KR800001188B1 - α-아미노벤질 페니실린 유도체의 제조방법 - Google Patents

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Description

α-아미노벤질 페니실린 유도체의 제조방법

제1도는 암피실린(BL-P1410) 및 p-아세톡시 암피실린(RN1359)을 래트에 투여하였을때의 혈중 농도치의 비교도

제2도는 암피실린(BL-P1410) 및 p-아세톡시 암피실린(RN1359)을 개에 투여하였을 때의 혈중 농도치의 비교도

본 발명은 α-아미노벤질 페니실린 유도체, 특히 6-D-(-)α-아미노-α-(p-하이드록시페닐 아세타미도)-페니실란산(일명, 아목시실린)의 제조방법에 관한 것이다.

미국특허 제2,985,648호는 α-아미노벤질 페니실린에 관한 것으로, 벤젠환에 저급 알카노일옥시 치환체가 치환된 페니실린의 일반 구조식을 설명했을뿐, 그러한 치환화합물에 대해 상세하게 설명하지도 않았으며 또한 그들의 제법에 대한 특별한 실시예도 언급하지 않았다. 전술한 특허에서는 -아미노벤질 페니실린은 여러 종류의 광학 이성체가 존재한다고 지적하였으며, 실시예에서 D-형과 L-형의 제법에 관하여 기술하였다.

미국특허 제3,520,876호는 미국특허 제2,985,648호에서와 같이, α-아미노벤질 페니실린의 일반구조식에 대하여 언급하고 21개의 화합물, 6-α-아미노-4-아세톡시-벤질 페니실란산(혹은, 6-α-아미노-α-(p-아세톡시 페닐 아세타미도)페니실란산)에 대해 기술하였다. 미국특허 제3,520,876호에서는, 이 화합물의 어떤 특정한 광학 이성체가 제조되는지의 여부를 지적하지 않았으며, 이것의 항균작용에 대해 자세하게 설명하지도 않았다.

그러나, 본 발명자들은, 6-D-(-)α-아미노-α-(p-아세톡시 페닐 아세타미도)페니실란 산이 항생제로서 높은 가치가 있음을 발견하였으며, 본 발명은 본질적으로 L-(+)이성체가 없이 6-D-(-)α-아미노-α-(p-아세톡시 페닐 아세타미도)페니실란산 혹은 제약상 가능한 그들의 염의 제조방법에 관한 것이다.

본 명세서에서 약학상 허용 가능한 염이란, 비독성 카르복실산염, 즉 비독성 금속염, 예를들면 나트륨, 칼륨, 칼슘 및 알미늄, 암모늄염 및 비독성 아민으로 된 염, 예를들면 트리알킬 아민, 프로카인, 디벤질아민, N-벤질-β-펜에틸아민, 1-에펜아민, N,N′-디벤질에틸렌디아민, N-알킬피페리딘 및 페니실린염의 형성에 사용되는 다른 아민류가 있다. 또한, 약학적으로 허용 가능한 염이란, 비독성 산부가염으로서, 예를들면, 무기산염, 즉 염산, 브롬산, 요오드산, 인산 및 황산과 유기산염, 즉 말레산, 초산, 주석산, 수산, 호박산, 안식향산, 구연산, 푸마르산, 만델산, 아스코르브산과 말산등이 있다.

본 발명은 6-D-(-)α-아미노-α-(p-아세톡시페닐아세타미도)-페니실란산 또는 약학적으로 허용 가능한 그들의 염을 실질적으로 L-(+)이성체가 없이 L-(-)형태로 제조하는 방법에 관한 것으로 다음과 같이 제조함을 특징으로 한다. 즉, 하기 구조식(I)이나, 실릴에스테르 또는 이들의 염을 하기 구조식(II)의 아실화제와 반응시킨 다음, 아미노 보호기를 제거하고, 필요하다면 상기 아미노기의 제거전 또는 후에 유리산이나 실릴에스테르 또는 이들의 염 형태의 생성물을 공지의 방법으로 대응하는 유리산 또는 약학상 허용 가능한 이들의 염으로 전화시킴을 특징으로 하여 실질적으로 L-(+)-이성체가 없는 D-(-)형태의 α-아미노-벤질 페니실린 유도체의 제조방법이다.

