KR20230142539A - 브루톤 티로신 키나제(btk) 분해제로서의 치환된 피롤로피리미딘 및 피라졸로피리미딘 - Google Patents

브루톤 티로신 키나제(btk) 분해제로서의 치환된 피롤로피리미딘 및 피라졸로피리미딘 Download PDF

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이민 치앤
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로버트 루오
지에 수
후이 장
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지에 판
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액큐타 바이오테크놀로지 인코포레이티드
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Abstract

본 발명의 개시는 브루톤 티로신 키나제(BTK)를 분해하는 신규한 화합물, 이러한 화합물을 함유하는 약학적 조성물, 및 BTK에 의해 조절되는 질환의 예방 및 치료에서의 이들의 용도에 관한 것이다.

Description

브루톤 티로신 키나제(BTK) 분해제로서의 치환된 피롤로피리미딘 및 피라졸로피리미딘
[001] 본 출원은 전체내용이 참조로서 본원에 포함되는 2021년 2월 3일에 출원된 미국 가특허 출원 번호 63/145,126호로부터의 우선권을 주장한다.
본 발명의 개시의 분야
[002] 본 발명은 브루톤 티로신 키나제(BTK)를 조절하는 화합물에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 BTK에 대한 분해 효과를 갖는 화합물, 상기 화합물을 포함하는 약학적 조성물 및 이에 대한 사용 방법에 관한 것이다.
[003] B-세포 수용체(BCR)를 통한 신호전달은 부분적으로 B-세포의 발달 단계에 따라 다양한 생물학적 산출물로 이어질 수 있다. BCR을 통한 잘못된 신호전달은 B-세포 기능의 조절 장애 및/또는 자가면역 및/또는 염증성 질병을 유발할 수 있는 자가-항체의 형성을 유발할 수 있다. B-세포를 고갈시키는 리툭산(Rituxan)과 같은 치료제는 류마티스 관절염과 같은 염증성 질병의 치료에 효과적이다.
[004] BTK는 B 세포, 비만 세포 및 대식세포와 같은 대부분의 조혈 세포에서 발현되나, T 세포, 자연 살해 세포 및 형질 세포에서 발현되지 않는 Tec 패밀리 비-수용체 단백질 키나제이다. 문헌[Smith, C. I. et al. J Immunology, 152 (2), 557-65 (1994)]을 참조한다. BTK는 BCR 및 FcR 신호전달 경로의 중요한 부분이며, BTK의 표적화된 억제는 B-세포 악성종양, 자가면역 질병, 및 염증성 장애와 같은 많은 상이한 인간 질병을 표적화하기 위한 신규한 접근법이다. 예를 들어, 문헌[Uckun, Fatih M. et al, Anti-Cancer Agents in Med Chem. 7(6):624-632 (2007); Shinohara et al, Cell 132(5):794-806 (2008); Pan, Z., Drug News & Perspectives, 21(7):357-362 (2008); Gilfillan et al, Immuno. Rev. 228(1):149-169 (2009); Davis RE et al, Nature, 463:88-92 (2010)]을 참조한다. BTK는 B 세포의 발달 및 활성화에서 역할을 하며, 광범위한 면역-매개 질병에 걸쳐 다수의 신호전달 경로와 관련되어 있다. BTK 활성은 B 세포-관련 혈액암(예를 들어, 비-호지킨 림프종 및 B 세포 만성 림프구성 백혈병) 및 자가면역 질병(예를 들어, 류마티스 관절염, 쇼그렌 증후군, 천포창, 염증성 장 질병, 루푸스 및 천식)과 같은 여러 장애 및 질환의 발병기전과 관련되어 있다.
[005] 일부 구현예에서, 본 발명의 개시는 하기 화학식 (I)의 화합물, 또는 이의 토토머, 입체이성질체 또는 입체이성질체의 혼합물, 또는 약학적으로 허용되는 염, 또는 수화물, 또는 중수소화된 유도체에 관한 것이다:
상기 식에서,
X는 CH 또는 N이고;
Y는 CH 또는 N이고;
A는 -C(O)-, -SO2-, -S(O)-, -O-, -S-, -NH-, -N(C1-C5알킬)-, 및 -C(O)NH(C1-C5알킬)-로부터 선택되고;
B는 또는 이고, 단, B가 인 경우, A는 -O-가 아니고;
R1은 H, C1-C3 알킬, C1-C3할로알킬, 디알킬아미노 기, 아미노 기, -CN, 하이드록실, C1-C4알콕시, 및 할로겐으로부터 선택되고;
각각의 R2 및 R3는 독립적으로 H, 할로겐, -CN, 하이드록실, 디알킬아미노 기, C1-C5알킬, C1-C5알콕시, 중수소화된 C1-C5 알킬, 중수소화된 C1-C5알콕시, 및 C1-C5할로알킬로부터 선택되고;
Q는 L-W1 또는 L-W2이고;
여기서,
L은 2 내지 20개의 탄소 원자 길이의 링커이고, 여기서 하나 이상의 탄소 원자는 선택적으로 및 독립적으로 C(=O), O, N(R6), S, S(O), SO2, C(O)NH, C(O)NCH3, C(O)NCH2CH3, C2-알케닐, C2-알키닐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클, 아릴, 또는 헤테로아릴로부터 선택된 기에 의해 대체되고, 여기서 각각은 독립적으로 0, 1, 2 또는 3개의 R7으로 치환되고;
W1은 하기로부터 선택되고;
여기서, R4는 H, 할로겐, -CN, C1-C5알킬, C1-C5알콕시, 및 C1-C5할로알킬로부터 선택되고;
W2는 , , 이거나 부재하고, 여기서 R5는 H, 할로겐, -CN, C1-C5알킬, 중수소화된 C1-C5 알킬, C1-C5알콕시, 중수소화된 C1-C5알콕시, 및 C1-C5할로알킬로부터 선택되고;
각각의 R6는 독립적으로 H, C1-C3알킬, -C(=O)-(C1-C3알킬), -C(=O)-O-(C1-C3알킬), 및 -C(=O)-NH-(C1-C3알킬)로부터 선택되고, 이들 각각은 0, 1, 2 또는 3개의 R7으로 치환되고;
각각의 R7은 독립적으로 할로겐, 하이드록실, 아미노 기, C1-C3알킬, C1-C3알콕시, C1-C3할로알킬, -N(R6)2, 및 -CN으로부터 선택된다.
[006] 일부 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은 하기 화학식 (IA)의 화합물일 수 있다:
.
[007] 일부 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은 하기 화학식 (IB)의 화합물일 수 있다:
.
[008] 일부 구현예에서, A는 -O- 또는 -C(O)-NH-CH2-이다.
[009] 일부 구현예에서, R1은 H, C1-C3 알킬, C1-C3할로알킬, 및 할로겐으로부터 선택된다.
[010] 일부 구현예에서, R2 및 R3는 각각 독립적으로 H, -OCD3, -CD3, 할로겐, C1-C4알킬, 및 C1-C4알콕시로부터 선택된다.
[011] 일부 구현예에서, R4는 H, 할로겐, -CN, 및 C1-C4할로알킬로부터 선택된다.
[012] 일부 구현예에서, R5는 H, 할로겐, 중수소화된 C1-C5알콕시, 및 C1-C5알콕시로부터 선택된다.
일부 구현예에서, L은 2 내지 12개의 탄소 원자 길이의 링커이고, 여기서 하나 이상의 탄소 원자는 선택적으로 및 독립적으로 C(=O), O, S, S(O), SO2, C(O)NH, C(O)NCH3, C(O)NCH2CH3, NH, NCH3, NCH2CH3, C2-알키닐, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , 및 로부터 선택된 기에 의해 대체된다.
[013] 일부 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물(예를 들어, 화학식 (IA), 화학식 (IB))은 입체이성질체 및 입체이성질체의 혼합물 둘 모두를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은 라세미 이성질체 및 거울상 이성질체 둘 모두를 포함할 수 있다.
[014] 화학식 (I)의 화합물(예를 들어, 화학식 (IA), 화학식 (IB)) 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 또는 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 포함하는 약학적 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 브루톤 티로신 키나제(BTK)에 의해 조절되는 질환의 치료를 필요로 하는 대상체에서 브루톤 티로신 키나제(BTK)에 의해 조절되는 질환을 치료하는 방법이 또한 본원에 개시된다. 적어도 하나의 구현예에서, 본 발명의 개시의 약학적 조성물은 암, 면역학적 질병, 자가면역 질병 및 염증성 질병의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암, 면역학적 질병, 자가면역 질병 및 염증성 질병의 치료(또는 이를 위한 약제의 제조)에서 사용하기 위한 것일 수 있다.
[015] 적어도 하나의 구현예에서, 치료적 유효량의 본 발명의 개시의 약학적 조성물은 BTK에 의해 조절되는 질환으로 고통받는 대상체에 투여될 수 있다. 일부 구현예에서, BTK에 의해 조절되는 질환은 암, 면역학적 질병, 자가면역 질병, 및 염증성 장애로부터 선택된다. 일부 구현예에서, 질환은 B-세포 악성종양, B-세포 림프종, 미만성 거대 B 세포 림프종, 만성 림프구성 백혈병, 비-호지킨 림프종, 외투 세포 림프종, 소포 림프종, 털세포 백혈병, B-세포 비-호지킨 림프종, 발덴스트롬 마크로글로불린혈증, 다발골수종, 골암, 골 전이, 관절염, 다발경화증, 골다공증, 과민성 대장 증후군, 염증성 장 질병, 크론병, 루푸스, 쇼그렌 증후군, 및 신장 이식과 관련된 장애로부터 선택된다.
[016] 전술한 요약뿐만 아니라 본 발명의 개시의 하기 상세한 설명은 첨부된 도면과 함께 읽을 때 더 잘 이해될 것이다. 본 발명의 개시를 예시하는 목적을 위해, 첨부된 도면은 전부가 아닌 일부 대안적 구현예를 예시한다. 그러나, 본 발명의 개시는 제시된 정확한 배열 및 수단에 제한되지 않는 것이 이해되어야 한다. 본 명세서에 포함되어 이의 일부를 구성하는 이들 도면은 본 발명의 개시의 원리를 설명하는 데 도움이 된다.
[017] 도 1은 투여 6시간 후 RAMOS 세포주에서 화합물 13, 25, 34, 42, 48, 49, 51 및 78의 BTK 분해 활성을 예시한다.
[018] 도 2는 투여 6시간 후 RAMOS 세포주에서 화합물 53, 54, 93 및 96의 BTK 분해 활성을 예시한다.
정의
[019] 두 문자 또는 기호 사이에 있지 않은 대시("-")는 치환기의 부착 지점을 나타내는 데 사용된다. 예를 들어, -CN은 탄소 원자를 통해 부착된다.
[020] 값의 범위가 나열되는 경우, 범위 내의 각각의 값 및 하위범위를 포함하도록 의도된다. 예를 들어, "C1-C6 알킬"은 C1, C2, C3, C4, C5, C6, C1-6, C1-5, C1-4, C1-3, C1-2, C2-6, C2-5, C2-4, C2-3, C3-6, C3-5, C3-4, C4-6, C4-5, 및 C5-6 알킬을 포함하도록 의도된다.
[021] 본원에서 사용되는 용어 "아실"은 R-C(O)- 기, 비제한적인 예로, (알킬)-C(O)-, (알케닐)-C(O)-, (알키닐)-C(O)-, (아릴)-C(O)-, (사이클로알킬)-C(O)-, (헤테로아릴)-C(O)-, 및 (헤테로사이클릴)-C(O)-을 지칭하며, 상기 기는 카르보닐 작용기를 통해 모 분자 구조에 부착된다. 일부 구현예에서, 이는, 예를 들어, 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 사이클로알킬, 또는 헤테로아릴 부분의 사슬 또는 고리 원자와 아실의 카르보닐 탄소의 총 수를 지칭하는 C1-10 아실 라디칼이다. 예를 들어, C4-아실은 3개의 다른 고리 또는 사슬 원자와 카르보닐을 갖는다.
[022] 본원에서 사용되는 용어 "알케닐"은 본원에서 (C2-C8)알케닐로 지칭되는 2-8개의 탄소 원자의 선형 또는 분지형 기와 같은 적어도 1개의 탄소-탄소 이중 결합을 갖는 불포화 선형 또는 분지형 탄화수소를 지칭한다. 예시적인 알케닐 기는 비닐, 알릴, 부테닐, 펜테닐, 헥세닐, 부타디에닐, 펜타디에닐, 헥사디에닐, 2-에틸헥세닐, 2-프로필-2-부테닐, 및 4-(2-메틸-3-부텐)-펜테닐을 포함하나 이에 제한되지 않는다.
[023] 본원에서 사용되는 용어 "알킬"은 본원에서 C1-8 알킬로 지칭되는 1-8개의 탄소 원자의 선형 또는 분지형 기와 같은 포화 선형 또는 분지형 탄화수소를 지칭한다. 예시적인 알킬 기는 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 2-메틸-1-프로필, 2-메틸-2-프로필, 2-메틸-1-부틸, 3 메틸-1-부틸, 2-메틸-3-부틸, 2,2-디메틸-1-프로필, 2-메틸-1-펜틸, 3 메틸-1-펜틸, 4-메틸-1-펜틸, 2-메틸-2-펜틸, 3-메틸-2-펜틸, 4 메틸-2-펜틸, 2,2-디메틸-1-부틸, 3,3-디메틸-1-부틸, 2-에틸-1-부틸, 부틸, 이소부틸, t-부틸, 펜틸, 이소펜틸, 네오펜틸, 헥실, 헵틸, 및 옥틸을 포함하나 이에 제한되지 않는다. 일부 구현예에서, "알킬"은 직쇄 탄화수소이다. 일부 구현예에서, "알킬"은 분지형 탄화수소이다.
[024] 용어 "알콕시"는 사슬에 말단 "O"를 함유하는 1-12개의 탄소 원자를 함유하는 직쇄 또는 분지쇄 포화 탄화수소, 예를 들어, -O(알킬)을 의미한다. 알콕시 기의 예는 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 부톡시, t-부톡시, 또는 펜톡시 기를 포함하나 이에 제한되지 않는다.
[025] 본원에서 사용되는 용어 "알킬렌"은 2가 알킬 라디칼을 지칭한다. C1-10 알킬렌의 대표적 예는 메틸렌, 에틸렌, n-프로필렌, 이소-프로필렌, n-부틸렌, sec-부틸렌, 이소-부틸렌, tert-부틸렌, n-펜틸렌, 이소펜틸렌, 네오펜틸렌, n-헥실렌, 3-메틸헥실렌, 2,2-디메틸펜틸렌, 2,3-디메틸펜틸렌, n-헵틸렌, n-옥틸렌, n-노닐렌 및 n-데실렌을 포함하나 이에 제한되지 않는다.
[026] 본원에서 사용되는 용어 "알키닐"은 본원에서 (C2-C8)알키닐로 지칭되는 2-8개의 탄소 원자의 선형 또는 분지형 기와 같은 적어도 하나의 탄소-탄소 삼중 결합을 갖는 불포화된 선형 또는 분지형 탄화수소를 지칭한다. 예시적인 알키닐 기는 에티닐, 프로피닐, 부티닐, 펜티닐, 헥시닐, 메틸프로피닐, 4-메틸-1-부티닐, 4-프로필-2-펜티닐, 및 4-부틸-2-헥시닐을 포함하나 이에 제한되지 않는다.
[027] 본원에서 사용되는 용어 "아릴"은 5 내지 14개의 고리 원자를 갖는 모노-, 바이-, 또는 기타 다중 카르보사이클릭, 방향족 고리 시스템을 지칭한다. 아릴 기는 선택적으로 아릴, 사이클로알킬, 헤테로아릴, 및 헤테로사이클릴로부터 선택된 하나 이상의 고리에 융합될 수 있다. 본 발명의 개시의 아릴 기는 알콕시, 아릴옥시, 알킬, 알케닐, 알키닐, 아미드, 아미노, 아릴, 아릴알킬, 카르바메이트, 카르복시, 시아노, 사이클로알킬, 에스테르, 에테르, 포르밀, 할로겐, 할로알킬, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴, 하이드록실, 케톤, 니트로, 포스페이트, 설파이드, 설피닐, 설포닐, 설폰산, 설폰아미드, 및 티오케톤으로부터 선택된 기로 치환될 수 있다. 예시적인 아릴 기는 페닐, 톨릴, 안트라세닐, 플루오레닐, 인데닐, 아줄레닐, 및 나프틸, 뿐만 아니라 벤조-융합된 카르보사이클릭 모이어티, 예를 들어, 5,6,7,8-테트라하이드로나프틸을 포함하나 이에 제한되지 않는다. 예시적인 아릴 기는 또한 본원에서 "C6-아릴"로 지칭되는 고리가 6개의 탄소 원자를 포함하는 모노사이클릭 방향족 고리 시스템을 포함하나 이에 제한되지 않는다.
[028] 본원에서 사용되는 용어 "시아노"는 -CN을 지칭한다.
[029] 본원에서 사용되는 용어 "사이클로알킬"은 사이클로알칸으로부터 유래된 본원에서 "(C3-C8)사이클로알킬"로 지칭되는 3-16개의 탄소 또는 3-8개의 탄소의 포화 또는 불포화 사이클릭, 바이사이클릭, 또는 브릿징된 바이사이클릭 탄화수소 기를 지칭한다. 예시적인 사이클로알킬 기는 사이클로헥산, 사이클로헥센, 사이클로펜탄, 및 사이클로펜텐을 포함하나 이에 제한되지 않는다. 사이클로알킬 기는 알콕시, 아릴옥시, 알킬, 알케닐, 알키닐, 아미드, 아미노, 아릴, 아릴알킬, 카르바메이트, 카르복시, 시아노, 사이클로알킬, 에스테르, 에테르, 포르밀, 할로겐, 할로알킬, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴, 하이드록실, 케톤, 니트로, 포스페이트, 설파이드, 설피닐, 설포닐, 설폰산, 설폰아미드 및 티오케톤으로 치환될 수 있다. 사이클로알킬 기는 다른 사이클로알킬(포화되거나 부분적으로 불포화됨), 아릴, 또는 헤테로사이클릴 기에 융합되어 바이사이클, 테트라사이클 등을 형성할 수 있다. 용어 "사이클로알킬"은 또한 헤테로원자를 함유하거나 함유하지 않을 수 있는 브릿징된 및 스피로-융합된 사이클릭 구조를 포함한다.
[030] 본원에서 사용되는 용어 "할로" 또는 "할로겐"은 -F, -Cl, -Br, 및/또는 -I를 지칭한다.
[031] "할로알킬"은 하나 이상의 할로겐으로 치환된 알킬 기를 의미한다. 할로알킬 기의 예는 트리플루오로메틸, 디플루오로메틸, 펜타플루오로에틸, 트리클로로메틸 등을 포함하나 이에 제한되지 않는다.
[032] 본원에서 사용되는 용어 "헤테로아릴"은 하나 이상의 헤테로원자, 예를 들어, 1-3개의 헤테로원자, 예를 들어, 질소, 산소, 및 황을 함유하는 모노-, 바이-, 또는 멀티-사이클릭, 방향족 고리 시스템을 지칭한다. 헤테로아릴은 알콕시, 아릴옥시, 알킬, 알케닐, 알키닐, 아미드, 아미노, 아릴, 아릴알킬, 카르바메이트, 카르복시, 시아노, 사이클로알킬, 에스테르, 에테르, 포르밀, 할로겐, 할로알킬, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴, 하이드록실, 케톤, 니트로, 포스페이트, 설파이드, 설피닐, 설포닐, 설폰산, 설폰아미드 및 티오케톤을 포함하는 하나 이상의 치환기로 치환될 수 있다. 헤테로아릴은 또한 비-방향족 고리에 융합될 수 있다. 예시적 헤테로아릴 기는 본원에서 "(C2-C5)헤테로아릴"로 지칭되는 고리가 2-5개의 탄소 원자 및 1-3개의 헤테로원자를 포함하는 모노사이클릭 방향족 고리를 포함하나 이에 제한되지 않는다. 헤테로아릴 기의 예시적 예는 피리디닐, 피리다지닐, 피리미딜, 피라질, 트리아지닐, 피롤릴, 피라졸릴, 이미다졸릴, (1,2,3)- 및 (1,2,4)-트리아졸릴, 피라지닐, 피리미딜릴, 테트라졸릴, 푸릴, 티에닐, 이속사졸릴, 티아졸릴, 푸릴, 페닐, 이속사졸릴, 및 옥사졸릴을 포함하나 이에 제한되지 않는다. 예시적인 헤테로아릴 기는 또한 본원에서 "(C5-C14)헤테로아릴"로 지칭되는 고리가 5-14개의 탄소 원자 및 1-3개의 헤테로원자를 포함하는 바이사이클릭 방향족 고리를 포함하나 이에 제한되지 않는다. 헤테로아릴의 대표적 예는 인다졸릴, 인돌릴, 아자인돌릴, 인돌리닐, 벤조트리아졸릴, 벤족사디아졸릴, 이미다졸릴, 신놀리닐, 이미다조피리딜, 피라졸로피리딜, 피롤로피리딜, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 퀴나졸리닐, 퀴나졸리노닐, 인돌리노닐, 이소인돌리노닐, 테트라하이드로나프틸, 테트라하이드로퀴놀리닐, 테트라하이드로이소퀴놀리닐 등을 포함하나 이에 제한되지 않는다.
[033] 본원에서 사용되는 용어 "헤테로사이클", 헤테로사이클릴" 또는 "헤테로사이클릭"은 각각 질소, 산소, 인, 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3, 또는 4개의 헤테로원자를 함유하는 포화 또는 불포화 3 내지 18원 고리를 지칭한다. 헤테로사이클은 방향족(헤테로아릴) 또는 비-방향족일 수 있다. 헤테로사이클은 알콕시, 아릴옥시, 알킬, 알케닐, 알키닐, 아미드, 아미노, 아릴, 아릴알킬, 카르바메이트, 카르복시, 시아노, 사이클로알킬, 에스테르, 에테르, 포르밀, 할로겐, 할로알킬, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴, 하이드록실, 케톤, 니트로, 포스페이트, 설파이드, 설피닐, 설포닐, 설폰산, 설폰아미드 및 티오케톤을 포함하는 하나 이상의 치환기로 치환될 수 있다. 헤테로사이클은 또한 상기 헤테로사이클릭 고리 중 임의의 것이 아릴, 사이클로알킬, 및 헤테로사이클로부터 독립적으로 선택된 1개 또는 2개의 고리에 융합된 바이사이클릭, 트리사이클릭, 및 테트라사이클릭 기를 포함한다. 예시적인 헤테로사이클은 아크리디닐, 벤즈이미다졸릴, 벤조푸릴, 벤조티아졸릴, 벤조티에닐, 벤족사졸릴, 비오티닐, 신놀리닐, 디하이드로푸릴, 디하이드로인돌릴, 디하이드로피라닐, 디하이드로티에닐, 디티아졸릴, 푸릴, 호모피페리디닐, 이미다졸리디닐, 이미다졸리닐, 이미다졸릴, 인돌릴, 이소퀴놀릴, 이소티아졸리디닐, 이소티아졸릴, 이속사졸리디닐, 이속사졸릴, 모르폴리닐, 옥사디아졸릴, 옥사졸리디닐, 옥사졸릴, 피페라지닐, 피페리디닐, 피라닐, 피라졸리디닐, 피라지닐, 피라졸릴, 피라졸리닐, 피리다지닐, 피리딜, 피리미디닐, 피리미딜, 피롤리디닐, 피롤리딘-2-오닐, 피롤리닐, 피롤릴, 퀴놀리닐, 퀴녹살로일, 테트라하이드로푸릴, 테트라하이드로이소퀴놀릴, 테트라하이드로피라닐, 테트라하이드로퀴놀릴, 테트라졸릴, 티아디아졸릴, 티아졸리디닐, 티아졸릴, 티에닐, 티오모르폴리닐, 티오피라닐, 및 트리아졸릴을 포함한다.
[034] 본원에서 사용되는 용어 "하이드록시" 및 "하이드록실"은 -OH를 지칭한다.
[035] "스피로사이클로알킬" 또는 "스피로사이클릴"은 단일 원자를 통해 연결된 둘 모두의 고리를 갖는 탄소 생성 바이사이클릭 고리 시스템을 의미한다. 고리는 크기와 성질이 상이할 수 있거나, 크기와 성질이 동일할 수 있다. 예로는 스피로펜탄, 스피로헥산, 스피로헵탄, 스피로옥탄, 스피로노난, 또는 스피로데칸을 포함한다. 스피로사이클의 고리 중 하나 또는 둘 모두는 카르보사이클릭, 헤테로사이클릭, 방향족, 또는 헤테로방향족 고리와 같은 또 다른 고리에 융합될 수 있다. (C3-12)스피로사이클로알킬은 3 내지 12개의 탄소 원자를 함유하는 스피로사이클이다.
[036] "스피로헤테로사이클로알킬" 또는 "스피로헤테로사이클릴"은 고리 중 적어도 하나가 헤테로사이클인 스피로사이클을 의미하며, 여기서 탄소 원자 중 하나 이상은 헤테로원자로 치한될 수 있다(예를 들어, 탄소 원자 중 하나 이상은 고리 중 적어도 하나에서 헤테로원자로 치환될 수 있다). 스피로헤테로사이클의 고리 중 하나 또는 둘 모두는 카르보사이클릭, 헤테로사이클릭, 방향족, 또는 헤테로방향족 고리와 같은 또 다른 고리에 융합될 수 있다.
[037] "이성질체"는 동일한 수 및 종류의 원자, 및 이에 따라 동일한 분자량을 갖지만, 공간에서 원자의 배열 또는 구성과 관련하여 상이한 화합물을 의미한다.
[038] "입체이성질체" 또는 "광학 이성질체"는 적어도 하나의 키랄 원자 또는 수직 비대칭 평면(예를 들어, 특정 바이페닐, 알렌, 및 스피로 화합물)을 발생시키는 제한된 회전을 갖고 평면-편광된 광을 회전시킬 수 있는 안정한 이성질체를 의미한다. 비대칭 중심 및 다른 화학 구조가 입체이성을 발생시킬 수 있는 본 발명의 개시의 화합물에 존재하기 때문에, 본 발명의 개시는 입체이성질체 및 이들의 혼합물을 고려한다. 본 발명의 개시의 화합물 및 이들의 염은 비대칭 탄소 원자를 포함하고, 따라서 단일 입체이성질체, 라세미체, 및 거울상 이성질체와 부분입체 이성질체의 혼합물로서 존재할 수 있다. 전형적으로, 이러한 화합물은 라세미 혼합물로서 제조될 것이다. 그러나, 원하는 경우, 이러한 화합물은 순수한 입체이성질체로서, 즉, 개별적 거울상 이성질체 또는 부분입체 이성질체, 또는 입체이성질체-농축된 혼합물로서 제조되거나 분리될 수 있다. 하기에서 보다 상세히 논의되는 바와 같이, 화합물의 개별 입체이성질체는 원하는 키랄 중심을 함유하는 광학 활성 시작 물질로부터의 합성에 의해 또는 거울상 이성질체 생성물의 혼합물의 분리 후, 분리 또는 분해, 예를 들어, 부분입체 이성질체의 혼합물로의 전환 후, 분리 또는 재결정화, 크로마토그래피 기술, 키랄 분해제의 사용, 또는 키랄 크로마토그래피 컬럼 상에서의 거울상 이성질체의 직접 분리에 의해 제조된다. 특정 입체화학의 시작 화합물은 상업적으로 이용 가능하거나 하기 설명되는 방법에 의해 제조되고 당 분야에 널리 공지된 기술에 의해 분해된다.
[039] 화합물의 생물학적 및 약리학적 활성이 화합물의 입체화학에 민감하다는 것은 당분야에 널리 공지되어 있다. 따라서, 예를 들어, 거울상 이성질체는 종종 대사, 단백질 결합 등을 포함하는 약동학적 특성, 및 표시된 활성의 유형, 활성의 정도, 독성 등을 포함하는 약리학적 특성의 차이를 포함하여 현저하게 상이한 생물학적 활성을 나타낸다. 따라서, 당업자는 하나의 거울상 이성질체가 더 활성일 수 있거나 다른 거울상 이성질체에 비해 풍부할 때 또는 다른 거울상 이성질체로부터 분리될 때 유익한 효과를 나타낼 수 있음을 인식할 것이다. 추가로, 당업자는 본 발명의 개시 및 선행 기술의 지식으로부터의 본 발명의 개시의 화합물의 거울상 이성질체를 분리하거나, 농축시키거나, 선택적으로 제조하는 방법을 알 것이다.
[040] 따라서, 라세미 형태의 약물이 사용될 수 있지만, 동일한 양의 거울상 이성질체적으로 순수한 약물을 투여하는 것보다 종종 덜 효과적이고; 실제로, 일부 경우에, 하나의 거울상 이성질체는 약리학적으로 불활성일 수 있으며 단지 간단한 희석제 역할만 할 수 있을 것이다. 예를 들어, 이전에 이부프로펜이 라세미체로 투여되었으나, 이부프로펜의 S-이성질체만이 항염증제로서 효과적인 것으로 밝혀졌다(그러나, 이부프로펜의 경우, R-이성질체가 불활성이지만, 이는 생체 내에서 S-이성질체로 전환되고, 따라서 약물의 라세미 형태의 작용 신속도는 순수한 S-이성질체보다 덜하다). 또한, 거울상 이성질체의 약리학적 활성은 별개의 생물학적 활성을 가질 수 있다. 예를 들어, S-페니실라민은 만성 관절염에 대한 치료제인 반면, R-페니실라민은 독성이 있다. 실제로, 일부 정제된 거울상 이성질체는 라세미체에 비해 장점을 갖는데, 이는 정제된 개별 이성질체가 라세미 혼합물에 비해 더 빠른 경피 침투 속도를 갖는다고 보고되었기 때문이다. 미국 특허 번호 5,114,946호 및 4,818,541호를 참조한다.
[041] 일부 구현예에서, 화합물은 (S)- 및 (R)-이성질체의 라세미 혼합물이다. 다른 구현예에서, 혼합물의 개별 화합물이 주로 (S)- 또는 (R)-이성질체 구성으로 존재하는 화합물의 혼합물이 본원에 제공된다. 예를 들어, 화합물 혼합물은 약 55%, 약 60%, 약 65%, 약 70%, 약 75%, 약 80%, 약 85%, 약 90%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98%, 약 99%, 약 99.5% 초과, 또는 그 초과의 (S)-거울상 이성질체 과량을 갖는다. 다른 구현예에서, 화합물 혼합물은 약 55% 내지 약 99.5% 초과, 약 60% 내지 약 99.5% 초과, 약 65% 내지 약 99.5% 초과, 약 70% 내지 약 99.5% 초과, 약 75% 내지 약 99.5% 초과, 약 80% 내지 약 99.5% 초과, 약 85% 내지 약 99.5% 초과, 약 90% 내지 약 99.5% 초과, 약 95% 내지 약 99.5% 초과, 약 96% 내지 약 99.5% 초과, 약 97% 내지 약 99.5% 초과, 약 98% 초과 내지 약 99.5% 초과, 약 99% 내지 약 99.5% 초과, 또는 그 초과의 (S)-거울상 이성질체 과량을 갖는다. 다른 구현예에서, 화합물 혼합물은 약 55%, 약 60%, 약 65%, 약 70%, 약 75%, 약 80%, 약 85%, 약 90%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98%, 약 99%, 약 99.5% 초과, 또는 그 초과의 (R)-거울상 이성질체 순도를 갖는다. 일부 다른 구현예에서, 화합물 혼합물은 약 55% 내지 약 99.5% 초과, 약 60% 내지 약 99.5% 초과, 약 65% 내지 약 99.5% 초과, 약 70% 내지 약 99.5% 초과, 약 75% 내지 약 99.5% 초과, 약 80% 내지 약 99.5% 초과, 약 85% 내지 약 99.5% 초과, 약 90% 내지 약 99.5% 초과, 약 95% 내지 약 99.5% 초과, 약 96% 내지 약 99.5% 초과, 약 97% 내지 약 99.5% 초과, 약 98% 초과 내지 약 99.5% 초과, 약 99% 내지 약 99.5% 초과, 또는 그 초과의 (R)-거울상 이성질체 과량을 갖는다.
[042] 본 발명의 개시의 화합물의 개별적 입체이성질체는 비대칭 또는 입체 중심을 함유하는 상업적으로 이용 가능한 시작 물질로부터 합성적으로, 또는 라세미 혼합물의 제조에 이어 당업자에게 널리 공지된 분해 방법에 의해 제조될 수 있다. 이들 분해 방법은 (1) 키랄 보조제로의 거울상 이성질체 혼합물의 부착, 재결정화 또는 크로마토그래피에 의한 생성된 부분입체 이성질체 혼합물의 분리 및 보조제로부터의 광학적으로 순수한 생성물의 해방; (2) 광학 활성 분해제를 사용한 염 형성; 또는 (3) 키랄 크로마토그래피 컬럼에서 광학 거울상 이성질체 혼합물의 직접 분리에 의해 예시된다. 입체이성질체 혼합물은 또한 널리 공지된 방법, 예를 들어, 키랄-상 가스 크로마토그래피, 키랄-상 고성능 액체 크로마토그래피, 키랄 염 복합체로서의 화합물 결정화, 또는 키랄 용매에서의 화합물 결정화에 의해 이들의 성분 입체이성질체로 분해될 수 있다. 입체이성질체는 또한 널리 공지된 비대칭 합성 방법에 의해 입체이성질체적으로 순수한 중간체, 시약, 및 촉매로부터 획득될 수 있다.
[043] 따라서, 하나의 거울상 이성질체가 약리학적으로 더 활성이거나, 덜 독성이거나, 다른 거울상 이성질체보다 신체에서 바람직한 배치를 갖는 경우, 그러한 거울상 이성질체를 우선적으로 투여하는 것이 치료적으로 더 유익할 것이다. 이러한 방식으로, 치료를 받는 환자는 더 낮은 총 용량의 약물 및 더 낮은 용량의 독성이 있을 수 있는 거울상 이성질체 또는 다른 거울상 이성질체의 억제제에 노출될 것이다.
[044] 본원에서 사용되는 용어 "약학적으로 허용되는 담체"는 약학적 투여와 상용되는 임의의 및 모든 용매, 분산 매질, 코팅, 등장성 및 흡수 지연제 등을 지칭한다. 약학적 활성 물질에 대한 이러한 매질 및 제제의 사용은 당 분야에 널리 공지되어 있다. 조성물은 또한 보충적, 추가적 또는 강화된 치료 기능을 제공하는 다른 활성 화합물을 함유할 수 있다.
[045] 본원에서 사용되는 용어 "약학적으로 허용되는 조성물"은 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체와 함께 제형화된 본원에 개시된 바와 같은 적어도 하나의 화합물을 포함하는 조성물을 지칭한다.
[046] 본원에서 사용되는 용어 "약학적으로 허용되는 프로드러그"는 건전한 의학적 판단의 범위 내에서 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응 없이 인간 및 하등 동물의 조직과 접촉하여 사용하기에 적합하고, 합리적인 이익/위험 비에 상응하고, 이들의 의도된 사용에 효과적인 본 발명의 개시의 화합물의 프로드러그, 뿐만 아니라 가능한 경우 본 발명의 개시의 화합물의 쯔비터이온 형태를 나타낸다. 논의는 문헌[Higuchi et al., "Prodrugs as Novel Delivery Systems," ACS Symposium Series, Vol. 14, 및 Roche, E.B., ed. Bioreversible Carriers in Drug Design, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987]에 제공되어 있으며, 이들 둘 모두는 참조로서 본원에 포함된다.
[047] 용어 "약학적으로 허용되는 염(들)"은 본 발명의 조성물에서 사용되는 화합물에 존재할 수 있는 산성 또는 염기성 기의 염을 지칭한다. 본질적으로 염기성인 본 발명의 조성물에 포함된 화합물은 다양한 무기 및 유기 산과 함께 다양한 염을 형성할 수 있다. 이러한 염기성 화합물의 약학적으로 허용되는 산 부가염을 제조하는 데 사용될 수 있는 산은 비-독성 산 부가염, 즉 설페이트, 시트레이트, 마테이트(matate), 아세테이트, 옥살레이트, 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드, 니트레이트, 설페이트, 바이설페이트, 포스페이트, 산 포스페이트, 이소니코티네이트, 아세테이트, 락테이트, 살리실레이트, 시트레이트, 타르트레이트, 올레에이트, 탄네이트, 판토테네이트, 바이타르트레이트, 아스코르베이트, 숙시네이트, 말레에이트, 겐티시네이트, 푸마레이트, 글루코네이트, 글루카로네이트, 사카레이트, 포르메이트, 벤조에이트, 글루타메이트, 메탄설포네이트, 에탄설포네이트, 벤젠설포네이트, p-톨루엔설포네이트 및 파모에이트(즉, 1,1'-메틸렌-비스-(2-하이드록시-3-나프토에이트)) 염을 포함하나 이에 제한되지 않는 약리학적으로 허용되는 음이온을 함유하는 염을 형성하는 산이다. 아미노 모이어티를 포함하는 본 발명의 조성물에 포함된 화합물은 상기 언급된 산 이외에 다양한 아미노산과 약학적으로 허용되는 염을 형성할 수 있다. 본질적으로 산성인 본 발명의 조성물에 포함된 화합물은 다양한 약리학적으로 허용되는 양이온과 염기 염을 형성할 수 있다. 이러한 염의 예는 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염, 특히 칼슘, 마그네슘, 소듐, 리튬, 아연, 포타슘, 및 철 염을 포함한다.
[048] 본원에서 사용되는 바와 같이, 유기 화합물을 포함하는 화합물에 대한 명명법은 관용명, IUPAC, IUBMB, 또는 명명법에 대한 CAS 권장사항을 사용하여 제공될 수 있다. 당업자는 명명 규칙을 사용하여 화합물 구조를 체계적으로 감소시키거나 CHEMDRAW™(Cambridgesoft Corporation, U.S.A.)과 같은 상업적으로 이용 가능한 소프트웨어에 의해 이름이 제공되면 화합물의 구조를 용이하게 확인할 수 있다. 화학명은 PerkinElmer ChemDraw® Professional, 버전 17을 사용하여 생성되었다.
[049] 본 발명의 개시의 화합물은 하나 이상의 키랄 중심 및/또는 이중 결합을 함유할 수 있고, 따라서 기하 이성질체, 거울상 이성질체 또는 부분입체 이성질체와 같은 입체이성질체로 존재할 수 있다. 본원에서 사용되는 용어 "입체이성질체"는 모든 기하 이성질체, 거울상 이성질체 또는 부분입체 이성질체로 구성된다. 이들 화합물은 입체 탄소 원자 주위의 치환기 구성에 따라 기호 "R" 또는 "S"로 지정될 수 있다. 본 발명의 개시는 이들 화합물 및 이들의 혼합물의 다양한 입체이성질체를 포함한다. 입체이성질체는 거울상 이성질체 및 부분입체 이성질체를 포함한다. 거울상 이성질체 또는 부분입체 이성질체의 혼합물은 명명법에서 "(±)"로 지정될 수 있지만, 당업자는 구조가 암묵적으로 키랄 중심을 나타낼 수 있음을 인식할 것이다. 일부 구현예에서, 거울상 이성질체 또는 입체이성질체는 상응하는 거울상 이성질체가 실질적으로 없이 제공될 수 있다.
[050] 본원에서 사용되는 "암"은 신체의 다른 부분을 침입하거나 이로 퍼질 잠재성이 있는 비정상적인 세포 성장을 포함하는 질병, 장애 및 질환을 지칭한다. 예시적인 암은 유방암, 폐암, 난소암, 자궁내막암, 전립선암, 및 식도암을 포함하나 이에 제한되지 않는다.
[051] 본원에서 사용되는 용어 "대상체"는 동물을 지칭한다. 전형적으로, 동물은 포유동물이다. 대상체는 또한, 예를 들어, 영장류(예를 들어, 인간, 남성 또는 여성), 소, 양, 염소, 말, 개, 고양이, 토끼, 래트, 마우스, 어류, 조류 등을 지칭한다. 특정 구현예에서, 대상체는 영장류이다. 또 다른 구현예에서, 대상체는 인간이다.
[052] 본원에서 사용되는 용어 "억제하다", "억제" 또는 "억제하는"은 제공된 질환, 증상, 또는 장애, 또는 질병의 감소 또는 억제, 또는 생물학적 활성 또는 프로세스의 기준선 활성의 유의한 감소를 지칭한다.
[053] 본원에서 사용되는 용어 임의의 질병 또는 장애를 "치료하다", "치료하는" 또는 "치료"는 일 구현예에서 질병 또는 장애를 개선시키는(즉, 질병 또는 이의 임상 증상 중 적어도 하나의 발달을 늦추거나 정지시키거나 감소시키는) 것을 지칭한다. 또 다른 구현예에서, "치료하다", "치료하는" 또는 "치료"는 환자가 식별할 수 없는 것들을 포함하는 적어도 하나의 신체적 파라미터를 완화시키거나 개선시키는 것을 지칭한다. 또 다른 구현예에서, "치료하다", "치료하는" 또는 "치료"는 질병 또는 장애를 신체적으로(예를 들어, 식별 가능한 증상의 안정화를 통해), 생리학적으로(예를 들어, 신체적 파라미터의 안정화를 통해) 또는 둘 모두로 조절하는 것을 지칭한다. 또 다른 구현예에서, "치료하다", "치료하는" 또는 "치료"는 질병 또는 장애의 개시 또는 발달 또는 진행을 예방하거나 지연시키는 것을 지칭한다.
[054] 본원에서 사용되는 바와 같이, 대상체는 이러한 대상체가 치료로부터 생물학적으로, 의학적으로 또는 삶의 질에서 이익을 얻는 경우 이러한 치료를 "필요로 한다".
[055] 추가적으로, 달리 언급되지 않는 한, 본원에 설명된 구조는 또한 하나 이상의 동위원소적으로 농축된 원자의 존재하에서만 상이한 화합물을 포함하는 것을 의미한다. 예를 들어, 중수소(2H) 또는 삼중수소(3H)에 의한 수소의 대체, 또는 13C- 또는 14C-탄소 원자에 의한 탄소의 대체를 제외하고 본 발명의 구조를 갖는 화합물은 본 발명의 개시 범위 내에 있다. 이러한 화합물은, 예를 들어, 분석 도구, 생물학적 검정의 프로브, 또는 치료제로서 유용할 수 있다.
