KR20230133316A - 항체-약물 접합체를 위한 이중 절단 에스테르 링커 - Google Patents

항체-약물 접합체를 위한 이중 절단 에스테르 링커 Download PDF

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KR20230133316A
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heteroaryl
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스테판 츄프라코프
아요델레 오. 오군코야
페넬로페 엠. 드레이크
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알.피.쉐러 테크놀러지즈 엘엘씨
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Abstract

본 개시내용은 항체-약물 접합체 구조를 제공하며, 여기서 항체-약물 접합체는 항체를 약물에 연결시키는 에스테르 기를 함유하는 절단 가능한 링커를 포함한다. 본 개시내용은 또한 그러한 접합체의 생성을 위한 화합물 및 방법을 포괄한다. 또한, 본 개시내용은 접합체를 사용하는 약제학적 조성물 및 방법을 포괄한다.

Description

항체-약물 접합체를 위한 이중 절단 에스테르 링커
관련 출원에 대한 상호 참조
본 출원은 2021년 1월 15일자로 출원된 미국 특허 가출원 제631/138,255호의 이익을 주장하며, 이의 개시내용은 참조에 의해 본 명세서에 원용된다.
항체-약물 접합체(antibody-drug conjugate; ADC)는 지난 20년 동안 새로운 부류의 표적화 전달 요법으로 등장하였다. 전형적인 ADC(도 1)는 화학적 링커를 통해 매우 강력한 약제(페이로드)에 연결된 항체 기반 표적화 요소를 포함한다. 부착된 페이로드에 대한 표적화 요소(예를 들어, 항체)의 몰비는 다양할 수 있으며 약물 대 항체 비율(DAR)이라고 한다.
본 개시내용은 항체-약물 접합체 구조를 제공하며, 여기서 항체-약물 접합체는 항체를 약물에 연결시키는 에스테르 기를 함유하는 절단 가능한 링커를 포함한다. 본 개시내용은 또한 그러한 접합체의 생성을 위한 화합물 및 방법을 포괄한다. 또한, 본 개시내용은 접합체를 사용하는 약제학적 조성물 및 방법을 포괄한다.
본 개시내용의 양태는 하기 화학식 (I)의 접합체를 포함한다:
여기서:
W1은 약물이고;
W2는 폴리펩티드이고;
A는 아미노산 잔기이고, 여기서 k는 0 또는 1 내지 5의 정수이고;
L은 링커이고;
G는 접합 모이어티이고;
X1은 및 -(CHR1)j(CHR2)-로부터 선택되고;
R1은 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 치환된 헤테로사이클릴 및 R3으로부터 선택되고, 여기서 R1은 R3으로 선택적으로 치환되고;
j는 0 또는 1 내지 5의 정수이고;
R2은 R3이거나; R2은 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택되고, 여기서 R2는 R3으로 선택적으로 치환되고;
X2는 -NH- 또는 -C(O)-이고;
각각의 R3은 독립적으로 글리코시드 또는 글리코시드 유도체이다.
일부 구현예에서, X1은 이다.
일부 구현예에서, X1은 -(CHR1)j(CHR2)-이다.
일부 구현예에서, j는 0이다.
일부 구현예에서, R2는 알킬이다.
일부 구현예에서, R2는 아릴이다.
일부 구현예에서, j는 1이다.
일부 구현예에서, R1은 수소이다.
일부 구현예에서, R1은 R3으로 치환된다.
일부 구현예에서, 각각의 R3은 하기로부터 독립적으로 선택된다:
및
일부 구현예에서, 접합체는 화학식 (II)의 것이다:
여기서 R4는 아미노산 측쇄이다.
일부 구현예에서, 접합체는 하기로부터 선택된다:
및
일부 구현예에서, 접합체는 화학식 (III)의 것이다:
여기서 R4는 아미노산 측쇄이다.
일부 구현예에서, 접합체는 하기로부터 선택된다:
및
일부 구현예에서, k는 2이다.
일부 구현예에서 L은 하기를 포함한다:
-(T1-V1)a-(T2-V2)b-(T3-V3)c-(T4-V4)d-(T5-V5)e-(T6-V6)f-,
여기서
a, b, c, d, e 및 f는 각각 독립적으로 0 또는 1이고;
T1, T2, T3, T4, T5 및 T6은 각각 공유 결합, (C1-C12)알킬, 치환된 (C1-C12)알킬, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 및 치환된 헤테로사이클릴, (EDA)w, (PEG)n, (AA)p, -(CR13OH)m-, 4-아미노-피페리딘 (4AP), 메타-아미노-벤질옥시 (MABO), 메타-아미노-벤질옥시카보닐 (MABC), 파라-아미노-벤질옥시 (PABO), 파라-아미노-벤질옥시카보닐 (PABC), 파라-아미노벤질 (PAB), 파라-아미노-벤질아미노 (PABA), 아세탈, 하이드라진, 디설파이드, 및 에스테르로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 EDA는 에틸렌 디아민 모이어티이고, PEG는 폴리에틸렌 글리콜이고, 그리고 AA는 아미노산 잔기 또는 아미노산 유사체이고, 여기서 각각의 w는 1 내지 20의 정수이고, 각각의 n은 1 내지 30의 정수이고, 각각의 p는 1 내지 20의 정수이고, 그리고 각각의 m은 1 내지 12의 정수이고;
V1, V2, V3, V4, V5 및 V6은 각각 공유 결합, -CO-, -NR15-, -NR15(CH2)q-, -NR15(C6H4)-, -CONR15-, -NR15CO-, -C(O)O-, -OC(O)-, -O-, -S-, -S(O)-, -SO2-, -SO2NR15-, -NR15SO2- 및 -P(O)OH-로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 각각의 q는 1 내지 6의 정수이고;
각각의 R13은 수소, 알킬, 치환된 알킬, 아릴, 및 치환된 아릴로부터 독립적으로 선택되고; 그리고
각각의 R15는 독립적으로 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 카복실, 카복실 에스테르, 아실, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택된다.
일부 구현예에서, 접합체는 링커 L을 포함하고, 여기서:
T1은 (C1-C12)알킬이고 V1은 -CO-이고;
T2는 아미노산 유사체이고 V2는 -NH-이고;
T3은 (PEG)n이고 V3은 -CO-이고; 그리고
d 내지 f는 각각 0이거나; 또는
여기서:
T1은 (C1-C12)알킬이고 V1은 -CO-이고;
T2는 아미노산 유사체이고 V2는 -NH-이고;
T3은 (PEG)n이고 V3은 -CONH-이고;
T4는 (PEG)n이고 V4는 -CO-이고;
e 및 f는 각각 0이다.
일부 구현예에서, G는 이고,
여기서:
Z는 CR10 또는 N이고,
R7은 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택되고;
R8 및 R9는 각각 독립적으로 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 알콕시, 치환된 알콕시, 아미노, 치환된 아미노, 카복실, 카복실 에스테르, 아실, 아실옥시, 아실 아미노, 아미노 아실, 알킬아미드, 치환된 알킬아미드, 설포닐, 티오알콕시, 치환된 티오알콕시, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택되거나, 또는 R8 및 R9는 선택적으로 환상으로 연결되어 5 또는 6-원 헤테로사이클릴을 형성하고;
각각의 R10은 독립적으로 수소, 할로겐, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 알콕시, 치환된 알콕시, 아미노, 치환된 아미노, 카복실, 카복실 에스테르, 아실, 아실옥시, 아실 아미노, 아미노 아실, 알킬아미드, 치환된 알킬아미드, 설포닐, 티오알콕시, 치환된 티오알콕시, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택된다.
일부 구현예에서, G는 아세탈, 하이드라존, 옥심, 설파이드, 디설파이드, 트리아졸, 에스테르 및 아미드로부터 선택된다.
본 개시내용의 양태는 하기 화학식 (IV)의 화합물을 포함한다;
여기서:
W1은 약물이고;
A는 아미노산 잔기이고, 여기서 k는 0 또는 1 내지 5의 정수이고;
L은 링커이고;
G는 접합 모이어티이고;
X1은 및 -(CHR1)j(CHR2)-로부터 선택되고;
R1은 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 치환된 헤테로사이클릴 및 R3으로부터 선택되고, 여기서 R1은 R3으로 선택적으로 치환되고;
j는 0 또는 1 내지 5의 정수이고;
R2은 R3이거나; R2은 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택되고, 여기서 R2는 R3으로 선택적으로 치환되고;
X2는 -NH- 또는 -C(O)-이고;
각각의 R3은 독립적으로 글리코시드 또는 글리코시드 유도체이다.
일부 구현예에서, X1은 이다.
일부 구현예에서, X1은 -(CHR1)j(CHR2)-이다.
일부 구현예에서, j는 0이다.
일부 구현예에서, R2는 알킬이다.
일부 구현예에서, R2는 아릴이다.
일부 구현예에서, j는 1이다.
일부 구현예에서, R1은 수소이다.
일부 구현예에서, R1은 R3으로 치환된다.
일부 구현예에서, 각각의 R3은 하기로부터 독립적으로 선택된다:
및
일부 구현예에서, 화합물은 화학식 (V)의 것이다:
여기서 R4는 아미노산 측쇄이다.
일부 구현예에서, 화합물은 하기로부터 선택된다:
및
일부 구현예에서, 화합물은 화학식 (VI)의 것이다:
여기서 R4는 아미노산 측쇄이다.
일부 구현예에서, 화합물은 하기로부터 선택된다:
및
일부 구현예에서, k는 2이다.
일부 구현예에서 L은 하기를 포함한다:
-(T1-V1)a-(T2-V2)b-(T3-V3)c-(T4-V4)d-(T5-V5)e-(T6-V6)f-,
여기서
a, b, c, d, e 및 f는 각각 독립적으로 0 또는 1이고;
T1, T2, T3, T4, T5 및 T6은 각각 공유 결합, (C1-C12)알킬, 치환된 (C1-C12)알킬, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 및 치환된 헤테로사이클릴, (EDA)w, (PEG)n, (AA)p, -(CR13OH)m-, 4-아미노-피페리딘 (4AP), 메타-아미노-벤질옥시 (MABO), 메타-아미노-벤질옥시카보닐 (MABC), 파라-아미노-벤질옥시 (PABO), 파라-아미노-벤질옥시카보닐 (PABC), 파라-아미노벤질 (PAB), 파라-아미노-벤질아미노 (PABA), 아세탈, 하이드라진, 디설파이드, 및 에스테르로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 EDA는 에틸렌 디아민 모이어티이고, PEG는 폴리에틸렌 글리콜이고, 그리고 AA는 아미노산 잔기 또는 아미노산 유사체이고, 여기서 각각의 w는 1 내지 20의 정수이고, 각각의 n은 1 내지 30의 정수이고, 각각의 p는 1 내지 20의 정수이고, 그리고 각각의 m은 1 내지 12의 정수이고;
V1, V2, V3, V4, V5 및 V6은 각각 공유 결합, -CO-, -NR15-, -NR15(CH2)q-, -NR15(C6H4)-, -CONR15-, -NR15CO-, -C(O)O-, -OC(O)-, -O-, -S-, -S(O)-, -SO2-, -SO2NR15-, -NR15SO2- 및 -P(O)OH-로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 각각의 q는 1 내지 6의 정수이고;
각각의 R13은 수소, 알킬, 치환된 알킬, 아릴, 및 치환된 아릴로부터 독립적으로 선택되고; 그리고
각각의 R15는 독립적으로 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 카복실, 카복실 에스테르, 아실, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택된다.
일부 구현예에서, 화합물은 링커 L을 포함하고, 여기서:
T1은 (C1-C12)알킬이고 V1은 -CO-이고;
T2는 아미노산 유사체이고 V2는 -NH-이고;
T3은 (PEG)n이고 V3은 -CO-이고; 그리고
d 내지 f는 각각 0이거나; 또는
여기서:
T1은 (C1-C12)알킬이고 V1은 -CO-이고;
T2는 아미노산 유사체이고 V2는 -NH-이고;
T3은 (PEG)n이고 V3은 -CONH-이고;
T4는 (PEG)n이고 V4는 -CO-이고;
e 및 f는 각각 0이다.
일부 구현예에서, G는 이고,
여기서:
Z는 CR10 또는 N이고,
R8 및 R9는 각각 독립적으로 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 알콕시, 치환된 알콕시, 아미노, 치환된 아미노, 카복실, 카복실 에스테르, 아실, 아실옥시, 아실 아미노, 아미노 아실, 알킬아미드, 치환된 알킬아미드, 설포닐, 티오알콕시, 치환된 티오알콕시, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택되거나, 또는 R8 및 R9는 선택적으로 환상으로 연결되어 5 또는 6-원 헤테로사이클릴을 형성하고;
각각의 R10은 독립적으로 수소, 할로겐, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 알콕시, 치환된 알콕시, 아미노, 치환된 아미노, 카복실, 카복실 에스테르, 아실, 아실옥시, 아실 아미노, 아미노 아실, 알킬아미드, 치환된 알킬아미드, 설포닐, 티오알콕시, 치환된 티오알콕시, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택된다.
일부 구현예에서, G는 아세탈, NHS-에스테르, PFP-에스테르, TFP-에스테르, 이소시아네이트, 이소티오시아네이트, 아실 할라이드, 말레이미드, 요오도아세트아미드, 포스핀, 알킨, 아지드, 하이드라진, 알콕시아민, 디설파이드, 에스테르, 및 아미드로부터 선택된다.
본 개시내용의 양태는 본 명세서에 기재된 바와 같은 접합체 및 약제학적으로 허용 가능한 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 포함한다.
본 개시내용의 양태는 접합체를 대상체에게 투여하는 방법을 포함하며, 여기서 방법은 본 명세서에 기재된 바와 같은 접합체를 대상체에게 투여하는 것을 포함한다.
도 1은 본 개시내용의 구현예에 따른 항체-약물 접합체(ADC)의 주요 성분의 개략도를 보여준다.
도 2는 ADC에 대한 링커 전략을 보여준다. (도 2, 패널 A) 아민 함유 페이로드에 대한 카바메이트 연결; (도 2, 패널 B) 하이드록시 기 함유 페이로드에 대한 카복실산 에스테르 링커.
도 3은 본 개시내용의 구현예에 따른 인접한 단당류를 갖는 에스테르 링커의 이중 절단 설계를 보여준다.
도 4는 본 개시내용의 구현예에 따른 ADC용 이중 절단 카복실산 에스테르 링커에 대한 구조 설계의 예를 보여준다.
도 5는 ADC 합성을 위한 HIPS 결찰의 개략도를 보여준다. 알데하이드 모이어티를 운반하는 항체는 HIPS(Hydrazino-iso-Pictet-Spengler) 링커 및 페이로드와 반응하여 안정적인 아자카볼린 연결을 갖는 부위 특이적으로 접합된 ADC를 생성한다.
도 6은 화합물 21 CH1-3/CT 태그 부착된 사시투주맙 접합체가 소수성 상호작용 컬럼(HIC)에 의해 결정된 바와 같이 3.41의 DAR을 산출하는 그래프를 보여준다.
도 7은 화합물 21 CH1-3/CT 태그 부착된 사시투주맙 접합체가 분석적 크기 배제 크로마토그래피(SEC)에 의해 결정된 바와 같이 98.1% 단량체인 그래프를 보여준다.
도 8은 화합물 21 CH1-3/CT 태그 부착된 폴라투주맙 접합체가 HIC에 의해 결정된 바와 같이 3.67의 DAR을 산출하는 그래프를 보여준다.
도 9는 화합물 21 CH1-3/CT 태그 부착된 폴라투주맙 접합체가 분석적 SEC에 의해 결정된 바와 같이 97.4% 단량체인 그래프를 보여준다.
도 10은 화합물 52 CT 태그 부착된 항-FITC 접합체가 HIC에 의해 결정된 바와 같이 1.61의 DAR을 산출하는 그래프를 보여준다.
도 11은 화합물 52 CT 태그 부착된 항-FITC 접합체가 분석 SEC에 의해 측정된 바와 같이 98.1% 단량체인 그래프를 보여준다.
도 12은 화합물 52 CT 태그 부착된 트라스투주맙 접합체가 HIC에 의해 결정된 바와 같이 1.56의 DAR을 산출하는 그래프를 보여준다.
도 13은 화합물 52 CT 태그 부착된 트라스투주맙 접합체가 분석적 SEC에 의해 결정된 바와 같이 95.6% 단량체인 그래프를 보여준다.
도 14는 화합물 52 CT 태그 부착된 사시투주맙 접합체가 HIC에 의해 결정된 바와 같이 1.02의 DAR을 산출하는 그래프를 보여준다.
도 15는 화합물 52 CT 태그 부착된 사시투주맙 접합체가 분석적 SEC에 의해 결정된 바와 같이 98.5% 단량체인 그래프를 보여준다.
도 16은 화합물 49 CT 태그 부착된 항-FITC 접합체가 HIC에 의해 결정된 바와 같이 1.09의 DAR을 산출하는 그래프를 보여준다.
도 17은 화합물 49 CT 태그 부착된 항-FITC 접합체가 분석 SEC에 의해 측정된 바와 같이 90.0% 단량체인 그래프를 보여준다.
도 18은 화합물 49 CT 태그 부착된 트라스투주맙 접합체가 HIC에 의해 결정된 바와 같이 1.09의 DAR을 산출하는 그래프를 보여준다.
도 19는 화합물 49 CT 태그 부착된 트라스투주맙 접합체가 분석적 SEC에 의해 결정된 바와 같이 90.0% 단량체인 그래프를 보여준다.
도 20은 화합물 49 CT 태그 부착된 사시투주맙 접합체가 HIC에 의해 결정된 바와 같이 0.80의 DAR을 산출하는 그래프를 보여준다.
도 21은 화합물 49 CT 태그 부착된 사시투주맙 접합체가 분석적 SEC에 의해 결정된 바와 같이 93.3% 단량체인 그래프를 보여준다.
도 22는 SK-BR-3 세포에 대한 ( 28)과 비교하여 (21) 또는 CL2A-SN38을 운반하는 HER2 표적화 또는 이소타입 대조군 ADC의 시험관 내 효능의 그래프를 보여준다.
도 23은 MDA-MB-468 세포에 대한 ( 28)과 비교하여 (21) 또는 CL2A-SN38을 운반하는 TROP-2 표적화 또는 이소타입 대조군 ADC의 시험관 내 효능의 그래프를 보여준다.
도 24는 MDA-MB-468 세포에 대한 (28) 또는 ( 12)과 비교하여 ( 21)을 운반하는 TROP-2 표적화 또는 이소타입 대조군 ADC의 시험관 내 효능의 그래프를 보여준다.
도 25는 MDA-MB-468 세포에 대한 ( 41)과 비교하여 ( 49)을 운반하는 TROP-2 표적화 또는 이소타입 대조군 ADC의 시험관 내 효능의 그래프를 보여준다.
도 26은 SK-BR-3 세포에 대한 (28) 또는 ( 12)와 비교하여 ( 21)을 운반하는 HER2 표적화 또는 이소타입 대조군 ADC의 시험관 내 효능의 그래프를 보여준다.
도 27은 SK-BR-3 세포에 대한 ( 41)과 비교하여 ( 49)을 운반하는 HER2 표적화 또는 이소타입 대조군 ADC의 시험관 내 효능의 그래프를 보여준다.
도 28은 NCI-N87 세포에 대한 ( 41)과 비교하여 ( 49)을 운반하는 HER2 표적화 또는 이소타입 대조군 ADC의 시험관 내 효능의 그래프를 보여준다.
도 29는 NCI-N87 세포에 대한 (28) 또는 ( 12)과 비교하여 ( 21)을 운반하는 HER2 표적화 또는 이소타입 대조군 ADC의 시험관 내 효능의 그래프를 보여준다.
도 30은 SK-BR-3 세포에 대한 ( 41)과 비교하여 ( 52)을 운반하는 HER2 표적화 또는 이소타입 대조군 ADC의 시험관 내 효능의 그래프를 보여준다.
도 31은 MDA-MB-468 세포에 대한 ( 41)과 비교하여 ( 52)을 운반하는 TROP-2 표적화 또는 이소타입 대조군 ADC의 시험관 내 효능의 그래프를 보여준다.
다음 용어는 달리 나타내지 않는 한 다음과 같은 의미를 갖는다. 정의되지 않은 용어는 당업계에서 인식되는 의미를 갖는다.
"알킬"은 1개 내지 10개의 탄소 원자, 예컨대, 1개 내지 6개의 탄소 원자 또는 1개 내지 5개, 또는 1개 내지 4개 또는 1개 내지 3개의 탄소 원자를 갖는 1가 포화 지방족 하이드로카르빌기를 지칭한다. 이 용어는, 예로서, 선형 및 분지형 하이드로카르빌기, 예컨대, 메틸(CH3-), 에틸 (CH3CH2-), n-프로필 (CH3CH2CH2-), 이소프로필 ((CH3)2CH-), n-부틸 (CH3CH2CH2CH2-), 이소부틸 ((CH3)2CHCH2-), sec-부틸 ((CH3)(CH3CH2)CH-), t-부틸 ((CH3)3C-), n-펜틸 (CH3CH2CH2CH2CH2-), 및 네오펜틸 ((CH3)3CCH2-)을 포함한다.
용어 "치환된 알킬"은, 알킬 사슬의 하나 이상의 탄소 원자(C1 탄소 원자는 제외됨)가 선택적으로 헤테로원자, 예컨대, -O-, -N-, -S-, -S(O)n-(여기서 n은 0 내지 2임), -NR-(여기서 R은 수소 또는 알킬임)로 대체되었고 알콕시, 치환된 알콕시, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 치환된 사이클로알케닐, 아실, 아실아미노, 아실옥시, 아미노, 아미노아실, 아미노아실옥시, 옥시아미노아실, 아자이도, 사이아노, 할로겐, 하이드록실, 옥소, 티오케토, 카복실, 카복실알킬, 티오아릴옥시, 티오헤테로아릴옥시, 티오헤테로사이클로옥시, 티올, 티오알콕시, 치환된 티오알콕시, 아릴, 아릴옥시, 헤테로아릴, 헤테로아릴옥시, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클로옥시, 하이드록시아미노, 알콕시아미노, 나이트로, -SO-알킬, -SO-아릴, -SO-헤테로아릴, -SO2-알킬, -SO2-아릴, -SO2-헤테로아릴 및 -NRaRb로 이루어진 군으로부터 선택된 1 내지 5개의 치환기를 갖는, 본 명세서에서 정의된 바와 같은 알킬 기를 지칭하되, 여기서 R' 및 R"은 동일 또는 상이할 수 있고, 수소, 선택적으로 치환된 알킬, 사이클로알킬, 알케닐, 사이클로알케닐, 알키닐, 아릴, 헤테로아릴 및 헤테로사이클릭으로부터 선택된다.
"알킬렌"은, 직쇄 또는 분지형이고, 선택적으로 -O-, -NR10-, -NR10C(O)-, -C(O)NR10- 등으로부터 선택된 1개 이상의 기로 차단된, 바람직하게는 1 내지 6개, 더 바람직하게는 1 내지 3개의 탄소 원자를 갖는 2가 지방족 하이드로카르빌기를 지칭한다. 이 용어는, 예로서, 메틸렌(-CH2-), 에틸렌(-CH2CH2-), n-프로필렌(-CH2CH2CH2-), 이소-프로필렌(-CH2CH(CH3)-), (-C(CH3)2CH2CH2-), (-C(CH3)2CH2C(O)-), (-C(CH3)2CH2C(O)NH-), (-CH(CH3)CH2-) 등을 포함한다.
"치환된 알킬렌"은 아래 "치환된" 정의에서 탄소에 대해 기재된 바와 같은 치환기로 대체된 1개 내지 3개의 수소를 갖는 알킬렌기를 지칭한다.
용어 "알케인"은 본 명세서에 정의된 바와 같은 알킬 기 및 알킬렌기를 지칭한다.
용어 "알킬아미노알킬", "알킬아미노알케닐" 및 "알킬아미노알키닐"은 R'NHR"- 기를 지칭하되, R'는 본 명세서에 정의된 바와 같은 알킬 기이고, R"는 본 명세서에 정의된 바와 같은 알킬렌, 알케닐렌 또는 알키닐렌기이다.
용어 "알크아릴" 또는 "아르알킬"은 알킬렌, 치환된 알킬렌 및 아릴이 본 명세서에 정의되어 있는 -알킬렌-아릴 및 -치환된 알킬렌-아릴 기를 지칭한다.
"알콕시"는 -O-알킬 기를 지칭하되, 알킬은 본 명세서에 정의된 바와 같다. 알콕시는, 예로서, 메톡시, 에톡시, n-프로폭시, 이소프로폭시, n-부톡시, t-부톡시, sec-부톡시, n-펜톡시 등을 포함한다. 용어 "알콕시"는 또한 알케닐-O-, 사이클로알킬-O-, 사이클로알케닐-O- 및 알키닐-O- 기를 지칭하되, 알케닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐 및 알키닐은 본 명세서에 정의된 바와 같다.
용어 "치환된 알콕시"는 치환된 알킬-O-, 치환된 알케닐-O-, 치환된 사이클로알킬-O-, 치환된 사이클로알케닐-O- 및 치환된 알키닐-O- 기를 지칭하되, 치환된 알킬, 치환된 알케닐, 치환된 사이클로알킬, 치환된 사이클로알케닐 및 치환된 알키닐은 본 명세서에 정의된 바와 같다.
용어 "알콕시아미노"는 -NH-알콕시기를 지칭하되, 알콕시는 본 명세서에 정의되어 있다.
용어 "할로알콕시"는 알킬-O- 기를 지칭하되, 알킬 기 상의 하나 이상의 수소 원자는 할로 기로 치환되고, 예로서, 트라이플루오로메톡시 등과 같은 기를 포함한다.