상기식에서, B는 아미노 보호기임.

본 발명의 신규한 페니실린 화합물 제법에서는, 대응하는 구조식(I)의 6-아미노-페니실란산 화합물 혹은 실릴 에스테르 혹은 그들의 염을 공지의 방법에 의하여 구조식(II)의 적당한 아실화제로 아실화한다.

화합물(I)은, 필요하면 아실화 반응전에 실릴에스테르 혹은 그들의 산부가염으로 전환하여도 된다. 실릴에스테르는, 예를들면 미국특허 제3,249,622호에 기재된 방법에 의하여 제조할 수 있다.

아실화 반응전에, 아실화제(II)의 아미노기는, 공지의 방법에 의하여 반응 종결시에 용이하게 제거되는 공지된 아미노 보호기 B로 보호할 수 있다. 적당한 아미노 보호기, 즉 아미노 차단기를 예로들면, t-부톡시카르보닐, 카르보벤질옥시, 2-하이드록시-1-나프트카르보닐, 트리클로로 에톡시카르보닐, 2-에톡시카르보닐, 1-메틸비닐 및 2-메톡시카르보닐-1-메틸비닐이 있다. 특히, 유용한 차단기로는 하기 구조식의 화합물에서와 같은 양이온(陽子)이 있다.

예를들면, 아실화 카플링 반응에 뒤이어 중화반응에 의하여 용이하게 제거할 수 있다. 아미노기를 차단할 수 있는 기능을 하는 다른 기들도 사용할 수 있으며, 그러한 관능기들도 본 발명의 범위내에 속한다.

페니실린의 6-아미노기 아실화 반응은 잘 알려진 방법이며, 제1급 아미노기의 아실화제로 통상으로 사용되는 구조식(II) 화합물과 동등한 기능을 가진 화합물은 어느 것이든 사용할 수 있다. 적당한 아실화제로 구조식(II)의 산 유도체로는, 대응하는 산 무수물, 혼합무수물 예를들면, 알콕시 포름산 무수물, 산 할라이드 산 아자이드, 활성 에스테르 및 활성 티오에스테르가 있다. 구조식(II)의 유리산은 N,N′-디메틸클로로포름클로라이드 또는 효소의 이용에 의하여 혹은 카르보디이미드시약, 예를들면, N,N′-디이프로필카르보디이미드, N,N′-디사이클로헥실카르보디이미드 또는 N-사이클로헥실카르보디이미드 혹은 N-사이클로헥실-N′-(2-모르필리노에틸)-카르보디이미드 혹은 알킬아민 시약의 이용에 의하여 혹은 이속사졸륨염 시약을 사용하여 최초에 반응시킨 후, 구조식(I) 화합물로 카플링할 수 있다. 유리산의 다른 등가 물질로는 대응하는 아졸라이드, 즉 산 아미드가 있다. 아마이드 질소는 의방향족(撥芳香族) 5원환이 구성원이며, 적어도 두개의 질소원자를 포함한 것으로는 아미다졸, 피라졸, 트리아졸, 벤조이미다졸, 벤조트리아졸 및 그들의 치환된 유도체 등이 있다. 구조식(II)의 페닐글라이신의 다른 활성유도체는 N-카르복시무수물(루크(Leuch)의 무수물)이다. 이 구조에서 카르복실기를 활성화하는 관능기는 역시 아미노기를 보호하는 역활도 한다. 특히, 적당한 아실화제는 다음 구조식의 염산염 화합물의 산염화물인 D-(-)이성체이며, 이것은 카르복실 활성화 및 아미노기 보호의 이중 역활을 한다.

이미 앞에서 설명한 바와같이, 아미노기가 차단된 유리산을 화합물(I)로 카플링하기 위하여 효소를 사용한다. 메틸 에스테르와 같은 에스테르를 사용하는 제법과, 유리산을 수종의 미생물에 의하여 생성된 효소를 사용하는 제법도 본 권리범위에 속한다. 미생물이 생성한 효소를 사용하는 제법에 관한 문헌으로는, 티. 다까하시와 그의 공동 연구자에 의한 논문, 미국 화학회지 94(11), 4035-4037(1972) 및 티. 나라와 그의 공동연구자에 의한 논문, 항생물질 잡지(일본), 24(5), 321-323(1971)의 논문 및 독일특허 제2,216,113호이다.

