KR910006633B1 - γ-L-글루타밀-L-시스테인 에틸 에스테르 및 유효성분으로서 이를 함유한 의약 - Google Patents

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Abstract

내용 없음.

Description

[발명의 명칭]
γ-L-글루타밀-L-시스테인 에틸에스테르 및 유효성분으로서 이를 함유한 의약
[도면의 간단한 설명]
제1도는 본 발명의 화합물을 마우스에 투여할 시 조직 글루타티온 레벨의 향상작용을 나타낸 그라프이다.
제2도는 본 발명의 화합물을 L-부티오닌 술폭시민으로 전처리한 마우스에 투여했을 경우 조직 글루타티온 레벨의 저하 억제작용을 나타낸 그라프이다.
제3도는 L-부티오닌 술폭시민으로 전처리한 마우스에 본 발명의 화합물을 투여했을 경우 조직 글루타티온 레벨의 회복속도를 나타낸 그라프이다.
[발명의 상세한 설명]
[기술분야]
본발명은 γ-L-글루타밀-L-시스테인 에틸 에스테르 및 이를 유효성분으로서 함유한 조직 글루타티온 레벨의 향상제, 간질환 치료제, 백내장 치료제, 그리고 신장질환 치료제에 관한 것이다.
[배경 기술]
글루타티온은 세포내의 주요 환원제로서 생체내 조직에 광범위하게 존재하며, 촉매, 대사, 운송 및 세포보호에 있어 중요한 역할을 담당하고 있다. 특히, 세포의 보호에 있어서 글루티온은 (1) 글루타티온 포옥시다제의 도움을 받아 활성 산소종과 자유 라디칼을 환원적으로 소멸시키거나 (2) 글루타티온-s-트랜스퍼라레로 독소와 반응시키고, 글루타티온 포합체로 하여 세포밖으로 배출하도록 작용을 발휘하고, 항산화, 해독을 비롯해서 방사장해보호, 온도내성을 높이는 등의 역할을 담당하고 있다.
따라서, 조직 글루타티온이 질환이나 노화 등으로 저하하면 조직은 상해를 받기 쉬워진다. 이러한 경우 조직 글루타티온을 정상치 회복시키는 것은 세포기능의 회복에 중요하고, 또 정상적인 경우에도 조직 글루타티온을 증가시키면 더욱 세포보호 기능을 높일 수 있는 것으로 생각하고 있다. 실제로 글루타티온이나 몇 가지의 티올 화합물을 변이원성 물질이나 암원성 무질에 대한 방어, 더욱이 이들에 의해 생긴 동물 간종양의 축소를 목적으로 사용하여 유효하였다는 보고도 있다.
그러나 문제점으로써 글루타티온 그것을 투여하여도 혈중 반감기가 수분으로 짧아 조직 글루타티온 상승에 그다지 유효하지 못하다는 사실을 둘 수 있다. 그 이유는 글루타티온 자체는 효율좋은 세포로 취입되지 않고 일단 분해되어 단백질이나 구성 아미노산형으로서 세포에 취입하여 재합성을 할 필요가 있기 때문이라고 생각된다.
상기와 같은 문제점을 극복하기 위하여 여러 화합물이 제안되었는데 이러한 화합물은 인체의 림포마 세포 또는 동물 조직의 글루타티온 레벨을 향상시키는데 있어 글루타티온보다 월등한 것으로 판명되었으며 그 예는 다음과 같다; 2-옥소티아졸리딘-4-카복실레이트, γ-L-글루타밀-L-시스테인, 및 γ-L-글루타밀- L-시스테이닐-글리신 에틸 에스테르(글루타티온 모노에틸 에스테르)등 [참조: Curr. Top. Cell. Regul., Vol. 26, pp383-394, 1985; Fed. Proc., Vol. 43, pp3031-3043, 1984]
[발명의 개시]
본 발명자는 조직 글루타티온 상승에 유효한 새로운 화합물을 탐색한 결과 초대배양 간세포계를 사용함으로써 다음과 같은 사실을 밝혀내고 본 발명에 도달하게 되었다 : γ-L-글루타밀-L-시스테인 에틸 에스테르는 간세포의 글루타티온을 향상시키는데 효과적이다; 특히 글루타티온 레벨이 글루타티온 합성의 저해제인 D,L- 부티오닌-술폭시민의 사용에 의해 저하될 경우 상기 저해제 제거후 글루타밀 화합물을 첨가하면 글루타티온 레벨이 현저하게 높은 속도로 회복된다; 이러한 화합물의 글루타티온 레벨 회복효과는 앞서 언급한 화합물보다 월등하다; 그리고, 본 화합물은 사염화탄소 처리에 의해 간세포의 회사를 강력히 저지한다.
