KR810001045B1 - 신규 아미노글리코시드 유도체의 제조 방법 - Google Patents

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Description

신규 아미노글리코시드 유도체의 제조 방법

본 발명은 우수한 항균 작용을 갖는 신규 아미노글리코시드 유도체의 제조 방법에 관한 것이며, 더 구체적으로 신규 아미노글리코시드 항생물질 유도체 및 그의 1-아미노기를

-하이드록시-

-헤테로사이클초산으로 아실화한 2-데옥시스트렙트아민성분을 함유하는 그의 염을 제조하는 방법에 관한 것이다.

아미노글루코시드 항생물질, 예를 들면 스트렙토마이신, 가나마이신, 겐타마이신, 토브라마이신 등은 그람-양성, 그람-음성 및 산성에서 빠르게 반응하는 세균에 대해 광위의 항균제로서 유효하게 사용된다. 그러나, 아미노글리코시드 항생물질은 종종 신장염 및 난청과 같은 부작용을 수반한다. 아미노글리코시드에 대한 내성균의 발생은 해결해야 할 또 다른 문제가 된다. 항균활성을 증대시키고, 비교적 부작용을 감소시키기 위해 아미노글리코시드를 1-아미노기에서 특정 아실기로 변형시키려고 시도해 왔었다. 예를 들면, 가나마이신 A의 1-아미노기를 L-(-)-4-아미노-2-하이드록시부티르산으로 아실화하여 제조한 우수한 항균제인 아미카신은 가나마이신 A 내성균에 대해 유효하며, 그의 독성이 가나마이신 A와 거의 동일하다. [가와구찌등에 의한 항생물질학지 25,695(1972), 미국특허 제3,781,268호지 및 후지사와 등에 의한 항생물질학지 27,677(1974) 참조].

본 발명자 등은 항균 스펙트럼과 역가를 아미노글리코시드의 1-아미노기를

-하이드록시-

-헤테로사이클 초산으로 아실화하여 증대시킬 수 있음을 발견하였으며, 본 발명은 이 발견에 기초한 것이다.

본 발명의 신규 아미노글리코시드 항생물질 유도체는 다음과 같은 일반식으로 나타낼 수 있다.

(식중, R는 임의로 치환되어도 좋은 1-2개의 질소 원자를 함유하는 4-6원 이종환식기이고, R¹은 아미노메틸, 하이드록시메틸, 1-아미노에틸 또는 1-메틸아미노에틸기이고, R², R³및 R⁶는 각각 수소 또는 하이드록시기이고, R⁴는 하이드록시 또는 아미노기이고, R⁵는아미노 또는 메틸아미노기이고, R⁷는 하이드록시 또는 메틸기이고, R⁸는 수소, 하이드록시메틸 또는 카르바모일 옥시메틸기이고, 점선은 이중결합의 존재 또는 부재를 나타낸다).

본 발명에서 원료로서 사용되고, 2-데옥시스트렙토아민성분을 함유하는 아미노글리코시드는 일반식(II)으로 표시된다.

(식중 R¹,R²,R³,R⁴,R⁵,R⁶,R⁷,R⁸및 점선은 전술한 것과 동일한 의미를 갖는다)

화합물(II) 및 그의 치환체의 대표적인 예를 표 1에 나타냈다.

[표 1]

전술한 일반식(I)에서, 4 내지 6-원 이종환식기는 2-아제티디닐, 3-아제티디닐, 2-피롤릴, 3-피롤릴, 2-피롤리닐, 3-피롤리닐, 2-피롤리디닐, 3-피롤리디닐, 2-아미다졸릴, 4-이미다졸릴, 2-이미다졸리닐, 4-이미다졸리닐, 2-이미다졸리디닐, 4-이미다졸리디닐, 3-피라졸릴, 4-피라졸릴, 3-피라졸리닐, 4-피라졸리닐, 3-피라졸리디닐, 4-피라졸리디닐, 2-피리딜, 3-피리딜, 4-피리딜, 2-피페리딜, 3-피페리딜, 4-피페리딜, 3-피리다지닐, 4-피리다지닐, 2-피리미디닐, 4-피리미디닐, 5-피리미디닐, 2-피라지닐, 3-피라지닐, 2-피페라지닐, 3-피페라지닐 등을 포함한다. 이들 이종환식기는 임의로 치환되어도 좋다.

본 발명의 신규 아미노글리코시드 항생물질 유도체(I)는 유리염기와 그의 염, 특히 비독성산부가염, 예를 들면,염산, 취화수소산, 옥화수소산, 황산, 인산, 카르본산 등의무기산과의 염 및 초산, 푸마르산, 말린산, 주석산, 말레인산, 귤산, 만델산, 아스콜빈산, 갈린산 등의 유기산과의 염을 포함한다.

1) 1-N-[2-하이드록시-2-(아제티딘-3-일)] 아세틸 토브라마이신

2) 1-N-[2-하이드록시-2-(피롤리딘-2-일)] 아세틸 토브라마이신

3) 1-N-[2-하이드록시-2-(피롤리딘-3-일)] 아세틸 토브라마이신

4) 1-N-[2-하이드록시-2-(피페리딘-3-일)] 아세틸 토브라마이신

5) 1-N-[2-하이드록시-2-(피페라진-2-일)] 아세틸 토브라마이신

6) 1-N-[2-하이드록시-2-(아제티딘-2-일)] 아세틸 토브라마이신

화합물(I)은 전술한 아미노글리코시드(II)를 일반식(III)

(II) (식중 R는 전술한 것과 동일한 의미를 갖는다)으로 표시되는 카르복실산 또는 그의 반응 유도체로 아실화시켜 용이하게 제조할 수 있다.

원료 아미노글리코시드(II)는 아실화시킬 1-아미노기 이외 다수의 기능기 (예, 아미노기)를 가지므로, 아실하에 의해 보호기로서 이들을 보호해주는 것이 좋다. 1-아미노기의 아실화 후에 용이하게 제거할 수 있으며, 펩티드 합성에 통상으로 사용하는 보호기를 모두 사용할 수 있다. 이와 같은 보호기의 예로 벤젠핵 상에서 임의로 치환될 수 있는 벤질옥시카르보닐기, 예로포르밀, t-부톡시카르보닐, t-아밀옥시카르보닐, 메톡시카르보닐, 에톡시카르보닐, p-톨루엔술포닐, 프탈로일, m-니트로페닐티오, 트리페닐메틸티오기를 들 수가 있다.

아실화제로서 사용하는 상기한 카르복실산의 반응성 유도체로 펩티드 합성에 통상으로 사용되는 화합물, 예를 들면 산할로겐화물, 산아지드화물, 산무수물, 혼합산무수물, 반응성 에스테르 등을 들 수가 있다. 이들 유도체의 예는 엠. 보단즈키(M. Bodanszky) 등에 의한 합성 제453권(1972) 및 펩티드합성 제75 내지 135권(1966)에 기재되었다. 아실화제에서, R가 이용 가능한 이미노기일 경우, 이것을 예를 들면 아미노글리코시드 보호에서 기술한 것과 동일한 적당한 보호기에 의해 보호하는 것이 적합하다.

아실화제(III)는 다음과 같은 반응식에 의해 제조할 수 있다.

(식중, R는 전술한 것과 동일한 의미를 갖는다)

이 방법은 3단계, 즉 출발물질(IV)의 산화(1단계), 시아노히드린 형성(2단계) 및 시아노기의 가수분해(3단계)로 된다. 출발물질(IV)는 공지의 화합물이며, 예를 들면 R가 2-피롤리디닐인 화합물은 피.지.가스맨(P.G. Gassman) 및 에이. 휀티맨(A. Fentiman)에 의해 유기화학회지 32, 2388(1967)에 기재되었다.

제 1단계. 산화

산화는 일급 알코올을 알데히드로 산화시키는 데 흔히 사용되는 종래의 방법, 예를 들면 오펜나우어. 산화(Oppenauer oxidation) 또는 크롬산-피리딘 복합체, 존스시약, 디메틸술폭사이드-디사이클로헥실카르보디이미드 등의 산화제를 사용하는 산화법으로 행한다. 본 발명에서, 디메틸술폭사이드-디사이클로헥실카르보디이미드와의 산화가 가장 적합하다. 산화제로서 디메틸술폭사이드-디사이클로헥실카르보디이미드를 사용할 때에, 반응은 -100℃ 내지 40℃ 사이의 온도, 적합하기로는 0℃ 내지 20℃ 사이에서 행한다. 필요에 따라, 반응은 반응 매질에 인산 또는 오염화인을 부가하여 촉진시킬 수 있다.

제 2단계. 시아노히드린 형성

이 단계는 화합물(V)을 시안화제로 시안화시켜 행한다. 시안하제의 예로 시안화수소, 시안화나트륨, 시안화칼륨 및 시아노히드린 형성에 통상으로 사용되는 시안화제 등을 들 수가 있다. 반응은 실온에서도 양호하게 진행하지만, 필요에 따라 가열시켜 촉진시킬 수 있다.

제 3단계

화합물(VI)의 가수분해는 산 또는 알칼리로 행한다. 이 산의 예로 니트릴의 가수분해에 통상적으로 사용되는 것, 예를 들면 염산 및 황산을 들 수가 있다. 알칼리로서 수산화나트륨, 수산화칼륨등을 사용할 수가 있다. 반응은 0℃내지 100℃, 적합하기로는 80℃ 내지 100℃ 사이의 온도에서 행한다.