용어 "할로알킬"은 위에 기재된 바와 같은 치환된 알킬 기를 지칭하되, 알킬 기 상의 하나 이상의 수소 원자는 할로 기로 치환된다. 이러한 기의 예는 제한 없이 플루오로알킬 기, 예컨대, 트라이플루오로메틸, 다이플루오로메틸, 트라이플루오로에틸 등을 포함한다.
용어 "알킬알콕시"는 -알킬렌-O-알킬, 알킬렌-O 치환된 알킬, 치환된 알킬렌-O-알킬 및 치환된 알킬렌-O 치환된 알킬 기를 지칭하되, 알킬, 치환된 알킬, 알킬렌 및 치환된 알킬렌은 본 명세서에 정의된 바와 같다.
용어 "알킬티오알콕시"는 -알킬렌-S-알킬, 알킬렌-S 치환된 알킬, 치환된 알킬렌-S-알킬 및 치환된 알킬렌-S 치환된 알킬 기를 지칭하되, 여기서 알킬, 치환된 알킬, 알킬렌 및 치환된 알킬렌은 본 명세서에 정의된 바와 같다.
"알케닐"은 2개 내지 6개의 탄소 원자, 바람직하게는 2개 내지 4개의 탄소 원자를 갖고, 적어도 1개, 바람직하게는 1개 내지 2개의 이중 결합 불포화 부위를 갖는 직쇄형 또는 분지형 하이드로카르빌기를 지칭한다. 이 용어는, 예로서, 바이-바이닐, 알릴 및 뷰트-3-엔-1-일을 포함한다. 이 용어에는 시스 및 트랜스 이성질체 또는 이들 이성질체의 혼합물이 포함된다.
용어 "치환된 알케닐"은 알콕시, 치환된 알콕시, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 치환된 사이클로알케닐, 아실, 아실아미노, 아실옥시, 아미노, 치환된 아미노, 아미노아실, 아미노아실옥시, 옥시아미노아실, 아지도, 사이아노, 할로겐, 하이드록실, 옥소, 티오케토, 카복실, 카복실알킬, 티오아릴옥시, 티오헤테로아릴옥시, 티오헤테로사이클로옥시, 티올, 티오알콕시, 치환된 티오알콕시, 아릴, 아릴옥시, 헤테로아릴, 헤테로아릴옥시, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클로옥시, 하이드록시아미노, 알콕시아미노, 나이트로, -SO-알킬, -SO 치환된 알킬, -SO-아릴, -SO-헤테로아릴, -SO2-알킬, -SO2 치환된 알킬, -SO2-아릴 및 -SO2-헤테로아릴로부터 선택되는 1개 내지 5개의 치환기 또는 1개 내지 3개의 치환기를 갖는 본 명세서에 정의된 바와 같은 알케닐 기를 지칭한다.
"알키닐"은 2개 내지 6개의 탄소 원자, 바람직하게는 2개 내지 3개의 탄소 원자를 갖고, 적어도 1개, 바람직하게는 1개 내지 2개의 삼중 결합 불포화 부위를 갖는 직쇄형 또는 분지형 1가 하이드로카르빌기를 지칭한다. 이러한 알키닐 기의 예는 아세틸렌일(-C≡CH) 및 프로파르길(-CH2C≡CH)을 포함한다.
용어 "치환된 알키닐"은 알콕시, 치환된 알콕시, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 치환된 사이클로알케닐, 아실, 아실아미노, 아실옥시, 아미노, 치환된 아미노, 아미노아실, 아미노아실옥시, 옥시아미노아실, 아지도, 사이아노, 할로겐, 하이드록실, 옥소, 티오케토, 카복실, 카복실알킬, 티오아릴옥시, 티오헤테로아릴옥시, 티오헤테로사이클로옥시, 티올, 티오알콕시, 치환된 티오알콕시, 아릴, 아릴옥시, 헤테로아릴, 헤테로아릴옥시, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클로옥시, 하이드록시아미노, 알콕시아미노, 나이트로, -SO-알킬, -SO 치환된 알킬, -SO-아릴, -SO-헤테로아릴, -SO2-알킬, -SO2 치환된 알킬, -SO2-아릴 및 -SO2-헤테로아릴로부터 선택되는 1개 내지 5개의 치환기 또는 1개 내지 3개의 치환기를 갖는 본 명세서에 정의된 바와 같은 알키닐 기를 지칭한다.
"알키닐옥시"는 -O-알키닐 기를 지칭하되, 알키닐은 본 명세서에 정의된 바와 같다. 알키닐옥시는, 예로서, 에틴일옥시, 프로핀일옥시 등을 포함한다.
"아실"은 H-C(O)-, 알킬-C(O)-, 치환된 알킬-C(O)-, 알케닐-C(O)-, 치환된 알케닐-C(O)-, 알키닐-C(O)-, 치환된 알키닐-C(O)-, 사이클로알킬-C(O)-, 치환된 사이클로알킬-C(O)-, 사이클로알케닐-C(O)-, 치환된 사이클로알케닐-C(O)-, 아릴-C(O)-, 치환된 아릴-C(O)-, 헤테로아릴-C(O)-, 치환된 헤테로아릴-C(O)-, 헤테로사이클릴-C(O)- 및 치환된 헤테로사이클릴-C(O)- 기를 지칭하되, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 치환된 사이클로알케닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로사이클릭 및 치환된 헤테로사이클릭은 본 명세서에 정의된 바와 같다. 예를 들어, 아실은 "아세틸"기 CH3C(O)-를 포함한다.
"아실아미노"는 -NR20C(O)알킬, -NR20C(O)치환된 알킬, N R20C(O)사이클로알킬, -NR20C(O)치환된 사이클로알킬, -NR20C(O)사이클로알케닐, -NR20C(O)치환된 사이클로알케닐, -NR20C(O)알케닐, -NR20C(O)치환된 알케닐, -NR20C(O)알키닐, -NR20C(O)치환된 알키닐, -NR20C(O)아릴, -NR20C(O)치환된 아릴, -NR20C(O)헤테로아릴, -NR20C(O)치환된 헤테로아릴, -NR20C(O)헤테로사이클릭 및 -NR20C(O)치환된 헤테로사이클릭 기를 지칭하되, R20은 수소 또는 알킬이고, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 치환된 사이클로알케닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로사이클릭 및 치환된 헤테로사이클릭은 본 명세서에 정의된 바와 같다.
"아미노카보닐" 또는 용어 "아미노아실"은 --C(O)NR21R22를 지칭하되, R21 및 R22는 독립적으로 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 아릴, 치환된 아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 치환된 사이클로알케닐, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로사이클릭 및 치환된 헤테로사이클릭으로 이루어진 군으로부터 선택되고, R21와 R22는 선택적으로 거기에 결합된 질소와 함께 결합되어 헤테로사이클릭 또는 치환된 헤테로사이클릭 기를 형성하고, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 치환된 사이클로알케닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로사이클릭 및 치환된 헤테로사이클릭은 본 명세서에 정의된 바와 같다.
"아미노카보닐아미노"는 -NR21C(O)NR22R23 기를 지칭하되, 여기서 R21, R22, 및 R23은 독립적으로 수소, 알킬, 아릴 또는 사이클로알킬로부터 선택되거나, 또는 2개의 R기는 연결되어 헤테로사이클릴 기를 형성한다.
용어 "알콕시카보닐아미노"는 -NRC(O)OR기를 지칭하되, 여기서 각각의 R은 독립적으로 수소, 알킬, 치환된 알킬, 아릴, 헤테로아릴 또는 헤테로사이클릴이고, 알킬, 치환된 알킬, 아릴, 헤테로아릴 및 헤테로사이클릴은 본 명세서에 정의된 바와 같다.
용어 "아실옥시"는 알킬-C(O)O-, 치환된 알킬-C(O)O-, 사이클로알킬-C(O)O-, 치환된 사이클로알킬-C(O)O-, 아릴-C(O)O-, 헤테로아릴-C(O)O- 및 헤테로사이클릴-C(O)O- 기를 지칭하되, 알킬, 치환된 알킬, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 및 헤테로사이클릴은 본 명세서에 정의된 바와 같다.
"아미노설포닐"은 -SO2NR21R22 기를 지칭하되, 여기서 R21 및 R22는 독립적으로 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 아릴, 치환된 아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 치환된 사이클로알케닐, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로사이클릭, 치환된 헤테로사이클릭으로 이루어진 군으로부터 선택되고, R21 및 R22는 선택적으로 이들에 결합된 질소와 함께 연결되어 헤테로사이클릭 또는 치환된 헤테로사이클릭 기를 형성하고, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 치환된 사이클로알케닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로사이클릭 및 치환된 헤테로사이클릭은 본 명세서에 정의된 바와 같다.
"설포닐아미노"는 -NR21SO2R22 기를 지칭하되, 여기서 R21 및 R22는 독립적으로 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 아릴, 치환된 아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 치환된 사이클로알케닐, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로사이클릭 및 치환된 헤테로사이클릭으로 이루어진 군으로부터 선택되고, R21 및 R22는 이들에 결합된 원자들과 함께 연결되어 헤테로사이클릭 또는 치환된 헤테로사이클릭 기를 형성하고, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 치환된 사이클로알케닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로사이클릭 및 치환된 헤테로사이클릭은 본 명세서에 정의된 바와 같다.
"아릴" 또는 "Ar"은 부착 지점이 방향족 고리의 원자를 통하는 경우 단일 고리(예컨대, 페닐기에 존재함) 또는 축합 고리가 방향족일 수 있거나 또는 방향족이 아닐 수 있는 다중 축합 고리를 갖는 고리 시스템(이러한 방향족 고리 시스템의 예는 나프틸, 안트릴 및 인단일을 포함함)을 갖는 6개 내지 18개의 탄소 원자의 1가 방향족 탄소환식기를 지칭한다. 이 용어는, 예로서, 페닐 및 나프틸을 포함한다. 아릴 치환기에 대한 정의에 의해 달리 제한되지 않는 한, 이러한 아릴 기는 선택적으로 아실옥시, 하이드록시, 티올, 아실, 알킬, 알콕시, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 치환된 알킬, 치환된 알콕시, 치환된 알케닐, 치환된 알키닐, 치환된 사이클로알킬, 치환된 사이클로알케닐, 아미노, 치환된 아미노, 아미노아실, 아실아미노, 알크아릴, 아릴, 아릴옥시, 아지도, 카복실, 카복실알킬, 사이아노, 할로겐, 나이트로, 헤테로아릴, 헤테로아릴옥시, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클로옥시, 아미노아실옥시, 옥시아실아미노, 티오알콕시, 치환된 티오알콕시, 티오아릴옥시, 티오헤테로아릴옥시, -SO-알킬, -SO 치환된 알킬, -SO-아릴, -SO-헤테로아릴, -SO2-알킬, -SO2 치환된 알킬, -SO2-아릴, -SO2-헤테로아릴 및 트라이할로메틸로부터 선택되는 1개 내지 5개의 치환기 또는 1개 내지 3개의 치환기로 치환될 수 있다.
"아릴옥시"는 -O-아릴 기를 지칭하되, 본 명세서에 정의된 바와 같은 선택적으로 치환된 아릴 기를 포함하는 펜톡시, 나프톡시 등을 포함하는 아릴은 본 명세서에 정의된 바와 같다.
"아미노"는 -NH2 기를 지칭한다.
용어 "치환된 아미노"는 -NRR 기를 지칭하되, 여기서 각각의 R은 독립적으로 수소, 알킬, 치환된 알킬, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 사이클로알케닐, 치환된 사이클로알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 아릴, 헤테로아릴, 및 헤테로사이클릴로 이루어진 군으로부터 선택되되, 단 적어도 1개의 R은 수소가 아니다.
용어 "아지도"는 -N3 기를 지칭한다.
"카복실", "카복시" 또는 "카복실레이트"는 -CO2H 또는 이의 염을 지칭한다.
"카복실 에스테르" 또는 "카복시 에스테르" 또는 용어 "카복시알킬" 또는 "카복실알킬"은 -C(O)O-알킬, -C(O)O 치환된 알킬, -C(O)O-알케닐, -C(O)O 치환된 알케닐, -C(O)O-알키닐, -C(O)O 치환된 알키닐, -C(O)O-아릴, -C(O)O 치환된 아릴, -C(O)O-사이클로알킬, -C(O)O 치환된 사이클로알킬, -C(O)O-사이클로알케닐, -C(O)O 치환된 사이클로알케닐, -C(O)O-헤테로아릴, -C(O)O 치환된 헤테로아릴, -C(O)O-헤테로사이클릭 및 -C(O)O 치환된 헤테로사이클릭 기를 지칭하되, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 치환된 사이클로알케닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로사이클릭 및 치환된 헤테로사이클릭은 본 명세서에 정의된 바와 같다.
"(카복실 에스테르)옥시" 또는 "카보네이트"는 -O-C(O)O-알킬, -O-C(O)O 치환된 알킬, -O-C(O)O-알케닐, -O-C(O)O 치환된 알케닐, -O-C(O)O-알키닐, -O-C(O)O 치환된 알키닐, -O-C(O)O-아릴, -O-C(O)O 치환된 아릴, -O-C(O)O-사이클로알킬, -O-C(O)O 치환된 사이클로알킬, -O-C(O)O-사이클로알케닐, -O-C(O)O 치환된 사이클로알케닐, -O-C(O)O-헤테로아릴, -O-C(O)O 치환된 헤테로아릴, -O-C(O)O-헤테로사이클릭 및 -O-C(O)O 치환된 헤테로사이클릭 기를 지칭하되, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 치환된 사이클로알케닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로사이클릭 및 치환된 헤테로사이클릭은 본 명세서에 정의된 바와 같다.
"사이아노" 또는 "나이트릴"은 -CN기를 지칭한다.
"사이클로알킬"은 융합, 가교 및 스피로 고리 시스템을 포함하는 단일 또는 다중 환식 고리를 갖는 3개 내지 10개의 탄소 원자의 환식 알킬 기를 지칭한다. 적합한 사이클로알킬 기의 예는, 예를 들어, 아다만틸, 사이클로프로필, 사이클로뷰틸, 사이클로펜틸, 사이클로옥틸 등을 포함한다. 이러한 사이클로알킬 기는, 예로서, 단일 고리 구조, 예컨대, 사이클로프로필, 사이클로뷰틸, 사이클로펜틸, 사이클로옥틸 등 또는 다중 고리 구조, 예컨대, 아다만탄일 등을 포함한다.
용어 "치환된 사이클로알킬"은 알킬, 치환된 알킬, 알콕시, 치환된 알콕시, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 치환된 사이클로알케닐, 아실, 아실아미노, 아실옥시, 아미노, 치환된 아미노, 아미노아실, 아미노아실옥시, 옥시아미노아실, 아지도, 사이아노, 할로겐, 하이드록실, 옥소, 티오케토, 카복실, 카복실알킬, 티오아릴옥시, 티오헤테로아릴옥시, 티오헤테로사이클로옥시, 티올, 티오알콕시, 치환된 티오알콕시, 아릴, 아릴옥시, 헤테로아릴, 헤테로아릴옥시, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클로옥시, 하이드록시아미노, 알콕시아미노, 나이트로, -SO-알킬, -SO 치환된 알킬, -SO-아릴, -SO-헤테로아릴, -SO2-알킬, -SO2 치환된 알킬, -SO2-아릴 및 -SO2-헤테로아릴로부터 선택되는 1개 내지 5개의 치환기 또는 1개 내지 3개의 치환기를 갖는 사이클로알킬 기를 지칭한다.
"사이클로알케닐"은 단일 또는 다중 고리를 가지며 적어도 1개의 이중 결합, 바람직하게는 1개 내지 2개의 이중 결합을 갖는 3개 내지 10개의 탄소 원자의 비방향족 환식 알킬 기를 지칭한다.
용어 "치환된 사이클로알케닐"은 알콕시, 치환된 알콕시, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 치환된 사이클로알케닐, 아실, 아실아미노, 아실옥시, 아미노, 치환된 아미노, 아미노아실, 아미노아실옥시, 옥시아미노아실, 아지도, 사이아노, 할로겐, 하이드록실, 케토, 티오케토, 카복실, 카복실알킬, 티오아릴옥시, 티오헤테로아릴옥시, 티오헤테로사이클로옥시, 티올, 티오알콕시, 치환된 티오알콕시, 아릴, 아릴옥시, 헤테로아릴, 헤테로아릴옥시, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클로옥시, 하이드록시아미노, 알콕시아미노, 나이트로, -SO-알킬, -SO 치환된 알킬, -SO-아릴, -SO-헤테로아릴, -SO2-알킬, -SO2 치환된 알킬, -SO2-아릴 및 -SO2-헤테로아릴로부터 선택되는 1개 내지 5개의 치환기 또는 1개 내지 3개의 치환기를 갖는 사이클로알케닐 기를 지칭한다.
"사이클로알키닐"은 단일 또는 다중 고리를 가지며 적어도 하나의 삼중 결합을 갖는 5개 내지 10개의 탄소 원자의 비방향족 사이클로알킬 기를 지칭한다.
"사이클로알콕시"는 -O-사이클로알킬을 지칭한다.
"사이클로알케닐옥시"는 -O-사이클로알케닐을 지칭한다.
"할로" 또는 "할로겐"은 플루오로, 클로로, 브로모 및 아이오도를 지칭한다.
"하이드록시" 또는 "하이드록실"은 -OH 기를 지칭한다.
"헤테로아릴"은 1개 내지 15개의 탄소 원자, 예컨대, 1개 내지 10개의 탄소 원자 및 고리 내의 산소, 질소 및 황으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1개 내지 10개의 헤테로원자의 방향족기를 지칭한다. 이러한 헤테로아릴 기는 단일 고리(예컨대, 피리딘일, 이미다졸일 또는 퓨릴) 또는 고리 시스템에서 다중 축합 고리(예를 들어, 인돌리진일, 퀴놀린일, 벤조퓨란, 벤즈이미다졸일 또는 벤조티엔일과 같은 기에서와 같음)를 가질 수 있되, 고리 시스템 내의 적어도 하나의 고리는 방향족이다. 원자가 요건을 충족시키기 위해, 이러한 헤테로아릴 고리 내의 임의의 헤테로원자는 H 또는 치환기, 예를 들어, 알킬 기 또는 본 명세서에 기재된 바와 같은 다른 치환기에 결합될 수 있거나 또는 결합되지 않을 수 있다. 특정 구현예에서, 헤테로아릴 기의 질소 및/또는 황 고리 원자(들)는 선택적으로 산화되어 N-옥사이드(N→O), 설피닐 또는 설포닐 모이어티를 제공한다. 용어는, 예로서, 피리딘일, 피롤일, 인돌일, 티오페닐 및 퓨란일을 포함한다. 헤테로아릴 치환기에 대한 정의에 의해 달리 제한되지 않는 한, 이러한 헤테로아릴 기는 선택적으로 아실옥시, 하이드록시, 티올, 아실, 알킬, 알콕시, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 치환된 알킬, 치환된 알콕시, 치환된 알케닐, 치환된 알키닐, 치환된 사이클로알킬, 치환된 사이클로알케닐, 아미노, 치환된 아미노, 아미노아실, 아실아미노, 알크아릴, 아릴, 아릴옥시, 아지도, 카복실, 카복실알킬, 사이아노, 할로겐, 나이트로, 헤테로아릴, 헤테로아릴옥시, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클로옥시, 아미노아실옥시, 옥시아실아미노, 티오알콕시, 치환된 티오알콕시, 티오아릴옥시, 티오헤테로아릴옥시, -SO-알킬, -SO 치환된 알킬, -SO-아릴, -SO-헤테로아릴, -SO2-알킬, -SO2 치환된 알킬, -SO2-아릴 및 -SO2-헤테로아릴 및 트라이할로메틸로부터 선택되는 1개 내지 5개의 치환기 또는 1개 내지 3개의 치환기로 치환될 수 있다.
용어 "헤테로아르알킬"은 -알킬렌-헤테로아릴 기를 지칭하되, 알킬렌 및 헤테로아릴은 본 명세서에 정의되어 있다. 이 용어는, 예로서, 피리딜메틸, 피리딜에틸, 인돌일메틸 등을 포함한다.
"헤테로아릴옥시"는 -O-헤테로아릴을 지칭한다.
"헤테로사이클", "헤테로사이클릭", "헤테로사이클로알킬" 및 "헤테로사이클릴"은 단일 고리 또는 융합, 가교 및 스피로 고리 시스템을 포함하는 다중 축합 고리를 가지며 1개 내지 10개의 헤테로 원자를 포함하는 3개 내지 20개의 고리 원자를 갖는 포화 또는 불포화기를 지칭한다. 이들 고리 원자는 질소, 황 또는 산소로부터 선택되되, 여기서, 융합된 고리계에서, 고리 중 하나 이상은 사이클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴일 수 있고, 단 부착점은 비-방향족 고리를 통한다. 특정 구현예에서, 헤테로사이클릭 기의 질소 및/또는 황 원자(들)는 선택적으로 산화되어 N-옥사이드, -S(O)- 또는 -SO2- 모이어티를 제공한다. 원자가 요건을 충족시키기 위해, 이러한 헤테로사이클릭 고리 내의 임의의 헤테로원자는 하나 이상의 H 또는 하나 이상의 치환기(들), 예를 들어, 알킬 기 또는 본 명세서에 기재된 바와 같은 다른 치환기에 결합될 수 있거나 또는 결합되지 않을 수 있다.
헤테로환 및 헤테로아릴의 예는, 아제티딘, 피롤, 이미다졸, 피라졸, 피리딘, 피라진, 피리미딘, 피리다진, 인돌리진, 이소인돌, 인돌, 다이하이드로인돌, 인다졸, 퓨린, 퀴놀리진, 이소퀴놀린, 퀴놀린, 프탈라진, 나프틸피리딘, 퀴녹살린, 퀴나졸린, 신놀린, 프테리딘, 카바졸, 카볼린, 페난트리딘, 아크리딘, 페난트롤린, 이소티아졸, 페나진, 이소옥사졸, 페녹사진, 페노티아진, 이미다졸리딘, 이미다졸린, 피페리딘, 피페라진, 인돌린, 프탈이미드, 1,2,3,4-테트라하이드로아이소퀴놀린, 4,5,6,7-테트라하이드로벤조[b]티오펜, 티아졸, 티아졸리딘, 티오펜, 벤조[b]티오펜, 몰폴린일, 티오몰폴린일(티아몰폴린일로도 지칭됨), 1,1-다이옥소티오몰폴린일, 피페리딘일, 피롤리딘, 테트라하이드로퓨란일 등을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다.
헤테로사이클릭 치환기에 대한 정의에 의해 달리 제한되지 않는 한, 이러한 헤테로사이클릭 기는 선택적으로 알콕시, 치환된 알콕시, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 치환된 사이클로알케닐, 아실, 아실아미노, 아실옥시, 아미노, 치환된 아미노, 아미노아실, 아미노아실옥시, 옥시아미노아실, 아지도, 사이아노, 할로겐, 하이드록실, 옥소, 티오케토, 카복실, 카복실알킬, 티오아릴옥시, 티오헤테로아릴옥시, 티오헤테로사이클로옥시, 티올, 티오알콕시, 치환된 티오알콕시, 아릴, 아릴옥시, 헤테로아릴, 헤테로아릴옥시, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클로옥시, 하이드록시아미노, 알콕시아미노, 나이트로, -SO-알킬, -SO 치환된 알킬, -SO-아릴, -SO-헤테로아릴, -SO2-알킬, -SO2 치환된 알킬, -SO2-아릴, -SO2-헤테로아릴 및 융합된 헤테로사이클로부터 선택되는 1개 내지 5개 또는 1개 내지 3개의 치환기로 치환될 수 있다.
"헤테로사이클릴옥시"는 -O-헤테로사이클릴 기를 지칭한다.
용어 "헤테로사이클릴티오"는 헤테로사이클릭-S- 기를 지칭한다.
용어 "헤테로사이클렌"은 본 명세서에 정의된 바와 같은 헤테로사이클로부터 형성된 2가 라디칼기를 지칭한다.
용어 "하이드록시아미노"는 -NHOH 기를 지칭한다.
"나이트로"는 -NO2 기를 지칭한다.
"옥소"는 원자(=O)를 지칭한다.
"설포닐"은 SO2-알킬, SO2 치환된 알킬, SO2-알케닐, SO2 치환된 알케닐, SO2-사이클로알킬, SO2 치환된 사이클로알킬, SO2-사이클로알케닐, SO2 치환된 사이클로알케닐, SO2-아릴, SO2 치환된 아릴, SO2-헤테로아릴, SO2 치환된 헤테로아릴, SO2-헤테로사이클릭 및 SO2 치환된 헤테로사이클릭 기를 지칭하되, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 치환된 사이클로알케닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로사이클릭 및 치환된 헤테로사이클릭은 본 명세서에 정의된 바와 같다. 설포닐은, 예로서, 메틸-SO2-, 페닐-SO2- 및 4-메틸페닐-SO2-를 포함한다.
"설포닐옥시"는 -OSO2-알킬, OSO2 치환된 알킬, OSO2-알케닐, OSO2 치환된 알케닐, OSO2-사이클로알킬, OSO2 치환된 사이클로알킬, OSO2-사이클로알케닐, OSO2 치환된 사이클로알케닐, OSO2-아릴, OSO2 치환된 아릴, OSO2-헤테로아릴, OSO2 치환된 헤테로아릴, OSO2-헤테로사이클릭 및 OSO2 치환된 헤테로사이클릭 기를 지칭하되, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 치환된 사이클로알케닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로사이클릭 및 치환된 헤테로사이클릭은 본 명세서에 정의된 바와 같다.
