KR950010395B1 - 마약계의 간이 검출법 및 검출용 킷트 - Google Patents

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내용 없음.

Description

마약계의 간이 검출법 및 검출용 킷트

제1도는 뇨시료중 메타암페타민의 농도에 따른 본 발명 시약의 감도를 나타낸 사진임.

제2도는 본 발명에 따른 마약계 검출용 킷트 구성요소의 구체예를 나타낸 사진임.

제3도는 메타암페타민 음성뇨와 양성뇨의 발색비교 사진임.

본 발명은 마약류의 간이검출법에 관한 것이다. 더욱 구체적으로는, 본 발명은 테트라브로모페놀프탈레인 에틸 에스테르(TBPE) 정색법을 이용하여 현장에서 뇨시료중의 마약계, 예컨대 메타암페타민, 메톡시펜아민, DL-메틸에페드린, 에페드린등의 함유 여부를 즉석에서 검출해낼 수 있는 건식 시험관법 및 이에 이용되는 시험관 킷트에 관한 것이다.

최근, 습관성 의약품, 특히 각성제 사용자의 범죄증가가 사회적 문제로 크게 대두되면서, 속칭, "히로뽕"으로 알려진 메타암페타민(methamphetamine : 이하 'MA'라 칭함)등, 마약류의 투약계층이 확대되고 히로뽕 중독에 의한 환각범죄가 급증하고 있는 추세이다.

이에따라, 마약류의 스크리닝 방법에 대한 연구가 다각적으로 연구되고 있으며, 화학적 간이측정법과 GC/MS를 이용한 기기분석법, 면역 측정법이 개발되어 이용되고 있다. 그러나 이들 방법은 전문인력을 요하는 실험실적 습식법으로서 고가의 장비를 갖춘 특정 실험실에서만 수행이 가능할 뿐아니라 검사로부터 결과를 통보받기까지 많은 시간이 걸린다는 단점이 있다.

MA의 경우, 통상 MA을 복용하거나 주사한 사람의 뇨중에는 대사산물이 아닌 MA 원형 그대로 배출되는 것이 가장 많고, 일부는 암페타민이나 p-히드록시암페타민으로 배출된다. 따라서 뇨중 MA 여부를 조사하는 스크리닝 테스트는 뇨를 채취한 시점에서 행하는 것이 가장 바람직하다. 현재 개발된 정색반응 스크리닝 테스트는 마키스 시약(Marquis reagent)을 이용하여 Becton Dickinson & Co. 에서 상품화한 NIK마약 검색법이 있고, 동일 시약을 앰플제로 하여 BDH Chemicals LTD.에서 시판하고 있다. 그의 실험실적인 간이 정색 반응으로서 Tropaeolin OO 정색법, 테트라브로모페놀프탈레인 에틸 에스테르(TBPE) 정색법, 고체-액체 추출 후 사이몬 시약(Simon's reagent)으로 정색반응을 보는 Ad-tip 법, Sep-pack C₁₈카트리지로 흡착시킨 후 사이몬 시약으로 정색반응을 보는 법등이 보고되어 있다. 그러나, 이들 역시 방법에 따라 특이성이 없거나 함유여부를 판정하기 곤란한 것, 감도가 아주 나쁜것, 함유량의 정도, 정색판정이 곤란한 것, 시간이 오래 걸리는 것등의 문제점을 갖는다.

따라서, 본 발명은 마약류의 복용이 사회문제화되고 있는 현시점에서 상기의 종래기술이 갖는 문제점들을 해소하여 마약류의 투약여부를 즉석에서 판별할 수 있는 간단한 휴대용 검사도구를 개발하는데 목적이 있다. 이같은 목적은 본 발명에 따라, 스크링닝 테스트법중 간편한 정색 시약으로 알려진 TBPE 정색법을 이용하는 건식시험관법 및 그에 이용되는 킷트에 의해 달성될 수 있다.

다음에 실시예를 들어 본 발명을 더욱 상세히 설명한다.

[실시예]

TBPE 정색법을 이용한 건식시험관법

A. 분석법 개발

TBPE 시약을 함유하는 시험관 킷트를 고안하여, 실제 일선에서 시료뇨 약간량만 넣고 흔들면 정색반응을 관찰할 수 있도록 그 방법을 모색하였다. 이중층, 단일층, 및 건조분말의 세종류에 대하여 구상하고 각각 감도와 안정도를 측정하는 예비실험을 수행하였다. 여기서 이중층은 시험관에 TBPE를 함유한 CH₂Cl₂용액(0.02%) 0.5ml를 넣고 붕사 수용액 0.5ml를 더 넣어서 만들었다. 단일층은 시험관에 TBPE를 함유한 CH₂Cl₂용액(0.02%) 0.5ml를 넣고 붕사 분말을 넣어 제조하였다. 건조분말은 붕사 분말을 시험관에 넣고 TBPE의 용매를 증발시켜 제조하였다. 단, 사용시 CH₂Cl₂0.5ml를 다시 첨가한다.

