsų gautame ekstrakte, nes be eterinių aliejų tirtuose vaistiniuose augaluose randama ir daugiau veikliųjų etilo alkoholyje tirpstančių medžiagą kurių suminis poveikis vėžinių ląstelių gyvybingumui ir buvo tirtas. Todėl kiekybinė sudėtis yra apibrėžiama augalo vaisių masės santykiu su ekstrakcijai naudotu etilo alkoholio tūriu - 1:10, t.y. 1 g smulkintų vaisių ekstrakcijai naudota 10 mL etilo alkoholio.Essential oils are important constituents of Carum carvi and Piper nigrum. They are found in 3-7% of caraway fruits and up to 3% in black pepper. Because essential oils are soluble in ethanol, the oils dissolve in ethanol when extracted with the crushed fruits of these plants. Ethanol extraction of essential oils is an acceptable method used to extract extracts from other herbs and / or medicinal plants (Solano et al., 2006). The extract thus obtained must contain, among other substances, a proportion of the essential oils. In the general section and at the beginning of the section, the concentration and composition of the essential oils found in the medicinal plants Carum carvi and Piper nigrum are determined from the literature. In this work, we did not aim to determine the exact concentrations of essential oils in the extract we obtained, because in addition to the essential oils, the active substances soluble in ethyl alcohol are found in the investigated medicinal plants and their total effect on cancer cell viability has been investigated. Therefore, the quantitative composition is defined by the ratio of the weight of the fruit of the plant to the volume of ethyl alcohol used for extraction, 1:10, i.e. 10 mL of ethyl alcohol was used to extract 1 g of crushed fruit.

Išradime pateikiama sąvoka „fitocheminių junginių kompozicija“ suprantama, kaip kmyno {Carum carvi) bei juodųjų pipirų {Piper nigrum) veikliųjų medžiagą jų tarpe ir eterinių aliejų, tirpių etilo alkoholyje derinys. Sąvoka „kmyno {Carum carvi) ekstraktas arba juodųjų pipirų {Piper nigrum) etanolinis ekstraktas“ nepilnai atspindi paraiškoje pateikiamus duomenis, nes atskiri kmynų ir pipirų ekstraktai buvo naudoti tik palyginamajai analizei.The term "composition of phytochemical compounds" as used in the present invention is understood to mean a combination of Carum carvi and Piper nigrum active ingredients and essential oils soluble in ethyl alcohol. The term "carum carvi extract or ethanol extract of black pepper {Piper nigrum)" does not fully reflect the data given in the application as the individual caraway and pepper extracts were used for comparative purposes only.

Naudotos ląstelės bei jų auginimo sąlygosUsed cells and growing conditions

Darbe buvo vertintas spiritinio juodųjų pipirų vaisių ekstrakto poveikis krūties vėžio (MCF-7), plaučių vėžio (A549) bei neuroblastomos (N2A) linijų ląstelėms. Ląstelių linijos gautos iš ATCC (American Type Culture Collection). Ląstelės augintos Iscove modifikuotoje Dulbeco terpėje (IMDM), praturtintoje 10 % fetalinių veršelių serumu ir antibiotikais - penicilinu (100 V V) ir streptomicinu (100 ųm/ml). Ląstelės persėjamos 2-3 kartus per savaitę, jų monosluoksnį disperguojant EDTA-tripsino (4:1) mišiniu. Ląstelės auginamos 37 °C temperatūroje, aplinkoje esant 5 % CO2 ir 95 % drėgmei.The effect of alcoholic extract of black pepper fruit on breast cancer (MCF-7), lung cancer (A549) and neuroblastoma (N2A) cell lines was evaluated. Cell lines were obtained from ATCC (American Type Culture Collection). The cells were grown in Iscove's modified Dulbec's medium (IMDM) enriched in 10% fetal calf serum and antibiotics penicillin (100 U) and streptomycin (100 µm / ml). Cells are seeded 2-3 times a week by dispersing their monolayer with EDTA-trypsin (4: 1). Cells were grown at 37 ° C, 5% CO 2 and 95% humidity.