특히, 반응조건, 예를들면 온도, 용매, 반응시간 등 카플링 반응에 선택되는 조건들은 사용하는 아실화 방법의 성질에 따라 결정하며, 본 분야에 통상 지식을 가진자들에게 알려진 것들이다. 일반적으로, 유기 3급아민, 즉 트리에틸아민, N,N′-디메틸아닐린, 에틸피페리딘, 2,6-루티딘 혹은 퀴놀린등과 양자 수용체로 작용하거나 염형성능이 있는 물질을 가하는 것이 유용하다.

본 발명의 화합물은 유사한 페니실린류의 단리에 사용되는 통상적인 방법에 의해 분리된다. 이와같이, 본 생성물은 중성분자로서 얻어질 수 있지만, 보다 정확히 표현하면 양성 이온으로서 얻어지며, 또는 염으로 단리된다. 소망하는 약학적으로 허용 가능한 카르복실산 혹은 산 부가염의 형성은 공지의 방법, 즉 적당한 염기 또는 산으로 산을 반응시켜서 생성시킨다.

아실화 반응 종말기에, 생성된 생성물은 공지의 방법에 의하여 원하는 신규의 생성물 형태로 전환된다(아미노-보호기를 제거하기전 또는 후). 예를들면, 실릴 에스테르형 또는 그들의 염은 유리산 혹은 가수분해에 의해 실릴에스테르기를 제거함으로써 약학적으로 허용 가능한 그들의 염으로 전환된다.

본 발명의 화합물은 여러가지 그람 음성 및 그람 양성균에 의해 인체가금 및 가축의 감염증 치료에 유용한 항생제이다. 본 발명의 방법에 의한 화합물은 또한 가축의 사료 보조제로, 그리고 젖소의 유선염 치료제로 가치가 있다. 또한, 본 발명의 적당한 화합물은 예상외로 경구 투여시에 효과적으로 흡수되는 것을 발견하였다.

본 발명의 방법에 의해 제공되는 신규한 의약은 유용성분에 약학적 허용 가능한 담체 또는 희석제를 가하여된 약학적 조성물로서 제제될 수도 있다. 본 화합물은 경구 또는 정맥주사로 다같이 투여 가능하다. 약학적인 제형들로서는 캡슐제, 정제 또는 유제와 같은 고체형으로 할수 있다. 인류의 세균감염 치료시, 본 발명의 화합물은 분할량, 즉 매일 3-4회로 5-200mg/kg/일의 양으로 경구 투여할 수 있다. 이들은 적절한 생리학적 담체 또는 부형제와 함께 유효성분, 예를들면 125, 250 또는 500mg을 함유하는 투여단위로 투여된다.

하기의 설명은 차후의 실시예 1에 기재된 바와같이, 본 발명의 신규한 화합물의 제조에 사용되는 출발물질의 제법을 나타낸 것이다.

[출발물질]

[D-(-)-α-아미노-α-(p-아세톡시 페닐)초산의 제법]

제법 A(용매로서 사용한 초산중에서)

203.5g(1몰)의 D(-) p-하이드록시페닐 글라이신 염산염, 800ml의 초산 및 314g.(4몰)의 아세틸 클로라이드를 실온에서 48시간동안 교반한다. 생성된 고체를 수집하여 아세톤(3×250ml)으로 3회 세척하고, 에탄올(2×250ml)로 2회 세척한 후, 40℃에서 건조한다. 수율 : 210g(85.4%), 이 염산염을 3.0ℓ의 물에 용해하고 수용액을 5-10℃로 냉각하여 20%의 NH₄OH로 4.5가 되도록 조정한다. 현탁액을 5℃에서 1시간 교반하고 고체를 수집하여 물로 2회 아세톤으로 2회 세척하고 40℃에서 건조한다. 수율 : 133g.(D-(-) p-하이드록시페닐글라이신으로부터 64%).

