KR20240073587A

KR20240073587A - 늙은호박씨 추출물을 유효성분으로 포함하는 뇌 염증성 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물

Info

Publication number: KR20240073587A
Application number: KR1020220155617A
Authority: KR
Inventors: 박희진; 유귀재; 이애신; 이창준; 최상윤; 최인욱; 최지원; 허진영
Original assignee: 한국식품연구원
Priority date: 2022-11-18
Filing date: 2022-11-18
Publication date: 2024-05-27

Abstract

본 발명은 늙은 호박씨 추출물을 유효성분으로 포함하는, 뇌 염증 개선용 식품 조성물; 뇌 염증성 질환 개선 또는 예방용 식품 조성물; 상기 식품 조성물을 포함하는 건강기능식품; 뇌 염증성 질환 예방 또는 치료용 약제학적 조성물; 의약외품 조성물; 사료 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 뇌 염증 개선용 식품 조성물; 뇌 염증성 질환 개선 또는 예방용 식품 조성물; 상기 식품 조성물을 포함하는 건강기능식품; 뇌 염증성 질환 예방 또는 치료용 약제학적 조성물; 의약외품 조성물; 사료 조성물은 소교세포의 NO 생성을 억제하고, 소교세포의 과활성을 억제하며, 산화스트레스에 의한 세포사멸 억제 효과를 가지는 바 뇌 염증성 질환 개선, 예방 또는 치료 용도로 유용하게 사용될 수 있다.

Description

늙은호박씨 추출물을 유효성분으로 포함하는 뇌 염증성 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 {Composition for prevention, improvement or treatment of brain inflammatory diseases comprising the extract of Cucurbita moschata Duchesne seed}

늙은호박씨 추출물을 유효성분으로 포함하는 뇌 염증성 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.

뇌질환에는 뇌혈관이 터져 발생하는 뇌출혈, 혈관이 막혀 혈류 감소로 뇌 조직이 괴사하는 뇌경색, 종양이 발생하는 뇌종양 및 노화 등 외부영향으로 인해 뇌세포가 감소하거나 뇌의 기능이 떨어지는 퇴행성 뇌질환 등이 있다.

뇌 염증(Nueroinflammation Brain inflammation)은 뇌졸중 뿐만 아니라 파킨슨병, 알츠하이머성 치매 등 다양한 뇌질환에 나타나는 반응으로, 염증 반응으로 분비되는 NO와 PGE2의 경우 소량 분비되면 혈액순환 촉진, 면역력 증강 등의 긍정적인 효과를 가져오지만, 반대로 과분비되는 경우 염증 반응을 촉진시켜 다양한 염증성 질환을 야기하게 된다.

한편, 뇌와 척수의 신경세포들은 그 위치에 따라 매우 다양한 기능을 하고 있으며, 중추신경계(Central nerve system, CNS)에 존재하는 소교세포(Microglial cell)는 미세아교세포라고도 불리며 뇌의 염증, 면역과 퇴행성에 중요한 역할을 하므로 이 세포에서 발생되는 염증 반응을 조절하여 뇌 염증성 질환을 막을 수 있다.

소교세포가 활성화되면 약물이나 독소에 의한 이물질을 제거하고 신경 성장 인자를 분비하여 신경세포를 보호 및 중추신경계의 항상성을 유지하는데 중요한 역할을 한다. 그러나 뇌 손상 등으로 지속적인 활성화가 되거나, lipopolysaccharide(LPS), interferon-gamma(IFN-γ), tumor necrosis factor-alpha(TNF-α)와 같은 자극으로 인해 과도하게 활성화되면 신경계에 독성을 보이는 nitric oxide(NO), prostaglandin E2(PGE2)와 같은 전염증 매개체(pro-inflammatory mediators), 사이토카인(cytokines), 활성산소종(Reactive oxygen species, ROS) 등이 분비되어 신경 독성을 유발하고 염증 유도 인자들의 발현과 생성을 촉진한다. 비정상적으로 활성화된 소교세포에 의한 염증 매개물의 분비는 면역계의 항상성을 교란시켜서 뇌 염증성 질환을 유발 및 진전시킨다. 따라서 소교세포의 과다 활성화에 따른 선천 면역계 조절 장애를 이해하고 비정상적으로 활성화된 소교세포로부터 분비되는 염증 매개물을 조절하는 것은 뇌 염증성 질환의 진행을 늦추거나 손상에 대한 치료에 접근 방법이 될 수 있다.