본 발명은 아미노글리코시드의 아실화는 그의 1-아미노기 이외의 기능기가 보호된 원료 아미노글리코시드(II)를 적당한 용매중에서 상기한 아실화제와 반응시켜 행한다. 용매로서 알콜올류(예, 메탄올, 에탄올), 에테르류(예, 디에틸에테르, 1,2-디메톡시에탄, 테트라하이드로푸란, 디옥신), 케톤류(예, 아세톤, 메틸에틸케톤), 디메틸포름아미드, 디메틸아세트아미드, 피리딘, 물 등을 사용할 수가 있으며, 이들은 단독으로 또는 두개 이상의 혼합물 형태로 사용할 수 있다. 이실화를 행함에 있어서, 아실화제의 등물량 또는 과량, 적합하기로는 약 1.0 내지 2.0몰을 아미노글리코시드(II)의 1몰에 사용한다. 반응은 -20℃ 내지 50℃, 적합하기로는 0℃ 내지 35℃, 더 적합하기로는 20℃ 내지 25℃ 사이의 온도에서 행한다.

본 발명에서 제조한 아미노글리코시드 항생물질 유도체 및 그의 비독성염은 우수한 항균활성을 나타낸다. 이들은 수종의 그람 양성 및 그람-음성균에 대해 대응하는 비아실화 아미노글리코시드보다 수십배 더 활성이다. 본 발명의 아실화 화합물의 최소 저지농도(MIC, ㎍/㎖)와 대응하는 주지의 비아실화 아미노글리코시드를 다음의 표 2에 나타냈다.

[표 2]

MIC (㎍/㎖)

표 2에서 알 수 있는 바와 같이, 본 발명의 화합물(I)은 수종의 그람 양성균 및 음성균에 대해 유용한 항균제이며, 인체 및 기타 수종의 동물에 대한 약제로서 유용하다. 이 화합물은 아미노글리코시드에 민감한 균 및 내성균(예, 스타필로코쿠스 에티데르미디스에스, 체리지아콜리, 클레브시엘라 뉴모니애, 슈도모나스 아에루기노사, 프로테우스 미라빌리스)이 일으키는 전염병의 예방 또는 치료에 유용하다.

본 발명의 화합물(I)은 또한 부패 음식물, 사료 또는 위생물 중에 살아있는 세균의 성잘을 보존하기 위한 소독제로서 사용될 수 있다.

본 발명의 화합물(I)은 단독으로 또는 기타 함께 작용하는 물질과 혼합해서 여러가지의 경구 또는 비경구 복용 형태로 제제할 수 있다. 이 약제는 화합물(I) 0.01 내지 99%와 이 화합물을 용해, 분산 또는 현탁시킬 수 있는 고상 또는 액상 물질인 약제 담체와 혼합한 혼합물이다. 이 약제는 단위 복용형이다. 고상 약제는 정제, 산제, 건조시럽, 트로치, 과립제, 캡슐제, 환제, 좌약 등의 고상제이다. 액상 약제는 주사제, 연고제, 분산제, 흡입제, 현탁제, 액제, 유탁제, 시럽제, 또는 엘릭서제이다. 희석제(예, 전분, 슈크로오스, 락토오스, 탄산칼슘, 고령토), 증량제(예, 락토오스, 설탕, 소금, 글리신, 전분, 탄산칼슘, 인산 칼슘, 고령토, 벤토나이트, 활석, 소르비톨), 결합제(예, 전분, 아카시아, 젤라틴, 글루코오스, 아르긴산나트륨, 트라칸트, 카르복시메틸셀룰로오즈, 소비톨, 폴리비닐피롤리돈), 분해제(예, 전분, 한천, 탄산염, 소디움 라우릴설페이트), 윤활제(예, 스테아린산, 활석, 파라핀, 붕산, 실리카, 안식향산나트륨, 폴리에틸렌글리코올, 카카오유, 황산마그네슘), 유화제(예, 레시틴, 소르비탄 모노올레이트, 아카시아), 현탁제(예, 소르비톨, 메틸셀룰로우스, 글루코오스, 당시럽, 젤라틴, 하이드록시메틸 셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스, 알루미늄 스테아레이트겔, 경화지방), 용매(예, 물, 낙화생유, 참깨유, 올레인산메틸) 방부제(예, 메틸 또는 에틸 p-히드록시 벤조에이트, 소르빈산), 식용착색제, 향료, 가용제, 완충액, 안정제, 분산제, 수화제, 항산화제 등을 모두 이들이 화합물(I)에 역으로 영향을 미치지 아니하는 한 종래의 방법으로 사용할 수 있다.

본 발명의 화합물(I) , 특히 그의 황산염은 물에 용이하게 용해하며, 종래의 방법에 의해 정맥내, 근육내 또는 피하 주사용 용액으로 편리하게 사용할 수 있다. 화합물(I)은 앰플중에 주사액을 제조하기 위해 주사용 수용액 또는 유상 용매 중에 용해시킬 수 있고, 장기간 동안 주사제를 보존하기 위해 화합물(I)의 결정, 분말, 미세결정 또는 동결 건조물을 함유하는 병약제를 제조하는 것이 적합하다. 병약제는 사용하기 직전에 주사용 용매에 용해시키거나 또는 현탁시킬 수 있다. 이 제제물은 전술한 방부제를 함유해도 좋다.

또한, 본 발명의 화합물(I)은 좌약, 국소 또는 안과용연고제, 국소용 산제, 및 당업자에게 주지된 방법에 의해 제조될 수 있는 약제형으로 사용할 수 있다. 외용제는 본 발명의 화합물 0.01 내지 99%와 상기한 약제 담체를 필요한 양으로 함유한다.

본 발명은 또한 인체 또는 가축의 세균이 일으키는 전염병을 치료 또는 예방하는 방법을 제공하며, 이 방법에서 인체 또는 동물에 본 발명의 화합물을 주사용으로 매일 0.01 내지 5g/kg의 분할 또는 단일 복용량으로, 경구 투여량으로 매일 0.01 내지 10g/kg이 복용량으로 또는 국소용으로 매일 3 내지 12시간 간격으로 0.01 내지 10의 양으로 투약할 수 있다.

이 방법은 본 발명의 화합물에 민감한 세균이 일으키는 수개의 전염병, 예를 들면 포도상균 피부염, 동물 기생체증, 방광염, 신우염, 폐렴, 기관지염, 축농증, 비인두염, 편도염, 비염, 피부염, 농포증, 농양 상처증 및 연조직 전염병, 귀전염병, 골수염, 패혈증, 장염, 요도관 전염병 및 신우 신장염의 치료 또는 예방에 사용된다.

본 발명의 화합물은 예를 들면 산제, 건조시럽제, 정제, 트리치제, 과립제, 캡슐제, 한제, 좌약, 주사제, 연고제, 분산제, 흡입제, 현탁제, 액제, 유탁제, 시럽제 및 엘릭서제 등의 약제형으로 환자에게 투약하는 것이 좋다. 이들은 단위 복용 형태, 예를 들면 정제, 트로치, 캡슐제, 주사제, 약병제, 과립제 또는 분지된 포장용기에 넣은 산제로 사용할 수 있다.

본 발명을 다음의 실시예에 의해 더 구체적으로 설명한다.

[실시예 1]

2-하이드록시-2-(1-디페닐메틸아제티딘-3-일) 초산의 제조

(1) 피리딘 30㎖ 중의 1-디페닐메틸-3하이드록시 아제티딘 [에스.에스.차테르지(S.S. Chatterjee)와 디. 제이. 트리글(D.J. Triggle)에 의해 J.C.S. Chem. Commun 93(1968)에 기재된 방법으로 제조] 2.39g(1미리몰)의 용액에 p-톨루엔술포닐 클로라이드 3.8g(2당량)을 부가하고, 이 혼합물을 실온에서 철야 교반하고, 감압하에서 증발시켰다. 잔류물을 탄산나트륨 수용액으로 알칼리화하고, 벤젠으로 추출했다. 추출물을 물로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 감압하에서 증발시켰다. 생성되는 갈색 유상 잔류물(4.5g)을 실리카겔 20g의 컬럼에 흡착시키고, 벤젠으로 용출시켰다. 이 용출물을 에테르-헥산으로 결정시켜 108-110℃에서 용융점을 갖는 프리즘상으로서 1-디페닐메틸-3-톨루엔술포닐 아제티딘 2.55g을수득했다. 수율 64.8%. 이것을 에테르로 재결정하여 융점 110-112℃를 갖는 순수한 생성물을 얻었다.

원소분석 : C₂₃H₂₃NO₃S

계산치(%) : C,70.20; H,5.89; N,3.56; S,8.15.

실측치(%) : C,70.40; H,5.87; N,3.56; S,8.26.

(2) 디메틸술폭사이드 10㎖ 중의 1-디페닐메틸-3-톨루엔술포닐아제티딘 1.0g(2.54미리몰)의 용액에 시안화칼륨 547㎎(8.4미리몰, 3.3당량)을 부가하고, 이 혼합물을 100℃까지 15분간 가열시켰다. 냉각후, 이혼합물을 물과 혼합하고, 에테르로 추출했다. 추출물을 물로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 감압하에서 증발시켰다. 이 잔류물을 에테르에 용해시키고, 활성탄으로 처리하고, 여과했다. 여액을 증발시켜 침상정으로서 융점 153-154℃를 갖는 1-디페닐메틸-3-시아노아제티딘 435㎎을 수득했다.(수율 69%). 모액으로부터, 융점 149-152℃를갖는 동일한 생성물을 수득했다. (수율 6.3%), 전체 수율은 75.3%이었다.

생성물을 에테르로 재 결정하여 융점 158-159℃를 갖는 순수한 생성물을 수득했다.

원소분석 : C₁₇H₁₄N₂

계산치(%) : C,82.22; H,6.50; N,11.28.