화합물
[056] 일부 구현예에서, 하기 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 토토머, 입체이성질체 또는 입체이성질체의 혼합물, 또는 약학적으로 허용되는 염, 또는 수화물, 또는 중수소화된 유도체가 본원에 제공된다:
상기 식에서,
X는 CH 또는 N이고;
Y는 CH 또는 N이고;
A는 -C(O)-, -SO2-, -S(O)-, -O-, -S-, -NH-, -N(C1-C5알킬)-, 및 -C(O)NH(C1-C5알킬)-로부터 선택되고;
B는 또는 이고, 단, B가 인 경우, A는 -O-가 아니고;
R1은 H, C1-C3 알킬, C1-C3할로알킬, 디알킬아미노 기, 아미노 기, -CN, 하이드록실, C1-C4알콕시, 및 할로겐으로부터 선택되고;
각각의 R2 및 R3는 독립적으로 H, 할로겐, -CN, 하이드록실, 디알킬아미노 기, C1-C5알킬, C1-C5알콕시, 중수소화된 C1-C5알킬, 중수소화된 C1-C5알콕시, 및 C1-C5할로알킬로부터 선택되고;
Q는 L-W1 또는 L-W2이고;
여기서,
L은 2 내지 20개의 탄소 원자 길이의 링커이고, 여기서 하나 이상의 탄소 원자는 선택적으로 및 독립적으로 C(=O), O, N(R6), S, S(O), SO2, C(O)NH, C(O)NCH3, C(O)NCH2CH3, C2-알케닐, C2-알키닐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클, 아릴, 또는 헤테로아릴로부터 선택된 기에 의해 대체되고, 여기서 각각은 독립적으로 0, 1, 2 또는 3개의 R7으로 치환되고;
W1은 하기로부터 선택되고;
여기서, R4는 H, 할로겐, -CN, C1-C5알킬, C1-C5알콕시, 및 C1-C5할로알킬로부터 선택되고;
W2는 , , 이거나 부재하고, 여기서 R5는 H, 할로겐, -CN, C1-C5알킬, C1-C5알콕시, 및 C1-C5할로알킬로부터 선택되고;
각각의 R6는 독립적으로 H, C1-C3알킬, -C(=O)-(C1-C3알킬), -C(=O)-O-(C1-C3알킬), 및 -C(=O)-NH-(C1-C3알킬)로부터 선택되고, 이들 각각은 0, 1, 2 또는 3개의 R7으로 치환되고;
각각의 R7은 독립적으로 할로겐, 하이드록실, 아미노 기, C1-C3알킬, C1-C3알콕시, C1-C3할로알킬, -N(R6)2, 및 -CN으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은 하기 화학식 (IA)의 화합물일 수 있다:
.
[057] 일부 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은 하기 화학식 (IB)의 화합물일 수 있다:
.
[058] 일부 구현예에서, A는 -O- 또는 -C(O)-NH-CH2이다. 일부 구현예에서, A는 -O-이다. 일부 구현예에서, A는 -C(O)-NH-CH2이다.
[059] 일부 구현예에서, R1은 H, C1-C3 알킬, C1-C3할로알킬, 및 할로겐으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R1은 H, F, Cl, Br, I, -CF3, -CH3, 및 으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R1은 H이다. 일부 구현예에서, R1은 Br이다. 일부 구현예에서, R1은 Cl이다. 일부 구현예에서, R1은 F이다. 일부 구현예에서, R1은 I이다.
[060] 일부 구현예에서, R2 및 R3는 각각 독립적으로 H, -OCD3, -CD3, 할로겐, C1-C4알킬, 및 C1-C4알콕시로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R2 및 R3는 각각 H이다. 일부 구현예에서, R2는 H이고, R3는 F이다. 일부 구현예에서, R2는 F이고, R3는 H이다. 일부 구현예에서, R2는 -OCH3이고, R3는 F이다. 일부 구현예에서, R2는 F이고, R3는 -OCH3이다. 일부 구현예에서, R2는 -OCD3이고, R3는 F이다. 일부 구현예에서, R2는 -F이고, R3는 -OCD3이다. 일부 구현예에서, R2는 -CD3이고, R3는 F이다. 일부 구현예에서, R2는 -F이고, R3는 -CD3이다.
[061] 일부 구현예에서, R4는 H, 할로겐, -CN, 및 C1-C4할로알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R4는 H이다. 일부 구현예에서, R4는 할로겐이다. 일부 구현예에서, R4는 F이다. 일부 구현예에서, R4는 Cl이다. 일부 구현예에서, R4는 Br이다.
[062] 일부 구현예에서, R5는 H, 할로겐, 중수소화된 C1-C5알콕시, 및 C1-C5알콕시로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R5는 -OCH3 또는 -OCD3이다. 일부 구현예에서, R5는 -OCH3이다.
[063] 일부 구현예에서, L은 2 내지 12개의 탄소 원자 길이의 링커이며, 여기서 하나 이상의 탄소 원자는 선택적으로 및 독립적으로 C(=O), O, S, S(O), SO2, C(O)NH, C(O)NCH3, C(O)NCH2CH3, NH, NCH3, NCH2CH3, C2-알키닐, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , 및 으로부터 선택된 기에 의해 대체된다.
[064] 일부 구현예에서, W2는 , , 이거나, 부재한다. 일부 구현예에서, W2는 이다. 일부 구현예에서, W2는 이다. 일부 구현예에서, W2는 이다. 일부 구현예에서, W2는 부재한다.
[065] 일부 구현예에서, 표 1에 열거된 화합물로부터 선택된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염이 본원에 제공된다.
표 1. 본 발명의 개시의 예시적 화합물
약학적 조성물
[066] 본 발명의 개시의 약학적 조성물은 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체와 함께 제형화된 화학식 (I)의 적어도 하나의 화합물(예를 들어, 화학식 (IA), 화학식 (IB)), 또는 이의 토토머, 입체이성질체 또는 입체이성질체의 혼합물, 또는 약학적으로 허용되는 염, 또는 수화물, 또는 중수소화된 유도체를 포함한다. 이들 제형은 경구, 직장, 국소, 협측 및 비경구(예를 들어, 피하, 근육내, 피내 또는 정맥내) 투여에 적합한 제형을 포함한다. 임의의 제공된 경우에 가장 적합한 투여 형태는 치료되는 질환의 정도 및 중증도 및 사용되는 특정 화합물의 특성에 의존할 것이다.
[067] 경구 투여에 적합한 제형은 분말 또는 과립으로서; 수성 또는 비-수성 액체 중 용액 또는 현탁액으로서; 또는 수중유 또는 유중수 에멀젼으로서 소정량의 본 발명의 개시의 화합물을 각각 함유하는 캡슐, 카세제(cachet), 로젠지 또는 정제와 같은 별개의 단위로 제시될 수 있다. 나타낸 바와 같이, 이러한 제형은 활성 화합물로서 본 발명의 개시의 적어도 하나의 화합물 및 담체 또는 부형제(이는 하나 이상의 보조 성분을 구성할 수 있음)를 회합시키는 단계를 포함하는 임의의 적합한 약학 방법에 의해 제조될 수 있다. 담체는 제형의 다른 성분과 상용성이라는 의미에서 허용되어야 하고, 수용자에게 해롭지 않아야 한다. 담체는 고체 또는 액체, 또는 둘 모두일 수 있고, 예를 들어, 약 0.05 중량% 내지 약 95 중량%의 적어도 하나의 활성 화합물을 함유할 수 있는 정제와 같은 단위-용량 제형에서 활성 화합물로서 본원에 설명된 적어도 하나의 화합물과 함께 제형화될 수 있다. 다른 화합물을 포함하여 다른 약리학적 활성 물질이 또한 존재할 수 있다. 본 발명의 개시의 제형은 성분을 혼합하는 것을 필수적 요소로 하여 구성되는(consisting essentially of) 임의의 널리 공지된 약학 기술에 의해 제조될 수 있다.
[068] 고체 조성물의 경우, 통상적인 비독성 고체 담체는, 예를 들어, 약학 등급의 만니톨, 락토스, 전분, 마그네슘 스테아레이트, 소듐 사카린, 활석, 셀룰로스, 글루코스, 수크로스, 마그네슘 카르보네이트 등을 포함한다. 예를 들어, 액체의 약리학적으로 투여 가능한 조성물은, 예를 들어, 본원에 설명된 바와 같은 본 발명의 개시의 적어도 하나의 활성 화합물 및 선택적 약학적 애쥬번트를, 예를 들어, 물, 염수, 수성 덱스트로스, 글리세롤, 에탄올 등과 같은 부형제에 용해시키거나 분산시켜 용액 또는 현탁액을 형성시킴으로써 제조될 수 있다. 일반적으로, 적합한 제형은 본 발명의 개시의 적어도 하나의 활성 화합물을 액체 또는 미분된 고체 담체, 또는 둘 모두와 균일하고 친밀하게 혼합한 후, 필요한 경우 제품을 성형함으로써 제조될 수 있다. 예를 들어, 정제는 하나 이상의 보조 성분과 선택적으로 조합될 수 있는 본 발명의 개시의 적어도 하나의 화합물의 분말 또는 과립을 압축하거나 성형함으로써 제조될 수 있다. 압축 정제는 적합한 기계에서 결합제, 윤활제, 비활성 희석제 및/또는 표면 활성제/분산제(들)와 선택적으로 혼합될 수 있는 분말 또는 과립과 같은 자유-유동 형태로 본 발명의 개시의 적어도 하나의 화합물을 압축함으로써 제조될 수 있다. 성형된 정제는 적합한 기계에서 성형에 의해 제조될 수 있으며, 여기서 본 발명의 개시의 적어도 하나의 화합물의 분말화된 형태는 불활성 액체 희석제로 적셔진다.
[069] 협측(설하) 투여에 적합한 제형은 향미 베이스, 일반적으로 수크로스 및 아카시아 또는 트라가칸트(tragacanth)에 본 발명의 개시의 적어도 하나의 화합물을 포함하는 로젠지, 및 젤라틴 및 글리세린 또는 수크로스 및 아카시아와 같은 불활성 베이스에 적어도 하나의 화합물을 포함하는 향정(pastille)을 포함한다.
[070] 비경구 투여에 적합한 본 발명의 개시의 제형은 의도된 수용자의 혈액과 거의 등장성인 화학식 (I)의 적어도 하나의 화합물(예를 들어, 화학식 (IA), 화학식 (IB)), 또는 이의 토토머, 입체이성질체 또는 입체이성질체의 혼합물, 또는 약학적으로 허용되는 염, 또는 수화물, 또는 중수소화된 유도체의 멸균 수성 제조물을 포함한다. 이들 제조물은 정맥 내로 투여되지만, 투여는 또한 피하, 근육내, 또는 피내 주사에 의해 수행될 수 있다. 이러한 제조물은 편리하게는 본원에 설명된 적어도 하나의 화합물과 물을 혼합하고, 생성된 용액을 멸균 및 혈액과 등장성이 되도록 하여 제조될 수 있다. 본 발명의 개시에 따른 주사 가능한 조성물은 약 0.1 내지 약 5% w/w의 활성 화합물을 함유할 수 있다.
[071] 직장 투여에 적합한 제형은 단위-용량 좌제로 제시된다. 이들은 본원에 설명된 바와 같은 적어도 하나의 화합물과 하나 이상의 통상적인 고체 담체, 예를 들어, 코코아 버터를 혼합한 후, 생성된 혼합물을 성형함으로써 제조될 수 있다.
[072] 피부에 국소 적용하기에 적합한 제형은 연고, 크림, 로션, 페이스트, 겔, 스프레이, 에어로졸, 또는 오일의 형태를 취할 수 있다. 사용될 수 있는 담체 및 부형제는 바셀린, 라놀린, 폴리에틸렌 글리콜, 알코올, 및 이들 중 둘 이상의 조합을 포함한다. 활성 화합물(즉, 화학식 (I)의 적어도 하나의 화합물(예를 들어, 화학식 (IA), 화학식 (IB)), 또는 이의 토토머, 입체이성질체 또는 입체이성질체의 혼합물, 또는 약학적으로 허용되는 염, 또는 수화물, 또는 중수소화된 유도체)은 일반적으로 조성물의 약 0.1% 내지 약 15% w/w, 예를 들어, 약 0.5 내지 약 2%의 농도로 존재한다.
[073] 투여되는 활성 화합물의 양은 치료되는 대상체, 대상체의 체중, 투여 방식 및 처방 의사의 판단에 따라 달라질 수 있다. 예를 들어, 투여 스케줄은 약 1 μg 내지 약 1000 mg의 인지된 투여량으로 캡슐화된 화합물의 매일 또는 반일(semi-daily) 투여를 포함할 수 있다. 또 다른 구현예에서, 캡슐화 화합물의 용량의 매월 또는 매년과 같이 간헐적 투여가 이용될 수 있다. 캡슐화는 작용 부위에 대한 접근을 용이하게 하고, 활성 성분의 동시 투여를 허용하여 이론적으로 상승작용적 효과를 생성한다. 표준 투여 요법에 따라, 의사는 최적의 투여량을 용이하게 결정할 것이며, 이러한 투여량을 달성하기 위해 투여를 용이하게 변형시킬 수 있을 것이다.
[074] 본원에 개시된 화합물 또는 조성물의 치료적 유효량은 화합물의 치료적 유효성에 의해 측정될 수 있다. 그러나, 투여량은 환자의 요구사항, 치료되는 질환의 중증도, 및 사용되는 화합물에 따라 달라질 수 있다. 일 구현예에서, 개시된 화합물의 치료적 유효량은 최대 혈장 농도를 확립하기에 충분하다. 예를 들어, 동물 시험에 따라 결정된 바와 같은 예비 용량, 및 인간 투여를 위한 투여량의 스케일링은 당 업계에서 허용되는 관행에 따라 수행된다.
[075] 독성 및 치료 효능은, 예를 들어, LD50(집단의 50%에 치명적인 용량) 및 ED50(집단의 50%에서 치료적으로 효과적인 용량)을 결정하기 위해 세포 배양 또는 실험 동물에서 표준 약학적 절차에 의해 결정될 수 있다. 독성 효과와 치료 효과 사이의 용량비는 치료 지수이며, 이는 LD50/ED50 비로 표현될 수 있다. 큰 치료 지수를 나타내는 조성물이 바람직하다.
[076] 세포 배양 검정 또는 동물 연구로부터 획득된 데이터는 사람에서 사용하기 위한 투여량 범위를 공식화하는 데 사용될 수 있다. 하나의 동물 모델에서 달성된 치료적 유효 투여량은 당 분야에 공지된 전환 인자를 사용하여 인간을 포함하는 또 다른 동물에서 사용하기 위해 전환될 수 있다(예를 들어, 문헌[Freireich et al., Cancer Chemother. Reports 50(4):219-244 (1966)] 및 등가 표면적 투여량 인자(Equivalent Surface Area Dosage Factor)에 대한 하기 표 참조).
표 2. 등가 표면적 투여량 인자.
[077] 이러한 화합물의 투여량은 바람직하게는 독성이 거의 없거나 독성이 전혀 없는 ED50을 포함하는 순환 농도 범위 내에 있다. 투여량은 사용된 투여 형태 및 사용된 투여 경로에 따라 상기 범위 내에서 변할 수 있다. 일반적으로, 치료적 유효량은 대상체의 연령, 상태, 및 성별뿐만 아니라 대상체에서 의학적 상태의 중증도에 따라 달라질 수 있다. 투여량은 의사에 의해 결정될 수 있고, 필요에 따라 관찰된 치료 효과에 맞게 조정될 수 있다.
치료 방법
[078] 일부 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물(예를 들어, 화학식 (IA), 화학식 (IB)), 또는 이의 토토머, 입체이성질체 또는 입체이성질체의 혼합물, 또는 약학적으로 허용되는 염, 또는 수화물, 또는 중수소화된 유도체는 BTK에 의해 조절되는 질환의 치료를 필요로 하는 대상체에서 BTK에 의해 조절되는 질환을 치료하기 위해 투여된다. 일부 구현예에서, BTK에 의해 조절되는 질환은 암, 면역학적 질병, 자가면역 질병, 및 염증성 질병으로부터 선택된다.
[079] 일부 구현예에서, 질병은 염증성 질병, 예를 들어, 관절염, 신장 질병, 또는 암, 예를 들어, 백혈병 및 림프종, 예를 들어, 만성 림프구성 백혈병(CLL), 다발골수종, 및 소림프구성 림프종(SLL), 및 B-세포 비-호지킨 림프종이다.
[080] 일부 구현예에서, 질병은 자가면역 질병이다. 일부 구현예에서, 질병은 류마티스 관절염이다. 일부 구현예에서, 자가면역 질병은 루푸스이다.
[081] 일 구현예에서, 필요로 하는 대상체는 이종면역 질환 또는 질병, 예를 들어, 이식편대숙주병, 이식, 수혈, 아나필락시스, 알레르기, 타입 I 과민성, 알레르기 결막염, 알레르기 비염, 또는 아토피 피부염으로 고통받고 있다.
[082] 일부 구현예에서, 필요로 하는 대상체는 염증성 질병, 예를 들어, 천식, 충수염, 눈꺼풀염, 세기관지염, 기관지염, 윤활낭염, 자궁경부염, 담관염, 담낭염, 결장염, 결막염으로 고통받고 있다.
[083] 일부 구현예에서, 필요로 하는 대상체는 암으로 고통받고 있다. 일 구현예에서, 암은 B-세포 증식 장애, 예를 들어, 미만성 거대 B 세포 림프종, 소포 림프종, 림프종, 만성 림프구성 백혈병, B-세포 전림프구성 백혈병, 림프형질세포 림프종, 발덴스트롬 마크로글로불린혈증, 비장 변연부 림프종, 형질 세포 골수종, 형질세포종, 결절외 변연부 B 세포 림프종, 결절 변연부 B 세포 림프종, 외투 세포 림프종, 종격(흉선) 거대 B 세포 림프종, 혈관내 거대 B 세포 림프종, 원발성 삼출 림프종, 버킷 림프종/백혈병, 또는 림프종모양 육아종증이다. 일부 구현예에서, 질환은 B-세포 악성종양, B-세포 림프종, 미만성 거대 B 세포 림프종, 만성 림프구성 백혈병, 비-호지킨 림프종, 외투 세포 림프종, 소포 림프종, 털세포 백혈병, B-세포 비-호지킨 림프종, 변연부 림프종, 발덴스트롬 마크로글로불린혈증, 다발골수종, 골암, 골 전이, 관절염, 다발경화증, 골다공증, 과민성 대장 증후군, 염증성 장 질병, 크론병, 루푸스, 쇼그렌 증후군, 및 신장 이식과 관련된 장애로부터 선택된다. 일부 구현예에서, 질환은 외투 세포 림프종이다. 일부 구현예에서, 질환은 만성 림프구성 백혈병 및 소림프구성 림프종이다. 일부 구현예에서, 질환은 발덴스트롬 마크로글로불린혈증이다. 일부 구현예에서, 질환은 변연부 림프종이다.
[084] 일부 구현예에서, 필요로 하는 대상체는 이종면역 질환 또는 질병, 예를 들어, 이식편대숙주병(GVHD)으로 고통받고 있다. 일부 구현예에서, GVHD는 급성 GVHD이다. 일부 구현예에서, GVHD는 만성 GVHD이다.
[085] 일부 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물(예를 들어, 화학식 (IA), 화학식 (IB)), 또는 이의 토토머, 입체이성질체, 약학적으로 허용되는 염, 또는 수화물, 또는 이의 중수소화된 유도체는 약학적 조성물로서 투여된다.
[086] 일부 구현예에서, 본 발명은 유효량의 화학식 (I)의 화합물(예를 들어, 화학식 (IA), 화학식 (IB)), 이의 약학적으로 허용되는 염 또는 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 포함하는 약학적 조성물을 세포와 접촉시키는 것을 포함하는, 세포에서 BTK를 분해하기 위한 방법을 제공한다. 일 구현예에서, 접촉은 시험관 내에서 이루어진다. 일 구현예에서, 접촉은 생체 내에서 이루어진다.
[087] 본원에서 사용되는 용어 "접촉"은 시험관 내 시스템 또는 생체 내 시스템에서 지시된 모이어티를 함께 가져오는 것을 지칭한다. 예를 들어, BTK를 본원에 제공된 화합물과 "접촉"시키는 것은 BTK에 의해 조절되는 질환을 갖는 인간과 같은 개체 또는 환자로의 본원에 제공된 화합물의 투여뿐만 아니라, 예를 들어, 본원에 제공된 화합물을 BTK를 함유하는 세포 또는 정제된 제조물을 함유하는 샘플에 도입하는 것을 포함한다.
[088] 환자에 대한 투여 농도 및 경로는 치료할 질환에 따라 달라질 것이다.
[089] 일 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물(예를 들어, 화학식 (IA), 화학식 (IB)), 또는 이의 토토머, 입체이성질체, 약학적으로 허용되는 염, 또는 수화물, 또는 이의 중수소화된 유도체는 다른 치료제와 함께 투여된다. 일 구현예에서, 이들 치료제는 화학요법제, 스테로이드, 면역요법제, 표적화된 요법, 항체 약물 컨쥬게이트, B 세포 수용체 경로 억제제, 항체, B 세포 수용체 신호전달 억제제, PI3K 억제제, IAP 억제제, mTOR 억제제, 방사선 면역치료제, DNA 손상제, 프로테오솜 억제제, 히스톤 데아세틸라제 억제제, 단백질 키나제 억제제, 헷지호그(hedgehog) 억제제, Hsp90 억제제, 텔로메라제 억제제, Jak1/2 억제제, 프로테아제 억제제, BCL2 억제제, PKC 억제제 및 PARP 억제제를 포함한다. 일부 구현예에서, 이들 치료제는 클로람부실(chlorambucil), 이포스파미드(ifosphamide), 독소루비신(doxorubicin), 메살라진(mesalazine), 탈리도미드(thalidomide), 레날리도미드(lenalidomide), 템시롤리무스(temsirolimus), 에베롤리무스(everolimus), 플루다라빈(fludarabine), 포스타마티닙(fostamatinib), 파클리탁셀(paclitaxel), 도세탁셀(docetaxel), 오파투무맙(ofatumumab), 리툭시맙(rituximab), 덱사메타손(dexamethasone), 프레드니손(prednisone), CAL-101, 이브리투모맙(ibritumomab), 토시투모맙(tositumomab), 보르테조밉(bortezomib), 펜토스타틴(pentostatin), 엔도스타틴(endostatin), 벤다무스틴(bendamustine), 사이클로포스파미드(cyclophosphamide), 빈크리스틴(vincristine), 베네토클락스(Venetoclax) 및 레날리도미드(lenalidomide)이다.
[090] 당업자는 적합하고, 공지되어 있고, 일반적으로 허용되는 세포 및/또는 동물 모델을 사용하는 생체 내 및 시험관 내 시험 둘 모두가 제공된 장애를 치료하거나 예방하는 시험 화합물의 능력을 예측한다는 것을 인식할 것이다.
[091] 당업자는 건강한 환자 및/또는 제공된 장애로 고통받는 환자에서 최초 인간 대상(first-in-human) 용량 범위 및 효능 시험을 포함하는 인간 임상 시험이 임상 및 의료 분야에서 널리 공지된 방법에 따라 완료될 수 있음을 추가로 인식할 것이다.
실시예
[092] 하기 제공된 실시예 및 제조법은 본원에 개시된 바와 같은 화합물 및 이러한 화합물을 제조하는 방법을 추가로 설명하고 예시한다. 본 발명의 개시의 범위는 하기 실시예 및 제조법의 범위에 의해 어떤 식으로든 제한되지 않음이 이해되어야 한다.
[093] 본원에 설명된 화학적 존재물은 본원의 하나 이상의 예시적 반응식 및/또는 당 분야에 널리 공지된 기술에 따라 합성될 수 있다. 반대로 명시되지 않는 한, 본원에 설명된 반응은 일반적으로 약 -10℃ 내지 약 200℃ 범위의 온도 내에서 대기압에서 일어난다. 또한, 달리 명시되지 않는 한, 반응 시간 및 조건은 대략적인 것으로 의도되며, 예를 들어, 약 1 내지 약 24시간일 수 있는 기간에 걸쳐, 예를 들어, 약 -10℃ 내지 약 200℃의 온도 범위 내에서 대략 대기압에서 일어나며; 일부 구현예에서 밤새 실행되도록 남겨진 반응은 평균 약 16시간의 기간일 수 있다.
[094] 본원에 설명된 화학적 존재물 및 중간체의 분리 및 정제는 원하는 경우, 예를 들어, 여과, 추출, 결정화, 컬럼 크로마토그래피, 박층 크로마토그래피 또는 후층 크로마토그래피와 같은 임의의 적합한 분리 또는 정제 절차, 또는 이들 절차의 조합에 의해 이루어질 수 있다. 예를 들어, 문헌[Carey et al. Advanced Organic Chemistry, 3rd Ed., 1990 New York: Plenum Press; Mundy et al., Name Reaction and Reagents in Organic Synthesis, 2nd Ed., 2005 Hoboken, NJ: J. Wiley & Sons]을 참조한다. 적합한 분리 및 단리 절차의 특정 예시는 하기 실시예를 참조로 하여 제공된다. 그러나, 다른 동등한 분리 또는 단리 절차가 또한 사용될 수 있다.
[095] 모든 방법에서, 화학의 일반 원리에 따라 필요한 경우 민감성 또는 반응성 기에 대한 보호기가 사용될 수 있음이 널리 이해된다. 보호기는 유기 합성의 표준 방법에 따라 조작된다(T.W. Greene and P.G.M. Wuts (1999) Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed., John Wiley & Sons). 이들 기는 당업자에게 용이하게 명백한 방법을 사용하여 화합물 합성의 편리한 단계에서 제거될 수 있다.
[096] 원하는 경우, 비제한적인 예시적 화합물의 (R)- 및 (S)-이성질체는 존재하는 경우 당업자에게 공지된 방법에 의해, 예를 들어, 분리될 수 있는 부분입체 이성질체 염 또는 복합체의, 예를 들어, 결정화에 의한 형성에 의해; 분리될 수 있는 부분입체 이성질체 유도체의, 예를 들어, 결정화, 기체-액체 또는 액체 크로마토그래피에 의한 형성을 통해; 하나의 거울상 이성질체와 거울상 이성질체 특이적 시약의 선택적 반응, 예를 들어, 효소적 산화 또는 환원 후, 변형된 및 변형되지 않은 거울상 이성질체의 분리에 의해; 또는, 예를 들어, 결합된 키랄 리간드를 갖는 실리카와 같은 키랄 지지체 상에서 또는 키랄 용매의 존재하에서 키랄 환경에서 기체-액체 또는 액체 크로마토그래피에 의해 분해될 수 있다. 대안적으로, 특정한 거울상 이성질체는 광학 활성 시약, 기질, 촉매 또는 용매를 사용한 비대칭 합성에 의해 또는 비대칭 변환에 의해 하나의 거울상 이성질체를 다른 거울상 이성질체로 전환시킴으로써 합성될 수 있다.
[097] 본원에 설명된 화합물은 선택적으로 약학적으로 허용되는 산과 접촉되어 상응하는 산 부가염을 형성할 수 있다. 또한, 본원에 설명된 화합물은 선택적으로 약학적으로 허용되는 염기와 접촉하여 상응하는 염기 부가염을 형성할 수 있다.
[098] 일부 구현예에서, 일반적으로 개시된 화합물은 일반적으로 널리 공지된 합성 방법의 적절한 조합에 의해 합성될 수 있다. 이러한 화학적 존재물을 합성하는 데 유용한 기술은 본 발명의 개시에 기초하여 관련 기술 분야의 당업자에게 용이하게 명백하고 접근 가능하다. 다수의 선택적으로 치환된 시작 화합물 및 다른 반응물은, 예를 들어, Millipore Sigma로부터 상업적으로 이용 가능하거나, 통상적으로 사용되는 합성 방법을 사용하여 당업자에 의해 용이하게 제조될 수 있다.
[099] 하기 논의는 개시된 화합물을 제조하는 데 사용하기 위한 이용 가능한 특정한 다양한 방법을 예시하기 위해 제공되며, 본원에 제공된 화합물을 제조하는 데 사용될 수 있는 반응 또는 반응 순서의 범위를 제한하려는 의도는 아니다. 당업자는 달리 명시되지 않는 한 표준 원자 원자가가 속 또는 명명된 화합물로 본원에 개시된 모든 화합물에 적용됨을 이해할 것이다.
하기 약어는 하기 기재되는 정의를 갖는다:
1. ACN: 아세토니트릴
2. DCM: 디클로로메탄
3. DIEA: 디이소프로필에틸아민
4. DMF: 디메틸포름아미드
5. EA: 에틸 아세테이트
6. EDCI: 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드
7. FA: 포름산
8. HATU: 1-[비스(디메틸아미노)메틸렌]-1H-1,2,3-트리아졸로[4,5-b]피리디늄 3-옥시드 헥사플루오로포스페이트
9. HPLC: 고압 액체 크로마토그래피
10. LC/MS: 액체 크로마토그래피/질량분광법
11. NMM: N-메틸모르폴린
12. NMR: 핵 자기 공명
13. PE: 석유 에테르
14. TEA: 트리에틸아민
15. TFA: 트리플루오로아세트산
16. THF: 테트라하이드로푸란
17. TLC: 박층 크로마토그래피
18. TsCl: p-톨루엔설포닐 클로라이드
일반 합성 반응식
[0100] 청구된 화합물은 하기 반응식에 따라 제조될 수 있다. 하기 반응식은 이들 화합물을 제조하는 데 사용되는 일반 방법을 나타낸다. 그러나, 이들 화합물의 합성은 이들 대표적 방법에 제한되지 않는데, 이는 이들이 또한 합성 화학 분야의 당업자에 의해 다양한 다른 방법을 통해 제조될 수 있기 때문이다.
반응식 1: 화합물 1, 3, 4, 5 및 6의 제조를 위한 방법
반응식 2: 화합물 2의 제조를 위한 방법
반응식 3: 화합물 7, 8, 11 및 19의 제조를 위한 방법
반응식 4: 화합물 14, 16, 17 및 20의 제조를 위한 방법
반응식 5: 화합물 9 및 10의 제조를 위한 방법
반응식 6: 화합물 12 및 18의 제조를 위한 방법
[0101] 하기 화합물을 반응식 3에 따라 제조하였다: 화합물 22, 23, 28 및 31.
[0102] 하기 화합물을 반응식 4에 따라 제조하였다: 화합물 13, 21, 24 및 25.
[0103] 하기 화합물을 반응식 6에 따라 제조하였다: 화합물 15, 26, 27, 29, 30 및 34.
반응식 7: 화합물 32의 제조를 위한 방법
화합물 33은 화합물 32의 합성에서 설명된 것과 유사한 방법을 사용하여 제조될 수 있다.
반응식 8: 화합물 35, 36 및 38의 제조를 위한 방법
화합물 39, 40 및 41은 반응식 8에 설명된 바와 같은 방법을 사용하여 제조될 수 있다.
반응식 9: 화합물 37 및 48의 제조를 위한 방법
화합물 42 및 43은 반응식 9에 설명된 것과 유사한 방법을 사용하여 합성될 수 있다.
반응식 10: 화합물 44의 제조를 위한 방법
화합물 45, 46 및 47은 화합물 44의 제조에 설명된 것과 유사한 방법을 사용하여 합성될 수 있다.
반응식 11: 화합물 49, 50, 51, 59 및 70의 제조를 위한 방법
화합물 65, 66, 67, 68, 69, 81, 82 및 85는 반응식 11에 설명된 것과 유사한 방법을 사용하여 합성될 수 있다.
반응식 12: 화합물 52, 53, 54, 56, 57, 58, 60 및 61의 제조를 위한 방법
반응식 13: 화합물 71, 72, 78 및 80의 제조를 위한 방법
화합물 79는 반응식 13에 설명된 것과 유사한 방법으로 합성될 수 있다.
반응식 14: 화합물 73 및 74의 제조를 위한 방법
화합물 75, 76 및 77은 반응식 14에 설명된 것과 유사한 방법을 사용하여 제조될 수 있다.
반응식 15: 화합물 83 및 84의 제조를 위한 방법
반응식 16: 화합물 86 및 87의 제조를 위한 방법
반응식 17: 화합물 88-91 및 100-101의 제조를 위한 방법
화합물 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 102, 103 및 104는 반응식 11에 설명된 것과 유사한 방법을 사용하여 제조될 수 있다.
반응식 18: 화합물 105-108의 제조를 위한 방법
화합물 109는 반응식 18에 설명된 것과 유사한 방법을 사용하여 합성될 수 있다.
중간체의 제조
(R)-(2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-3-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(중간체 A)의 제조
단계 1: 메틸 2-클로로-4-페녹시벤조에이트의 제조
[0104] N,N-디메틸포름아미드(200 mL) 중 메틸 2-클로로-4-플루오로벤조에이트(20 g, 106.1 mmol), 페놀(13 g, 137.9mmol) 및 탄산세슘(51.83 g, 156.1 mmol)의 혼합물을 90℃에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc(200 mL × 3)로 추출하였다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에서 농축시켰다. 잔여물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헥산:에틸 아세테이트=50:1→5:1)로 정제하여 메틸 2-클로로-4-페녹시벤조에이트(18g, 64.5%)를 제공하였다.
단계 2: (2-클로로-4-페녹시페닐)(4-클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논의 제조
[0105] 5-브로모-4-클로로-7h-피롤 [2,3-d] 피리미딘(1 g, 4.3mmol)을 테트라하이드로푸란(25 mL)에 용해시키고, 여기에 Ar 하에서 -78℃에서 n-BuLi(헥산 중 2.5 M, 2 eq)를 천천히 적가하였다. 혼합물을 -78℃에서 1시간 동안 교반한 후, 메틸 2-클로로-4-페녹시벤조에이트의 용액(1.1 eq)을 적가하였다. 혼합물을 -78℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응을 1N HCl로 켄칭시키고, EtOAc로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에서 농축시켰다. 잔여물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(헥산:에틸 아세테이트=9:1 내지 1:1)로 정제하여 (2-클로로-4-페녹시페닐)(4-클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(650 mg)을 제공하였다. LCMS: (ES+): m/z 383.02 [M]+.
단계 3: tert-부틸 (R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트의 제조
[0106] 20 mL 마이크로파 튜브에 (2-클로로-4-페녹시페닐)(4-클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(1 g, 2.6 mmol), DIEA(3 eq) 및 tert-부틸 (R)-3-아미노피페리딘-1-카르복실레이트(1.2 eq) 및 이소프로판올(12 mL)을 충전하였다. 혼합물을 마이크로파 조사하에서 160℃에서 1.5시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각 후, 반응물을 EtOAc(40 mLХ4)로 추출하고, 유기층을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에서 농축시켰다. 잔여물을 석유 에테르 중 25% EtOAc로 재결정화하여 tert-부틸 (R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트(1.1 g)를 제공하였다. LCMS: (ES+): m/z 547.2 [M]+.
단계 4: (R)-(2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-3-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논의 제조
[0107] 250 mL 디옥산 중 tert-부틸 (R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트(11 g, 20.07 mmol)의 용액에 디옥산 중 4N HCl(50 mL)을 첨가하였다. 혼합물 반응물을 실온에서 2.0시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공하에 농축 건조시켰다. 잔여물을 DCM으로 분쇄시켜 미정제 생성물(9 g)을 제공하였다. 고체를 역상 크로마토그래피로 추가로 정제하여 7.8 g TFA 염을 제공하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.91 (br, 1H), 8.91-8.81 (m, 3H), 8.31 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.58 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.49 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 7.27 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.20 - 7.05 (m, 3H), 7.05 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 4.44 (s, 1H), 3.56 (br, 1H), 3.25 (br, 1H), 3.02 - 2.97 (m, 2H), 2.15 (br, 1H), 1.98 (br, 1H), 1.82 - 1.77 (m, 2H). LCMS: (ES+): m/z 448.2 [M]+.
(2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-4-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논 하이드로클로라이드(중간체 B)의 제조
단계 1: tert-부틸4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트의 제조
[0108] 20 mL 마이크로파 튜브에 (2-클로로-4-페녹시페닐)(4-클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(4.4 g, 11.45 mmol), DIEA(3 eq), 4-아미노페리딘-1-tert-부틸 카르복실레이트(1.2 eq) 및 이소프로판올(12 ml)을 충전하였다. 혼합물을 마이크로파 조사하에서 160℃에서 1.5시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각 후, 반응물을 EtOAc(40 mLХ4)로 추출하고, 유기층을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에서 농축시켰다. 잔여물을 석유 에테르 중 25% EtOAc로 재결정화시켜 tert-부틸4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트(5 g)를 제공하였다. LCMS: (ES+): m/z 547.2 [M]+.
단계 2: (2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-4-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논 하이드로클로라이드의 제조
[0109] 250 mL 디옥산 중 tert-부틸-4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르복실레이트(10 g, 18.3 mmol)의 용액에 디옥산 중 4N HCl(50 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2.0시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 농축 건조시켰다. 잔여물을 DCM으로 분쇄시켜 (2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-4-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논 하이드로클로라이드(8 g)를 제공하였다.
1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.47 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.57 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.47 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 7.27 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.18 - 7.10 (m, 3H), 7.04 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 4.44 (s, 1H), 3.57 (br, 2H), 3.34 (br, 2H), 2.47 (br, 2H), 2.06 (br, 2H). LCMS: (ES+): m/z 448.2 [M]+.
2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-1,3-디온(중간체 C)의 제조
[0110] 문헌에 설명된 유사한 방법을 사용하여 상기 반응식에 따라 하이드로클로라이드 염으로서 중간체 2-1을 제조하였다. LC/MS 343.1 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.76 (d, J = 8.36 Hz, 1 H), 7.47 (s, 1 H), 7.35 (dd, J = 8.36, 1.54 Hz, 1 H), 5.09 (br dd, J = 12.8, 5.40 Hz, 1 H), 3.67 - 3.74 (m, 4 H), 3.37 - 3.42 (m, 4 H), 2.63 - 2.94 (m, 3 H), 2.07 - 2.17 (m, 1 H).
(S)-3-(1-옥소-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온 벤젠설폰산(중간체 D)의 합성
[0111] 아세토니트릴(90 mL) 중 (S)-tert-부틸 4-(2-(1-아미노-5-tert-부톡시-1,5-디옥소펜탄-2-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-카르복실레이트(5.8 g, 12 mol)의 용액에 벤젠설폰산(3.64 g, 23 mol)을 첨가하였다. 혼합물을 12시간 동안 85℃에서 교반하였다. LC/MS는 반응이 완료된 것을 나타내었다. 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 에틸 아세테이트로 분쇄시켜 회백색 고체로서 (S)-3-(1-옥소-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온 벤젠설포네이트(5.2 g, 93%)를 제공하였다. LC/MS 329.1 [M+1]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1.95-1.99 (m, 1H), 2.36-2.41 (m, 1H), 2.58-2.62 (d, 1H), 2.88-2.91 (m, 1H), 3.26 (s, 4H), 3.49-3.52 (m, 4H), 4.21-4.38 (dd, 2H), 5.05-5.10 (dd, 1H), 7.12-7.16 (m, 2H), 7.30-7.358 (m, 3H), 7.58-7.62 (m, 3H), 8.72 (s, 2H).
N-(4-(4-아미노-1-(4-(4-(디메톡시메틸)피페리딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(중간체 E)의 합성
단계 1: N-(4-브로모벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0112] N,N-디메틸포름아미드(300 mL) 중 5-플루오로-2-메톡시-벤조산(30 g, 176 mmol, 1.0 eq),　O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트(80.5 g, 212 mmol, 1.2 eq) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(45.6 g, 353 mmol, 2 eq)의 용액을 30분 동안 25℃에서 교반하였다. 이후, (4-브로모페닐)메탄아민(32.8 g, 176 mmol, 1.0 eq)을 용액에 첨가하고, 혼합물을 12시간 동안 25℃에서 교반하였다. 용액을 물(500 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(500 mL x 3)로 추출하였다. 조합된 유기상을 염수(500 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 농축시켰다. 잔여물을 용리액으로서 석유 에테르 중 20% - 30% 에틸 아세테이트로 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 고체로서 원하는 화합물(56 g, 94% 수율)을 제공하였다.
1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.26 (br s, 1H), 7.94 (q, J = 2.0 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.22 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.16 - 7.12 (m, 1H), 6.94 - 6.91 (m, 1H), 4.61 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 3.91 (s, 3H).
단계 2: 5-플루오로-2-메톡시-N-[[4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페닐]메틸]벤즈아미드의 제조
[0113] 디옥산(500 mL) 중 N-[(4-브로모페닐)메틸]-5-플루오로-2-메톡시-벤즈아미드(46 g, 136 mmol, 1.0 eq) 　및 4,4,5,5-테트라메틸-2-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1,3,2-디옥사보롤란(51.8 g, 204 mmol, 1.5 eq)의 용액에 포타슘 아세테이트(26.7 g, 272 mmol, 2.0 eq) 및 1,1-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II)(9.95 g, 13.6 mmol, 0.1 eq)을 첨가하였다. 현탁액을 진공하에서 탈기시키고, 질소로 3회 퍼징시켰다. 혼합물을 12시간 동안 90℃에서 질소하에서 교반하였다. 용액을 물(2 L)에 붓고, 에틸 아세테이트(1 L x 3)로 추출하였다. 조합된 유기상을 염수(2 L)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 농축시켰다. 조합된 미정제 생성물을 용리액으로서 석유 에테르 중 20% - 30% 에틸 아세테이트로 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 미정제 생성물을 석유 에테르(200 mL)로 분쇄시키고, 여과시키고, 필터 케이크를 진공하에서 건조시켜 백색 고체로서 원하는 화합물(50 g, 79% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 386.2 [M+H]+.
단계 3: N-(4-(4-아미노-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
디옥산(200 mL)　및 물(40 mL) 중 5-플루오로-2-메톡시-N-[[4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페닐]메틸]벤즈아미드(10.0 g, 26.0 mmol, 1.0 eq), 3-아이오도-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(6.78 g, 26.0 mmol, 1.0 eq), 1,1-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II)(3.80 g, 5.19 mmol, 0.2 eq), 인산 칼륨(16.5 g, 77.9 mmol, 3.0 eq)의 혼합물을 탈기시키고, 질소로 3회 퍼징한 후, 혼합물을 질소 분위기 하에서 60시간 동안 110℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(1 L)와 물(1　L) 사이에 분배시켰다. 유기상을 분리시키고, 염수(1 L)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켰다. 잔여물을 아세토니트릴(50 mL) 및 이후 에틸 아세테이트(50 mL)로 분쇄시키고, 고체를 수집하고, 진공하에서 건조시켜 밝은 황색 고체로서 원하는 화합물(6.0 g, 59% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 393.1 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 13.59 (s, 1H), 8.86 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.64 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.57 - 7.47 (m, 3H), 7.37 - 7.31 (m, 1H), 7.19 (dd, J = 4.4, 9.2 Hz, 1H), 4.59 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 3.90 (s, 3H).