"설페이트" 또는 "설페이트 에스테르"는 -O-SO2-OH, -O-SO2-O-알킬, -O-SO2-O 치환된 알킬, -O-SO2-O-알케닐, -O-SO2-O 치환된 알케닐, -O-SO2-O-사이클로알킬, -O-SO2-O 치환된 사이클로알킬, -O-SO2-O-사이클로알케닐, -O-SO2-O 치환된 사이클로알케닐, -O-SO2-O-아릴, -O-SO2-O 치환된 아릴, -O-SO2-O-헤테로아릴, -O-SO2-O 치환된 헤테로아릴, -O-SO2-O-헤테로사이클릭, 및 -O-SO2-O 치환된 헤테로사이클릭 기를 지칭하고, 여기서 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 치환된 사이클로알케닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로사이클릭, 및 치환된 헤테로사이클릭은 본 명세서에서 정의된 바와 같다.
용어 "아미노카보닐옥시"는 -OC(O)NRR 기를 지칭하되, 각각의 R은 독립적으로 수소, 알킬, 치환된 알킬, 아릴, 헤테로아릴 또는 헤테로사이클릭이고, 알킬, 치환된 알킬, 아릴, 헤테로아릴 및 헤테로사이클릭은 본 명세서에 정의된 바와 같다.
"티올"은 -SH 기를 지칭한다.
"티옥소" 또는 용어 "티오케토"는 원자(=S)를 지칭한다.
"알킬티오" 또는 용어 "티오알콕시"는 -S-알킬 기를 지칭하되, 알킬은 본 명세서에 정의된 바와 같다. 특정 구현예에서, 황은 -S(O)-로 산화될 수 있다. 설폭사이드는 하나 이상의 입체이성질체로서 존재할 수 있다.
용어 "치환된 티오알콕시"는 -S 치환된 알킬 기를 지칭한다.
용어 "티오아릴옥시"는 아릴-S- 기를 지칭하되, 아릴 기는 본 명세서에 또한 정의되어 있는 선택적으로 치환된 아릴 기를 포함하여 본 명세서에 정의된 바와 같다.
용어 "티오헤테로아릴옥시"는 헤테로아릴-S- 기를 지칭하되, 헤테로아릴 기는 본 명세서에 또한 정의되어 있는 선택적으로 치환된 아릴 기를 포함하여 본 명세서에 정의된 바와 같다.
용어 "티오헤테로사이클로옥시"는 헤테로사이클릴-S- 기를 지칭하되, 헤테로사이클릴 기는 본 명세서에 또한 정의되어 있는 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴 기를 포함하여 본 명세서에 정의된 바와 같다.
본 명세서의 개시내용에 더하여, 용어 "치환된"은 특정 기 또는 라디칼을 변형시키는 데 사용되는 경우 특정 기 또는 라디칼의 하나 이상의 수소 원자가 각각 서로 독립적으로 아래 정의된 바와 같은 동일하거나 상이한 치환기로 대체되는 것을 의미할 수 있다.
본 명세서의 개별 용어와 관련하여 개시된 기에 더하여, 특정 기 또는 라디칼의 포화 탄소 원자 상의 하나 이상의 수소를 치환하기 위한 치환기(단일 탄소 상의 임의의 2개의 수소는 =O, =NR70, =N-OR70, =N2 또는 =S로 대체될 수 있음)는 달리 명시되지 않는 한, -R60, 할로, =O, -OR70, -SR70, -NR80R80, 트라이할로메틸, -CN, -OCN, -SCN, -NO, -NO2, =N2, -N3, -SO2R70, -SO2O-M+, -SO2OR70, -OSO2R70, -OSO2O-M+, -OSO2OR70, -P(O)(O-)2(M+)2, -P(O)(OR70)O-M+, -P(O)(OR70) 2, -C(O)R70, -C(S)R70, -C(NR70)R70, -C(O)O-M+, -C(O)OR70, -C(S)OR70, -C(O)NR80R80, -C(NR70)NR80R80, -OC(O)R70, -OC(S)R70, -OC(O)O-M+, -OC(O)OR70, -OC(S)OR70, -NR70C(O)R70, -NR70C(S)R70, -NR70CO2 -M+, -NR70CO2R70, -NR70C(S)OR70, -NR70C(O)NR80R80, -NR70C(NR70)R70 및 -NR70C(NR70)NR80R80이되, R60은 선택적으로 치환된 알킬, 사이클로알킬, 헤테로알킬, 헤테로사이클로알킬알킬, 사이클로알킬알킬, 아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴 및 헤테로아릴알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고, 각각의 R70은 독립적으로 수소 또는 R60이고; 각각의 R80은 독립적으로 R70이거나 또는 대안적으로 2개의 R80'는 이들이 결합된 질소 원자와 함께 O, N 및 S(이들 중 N은 -H 또는 C1-C3 알킬 치환을 가질 수 있음)로 이루어진 군으로부터 선택되는 1개 내지 4개의 동일하거나 상이한 추가적인 헤테로원자를 선택적으로 포함할 수 있는 5-원, 6-원 또는 7-원 헤테로사이클로알킬을 형성하고; 각각의 M+는 순 단일 양전하를 갖는 반대 이온이다. 각각의 M+는 독립적으로, 예를 들어, 알칼리 이온, 예컨대, K+, Na+, Li+; 암모늄 이온, 예컨대, +N(R60)4; 또는 알칼리 토류 이온, 예컨대, [Ca2 +]0.5, [Mg2 +]0.5, 또는 [Ba2 +]0.5일 수 있다("아래첨자 0.5는 이러한 2가 알칼리 토류 이온에 대한 반대 이온 중 하나는 본 발명의 화합물의 이온화된 형태일 수 있고 다른 하나는 클로라이드와 같은 전형적인 반대 이온일 수 있거나, 또는 본 명세서에 개시된 2개의 이온화된 화합물이 이러한 2가 알칼리 토류 이온에 대해 반대 이온으로 작용할 수 있거나 또는 이중 이온화된 본 발명의 화합물이 이러한 2가 알칼리 토류 이온에 대한 반대 이온으로 작용할 수 있음을 의미함). 특정 예로서, -NR80R80은 -NH2, -NH-알킬, N-피롤리딘일, N-피페라진일, 4N-메틸-피페라진-1-일 및 N-모폴린일을 포함하는 것을 의미한다.
본 명세서의 개시내용에 더하여, "치환된" 알켄, 알킨, 아릴 및 헤테로아릴 기의 불포화 탄소 원자 상의 수소에 대한 치환기는 달리 명시되지 않는 한 -R60, 할로, -O-M+, -OR70, -SR70, -S-M+, -NR80R80, 트라이할로메틸, -CF3, -CN, -OCN, -SCN, -NO, -NO2, -N3, -SO2R70, -SO3 -M+, -SO3R70, -OSO2R70, -OSO3 -M+, -OSO3R70, -PO3 -2(M+)2, -P(O)(OR70)O-M+, -P(O)(OR70)2, -C(O)R70, -C(S)R70, -C(NR70)R70, -CO2 -M+, -CO2R70, -C(S)OR70, -C(O)NR80R80, -C(NR70)NR80R80, -OC(O)R70, -OC(S)R70, -OCO2 -M+, -OCO2R70, -OC(S)OR70, -NR70C(O)R70, -NR70C(S)R70, -NR70CO2 -M+, -NR70CO2R70, -NR70C(S)OR70, -NR70C(O)NR80R80, -NR70C(NR70)R70 및 -NR70C(NR70)NR80R80이되, R60, R70, R80 및 M+는 이전에 정의된 바와 같지만, 단, 치환된 알켄 또는 알킨의 경우, 치환기는 -O-M+, -OR70, -SR70, 또는 -S-M+가 아니다.
본 명세서의 개별 용어와 관련하여 개시된 기에 추가하여, "치환된" 헤테로알킬 및 사이클로헤테로알킬 기의 질소 원자 상의 수소에 대한 치환기는 달리 명시되지 않는 한 -R60, -O-M+, -OR70, -SR70, -S-M+, -NR80R80, 트라이할로메틸, -CF3, -CN, -NO, -NO2, -S(O)2R70, -S(O)2O-M+, -S(O)2OR70, -OS(O)2R70, -OS(O)2O-M+, -OS(O)2OR70, -P(O)(O-)2(M+)2, -P(O)(OR70)O-M+, -P(O)(OR70)(OR70), -C(O)R70, -C(S)R70, -C(NR70)R70, -C(O)OR70, -C(S)OR70, -C(O)NR80R80, -C(NR70)NR80R80, -OC(O)R70, -OC(S)R70, -OC(O)OR70, -OC(S)OR70, -NR70C(O)R70, -NR70C(S)R70, -NR70C(O)OR70, -NR70C(S)OR70, -NR70C(O)NR80R80, -NR70C(NR70)R70 및 -NR70C(NR70)NR80R80이되, R60, R70, R80 및 M+는 이전에 정의된 바와 같다.
본 명세서의 개시내용에 더하여, 특정 구현예에서, 치환된 기는 1개, 2개, 3개 또는 4개의 치환기, 1개, 2개 또는 3개의 치환기, 1개 또는 2개의 치환기 또는 1개의 치환기를 갖는다.
위에 정의된 모든 치환된 기에서, 그 자체에 대한 추가의 치환기를 갖는 치환기를 정의함으로써 도달하는 중합체(예를 들어, 치환된 아릴 기 등으로 추가로 치환되는 그 자체가 치환된 아릴 기로 치환된 치환기로서 치환된 아릴 기를 갖는 치환된 아릴)는 본 명세서에 포함되는 것으로 의도되지 않음이 이해된다. 이러한 경우, 이러한 치환의 최대 수는 3개이다. 예를 들어, 본 명세서에서 구체적으로 상정되는 치환된 아릴 기의 연속 치환은 치환된 아릴-(치환된 아릴)-치환된 아릴로 제한된다.
달리 나타내지 않는 한, 본 명세서에 명시적으로 정의되지 않은 치환기의 명명법은 부착 지점을 향한 인접한 관능기가 뒤따르는 관능기의 말단 부분을 명명함으로써 이루어진다. 예를 들어, 치환기 "아릴알킬옥시카보닐"은 (아릴)-(알킬)-O-C(O)- 기를 지칭한다.
하나 이상의 치환기를 포함하는 본 명세서에 개시된 임의의 기에 대하여, 물론 이러한 기는 입체적으로 비실용적이고/이거나 합성적으로 실행 불가능한 임의의 치환 또는 치환 패턴을 포함하지 않는 것으로 이해된다. 또한, 대상 화합물은 이러한 화합물의 치환으로부터 발생하는 모든 입체화학적 이성질체를 포함한다.
용어 "약제학적으로 허용 가능한 염"은 포유동물과 같은 환자에게 투여가 허용되는 염(주어진 투여 양생법에 대해 허용 가능한 포유동물 안전성을 갖는 반대 이온을 갖는 염)을 의미한다. 이러한 염은 약제학적으로 허용 가능한 무기 또는 유기 염기 및 약제학적으로 허용 가능한 무기산 또는 유기산으로부터 유래될 수 있다. "약제학적으로 허용 가능한 염"은 화합물의 약제학적으로 허용 가능한 염을 지칭하며, 염은 당업계에 잘 알려진 다양한 유기 및 무기 반대 이온으로부터 유래되고, 단지 예로서 소듐, 포타슘, 칼슘, 마그네슘, 암모늄, 테트라알킬암모늄 등을 포함하며; 분자가 염기성 관능기를 포함하는 경우, 하이드로클로라이드, 하이드로브로마이드, 폼에이트, 타트레이트, 베실레이트, 메실레이트, 아세테이트, 말레에이트, 옥살레이트 등과 같은 유기산 또는 무기산의 염이다.
용어 "이의 염"은 금속 양이온 또는 유기 양이온 등과 같은 양이온으로 대체될 때 형성되는 화합물을 의미한다. 적용 가능한 경우, 염은 약제학적으로 허용 가능한 염이지만, 이는 환자에게 투여하기 위한 것이 아닌 중간체 화합물의 염에는 필요하지 않다. 예로서, 본 발명의 화합물의 염은 염의 음이온성 성분으로서 무기산 또는 유기산의 짝염기와 함께 화합물이 무기산 또는 유기산에 의해 양성자화되어 양이온을 형성하는 것을 포함한다.
"용매화물"은 용질의 분자 또는 이온과 용매 분자의 조합에 의해 형성된 복합체를 지칭한다. 용매는 유기 화합물, 무기 화합물 또는 이 둘의 혼합물일 수 있다. 용매의 일부 예는 메탄올, N,N-다이메틸폼아미드, 테트라하이드로퓨란, 다이메틸설폭사이드 및 물을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 용매가 물인 경우, 형성되는 용매화물은 수화물이다.
"입체이성질체" 및 "입체이성질체들"은 동일한 원자 연결성을 갖지만 공간에서 원자 배열이 다른 화합물을 지칭한다. 입체이성질체는 시스-트랜스 이성질체, E 및 Z 이성질체, 거울상이성질체 및 부분입체이성질체를 포함한다.
"호변이성질체"는 원자의 전자 결합 및/또는 양성자의 위치만이 다른 분자의 대안적 형태, 예컨대, 에놀-케토 및 이민-엔아민 호변이성질체 또는 피라졸, 이미다졸, 벤즈이미다졸, 트라이아졸 및 테트라졸과 같은 -N=C(H)-NH- 고리 원자 배열을 포함하는 헤테로아릴 기의 호변이성질체 형태를 지칭한다. 당업자는 다른 호변이성질체 고리 원자 배열이 가능함을 인지할 것이다.
용어 "또는 이의 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체"는 대상 화합물의 입체이성질체의 약제학적으로 허용 가능한 염의 용매화물과 같은 염, 용매화물 및 입체이성질체의 모든 순열을 포함하는 것으로 의도됨을 이해할 것이다.
"약제학적 유효량" 및 "치료학적 유효량"은 특정 장애 또는 질환 또는 하나 이상의 이의 증상을 치료하고/하거나 질환 또는 장애의 발생을 예방하기에 충분한 화합물의 양을 지칭한다. 종양형성성 증식 장애와 관련하여, 약제학적 또는 치료학적 유효량은 특히 종양을 수축시키거나 또는 종양의 성장 속도를 감소시키기에 충분한 양을 포함한다.
"환자"는 인간 및 비-인간 대상체, 특히 포유류 대상체를 나타낸다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같은 용어 "치료하는" 또는 "치료"는 환자, 예컨대, 포유류(특히 인간)의 질환 또는 의학적 병태를 치료하는 또는 치료를 의미하고, (a) 대상체의 질환 또는 의학적 병태가 발생하는 것을 방지하는 것, 예컨대, 예방적 치료; (b) 환자에서 질병 또는 의학적 상태를 개선하는 것, 예컨대, 질병 또는 의학적 상태의 제거 또는 퇴행 유발; (c) 환자의 질환 또는 의학적 병태를, 예를 들어, 질환 또는 의학적 병태의 둔화 또는 발달의 정지에 의해 억제하는 것; 또는 (d) 환자의 질환 또는 의학적 병태의 증상을 완화시키는 것을 포함한다.
용어 "폴리펩티드", "펩티드" 및 "단백질"은 임의의 길이의 아미노산의 중합체 형태를 지칭하기 위해 본 명세서에서 상호교환적으로 사용된다. 달리 구체적으로 나타내지 않는 한, "폴리펩티드", "펩티드" 및 "단백질"은 유전적으로 코딩된 아미노산 및 코딩되지 않은 아미노산, 화학적으로 또는 생화학적으로 변형되거나 또는 유도체화된 아미노산 및 변형된 펩티드 백본을 갖는 폴리펩티드를 포함할 수 있다. 용어는 이종 아미노산 서열을 갖는 융합 단백질, 이종 및 상동 리더 서열을 갖는 융합체, (예를 들어, 재조합 숙주 세포에서의 생산을 용이하게 하기 위한) 적어도 하나의 N-말단 메티오닌 잔기를 포함하는 단백질; 면역학적으로 태깅된 단백질; 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는 융합 단백질을 포함한다.
"천연 아미노산 서열" 또는 "모 아미노산 서열"은 변형된 아미노산 잔기를 포함하도록 변형되기 전의 폴리펩티드의 아미노산 서열을 지칭하기 위해 상호교환적으로 사용된다.
용어 "아미노산 유사체", "비천연 아미노산" 등은 상호교환적으로 사용될 수 있으며, 자연 발생적 단백질에서 일반적으로 발견되는 하나 이상의 아미노산(예를 들어, Ala 또는 A, Cys 또는 C, Asp 또는 D, Glu 또는 E, Phe 또는 F, Gly 또는 G, His 또는 H, Ile 또는 I, Lys 또는 K, Leu 또는 L, Met 또는 M, Asn 또는 N, Pro 또는 P, Gln 또는 Q, Arg 또는 R, Ser 또는 S, Thr 또는 T, Val 또는 V, Trp 또는 W, Tyr 또는 Y)과 구조 및/또는 전체 모양이 유사한 아미노산-유사 화합물을 포함한다. 아미노산 유사체는 또한 변형된 측쇄 또는 백본을 갖는 천연 아미노산을 포함한다. 아미노산 유사체는 또한 아미노산 유사체의 자연 발생적 D-형뿐만 아니라 L-형에서와 동일한 입체화학을 갖는 아미노산 유사체를 포함한다. 일부 예에서, 아미노산 유사체는 하나 이상의 천연 아미노산의 백본 구조 및/또는 측쇄 구조를 공유하며, 분자 내 하나 이상의 변형된 기에 차이(들)가 있다. 이러한 변형은 관련 원자(예컨대, S)에 대한 원자(예컨대, N)의 치환, 기(예컨대, 메틸 또는 하이드록실 등) 또는 원자(예컨대, Cl 또는 Br 등)의 추가, 기의 결실, 공유 결합의 치환(이중 결합에 대한 단일 결합 등) 또는 이들의 조합을 포함할 수 있지만 이에 제한되지 않는다. 예를 들어, 아미노산 유사체는 α-하이드록시산 및 α-아미노산 등을 포함할 수 있다.
용어 "아미노산 측쇄" 또는 "아미노산의 측쇄" 등은 천연 아미노산, 비천연 아미노산 및 아미노산 유사체를 포함하는 아미노산 잔기의 α-탄소에 부착된 치환기를 지칭하기 위해 사용될 수 있다. 아미노산 측쇄는 또한 본 명세서에 기재된 변형된 아미노산 및/또는 접합체의 맥락에서 기재된 바와 같은 아미노산 측쇄를 포함할 수 있다.
용어 "탄수화물" 등은 단당류, 이당류, 올리고당류 및 다당류의 단량체 단위 및/또는 중합체를 지칭하기 위해 사용될 수 있다. 용어 당은 더 작은 탄수화물, 예컨대, 단당류, 이당류를 지칭하기 위해 사용될 수 있다. 용어 "탄수화물 유도체"는 관심 탄수화물의 하나 이상의 관능기가 치환(임의의 편리한 치환기에 의해 대체)되거나, 변형(임의의 편리한 화학을 사용하여 다른 기로 변환)되거나 또는 없는(예를 들어 제거되거나 H에 의해 대체되는) 화합물들을 포함한다. 다양한 탄수화물 및 탄수화물 유도체가 활용될 수 있고 본 화합물 및 접합체에 사용하기 위해 적응될 수 있다.
용어 "글리코시드" 또는 "글리코실"은 글리코시드 결합을 통해 모이어티에 결합된 당 분자 또는 기를 지칭한다. 예를 들어, 글리코시드가 결합된 모이어티는 본 명세서에 기재된 바와 같이 절단 가능한 링커일 수 있다. 글리코시드 결합은 O-글리코시드 결합(O-글리코시드), N-글리코시드 결합(글리코실아민), 글리코시드 결합(티오글리코시드) 또는 C-글리코시드 결합(C-글리코시드 또는 C-글리코실)로 제한되지 않는 것과 같은 다른 유형의 결합을 통해 다른 모이어티에 글리코시드를 연결할 수 있다. 일부 경우에 글리코시드는 화학적 매개 가수분해 또는 효소 매개 가수분해와 같이 부착된 모이어티에서 절단될 수 있다.
용어 "항체"는 가장 넓은 의미로 사용되고, 단클론성 항체(전장 단클론성 항체 포함), 다클론성 항체, 및 다중특이적 항체(예를 들어, 이중특이적 항체), 인간화된 항체, 단쇄 항체, 키메라 항체, 항체 단편(예를 들어, Fab 단편) 등을 포함한다. 항체는 표적 항원에 결합할 수 있다 (Janeway, C., Travers, P., Walport, M., Shlomchik (2001) Immuno Biology, 5판, Garland Publishing, New York). 표적 항원은, 항체의 하나 이상의 가변 영역에 의해 형성된 상보성 결정 영역(CDR)에 의해 인식되는, 에피토프로도 불리는, 하나 이상의 결합 부위를 가질 수 있다.
용어 "천연 항체"는 항체의 중쇄 및 경쇄가 다세포 유기체의 면역체계에 의해 만들어지고 쌍을 이루는 항체를 지칭한다. 비장, 림프절, 골수 및 혈청이 천연 항체를 생산하는 조직들의 예이다. 예를 들어, 항원으로 면역화된 제1 동물로부터 단리된 항체 생산 세포에 의해 생산된 항체는 천연 항체이다.
용어 "인간화된 항체" 또는 "인간화된 면역글로불린"은 인간 항체로부터의 상응하여 위치된 아미노산으로 치환된 (예를 들어 프레임워크 영역, 불변 영역 또는 CDR에) 하나 이상의 아미노산을 함유하는 비-인간(예를 들어 마우스 또는 토끼) 항체를 지칭한다. 일반적으로, 인간화된 항체는, 동일한 항체의 비-인간화된 버전에 비해서, 인간 숙주에서 감소된 면역 반응을 유발한다. 항체는, 예를 들어, CDR-그라프팅(EP 239,400; PCT 공보 WO 91/09967; 미국 특허 제5,225,539호; 제5,530,101호; 및 제5,585,089호), 비니어링(veneering) 또는 리서페이싱(resurfacing)((EP 592,106; EP 519,596; Padlan, Molecular Immunology 28(4/5):489-498 (1991); Studnicka 등, Protein Engineering 7(6):805-814 (1994); Roguska. 등, PNAS 91:969-973 (1994)), 및 사슬 셔플링(chain shuffling)(미국 특허 제5,565,332호)을 포함하여, 당업계에 공지된 다양한 기법을 사용하여 인간화될 수 있다. 특정 구현예에서, 프레임워크 치환은 항원 결합에 중요한 프레임워크 잔기를 확인하기 위한 CDR과 프레임워크 잔기의 상호작용의 모델링 및 특정 위치에서 독특한 프레임워크 잔기를 확인하기 위한 서열 비교에 의해 확인된다(예컨대, 미국 특허 제5,585,089호; 문헌[Riechmann 등, Nature 332:323 (1988)] 참조). 본 발명에 사용하기 위해 상정된 항체를 인간화하기 위한 추가의 방법들은 미국 특허 제5,750,078호; 제5,502,167호; 제5,705,154호; 제5,770,403호; 제5,698,417호; 제5,693,493호; 제5,558,864호; 제4,935,496호; 및 제4,816,567호 및 PCT 공보 WO 98/45331 및 WO 98/45332에 기재되어 있다. 특정 구현예에서, 대상 토끼 항체는 US20040086979 및 US20050033031에 제시된 방법에 따라 인간화될 수 있다. 따라서, 위에서 기재된 항체들은 당업계에 잘 알려져 있는 방법들을 사용하여 인간화될 수 있다.
용어 "키메라 항체"는 경쇄 및 중쇄 유전자들이 전형적으로 유전자 조작에 의해, 상이한 종에 속하는 항체 가변 및 불변 영역 유전자들로부터 작제된 항체를 나타낸다. 예를 들어, 마우스 단클론성 항체로부터의 유전자의 가변 분절은 인간 불변 분절, 예컨대, 감마 1 및 감마 3에 연결될 수 있다. 치료용 키메라 항체의 예는 마우스 항체로부터의 가변 또는 항원-결합 도메인과 인간 항체로부터의 불변 또는 이펙터 도메인으로 구성된 하이브리드 단백질이지만, 다른 포유류 종으로부터의 도메인도 사용될 수 있다.
면역글로불린 폴리펩티드 면역글로불린 경쇄 또는 중쇄 가변 영역은 "상보성 결정 영역" 또는 "CDR"로도 불리는 3개의 초가변 영역이 사이에 끼어 있는 프레임워크 영역(FR)으로 구성된다. 프레임워크 영역 및 CDR의 정도는 정의되어 있다(문헌["Sequences of Proteins of Immunological Interest", E. Kabat 등, U.S. Department of Health and Human Services, 1991] 참조). 구성 경쇄 및 중쇄의 조합된 프레임워크 영역인, 항체의 프레임워크 영역은 CDR의 위치를 정하고 정렬시키는 작용을 한다. CDR은 주로 항원의 에피토프에 대한 결합을 담당한다.
"모 Ig 폴리펩티드"는 본 명세서에 기재된 것과 같은 알데하이드-태그 부착된 불변 영역이 결여된 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩티드이다. 모 폴리펩티드는 천연 서열 불변 영역을 포함할 수 있거나, 또는 기존의 아미노산 서열 변형(예컨대 첨가, 결실 및/또는 치환)을 가진 불변 영역을 포함할 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "단리된"은 화합물이 자연적으로 발생하는 환경과 다른 환경에 있는 관심 화합물을 설명하기 위한 것이다. "단리된"은 관심 화합물이 실질적으로 풍부하고/하거나 관심 화합물이 부분적으로 또는 실질적으로 정제된 샘플 내에 있는 화합물을 포함하는 것을 의미한다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "실질적으로 정제된"은 이의 자연 환경으로부터 제거되며, 자연적으로 관련된 다른 성분이 적어도 60% 없고, 적어도 75% 없고, 적어도 80% 없고, 적어도 85% 없고, 적어도 90% 없고, 적어도 95% 없고, 적어도 98% 없거나 또는 98% 이상 없는 화합물을 지칭한다.
용어 "생리학적 조건"은 살아있는 세포에 적합한 조건, 예를 들어, 주로 살아있는 세포에 적합한 온도, pH, 염도 등의 수성 조건을 포함하는 것을 의미한다.