실측치(%) : C,82.36; H,6.70; N,11.05.

농황산 및 메탄올(용적비=1 : 1)과의 혼합물 15㎖에 1-디페닐메틸-3-시아노아제티딘 3.13g(12.6미리몰)의 용액을 100℃에서 30분 동안 가열시키고, 냉각한 후, 다량의 빙수에 경사하고, 염화메틸렌으로 추출했다. 이 추출물을 탄산수소 나트륨 수용액과 물로 세척하고, 황산 나트륨으로 건조시키고, 증발시켜 조악한 생성물로서 1-디페닐메틸-3-메톡시카르보닐 아제티딘 2.707g을 수득했다. (수율 76.3%)

건조에테르 20㎖중의 리튬알루미늄하이드라이드 0.36g(3당량)의 현탁액에 건조 에테르 20㎖중의 조악한 1-디페닐메틸-3-메톡시카르보닐아제티딘 3.6g(12.7미리몰)의 용액을 적가하고, 이 혼합물을 실온에서 15분동안 교반했다. 과량의 리튬 알루미늄 하이드라이드를 초산에틸로 분해시켰다. 불용성 물질을 여거하고, 건조 에테르로 세척했다. 여액과 세척액을 화합하여 감압하에서 증발시켜 잔류물을 생성하고 이것을 에테르에 용해시켰다. 생성용액을 탄산수소 나트륨 수용액과 물로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시킨 다음에 증발시켜 반-고상물 3.131g을 수득히고, 이것을 에테르로 석출시켜 프리즘상으로서 1-디페닐메틸-3-하이드록시메틸아제티딘을 얻었다.

제 1 결정 : 융점 121-122℃ 제 2 결정 : 융점 120-121℃

수량 : 2.462g(76.5%) 수량 : 0.183g(5.7%)

전체수율 : 82.2%

원소분석 : C₁₇H₁₉NO

계산치(%) : C,80.57; H,7.56; N,5.53.

실측치(%) : C,80.80; H,7.64; N,5.43.

(4) 디메틸술폭사이드 30㎖ 중의 1-디페닐메틸-3-하이드록시 메틸아제티딘 2.27g(8.96미리몰)의 용액에 인산 586㎎(0.67당량)과 디사이클로헥실카르보디이미드 4.25g(2.3당량)을 부가하고, 이 혼합물을 실온에서 철야 교반했다. 불용성 물질을 여거하고, 여액을 탄산나트륨 수용액으로 알칼리성으로 하고, 초산에틸로 추출했다. 이 추출물을 14.9% 아황산수소나트륨 수용액으로 3회 재추출했다. 이 추출물을 10% 수산화 나트륨 수용액으로 알칼리성으로 하고, 염화메틸렌으로 추출했다. 이 추출물을 건조시키고, 증발시켜 조악한 밝은 황색의 시럽상으로 1-디페닐메틸-3-포르밀아제티딘 1.281g을 수득했다(수율 56.9%).

(5) 물 2㎖ 및 테트라하이드로푸란 2㎖와의 혼합물중에 용해시킨 조악한 1-디페닐메틸-3-포르밀아제티딘 1.13g(4.49미리몰)의 용액에 시안화칼륨 878㎎(3당량)을 부가하고, 이 혼합물을 실온에서 2시간동안 교반하고, 물로 혼합하고, 염화 메메렌으로 추출했다. 이 추출물을 물로 세척하고, 증발시켜 반-고상물로서 조악한 2-하이드록시-2-(1-디페닐메틸아세티딘-3-일)아세토니트릴 1.046g을 얻었다.

(6) 농염산 1㎖ 중의 조악한 2-하이드록시-2-(1-디페닐메틸아제티딘-3-일) 아세토니트릴 205㎎(0.74미리몰)의 용액을 85℃까지 2시간 가열시켰다. 과량의 농염산을 감압하에서 증발시켜 제거했다. 잔류물을 소량의 수산화암모늄 및 클로로포름과의 혼합물에 용해시키고, 생성되는 용액을 감압하에서 증발시켰다. 잔류물을 소량의 클로로포름과 혼합했다. 석출된 침전물을 여거하고, 여액을 감압하에서 증발시켰다. 이 잔류물을 묽은 수산화암모늄 수용액에 용해시키고, 에테르로 세척하고, 감압하에서 증발시켜 분말상으로서 2-하이드록시-2-(1-디페닐메틸아제티딘-3-일) 초산 120㎎을 수득했다. (수율 54%)

TLC : Rf=0.39 (메르크회사제 키젤겔 F254 i-C₃H₇OH : CHCl₃=2 : 1 : 1)

상기의 분말(322㎎)을 묽은 수산화암모늄 수용액에 용해시키고, 생성되는 용액을 활성탄으로 처리하고, 감압하에서 증발시켜, 순수한 2-하이드록시-2-(1-디페닐메틸아제티딘-3-일) 초산 237㎎을 수득했다.

[실시예 2]

1-N-[

-하이드록시-

-(아제티딘-2-일) 아세틸] 토브라마이신 황산염의 제조

디메틸포름아미드 2㎖ 중의 3, 2', 6', 3',-테트라-N-포르밀토브라마이신 300㎎(0.502미리몰), 2-하이드록시-2-(1-디페닐메틸아제티딘-3-일) 초산 179㎎(1.2당량)의 용액에 디사이클로헥실카르보디이미드 145㎎(1.4당량)을 부가했다. 이 혼합물을 실온에서 3일동안 교반했다. 나타낸 디사이클로헥실우레아를 여거하고, 소량의 디메틸포름아미드로 세척했다. 화합된 여액과 세척액을 초산에틸 70㎖와 혼합했다. 석출된 침전물을 여과하여 수집하고, 초산에틸로 세척하고, 물에 용해시켰다. 생성되는 용액을 감압하에서 증발시켜 조악한 분말로서 1-N-[2-하이드록시-2-(1-디페닐메틸아제티딘-3-일) 아세틸] 3, 2', 6', 3＂,-테트라-N-포르밀토브라마이신 322㎎을 수득했다.

물 0.7㎖ 중의 상기의 생성물의 용액에 농염산(11㎖) 및 메탄올(54.5㎖)과의 혼합물 4.2㎖를 부가하고, 이 혼합물을 35℃에서 24시간동안 교반시키고, 물로 희석시키고, Amberlite IR-4513㎖로 중화시켰다. 수지를 여거하고, 물로 세척했다. 화합된 여액과 세척액을 감압하에서 증발시켜 잔류물 308㎎을 수득하고, 이것을 실리카겔(메르크회사제 키젤겔 60) 컬럼에 흡착시키고, 이소프로판올, 수산화암모늄 및 클로로포름(5 : 1 : 1)과의 혼합물로 용출시켰다. (1회 분류물 : 10㎖). 분류물 제15 내지 43번을 감압하에서 증발시켰다. 잔류물을 Amberlite CG-50(NH₄ ⁺) 8㎖의 컬럼에서 다시 흡착시키고, 물 50㎖로 컬럼을 세척한 후에 물 150㎖ 및 0.4% 수산화암모늄 150㎖로 구배법으로 용출시켰다. (1분류법 : 4㎖). 분류물 제45 내지 65번을 감압하에서 증발시켜 1-N-2-[하이드록시-2-(1-디페닐메틸아제티딘-3-일) 아세틸] 토브라마이신 54㎎을 수득했다.

상기의 생성물을 물 4㎖ 및 디옥산 4㎖와의 혼합물을 용해시키고, 실온에서 수소분위기 하에 10% 팔라듐-목탄 60㎎의 존재하에 촉매적으로 철야 수소 첨가했다. 이 촉매를 여거하고, 물로 세척했다. 화합된 여액과 세척액을 감압하에서 증발시켜, 잔류물 45㎎을 수득하고, 이것을 Amberlite CG-50(NH₄ ⁺) 컬럼 4.5㎖에 흡착시키고, 물 50㎖의 컬럼으로 세척한 후에, 경사법으로 물 100㎖ 및 1N 수산화암모늄 200㎖로 용출시켰다. (1회 분류물 : 2㎖). 분류물 제91-131번을 감압하에서 증발시켰다. 이 잔류물을 물에 용해시키고, 활성탄으로 처리하고, 감압하에서 건조시까지 증발시켜 1-N-[2-하이드록시-2-(아제티딘-3-일)] 아세틸 토브라마이신 37㎎을 수득했다.

상기의 생성물을 물 5㎖에 용해시키고, 0.1003N 황산 2㎖를 부가하여 pH4.6으로 조정하고, 에탄올 25㎖로 혼합하고, 감압하에서 약간 농축시켰다. 석출된 침전물을 여과하여 수집하고, 에탄올로 세척하고, 물에 용해시켰다. 생성용액을 활성탄으로 처리하고, 감압하에서 증발시켜 잔류물 36㎎을 수득했다. 상기의 잔류물의 일부분(33.9㎎)을 중량이 일정할 때까지 습기를 흡수하고, 1-N-[2-하이드록시-2-(1-아제티딘-3-일) 아세틸] 토브라마이신 2.5H₂SO₄10H₂O 36㎎을 전체 수율 5%로 수득했다.

원소분석 : C₂₃H₄₄N₆O₁₁2.5H₂SO₄10H₂O

계산치(%) : C,27.46; H,6.91; N,8.35; S,7.97

실측치(%) : C,27.11; H,6.28; N,8.38; S,8.37

[실시예 3]

2-하이드록시-2-(1-벤질옥시카르보닐피롤리딘-2-일) 초산의 제조.