단계 4: N-[[4-[4-아미노-1-[4-[4-(디메톡시메틸)-1-피페리딜]-3-플루오로-페닐]피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일]페닐]메틸]-5-플루오로-2-메톡시-벤즈아미드의 제조
[0114] 디메틸 설폭사이드(150 mL) 중 N-[[4-(4-아미노-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)페닐]메틸]-5-플루오로-2-메톡시-벤즈아미드(12.0 g, 30.6 mmol, 1.0 eq) 및 4-(디메톡시메틸)-1-(2-플루오로-4-아이오도-페닐)피페리딘(11.6 g, 30.6 mmol, 1.0 eq)의 용액에 요오드화 구리(3.24 g, 17.0 mmol, 0.55 eq), 2-(디메틸아미노)아세트산(3.50 g, 33.98 mmol, 1.1 eq) 및 탄산나트륨(7.20 g, 68.0 mmol, 2.2 eq)을 첨가하였다. 현탁액을 진공하에서 탈기시키고, 질소로 3회 퍼징하였다. 혼합물을 12시간 동안 110℃에서 질소하에서 교반하였다. 용액을 에틸 아세테이트(800 mL)와 물(2.0 L) 사이에 분배하였다. 분리된 수성층을 에틸 아세테이트(700 mL x 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(500 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 미정제 생성물(15 g)을 제공하였다. 미정제 생성물을 환류하면서 에틸 아세테이트(420 mL)에 용해시켰다. 이후, 용액을 주위 온도로 냉각시켰고, 이와 함께 약간의 침전물이 형성되었고, 혼합물을 48시간 동안 냉장고(약 5℃)에서 유지하였다. 용액을 여과시키고, 필터 케이크를 저온 에틸 아세테이트(20 mL)로 세척하여 순수한 생성물(5.28 g)을 제공하였다. 모액을 농축시키고, 잔여물을 에틸 아세테이트(100 mL)로부터 재결정화시켜 회색 고체로서 또 다른 순수한 생성물의 수확물(1.7 g)(총 6.98 g, 36% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 644.2 [M+H]+. 1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.47 (s, 1H), 8.38 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 7.99 (dd, J = 3.2, 9.2 Hz, 1H), 7.97 - 7.93 (m, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.75 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.56 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.22 - 7.14 (m, 1H), 7.08 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 6.97 (dd, J = 4.4, 8.8 Hz, 1H), 5.60 (br s, 2H), 4.78 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 4.12 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.53 (d, J = 12.0 Hz, 2H), 3.39 (s, 6H), 2.69 (t, J = 11.6 Hz, 2H), 1.88 (d, J = 12.0 Hz, 2H), 1.82 - 1.73 (m, 1H), 1.64 - 1.48 (m, 2H).
(S)-3-(6-플루오로-1-옥소-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온 벤젠설폰산(중간체 F)의 제조
단계 1: 메틸 2-브로모-4,5-디플루오로벤조에이트의 제조
[0115] 티오닐 클로라이드(13 g, 0.11 mol)를 10℃에서 MeOH(60 mL) 중 2-브로모-4,5-디플루오로벤조산(20 g, 0.084 mol)의 혼합물에 천천히 첨가한 후, 3시간 동안 80℃에서 교반하였다. TLC는 반응이 완료된 것을 나타내었다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 농축시킨 후, 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배하였다. 유기층을 포화 Na2CO3 및 염수로 2회 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 미정제의 원하는 생성물(21 g, 수율: 100%)을 제공하였고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
단계 2: tert-부틸 4-(5-브로모-2-플루오로-4-(메톡시카르보닐)페닐) 피페라진-1-카르복실레이트의 제조
[0116] N,N-디메틸아세트아미드(60 mL) 중 메틸 2-브로모-4,5-디플루오로벤조에이트(21 g, 0.084 mol), tert-부틸 피페라진-1-카르복실레이트(23.4 g, 0.125 mol) 및 K2CO3(17.3 g, 0.125 mol)의 혼합물을 16시간 동안 80℃에서 교반하였다. TLC는 반응이 완료된 것을 나타내었다. 혼합물을 물(200 mL)에 첨가하고, 10분 동안 교반하였다. EtOAc(200 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배하였다. 유기층을 물, 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 원하는 표제 생성물(31.6 g, 수율: 90%)을 제공하였다.
단계 3: tert-부틸 4-(5-시아노-2-플루오로-4-(메톡시카르보닐)페닐) 피페라진-1-카르복실레이트의 제조
[0117] DMF(120 mL) 중 tert-부틸 4-(5-브로모-2-플루오로-4-(메톡시카르보닐)페닐)피페라진-1-카르복실레이트(30.6 g, 0.073 mol) 및 CuCN(9.8 g, 0.11 mol)의 혼합물을 16시간 동안 100℃에서 교반하였다. TLC는 반응이 완료된 것을 나타내었다. 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 에틸 아세테이트(200 mL) 및 수산화 암모늄(200 mL)을 첨가하고, 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 여과시켰다. 유기층을 물로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 미정제 생성물(25.4 g)을 제공하였다. 미정제 물질을 환류 상태에서 석유 에테르(100 mL)에 취했다. 혼합물을 여과시키고, 오븐 50℃에서 건조시켜 표제 화합물(21.5 g, 수율: 81%)을 제공하였다.
단계 4: tert-부틸 4-(2-플루오로-5-포르밀-4-(메톡시카르보닐)페닐) 피페라진-1-카르복실레이트의 제조
[0118] 실온에서 피리딘(39.1 g, 495 mmol), 물(20 mL), 아세트산(26.4 g, 440 mmol)의 용액에 tert-부틸 4-(5-시아노-2-플루오로-4-(메톡시카르보닐)페닐)피페라진-1-카르복실레이트(20 g, 55 mmol) 및 라니-니켈(물 중 85%, 10 g)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃로 가열하였다. 차아인산나트륨(50 mL 물 중 29.2 g)을 혼합물에 적가하였다. 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. TLC는 반응이 완료된 것을 나타내었다. 혼합물을 10시간 동안 추가로 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 에틸 아세테이트 및 물을 첨가하였다. 혼합물을 여과시켰다. 유기층을 물, 1N HCl 및 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 감압하에서 농축시켜 미정제 생성물(20.8 g, 미정제)을 제공하였다. 생성된 잔여물을 실리카-겔 패드로 정제하여 원하는 생성물(8.7 g, 수율: 43%)을 제공하였다.
단계 5: tert-부틸 (S)-4-(2-(1-아미노-5-(tert-부톡시)-1,5-디옥소펜탄-2-일)-6-플루오로-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-카르복실레이트의 제조
[0119] 실온에서 메탄올(50 mL) 중 tert-부틸 4-(2-플루오로-5-포르밀-4-(메톡시카르보닐)페닐)피페라진-1-카르복실레이트(8.15 g, 22 mmol)의 용액에 tert-부틸 (S)-4,5-디아미노-5-옥소펜타노에이트(5.4 g, 27 mmol)를 첨가하였다. 아세트산(1.98 g, 33 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 소듐 시아노보로하이드라이드(2.76 g, 44 mmol)를 천천히 첨가하였다. 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. TLC는 반응이 완료된 것을 나타내었다. 혼합물을 농축시키고, 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배하였다. 유기층을 포화 시트르산, 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 감압하에서 농축시켜 미정제물을 제공하였다. 미정제물을 실리카-겔 패드로 정제하여 원하는 생성물(8 g, 수율: 69%)을 제공하였다.
단계 6: (S)-3-(6-플루오로-1-옥소-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온 벤젠설폰산의 제조
[0120] 아세토니트릴(67 mL) 중 tert-부틸 (S)-4-(2-(1-아미노-5-(tert-부톡시)-1,5-디옥소펜탄-2-일)-6-플루오로-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-카르복실레이트(6.7 g, 13 mmol)의 용액에 벤젠설폰산(4.3 g, 26 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 16시간 동안 80℃에서 교반하였다. LC/MS는 반응이 완료된 것을 나타내었다. 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 여과시키고, 건조시켜 회백색 고체로서 원하는 생성물(5.6 g, 86%)을 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.99 (s, 1H), 8.73 (br s, 2H), 7.60 (m, 2H), 7.49 (d, 1H), 7.32 (m, 4H), 5.08 (dd, J = 13.2 및 5.2 Hz, 1H), 4.38 (d J = 17.2 Hz, 1H), 4.27 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 3.30 (br s, 8H), 2.91 (m, 1H), 2.67 (m, 1H), 2.50 (m, 1H), 1.98 (m, 1H); LC/MS 347.3 [M+H]+
실시예
실시예 1: 5-((7-(4-(5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로 [2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)피리딘-2-일)피페라진-1-일)헵틸)옥시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 1)의 제조
단계 1: 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-하이드록시이소인돌린-1,3-디온의 제조
[0121] 아세트산(45 mL) 중 3-아미노피페리딘-2,6-디온 HCl 염(4.1 g, 24.7 mmol)의 용액에 소듐 아세테이트(4.1 g, 49.4 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 1시간 동안 25℃에서 교반하였다. 4-하이드록시프탈산(3.0g, 16.5 mmol)을 혼합물에 첨가하고, 11시간 동안 120℃로 가열하였다. 혼합물을 농축시킨 후, 물(20 mL)에 부었다. 현탁액을 여과시켰다. 미정제 생성물을 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄:메탄올=50:1 내지 10:1)로 정제하여 무색 고체로서 2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-5-하이드록시-이소인돌린-1,3-디온(3.9 g, 14.3 mmol, 86% 수율)을 제공하였다.
단계 2: tert-부틸 6-(피페라진-1-일)니코티네이트의 제조
[0122] tert-부탄올(100 mL) 중 tert-부틸 6-클로로니코티네이트(8.52 g, 40 mmol)의 용액에 피페라진(17.2 g, 200 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 6시간 동안 60℃로 가열하였다. 혼합물을 진공하에서 농축시키고, 미정제 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 무색 고체로서 표제 화합물(10 g, 95%)을 제공하였다. LCMS: m/z=264.2 [M]+.
단계 3: tert-부틸 6-(4-(7-하이드록시헵틸)피페라진-1-일)니코티네이트의 제조
[0123] 실온에서 CH3CN(5 mL) 중 tert-부틸 6-(피페라진-1-일)니코티네이트(526 mg, 2 mmol), 7-브로모헵탄-1-올(468 mg, 2.4 mmol)의 용액에 K2CO3를 첨가하고, 반응 혼합물을 4시간 동안 85℃에서 교반하였다. 혼합물을 EtOAc로 희석시키고, 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 여과액을 농축시켜 밝은 황색 고체로서 tert-부틸 6-(4-(7-하이드록시헵틸)피페라진-1-일)니코티네이트(630 mg, 83%)를 제공하였다. LCMS: m/z=378.3 [M]+.
단계 4: tert-부틸 6-(4-(7-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)옥시)헵틸)피페라진-1-일)니코티네이트의 제조
[0124] 질소하에서 25℃에서 건조 THF(3 mL) 중 tert-부틸 6-(4-(7-하이드록시헵틸)피페라진-1-일)니코티네이트(377 mg, 1 mmol)의 용액에 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-하이드록시이소인돌린-1,3-디온(383.6 mg, 1.4 mmol), PPh3(524 mg, 2.0 mmol)를 첨가하였다. DIAD(404 mg, 2.0 mmol)를 실온에서 혼합물에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 2시간 동안 45℃에서 교반하였다. 실온으로 냉각 후, 반응을 H2O(10 mL)로 켄칭시키고, EtOAc(10 mLХ2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(20 mLХ5)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔여물을 프렙-TLC로 정제하여 백색 고체로서 원하는 생성물(80 mg, 12.6%)을 제공하였다. LCMS: m/z=634.3 [M+1]+.
단계 5: 6-(4-(7-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)옥시)헵틸)피페라진-1-일)니코틴산의 제조
[0125] TFA/DCM(6.0 mL, 1:5) 중 tert-부틸 6-(4-(7-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)옥시)헵틸)피페라진-1-일)니코티네이트(80 mg, 0.13 mmol)의 용액을 3시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 회전 증발로 농축시켜 표제 생성물(70 mg)을 획득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LCMS: m/z=578.3 [M+1]+.
단계 6: 5-((7-(4-(5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)피리딘-2-일)피페라진-1-일)헵틸)옥시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온의 제조
[0126] 실온에서 DMF(3 mL) 중 6-(4-(7-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)옥시)헵틸)피페라진-1-일)니코틴산(58 mg, 0.1 mmol), (R)-(2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-3-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(54 mg, 0.12 mmol) 및 DIEA(51.6 mg, 0.4 mmol)의 용액에 HATU(57 mg, 0.15 mmol)를 첨가하였다. LCMS가 반응이 완료된 것을 나타낼 때까지 반응물을 실온에서 교반하였다. 혼합 용액을 얼음물로 켄칭시키고, DCM(10 mL x 3)으로 추출하였다. 유기층을 물 및 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과시키고, 용매를 회전 증발에 의해 제거하였다. 잔여물을 Pre-TLC로 정제하여 백색 고체로서 표제 생성물(21 mg, 20.8%)을 획득하였다. LCMS: m/z=1007.4 [M+H]+.
1HNMR (400 MHz, CDCl3 -d): δ9.05 (s, 1H), 8.36-8.30 (m, 2H), 7.77-7.65 (m, 2H), 7.41-7.31 (m, 5H), 7.23-7.16 (m, 2H), 7.10-7.07 (m, 3H), 6.95-6.93 (m, 1H), 6.50-6.48 (m, 1H), 4.96-4.95 (m, 1H), 4.38 (s, 1H), 4.08 (s, 3H), 3.90 (s, 1H), 3.58-3.44 (m, 6H), 2.91-2.74 (m, 3H), 2.52 (m, 4H), 2.36 (s, 2H), 2.19-2.01 (m, 4H), 1.18-1.75 (m, 5H), 1.51-1.36 (m, 8H).
실시예 2: 5-(4-(5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)피리딘-2-일)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 2)의 제조
단계 1: 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온의 제조
[0127] 아세트산(30 mL) 중 5-플루오로이소벤조푸란-1,3-디온(2 g, 12.05 mmol)의 용액에 소듐 아세테이트(1.98 g, 24.08 mmol) 및 3-아미노피페리딘-2,6-디온 하이드로클로라이드(1.98 g, 12.05 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 18시간 동안 120℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에서 농축시켰다. 잔여물을 물(60 mL)에 붓고, 10분 동안 교반하였다. 고체를 여과에 의해 수집하고, 물(2 x 20 mL)로 세척하고, 진공하에서 건조시켜 백색 고체로서 표제 화합물(2.8 g, 94%)을 제공하였다.
단계 2: tert-부틸 6-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)니코티네이트의 제조
[0128] 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(200 mg, 0.724 mmol), tert-부틸 6-(피페라진-1-일)니코티네이트(158 mg, 0.603 mmol) 및 K2CO3(167 mg, 1.207 mmol)를 20 mL 마이크로파 튜브에서 DMF 중에 현탁시켰다. 혼합물을 1시간 동안 120℃에서 마이크로파로 조사하였다. 혼합물을 EtOAc(30mLХ3)로 추출하고, 염수(20 mLХ2)로 세척하였다. 조합된 유기상을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 Prep-TLC로 정제하여 tert-부틸 6-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)니코티네이트(200 mg)를 제공하였다.
단계 3: 6-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)니코틴산의 제조
[0129] tert-부틸 6-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)니코티네이트(180 mg, 0.346 mol)를 4N HCl/디옥산에 용해시키고, 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 진공하에서 농축 후, 표제 화합물(130 mg)을 황색 고체로서 획득하고, 다음 단계에 그대로 사용하였다.
단계 4: 5-(4-(5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)피리딘-2-일)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온의 제조
[0130] DMF(5 mL) 중 6-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)니코틴산(130 mg 0.281 mmol)의 용액에 (R)-(2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-3-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(163 mg, 0.337 mmol), HATU(128 mg 0.337 mmol) 및 DIEA(145 mg 1.12 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 3시간 동안 실온에서 교반한 후, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 조합된 유기상을 염화나트륨 수용액으로 세척하였다. 진공하에서 농축 후, 잔여물을 프렙-HPLC로 정제하여 황색 고체로서 표제 화합물(16.8 mg)을 제공하였다. LCMS: (ES+): m/z 893.3 [M+1] +.
1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ: 12.71 (s, 1H), 11.06（s, 1H）, 8.87 (s, 1H), 8.17（m, 2H）, 7.82 (d, J=13.6Hz, 1H),7.77-7.10（m, 12H）7.05 (br, 1H), 6,68（br, 1H), 5.08-5.06（m, 1H), 4,25 (br, 1H), 3,79-3.51 (m, 14H), 2.93-2.89 (m, 1H)，2.13-21.85 (m, 5H).
실시예 3: 5-((6-(4-(5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로 [2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)피리딘-2-일)피페라진-1-일)헥실)옥시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 3)의 제조
단계 3에서 7-브로모헵탄-1-올을 6-브로모헥산-1-올로 대체하여 화합물 (1)에 대해 설명된 것과 동일한 절차로 화합물 (3)을 제조하였다.
LCMS: m/z=993.4 [M]+.
1HNMR (400 MHz, CDCl3 -d): δ9.04 (s, 1H), 8.36-8.30 (m, 2H), 7.77-7.65 (m, 2H), 7.41-7.32 (m, 5H), 7.22-7.18 (m, 2H), 7.10-7.07 (m, 3H), 6.95-6.93 (m, 1H), 6.54-6.50 (m, 1H), 4.96-4.95 (m, 1H), 4.37 (s, 1H), 4.10-4.06 (m, 4H), 3.57-3.42 (m, 6H), 2.90-2.78 (m, 3H), 2.49 (s, 4H), 2.35 (s, 2H), 2.18-2.15 (m, 2H), 2.00 (s, 3H), 1.83-1.51 (m, 10H).
실시예 4: 5-(3-(4-(5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로 [2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)피리딘-2-일)피페라진-1-일)프로폭시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 4)의 제조
단계 3에서 7-브로모헵탄-1-올을 3-브로모프로판-1-올로 대체하여 화합물 (1)에 대해 설명된 것과 동일한 절차로 화합물 (4)를 제조하였다.
LCMS: m/z=951.3 [M]+.
1HNMR (400 MHz, CDCl3 -d): δ8.98-8.89 (m, 1H), 8.46-8.32 (m, 2H), 7.81-7.68 (m, 2H), 7.41-7.39 (m, 3H), 7.29-7.20 (m, 3H), 7.09-7.07 (m, 3H), 6.95-6.93 (m, 1H), 6.54-6.47 (m, 1H), 4.96-4.93 (m, 1H), 4.35-4.13 (m, 4H), 3.74-3.73 (m, 1H), 3.57 (s, 3H), 3.35-3.32 (m, 1H), 2.91-2.73 (m, 4H), 2.47 (s, 3H), 2.38-2.17 (m, 5H), 1.89-1.59 (m, 9H).
실시예 5: 5-(2-(4-(5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)피리딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물5)의 제조
단계 1: tert-부틸 6-(4-(2-하이드록시에틸)피페라진-1-일)니코티네이트의 제조
[0131] 20 mL 아세토니트릴 중 tert-부틸 6-(피페라진-1-일) 니코티네이트(800 mg, 3.04 mmol)의 용액에 2-브로모에탄올(452 mg 3.65 mmol) 및 K2CO3(839 mg 6.08 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 12시간 동안 85℃에서 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석시킨 후, 여과시켰다. 여과액을 농축시켜 tert-부틸 6-(4-(2-하이드록시에틸)피페라진-1-일)니코티네이트(760 mg, 78.9%)를 제공하였고, 이를 다음 단계에 그대로 사용하였다. LCMS: 308.2 [M+H]+.
단계 2: tert-부틸 6-(4-(2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)옥시)에틸)피페라진-1-일)니코티네이트의 제조
[0132] THF(10 mL) 중 tert-부틸 6-(4-(2-하이드록시에틸)피페라진-1-일)니코티네이트(760 mg 2.47 mmol)의 용액에 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-하이드록시이소인돌린-1,3-디온(813 mg, 2.97 mmol) 및 PPh3(1.01 g, 2.97 mmol) 및 이후 DIAD(748 mg 3.70 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 밤새 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 에틸 아세테이트에 용해시키고, 염화나트륨 수용액으로 세척하였다. 유기상을 농축 건조시키고, 잔여물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH=20/1)로 정제하여 tert-부틸 6-(4-(2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)옥시)에틸)피페라진-1-일)니코티네이트(130 mg, 87.1%)를 제공하였다. LCMS: 564.3 [M+H]+.
단계 3: 6-(4-(2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)옥시)에틸)피페라진-1-일)니코틴산의 제조
[0133] DCM/TFA(3:1) 중 tert-부틸 6-(4-(2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)옥시)에틸)피페라진-1-일)니코티네이트(130 mg, 0.23 mol)의 용액을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 진공하에서 농축 후, 6-(4-(2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)옥시)에틸)피페라진-1-일)니코틴산(120 mg)을 황색 오일로서 획득하였고, 다음 단계에서 그대로 사용하였다. LCMS: 508.1 [M+H]+.
단계 4: 5-(2-(4-(5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)피리딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온의 제조
[0134] DMF(30 mL) 중 6-(4-(2-((2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)옥시)에틸)피페라진-1-일)니코틴산(120 mg 0.236 mmol)의 용액에 (R)-(2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-3-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(137 mg, 0.283 mmol), HATU(90 mg 0.283 mmol) 및 DIEA(121 mg 0.944 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 3시간 동안 실온에서 교반한 후, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 조합된 유기상을 염화나트륨 수용액으로 세척하였다. 진공하에서 농축 후, 잔여물을 프렙-HPLC로 정제하여 황색 고체로서 표제 화합물(19 mg, 9%)을 제공하였다. LC-MS: (ES+): m/z 940.3 [M+1] +.
1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ: 8.99 (s, 1H), 8.35（s, 1H）,8.29（s, 1H）7.77 (d, J=8.4Hz, 1H), 7.65（s, 1H）7.49-7.39 (m, 4H),7.30（s, 1H）,7.29-7.10（s, 2H）7.07-7.07 (m, 2H), 6.95 (d, J=1.6Hz, 1H), 6.47 (s, 1H), 5.36-5.34 (m, 1H),4.97-4.94 (m, 1H), 4.31 (s, 2H),4.15-4.06 (m, 1H)，3.57（s, 6H）,2.86(s, 4H), 2.63 (s, 4H), 2.25-2.12 (m, 2H), 2.08-2.01 (m, 2H) ,1.92(s, 1H),1.85(s, 1H)
실시예 6: 5-((5-(4-(5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로 [2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)피리딘-2-일)피페라진-1-일)펜틸)옥시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 6)의 제조
단계 3에서 7-브로모헵탄-1-올을 5-브로모펜탄-1-올로 대체하여 화합물 (1)에 대해 설명된 것과 동일한 절차로 화합물 (6)을 제조하였다.
LCMS: m/z=979.4 [M]+.
1HNMR (400 MHz, CDCl3 -d): δ9.06 (s, 1H), 8.36-8.30 (m, 2H), 7.77-7.64 (m, 2H), 7.43-7.38 (m, 3H), 7.33-7.31 (m, 2H), 7.23-7.15 (m, 2H), 7.10-7.06 (m, 3H), 6.95-6.93(m, 1H), 6.51-6.48 (m, 1H), 4.97-4.93 (m, 1H), 4.38 (s, 1H), 4.12-4.07 (m, 3H), 3.56-3.47 (m, 6H), 2.90-2.73 (m, 3H), 2.49(s, 4H), 2.36-2.35 (m, 2H), 2.19-2.01 (m, 4H),1.88-1.50 (m, 10H).
실시예 7: 5-(4-(6-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-6-옥소헥실)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 7)의 제조
단계 1: (R)-6-브로모-1-(3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)헥산-1-온의 제조
[0135] DCM(5 mL) 중 6-브로모헥사노일 클로라이드(45 mg, 0.21 mmol), (R)-(2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-3-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(94 mg, 0.21 mmol) 및 DIEA(136 mg, 1 mmol)의 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(5 mL)을 첨가하여 켄칭시켰다. 유기상을 수집하고, 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 Prep-TLC(DCM / MeOH = 10:1)로 정제하여 백색 고체로서 원하는 생성물(150 mg, 98%)을 제공하였다. LC/MS: 624.5 [M+H]+.
단계 2: 5-(4-(6-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-6-옥소헥실)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온의 제조
[0136] DMF(3 mL) 중 (R)-6-브로모-1-(3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)헥산-1-온(150 mg, 0.20 mmol), 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-1,3-디온(90.9 mg, 0.24 mmol), K2CO3(165.9 mg, 1.2 mmol) 및 KI(7.9 mg, 0.05 mmol)의 혼합물을 16시간 동안 60℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과시키고, 용액을 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 Prep-TLC(DCM / MeOH = 10:1)로 정제하여 백색 고체로서 원하는 생성물(37 mg, 19.8%)을 제공하였다. LC/MS: 885.5 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.78 (br, 1H), 11.11 (s, 1H), 8.92 - 8.89 (m, 1H), 8.30 - 8.25 (m, 1H), 7.71 - 7.61 (m, 2H), 7.59 - 7.52 (m, 1H), 7.51 - 7.39 (m, 2H), 7.37 (s, 1H), 7.32 - 7.23 (m, 2H), 7.22 - 7.12 (m, 3H), 7.07 - 6.96 (m, 1H), 5.09 (dd, J = 12.9, 5.3 Hz, 1H), 4.31 - 4.13 (m, 1H), 3.89 - 3.71 (m, 1H), 3.67 - 3.37 (m, 6H), 2.96 - 2.81 (m, 1H), 2.70 - 2.54 (m, 2H), 2.49 - 2.17 (m, 5H), 2.03 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 1.95 - 1.67 (m, 3H), 1.65 - 1.41 (m, 4H), 1.39 - 1.02 (m, 5H), 1.00 - 0.70 (m, 1H).
실시예 8: 5-(4-(5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)펜틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 8)의 제조
단계 1: (R)-7-브로모-1-(3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)헵탄-1-온의 제조
[0137] DCM(5 mL) 중 7-브로모헵타노일 클로라이드(60 mg, 0.26 mmol)의 용액에 (R)-(2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-3-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(145.8 mg, 0.26 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(335.4 mg, 2.6 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 증발시키고, MeOH : DCM = 1:10로 Prep-TLC에 의해 정제하여 백색 오일로서 표제 화합물(45 mg, 27%)을 제공하였다. LC/MS: 639.6 [M+H]+.
단계 2: 5-(4-(5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)펜틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온의 제조
[0138] 실온에서 교반된 아세토니트릴 중 (R)-7-브로모-1-(3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)헵탄-1-온(45 mg, 0.07 mmol) 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-1,3-디온(23 mg, 0.06 mmol)의 용액에 N,N-디이소프로필에틸아민(27.09 mg, 0.21 mmol) 및 KI(1.2 mg, 0.007 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 증발시키고, MeOH : DCM = 1:10로 Prep-TLC에 의해 정제하여 표제 화합물(32 mg, 50.8%)을 제공하였다. LC/MS: 899.3 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.81 (br, 1H), 11.10 (s, 1H), 8.95 - 8.85 (m, 1H), 8.32 - 8.25 (m, 1H), 7.70 - 7.61 (m, 2H), 7.59 - 7.53 (m, 1H), 7.51 - 7.49 (m, 2H), 7.40 - 7.25 (m, 3H), 7.24 - 7.15 (m, 3H), 7.12 - 7.03 (m, 1H), 5.14 - 5.07 (m, 1H), 4.27 - 4.16 (m, 1H), 3.82 - 3.74 (m, 1H), 3.62 - 3.41 (m, 4H), 3.29 - 3.27 (m, 2H), 2.95 - 2.85 (m, 1H), 2.70 - 2.62 (m, 2H), 2.45 - 2.12 (m, 5H), 2.08 - 1.98 (m, 2H), 1.90 - 1.70 (m, 3H), 1.65 - 1.40 (m, 4H), 1.31 - 1.10 (m, 7H), 0.95 - 0.82 (m, 1H).
실시예 9: 5-(4-((5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)피리딘-2-일)메틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 9)
단계 1: tert-부틸 6-메틸니코티네이트의 제조
[0139] 톨루엔(150 mL) 중 6-메틸니코틴산(5.2 g, 37.9 mmol)의 용액에 DMAP(520 mg, 3.79 mmol) 및 Boc2O(12.37g, 56.9 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 12시간 동안 110℃에서 교반하였다. 실온으로 냉각 후, 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석시키고, 염화나트륨 수용액으로 추출하였다. 조합된 유기상을 진공하에서 농축시키고, 잔여물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르 중 3% EtOAc로 용리됨)로 정제하여 표제 생성물(5.09 g, 69%)을 제공하였다. LCMS: m/z 194.2 [M+1]+.
단계 2: tert-부틸 6-(브로모메틸)니코티네이트의 제조
[0140] 사염화탄소(10 mL) 중 tert-부틸 6-메틸니코티네이트(590 mg, 3.05 mmol)의 용액에 NBS(440 mg, 2.48 mmol) 및 AIBN(59 mg 0.3 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 12시간 동안 70℃에서 교반한 후, 에틸 아세테이트로 희석시켰다. 염화나트륨 수용액으로 추출 후, 조합된 유기상을 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르 중 3% EtOAc로 용리됨)로 정제하여 표제 생성물(320 mg, 38.5%)을 제공하였다.
단계 3: tert-부틸 6-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)니코티네이트의 제조
[0141] CH3CN(10 mL) 중 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-1,3-디온(520 mg, 1.52 mmol)의 용액에 DIEA(770mg 5.96 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 20분 동안 실온에서 교반하였다. tert-부틸 6-(브로모메틸)니코티네이트(316 mg,1.16 mmol)를 반응 혼합물에 첨가하고, 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응을 물로 켄칭시키고, EtOAc(100 mLХ3)로 추출하였다. 조합된 유기상을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 유기 용매를 진공하에서 제거하였다. 잔여물을 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH=50/1)로 정제하여 tert-부틸 6-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일) 피페라진-1-일)메틸)니코티네이트(480 mg, 59%)를 제공하였다. LCMS: m/z 534.3 [M+1]+.
단계 4: 6-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)니코틴산의 제조
[0142] tert-부틸 6-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일) -1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)니코티네이트(480 mg, 0.9 mmol)를 4N HCl/디옥산(30mL)에 용해시키고, 5시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 농축시켜 표제 생성물(470 mg)을 제공하였고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. LCMS: (ES+): m/z 478.2 [M+1]+.
단계 5: 5-(4-((5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)피리딘-2-일)메틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온의 제조
[0143] DMF(5 mL) 중 6-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)니코틴산(220 mg, 0.46 mmol)의 용액에 (R)-(2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-3-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(240 mg, 536 mmol), HOBT(120 mg 0.88 mmol), EDCI(170 mg 0.89 mmol) 및 DIEA(350 mg, 2.713 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 물로 희석시키고, EtOAc(100mLХ3)로 추출하였다. 조합된 유기상을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 용매를 회전 증발에 의해 제거하고, 잔여물을 프렙-HPLC로 정제하여 황색 고체로서 표제 생성물(27 mg, 6%)을 제공하였다. LCMS: m/z 454.2 [M+1]+.
1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ: 8.91(s, 1H), 8.34 (s, 1H) 8.68 (d, J=8.4Hz, 1H) 8.20 (d, J=8Hz, 1H) 7.85-7.61 (m, 2H) 7.45-7.35 (m, 5H) 7.31 (s, 2H) 7.29-7.11(m, 2H) 7.10(s, 1H) 7.09-7.01 (m, 3H) 6.96 (d, J=8.0Hz, 1H) 5.98-5.91 (m, 1H) 4.21 (s, 1H) 4.11 (s, 1H) 4.12-3.89 (m, 1H) 3.72 (s, 3H) 3.35 (s, 6H) 2.92-2.71(m, 4H) 2.55 (s, 3H) 2.27-2.15(m, 1H) 2.14-2.09(m, 3H).
실시예 10: 5-(4-((1-(5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)메틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 10)의 제조
단계 1: tert-부틸 4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트의 제조
[0144] DCM(20 mL) 중 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-1,3-디온(540 mg, 1.578 mmol)의 용액에 tert-부틸 4-포르밀피페리딘-1-카르복실레이트(350mg，1.643mmol) 및 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(990 mg, 4.691mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(40 mL x 4)로 추출하고, 염화나트륨 수용액으로 세척하였다. 유기상을 진공하에서 농축시키고, 잔여물을 DCM/MeOH 100:1 내지 50:1로 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물(469 mg, 55.1%)을 제공하였다. LCMS: (ES+): m/z 440 [M+1-Boc]+.
단계 2: 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-(4-(피페리딘-4-일메틸)피페라진-1-일)이소인돌린-1,3-디온의 제조
[0145] tert-부틸 4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트(400mg, 0.74mmol)를 HCl/디옥산(10mL)에 용해시키고, 혼합물을 1.5시간 동안 실온에서 교반하였다. 고체를 여과에 의해 수집하여 HCl 염으로서 표제 화합물(450 mg)을 제공하였다. LCMS: 440.2 [M+H]+.
단계 3: tert-부틸 6-(4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)니코티네이트의 제조
[0146] DMSO(20mL) 중 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-(4-(피페리딘-4-일메틸)피페라진-1-일)이소인돌린-1,3-디온(350 mg, 0.797mmol)의 용액에 tert-부틸 6-클로로니코티네이트(169 mg, 0.793mmol), L-프롤린(70 mg, 10%, K2CO3(220mg, 1.59mmol) 및 CuI(35 mg, 10%)를 첨가하였다. 혼합물을 12시간 동안 90℃에서 교반하였다. 혼합물을 EtOAc(50 mL x 4)로 추출하고, 유기상을 수성 염화나트륨(40 mL x 3)으로 세척하였다. 유기상을 진공하에서 농축시키고, 잔여물을 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH 20:1)로 정제하여 황색 오일로서 표제 화합물(280 mg, 71.4%)을 제공하였다. LCMS: (ES+): m/z 617.3 [M+H]+.
단계 4: 6-(4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)니코틴산의 제조
[0147] tert-부틸 6-(4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)니코티네이트(280 mg, 0.133 mmol)를 DCM(6 mL) 및 TFA(2 mL)에 용해시켰다. 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 진공하에서 용매의 증발 후, 잔여물을 DCE에 용해시킨 후, 진공하에서 농축 건조시켰다. 잔여물을 DCE로 3회 공비시켜 밝은 황색 오일로서 표제 화합물(340 mg)을 제공하였다. LCMS: (ES+): m/z 562.2 [M+1]+.
단계 5: 5-(4-((1-(5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)메틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온의 제조
[0148] DMF(20 mL) 중 6-(4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)니코틴산(110 mg, 0.196 mmol)의 용액에 (R)-(2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-3-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(70 mg,0.156 mmol) 및 DIEA(300 mg,2.34 mmol)를 첨가한 후, 실온에서 HATU(89 mg, 0.234 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. EtOAc(30 mL x 4)로 추출하고, 염수(20 mL x3)로 세척한 후, 유기상을 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 프리-HPLC로 정제하여 황색 고체로서 표제 생성물(18.8 mg)을 제공하였다. LCMS: (ES+): m/z 992.3[M+1]+,
1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ: 10.20 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.77 (d, J=8.4Hz, 1H), 7.22-7.12 (m, 5H), 7.11-6.19 (m, 2H), 5.35-5.33 (m, 1H), 4.97-4.93 (m, 1H), 4.51-4.21(m, 3H), 3.91-3.85(m, 3H), 3.76 (s, 5H), 3.41-3.03(m, 8H), 2.91-2.71 (m, 4H), 1.71-1.59 (m, 1H), 1.54(d, J=6.8Hz, 4H), 1.45 (s, 2H).
실시예 11: 5-(4-(5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-5-옥소펜틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 11)의 제조
단계 1: tert-부틸 5-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)펜타노에이트의 제조
[0149] ACN(10 mL) 중 tert-부틸 5-브로모펜타노에이트(47 mg, 0.2 mmol)의 용액에 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-1,3-디온(75.7 mg, 0.2 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(38.7 mg, 0.3 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 60℃에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 증발시키고, MeOH: DCM = 1:10로 Prep-TLC에 의해 정제하여 황색 고체로서 표제 화합물(60 mg, 60.1%)을 제공하였다. LC/MS: 498.8 [M+H]+.
단계 2: 5-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)펜탄산의 제조
[0150] DCM(10 mL) 중 tert-부틸 5-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)펜타노에이트(40 mg, 0.08 mmol)의 용액에 TFA(2 mL)를 첨가하였다. 반응물을 4시간 동안 실온에서 교반하였다. 용액을 진공하에서 농축시켜 황색 고체로서 미정제 생성물(35 mg, 수율: 100%)을 제공하였다. LC/MS: 442.7 [M+H]+.
단계 3: 5-(4-(5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-5-옥소펜틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온의 제조
[0151] 실온에서 질소하에서 교반된 DMF(10 mL) 중 5-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)펜탄산(35 mg, 0.08 mmol) 및 (R)-(2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-3-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(44.88 mg, 0.08 mmol)의 용액에 HATU(36.48 mg, 0.096 mmol) 및 DIEA(15.48 mg, 0.12 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 용매를 진공하에서 제거하여 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 MeOH:DCM = 1:10로 Prep-TLC에 의해 정제하여 표제 화합물(40 mg, 57.4%)을 제공하였다. LC/MS: 871.3 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.84 (br, 1H), 11.12 (s, 1H), 9.57 - 9.51 (m, 1H), 8.96 - 8.90 (m, 1H), 8.38 - 8.35 (m, 1H), 7.77 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 7.57 (dd, J = 8.5, 3.0 Hz, 1H), 7.51 - 7.46 (m, 2H), 7.38 - 7.15 (m, 5H), 7.08 - 7.01 (m, 1H), 5.14 - 5.06 (m, 1H), 4.26 - 4.16 (m, 3H), 3.99 - 3.85 (m, 2H), 3.56 - 3.52 (m, 2H), 3.27 - 3.03 (m, 5H), 2.94 - 2.84 (m, 1H), 2.69 - 2.54 (m, 3H), 2.45 - 2.41 (m, 1H), 2.37 - 2.31 (m, 1H), 2.10 - 1.99 (m, 2H), 1.80 - 1.50 (m, 6H), 1.30 - 1.23 (m, 2H), 0.90 - 0.80 (m, 1H).
실시예 12: 5-(4-(7-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)헵틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 12)의 제조
단계 1: 7-브로모헵타날의 제조
[0152] DMSO(30 mL) 중 7-브로모헵탄-1-올(1 g, 5.52 mmol)의 용액에 IBX(1.8 g, 6.62 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 물(30 mL)로 희석시키고, 여과시켰다. 여과액을 EtOAc로 추출하였다. 조합된 유기상을 탄산수소 나트륨 수용액 및 염수로 세척하였다. Na2SO4 상에서 건조 후, 용매를 진공하에서 농축시켜 황색 오일로서 7-브로모헵타날(780 mg, 4.062 mmol)을 제공하였다.
단계 2: 5-(4-(7-브로모헵틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일) 이소인돌린-1,3-디온의 제조
[0153] 0℃에서 DCM(20 mL) 중 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-1,3-디온(260 mg, 0.76 mmol)의 용액에 7-브로모헵타날(161 mg, 0.83 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 30분 동안 교반한 후, Na(OAc)3BH(483 mg, 2.28 mmol)를 첨가하였다. 12시간 동안 실온에서 교반 후, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 염화나트륨 용액으로 세척하였다. 조합된 유기상을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 황색 고체로서 5-(4-(7-브로모헵틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(410 mg, 89%)을 제공하였다. LCMS: m/z 519 [M+1]+.
단계 3: 5-(4-(7-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)헵틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온의 제조
[0154] DMSO(10mL) 중 5-(4-(7-브로모헵틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(410 mg, 0.75 mmol)의 용액에 (2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-4-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(472 mg 0.97 mmol) 및 DIEA(483 mg, 3.75 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 12시간 동안 70℃에서 교반하고, 여과시켰다. 여과액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 염수로 세척하였다. 유기상을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 프리-HPLC로 정제하여 황색 고체로서 원하는 생성물(42.8 mg, 6%)을 제공하였다. LCMS: m/z 443[M+1]2+.
1HNMR (400 MHz, DMSO): δ: 12.85 (s, 1H), 11.09 (s, 1H)，8.81 (d, J=7.2Hz, 1H) 8.29 (s, 1H)，7.77 (d, J=8.4Hz, 1H) 7.68 (s, 1H)，7.58 (d, J=8.4Hz, 1H)，7.53-7.45 (m, 3H),7.39 (s, 1H)，7.29-7.21 (m, 1H) 7.18(d, J=8.8Hz, 3H)，7.05(d, J=2.4Hz, 1H)，5.12-5.10 (m, 2H)，4.32 (s, 1H)，4.22 (s, 2H)，3.59-3.48(m, 4H)，3.21-3.09 (m, 8H)，2.95-2.81(m, 1H)，2.69-2.52 (m, 2H)，2.36 (d, J=14.0Hz, 1H)，2.15 (s, 2H)，2.05-2.01 (m, 1H)，2.71 (s, 4H)，1.34 (s, 6H)，1.23 (s, 2H).
실시예 13: (S)-3-(5-(4-(6-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-6-옥소헥실)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(화합물 13)
단계 1: 6-브로모-1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)헥산-1-온의 제조
[0155] 실온에서 아르곤 하에서 교반된 DCM(5 mL) 중 (2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-4-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(90 mg, 0.2 mmol)의 용액에 6-브로모헥사노일 클로라이드(43 mg, 0.2 mmol) 및 DIEA(130 mg, 1.0 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 농축시키고, Prep-TLC(DCM/MeOH= 10:1)로 정제하여 백색 고체로서 표제 화합물(120 mg, 96%)을 제공하였다. LC/MS: 623.6 [M+H]+.
단계 2: (S)-3-(5-(4-(6-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-6-옥소헥실)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온의 제조
[0156] 실온에서 아르곤 하에서 교반된 ACN(2 mL) 중 6-브로모-1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)헥산-1-온(110 mg, 0.18 mmol)의 용액에 (S)-3-(1-옥소-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(88 mg, 0.18 mmol), DIEA(116 mg, 0.9 mmol) 및 아이오딘화 칼륨(6.0 mg, 0.04 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 16시간 동안 25℃에서 교반하였다. 미정제 생성물을 진공하에서 농축시키고, Prep-TLC(DCM/MeOH= 10:1)로 정제하여 표제 화합물(13 mg, 8.3%)을 제공하였다. LC/MS: 872.5 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.80 (s, 1H), 10.97 (s, 1H), 10.49 (br, 1H), 8.84 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.59 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.49 (t, J = 7.9 Hz, 2H), 7.26 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.22 - 7.19 (m, 2H), 7.18 - 7.15 (m, 1H), 7.07 - 7.00 (m, 1H), 5.07 (dd, J = 13.2, 5.0 Hz, 1H), 4.42 - 4.30 (m, 2H), 4.27 - 4.13 (m, 2H), 4.05 - 3.96 (m, 1H), 3.90 - 3.82 (m, 1H), 3.62 - 3.54 (m, 1H), 3.30 - 3.20 (m, 2H), 3.19 - 2.97 (m, 4H), 2.95 - 2.86 (m, 1H), 2.69 - 2.56 (m, 1H), 2.47 - 2.31 (m, 4H), 2.13 - 2.01 (m, 2H), 2.00 - 1.92 (m, 1H), 1.82 - 1.65 (m, 2H), 1.64 - 1.45 (m, 4H), 1.43 - 1.32 (m, 3H), 1.30 - 1.17 (m, 3H).