특히, 본 발명은 다음 구조식으로 표시되는 γ-L-글루타밀-L-시스테인 에틸 에스테르 및 유효성분으로서 이를 함유한 글루타티온 레벨 향상제, 간질환 치료제, 백내장 치료제, 그리고 신장질환 치료제에 관한 것이다 :
Figure kpo00001
위의 식은 γ-L-글루타밀-L-시스테인 에틸 에스테르의 환원형 및 산화형(산화형 이량체)도 포함하는데, 이는 상기 식으로 표시되는 화합물의 두 분자간에서 야기되는 탈수소반응에 의해 형성된 디설파이드 결합(-s-s-)으로 이루어진 이량체로서 이 또한 본 발명의 범위에 포함된다.
[발명의 최선 실시형태]
본 발명의 화합물은 γ-L-글루타밀-L-시스테인 메틸 에스테르로 알려진 화합물의 유도체이며 (1) 보고된 한 문헌[Floge'et al. in Z.Klin. Chem. u. Klin. Biochem., Vol.8, pp149-155(1970)]의 방법에 따라 유기화학적으로 합성시킬 수 있다. 또한 (2) 문헌[Anderson et al. in Arch. Biochem. Biophys., Vol. 239, pp538-548(1985)]에 보고된 글루타티온의 모노에틸 에스테르화 방법을 채택해 γ-L-글루타밀-L-시스테인을 모노에틸 에스테르화시켜 합성시킬 수 있다.
본 발명의 화합물은 조직 글루타티온 레벨을 향상시키는 기능을 지니고 있으며 따라서 여러종의 세포를 부활시키고 회사를 방지하는데 유효하다. (1) 조직 글루타티온 레벨의 저하가 백내장, 고혈압, 동맥경화, 당뇨병, 위궤양, 암, 신장병, 호흡기질환, 뇌 및 심장의 질환등과 같은 각종 성인병이 한 원인임을 고려해볼 때 본 발명의 약제는 상기와 같은 각종 질환의 예방 및 치료에 효과적이며, 또한 본 발명의 약제는 진해거담제, 중독치료제, 각종 알레르기성 질환 치료제 및 피부질환 치료제로서 현저한 치료효과를 나타낼 뿐 아니라 일소방지, 방사선 상해보호 그리고 내열성 증대에도 우수한 효과를 보인다. 또한 (2) 본 발명의 약제는 간염, 지방간, 간경변등의 간질환 치료 및 예방에도 효과적이다. 또한 본 발명의 화합물은 (3) 항간제의 사용으로 인한 신독성의 중화작용에도 유효하기 때문에 신장질환의 치료 및 예방에도 유효함을 기대할 수 있다.
그리고 각종 티올 화합물은 SH기에서 유래하는 항산화-환원작용 및 중금속과의 결합작용으로 인해 간질환, 중독, 안질환, 및 진해거담 등과 같은 각종 질환의 치료에 사용할 수 있으며, SH기를 지닌 본 발명의 화합물은 그 자체 또는 대사물로서 각종 약효를 발휘할 수 있음을 예기할 수 있다.
본 발명의 화합물은 정맥내 투여, 근육내 투여, 피하투여, 직장내 투여, 경피투여 및 점안 투여 등과 같이 경구적으로 또는 비경구적으로 투여할 수 있으며, 경구 투여의 제형으로서는 정제, 환제, 과립제, 산제, 액제, 현탁제, 캡슐제 등을 예로 들 수 있다.
정제형태의 제법으로서는 락토스, 스타치, 및 결정성 셀룰로서와 같은 부형제; 카복시메틸 셀룰로스, 메틸 셀룰로스, 및 폴리비닐 피롤리돈과 같은 결합제; 그리고 소니움 알기네이트 및 중탄산나트륨과 같은 붕괴제를 이용하는 통상적인 방법에 따라 성형시킬 수 있다.