(1) 아세톤 20㎖ 및 물 4㎖와의 혼합물 중의 2-하이드록시 메틸피롤리딘(피. 지. 가스맨 및 에이. 휀티맨에 의해 유기화학회지 32,2388(1967)에 기재된 방법에 의해 제조)3.40g(3.21 미리몰)의 용액에 염화벤조일 5.0㎖(1.34당량) 및 탄산나트륨 4.5g(1.34당량)의 수용액 10㎖를 동시에 적가하고, 여기에 30분후에 물을 부가했다. 이 혼합물을 염화 메틸렌으로 추출했다. 유기층을 분리시키고, 물로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 감압하에서 증발시켜 잔류물 8.4g을 생성하고,이것을 키젤겔 60(메르크화사제) 84g의 컬럼에 흡착시키고, 벤진으로 용출시키고, 이어서 벤진 및 클로로포름과의 혼합물, 및 클로로포름으로 용출시켰다.이 용출물 감압하에서 증발시켜 유상 1-벤조일-2-하이드록시메틸피롤리딘 5.1g을 수득했다. (수율 77.5%).

(2) 건조 디메틸술폭사이드 70㎖ 중의 1-벤조일-2-하이드록시메틸 피롤리딘 5.1g(24.9미리몰)의 용액에 오르토인산 800㎎(8.2미리몰)과 디사이클로헥실카르보디이미드 10.50g(51미리몰)을 부가하고, 이 혼합물을 실온에서 교반하고, 철야 방치하고, 초산에틸 200㎖와 혼합했다. 석출된 디사이클로헥실우레아를 여거하고, 여액을 물과 혼합하고, 초산에틸로 6회 추출했다. 이 추출물을 물로 3회 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 감압하에서 증발시켜 유상 잔류물 6.3g을 수득하고,이것을 벤젠에 용해시키고, 23(w/w)% 아황산나트륨 수용액 및 18(w/w)% 아황산나트륨 수용액으로 세척했다. 세척액을 23(w/w)% 탄산나트륨 수용액 100㎖로 중화시키고, 염화메틸렌으로 4회 추출했다. 이 추출물을 황산나트륨으로 건조시키고, 감압하에서 증발시켜 1-벤조일-2-포르밀피롤리딘 3.210g수득했다. (수율 63.5%)

(3) 테트라하이드로푸란 28㎖및 물 19㎖와의 혼합물에 용해시킨 1-벤조일-2-포르밀피롤리딘 3.347g(16.5미리몰)의 용액에 시안화칼륨 1.30g(20미리몰, 1.23당량) 및 농염산 1.4㎖(16.7미리몰)를 부가했다. 1시간 후에, 혼합물을 물로 희석하고,클로로포름으로 추출했다. 유기층을 분리시키고, 물로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 감압하에서 증발시켜 정량적인 수율로 조악한 결정형 2-하이드록시-2-(1-벤조일피롤리딘-2-일) 아세토니트릴 3.8g을 수득했다.

상기의 결정 일부분을 염화메틸렌 및 헥산과의 혼합물로 2회 재결정하여 침상정을 수득했다.

융점 122˚- 136℃

원소분석 : C₁₃H₁₄N₂O₂

계산치(%) : C,67.81; H,6.13; N,12.17.

실측치(%) : C,68.08; H,6.18; N,12.02.

(4) 농염산 30㎖ 중의 조악한 2-하이드록시-2-(1-벤조일피롤리딘-2-일) 아세토니트릴 3.8g(16.5미리몰)의 용액을 1.5시간 동안 환류시키고, 물로 희석하고, 에테르로 세척했다. 수용액층을 Amberlite IR-120B(H⁺) 100㎖의 컬럼에 흡착시키고, 물 300㎖로 세척하고, 5N 수산화암모늄 500㎖로 용출시켰다. 용출물을 감압하에서 증발시켜 잔류물을 수득하고, 이것을 물에 용해시켰다. 생성용액을 활성탄으로 처리하고, 감압하에서 농축시켰다. 석출된 침전물을 여과하여 수집하고, 아세톤으로 세척하여 엷은 조각 결정으로서 2-하이드록시-2-(피롤리딘-2-일) 초산 1.102g을 수득했다. (수율 45.9%).

원소분석 : C₆H₁₁NO₃1/5H₂O

계산치(%) : C,48.44; H,7.72; N,9.41.

실측치(%) : C,48.32; H,7.80; N,9.21.

(5) 물 10㎖ 중의 수산화나트륨 550㎎(2당량)의 용액중의 2-하이드록시-2-(피롤리딘-2-일) 초산 1.002g(6.9미리몰)의 용액에 염화벤조일 옥시카르보닐 1.18㎖(1.2당량)를 부가하고, 이 혼합물을 실온에서 1.5시간동안 교반하고, 에테르로 2회 세척하고, 10% 염산으로 pH2로 조정한 다음에 염화메틸렌으로 3회 추출했다. 이 추출물을 물로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 감압하에서 증발시켜

-하이드록시-

-(1-벤질옥시카르보닐피롤리딘-2-일) 초산 1.288g을 수득했다. (수율 70.3%)

[실시예 4]

1-N-[2-하이드록시-2-(피롤리딘-2-일) 아세틸] 토브라마이신황산염의 제조.

디메틸포름아미드 22㎖중의 2-하이드록시-2-(1-벤질옥시카르보닐피롤리딘-2-일) 초산 578㎎, N-하이드록시숙신이미드 180㎎(1.1당량), 디사이클로헥실카르보디이미드 379㎎(1.3당량) 및 3, 2', 6', 3＂-테트라-N-포르밀토브라마이신 840㎎(1.41미리몰)을 철야 방치했다. 석출된 디사이클로헥실우레아를 여거하고, 디메틸포름아미드 3㎖로 세척했다. 화합된 여액과 세척액을 초산에틸 250㎖와 혼합했다. 불용성 물질을 여과하여 수집하고, 초산에틸로 세척하고, 메탄올을 함유하는 물에 용해시켰다. 생성용액을 감압하에서 증발시켜 1-N-[2-하이드록시-2-(1-벤질옥시카르보닐피롤리딘-2-일) 아세틸]-3, 2', 6', 3＂-테트라-N-포르밀토브라마이신 1.183g을 수득했다.

상기의 생성물을 메탄올 및 물(4 : 5)과의 혼합물 27에 용해시키고, 수소 분위기 하에서 10% 팔라듐-목탄 414㎎존재하에 1시간동안 촉매적으로 수소 첨가했다. 촉매를 여거하고, 메탄올을 수용액으로 세척했다. 화합된 여액과 세척액을 감압하에서 증발시켜 1-N-[2-하이드록시-2-(피롤리딘-2-일) 아세틸]-3, 2', 6', 3＂-테트라-N-포르밀토브라마이신 1.032g을 수득했다.

상기의 생성물을 물 1.71㎖에 용해시키고, 농염산(11.0㎖) 및 메탄올(54.5㎖)와의 혼합물 16.5㎖를 부가했다. 이 혼합물을 36℃에서 24시간동안 가온하고, Amberlite IR-45로 중화시켰다. 수지를 여거하고, 물로 세척했다. 화합된 여액과 세척액을 감압하에서 증발시켜 잔류물 1.166g을 수득하고, 이것을 물 16㎖에 용해시켰다. 생성용액을 Amberlite CG-50(NH₄ ⁺) 320㎖의 컬럼상에 흡착시키고, 물 1.2

의 컬럼으로 세척한 후에, 경사법으로 1N 수산화 암모늄 1

와 물 1

로 용출시켰다. (1회 분류물 : 15㎖) 분류물 제79 내지 86번, 제87 내지 91번, 및 95 내지 103번을 각각 수집했다.

분류물 제95 내지 103번을 0.0955N 황산으로 pH4.5로 조정하고, 감압하에서 1-2㎖까지 농축하고, 에탄으로 50㎖로 혼합하고, 빙냉했다. 석출된 침전물을 여과하여 수집하고, 에탄올로 세척하고, 물에 용해시켰다. 생성용액을 활성탄으로 처리하고, 동결 건조했다. 동결 건조물을 중량이 일정한 때까지 습기를 흡수하여 1-N-[2-하이드록시-2-(피롤리딘-2-일) 아세틸] 토브라마이신 2.5H₂SO₄9H₂O 196㎎을 수득했다. (수율 27.4%)

원소분석 : C₂₄H₄₆N₆O₁₁2.5H₂SO₄9H₂O

계산치(%) : C,28.76; H,6.94; N,8.39; S,8.00

실측치(%) : C,29.04; H,6.91; N,8.32; S,8.06

분류물 제79 내지 86번을 Amberlite CG-50(NH₄ ⁺) 100㎖의 컬럼에 흡착시키고, 물 1

및 수산화암모늄 1

로 용출시켰다. (1회 분류물 : 12㎖). 분류물 제69 내지 73번 및 77 내지 81번을 각각 수득했다.

