KR840006907A - 말라리아 기생충에 대한 보호항체를 발생시키는 폴리펩티드 부분을 함유한 면역 조성물. - Google Patents
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Abstract
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Description
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Claims (19)
- 말라리아 기생충, 특히 플라스모듐 팔시파럼과 같은 플라스모듐 종과 같은 말라리아 기생충으로 부터 얻어진 제제를 대부분의 세포 구조와 단백질 성분을 용해시킬 수 있는 세정제의 용액으로 처리하고, 형성된 용액으로 부터 분리 및 회수하는단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 말라리아 기생충 특히 플라스모듐 팔라시럼종에 대한 저항성이있는 원숭이로 부터 발생한 보호성 항체와 반응할 수 있으며, 약 50000-140000의 평균 분자량을 가진 말라리아 기생충에 함유되어 있는 하나 또는 여러개의 펩리드와 사람 또는 원숭이에게 감염되기 쉬운 기생충에 대한 보호항체의 제조를 유발시킬 수 있으며 기생충에 의해 면역된 원숭. 또는 사람으로 부터 얻어진 항체에 의해 인식될 수 있는 면역 폴리펩리드가 함유된 면역 조성물의 제조방법.
- 제1항에 있어서, 75000 ± 5000의 평균 분자량을 갖는 보호 폴리펩티드를 분리하는 단계가 또한 포함되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제1항에 있어서, 100000 ± 10000의 평균 분자량을 갖는 보호 폴리펩티드를 분리하는 단계가 또한 포함되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제1항에 있어서, 50000의 평균 분자량을 갖는 보호 폴리펩티드를 분리하는 단계가 포함되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제1항-제4항, 어느 한항에 있어서 세정제는 소듐 도데실설페이트 용액으로 구성되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제1항-제5항의 어느 한항에 있어서 최소한 하나 이상의 겔여과, 전기 영동 및 기타 방법에 의해 대응하는 분자량을 가는 폴리펩티드를 회수하는 단계가 포함되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제6항에 있어서, 72000-85000의 분자량을 갖는 폴리펩티드를 채집하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제6항에 있어서, 90000-120000의 분자량을 갖는 폴리펩티드를 채집하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제1항-제8항에 있어서, 기생충을 세정제로 처리하여 형성된 용액을 불용성 지지체에 고착된 보호항체와 접촉시키고 고착된 항체와 대응하는 항원사이에 형성된 복합물로 부터 항원을 용출시키는 단계가 포함되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 6,7 및 8항중의 어느 한항과 제9항에 있어서, 항체와의 접촉 전후에 전기 영동 또는 겔여과 과정을 거치는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제7항 또는 제10항에 있어서, 고착된 보호 항체 대신 폴리펩리드와 보호 항체와의 반응에 의해 형성된 모노클로운 항체를 사용하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제11항에 있어서, 관련된 모노클로운 항체가 50000, 72000, 85000, 90000, 96000, 100,000, 105000 및 120000의 분자량을 갖는 폴리펩티드중의 최소한 어느 하나와 직접적으로 반응하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제12항에 있어서, n°I -271항에서 C.N.C.M.에 침전된 하이브리도마에 의해 분비되는 항체에 대응하는 모노클로운 항체가 90000의 평균 분자량을 갖는 폴리펩티드와 직접 반응하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제1항-제13항의 어느 한항의 방법에 의해 얻어진 폴리펩티드의 일정량을 ELISA의 방법에서 사용되는 마이크로플레이트의 웰에 침전시키고 항체를 분석하기 위해 혈청의 희석도를 증가시켜 마이크로 플레이트의 웰에 주입하고 마이크로 플레이트와 내용물 모두를 배양시키며, 마이크로 플레이트를 적합한 완충용액으로 철저히 세척하며, 주어진 파장조사에 대한 흡광도 변이에 의해 가수분해 정도가 확인되는데, 이러한 성질을 이용하여 기질을 가수분해시킬 수 있는 효소 또는 플루오레시인 분자에 의해 표시되는 항체를 직접 반응할 수 있는 폴리펩티드에 주입하고, 플루오레시인 세기 또는 흡광도 변이를 측정하며 대조물에서 수행했던 비슷한 측정 방법으로 혈청의 항체 성분을 결정하는 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 혈청중의 항말라리아 항체의 존재를 시험관 내에서 분석하는 방법.
- 효소 또는 플루오레시인 화합물에 의해 표시되는 폴리펩리드, 사용된 폴리펩리드에 대한 특이성 갖는 항체및 표시용 완충 용액 또는 기질로 구성되는 것을 특징으로 하는 혈청중의 말라리아 항원의 존재를 시험관내에서 감별 또는 분석하기 위한 키트.
- 수용성 단백질 조성물과 말라리아 기생충, 특히 플라스모듐 형의 세포 구조 조성물이 함유된 수용액으로 개시하여 약 5000-140000, 특히 약 72000-140000, 가장 바람직하게는 72000 ± 2000 내지 90000 ± 5000의분자량을 갖는 폴리펩리드를 상기 용액으로 부터 분리 및 회수하는 단계로 구성되며 상기 회수된 폴리펩리드에는 사람에게 감염되기 쉬운 말라리아 기생충, 특히 플라스모듐 팔시파럼으로 면역이 된 원숭이로부터 얻어진 보호성 항체에 인식되는 면역 폴리펩티가 함유되어 있는 것을 특징으로 하는, 말라리아로부터 기원되며 사람에게 감염되기 쉬운 악성 플라스모듐, 특히 플라스모듐 팔시파럼에 대해 면역되지 않는 원숭이 특히 사이미리 시우레우스 원숭이를 보호할 수 있는 폴리펩리드를 하나 또는 하나 이상을 함유한 면역 조성물의 제조방법.
- 제16항에 있어서, 수용액을 형성하는 수용성 단백질 조성물과 세포 구조 성분은 동물 또는 사람, 특히 쥐에 감염되기 쉬운 말라리아 기생충으로부터 유도됨을 특징하는 방법.
- 제16항 또는 제17항에 있어서, 항체-항원 복합물을 형성하기 위해 상기 면역 폴리펩리드로 면역된 쥐의 비장 세포로부터 형성된 하이브리도마에 의해 분비된 모노클로운 항체나 또는 상기 면역된 원숭이로부터 얻어진 보호 항체와 폴리펩리드를 접촉시키고, 상기 복합물로 부 상기 항원을 분리 및회수하는 단계가 포함되는 것을 특징으로 하는 방법.
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