(1% HCl N/10)=-104.5.

제법 B(염화메틸렌중에서)

4.07g(0.02몰)의 D(-) p-하이드록시-페닐글라이신 염산염, 30ml의 염화메틸렌 및 6.28g(0.08몰)의 염화아세틸을 실온에서 48시간 교반한다. 고체를 수집하여 아세톤으로 2회 에탄올로 2회 세척한다. 수율 : 4.17g(84.5%).

원소분석치 : Cl=14.8%(산으로 계산)

제법 C(트리플루오로 초산중에서)

1.67g(0.01몰)의 D-(-) p-하이드록시페닐글라이신을 교반하면서 실온에서 트리플루오로 초산 10ml에 가한다. 용해한 후, 1.57g(0.02몰)의 염화아세틸을 가한다. 약간 발열반응이 일어난다음 고체가 생성된다. 현탁액을 1시간 30분동안 실온에서 교반하고 트리플루오로 초산을 진공하에서 제거한 잔여 고체를 모아서 염화메틸렌으로 세척하고 다시 에탄올로 세척한다. D(-) α-아미노-α-(p-아세톡시페닐)초산은 제법 A 또는 B에서 제조한 것과 일치하였다. 수율 : 1.9g(75%).

[D(-)α-아미노-α-(p-아세톡시페닐)아세틸클로라이드 염산염의 제법]

83.6g(0.40몰)의 D(-)α-아미노-α-(p-아세톡시페닐)초산 및 1.25ml의 무수염화메틸렌을 교반하면서 -5℃로 냉각한다. 152의 5염화인을 서서히 가하고, 이어서 4ml의 디메틸포름아마이드를 가했다. 혼합물을 0℃에서 4시간 교반하고, 고체를 수집하여 무수염화메티렌으로 세척하고 실온에서 진공하 건조하였다. 수율 : 61g(57.5%).

분석치 : 총염소=27.2%(이론치 :26.9%)

하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것이며, 본 발명을 한정하고자 하는 것은 아니다. 하기 실시예중 온도는 섭씨이며, 6-아미노페니실린산은 6-APA로 약기하였다.

[실시예 1]

6-D-(-)-α-아미노-α-(p-아세톡시페닐 아세트아미도)페니실란산 혹은 아세톡시-암피실린-혹은 RN1395.

제법 A : 무수공정

15.27g(0.071몰)의 6-APA를 무수 염화메틸렌 500ml중에서 교반했다. 120ml의 염화메틸렌을 증류 제거하고, 11.8ml의 헥사메틸디실라잔을 가했다. 이 혼합물을 교반하고 20시간동안 환류했다.(약 10-15시간 후에는 모든 6-APA가 용액으로 된다) 상기 용액을 0℃로 냉각하고, 120ml의 염화메틸렌을 가하고 이어서 9.5ml의 디메틸아닐린 및 염화메틸렌중의 디메틸아닐린 염산염용액(30%) 7ml를 가했다. 그리고, 20g(0.0756몰)의 D(-)-α-아미노-α-(p-아세톡시페닐)아세틸클로라이드 염산염을 +20℃에서 소량씩(

1.5시간) 가하고, +5℃에서 철야 정치한다. 5ml의 메탄올과 240ml의 물을 가하고 트리에틸아민으로 pH2.5로 조정하고, 혼합물을 셀라이트 패드를 통하여 여과한다. pH를 확인하고 수용액층을 분리하여 염화메틸렌으로 2회(2×150ml) 세척한 후 목탄으로 처리한다. 용액을 pH 4.5로 조정하고 감압 농축하여 약 150ml가 되도록 한다. 현탁액을 +5℃에서 철야 정치하여 생성된 고체를 물과 아세톤으로 세척하고 40℃에서 건조하면 실제로 L-(+)이성체의 유리형태로 상기의 생성물이 얻어진다.

수율=약 30%(순수한 물질 85-90%).

(0.5% HCl N/10)=+205.5

및 10.77(TGA) NMR로 그 구조를 결정하였다.