최근 사회의 고령화가 진행됨에 따라 뇌 염증성 질환 환자가 증가하고 있으며 질병의 원인 규명과 이에 대한 약물 개발이 빠르게 이루어지고 있다. 현재 뇌졸중 환자의 치료에 있어 비스테로이드계 항염증 약물(Non-steroidal anti-inflammatory drugs, NSAIDs)이 제한적으로 사용되고 있지만, 오심, 구토 및 위장장애 등의 부작용이 보고되어 있다. 이에 기인하여 최근 부작용이 비교적 적은 것으로 인식되고 있는 천연물을 대상으로 항염증 치료제 개발에 많은 연구가 이루어지고 있다.

한편, 호박씨는 박과의 덩굴성 한해살이풀 열매인 호박의 씨앗으로 견과류이며 날것으로 섭취하거나 기름으로 만들어 요리에 활용된다. 호박씨에는 불포화지방산이 함유되어 있어 혈액 내 콜레스테롤 수치를 낮춰주어 고혈압과 같은 성인병 예방에 도움을 주고, 기질과 비타민이 다량 함유되어 있어 피부 미용과 노화 예방, 시력 회복에도 이로우며 관절염에 의한 염증을 감소시키고 뼈를 보호해주며 폐경 후 열감이나 저혈압과 관련한 증상을 관리하는데 도움을 주는 것으로 알려져있다.

이러한 배경 하에서, 본 발명자들은 뇌 염증성 질환의 개선에 유용한 천연 유래 소재를 개발하기 위해 예의 연구 노력한 결과, 호박씨 추출물이 소교세포의 NO 생성을 억제하고, 소교세포의 과활성을 억제하며, 산화스트레스에 의한 세포사멸을 억제시키는 것을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.

대한민국 등록특허 제10-2234567호

본 발명의 목적은 늙은 호박씨 추출물을 유효성분으로 포함하는 뇌 염증 개선 또는 예방을 위한 식품 조성물; 뇌 염증성 질환 개선 또는 예방용 식품 조성물; 상기 조성물을 포함하는 건강기능식품을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 늙은 호박씨 추출물을 유효성분으로 포함하는 뇌 염증성 질환 예방 또는 치료용 약제학적 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 늙은 호박씨 추출물을 유효성분으로 포함하는 뇌 염증성 질환 예방, 개선 또는 치료용 의약외품 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 늙은 호박씨 추출물을 유효성분으로 포함하는 뇌 염증 개선 또는 예방을 위한 사료 조성물; 뇌 염증성 질환 개선 또는 예방용 사료 조성물을 제공하는 것이다.

이를 구체적으로 설명하면 다음과 같다. 한편, 본 출원에서 개시된 각각의 설명 및 실시형태는 각각의 다른 설명 및 실시 형태에도 적용될 수 있다. 즉, 본 출원에서 개시된 다양한 요소들의 모든 조합이 본 출원의 범주에 속한다. 또한, 하기 기술된 구체적인 서술에 의하여 본 출원의 범주가 제한된다고 볼 수 없다.

본 발명자들은 아래의 실시예 및 실험예에서 확인되는 바와 같이, 본 발명의 호박씨 추출물이 소교세포의 NO 생성을 억제하고, 소교세포의 과활성을 억제하며, 산화스트레스에 의한 세포사멸 억제 효과를 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 일 양태는 늙은 호박씨 추출물을 유효성분으로 포함하는 뇌 염증 개선 또는 예방을 위한 식품 조성물; 뇌 염증성 질환 개선 또는 예방용 식품 조성물; 상기 조성물을 포함하는 건강기능식품을 제공한다.

본 발명의 용어 "추출물"은 상기 호박씨의 추출처리에 의하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다.

본 발명의 상기 추출물을 추출하는 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출 방법의 비제한적인 예로는, 열수 추출법, 냉침 추출법, 용매 추출법, 수증기 증류법, 용출법, 압착법, 초음파 추출법, 여과법, 환류 추출법 등이 있으며, 이들은 단독으로 수행되거나 2종 이상의 방법을 병용하여 수행될 수 있다.