Kmynų ir juodųjų pipirų vaisių ekstrakto mišinio poveikio ląstelių gyvybingumui tyrimas Dieną prieš poveikį tiriamos ląstelės išsėjamos maždaug 200 ląstelių/ml. suspensijos tankiu į 96 duobučių polistirolinę plokštelę. Po 24 vai., ląstelėms pradėjus daugintis, auginimo terpė pakeičiama nauja terpe, kurioje yra pridėta skirtingos koncentracijos kmynų ir juodųjų pipirų ekstraktų mišinio. 1 lentelėje pateikiama tyrimuose naudotų kmynų ir juodųjų pipirų vaisių ekstraktų koncentracijų kombinacijos. Lygiagrečiai buvo tiriamas ir ekstragento - etilo alkoholio bei pavienių kmynų bei juodųjų pipirų ekstraktų poveikis tiriamų ląstelių proliferacijai ir gyvybingumui. Abiem atvejais poveikio trukmė - 24 vai.Cell viability assay of cumin and black pepper fruit mixture The day before exposure, cells are plated at approximately 200 cells / ml. suspension density into a 96-well polystyrene plate. After 24 hours, as the cells begin to proliferate, the culture medium is replaced with a new medium containing a mixture of cumin and black pepper extracts of varying concentrations. Table 1 shows the combinations of cumin and black pepper fruit extract concentrations used in the studies. In parallel, the effect of extragens - ethyl alcohol and extracts of cumin and black pepper on the proliferation and viability of the cells was investigated. In both cases, the exposure duration is 24 hours.

Ląstelių proliferacinio aktyvumo įvertinimasEvaluation of cell proliferative activity

Tiriamų ląstelių proliferacija buvo vertinama naudojant MTT reagentą. Metodas paremtas gyvų ląstelių mitochondrijų fermentų gebėjimu tirpų geltonos spalvos MTT [3-(4,5-dimetiltiazol-2il)-2,5-difeniltetrazolio bromidą] redukuoti iki violetinės spalvos netirpius kristalus formuojančio formazano. Gyvų ląstelių skaičius yra tiesiogiai proporcingas susidariusio produkto - formazano kiekiui, kuris įvertinamas spektrofitometriškai 570 nm bangos ilgyje, gautus netirpius kristalus ištirpinus etanolyje. Proliferacijos įvertinimui naudojamas 0,2 mg/ml MTT tirpalas fosfatiniame buferyje, kurio 50 μΐ/cm² pilama ant ląstelių monosluoksnio prieš tai pašalinus auginimo terpę. Inkubuojama 1 vai., susidariusios nuosėdos tirpinamos etanoliu, kurio pilama 100 μΐ/cm². Optinis tankis matuojamas spektrofitometriškai, 570 nm bangos ilgyje.Proliferation of test cells was evaluated using MTT reagent. The method is based on the ability of living cell mitochondrial enzymes to reduce soluble yellow MTT [3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide] to purple-insoluble crystalline formazan. The number of viable cells is directly proportional to the amount of product formed, formazan, which is estimated spectrophotometrically at 570 nm by dissolving the insoluble crystals in ethanol. For the proliferation assessment, a 0.2 mg / ml MTT solution in phosphate buffer, 50 μΐ / cm ^{2, is} added to the cell monolayer after the culture medium is removed. Incubate for one hour and dissolve the precipitate in ethanol at 100 μΐ / cm ² . The optical density is measured spectrophotometrically at 570 nm.

Kmynų ir juodųjų pipirų vaisių ekstrakto slopinamojo poveikio MCF-7 linijos ląstelių proliferacijai tyrimas.Investigation of the inhibitory effect of cumin and black pepper fruit extract on cell proliferation of the MCF-7 line.