분류물 제77 내지 81번 및 전술한 분류물 제87 내지 91번을 화합하고, 0.0955N 황산 9.8㎖로 pH4.6으로 조정하고, 감압하에서 1-2㎖로 농축시키고, 에탄올 50㎖와 혼합한 다음에 빙냉했다. 석출된 침전물을 여과하여 수집하고, 에탄올로 세척하고 물에 용해시키고, 활성탄으로 처리한 다음에 동결 건조했다. 동결 건조물을 중량이 일정할때까지 습기를 흡수하여, 1-N-[2-하이드록시-2-하이드록시-2-(피롤리딘-2-일) 아세틸] 토브라마이신 2.5H₂SO₄9H₂O 142㎎을 수득했다. (수율 14%)

원소분석 : C₂₄H₄₆N₆O₁₁·2.5H₂SO₄9H₂O

계산치(%) : C,28.76; H,6.94; N,8.39; S,8.00

실측치(%) : C,29.04; H,6.91; N,8.32; S,8.06

분류물 제69 내지 73번을 0.0955N 황산 7.0㎖로 조정하고, 감압하에서 1-2㎖로 농축하고, 에탄올 50㎖와 혼합하고, 빙냉했다. 석출된 침전물을 여과하여 수집하고, 에탄올로 세척하고 물에 용해시켰다. 생성용액을 활성탄으로 처리한 다음에 동결 건조했다. 동결 건조물을 중량이 일정해질 때까지 습기를 흡수하여 1-N-[2-하이드록시-2-(피롤리딘-2-일) 아세틸] 토브라마이신 2.5H₂SO₄9H₂O 142㎎을 수득했다. (수율 10.1%)

원소분석 : C₂₄H₄₆N₆O₁₁·2.5H₂SO₄9H₂O

계산치(%) : C,28.76; H,6.94; N,8.39; S,8.00.

실측치(%) : C,29.08; H,6.96; N,8.25; S,8.12.

총수율 : 51.5%

[실시예 5]

2-하이드록시-2-(1-벤질피톨리딘-3-일) 초산의 제조

(1) 건조디메틸술폭사이드 400㎖중의 디사이클로헥실카르보디이드 61.8g(0.3몰)의 용액에 1-벤질-3-하이드록시메틸피롤리딘 야오-후아 우(Yao-Hua Wu) 및 아르.에프. 휄드 캠프(R.F. Feldkamp)에 의해 유기 화학회지 26,1519(1961)에 기재된 방법으로 제조 19.10g(0.1몰)의 용액을 빙냉하에 15분동안 적가했다. 이 혼합물을 실온에서 철야 교반했다. 여기에 디사이클로헥실카르보디이미드 (13.26g, 60밀리몰)와 오염화인(4.40g, 30 밀리몰)을 부가하고, 이 혼합물을 철야 교반하고, 빙수에 붓고, 염화메틸렌 300㎖와 혼합하고, 30분 동안 교반했다. 석출된 불용성 물질을 여거하고, 물로 세척했다. 화합된 여액과 세척액을 염화메틸렌 200㎖로 2회 세척하고, 20(w/w)% 아황산수소나트륨 수용액으로 세척했다. 수용액층을 분리시키고 염화메틸렌 100㎖로 3회 세척하고, 20(w/w)% 탄산나트륨 수용액으로 pH9로 조정하고, 염화메틸렌 200㎖로 4회 추출했다. 추출물을 20(w/w)% 탄산나트륨 수용액과 혼합하고, 염화메틸렌으로 추출했다. 이 추출물을 물로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 감압하에서 증발시켜 조악한 유상 1-벤질-3-포르밀피롤리딘을 수득했다(수율 66%).

(2) 테트라하이드로푸란 23㎖와 물 23㎖와의 혼합물에 조악한 1-벤질-2-포르밀피롤리딘 12.45g을 용해시킨 용액에 농염산 11.4㎖(2당량)과 시안화칼륨 분말 8.39g(2당량)을 빙냉하에 15분동안 부가했다. 이 혼합물을 동일한 온도에서 2시간 동안 교반하고, 10% 탄산나트륨 수용액으로 pH 10으로 조정하고, 염화메틸렌으로 3회 수출했다. 이 추출물을 빙수로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 감압하에서 증발시켜 2-하이드록시-2-(1-벤질피롤리딘-3-일) 아세토니트릴 12.05g을 수득했다.

(3) 농염산 23㎖중의 2-하이드록시-2-(1-벤질피롤리딘-3-일)아세토니트릴 12.05g의 용액을 1시간 동안 욕중에서 가열시킨 다음에 철야 방치했다. 냉각한 후에 침전된 염화암모늄을 여거하고, 아세톤으로 세척했다. 화합된 여액과 세척액을 감압하에서 증발시켜 잔류물을 수득하고, 이것을 물에 용해시키고, 23(w/w)% 수산화나트륨 수용액 20㎖와 혼합한 다음에 염화메틸렌으로 세척했다. 수용액층을 Amberlite IR-12BO(H⁺) 300㎖의 컬럼에 서서히 흡착시키고, 컬럼을 물로 세척한 후에, 1N 수산화암모늄 으로 용출시켰다. 용출물을 감압하에서 건조시까지 증발시키고, 잔류물을 아센톤과 혼합했다. 석출된 침전물을 여과하여 수집하고, 에탄올 및 아세톤과의 혼합물로부터 재결정하여 2-하이드록시-2-(1-벤질피롤리딘-3-일) 초산 1.422g을 수득했다. 융점 174~176℃.

원소분석 : C₁₃H₁₇NO₃

계산치(%) : C, 66.39; H, 7.28; N, 5.95

실측치(%) : C, 66.09; H, 7.27; N,5.27

모액(3.4g)을 키젤겔 60(메르크회사제) 360g의 컬럼으로 크로마트그라피하고, 이소프로판올 및 농수산화암모늄(30 : 1)과의 혼합물로 용출했다. 용출물을 감압하에서 건조시까지 증발시키고, 잔류물을 에탄올로 결정시켜 2-하이드록시-2-(1-벤질피롤리딘-3-일) 초산 2.70g을 수득했다. 총수율 : 4.122g(17.5%).

[실시예 6]

1-N-2-하이드록시-2-(피롤리딘-3-일)아세틸토브라마이신 황산염의 제조.

디메틸포름아미드 15㎖중의 3, 2', 6', 3＂-테트라-N포르밀토브라마이신 598㎎(1.0밀리몰)의 용액에 2-하이드록시-2-(1-벤질피롤리딘-3-일)초산 449㎎(1.9당량), N-하이드록시 숙신이미드 219㎎(1.9당량) 및 디사이클로헥실카르보디이미드 392㎎(1.9당량)을 부가했다. 이 혼합물을 50℃ 유욕상에서 10시간 동안 교반한 다음에 냉각했다. 석출된 디사이클로헥실우레아를 여거하고, 소량의 디메틸포름아미드로 세척했다. 화합된 여액과 세척액을 초산에틸 300㎖와 혼합했다. 석출된 침전물을 여과하여 수집하고, 초산에틸로 세척하고, 물에 용해시켰다. 생성 용액을 감압하에서 건조시까지 증발시켰다.

물 1.5㎖중의 상기 잔류물의 용액에 농염산(11.0㎖)과 메탄올(54.5㎖)과의 혼합물 10㎖를 부가하고, 이 혼합물을 37℃에서 24시간 동안 교반하고, Amberlite IR-45 25㎖로 중화시켰다. 이 수지를 여거하고, 물로 세척했다. 화합된 여액과 세척액을 감압하에서 증발시켜 잔류물을 수득하고, 이것을 소량의 물에 용해시키고, Amberlite CG-50(NH₄ ⁺)의 컬럼의 160㎖에 흡착시키고, 이 컬럼을 물 400㎖로 세척한후에, 0.2% 수산화암모늄 수용액으로 (1회 분류물 16㎖) 분류물 제161번까지 용출시키고, 이어서 분류물 제162번으로부터 0.3% 수산화암모늄 수용액으로 용출시켰다. 분류물 제182번 내지 199번을 수집하고, 증발시켰다. 잔류물(400㎎)을 50% 메탄올 24㎖에 용해시키고, 수소분위기하에서 10% 팔라듐-목탄 260㎎ 존재하에서 촉매적으로 철야 수소 첨가했다.

촉매를 여거하고, 메탄올 수용액으로 세척했다. 화합된 여액과 세척액을 감압하에서 증발시켰다.

상기의 잔류물(384㎎)을 소량의 물에 용해시키고, Amberlite CG-50(NH₄ ⁺) 60㎖의 컬럼상에 흡착시키고, 컬럼을 세척한 후에 경사법으로 1N 수산화암모늄 1

와 물 1

로 용출시켰다(1회 분류물 : 13㎖). 분류물 제109내지 135번을 감압하에서 농축하고, 활성탄으로 처리하고, 여과한 다음에 감압하에서 증발시켰다. 잔류물(301㎎)을 0.0995N황산 21.6㎖를 부가하여 pH 4.65로 조정하고, 감압하에서 약 1 내지 2m로 농축하고, 에탄올 40㎖와 혼합했다. 석출된 침전물을 여과하고 수집하고, 에탄올로 세척하고, 물에 용해시켰다. 생성용액을 활성탄으로 처리하고, 동결 건조했다. 동결 건조물을 중량이 일정해질 때까지 습기를 흡수하여 1-N-[2-하이드록시-2-(피롤리딘-3-일)아세틸] 토브라마이신 황산염 408.5㎎을 수득했다(수율 41.6%).

원소분석 : C₂₄H₄₆N₆O₁₁ㆍ2.5H₂SO₄ㆍ8H₂O

계산치(%) : C, 29.29; H, 6.86; N, 8.54; S, 8.15

실측치(%) : C, 29.34; H, 6.98; N, 8.47; S, 8.23

[실시예 7]

2-하이드록시-2-(1-벤질옥시카르보닐피페리딘-3-일)초산의 제조.

(1) 물 10㎖ 및 초산 15㎖와의 혼합물중의 2-하이드록시-2-(피페리딘-3-일)초산 하이드로클로라이드 떠블유. 사우어밀취(W.Sauermilch) 및 에이. 월프(A.wolf)에 의해 Archive der Pharmzie, 292, 38(1959)에 기재된 방법으로 제조의 용액을 수소 분위기 하에서 산화백금 모노수화물 존재하에 촉매적으로 철야 수소 첨가했다. 촉매를 여거하고, 물로 세척했다. 화합된 여액과 세척액을 감압하에서 증발시켰다. 잔류물을 아세톤으로 결정시켰다. 결정을 여과하여 수집하고 아세톤으로 세척하고, 아세톤으로 재결정하여 융점 185˚내지 188℃를 갖는 2-하이드록시-2-(피페리딘-3-일)초산 하이드로클로라이드 2.15`g을 수득했다(수율 78.5%). 또, 결정을 아세톤으로 2회 재결정시켜 미세프리즘상으로서 융점 189℃ 내지 192℃를 갖는 동일한 생성물을 수득했다.