본 발명의 상기 추출물은 적절한 용매를 이용하여 호박씨로부터 추출한 것이며, 예를 들어 조추출물, 극성용매 가용 추출물 또는 비극성 용매 가용 추출물을 모두 포함할 수 있다. 상기 추출물을 제조하기 위해 사용되는 추출 용매의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 추출 용매의 비제한적인 예로는 물; 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올, 프로필알콜, 부틸알콜 등의 탄소수 1 내지 4 저급 알콜; 글리세린, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 등의 다가 알코올; 메틸아세테이트, 에틸아세테이트, 아세톤, 벤젠, 헥산, 디에틸에테르, 디클로로메탄 등의 탄화수소계 용매;　또는 이들의 혼합물을 사용할 수 있다. 구체적으로, 상기 추출 용매는 에탄올일 수 있다. 또한, 상기 용매를 사용하여 1회 이상 추출하여 용매 추출물을 제조할 수 있다.

본 발명에서 용어 "유효성분"이란 단독으로 목적하는 활성을 나타내거나, 또는 그 자체는 활성이 없는 담체와 함께 활성을 나타낼 수 있는 성분을 의미한다.

본 발명의 용어 "예방"은 본 발명에 따른 늙은 호박씨 추출물 등을 포함하는 조성물의 투여로 개체의 뇌 염증성 질환에 따른 증상을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미한다.

본 발명의 용어 "개선"은 본 발명에 따른 늙은 호박씨 추출물 등을 포함하는 조성물의 투여로 개체의 뇌 염증 상태가 호전되도록 하거나 이롭게 되도록 하는 모든 행위를 의미한다.

본 발명에서 용어 "뇌 염증(brain inflammation)"은 신경세포 사멸과 뇌세포인 소교세포의 나이트릴 옥사이드 생성, 과도한 활성화와 관련 있는 것으로 알려져 있다.

또한, 본 발명에서 용어 "뇌 염증성 질환"은 상기 뇌 염증 반응과 관련된 질환으로, 구체적으로 뇌염,　뇌수막염, 수막뇌염, 뇌염증에 의한 뇌졸중, 혈관성 치매, 뇌종양, 우울증, 조울증, 불면증, 강박장애, 외상 후 스트레스 장애로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상을 의미할 수 있다.

본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 조성물은 소교세포의 활성화(activation)를 억제한다.

소교세포(Microglia cell)인 예컨대, BV2 세포는 뇌의 염증과 퇴행성 변화에서 중요한 역할을 하는 중추신경계 대식세포이며, 염증 발생시 활성화된 소교세포는 염증 매개물질인 프로스타글라딘(prostaglandin)과 나이트릴 옥사이드(nitric oxide) 등을 억제하게 된다. 다만 소교세포가 과활성화 되는 경우에는 소교세포의 분비물질들이 신경(neuron)의 세포사멸을 일으키고, 신경 세포의 사멸과 동시에 신경 세포에서 다시 유해한 분비물질을 내어 소교세포의 활성화가 반복되어 신경 세포의 사멸을 계속해서 유도하는 작용이 반복되므로 소교세포 활성을 조절하여 신경 세포의 세포 사멸을 억제하는 것은 신경세포의 보호 뿐만 아니라 뇌 염증의 개선 효과를 갖는다.

본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 조성물은 신경보호(neuroprotective) 활성, 일 예로, 뇌신경세포 보호 활성을 갖는다.

본 발명의 "신경보호"는 신경 구조 및/또는 기능의 상대적인 보존을 의미하며 신경보호를 통해 뉴런의 손실을 멈추거나 최소한 늦춤으로써 질병 진행과 2차 손상을 예방하거나 늦추는 효과를 갖는다. 본 발명의 늙은 호박씨 추출물은 또한 신경세포의 사멸을 방지하고 신경세포를 증식시키는 효과를 통해 신경보호 활성을 갖는다.

본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 조성물은 신경세포의 아폽토시스(apoptosis)를 감소 효과를 갖는다.