"반응 파트너"는 반응 생성물을 생성하기 위해 다른 반응 파트너와 특이적으로 반응하는 분자 또는 분자 모이어티를 의미한다. 예시적인 반응 파트너로는 설파타제 모티프 및 포르밀글리신 생성 효소(FGE)의 시스테인 또는 세린을 포함하는데, 이들은 모티프의 시스테인 또는 세린 대신 포르밀글리신(FGly)을 함유하는 전환된 알데하이드 태그의 반응 생성물을 형성하기 위해 반응한다. 다른 예시적인 반응 파트너는 전환된 알데하이드 태그의 fGly 잔기의 알데하이드(예를 들어 반응성 알데하이드기) 및 "알데하이드-반응성 반응 파트너"를 포함하는데, 이것은 알데하이드-반응성 기와 관심 모이어티를 포함하며, 변형된 fGly 잔기를 통해 변형된 폴리펩티드에 대해 접합된 관심 모이어티를 갖는 변형된 알데하이드 태그 부착된 폴리펩티드의 반응 생성물을 형성하기 위하여 반응한다.
"N-말단"은 유리 아민기를 갖는 폴리펩티드의 말단 아미노산 잔기를 나타내고, 비-N-말단 아미노산 잔기의 아민기는 통상 폴리펩티드의 공유 백본의 부분을 형성한다.
"C-말단"은 유리 카복실기를 갖는 폴리펩티드의 말단 아미노산 잔기를 나타내고, 비-C-말단 아미노산 잔기의 카복실기는 통상 폴리펩티드의 공유 백본의 부분을 형성한다.
폴리펩티드 또는 폴리펩티드의 아미노산 서열과 관련하여 사용되는 바와 같은 "내부 부위"는 N-말단 또는 C-말단에 있지 않은 폴리펩티드의 영역을 의미한다.
본 발명을 추가로 설명하기 전에, 본 발명은 기재된 특정 구현예에 제한되지 않으며, 물론 그 자체는 다양할 수 있음을 이해하여야 한다. 또한, 본 발명의 범위는 첨부된 청구범위에 의해서만 제한될 것이기 때문에, 본 명세서에서 사용된 용어는 단지 특정 구현예를 설명하기 위한 것이며 제한하려는 의도가 아님을 이해하여야 한다.
값의 범위가 제공되는 경우, 문맥에서 달리 명시하지 않는 한 해당 범위의 상한 및 하한과 임의의 다른 언급되거나 또는 언급된 범위 내의 개재 값 사이의 각각의 개재 값은 하한 단위의 10분의 1까지 본 발명 내에 포함된다. 이러한 더 작은 범위의 상한 및 하한은 독립적으로 더 작은 범위에 포함될 수 있고, 또한 언급된 범위에서 임의의 구체적으로 배제된 한계에 따라 본 발명 내에 포함된다. 언급된 범위가 한계 중 하나 또는 둘 다를 포함하는 경우, 포함된 한계 중 하나 또는 둘 다를 제외한 범위도 본 발명에 포함된다.
명료함을 위해 별도의 구현예의 맥락에서 기재된 본 발명의 소정의 특징은 또한 단일 구현예에서 조합하여 제공될 수 있음이 이해된다. 역으로, 간결함을 위해 단일 구현예의 맥락에서 기재된 본 발명의 다양한 특징은 또한 개별적으로 또는 임의의 적합한 하위 조합으로 제공될 수 있다. 본 발명에 관한 구현예의 모든 조합은 본 발명에 구체적으로 포함되며, 예를 들어, 안정적인 화합물 (즉, 만들어지고, 단리되고, 특성화되고 그리고 생물학적 활성에 대해 테스트될 수 있는 화합물)인 특허 대상을 포함하는 범위까지 마치 각각 및 모든 조합이 개별적으로 그리고 명시적으로 개시된 것처럼 본 명세서에 개시된다. 또한, 다양한 구현예의 모든 하위 조합 및 이의 요소(예를 들어, 이러한 변수를 설명하는 구현예에 열거된 화학기의 요소)는 또한 본 발명에 의해 구체적으로 포함되며, 마치 각각 및 모든 이러한 하위 조합이 본 명세서에 개별적으로 그리고 명시적으로 개시된 것처럼 본 명세서에 개시된다.
달리 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용된 모든 기술 및 과학 용어는 본 발명이 속하는 기술 분야의 당업자가 일반적으로 이해하는 것과 동일한 의미를 갖는다. 본 명세서에 기재된 것과 유사하거나 등가인 임의의 방법 및 물질이 본 발명의 실시 또는 테스트에 사용될 수 있지만, 바람직한 방법 및 물질이 이제 기재된다. 본 명세서에 언급된 모든 간행물은 간행물이 인용된 것과 관련된 방법 및/또는 자료를 개시하고 기술하기 위해 참조에 의해 본 명세서에 원용된다.
본 명세서 및 첨부된 청구범위에서 사용되는 "단수형"은 문맥상 달리 지시하지 않는 한 복수의 지시 대상을 포함한다는 점에 유의하여야 한다. 청구범위는 임의의 선택적 요소를 배제하도록 작성될 수 있음에 추가로 유의한다. 이와 같이, 이 진술은 청구항 요소의 인용 또는 "부정적" 제한의 사용과 관련하여 "단독(solely)", "단지(only)" 등과 같은 이러한 배타적 용어 사용에 대한 선행적 근거의 역할을 하기 위한 것이다.
명료함을 위해 별도의 구현예의 맥락에서 기재된 본 발명의 소정의 특징은 또한 단일 구현예에서 조합하여 제공될 수 있음이 이해된다. 역으로, 간결함을 위해 단일 구현예의 맥락에서 기재된 본 발명의 다양한 특징은 또한 개별적으로 또는 임의의 적합한 하위 조합으로 제공될 수 있다.
본 명세서에서 논의된 간행물은 본 출원의 출원일 이전의 공개에 대해서만 제공된다. 본 명세서의 어떠한 것도 본 발명이 선행 발명에 의해 이러한 간행물보다 선행할 자격이 없다는 것을 인정하는 것으로 해석되어서는 안 된다. 또한, 제공된 공개 날짜는 독립적으로 확인하여야 할 필요가 있는 실제 공개 날짜와 상이할 수 있다.
상세한 설명
본 개시내용은 항체를 약물에 연결시키는 에스테르 기를 함유하는 절단 가능한 링커를 포함하는 항체-약물 접합체 구조를 제공한다. 본 개시내용은 또한 그런 접합체의 제조 방법뿐 만 아니라 이를 사용하는 방법도 포함한다.
대부분의 페이로드는 활성을 나타내기 위해 ADC 어셈블리에서 절단해야 한다. 이와 같이, ADC에 사용되는 화학적 링커는 주로 세포내(리소좀) 조건에서 절단 가능하다. 전형적으로, 이러한 링커는 프로테아제 및 글리코시다제에 의한 효소 절단에 민감하거나 산에 불안정하다. 예를 들어, 많은 아민 함유 약물은 자가 희생 스페이서 및 카바메이트 기를 통해 프로테아제 절단 가능한 디펩티드 링커에 쉽게 연결될 수 있다(도 2, 패널 A). 대조적으로, 연결 가능한 모이어티로 자유 하이드록시 기만 보유하는 페이로드는 ADC에서 직접 사용하기 어려운 것으로 입증되었다. 이러한 페이로드에 대한 절단 가능한 링커는 특별한 설계와 종종 힘든 합성 접근 방식이 필요하다. 항체에 하이드록시 함유 페이로드를 부착하기 위해 카복실 에스테르 기를 사용하는 것은 이러한 부류의 페이로드를 갖는 ADC를 생성하기 위한 가장 간단하고 합성적으로 다루기 쉬운 접근 방식인 것으로 보인다(도 2, 패널 B). 그러나 에스테르는 다양한 혈장 가수분해효소(에스테라제)에 매우 민감하므로 일반적으로 순환에서 높은 안정성(t½ = 주)을 요구하는 ADC에 대한 유용한 링커로 간주되지 않는다. 본 개시내용은 혈장-안정성 접합체의 생성을 위해 하이드록시 함유 약물을 항체에 직접 연결하기 위한 에스테르 링커의 사용을 포함하는 ADC를 제공한다.
단당류 모이어티에 인접한 카복실산 에스테르 링커를 함유하는 ADC는 완전히 노출된 에스테르 기에 비해 더 큰 혈장 안정성을 나타낼 수 있지만, 도 3에 도시된 바와 같이 ADC 내재화 및 트래피킹 시에 효율적으로 절단될 수 있다.
표적 세포에 들어가기 전에 세포외 가수분해효소에 의한 에스테르 절단은 그 자체가 혈장에서 매우 안정한 인접 글루코시드에 의해 제공되는 입체 장애로 인해 무시할 수 있다. 반대로, ADC 내재화 시, 단당류 그룹은 리소좀 글리코시다제에 의해 효율적으로 제거될 수 있으며, 에스테르 기는 세포내 에스테라제에 의한 효소적 가수분해에 접근할 수 있게 된다. 이 후자의 단계는 접합을 위해 사용된 유리 하이드록시 기의의 회수와 함께 원래의 페이로드의 방출로 이어질 것이다(도 3). 이러한 이중 절단 에스테르-글리코시드 링커의 예는 도 4에 도시되어 있다. 여기에는 오르토-글리코시드 모이어티(1) 및 α-아릴 글리신(2)의 구조적으로 관련된 유도체를 함유하는 살리실산 에스테르 링커가 포함된다. 세린, 이소세린 및 트레오닌에 동일한 구조 설계 개념을 적용하면 각각 글리코시드화 에스테르 링커 3, 4 및 5가 제공된다. 동일한 원리에 따라, 말산 및 타르타르산의 단당류 함유 유도체(각각 6 및 7)도 제공된다(도 4).
항체-약물 접합체
본 개시내용은 접합체, 예를 들어, 항체-약물 접합체(ADC)를 제공한다. "접합체"는 제1 모이어티(예를 들어, 항체)가 제2 모이어티(예를 들어, 약물 또는 활성제)와 안정적으로 회합되는 것을 의미한다. 예를 들어, 항체-약물 접합체는 다른 모이어티(예를 들어, 항체)와 안정적으로 회합된 약물 또는 활성제를 포함한다. "안정적으로 회합된 "은 모이어티가 또 다른 모이어티 또는 구조에 표준 조건하에서 결합된 것을 의미한다. 특정 구현예에서, 제1 및 제2 모이어티는 서로 하나 이상의 관능기 및 공유 결합을 통해 결합된다. 예를 들어, 하나 이상의 관능기 및 공유 결합은 본 명세서에 기재된 바와 같은 절단 가능한 링커를 포함할 수 있다.
특정 구현예에서, 접합체는, 제2 모이어티에 접합된 폴리펩티드(예를 들어, 항체)를 포함하는 폴리펩티드 접합체이다. 특정 구현예에서, 폴리펩티드에 접합된 모이어티는, 예컨대, 약물, 활성제, 검출 가능한 표지, 수용성 중합체, 또는 막 또는 표면에 폴리펩티드를 고정시키기 위한 모이어티를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는 다양한 관심 모이어티 중 임의의 것일 수 있다. 특정 구현예에서, 접합체는 폴리펩티드가 항체인 약물 접합체이며, 따라서 항체-약물 접합체를 제공한다. 예를 들어, 접합체는 폴리펩티드가 약물 또는 활성제에 접합된 약물 접합체일 수 있다. 다양한 유형의 약물 또는 활성제가 접합체에 사용될 수 있으며 아래에 더 자세히 설명되어 있다.
관심 모이어티(예를 들어, 약물 또는 활성제)는 폴리펩티드의 임의의 목적하는 부위에서 폴리펩티드(예를 들어, 항체)에 접합될 수 있다. 따라서, 본 개시내용은, 예를 들어, 폴리펩티드의 C-말단에서 또는 그 부근에서 접합된 모이어티를 갖는 변형된 폴리펩티드를 제공한다. 다른 예는 폴리펩티드의 N-말단에서 또는 그 부근에서 접합된 모이어티를 갖는 변형된 폴리펩티드를 제공한다. 그 예는 또한 폴리펩티드의 C-말단과 N-말단 사이의 위치에서 (예를 들어 폴리펩티드의 내부 부위에서) 접합된 모이어티를 갖는 변형된 폴리펩티드를 포함한다. 상기의 조합은 또한 변형된 폴리펩티드가 둘 이상의 모이어티에 접합되어 있는 경우에도 가능하다.
특정 구현예에서, 본 개시내용의 접합체는 아미노산 잔기의 α-탄소에서 폴리펩티드의 아미노산 잔기에 접합된 약물 또는 활성제을 포함한다. 기재된 또 다른 방식에서, 활성제 접합체는 폴리펩티드의 1개 이상의 아미노산 잔기의 측쇄가 약물 또는 활성제에 부착되도록 변형되어 있는(예를 들어 본 명세서에 기재된 바와 같은 링커를 통해 약물 또는 활성제에 부착된) 폴리펩티드를 포함한다. 예를 들어, 활성제 접합체는 폴리펩티드의 1개 이상의 아미노산 잔기의 α-탄소가 약물 또는 활성제에 부착되도록 변형되어 있는(예를 들어 본 명세서에 기재된 바와 같은 링커를 통해 약물 또는 활성제에 부착된) 폴리펩티드를 포함한다.
본 개시내용의 구현예는 폴리펩티드가 1개 이상의 모이어티, 예컨대, 2개의 모이어티, 3개의 모이어티, 4개의 모이어티, 5개의 모이어티, 6개의 모이어티, 7개의 모이어티, 8개의 모이어티, 9개의 모이어티, 또는 10개 이상의 모이어티에 접합된 접합체를 포함한다. 모이어티는 폴리펩티드의 1개 이상의 부위에서 폴리펩티드에 접합될 수 있다. 예를 들어, 1개 이상의 모이어티는 폴리펩티드의 단일 아미노산 잔기에 접합될 수 있다. 몇몇 경우에, 1개의모이어티는 폴리펩티드의 아미노산 잔기에 접합된다. 다른 구현예에서, 2개의 모이어티는 폴리펩티드의 동일한 아미노산 잔기에 접합될 수 있다. 다른 구현예에서, 제1 모이어티는 폴리펩티드의 제1 아미노산 잔기에 접합되고, 제2 모이어티는 폴리펩티드의 제2 아미노산 잔기에 접합된다. 상기의 조합이 또한 가능하며, 예를 들어, 폴리펩티드는 제1 아미노산 잔기에서 제1 모이어티에 접합되고 제2 미노산 잔기에서 2개의 다른 모이어티에 접합된다. 제한 없이, 제1 아미노산 잔기에서 제1 및 제2 모이어티에 접합되고 제2 아미노산 잔기에서 제3 및 제4 모이어티에 접합된 폴리펩티드 등과 같은 다른 조합이 또한 가능하다.
1개 이상의 모이어티에 접합된 폴리펩티드의 1개 이상의 아미노산 잔기는 천연 유래 아미노산, 비천연 아미노산, 또는 이들의 조합일 수 있다. 예를 들어, 접합체는 폴리펩티드의 천연 유래 아미노산 잔기에 접합된 모이어티를 포함할 수 있다. 다른 경우에, 접합체는 폴리펩티드의 비천연 아미노산 잔기에 접합된 모이어티를 포함할 수 있다. 1개 이상의 모이어티는 위에서 기재된 바와 같은 단일의 천연 또는 비천연 아미노산 잔기에서 폴리펩티드에 접합될 수 있다. 폴리펩티드의 하나 이상의 천연 또는 비천연 아미노산 잔기는 본 명세서에 기재된 바와 같은 모이어티 또는 모이어티들에 접합될 수 있다. 예를 들어, 폴리펩티드의 2개(또는 그 초과)의 아미노산 잔기(예를 들어, 천연 또는 비천연 아미노산 잔기)는, 각각 1 또는 2개의 모이어티에 접합될 수 있어, 폴리펩티드의 다수의 부위가 변형된다.
본 명세서에 기재된 비와 같이, 폴리펩티드는 1개 이상의 모이어티에 접합될 수 있다. 특정 구현예에서, 관심 모이어티는 화학적 독립체(entity), 예컨대, 약물, 활성제 또는 검출 가능한 표지이다. 예를 들어, 약물(또는 활성제)은 폴리펩티드에 접합될 수 있거나, 또는 다른 구현예에서, 검출 가능한 표지는 폴리펩티드에 접합될 수 있다. 따라서, 예를 들어, 본 개시내용의 실시형태는 하기를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다: 폴리펩티드와 약물의 접합체; 폴리펩티드와 활성제의 접합체; 폴리펩티드와 검출가능한 표지의 접합체;; 2가지 이상의 약물과 폴리펩티드의 접합체, 및 2종 이상의 검출 가능한 표지와 폴리펩티드의 접합체; 등.
특정 구현예에서, 폴리펩티드(예를 들어, 항체) 및 관심 모이어티(예를 들어, 약물 또는 활성제)은 접합 모이어티를 통해 접합된다. 예를 들어, 폴리펩티드와 관심 모이어티는 접합 모이어티에 결합(예를 들어, 공유 결합)될 수 있고, 따라서 접합 모이어티를 통해서 폴리펩티드와 관심 모이어티를 간접적으로 결합시킬 수 있다. 몇몇 경우에, 접합 모이어티는 하이드라지닐-인돌릴 또는 하이드라지닐-피롤로-피리딘일 화합물, 또는 하이드라지닐-인돌릴 또는 하이드라지닐-피롤로-피리딘일 화합물의 유도체를 포함한다. 예를 들어, 하이드라지닐-인돌릴 또는 하이드라지닐-피롤로-피리딘일 접합 모이어티를 통해서 폴리펩티드에 관심 모이어티를 결합시키기 위한 일반적 반응식은 이하의 일반적 반응식에 도시된다. 하이드라지닐-인돌릴과 하이드라지닐-피롤로-피리딘일 접합 모이어티는 또한 각각 본 명세서에서 하이드라지노-이소-피쳇-슈펭글러(HIPS) 접합 모이어티 및 아자-하이드라지노-이소-피쳇-슈펭글러(aza-hydrazino-iso-Pictet-Spengler: 아자HIPS) 접합 모이어티로 지칭된다.
상기 반응 도식에서, R은 폴리펩티드에 접합된(예를 들어, 본 명세서에 기재된 바와 같은 절단 가능한 링커를 통해 폴리펩티드에 접합된) 관심 모이어티(예를 들어, 약물 또는 활성제)을 포함한다. 상기 반응식에 도시된 바와 같이, 2-포르밀글리신 잔기(fGly)를 포함하는 폴리펩티드는 접합 모이어티(예를 들어, 하이드라지닐-인돌릴 또는 하이드라지닐-피롤로-피리딘일 접합 모이어티)를 포함하도록 변형된 약물 또는 활성제와 반응하여 접합 모이어티에 부착된 폴리펩티드 접합체를 생성하므로, 접합 모이어티를 통해서 폴리펩티드에 약물 또는 활성제를 부착시킨다.
본 명세서에 기재된 비와 같이, 모이어티는 다양한 모이어티, 예컨대, 제한 없이, 화학적 실체, 예컨대, 검출 가능한 표지, 또는 약물 또는 활성제 중 임의의 것일 수 있다. R' 및 R"은 각각 독립적으로 임의의 목적하는 치환기, 예컨대, 제한 없이, 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 알콕시, 치환된 알콕시, 아미노, 치환된 아미노, 카복실, 카복실 에스테르, 아실, 아실옥시, 아실 아미노, 아미노 아실, 알킬아미드, 치환된 알킬아미드, 설포닐, 티오알콕시, 치환된 티오알콕시, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 및 치환된 헤테로사이클릴일 수 있다. Z는 CR21, NR22, N, O 또는 S일 수 있는데, 여기서 R21 및 R22는 각각 독립적으로 위에서 R' 및 R"에 대해서 기재된 치환기 중 임의의 것으로부터 선택된다.
다른 하이드라지닐-인돌릴 또는 하이드라지닐-피롤로-피리딘일 접합 모이어티가 또한 본 명세서에 기재된 접합체 및 화합물에서 나타난 것과 같이 가능하다. 예를 들어, 하이드라지닐-인돌릴 또는 하이드라지닐-피롤로-피리딘일 접합 모이어티는 링커에 부착(예를 들어, 공유 부착)되도록 변형될 수 있다. 이와 같이, 본 개시내용의 구현예는 링커를 통해 약물 또는 활성제에 부착된 하이드라지닐-인돌릴 또는 하이드라지닐-피롤로-피리딘일 접합 모이어티를 포함한다. 하이드라지닐-인돌릴 또는 하이드라지닐-피롤로-피리딘일 접합 모이어티를 약물 또는 활성제에 커플링시킬 수 있는 링커의 각종 구현예가 본 명세서에 상세히 기재된다. 예를 들어, 일부 예에서 링커는 절단 가능한 링커, 예컨대 본 명세서에 기재된 절단 가능한 링커이다.
특정 구현예에서, 폴리펩티드는 관심 모이어티에 접합될 수 있되, 여기서 폴리펩티드는 관심 모이어티에 접합되기 전에 변형된다. 폴리펩티드의 변형은 관심 모이어티에 접합되기에 적합한 1개 이상의 반응성 기를 함유하는 변형된 폴리펩티드를 생성할 수 있다. 몇몇 경우에, 폴리펩티드는 관심 모이어티(예를 들어, 위에서 기재된 바와 같은 접합 모이어티, 예컨대, 하이드라지닐-인돌릴 또는 하이드라지닐-피롤로-피리딘일 접합 모이어티를 포함하는 모이어티)에의 접합에 적합한 1개 이상의 반응성 기를 제공하기 위해 1개 이상의 아미노산 잔기에서 변형될 수 있다. 예를 들어, 폴리펩티드는 반응성 알데하이드기(예를 들어, 반응성 알데하이드)를 포함하도록 변형될 수 있다. 반응성 알데하이드는, 본 명세서에서 사용되는 바와 같이 2-포르밀글리신 잔기(본 명세서에서 "FGly"로 지칭됨)를 함유하기 위해 포르밀글리신 생성 효소(FGE)의 작용에 의해 전환된 설파타제 모티프(예를 들어, L(C/S)TPSR)로부터 유래된 아미노산 서열을 지칭하는 "알데하이드 태그" 또는 "ald-태그"에 포함될 수 있다. FGE에 의해 생성된 FGly 잔기는 "포르밀글리신" 으로도 지칭될 수 있다. 다르게 진술하면, 용어 "알데하이드 태그"는 "전환된" 설파타제 모티프(즉, 시스테인 또는 세린 잔기가 FGE의 작용에 의해 FGly로 전환된 설파타제 모티프, 예컨대, L(FGly)TPSR)를 포함하는 아미노산 서열을 지칭하기 위해 본 명세서에서 사용된다. 전환된 설파타제 모티프는 "미전환" 설파타제 모티프(즉, 시스테인 또는 세린 잔기가 FGE에 의해 FGly로 전환되지 않았지만, 전환될 수 있는 설파타제 모티프, 예컨대, 서열: L(C/S)TPSR을 가지는 미전환 설파타제 모티프)를 포함하는 아미노산 서열로부터 유래될 수 있다. 설파타제 모티프 상의 포르밀글리신 생성 효소(FGE)의 작용의 맥락에서 사용되는 바와 같은 "전환"은 설파타제 모티프의 시스테인 또는 세린 잔기의 포르밀글리신(FGly) 잔기로의 생화학적 변형(예를 들어, Cys의 FGly로의 변형, 또는 Ser의 FGly로의 변형)을 지칭한다. 알데하이드 태그 및 부위-특이적 단백질 변형에서 그의 사용의 추가의 양상은 미국 특허 제7,985,783호 및 미국 특허 제8,729,232호에 기재되고, 상기 각 문헌의 내용은 본 명세서에 참조에 의해 원용된다.
몇몇 경우에, FGly 잔기를 함유하는 변형된 폴리펩티드는 FGly와 화합물(예컨대, 위에서 기재된 바와 같은 하이드라지닐-인돌릴 또는 하이드라지닐-피롤로-피리딘일 접합 모이어티를 함유하는 화합물)의 반응에 의해 관심 모이어티에 접합될 수 있다. 예를 들어, FGly 함유 폴리펩티드는 약물의 폴리펩티드에의 접합을 제공하기에 적합한 조건하에서 반응성 파트너 함유 약물과 접촉될 수 있다. 일부 사례에서, 반응성 파트너 함유 약물은 위에서 기재된 바와 같은 하이드라지닐-인돌릴 또는 하이드라지닐-피롤로-피리딘일 접합 모이어티를 포함할 수 있다. 예를 들어, 약물 또는 활성제는 하이드라지닐-인돌릴 또는 하이드라지닐-피롤로-피리딘일 접합 모이어티를 포함하도록 변형될 수 있다. 일부 경우에, 약물 또는 활성제는 하이드라지닐-인돌릴 또는 하이드라지닐-피롤로-피리딘일 커플링 모이어티에 부착, 예컨대, 본 명세서에서 상세하게 기재된 바와 같이, 링커, 예컨대 절단 가능한 링커를 통해 하이드라지닐-인돌릴 또는 하이드라지닐-피롤로-피리딘일 커플링 모이어티에 공유 부착된다.
특정 구현예에서, 본 개시내용의 접합체는 적어도 1개의 변형된 아미노산 잔기를 갖는 폴리펩티드(예를 들어, 항체)를 포함한다. 폴리펩티드의 변형된 아미노산 잔기는 위에서 기재된 바와 같은 하이드라지닐-인돌릴 또는 하이드라지닐-피롤로-피리딘일 접합 모이어티를 함유하는 약물 또는 활성제에 커플링될 수 있다. 특정 구현예에서, 폴리펩티드(예를 들어, 항체)의 변형된 아미노산 잔기는 위에서 기재된 바와 같이 FGly 잔기로 전환된 시스테인 또는 세린 잔기로부터 유래될 수 있다. 특정 구현예에서, FGly 잔기는 본 개시내용의 접합체를 제공하기 위해 위에서 기재된 바와 같은 하이드라지닐-인돌릴 또는 하이드라지닐-피롤로-피리딘일 접합 모이어티를 함유하는 약물 또는 활성제에 접합되고, 여기서 약물 또는 활성제는 하이드라지닐-인돌릴 또는 하이드라지닐-피롤로-피리딘일 접합 모이어티를 통해 폴리펩티드에 접합된다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 FGly'은 관심 모이어티(예를 들어, 약물 또는 활성제)에 결합되는 폴리펩티드(예를 들어, 항체)의 변형된 아미노산 잔기를 지칭한다.