원소분석치 : C₇H₁₃NO₃ㆍHCl

계산치(%) : C, 42.97; H, 7.21; N, 7.16; Cl, 18.13.

실측치(%) : C, 42.78; H, 7.29; N, 7.17; Cl, 18.20.

(2) 2.7(w/w)% 수산화나트륨 수용액 중의 2-하이드록시-2-(피페리딘-3-일)초산 하이드로클로라이드 (1.956g, 10밀리몰)의 용액에 벤질옥시카르보닐클로라이드 1.72㎖(1.2당량)를 부가했다. 2시간 후에, 반응 혼합물을 에테르로 2회 세척하고, 10% 염산으로 pH1 내지 2로 조정하고, 염화메틸렌으로 3회 추출했다. 추출물 물로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 감압하에서 증발시켜 유상 2-하이드록시-2-(1-벤질옥시카르보닐피페리딘-3-일)초산 2.650g을 수득했다(수율 90.4%).

[실시예 8]

1-N-[2-하이드록시-2-(피페리딘-3-일)아세틸]토브라마이신 황산염의 제조.

디메틸포름아미드 5㎖중의 3, 2', 6', 3＂-테트라-N-포르밀토브라마이신 299㎎(0.5밀리몰)의 용액에 2-하이드록시-2-(1-벤질옥시카르보닐피페리딘-3-일)초산 191㎎(1.3당량), N-하이드록시숙신이므드 85㎎(1.3당량) 및 디사이클로헥실카르보디이미드 134㎎을 부가하고, 혼합물을 실온에서 3일동안 방치했다. 석출된 디사이클로헥실우레아를 여거하고, 소량의 디메틸포름아미드로 세척했다. 화합된 여액과 세척액을 초산에틸 200㎖와 혼합하고, 빙냉했다. 30분 후에, 석출된 불용성 물질을 초산에틸로 추출하고, 이어서 메탄올 수용액에 용해시켰다. 생성 용액을 감압하에서 증발시켜 1-N-[2-하이드록시-2-(1-벤질옥시카르보닐피페리딘-3-일)아세틸]-3, 2', 6', 3＂-테트라-N-포르밀토브라마이신 18㎎을 수득했다.

물 21.3㎖와 메탄올 8.3㎖와의 혼합물 중의 상기의 생성물의 용액을 10% 팔라듐-목탄 217㎎존재하에 촉매적으로 2.5시간 동안 수소 첨가했다. 촉매를 여거하고, 물로 세척했다. 화합된 여액과 세척액을 감압하에서 증발시켜 1-N-[2-하이드록시-2-(피페리딘-3-일)아세틸]-3, 2', 3＂-테트라-N-포르밀토브라마이신 381㎎을 수득했다.

물 0.5㎖중의 상기의 생성물의 용액에 농염산(11.0㎖) 및 메탄올(54.5㎖)과의 혼합물 5㎖를 부가하고 이 혼합물을 36℃에서 24시간 동안 교반하고, Amberlite IR-45 13㎖로 중화시켰다. 수지를 여거하고, 물로 세척했다. 화합된 여액과 세척액을 감압하에서 증발시켰다. 잔류물(390㎎)을 소량의 물에 용해시키고 Amberlite CG-50(NH₄ ⁺) 120㎖의 컬럼에 흡착시키고, 이 컬럼을 물 500㎖로 세척한 후에, 경사법에 흡착시키고, 이 칼럼을 물로 세척한 후에, 경사법에 의해 물 1

및 1N 수산화암모늄 1

로 용출시켰다(1회 분류물 13㎖). 분류물 제113 내지 123번을 감압하에서 증발시켰다. 잔류물을 물에 용해시키고, 활성톤으로 처리하고, 여과한 다음에 세척했다. 여액을 감압하에서 증발시켜 1-N-[2-하이드록시-2-(피페리딘-3-일)아세틸] 토브라마이신 248㎎을 수득했다.

상기의 생성물을 0.0955N 황산 16.0㎖를 부가하여 pH 4.6으로 조정하고, 감압하에서 증발시켜, 에탄올 40㎖와 혼합하고, 빙냉했다. 석출된 침전물을 여과하여 수집하고, 에탄올로 세척하고, 물에 용해시켰다. 생성용액을 활성탄으로 처리하고, 여과하고, 동결 건조했다. 동결 건조물을 중량이 일정해질 때 까지 습기를 흡수하여, 1-N-[2-하이드록시-2-(피페리딘-3-일)아세틸] 토브라마이신 2.5H₂SO₄ㆍ9H₂O 316㎎을 수득했다(수율 62.2%).

원소분석 : C₂₅H₄₈N₆O₁₁ㆍ2.5H₂SO₄ㆍ9H₂O

계산치(%) : C, 29.55; H, 7.04; N, 8.27; S, 7.89

실측치(%) : C, 29.78; H, 7.07; N, 8.04; S, 7.83

[실시예 9]

2-하이드록시-2-(1,4-디벤질피페라진-2-일) 초산의 제조.

(1) 건조에테르 40㎖중의 에틸 1,4-디벤질피페라진-2-카르복실레이트 이.주커(E.Jucker) 및 이.리씨(E. Rissi)에 의해 Helv. Chim. Acta, 298. 2646(1963)에 기술된 방법으로 제조 5.0g(13.9밀리몰)의 용액에 질수 분위기 하에서 -56 내지 -66℃의 온도에서 톨루엔 중에 용해시킨 디이소부틸알루미늄하이드라이드 1.46몰의 용액 30㎖를 15분 동안 적가하고, 이 혼합물을 동일한 온도에서 1시간 동안 교반했다. 10% 수산화나트륨 수용액(20㎖)을 여기에 서서히 적가하고, 이 혼합물을 실온까지 가온시키고, 에테르로 추출했다. 추출물을 물로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 감압하에서 증발시켜, 조악한 1.4-디벤질-2-포르밀피페라진 5.2g을 수득했다.

(2) 테트라하이드로푸란 30㎖와 물 10㎖와의 혼합물중의 조악한 1,4-디벤질-2-포르밀피페라진 5.2g의 용액에 시안화칼륨 2.2g(33.8밀리몰)과 농염산 3.4㎖를 빙냉하에 부가하고, 이 혼합물을 30분 동안 교반하고, 물과 혼합하고, 클로로포름으로 추출했다. 이 추출물을 물로 세척하고, 황산 마그네슘으로 건조시키고, 감압하에서 증발시켜 조악한 유상 2-하이드록시-2-(1,4-디벤질피페라진-2-일) 아세토니트릴 5.70g을 수득했다.

(3) 농염산 9.2㎖중의 조악한 2-하이드록시-2-(1,4-디벤질피페라진-2-일) 아세토니트릴 5.70g의 용액을 1시간 동안 욕조상에서 가온시키고, 이어서 냉각한 후에, 이 용액을 13(w/w)% 수산화나트륨 수용액을 부가하여 알칼리성으로 하고, 염화메틸렌으로 세척하고, Amberlite IR-120B(H⁺) 280㎖의 컬럼에 흡착시키고, 물 2.5

의 컬럼으로 세척한 후에, 수산화암모늄 수용액으로 용출시켰다. 용출물을 감압하에서 농축시켜 점조한 잔류물 25㎖을 수득하고 이것을 물 25㎖ 및 이소포토판올 2.5㎖와의 혼합물에 용해시키고, 키젤겔 60(메르크회사제)의 컬럼에 흡착시키고, 이소프로판올-농수산암모늄(4 : 1)으로 용출시켰다(1회 분류물 16g). 분류물 제12 내지 20번을 수집하여, 감압하에서 증발시켰다. 이 잔류물을 물에 용해시키고, 활성탄으로 처리한 다음에 여과했다. 여액을 감압하에서 증발시켜 2-하이드록시-2-(1,4-디벤질피페라진-2-일) 초산 2.23g을 수득했다(수율 47%).

(4) 메탄올 5㎖중의 2-하이드록시-2-(1,4-디벤질피페라진-2-일) 초산 425㎎의 용액에 에테르 중에 용해시킨 디아조메탄올용액을 부가했다. 과량의 디아조메탄올을 초산으로 분해시킨 후에, 이 혼합물을 감압하에서 건조시까지 증발시켰다. 잔류물을 에테르에 용해시키고, 생성 용액을 10% 황산나트륨 수용액과 물로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 감압하에서 증발시켜 에리스로 및 스레오의 혼합물로서 메틸 2-하이드록시-2-(1,4-디벤질피페라진-2-일) 초산염 468㎎을 수득했다.

(5) 상기의 생성물(2.1g)을 액체 크로마토그라피[예비 충전 칼럼, 사이즈 C; 벤젠-초산에틸(7 : 3)]로 분리, 정제하여 보다 덜 극성인 에스테르 912㎎, 더 극성인 에스테르 896㎎과 이들 혼합물 40㎎을 수득했다. 수율은 각각 43.4%, 42.7% 및 2%이었다.