실시예 14: (S)-3-(5-(4-(5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-5-옥소펜틸)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(화합물 14)
단계 1: tert-부틸 (S)-5-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)펜타노에이트의 제조
[0157] 실온에서 교반된 MeCN(5 mL) 중 tert-부틸 5-브로모펜타노에이트(50 mg, 0.21 mmol)의 용액에 (S)-3-(1-옥소-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(103 mg, 0.21 mmol), KI(35 mg, 0.21 mmol) 및 DIEA(109 mg, 0.84 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 12시간 동안 60℃에서 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물(45 mL)에 붓고, EtOAc(50 mLХ2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 플래시 크로마토그래피(MeOH/DCM= 1:10)로 정제하여 황색 고체로서 원하는 생성물(100 mg, 수율 = 98.4%)을 제공하였다. LC/MS : 484.9 [M+H]+.
단계 2: (S)-5-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)펜탄산의 제조
[0158] TFA/DCM(1:5, 12 mL) 중 tert-부틸 (S)-5-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)펜타노에이트(100 mg, 0.20 mmol)의 용액에 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물(100 mg, 미정제)을 제공하였다. LC/MS : 428.8 [M+H]+.
단계 3: (S)-3-(5-(4-(5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-5-옥소펜틸)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온의 제조
[0159] 실온에서 DMF(5 mL) 중 (S)-5-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)펜탄산(100 mg, 0.20 mmol)의 용액에 HATU(94 mg, 0.25 mmol), DIEA(107 mg, 0.828 mmol) 및 (R)-(2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-3-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(116 mg, 0.187 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 물(45 mL)에 붓고, EtOAc(50 mLХ2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 Prep-TLC(MeOH/DCM= 1:10)로 정제하여 원하는 생성물(25 mg, 수율 = 2단계로 14.5%)을 제공하였다. LC/MS : 857.6 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.83 (br, 1H), 10.97 (s, 1H), 8.95 - 8.85 (m, 1H), 8.37 - 8.25 (m, 1H), 7.71 - 7.63 (m, 1H), 7.60 - 7.53 (m, 3H), 7.48 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 7.25 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 7.24 - 7.16 (m, 3H), 7.15 - 7.06 (m, 2H), 7.04 (dd, J= 8.4, 2.4 Hz, 1H), 5.09 - 5.04 (m, 1H), 4.40 - 4.30 (m, 1H), 4.28 - 4.15 (m, 2H), 3.95 - 3.75 (m, 1H), 3.65 - 3.41 (m, 5H), 3.22 - 3.10 (m, 2H), 2.98 - 2.85 (m, 2H), 2.60 - 2.52 (m, 2H), 2.47 - 2.28 (m, 3H), 2.28 - 2.15 (m, 1H), 2.09 - 1.94 (m, 2H), 1.88 - 1.70 (m, 2H), 1.65 - 1.40 (m, 4H), 1.31 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 1.26 - 1.21 (m, 1H).
실시예 15: 5-(4-(6-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)헥실)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 15)
단계 1: (R)-(2-클로로-4-페녹시페닐)(4-((1-(6,6-디메톡시헥실)피페리딘-3-일)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논의 제조
[0160] DMF(2 mL) 중 6-브로모-1,1-디메톡시헥산(21 mg, 0.09 mmol), (R)-(2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-3-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(50 mg, 0.09 mmol), KI(15 mg, 0.09 mmol) 및 DIEA(24 mg, 0.18 mmol)의 현탁액을 16시간 동안 25℃에서 교반하였다. 용매를 진공하에서 제거하였다. 잔여물을 DCM/MeOH = 20:1로 용리된 크로마토그래피로 정제하여 황색 고체로서 생성물(50 mg, 94%)을 제공하였다. LC/MS: 592.3 [M+H]+.
단계 2: (R)-6-(3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)헥사날의 제조
[0161] ACN(2 mL) 중 (R)-(2-클로로-4-페녹시페닐)(4-((1-(6,6-디메톡시펜틸)피페리딘-3-일)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(50 mg, 0.08 mmol)의 용액을 TsOH(14 mg, 0.08 mmol) 및 HOAc(14 mg, 0.08 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 5시간 동안 25℃에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 EtOAc(10 mL)로 용해시키고, 포화 NaHCO3 용액으로 세척하였다. 유기상을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 황색 고체로서 표제 생성물(35 mg, 80%)을 제공하였다. LC/MS: 546.2 [M+H]+.
단계 3: 5-(4-(6-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)헥실)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온의 제조
[0162] DCM(5 mL) 중 (R)-6-(3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)헥사날(35 mg, 0.07 mmol), Et3N(14 mg, 0.14 mmol) 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-1,3-디온(27 mg, 0.07 mmol)의 용액을 10분 동안 25℃에서 교반하였다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고, NaBH(OAc)3(22 mg, 0.11 mmol)를 나누어 첨가하였다. 혼합물을 16시간 동안 25℃에서 교반하였다. 용매를 진공하에서 제거하고, 잔여물을 DCM/MeOH =20:1로 용리된 크로마토그래피로 정제하여 황색 고체로서 표제 생성물(15 mg, 24%)을 제공하였다. LC/MS: 872.3 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.79 (br, 1H), 10.97 (s, 1H), 10.60 (br, 1H), 8.83 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.60 - 7.46 (m, 3H), 7.26 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.23 - 7.06 (m, 4H), 7.04 - 7.01 (m, 1H), 5.09 - 5.04 (m, 1H), 4.42 - 4.13 (m, 4H), 4.09 - 3.93 (m, 1H), 3.92 - 3.78 (m, 1H), 3.72 - 3.41 (m, 2H), 3.29 - 3.17 (m, 3H), 3.14 - 2.85 (m, 4H), 2.77 - 2.52 (m, 4H), 2.42 - 2.30 (m, 3H), 2.13 - 1.60 (m, 3H), 1.77 - 1.65 (m, 1H), 1.58 - 1.45 (m, 3H), 1.41 - 1.19 (m, 5H).
실시예 16: (S)-3-(5-(4-(6-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-6-옥소헥실)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(화합물 16)의 제조
단계 1: (R)-6-브로모-1-(3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)헥산-1-온의 제조
[0163] 0℃에서 DCM(10 mL) 중 (R)-(2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-3-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(113 mg, 0.20 mmol) 및 DIEA(77.8 mg, 0.60 mmol)의 혼합물에 6-브로모헥사노일 클로라이드(42.8 mg, 0.20 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 5시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 미정제 생성물을 DCM 중 4-8% MeOH로 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 정제하여 원하는 화합물(80 mg, 64%)을 제공하였다. LC/MS: 623.5[M+H]+.
단계 2: (S)-3-(5-(4-(6-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-6-옥소헥실)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온의 제조
[0164] ACN(9 mL) 중 (R)-6-브로모-1-(3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)헥산-1-온(50 mg, 0.08 mmol), (S)-3-(1-옥소-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(38.8 mg, 0.08 mmol), DIEA(20 mg, 0.16 mmol) 및 NaI(1.2 mg, 0.008 mmol)의 혼합물을 N2 분위기 하에서 18시간 동안 90℃에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 DCM 중 5-10% MeOH로 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 정제하여 원하는 화합물(38 mg, 70%)을 제공하였다. LC/MS: 871.4[M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.75 (br, 1H), 10.96 (s, 1H), 8.91 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 8.30 - 8.26 (m, 1H), 7.68 - 7.59 (m, 1H), 7.56 - 7.46 (m, 4H), 7.32 - 7.24 (m, 1H), 7.21 - 7.13 (m, 3H), 7.10 - 7.02 (m, 3H), 5.08 - 5.03 (m, 1H), 4.37 - 4.29 (m, 1H), 4.25 - 4.16 (m, 2H), 3.82 - 3.70 (m, 1H), 3.65 - 3.39 (m, 3H), 3.28 - 3.15 (m, 2H), 2.95 - 2.83 (m, 2H), 2.72 - 2.65 (m, 1H), 2.63 - 2.59 (m, 1H), 2.57 - 2.55 (m, 1H), 2.49 - 2.40 (m, 2H), 2.37 - 2.31 (m, 1H), 2.28 - 2.15 (m, 2H), 2.03-1.95 (m, 2H), 1.81 - 1.71 (m, 2H), 1.63 - 1.32 (m, 4H), 1.30 - 1.18 (m, 3H), 1.15 - 1.08 (s, 2H), 0.90 - 0.84 (m, 1H).
실시예 17: 3-(5-(4-(7-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-7-옥소헵틸)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(화합물 17)
단계 1: (R)-7-브로모-1-(3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)헵탄-1-온의 제조
[0165] 0℃에서 DCM(10 mL) 중 (R)-(2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-3-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(113 mg, 0.20 mmol) 및 DIEA(77.8 mg, 0.60 mmol)의 혼합물에 7-브로모헵타노일 클로라이드(45.7 mg, 0.20 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 5시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 미정제 생성물을 DCM 중 4 - 8% MeOH로 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 정제하여 원하는 화합물(80 mg, 63%)을 제공하였다. LC/MS: 637.4[M+H]+.
단계 2: 3-(5-(4-(7-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-7-옥소헵틸)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온의 제조
[0166] ACN(9 mL) 중 (R)-7-브로모-1-(3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)헵탄-1-온(50 mg, 0.08 mmol), (S)-3-(1-옥소-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(38.8mg, 0.08 mmol), DIEA(20 mg, 0.16 mmol) 및 NaI(1.2 mg, 0.008 mmol)의 혼합물을 N2 분위기 하에서 18시간 동안 90℃에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 DCM 중 5-10% MeOH로 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 정제하여 원하는 화합물(22 mg, 98% 순도, 30% 수율)을 제공하였다. 키랄 크로마토그래피 분석은 부분적인 라세미화를 나타내었다. LC/MS: 885.5[M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.75 (br, 1H), 10.96 (s, 1H), 8.92 - 8.86 (m, 1H), 8.32 - 8.25 (m, 1H), 7.72 - 7.60 (m, 1H), 7.57 - 7.46 (m, 4H), 7.32 - 7.20 (m, 1H), 7.21 - 7.15 (m, 3H), 7.08 - 7.02 (m, 3H), 5.06 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.37 - 4.30 (m, 1H), 4.28 - 4.15 (m, 2H), 3.77 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 3.61 - 3.45 (m, 3H), 3.29 - 3.21 (m, 2H), 3.02 - 2.79 (m, 2H), 2.69 - 2.55 (m, 2H), 2.40 - 2.29 (m, 3H), 2.25 - 2.12 (m, 2H), 2.07 - 1.91 (m, 3H), 1.88 - 1.73 (m, 2H), 1.63 - 1.55 (m, 1H), 1.50 - 1.32 (m, 4H), 1.28 - 1.23 (m, 3H), 1.17 - 1.08 (m, 3H), 0.89 - 0.78 (m, 1H).
실시예 18: 5-(4-(6-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)헥실)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 18)의 제조
화합물 (12)에 대해 설명된 절차와 유사하게 화합물 (18)을 제조하였다. LCMS: m/z 436.8 [M+1]2+.
1HNMR (400 MHz, DMSO): δ: 12.91 (s, 1H), 11.12 (s, 1H), 8.81 (d, J=6.8Hz, 1H),8.31 (s, 1H), 7.77(d, J=8.8Hz, 1H) 7.72 (s, 1H),7.61 (s, 1H),7.51-7.48 (m, 3H),7.31 (s, 1H),7.15 (s, 1H),7.13 (s, 3H),7.05(d, J=2Hz, 1H),5.19-5.15 (m, 1H),4.35 (s, 1H),4.21 (s, 2H),3.61 (s, 6H),3.19 (s, 7H),2.91-2.87 (m, 1H),2.71-2.69 (m, 1H),2.50 (d, J=1.6Hz, 2H),2.12-2.08 (m, 2H),1.71(s, 4H),1.35(s, 4H),1.22(s, 3H)
실시예 19: 5-(4-(4-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-4-옥소부틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 19)
화합물 (14)에 대해 설명된 절차와 유사하게 화합물 (19)을 제조하였다.
LC/MS: 857.5 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.81 (br, 1H), 11.10 (s, 1H), 8.92 - 8.83 (m, 1H), 8.32 - 8.19 (m, 1H), 7.84 - 7.55 (m, 3H), 7.54 - 7.40 (m, 2H), 7.39 - 6.97 (m, 6H), 5.17 - 5.02 (m, 1H), 4.37 - 4.05 (m, 2H), 3.97 - 3.75 (m, 1H), 3.72 - 3.33 (m, 6H), 3.27 - 2.81 (m, 4H), 2.73 - 2.54 (m, 2H), 2.47 - 2.09 (m, 5H), 2.06 - 1.97 (m, 2H), 1.93 - 1.45 (m, 5H), 1.35 - 1.15 (m, 1H).
실시예 20: (S)-3-(5-(4-(4-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-4-옥소부틸)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(화합물 20)
화합물 (14)에 대해 설명된 절차와 유사하게 화합물 (20)을 제조하였다.
LC/MS: 843.6 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.90 - 12.75 (m, 1H), 10.97 (s, 1H), 10.47 (br, 1H), 8.93 - 8.81 (m, 1H), 8.35 - 8.24 (m, 1H), 7.73 - 7.43 (m, 5H), 7.29 - 7.08 (m, 5H), 7.07 - 7.00 (m, 1H), 5.13 - 5.03 (m, 1H), 4.42 - 4.15 (m, 3H), 4.03 - 3.85 (m, 2H), 3.78 - 3.38 (m, 5H), 3.29 - 3.01 (m, 5H), 2.96 - 2.86 (m, 1H), 2.64 - 2.56 (m, 1H), 2.47 - 2.32 (m, 3H), 2.06 - 1.91 (m, 3H), 1.83 - 1.46 (m, 4H), 1.28 - 1.18 (m, 1H), 0.96 - 0.75 (m, 1H).
실시예 21: (S)-3-(5-(4-(7-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-7-옥소헵틸)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(화합물 21)의 제조
단계 1: (S)-3-(5-(4-(7-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-7-옥소헵틸)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온의 제조
[0167] 실온에서 아르곤 하에서 교반된 DMF(5 mL) 중 7-브로모-1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)헵탄-1-온(80 mg, 0.13 mmol)의 용액에 (S)-3-(1-옥소-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(63 mg, 0.13 mmol), DIEA(50 mg, 0.39 mmol) 및 아이오딘화 칼륨(20 mg, 0.13 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 15시간 동안 70℃에서 교반하였다. 미정제 생성물을 진공하에서 농축시키고, Prep-TLC(DCM/MeOH=10:1)로 정제하여 표제 화합물(30 mg, 26.0%)을 제공하였다. LC/MS: 886.3 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.79 (s, 1H), 10.97 (s, 1H), 10.25 (br, 1H), 8.83 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.60 - 7.46 (m, 3H), 7.26 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.22 - 7.01 (m, 5H), 5.06 (dd, J = 13.4, 5.1 Hz, 1H), 4.38 - 4.15 (m, 4H), 4.08 - 3.92 (m, 1H), 3.90 - 3.77 (m, 1H), 3.75 - 3.50 (m, 2H), 3.45 - 3.35 (m, 1H), 3.32 - 3.18 (m, 3H), 3.14 - 2.85 (m, 4H), 2.75 - 2.53 (m, 5H), 2.42 - 2.31 (m, 3H), 2.15 - 1.95 (m, 3H), 1.77 - 1.62 (m, 1H), 1.57 - 1.47 (m, 3H), 1.45 - 1.27 (m, 5H).
실시예 22: 5-(4-(7-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-7-옥소헵틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 22)의 제조
화합물 (13)에 대해 설명된 절차와 유사하게 화합물 (22)을 제조하였다.
LC/MS: 901.2 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ = 12.87 (br, 1H), 11.10 (s, 1H), 8.83 (d, J=7.4, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.78 - 7.67 (m, 1H), 7.65 - 7.56 (m, 2H), 7.50 - 7.45 (m, 2H), 7.35 - 7.23 (m, 2H), 7.22 - 7.14 (m, 3H), 7.06 - 7.01 (m, 1H), 5.15 - 5.05 (m, 1H), 4.38 - 4.30(m, 1H), 4.28 - 4.12 (m, 2H), 3.89 - 3.80 (m, 1H), 3.65 - 3.40 (m, 3H), 3.29 - 3.23 (m, 2H), 3.17 - 2.82 (m, 5H), 2.65 - 2.54 (m, 2H), 2.39 - 2.32 (m, 2H), 2.12 - 1.99 (m, 3H), 1.80 - 1.68 (m,1H), 1.60 - 1.44 (m, 4H), 1.40 - 1.20 (m, 7H), 0.94 - 0.73 (m, 1H).
실시예 23: 5-(4-(4-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-4-옥소부틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 23)의 제조
화합물 (11)에 대해 설명된 절차와 유사하게 화합물 (23)을 제조하였다.
LC/MS: 857.3 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.79 (br, 1H), 11.10 (s, 1H), 8.84 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.72 (brs, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.49 (t, J = 7.9 Hz, 2H), 7.46 - 7.35 (m, 1H), 7.34 - 7.23 (m, 2H), 7.23 - 7.15 (m, 3H), 7.08 - 7.00 (m, 1H), 5.14 - 5.03 (m, 1H), 4.40 - 4.31 (m, 1H), 4.28 - 4.07 (m, 2H), 3.93 - 3.81 (m, 1H), 3.70 - 3.39 (m, 3H), 3.10 - 2.85 (m, 3H), 2.71 - 2.56 (m, 2H), 2.36 - 2.32 (m, 1H), 2.14 - 1.97 (m, 4H), 1.94 - 1.75 (m, 2H), 1.68 - 1.48 (m, 2H), 1.48 - 1.15 (m, 4H), 1.06 - 0.74 (m, 2H).
실시예 24: (S)-3-(5-(4-(4-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-4-옥소부틸)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(화합물 24)의 제조
화합물 (14)에 대해 설명된 절차와 유사하게 화합물 (24)을 제조하였다.
LC/MS: 843.4 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.81 (br, 1H), 10.96 (s, 1H), 8.84 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 8.73 (s, 0.5H), 8.51 (d, J = 8.4 Hz, 0.5H), 8.27 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.59 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.50 - 7.46 (m, 2H), 7.26 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.23 - 7.15 (m, 3H), 7.14 - 7.06 (m, 2H), 7.03 (dd, J = 8.5, 2.3 Hz, 1H), 5.10 - 5.05 (m, 1H), 4.39 - 4.30 (m, 2H), 4.25 - 4.17 (m, 2H), 3.89 - 3.82 (m, 1H), 3.50 - 3.32 (m, 4H), 3.06 - 3.00 (m, 1H), 2.94 - 2.88 (m, 3H), 2.76 - 2.66 (m, 2H), 2.62 - 2.56 (m, 1H), 2.47 - 2.33 (m, 3H), 2.18 - 1.92 (m, 4H), 1.89 - 1.80 (m, 2H), 1.59 - 1.52 (m, 1H), 1.47 - 1.34 (m, 2H).
실시예 25: (S)-3-(5-(4-(5-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-5-옥소펜틸)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(화합물 25)의 제조
단계 1: tert-부틸 (S)-5-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)펜타노에이트의 제조
[0168] 실온에서 MeCN(20 mL) 중 tert-부틸 5-브로모펜타노에이트(200 mg， 0.84 mmol), (S)-3-(1-옥소-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(410.37 mg, 0.84 mmol) 및 DIEA(326.87 mg, 2.53 mmol)의 용액에 KI(14.00 mg, 0.084 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 12시간 동안 60℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에서 증발시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제물을 DCM/MeOH(50/1-10/1)로 실리카-겔 컬럼에 의해 정제하여 황색 고체로서 생성물(250 mg, 61%)을 제공하였다. LC/MS: 484.7 [M+H]+.
단계 2: (S)-5-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)펜탄산의 제조
[0169] tert-부틸 (S)-5-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)펜타노에이트(250 mg, 0.52 mmol)를 DCM(10 mL) 및 TFA(2 mL)에 용해시켰다. 반응 혼합물을 5시간 동안 25℃에서 교반하였다. 혼합물을 농축시켜 갈색 고체로서 생성물(200 mg, 78%)을 제공하였다. LC/MS: 428.8 [M+H]+.
단계 3: (S)-3-(5-(4-(5-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-5-옥소펜틸)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온의 제조
[0170] DCM(15 mL) 중 (S)-5-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)펜탄산(50 mg, 0.10 mmol), HATU(53.24 mg, 0.14 mmol) 및 DIEA(45.23 mg, 0.35 mmol)의 용액을 10분 동안 교반하였다. (2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-4-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(53.24 mg, 0.14 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 25℃에서 교반하였다. 용매를 제거하고, 잔여물을 실리카-겔 컬럼(DCM/MeOH=20/1)으로 정제하여 황색 고체로서 생성물(35 mg, 0.04 mmol, 40%)을 제공하였다. LC/MS: 858.3 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.78 (s, 1H), 10.96 (s, 1H), 10.13 (br, 1H), 8.84 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.60 - 7.46 (m, 3H), 7.26 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.23 - 6.97 (m, 5H), 5.06 - 5.01 (m, 1H), 4.48 - 4.12 (m, 4H), 4.061 - 3.81 (m, 2H), 3.66 - 3.49 (m, 1H), 3.34 - 3.11 (m, 5H), 3.10 - 2.76 (m, 3H), 2.67 - 2.52 (m, 3H), 2.50 - 2.24 (m, 6H), 2.17 - 2.08 (m, 2H), 2.01 - 1.87 (m, 1H), 1.74 - 1.46 (m, 4H), 1.43 - 1.31 (m, 1H).
실시예 26: 5-(4-(3-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)프로필)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 26)의 제조
화합물 (15)에 대해 설명된 절차와 유사하게 화합물 (26)을 제조하였다.
LC/MS: 830.5 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.87 (s, 1H), 11.11 (s, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.64 - 7.56 (m, 1H), 7.53 - 7.45 (m, 2H), 7.40 - 7.35 (m, 1H), 7.30 - 7.23 (m, 2H), 7.22 - 7.17 (m, 2H), 7.15 - 7.10 (m, 1H), 7.07 - 7.00 (m, 1H), 5.17 - 5.05 (m, 1H), 4.42 - 4.16 (m, 2H), 3.72 - 3.41 (m, 7H), 3.27 - 3.07 (m, 6H), 2.97 - 2.82 (m, 1H), 2.73 - 2.53 (m, 3H), 2.37 - 2.21 (m, 3H), 2.12 - 1.85 (m, 4H), 1.04 - 0.72 (m, 2H).
실시예 27: 5-(4-(4-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)부틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 27)의 제조
화합물 (15)에 대해 설명된 절차와 유사하게 화합물 (27)을 제조하였다.
LC/MS: 844.4 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.97 (s, 1H), 11.11 (s, 1H), 8.86 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.80 - 7.59 (m, 2H), 7.54 - 7.43 (m, 3H), 7.39 - 7.29 (m, 3H), 7.26 - 7.16 (m, 3H), 5.21 - 4.98 (m, 1H), 4.35-4.13 (m, 2H), 3.72 - 3.35 (m, 9H), 3.27 - 3.18 (m, 4H), 3.01 - 2.93 (m, 1H), 2.80 - 2.51 (m, 4H), 2.41 - 2.19 (m, 4H), 2.08 - 1.79 (m, 4H), 0.96 - 0.69 (m, 2H).
실시예 28: 5-(4-(6-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-6-옥소헥실)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 28)의 제조
화합물 (11)에 대해 설명된 절차와 유사하게 화합물 (28)을 제조하였다.
LCMS: m/z=886.3 [M+1]+.
1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ 11.06 (s, 1H), 8.85 (s, 1H), 8.229 (s, 1H), 7.69-7.67 (m, 1H), 7.58-7.56 (m, 1H), 7.51-7.49 (m, 2H), 7.32 (s, 1H), 7.28-7.21 (s, 2H), 7.19-7.15 (m, 3H), 7.01-6.99 (s, 1H), 6.65 (s, 1H), 5.32 (s, 2H), 5.11-5.08 (m, 1H), 4.35 (s, 1H), 4.19 (s, 1H), 3.91-3.88 (m, 2H), 2.68 (s, 1H), 2.39-2.31 (m, 5H), 2.09-1.99 (m, 8H), 1.60-1.42 (m, 8H), 0.85 (s, 4H).
실시예 29: 5-(4-(7-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)헵틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 29)
화합물 (15)에 대해 설명된 절차와 유사하게 화합물 (29)을 제조하였다.
LC/MS: 886.3 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.89 (br, 1H), 11.10 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.77 - 7.65 (m, 2H), 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.54 - 7.45 (m, 2H), 7.44 - 7.32 (m, 1H), 7.30 - 7.17 (m, 4H), 7.04 (dd, J = 8.5, 2.4 Hz, 1H), 5.09 (dd, J = 12.8, 5.3 Hz, 1H), 4.64 - 4.46 (m, 1H), 4.30 - 4.12 (m, 1H), 3.81 - 3.65 (m, 1H), 3.57 - 3.38 (m, 4H), 3.17 - 3.02 (m, 3H), 2.98 - 2.79 (m, 3H), 2.71 - 2.53 (m, 3H), 2.46 - 2.21 (m, 3H), 2.20 - 1.86 (m, 5H), 1.81 - 1.42 (m, 6H), 1.40 - 1.27 (m, 6H).
실시예 30: 5-(4-(5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)펜틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 30)의 제조
화합물 (15)에 대해 설명된 절차와 유사하게 화합물 (30)을 제조하였다.
LC/MS: 857.4 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.87 (br, 1H), 11.10 (s, 1H), 8.82 (br, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.75 - 7.65 (m, 2H), 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.52 - 7.46 (m, 2H), 7.41 - 7.31 (m, 1H), 7.29 - 7.16 (m, 4H), 7.07 - 7.01 (m, 1H), 5.13 - 5.06 (m, 1H), 4.59 - 4.45 (m, 1H), 3.61 - 3.43 (m, 5H), 3.07 - 2.77 (m, 5H), 2.72 - 2.55 (m, 4H), 2.45 - 2.25 (m, 3H), 2.15 - 1.87 (m, 4H), 1.80 - 1.46 (m, 6H), 1.42 -1.17 (m, 4H).
실시예 31: 5-(4-(5-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-5-옥소펜틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 31)의 제조
화합물 (14)에 대해 설명된 절차와 유사하게 화합물 (31)을 제조하였다.
LCMS: m/z=872.3 [M+1]+.
1HNMR (400 MHz, DMSO): δ: 12.91 (s, 1H), 11.09 (s, 1H), 9.71 (s, 1H), 9.01-8.98 (m, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.81-7.79 (m, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.59-7.49 (m, 3H), 7.45-7.35 (m, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.19-7.16 (m, 2H), 7.02 (s, 1H), 5.19-5.09 (m, 1H), 4.31 (s, 2H), 3.89(s, 2H), 3.61(s, 1H), 3.39-2.91 (m, 8H), 2.92-2.85 (m, 1H), 2.69-2.59 (m, 1H), 2.45-2.35 (s, 1H), 2.21-2.01 (s, 3H), 1.75 (s, 2H), 1.62-1.52 (m, 3H), 1.49-1.32(m, 1H), 1.25 (s, 1H).
실시예 32: (S)-3-(5-(4-((1-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)피페리딘-4-일)메틸)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(화합물32)의 제조
단계 1: 벤질 (S)-4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트의 제조
[0171] 실온에서 아르곤 하에서 교반된 DCM(10 mL) 중 벤질 4-포르밀피페리딘-1-카르복실레이트(60 mg, 0.24 mmol)의 용액에 (S)-3-(1-옥소-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(117 mg, 0.24 mmol), MgSO4(288 mg, 2.4 mmol) 및 TEA(49 mg, 0.48 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반한 후, 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(127 mg, 0.6 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 고체를 여과시키고, DCM(5 mLХ3)으로 세척하였다. 조합된 용액을 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 PE:EA = 1:1로 Prep-TLC에 의해 정제하여 백색 고체로서 표제 생성물(100 mg, 74%)을 제공하였다. LC/MS: 560.8 [M+H]+.
단계 2: (S)-3-(1-옥소-5-(4-(피페리딘-4-일메틸)피페라진-1-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온의 제조
[0172] TFA(4 mL) 중 벤질 (S)-4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트(100 mg, 0.18 mmol)의 용액을 밤새 70℃에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 농축시켜 황색 고체로서 미정제 생성물(136 mg)을 제공하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. LC/MS: 426.8[M+H]+.
단계 3: (S)-3-(5-(4-((1-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)피페리딘-4-일)메틸)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온의 제조
[0173] 실온에서 아르곤 하에서 교반된 DCM(5 mL) 중 (R)-(2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-3-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(90 mg, 0.16 mmol)의 용액에 트리포스겐(14 mg, 0.05 mmol) 및 DIEA(124 mg, 0.96 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 용액을 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 DCM(5 mL)으로 용해시켰다. (S)-3-(1-옥소-5-(4-(피페리딘-4-일메틸)피페라진-1-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(136 mg) 및 DIEA(124 mg, 0.96 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 물(2 mL)을 첨가하여 반응을 켄칭시키고, 유기상을 분리시켰다. 유기상을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 DCM/MeOH = 10:1로 Prep-TLC에 의해 정제하여 백색 고체로서 생성물(30 mg, 20%)을 제공하였다. LC/MS: 898.4 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.81 (br, 1H), 10.97 (s, 1H), 8.90 (br, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.62 - 7.44 (m, 4H), 7.29 - 7.15 (m, 4H), 7.13 - 7.01 (m, 2H), 5.07 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.38 - 4.18 (m, 3H), 4.00 - 3.87 (m, 1H), 3.75 - 3.50 (m, 4H), 3.30 - 3.20 (m, 2H), 3.17 - 3.05 (m, 3H), 2.95 - 2.88 (m, 1H), 2.73 - 2.53 (m, 4H), 2.46 - 2.34 (m, 2H), 2.06 - 1.85 (m, 4H), 1.79 - 1.45 (m, 5H), 1.37 - 1.17 (m, 3H), 1.10 - 0.80 (m, 3H).
실시예 33: 5-(4-((1-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)피페리딘-4-일)메틸)피페라진-1-일)-2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 33)의 제조
화합물 (32)에 대해 설명된 절차와 유사하게 화합물 (33)을 제조하였다.
LC/MS: 913.2[M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.79 (s, 1H), 11.11 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.76 - 7.62 (m, 2H), 7.57 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.51 - 7.44 (m, 2H), 7.40 - 7.31 (m, 1H), 7.30 - 7.15 (m, 4H), 7.12 - 7.00 (m, 1H), 5.14 - 5.05 (m, 1H), 4.35 - 4.12 (m, 2H), 3.68 - 3.40 (m, 6H), 3.02 - 2.84 (m, 5H), 2.70 - 2.61 (m, 2H), 2.59 - 2.54 (m, 1H), 2.46 - 2.33 (m, 2H), 2.19 - 1.84 (m, 5H), 1.72 - 1.48 (m, 4H), 1.33 - 1.14 (m, 3H), 0.99 - 0.72 (m, 3H).
실시예 34: 5-(4-(5-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)펜틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 34)의 제조
단계 1: 5-(4-(5,5-디메톡시펜틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온의 제조
[0174] DMSO(10 mL) 중 5-브로모-1,1-디메톡시펜탄(250 mg, 1.19 mmol)의 용액에 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-1,3-디온(340 mg, 0.994 mmol) 및 DIEA(350 mg 2.71 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 12시간 동안 70℃에서 교반하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 조합된 유기상을 염화나트륨 수용액으로 세척한 후, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 용매를 진공하에서 제거하고, 잔여물을 Prep-TLC(DCM/MeOH =10/1)로 정제하여 황색 고체로서 원하는 생성물(135 mg, 24%)을 제공하였다.
단계 2: 5-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)펜타날의 제조
[0175] 5-(4-(5,5-디메톡시펜틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(360 mg, 0.762 mmol)을 2N HCl/디옥산(10 mL)에 용해시키고, 반응 혼합물을 3시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 NaHCO3 수용액으로 pH 8-9로 조정한 후, EtOAc(40 mL x3)로 추출하였다. 유기층을 물 및 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 용매를 회전 증발에 의해 제거하고, 잔여물을 Prep-TLC(DCM/MeOH = 20/1)로 정제하여 5-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)펜타날(240 mg, 70%)을 제공하였다.
단계 3: 5-(4-(5-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)펜틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온의 제조
[0176] DCM(3 mL) 중 (2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-4-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(220 mg 0.492 mmol)의 용액에 포타슘 아세테이트(72.3 mg 0.738 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 교반하였다. DCM(5 mL) 중 5-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)펜타날(210 mg, 0.492 mmol) 및 AcOH(44.28mg, 0.738mmol)의 용액을 첨가하였다. 30분 동안 교반 후, 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(312 mg 1.476 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 혼합물을 EtOAc(30 mL x3)로 추출하였다. 유기층을 물 및 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 용매를 회전 증발에 의해 제거하고, 잔여물을 프렙-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 5-(4-(5-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)펜틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(43.1 mg, 9.7%)을 제공하였다. LCMS: m/z =860.3 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.87 (s, 1H), 11.09 (s, 1H),10.11 (s, 1H), 9.52 (s, 1H), 8.82 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.69-7.59 (m, 1H) 7.58 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.50-7.48 (m, 2H), 7.45-7.44 (m, 1H), 7.42-7.40 (m, 1H), 7.25-7.23(m, 2H), 7.09-7.01 (s, 1H), 5.12-5.07 (m, 2H), 4.26-4.23 (m, 4H), 3.61 (s, 4H), 3.61-3.58(m, 2H), 3.21-3.12 (s, 9H), 2.99-2.81 (m, 2H), 2.69-2.52 (m, 2H), 2.40 (d, J = 2.4 Hz, 2H), 2.15(s, 1H), 2.09-1.98 (m, 2H), 1.35 (s, 2H).
실시예 35: 4-(9-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-9-옥소논-1-인-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 35)의 제조
단계 1: 논-8-인산의 제조
[0177] 0℃에서 DMSO(5 mL) 중 리튬 아세틸라이드-에틸렌디아민 복합체(2.20 g, 21.5 mmol, 90%)의 용액에 DMSO(7 mL) 중 7-브로모헵탄산(1.50 g, 7.17 mmol)을 적가하였다. 용액을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 얼음/물에 붓고, 1N HCl로 산성화시키고, DCM으로 추출하였다. 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 플래시 컬럼 크로마토그래피(PE 중 10 ~ 30%의 EA)로 정제하여 무색 오일로서 표제 화합물(713 mg, 64%)을 생성하였다. LC/MS: 155.1 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 2.38 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.21 (td, J = 7.0, 2.6 Hz, 2H), 1.96 (t, J = 2.6 Hz, 1H), 1.71 - 1.63 (m, 2H), 1.60 - 1.52 (m, 2H), 1.49 - 1.38 (m, 4H).
단계 2: tert-부틸 논-8-이노에이트의 제조
[0178] 실온에서 Ar 하에서 교반된 무수 DCM(20 mL) 중 논-8-인산(900 mg, 5.84 mmol), 무수 N,N-디메틸포름아미드(85 mg, 1.17 mmol)의 용액에 옥살릴 클로라이드(1.5 g, 11.68 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 증발시키고, 잔여물을 무수 THF(20 mL)에 용해시켰다. 용액을 0℃로 냉각시키고, t-BuOK(1.3 g, 11.68 mmol)를 나누어 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 얼음-물을 첨가하여 반응을 켄칭시키고, Et2O로 추출하였다. 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 증발시켰다. 잔여물을 PE/EA=10:1로 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 투명한 오일로서 표제 화합물(657 mg, 53%)을 생성시켰다. LC/MS: 232.9 [M+Na]+.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 2.26 - 2.17 (m, 4H), 1.96 (t, J = 2.6 Hz, 1H), 1.65 - 1.52 (m, 4H), 1.46 (s, 9H), 1.45 - 1.30 (m, 4H).
단계 3: tert-부틸 9-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)논-8-이노에이트의 제조
[0179] THF(5mL) 중 tert-부틸 논-8-이노에이트(63 mg, 0.3 mmol), 4-브로모-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌-1,3-디온(50 mg, 0.15 mmol), 구리(I) 아이오다이드(6.3 mg, 0.033 mmol), 비스(트리페닐 포스핀)팔라듐(II) 클로라이드(11 mg, 0.017 mmol) 및 Et3N(2 mL)의 현탁액을 10시간 동안 Ar 분위기 하에서 70℃에서 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 여과시켰다. 여과액을 진공하에서 증발시켰다. 잔여물을 PE/EA=1:1로 프렙-TLC에 의해 정제하여 백색 고체로서 표제 화합물(48 mg, 68%)을 제공하였다. LC/MS: 488.7 [M+Na]+.
단계 4: 9-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)논-8-인산의 제조
[0180] TFA(1 mL) 및 DCM(3 mL) 중 tert-부틸 9-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)논-8-이노에이트(30 mg, 0.06 mmol)의 용액을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 증발시켜 미정제 생성물(33 mg)을 제공하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. LC/MS: 432.7 [M+Na]+.
단계 5: 4-(9-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d] 피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-9-옥소논-1-인-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온의 제조
[0181] 9-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-4-일)논-8-인산(33 mg, 80% 순도, 0.06 mmol), (2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-4-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(31 mg, 0.070 mmol), HATU(40 mg, 0.11 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민(27 mg, 0.21 mmol) 및 DMF(5 mL)의 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 농축시키고, DCM/MeOH=10:1로 프렙-TLC에 의해 정제하여 백색 고체로서 표제 화합물(16.1 mg, 29%)을 제공하였다. LC/MS: 839.5 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.78 (br, 1H), 11.15 (br, 1H), 8.83 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.88 - 7.80 (m, 3H), 7.65 - 7/62 (m, 1H), 7.59 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.49 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 7.29 - 7.17 (m, 4H), 7.03 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 5.18 - 5.12 (m, 1H), 4.35 - 4.06 (m, 2H), 3.91 - 3.76 (m, 1H), 3.05 - 2.85 (m, 2H), 2.70 - 2.57 (m, 2H), 2.37 - 2.35 (m, 2H), 2.30 - 2.20 (m, 3H), 1.63 - 1.48 (m, 8H), 1.36 - 1.25 (m, 5H).
실시예 36: 4-(7-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-7-옥소헵트-1-인-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 36)의 제조
화합물 (35)에 대해 설명된 절차와 유사하게 화합물 (36)을 제조하였다.
LC/MS: 811.4 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.78 (br, 1H), 11.16 (s, 1H), 8.82 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.91 - 7.87 (m, 3H), 7.64 (s, 1H), 7.58 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.49 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 7.30 - 7.25 (m, 1H), 7.28 - 7.22 (m, 3H), 7.07 - 7.02 (m, 1H), 5.18 - 5.11 (m, 1H), 4.39 - 4.14 (m, 2H), 3.90 - 3.80 (m, 1H), 3.07 - 2.81 (m, 2H), 2.70 - 2.58 (m, 2H), 2.43 - 2.31 (m, 2H), 2.15 - 2.02 (m, 3H), 1.78 - 1.61 (m, 4H), 1.60 - 1.30 (m, 3H), 1.30 - 1.03 (m, 2H).
실시예 37: 5-(4-(3-(2-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)사이클로부틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 37)의 제조
단계 1: 3-(2-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)사이클로부탄-1-온의 제조
[0182] 실온으로 교반된 DMF(10 ml) 중 (3-옥소사이클로부틸)아세트산(250 mg, 1.95 mmol)의 용액에 HATU(890 mg, 2.34 mmol), DIEA(756 mg, 5.85 mmol) 및 (2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-4-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(944 mg, 1.95 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 물(40 mL)에 붓고, EtOAc(50 mLХ 2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 플래시 크로마토그래피(DCM/MeOH= 10:1)로 정제하여 황색 고체로서 원하는 생성물(1 g, 91.79%)을 제공하였다. LC/MS: 558.0 [M+H]+.
단계 2: 5-(4-(3-(2-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)사이클로부틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온의 제조
[0183] 실온으로 교반된 MeOH/DMF/AcOH(8 mL, 4 mL, 0.5 mL) 중 3-{2-[4-({5-[(2-클로로-4-페녹시페닐)카르보닐]-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일}아미노)피페리딘-1-일]-2-옥소에틸}사이클로부탄-1-온(1 g, 1.79 mmol)의 용액에 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-1,3-디온(678 mg, 1.79 mmol) 및 NaBH3CN(169 mg, 2.685 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 60℃에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 플래시 크로마토그래피(DCM/MeOH= 10:1)로 정제하여 황색 고체로서 원하는 생성물(290 mg, 18.44%)을 제공하였다. LC/MS: 884.1 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.76 (s, 1H), 11.09 (s, 1H), 10.1 (br, 1H), 8.83 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.85 - 7.72 (m, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.58 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.48 (t, J= 8.4 Hz, 2H), 7.35 - 7.30 (m, 1H), 7.26 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 7.2-7.16 (m, 3H), 7.03 (dd, J= 8.4, 2.4 Hz, 1H), 5.18 - 5.05 (m, 1H), 4.40 - 4.30 (m, 1H), 4.19 - 4.13 (m, 1H), 3.86 - 3.82 (m, 1H), 3.48 - 3.39 (m, 3H), 3.29 - 3.25 (m, 2H), 3.05 - 2.80 (m, 4H), 2.64 - 2.53 (m, 3H), 2.43 - 2.30 (m, 4H), 2.27 - 2.21 (m, 2H), 2.18 - 1.95 (m, 4H), 1.61 - 1.48 (m, 2H), 1.40 - 1.35 (m, 1H).
실시예 38: 4-(8-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-8-옥소옥트-1-인-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 38)의 제조
화합물 (35)에 대해 설명된 절차와 유사하게 화합물 (38)을 제조하였다.
LC/MS: 825.5 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.77 (br, 1H), 11.15 (s, 1H), 8.83 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.87 - 7.81 (m, 3H), 7.63 (s, 1H), 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.52 - 7.46 (m, 2H), 7.26 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.22 - 7.17 (m, 3H), 7.02 (dd, J = 8.5, 2.3 Hz, 1H), 5.15 (dd, J = 12.9, 5.3 Hz, 1H), 4.35 - 4.20 (m, 1H), 4.18 - 4.13 (m, 1H), 3.85 (d, J = 14.3 Hz, 1H), 3.32 - 3.26 (m, 1H), 3.05 - 2.98 (m, 1H), 2.92 - 2.84 (m, 1H), 2.63 - 2.53 (m, 3H), 2.42 - 2.32 (m, 3H), 2.09 - 2.01 (m, 3H), 1.64 - 1.51 (m, 6H), 1.44 - 1.29 (m, 2H).
실시예 39: 3-(4-(9-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-9-옥소논-1-인-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(화합물 39)의 제조
화합물 (35)에 대해 설명된 절차와 유사하게 화합물 (39)을 제조하였다.
LC/MS: 825.5 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.76 (br, 1H), 11.00 (br, 1H), 9.00 - 8.75 (m, 1H), 8.26 (br, 1H), 7.72 - 7.46 (m, 7H), 7.35 - 7.16 (m, 4H), 7.12 - 7.04 (m, 1H), 5.23 - 5.10 (m, 1H), 4.51 - 4.42 (m, 1H), 4.39 - 4.27 (m, 2H), 4.22 - 4.12 (m, 1H), 3.89 - 3.77 (m, 1H), 3.01 - 2.88 (m, 2H), 2.76 - 2.65 (m, 2H), 2.38 - 2.33 (m, 2H), 2.04 (s, 3H), 1.70 - 1.30 (m, 13H).
