KR930000677A - 한국형 c형 간염 바이러스의 특이항원인 khcv ub 897 단백질의 정제방법 - Google Patents

한국형 c형 간염 바이러스의 특이항원인 khcv ub 897 단백질의 정제방법 Download PDF

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Abstract

내용 없음

Description

한국형 C형 간염 바이러스의 특이항원인 KHCV UB 897 단백질의 정제방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 한국형 C형 간염 바이러스의 특히 항원 KHCV UB 897 유전자의 염기 서열을 나타낸 것이고,
제2도는 본 발명에 따른 정제 과정중 각 단계에서 얻어지는 조생성물들을 SDS-폴리아크릴 아마이드 젤 전기영동하여 나타낸 결과이며,
제3도는 본 발명에 따른 정제 과정중 각 단계에서 얻어지는 조생성물을 SDS-폴리아크릴 아미드 젤 전기영동하고, 이를 한국형 C형 간염 환자의 혈청에서 분리한 면역 글로불린 G(Ig G)를 이용하여 웨스턴-블롯팅한 결과를 나타낸 것이다.

Claims (9)

  1. 유전자 재조합 대장균으로부터 단백질을 정제하는데 있어서, (가)한국형 C형 간염 바이러스의 특이항원 KHCV UB 897 단백질을 생성시킨 대장균 세포를 파괴하고, 가용성 단백질의 제거하고; (나)상기 단계(가)에서 얻어진 세포 침전물을 트리톤 X-100과 트리스완충액(50mM 트리스, 5mM EDTA, 2mM β-머캅토 에탄올, pH8.5)으로 차례로 세척하여 용해되는 단백질을 제거하며; (다)상기 단계(나)에서 얻어진 세포 침전물을 우레아가 함유된 완충액에 용해시켜 불용 단백질을 제거하고; (라)상기 단계(다)에서 얻어진 단백질 용액을 양이온 교환 크로마토그래피하고, (마)상기 단계(라)에서 수집한 분획을 투석시켜 우레아를 제거한 후 EPLC(Fast Protein, Peptide and Polynucleotide Liquid Chromatograhy)하는 것을 특징으로 하는, 한국형 C형 간염 바이러스의 특징이 항원인 KHCV UB 897 단백질의 정제 방법.
  2. 제1항에 있어서, 상기 단계(나)에서 트리톤 X-100을 1% 함유하는 트리스 완충액을 사용함을 특징으로 하는 방법.
  3. 제1항에 있어서, 상기 단계(다)에서 6 내지 8M 우레아를 사용함을 특징으로 하는 방법.
  4. 제1항에 있어서, 상기 단계(라)에서 양이온 교환 크로마토그래피로서 S-세파로스 컬럼을 사용하는 것을 특징으로 하는 방법.
  5. 제1항 또는 제4항에 있어서, 상기 단계(라)에서 pH6.0의 인산염 완충액을 사용함을 특징으로 하는 방법.
  6. 제1항 또는 제4항에 있어서, 상기 단계(라)에서 염화나트륨을 0 내지 0.2M 농도구배로 함유하는 완충액으로 용출시킴으로 특징으로 하는 방법.
  7. 제1항에 있어서, 상기 단계(마)의 FPLC에서 모노 Q이온 교환 수지 컬럼을 사용함을 특징으로 하는 방법.
  8. 제1항 또는 제7항에 있어서, 상기 단계(마)의 크로마토그래피 과정에서 pH8.5의 완충액을 사용함을 특징으로 하는 방법.
  9. 제1항 또는 제7항에 있어서, 상기 단계 (마)에서 염화나트륨을 0 내지 0.4M 농도구배로 함유하는 완충액을 사용함을 특징으로 하는 방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개되는 것임.
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