(6) 메탄올 3㎖중의 상기의 보다 덜 극성인 생성물 632㎎(1.86밀리몰)의 용액에 86% 수산화칼륨 256㎎(3.9밀리몰)과 물 0.5㎖를 부가하고, 이 혼합물을 실온에서 철야 방치하고, 감압하에서 증발시켰다. 잔류물을 물에 용해시키고, Amberlite IR-120B(H⁺) 80㎖의 칼럼에 서서히 흡착시키고, 물 500㎖의 컬럼으로 세척한 후에, 1. 수산화암모늄 수용액으로 용출시켰다. 용출물을 감압하에서 증발시켜 잔류물을 수득하고, 이것을 물에 용해시켰다. 생성용액을 활성탄으로 처리하고 여과했다. 여액을 감압하에서 증발시켜 점조한 2-하이드록시-2-(1,4-디벤질피페라진-2-일) 초산(보다 덜 극성인 이성체) 590㎎을 수득했다(수율 97%).

(7) 메탄올 3㎖중의 상기(5)에서 제조한 더 극성인 생성물 687㎎(1.85밀리몰)의 용액에 86% 수산화칼륨 242㎎(3.71밀리몰)과 물 0.5㎖를 부가하고, 이 혼합물을 철야 방치하고, 감압하에서 증발시켰다. 잔류물을 물에 용해시키고, Amberlite IR-120B(H⁺) 80㎖에 서서히 흡착시키고, 이 컬럼을 물 500㎖로 세척한 후에, 1N 수산화암모늄 수용액으로 용출시켰다. 이 용출물을 감압하에서 증발시켜 잔류물을 수득하고, 이것을 물에 용해시켰다. 생성용액을 활성탄으로 처리하고, 여과했다. 여액을 감압하에서 농축시켜 보다 더 극성인 생성물로서 2-하이드록시-2-(1,4-디벤질피페라진-2-일) 초산 622㎎을 수득했다(수율 93%).

[실시예 10]

1-N-[2-하이드록시-2-(피페라진-2-일)아세틸] 토브라마이신 황산염의 제조.

(1) 디메틸포름아미드 6㎖중에 용해시킨 실시예 9-(6)에서 제조한 2-하이드록시-2-(1,4-디벤질피페라진-2-일) 초산(보다 덜 극성인 이성체) 234㎎(1.4당량)의 용액에 디사이클로헥실카르보디이미드 144㎎(1.4당량), N-하이드록시숙신이미드 80㎎(1.4당량) 및 3, 2', 6', 3＂-테트라-N-포르밀토브라마이신 300㎎(0.5밀리몰)을 부가하고, 이 혼합물을 실온에서 철야 방치했다. 석출된 디사이클로헥실 우레아를 여거하고, 소량의 디메틸포름아미드로 세척했다. 화합된 여액과 세척액을 감압하에서 1 내지 2㎖까지 농축하고 초산에틸 50㎖와 혼합했다. 석출된 침전물을 초산에틸로 세척하고, 물에 용해시켰다. 생성되는 용액을 감압하에서 증발시켜 1-N-[2-하이드록시-2-(1,4-디벤질피페라진-2-일)아세틸]-3, 2', 6', 3＂-테트라-N-포르밀토브라마이신 419㎎을 수득했다.

물 0.63㎖중의 상기의 생성물을 용액에 농염산(11.0㎖)와 메탄올(54.5㎖)와 이의 혼합물 5㎖를 부가하고, 이 혼합물을 35 내지 37℃의 유욕상서 24시간 동안 교반하고, Amberlite IR-45 30㎖로 중화시켰다. 수지를 여거하고 물로 세척했다. 화합된 여액과 세척액을 감압하에서 증발시키고, 잔류물(463㎎)을 물 1㎖ 및 이소프로판올 1㎖와의 혼합물에 용화시키고, 키젤겔 60(메르크 회사제) 50g의 컬럼에 서서히 흡착시키고, 이소프로판올, 농수산화암모늄 및 클로로포름(4 : 1 : 1)과의 혼합물로 용출시켰다(1회 분류물 10㎖) 부류물 제12 내지 24번을 감압하에서 증발시켰다. 잔류물을 물에 용해시키고, 활성탄으로 처리한 뒤 여과했다. 여액을 감압하에서 증발시켜 1-N-[2-하이드록시-2-(1,4-디벤질피페라진-2-일)아세틸]토브라마이신 260㎎을 수득했다.

상기의 생성물을 물 2㎖ 및 초산 2㎖와의 혼합물에 용해시키고, 4기압의 고압 수소분위기 하에서 10% 팔라듐-목탄 127㎎존재하에 촉매적으로 수소 첨가했다. 촉매를 여거하고, 물로 세척했다. 화합된 여액과 세척액을 감압하에서 증발시켰다. 잔류물(276㎎)을 소량의 물에 용해시키고, Amberlite CG-50(NH₄ ⁺) 60㎖의 컬럼에 서서히 흡착시키고 물 1

의 컬럼으로 세척한 후에, 경사법으로 물 1

및 수산화암모늄 수용액-와의 혼합물로 용출시켰다(1회 분류물 15㎖). 분류물 제48-56번을 감압하에서 증발시켰다. 잔류물을 물에 용해시키고, 활성탄으로 처리하고, 여과하고, 물로 세척했다. 여액을 감압하에서 농축시켜 1-N-[2-하이드록시-2-(피페라진-2-일)아세틸] 토브라마이신 134㎎을 수득했다.

상기의 생성물을 0.0966N 황산 9.4㎖로 pH 4.5로 조정하고 감압하에서 약 1 내지 2㎖로 농축하고, 에탄올 50㎖와 혼합했다. 석출하는 침전물을 여과 수집하고, 에탄올로 세척하고, 물에 용해시키고, 활성탄으로 처리하고, 여과했다. 여액을 동결 건조시키고, 동결 건조물을 습기를 흡수하여 1-N-[2-하이드록시-2-(피페라진-2-일)아세틸] 토브라마이신 2.5H₂SO₄ㆍ10H₂O 188㎎을 수득했다(수율 36.2%).

원소분석 : C₂₄H₄₆N₇O₁₁ㆍ2.5H₂SO₄ㆍ10H₂O

계산치(%) : C, 27.88; H, 6.92; N, 9.48; S, 7.75.

실측치(%) : C, 27.69; H, 6.68; N, 9.40; S, 8.00.

(2) 디메틸포름아미드 6㎖중의 2-하이드록시-2-(1,4-디벤질피페라진-2-일) 초산(더 극성인 이성체) 327㎎(1.4당량)의 용액에 디사이클로헥실카르보디이미드 193㎎(1.4당량, N-하이드록시숙신이미드 108㎎(1.4당량) 및 3, 2', 6', 3＂-테트라-N-포르밀토브라마이신 400㎎(0.67밀리몰)을 부가하고, 이 혼합물을 실온에서 철야 방치했다. 석출된 디사이클로헥실우레아를 여거하고, 소량의 디메틸포름아미드로 세척했다. 화합된 여액과 세척액을 감압하에서 약 1 내지 2㎖까지 농축하여 초산에틸 50㎖와 혼합했다. 석출된 침전물을 초산에틸로 세척하고, 물에 용해시키고, 감압하에서 증발시켜 1-N-[2-하이드록시-2-(1,4-디벤질피페라진-2-일)아세틸]-3, 2', 6', 3＂-테트라-N-포르밀토브라마이신 541㎎을 수득했다.

물 0.85㎖중에 상기의 생성물을 용해시킨 용액에 농염산(11.0㎖) 및 메탄올(54.5㎖)과의 혼합물 6.7㎖를 부가하고, 이 혼합물을 35 ~37℃의 유욕상에서 24시간 동안 교반하고, Amberlite IR-45 30㎖로 중화시켰다. 수지를 여거하고 물로 세척했다. 화합된 여액과 세척액을 감압하에서 증발시켰다. 잔류물(5443)을 물 1㎖ 및 이소프로판올 1㎖와의 혼합물에 용해시키고, 키젤겔 60(메르크회사제) 70g의 컬럼에 서서히 흡착시키고, 이소프로판올, 농수산화암모늄 및 클로로포름(2 : 1 : 1)과의 혼합물로 용출했다(1회 분류물 15㎖). 분류물 제23 내지 38번을 감압하에서 증발시켰다. 잔류물을 물에 용해시키고, 활성탄으로 처리한 뒤 여과했다. 여액을 감압하에서 증발시켜 1-N-[2-하이드록시-2-(1,4-디벤질피페라진-2-일)아세틸]토브라마이신 337㎎을 수득했다.

상기의 생성물을 물 3㎖ 및 초산 3㎖와의 혼합물에 용해시키고, 수소 분위기하에서 4기압에 10% 팔라듐-목탄 존재하에 촉매 수소화했다. 촉매를 여거하고, 물로 세척했다. 화합된 여액과 세척액을 감압하에서 증발시켰다. 잔류물(331㎎)을 소량의 물에 용해시키고, Amberlite CG-50(NH₄ ⁺) 80㎖의 컬럼에 서서히 흡착시키고, 컬럼을 세척한 후에, 경사법으로 물 1

및 1N 수산화암모늄 1

로 용출시켰다 (1회 분류물 18㎖). 분류물 제47-56번을 감압하에서 건조시까지 증발시켰다. 잔류물을 활성탄으로 처리하고, 여과하고, 물로 세척했다. 여액을 감압하에서 증발시켜 1-N-[2-하이드록시-2-(피페라진-2-일)아세틸] 토브라마이신 178㎎을 수득했다.