본 발명의 "아폽토시스"는 세포사멸을 의미하며 신경세포는 다양한 원인에 의해 세포사멸이 이루어지며 다른 세포들과 달리 한번 사멸되면 다시 재생하기가 어려운 점이 있다. 이에 사멸 원인을 밝히고, 이를 막을 수 있는 기전에 대한 연구는 세포사멸을 방지함으로써 신경세포를 보호하고 이를 통해 뇌 염증 개선 효과를 갖는다.

본 발명의 식품 조성물은 늙은 호박씨 추출물 이외에, 복용이나 섭취의 편리성을 증진시키기 위하여, 당업계에서 이미 안전성이 검증되고 해당 활성을 갖는 것으로 공지된 임의의 화합물이나 천연 추출물을 추가로 포함할 수 있다.

이러한 화합물 또는 추출물에는 각국 약전(한국에서는 '대한민국약전'), 각국 건강기능식품공전(한국에서는 식약처 고시인 '건강기능식품 기준 및 규격') 등의 공정서에 실려 있는 화합물 또는 추출물, 의약품의 제조·판매를 규율하는 각국의 법률(한국에서는 '약사법')에 따라 품목 허가를 받은 화합물 또는 추출물, 건강기능식품의 제조·판매를 규율하는 각국 법률(한국에서는 '건강기능식품에 관한 법률')에 따라 기능성이 인정된 화합물 또는 추출물이 포함될 수 있다.

본 발명의 용어 "식품"은 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료, 비타민 복합제, 영양 보조제(nutritional supplement), 기능성 식품, 식품 첨가제(food additive), 건강 기능　식품　및 건강　식품　등이 있으며, 통상적인 의미의　식품을 모두 포함한다.

상기 건강　식품(health food)은 일반식품에 비해 적극적인 건강유지나 증진 효과를 가지는　식품을 의미하고, 건강보조식품(health supplement food)은 건강보조 목적의　식품을 의미한다. 경우에 따라, 건강 기능　식품, 건강식품, 건강보조식품의 용어는 호용된다.

본 발명의 용어 "건강 기능 식품"이란, 특정보건용　식품(food for special health use, FoSHU)와 동일한 용어로, 영양 공급 외에도 생체조절기능이 효율적으로 나타나도록 가공된 의학, 의료효과가 높은　식품을 의미한다. 여기서 "기능(성)"이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의　식품은 당 업계에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조가능하며, 상기 제조시에는 당 업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한 상기　식품의 제형 또한　식품으로 인정되는 제형이면 제한 없이 제조될 수 있다. 본 발명의　식품　조성물은 다양한 형태의 제형으로 제조될 수 있으며, 일반 약품과는 달리　식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어나며 본 발명의　식품은 뇌 염증 개선 또는 예방 효과를 위한 보조제로 섭취가 가능하다.

구체적으로, 상기 건강 기능　식품은 늙은 호박씨 추출물을 음료, 차류, 향신료, 껌, 과자류 등의　식품소재에 첨가하거나, 환, 정제, 캡슐, 분말, 현탁액 등으로 제조한　식품으로, 이를 섭취할 경우 건강상 특정한 효과를 가져오는 것을 의미하나, 일반 약품과는 달리　식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용이 없는 장점이 있다.

본 발명의　식품　조성물은, 일상적으로 섭취하는 것이 가능하기 때문에 뇌 염증 개선 또는 예방 효과를 기대할 수 있어 매우 유용하다.

본 발명의 식품 조성물은 어떠한 형태로도 제조될 수 있으며, 예컨대 차, 쥬스, 탄산음료, 이온음료 등의 음료류, 우유, 요구루트 등의 가공 유류(乳類), 껌류, 떡, 한과, 빵, 과자, 면 등의 식품류, 정제, 캡슐, 환, 과립, 액상, 분말, 편상, 페이스트상, 시럽, 겔, 젤리, 바 등의 제제류 등으로 제조될 수 있다. 또한, 본 발명의 식품 조성물은 법률상·기능상의 구분에 있어서 제조·유통 시점의 시행 법규에 부합하는 한 임의의 제품 구분을 띨 수 있다. 예컨대 한국 '건강기능식품에 관한 법률'에 따른 건강기능식품이거나, 한국 '식품위생법'의 식품공전(식약처 고시 '식품의 기준 및 규격')상 각 식품유형에 따른 과자류, 다류, 음료류, 특수용도식품 등일 수 있다.

