Claims (20)
세파로스포린 C를 함유하는 발효배양액에서 발효여액을 약염기성 음이온 교환수지들, 비이온성 거대다공성 흡착수지 I, II 및 강산성 양이온교환수지를 사용하여 정제하고, 역삼투막과 박막농축기(센트리좀)으로 농축한 뒤 분무건조함을 특징으로 하는 세파로스포린 C의 정제방법.The fermentation filtrate in the fermentation broth containing cephalosporin C is purified using weakly basic anion exchange resins, nonionic macroporous adsorptive resins I, II and strongly acidic cation exchange resins, and concentrated with a reverse osmosis membrane and thin film concentrator (centrisome). Separation method of Separosporin C, characterized in that the spray drying.
제1항에 있어서, 약 염기성 음이온 교환수지들의 경우, 아크릴계 젤형인 WA-10 또는 스틸렌계 다공성인 WA-30, 다이아이온 HP-20 수지를 사용함을 특징으로 하는 방법.The method of claim 1, wherein in the case of weakly basic anion exchange resins, an acrylic gel-type WA-10 or a styrene-based porous WA-30 and a diion HP-20 resin are used.
제1항에 있어서, 비이온성 거대다공성 흡착수지 I로 XAD-2000 수지를 사용함을 특징으로 하는 방법.The method according to claim 1, wherein XAD-2000 resin is used as the nonionic macroporous adsorptive resin.
제1항에 있어서, 비이온성 거대다공성 흡착수지 II로 SP-850 수지를 사용함을 특징으로 하는 방법.The method according to claim 1, wherein SP-850 resin is used as the nonionic macroporous adsorptive resin II.
제1항에 있어서, 강산성 양이온 교환수지로 스틸렌계수지인 다이아이온 SK-1B수지를 사용하여 양이온을 치환시켜 소디움염 형태로 세파로스포린 C를 정제함을 특징으로 하는 방법.The method of claim 1, wherein the cation is substituted with cation using a ionic resin, diion SK-1B resin, as a strongly acidic cation exchange resin to purify cephalosporin C in the form of sodium salt.
제1항에 있어서, 역삼투막은 폴리아미드, 셀룰로즈 아세테이트, 폴리스틸렌을 재질로 하여 세포로스포린 C 농도를 40-80g/ℓ까지 농축하는 것을 특징으로 하는 방법.The method according to claim 1, wherein the reverse osmosis membrane is made of polyamide, cellulose acetate, and polystyrene, and the cellulosporin C concentration is concentrated to 40-80 g / L.
제1항에 있어서, 박막농축기로 100-300g/ℓ 까지 농축하는 것을 특징으로 하는 방법.The method of claim 1 wherein the thin film concentrator is concentrated to 100-300 g / l.
제1항에 있어서, 분무건조시 노즐분사온도를 150℃-200℃로 조절함을 특징으로하는 방법.The method according to claim 1, wherein the nozzle spray temperature is controlled to be 150 deg. C-200 deg. C during spray drying.
제1항에 있어서, 발효여과액의 pH를 무기산을 써서 2.5-7.0 되게 조절함을 특징으로하는 방법.The method of claim 1, wherein the pH of the fermentation filtrate is adjusted to 2.5-7.0 using an inorganic acid.
제1항에 있어서, 수지컬럼의 사용은, 단계별로 단독사용하거나 또는 연결하여 사용되는 것임을 특징으로 하는 방법.The method of claim 1, wherein the resin column is used alone or in series.
제1항에 있어서, 불순물제거 및 탈색을 위하여 사용된 WA계 및 HP계 수지를 PH가 2.5-7.0으로 조절된 물로 세척함을 특징으로 하는 방법.The method of claim 1, wherein the WA-based and HP-based resins used for removing impurities and decolorizing are washed with water having a pH of 2.5-7.0.
제11항에 있어서, 전도도를 분석하여 5.0ms/㎝ 이하에서 수세를 완료함을 특징으로 하는 방법.12. The method of claim 11, wherein the conductivity is analyzed to complete water washing at 5.0 ms / cm or less.
제1항 및 12항에 있어서, 유속은 0.5-2.0SV로 함을 특징으로 하는 방법.The method of claim 1 or 12, wherein the flow rate is 0.5-2.0SV.
제3항 또는 제4항에 있어서, XAD-2000 수지 및 SP-850 수지에 흡착된 세파로 스포린 C를 용리함에 있어서 저급알콕 특히 이소프로필 알콜로 용리함을 특징으로 하는 방법.5. Process according to claim 3 or 4, characterized in that eluting with lower alkoxy, in particular isopropyl alcohol, in eluting Sepharo-Sporin C adsorbed on XAD-2000 resin and SP-850 resin.
제14항에 있어서, 유속은 0.2-2.0 SV로 하고 알콜농도를 3-20%로 함을 특징으로 하는 방법.15. The method of claim 14, wherein the flow rate is 0.2-2.0 SV and the alcohol concentration is 3-20%.
제5항에 있어서, 전도도를 분석하여 세파로스포린 C가 용리되는 시점에서 SK-1B수지를 연결함을 특징으로 하는 방법.The method of claim 5, wherein the conductivity is analyzed to connect the SK-1B resin at the time point of cephalosporin C eluting.
제6항에 있어서, 역삼투막에 농축하기 전 수산화나트륨, 중조를 사용하여 pH를 3-7로 조절함을 특징으로 하는 방법.7. The method of claim 6, wherein the pH is adjusted to 3-7 using sodium hydroxide, sodium bicarbonate prior to concentration on the reverse osmosis membrane.
제6항 및 제17항에 있어서 온도를 10-20℃압력을 15-40㎏/㎠으로 조절함을 특징으로 하는 방법.18. The method of claim 6 and 17, wherein the temperature is adjusted to 10-20 [deg.] C. pressure to 15-40 kg / cm < 2 >.
제1항에 있어서 무기산을 사용하여 pH를 1-3으로 조절하여 여과과정의 잔존 세파로스포린 C를 회수함을 특징으로 하는 방법.The method of claim 1, wherein the pH is adjusted to 1-3 using an inorganic acid to recover the remaining separosporin C during the filtration process.
제19항에 있어서, 무기산으로 염산, 황산, 수산등을 사용함을 특징으로 하는 방법.20. The method according to claim 19, wherein hydrochloric acid, sulfuric acid, hydroxyl acid, or the like is used as the inorganic acid.
※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.※ Note: The disclosure is based on the initial application.