Pirmiausia buvo tiriama kmynų ir juodųjų pipirų ekstrakto mišinio poveikis krūties vėžio MCF7 linijos ląstelių proliferacijai. Tuo tikslu buvo paruoštos 25 įvairios kmynų ir juodųjų pipirų ekstraktų koncentracijos (1 lentelė).The effect of a mixture of cumin and black pepper extract on the proliferation of breast cancer MCF7 line was first investigated. For this purpose 25 different concentrations of cumin and black pepper extracts were prepared (Table 1).

lentelėtable

Pipirai, pL/mL Kmynai, pL/mL Pepper, pL / mL Caraway, pL / mL 2 2 4 4 6 6th 8 8th 10 10th 10 10th 2:10 2:10 4:10 4:10 6:10 6:10 8:10 8:10 10:10 10:10 20 20th 2:20 2:20 4:20 4:20 6:20 6:20 8:20 8:20 10:20 10:20 30 30th 2:30 2:30 4:30 4:30 6:30 6:30 8:30 8:30 10:30 10:30 40 40 2:40 2:40 4:40 4:40 6:40 6:40 8:40 8:40 10:40 10:40 50 50 2:50 2:50 4:50 4:50 6:50 6:50 8:50 8:50 10:50 10:50

Lentelėje išraiška 2:10 reiškia, kad l-ame mL ląstelių auginimo terpės yra 2 pL etanolinio pipirų ekstrakto bei 10 pL analogiško kmynų ekstrakto. (Analogiškai suprantamos ir kitos išraiškos: 4:10,6:10 irt. t.).The expression 2:10 in the table means that 1 µl of cell culture medium contains 2 pL of ethanol pepper extract and 10 pL of similar cumin extract. (Other expressions are understood by analogy: 4: 10,6: 10, etc.).

Lentelėje pateiktomis ekstraktų mišinio koncentracijomis buvo veikiamos tiriamos ląstelės. Gauti rezultatai pateikiami Fig. 1 - Fig. 5 diagramose.The concentrations of mixture of extracts in the table were exposed to the test cells. The results obtained are shown in Figs. 1 - FIG. In the 5 charts.

Fig. 1 diagramose A-E parodyta veikliųjų kmynų ir juodųjų pipirų ekstraktų koncentracijų poveikio MCF-7 linijos ląstelių proliferacijai tyrimas. Ekstraktų mišinio (pipirai - 8 ir 20 pL/mL ir kmynai - 40 ir 50 pL/mL) slopinamasis poveikis MCF-7 linijos ląstelių proliferacijai gerai išreikštas - 75-80 %.FIG. Figures 1 A to E show the effect of concentrations of active cumin and black pepper extracts on cell proliferation of the MCF-7 line. The inhibitory effect of the mixture of extracts (pepper 8 and 20 pL / mL and cumin 40 and 50 pL / mL) on cell proliferation of the MCF-7 line was well characterized - 75-80%.

Analogiški tyrimai buvo atlikti su plaučių vėžio A549 linijos ląstelėmis.Similar studies were performed on lung cancer A549 line cells.

Fig. 2 diagramose A-D parodyti gauti veikliųjų kmynų ir juodųjų pipirų ekstraktų koncentracijų poveikio A459 linijos ląstelių proliferacijai tyrimo duomenys. Iš pateiktų duomenų matyti, kad juodųjų pipirų ir kmynų mišinio poveikis plaučių vėžio A549 linijos ląstelėmis yra daug didesnis nei atskirų medžiagų ekstraktų veikimas, t. y. mišinio poveikis yra maždaug 80 %.FIG. Figures 2 A-D show the results of a study of the effect of concentrations of active cumin and black pepper extracts on cell proliferation of the A459 line. The data presented show that the effect of the mixture of black pepper and cumin on the lung cancer A549 lineage cells is much greater than that of the individual substance extracts, i. y. the effect of the mixture is approximately 80%.