특정 구현예에서, 접합체는 본 명세서에 기재된 바와 같은 적어도 하나의 변형된 아미노산 잔기를 포함하고, 여기서 변형된 아미노산 잔기는 본 명세서에 기재된 바와 같은 링커(절단 가능한 링커)에 부착되고, 이는 다시 약물 또는 활성제에 부착된다. 예를 들어, 접합체는 상기 기재된 바와 같이 적어도 하나의 변형된 아미노산 잔기(FGly')를 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 접합체는 화학식 (I)의 것이다:
여기서:
W1은 약물이고;
W2는 폴리펩티드이고;
A는 아미노산 잔기이고, 여기서 k는 0 또는 1 내지 5의 정수이고;
L은 링커이고;
G는 접합 모이어티이고;
X1은 및 -(CHR1)j(CHR2)-로부터 선택되고;
R1은 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 치환된 헤테로사이클릴 및 R3으로부터 선택되고, 여기서 R1은 R3으로 선택적으로 치환되고;
j는 0 또는 1 내지 5의 정수이고;
R2는 R3이거나; R2는 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택되고, 여기서 R2는 R3으로 선택적으로 치환되고;
X2는 -NH- 또는 -C(O)-이고;
각각의 R3은 독립적으로 글리코시드 또는 글리코시드 유도체이다.
화학식 (I)의 접합체와 관련된 치환기는 하기에 보다 상세히 기재되어 있다.
X1은 및 -(CHR1)j(CHR2)-로부터 선택된다.
일부 예에서, X1은 이다.
특정 구현예에서, X1은 이다.
일부 사례에서, X1은 -(CHR1)j(CHR2)-이다. 특정 구현예에서, j는 0 또는 1 내지 5의 정수이다. 일부 사례에서, j는 0이므로 X1이 없다. 일부 예에서, j는 1이다. 일부 예에서, j는 2이다. 일부 예에서, j는 3이다. 일부 예에서, j는 4이다. 일부 예에서, j는 5이다.
특정 구현예에서, R1은 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 치환된 헤테로사이클릴 및 R3으로부터 선택되고, 여기서 R1은 R3으로 선택적으로 치환된다. 특정 구현예에서, R1은 수소이다. 특정 구현예에서, R1은 알킬 또는 치환된 알킬, 예컨대 C1-6 알킬 또는 C1-6 치환된 알킬, 또는 C1-4 알킬 또는 C1-4 치환된 알킬, 또는 C1-3 알킬 또는 C1-3 치환된 알킬이다. 특정 구현예에서, R1은 알케닐 또는 치환된 알케닐, 예컨대, C2-6 알케닐 또는 C2-6 치환된 알케닐, 또는 C2-4 알케닐 또는 C2-4 치환된 알케닐, 또는 C2-3 알케닐 또는 C2-3 치환된 알케닐이다. 특정 구현예에서, R1은 알키닐 또는 치환된 알키닐, 예컨대, C2-6 알케닐 또는 C2-6 치환된 알케닐, 또는 C2-4 알케닐 또는 C2-4 치환된 알케닐, 또는 C2-3 알케닐 또는 C2-3 치환된 알케닐이다. 특정 구현예에서, R1은 아릴 또는 치환된 아릴, 예컨대, C5-8 아릴 또는 C5-8 치환된 아릴, 예컨대, C5 아릴 또는 C5 치환된 아릴, 또는 C6 아릴 또는 C6 치환된 아릴이다. 특정 구현예에서, R1은 페닐이다. 특정 구현예에서, R1은 헤테로아릴 또는 치환된 헤테로아릴, 예컨대, C5-8 헤테로아릴 또는 C5-8 치환된 헤테로아릴, 예컨대, C5 헤테로아릴 또는 C5 치환된 헤테로아릴, 또는 C6 헤테로아릴 또는 C6 치환된 헤테로아릴이다. 특정 구현예에서, R1은 사이클로알킬 또는 치환된 사이클로알킬, 예컨대, C3-8 사이클로알킬 또는 C3-8 치환된 사이클로알킬, 예컨대, C3-6 사이클로알킬 또는 C3-6 치환된 사이클로알킬, 또는 C3-5 사이클로알킬 또는 C3-5 치환된 사이클로알킬이다. 특정 구현예에서, R1은 헤테로사이클릴 또는 치환된 헤테로사이클릴, 예컨대, C3-8 헤테로사이클릴 또는 C3-8 치환된 헤테로사이클릴, 예컨대, C3-6 헤테로사이클릴 또는 C3-6 치환된 헤테로사이클릴, 또는 C3-5 헤테로사이클릴 또는 C3-5 치환된 헤테로사이클릴이다. 특정 구현예에서, R1은 R3이다.
특정 구현예에서, R1은 R3으로 선택적으로 치환된다. 예를 들어, 일부 사례에서, R1이 R3으로 치환되지 않는다. 다른 구현예에서, R1은 R3으로 치환된다.
특정 구현예에서, R2는 R3이다.
특정 구현예에서, R2는 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택되고, 여기서 R2는 R3으로 선택적으로 치환된다. 특정 구현예에서, R2는 R3으로 치환된다. 이러한 경우에, R2는 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택된다. 특정 구현예에서, R2는 알킬 또는 치환된 알킬, 예컨대, C1-6 알킬 또는 C1-6 치환된 알킬, 또는 C1-4 알킬 또는 C1-4 치환된 알킬, 또는 C1-3 알킬 또는 C1-3 치환된 알킬이다. 특정 구현예에서, R2는 메틸이다. 특정 구현예에서, R2는 에틸이다. 특정 구현예에서, R2는 알케닐 또는 치환된 알케닐, 예컨대, C2-6 알케닐 또는 C2-6 치환된 알케닐, 또는 C2-4 알케닐 또는 C2-4 치환된 알케닐, 또는 C2-3 알케닐 또는 C2-3 치환된 알케닐이다. 특정 구현예에서, R2는 알키닐 또는 치환된 알키닐, 예컨대, C2-6 알케닐 또는 C2-6 치환된 알케닐, 또는 C2-4 알케닐 또는 C2-4 치환된 알케닐, 또는 C2-3 알케닐 또는 C2-3 치환된 알케닐이다. 특정 구현예에서, R2는 아릴 또는 치환된 아릴, 예컨대, C5-8 아릴 또는 C5-8 치환된 아릴, 예컨대, C5 아릴 또는 C5 치환된 아릴, 또는 C6 아릴 또는 C6 치환된 아릴이다. 특정 구현예에서, R2는 페닐이다. 특정 구현예에서, R2는 헤테로아릴 또는 치환된 헤테로아릴, 예컨대, C5-8 헤테로아릴 또는 C5-8 치환된 헤테로아릴, 예컨대, C5 헤테로아릴 또는 C5 치환된 헤테로아릴, 또는 C6 헤테로아릴 또는 C6 치환된 헤테로아릴이다. 특정 구현예에서, R2는 사이클로알킬 또는 치환된 사이클로알킬, 예컨대, C3-8 사이클로알킬 또는 C3-8 치환된 사이클로알킬, 예컨대, C3-6 사이클로알킬 또는 C3-6 치환된 사이클로알킬, 또는 C3-5 사이클로알킬 또는 C3-5 치환된 사이클로알킬이다. 특정 구현예에서, R2는 헤테로사이클릴 또는 치환된 헤테로사이클릴, 예컨대, C3-8 헤테로사이클릴 또는 C3-8 치환된 헤테로사이클릴, 예컨대, C3-6 헤테로사이클릴 또는 C3-6 치환된 헤테로사이클릴, 또는 C3-5 헤테로사이클릴 또는 C3-5 치환된 헤테로사이클릴이다.
특정 구현예에서, X2는 -NH- 또는 -C(O)-이다. 일부 사례에서, X2는 -NH-이다. 일부 사례에서, X2는 -C(O)-이다.
특정 구현예에서, 각각의 R3은 독립적으로 글리코시드 또는 글리코시드 유도체이다. 특정 구현예에서, 글리코시드 또는 글리코시드 유도체는 글루쿠로나이드, 갈락토시드, 글루코시드, 만노시드, 푸코시드, O-GlcNAc 및 O-GalNAc로부터 선택된다.
예를 들어, 일부 구현예에서, 글리코시드 또는 글리코시드 유도체는 하기 구조로부터 선택될 수 있다:
및
특정 구현예에서, W1은 약물(또는 활성제)이다. 본 개시내용의 접합체에 사용될 수 있는 약물 및 활성제의 예는 하기에 보다 상세히 기재되어 있다.
특정 구현예에서, W2는 폴리펩티드(예를 들어, 항체)이다. 본 개시내용의 접합체에 사용될 수 있는 폴리펩티드 및 항체의 예는 하기에 보다 상세히 기재되어 있다.
특정 구현예에서, A는 아미노산 잔기이다. 특정 실시예에서, k는 0 또는 1 내지 5의 정수이다. 일부 사례에서, k는 0이므로 A는 존재하지 않는다. 일부 사례에서, k는 1이다. 일부 사례에서, k는 2이다. 일부 사례에서, k는 3이다. 일부 사례에서, k는 4이다. 일부 사례에서, k는 5이다.
아미노산 잔기는 자연 발생 단백질에서 발견되는 아미노산(예를 들어, Ala 또는 A, Cys 또는 C, Asp 또는 D, Glu 또는 E, Phe 또는 F, Gly 또는 G, His 또는 H, Ile 또는 I, Lys 또는 K, Leu 또는 L, Met 또는 M, Asn 또는 N, Pro 또는 P, Gln 또는 Q, Arg 또는 R, Ser 또는 S, Thr 또는 T, Val 또는 V, Trp 또는 W, Tyr 또는 Y)을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 일부 사례에서, 아미노산 잔기는 아미노산 유사체 또는 비천연 아미노산일 수 있다.
용어 "아미노산 유사체", "비천연 아미노산" 등은 상호교환적으로 사용될 수 있으며, 자연 발생적 단백질에서 일반적으로 발견되는 하나 이상의 아미노산과 구조 및/또는 전체 모양이 유사한 아미노산 유사 화합물을 포함한다. 아미노산 유사체는 또한 변형된 측쇄 또는 백본을 갖는 천연 아미노산을 포함한다. 아미노산 유사체는 또한 아미노산 유사체의 자연 발생적 D-형뿐만 아니라 L-형에서와 동일한 입체화학을 갖는 아미노산 유사체를 포함한다. 일부 예에서, 아미노산 유사체는 하나 이상의 천연 아미노산의 백본 구조 및/또는 측쇄 구조를 공유하며, 분자 내 하나 이상의 변형된 기에 차이(들)가 있다. 이러한 변형은 관련 원자(예컨대, S)에 대한 원자(예컨대, N)의 치환, 기(예컨대, 메틸 또는 하이드록실 등) 또는 원자(예컨대, Cl 또는 Br 등)의 추가, 기의 결실, 공유 결합의 치환(이중 결합에 대한 단일 결합 등) 또는 이들의 조합을 포함할 수 있지만 이에 제한되지 않는다. 예를 들어, 아미노산 유사체는 α-하이드록시산 및 α-아미노산 등을 포함할 수 있다.
특정 구현예에서, L은 링커이다. 일부 사례에서, 링커는 절단 가능한 링커이다. 본 개시내용의 접합체에 사용될 수 있는 링커의 예는 하기에 보다 상세히 기재되어 있다.
특정 구현예에서, G는 접합 모이어티이다. 전술한 바와 같이, 본 개시내용의 ADC에서, 폴리펩티드(예를 들어, 항체) 및 약물 또는 활성제는 접합 모이어티를 통해 서로 접합될 수 있다. 예를 들어, 폴리펩티드(항체) 및 약물은 접합 모이어티에 각각 결합(예를 들어, 공유 결합)할 수 있고, 따라서 접합 모이어티를 통해 폴리펩티드(항체) 및 약물을 함께 간접적으로 결합시킬 수 있다. 임의의 편리한 접합 모이어티가 본 개시내용의 접합체에 사용될 수 있으며, 여기서 접합 모이어티는 ADC에서 약물 또는 활성제에 대한 폴리펩티드(예를 들어, 항체)의 안정한 부착을 제공하기에 충분하다.
특정 구현예에서, 접합 모이어티는 하이드라지닐-인돌릴 또는 하이드라지닐-피롤로-피리딘일 화합물, 또는 하이드라지닐-인돌릴 또는 하이드라지닐-피롤로-피리딘일 화합물의 유도체를 포함한다. 특정 구현예에서, 접합 모이어티 G는 이다:
여기서:
Z는 CR10 또는 N이고,
R7은 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 및 치환된 헤테로사이클릴헤테로사이클릴로부터 선택되고;
R8 및 R9는 각각 독립적으로 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 알콕시, 치환된 알콕시, 아미노, 치환된 아미노, 카복실, 카복실 에스테르, 아실, 아실옥시, 아실 아미노, 아미노 아실, 알킬아미드, 치환된 알킬아미드, 설포닐, 티오알콕시, 치환된 티오알콕시, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택되거나, 또는 R8 및 R9는 선택적으로 환상으로 연결되어 5 또는 6-원 헤테로사이클릴을 형성하고;
각각의 R10은 독립적으로 수소, 할로겐, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 알콕시, 치환된 알콕시, 아미노, 치환된 아미노, 카복실, 카복실 에스테르, 아실, 아실옥시, 아실 아미노, 아미노 아실, 알킬아미드, 치환된 알킬아미드, 설포닐, 티오알콕시, 치환된 티오알콕시, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택된다.
특정 구현예에서, Z는 CR10 또는 N이다. 특정 구현예에서, Z는 CR10이다. 특정 구현예에서, Z는 N이다.
특정 구현예에서, R7은 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택된다. 특정 구현예에서, R7은 수소이다. 특정 구현예에서, R7은 알킬 또는 치환된 알킬, 예컨대, C1-6 알킬 또는 C1-6 치환된 알킬, 또는 C1-4 알킬 또는 C1-4 치환된 알킬, 또는 C1-3 알킬 또는 C1-3 치환된 알킬이다. 특정 구현예에서, R7은 메틸이다. 특정 구현예에서, R7은 알케닐 또는 치환된 알케닐, 예컨대, C2-6 알케닐 또는 C2-6 치환된 알케닐, 또는 C2-4 알케닐 또는 C2-4 치환된 알케닐, 또는 C2-3 알케닐 또는 C2-3 치환된 알케닐이다. 특정 구현예에서, R7은 알키닐 또는 치환된 알키닐, 예컨대, C2-6 알케닐 또는 C2-6 치환된 알케닐, 또는 C2-4 알케닐 또는 C2-4 치환된 알케닐, 또는 C2-3 알케닐 또는 C2-3 치환된 알케닐이다. 특정 구현예에서, R7은 아릴 또는 치환된 아릴, 예컨대, C5-8 아릴 또는 C5-8 치환된 아릴, 예컨대, C5 아릴 또는 C5 치환된 아릴, 또는 C6 아릴 또는 C6 치환된 아릴이다. 특정 구현예에서, R7은 헤테로아릴 또는 치환된 헤테로아릴, 예컨대, C5-8 헤테로아릴 또는 C5-8 치환된 헤테로아릴, 예컨대, C5 헤테로아릴 또는 C5 치환된 헤테로아릴, 또는 C6 헤테로아릴 또는 C6 치환된 헤테로아릴이다. 특정 구현예에서, R7은 사이클로알킬 또는 치환된 사이클로알킬, 예컨대, C3-8 사이클로알킬 또는 C3-8 치환된 사이클로알킬, 예컨대, C3-6 사이클로알킬 또는 C3-6 치환된 사이클로알킬, 또는 C3-5 사이클로알킬 또는 C3-5 치환된 사이클로알킬이다. 특정 구현예에서, R7은 헤테로사이클릴 또는 치환된 헤테로사이클릴, 예컨대, C3-8 헤테로사이클릴 또는 C3-8 치환된 헤테로사이클릴, 예컨대, C3-6 헤테로사이클릴 또는 C3-6 치환된 헤테로사이클릴, 또는 C3-5 헤테로사이클릴 또는 C3-5 치환된 헤테로사이클릴이다.
특정 구현예에서, R8 및 R9는 각각 독립적으로 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 알콕시, 치환된 알콕시, 아미노, 치환된 아미노, 카복실, 카복실 에스테르, 아실, 아실옥시, 아실 아미노, 아미노 아실, 알킬아미드, 치환된 알킬아미드, 설포닐, 티오알콕시, 치환된 티오알콕시, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택되거나, 또는 R8 및 R9는 선택적으로 환상으로 연결되어 5 또는 6-원 헤테로사이클릴을 형성한다.
특정 구현예에서, R8은 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 알콕시, 치환된 알콕시, 아미노, 치환된 아미노, 카복실, 카복실 에스테르, 아실, 아실옥시, 아실 아미노, 아미노 아실, 알킬아미드, 치환된 알킬아미드, 설포닐, 티오알콕시, 치환된 티오알콕시, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택된다. 특정 구현예에서, R8은 수소이다. 특정 구현예에서, R8은 알킬 또는 치환된 알킬, 예컨대, C1-6 알킬 또는 C1-6 치환된 알킬, 또는 C1-4 알킬 또는 C1-4 치환된 알킬, 또는 C1-3 알킬 또는 C1-3 치환된 알킬이다. 특정 구현예에서, R8은 메틸이다. 특정 구현예에서, R8은 알케닐 또는 치환된 알케닐, 예컨대, C2-6 알케닐 또는 C2-6 치환된 알케닐, 또는 C2-4 알케닐 또는 C2-4 치환된 알케닐, 또는 C2-3 알케닐 또는 C2-3 치환된 알케닐이다. 특정 구현예에서, R8은 알키닐 또는 치환된 알키닐이다. 특정 구현예에서, R8은 알콕시 또는 치환된 알콕시이다. 특정 구현예에서, R8은 아미노 또는 치환된 아미노이다. 특정 구현예에서, R8은 카복실 또는 카복실 에스테르이다. 특정 구현예에서, R8은 아실 또는 아실옥시이다. 특정 구현예에서, R8은 아실 아미노 또는 아미노 아실이다. 특정 구현예에서, R8은 알킬아미드 또는 치환된 알킬아미드이다. 특정 구현예에서, R8은 설포닐이다. 특정 구현예에서, R8은 티오알콕시 또는 치환된 티오알콕시이다. 특정 구현예에서, R8은 아릴 또는 치환된 아릴, 예컨대, C5-8 아릴 또는 C5-8 치환된 아릴, 예컨대, C5 아릴 또는 C5 치환된 아릴, 또는 C6 아릴 또는 C6 치환된 아릴이다. 특정 구현예에서, R8은 헤테로아릴 또는 치환된 헤테로아릴, 예컨대, C5-8 헤테로아릴 또는 C5-8 치환된 헤테로아릴, 예컨대, C5 헤테로아릴 또는 C5 치환된 헤테로아릴, 또는 C6 헤테로아릴 또는 C6 치환된 헤테로아릴이다. 특정 구현예에서, R8은 사이클로알킬 또는 치환된 사이클로알킬, 예컨대, C3-8 사이클로알킬 또는 C3-8 치환된 사이클로알킬, 예컨대, C3-6 사이클로알킬 또는 C3-6 치환된 사이클로알킬, 또는 C3-5 사이클로알킬 또는 C3-5 치환된 사이클로알킬이다. 소정의 실시형태에서, R8은 헤테로사이클릴 또는 치환된 헤테로사이클릴, 예컨대, C3-6 헤테로사이클릴 또는 C3-6 치환된 헤테로사이클릴, 또는 C3-5 헤테로사이클릴 또는 C3-5 치환된 헤테로사이클릴이다.
특정 구현예에서, R9는 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 알콕시, 치환된 알콕시, 아미노, 치환된 아미노, 카복실, 카복실 에스테르, 아실, 아실옥시, 아실 아미노, 아미노 아실, 알킬아미드, 치환된 알킬아미드, 설포닐, 티오알콕시, 치환된 티오알콕시, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택된다. 특정 구현예에서, R9는 수소이다. 특정 구현예에서, R9는 알킬 또는 치환된 알킬, 예컨대, C1-6 알킬 또는 C1-6 치환된 알킬, 또는 C1-4 알킬 또는 C1-4 치환된 알킬, 또는 C1-3 알킬 또는 C1-3 치환된 알킬이다. 특정 구현예에서, R9는 메틸이다. 특정 구현예에서, R9는 알케닐 또는 치환된 알케닐, 예컨대, C2-6 알케닐 또는 C2-6 치환된 알케닐, 또는 C2-4 알케닐 또는 C2-4 치환된 알케닐, 또는 C2-3 알케닐 또는 C2-3 치환된 알케닐이다. 특정 구현예에서, R8은 알키닐 또는 치환된 알키닐이다. 특정 구현예에서, R9는 알콕시 또는 치환된 알콕시이다. 특정 구현예에서, R9는 아미노 또는 치환된 아미노이다. 특정 구현예에서, R9는 카복실 또는 카복실 에스테르이다. 특정 구현예에서, R9는 아실 또는 아실옥시이다. 특정 구현예에서, R9는 아실 아미노 또는 아미노 아실이다. 특정 구현예에서, R9는 알킬아미드 또는 치환된 알킬아미드이다. 특정 구현예에서, R9는 설포닐이다. 특정 구현예에서, R9는 티오알콕시 또는 치환된 티오알콕시이다. 특정 구현예에서, R9는 아릴 또는 치환된 아릴, 예컨대, C5-8 아릴 또는 C5-8 치환된 아릴, 예컨대, C5 아릴 또는 C5 치환된 아릴, 또는 C6 아릴 또는 C6 치환된 아릴이다. 특정 구현예에서, R9는 헤테로아릴 또는 치환된 헤테로아릴, 예컨대, C5-8 헤테로아릴 또는 C5-8 치환된 헤테로아릴, 예컨대, C5 헤테로아릴 또는 C5 치환된 헤테로아릴, 또는 C6 헤테로아릴 또는 C6 치환된 헤테로아릴이다. 특정 구현예에서, R9는 사이클로알킬 또는 치환된 사이클로알킬, 예컨대, C3-8 사이클로알킬 또는 C3-8 치환된 사이클로알킬, 예컨대, C3-6 사이클로알킬 또는 C3-6 치환된 사이클로알킬, 또는 C3-5 사이클로알킬 또는 C3-5 치환된 사이클로알킬이다. 특정 구현예에서, R9는 헤테로사이클릴 또는 치환된 헤테로사이클릴, 예컨대, C3-8 헤테로사이클릴 또는 C3-8 치환된 헤테로사이클릴, 예컨대, C3-6 헤테로사이클릴 또는 C3-6 치환된 헤테로사이클릴, 또는 C3-5 헤테로사이클릴 또는 C3-5 치환된 헤테로사이클릴이다.
특정 구현예에서, R8 및 R9는 선택적으로 환상으로 연결되어 5 또는 6-원 헤테로사이클릴을 형성한다. 특정 구현예에서, R8 및 R9는 고리상에 연결되어 5 또는 6-원 헤테로사이클릴을 형성한다. 특정 구현예에서, R8 및 R9는 고리상에 연결되어 5-원 헤테로사이클릴을 형성한다. 특정 구현예에서, R8 및 R9는 고리상에 연결되어 6-원 헤테로사이클릴을 형성한다.
특정 구현예에서, 각각의 R10은 독립적으로 수소, 할로겐, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 알콕시, 치환된 알콕시, 아미노, 치환된 아미노, 카복실, 카복실 에스테르, 아실, 아실옥시, 아실 아미노, 아미노 아실, 알킬아미드, 치환된 알킬아미드, 설포닐, 티오알콕시, 치환된 티오알콕시, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택된다.
각각의 R10에 대한 다양한 가능성은 다음과 같이 더 상세하게 기재된다. 특정 구현예에서, R10은 수소이다. 특정 구현예에서, 각각의 R10은 수소이다. 특정 구현예에서, R10은 할로겐, 예컨대, F, Cl, Br 또는 I이다. 특정 구현예에서, R10은 F이다. 특정 구현예에서, R10은 Cl이다. 특정 구현예에서, R10은 Br이다. 특정 구현예에서, R10은 I이다. 특정 구현예에서, R10은 알킬 또는 치환된 알킬, 예컨대, C1-6 알킬 또는 C1-6 치환된 알킬, 또는 C1-4 알킬 또는 C1-4 치환된 알킬, 또는 C1-3 알킬 또는 C1-3 치환된 알킬이다. 특정 구현예에서, R10은 메틸이다. 특정 구현예에서, R10은 알케닐 또는 치환된 알케닐, 예컨대, C2-6 알케닐 또는 C2-6 치환된 알케닐, 또는 C2-4 알케닐 또는 C2-4 치환된 알케닐, 또는 C2-3 알케닐 또는 C2-3 치환된 알케닐이다. 특정 구현예에서, R10은 알키닐 또는 치환된 알키닐이다. 특정 구현예에서, R10은 알콕시 또는 치환된 알콕시이다. 특정 구현예에서, R10은 아미노 또는 치환된 아미노이다. 특정 구현예에서, R10은 카복실 또는 카복실 에스테르이다. 특정 구현예에서, R10은 아실 또는 아실옥시이다. 특정 구현예에서, R10은 아실 아미노 또는 아미노 아실이다. 특정 구현예에서, R10은 알킬아미드 또는 치환된 알킬아미드이다. 특정 구현예에서, R10은 설포닐이다. 특정 구현예에서, R10은 티오알콕시 또는 치환된 티오알콕시이다. 특정 구현예에서, R10은 아릴 또는 치환된 아릴, 예컨대, C5-8 아릴 또는 C5-8 치환된 아릴, 예컨대, C5 아릴 또는 C5 치환된 아릴, 또는 C6 아릴 또는 C6 치환된 아릴(예를 들어, 페닐 또는 치환된 페닐)이다. 특정 구현예에서, R10은 헤테로아릴 또는 치환된 헤테로아릴, 예컨대, C5-8 헤테로아릴 또는 C5-8 치환된 헤테로아릴, 예컨대, C5 헤테로아릴 또는 C5 치환된 헤테로아릴, 또는 C6 헤테로아릴 또는 C6 치환된 헤테로아릴이다. 특정 구현예에서, R10은 사이클로알킬 또는 치환된 사이클로알킬, 예컨대, C3-8 사이클로알킬 또는 C3-8 치환된 사이클로알킬, 예컨대, C3-6 사이클로알킬 또는 C3-6 치환된 사이클로알킬, 또는 C3-5 사이클로알킬 또는 C3-5 치환된 사이클로알킬이다. 특정 구현예에서, R10은 헤테로사이클릴 또는 치환된 헤테로사이클릴, 예컨대, C3-8 헤테로사이클릴 또는 C3-8 치환된 헤테로사이클릴, 예컨대, C3-6 헤테로사이클릴 또는 C3-6 치환된 헤테로사이클릴, 또는 C3-5 헤테로사이클릴 또는 C3-5 치환된 헤테로사이클릴이다.