실시예 40: 3-(4-(8-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-8-옥소옥트-1-인-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(화합물 40)의 제조
화합물 (35)에 대해 설명된 절차와 유사하게 화합물 (40)을 제조하였다.
LC/MS: 811.5 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.76 (br, 1H), 11.00 (s, 1H), 8.82 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.70 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 7.64 (t, J = 3.4 Hz, 2H), 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.54 - 7.43 (m, 3H), 7.28 - 7.24 (m, 1H), 7.20 - 7.18 (m, 2H), 7.02 (dd, J = 8.5, 2.4 Hz, 1H), 5.19 - 5.10 (m, 1H), 4.53 - 4.45 (m, 1H), 4.39 - 4.25 (m, 2H), 4.20 - 4.15 (m, 1H), 3.90 -3.81 (m, 1H), 3.29 - 3.25 (m, 1H), 3.04 - 2.85 (m, 3H), 2.70 - 2.66 (m, 1H), 2.62 - 2.54 (m, 2H), 2.40 - 2.33 (m, 2H), 2.10 - 1.98 (m, 3H), 1.63 - 1.36 (m, 8H), 1.29 - 1.21 (m, 1H).
실시예 41: 3-(4-(7-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-7-옥소헵트-1-인-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(화합물 41)의 제조
화합물 (35)에 대해 설명된 절차와 유사하게 화합물 (41)을 제조하였다.
LC/MS: 798.3[M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.79 (s, 1H), 11.1-10.9(m, 1H), 8.82 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.70 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.63 (t, J = 3.6 Hz, 2H), 7.58 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.54 - 7.43 (m, 3H), 7.30-7.23 (m, 1H), 7.23 - 7.14 (m, 3H), 7.02 (dd, J = 8.4, 2.4 Hz, 1H), 5.15 (dd, J = 13.2, 4.6 Hz, 1H), 4.50-4.45 (m, 1H), 4.35-4.28 (m, 2H), 4.20-4.10 (m ,1H), 3.89-3.80 (m, 1H), 3.65-3.57 (m, 1H), 3.33-3.25 (m, 1H), 3.15-3.08 (m, 1H), 3.02 - 2.87 (m, 2H), 2.62 - 2.53 (m, 2H), 2.42 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.09 - 1.97 (m, 3H), 1.72 - 1.60 (m, 3H), 1.55-1.46 (m, 1H), 1.41 - 1.31 (m, 2H).
실시예 42 : (S)-3-(5-(4-(3-(2-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)사이클로부틸)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(화합물 42)의 제조
단계 1: 3-(2-디아조아세틸)사이클로부탄-1-온의 제조
[0184] DCM(10 mL) 중 3-옥소사이클로부탄-1-카르복실산(2 g, 17.54 mmol)의 용액에 SOCl2(3.84 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 20℃에서 교반하였다. 혼합물을 감압하에서 증발 건조시켰다. THF(5 mL) 및 아세토니트릴(5 mL) 중 잔여물의 용액에 (디아조메틸)트리메틸실란(헥산 중 2 M, 17.5 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 동안 20℃에서 교반한 후, 진공하에서 증발시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, PE/EA = 2:1)로 정제하여 황색 오일로서 표제 화합물(1.6 g, 52.8% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 139.1 [M+H]+.
단계 2: 2-(3-옥소사이클로부틸)아세트산의 제조
[0185] THF(30 mL) 및 물(15 mL) 중 3-(2-디아조아세틸)사이클로부탄-1-온(1.6 g, 9.27 mmol)의 용액에 AgNO3(1.87 g, 11.12 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 동안 실온에서 교반한 후, 진공하에서 증발시켜 THF를 제거하였다. 수성상을 EA(20 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 증발시켜 황색 오일로서 표제 화합물(1.0 g, 76.4% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 127.1 [M-H]-.
단계 3: 3-(2-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)사이클로부탄-1-온의 제조
[0186] 2-(3-옥소사이클로부틸)아세트산(50 mg, 90% 순도, 0.35 mmol), (2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-4-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(207.8 mg, 0.43 mmol), HATU(177.9 mg, 0.47mmol), N,N-디이소프로필에틸아민(75.6 mg, 0.59mmol) 및 DMF(10 mL)의 용액을 4시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 증발시키고, MeOH:DCM(1:10)으로 프렙-TLC에 의해 정제하여 표제 화합물(100 mg, 51%)을 제공하였다. LC/MS: 557.6 [M+H]+.
단계 4: (S)-3-(5-(4-(3-(2-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)사이클로부틸)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온의 제조
[0187] DMF/MeOH/HOAc(16 mL, 5:10:1) 중 3-(2-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)사이클로부탄-1-온(100 mg, 0.18 mmol), (S)-3-(1-옥소-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(87.5 mg, 0.18 mmol) 및 소듐 시아노보로하이드라이드(21.6 mg, 0.36 mmol)의 용액을 밤새 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 증발시키고, MeOH:DCM = 1:10으로 프렙-TLC에 의해 정제하여 표제 화합물(40 mg, 25.6%)을 제공하였다. LC/MS: 869.5 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.77 (s, 1H), 10.96 (s, 1H), 8.83 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.51 - 7.46 (m, 2H), 7.26 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.21 - 7.16 (m, 3H), 7.08 - 7.01 (m, 2H), 5.06 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 4.37 - 4.13 (m, 4H), 4.00 (s, 1H), 3.87 - 3.79 (m, 1H), 3.71-3.34 (m, 2H), 3.31 - 3.13 (m, 4H), 3.06 - 2.85 (m, 3H), 2.80 - 2.52 (m, 2H), 2.49 - 2.46 (m, 1H), 2.37 (s, 4H), 2.23 (s, 2H), 2.13 - 1.89 (m, 5H), 1.51 (br, 2H), 1.41 - 1.34 (m, 1H), 1.24 (s, 1H).
실시예 43: 5-(4-(3-(2-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)사이클로부틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 43)의 제조
[0188] 화합물 (42)의 제조에서 설명된 것과 동일한 방법을 사용하여 화합물 (43)을 제조하였다. LC/MS: 884.4 [M+H] +
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.81 - 12.75 (m, 1H), 11.09 (s, 1H), 8.92 - 8.86 (m, 1H), 8.33 - 8.25 (m, 1H), 7.67 - 7.63 (m, 2H), 7.59 - 7.42 (m, 3H), 7.35 - 7.30 (m, 1H), 7.29 - 7.11 (m, 5H), 7.07 - 7.01 (m, 1H), 5.10 - 5.06 (m, 1H), 4.28 - 4.20 (m, 1H), 3.79 - 3.35 (m, 8H), 2.94 - 2.84 (m, 1H), 2.68 - 2.55 (m, 3H), 2.46 - 2.08 (m, 9H), 2.05 - 1.80 (m, 3H), 1.78 - 1.72 (m, 3H), 1.27 - 1.20 (M, 1H).
실시예 44: 5-(4-(2-(1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)에틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 44)의 제조
단계 1: 2-(1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)아세트알데하이드의 제조
[0189] THF/H2SO4(10% aq)(30 mL, THF/H2SO4= 1/1) 중 (2-클로로-4-페녹시페닐)(4-((4-(4-(2,2-디메톡시에틸)피페리딘-1-일)-3-플루오로페닐)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(250 mg, 0.4 mmol)의 용액을 1시간 동안 70℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 수산화나트륨 용액(2 M)으로 pH=10으로 조정하고, EtOAc(15 mLХ3)로 추출하였다. 유기상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 황색 고체로서 원하는 생성물(200 mg, 82%)을 제공하였다. LC/MS:583.[M+1]+.
단계 2: 5-(4-(2-(1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)에틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온의 제조
[0190] DCM(20 mL) 중 2-(1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)아세트알데하이드(100 mg, 0.17 mmol), 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-1,3-디온(64 mg, 0.17 mmol), TEA(52 mg, 0.51 mmol) 및 MgSO4(408 mg, 3.4mmol)의 용액을 30분 동안 실온에서 질소하에서 교반하였다. 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(72 mg, 0.34 mmol)를 0℃에서 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과시키고, 물로 추출하였다. 유기상을 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 Prep-TLC(MeOH:DCM =1:10)로 정제하여 황색 고체로서 원하는 생성물(50 mg, 32%)을 제공하였다. LC/MS: 910.4[M+1]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 13.06 (br, 1H), 11.12 (d, J = 18.0 Hz, 2H), 8.46 (s, 1H), 8.11 - 8.02 (m, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.74 - 7.61 (m, 2H), 7.54 - 7.45 (m, 2H), 7.38 - 7.18 (m, 6H), 7.14 - 7.02 (m, 2H), 5.08 (dd, J = 12.8, 5.3 Hz, 1H), 3.52 - 3.37 (m, 2H), 3.36 - 3.28 (m, 7H), 2.95 - 2.82 (m, 1H), 2.71 - 2.53 (m, 4H), 2.45 - 2.27 (m, 3H), 2.04 - 1.97 (m, 1H), 1.85 - 1.73 (m, 2H), 1.55 - 1.3.0 (m, 5H), 1.28 - 1.20 (m, 1H).
실시예 45: (S)-3-(5-(4-(2-(1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)에틸)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(화합물 45)의 제조
[0191] DCM(20 mL) 중 2-(1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)아세트알데하이드(100 mg, 0.17 mmol), (S)-3-(1-옥소-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(83 mg, 0.17 mmol), TEA(52 mg, 0.51 mmol) 및 MgSO4(408 mg, 3.4 mmol)의 용액을 30분 동안 실온에서 질소하에서 교반하였다. 소듐 트리아세톡시 보로하이드라이드(72 mg, 0.34 mmol)를 0℃에서 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과시켰다. 유기층을 물로 세척하고, 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 Prep-TLC(MeOH: DCM =1:10)로 정제하여 황색 고체로서 원하는 생성물(30 mg, 17.6%)을 제공하였다. LC/MS: 896.4[M+1]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 13.06 (br, 1H), 11.14 (s, 1H), 10.96 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.05 (dd, J = 15.0, 2.1 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.64 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.65 - 7.39 (m, 3H), 7.35 - 7.18 (m, 5H), 7.12 - 7.02 (m, 4H), 5.06 (dd, J = 13.2, 5.0 Hz, 1H), 4.39 - 4.19 (m, 2H), 3.35 - 3.25 (m, 7H), 2.94 - 2.85 (m, 1H), 2.70 - 2.53 (m, 4H), 2.49 - 2.25 (m, 4H), 1.95 - 1.85 (m, 1H), 1.80 - 1.75 (m, 2H), 1.62 - 1.30 (m, 5H), 1.25 - 1.15(m,1H).
실시예 46: (S)-3-(5-(4-((1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)메틸)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(화합물 46)의 제조
단계 1: 1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-카르브알데하이드의 제조
[0192] THF/H2SO4(10% aq)(20 mL, 1:1) 중 (2-클로로-4-페녹시페닐)(4-((4-(4-(디메톡시메틸)피페리딘-1-일)-3-플루오로페닐)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(200 mg, 0.32 mmol)의 용액을 1시간 동안 70℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 수산화나트륨 용액(2 M)으로 pH=10으로 조정하고, EtOAc(100 mL)로 추출하였다. 유기상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에서 증발시켜 황색 고체로서 원하는 생성물(150 mg, 82% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 570.1 [M+1]+.
단계 2: (S)-3-(5-(4-((1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)메틸)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온의 제조
[0193] DCM(10 mL) 중 1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-카르브알데하이드(70 mg, 0.12 mmol), (S)-3-(1-옥소-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(60 mg, 0.12 mmol), TEA(24 mg, 0.24 mmol) 및 MgSO4(289 mg, 2.4 mmol)의 용액을 30분 동안 실온에서 질소하에서 교반하였다. 0℃에서 용액에 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(64 mg, 0.3 mmol)를 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과시켰다. 유기층을 물로 세척하고, DCM(50 mL)으로 추출하여 미정제 생성물을 제공하였고, 이를 Prep-TLC(PE:EA = 5:1)로 정제하여 황색 고체로서 원하는 생성물(20 mg, 19% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 882.0[M+1]+
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 13.05 (br, 1H), 11.14 (s, 1H), 10.96 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.04 (d, J = 16.6 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.65 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.59 - 7.46 (m, 3H), 7.39 - 7.14 (m, 5H), 7.11 - 7.03 (m, 3H), 5.05 (dd, J = 13.4, 5.1 Hz, 1H), 4.34 (d, J = 17.0 Hz, 1H), 4.21 (d, J = 16.9 Hz, 1H), 3.30 - 3.27 (m, 6H), 2.96 - 2.86 (m, 1H), 2.71 - 2.53 (m, 4H), 2.46 - 2.31 (m, 3H), 2.26 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 2.02 - 1.92 (m, 1H), 1.88 - 1.78 (m, 2H), 1.76 - 1.62 (m, 2H), 1.38 - 1.19 (m, 3H).
실시예 47: 5-(4-((1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)메틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 47)의 제조
[0194] DCM(10 mL) 중 1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-카르브알데하이드(70 mg, 0.12 mmol), 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-1,3-디온(45 mg, 0.12 mmol), TEA(24 mg, 0.24 mmol) 및 MgSO4(289 mg, 2.4 mmol)의 용액을 30분 동안 실온에서 질소하에서 교반하였다. 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(64 mg, 0.3 mmol)를 0℃에서 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과시켰다. 유기층을 물로 세척하고, 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 Prep-TLC(MeOH: DCM = 1:10)로 정제하여 황색 고체로서 원하는 생성물(20 mg, 18%)을 제공하였다. LC/MS: 898.1[M+1]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 13.05 (s, 1H), 11.14 (s, 1H), 11.09 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.08 - 8.01 (m, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.72 - 7.61 (m, 2H), 7.54 - 7.45 (m, 2H), 7.37 - 7.18 (m, 6H), 7.13 - 7.02 (m, 2H), 5.08 (dd, J = 13.0, 5.4 Hz, 1H), 3.50 - 3.41 (m, 3H), 3.33 - 3.29 (m, 2H), 2.93 - 2.84 (m, 1H), 2.75 - 2.58 (m, 3H), 2.57 - 2.52 (m, 2H), 2.47 - 2.30 (m, 2H), 2.29 - 2.20 (m, 2H), 2.10 - 1.92 (m, 2H), 1.90 - 1.64 (m, 4H), 1.39 - 1.22 (m, 3H).
실시예 48: 5-(4-(3-(2-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)아제티딘-1-일)피페리딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 48)의 제조
단계 1: 벤질 4-(3-(2-(tert-부톡시)-2-옥소에틸)아제티딘-1-일)피페리딘-1-카르복실레이트의 제조
[0195] 실온에서 교반된 DCM(5 mL) 중 tert-부틸 2-(아제티딘-3-일)아세테이트(200 mg, 0.96 mmol)의 용액에 Et3N(194 mg, 1.92 mmol), MgSO4(300 mg) 및 [3-(4-옥소피페리딘-1-일)페닐]메틸 포르메이트(224 mg, 0.96 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반한 후, NaBH(OAc)3(406 mg, 1.92 mmol)를 천천히 첨가하였다(30분 당 0.5 eq). 반응 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 여과시키고, 여과액을 압력하에서 농축시켰다. 잔여물을 플래시 크로마토그래피(MeOH/DCM= 1:10)로 정제하여 무색 오일로서 원하는 생성물(255 mg, 68.37%)을 제공하였다. LC/MS: 388.8 [M+H]+.
단계 2: tert-부틸 2-(1-(피페리딘-4-일)아제티딘-3-일)아세테이트의 제조
[0196] 실온에서 교반된 MeOH(5 mL) 중 tert-부틸 2-[1-(1-{3-[(포르밀옥시)메틸]페닐}피페리딘-4-일)아제티딘-3-일]아세테이트(255 mg, 0.66 mmol)의 용액에 Pd/C(70 mg, 0.66 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 3시간 동안 H2 하에서 실온에서 교반하였다. 혼합물을 여과시키고, 여과액을 압력하에서 농축시켜 백색 고체로서 원하는 생성물(160 mg, 수율 = 95.3%)을 제공하였다. LC/MS: 255.1 [M+H]+.
단계 3: tert-부틸 2-(1-(1-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페리딘-4-일)아제티딘-3-일)아세테이트의 제조
[0197] 실온에서 교반된 NMP(5 mL) 중 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌-1,3-디온(140 mg, 0.55 mmol)의 용액에 tert-부틸 2-[1-(피페리딘-4-일)아제티딘-3-일]아세테이트(140 mg, 0.55 mmol) 및 DIEA(142 mg, 1.1 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 12시간 동안 90℃에서 교반하였다. 혼합물을 물(25 mL)에 붓고, EtOAc(30 mL Х 2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 플래시 크로마토그래피(MeOH/DCM= 1:10)로 정제하여 황색 고체로서 원하는 생성물(70 mg, 수율 = 25.4%)을 제공하였다. LC/MS: 510.8 [M+H]+.
단계 4: 2-(1-(1-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페리딘-4-일)아제티딘-3-일)아세트산의 제조
[0198] TFA/DCM(1:5, 6 mL) 중 tert-부틸 2-(1-{1-[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]피페리딘-4-일}아제티딘-3-일)아세테이트(70 mg, 0.14 mmol)의 용액을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 용액을 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물(80 mg, 미정제)을 제공하였다. LC/MS: 455.1 [M+H]+.
단계 5: 5-(4-(3-(2-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)아제티딘-1-일)피페리딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온의 제조
[0199] 실온에서 교반된 DMF(5 ml) 중 (1-{1-[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌-5-일]피페리딘-4-일}아제티딘-3-일)아세트산(70 mg, 미정제, 0.14 mmol)의 용액에 HOBt(22 mg, 0.156 mmol), EDCI(30 mg, 0.156 mmol), NMM(53 mg, 0.52 mmol) 및 N-{5-[(2-클로로-4-페녹시페닐)카르보닐]-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일}피페리딘-4-아민 하이드로클로라이드(63 mg, 0.14 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 물(25 mL)에 붓고, EtOAc(30 mLХ2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 Prep-TLC(MeOH/DCM= 1:10)로 정제하여 황색 고체로서 원하는 생성물(30 mg, 수율 = 24.2%)을 획득하였다. LC/MS: 884.1 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.75 (br, 1H), 11.09 (s, 1H), 8.83 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.66-7.61 (m, 2H), 7.58 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.47 (t, J= 8.0 Hz, 2H), 7.30 (s, 1H), 7.28 - 7.14 (m, 5H), 7.02 (dd, J= 8.8, 2.4 Hz, 1H), 5.09 - 5.04 (m, 1H), 4.40 - 4.30 (m, 1H), 4.18 - 4.13 (m, 1H), 3.95 - 3.73 (m, 3H), 3.13 - 3.05 (m, 2H), 3.03 - 2.95 (m, 1H), 2.94 - 2.86 (m, 1H), 2.84 - 2.73 (m, 2H), 2.70 - 2.65 (m, 2H), 2.62 - 2.54 (m, 2H), 2.34 - 2.21 (m, 2H), 2.10 - 1.95 (m, 4H), 1.74 - 1.64 (m, 2H), 1.58 - 1.45 (m, 2H), 1.43 - 1.30 (m, 2H), 1.22 - 1.15 (m, 2H).
실시예 49: (S)-N-(4-(4-아미노-1-(4-(4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(화합물 49)의 제조
단계 1: N-(4-브로모벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0200] N,N-디메틸포름아미드(300 mL) 중 5-플루오로-2-메톡시-벤조산(30 g, 176 mmol, 1.0 eq),　O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트(80.5 g, 212 mmol, 1.2 eq) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(45.6 g, 353 mmol, 2 eq)의 용액을 30분 동안 25℃에서 교반하였다. (4-브로모페닐)메탄아민(32.8 g, 176 mmol, 1.0 eq)을 용액에 첨가하고, 혼합물을 12시간 동안 25℃에서 교반하였다. 용액을 물(500 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(500 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기상을 염수(500 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켰다. 잔여물을 용리액으로서 석유 에테르 중 20% - 30% 에틸 아세테이트로 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 고체로서 원하는 화합물(56 g, 94% 수율)을 제공하였다.
1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.26 (br s, 1H), 7.94 (q, J = 2.0 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.22 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.16 - 7.12 (m, 1H), 6.94 - 6.91 (m, 1H), 4.61 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 3.91 (s, 3H).
단계 2: 5-플루오로-2-메톡시-N-[[4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페닐]메틸]벤즈아미드의 제조
[0201] 디옥산(500 mL) 중 N-[(4-브로모페닐)메틸]-5-플루오로-2-메톡시-벤즈아미드(46 g, 136 mmol, 1.0 eq) 및 4,4,5,5-테트라메틸-2-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1,3,2-디옥사보롤란(51.8 g, 204 mmol, 1.5 eq)의 용액에 포타슘 아세테이트(26.7 g, 272 mmol, 2.0 eq)　및 1,1-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II)(9.95 g, 13.6 mmol, 0.1 eq)을 첨가하였다.　현탁액을 진공하에서 탈기시키고, 질소로 3회 퍼징하였다. 혼합물을 12시간 동안 90℃에서 질소하에서 교반하였다. 용액을 물(2 L)에 붓고, 에틸 아세테이트(1 L Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기상을 염수(2 L)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 농축시켰다. 조합된 미정제 생성물을 용리액으로서 석유 에테르 중 20% - 30% 에틸 아세테이트로 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 미정제 생성물을 석유 에테르(200 mL)로 분쇄시키고, 여과시키고, 필터 케이크를 진공하에서 건조시켜 백색 고체로서 원하는 화합물(50 g, 79% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 386.2 [M+H]+.
단계 3: N-(4-(4-아미노-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0202] 디옥산(200 mL)　및 물(40 mL) 중 5-플루오로-2-메톡시-N-[[4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페닐]메틸]벤즈아미드(10.0 g, 26.0 mmol, 1.0 eq), 3-아이오도-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(6.78 g, 26.0 mmol, 1.0 eq), 1,1-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II)(3.80 g, 5.19 mmol, 0.2 eq), 인산 칼륨(16.5 g, 77.9 mmol, 3.0 eq)의 혼합물을 탈기시키고, 질소로 3회 퍼징하고, 혼합물을 질소 분위기 하에서 60시간 동안 110℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(1 L)와 물(1　L) 사이에 분배하였다. 유기상을 분리시키고, 염수(1 L)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켰다. 잔여물을 아세토니트릴(50 mL) 및 에틸 아세테이트(50 mL)로 순차적으로 분쇄시켰다. 고체를 수집하고, 진공하에서 건조시켜 밝은 황색 고체로서 원하는 화합물(6.0 g, 59% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 393.1 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 13.59 (s, 1H), 8.86 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.64 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.57 - 7.47 (m, 3H), 7.37 - 7.31 (m, 1H), 7.19 (dd, J = 4.4, 9.2 Hz, 1H), 4.59 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 3.90 (s, 3H).
단계 4: N-[[4-[4-아미노-1-[4-[4-(디메톡시메틸)-1-피페리딜]-3-플루오로-페닐]피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일]페닐]메틸]-5-플루오로-2-메톡시-벤즈아미드의 제조
[0203] 디메틸 설폭사이드(150 mL) 중 N-[[4-(4-아미노-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)페닐]메틸]-5-플루오로-2-메톡시-벤즈아미드(12.0 g, 30.6 mmol, 1.0 eq) 및 4-(디메톡시메틸)-1-(2-플루오로-4-아이오도-페닐)피페리딘(11.6 g, 30.6 mmol, 1.0 eq)의 용액에 요오드화 구리(3.24 g, 17.0 mmol, 0.55 eq), 2-(디메틸아미노)아세트산(3.50 g, 33.98 mmol, 1.1 eq) 및 탄산나트륨(7.20 g, 68.0 mmol, 2.2 eq)을 첨가하였다. 현탁액을 진공하에서 탈기시키고, 질소로 3회 퍼징하였다. 혼합물을 12시간 동안 110℃에서 질소하에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(800 mL)와 물(2.0 L) 사이에 분배하였다. 수성층을 에틸 아세테이트(700 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(500 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 미정제 생성물(15 g)을 제공하였다. 미정제 생성물을 환류하면서 에틸 아세테이트(420 mL)에 용해시키고, 용액을 주위 온도로 냉각시킨 후, 48시간 동안 냉장고(약 5℃)에 보관하였다. 현탁액을 여과시키고, 습윤 케이크를 저온 에틸 아세테이트(20 mL)로 세척하여 순수한 생성물(5.28 g)을 제공하였다. 모액을 농축시키고, 잔여물을 에틸 아세테이트(100 mL)로부터 재결정화시켜 회색 고체로서 또 다른 순수한 생성물(1.7 g)(총 6.98 g, 36% 수율)의 수확물을 제공하였다. LC/MS: 644.2 [M+H]+. 1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.47 (s, 1H), 8.38 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 7.99 (dd, J = 3.2, 9.2 Hz, 1H), 7.97 - 7.93 (m, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.75 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.56 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.22 - 7.14 (m, 1H), 7.08 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 6.97 (dd, J = 4.4, 8.8 Hz, 1H), 5.60 (br s, 2H), 4.78 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 4.12 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.53 (d, J = 12.0 Hz, 2H), 3.39 (s, 6H), 2.69 (t, J = 11.6 Hz, 2H), 1.88 (d, J = 12.0 Hz, 2H), 1.82 - 1.73 (m, 1H), 1.64 - 1.48 (m, 2H).
단계 5: N-(4-(4-아미노-1-(3-플루오로-4-(4-포르밀피페리딘-1-일)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0204] THF(20 mL) 및 H2SO4(2 M, 20 ml) 중 N-(4-(4-아미노-1-(4-(4-(디메톡시메틸)피페리딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(1.03 g, 1.60 mmol)의 용액을 1시간 동안 70℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM(50 mL)으로 희석시키고, 수성 수산화나트륨(2 M)을 적가하여 pH를 8로 조정하였다. 유기층을 진공하에서 증발시켜 황색 고체로서 원하는 생성물(900 mg, 96% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 598.1 [M+1]+.
단계 6: (S)-N-(4-(4-아미노-1-(4-(4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0205] DCM(60 mL) 중 N-(4-(4-아미노-1-(3-플루오로-4-(4-포르밀피페리딘-1-일)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(900 mg 1.51 mmol), (S)-3-(1-옥소-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(1.46 g, 3.02 mmol) 및 트리에틸아민(325 mg, 3.21 mmol)의 용액을 1시간 동안 실온에서 공기 중에서 교반하였다. 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(956 mg, 4.53 mmol)를 0℃에서 용액에 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반한 후, 물(50 mL)과 DCM(60 mL) 사이에 분배하였다. 유기상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에서 증발시켰다. 미정제 생성물을 MeOH로 분쇄시켜 백색 고체로서 생성물(1.0 g, 1.10 mmol, 73% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 910.4 [M+1]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.96 (s, 1H), 8.90 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.05 - 7.99 (m, 2H), 7.74 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.57 - 7.50 (m, 4H), 7.37 - 7.32 (m, 1H), 7.25 - 7.18 (m, 2H), 7.07 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 5.05 (dd, J = 13.1, 4.9 Hz, 1H), 4.61 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 4.33 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 4.20 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.42 (d, J = 10.4 Hz, 2H), 3.30 (br s, 4H), 2.96 - 2.85 (m, 1H), 2.77 - 2.67 (m, 2H), 2.64 - 2.52 (m, 5H), 2.43 - 2.30 (m, 1H), 2.24 (br d, J = 6.4 Hz, 2H), 2.01 - 1.66 (m, 4H), 1.38 - 1.25 (m, 2H).
실시예 50: N-(4-(4-아미노-1-(4-(4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(화합물 50)의 제조
[0206] DCM(5.0 mL) 중 N-[(4-{4-아미노-1-[3-플루오로-4-(4-포르밀피페리딘-1-일)페닐]피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일}페닐)메틸]-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(60 mg, 0.1 mmol), 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-1,3-디온 하이드로클로라이드(57 mg, 0.15 mmol) 및 트리에틸아민(30 mg, 0.3 mmol)의 용액을 실온에서 공기 중에서 교반하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 이후, 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(53 mg, 0.25 mmol)를 0℃에서 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에서 증발시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 Prep-TLC(DCM:MeOH=10:1)로 정제하여 백색 고체로서 원하는 생성물(31.8 mg, 0.034 mmol, 34% 수율)을 획득하였다. LC/MS: 924 [M+1]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ = 11.12 (s, 1H), 9.41 (s, 1H), 8.92 (t, J=6.2, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.04 (dd, J=14.0, 2.4, 1H), 7.98 (d, J=8.9 Hz, 1H), 7.76 (dd, J=19.5, 8.3 Hz, 3H), 7.53 (dd, J=9.2, 3.4 Hz, 3H), 7.39 - 7.33 (m, 2H), 7.20 (dd, J=9.2, 4.3 Hz, 2H), 5.11 (dd, J=13.1, 5.1 Hz, 1H), 4.60 (s, 2H), 4.23 (m, 2H), 3.92 (m, 8H), 3.64 (s, 2H), 3.45 (d, J=10.4, 2H), 3.14-3.22 (m, 3H), 2.84-2.95 (m, 2H), 2.78 (t, J=11.6 Hz, 2H), 1.85-2.06 (m, 3H), 1.33-1.47 (m, 2H).
실시예 51: (S)-N-(4-(4-아미노-1-(4-(4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-6-플루오로-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(화합물 51)의 제조
[0207] DCM(5.0 mL) 중 N-[(4-{4-아미노-1-[3-플루오로-4-(4-포르밀피페리딘-1-일)페닐]피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일}페닐)메틸]-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(60 mg, 0.1 mmol), (S)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로-6-(피페라진-1-일)이소인돌린-1,3-디온 벤젠설폰산(76 mg, 0.15 mmol) 및 트리에틸아민(30 mg, 0.3 mmol)의 용액을 실온에서 공기 중에서 교반하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 이후, 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(53 mg, 0.25 mmol)를 0℃에서 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에서 증발시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 Prep-TLC(DCM:MeOH=10:1)로 정제하여 백색 고체로서 원하는 생성물(29.7 mg, 0.032 mmol, 32% 수율)을 획득하였다. LC/MS: 927 [M+1]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ = 11.01 (s, 1H), 9.45 (s, 1H), 8.92 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.95-8.20 (m, 2H), 7.74 (d, J=7.2 Hz, 2H), 7.53 (m, 3H), 7.46 - 7.04 (m, 4H), 5.10 (br d, J=9.0 Hz, 1H), 4.61 (d, J=4.9 Hz, 2H), 4.34 (m, 3H), 3.92 (m, 5H), 3.46 (m, 3H), 3.15 - 3.35 (m, 6H), 2.85 - 2.96 (m, 2H), 2.70 - 2.79 (m, 3H), 2.11 - 1.69 (m, 6H).
실시예 52: (S)-N-(4-(4-아미노-1-(1-(5-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(화합물 52)의 제조
단계 1: N-(4-(4-아미노-1-(1-(5-포르밀피리딘-2-일)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0208] 실온에서 교반된 DMF(10 mL) 중 N-(4-(4-아미노-1-(1-(5-포르밀피리딘-2-일)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(200 mg, 0.42 mmol)의 용액에 6-브로모니코틴알데하이드(156 mg, 0.84 mmol) 및 K2CO3(116 mg, 0.84 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 3시간 동안 100℃에서 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물(40 mL)에 붓고, EA(50 mL x 2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 플래시 크로마토그래피(DCM/MeOH= 10:1)로 정제하여 원하는 생성물(100 mg, 41.0%)을 제공하였다. LC/MS: 581.0 [M+H]+.
단계 2: (S)-N-(4-(4-아미노-1-(1-(5-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일) 벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0209] (S)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로-6-(피페라진-1-일)이소인돌린-1,3-디온 벤젠설폰산(63 mg, 0.13 mmol) 및 Et3N(13 mg, 0.13 mmol)을 MeOH(4 mL)에 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 실온에서 교반하였다. 이후, DCM(4 mL), HOAc(155 mg, 2.58 mmol) 및 NaBH3CN(32 mg, 0.52 mmol) 중 N-(4-(4-아미노-1-(1-(5-포르밀피리딘-2-일)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(75 mg, 0.13 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 2일 동안 실온에서 교반하였다. 물(10 mL)을 첨가하여 반응을 켄칭시키고, EA(15 mL x 3)로 추출하였다. 유기층을 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 Prep-HPLC(물(0.1% FA) 중 ACN(15-30%))로 정제하여 백색 고체로서 원하는 생성물(16 mg, 13%)을 제공하였다. LC/MS: 893 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.98 - 10.91 (m, 1H), 8.89 - 8.82 (m, 1H), 8.26 - 8.25 (m, 1H), 8.07 - 8.02 (m, 1H), 7.62 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.55 - 7.45 (m, 5H), 7.36 - 7.31 (m, 1H), 7.18 (dd, J = 9.1, 4.3 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 6.92 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 5.08 - 4.96 (m, 2H), 4.57 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 4.49 - 4.46 (m, 2H), 4.33 - 4.28 (m, 1H), 4.22 - 4.18 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.41 - 3.39 (m, 2H), 3.29 - 3.25 (m, 5H), 3.08 (t, J = 12.4 Hz, 2H), 2.94 - 2.85 (m, 1H), 2.62 - 2.52 (m, 4H), 2.40 - 2.30 (m, 1H), 2.18 - 2.06 (m, 2H), 2.10 - 1.92 (m, 3H).
실시예 53: (S)-N-(4-(4-아미노-1-(1-(4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)페닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(화합물 53)의 제조
단계 1: tert-부틸 4-(토실옥시)피페리딘-1-카르복실레이트의 제조
[0210] 실온에서 교반된 피리딘(20 mL) 중 tert-부틸 4-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(2 g, 9.94 mmol)의 용액에 TsCl(2.27 g, 11.93 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 물(80 mL)에 붓고, EA(100 mL x 2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 플래시 크로마토그래피(PE/EtOAc= 3:1)로 정제하여 원하는 생성물(2.2 g, 62%)을 제공하였다. LC/MS: 377.8 [M+Na]+.
단계 2: tert-부틸 4-(4-아미노-3-(4-((5-플루오로-2-메톡시벤즈아미도)메틸)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-카르복실레이트의 제조
[0211] 실온에서 교반된 DMF(2 mL) 중 tert-부틸 4-(토실옥시)피페리딘-1-카르복실레이트(2.2 g, 6.19 mmol)의 용액에 Cs2CO3(4.03 g, 12.38 mmol) 및 N-(4-(4-아미노-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(2.43 g, 6.19 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 12시간 동안 60℃에서 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물(75 mL)에 붓고, EA(100 mL x 2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 플래시 크로마토그래피(DCM/MeOH=10:1)로 정제하여 원하는 생성물(2.5 g, 70%)을 제공하였다. LC/MS: 575.8 [M+H]+.
단계 3: N-(4-(4-아미노-1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0212] TFA/DCM(1:5, 30 mL) 중 tert-부틸 4-(4-아미노-3-(4-((5-플루오로-2-메톡시벤즈아미도)메틸)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-카르복실레이트(2.5 g, 4.34 mmol)의 용액을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 용액을 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 DCM(100 mL)으로 용해시키고, 포화 탄산수소 나트륨 용액(100 mL x 2)으로 세척하였다. 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 원하는 생성물(1.5 g, 72%)을 제공하였다. LC/MS: 476.0 [M+H]+.
단계 4: N-(4-(4-아미노-1-(1-(4-포르밀페닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0213] 실온에서 교반된 DMF(10 mL) 중 N-({4-[4-아미노-1-(피페리딘-4-일)피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일]페닐}메틸)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(700 mg, 1.47 mmol)의 용액에 4-플루오로벤즈알데하이드(365 mg, 2.94 mmol) 및 K2CO3(406 mg, 2.94 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 3시간 동안 100℃에서 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물(40 mL)에 붓고, EA(50 mL x 2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 플래시 크로마토그래피(DCM/MeOH= 10:1)로 정제하여 원하는 생성물(300 mg, 35%)을 제공하였다. LC/MS: 580.0 [M+H]+.
단계 5: (S)-N-(4-(4-아미노-1-(1-(4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)페닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0214] (S)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로-6-(피페라진-1-일)이소인돌린-1,3-디온 벤젠설폰산(71 mg, 0.15 mmol) 및 Et3N(15 mg, 0.15 mmol)을 MeOH(4 mL)에 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 실온에서 교반하였다. 이후, DCM(4 mL), HOAc(176 mg, 2.93 mmol) 및 NaBH3CN(37 mg, 0.59 mmol) 중 N-(4-(4-아미노-1-(1-(4-포르밀페닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(85 mg, 0.15 mmol)를 첨가하였다. 용액을 2일 동안 실온에서 교반하였다. 물(10 mL)을 첨가하여 반응을 켄칭시키고, EA(3 x 15 mL)로 추출하였다. 유기층을 조합하고, 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 분취용 HPLC[물(0.1% FA) 중 ACN(20-40%)]로 정제하여 백색 고체로서 원하는 생성물(26 mg, 19%)을 제공하였다. LC/MS: 892 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.95 (s, 1H), 8.87 (t, J = 6.3 Hz, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.64 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.55 - 7.47 (m, 4H), 7.37 - 7.31 (m, 1H), 7.18 (dd, J = 9.1, 4.3 Hz, 3H), 7.10 - 6.94 (m, 4H), 5.09 - 5.03 (m, 1H), 4.93 - 4.89 (m, 1H), 4.58 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 4.35 - 4.10 (m, 2H), 3.95 - 3.80 (m, 5H), 3.48 - 3.35 (m, 2H), 3.31 - 3.19 (m, 3H), 3.15 - 2.85 (m, 4H), 2.63 - 2.53 (m, 4H), 2.44 - 2.34 (m, 2H), 2.47 - 2.25 (m, 2H), 2.09 - 1.95 (m, 3H).
실시예 54: (S)-N-(4-(4-아미노-1-(1-(5-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)아제티딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(화합물 54)의 제조
단계 1: tert-부틸 3-(토실옥시)아제티딘-1-카르복실레이트의 제조
[0215] DCM(20 mL) 중 tert-부틸 3-하이드록시아제티딘-1-카르복실레이트(1270 mg, 7.33 mmol), Et3N(1113 mg, 11.00 mmol) 및 TsCl(1677 mg, 8.80 mmol)의 용액을 밤새 N2 하에서 실온에서 교반하였다. 물(20 mL)을 첨가하여 반응을 켄칭시키고, DCM(20 mL x 3)으로 추출하였다. 유기상을 염수로 세척하고, 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 플래시 크로마토그래피(PE/EA = 9/1)로 정제하여 무색 오일로서 원하는 생성물(2.4 g, 100%)을 제공하였다. LC/MS: 328 [M+H]+.
단계 2: tert-부틸 3-(4-아미노-3-(4-((5-플루오로-2-메톡시벤즈아미도)메틸)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)아제티딘-1-카르복실레이트의 제조
[0216] DMF(10 mL) 중 tert-부틸 3-(토실옥시)아제티딘-1-카르복실레이트(667 mg, 2.04 mmol), N-(4-(4-아미노-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(800 mg, 2.04 mmol) 및 Cs2CO3(1993 mg, 6.12 mmol)의 현탁액을 밤새 80℃에서 교반하였다. 물(20 mL)을 첨가하여 반응을 켄칭시키고, EA(20 mL x 3)로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 플래시 크로마토그래피(DCM/MeOH = 97/3)로 정제하여 밝은 갈색 고체로서 원하는 생성물(200 mg, 17.9%)을 제공하였다. LC/MS: 548 [M+H]+.
단계 3: N-(4-(4-아미노-1-(아제티딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0217] DCM/TFA(8 mL, 3:1) 중 tert-부틸 3-(4-아미노-3-(4-((5-플루오로-2-메톡시벤즈아미도)메틸)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)아제티딘-1-카르복실레이트(200 mg, 0.36 mmol)의 용액을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 용액을 진공하에서 농축시켜 백색 고체로서 원하는 생성물(198 mg의 TFA 염, 100%)을 제공하였다. LC/MS: 448 [M+H]+.
단계 4: N-(4-(4-아미노-1-(1-(5-포르밀피리딘-2-일)아제티딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0218] DMF(4 mL) 중 N-(4-(4-아미노-1-(아제티딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(TFA 염, 198 mg, 0.36 mmol) 및 6-브로모니코틴알데하이드(136 mg, 0.73 mmol)의 용액에 K2CO3(151 mg, 1.11 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 밤새 80℃에서 교반하였다. 물(10 mL)을 첨가하여 반응을 켄칭시키고, EA(20 mL x 3)로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 플래시 크로마토그래피(DCM/MeOH = 75/15)로 정제하여 황색 고체로서 원하는 생성물(100 mg, 50%)을 제공하였다. LC/MS: 553 [M+H]+.
단계 5: (S)-N-(4-(4-아미노-1-(1-(5-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)아제티딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0219] (S)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로-6-(피페라진-1-일)이소인돌린-1,3-디온 벤젠설폰산(84 mg, 0.17 mmol) 및 Et3N(17 mg, 0.17 mmol)을 MeOH(4 mL)에 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 실온에서 교반하였다. 이후, DCM(4 mL), HOAc(206 mg, 3.44 mmol) 및 NaBH3CN(65 mg, 1.03 mmol) 중 N-(4-(4-아미노-1-(1-(5-포르밀피리딘-2-일)아제티딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(95 mg, 0.17 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 2일 동안 실온에서 교반하였다. 물(10 mL)을 첨가하여 반응을 켄칭시키고, EA(15 mL x 3)로 추출하였다. 유기상을 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 분취용 HPLC[물(0.1% FA) 중 ACN(15-25%)]로 정제하여 백색 고체로서 원하는 생성물(13.8 mg, 9.3%)을 제공하였다. LC/MS: 865 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.95 (s, 1H), 8.87 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.66 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.56 - 7.47 (m, 5H), 7.37 - 7.30 (m, 1H), 7.18 (dd, J = 9.2, 4.3 Hz, 1H), 7.04 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 6.50 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.87 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 5.06 - 5.02 (m, 1H), 4.57 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 4.55 - 4.37 (m, 4H), 4.35 - 4.17 (m, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.42 (s, 2H), 3.29 - 3.05 (m, 5H), 2.98 - 2.89 (m, 1H), 2.65 - 2.55 (m, 4H), 2.37 - 2.33 (m, 1H), 1.97 - 1.95 (m, 1H).
실시예 55: N-(4-(4-아미노-1-(1-(5-(4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)펜타노일)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(화합물 55)의 제조
단계 1: tert-부틸 5-하이드록시펜타노에이트의 제조
[0220] 0℃로 냉각된 건조 THF(60 mL) 중 5-(tert-부톡시)-5-옥소펜탄산(3.00 g, 6.96 mmol)의 용액에 NaBH4(630 mg, 16.74 mmol)를 첨가하였다. H2의 방출이 멈출 때까지 용액을 교반한 후, BF3.OEt2(2.71 g, 19.13 mmol)를 적가하였다. 반응물을 4시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응물을 4시간 동안 실온에서 교반하였다. 0℃에서 H2O(50 mL)를 첨가하여 반응을 켄칭시켰다. 혼합물을 EA(50 mLХ3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 포화 Na2CO3 용액 및 염수로 세척한 후, 진공하에서 농축시켜 무색 오일로서 미정제 생성물(2.50 g, 90.0%)을 제공하였다. LC/MS: 197.2 [M+Na]+.