예비 실험결과 건조분말 형태로 만든 시험관이 운반하는데 안정하고 내용물의 변화가 없는 등 가장 우수한 것으로 판단되어 건조 분발 형태의 시험관을 가지고 계속해서 다음의 실험을 진행하였다. 아래의 실험에서는 TBPE 0.1mg, 붕사 10mg, CH₂Cl₂0.5ml, 뇨 1ml로 고정하여 실험하였다. 위의 3가지 모델에 대한 예비 실험결과 발색되는데 필요한 최소 붕사량은 5-10mg인 것으로 나타났다.

pH의 영향

통상의 뇨는 그 pH가 4.8-7.6 이지만 시료뇨의 pH에 따라 시험 감도에 영향을 주는지, 또 이에따라 시료뇨의 pH를 조절해 줄 필요가 있는지를 알아보기 위하여 각 pH의 뇨에 MA를 첨가하여 그 감도를 조사하였다. 결과를 다음 표 1에 나타내었다.

[표 1]

pH 영향

1) 약 20초후 노랑→연두, 다른 pH에서는 모두 연두.

2) pH 10 이상에서는 짙은 초록.

3), 4) 식별이 어려움, 연두바탕에 적자색 기운.

5) 파랑

상기 표에서 알 수 있는 바와같이, 뇨의 pH가 3-4일때는 다소 감도가 떨어지지만, 약물 복용에 의한 산성뇨(pH 4.9-5.3) 또는 알칼리뇨(pH 7.8-8.2에서도 MA 3-5μg/ml 까지는 검출이 가능하며, 따라서 시료뇨의 pH를 조절해 줄 필요는 없었다.

뇨의 용량검토

시험관에 첨가하는 시료뇨의 용량을 확립하기 위하여 뇨의 용량에 따라 반응이 달라지는지의 여부를 보기 위해 MA의 경우 뇨의 용량별 감도를 측정하여 그 결과를 다음의 표 2에 나타내었다.

[표 2]

뇨의 용량별 감도

상기 표가 가리키듯이, MA 1μg/ml에서는 뇨의 용량과 관계없이 항상 음성으로 나타났다. 그러나, 시료뇨의 용량을 증가시키면 발색정도가 진해진다. 이는 저농도에서 감도에 영향을 미치므로 검출한계를 Ma 5μg/ml로 하려한다면 최소뇨의 용량은 1ml이며 발색정도를 확실하게 하여 판정을 용이하게 하려면 2ml의 뇨가 적당하다.

안정성

TBPE 시약이 냉암소 보관을 요구하므로 이것이 건식 시험관 킷트의 보관에도 영향을 미치는지를 조사하기 위하여 4℃, R.T., 40℃에서 각각 광노출, 광차단하여 보관하면서 시일경과에 따른 감소를 측정하였다. 각 온도에서 보관한지 75일째 될때까지 모두 MA 5μg/ml에 양성을 나타내었다. 따라서 온도와 빛에 무관하게 75일 이상 안정한 것으로 나타났다.

감도

정상뇨에 MA을 첨가하여 각 농도의 표준 시료를 만든 다음 상기 조건화된 킷트에 1ml씩 가하여 감도를 측정하였다(제1도 참조). MA 5μg/ml에 어두운 보라색으로 양성반응을 보였으며, 그 이상의 농도에서는 밝은 보라색을 띄는 양성이었고, 그 이하 농도에서는 녹색으로 음성이었다. 따라서 뇨시료를 1ml로 고정시켰을 때 검출 한계는 MA 5μg/ml이다.

본 발명의 건식 시험관법으로 측정될 수 있는 구체적 화합물과 그 측정범위는 뇨중 5μg/ml 이상의 MA, 8μg/ml 이상의 에페드린, 4μg/ml 이상의 DL-메틸에페드린, 4μg/ml 이상의 메톡시펜아민이 단독 또는 2가지 이상 혼합된 경우로 청보라-적자-보라색으로 발색함으로써 검출이 용이하다.

용기 및 뚜껑

킷트용 용기는 색관찰이 용이하도록 투명 또는 반투명이고 용매인 CH₂Cl₂에 안정한 재질로 만들어져야 하며 용량은 5ml 정도이면 좋다. 뚜껑 역시 닫기 쉽고 흔들었을 때 새지 않아야 하며 역시 CH₂Cl₂에 안정하여야 한다. 따라서 시험관은 유리제나 폴리프로필렌으로, 뚜껑은 폴리프로필렌이나 테플론 라이너가 있는 플라스틱제로 만들어지는 것이 바람직하다.