Taip pat buvo ištirtas kmynų ir juodųjų pipirų ekstraktų naudojamų kartu su taksoliu, slopinamasis poveikis MCF-7 ir A549 linijos ląstelių proliferacijai. Buvo ištirta, kaip juodųjų pipirų ir kmynų ekstraktų mišinys pagerina chemoterapinio preparato taksolio veikimą. Žinoma, kad taksolis - plačiai naudojamas, mikrovamzdelius stabilizuojantis ir slopinantis jų dinamiką, chemoterapinis agentas, galintis įvairiose ląstelėse indukuoti programuotą ląstelių žūtį, priklausomai nuo p53 būklės. Jo veikimas pasireiškia tiesioginiu poveikiu mitochondrijoms, cit c išlaisvinimu, GTP sujungiančio baltymo aktyvacija ir NF-κΒ/ΙκΒ-α signalinio kelio aktyvacija. Taksolis (paclitaxel) indukuoja programuotą ląstelių žūtį aktyvuodamas kaspazę-7, o ne kaspazę-3. Be to, lygiagrečiai aktyvuojamos JNK, p38 MAPK ir ERK, tačiau jų aktyvacija yra nesusijusi su apoptozės indukacija (Okano et ai., 2001).The inhibitory effect of cumin and black pepper extracts, when used in combination with taxol, on the proliferation of MCF-7 and A549 cell lines was also investigated. It has been investigated how a mixture of black pepper and cumin extracts improves the action of the chemotherapeutic taxol. Taxol is known to be widely used, stabilizing and inhibiting the dynamics of microvasculature, a chemotherapeutic agent capable of inducing programmed cell death in various cells, depending on the state of p53. Its action is mediated through direct action on mitochondria, release of cyt c, activation of GTP-binding protein, and activation of the NF-κΒ / ΙκΒ-α signaling pathway. Taxol (paclitaxel) induces programmed cell death by activating caspase-7 rather than caspase-3. In addition, JNK, p38 MAPK, and ERK are activated in parallel, but their activation is unrelated to the induction of apoptosis (Okano et al., 2001).

Tyrimų metu taksolis buvo pridedamas 1 vai. prieš paveikiant ląsteles su juodų ų pipirų ir kmynų ekstraktų mišiniu.During the studies, taxol was added for 1 hour. before exposure to cells with a mixture of black pepper and cumin extracts.

Fig. 3 diagramose A-B pateikiami duomenys, gauti veikliųjų kmynų ir juodųjų pipirų ekstraktų koncentracijų poveikio taksolio veikimui MCF-7 linijos ląstelėse tyrimas.FIG. Figures 3 A-B present data obtained from a study of the effect of active cumin and black pepper extract concentrations on taxol activity in MCF-7 line cells.

Fig. 4 diagramose A-B pateikiami duomenys, gauti veikliųjų kmynų ir juodųjų pipirų ekstraktų koncentracijų poveikio taksolio veikimui ir A459 linijos ląstelėse tyrimas.FIG. Figures 4 A-B present data obtained from the study of the effect of active cumin and black pepper extract concentrations on taxol activity and A459 lineage cells.

Iš pateiktų duomenų matyti, kad juodųjų pipirų ir kmynų ekstraktų mišinys padidina taksolio veikimą, tačiau suminis poveikis dažniausiai yra mažesnis už juodųjų pipirų ir kmynų ekstraktų mišinio veikimą, kai nėra taksolio.The data presented show that the blend of black pepper and cumin extracts enhances the action of taxol, but the overall effect is usually less than that of the blend of black pepper and cumin extracts in the absence of taxol.

Taip pat buvo ištirtas kmynų vaisių ekstrakto slopinamasis poveikis neuroblastomos (N2A) linijos ląstelių proliferacijai.The inhibitory effect of cumin fruit extract on cell proliferation of the neuroblastoma (N2A) line was also investigated.

Atliktas kmynų vaisių 60-96 % alkoholinio ekstrakto (kmynų tinktūros) poveikis neuroblastomos (N2A) linijų ląstelėms.The effect of cumin fruit 60-96% alcohol extract (cumin tincture) on neuroblastoma (N2A) lineage cells was performed.

Fig. 5 diagramoje parodytas kmynų vaisių ekstrakto slopinamasis poveikis neuroblastomos (N2A) linijos ląstelių proliferacijai. Ekstrakto poveikis neuroblastomos ląstelių proliferacijai yra gerai išreikštas ir siekia iki 80 %.FIG. Figure 5 shows the inhibitory effect of cumin fruit extract on cell proliferation of the neuroblastoma (N2A) line. The effect of the extract on neuroblastoma cell proliferation is well expressed up to 80%.