요오드 적정법에 의한 정량(표준 암피실린에 대하여)=738mbg/ml

제법 B(습식공정)

10.8g(0.05몰)의 6-APA를 45ml의 몰 및 6N염산 11.7ml에 녹인다. 300ml의 아세톤을 가하고 혼합물을 -5℃까지 냉각한다. 7.4g(0.028몰)의 D(-)α-아미노-α-(p-아세톡시페닐)아세틸클로라이드 염산염을 소량씩 가하고 트리에틸아민을 가하여 pH 1.4-1.6으로 고정시킨다. 상기의 염화물 염산염의 2번째 분획을 pH 1.2-1.4에서 가하고, 5℃에서 1시간 후 아세톤을 감압하 제거하고 용액의 pH를 4.3-4.5로 조정한다. 고체물질을 모아서 버리고, 모액을 종정(種晶)을 가하고 +5℃에서 철야 정치하여 결정이 생성되도록 한다. RN1395를 모아서 소량의 물과 아세톤으로 조심스럽게 세척하고 40℃에서 건조한다. 수율 : 2.0g(9%). 생성물은 제법 A에서 제조한 것과 일치하였다.

[생화학적 데이타]

표 I은 암옥시실린(BL-P1410 : 암피실린의 p-하이드록시 계열), 및 p-아세톡시 암피실린(RN-1395)의 MIC 데이타를 비교하여 나타낸 것이다. 최소 저해농도(MIC)는 각 화합물의 동 몰농도를 사용하여 2네 희석한 영양 배지에 의하여 결정하였다.

표 II 및 도면 1과 2는, 암피실린(BL-P1410) 및 p-아세톡시 암피실린(RN-1395)을 투여하였을때 래트 및 개의 혈중농도 데이타를 비교하여 나타낸 것이다. 표 III은 도면 1과 2에서 얻은 결론을 요약한 것이다.

생화학적 데이타에서 관찰한 바와같이, p-아세톡시 암피실린과 암목시실린은 유사한 MIC성질을 가지고 있지만, p-아세톡시 암피실린은 더 우수한 혈중 농도성을 가지고 있음은 놀라운 사실이다.

[표 I]

[표 II]

[표 III]

그밖의, 본 발명의 화합물은 그람음성 및 그람양성군에 의해 감염된 인체, 동물 및 가금류의 치료에 유효한 항생제로 알려진 대응하는 p-하이드록시 화합물 제법의 중간 물질로서도 매우 유용하다.

6-D-(-)-α-아미노-α-(p-아세톡시페닐 아세트아미도)페니실란산은 정상적인 생리 식염수에는 안정하지만, 효소적으로 가수분해되어 6-D-(-)-α-아미노-α-(p-하이드록시페닐 아세타미도)페니실란산이 되는 사실을 발견하였다.

따라서, 본 발명은 6-D-(-)아미노-(P-하이드록시페닐 아세트아미도)페닐실린산, 그들의 수화물 혹은 약학적으로 가능한 염의 새로운 제법에 관한 것으로, 6-D-(-)-아미노-(P-아세톡시페닐 아세트아미로)페닐실란산 수용액을 pH 5.0-7.5에서 에스테라제로 처리하고, 공지의 방법에 의해 이 생성물을 단리시키고, 필요하면 생성물을 공지의 방법에 의해 유리산 혹은 약학적으로 허용 가능한 그들의 염의 형태로 전환시키는 단계로 되어있다.

바람직한 실례로는 6-D-(-)-아미노-(P-하이드록시페닐 아세트아미도)페니실란산, 그들의 수화물 혹은 약학적으로 허용가능한 그들의 염의 제조인바, 이 방법은 6-D-(-)-아미노-(P-아세톡시페닐아세트아미도)-페닐실란산 수용액을 pH 약 5.0-7.5 및 수용액 총용량당 에스테라아제 약 5-10mg/ml의 농도에서 인체혈청, 동물혈청, 시루러스 에스테라아제, 밀기울, 맥아 및 바실루스 서브티리스등에 에스테라아제로 처리하고, 그 생성물을 공지의 방법에 의해 단리하고, 필요하면 유리산형태 혹은 수화물 형태의 생성물을 대응하는 약학적으로 허용 가능한 염으로 전화시키는 단계로 되어 있다.