단계 2: tert-부틸 5-옥소펜타노에이트의 제조
[0221] 실온에서 아르곤 하에서 교반된 DCM(20 mL) 중 tert-부틸 5-하이드록시펜타노에이트(500 mg, 2.87 mmol)의 용액에 PDC(1.62 g, 4.30 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 4시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 여과시키고, 여과액을 수집하였다. 여과 케이크를 DCM(20 mL)으로 세척하였다. 조합된 용액을 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 플래시 크로마토그래피(PE 중 0 ~ 65% EA)로 정제하여 무색 오일로서 원하는 생성물(200 mg, 40.5%)을 제공하였다. LC/MS: 195.0 [M+Na]+.
단계 3: tert-부틸 (S)-5-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)펜타노에이트의 제조
[0222] MeOH(10 mL) 중 tert-부틸 5-옥소펜타노에이트(90 mg, 0.52 mmol), (S)-3-(1-옥소-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(254 mg, 0.52 mmol) 및 NaOAc(51 mg, 0.63 mmol)의 용액에 NaBH3CN(66 mg, 1.05 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM(50 mL)과 물(30 mL) 사이에 분배하였다. 유기층을 증발시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 플래시 크로마토그래피(DCM 중 0 ~ 10% MeOH)로 정제하여 원하는 생성물(200 mg, 79.0% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 484.9 [M+H]+.
단계 4: (S)-5-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)펜탄산의 제조
[0223] DCM(3 mL) 중 tert-부틸 (S)-5-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)펜타노에이트(200 mg, 0.41 mmol)의 용액에 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에서 농축시켜 밝은 황색 고체로서 원하는 생성물(170 mg, 96.1% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 428.9 [M+H]+.
단계 5: N-(4-(4-아미노-1-(1-(5-(4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)펜타노일)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0224] DMF(10 mL) 중 (S)-5-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)펜탄산(177 mg, 0.41 mmol), N-(4-(4-아미노-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(191 mg, 0.41 mmol) 및 DIEA(160 mg, 1.24 mmol)의 용액에 HOBT(61 mg, 0.45 mmol) 및 EDCI(87 mg, 0.45 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM(50 mL)과 물(30 mL) 사이에 분배하였다. 유기층을 증발시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 Prep-HPLC(H2O(0.1%의 FA) 중 20 ~ 22% ACN)로 정제하여 백색 고체로서 원하는 생성물(25 mg, 6.64% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 872.6 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.95 (s, 1H), 8.87 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 8.87 - 8.26 (m, 1H), 7.63 (dd, J = 7.3, 5.3 Hz, 2H), 7.55 - 7.48 (m, 4H), 7.34 (td, J = 8.7, 3.5 Hz, 1H), 7.18 (dd, J = 9.1, 4.3 Hz, 1H), 7.02 (dd, J = 10.7, 7.8 Hz, 2H), 5.55 - 5.39 (m, 1H), 5.10 - 4.95 (m, 1H), 4.58 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 4.32 (d, J = 15.9 Hz, 1H), 4.19 (d, J = 16.9 Hz, 1H), 4.07 - 3.87 (m, 4H), 3.87 - 3.56 (m, 3H), 3.54 - 3.41 (m, 1H), 3.26 - 3.18 (m, 4H), 2.95 - 2.85 (m, 1H), 2.60 - 2.52 (m, 1H), 2.48 - 2.41 (m, 4H), 2.39 - 2.23 (m, 6H), 2.00 - 1.91 (m, 1H), 1.59 - 1.42 (m, 4H).
실시예 56: N-(4-(4-아미노-1-(1-(6-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피리딘-3-일)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(화합물 58)의 제조
단계 1: tert-부틸 3-(토실옥시)피롤리딘-1-카르복실레이트의 제조
[0225] 실온에서 피리미딘(50 mL) 중 tert-부틸 (3-하이드록시피롤리딘-1-일)포르메이트(5 g, 26.6 mmol)의 용액에 TsCl(6.1 g, 31.9 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM(100 mL)으로 희석시킨 후, 물 및 염수로 세척하였다. 유기상을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 플래시 크로마토그래피(PE/EA = 3:1)로 정제하여 백색 고체로서 원하는 생성물(8 g, 87.9%)을 제공하였다. LC/MS: 364.0 [M+Na]+.
단계 2: tert-부틸 3-(4-아미노-3-(4-((5-플루오로-2-메톡시벤즈아미도)메틸)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피롤리딘-1-카르복실레이트의 제조
[0226] 실온에서 교반된 DMF(20 mL) 중 tert-부틸 (3-{[(4-메틸벤젠)설포닐]옥시}피롤리딘-1-일)포르메이트(2 g, 5.84 mmol)의 용액에 N-[(4-{4-아미노-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일}페닐)메틸]-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(2.3 g, 5.84 mmol) 및 Cs2CO3(3.8 g, 11.68 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 12시간 동안 80℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 물(80 mL)에 부은 후, EA(100 mLx2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(200 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 플래시 크로마토그래피(DCM 중 10% MeOH)로 정제하여 황색 고체로서 원하는 생성물(2.3 g, 70.0%)을 제공하였다. LC/MS: 562.0[M+H]+.
단계 3: N-(4-(4-아미노-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0227] TFA/DCM(24 mL, 5:1) 중 tert-부틸-3-(4-아미노-3-(4-((5-플루오로-2-메톡시벤즈아미도)메틸)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피롤리딘-1-카르복실레이트(2.3 g, 4.09 mmol)의 용액을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 포화 탄산수소 나트륨 용액(100 mL)으로 용해시킨 후, DCM(100 mLХ2)으로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(200 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 갈색 고체로서 원하는 생성물(1.2 g, 63.6%)을 제공하였다. LC/MS: 462.0[M+H]+.
단계 4: 5-브로모-2-(디메톡시메틸)피리미딘의 제조
[0228] 실온에서 교반된 MeOH(10 mL) 중 5-브로모피리딘-2-카르브알데하이드(1 g, 5.37 mmol)의 용액에 트리메톡시메탄(1.71 g, 16.13 mmol) 및 TsOH(278 mg, 1.61 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 70℃에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 획득하였다. 미정제 생성물을 플래시 크로마토그래피(PE/EA= 10:1)로 정제하여 원하는 생성물(600 mg, 48.1%)을 제공하였다. LC/MS: 232.0 [M+H]+.
단계 5: N-(4-(4-아미노-1-(1-(6-(디메톡시메틸)피리딘-3-일)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0229] 실온에서 교반된 톨루엔(10 mL) 중 N-({4-[4-아미노-1-(피롤리딘-3-일)피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일]페닐}메틸)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(160 mg, 0.35 mmol)의 용액에 5-브로모-2-(디메톡시메틸)피리딘(123 mg, 0.53 mmol), BINAP(130 mg, 0.21 mmol), t-BuONa(67 mg, 0.7 mmol) 및 Pd2(dba)3(96 mg, 0.105 mmol)을 Ar 하에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 12시간 동안 80℃에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 플래시 크로마토그래피(DCM/MeOH= 10:1)로 정제하여 원하는 생성물(60 mg, 28.2%)을 제공하였다. LC/MS: 635.0 [M+H]+.
단계 6: N-(4-(4-아미노-1-(1-(6-포르밀피리딘-3-일)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0230] 실온에서 교반된 THF(5 mL) 중 N-{[4-(4-아미노-1-{1-[5-(디메톡시메틸)피리딘-2-일]피페리딘-4-일}피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)페닐]메틸}-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(55 mg, 0.09 mmol)의 용액에 HCl(0.2 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 12시간 동안 50℃에서 교반하였다. 혼합물을 H2O(20 mL)에 붓고, 포화 탄산수소 나트륨 용액으로 pH를 7-8로 조정한 후, EA(20 mLХ3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(50 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 플래시 크로마토그래피(DCM/MeOH=10:1)로 정제하여 원하는 생성물(21 mg, 41.1%)을 제공하였다. LC/MS: 566.9 [M+H]+.
단계 7: N-(4-(4-아미노-1-(1-(6-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피리딘-3-일)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0231] MeOH/DMF/HOAc(5 mL, 2:1:0.02) 중 N-(4-(4-아미노-1-(1-(6-포르밀피리딘-3-일)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(21 mg, 0.03 mmol)의 용액에 TEA(7.5 mg, 0.04 mmol), (S)-3-(1-옥소-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(21.66 mg, 0.04 mmol) 및 NaBH3CN(6.99 mg, 0.11 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 60℃에서 교반하였다. 물(5 mL)을 첨가하여 반응을 켄칭시키고, DCM(10 mLХ2)으로 추출하였다. 유기상을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 용매를 진공하에서 제거하고, 잔여물을 Prep-HPLC(ACN/H2O(0.1%FA), 10-40%)로 정제하여 원하는 화합물(3 mg, 9.2%)을 제공하였다. LC/MS: 879.6 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.96 (s, 1H), 8.87 (t, J = 6.3 Hz, 1H), 8.39 - 8.27 (m, 2H), 7.91 (s, 1H), 7.62 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.49 (t, J = 9.8 Hz, 3H), 7.37 - 7.31 (m, 1H), 7.27 - 7.14 (m, 2H), 7.11 - 6.93 (m, 3H), 5.68 - 5.60 (m, 1H), 5.04 (dd, J = 13.1, 5.1 Hz, 1H), 4.57 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 4.32 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 4.19 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 3.94 - 3.82 (m, 4H), 3.69 - 3.64 (m, 2H), 3.53 - 3.50 (m, 4H), 3.29 - 3.25 (m, 3H), 2.94 - 2.86 (m, 1H), 2.68 - 2.52 (m, 6H), 2.42 - 2.28 (m, 2H), 1.99 - 1.90 (m, 1H).
실시예 57: (S)-N-(4-(4-아미노-1-(6-(4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(화합물 59)의 제조
단계 1: (1-(5-아이오도피리딘-2-일)피페리딘-4-일)메탄올의 제조
[0232] 25℃에서 질소하에서 교반된 DMF(50 mL) 중 2-플루오로-5-아이오도피리딘(2 g, 9.0 mmol) 및 피페리딘-4-일메탄올(1.2 g,10.8 mmol)의 용액에 탄산 칼륨(3.7 g, 27.0 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 100℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에서 증발시켜 미정제 생성물을 제공하였고, 이를 실리카-겔 컬럼(PE:EA = 10:1-1:1)으로 정제하여 백색 고체로서 원하는 생성물(2 g, 69.8%)을 제공하였다. LC/MS: 319.0[M+1]+.
단계 2: 1-(5-아이오도피리딘-2-일)피페리딘-4-카르브알데하이드의 제조
[0233] 25℃에서 질소하에서 교반된 DCM(50 mL) 중 [1-(5-아이오도피리딘-2-일)피페리딘-4-일]메탄올(1 g, 3.1 mmol)의 용액에 데스-마틴(Dess-Martin) 페리오디난(2.0 g, 4.6 mmol)을 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 25℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 Na2S2O3(2 M)로 켄칭시키고, DCM(200 mL)으로 추출하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에서 증발시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 실리카-겔 컬럼(PE:EA=10:1-1:1)으로 정제하여 백색 고체로서 원하는 생성물(0.7 g, 70.9%)을 제공하였다. LC/MS:317.0 [M+1]+.
단계 3: 2-(4-(디메톡시메틸)피페리딘-1-일)-5-아이오도피리딘의 제조
[0234] 25℃에서 질소하에서 교반된 트리메트-옥시메탄(15 mL) 중 1-(5-아이오도피리딘-2-일)피페리딘-4-카르브알데하이드(700 mg, 2.2 mmol)의 용액에 TsOH(40 mg, 0.2 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 100℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에서 증발시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 실리카-겔 컬럼(PE:EA = 10:1-1:1)로 정제하여 백색 고체로서 원하는 생성물(0.6 g, 75.2%)을 제공하였다. LC/MS: 362.9 [M+1]+.
단계 4: N-(4-(4-아미노-1-(6-(4-(디메톡시메틸)피페리딘-1-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0235] 25℃에서 질소하에서 교반된 DMF(10 mL) 중 2-[4-(디메톡시메틸)피페리딘-1-일]-5-아이오도피리딘(100 mg, 0.3 mmol), N-[(4-{4-아미노-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일}페닐)메틸]-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(108.3 mg, 0.3 mmol) 및 N1,N1-디메틸사이클로헥산-1,2-디아민(39.3 mg, 0.3 mmol)의 용액에 구리(I) 아이오다이드(52.6 mg, 0.3 mmol) 및 탄산세슘(269.8 mg, 0.8 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 12시간 동안 110℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과시키고, 진공하에서 증발시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 실리카-겔 컬럼(DCM:MeOH=100:1-10:1)으로 정제하여 황색 고체로서 원하는 생성물(20 mg, 11.5%)을 제공하였다. LC/MS: 627.0 [M+1]+.
단계 5: N-(4-(4-아미노-1-(6-(4-포르밀피페리딘-1-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로 [3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0236] THF/H2SO4(2N)(5 mL, 1:1) 중 N-{[4-(4-아미노-1-{6-[4-(디메톡시메틸)피페리딘-1-일]피리딘-3-일}피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)페닐]메틸}-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(15 mg, 0.023 mmol)의 용액을 1시간 동안 70℃에서 교반하였다. 혼합물을 EA(100 mL)로 희석시키고, NaOH(2 M)로 중화시키고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에서 증발시켜 황색 고체로서 원하는 생성물(10 mg, 71.9%)을 제공하였다. LC/MS: 581.0 [M+1]+.
단계 6: (S)-N-(4-(4-아미노-1-(6-(4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0237] 60℃에서 질소하에서 교반된 CH3OH/DMF(2 mL, 1:1) 중 N-[(4-{4-아미노-1-[6-(4-포르밀피페리딘-1-일)피리딘-3-일]피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일}페닐)메틸]-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(15 mg,0.025 mmol), (3S)-3-[1-옥소-5-(피페라진-1-일)-3H-이소인돌-2-일]피페리딘-2,6-디온(8.47 mg, 0.025 mmol) 및 아세트산(62 mg, 0.52 mmol)의 용액에 트리에틸아민(13.05 mg, 0.13 mmol) 및 NaBH3CN(8.11 mg, 0.13 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 60℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 EA(50 mL)로 용해시키고, 물(10 mL x 2)로 세척하였다. 유기상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에서 증발시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 Prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 원하는 생성물(5 mg, 21.7%)을 제공하였다. LC/MS: 893.0 [M+1]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.96 (s, 1H), 8.90 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 8.72 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.12 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.58 - 7.48 (m, 3H), 7.40 - 7.32 (m, 1H), 7.23 - 7.17 (m, 1H), 7.08 - 6.96 (m, 3H), 6.61 - 6.49 (m, 3H), 5.15 - 5.01 (m, 1H), 4.60 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 4.44 - 4.28 (m, 3H), 3.91 (s, 3H), 3.29 - 3.24 (m, 7H), 3.00 - 2.82 (m, 3H), 2.74 - 2.59 (m, 2H), 2.44 - 2.31 (m, 2H), 2.29 - 2.17 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 2.02 - 1.73 (m, 4H), 1.34 - 1.05 (m, 2H).
실시예 58: N-(4-(4-아미노-1-(1-(4-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)페닐)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(화합물 60)의 제조
단계 1: N-(4-(4-아미노-1-(1-(4-포르밀페닐)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0238] 실온에서 교반된 DMSO(5 mL) 중 N-({4-[4-아미노-1-(피롤리딘-3-일)피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일]페닐}메틸)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(300 mg, 0.65 mmol)의 용액에 4-플루오로벤즈알데하이드(121 mg, 0.98 mmol) 및 K2CO3(180 mg, 1.3 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 12시간 동안 80℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 물(100 mL)에 붓고, EA(100 mLХ2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 물, 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시킨 후, 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 플래시 크로마토그래피(DCM/MeOH= 10:1)로 정제하여 원하는 생성물(100 mg, 27.2%)을 제공하였다. LC/MS: 566.0 [M+H]+.
단계 2: N-(4-(4-아미노-1-(1-(4-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)페닐)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0239] 실온에서 교반된 MeOH/DMF/HOAc(12 mL, 2:1:0.06) 중 N-[(4-{4-아미노-1-[1-(4-포르밀페닐)피롤리딘-3-일]피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일}페닐)메틸]-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(100 mg, 0.18 mmol)의 용액에 (S)-3-(1-옥소-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(86 mg, 0.18 mmol), Et3N(36 mg, 0.36 mmol) 및 NaBH3CN(45 mg, 0.72 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 60℃에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 농축시키고, 물(50 mL)에 붓고, EA(100 mLХ2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(200 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 Prep-HPLC로 정제하여 원하는 생성물(19 mg, 12.2%)을 제공하였다. LC/MS: 900.0 [M+Na]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ = 10.95 (s, 1H), 8.86 (t, J= 6.0 Hz 1H), 8.30 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.63 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 7.52 - 7.47 (m, 5H), 7.36 - 7.31 (m, 1H), 7.18 (dd, J= 9.2, 4.4 Hz, 1H), 7.12 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 7.06 - 7.01 (m, 2H), 6.56 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 5.65 - 5.60 (m, 1H), 5.04 (dd, J= 13.2, 5.2 Hz, 1H), 4.57 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 4.32 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 4.19 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.84 - 3.79 (m, 1H), 3.66 - 3.60 (m, 2H), 3.48 - 3.39 (m, 2H), 3.30 - 3.20 (m, 5H), 2.95 - 2.83 (m, 2H), 2.64 - 2.59 (m, 2H), 2.57 - 2.54 (m, 2H), 2.47 (s, 3H), 1.96 - 1.90 (m, 1H).
실시예 59: (S)-N-(4-(4-아미노-1-(1-(4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)페닐)아제티딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(화합물 61)의 제조
단계 1: N-(4-(4-아미노-1-(1-(4-포르밀페닐)아제티딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0240] DMSO(5 mL) 중 N-(4-(4-아미노-1-(아제티딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(60 mg, 0.13 mmol), 4-플루오로벤즈알데하이드(25 mg, 0.20 mmol) 및 K2CO3(56 mg, 0.41 mmol)의 혼합물을 밤새 동안 80℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 물(5 mL)에 붓고, EA(10 mLХ3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 물로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 DCM/MeOH = 10:1로 Pre-TLC에 의해 정제하여 원하는 생성물(20 mg, 80% 순도, 21.6% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 552.7 [M+H]+.
단계 2: (S)-N-(4-(4-아미노-1-(1-(4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)페닐)아제티딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0241] 실온에서 교반된 MeOH/DMF(2:1, 3 mL) 중 N-(4-(4-아미노-1-(1-(4-포르밀페닐)아제티딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(20 mg, 80% 순도, 0.029 mmol)의 용액에 (S)-3-(1-옥소-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(22 mg, 0.045 mmol) 및 Et3N(7 mg, 0.069 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반한 후, AcOH(0.1 mL) 및 NaBH3CN(4 mg, 0.064 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 60℃에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 물(4 ml)에 붓고, EA(8 mLХ3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(10 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 Prep-HPLC로 정제하여 원하는 생성물(8 mg, 31.9%)을 제공하였다. LC/MS: 864 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.95 (s, 1H), 8.86 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 8.33 - 8.20 (m, 2H), 7.65 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.53 - 7.48 (m, 3H), 7.37 - 7.31 (m, 1H), 7.24 - 7.11 (m, 3H), 7.08 - 6.98 (m, 2H), 6.52 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 5.88 - 5.81 (m, 1H), 5.05 - 5.02 (m, 1H), 4.57 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 4.42 - 4.16 (m, 6H), 3.89 (s, 3H), 3.42 - 3.36 (m, 4H), 3.28 - 3.25 (m, 5H), 2.97 - 2.83 (m, 2H), 2.69 - 2.54 (m, 2H), 2.41 - 2.31 (m, 2H), 1.98 - 1.92 (m, 1H).
실시예 60: (S)-N-(4-(4-아미노-1-(1-(4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)벤조일)아제티딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(화합물 62)의 제조
단계 1: tert-부틸 (S)-4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)벤조에이트의 제조
[0242] DMF(10 mL) 중 (S)-3-(1-옥소-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(100 mg, 0.2 mmol)의 용액에 TEA(41.51 mg, 0.4 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 실온에서 질소하에서 교반하였다. 이후, tert-부틸-4-포르밀 벤조에이트(42.38 mg, 0.2 mmol) 및 NaBH3CN(38.74 mg, 0.61 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 60℃에서 교반하였다. 물(20 mL)을 첨가하여 반응을 켄칭시키고, EA(20 mLХ3)로 추출하였다. 유기상을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 용액을 진공하에서 농축시키고, 잔여물을 DCM:MeOH= 10:1로 플래시 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 황색 고체로서 원하는 생성물(100 mg, 90% 순도, 86.7% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 519.1 [M+H]+.
단계 2: (S)-4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)벤조산의 제조
[0243] DCM(3 mL) 및 TFA(1 mL) 중 tert-부틸 (S)-4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)벤조에이트(100 mg, 90% 순도, 0.17 mmol)의 용액을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 농축시켜 황색 오일로서 표제 화합물(70 mg, 80% 순도, 69.5% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 462.8 [M+H]+.
단계 3: tert-부틸 3-(4-아미노-3-(4-((5-플루오로-2-메톡시벤즈아미도)메틸)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)아제티딘-1-카르복실레이트의 제조
[0244] DMF(10 ml) 중 N-(4-(4-아미노-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시 벤즈아미드(500 mg, 1.27 mmol)의 용액에 tert-부틸-3-(토실옥시)아제티딘-1-카르복실레이트(502 mg, 1.52 mmol) 및 Cs2CO3(1.24 g, 3.82 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 16시간 동안 80℃에서 교반하였다. 물(20 mL)을 첨가하여 반응을 켄칭시키고, DCM(20 mLХ2)으로 추출하였다. 유기상을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 용액을 진공하에서 농축시키고, 잔여물을 DCM:MeOH = 10:1로 플래시 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 황색 오일로서 원하는 생성물(230 mg, 90% 순도, 29.7%)을 제공하였다. LC/MS: 547.8 [M+H]+.
단계 4: N-(4-(4-아미노-1-(아제티딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0245] DCM(8 mL) 및 TFA(2 mL) 중 tert-부틸 3-(4-아미노-3-(4-((5-플루오로-2-메톡시벤즈아미도)메틸)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)아제티딘-1-카르복실레이트(230 mg, 90% 순도, 0.4 mmol)의 용액을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 진공하에서 제거한 후, DCM(20 mL)으로 용해시켰다. 혼합물을 포화 Na2CO3 용액으로 pH를 약 10으로 조정하였다. 유기상을 진공하에서 농축시켜 황색 고체로서 표제 화합물(100 mg, 60.3%)을 제공하였다. LC/MS: 448.1 [M+H]+.
단계 5: (S)-N-(4-(4-아미노-1-(1-(4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)벤조일)아제티딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0246] THF(5 mL) 중 4-[(4-{2-[(3S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일]-1-옥소-3H-이소인돌-5-일}피페라진-1-일)메틸]벤조산(44 mg, 80% 순도, 0.07 mmol)의 용액에 N-({4-[4-아미노-1-(아제티딘-3-일)피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일]페닐}메틸)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(33.9 mg, 0.07 mmol), 1-하이드록시벤조트리졸(15.3 mg, 0.11 mmol), EDCI(21.8 mg, 0.11 mmol) 및 TEA(22.9 mg, 0.22 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 물(15 mL)을 첨가하여 반응을 켄칭시키고, DCM(10 mLХ3)으로 추출하였다. 유기상을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 용액을 진공하에서 농축시키고, 잔여물을 Prep-HPLC(ACN/H2O(0.1%FA), 10-40%)로 정제하여 백색 고체로서 원하는 화합물(10 mg, 14.3%)을 제공하였다. LC/MS: 892.6 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, ) δ 10.95 (s, 1H), 8.88 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.68 - 7.64 (m, 4H), 7.51 - 7.47 (m, 4H), 7.45 - 7.40 (m, 2H), 7.34 (td, J = 8.5, 3.3 Hz, 1H), 7.19 (dd, J = 9.1, 4.3 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 5.80 - 5.71 (m, 1H), 5.05 (dd, J = 13.2, 5.0 Hz, 1H), 4.93 - 4.72 (m, 2H), 4.66 - 4.49 (m, 4H), 4.32 (d, J = 16.9 Hz, 1H), 4.20 (d, J = 16.9 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.59 (s, 2H), 3.32 - 3.25 (m, 4H), 2.96 - 2.84 (m, 1H), 2.68 - 2.56 (m, 4H), 2.44 - 2.29 (m, 2H), 1.99 -1.91 (m, 1H).
실시예 61: (N-(4-(4-아미노-1-(1-(4-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)벤조일)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(화합물 63)의 제조
단계 1: (N-(4-(4-아미노-1-(1-(4-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)벤조일)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0247] THF(5 mL) 중 (S)-4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)벤조산(44 mg, 80% 순도, 0.07 mmol)의 용액에 N-(4-(4-아미노-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시 벤즈아미드(34.9 mg, 0.07 mmol), 1-하이드록시벤조트리아졸(15.3 mg, 0.11 mmol), EDCI(21.8 mg, 0.11 mmol) 및 TEA(22.9 mg, 0.22 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 물(10 mL)을 첨가하여 반응을 켄칭시키고, DCM(10 mLХ2)으로 추출하였다. 유기상을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 용액을 진공하에서 농축시키고, 잔여물을 Prep-HPLC(ACN/H2O(0.1% FA), 10-40%)로 정제하여 원하는 화합물(4 mg, 6.3%)을 제공하였다. LC/MS: 906.5 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.96 (s, 1H), 8.94 - 8.86 (m, 1H), 8.25 - 8.12 (m, 1H), 7.75 - 7.28 (m, 11H), 7.25 - 7.15 (m, 1H), 7.10 - 6.97 (m, 2H), 5.62 - 5.35 (m, 1H), 5.05 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.59 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 4.32 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 4.19 (d, J = 15.3 Hz, 1H), 4.06 - 3.72 (m, 6H), 3.67 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 3.55 (d, J = 16.0 Hz, 2H), 3.32 - 3.18 (m, 4H), 2.90 (t, J = 12.8 Hz, 1H), 2.69 - 2.53 (m, 4H), 2.48 - 2.43 (m, 2H), 2.41 -2.28 (m, 2H), 2.02 - 1.86 (m, 1H).
실시예 62: N-(4-(4-아미노-1-(1-(6-(4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)헥사노일)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(화합물 64)의 제조
단계 1: (S)-6-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)헥산산의 제조
[0248] DMF(3 mL) 중 6-브로모헥산산(100 mg, 0.51 mmol), (S)-3-(1-옥소-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(168.3 mg, 0.51 mmol), K2CO3(212.3 mg, 1.54 mmol) 및 KI(85.1 mg, 0.51 mmol)의 현탁액을 밤새 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 EA(50 mL)로 용해시키고, 물(10 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 증발시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 플래시 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH= 10:1)로 정제하여 백색 고체로서 원하는 생성물(50 mg, 순도 = 90%, 수율 = 19.8%)을 제공하였다. LC/MS: 442.9 [M+H]+.
단계 2: N-(4-(4-아미노-1-(1-(6-(4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)헥사노일)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0249] DMF(5 mL) 중 (S)-6-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)헥산산(50 mg, 순도 = 90%), N-(4-(4-아미노-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(69.9 mg, 0.15 mmol), HATU(86.4 mg, 0.23 mmol) 및 DIEA(58.7 mg, 0.45 mmol)의 용액을 4시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 EA(50 mL)로 용해시키고, 물(10 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 증발시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 Prep-TLC(DCM/MeOH = 10:1)로 정제하여 백색 고체로서 원하는 생성물(8 mg, 12.5%)을 제공하였다. LC/MS: 886.1 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.92 (s, 1H), 8.84 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.24 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.52 - 7.45 (m, 4H), 7.33 - 7.28 (m, 1H), 7.17 - 7.14 (m, 1H), 7.10 - 7.02 (m, 2H), 5.51 - 5.34 (m, 1H), 5.06 - 4.97 (m, 1H), 4.54 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 4.33 - 4.15 (m, 2H), 4.05 - 3.57 (m, 8H), 3.50 - 3.41 (m, 1H), 3.24 - 3.05 (m, 2H), 2.93 - 2.78 (m, 2H), 2.60 - 2.48 (m, 3H), 2.45 - 2.14 (m, 9H), 1.96 - 1.88 (m, 1H), 1.56 - 1.44 (m, 4H), 1.33 - 1.17 (m, 3H).
실시예 63: N-(4-(4-아미노-1-(4-(3-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피롤리딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(화합물 65)의 제조
단계 1: (1-(2-플루오로-4-니트로페닐)피롤리딘-3-일)메탄올의 제조
[0250] CH3CN(5 mL) 중 1,2-디플루오로-4-니트로벤젠(2 g, 12.57 mmol)의 용액에 피롤리딘-3-일메탄올(1.9 g, 13.83 mmol) 및 DIEA(4.9 g, 37.71 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 3시간 동안 80℃에서 교반하였다. 용매를 진공하에서 제거하였다. 잔여물을 PE:EA = 1:1로 플래시 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 황색 고체로서 원하는 생성물(1.8 g, 59.6%)을 제공하였다. LC/MS: 241.1 [M+H]+.
단계 2: (1-(4-아미노-2-플루오로페닐)피롤리딘-3-일)메탄올의 제조
[0251] MeOH(20 mL) 중 (1-(2-플루오로-4-니트로페닐)피롤리딘-3-일)메탄올(1.8 g, 7.49 mmol)의 용액에 Pd/C(180 mg, 10%)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 1atm에서 H2 하에서 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 촉매를 여과시켰다. 용매를 진공하에서 농축시켜 갈색 오일로서 원하는 생성물(1.3 g, 82.5%)을 제공하였다. LC/MS: 211.1 [M+H]+.
단계 3: (1-(2-플루오로-4-아이오도페닐)피롤리딘-3-일)메탄올의 제조
[0252] 0℃에서 CH3CN(30 mL) 중 (1-(4-아미노-2-플루오로페닐)피롤리딘-3-일)메탄올(1.3 g, 6.1 mmol)의 용액에 1.9 mL의 농축된 HCl(1.9 mL), NaNO2(630 mg, 9.13 mmol, 8 mL H2O에 용해됨)를 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 0℃에서 교반한 후, KI(3.16 g, 19.03 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 17시간 동안 실온에서 교반하였다. 물(20 mL)을 첨가하여 반응을 켄칭시키고, EA(20 mL x 3)로 추출하였다. 유기상을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 용매를 진공하에서 제거하였다. 잔여물을 PE: EA = 3:1로 플래시 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 황색 고체로서 원하는 생성물(1.5 g, 75.5%)을 제공하였다. LC/MS: 321.9 [M+H]+.
단계 4: 1-(2-플루오로-4-아이오도페닐)피롤리딘-3-카르브알데하이드의 제조
[0253] -78℃에서 DCM(20 mL) 중 옥살릴 클로라이드(1.19 g, 9.34 mmol)의 용액에 DMSO(1.46 g, 18.68 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 15분 동안 -78℃에서 교반한 후, (1-(2-플루오로-4-아이오도페닐)피롤리딘-3-일)메탄올(1.5 g, 4.67 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 다른 15분 동안 -78℃에서 교반하였다. TEA(1.9 g, 18.68 mmol)를 -78℃에서 첨가하였다. 최종 혼합물을 30분 동안 -78℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 상승시키고, 1시간 동안 교반하였다. 물(20 mL)을 첨가하여 반응을 켄칭시키고, DCM(20 mLХ3)으로 추출하였다. 유기상을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 용매를 진공하에서 제거하였다. 잔여물을 PE:EA = 1:1로 플래시 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 황색 고체로서 원하는 생성물(1.2 g, 80.5%)을 제공하였다. LC/MS: 319.8 [M+H]+.
단계 5: 3-(디메톡시메틸)-1-(2-플루오로-4-아이오도페닐)피롤리딘의 제조
[0254] MeOH(20 mL) 중 1-(2-플루오로-4-아이오도페닐)피롤리딘-3-카르브알데하이드(1.2 g, 3.76 mmol)의 용액에 트리메톡시메탄(600 mg, 5.46 mmol) 및 PTSA(97 mg, 1.36 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 12시간 동안 60℃에서 교반하였다. 용매를 진공하에서 제거하였다. 잔여물을 EA(20 mL)에 용해시키고, NaHCO3 용액으로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 유기상을 농축시키고, PE:EA = 1:1로 플래시 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 황색 고체로서 원하는 생성물(720 mg, 41.9%)을 제공하였다. LC/MS: 365.8 [M+H]+.
단계 6: N-(4-(4-아미노-1-(4-(3-(디메톡시메틸)피롤리딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0255] 1,4-디옥산(5 mL) 중 3-(디메톡시메틸)-1-(2-플루오로-4-아이오도페닐)피롤리딘(200 mg, 0.55 mmol)의 용액에 N-(4-(4-아미노-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(429 mg, 1.09 mmol), Cs2CO3(535 mg, 1.64 mmol), 트랜스-N,N'-디메틸사이클로헥산-1,2-디아민(156 mg, 1.09 mmol) 및 CuI(104 mg, 0.55 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 Ar 하에서 17시간 동안 100℃에서 교반하였다. 고체를 여과시키고, 용액을 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 DCM: MeOH = 10:1로 Pre-TLC에 의해 정제하여 백색 고체로서 원하는 생성물(100 mg, 60% 순도, 17.3% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 629.9 [M+H]+.
단계 7: N-(4-(4-아미노-1-(3-플루오로-4-(3-포르밀피롤리딘-1-일)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0256] THF(2 mL) 중 N-(4-(4-아미노-1-(4-(3-(디메톡시메틸)피롤리딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(80 mg, 60% 순도, 0.076 mmol)의 용액에 H2SO4(4 mL, 물 중 3M)를 첨가하였다. 반응물을 2시간 동안 70℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, NaHCO3 용액으로 중화시키고, EA(10 mL x 3)로 추출하였다. 유기상을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 용액을 진공하에서 농축시켜 황색 고체로서 원하는 생성물(40 mg, 미정제)을 제공하였다. LC/MS: 584.2 [M+H]+.
단계 8: N-(4-(4-아미노-1-(4-(3-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피롤리딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0257] DMF(1 mL) 및 MeOH(1 mL) 중 (S)-3-(1-옥소-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온 벤젠설폰산(11.26 mg, 0.034 mmol)의 용액에 TEA(0.2 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반하였다. 이후, N-(4-(4-아미노-1-(3-플루오로-4-(3-포르밀피롤리딘-1-일)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(40 mg, 미정제), HOAc(0.5 mL) 및 NaBH3CN(21.55 mg, 0.343 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. H2O(10 mL)를 첨가하여 반응을 켄칭시키고, EA(5 mLХ3)로 추출하였다. 조합된 유기상을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 용액을 진공하에서 농축시키고, 잔여물을 DCM: MeOH = 10:1로 Pre-TLC에 의해 정제하여 백색 고체로서 원하는 생성물(6.9 mg, 두 단계에 대해 10.1%)을 제공하였다. LC/MS: 896.5 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.96 (s, 1H), 8.90 (t, J = 6 Hz, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.93 (d, J = 15.3 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.56 - 7.50 (m, 3H), 7.38 - 7.31 (m, 1H), 7.23 - 7.16 (m, 1H), 7.12 - 7.04 (m, 2H), 6.88 (t, J = 9.5 Hz, 1H), 5.05 (dd, J = 13.3, 5.0 Hz, 1H), 4.60 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 4.36 - 4.17 (m, 2H), 3.91 (s, 2H), 3.57 - 3.49 (m, 1H), 3.48 - 3.40 (m, 2H), 3.31 (s, 3H), 3.22 - 3.15 (m, 1H), 2.93 - 2.83 (m, 1H), 2.66 - 2.53 (m, 4H), 2.45 - 2.30 (m, 3H), 2.13 - 1.90 (m, 3H), 1.73 - 1.66 (m, 1H), 1.50 - 1.40 (m, 1H), 1.27 - 1.17 (m, 5H).
실시예 64: N-(4-(4-아미노-1-(6-(3-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피롤리딘-1-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(화합물 66)의 제조
단계 1: (1-(5-아이오도피리딘-2-일)피롤리딘-3-일)메탄올의 제조
[0258] DMF(20 mL) 중 2-플루오로-5-아이오도피리딘(2 g, 9 mmol)의 용액에 피롤리딘-3-일메탄올(1.09 g, 10.8 mmol) 및 탄산 칼륨(3.73 g, 2.7 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 100℃에서 교반하였다. 물(50 mL)을 첨가하여 반응을 켄칭시키고, EA(50 mLХ3)로 추출하였다. 유기상을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 용매를 진공하에서 제거하고, 잔여물을 PE:EA = 5:1로 플래시 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 황색 고체로서 원하는 생성물(2 g, 73.0%)을 제공하였다. LC/MS: 304.9 [M+H]+.
단계 2: 1-(5-아이오도피리딘-2-일)피롤리딘-3-카르브알데하이드의 제조
[0259] 0℃에서 질소하에서 교반된 DCM(30 mL) 중 [1-(5-아이오도피리딘-2-일)피롤리딘-3-일]메탄올(2 g, 6.6 mmol)의 용액에 데스-마틴 페리오디난(4.2 g, 9.9 mmol)을 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 물(10 mL)을 첨가하여 반응을 켄칭시켰다. 유기상을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 용매를 진공하에서 제거하여 황색 고체로서 표제 화합물(1.5 g, 75.7% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 302.9 [M+H]+.
단계 3: 2-(3-(디메톡시메틸)피롤리딘-1-일)-5-아이오도피리딘의 제조
[0260] 25℃에서 질소하에서 교반된 트리메톡시 메탄(20 mL) 중 1-(5-아이오도피리딘-2-일)피롤리딘-3-카르브알데하이드(1.5 g, 5.0 mmol)의 용액에 TsOH(90 mg, 0.5 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 2시간 동안 100℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에서 농축시키고, 잔여물을 PE:EA = 5:1로 플래시 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 황색 고체로서 원하는 생성물(500 mg, 28.0%)을 제공하였다. LC/MS: 348.9 [M+H]+.
단계 4: N-(4-(4-아미노-1-(6-(3-(디메톡시메틸)피롤리딘-1-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0261] DMF(20 mL) 중 2-(3-(디메톡시메틸)피롤리딘-1-일)-5-아이오도피리딘(120 mg, 0.34 mmol)의 용액에 N-(4-(4-아미노-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(135 mg, 0.34 mmol), Cs2CO3(336.8 mg, 1.03 mmol), 구리(I) 아이오다이드(65.3 mg, 0.34 mmol) 및 N1,N1-디메틸사이클로헥산-1,2-디아민(49.02 mg, 0.34 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 10시간 동안 110℃에서 교반하였다. 고체를 여과시키고, DCM(10 mL x 3)으로 세척하였다. 용액을 진공하에서 농축시키고, 잔여물을 DCM:MeOH = 1:0 ~ 10:1로 플래시 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 원하는 생성물(20 mg, 9.4%)을 제공하였다. LC/MS: 613.0 [M+H]+.
단계 5: N-(4-(4-아미노-1-(6-(3-포르밀피롤리딘-1-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로 [3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0262] H2SO4/H2O/THF(1 mL, 1/3/2) 중 N-(4-(4-아미노-1-(6-(3-(디메톡시메틸)피롤리딘-1-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(15 mg, 0.025 mmol)의 용액을 1시간 동안 70℃에서 질소하에서 교반하였다. 혼합물을 EA(50 mL)로 희석시키고, NaOH(2 N)로 중화시켰다. 유기상을 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 용매를 진공하에서 제거하여 황색 고체로서 표제 화합물(12 mg, 86.5%)을 제공하였다. LC/MS: 567.0 [M+H]+.
단계 6: N-(4-(4-아미노-1-(6-(3-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피롤리딘-1-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일) 벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0263] MeOH/DMF/HOAc(2 mL, 2:1:0.02) 중 N-(4-(4-아미노-1-(6-(3-포르밀피롤리딘-1-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(12 mg，0.02 mmol)의 용액에 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-(피페라진-1-일)이소인돌-1,3-디온(7 mg, 0.02 mmol), TEA(21.5 mg, 0.21 mmol) 및 NaBH3CN(6.6 mg, 0.106 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 1시간 동안 60℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 후, 물(5 mL)을 첨가하여 켄칭시키고, DCM(5 mL x 3)으로 추출하였다. 유기상을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 용매를 진공하에서 제거하고, 잔여물을 실리카-겔 컬럼(DCM: MeOH = 100:1-10:1)으로 정제하여 원하는 화합물(10 mg, 53.7%)을 제공하였다. LC/MS: 878.9 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.96 (s, 1H), 8.90 (m, 1H), 8.67 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 8.31 (s, 2H), 8.07 (dd, J = 9.0, 2.7 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.58 - 7.50 (m, 3H), 7.38 - 7.30 (m, 1H), 7.21 - 7.18 (m, 1H), 7.10 - 7.05 (m, 2H), 6.62 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 5.09 - 5.03 (m, 1H), 4.60 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 4.33 (d, J = 17.0 Hz, 1H), 4.21 (d, J = 16.9 Hz, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.74 - 3.61 (m, 2H), 3.59 - 3.53 (m, 2H), 3.32 - 3.25 (m, 6H), 3.22 - 3.14 (m, 2H), 2.92 - 2.85 (m, 1H), 2.62 - 2.55 (m, 4H), 2.43 - 2.31 (m, 3H), 2.13 - 2.10 (m, 1H), 2.01 - 1.91 (m, 1H), 1.80 - 1.72 (m, 1H).
실시예 65: 1-(5-(4-(6-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-6-옥소헥실)피페라진-1-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온(화합물 71)의 제조
단계 1: tert-부틸 6-(4-(3-(2,4-디옥소테트라하이드로피리미딘-1(2H)-일)-4-메톡시벤조일)피페라진-1-일)헥사노에이트의 제조
[0264] DMF(10 mL) 중 tert-부틸 6-브로모헥사노에이트(200 mg, 0.8 mmol)의 용액에 1-(2-메톡시-5-(피페라진-1-카르보닐)페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온(392 mg, 0.88 mmol) 및 K2CO3(336 mg, 2.4 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 17시간 동안 90℃에서 교반하였다. 용매를 진공하에서 증발시키고, 잔여물을 PE:EA = 1:2로 플래시 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 원하는 생성물(100 mg, 23%)을 제공하였다. LC/MS: 502.8 [M+H]+.
단계 2: 6-(4-(3-(2,4-디옥소테트라하이드로피리미딘-1(2H)-일)-4-메톡시벤조일)피페라진-1-일)헥산산의 제조
[0265] DCM(3 mL) 중 tert-부틸 6-(4-(3-(2,4-디옥소테트라하이드로피리미딘-1(2H)-일)-4-메톡시벤조일)피페라진-1-일)헥사노에이트(100 mg, 0.2 mmol)의 용액에 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 진공하에서 제거하여 생성물(80 mg, 미정제)을 제공하였다. LC/MS: 446.7 [M+H]+.