B. 킷트의 구성성분 제조

TBPE 시험관 : 시험관에 붕사 10mg을 넣고 0.02% TBPE를 함유한 CH₂Cl₂용액 0.5ml를 가한 후 후드에서 건조시킨다.

C. 킷트의 구성요소(제2도 참조)

본 발명에 따른 마약계 검출용 킷트는 붕사분말이 든 시험관에 테트라브로모페놀프탈레인 에틸 에스테르(TBPE)를 함유하는 메틸렌 클로라이드를 첨가하여 혼합 건조시킨 TBPE 함유 시험관 : 메틸렌 클로라이드를 함유하는 시약병 및 드롭퍼 ; 및 뇨시료 드롭퍼로 구성된다.

이하 본 발명의 킷트를 구성요소 별로 설명하면 다음과 같다.

1. TBPE 시험관 : 라벨 : 양성/음성 색조비교표

이름, 날짜, 판정결과

2. CH₂Cl₂시약병 및 드롭퍼

3. 뇨시료 드롭퍼

D. 검출방법

ⓛ MA

1. TBPE 시험관에 CH₂Cl₂0.5ml(드롭퍼로 약 5-6방울)을 가한다.

2. 뇨시료 1ml를 첨가하고 위 아래층이 섞이도록 조심스럽게 충분히 흔든다.

3. 가만히 세워두어 약 30초 후 두층으로 분리되면 아래층의 색을 관찰한다. 아래층의 색이 녹색이면 음성이고, 청보라-보라-적자색이면 양성이다. 5μg/ml 이상의 MA에서 양성으로 발색하였다.

② 에페드린

1. TBPE 시험관에 CH₂Cl₂0.5ml(드롭퍼로 약 5-6방울)을 가한다.

2. 뇨시료 1ml를 첨가하고 위 아래층이 섞이도록 조심스럽게 충분히 흔든다.

3. 가만히 세워두어 약 30초 후 두층으로 분리되면 아래층의 색을 관찰한다. 아래층의 색이 녹색이면 음성이고, 청보라-보라-적자색이면 양성이다. 8μg/ml 이상의 에페드린에서 양성으로 발색하였다.

③ DL-메틸에페드린

1. TBPE 시험관에 CH₂Cl₂0.5ml(드롭퍼로 약 5-6방울)을 가한다.

2. 뇨시료 1ml를 첨가하고 위 아래층이 섞이도록 조심스럽게 충분히 흔든다.

3. 가만히 세워두어 약 30초 후 두층으로 분리되면 아래층의 색을 관찰한다. 아래층의 색이 녹색이면 음성이고, 청보라-보라-적자색이면 양성이다. 4μg/ml 이상의DL-메틸에페드린에서 양성으로 발색하였다.

④ 메톡시펜아민

1. TBPE 시험관에 CH₂Cl₂0.5ml(드롭퍼로 약 5-6방울)을 가한다.

2. 뇨시료 1ml를 첨가하고 위 아래층이 섞이도록 조심스럽게 충분히 흔든다.

3. 가만히 세워두어 약 30초 후 두층으로 분리되면 아래층의 색을 관찰한다. 아래층의 색이 녹색이면 음성이고, 청보라-보라-적자색이면 양성이다. 4μg/ml 이상의 메톡시펜아민에서 양성으로 발색하였다.

E. 결론

본 발명에 따라 마약계의 간이 화학 정색법이 건식시험관법으로서 제시되며, 분석시간 30초 이내에 뇨시료중 마약류를 스크리닝 할 수 있다. 이 간이건식법은 안정성이 우수하며 육안으로 그 결과를 판정하므로 현장 테스트에 적합하다.

Claims (3)

1. 붕사분말이 든 시험관에 테트라 브로모페놀프탈레인 에틸에스테르(TBPE)를 함유하는 메틸렌 클로라이드를 첨가하여 혼합 건조시킨 TBPE 함유 시험관 ; 메틸렌 클로라이드를 함유하는 시약병 및 드롭퍼 ; 및 뇨시료 드롭퍼로 구성된 것이 특징인 마약계 검출용 킷트.
2. 붕사분말이 들어있는 TBPE 함유 시험관에 메틸렌 클로라이드를 첨가하고 여기에 뇨시료를 가하여 발색된 색상을 육안으로 판정하는 것으로 되는 마약계의 간이 검출법.
3. 제2항에 있어서, 마약계가 메타암페타민, 메톡시아민, 에페드린 및 DL-메틸에페드린중에서 단독 또는 두가지 이상의 혼합물로 이루어진 것이 특징인 마약계의 간이 검출법.