환제, 과립 및 산제들도 트라카프릴린 및 트리아세틴과 같은 글리세린 에스테르 그리고 에탄올과 같은 알토올을 사용하여 통상적인 방법에 따라 성형시킬 수 있다. 캡슐제는 젤라틴 캡슐에 과립제, 산제 또는 액제를 충진시켜 성형할 수 있다.
정맥내, 근육내, 및 피하투여용 제형으로서는 수용액 또는 비수용액의 형태로 조제한 주사제를 이용할 수 있으며, 이러한 주사제를 제조하는데는 염화나트륨 등장액, 에탄올, 및 프로필렌 글리콜과 같은 용매, 그리고 필요할 경우에는 방부제 및 안정제를 사용할 수 있다.
직장내 투여의 경우는 젤라틴 연질 캡슐로 만든 통상의 좌제를 들 수 있다. 경피투여으 제형으로서는 연고제를 그 예로 들 수 있으며, 이는 통상적인 방법으로 성형시킬 수 있다.
점안제는 중탄산나트륨, 아황산수소나트륨 및 보르산 등으로 이루어진 중성-근접 완충액을 사용하고, 필요할 경우는 방부제, 안정제 및 삼투압 조절제를 사용하여 조제할 수 있다.
본 발명의 화합물을 조직내 글루타티온의 레벨을 향상시키는 약제로서 사용하거나, 간질환, 백내장, 및 신장질환 치료제로서 사용할 경우 투여량은 환자의 중상의 정도에 따라 다르지만 보통 성인의 경우는 1일 약 2mg∼20g이며, 투여법은 경구적 또는 비경구적으로 1일 1∼8회에 걸쳐 나누어 투여할 수 있다.
본 발명에 따른 화합물의 급성 독성은 실시예 10에 나타나 있는 대조 화합물과 비교해 볼 때 매우 낮다.
본 발명을 실시예를 통해 더욱 자세히 설명하면 다음과 같다.
[실시예 1]
γ-L-글루타밀-L-시스테인 에틸 에스테르 및 그의 산화형의 합성과 정제
(ⅰ) 에스테르화
염화수소-함유 에탄올(7N HCl-EtOH) 250ml를 γ-L-글루타밀-L-시스테인 모노하이드레이트 50g(약 185mmol)이 함유된 무수에탄올 현탁액(750ml)에 가하고, 생성 혼합물을 실온에서 1시간 휘젓는다. 여기에 염화수소를 가하면 현탁액은 용액으로 변하게 되는데, 이 반응용액은 미리 0℃까지 냉각된 에테르(7.5ℓ)에 가한 다음 생성 혼합물을 2시간 계속 휘저으면 결정 침전물이 형성된다. 여기서 얻은 생성물을 여과, 분리한 결과 γ-L-글루타밀-L-시스테인 에틸 에스테르 하이드로클로라이드 염 48.4g(83%)을 얻었다.
상기 생성물중에는 5∼10%의 디에스테르체가 혼입되어 있음이 밝혀졌다. 순수한 생성물 형태로 목적물을 얻기 위해서는 하이드로클로라이드염을 아민과 같은 염기로 중화시킨 다음에 이온교환수지를 사용해 정제해야 한다.
(ⅱ) 정제
물 950ml에 상기의 γ-L-글루타밀-L-시스테인 에틸 에스테르 하이드로클로라이드염 45g을 용해시켜 제조한 용액을 암모니아수를 사용해 중화시키고 추가로 물을 첨가해 최종부피를 1ℓ로 만든다. 상기 용액을 사전에 물로써 양호하게 세정한 암모니아형 컬럼(BIO-RAD사제) AG 50W ; 수지량 50ml) 및 AG1아세테이트형 컬럼에 연이어 통과시키고 상기 두 컬럼을 부피와 동등한 물로써 마지막으로 세정한다. 용출액과 세정액을 합해 동결건조시킨 결과 γ-L-글루타밀-L-시스테인 에틸 에스테르 36g을 얻었다. 그의 물성은 다음과 같다 :
NMR(δppm, D2O) : 1.28(3H, t, J=7.0Hz), 2.16(2H, m), 2.54(2H, t, J=7.6Hz), 3.00(2H, m), 3.79(1H, t, J=6.3Hz), 4.26(2H, q, J=7.0Hz), 4.64(1H, m)
위에서 얻은 정제된 표준샘플을 C18역상 컬럼(Waters제 : 직경 4mm, 길이 30cm)을 사용해 유속 1ml/min으로 용출시킨 결과, 아세토니트릴(15%)/0.1% 트리플루오로아세트산(85%)의 조건하에서 보류시간 4.7분의 단일피크를 나타내었으며, 그리고 아세토니트릴(7.5%)/트리플루오로아세트산(92.5%)의 조건하에서는 보류시간 7.4분의 단일 피크를 나타내었다.