단계 3: 1-(5-(4-(6-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-6-옥소헥실)피페라진-1-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온의 제조
[0266] DCM(5 mL) 중 6-(4-(3-(2,4-디옥소테트라하이드로피리미딘-1(2H)-일)-4-메톡시벤조일)피페라진-1-일)헥산산(80 mg, 미정제)의 용액에 HATU(102 mg, 0.27 mmol) 및 TEA(54 mg, 0.54 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 실온에서 교반한 후, (2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-4-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(80 mg, 0.18 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 염수로 추출하고, 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 DCM:MeOH = 10:1로 Pre-TLC에 의해 정제하여 원하는 생성물(19.5 mg, 두 단계에 대해 11%)을 제공하였다. LC/MS: 876.1 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.12 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.46 - 7.37 (m, 5H), 7.33 (s, 1H), 7.23 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.12 - 7.06 (m, 3H), 7.02 - 6.93 (m, 2H), 4.40 - 4.48 (m, 1H), 4.31 - 4.38 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.77 - 3.87 (m, 2H), 3.71 (s, 4H), 3.34 (t, J = 10.7 Hz, 1H), 3.20 - 3.12 (m, 1H), 2.87 - 2.81 (m, 2H), 2.70 - 2.52 (m, 5H), 2.36 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.11 - 2.21 (m, 2H), 1.53 - 1.75 (m, 8H), 1.40 - 1.25 (m, 2H).
실시예 66: 1-(5-(4-(5-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-5-옥소펜틸)피페라진-1-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온(화합물 72)의 제조
단계 1: tert-부틸 5-(4-(3-(2,4-디옥소테트라하이드로피리미딘-1(2H)-일)-4-메톡시 벤조일)피페라진-1-일)펜타노에이트의 제조
[0267] DMF(20 mL) 중 tert-부틸 5-브로모펜타노에이트(380 mg, 1.60 mmol), 1-(2-메톡시-5-(피페라진-1-카르보닐)페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온(1.07 g, 3.20 mmol), K2CO3(1.11 g, 8.00 mmol), KI(266 mg, 1.60 mmol)의 용액을 3시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 물(50 mL)로 희석시키고, EtOAc(50 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과시키고, 증발시켜 미정제 화합물을 제공하였다. 미정제 생성물을 컬럼 크로마토그래피(DCM: MeOH = 10:1)로 정제하여 밝은 황색 고체로서 원하는 생성물(130 mg, 17%)을 획득하였다. LC/MS: 488.7 [M+H]+.
단계 2: 5-(4-(3-(2,4-디옥소테트라하이드로피리미딘-1(2H)-일)-4-메톡시벤조일)피페라진-1-일)펜탄산의 제조
[0268] DCM(12 mL) 및 TFA(9 mL) 중 tert-부틸 5-(4-(3-(2,4-디옥소테트라하이드로피리미딘-1(2H)-일)-4-메톡시 벤조일)피페라진-1-일)펜타노에이트(130 mg, 0.27 mmol)의 용액을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 농축시켜 황색 오일로서 원하는 화합물(115 mg, 98%)을 제공하였다. LC/MS: 432.8 [M+H] +
단계 3: 1-(5-(4-(5-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-5-옥소펜틸)피페라진-1-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온의 제조
[0269] MeOH/DMF(2:1, 15 mL) 중 5-(4-(3-(2,4-디옥소테트라하이드로피리미딘-1(2H)-일)-4-메톡시벤조일)피페라진-1-일)펜탄산(115 mg, 0.27 mmol), (2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-4-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(133 mg, 0.30 mmol), HATU(154 mg, 0.41 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(174 mg, 1.35 mmol)의 용액을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 증발시키고, MeOH:DCM = 1:10로 Prep-TLC에 의해 정제하여 표제 화합물(40 mg, 수율: 17%)을 제공하였다. LC/MS: 862.1 [M+H]+.
1H NMR (301 MHz, DMSO) δ 12.74 (s, 1H), 10.33 (s, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.24 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 7.70 - 7.56 (m, 2H), 7.45 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 7.38 - 7.29 (m, 2H), 7.28 - 7.23 (m, 1H), 7.19 - 7.11 (m, 4H), 7.02 - 6.95 (m, 1H), 4.31 - 4.14 (m, 3H), 3.90 - 3.75 (m, 4H), 3.58 - 3.46 (m, 6H), 2.70 - 2. 45 (m, 2H), 2.48 - 2.19 (m, 8H), 2.10 - 1.90 (m, 3H), 1.58 - 1.38 (m, 6H).
실시예 67: 1-(5-(4-(2-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온(화합물 73)의 제조
단계 1: 벤질 4-(2-(tert-부톡시)-2-옥소에틸)-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르복실레이트의 제조
[0270] DCM(15 mL) 중 tert-부틸 2-(피페리딘-4-일)아세테이트(500 mg, 2.51 mmol), 벤질 4-옥소피페리딘-1-카르복실레이트(584.8 mg, 2.51 mmol), 및 TEA(507 mg, 5.02 mmol)의 용액에 MgSO4(3 g , 25.1 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. NaBH(AcO)3(1.3 g, 6.27 mmol)를 3시간 내에 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 고체를 여과시키고, DCM(20 mL Х 2)으로 세척하였다. 용액을 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 MeOH: DCM =1:10로 Prep-TLC에 의해 정제하여 백색 고체로서 표제 화합물(850 mg, 80% 순도, 65.1% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 417.2 [M+H]+.
단계 2: tert-부틸 2-([1,4'-바이피페리딘]-4-일)아세테이트의 제조
[0271] 건조 t-BuOH(20 mL) 중 벤질 4-(2-(tert-부톡시)-2-옥소에틸)-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르복실레이트(850 mg, 80% 순도, 1.63 mmol)의 용액에 Pd/C(100 mg)를 첨가하였다. 혼합물을 H2 하에서 밤새 동안 20℃에서 교반하였다. 촉매를 여과시켰다. 용액을 진공하에서 농축시켜 백색 고체로서 표제 생성물(320 mg, 90% 순도, 62% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 227.1 [M-55]+.
단계 3: tert-부틸 2-(1'-(3-(2,4-디옥소테트라하이드로피리미딘-1(2H)-일)-4-메톡시 벤조일)-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)아세테이트의 제조
[0272] DMF(15 mL) 중 tert-부틸 2-([1,4'-바이피페리딘]-4-일)아세테이트(320 mg, 90% 순도, 1.02 mmol), 3-(2,4-디옥소테트라하이드로피리미딘-1(2H)-일)-4-메톡시벤조산(269 mg, 1.02 mmol), HATU(463.6 mg, 1.22mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(197.4 mg, 1.53mmol)의 용액을 4시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 증발시키고, MeOH:DCM = 1:10로 prep-TLC에 의해 정제하여 백색 고체로서 표제 화합물(30 mg, 5.5%)을 제공하였다. LC/MS: 529.2 [M+H]+.
단계 4: 2-(1'-(3-(2,4-디옥소테트라하이드로피리미딘-1(2H)-일)-4-메톡시벤조일)-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)아세트산의 제조
[0273] DCM(5 mL) 및 TFA(2 mL) 중 tert-부틸 2-(1'-(3-(2,4-디옥소테트라하이드로피리미딘-1(2H)-일)-4-메톡시벤조일)-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)아세테이트(30 mg, 0.056 mmol)의 용액을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 농축시켜 표제 화합물(30 mg, 89.3% 순도, 100% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 473.1 [M+H]+.
단계 5: 1-(5-(4-(2-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온의 제조
[0274] DMF(10 mL) 중 2-(1'-(3-(2,4-디옥소테트라하이드로피리미딘-1(2H)-일)-4-메톡시벤조일)-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)아세트산(30 mg, 0.056 mmol), (2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-4-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(27.1 mg, 0.056 mmol), HATU(25.5 mg, 0.067 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(11 mg, 0.084 mmol)의 용액을 4시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 증발시키고, MeOH:DCM = 1:10로 프렙-TLC에 의해 정제하여 백색 고체로서 표제 화합물(15 mg, 29.4%)을 제공하였다. LC/MS: 901.5 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.89 (br, 1H), 10.35 (s, 1H), 9.36 (br, 1H), 9.00 - 8.92 (m, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.49 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 7.42 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.26 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.19 (d, J = 8.1 Hz, 3H), 7.03 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.39 - 4.30 (m, 2H), 4.26 - 4.12 (m, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.64 - 3.57 (m, 2H), 3.44 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 3.33 - 3.25 (m, 1H), 3.07 - 2.98 (m, 3H), 2.73 - 2.65 (m, 2H), 2.40 - 2.31 (m, 2H), 2.16 - 1.83 (m, 8H), 1.72 - 1.31 (m, 8H), 1.27 - 1.20 (m, 1H).
실시예 68: 1-(5-(4-((1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)메틸)피페라진-1-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온(화합물 74)의 제조
단계 1: 1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-카르브알데하이드의 제조
[0275] THF(5 mL) 중 (2-클로로-4-페녹시페닐)(4-((4-(4-(디메톡시메틸)피페리딘-1-일)-3-플루오로페닐)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(200 mg, 0.33 mmol)의 용액에 황산(2M, 5 mL, 10 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 70℃에서 교반하였다. NaOH(1 M)를 첨가하여 pH = 9로 조정한 후, 에틸 아세테이트(20 mLХ3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물(152 mg, 81%)을 제공하였다. LC/MS: 569.6 [M+H]+.
단계 2: 1-(5-(4-((1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)메틸)피페라진-1-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온의 제조
[0276] DCM(15 mL) 중 1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-카르브알데하이드(90 mg, 0.16 mmol), 1-(2-메톡시-5-(피페라진-1-카르보닐)페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 하이드로클로라이드(53.1 mg, 0.16 mmol), 및 TEA(48.5 mg, 0.48 mmol)의 용액에 MgSO4(192 mg, 1.6 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. NaBH(AcO)3(101.7 mg, 0.48 mmol)를 3시간 내에 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 5시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 MeOH: DCM =1:10로 Prep-TLC에 의해 정제하여 표제 화합물(40 mg, 98% 순도, 25% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 885.4 [M+H]+.
1H NMR (301 MHz, DMSO) δ 13.04 (s, 1H), 11.12 (s, 1H), 10.35 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.02 (d, J = 17.1 Hz, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.63 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.53 - 7.43 (m, 2H), 7.40 - 7.12 (m, 7H), 7.10 - 6.99 (m, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.60 - 3.35 (m, 6H), 3.29 - 3.20 (m, 2H), 2.70 - 2.55 (m, 5H), 2.40 - 2.32 (m, 3H), 2.21 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 1.80 (d, J = 12.3 Hz, 2H), 1.70 - 1.62 (m, 1H), 1.40 - 1.27 (m, 3H).
실시예 69: 1-(5-(4-((1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)메틸)-1,4-디아제판-1-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온(화합물 75)의 제조
단계 1: tert-부틸 4-(3-(2,4-디옥소테트라하이드로피리미딘-1(2H)-일)-4-메톡시벤조일)-1,4-디아제판-1-카르복실레이트의 제조
[0277] 실온에서 DMF(5 mL) 중 3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-4-메톡시벤조산(500 mg, 1.89 mmol)의 용액에 HATU(862 mg, 2.268 mmol), DIEA(489 mg, 3.78 mmol) 및 tert-부틸 (1,4-디아제판-1-일)포르메이트(380 mg, 1.89 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 물(45 mL)에 붓고, EtOAc(50 mLХ2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 획득하였다. 미정제 생성물을 플래시 크로마토그래피(MeOH/DCM= 1:10)로 정제하여 원하는 생성물(1 g, 94.7%)를 제공하였다. LC/MS: 391.2 [M-55]+.
단계 2: 1-(5-(1,4-디아제판-1-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온의 제조
[0278] TFA/DCM(1:5, 12 mL) 중 tert-부틸 (4-{[3-(2,4-디옥소-1,3-디아지난-1-일)-4-메톡시페닐]카르보닐}-1,4-디아제판-1-일)포르메이트(1 g)의 용액을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 용액을 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 DCM(50 mL)에 용해시키고, 포화 탄산수소 나트륨 용액 및 염수로 세척하였다. 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 원하는 생성물(500 mg, 83.0%)을 제공하였다. LC/MS: 347.1 [M+H]+.
단계 3: 1-(5-(4-((1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)메틸)-1,4-디아제판-1-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온의 제조
[0279] 실온에서 DCM(5 mL) 중 1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-카르브알데하이드(80 mg, 0.14 mmol)의 용액에 1-(5-(1,4-디아제판-1-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온(97 mg, 0.28 mmol), Et3N(28 mg, 0.28 mmol) 및 MgSO4(200 mg, 1.66 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반한 후, NaBH(OAc)3(59 mg, 0.28 mmol)를 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 여과시키고, 여과액을 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 Prep-TLC(MeOH/DCM= 1:10)로 정제하여 원하는 생성물(80 mg, 63.5%)을 제공하였다. LC/MS: 900.1 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 13.06 (br, 1H), 11.14 (s, 1H), 10.36 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.04 (d, J= 14.8 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.64 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.49 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 7.39 - 7.30 (m, 3H), 7.29 - 7.14 (m, 6H), 7.13 - 7.00 (m, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.65 - 3.55 (m, 4H), 3.45 - 3.35 (m, 2H), 3.29 - 3.25 (m, 2H), 2.78 - 2.55 (m, 8H), 2.49 - 2.20 (m, 2H), 1.85 - 1.75 (m, 4H), 1.30 - 1.25 (m, 2H).
실시예 70: 1-(5-(4-(2-(1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)에틸)피페라진-1-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온(화합물 76)의 제조
[0280] DCM(20 mL) 중 2-(1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)아세트알데하이드(140 mg, 0.24 mmol), 1-(2-메톡시-5-(피페라진-1-카르보닐)페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온(80 mg, 0.24 mmol), TEA(121 mg, 1.2 mmol) 및 MgSO4(408 mg, 3.4 mmol)의 용액을 30분 동안 실온에서 질소하에서 교반하였다. 소듐 트리아세톡시 보로하이드라이드(163 mg, 0.72 mmol)를 0℃에서 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과시켰다. 유기층을 물로 세척하고, 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 Prep-TLC(MeOH: DCM =1:10)로 정제하여 황색 고체로서 원하는 생성물(55 mg, 25%)을 제공하였다. LC/MS: 900.0[M+1]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 13.06 (br, 1H), 11.14 (s, 1H), 10.36 (s, 1H), 10.05 (br, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.04 (d, J = 14.8 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.64 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.49 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 7.45 - 7.37 (m, 1H), 7.33 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.30 - 7.24 (m, 1H), 7.23 - 7.11 (m, 3H), 7.09 - 7.04 (m, 1H), 3.86 (s, 2H), 3.67 - 3.56 (m, 2H), 3.52 - 3.39 (m, 2H), 3.38 - 3.24 (m, 4H), 3.22 - 2.96 (m, 2H), 2.91 - 2.56 (m, 4H), 2.45 - 1.88 (m, 5H), 1.85 - 1.45 (m, 4H), 1.42 - 0.87 (m, 5H).
실시예 71: (R)-1-(5-(4-(2-(3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온(화합물 77)의 제조
단계 1: (R)-1-(5-(4-(2-(3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온의 제조
[0281] DMF(10 mL) 중 2-(1'-(3-(2,4-디옥소테트라하이드로피리미딘-1(2H)-일)-4-메톡시벤조일)-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)아세트산(70 mg, 0.15 mmol), (R)-(2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-3-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(84 mg, 0.15 mmol), HATU(86 mg, 0.23 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(116 mg, 0.9 mmol)의 용액을 4시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 증발시키고, MeOH:DCM = 1:10로 Prep-TLC에 의해 정제하여 백색 고체로서 표제 화합물(14 mg, 10%)을 제공하였다. LC/MS: 902.4 [M+H]+.
1H NMR (301 MHz, DMSO) δ 12.86 (br, 1H), 10.37 (s, 1H), 8.87 (br, 1H), 8.32 - 8.24 (m, 1H), 7.67 - 7.62 (m, 1H), 7.60 - 7.52 (m, 1H), 7.51 - 7.43 (m, 2H), 7.42 - 7.34 (m, 2H), 7.29 - 7.12 (m, 5H), 7.05 - 6.98 (m, 1H), 4.32 - 4.21 (m, 1H), 4.20 - 4.13 (m, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.63 - 3.53 (m, 3H), 3.33 - 3.24 (m, 2H), 3.21 - 3.13 (m, 1H), 3.07 - 3.01 (m, 1H), 2.94 - 2.77 (m, 3H), 2.67 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.35 - 2.23 (m, 2H), 2.10 - 1.70 (m, 10H), 1.67 - 1.46 (m, 6H), 1.19 - 1.15 (m, 1H).
실시예 72: 1-(5-(4-(7-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-7-옥소헵틸)피페라진-1-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온(화합물 78)의 제조
단계 1: 7-브로모헵타노일 클로라이드의 제조
[0282] 티오닐 클로라이드(20 mL) 중 7-브로모헵탄산(1 g, 4.8 mmol)의 용액을 5시간 동안 70℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에서 증발시켜 갈색 오일로서 원하는 생성물(1 g, 91%)을 제공하였다. LC/MS: 223.0 [M+H]+ (MeOH로 처리됨).
단계 2: 7-브로모-1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)헵탄-1-온의 제조
[0283] 실온에서 질소하에서 교반된 ACN(10 mL) 중 (2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-4-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(106 mg,0.22 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(142.16 mg, 1.1 mmol)의 용액에 7-브로모헵타노일 클로라이드(50 mg, 0.22 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 5시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 진공하에서 제거하였다. 잔여물을 EtOAc와 H2O 사이에 분배하였다. 유기상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 CH2Cl2/MeOH(100:1-10:1)로 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 정제하여 황색 고체로서 원하는 화합물(60 mg, 41%)을 제공하였다. LC/MS: 637.9 [M+H]+.
단계 3: 1-(5-(4-(7-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-7-옥소헵틸)피페라진-1-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드피리미딘-2,4(1H,3H)-디온의 제조
[0284] 실온에서 질소하에서 교반된 ACN(10 mL) 중 7-브로모-1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)헵탄-1-온(60 mg, 0.09 mmol), 1-{2-메톡시-5-[(피페라진-1-일)카르보닐]페닐}-1,3-디아지난(31.20 mg, 0.09 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(36.33 mg, 0.28 mmol)의 용액에 아이오딘화 칼륨(3.1 mg, 0.02 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 5시간 동안 70℃에서 교반하였다. 용매를 제거하고, 잔여물을 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH=50:1-10:1)로 정제하여 황색 고체로서 생성물(21.3 mg, 0.024 mmol, 26%)을 제공하였다. LC/MS: 890.3 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.77 (s, 1H), 10.36 (s, 1H), 8.82 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.60 - 7.55 (m, 1H), 7.51 - 7.44 (m, 2H), 7.43 - 7.31 (m, 2H), 7.26 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.23 - 7.11 (m, 4H), 7.05 - 7.00 (m, 1H), 4.38 - 4.33 (m, 1H), 4.19 - 4.12 (m, 1H), 3.93 - 3.80 (m, 4H), 3.60 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 3.56 - 3.40 (m, 3H), 3.22 - 2.93 (m, 4H), 2.74 - 2.66 (m, 2H), 2.46 - 2.19 (m, 5H), 2.19 - 1.99 (m, 2H), 1.73 - 1.64 (m, 1H), 1.58 - 1.44 (m, 4H), 1.43 - 1.24 (m, 7H).
실시예 73: 1-(5-(4-(4-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)벤질)-1,4-디아제판-1-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온(화합물 79)의 제조
단계 1: tert-부틸 4-((4-(3-(2,4-디옥소테트라하이드로피리미딘-1(2H)-일)-4-메톡시 벤조일)-1,4-디아제판-1-일)메틸)벤조에이트의 제조
[0285] DMF(5 mL) 중 1-(5-(1,4-디아제판-1-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H, 3H)-디온(80 mg, 0.23 mmol)의 용액에 tert-부틸 4-(브로모메틸)벤조에이트(69 mg, 0.25 mmol) 및 K2CO3(64 mg, 0.46 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 17시간 동안 75℃에서 교반하였다. 용매를 진공하에서 제거하고, 잔여물을 PE:EA = 1:1로 Pre-TLC에 의해 정제하여 원하는 생성물(72 mg, 58%)을 제공하였다. LC/MS: 537.2 [M+H]+.
단계 2: 4-((4-(3-(2,4-디옥소테트라하이드로피리미딘-1(2H)-일)-4-메톡시벤조일)-1,4-디아제판-1-일)메틸)벤조산의 제조
[0286] DCM(3 mL) 중 tert-부틸 4-((4-(3-(2,4-디옥소테트라하이드로피리미딘-1(2H)-일)-4-메톡시벤조일)-1,4-디아제판-1-일)메틸)벤조에이트(72 mg, 0.13 mmol)의 용액에 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 반응물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 진공하에서 제거하여 생성물(80 mg)을 제공하였고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LC/MS: 481.0 [M+H]+.
단계 3: 1-(5-(4-(4-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)벤질)-1,4-디아제판-1-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온의 제조
[0287] DCM(5 mL) 중 4-((4-(3-(2,4-디옥소테트라하이드로피리미딘-1(2H)-일)-4-메톡시벤조일)-1,4-디아제판-1-일)메틸)벤조산(80 mg, 미정제)의 용액에 HATU(114 mg, 0.3 mmol) 및 DIEA(97 mg, 0.75mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 실온에서 교반하고, (2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-4-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(73 mg, 0.15 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 염수로 세척하고, 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 DCM:MeOH = 10:1로 Pre-TLC에 의해 정제하여 원하는 생성물(25 mg, 두 단계에 대해 21%)을 제공하였다. LC/MS: 910.1 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.77 (s, 1H), 10.34 (s, 1H), 8.85 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.58 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.48 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 7.44 - 7.31 (m, 6H), 7.26 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.23 - 7.17 (m, 3H), 7.16 - 7.11 (m, 1H), 7.03 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.42 - 4.20 (m, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.68 - 3.53 (m, 6H), 3.46 (s, 2H), 3.27 - 3.13(m, 2H), 2.75 - 2.60 (m, 4H), 2.59 - 2.53 (m, 1H), 2.23 - 1.92 (m, 3H), 1.86 - 1.66 (m, 3H), 1.60 - 1.48 (m, 2H).
실시예 74: 1-(5-(4-(4-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)벤질)피페라진-1-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온(화합물 80)의 제조
단계 1: tert-부틸 4-((4-(3-(2,4-디옥소테트라하이드로피리미딘-1(2H)-일)-4-메톡시 벤조일)피페라진-1-일)메틸)벤조에이트의 제조
[0288] DCM(20 mL) 중 tert-부틸 4-(브로모메틸)벤조에이트(150 mg, 0.55 mmol), 1-(2-메톡시-5-(피페라진-1-카르보닐)페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온(548 mg, 1.7 mmol) 및 DIEA(213 mg, 1.8 mmol)의 혼합물을 4시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 진공하에서 제거하여 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 Pre-TLC로 정제하여 생성물(160 mg, 50%)을 제공하였고, 이를 황색 고체로서 획득하였다. LC/MS: 522.8 [M+H]+.
단계 2: 4-((4-(3-(2,4-디옥소테트라하이드로피리미딘-1(2H)-일)-4-메톡시벤조일)피페라진-1-일)메틸)벤조산의 제조
[0289] DCM(20 mL) 중 tert-부틸 4-((4-(3-(2,4-디옥소테트라하이드로피리미딘-1(2H)-일)-4-메톡시벤조일)피페라진-1-일)메틸)벤조에이트(160 mg)의 용액에 TFA(6 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 농축시켜 미정제 화합물(180 mg)을 제공하였고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LC/MS: 466.7 [M+H]+.
단계 3: 1-(5-(4-(4-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)벤질)피페라진-1-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로 피리미딘-2,4(1H,3H)-디온의 제조
[0290] DMF(10 mL) 중 4-((4-(3-(2,4-디옥소테트라하이드로피리미딘-1(2H)-일)-4-메톡시벤조일)피페라진-1-일)메틸)벤조산(83 mg, 순도: 70%, 0.12 mmol), (2-클로로-4-페녹시페닐)(4-(피페리딘-4-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-5-일)메타논(60 mg, 0.12 mmol), HATU(57 mg, 0.15 mmol) 및 DIEA(48 mg, 0.37 MMOL)의 용액을 3시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 진공하에서 제거하여 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 Pre-TLC로 정제하여 백색 고체로서 표제 생성물(24 mg, 22%)을 제공하였다. LC/MS: 895.5 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.75 (s, 1H), 10.33 (s, 1H), 8.85 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.58 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.50 - 7.46 (m, 2H), 7.42 - 7.36 (m, 4H), 7.34 (s, 1H), 7.26 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.22 - 7.10 (m, 4H), 7.05 - 7.00 (m, 1H), 4.36 - 4.31 (m, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.65 - 3.45 (m, 8H), 3.32 (s, 3H), 3.29 - 3.17 (m, 2H), 2.67 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.46 - 2.37 (m, 3H), 2.15 - 2.00 (m, 2H), 1.62 - 1.52 (m, 2H).
실시예 75: (S)-N-(4-(4-아미노-1-(4-(3-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)아제티딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(화합물 85)의 제조
단계 1: (1-(2-플루오로-4-니트로페닐)아제티딘-3-일)메탄올의 제조
[0291] ACN(15 mL) 중 1,2-디플루오로-4-니트로벤젠(2.0 g, 12.6 mmol), 아제티딘-3-일메탄올(1.3 g, 15.1 mmol) 및 DIEA(4.9 g, 37.8 mmol)의 혼합물을 3시간 동안 80℃에서 교반하였다. 용매를 진공하에서 제거하고, 잔여물을 PE:EA = 1:1로 플래시 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 원하는 생성물(2.5 g, 88.1%)을 제공하였다. LC/MS: 227.0 [M+H]+.
단계 2: (1-(4-아미노-2-플루오로페닐)아제티딘-3-일)메탄올의 제조
[0292] MeOH(30 mL) 중 (1-(2-플루오로-4-니트로페닐)아제티딘-3-일)메탄올(2.5 g, 11.1 mmol)의 용액에 Pd/C(0.25 g, 10%)를 첨가하였다. 혼합물을 밤새 동안 1 atm에서 H2 하에서 실온에서 교반하였다. 촉매를 여과시키고, 용액을 진공하에서 농축시켜 생성물(2 g, 91.8%)을 제공하였다. LC/MS: 197.1 [M+H]+.
단계 3: (1-(2-플루오로-4-아이오도페닐)아제티딘-3-일)메탄올의 제조
[0293] 0℃에서 ACN(40 mL) 및 농축된 HCl(3.5 mL) 중 (1-(4-아미노-2-플루오로페닐)아제티딘-3-일)메탄올(2.0 g, 10.2 mmol)의 용액에 물(4 mL) 중 NaNO2(0.91 g, 13.2 mmol)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 0℃에서 교반한 후, 물(6 mL) 중 KI(4.3 g, 25.5 mmol)의 용액을 적가하였다. 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 혼합물을 물(15 mL)로 희석시키고, DCM(40 mL X 3)으로 추출하였다. 조합된 유기층을 진공하에서 농축시키고, 잔여물을 PE:EA = 2:1로 플래시 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 원하는 생성물(1.0 g, 31.3%)을 제공하였다. LC/MS: 308.0 [M+H]+.
단계 4: 1-(2-플루오로-4-아이오도페닐)아제티딘-3-카르브알데하이드의 제조
[0294] 0℃에서 질소하에서 교반된 DCM(10 mL) 중 (1-(2-플루오로-4-아이오도페닐)아제티딘-3-일)메탄올(1.0 g, 3.3 mmol)의 용액에 데스-마틴 페리오디난(2.1 g, 4.9 mmol)을 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 물(10 mL)을 첨가하여 반응을 켄칭시켰다. 유기상을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 용매를 진공하에서 제거하여 원하는 생성물(0.8 g, 78.7% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 306.0 [M+H]+.
단계 5: 3-(디메톡시메틸)-1-(2-플루오로-4-아이오도페닐)아제티딘의 제조
[0295] MeOH(10 mL) 중 1-(2-플루오로-4-아이오도페닐)아제티딘-3-카르브알데하이드(800 mg, 2.6 mmol)의 용액에 0℃에서 질소하에서 교반된 아세틸 클로라이드(310 mg, 3.9 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 25℃에서 교반하였다. TEA(1 mL)를 첨가하여 반응을 켄칭시켰다. 용매를 진공하에서 제거하고, 잔여물을 PE:EA = 5:1로 플래시 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 원하는 생성물(500 mg, 53.8%)을 제공하였다. LC/MS: 352.0 [M+H]+.
단계 6: N-(4-(4-아미노-1-(4-(3-(디메톡시메틸)아제티딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0296] DMSO(10 mL) 중 3-(디메톡시메틸)-1-(2-플루오로-4-아이오도페닐)아제티딘(400 mg, 1.14 mmol)의 용액에 N-(4-(4-아미노-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(536.3 mg, 1.37 mmol), K2CO3(472.3 mg, 3.41 mmol), 구리(I) 아이오다이드(119.3 mg, 0.62 mmol) 및 N,N-디메틸글리신(129.2 mg, 1.25 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 16시간 동안 110℃에서 교반하였다. 고체를 여과시키고, DCM(20 mLХ3)으로 세척하였다. 조합된 용액을 진공하에서 농축시키고, 잔여물을 DCM:MeOH = 10:1로 플래시에 의해 정제하여 원하는 생성물(200 mg, 80% 순도, 22.8% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 616.2 [M+H]+.
단계 7: N-(4-(4-아미노-1-(3-플루오로-4-(3-포르밀아제티딘-1-일)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0297] N-(4-(4-아미노-1-(4-(3-(디메톡시메틸)아제티딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(200 mg, 80% 순도, 0.26 mmol)의 용액에 THF:H2O:H2SO4(6 mL, 2:3:1)를 첨가하였다. 혼합물을 밤새 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 진공하에서 제거하고, 잔여물을 DCM(20 mL)으로 희석시켰다. 유기상을 포화 NaHCO3 용액, 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 용매를 진공하에서 제거하였다. 잔여물을 PE/EA = 1:1를 사용하여 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 원하는 생성물(100 mg, 67.5%)을 제공하였다. LC/MS: 570.1 [M+H]+.
단계 8: (S)-N-(4-(4-아미노-1-(4-(3-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)아제티딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일) 벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0298] MeOH/DMF(6 mL, 2:1) 중 N-(4-(4-아미노-1-(3-플루오로-4-(3-포르밀아제티딘-1-일)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(100 mg, 0.17 mmol), (S)-3-(1-옥소-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(63.4 mg, 0.19 mmol) 및 TEA(88 mg, 0.87 mmol)의 용액에 AcOH(0.5 mL) 및 NaBH3CN(44.1 mg, 0.70 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 60℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물(5 mL)을 첨가하여 켄칭시켰다. 혼합물을 DCM(15 mLХ3)으로 추출하였다. 유기상을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 용매를 제거하고, Prep-HPLC로 정제하여 원하는 화합물(50 mg, 98.7% 순도, 32.9% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 882.3[M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.96 (s, 1H), 8.90 (t, J = 6.2 Hz, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.93 - 7.89 (m, 1H), 7.85 - 7.83 (m, 1H), 7.73 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.55 - 7.52 (m, 4H), 7.38 - 7.33 (m, 1H), 7.21 - 7.18 (m, 1H), 7.10 - 7.06 (m, 2H), 6.72 (t, J = 9.3 Hz, 1H), 5.08 - 5.03 (dd, 1H), 4.60 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 4.34 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 4.22 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 4.12 - 4.10 (m, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.69 - 3.63 (m, 2H), 3.32 - 3.27 (m, 3H), 3.04 - 2.85 (m, 3H), 2.68 - 2.55 (m, 6H), 2.39 - 2.33 (m, 2H), 1.96 - 1.91 (m, 1H).
실시예 76: N-(4-(4-아미노-1-(1-(5-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(화합물 92)의 제조
단계 1: N-(4-(4-아미노-1-(1-(5-포르밀피리딘-2-일)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0299] 실온에서 교반된 DMSO(5 mL) 중 N-({4-[4-아미노-1-(피롤리딘-3-일)피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일]페닐}메틸)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(200 mg, 0.43 mmol)의 용액에 6-브로모피리딘-3-카르브알데하이드(121 mg, 0.65 mmol) 및 K2CO3(120 mg, 0.86 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 12시간 동안 80℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 물(100 mL)에 부은 후, EA(100 mLХ2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 물, 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 플래시 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH= 10:1)로 정제하여 원하는 생성물(150 mg, 61.1%)을 제공하였다. LC/MS: 566.9 [M+H]+.
단계 2: N-(4-(4-아미노-1-(1-(5-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0300] 실온에서 교반된 MeOH/DMF/HOAc(12 mL, 2:1:0.05) 중 N-(4-(4-아미노-1-(1-(5-포르밀피리딘-2-일)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(130 mg, 0.23 mmol)의 용액에 Et3N(36 mg, 0.36 mmol)을 첨가하고, (S)-3-(1-옥소-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(86 mg, 0.18 mmol) 및 NaBH3CN(45 mg, 0.72 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 60℃에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 농축시킨 후, 물(50 mL)에 붓고, EA(100 mL x 2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(200 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 미정제 생성물을 제공하였다. 미정제 생성물을 Prep-HPLC로 정제하여 원하는 생성물(18 mg, 8.9%)을 제공하였다. LC/MS: 879.0 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ = 10.94 (s, 1H), 8.85 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.99 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.61 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 7.53 - 7.45 (m, 5H), 7.36 - 7.31 (m, 1H), 7.18 (dd, J= 9.2, 4.4 Hz, 1H), 7.05 (s, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.50 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 5.62 - 5.57 (m, 1H), 5.04 (dd, J= 13.2, 5.2 Hz, 1H), 4.57 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 4.32 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 4.19 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 4.01 - 3.91 (m, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.86 - 3.72 (m, 3H), 3.65 - 3.55 (m, 2H), 3.38 (s, 2H), 3.32 - 3.25 (m, 4H), 2.94 - 2.84 (m, 2H), 2.62 - 2.58 (m, 1H), 2.56 - 2.52 (m, 3H), 1.98 - 1.92 (m, 1H).
실시예 77: N-(4-(4-아미노-1-(6-((R)-3-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피롤리딘-1-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(화합물 93)의 제조
화합물 (66)에 대해 설명된 절차와 유사하게 화합물 (93)을 제조하였다.
LC/MS: 878.8 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.96 (s, 1H), 8.93 - 8.86 (m, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.08 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 7.59 - 7.49 (m, 4H), 7.38 - 7.32 (m, 1H), 7.20 (dd, J = 9.1, 4.2 Hz, 1H), 7.14 - 7.04 (m, 2H), 6.62 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 13.0, 4.7 Hz, 1H), 4.60 (d, J = 5.9 Hz, 2H), 4.34 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 4.21 (d, J = 16.7 Hz, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.71 - 3.50 (m, 3H), 3.49 - 3.36 (m, 3H), 3.27 - 3.15 (m, 2H), 2.89 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 2.70 - 2.53 (m, 6H), 2.48 - 2.41 (m, 4H), 2.17 - 2.10 (m, 1H), 1.99 - 1.94 (m, 1H), 1.80 - 1.72 (m, 1H).
실시예 78: N-(4-(4-아미노-1-(6-((S)-3-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피롤리딘-1-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(화합물 94)의 제조
단계 1: 4-((5-플루오로-2-메톡시벤즈아미도)메틸)벤조산의 제조
[0301] 실온에서 교반된 THF/물(100 mL, 1:1) 중 메틸 4-{[(5-플루오로-2-메톡시페닐)포름아미도]메틸}벤조에이트(7.1 g, 22.37 mmol)의 용액에 LiOH-H2O(4.7 g, 111.9 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 50 mL로 진공하에서 농축시킨 후, pH= 5-6이 될때까지 HCl(5 M)로 산성화시켰다. 고체를 여과시키고, 물로 세척하고, 진공하에서 건조시켜 원하는 생성물(6 g, 88.42%)을 제공하였다. LC/MS: 304.0 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ = 8.89 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 7.91 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 7.50 (dd, J= 9.2, 3.2 Hz, 1H), 7.43 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 7.37 - 7.31 (m, 1H), 7.18 (dd, J= 9.2, 4.4 Hz, 1H), 4.56 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 3.89 (s, 3H).
단계 2: 4-((5-플루오로-2-메톡시벤즈아미도)메틸)벤조일 클로라이드의 제조
[0302] 실온에서 교반된 DCM(50 mL) 중 4-{[(5-플루오로-2-메톡시페닐)포름아미도]메틸}벤조산(3.9 g, 12.86 mmol)의 용액에 옥살릴 클로라이드(2.2 mL, 25.72 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에서 농축시켜 갈색 오일로서 표제 화합물(4.0 g, 미정제)을 제공하였다.
단계 3: N-(4-(2,2-디시아노아세틸)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0303] 5℃에서 교반된 아세톤(40 mL) 중 4-{[(5-플루오로-2-메톡시페닐)포름아미도]메틸}벤조일 클로라이드(4 g, 미정제) 및 프로판디니트릴(960 mg, 14.54 mmol)의 용액에 NaOH(4 mL, 39.26 mmol, 40%)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 물(40 mL)로 희석시키고, HCl(5 M)을 첨가하여 pH를 2-3으로 조정하였다. 고체를 여과시키고, 물로 세척하고, 진공하에서 건조시켜 백색 고체로서 원하는 생성물(3.8 g, 두 단계에 대해 84.10%)을 제공하였다. LC/MS: 351.8 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ = 10.89 (s, 1H), 8.86 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 7.57 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 7.50 (dd, J= 9.2, 3.2 Hz, 1H), 7.37 - 7.30 (m, 3H), 7.17 (dd, J= 9.2, 4.4 Hz, 1H), 4.52 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 3.88 (s, 3H).
단계 4: N-(4-(2,2-디시아노-1-메톡시비닐)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0304] 실온에서 교반된 디옥산(40 mL) 중 N-{[4-(2,2-디시아노아세틸)페닐]메틸}-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(3.14 g, 8.94 mmol)의 용액에 NaHCO3(6.0 g, 71.52 mmol) 및 디메틸 설페이트(8.45 g, 67.05 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 2.5시간 동안 100℃에서 교반하였다. 혼합물을 물(60 mL)에 붓고, EtOAc(100 mLХ2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(200 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 갈색 오일로서 표제 화합물(3.5 g, 미정제)을 제공하였다. LC/MS: 366.0 [M+H]+.
단계 5: N-(4-(5-아미노-4-시아노-1H-피라졸-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0305] 실온에서 교반된 밀봉된 튜브에서 MeOH/물(20 mL, 2:1) 중 N-{[4-(2,2-디시아노-1-메톡시에트-1-엔-1-일)페닐]메틸}-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(6.2 g, 미정제)의 용액에 하이드라진(1.4 g, 34.16 mmol, 80%)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 12시간 동안 100℃에서 교반하였다. 혼합물을 물(100 mL)에 붓고, EtOAc(100 mLХ2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(200 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 플래시 크로마토그래피(DCM: MeOH= 10:1)로 정제하여 원하는 생성물(2.36 g, 두 단계에 대해 36.1%)을 제공하였다. LC/MS: 366.0 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ = 12.12 (s, 1H), 8.84 (s, 1H), 7.74 (d, J= 7.6 Hz, 2H), 7.51 (dd, J= 9.2, 3.2 Hz, 1H), 7.42 - 7.38 (m, 2H), 7.36 - 7.30 (m, 1H), 7.18 (dd, J= 9.2, 4.4 Hz, 1H), 6.46 (s, 1H), 4.53 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 3.89 (s, 3H).
단계 6: N-(4-(4-아미노-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0306] 포름아미드(30 mL) 중 N-{[4-(5-아미노-4-시아노-1H-피라졸-3-일)페닐]메틸}-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(2.36 g, 6.46 mmol)를 2시간 동안 160℃에서 교반하였다. 혼합물을 물(100 mL)에 붓고, EtOAc(100 mLХ2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(200 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 플래시 크로마토그래피(DCM: MeOH= 10:1)로 정제하여 원하는 생성물(2.1 g, 82.8%)을 제공하였다. LC/MS: 393.0 [M+H]+.
단계 7: (R)-(1-(5-아이오도피리딘-2-일)피롤리딘-3-일)메탄올의 제조
[0307] 실온에서 교반된 DMF(30 mL) 중 2-플루오로-5-아이오도피리딘(3 g, 13.45 mmol)의 용액에 (3R)-피롤리딘-3-일메탄올(2.04 g, 20.18 mmol) 및 K2CO3(5.6 g, 40.36 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 12시간 동안 100℃에서 교반하였다. 혼합물을 물(100 mL)에 붓고, EtOAc(100 mLХ2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(200 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 플래시 크로마토그래피(PE:EtOAc= 3:1)로 정제하여 원하는 생성물(3.0 g, 73.3%)을 제공하였다. LC/MS: 304.8 [M+H]+.
단계 8: (R)-1-(5-아이오도피리딘-2-일)피롤리딘-3-카르브알데하이드의 제조
[0308] -78℃에서 교반된 DCM(30 mL) 중 옥살릴 클로라이드(2.42 g, 19.07 mmol)의 용액에 15분 동안 -78℃에서 천천히 DMSO(3 g, 38.14 mmol)를 첨가하였다. 이후, DCM(5 mL) 중 [(3R)-1-(5-아이오도피리딘-2-일)피롤리딘-3-일]메탄올(2.9 g, 9.54 mmol)의 용액을 천천히 첨가하였다. 15분 후, Et3N(3.86 g, 38.14 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 -78℃에서 교반한 후, 실온으로 가온시키고, 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM(65 mL)로 희석시키고, 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 갈색 고체로서 표제 화합물(3.0 g, 미정제)을 제공하였다. LC/MS: 302.7 [M+H]+.
단계 9: (R)-2-(3-(디메톡시메틸)피롤리딘-1-일)-5-아이오도피리딘의 제조
[0309] 0℃에서 교반된 MeOH(30 mL) 중 (3R)-1-(5-아이오도피리딘-2-일)피롤리딘-3-카르브알데하이드(3 g, 미정제)의 용액에 아세틸 클로라이드(1.56 g, 19.86 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 Et3N(2 mL)로 켄칭시키고, 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 플래시 크로마토그래피(PE:EtOAc= 5:1)로 정제하여 원하는 생성물(2.6 g, 78.3%)을 제공하였다. LC/MS: 348.7 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.28 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.61 (dd, J= 8.8, 2.4 Hz, 1H), 6.21 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 4.29 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 3.59 - 3.51 (m, 2H), 3.42 - 3.34 (m, 7H), 3.25 (dd, J= 10.8, 7.6 Hz, 1H), 2.73 - 2.63 (m, 1H), 2.16 - 2.05 (m, 1H), 1.94 - 1.84 (m, 1H).