또한, 본 발명의 식품 조성물에는 그 유효성분 이외에 식품첨가물이 포함될 수 있다. 식품첨가물은 일반적으로 식품을 제조, 가공 또는 보존함에 있어 식품에 첨가되어 혼합되거나 침윤되는 물질로서 이해될 수 있는데, 식품과 함께 매일 그리고 장기간 섭취되므로 그 안전성이 보장되어야 한다. 이러한 식품첨가물은 용도면에 있어서는 감미료, 향미증진제, 보존료, 유화제, 향료 등으로 구분된다.

상기 감미료는 식품에 적당한 단맛을 부여하기 위하여 사용되는 것으로, 천연의 것이거나 합성된 것을 사용할 수 있다. 예를 들어, 네오탐, 락티톨, D-리보오스, 만니톨, D-말티톨, 사카린나트륨 등의 감미료가 사용될 수 있다.

상기 향미증진제는 식품의 맛이나 향을 증진시키는 식품 첨가물로, 천연의 것과 합성된 것 모두 사용될 수 있다. 예를 들어, 향미증진제는 5'-구아닐산이나트륨, L-글루탐산, 글리신, 베타인 등이 사용될 수 있다.

상기 보존료로서는 메타중아황산나트륨, 무수아황산, 소브산, 안식향산, 자몽종자추출물 등이 사용될 수 있다.

상기 유화제는 물과 기름 등 섞이지 않는 두 가지 또는 그 이상의 상(phases)을 균질하게 섞어주거나 유지시키는 식품첨가물로, 글루콘산나트륨, 글리세린지방산에스테르, 레시틴, 스테아린산마그네슘, 알긴산 등이 사용될 수 있다.

상기 향료는 식품에 특유한 향을 부여하거나 제조공정 중 손실된 식품 본래의 향을 보강시키는 식품첨가물로, 에틸바닐린, 옥탄산에틸, 초산리나릴, 카프론산알릴, 파라메틸아세토페논 등이 사용될 수 있다.

본 발명의 식품 조성물은 전술한 바의 식품첨가물 이외에, 기능성과 영양성을 보충, 보강할 목적으로 당업계에 공지되고 식품첨가물로서 안정성이 보장된 생리활성 물질이나 미네랄류를 포함할 수 있다. 상기 생리활성 물질로는 녹차 등에 포함된 카테킨류, 비타민 B1, 비타민 C, 비타민 E, 비타민 B12 등의 비타민류, 토코페롤, 디벤조일티아민 등을 들 수 있으며, 미네랄류로서는 구연산칼슘 등의 칼슘 제제, 스테아린산마그네슘 등의 마그네슘 제제, 구연산철 등의 철 제제, 염화크롬, 요오드칼륨, 셀레늄, 게르마늄, 바나듐, 아연 등을 들 수 있다.

본 발명의 식품 조성물에는 전술한 바의 식품첨가물이 제품 유형에 따라 그 목적을 달성할 수 있는 적정량으로 포함될 수 있으며, 본 발명의 식품 조성물에 포함될 수 있는 기타의 식품첨가물과 관련하여서는 각국 식품공전이나 식품첨가물 공전을 참조할 수 있다.

상기 늙은 호박씨 추출물을 식품첨가물로 사용하는 경우, 늙은 호박씨 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합양은 그의 사용 목적에 따라 적합하게 결정될 수 있다.

상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 다른 하나의 양태는 늙은 호박씨 추출물을 유효성분으로 포함하는 뇌 염증성 질환 예방 또는 치료용 약제학적 조성물을 제공한다. 상기 용어 호박씨, 추출물, 유효성분, 예방 및 뇌 염증성 질환 등은 전술한 바와 같다.

본 발명의 용어 "치료"는 본 발명에 따른 늙은 호박씨 추출물 등을 포함하는 조성물의 투여로 개체의 뇌 염증성 질환에 따른 증상이 호전 또는 완화되거나 이롭게 되도록 하는 모든 행위를 의미한다.