특정 구현예에서, 접합 모이어티 G는 폴리펩티드(항체) W2를 링커 L에 접합시키는 관능기를 포함한다. 일부 사례에서, G는 아세탈, 하이드라존, 옥심, 설파이드, 디설파이드, 트리아졸, 에스테르, 및 아미드로부터 선택된다. 일부 사례에서, 접합 모이어티 G는 아세탈이다. 일부 사례에서, 접합 모이어티 G는 하이드라존이다. 일부 사례에서, 접합 모이어티 G는 옥심이다. 일부 사례에서, 접합 모이어티 G는 설파이드이다. 일부 사례에서, 접합 모이어티 G는 디설파이드이다. 일부 사례에서, 접합 모이어티 G는 트리아졸이다. 일부 사례에서, 접합 모이어티 G는 에스테르이다. 일부 사례에서, 접합 모이어티 G는 아미드이다.
특정 구현예에서, 접합 모이어티 G는 폴리펩티드(항체)를 링커 L에 접합시키기 위해 폴리펩티드(항체) 상의 상응하는 반응성 기와 반응하는 중간체 또는 전구체 관능기의 관점에서 기재될 수 있다. 이러한 경우에, 접합 모이어티 G는 아세탈, NHS-에스테르, PFP-에스테르, TFP-에스테르, 이소시아네이트, 이소티오시아네이트, 아실 할라이드, 말레이미드, 요오도아세트아미드, 포스핀, 알킨, 아지드, 하이드라진, 알콕시아민, 디설파이드, 에스테르, 및 아미드로부터 선택될 수 있다. 일부 사례에서, 접합 모이어티 G는 아세탈이다. 일부 사례에서, 접합 모이어티 G는 NHS-에스테르이다. 일부 사례에서, 접합 모이어티 G는 PFP-에스테르이다. 일부 사례에서, 접합 모이어티 G는 TFP-에스테르이다. 일부 사례에서, 접합 모이어티 G는 이소시아네이트이다. 일부 사례에서, 접합 모이어티 G는 이소티오시아네이트이다. 일부 사례에서, 접합 모이어티 G는 아실 할라이드이다. 일부 사례에서, 접합 모이어티 G는 말레이미드이다. 일부 사례에서, 접합 모이어티 G는 요오도아세트아미드이다. 일부 사례에서, 접합 모이어티 G는 포스핀이다. 일부 사례에서, 접합 모이어티 G는 알킨이다. 일부 사례에서, 접합 모이어티 G는 아지드이다. 일부 사례에서, 접합 모이어티 G는 하이드라진이다. 일부 사례에서, 접합 모이어티 G는 알콕시아민이다. 일부 사례에서, 접합 모이어티 G는 디설파이드이다. 일부 사례에서, 접합 모이어티 G는 에스테르이다. 일부 사례에서, 접합 모이어티 G는 아미드이다.
특정 구현예에서, 화학식 (I)의 접합체는 링커 L을 포함한다. 링커는 접합 모이어티를 통해 하나 이상의 관심 모이어티(예를 들어, 약물 또는 활성제)를 하나 이상의 폴리펩티드에 결합시키는 데 사용될 수 있다. 링커는 임의의 편리한 위치에서 (예컨대, 본 명세서에 기재된 바와 같은) 접합 모이어티 G에 결합(예컨대, 공유 결합)될 수 있다. 예를 들어, 링커는 하이드라지닐-인돌릴 또는 하이드라지닐-피롤로-피리디닐 접합 모이어티를 약물(예를 들어, 캄프토테신 또는 캄프토테신 유도체)에 부착시킬 수 있다. 하이드라지닐-인돌릴 또는 하이드라지닐-피롤로-피리딘일 접합 모이어티는 링커(따라서 약물)를 폴리펩티드, 예컨대, 항체에 접합시키는데 사용될 수 있다.
예를 들어, 상기 화학식 (I)에 나타낸 바와 같이, L은 접합 모이어티 G를 통해 W2에 부착되고, 따라서 W2는 접합 모이어티를 통해 링커 L에 간접적으로 결합된다. 전술한 바와 같이, W2는 폴리펩티드(예를 들어, 항체)이고, 따라서 L은 접합 모이어티를 통해 폴리펩티드(항체)에 부착되며, 예를 들어 링커 L은 접합 모이어티를 통해 (예를 들어, 본 명세서에 기재된 바와 같은 하이드라지닐-인돌릴 또는 하이드라지닐-피롤로-피리디닐 접합 모이어티를 통해) 폴리펩티드(항체)에 간접적으로 결합된다.
임의의 편리한 링커는 대상 접합체 및 화합물에서 링커 L을 위해 활용될 수 있다. 특정 구현예에서, 링커는 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 알콕시, 치환된 알콕시, 아미노, 치환된 아미노, 카복실, 카복실 에스테르, 아실 아미노, 알킬아미드, 치환된 알킬아미드, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택된 기를 포함한다. 특정 구현예에서, 링커 L은 알킬 또는 치환된 알킬 기를 포함할 수 있다. 특정 구현예에서, 링커 L은 알케닐 또는 치환된 알케닐 기를 포함할 수 있다. 특정 구현예에서, 링커 L은 알키닐 또는 치환된 알키닐 기를 포함할 수 있다. 특정 구현예에서, 링커 L은 알콕시 또는 치환된 알콕시기를 포함할 수 있다. 특정 구현예에서, 링커 L은 아미노 또는 치환된 아미노 기를 포함할 수 있다. 특정 구현예에서, 링커 L은 카복실 또는 카복실 에스테르 기를 포함할 수 있다. 특정 구현예에서, 링커 L은 아실 아미노 기를 포함할 수 있다. 특정 구현예에서, L은 알킬아미드 또는 치환된 알킬아미드 기를 포함한다. 특정 구현예에서, 링커 L은 아릴 또는 치환된 아릴 기를 포함할 수 있다. 특정 구현예에서, L은 헤테로아릴 또는 치환된 헤테로아릴 기를 포함한다. 특정 구현예에서, L은 사이클로알킬 또는 치환된 사이클로알킬 기를 포함한다. 특정 구현예에서, L은 헤테로사이클릴 또는 치환된 헤테로사이클릴 기를 포함한다.
특정 구현예에서, 링커 L은 중합체를 포함할 수 있다. 예를 들어, 중합체는 폴리에틸렌 글리콜, 메톡시폴리에틸렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜 동종중합체, 폴리프로필렌 글리콜 동종중합체, 에틸렌 글리콜과 프로필렌 글리콜의 공중합체(예를 들어, 동종중합체 및 공중합체는 일단부에서 알킬 기로 치환되거나 비치환됨), 폴리비닐 알코올, 폴리비닐 에틸 에테르, 폴리비닐피롤리돈, 이들의 조합 등을 포함하는, 폴리알킬렌 글리콜 및 이들의 유도체를 포함한다. 특정 구현예에서, 중합체는 폴리알킬렌 글리콜이다. 특정 구현예에서, 중합체는 폴리에틸렌 글리콜이다. 이하에 더욱 상세히 기재된 접합체 및 화합물에 나타낸 바와 같은 기타 링커도 가능하다.
일부 구현예에서, L은 하기 식으로 기재된 링커이다:
-(L1)a-(L2)b-(L3)c-(L4)d-(L5)e-(L6)f-,
여기서 L1, L2, L3, L4, L5 및 L6은 각각 독립적으로 링커 서브유닛이고, a, b, c, d, e 및 f는 각각 독립적으로 0 또는 1이고, 여기서 a, b, c, d, e 및 f는 1에서 6이다.
특정 구현예에서, a, b, c, d, e 및 f는 1이다. 특정 구현예에서, a, b, c, d, e 및 f는 2이다. 특정 구현예에서, a, b, c, d, e 및 f는 3이다. 특정 구현예에서, a, b, c, d, e 및 f는 4이다. 특정 구현예에서, a, b, c, d, e 및 f는 5이다. 특정 구현예에서, a, b, c, d, e 및 f는 6이다. 특정 구현예에서, a, b, c, d, e 및 f는 각각 1이다. 특정 구현예에서, a, b, c, d 및 e는 각각 1이고 f는 0이다. 특정 구현예에서, a, b, c 및 d는 각각 1이고 e 및 f는 각각 0이다. 특정 구현예에서, a, b 및 c는 각각 1이고 d, e 및 f는 각각 0이다. 특정 구현예에서, a 및 b는 각각 1이고 c, d, e 및 f는 각각 0이다. 특정 구현예에서, a는 1이고 b, c, d, e 및 f는 각각 0이다.
특정 구현예에서, 링커 서브유닛 L1은 접합 모이어티 G에 부착된다(예를 들어, 상기 화학식 (I)에 나타낸 바와 같음). 특정 구현예에서, 링커 서브유닛 L2는 존재하는 경우 약물 또는 활성제 W1에 부착된다. 예를 들어, L2는 화학식 (I)의 구조의 -Ak-X2-X1-C(O)O- 부분을 통해 약물 또는 활성제 W1에 간접적으로 부착될 수 있다. 특정 구현예에서, 링커 서브유닛 L3은 존재하는 경우 약물 또는 활성제에 부착된다. 예를 들어, L3은 화학식 (I)의 구조의 -Ak-X2-X1-C(O)O- 부분을 통해 약물 또는 활성제 W1에 간접적으로 부착될 수 있다. 특정 구현예에서, 링커 서브유닛 L4는 존재하는 경우 약물 또는 활성제에 부착된다. 예를 들어, L4는 화학식 (I)의 구조의 -Ak-X2-X1-C(O)O- 부분을 통해 약물 또는 활성제 W1에 간접적으로 부착될 수 있다. 특정 구현예에서, 링커 서브유닛 L5는 존재하는 경우 약물 또는 활성제에 부착된다. 예를 들어, L5는 화학식 (I)의 구조의 -Ak-X2-X1-C(O)O- 부분을 통해 약물 또는 활성제 W1에 간접적으로 부착될 수 있다. 특정 구현예에서, 링커 서브유닛 L6은 존재하는 경우 약물 또는 활성제에 부착된다. 예를 들어, L6은 화학식 (I)의 구조의 -Ak-X2-X1-C(O)O- 부분을 통해 약물 또는 활성제 W1에 간접적으로 부착될 수 있다.
임의의 편리한 링커 서브유닛이 링커 L에서 활용될 수 있다. 관심 링커 서브유닛은, 중합체의 단위, 예컨대, 폴리에틸렌 글리콜, 폴리에틸렌 및 폴리아크릴레이트, 아미노산 잔기(들), 탄수화물-기반 중합체 또는 탄수화물 잔기 및 이들의 유도체, 폴리뉴클레오타이드, 알킬기, 아릴기, 헤테로사이클릭기, 이들의 조합, 및 이들의 치환된 버전을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 몇몇 실시형태에서, L1, L2, L3, L4, L5 및 L6은 각각 (만약 존재하는 경우) 폴리에틸렌 글리콜, 변형된 폴리에틸렌 글리콜, 아미노산 잔기, 알킬기, 치환된 알킬, 아릴기, 치환된 아릴기, 및 디아민(예컨대, 알킬렌 디아민을 포함하는 연결기)으로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 기를 포함한다.
일부 구현예에서, L1은 (존재하는 경우) 폴리에틸렌 글리콜, 변형된 폴리에틸렌 글리콜, 아미노산 잔기, 알킬 기, 치환된 알킬, 아릴 기, 치환된 아릴 기, 또는 디아민을 포함한다. 일부 구현예에서, L1은 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다. 일부 구현예에서, L1은 변형된 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다. 일부 구현예에서, L1은 아미노산 잔기를 포함한다. 일부 구현예에서, L1은 알킬 기 또는 치환된 알킬을 포함한다. 일부 구현예에서, L1은 아릴 기 또는 치환된 아릴 기를 포함한다. 일부 구현예에서, L1은 디아민(예를 들어, 알킬렌 디아민을 포함하는 연결기)을 포함한다.
일부 구현예에서, L2는 (존재하는 경우) 폴리에틸렌 글리콜, 변형된 폴리에틸렌 글리콜, 아미노산 잔기, 알킬 기, 치환된 알킬, 아릴 기, 치환된 아릴 기, 또는 디아민을 포함한다. 일부 구현예에서, L2는 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다. 일부 구현예에서, L2는 변형된 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다. 일부 구현예에서, L2는 아미노산 잔기를 포함한다. 일부 구현예에서, L2는 알킬 기 또는 치환된 알킬을 포함한다. 일부 구현예에서, L2는 아릴 기 또는 치환된 아릴 기를 포함한다. 일부 구현예에서, L2는 디아민(예를 들어, 알킬렌 디아민을 포함하는 연결기)을 포함한다.
일부 구현예에서, L3은 (존재하는 경우) 폴리에틸렌 글리콜, 변형된 폴리에틸렌 글리콜, 아미노산 잔기, 알킬 기, 치환된 알킬, 아릴 기, 치환된 아릴 기, 또는 디아민을 포함한다. 일부 구현예에서, L3은 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다. 일부 구현예에서, L3은 변형된 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다. 일부 구현예에서, L3은 아미노산 잔기를 포함한다. 일부 구현예에서, L3은 알킬 기 또는 치환된 알킬을 포함한다. 일부 구현예에서, L3은 아릴 기 또는 치환된 아릴 기를 포함한다. 일부 구현예에서, L3은 디아민(예를 들어, 알킬렌 디아민을 포함하는 연결기)을 포함한다.
일부 구현예에서, L4는 (존재하는 경우) 폴리에틸렌 글리콜, 변형된 폴리에틸렌 글리콜, 아미노산 잔기, 알킬 기, 치환된 알킬, 아릴 기, 치환된 아릴 기, 또는 디아민을 포함한다. 일부 구현예에서, L4는 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다. 일부 구현예에서, L4는 변형된 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다. 일부 구현예에서, L4는 아미노산 잔기를 포함한다. 일부 구현예에서, L4는 알킬 기 또는 치환된 알킬을 포함한다. 일부 구현예에서, L4는 아릴 기 또는 치환된 아릴 기를 포함한다. 일부 구현예에서, L4는 디아민(예를 들어, 알킬렌 디아민을 포함하는 연결기)을 포함한다.
일부 구현예에서, L5는 (존재하는 경우) 폴리에틸렌 글리콜, 변형된 폴리에틸렌 글리콜, 아미노산 잔기, 알킬 기, 치환된 알킬, 아릴 기, 치환된 아릴 기, 또는 디아민을 포함한다. 일부 구현예에서, L5는 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다. 일부 구현예에서, L5는 변형된 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다. 일부 구현예에서, L5은 아미노산 잔기를 포함한다. 일부 구현예에서, L5은 알킬 기 또는 치환된 알킬을 포함한다. 일부 구현예에서, L5는 아릴 기 또는 치환된 아릴 기를 포함한다. 일부 구현예에서, L5는 디아민(예를 들어, 알킬렌 디아민을 포함하는 연결기)을 포함한다.
일부 구현예에서, L6은 (존재하는 경우) 폴리에틸렌 글리콜, 변형된 폴리에틸렌 글리콜, 아미노산 잔기, 알킬 기, 치환된 알킬, 아릴 기, 치환된 아릴 기, 또는 디아민을 포함한다. 일부 구현예에서, L6은 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다. 일부 구현예에서, L6은 변형된 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다. 일부 구현예에서, L6은 아미노산 잔기를 포함한다. 일부 구현예에서, L6은 알킬 기 또는 치환된 알킬을 포함한다. 일부 구현예에서, L6은 아릴 기 또는 치환된 아릴 기를 포함한다. 일부 구현예에서, L6은 디아민(예를 들어, 알킬렌 디아민을 포함하는 연결기)을 포함한다.
일부 구현예에서, L은 -(L1)a-(L2)b-(L3)c-(L4)d-(L5)e-(L6)f-를 포함하는 링커이되, 여기서:
-(L1)a-는 -(T1-V1)a-이고;
-(L2)b-는 -(T2-V2)b-이고;
-(L3)c-는 -(T3-V3)c-이고;
-(L4)d-는 -(T4-V4)d-이고;
-(L5)e-는 -(T5-V5)e-; 그리고
-(L6)f-는 -(T6-V6)f-이고,
여기서, T1, T2, T3, T4, T5 및 T6은, 존재하는 경우, 테더 기(tether group)이고;
T1, T2, T3, T4, T5 및 T6은, 존재하는 경우, 공유 결합 또는 연결 관능기이고; 그리고
a, b, c, d, e 및 f는 각각 독립적으로 0 또는 1이고, 여기서 a, b, c, d, e 및 f의 합은 1 내지 6이다.
전술한 바와 같이, 특정 구현예에서, L1은 접합 모이어티 G에 부착된다(예를 들어, 상기 화학식 (I)에 나타낸 바와 같음). 이와 같이, 특정 구현예에서, T1은 접합 모이어티 G에 부착된다(예를 들어, 상기 화학식 (I)에 나타낸 바와 같음). 특정 구현예에서, V1은 (예를 들어, 화학식 (I)의 구조의 -Ak-X2-X1-C(O)O- 부분을 통해) 약물 또는 활성제에 (간접적으로) 부착된다. 특정 구현예에서, L2는 존재하는 경우 약물 또는 활성제에 부착된다. 이와 같이, 특정 구현예에서, T2는 존재하는 경우 약물 또는 활성제에 (간접적으로) 부착되거나, V2는 존재하는 경우 약물 또는 활성제에 (간접적으로) 부착된다(예를 들어, 화학식 (I)의 구조의 -Ak-X2-X1-C(O)O- 부분을 통해). 특정 구현예에서, L3은 존재하는 경우 약물 또는 활성제에 부착된다. 이와 같이, 특정 구현예에서, T3은 존재하는 경우 약물 또는 활성제에 (간접적으로) 부착되거나, V3은 존재하는 경우 약물 또는 활성제에 (간접적으로) 부착된다(예를 들어, 화학식 (I)의 구조의 -Ak-X2-X1-C(O)O- 부분을 통해). 특정 구현예에서, L4는 존재하는 경우 캄프토테신 또는 캄프토테신 유도체에 부착된다. 이와 같이, 특정 구현예에서, T4는 존재하는 경우 약물 또는 활성제에 (간접적으로) 부착되거나, V4는 존재하는 경우 약물 또는 활성제에 (간접적으로) 부착된다(예를 들어, 화학식 (I)의 구조의 -Ak-X2-X1-C(O)O- 부분을 통해). 특정 구현예에서, L5는 존재하는 경우 캄프토테신 또는 캄프토테신 유도체에 부착된다. 이와 같이, 특정 구현예에서, T5는 존재하는 경우 약물 또는 활성제에 (간접적으로) 부착되거나, V5는 존재하는 경우 약물 또는 활성제에 (간접적으로) 부착된다(예를 들어, 화학식 (I)의 구조의 -Ak-X2-X1-C(O)O- 부분을 통해). 특정 구현예에서, L6은 존재하는 경우 캄프토테신 또는 캄프토테신 유도체에 부착된다. 이와 같이, 특정 구현예에서, T6은 존재하는 경우 약물 또는 활성제에 (간접적으로) 부착되거나, V6은 존재하는 경우 약물 또는 활성제에 (간접적으로) 부착된다(예를 들어, 화학식 (I)의 구조의 -Ak-X2-X1-C(O)O- 부분을 통해).
테더 기 T1, T2, T3, T4, T5 및 T6에 관하여, 임의의 편리한 테더 기는 본 링커에서 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, T1, T2, T3, T4, T5 및 T6은 각각 공유 결합, (C1-C12)알킬, 치환된 (C1-C12)알킬, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 및 치환된 헤테로사이클릴, (EDA)w, (PEG)n, (AA)p, -(CR13OH)m-, 4-아미노-피페리딘 (4AP), 메타-아미노-벤질옥시 (MABO), 메타-아미노-벤질옥시카보닐 (MABC), 파라-아미노-벤질옥시 (PABO), 파라-아미노-벤질옥시카보닐 (PABC), 파라-아미노벤질 (PAB), 파라-아미노-벤질아미노 (PABA), 파라-아미노-페닐 (PAP), 파라-하이드록시-페닐 (PHP), 아세탈 기, 하이드라진, 디설파이드, 및 에스테르로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 기를 포함하고, 여기서 각각의 w는 1 내지 20의 정수이고, 각각의 n은 1 내지 30의 정수이고, 각각의 p는 1 내지 20의 정수이고, 각각의 m은 1 내지 12의 정수이다.
특정 구현예에서, 테더 기(예를 들어, T1, T2, T3, T4, T5 및/또는 T6)는 (C1-C12)알킬 또는 치환된 (C1-C12)알킬을 포함한다. 특정 구현예에서, (C1-C12)알킬은 1 내지 12개의 탄소 원자, 예컨대, 1 내지 10개의 탄소 원자, 또는 1 내지 8개의 탄소 원자, 또는 1 내지 6개의 탄소 원자, 또는 1 내지 5개의 탄소 원자, 또는 1 내지 4개의 탄소 원자, 또는 1 내지 3개의 탄소 원자를 포함하는 직쇄 또는 분지형 알킬 기이다. 일부 사례에서, (C1-C12)알킬은 알킬 또는 치환된 알킬, 예컨대, C1-C12 알킬, 또는 C1-C10 알킬, 또는 C1-C6 알킬, 또는 C1-C3 알킬일 수 있다. 일부 사례에서, (C1-C12)알킬은 C2-알킬이다. 예를 들어, (C1-C12)알킬은 알킬렌 또는 치환된 알킬렌, 예컨대, C1-C12 알킬렌, 또는 C1-C10 알킬렌, 또는 C1-C6 알킬렌, 또는 C1-C3 알킬렌일 수 있다. 일부 사례에서, (C1-C12)알킬은 C2-알킬렌(예를 들어, CH2CH2)이다.
특정 구현예에서, 치환된 (C1-C12)알킬은 1 내지 12개의 탄소 원자, 예컨대, 1 내지 10개의 탄소 원자, 또는 1 내지 8개의 탄소 원자, 또는 1 내지 6개의 탄소 원자, 또는 1 내지 5개의 탄소 원자, 또는 1 내지 4개의 탄소 원자, 또는 1 내지 3개의 탄소 원자를 포함하는 직쇄 또는 분지형 치환된 알킬 기이다. 일부 사례에서, 치환된 (C1-C12)알킬은 치환된 알킬, 예컨대, 치환된 C1-C12 알킬, 또는 치환된 C1-C10 알킬, 또는 치환된 C1-C6 알킬, 또는 치환된 C1-C3 알킬일 수 있다. 일부 사례에서, 치환된 (C1-C12)알킬은 치환된 C2-알킬이다. 예를 들어, 치환된 (C1-C12)알킬은 치환된 알킬렌, 예컨대, 치환된 C1-C12 알킬렌, 또는 치환된 C1-C10 알킬렌, 또는 치환된 C1-C6 알킬렌, 또는 치환된 C1-C3 알킬렌일 수 있다. 일부 사례에서, 치환된 (C1-C12)알킬은 치환된 C2-알킬렌이다.
특정 구현예에서, 테더 기(예를 들어, T1, T2, T3, T4, T5 및 T6)는 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 또는 치환된 헤테로사이클릴을 포함한다. 일부 사례에서, 테더 기(예를 들어, T1, T2, T3, T4, T5 및 T6)는 아릴 또는 치환된 아릴을 포함한다. 예를 들어, 아릴은 페닐일 수 있다. 일부 경우에, 치환된 아릴은 치환된 페닐이다. 치환된 페닐은 (C1-C12)알킬, 치환된 (C1-C12)알킬, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환될 수 있다. 일구 사례에, 치환된 아릴은 치환된 페닐이고, 여기서 치환기는 본 명세서에 기재된 바와 같은 절단 가능한 모이어티(예를 들어, 글리코시드 또는 글리코시드 유도체와 같은 효소적으로 절단 가능한 모이어티)을 포함한다.
일부 사례에서, 테더 기(예를 들어, T1, T2, T3, T4, T5 및 T6)는 헤테로아릴 또는 치환된 헤테로아릴을 포함한다. 일부 사례에서, 테더 기(예를 들어, T1, T2, T3, T4, T5 및 T6)는 사이클로알킬 또는 치환된 사이클로알킬을 포함한다. 일부 사례에서, 테더 기(예를 들어, T1, T2, T3, T4, T5 및 T6)는 헤테로사이클릴 또는 치환된 헤테로사이클릴을 포함한다. 일부 사례에서, 치환된 헤테로아릴, 치환된 시클로알킬 또는 치환된 헤테로시클릴 상의 치환기는 본 명세서에 기재된 바와 같은 절단 가능한 모이어티(예를 들어, 글리코시드 또는 글리코시드 유도체와 같은 효소적으로 절단 가능한 모이어티)을 포함한다.