단계 10: (R)-N-(4-(4-아미노-1-(6-(3-(디메톡시메틸)피롤리딘-1-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0310] DMSO(10 mL) 중 (R)-2-(3-(디메톡시메틸)피롤리딘-1-일)-5-아이오도피리딘(300 mg, 0.86 mmol)의 용액에 25℃에서 질소하에서 교반된 N-(4-(4-아미노-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(337 mg, 0.86 mmol), Na2CO3(182 mg, 1.72 mmol), 구리(I) 아이오다이드(82 mg, 0.43 mmol) 및 N,N-디메틸글리신(89 mg, 0.86 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 16시간 동안 110℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과시키고, DCM으로 세척하였다. 용액을 진공하에서 농축시키고, 잔여물을 플래시 컬럼 크로마토그래피(DCM:MeOH= 10:1)로 정제하여 황색 고체로서 원하는 생성물(460 mg, 87.2%)을 제공하였다. LC/MS: 612.7 [M+H]+.
단계 11: (R)-N-(4-(4-아미노-1-(6-(3-포르밀피롤리딘-1-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0311] 무수 THF(2.5 mL) 중 (R)-N-(4-(4-아미노-1-(6-(3-(디메톡시메틸)피롤리딘-1-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(460 mg, 0.75 mmol)의 용액에 HCl(4N, 디옥산 중 2.5 ml)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 4시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 진공하에서 제거하고, 잔여물을 DCM으로 용해시켰다. 유기상을 NaHCO3, 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 황색 고체로서 표제 화합물(300 mg, 미정제)을 제공하였다. LC/MS: 566.8 [M+H]+.
단계 12: N-(4-(4-아미노-1-(6-((S)-3-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피롤리딘-1-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0312] 실온에서 교반된 MeOH/DMF(12 mL, 2:1) 중 (R)-N-(4-(4-아미노-1-(6-(3-포르밀피롤리딘-1-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(300 mg，미정제)의 용액에 (S)-3-(1-옥소-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(260 mg, 0.53 mmol) 및 Et3N(107 mg, 1.06 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반한 후, AcOH(1 mL) 및 NaBH3CN(134 mg, 2.12 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 60℃에서 질소하에서 교반하였다. 혼합물을 물로 희석시키고, DCM으로 추출하였다. 유기상을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 Prep-HPLC로 정제하여 원하는 화합물(30.5 mg, 6.9%)을 제공하였다. LC/MS: 878.8 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ = 10.98 (s, 1H), 8.92 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 8.70 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.18 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.73 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 7.61 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.57 - 7.50 (m, 3H), 7.39 - 7.33 (m, 1H), 7.23 - 7.15 (m, 3H), 6.71 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 5.07 (dd, J= 13.2, 4.8 Hz, 1H), 4.61 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 4.37 (d, J=17.2, 1H), 4.25 (d, J=17.2, 1H), 4.10 - 4.02 (m, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.41 - 3.37 (m, 2H), 3.27 - 3.22 (m, 4H), 2.95 - 2.85 (m, 2H), 2.77 (d, J= 5.2 Hz, 2H), 2.65 - 2.55 (m, 1H), 2.45 - 2.30 (m, 2H), 2.27 - 2.24 (m, 2H), 1.98 - 1.93 (m, 2H), 1.91 - 1.85 (m, 2H).
실시예 79: N-(4-(4-아미노-1-(4-((R)-3-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피롤리딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(화합물 95)의 제조
단계 1: (S)-(1-(2-플루오로-4-니트로페닐)피롤리딘-3-일)메탄올의 제조
[0313] CH3CN(30 mL) 중 1,2-디플루오로-4-니트로벤젠(2.0 g, 12.6 mmol)의 용액에 (3S)-피롤리딘-3-일메탄올 하이드로클로라이드(1.91 g, 13.8 mmol) 및 DIEA(4.89 g, 37.8 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 3시간 동안 80℃에서 교반한 후, 물을 첨가하여 켄칭시켰다. 혼합물을 EA로 추출하고, 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 용매를 진공하에서 제거하고, 잔여물을 PE:EA = 1:1로 플래시에 의해 정제하여 황색 고체로서 원하는 생성물(2.8 g, 90% 순도, 82.5% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 241.1 [M+H]+.
단계 2: (S)-(1-(4-아미노-2-플루오로페닐)피롤리딘-3-일)메탄올의 제조
[0314] 메탄올(40 mL) 중 (S)-(1-(2-플루오로-4-니트로페닐)피롤리딘-3-일)메탄올(2.8 g, 90% 순도, 10.5 mmol)의 용액에 Pd/C(0.28 g, 10%)를 첨가하였다. 반응물을 25℃에서 16시간 동안 1 atm에서 H2 분위기 하에서 교반하였다. 촉매를 여과시키고, MeOH로 세척하였다. 용액을 진공하에서 농축시켜 갈색 오일로서 원하는 생성물(2.2 g, 99.6%)을 제공하였다. LC/MS: 211.1 [M+H]+.
단계 3: (S)-(1-(2-플루오로-4-아이오도페닐)피롤리딘-3-일)메탄올의 제조
[0315] 0℃에서 CH3CN(30 mL) 중 (S)-(1-(4-아미노-2-플루오로페닐)피롤리딘-3-일)메탄올(2.1 g, 9.98 mmol)의 용액에 농축된 HCl(2.5 mL), NaNO2(827 mg, 11.98 mmol, 5 mL H2O에 용해됨)를 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 0℃에서 교반하고, KI(4.14 g, 24.97 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 17시간 동안 실온에서 교반하였다. 물(40 mL)을 첨가하여 반응을 켄칭시키고, EA(40 mLХ3)로 추출하였다. 유기상을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 용매를 진공하에서 제거하였다. 잔여물을 PE:EA = 3:1로 플래시에 의해 정제하여 황색 고체로서 원하는 생성물(2 g, 62.3%)을 제공하였다. LC/MS: 321.8 [M+H]+.
단계 4: (S)-1-(2-플루오로-4-아이오도페닐)피롤리딘-3-카르브알데하이드의 제조
[0316] DCM(20 mL) 중 (S)-(1-(2-플루오로-4-아이오도페닐)피롤리딘-3-일)메탄올(1.9 g, 5.9 mmol)의 용액에 데스-마틴 페리오디난(3.75 g, 8.8 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 2시간 동안 25℃에서 교반하였다. 포화 Na2S2O3 용액으로 반응을 켄칭시킨 후, EA로 추출하였다. 유기상을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 용매를 진공하에서 제거하고, 잔여물을 PE:EA = 1:1로 플래시에 의해 정제하여 백색 고체로서 원하는 생성물(2 g, 80% 순도, 84.9% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 319.8 [M+H]+.
단계 5: (S)-3-(디메톡시메틸)-1-(2-플루오로-4-아이오도페닐)피롤리딘의 제조
[0317] MeOH(20 mL) 중 (S)-1-(2-플루오로-4-아이오도페닐)피롤리딘-3-카르브알데하이드(2.0 g, 80% 순도, 5.0 mmol)의 용액에 0℃에서 질소하에서 교반된 아세틸 클로라이드(1.04 g, 13.2 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 2시간 동안 25℃에서 교반하였다. TEA로 반응을 켄칭시키고, 용매를 진공하에서 제거하였다. 잔여물을 PE:EA = 1:1로 플래시 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 고체로서 원하는 생성물(1.0 g, 90% 순도, 49.2% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 365.7 [M+H]+.
단계 6: (S)-N-(4-(4-아미노-1-(4-(3-(디메톡시메틸)피롤리딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0318] DMSO(10 mL) 중 (S)-3-(디메톡시메틸)-1-(2-플루오로-4-아이오도페닐)피롤리딘(220 mg, 90% 순도, 0.54 mmol)의 용액에 25℃에서 질소하에서 교반된 N-[(4-{4-아미노-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일}페닐)메틸]-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(257.89 mg, 0.65 mmol), Na2CO3(127.72 mg, 1.2 mmol), 구리(I) 아이오다이드(57.37 mg, 0.3 mmol) 및 N,N-디메틸글리신(62.13 mg, 0.6 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 16시간 동안 110℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과시키고, DCM으로 세척하였다. 용매를 진공하에서 제거하고, 잔여물을 DCM:MeOH = 10:1로 플래시에 의해 정제하여 황색 고체로서 원하는 생성물(170 mg, 90% 순도, 44.1% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 629.8 [M+H]+.
단계 7: (S)-N-(4-(4-아미노-1-(3-플루오로-4-(3-포르밀피롤리딘-1-일)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0319] DCM(4 mL) 중 (S)-N-(4-(4-아미노-1-(4-(3-(디메톡시메틸)피롤리딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(170 mg, 90% 순도, 0.24 mmol)의 용액에 25℃에서 질소하에서 교반된 HCl(디옥산 중 4N, 4 mL)을 첨가하였다. 반응물을 4시간 동안 25℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 용액으로 염기성화시키고, DCM으로 추출하였다. 유기상을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 용액을 진공하에서 농축시켜 황색 고체로서 원하는 생성물(160 mg, 미정제)을 제공하였다. LC/MS: 583.8 [M+H]+.
단계 8: N-(4-(4-아미노-1-(4-((R)-3-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피롤리딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0320] MeOH/DMF/AcOH(5 mL, 2:1:0.02) 중 (S)-3-(1-옥소-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(150 mg, 0.3 mmol)의 용액에 (S)-N-(4-(4-아미노-1-(3-플루오로-4-(3-포르밀피롤리딘-1-일)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(150 mg, 0.25 mmol), TEA(52 mg, 0.51 mmol) 및 NaBH3CN(48 mg, 0.77 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 1시간 동안 60℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 후, 물로 켄칭시켰다. 혼합물을 DCM으로 추출하고, 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 DCM:MeOH = 10:1로 Prep-TLC에 의해 정제하여 백색 고체로서 원하는 생성물(60 mg, 26.0%)을 제공하였다. LC/MS: 896.7 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, ) δ 10.92 (s, 1H), 8.86 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 8.32 ( s, 1H), 7.89 (dd, J = 15.2, 2.5 Hz, 1H), 7.79 (dd, J = 8.8, 2.0 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.52 - 7.47 (m, 4H), 7.34 - 7.28 (m, 1H), 7.16 (dd, J = 9.1, 4.3 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 6.84 (t, J = 9.5 Hz, 1H), 5.02 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.57 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 4.30 (d, J = 17.0 Hz, 1H), 4.17 (d, J = 17.0 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.51 - 3.45 (m, 1H), 3.42 - 3.37 (m, 2H), 3.27 - 3.25 (m, 3H), 3.21 - 3.11 (m, 2H), 2.90 - 2.81 (m, 1H), 2.60 - 2.52 (m, 6H), 2.41 - 2.24 (m, 4H), 2.07 - 2.01 (m, 1H), 1.95 - 1.89 (m, 1H), 1.69 - 1.62 (m, 1H).
실시예 80: N-(4-(4-아미노-1-(4-((S)-3-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피롤리딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(화합물 96)의 제조
화합물 (95)에 대해 설명된 절차와 유사하게 화합물 (96)을 제조하였다.
LC/MS: 896.6 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.98 (s, 1H), 9.61 (bs, 1H), 8.93 - 8.90 (m, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.99 - 7.85 (m, 2H), 7.73 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.63 - 7.50 (m, 4H), 7.39 - 7.33 (m, 1H), 7.20 (m, 3H), 6.94 - 6.89 (m, 1H), 5.07 (m, 1H), 4.61 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 4.39 - 4.35 (m, 1H), 4.26 - 4.22 (m, 1H), 4.08 - 4.02 (m, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.74 - 3.63 (m, 3H), 3.54 - 3.36 (m, 4H), 3.28 - 3.13 (m, 5H), 2.95 - 2.76 (m, 3H), 2.64 - 2.56 (m, 1H), 2.43 - 2.34 (m, 1H), 2.26 - 2.18 (m, 1H), 2.00 - 1.94 (m, 1H), 1.82 - 1.74 (m, 1H).
실시예 81: (S)-N-(4-(4-아미노-1-(6-(3-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)아제티딘-1-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(화합물 97)의 제조
단계 1: (1-(5-아이오도피리딘-2-일)아제티딘-3-일)메탄올의 제조
[0321] 실온에서 아르곤 하에서 교반된 DMA(100 mL) 중 2-플루오로-5-아이오도피리딘(2.2 g, 9.86 mmol)의 용액에 아제티딘-3-일메탄올(1.2 g, 9.86 mmol) 및 탄산 칼륨(4.1 g, 29.59 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 동안 100℃에서 교반하였다. 물(50 mL)을 첨가하여 반응을 켄칭시키고, DCM(50 mLХ3)으로 추출하였다. 유기상을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 용매를 진공하에서 제거하고, 잔여물을 PE:EA = 5:1로 플래시 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 황색 고체로서 원하는 생성물(1.5 g, 52.4%)을 제공하였다. LC/MS: 290.8 [M+H]+.
단계 2: 1-(5-아이오도피리딘-2-일)아제티딘-3-카르브알데하이드의 제조
[0322] 실온에서 교반된 DCM(80 mL) 중 [1-(5-아이오도피리딘-2-일)아제티딘-3-일]메탄올(1.4 g, 4.82 mmol)의 용액에 데스-마틴 페리오디난(3 g, 7.24 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 4시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 진공하에서 제거하고, 잔여물을 PE:EA = 5:1로 플래시에 의해 정제하여 황색 고체로서 원하는 생성물(700 mg, 50.3%)을 제공하였다. LC/MS: 306.7 [M+H2O]+.
단계 3: 2-(3-(디메톡시메틸)아제티딘-1-일)-5-아이오도피리딘의 제조
[0323] 0℃에서 아르곤 하에서 교반된 MeOH(10 mL) 중 1-(5-아이오도피리딘-2-일)아제티딘-3-카르브알데하이드(700 mg, 2.42 mmol)의 용액에 아세틸 클로라이드(381 mg, 4.859 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. TEA(1 mL)로 반응을 켄칭시켰다. 용매를 진공하에서 제거하고, 잔여물을 PE:EA = 5:1로 플래시 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 원하는 생성물(400 mg, 49.2%)을 제공하였다. LC/MS: 334.8 [M+H]+.
단계 4: N-(4-(4-아미노-1-(6-(3-(디메톡시메틸)아제티딘-1-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0324] DMSO(13 mL) 중 2-[3-(디메톡시메틸)아제티딘-1-일]-5-아이오도피리딘(200 mg, 0.59 mmol)의 용액에 25℃에서 질소하에서 교반된 N-[(4-{4-아미노-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일}페닐)메틸]-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(282 mg, 0.71 mmol), Na2CO3(139.5 mg, 1.31 mmol), 구리(I) 아이오다이드(63 mg, 0.32 mmol) 및 N,N-디메틸글리신(67.89 mg, 0.65 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 밤새 동안 110℃에서 교반하였다. 물(50 mL)을 첨가하여 반응을 켄칭시키고, DCM(50 mL X 3)으로 추출하였다. 유기상을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 용매를 진공하에서 제거하고, 잔여물을 DCM:MeOH = 10:1로 플래시 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 고체로서 원하는 생성물(200 mg, 55.8%)을 제공하였다. LC/MS: 599.2 [M+H]+.
단계 5: N-(4-(4-아미노-1-(6-(3-포르밀아제티딘-1-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0325] 실온에서 교반된 DCM(10 mL) 중 N-{[4-(4-아미노-1-{6-[3-(디메톡시메틸)아제티딘-1-일]피리딘-3-일}피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)페닐]메틸}-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(100 mg, 0.16 mmol)의 용액에 HCl/디옥산(10 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 용액을 진공하에서 농축시켜 황색 고체로서 표제 화합물(110 mg, 미정제)을 제공하였다. LC/MS: 553.2 [M+H]+.
단계 6: (S)-N-(4-(4-아미노-1-(6-(3-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)아제티딘-1-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드의 제조
[0326] 실온에서 아르곤 하에서 교반된 MeOH(6 mL)/DMF(3 mL) 중 (S)-3-(1-옥소-5-(피페라진-1-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온(105.6 mg, 0.217 mmol)의 용액에 TEA(37 mg, 0.36 mmol) 및 N-[(4-{4-아미노-1-[6-(3-포르밀아제티딘-1-일)피리딘-3-일]피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일}페닐)메틸]-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드(100 mg, 0.181 mmol)를 첨가하였다. 이후, NaBH3CN(34 mg,0.54 mmol) 및 AcOH(0.5 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 60℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물(10 mL)을 첨가하여 켄칭시켰다. 혼합물을 DCM(10 mLХ3)으로 추출하였다. 조합된 유기상을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 용매를 진공하에서 제거하고, 잔여물을 DCM:MeOH = 10:1로 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 고체로서 원하는 생성물(30 mg, 97.65% 순도, 18.7% 수율)을 제공하였다. LC/MS: 864.5 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.97 (s, 1H), 8.93 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.69 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.17 - 8.10 (m, 1H), 7.72 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.59 - 7.48 (m, 4H), 7.38 - 7.32 (m, 1H), 7.20 (dd, J = 9.2, 4.3 Hz, 1H), 7.15 - 7.00 (m, 2H), 6.56 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 13.2, 5.1 Hz, 1H), 4.60 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 4.40 - 4.05 (m, 5H), 3.91 (s, 3H), 3.80 - 3.62 (m, 2H), 3.35 - 3.25 (m, 3H), 3.20 - 2.80 (m, 4H), 2.73 - 2.55 (m, 4H), 2.43 - 2.35 (m, 2H), 2.11 - 1.88 (m, 2H), 1.25 - 1.20 (m, 1H).
BTK 활성에 대한 화합물의 시험
실시예 82. RAMOS 세포주에서 본 발명의 개시의 예시적 화합물의 BTK 분해 활성.
[0327] RAMOS(ATCC) 세포를 24-웰 플레이트에서 10% 열-불활성화된 FBS 및 1x 페니실린 스트렙토마이신을 함유하는 RPMI 성장 배지에서 8Х105 세포/웰로 플레이팅한 후, 밤새 37℃에서 인큐베이션하였다. 다음날, DMSO에서 제조된 1000x 화합물 스톡 용액을 다양한 농도로 사용하여 시험 화합물을 세포에 투여하였다. 화합물의 투여 후, 세포를 6시간 동안 37℃에서 인큐베이션하였다.
[0328] 완료시, 세포를 원심분리에 의해 수집하고, Laemmli 샘플 완충액(1x; VWR International)에서 용해시켰다. 세포 용해질의 단백질을 SDS-PAGE에 의해 분리하고, iblot® 건조 블로팅 전달 시스템(ThermoFisher)을 이용하여 Odyssey 니트로셀룰로스 막(Licor)으로 옮겼다. 비특이적 결합을 가벼운 진탕과 함께 실온에서 1시간 동안 Intercept Blocking Buffer(Licor)와 함께 막을 인큐베이션함으로써 차단하였다. 이후, 막을 0.1% Tween 20을 함유하는 Intercept Blocking Buffer에 희석된 일차 항체 항-BTK(Cell signaling, cat. #8547) 및 항-GAPDH(Cell signaling, cat. #5179)와 함께 4℃에서 밤새 인큐베이션하였다. TBS-T로 3회 세척한 후, 막을 1시간 동안 IRDye® 800CW 염소 항-마우스 IgG(1:20,000, Licor) 또는 IRDye® 800CW 염소 항-토끼 IgG(1:20,000, Licor)와 함께 인큐베이션하였다. TBS-T 세척 후, 막을 TBS에서 헹구고, Odyssey® CLx Imaging System(Licor)에서 스캐닝하였다. 밴드를 Image Studio™ Software(Licor)를 사용하여 정량화하였다.
[0329] 도 1 및 도 2는 투여 6시간 후 RAMOS 세포주에서 본 발명의 개시의 예시적 화합물 13, 25, 34, 42, 48, 49, 51, 53, 54, 78, 93 및 96의 BTK 분해 활성을 예시한다.
[0330] 표 3은 투여 6시간 후 RAMOS 세포주에서 본 발명의 개시의 예시적 화합물의 BTK 분해 활성을 요약한다. DC50 값(즉, 표적 단백질의 50%가 분해되는 시험 화합물의 농도)을 계산하였다. "A"의 지정은 10 nM 미만의 DC50 값에 해당한다. "B"의 지정은 10 nM 이상 및 100 nM 미만의 DC50 값에 해당한다. "C"의 지정은 100 nM 이상의 DC50 값에 해당한다.
표 3
실시예 83. REC-1 BTK C481S 세포주의 생성
[0331] REC-1 세포주(ATCC)의 BTK 유전자를 CRISPR-Cas9 기술로 편집하여 BTK 단백질의 잔기 481에서 C에서 S로의 점 돌연변이를 생성하였다. 유전자 편집을 위해, 먼저, Alt-R CRISPR-Cas9 tracrRNA 및 crRNA BTKC481S(5'-GUAGUUCAGGAGGCAGCCAU-3')(IDT-Integrated DNA Technologies)로 gRNA 복합체를 제조한 후, gRNA 복합체 및 Alt-R S.p. Cas9 Nuclease V3(IDT-Integrated DNA Technologies)로 BTKC481S 리보핵산단백질(RNP) 복합체를 제조하였다. 다음으로, 1 x 105 REC-1 세포를 1400 V, 10 ms, 3 펄스의 조건하에서 Neon Transfection System(Thermo Fisher)을 사용하여 BTKC481S RNP 복합체, Alt-R Cas9 Electroporation Enhancer 및 BTKC481S Ultramer DNA Oligo(5'-AGCTGCTGAGTCTGGAAGCGGTGGCGCATCTCCCTCAGATAGTTCAGGAGGGAGCCGTTGGCCATGTACTCAGTGATGATGAAGATGGGGCGCTGCTTGGTGCAG-3')(IDT-Integrated DNA Technologies)로 전기천공시켰다. 이후, 세포를 10일 동안 96-웰 플레이트에 플레이팅하고, 5 계대 동안 10 nM 이브루티닙(Ibrutinib)으로 선택하였다. BTK의 C481S 돌연변이를 이들 세포에서 추출된 gDNA를 사용하여 생거 시퀀싱(Sanger Sequencing)에 의해 추가로 검증하였다.
BTK-의존성 REC-1 및 REC-1 BTK C481S 세포주에서 본 발명의 개시의 예시적 화합물의 성장 억제 활성.
[0332] REC-1(ATCC) 및 REC-1 BTKC481S 세포를 96-웰 플레이트에서 10% 열-불활성화된 FBS 및 1x 페니실린 스트렙토마이신을 함유하는 90 ul의 RPMI 성장 배지에서 8,000 세포/웰로 플레이팅한 후, 밤새 37℃에서 인큐베이션하였다. 다음날, 시험 화합물을 다양한 농도로 성장 배지에서 제조된 10x 화합물 스톡 용액을 사용하여 세포에 투여하였다. 화합물의 투여 후, 세포를 6일 동안 37℃에서 인큐베이션하였다. CellTiter-Glo 검정 전, 플레이트를 대략 10분 동안 실온에서 평형화하였다. 100 ul의 CellTiter-Glo® Reagent(Promega)를 각각의 웰에 첨가하였다. 이후, 플레이트를 10분 동안 실온에서 인큐베이션하고, 발광을 EnSpire 플레이트 판독기(PerkinElmer)로 기록하였다.
[0333] 표 4는 투여 6일 후 BTK-의존성 REC-1 및 REC1 BTKC481S 세포주에서 본 발명의 개시의 예시적 화합물의 성장 억제 활성을 요약한다.
[0334] GI50 값(즉, 세포 성장의 50%가 억제되는 시험 화합물의 농도)을 계산하였다. "A"의 지정은 20 nM 미만의 DC50 값에 해당한다. "B"의 지정은 20 nM 이상 및 200 nM 미만의 DC50 값에 해당한다. "C"의 지정은 200 nM 이상의 DC50 값에 해당한다.
표 4
[0335] 본 발명의 개시의 많은 특징 및 이점은 상세한 명세서로부터 명백하므로, 첨부된 청구항은 본 발명의 개시의 진정한 사상 및 범위 내에 속하는 본 발명의 개시의 이러한 모든 특징 및 이점을 포함하는 것으로 의도된다. 또한, 다수의 변형 및 변화가 당업자에게 용이하게 일어날 것이므로, 본 발명의 개시를 예시되고 설명된 정확한 구성 및 작업으로 제한하는 것은 바람직하지 않으며, 따라서 본 발명의 개시의 범위 내에 속하는 모든 적합한 변형 및 등가물에 의지할 수 있다.
[0336] 또한, 당업자는 본 발명의 개시가 기초로 하는 개념이 본 발명의 개시의 여러 목적을 수행하기 위한 다른 구조, 방법 및 시스템을 설계하기 위한 기초로서 용이하게 사용될 수 있음을 인식할 것이다. 따라서, 청구항은 전술한 설명 또는 실시예에 의해 제한되는 것으로 간주되어서는 안 된다.

Claims (44)

  1. 하기 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 토토머, 입체이성질체 또는 입체이성질체의 혼합물, 또는 약학적으로 허용되는 염, 또는 수화물, 또는 중수소화된 유도체:

    상기 식에서,
    X는 CH 또는 N이고;
    Y는 CH 또는 N이고;
    A는 -C(O)-, -SO2-, -S(O)-, -O-, -S-, -NH-, -N(C1-C5알킬)-, 및 -C(O)NH(C1-C5알킬)-로부터 선택되고;
    B는 또는 이고, 단, B가 인 경우, A는 -O-가 아니고;
    R1은 H, C1-C3 알킬, C1-C3할로알킬, 디알킬아미노 기, 아미노 기, -CN, 하이드록실, C1-C4알콕시, 및 할로겐으로부터 선택되고;
    각각의 R2 및 R3는 독립적으로 H, 할로겐, -CN, 하이드록실, 디알킬아미노 기, C1-C5알킬, 중수소화된 C1-C5 알킬, C1-C5알콕시, 중수소화된 C1-C5알콕시, 및 C1-C5할로알킬로부터 선택되고;
    Q는 L-W1 또는 L-W2이고;
    여기서,
    L은 2 내지 20개의 탄소 원자 길이의 링커이고, 여기서 하나 이상의 탄소 원자는 선택적으로 및 독립적으로 C(=O), O, N(R6), S, S(O), SO2, C(O)NH, C(O)NCH3, C(O)NCH2CH3, C2-알케닐, C2-알키닐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클, 아릴, 또는 헤테로아릴로부터 선택된 기에 의해 대체되고, 여기서 각각은 독립적으로 0, 1, 2 또는 3개의 R7으로 치환되고;
    W1은 하기로부터 선택되고;

    여기서, R4는 H, 할로겐, -CN, C1-C5알킬, C1-C5알콕시, 및 C1-C5할로알킬로부터 선택되고;
    W2는 , , 이거나 부재하고, 여기서 R5는 H, 할로겐, -CN, C1-C5알킬, 중수소화된 C1-C5 알킬, C1-C5알콕시, 중수소화된 C1-C5알콕시, 및 C1-C5할로알킬로부터 선택되고;
    각각의 R6는 독립적으로 H, C1-C3알킬, -C(=O)-(C1-C3알킬), -C(=O)-O-(C1-C3알킬), 및 -C(=O)-NH-(C1-C3알킬)로부터 선택되고, 이들 각각은 0, 1, 2 또는 3개의 R7으로 치환되고;
    각각의 R7은 독립적으로 할로겐, 하이드록실, 아미노 기, C1-C3알킬, C1-C3알콕시, C1-C3할로알킬, -N(R6)2, 및 -CN으로부터 선택된다.
  2. 제1항에 있어서, A가 -O- 또는 -C(O)-NH-CH2-인 화합물.
  3. 제1항에 있어서, R1이 H, C1-C3 알킬, C1-C3할로알킬, 및 할로겐으로부터 선택되는 화합물.
  4. 제3항에 있어서, R1이 H, F, Cl, Br, I, -CF3, -CH3, 및 로부터 선택되는 화합물.
  5. 제4항에 있어서, R1이 H인 화합물.
  6. 제4항에 있어서, R1이 Br인 화합물.
  7. 제4항에 있어서, R1이 Cl인 화합물.
  8. 제4항에 있어서, R1이 F인 화합물.
  9. 제1항에 있어서, R2 및 R3가 각각 독립적으로 H, -OCD3, -CD3, 할로겐, C1-C4알킬, 및 C1-C4알콕시로부터 선택되는 화합물.
  10. 제9항에 있어서, R2 및 R3가 각각 H인 화합물.
  11. 제9항에 있어서, R2가 H이고, R3가 F인, 화합물.
  12. 제9항에 있어서, R2가 F이고, R3가 H인, 화합물.
  13. 제9항에 있어서, R2가 -OCH3이고, R3가 F인, 화합물.
  14. 제9항에 있어서, R2가 -F이고, R3가 -OCH3인, 화합물.
  15. 제9항에 있어서, R2가 -OCD3이고, R3가 F인, 화합물.
  16. 제9항에 있어서, R2가 F이고, R3가 -OCD3인, 화합물.
  17. 제9항에 있어서, R2가 -CD3이고, R3가 F인, 화합물.
  18. 제9항에 있어서, R2가 F이고, R3가 -CD3인, 화합물.
  19. 제1항에 있어서, R4가 H, 할로겐, -CN, 및 C1-C4할로알킬로부터 선택되는 화합물.
  20. 제19항에 있어서, R4가 H인 화합물.
  21. 제19항에 있어서, R4가 할로겐인 화합물.
  22. 제21항에 있어서, 할로겐이 F, Cl, Br, 및 I로부터 선택되는 화합물.
  23. 제22항에 있어서, 할로겐이 F인 화합물.
  24. 제1항에 있어서, R5가 H, 할로겐, 중수소화된 C1-C5알콕시, 및 C1-C5알콕시로부터 선택되는 화합물.
  25. 제24항에 있어서, R5가 -OCH3 또는 -OCD3인 화합물.
  26. 제1항에 있어서, L이 2 내지 12개의 탄소 원자 길이의 링커이고, 여기서 하나 이상의 탄소 원자가 선택적으로 및 독립적으로 C(=O), O, S, S(O), SO2, C(O)NH, C(O)NCH3, C(O)NCH2CH3, NH, NCH3, NCH2CH3, C2-알키닐, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , 및 으로부터 선택된 기에 의해 대체되는, 화합물.
  27. 제1항에 있어서, 화합물이 하기 화학식 (IA)의 화합물인 화합물:
    .
  28. 제1항에 있어서, 화합물이 하기 화학식 (IB)의 화합물인 화합물:
    .
  29. 제1항에 있어서, 화합물이 하기로부터 선택되는 화합물:
    5-((7-(4-(5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)피리딘-2-일)피페라진-1-일)헵틸)옥시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    5-(4-(5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)피리딘-2-일)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    5-((6-(4-(5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)피리딘-2-일)피페라진-1-일)헥실)옥시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    5-(3-(4-(5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)피리딘-2-일)피페라진-1-일)프로폭시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    5-(2-(4-(5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)피리딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    5-((5-(4-(5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)피리딘-2-일)피페라진-1-일)펜틸)옥시)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    5-(4-(6-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-6-옥소헥실)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    5-(4-(7-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-7-옥소헵틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    5-(4-((5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)피리딘-2-일)메틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    5-(4-((1-(5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)메틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    5-(4-(5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-5-옥소펜틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    5-(4-(7-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)헵틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    (S)-3-(5-(4-(6-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-6-옥소헥실)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온;
    (S)-3-(5-(4-(5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-5-옥소펜틸)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온;
    5-(4-(6-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)헥실)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    (S)-3-(5-(4-(6-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-6-옥소헥실)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온;
    3-(5-(4-(7-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-7-옥소헵틸)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온;
    5-(4-(6-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)헥실)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    5-(4-(4-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-4-옥소부틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    (S)-3-(5-(4-(4-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-4-옥소부틸)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온;
    (S)-3-(5-(4-(7-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-7-옥소헵틸)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온;
    5-(4-(7-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-7-옥소헵틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    5-(4-(4-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-4-옥소부틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    (S)-3-(5-(4-(4-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-4-옥소부틸)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온;
    (S)-3-(5-(4-(5-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-5-옥소펜틸)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온;
    5-(4-(3-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)프로필)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    5-(4-(4-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)부틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    5-(4-(6-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-6-옥소헥실)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    5-(4-(7-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)헵틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    5-(4-(5-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)펜틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    5-(4-(5-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-5-옥소펜틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    (S)-3-(5-(4-((1-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)피페리딘-4-일)메틸)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온;
    5-(4-((1-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)피페리딘-4-일)메틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    5-(4-(5-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)펜틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    4-(9-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-9-옥소논-1-인-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    4-(7-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-7-옥소헵트-1-인-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    5-(4-(3-(2-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)사이클로부틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    4-(8-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-8-옥소옥트-1-인-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    3-(4-(9-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-9-옥소논-1-인-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온;
    3-(4-(8-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-8-옥소옥트-1-인-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온;
    3-(4-(7-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-7-옥소헵트-1-인-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온;
    (S)-3-(5-(4-(3-(2-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)사이클로부틸)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온;
    5-(4-(3-(2-((R)-3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)사이클로부틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    5-(4-(2-(1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)에틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    (S)-3-(5-(4-(2-(1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)에틸)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온;
    (S)-3-(5-(4-((1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)메틸)피페라진-1-일)-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온;
    5-(4-((1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)메틸)피페라진-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    5-(4-(3-(2-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)아제티딘-1-일)피페리딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온;
    (S)-N-(4-(4-아미노-1-(4-(4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    N-(4-(4-아미노-1-(4-(4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    (S)-N-(4-(4-아미노-1-(4-(4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-6-플루오로-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    (S)-N-(4-(4-아미노-1-(1-(5-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    (S)-N-(4-(4-아미노-1-(1-(4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)페닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    (S)-N-(4-(4-아미노-1-(1-(5-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)아제티딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    N-(4-(4-아미노-1-(1-(5-(4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)펜타노일)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    N-(4-(4-아미노-1-((S)-1-(5-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    N-(4-(4-아미노-1-((R)-1-(5-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    N-(4-(4-아미노-1-(1-(6-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피리딘-3-일)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    (S)-N-(4-(4-아미노-1-(6-(4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    N-(4-(4-아미노-1-(1-(4-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)페닐)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    (S)-N-(4-(4-아미노-1-(1-(4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)페닐)아제티딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    (S)-N-(4-(4-아미노-1-(1-(4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)벤조일)아제티딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    N-(4-(4-아미노-1-(1-(4-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)벤조일)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    N-(4-(4-아미노-1-(1-(6-(4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)헥사노일)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    N-(4-(4-아미노-1-(4-(3-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피롤리딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    N-(4-(4-아미노-1-(6-(3-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피롤리딘-1-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    N-(4-(4-아미노-1-(4-(6-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-3-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    N-(4-(4-아미노-1-(4-((1R,5S,6s)-6-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-3-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    N-(4-(4-아미노-1-(4-((1R,5S,6r)-6-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-3-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    (S)-N-(4-(4-아미노-1-(4-(4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)피콜린아미드;
    1-(5-(4-(6-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-6-옥소헥실)피페라진-1-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온;
    1-(5-(4-(5-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-5-옥소펜틸)피페라진-1-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온;
    1-(5-(4-(2-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온;
    1-(5-(4-((1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)메틸)피페라진-1-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온;
    1-(5-(4-((1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)메틸)-1,4-디아제판-1-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온;
    1-(5-(4-(2-(1-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)에틸)피페라진-1-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온;
    (R)-1-(5-(4-(2-(3-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온;
    1-(5-(4-(7-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-7-옥소헵틸)피페라진-1-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온;
    1-(5-(4-(4-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)벤질)-1,4-디아제판-1-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온;
    1-(5-(4-(4-(4-((5-(2-클로로-4-페녹시벤조일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-카르보닐)벤질)피페라진-1-카르보닐)-2-메톡시페닐)디하이드로피리미딘-2,4(1H,3H)-디온;
    N-(4-(4-아미노-1-(4-((R)-3-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-6-플루오로-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피롤리딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)피콜린아미드;
    N-(4-(4-아미노-1-(4-((S)-3-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-6-플루오로-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피롤리딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)피콜린아미드;
    N-(4-(4-아미노-1-(1-(1'-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)-[1,3'-바이아제티딘]-3-일)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    N-(4-(4-아미노-1-(1'-(1-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)아제티딘-3-일)-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    (S)-N-(4-(4-아미노-1-(4-(3-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)아제티딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    (S)-N-(4-(4-아미노-1-(1-(1-(2-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)에틸)아제티딘-3-일)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    N-(4-(4-아미노-1-(1-(1-(2-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)에틸)아제티딘-3-일)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    트랜스-N-(4-(4-아미노-1-(1-(3-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)사이클로부틸)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    시스-N-(4-(4-아미노-1-(1-(3-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)사이클로부틸)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    트랜스-N-(4-(4-아미노-1-(1-((1S,3r)-3-(4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)사이클로부틸)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    시스-N-(4-(4-아미노-1-(1-(3-(4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)사이클로부틸)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    N-(4-(4-아미노-1-(1-(5-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    N-(4-(4-아미노-1-(6-((R)-3-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피롤리딘-1-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    N-(4-(4-아미노-1-(6-((S)-3-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피롤리딘-1-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    N-(4-(4-아미노-1-(4-((R)-3-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피롤리딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    N-(4-(4-아미노-1-(4-((S)-3-((4-(2-((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피롤리딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    (S)-N-(4-(4-아미노-1-(6-(3-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)아제티딘-1-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    (S)-N-(4-(4-아미노-1-(4-(4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-3-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    (S)-N-(4-(4-아미노-1-(4-(3-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-3-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)아제티딘-1-일)-3-플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    (S)-N-(4-(4-아미노-1-(1-(2-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)에틸)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    (S)-N-(4-(4-아미노-1-(1-(2-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-3-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)에틸)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    (S)-N-(4-(4-아미노-1-(4-(4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    N-(4-(4-아미노-1-(4-(4-((1-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소이소인돌린-5-일)아제티딘-3-일)메틸)피페라진-1-일)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    (S)-N-(4-(4-아미노-1-(4-(3-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소이소인돌린-5-일)피페라진-1-일)메틸)아제티딘-1-일)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드;
    5-(4-((1-(4-(4-아미노-3-(4-((5-플루오로-2-메톡시벤즈아미도)메틸)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)페닐)아제티딘-3-일)메틸)피페라진-1-일)-N-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)피콜린아미드;
    5-(4-((1-(4-(4-아미노-3-(4-((5-플루오로-2-메톡시벤즈아미도)메틸)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-2-플루오로페닐)아제티딘-3-일)메틸)피페라진-1-일)-N-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)피콜린아미드;
    6-(4-((1-(4-(4-아미노-3-(4-((5-플루오로-2-메톡시벤즈아미도)메틸)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-2-플루오로페닐)아제티딘-3-일)메틸)피페라진-1-일)-N-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)니코틴아미드;
    N-(4-(4-아미노-1-(4-(3-((4-(4-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)카르바모일)페닐)피페라진-1-일)메틸)아제티딘-1-일)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)벤질)-5-플루오로-2-메톡시벤즈아미드; 및
    5-(4-((1-(4-(4-아미노-3-(4-((5-플루오로-2-메톡시벤즈아미도)메틸)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)메틸)피페라진-1-일)-N-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)피콜린아미드.
  30. 제1항 내지 제29항 중 어느 한 항에 따른 화합물, 및 약학적으로 허용되는 담체, 약학적으로 허용되는 비히클 및 약학적으로 허용되는 부형제로부터 선택된 적어도 하나의 추가 성분을 포함하는 약학적 조성물.
  31. 제30항에 있어서, 화합물이 치료적 유효량으로 존재하는 약학적 조성물.
  32. 유효량의 제1항 내지 제29항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 제30항 또는 제31항에 따른 약학적 조성물을 대상체에 투여하는 것을 포함하는, 브루톤 티로신 키나제(BTK)에 의해 조절되는 질환의 치료를 필요로 하는 대상체에서 브루톤 티로신 키나제(BTK)에 의해 조절되는 질환을 치료하는 방법.
  33. 제32항에 있어서, BTK에 의해 조절되는 질환이 암, 림프종, 백혈병, 면역학적 질병, 자가면역 질병, 및 염증성 장애로부터 선택되는 방법.
  34. 제32항에 있어서, 질환이 B-세포 악성종양, B-세포 림프종, 미만성 거대 B 세포 림프종, 만성 림프구성 백혈병, 소림프구성 림프종, 변연부 림프종, 비-호지킨 림프종, 외투 세포 림프종, 소포 림프종, 털세포 백혈병, B-세포 비-호지킨 림프종, 발덴스트롬 마크로글로불린혈증, 다발골수종, 골암, 골 전이, 관절염, 다발경화증, 골다공증, 과민성 대장 증후군, 염증성 장 질병, 크론병, 루푸스, 쇼그렌 증후군, 만성 이식편대숙주병, 및 신장 이식과 관련된 장애로부터 선택되는 방법.
  35. 제34항에 있어서, 질환이 외투 세포 림프종인 방법.
  36. 제34항에 있어서, 질환이 만성 림프구성 백혈병 또는 소림프구성 림프종인 방법.
  37. 제34항에 있어서, 질환이 발덴스트롬 마크로글로불린혈증인 방법.
  38. 제34항에 있어서, 질환이 변연부 림프종인 방법.
  39. 제34항에 있어서, 질환이 만성 이식편대숙주병인 방법.
  40. 제34항에 있어서, 질환이 다발경화증인 방법.
  41. 약제의 제조에서의 제1항 내지 제29항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 제30항 또는 제31항에 따른 약학적 조성물의 용도.
  42. 제1항 내지 제29항 중 어느 한 항의 화합물 또는 제30항 또는 제31항에 따른 약학적 조성물을 세포와 접촉시키는 것을 포함하는, 세포에서 BTK를 분해하는 방법.
  43. 제32항에 있어서, 또 다른 치료제와 함께 대상체에 투여하는 것을 추가로 포함하는 방법.
  44. 제43항에 있어서, 치료제가 클로람부실(chlorambucil), 이포스파미드(ifosphamide), 독소루비신(doxorubicin), 메살라진(mesalazine), 탈리도미드(thalidomide), 레날리도미드(lenalidomide), 템시롤리무스(temsirolimus), 에베롤리무스(everolimus), 플루다라빈(fludarabine), 포스타마티닙(fostamatinib), 파클리탁셀(paclitaxel), 도세탁셀(docetaxel), 오파투무맙(ofatumumab), 리툭시맙(rituximab), 덱사메타손(dexamethasone), 프레드니손(prednisone), CAL-101, 이브리투모맙(ibritumomab), 토시투모맙(tositumomab), 보르테조밉(bortezomib), 펜토스타틴(pentostatin), 엔도스타틴(endostatin), 벤다무스틴(bendamustine), 사이클로포스파미드(cyclophosphamide), 빈크리스틴(vincristine), 베네토클락스(Venetoclax), 및 레날리도미드(lenalidomide)로부터 선택되는 방법.
KR1020237029298A 2021-02-03 2022-02-02 브루톤 티로신 키나제(btk) 분해제로서의 치환된 피롤로피리미딘 및 피라졸로피리미딘 KR20230142539A (ko)

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