본 발명에 따른 상업적으로 적당한 실례는 6-D-(-)α-아미노-α-(P-하이드록시페닐 아세트아미도)페닐실란산, 그 수화물 또는 약학적으로 허용 가능한 염의 제조인바, 그 방법은 6-D-(-)α-아미노-α-(P-아세톡시페닐 아세트아미도)페닐실란산 수용액을 pH 약 5.0-7.5 및 상기 수용액의 총용량당 에스테라아제 약 5-10mg/10ml의 농도에서 시투러스 에스테라아제, 밀기울 및 맥아로 처리하고, 필요하다면 유리산 또는 수화물 형태의 생성물을 대응하는 약학적으로 허용 가능한 그들의 염으로 전화시키는 단계로 되어 있다.

특히 상업적으로 유익한 방법은 6-D-(-)α-아미노-α-(P-하이드록시페닐 아세트아미도)페니실란산, 수화물 혹은 약학적으로 가능한 그들의 염제조 방법인데, 이 방법은 6-D-(-)-α-아미노-α-(P-아세톡시페닐아세트아미도)페니실란산 수용액을 PH 5.5-6.0 또는 상기 수용액 총용량당 에스테라아제 약 10mg/ml의 농도에서 pH 7.0의 완충액 존재하에 상업적으로 유용한 에스테라아제, 밀기울로 처리하고, 공지의 방법으로 생성물을 단리하고, 필요하다면 유리산 또는 수화물 형태의 생성물을 대응하는 약학적으로 허용 가능한 그들의 염으로 전화시키는 단계로 되어 있다.

본 발명에 의해 제조된 6-D-(-)-α-아미노-α-(P-하이드록시페닐아세트아미도)페닐실란산(암옥시실린)은 수종의 그람음성 및 그람양성균에 의해 야기된 가금 및 동물, 그리고 인체의 감염증질환 치료제로서 유용한 항생제로 알려져 있다.

하기 실시예들은 본 발명에 의한 암옥시실린의 제법을 예시하고 있다.

[실시예 A]

통상의 생리 식염수 및 인체 혈청중에 6-D-(-)-α-아미노-α-(P-아세톡시페닐아세트아미도)페니실란산(P-아세톡시암피실린) 0.5mg/ml을 용해한 용액을 조제하였다. 통상의 생리 식염수 및 인체 혈청용액을 만든다.

상기 전용액을 37℃에서 교반하면서 배양하고, 0,2,4,8 및 24시간 간격으로 크로마토그라피하기 위한 시료를 채취하였다. 스트리프당 약 5마이크로리터의 용액을 와트만지 제1호 1/2인치 조각위에 점적하고 건조한 다음 초산부틸 80부, n-부탄올 15부, 초산 40부, 물 24부를 함유한 용매계에서 전개시켰다. pH 6.0에서 고초균(Bacillus subtilis)을 종정한 플레이트 상에서 스트리프를 바이오오트그래프(Bioautograph)한다.

P-아세톡시 암피실린은 인체 혈청중에서 신속히 가수분해되어 P-하이드록시 형으로 되지만, 정상적인 생리 식염수 중에서는 매우 안정한 것으로 바이오크로마토그람상에 나타났다.

[실시예 B]

다음의 용액을 조제하였다.

0.5mg/ml의 6-D-(-)-α-아미노-α-(P-아세톡시페닐아세타미도)페니실란산(P-아세톡시 암피실린) 식염수 용액 :

0.5mg/ml의 P-아세톡시 암피실린 시투터스 에스테라아제 용액으로서 01M인산칼륨 완충액으로 10배 희석하여 pH 7.0을 유지하게한 용액 :

0.5mg/ml의 P-아세톡시 암피실린과 거치른 밀기울(실로흐) 10mg/ml 및 0.1M인산칼륨 완충액의 용액 :

상기 전용액을 37℃에서 교반하면서 배양하고 실시예 A에서 기술한 바와같이 크로마토그라피용의 시료를 취하였다.