본 발명의 약학적 조성물은 통상의 방법에 따른 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 더 포함할 수 있다. 약학적으로 허용되는 담체는 투여 경로나 제형에 따라 당업계에 주지되어 있으며, 구체적으로는 '대한민국약전'을 포함한 각국의 약전을 참조할 수 있다. 본 발명의 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 또한, 본 발명의 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제는 비자연적 담체일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

본 발명의 약학적 조성물은 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 또는 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 상세하게는, 제형화할 경우 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트, 수크로오스, 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 액체 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 오일, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔, 마크로골, 트윈 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다. 약학적 조성물의 구체적인 제제화와 관련하여서는 당업계에 공지되어 있으며, 예컨대 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences(19th ed., 1995)] 등을 참조할 수 있다. 상기 문헌은 본 명세서의 일부로서 간주된다.

본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 상기 약학적으로 유효한 양은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분하며 부작용을 일으키지 않을 정도의 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 건강상태, 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 방법, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 배합 또는 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 투여량 및 횟수는 어떠한 면에서든 본 발명의 범위를 제한하는 것은 아니다.

본 발명의 약학적 조성물은 쥐, 개, 고양이, 소, 말, 돼지, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로를 통해 투여될 수 있으며, 인간인 경우가 바람직할 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있으며, 예를 들어 경구, 정맥, 근육 또는 피하 주사에 의해 투여될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 다른 하나의 양태는 늙은 호박씨 추출물을 유효성분으로 포함하는 뇌 염증성 질환 예방, 개선 또는 치료용 의약외품 조성물을 제공한다. 상기 용어 호박씨, 추출물, 유효성분 및 뇌 염증성 질환 등은 전술한 바와 같다.

본 발명에서 사용되는 용어 "의약외품"은 사람이나 동물의 질병을 진단, 치료, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용하는 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것 및 사람이나 동물의 구조와 기능에 약리학적 영향을 줄 목적으로 사용하는 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것을 제외한 물품을 의미하며, 일 구체예로 내복용 제제를 포함할 수 있으나 이에 제한되는 것이 아니며, 의약외품의 제제화 방법, 용량, 이용방법, 구성성분 등은 기술분야에 공지된 통상의 기술로부터 적절히 선택될 수 있다.

본 발명의 의약외품 조성물에는 상기 성분 외에 필요에 따라 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 더욱 포함할 수 있다. 상기 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제는 본 발명의 효과를 해하지 않는 한 제한되지 않으며, 예를 들어 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제, 윤활제, 감미제, 방향제, 보존제 등을 포함할 수 있다.

상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 다른 하나의 양태는 늙은 호박씨 추출물을 유효성분으로 포함하는 뇌 염증 개선 또는 예방을 위한 사료 조성물; 뇌 염증성 질환 개선 또는 예방용 사료 조성물을 제공한다. 상기 용어 늙은 호박씨, 추출물, 유효성분, 뇌 염증 개선 및 뇌 염증성 질환 등은 전술한 바와 같다.

본 발명에서 용어 "사료"는 동물이 먹고, 섭취하며, 소화시키기 위한 또는 이에 적당한 임의의 천연 또는 인공 규정식, 한끼식 등 또는 상기 한끼식의 성분을 의미할 수 있다.

본 발명에 있어서, 상기 사료 조성물은, 통상의 사료 형태로 제제화될 수 있고, 알려진 사료성분을 함께 포함할 수 있다. 또한, 사용되는 사료에 첨가제 형태로 가미되는, 사료첨가제로서도 사용될 수 있다. 본 발명의 사료첨가제는 사료관리법상의 보조사료에 해당하며, 탄산수소나트륨(중조), 벤토나이트 (bentonite), 산화마그네슘, 복합광물질 등의 광물질제제, 아연, 구리, 코발트, 셀레늄 등의 미량 광물질인 미네랄제제, 케로틴, 비타민 E, 비타민 A, D, 니코틴산, 비타민 B 복합체 등의 비타민제, 메티오닌, 리이산 등의 보호아미노산제, 지방산 칼슘염 등의 보호지방산제, 생균제(유산균제), 효모배양물, 곰팡이 발효물 등의 생균, 효모제 등이 추가로 포함될 수 있다.