상기의 생성물을 0.0966N 황산 13㎖를 부가하여 pH 4.5로 조정하고, 감압하에서 증발시켰다. 잔류물을 에탄올 50㎖와 혼합했다. 석출되는 침전물을 에탄올로 세척하고, 물에 용해시키고, 활성탄으로 세척하고, 여과한 뒤 동결 건조했다. 동결 건조물을 습기를 흡수하여 1-N-[2-하이드록시-2-(피페라진-2-일)아세틸] 토브라마이신 2.8H₂SO₄ㆍ10H₂O 265㎎을 수득했다(수율 37.3%).

원소분석 : C₂₄H₄₆N₇O₁₁ㆍ2.5H₂SO₄ㆍ10H₂O

계산치(%) : C, 27.01; H, 6.80; N, 9.22; S, 8.44.

실측치(%) : C, 27.29; H, 6.60; N, 9.31; S, 8.42.

[실시예 11]

2-하이드록시-2-(1-디페닐메틸아제티딘-2-일) 초산의 제조

(1) 건조 에테르 30㎖중의 리튬 알루미늄하이드라이드 0.57g의 현탁액에 건조에테르 30㎖중에 용해시킨 1-디페닐메틸-2-메톡시카르보닐아제티딘 아르. 엠. 로데 바우(R. M. Rodebaugh) 및 엔. 에이취. 크롬웰(N. H. Cromwell)에 의해 이 종환식 화학지6, 435(1969)에 기술된 방법으로 제조 6g(0.021몰)의 용액을 15분 동안 적가하고, 이 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반시켰다. 과량의 리튬 알루미늄하이드라이드를 초산에틸을 부가하여 분해시켰다. 불용성 물질을 여거하고, 건조에테르로 세척했다. 화합된 여액과 세척액을 감압하에서 건조시까지 증발시켰다. 잔유물을 에테르에 용해시키고, 생성용액을 증발시켜 조악한 시럽상 1-디페닐메틸-2-하이드록시메톡아제티딘 4.7g을 수득했다(수율 90%).

(2) 건조톨루엔 40㎖중의 N-클로로숙신이미드 2.36g(27.7밀리몰)의 용액에 디메틸술폭사이드 1.77㎖(24.2밀리몰)를 부가하고, 이 혼합물을 동일한 온도에서 25분 동안 교반하고, -25℃ 내지 -30℃까지 냉각시켰다. 톨루엔 8㎖중의 1-디페닐메틸-2-하이드록시메톡아제티딘 3g(11.8 밀리몰)의 용액을 20분동안 여기에 적가하고, 이 혼합물을 동일한 온도에서 2시간 동안 교반했다. 톨루엔 2㎖중의 트리에틸아민 2.5㎖(11.8 밀리몰)의 용액을 15분 동안 적가했다. 반응 혼합물을 -25℃ 에서 30℃분 동안 교반하고, 에테르 120㎖와 혼합하고, 실온에서 5분 동안 교반하고, 물 50㎖로 2회 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 감압하에서 증발시켰다. 생성되는 시럽상 잔류물(3.2g)을 염화메틸렌 50㎖에 용해시키고, 20(W/W)% 황산수소나트륨 수용액으로 4회 추출했다. 이 추출물을 염화메틸렌 20㎖로 세척하고, 20% 탄산나트륨 수용액으로 pH 10으로 조정하고, 염화메틸렌 50㎖로 4회 추출했다. 이 추출물을 물로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고 감압하에서 증발시켰다. 생성되는 시럽상 잔류물(2.1g)을 - 헥산 및 에테르와의 혼합물로 결정하여 1-디페닐메틸-2-포르밀아제티딘 2g을 수득했다(수율 67%). 융점 85~86℃.

(3) 테트라하이드로푸란 7.5㎖ 및 물 7.5㎖와의 혼합물 중의 1-디페닐메틸-2-포르밀아제티딘 1.4g(5.57 밀리몰)의 용액에 냉각하에 농염산 0.91㎖(11.14 밀리몰)를 부가한 다음에, 여기에 시안화칼륨 0.724g(11.14 밀리몰)을 부가했다. 이 혼합물을 24시간 동안 교반하고, 에탄올 30㎖로 추출했다. 수용액층을 에테르 30㎖로 다시 추출했다. 추출물과 상기의 유기층을 화합하고, 물로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 감압하에서 증발시켜 정량적인 수율로 조악한 시럽상 2-하이드록시-2-(1-디페닐메틸아제티딘-2-일) 아세토니트릴 1.6g을 수득했다.

(4) 상기의 생성물(1.5g, 5.4 밀리몰)을 농염산 2㎖에 용해시키고, 생성 용액을 85℃에서 1시간 동안 교반하고, 감압하에서 증발시켰다. 과량의 농염산을 물과 공비 증류시켜 제거했다. 잔류물을 수산화나트륨 1g을 함유하는 물 50㎖중에 용해시키고, 클로로포름 30㎖로 세척했다. 세척액을 수산화나트륨 0.5g을 함유하는 물 30㎖로 추출했다. 이 추출물과 상기의 용액을 화합하고, IR-120B(H⁺) 100㎖의 컬럼상에 서서히 흡착시키고, 5N 수산화암모늄 수용액 1

로 용출시키고, 세척액이 중성이 될 때까지 물로 컬럼을 세척했다. 이 용출물을 감압하에서 농축시켜 분말로서 2-하이드록시-2-(1-디페닐메틸아제티딘-2-일) 초산 0.8g을 수득했다(수율 50%)

원소분석 : C₁₈H₁₉NO₃

계산치(%) : C, 72.70; H, 6.44; N, 4.71.

실측치(%) : C, 72.90; H, 6.54; N, 4.69.

[실시예 12]

1-N-[2-하이드록시-2-(아제티딘-2-일)아세틸] 토브라마이신 황산염의 제조.

디메틸포름아미드 2.5㎖중의 3, 2', 6', 3＂-테트라-N-포르밀토브라마이신 300㎎(0.502 밀리몰), 2-하이드록시-2-(1-디페닐메틸아제티딘-2-일) 초산 146㎎(1.1당량). N-하이드록시숙신이미드64㎎(1.1당량) 및 디사이클로헥실카르보디이미드 114㎎(1.1당량)을 실온에서 16시간 동안 방치했다. 석출되는 디사이클로헥실우레아를 여거했다. 여액을 10배량의 초산에틸로 혼합했다. 석출되는 침전물을 여과하여 수집하고, 메탄올로 세척하여 1-N-[2-하이드록시-2-(1-디페닐메틸아제티딘-2-일) 아세틸]-3, 2', 6', 3＂-테트라-N-포르밀토브라마이신 350㎎을 수득했다.

물 0.8㎖중의 상기의 생성물의 용액에 농염산(11.0㎖) 및 메탄올(54.5㎖)과의 혼합물 6.8㎖를 부가하고, 이 혼합물을 36℃에서 20시간 동안 교반하고, Amberlite IR-45(OH-)로 중화시켰다. 수지를 여거하고, 여액을 감압하에서 농축시켜 1-N-[2-하이드록시-2-(1-디페닐아제티딘-2-일)아세틸] 토브라마이신 300㎎을 수득했다.

상기의 생성물을 물 15㎖ 에 용해시키고, 수소 분위기하에서 10% 팔라듐-목탄 200㎎존재하에 20시간 동안 촉매 수소화했다. 촉매를 여거하고, 여액을 에테르 50㎖로 2회 세척하고, 감압하에서 증발시켰다. 잔류물(225㎎)을 물 20㎖에 용해시키고, Amberlite CG-50(NH₄ ⁺) 30㎖의 컬럼에 흡착시키고, 이 컬럼을 물 100㎖로 세척한 후에, 1N 수산화암모늄 수용액으로 용출시켰다 (1회 분류물 10㎖). 분류물 제16내지 25번을 감압하에서 증발시켜 1-N-[2-하이드록시-2-(아제티딘-2-일)아세틸] 토브라마이신 120㎎을 수득했다.

상기의 생성물을 0.0955N 황산 6.8㎖로 pH 4.6로 조정하고, 감압하에서 1~2㎖까지 농축하고, 에탄올과 혼합하고, 빙냉했다. 석출되는 침전물을 여과하여 수집하고, 에탄올로 세척하고, 물에 용해시켰다. 생성용액을 활성탄으로 처리하고, 여과했다. 여액을 동결 건조시키고, 동결 건조물을 중량이 일정해질 때까지 습기를 흡수하여 1-N-[2-하이드록시-2-(아제티딘-2-일)아세틸] 토브라마이신 2.5H₂SO₄ㆍ9H₂O 125㎎을 수득했다.

원소분석 : C₂₃H₄₄N₆O₁₁ㆍ2.5H₂SO₄ㆍ9H₂O

계산치(%) : C, 27.96; H, 6.84; N, 8.51; S, 8.11.

실측치(%) : C, 28.21; H, 6.67; N, 8.23; S, 8.25.

Claims (1)

1. 기능기가 1-아미노기 이외의 것인 일반식(II)의 아미노글리코시드를 일반식(III)의 카르복실산 또는그의 반응성 유도체와 반응시킨 다음에 기능기를 탈보호 처리함을 특징으로 하는 일반식(I)의 신규 아미노글리코시드 유도체의 제조방법.

   

   (식중, R는 임의로 치환되어도 좋은 1 내지 2개의 질소원자를 갖는 4 내지 6원 이종환식기이고, R¹은 아미노메틸, 하이드록시메틸, 1-아미노에틸 또는 1-메틸아미노에틸기이고, R², R³및 R⁶는 각각 수소 또는 하이드록시기이고, R⁴는 하이드록시 또는 아미노기이고, R⁵는 아미노 또는 메틸아미노기이고, R⁷는 하이드록시 또는 메틸기이고, R⁸은 수소, 하이드록시메틸 또는 카르바모일옥시메틸기이고, 점선은 이중결합의 존재 또는 부재를 나타낸다).