P-아세톡시 암피실린은 식염수 중에서는 안정하지만 시투러스 에스테라아제 및 밀기울 에스테라아제 양자중에서는 P-하이드록시 형으로 신속히 가수분해됨을 바이오 크로마토그람에 의하여 알게되었다.

[실시예 C]

하기 반응 혼합물을 조제하고 28℃에서 진탕한 다음, 실시예 A에서 기술한 바와같이 0,1/2,1,2,3,4 및 6시간 간격으로 시료를 채취하였다.

바이오크로마토그람의 결과는 다음 표 IV와 같다.

[표 IV]

반응혼합물 제5번을 사용한 것이 가장 좋은 결과로 나타났는데, 효소농도 10mg/ml 및 pH 7.0에서 2시간내에 P-하이드록시 암피실린으로 모두 전화되었다.

[실시예 D]

50mg의 탈지 밀기울(실로흐), 2.5mg의 6-D-(-)-α-아미노-α-(P-아세톡시페닐-아세트아미도) 페닐실란산(P-아세톡시-암피실린) 및 5.0ml의 물을 함유한 반응혼합물을 조제하였다. 이 반응혼합물을 28℃에서 진탕하고, 실시예 B에서 기술한 바와같이 1,2 및 3시간 간격으로 크로마토라피에 의해 측정한다. 바이오크로마토그라피결과에 의하면, 3시간동안에 P-아세톡시 암피실린은 P-하이드록시 암피실린으로 100% 전화한 것으로 나타났다. 완충액이 없는데도 불구하고 반응혼합물의 pH는 약 5.7이였다.

[실시예 E]

20mg의 탈지 밀기울(실로흐), 1.0g의 6-D-(-)-α-아미노-α-(P-아세톡시페닐 아세트아미도)페니실란산(P-아세톡시 암피실린) 및 2ℓ의 0.01M.pH 7.0의 인산칼륨 완충용액의 혼합물을 28℃에서 교반하고 실시예 A에서 기술한 바와같이 매시간마다 시료를 취했다. 3시간동안에 100% 전화되였음이 바이오크로마토그람에 의해 나타났다. 혼합물을 원심 분리하에 상징액을 분리하여 염산으로 pH 4.0이 되게 조절하고 동결 건조했다. 동결 건조물질을 전술한 바와같이 재분석하면 약 900mg의 P-하이드록시 암피실린이 함유되어 있음을 알았다.

동결 건조물질 6.0g을 20ml의 물에서 슬러리로 만들고, 6N염산을 가하여 서서히 pH 2.0이 되도록 한다. 15분간 더 교반하고 고체를 여별한다. 여액을 탈색용 탄소 1.0g으로 처리하고 여과한 후, 맑은 여액을 pH 4.5로 조절하였다. 용액의 가벽을 긁어주어 결정을 시키고 1시간 더 방치하였다. 결정을 여과하여 물과 아세톤으로 세척하고 건조하면 180mg의 6-D-(-)-α-아미노-α-(P-하이드록시-페닐아세타미도)페니실란산 3수화물(201℃에서 분해)이 수득된다.

생화학적 데이타.

생체내 작용데이타.

래트에 있어서 여러가지 병원성 세균에 의한 치사정도에 대한 6-[D-(-)-α-아미노-α-(4-하이드록시페닐)아세타미도]페니실란산의 치료량(CD₅₀)의 중앙치를 측정하였다. 그 결과 얻은 CD₅₀데이타는 mg/kg 단위로 아래에 보고되어 있다.

경구 투여시 흡수 데이타.

래트에 6-[D-(-)-α-아미노-α-(4-하이드록시페닐)아세타미도]-페니실란산을 경구 투여시키고 그 혈중농도를 측정하였다. 실험에서 4마리의 래트를 화합물 30mg/kg으로 경구 투여한 다음 측정한 혈중농도는 다음과 같다.

Claims (1)

1. 다음 구조식(I) 화합물이나 그의 염을 다음 구조식(II) 화합물과 반응시킨 다음 아미노보호기를 제거하여 다음 구조식(III)인 D-(-)-α-아미노벤질페니실린 유도체 및 그의 염을 제조하는 방법.

   

   상기 식에서 B는 아미노보호기임.

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