(ⅲ) 산화형의 제조
앞의 (ⅱ)단계에서 얻은 γ-L-글루타밀-L-시스테인 에틸 에스테르 7g을 물 250ml에 용해시키고, 생성 용액을 암모니아수를 사용해 pH를 7.4로 조정한 다음에는 황산구리.5수화물 10mg을 첨가하고 실온에서 밤새 공기를 취입시킨다.
상기 반응용액을 물로 완전히 세정한 AG50W.암모니움형 컬럼(수지량 3ml) 그리고 AG1.아세테이트형 컬럼(수지량 3ml)에 연이어 통과시켜 이들로부터 황산구리를 제거한 다음 동결건조시킨 결과 산화형 2량체인 γ-L-글루타밀-L-시스테인 에틸 에스테르 6.30g을 얻었으며, 그의 물성은 다음과 같다 :
NMR(δppm, D2O) : 1.4(6H, t, J=7.0Hz), 2.3(4H, m), 2.55(4H, m), 3.0∼3.6(4H, m), 3.9(2H, m), 4.35(4H, q, J=7.0Hz), 4.9(2H, m)
상기 생성물을 C18역상 컬럼(직경 4.6mm, 길이 25cm)(Shiseido제 CAPCELL PAK)을 사용해 유속 1ml/min, 그리고 아세토니트릴(20%)/0.1% 트리플루오로아세트산(80%)의 혼합용매 조건하에서 용출시켰을 때 용출된 산화형은 보류시간 5.6분의 단일 피크를 나타내었으며 동일한 조건하에서 용출된 환원형은 보류 시간 4.2분의 단일 피크를 나타내었다.
[실시예 2]
간세포내 글루타티온 수준의 향상작용
나카무라(Nakamura)의 방법[Protein, Nucleic Acid, and Enzyme, Vol 24, pp 55-76(1981)]을 주로 따르고 왕(Wang)의 방법(In Vitro, Vol. 21, pp 526-530(1985)]도 일부 채택하여 간세포(샘플)를 조제한다. 새앙쥐의 간을 0.05% 콜라게나제로써 관류시킨 후, 원심분리하여 세포를 수거하고 페르콜로써 추가로 원심분리하여 실질 간세포를 수거한다. 여기서 얻은 간세포를 10% 우태아 혈청, 덱사메타손(10-6M), 인슈린(1㎍/ml) 및 항생물질이 함유된 윌리암스 E 배양액(Williams' medium E)에 분산시키고, 1×105세포/0.2ml/㎠의 밀도로 배양판에 접착시킨다. 접착되지 않은 세포를 일단 1.5시간 후에 제거한 다음 5% CO2-95% 공기의 대기중에서 37℃하에 배양을 계속한다.
본 발명에 따른 화합물을 1mM의 농도로 배양 시스템에 첨가하고 세포내 글루타티온 레벨의 시간 경과변화를 측정한다[참조: Owens and Belcher, Biochem. J., Vol. 94, pp 705-711(1965) and Tietze, Anal. Biochem., Vol. 27, pp 502-522(1969)].
한편, 대조용으로는 상기 화합물을 첨가하지 않고 측정하였다.
다음의 표 1에는 세포내 글루타티온 레벨의 시간 경과 변화가 100의 값이 본 상기 화합물을 첨가하기 전의 실험치를 나타내는 상대치와 비교되어 나타나 있다.
[표 1]
Figure kpo00002
상기의 표를 보면 본 발명의 화합물은 간세포내에서 글루타티온 레벨을 증가시키는 효과를 지니고 있음이 뚜렷하다.
[실시예 3]
D,L-부티오닌 술폭시민이 본 발명의 화합물과 공존되도록 할 경우 간세포내 글루타티온 레벨의 저하 억제 작용
배양 간세포내 D,L-부티오닌 술폭시민을 0.3mM의 농도로 그리고 본 발명의 화합물을 1mM의 농도로 첨가한 후 13시간 배양하고, 세포내 글루타티온의 레벨을 측정한다. 한편으로는 아무 것도 첨가되지 않고 단지 D,L-부티오닌 술폭시민만이 첨가된 대조용으로 유사한 측정을 하였다.