특정 구현예에서, 테더 기(예를 들어, T1, T2, T3, T4, T5 및 T6)는 에틸렌 디아민(EDA) 모이어티, 예컨대, EDA 함유 테더 기를 포함한다. 특정 구현예에서, (EDA)w는 1개 이상의 EDA 모이어티를 포함하며, 예컨대, w는 1 내지 50, 예컨대, 1 내지 40, 1 내지 30, 1 내지 20, 1 내지 12 또는 1 내지 6의 정수(예컨대, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6)이다. 연결된 에틸렌 디아민(EDA) 모이어티는 선택적으로 임의의 편리한 치환기로, 예컨대, 알킬, 치환된 알킬, 아실, 치환된 아실, 아릴 또는 치환된 아릴로 하나 이상의 편리한 위치에서 치환될 수 있다. 특정 구현예에서, EDA 모이어티는 하기 구조로 표기된다:
,
여기서 y는 1 내지 6의 정수이거나, 0 또는 1이고, 각각의 R12는 독립적으로 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 알콕시, 치환된 알콕시, 아미노, 치환된 아미노, 카복실, 카복실 에스테르, 아실, 아실옥시, 아실 아미노, 아미노 아실, 알킬아미드, 치환된 알킬아마이드, 설포닐, 티오알콕시, 치환된 티오알콕시, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택된다. 특정 구현예에서, y는 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이다. 특정 구현예에서, y는 1이고, r은 0이다. 특정 구현예에서, y는 1이고, r은 1이다. 특정 구현예에서, y는 2이고 r은 0이다. 특정 구현예에서, y는 2이고 r은 1이다. 특정 구현예에서, 각각의 R12는 독립적으로 수소, 알킬, 치환된 알킬, 아릴 및 치환된 아릴로부터 선택된다. 특정 구현예에서, EDA의 임의의 2개의 인접한 R12 기는, 예컨대, 환상으로 연결되어, 피페라진일 고리를 형성할 수 있다. 특정 구현예에서, y는 1이고, 2개의 인접한 R12 기는 알킬 기이고, 환상으로 연결되어 피페라진일 고리를 형성한다. 특정 구현예에서, y는 1이고, 인접한 R12 기는 수소, 알킬(예를 들어, 메틸) 및 치환된 알킬(예를 들어, 저급 알킬-OH, 예컨대, 에틸-OH 또는 프로필-OH)로부터 선택된다.
특정 구현예에서, 테더 기(예를 들어, T1, T2, T3, T4, T5 및 T6)는 4-아미노-피페리딘(4AP) 모이어티(본 명세서에서 피페리딘-4-아미노, P4A로도 지칭됨)를 포함한다. 4AP 모이어티는 선택적으로 임의의 편리한 치환기로, 예컨대, 알킬, 치환된 알킬, 폴리에틸렌 글리콜 모이어티, 아실, 치환된 아실, 아릴 또는 치환된 아릴로 하나 이상의 편리한 위치에서 치환될 수 있다. 특정 구현예에서, 4AP 모이어티는 하기 구조로 표기된다:
여기서 R12는 수소, 알킬, 치환된 알킬, 폴리에틸렌 글리콜 모이어티(예를 들어, 폴리에틸렌 글리콜 또는 변형된 폴리에틸렌 글리콜), 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 알콕시, 치환된 알콕시, 아미노, 치환된 아미노, 카복실, 카복실 에스테르, 아실, 아실옥시, 아실 아미노, 아미노 아실, 알킬아미드, 치환된 알킬아미드, 설포닐, 티오알콕시, 치환된 티오알콕시, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택된다. 특정 구현예에서, R12는 폴리에틸렌 글리콜 모이어티이다. 특정 구현예에서, R12는 카복시 변형된 폴리에틸렌 글리콜이다.
특정 실시양태에서, R12는 하기 구조로 표시될 수 있는 화학식 (PEG)k로 기재된 폴리에틸렌 글리콜 모이어티를 포함한다:
여기서 k는 1 내지 20, 예컨대, 1 내지 18, 또는 1 내지 16, 또는 1 내지 14, 또는 1 내지 12, 또는 1 내지 10, 또는 1 내지 8, 또는 1 내지 6, 또는 1 내지 4, 또는 1 또는 2의 정수, 예컨대, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20이다. 일부 사례에서, k는 2이다. 특정 구현예에서, R17은 OH, COOH 또는 COOR로부터 선택되되, 여기서 R은 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택된다. 특정 구현예에서, R17은 COOH이다.
특정 구현예에서, 테더 기(예를 들어, T1, T2, T3, T4, T5 및 T6)는 (PEG)n을 포함하는데, 여기서 (PEG)n은 폴리에틸렌 글리콜 또는 변형된 폴리에틸렌 글리콜 연결 단위이다. 특정 구현예에서, (PEG)n은 하기 구조로 표기된다:
여기서 n은 1 내지 50, 예컨대, 1 내지 40, 1 내지 30, 1 내지 20, 1 내지 12 또는 1 내지 6의 정수, 예컨대, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20이다. 일부 사례에서, n은 2이다. 일부 사례에서, n은 3이다. 일부 사례에서, n은 6이다. 일부 사례에서, n은 12이다.
특정 구현예에서, 테더 기(예를 들어, T1, T2, T3, T4, T5 및 T6)는 (AA)p를 포함하는데, 여기서 AA는 아미노산 잔기이다. 임의의 편리한 아미노산이 사용될 수 있다. 관심 아미노산은, L- 및 D-아미노산, 천연 유래 아미노산, 예컨대, 20개의 1차 알파-아미노산 및 베타-알라닌 중 임의의 것, 비천연 유래 아미노산(예를 들어, 아미노산 유사체), 예컨대, 비천연 유래 알파-아미노산 또는 비천연 유래 베타-아미노산 등을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 특정 구현예에서, p는 1 내지 50, 예컨대, 1 내지 40, 1 내지 30, 1 내지 20, 1 내지 12 또는 1 내지 6의 정수, 예컨대, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20이다. 특정 구현예에서, p는 1이다. 특정 구현예에서, p는 2이다.
특정 구현예에서, 테더 기(예를 들어, T1, T2, T3, T4, T5 및 T6)는 화학식 -(CR13OH)m-로 표시되는 모이어티를 포함하되, 여기서 m는 0이거나 또는 n은 1 내지 50, 예컨대, 1 내지 40, 1 내지 30, 1 내지 20, 1 내지 12의 정수 또는 1 내지 6, 예컨대, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12이다. 특정 구현예에서, m은 1이다. 특정 구현예에서, m은 2이다. 특정 구현예에서, R13은 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 알콕시, 치환된 알콕시, 아미노, 치환된 아미노, 카복실, 카복실 에스테르, 아실, 아실옥시, 아실 아미노, 아미노 아실, 알킬아미드, 치환된 알킬아미드, 설포닐, 티오알콕시, 치환된 티오알콕시, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택된다. 특정 구현예에서, R13은 수소이다. 특정 구현예에서, R13은 알킬 또는 치환된 알킬, 예컨대, C1-6 알킬 또는 C1-6 치환된 알킬, 또는 C1-4 알킬 또는 C1-4 치환된 알킬, 또는 C1-3 알킬 또는 C1-3 치환된 알킬이다. 특정 구현예에서, R13은 알케닐 또는 치환된 알케닐, 예컨대, C2-6 알케닐 또는 C2-6 치환된 알케닐, 또는 C2-4 알케닐 또는 C2-4 치환된 알케닐, 또는 C2-3 알케닐 또는 C2-3 치환된 알케닐이다. 특정 구현예에서, R13은 알키닐 또는 치환된 알키닐이다. 특정 구현예에서, R13은 알콕시 또는 치환된 알콕시이다. 특정 구현예에서, R13은 아미노 또는 치환된 아미노이다. 특정 구현예에서, R13은 카복실 또는 카복실 에스테르이다. 특정 구현예에서, R13은 아실 또는 아실옥시이다. 특정 구현예에서, R13은 아실 아미노 또는 아미노 아실이다. 특정 구현예에서, R13은 알킬아미드 또는 치환된 알킬아미드이다. 특정 구현예에서, R13은 설포닐이다. 특정 구현예에서, R13은 티오알콕시 또는 치환된 티오알콕시이다. 특정 구현예에서, R13은 아릴 또는 치환된 아릴, 예컨대, C5-8 아릴 또는 C5-8 치환된 아릴, 예컨대, C5 아릴 또는 C5 치환된 아릴, 또는 C6 아릴 또는 C6 치환된 아릴이다. 특정 구현예에서, R13은 헤테로아릴 또는 치환된 헤테로아릴, 예컨대, C5-8 헤테로아릴 또는 C5-8 치환된 헤테로아릴, 예컨대, C5 헤테로아릴 또는 C5 치환된 헤테로아릴, 또는 C6 헤테로아릴 또는 C6 치환된 헤테로아릴이다. 특정 구현예에서, R13은 사이클로알킬 또는 치환된 사이클로알킬, 예컨대, C3-8 사이클로알킬 또는 C3-8 치환된 사이클로알킬, 예컨대, C3-6 사이클로알킬 또는 C3-6 치환된 사이클로알킬, 또는 C3-5 사이클로알킬 또는 C3-5 치환된 사이클로알킬이다. 특정 구현예에서, R13은 헤테로사이클릴 또는 치환된 헤테로사이클릴, 예컨대, C3-8 헤테로사이클릴 또는 C3-8 치환된 헤테로사이클릴, 예컨대, C3-6 헤테로사이클릴 또는 C3-6 치환된 헤테로사이클릴, 또는 C3-5 헤테로사이클릴 또는 C3-5 치환된 헤테로사이클릴이다.
특정 구현예에서, R13은 수소, 알킬, 치환된 알킬, 아릴 및 치환된 아릴로부터 선택된다. 이들 구현예에서, 알킬, 치환된 알킬, 아릴, 및 치환된 아릴은 R13에 대해서 위에서 기재된 바와 같다.
특정 구현예에서, 테더 기(예를 들어, T1, T2, T3, T4, T5 및 T6)는 메타-아미노-벤질옥시 (MABO), 메타-아미노-벤질옥시카보닐 (MABC), 파라-아미노-벤질옥시 (PABO), 파라-아미노-벤질옥시카보닐 (PABC), 파라-아미노벤질 (PAB), 파라-아미노-벤질아미노 (PABA), 파라-아미노-페닐 (PAP), 또는 파라-하이드록시-페닐 (PHP)를 포함한다.
일부 구현예에서, 테더는 하기 구조로 기재된 MABO 기를 포함한다:
일부 구현예에서, 테더는 하기 구조로 기재된 MABC 기를 포함한다:
일부 구현예에서, 테더는 하기 구조로 기재된 PABO 기를 포함한다:
일부 구현예에서, 테더는 하기 구조로 기재된 PABC 기를 포함한다:
일부 구현예에서, 테더는 하기 구조로 기재된 PAB 기를 포함한다:
일부 구현예에서, 테더는 하기 구조로 기재된 PABA 기를 포함한다:
일부 구현예에서, 테더는 하기 구조로 기재된 PAP 기를 포함한다:
일부 구현예에서, 테더는 하기 구조로 기재된 PHP 기를 포함한다:
특정 구현예에서, 각각의 R14는 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 알콕시, 치환된 알콕시, 아미노, 치환된 아미노, 카복실, 카복실 에스테르, 아실, 아실옥시, 아실 아미노, 아미노 아실, 알킬아미드, 치환된 알킬아미드, 설포닐, 티오알콕시, 치환된 티오알콕시, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 독립적으로 선택된다.
특정 구현예에서, R14은 수소이다. 특정 구현예에서, 각각의 R14는 수소이다. 특정 구현예에서, R14는 알킬 또는 치환된 알킬, 예컨대, C1-6 알킬 또는 C1-6 치환된 알킬, 또는 C1-4 알킬 또는 C1-4 치환된 알킬, 또는 C1-3 알킬 또는 C1-3 치환된 알킬이다. 특정 구현예에서, R14은 알케닐 또는 치환된 알케닐, 예컨대, C2-6 알케닐 또는 C2-6 치환된 알케닐, 또는 C2-4 알케닐 또는 C2-4 치환된 알케닐, 또는 C2-3 알케닐 또는 C2-3 치환된 알케닐이다. 특정 구현예에서, R14은 알키닐 또는 치환된 알키닐이다. 특정 구현예에서, R14는 알콕시 또는 치환된 알콕시이다. 특정 구현예에서, R14는 아미노 또는 치환된 아미노이다. 특정 구현예에서, R14는 카복실 또는 카복실 에스테르이다. 특정 구현예에서, R14는 아실 또는 아실옥시이다. 특정 구현예에서, R14는 아실 아미노 또는 아미노 아실이다. 특정 구현예에서, R14은 알킬아미드 또는 치환된 알킬아미드이다. 특정 구현예에서, R14는 설포닐이다. 특정 구현예에서, R14는 티오알콕시 또는 치환된 티오알콕시이다. 특정 구현예에서, R14은 아릴 또는 치환된 아릴, 예컨대, C5-8 아릴 또는 C5-8 치환된 아릴, 예컨대, C5 아릴 또는 C5 치환된 아릴, 또는 C6 아릴 또는 C6 치환된 아릴이다. 특정 구현예에서, R14은 헤테로아릴 또는 치환된 헤테로아릴, 예컨대, C5-8 헤테로아릴 또는 C5-8 치환된 헤테로아릴, 예컨대, C5 헤테로아릴 또는 C5 치환된 헤테로아릴, 또는 C6 헤테로아릴 또는 C6 치환된 헤테로아릴이다. 특정 구현예에서, R14은 사이클로알킬 또는 치환된 사이클로알킬, 예컨대, C3-8 사이클로알킬 또는 C3-8 치환된 사이클로알킬, 예컨대, C3-6 사이클로알킬 또는 C3-6 치환된 사이클로알킬, 또는 C3-5 사이클로알킬 또는 C3-5 치환된 사이클로알킬이다. 특정 구현예에서, R14는 헤테로사이클릴 또는 치환된 헤테로사이클릴, 예컨대, C3-8 헤테로사이클릴 또는 C3-8 치환된 헤테로사이클릴, 예컨대, C3-6 헤테로사이클릴 또는 C3-6 치환된 헤테로사이클릴, 또는 C3-5 헤테로사이클릴 또는 C3-5 치환된 헤테로사이클릴이다.
일부 구현예에서, 상기에 나타낸 MABO, MABC, PABO, PABC, PAB, PABA, PAP 및 PHP 테더 구조의 일부 구현예에서, 페닐 고리는 할로겐, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 알콕시, 치환된 알콕시, 아미노, 치환된 아미노, 카복실, 카복실 에스테르, 아실, 아실옥시, 아실 아미노, 아미노 아실, 알킬아미드, 치환된 알킬아미드, 설포닐, 티오알콕시, 치환된 티오알콕시, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택된 하나 이상의 추가 기로 치환될 수 있다.
링커 L의 특정 구현예에서, 테더 기 T1, T2, T3, T4, T5 또는 T6 중 하나 이상은 각각 글리코시드 또는 글리코시드 유도체로 선택적으로 치환된다. 특정 구현예에서, 글리코시드 또는 글리코시드 유도체는 글루쿠로나이드, 갈락토시드, 글루코시드, 만노시드, 푸코시드, O-GlcNAc 및 O-GalNAc로부터 선택된다.
특정 구현예에서, 상기에 나타낸 MABO, MABC, PABO, PABC, PAB, PABA, PAP 및 PHP 테더 구조는 글리코시드 및 글리코시드 유도체로부터 선택된 하나 이상의 추가 기로 치환될 수 있다. 예를 들어, 상기에 나타낸 MABO, MABC, PABO, PABC, PAB, PABA, PAP 및 PHP 테더 구조의 일부 구현예에서, 페닐 고리는 글리코시드 및 글리코시드 유도체로부터 선택된 하나 이상의 추가 기로 치환될 수 있다. 특정 구현예에서, 글리코시드 또는 글리코시드 유도체는 글루쿠로나이드, 갈락토시드, 글루코시드, 만노시드, 푸코시드, O-GlcNAc 및 O-GalNAc로부터 선택된다.
예를 들어, 일부 구현예에서, 글리코시드 또는 글리코시드 유도체는 하기 구조로부터 선택될 수 있다:
및
연결 관능기 V1, V2, V3, V4, V5 및 V6과 관련하여 임의의 편리한 연결 관능기가 링커 L에 활용될 수 있다. 관심 연결 관능기는 아미노, 카보닐, 아미도, 옥시카보닐, 카복시, 설포닐, 설폭사이드, 설포닐아미노, 아미노설포닐, 티오, 옥시, 포스포, 포스포르아미데이트, 티오포스포라데이트 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 일부 구현예에서, V1, V2, V3, V4, V5 및 V6은 각각 독립적으로 공유 결합, -CO-, -NR15-, -NR15(CH2)q-, -NR15(C6H4)-, -CONR15-, -NR15CO-, -C(O)O-, -OC(O)-, -O-, -S-, -S(O)-, -SO2-, -SO2NR15-, -NR15SO2- 및 -P(O)OH-로부터 선택되되, 여기서 q는 1 내지 6의 정수이다. 특정 구현예에서, q는 1 내지 6의 정수(예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6)이다. 특정 구현예에서, q는 1이다. 특정 구현예에서, q는 2이다. 특정 구현예에서, q는 3이다. 특정 구현예에서, q는 4이다. 특정 구현예에서, q는 5이다. 특정 구현예에서, q는 6이다.
일부 구현예에서, 각각의 R15는 독립적으로 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 알콕시, 치환된 알콕시, 아미노, 치환된 아미노, 카복실, 카복실 에스테르, 아실, 아실옥시, 아실 아미노, 아미노 아실, 알킬아미드, 치환된 알킬아미드, 설포닐, 티오알콕시, 치환된 티오알콕시, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택된다.
특정 구현예에서, R15는 수소이다. 특정 구현예에서, 각각의 R15는 수소이다. 특정 구현예에서, R15는 알킬 또는 치환된 알킬, 예컨대, C1-6 알킬 또는 C1-6 치환된 알킬, 또는 C1-4 알킬 또는 C1-4 치환된 알킬, 또는 C1-3 알킬 또는 C1-3 치환된 알킬이다. 특정 구현예에서, R15는 알케닐 또는 치환된 알케닐, 예컨대, C2-6 알케닐 또는 C2-6 치환된 알케닐, 또는 C2-4 알케닐 또는 C2-4 치환된 알케닐, 또는 C2-3 알케닐 또는 C2-3 치환된 알케닐이다. 특정 구현예에서, R15는 알키닐 또는 치환된 알키닐이다. 특정 구현예에서, R15는 알콕시 또는 치환된 알콕시이다. 특정 구현예에서, R15는 아미노 또는 치환된 아미노이다. 특정 구현예에서, R15는 카복실 또는 카복실 에스테르이다. 특정 구현예에서, R15는 아실 또는 아실옥시이다. 특정 구현예에서, R15는 아실 아미노 또는 아미노 아실이다. 특정 구현예에서, R15는 알킬아미드 또는 치환된 알킬아미드이다. 특정 구현예에서, R15는 설포닐이다. 특정 구현예에서, R15는 티오알콕시 또는 치환된 티오알콕시이다. 특정 구현예에서, R15는 아릴 또는 치환된 아릴, 예컨대, C5-8 아릴 또는 C5-8 치환된 아릴, 예컨대, C5 아릴 또는 C5 치환된 아릴, 또는 C6 아릴 또는 C6 치환된 아릴이다. 특정 구현예에서, R15는 헤테로아릴 또는 치환된 헤테로아릴, 예컨대, C5-8 헤테로아릴 또는 C5-8 치환된 헤테로아릴, 예컨대, C5 헤테로아릴 또는 C5 치환된 헤테로아릴, 또는 C6 헤테로아릴 또는 C6 치환된 헤테로아릴이다. 특정 구현예에서, R15는 사이클로알킬 또는 치환된 사이클로알킬, 예컨대, C3-8 사이클로알킬 또는 C3-8 치환된 사이클로알킬, 예컨대, C3-6 사이클로알킬 또는 C3-6 치환된 사이클로알킬, 또는 C3-5 사이클로알킬 또는 C3-5 치환된 사이클로알킬이다. 특정 구현예에서, R15는 헤테로사이클릴 또는 치환된 헤테로사이클릴, 예컨대, C3-8 헤테로사이클릴 또는 C3-8 치환된 헤테로사이클릴, 예컨대, C3-6 헤테로사이클릴 또는 C3-6 치환된 헤테로사이클릴, 또는 C3-5 헤테로사이클릴 또는 C3-5 치환된 헤테로사이클릴이다.
특정 구현예에서, 각각의 R15는 독립적으로 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 카복실, 카복실 에스테르, 아실, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택된다. 이들 구현예에서, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 카복실, 카복실 에스테르, 아실, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 및 치환된 헤테로사이클릴은 R15에 대해서 위에서 기재된바와 같다.
특정 구현예에서, 테더 기는 아세탈 기, 설파이드, 하이드라진 또는 에스테르를 포함한다. 일부 구현예에서, 테더 기는 아세탈 기를 포함한다. 일부 구현예에서, 테더 기는 하이드라진을 포함한다. 일부 구현예에서, 테더 기는 설파이드를 포함한다. 일부 구현예에서, 테더 기는 에스테르를 포함한다.
위에서 기재된 바와 같이, 일부 구현예에서, L은 -(T1-V1)a-(T2-V2)b-(T3-V3)c-(T4-V4)d-(T5-V5)e-(T6-V6)f-를 포함하는 링커이되, a, b, c, d, e 및 f는 각각 독립적으로 0 또는 1이고, 여기서 a, b, c, d, e 및 f의 합은 1 내지 6이다.
일부 구현예에서, 링커 L에서:
T1은 (C1-C12)알킬 및 치환된 (C1-C12)알킬로부터 선택되고;
T2, T3, T4, T5 및 T6은 각각 (C1-C12)알킬, 치환된 (C1-C12)알킬, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 및 치환된 헤테로사이클릴, (EDA)w, (PEG)n, (AA)p, -(CR13OH)m-, 4-아미노-피페리딘 (4AP), MABO, MABC, PABO, PABC, PAB, PABA, PAP, PHP, 아세탈 기, 디설파이드, 하이드라진, 및 에스테르로부터 독립적으로 선택되고; 그리고
V1, V2, V3, V4, V5 및 V6은 각각 독립적으로 공유 결합, -CO-, -NR15-, -NR15(CH2)q-, -NR15(C6H4)-, -CONR15-, -NR15CO-, -C(O)O-, -OC(O)-, -O-, -S-, -S(O)-, -SO2-, -SO2NR15-, -NR15SO2- 및 -P(O)OH-로부터 선택되되, 여기서 q는 1 내지 6의 정수이고;
여기서:
(PEG)n은 이되, n은 1 내지 30의 정수이고;
EDA는 구조 를 갖는 에틸렌 디아민 모이어티이고:
여기서 y는 1 내지 6의 정수이고 r은 0 또는 1이고;
4-아미노-피페리딘(4AP)은 이고;
AA는 아미노산 잔기이되, p는 1 내지 20의 정수이고; 그리고
각각의 R12는 독립적으로 수소, 알킬, 치환된 알킬, 폴리에틸렌 글리콜 모이어티, 아릴 및 치환된 아릴로부터 선택되되, 임의의 2개의 인접한 R12 기는 환상으로 연결되어 피페라진일 고리를 형성하고; 그리고
각각의 R13은 독립적으로 수소, 알킬, 치환된 알킬, 아릴 및 치환된 아릴로부터 선택되고;
각각의 R15는 독립적으로 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 카복실, 카복실 에스테르, 아실, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택된다.
일부 구현예에서, L은 링커이고, 여기서:
T1은 (C1-C12)알킬이고 V1은 -CO-이고;
T2는 아미노산 유사체이고 V2는 -NH-이고;
T3은 (PEG)n이고 V3은 -CO-이고; 그리고
d 내지 f는 각각 0이거나; 또는
여기서:
T1은 (C1-C12)알킬이고 V1은 -CO-이고;
T2는 아미노산 유사체이고 V2는 -NH-이고;
T3은 (PEG)n이고 V3은 -CONH-이고;
T4는 (PEG)n이고 V4는 -CO-이고;
e 및 f는 각각 0이다.
특정 구현예에서, 상기 링커 구조(예를 들어, T1)의 왼쪽은 접합 모이어티 G에 부착되고, 상기 링커 구조(예를 들어, V3 또는 V4)의 오른쪽은 (예를 들어, 화학식 (I)의 구조의 -Ak-X2-X1-C(O)O- 부분을 통해) 약물 또는 활성제에 부착된다.
특정 구현예에서, 접합체는 항체와 약물이 상기 기재된 바와 같이 링커에 의해 함께 연결된 항체-약물 접합체이다. 일부 사례에서, 링커는 절단 가능한 링커이다. 절단 가능한 링커는 하나 이상의 절단 가능한 모이어티를 포함하는 링커이며, 여기서 절단 가능한 모이어티는 특정 조건 하에서 해리될 수 있는 하나 이상의 결합을 포함하여 절단 가능한 링커를 2개 이상의 분리 가능한 부분으로 분리한다. 예를 들어, 절단 가능한 모이어티는 하나 이상의 공유 결합을 포함할 수 있으며, 이는 특정 조건 하에서 절단 가능한 링커를 2개 이상의 부분으로 분리하기 위해 해리되거나 분해될 수 있다. 이와 같이, 항체-약물 접합체에 포함된 링커는 적절한 조건 하에서 절단 가능한 링커가 절단되어 약물에 대한 원하는 표적 작용 부위에서 항체로부터 약물을 분리하거나 방출하도록 하는 절단 가능한 링커일 수 있다.