Tyrimai parodė, kad kmynų vaisių ekstraktas, pasižymintis netoksiniu arba silpnai išreikštu toksiniu veikimu, intensyviai stabdo neuroblastomos (N2A) ląstelių dauginimąsi. Jis tinka neuroblastomos profilaktikai ir gydymui.Studies have shown that cumin fruit extract, which is non-toxic or mildly toxic, intensively inhibits the proliferation of neuroblastoma (N2A) cells. It is suitable for the prevention and treatment of neuroblastoma.

Tyrimais taip pat įsitikinta, kad ekstraktų mišinio (pipirai+kmynai) slopinamasis poveikis MCF7 linijos ląstelių proliferacijai gerai išreikštas. Reikšmingi rezultatai gauti tiriant slopinamąjį kmynų ir juodųjų pipirų ekstraktų mišinio poveikį A549 linijos ląstelių proliferacijai, Nustatyta, kad mišinio poveikis yra daug didesnis nei atskirų fitocheminių junginių veikimas. Taip pat parodyta, kad chemoterapinio preparato taksolio gydomasis veikimas MCF-7 ir A549 ląstelių linijoms pagerėja, kai jis naudojamas kartu su kmynų ir juodųjų pipirų alkoholiniu ekstraktu.The studies also confirmed that the inhibitory effect of the extract mixture (pepper + cumin) on cell proliferation of the MCF7 line was well expressed. Significant results were obtained by investigating the inhibitory effect of a mixture of cumin and black pepper extracts on cell proliferation of the A549 line. It is also shown that the therapeutic effect of the chemotherapeutic agent taxol on MCF-7 and A549 cell lines is improved when used in combination with cumin and black pepper alcohol extract.

Ši gausi informacija verta to, kad būtų išbandyta klinikos sąlygomis.This wealth of information is well worth being tested in a clinical setting.

Claims

DEFINITION OF INVENTION

CLAIMS 1. A composition of phytochemical compounds for the treatment of cancer, comprising essential oils and a solvent, wherein the essential oils comprise dipentene, felandren, sesquiterpene, caryophylene compounds, a complex of alkaloid piperine present in the fruits of black pepper (Piper nigrum), and / or a combination of phytochemicals carvone, limonene, steroids, flavonoids in the fruits of the medicinal plant caraway (Carum carvi), and the solvent is 60-96% ethyl alcohol, wherein the components of the composition are in a weight ratio of black pepper and caraway; 60-96% ethyl alcohol at about 1:10.

2. A process for the preparation of a composition according to claim 1, wherein the composition is prepared by extracts of phytochemical compounds, wherein the dry fruits of Piper nigrum and / or Carum carvi, containing not more than 12% moisture, crush and extract 60-96% ethyl alcohol in 24-72 hours. 18-20 ° C with shaking.

Use of a composition according to claims 1 and 2 for inhibiting cell proliferation of the MCF-7 line, wherein the composition comprises a mixture of pepper extract 8-20 pL / mL and cumin extract 40-50 pL / mL.

Use of a composition according to claims 1 and 2 for inhibiting cell proliferation of the A549 line, wherein the composition comprises a mixture of pepper extract 4-8 pL / mL and cumin extract 20-40 pL / mL.

Use of a composition according to claims 1 and 2 in combination with a taxol for the inhibition of cell proliferation of the MCF-7 line, wherein the composition comprises a mixture of pepper extract 4-8 pL / mL and cumin extract 20-30 pL / mL.

Use of a composition according to claims 1 and 2 in combination with a taxol for the inhibition of cell proliferation of the A549 line, wherein the composition comprises a mixture of pepper extract 2-4 pL / mL and cumin extract 20-30 pL / mL.

Use of a composition according to claims 1 and 2 for inhibiting neuroblastoma proliferation, wherein the composition comprises cumin extract at 20-40 pL / mL,

A