다음의 표 2는 본 발명의 화합물을 첨가하기전 100의 값을 기준으로 하는 상대치로 세포내 글루타티온 레벨이 나타나 있다.
[표 2]
Figure kpo00003
위의 표 2를 보면 본 발명의 화합물은 D,L-부티오닌 술폭시민에 의해 간세포내에서 글루타티온 레벨의 저하를 억제시키는 효과를 지니고 있음이 뚜렷하다.
[실시예 4]
세포내 글루타티온 레벨이 D,L-부티오닌 술폭시민의 사용으로 일단 저하되고 그 후 억제제가 제거된 다음의 경우 본 발명의 생성물을 사용한 결과로서 세포내 글루타티온 레벨의 회복을 촉진하는 작용 및 간세포의 회사를 억제하는 작용 D,L-부티오닌 술폭시민을 배양 간세포에 0.5mM의 농도로 가하고 16시간 배양한다. 그리고는 D,L-부티오닌 술폭시민을 제거하고 본 발명의 화합물을 대조화합물(글루탐산, 시스테인 및 글리신의 등몰혼합물; 글루타티온; 글루타티온 모노에틸 에스테르; γ-L-글루타밀-L-시스테인)과 함께 1mM의 농도로 각 배양액에 각각 첨가하고 2시간 배양한다. 이 시점에서 세포내 글루타티온 레벨의 변화를 측정한다. 한편으로는, 피검 화합물을 각 배양액에서 제거한 다음에 배양액은 사염화탄소가 0.5μl/ml의 농도로 함유된 새로운 것으로 치환한다. 1시간 배양 후 각 배양 상등액의 GPT 활성을 측정하고 또한 트리판 블루 스테이닝 테스트(Trypan Blue Staining test)에 의해 간세포의 회사억제 작용을 조사한다.
다음의 표 3에는 100으로 설정된 미처리 값을 기준한 상대치로 세포내 글루타티온 레벨의 변화가 나타나 있으며, 간세포의 회사 억제작용은 배양액 상등액의 GPT 활성 및 생존율로 나타나 있다.
[표 3]
Figure kpo00004
상기의 표3에서는 γ-L-글루타밀-L-시스테인 에틸 에스테르는 D,1-부티오닌 술폭시민에 의해 일단 저하된 간세포의 글루타티온 레벨을 본 발명의 화합물이 첨가되지 않았거나, 위에서 언급한 다른 대조 화합물이 첨가된 경우 보다 훨씬 빠르게 회복시킬 수 있으며, 간 세포의 회사억제를 가장 효과적으로 수행함을 알 수 있다. 따라서 본 발명의 화합물은 간염, 지방간, 및 간경변 등의 간질환의 치료 및 예방에 효과적임을 예상할 수 있다.
[실시예 5]
세포내 글루타티온 레벨이 사염화탄소에 의해 일단 저하된 후 사염화탄소의 제거 및 본 발명 화합물의 첨가할 경우 간세포 글루타티온 레벨의 회복작용 사염화탄소를 배양 간세포에 0.5μl/ml의 농도로 첨가한 다음 1시간 배양한다. 다음에는 상기 배양액을 새로운 배양액으로 교환하고 본 화합물을 1mM의 농도로 첨가한다. 그리고는 1시간 후에 세포내 글루타티온 레벨의 변화를 측정한다.
다음의 표 4에는 사염화탄소 처리전 100의 값을 기준으로 한 상태치로 세포내 글루타티온 레벨의 변화가 나타나 있다.
[표 4]
Figure kpo00005
위의 표를 보면 본 발명의 화합물은 사염화탄소에 의해 저하된 세포내 글루타티온 레벨을 회복시키는 효과를 지니고 있음을 알 수 있다.
[실시예 6]
마우스에 본 발명의 화합물을 투여할 경우 조직 글루타티온 레벨의 향상작용
9일된 ICR 숫쥐에 2.5mmol/kg의 본 발명의 화합물(γ-Glu-Cys OET) 또는 대조 화합물 글루타티온(GSH), γ-L-글루타밀-L-시스테인(γ-Glu-Cys)을 2.5시간 간격으로 4회에 걸쳐 피하투여한다. 투여전 그리고 투여 개시후의 2시간 반마다 쥐를 해부하여 간장과 신장을 적출해 글루타티온(GSH)함량을 정량한다. 글루타티온 함량 측정 외에도 안구에 대해서도 SH함량을 또한 측정한다. 이는 동일한 절차후에 5mmol/kg의 본 화합물을 투여하고 DTNB법에 의해 측정한다. 결과는 제1도에 나타나 있다.