본 발명의 사료 또는 사료첨가제는 포유류, 가금 및 어류를 포함하는 다수의 동물식이에 적용할 수 있다.

본 발명의 늙은 호박씨 추출물은 소교세포의 NO 생성을 억제하고, 소교세포의 과활성을 억제하며, 산화스트레스에 의한 세포사멸 억제 효과를 나타낸다.

도 1은 본 발명의 늙은 호박씨 추출물(SCMD : Seed of Cucucrbita moschata Duchesne) 의 LPS-유도성 NO 생성의 억제 효과를 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명의 늙은 호박씨 추출물의 세포독성 평가를 나타낸 것이다.
도 3은 본 발명의 호박씨 추출물의 H₂O₂ 유발 산화스트레스에 의한 세포사멸 억제 효과를 나타낸 것이다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명의 구성 및 효과를 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위가 이에 의해 한정되는 것은 아니다.

실시예 1: 늙은 호박씨 추출물의 제조

본 발명에 사용한 늙은 호박(Cucurbita moschata Duchesne)은 2021년 11월에 경상북도 경산시에서 재배된 것을 사용하였다. 씨 부분을 분리 후 건조하여 파쇄하고 70% 주정을 사용하여 50℃에서 3시간씩 2번 반복하여 추출하였다. 얻어진 상등액을 여과 후 감압농축 및 동결건조 하여 제조된 고형 추출물을 -20℃에 보관하면서 실험시료로 사용하였다.

실험예 1: 호박씨 추출물의 소교세포 과활성 억제 효과 확인

늙은 호박씨 추출물의 소교세포 과활성억제능을 검증하기 위하여, 농도별 NO 생성 억제효과 실험을 수행하였다.

BV2 세포를 96-웰 플레이트에 3×10⁴cells/well로 분주하여 세포 배양기에서 24시간 동안 배양하고, 이후 상등액을 모두 제거하여 LPS 0.1 μg/mL 과 호박씨 추출물을 농도별 (10, 25, 50, 100, 200 μg/mL)로 동시에 처리하여 추가로 24시간 배양하였다. NO 생성양을 측정하기 위해 상등액과 Griess reagent를 1:1 비율로 15분간 차광한 곳에서 반응시킨 후 540 nm에서 흡광도를 측정하였다. Standard로 NaNO₂를 사용하여 표준곡선을 산출하였다.

그 결과, 도 1에서와 같이 BV2 세포에서 호박씨 추출물을 농도별 (10, 25, 50, 100, 200 μg/mL)로 처리하였을 때, NO 생성이 농도 의존적으로 유의성 있게 감소함을 확인하였다. 구체적으로 BV2 세포에서 아무것도 처리하지 않은 대조군에 비해 LPS 처리한 군은 NO 생성량이 15배 이상 증가하였고, 호박씨 추출물을 처리한 군(10, 25, 50, 100, 200 μg/mL)에서는 각각 12.1, 10.1, 7.9, 2.68, 1.89 μM로 농도 의존적으로 NO생성량이 감소하는 것을 확인하였다.

NO 감소효과가 세포독성에 의한 것이 아님을 증명하기 위하여 세포 생 존율을 측정한 결과, 도 2에서와 같이 호박씨 추출물은 BV2 세포에서 독성을 나타내지 않았으며 이는 세포독성에 의한 NO저해가 아닌, 호박씨 추출물에 의한 NO 저해효능임을 확인하였다.

실험예 2: 호박씨 추출물의 산화 스트레스에 의해 유도된 세포사멸 억제 효과 확인

호박씨 추출물의 산화 스트레스에 의해 유도된 신경세포사멸 억제 효과를 확인하기 위하여, 세포생존률 측정 실험을 수행하였다.

SH-SY5Y human neuroblastoma 세포를 96-웰 플레이트에 5×10⁴ cells/well 분주하여 세포 배양기에서 24시간 배양하고 이후 상등액을 모두 제거하여 H₂O₂ 200 μM과 호박씨 추출물을 농도별 (10, 25, 50, 100μg/mL)로 처리하여 배양하였다. 이후 MTT 시약 0.1 mg/mL을 첨가하여 3시간 동안 37℃, 5% CO₂ 조건에서 배양한 후 DMSO에 녹여 595 nm에서 흡광도를 측정하였다. 세포생존율(%)은 다음과 같은 식을 사용하여 나타내었다.