제1도에는 동물에 있어 간[제1도-(a)]과 신장[제1도-(b)]의 조직 글루타티온 레벨을 향상시키는데 본 발명의 화합물이 글루타티온 및 γ-L-글루타밀-L-시스테인보다 훨씬 탁월한 효과를 지니고 있음이 분명히 드러나 있다. 또한 제1도에는 안구[제1도-(c)]의 경우에 있어서도 본 발명의 화합물이 상기의 효과 이외에 SH 레벨을 현저하게 향상시키는 효과를 지니고 있음을 볼 수 있다.
[실시예 7]
본 발명의 화합물과 L-부티오닌 술폭시민을 쥐에 교차 투여할 경우 조직 글루타티온 레벨의 저하 억제작용
실시예 6에서와 동일한 방법으로 본 발명의 화합물을 투여하고, 이와 마찬가지로 L-부티오닌 술폭시민(BSO)을 본 화합물 투여 각 1시간 후에 4mmol/kg의 투여량으로 투여한다. 그리고는 간장과 신장내의 글루타티온 함량을 본 화합물 투여개시 매 2.5시간 후에 실시예 6에 따른 방법으로 측정한다.
대조용으로서는 본 화합물 대신에 생리식염수를 투여하고 측정한다.
결과는 제2도에 나타나 있다.
제2도에서는 동물을 모델로 한 경우에서도 본 발명의 화합물이 L-부티오닌 술폭시민으로 유도된 간장[제2도-(a)]과 신장[제2도-(b)]의 조직 글루타티온 레벨의 저하를 억제하는 효과를 지니고 있음을 알 수 있다.
[실시예 8]
본 발명의 화합물을 L-부티오닌 술폭시민으로 전처리한 쥐에 투여했을 경우 조직 글루타티온 레벨의 회복을 촉진하는 작용
9일된 ICR 숫쥐를 그의 조직 글루타티온 레벨을 사전에 저하시키기 위해 2.5시간 간격으로 L-부티오닌 술폭시민을 4mmol/kg씩 4회 투여한다. 다음날 본 발명의 화합물 또는 생리식염수 2.5mmol/kg을 2.5시간 간격으로 4회 피하투여하고, 또한 이와 유사하게 글루타티온 모노에틸 에스테르(GSHOET)를 대조용으로 하여 2.5mmol/kg 투여한다. 그리고는 실시예 6에 기술된 방법에 따라 간장과 신장내의 글루타티온 함량을 측정한다. 결과는 제3도에 나타나 있다.
본 발명의 화합물은 간장[제3도-(a)]의 조직 글루타티온 레벨을 회복시키는데 있어 글루타티온 모노에틸 에스테르와 동일한 효과를 나타냄을 제3도를 보면 알 수 있다. 그렇지만, 신장[제3도-(b)]에 관해서 본 발명의 화합물은 글루타티온 모노에틸 에스테르와 비교해 볼 때 조직 글루타티온 레벨을 정상적인 레벨까지 회복시키는데 있어 훨씬 우수한 효과를 나타낸다.
동물 모델의 경우에 있어서도 처리되지 않는 경우는 물론 본 발명의 화합물은 글루타티온 모노에틸 에스테르와 비교해 볼 때 L-부티오닌 술폭시민에 의해 저하된 조직 글루타티온 레벨을 신속히 회복시키는 우수한 효과를 지니고 있다.
[실시예 9]
L-부티오닌 술폭시민에 의해 발증된 실험적 백내장에 대한 본 화합물(또는 환원형 또는 산화형)의 발증방지작용
실험적 백내장을 문헌[Calvin et al., Science, Vol. 233, pp 553-555 (1986)]에 기술된 방법에 따라 제작한다. 특히, L-부티오닌 술폭시민을 ICR 숫쥐에 생후 9일되는 날부터 11일 되는 날까지 3일간 연속적으로 하루 4회 매 2.5시간마다 4mmol/kg씩 피하투여하여 백내장을 발증시킨다. 백내장의 발증율은 생후 16일 되는 날에 판정한다. 테스트 화합물(피검약물)은 또한 L-부티오닌 술폭시민을 투여하기 1시간 전에 생후 9일부터 11일까지 3일간 하루 4회 피하투여하고, 피검약물 단독만을 생후 12일부터 13일까지 하루 4회 2.5시간 간격으로 피하투여한 다음, 생후 16일 되는 날에는 백내장 발증에 대한 본 화합물의 발증 방지효과를 검정한다. 한편 대조 화합물로서는 글루타티온, 글루타티온 모노에틸 에스테르, 및 γ-L-글루타밀-시스테인을 또한 백내장 발증 방지효과에 대해 조사한다.
다음의 표 5에는 백내장 발증에 대한 각 피검 화합물의 방지성적이 나타나 있다.
표 5에 있어 백내장 발증율은 모든 피검 동물(1그룹당 11∼12마리의 쥐)에 대한 백내장이 발증된 실험동물의 비를 의미하고, 백내장 안율은 전체 피검 안구에 대한 백내장 안구의 비율을 뜻한다.
[표 5]
Figure kpo00006
위의 표 5로부터는 본 발명의 화합물(환원형 및 산화형을 포함하여)은 L-부티오닌 술폭시민에 의해 발증된 실험적 백내장에 대하여 강력한 발증 방지작용을 지니고 있음을 확인할 수 있다.
[실시예 10]
본 화합물의 급성독성(마우스 신생아)
본 화합물의 급성독성을 실시예 9의 스케줄에 따라 투여할 경우 측정하고 대조 화합물인 글루타티온, 글루타티온 모노에틸 에스테르, 및 γ-L-글루타밀-L-시스테인과 비교 검토한다. 다음의 표 6에는 피검화합물의 투여 종료후 동물들의 생존율이 나타나 있다.
본 화합물을 동물들에 2.5mmol/kg 투여할 경우 투여동물의 모두가 생존하였다. 이는 본 화합물이 글루타티온 모노에틸 에스테르와 거의 동일하게 안전하며 글루타티온 또는 γ-L-글루타밀-L-시스테인보다 뛰어나게 안전함을 입증해 준다. 또한, 본 화합물은 BSO의 독성에 의한 동물 체중의 증가억제를 회복하는 효능을 지니고 있는데 이는 글루타티온이나 γ-L-글루타밀-L-시스테인에 있어서는 볼 수 없는 것이다. 따라서, 본 화합물을 백내장의 치료에 사용할 경우 대조 화합물에 비교해서 매우 높은 안정성을 지니고 있음을 예상할 수 있다.
[표 6]
Figure kpo00007
[실시예 11]
시스플라틴 신장독성의 중화작용
생후 5주일 된 ICR 숫쥐에 시스플라틴 20mg/kg을 복강내 투여한다. 그리고는 본 화합물(2.5mmol/kg)을 시스플라틴 투여일을 포함해 연속 5일간 하루에 4회씩 2.5시간 간격을 복강내 투여한다. 한편, 대조그룹에는 본 화합물 대신에 생리식염수를 투여한다. 시스플라틴 투여일로부터 1주일 후에 혈액을 채취해 혈청중의 요소질소(BUN) 레벨을 측정한다. 결과는 다음의 표 7에 나타나 있다(그룹당 10마리의 평균치). 표 7에서 본 화합물은 BUN의 증가로 보아 시스플라틴의 신장 장해작용을 중화시킴을 알 수 있다.
[표 7]
Figure kpo00008

Claims (5)

  1. 다음의 식으로 표시되는 γ-L-글루타밀-L-시스테인 에틸 에스테르 또는 그의 산화형 이량체:
    Figure kpo00009
  2. 유효성분으로서 γ-L-글루타밀-L-시스테인 에틸 또는 그의 산화형 이량체로 이루어진 조직 글루타티온 레벨의 향상제.
  3. 유효성분으로서 γ-L-글루타밀-L-시스테인 에틸 에스테르 또는 그의 산화형 이량체를 함유한 간질환 치료제.
  4. 유효성분으로서 γ-L-글루타밀-L-시스테인 에틸 에스테르 또는 그의 산화형 이량체를 함유한 백내장 치료제.
  5. 유효성분으로서 γ-L-글루타밀-L-시스테인 에틸 에스테르 또는 그의 산화형 이량체를 함유한 신장질환 치료제.
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