세포생존율(%)=(시료처리군의 흡광도/대조구의 흡광도)X100

그 결과, 도 3에서와 같이 SH-SY5Y human neuroblastoma 세포에서 호박씨 추출물을 농도별 (10, 25, 50, 100 μg/mL)로 처리하였을 때, 세포생존률이 농도 의존적으로 유의성 있게 증가함을 확인하였다. 구체적으로 아무것도 처리하지 않은 군을 100%로 하였을 때에 비해 H₂0₂ 200 μM을 처리한 군은 73.1%의 세포생존율을 나타내었고 호박씨 추출물을 처리한 군(10, 25, 50, 100 μg/mL)에서는 각각 80, 83.2, 86.2, 86.5%로 농도 의존적으로 세포생존률이 증가하는 것을 확인하였다.

Claims

늙은 호박씨 추출물을 유효성분으로 포함하는 뇌 염증 개선 또는 예방을 위한 식품 조성물.
제1항에 있어서,
상기 뇌 염증 개선 또는 예방은 소교세포의 나이트릴 옥사이드(nitrile oxide) 생성을 억제하거나 소교세포의 과활성을 감소시키는 것인, 식품 조성물.
늙은 호박씨 추출물을 유효성분으로 포함하는 뇌 염증성 질환 개선 또는 예방용 식품 조성물.
제3항에 있어서,
상기 뇌 염증성 질환은 뇌염,　뇌수막염, 수막뇌염, 뇌염증에 의한 뇌졸중, 혈관성 치매, 뇌종양, 우울증, 조울증, 불면증, 강박장애 및 외상 후 스트레스 장애로 구성된 군으로부터 선택되는 것인, 식품 조성물.
제3항에 있어서, 상기 조성물은 소교세포의 나이트릴 옥사이드(nitrile oxide) 생성을 억제하거나, 소교세포의 과활성을 감소시키는 것인, 식품 조성물.
제3항에 있어서,
상기 조성물은 신경보호(neuroprotective) 활성을 갖는 것인, 식품 조성물.
제3항에 있어서,
상기 조성물은 신경세포의 아폽토시스(apoptosis)를 감소시키는 것인, 식품 조성물.
제1항 내지 제7항 중 어느 한 항의 조성물을 포함하는, 건강기능식품.
늙은 호박씨 추출물을 유효성분으로 포함하는 뇌 염증성 질환 예방 또는 치료용 약제학적 조성물.
제9항에 있어서,
상기 뇌 염증성 질환은 뇌염,　뇌수막염, 수막뇌염, 뇌염증에 의한 뇌졸중, 혈관성 치매, 뇌종양, 우울증, 조울증, 불면증, 강박장애 및 외상 후 스트레스 장애로 구성된 군으로부터 선택되는 것인, 약제학적 조성물.
제9항에 있어서,
상기 조성물은 소교세포의 활성화(activation)를 감소시키는 것인, 약제학적 조성물.
제9항에 있어서,
상기 조성물은 신경보호(neuroprotective) 활성을 갖는 것인, 약제학적 조성물.
제9항에 있어서,
상기 조성물은 신경세포의 아폽토시스(apoptosis)를 감소시키는 것인, 약제학적 조성물.
늙은 호박씨 추출물을 유효성분으로 포함하는 뇌 염증성 질환 예방, 개선 또는 치료용 의약외품 조성물.
제14항에 있어서,
상기 뇌 염증성 질환은 뇌염,　뇌수막염, 수막뇌염, 뇌염증에 의한 뇌졸중, 혈관성 치매, 뇌종양, 우울증, 조울증, 불면증, 강박장애 및 외상 후 스트레스 장애로 구성된 군으로부터 선택되는 것인, 의약외품 조성물.
늙은 호박씨 추출물을 유효성분으로 포함하는 뇌 염증 개선 또는 예방을 위한 사료 조성물.
늙은 호박씨 추출물을 유효성분으로 포함하는 뇌 염증성 질환 개선 또는 예방용 사료 조성물.