일부 사례에서, 절단 가능한 링커는 제1 절단 가능한 모이어티 및 제2 절단 가능한 모이어티와 같은 2개의 절단 가능한 모이어티를 포함한다. 절단 가능한 모이어티는 약물에 대한 원하는 표적 작용 부위에서 항체로부터 약물을 분리하거나 방출하기 위해 두 절단 가능한 모이어티의 절단이 필요하도록 구성될 수 있다. 예를 들어, 절단 가능한 링커의 절단은 초기에 2개의 절단 가능한 모이어티 중 하나를 절단한 다음, 2개의 절단 가능한 모이어티 중 다른 하나를 절단함으로써 달성될 수 있다. 특정 구현예에서, 절단 가능한 링커는 제1 절단 가능한 모이어티 및 제1 절단 가능한 모이어티의 절단을 방해하는 제2 절단 가능한 모이어티를 포함한다. "절단을 방해한다"는 절단되지 않은 제2 절단 가능한 모이어티의 존재가 가능성을 감소시키거나 제1 절단 가능한 모이어티의 절단을 실질적으로 억제하여 절단 가능한 링커의 양을 실질적으로 감소시키거나 절단을 방지함을 의미한다. 예를 들어, 절단되지 않은 제2 절단 가능한 모이어티의 존재는 제1 절단 가능한 모이어티의 절단을 방해할 수 있다. 제2 절단 가능한 모이어티의 존재에 의한 제1 절단 가능한 모이어티의 절단 방해는 결국 항체로부터 약물의 방출을 방지하거나 양을 실질적으로 감소시킨다. 예를 들어, 항체로부터의 약물의 조기 방출은 항체-약물 접합체가 약물에 대한 원하는 표적 작용 부위에 또는 그 근처에 있을 때까지 실질적으로 감소되거나 방지될 수 있다.
일부 경우에, 제2 절단 가능한 모이어티가 제1 절단 가능한 모이어티의 절단을 방해하기 때문에, 절단 가능한 링커의 절단은 초기에 제2 절단 가능한 모이어티를 절단한 다음, 제1 절단 가능한 모이어티를 절단함으로써 달성될 수 있다. 제2 절단 가능한 모이어티의 절단은 제1 절단 가능한 모이어티의 절단에 대한 방해를 감소시키거나 제거하여, 제1 절단 가능한 모이어티가 절단되게 할 수 있다. 제1 절단 가능한 모이어티의 절단은 항체-약물 접합체로부터 약물을 방출하기 위해 상기 기재된 바와 같이 절단 가능한 링커가 해리되거나 2개 이상의 부분으로 분리되는 결과를 초래할 수 있다. 일부 사례에서, 제1 절단 가능한 모이어티의 절단은 절단되지 않은 제2 절단 가능한 모이어티의 존재 하에 실질적으로 발생하지 않는다. 실질적으로란 절단되지 않은 제2 절단 가능한 모이어티의 존재 하에 제1 절단 가능한 모이어티의 약 10% 이하의 절단이 일어나고, 예컨대 제1 절단 가능한 모이어티의 약 9% 이하, 또는 약 8% 이하, 또는 약 7% 이하, 또는 약 6% 이하, 또는 약 5% 이하, 또는 약 4% 이하, 또는 약 3% 이하, 또는 약 2% 이하, 또는 약 1% 이하, 또는 약 0.5% 이하, 또는 약 0.1% 이하 절단은 절단되지 않은 제2 절단 가능한 모이어티의 존재 하에 일어난다.
달리 말하면, 제2 절단 가능한 모이어티는 절단으로부터 제1 절단 가능한 모이어티를 보호할 수 있다. 예를 들어, 절단되지 않은 제2 절단 가능한 모이어티의 존재는 절단으로부터 제1 절단 가능한 모이어티를 보호할 수 있고, 따라서 항체-약물 접합체가 약물의 원하는 작용 표적 부위에 또는 그 근처에 있을 때까지 항체로부터 약물의 조기 방출을 실질적으로 감소시키거나 방지할 수 있다. 이와 같이, 제2 절단 가능한 모이어티의 절단은 제1 절단 가능한 모이어티를 노출시키고(예를 들어, 제1 절단 가능한 모이어티를 탈보호함), 따라서 제1 절단 가능한 모이어티가 절단되도록 허용하고, 이는 절단 가능한 링커의 절단을 초래하고, 차례로 상기 기술된 바와 같이 약물에 대한 원하는 표적 작용 부위에서 항체로부터 약물을 분리 또는 방출한다. 특정 사례에서, 제2 절단 가능한 모이어티의 절단은 제1 절단 가능한 모이어티를 후속 절단에 노출시키지만, 제2 절단 가능한 모이어티의 절단은 그 자체로 절단 가능한 링커의 절단을 초래하지 않는다(즉, 제1 절단 가능한 모이어티의 절단은 여전히 절단 가능한 링커를 절단하기 위해 필요함).
절단 가능한 링커에 포함된 절단 가능한 모이어티는 각각 효소적으로 절단 가능한 모이어티일 수 있다. 예를 들어, 제1 절단 가능한 모이어티는 제1 효소적으로 절단 가능한 모이어티일 수 있고, 제2 절단 가능한 모이어티는 제2 효소적으로 절단 가능한 모이어티일 수 있다. 효소적으로 절단 가능한 모이어티는 효소의 효소 작용을 통해 전술한 바와 같이 2개 이상의 부분으로 분리될 수 있는 절단 가능한 모이어티이다. 효소적으로 절단 가능한 모이어티는 효소의 효소 작용을 통해 절단될 수 있는 임의의 절단 가능한 모이어티, 예를 들어 에스테르, 펩티드, 글리코시드 등(이에 제한되지 않음)일 수 있다. 일부 사례에서, 효소적으로 절단 가능한 모이어티를 절단하는 효소는 항체-약물 접합체로부터 방출될 약물의 원하는 표적 작용 부위와 같은 원하는 표적 작용 부위에 존재한다. 일부 경우에 효소적으로 절단 가능한 모이어티를 절단하는 효소가 전혈, 혈장 또는 혈청과 같은 다른 영역에 상당한 양으로 존재하지 않는다. 이와 같이, 효소적으로 절단 가능한 모이어티의 절단은 원하는 작용 부위에서 상당한 절단이 일어나는 반면, 다른 영역에서는 또는 항체-약물 접합체가 원하는 작용 부위에 도달하기 전에 절단이 유의하게 일어나지 않도록 제어될 수 있다.
예를 들어, 본 명세서에 기재된 바와 같이, 본 개시내용의 항체-약물 접합체는 암 치료, 예를 들어 암 세포가 존재하는 원하는 작용 부위에 암 치료 약물을 전달하기 위해 사용될 수 있다. 일부 경우에 에스테르 결합을 절단하는 에스테라제와 같은 효소가 암세포에서 과발현되는 암에 대한 바이오마커가 될 수 있다. 암에서 특정 효소의 과발현 및 이에 따른 국소화는 원하는 작용 부위(즉, 암 부위 (및 과발현된 효소))에서 약물을 특이적으로 방출하기 위해 본 개시내용의 항체-약물 접합체의 절단가능한 링커에 포함된 효소적으로 절단가능한 모이어티의 맥락에서 사용될 수 있다. 따라서, 일부 구현예에서, 효소적으로 절단 가능한 모이어티는 암세포에서 과발현되는 효소에 의해 절단될 수 있는 절단 가능한 모이어티(예를 들어, 에스테르)이다. 예를 들어, 효소는 에스테라제일 수 있다. 이와 같이, 일부 사례에서, 효소적으로 절단 가능한 모이어티는 에스테라제 효소에 의해 절단될 수 있는 절단 가능한 모이어티(예를 들어, 에스테르)이다.
특정 구현예에서, 효소적으로 절단 가능한 모이어티는 에스테르 결합이다. 예를 들어, 상기 기재된 제1 절단 가능한 모이어티(즉, 제2 절단 가능한 모이어티에 의해 조기 절단으로부터 보호되는 절단 가능한 모이어티)은 에스테르를 포함할 수 있다. 절단되지 않은 제2 절단 가능한 모이어티의 존재는 에스테라제 효소에 의한 절단으로부터 제1 절단 가능한 모이어티(에스테르)를 보호할 수 있고, 따라서 항체-약물 접합체가 약물의 원하는 작용 표적 부위에 또는 그 근처에 있을 때까지 항체로부터 약물의 조기 방출을 실질적으로 감소시키거나 방지할 수 있다. 일부 사례에서, 제1 절단 가능한 모이어티에 인접한 링커 L의 일부는 치환기에 연결되거나 치환기를 포함하며, 여기서 치환기는 제2 절단 가능한 모이어티를 포함한다. 일부 사례에서, 제2 절단 가능한 모이어티는 글리코시드를 포함한다.
일부 구현예에서, 효소적으로 절단 가능한 모이어티는 글리코시드(또는 글리오실) 또는 글리코시드 유도체와 같은 당 모이어티이다. 일부 경우에, 글리코시드 또는 글리코시드 유도체는 글리코시드 또는 글리코시드 유도체를 포함하지 않는 절단 가능한 링커와 비교하여 절단 가능한 링커의 친수성 증가를 촉진할 수 있다. 글리코시드 또는 글리코시드 유도체는 절단 가능한 링커에 사용하기에 적합하고 효소의 효소적 작용을 통해 절단될 수 있는 임의의 글리코시드 또는 글리코시드 유도체일 수 있다. 예를 들어, 제2 절단 가능한 모이어티(즉, 조기 절단으로부터 제1 절단 가능한 모이어티를 보호하는 절단 가능한 모이어티)는 글리코시드 또는 글리코시드 유도체일 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 제1 절단 가능한 모이어티는 에스테르를 포함하고 제2 절단 가능한 모이어티는 글리코시드 또는 글리코시드 유도체를 포함한다. 특정 구현예에서, 제2 절단 가능한 모이어티는 글루쿠로나이드, 갈락토시드, 글루코시드, 만노시드, 푸코사이드, O-GlcNAc, 및 O-GalNAc로부터 선택되는 글리코시드 또는 글리코시드 유도체이다. 일부 사례에서, 제2 절단 가능한 모이어티는 글루쿠로나이드이다. 일부 사례에서, 제2 절단 가능한 모이어티는 갈락토시드이다. 일부 사례에서, 제2 절단 가능한 모이어티는 글루코시드이다. 일부 사례에서, 제2 절단 가능한 모이어티는 만노시드이다. 일부 사례에서, 제2 절단 가능한 모이어티는 푸코사이드이다. 일부 사례에서, 제2 절단 가능한 모이어티는 O-GlcNAc이다. 일부 사례에서, 제2 절단 가능한 모이어티는 O-GalNAc이다.
글리코시드 또는 글리코시드 유도체는 글리코시드 결합을 통해 절단 가능한 링커에 부착(공유 결합)될 수 있다. 글리코시드 결합은 O-글리코시드 결합 (O-글리코시드), N-글리코시드 결합 (글리코실아민), S-글리코시드 결합 (티오글리코시드), 또는 C-글리코시드 결합 (C-글리코시드 또는 C-글리코실)로 제한되지 않는 것과 같은 다양한 유형의 결합을 통해 글리코시드 또는 글리코시드 유도체를 절단 가능한 링커에 연결할 수 있다. 일부 사례에서, 글리코시드 결합이 O-글리코시드 결합(O-글리코시드)이다. 일부 경우에, 글리코시드 또는 글리코시드 유도체는 (예를 들어, 글리코시드 결합의 효소 매개 가수분해를 통해) 효소에 의해 부착된 절단 가능한 링커로부터 절단될 수 있다. 글리코시드 또는 글리코시드 유도체는 글리코시드 또는 글리코시드 유도체를 절단 가능한 링커에 부착시키는 글리코시드 결합의 절단(가수분해)을 수행할 수 있는 임의의 편리한 효소에 의해 절단 가능한 링커로부터 제거되거나 절단될 수 있다. 글리코시드 또는 글리코시드 유도체를 절단 가능한 링커에 부착시키는 글리코시드 결합의 절단(가수분해)을 매개하는데 사용될 수 있는 효소의 예는 글리코시다제, 예컨대 글루쿠로니다제, 갈락토시다제, 글루코시다제, 만노시다제, 푸코시다제, 등이다. 글리코시드 또는 글리코시드 유도체를 절단 가능한 링커에 부착시키는 글리코시드 결합의 절단(가수분해)을 매개하기 위해 다른 적합한 효소도 사용될 수 있다. 일부 경우에, 글리코시드 또는 글리코시드 유도체를 절단 가능한 링커에 부착시키는 글리코시드 결합의 절단(가수분해)을 매개하는데 사용되는 효소는 항체-약물 접합체의 약물에 대한 원하는 작용 부위 또는 그 근처에서 발견된다. 예를 들어, 효소는 항체-약물 접합체의 약물에 대한 원하는 작용 부위 또는 그 근처에서 세포에서 발견되는 리소좀 글리코시다제와 같은 리소좀 효소일 수 있다. 일부 경우에, 효소는 제1 절단 가능한 모이어티의 절단을 매개하는 효소가 발견되는 표적 부위에서 또는 그 근처에서 발견되는 효소이다.
특정 구현예에서, 접합체는 화학식 (II)의 것이다:
여기서 R4는 아미노산 측쇄이다.
특정 구현예에서, R4는 아미노산의 측쇄를 나타낸다. 예를 들어, R4는 천연 아미노산, 비천연 아미노산 및 아미노산 유사체를 포함하는 아미노산 잔기의 α-탄소에 부착된 치환기를 나타낼 수 있다. 일부 경우에, R4는 자연 발생 단백질에서 발견되는 아미노산의 측쇄(예를 들어, Ala 또는 A, Cys 또는 C, Asp 또는 D, Glu 또는 E, Phe 또는 F, Gly 또는 G, His 또는 H, Ile 또는 I, Lys 또는 K, Leu 또는 L, Met 또는 M, Asn 또는 N, Pro 또는 P, Gln 또는 Q, Arg 또는 R, Ser 또는 S, Thr 또는 T, Val 또는 V, Trp 또는 W, Tyr 또는 Y의 측쇄)를 나타낸다. 특정 구현예에서, R4는 발린(Val)의 측쇄를 나타내고; 즉, R4는 이소프로필이다. 특정 구현예에서, R4는 알라닌(Ala)의 측쇄를 나타내고; 즉, R4는 메틸이다. 특정 구현예에서, R4는 페닐알라닌(Phe)의 측쇄를 나타내고; 즉, R4는 벤질이다. 특정 구현예에서, R4는 라이신(Lys)의 측쇄를 나타내고; 즉, R4는 4-아미노-부틸이다.
화학식 (II)의 특정 구현예에서, 접합체는 하기로부터 선택된다:
및
특정 구현예에서, 접합체는 하기 화학식 (III)의 것이다:
여기서 R4는 아미노산 측쇄이다.
화학식 (III)의 특정 구현예에서, 접합체는 하기로부터 선택된다:
및
화학식 (II) 및 화학식 (III)에서, 치환기 W1, W2, k, L, G, 및 R3은 화학식 (I)과 관련하여 상기 기재된 바와 같다.
상기 구조에 제시된 화학적 실체, 링커 및 접합 모이어티 중 어느 것이든지 본 화합물 및 접합체에 사용하기 위해 적응될 수 있다.
하이드라진일-인돌릴 및 하이드라진일-피롤로-피리딘일 및 접합체의 제조 방법과 관련된 추가의 개시내용은 미국 특허 제9,310,374호 및 미국 특허 제9,493,413호에서 찾아볼 수 있고, 이들의 개시내용은 본 명세서에 참조에 의해 원용된다.
접합체 생성에 유용한 화합물
본 개시내용은 본 명세서에 기재된 접합체를 생성하는 데 유용한 화합물을 제공한다. 특정 구현예에서, 화합물은 약물 또는 활성제에 부착될 수 있고, 또한 약물 또는 활성제를 폴리펩티드(예를 들어, 항체)에 접합시키는데 유용한 접합 모이어티를 포함할 수 있다. 예를 들어, 화합물의 접합 모이어티는 폴리펩티드(예를 들어, 항체)에 접합되어 약물 또는 활성제와 폴리펩티드(항체)를 함께 간접적으로 결합시킬 수 있다.
특정 구현예에서, 화합물은 하기 화학식 (IV)의 화합물이다;
여기서:
W1은 약물이고;
A는 아미노산 잔기이고, 여기서 k는 0 또는 1 내지 5의 정수이고;
L은 링커이고;
G는 접합 모이어티이고;
X1은 및 -(CHR1)j(CHR2)-로부터 선택되고;
R1은 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 치환된 헤테로사이클릴 및 R3으로부터 선택되고, 여기서 R1은 R3으로 선택적으로 치환되고;
j는 0 또는 1 내지 5의 정수이고;
R2은 R3이거나; R2은 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택되고, 여기서 R2는 R3으로 선택적으로 치환되고;
X2는 -NH- 또는 -C(O)-이고;
각각의 R3은 독립적으로 글리코시드 또는 글리코시드 유도체이다.
화학식 (IV)의 화합물과 관련하여, 치환기 W1, A, k, L, G, X1, X2, R1, j, R2, 및 R3은 화학식 (I), (II) 및 (III)의 접합체와 관련하여 상기 기재된 바와 같다.
특정 구현예에서, 화합물은 하기 화학식 (V)의 것이다:
여기서 R4는 아미노산 측쇄이다.
화학식 (V)의 특정 구현예에서, 화합물은 하기로부터 선택된다:
및
특정 구현예에서, 화합물은 하기 화학식 (VI)의 것이다:
여기서 R4는 아미노산 측쇄이다.
화학식 (VI)의 특정 구현예에서, 화합물은 하기로부터 선택된다:
및
화학식 (V) 및 화학식 (VI)에서, 치환기 W1, k, L, G, R3, 및 R4은 화학식 (I), (II) 및 (III)과 관련하여 상기 기재된 바와 같다.
폴리펩티드 및 항체
상기 언급된 바와 같이, 대상 접합체는 치환기 W2로서 폴리펩티드(예를 들어, 항체)를 포함할 수 있다. 폴리펩티드(항체)는 2-포르밀글리신(FGly) 잔기를 포함하도록 변형될 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 아미노산은 이들의 표준 명칭, 표준 3문자 약어 및/또는 표준 한문자 약어로 지칭될 수 있는데, 예컨대, 알라닌 또는 Ala 또는 A; 시스테인 또는 Cys 또는 C; 아스파르트산 또는 Asp 또는 D; 글루탐산 또는 Glu 또는 E; 페닐알라닌 또는 Phe 또는 F; 글리신 또는 Gly 또는 G; 히스티딘 또는 His 또는 H; 이소류신 또는 Ile 또는 I; 라이신 또는 Lys 또는 K; 류신 또는 Leu 또는 L; 메티오닌 또는 Met 또는 M; 아스파라긴 또는 Asn 또는 N; 프롤린 또는 Pro 또는 P; Glut아민 또는 Gln 또는 Q; 아르기닌 또는 Arg 또는 R; 세린 또는 Ser 또는 S; 트레오닌 또는 Thr 또는 T; 발린 또는 Val 또는 V; 트립토판 또는 Trp 또는 W; 및 티로신 또는 Tyr 또는 Y이다.
특정 구현예에서, 폴리펩티드 또는 항체의 아미노산 서열은 포르밀글리신 생성 효소(FGE)의 작용에 의해 생체내에서(예컨대, 세포에서 알데하이드 태그-함유 단백질의 번역 시) 또는 시험관내에서(예컨대, 무세포계에서 알데하이드 태그-함유 단백질을 FGE와 접촉시킴으로써) 2-포르밀글리신(FGly) 잔기로 전환(산화)될 수 있는 세린 또는 시스테인 잔기를 함유하는 설파타제 모티프를 포함하도록 변형된다. 이러한 설파타제 모티프는 본 명세서에서 FGE-변형 부위로도 지칭될 수 있다.
설파타제 모티프
알데하이드 태그의 최소 설파타제 모티프는 보통 길이가 5 또는 6개의 아미노산 잔기, 보통 길이가 6개 이하의 아미노산 잔기이다. Ig 폴리펩티드에 제공된 설파타제 모티프는, 길이가 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8 또는 7개 미만의 아미노산 잔기의 설파타제 모티프를 규정하기 위하여, 길이가 적어도 5 또는 6개의 아미노산 잔기이고, 예를 들면 5 내지 16, 6 내지 16, 5 내지 15, 6 내지 15, 5 내지 14, 6 내지 14, 5 내지 13, 6 내지 13, 5 내지 12, 6 내지 12, 5 내지 11, 6 내지 11, 5 내지 10, 6 내지 10, 5 내지 9, 6 내지 9, 5 내지 8, 또는 6 내지 8개의 아미노산 잔기의 길이일 수 있다.
특정 구현예에서, 관심 폴리펩티드는 폴리펩티드에서 설파타제 모티프의 서열을 제공하기 위한 천연 아미노산 서열에 비해 하나 이상의 아미노산 잔기, 예컨대, 2개 이상, 또는 3개 이상, 또는 4개 이상, 또는 5개 이상, 또는 6개 이상, 또는 7개 이상, 또는 8개 이상, 또는 9개 이상, 또는 10개 이상, 또는 11개 이상, 또는 12개 이상, 또는 13개 이상, 또는 14개 이상, 또는 15개 이상, 또는 16개 이상, 또는 17개 이상, 또는 18개 이상, 또는 19개 이상, 또는 20개 이상의 아미노산 잔기가 삽입, 결실, 치환(대체)된 것들을 포함한다. 특정 구현예에서, 폴리펩티드는 폴리펩티드의 천연 아미노산 서열에 비해 아미노산 서열의 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3 또는 2개 미만의 아미노산 잔기의 변형(삽입, 첨가, 결실 및/또는 치환/대체)을 포함한다. 폴리펩티드(예컨대, 항체)에 대해 천연인 아미노산 서열이 목적하는 설파타제 모티프의 하나 이상의 잔기를 함유하는 경우에, 잔기의 변형의 총 수는, 예컨대, 목적하는 설파타제 모티프의 서열을 제공하기 위하여 천연 아미노산 잔기에 측접하는 아미노산 잔기의 부위-특이적 변형(삽입, 첨가, 결실, 치환/대체)에 의해 저감될 수 있다. 소정의 실시형태에서, 표적 항체의 천연 아미노산 서열의 변형 정도는 최소화되어서, (예컨대, N- 또는 C-말단에) 삽입, 결실, 치환(대체) 또는 부가되는 아미노산 잔기의 수가 최소화될 수 있다. 표적 항체의 아미노산 서열 변형 정도를 최소화하는 것은 이러한 변형들이 항체 기능 및/또는 구조에 미칠 수 있는 영향을 최소화할 수 있다.
특정 관심 알데하이드 태그는 적어도 최소 설파타제 모티프("공통 설파타제 모티프"로도 지칭됨)를 포함하는 것들인 한편, 더 긴 알데하이드 태그가 본 개시내용에 의해 상정되고 포함되며 본 개시내용의 조성물 및 방법에 사용될 수 있다는 것이 쉽게 인지될 것임이 주지되어야 한다. 그러므로, 알데하이드 태그는 5 또는 6개의 잔기의 최소 설파타제 모티프를 포함할 수 있거나, 또는 더 길 수 있고 추가의 아미노산 잔기에 의해 모티프의 N- 및/또는 C-말단 쪽에서 측접될 수 있는 최소 설파타제 모티프를 포함할 수 있다. 예를 들어, 5 또는 6개 아미노산 잔기의 알데하이드 태그가 고려될 뿐만 아니라, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20개 이상의 아미노산 잔기의 더 긴 아미노산 서열이 상정된다.
알데하이드 태그는 Ig 중쇄의 C-말단에 또는 그 부근에 존재할 수 있고; 예컨대, 알데하이드 태그는 천연, 야생형 Ig 중쇄의 C-말단의 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개의 아미노산 내에 존재할 수 있다. 알데하이드 태그는 Ig 중쇄의 CH1 도메인 내에 존재할 수 있다. 알데하이드 태그는 Ig 중쇄의 CH2 도메인 내에 존재할 수 있다. 알데하이드 태그는 Ig 중쇄의 CH3 도메인 내에 존재할 수 있다. 알데하이드 태그는 Ig 경쇄 불변 영역에, 예컨대, 카파 경쇄 불변 영역 또는 람다 경쇄 불변 영역에 존재할 수 있다.
특정 구현예에서, 사용된 설파타제 모티프는 하기 식에 의해 표시될 수 있다:
여기서
Z10은 시스테인 또는 세린이고(이것은 또한 (C/S)로 표시될 수 있고);
Z20은 프롤린 또는 알라닌 잔기 중 어느 하나이고(이것은 또한 (P/A)로 표시될 수 있고);
Z30은 염기성 아미노산(예를 들어, 아르기닌(R), 그리고 라이신(K) 또는 히스티딘(H), 예컨대, 라이신일 수 있음), 또는 지방족 아미노산(알라닌(A), 글리신(G), 류신(L), 발린(V), 이소류신(I), 또는 프롤린(P), 예컨대, A, G, L, V 또는 I이고;
X1은 존재할 수 있거나 또는 존재하지 않을 수 있고, 존재할 경우, 임의의 아미노산, 예컨대, 지방족 아미노산, 황 함유 아미노산, 또는 극성, 비하전된 아미노산, (즉, 방향족 아미노산 또는 하전된 아미노산 이외의 것), 예컨대, L, M, V, S 또는 T, 예컨대, L, M, S 또는 V일 수 있고, 단 설파타제 모티프가 표적 폴리펩티드의 N-말단에 존재할 경우, X1은 존재하고; 그리고
X2 및 X3은 독립적으로, 보통 지방족 아미노산, 극성, 비하전된 아미노산, 또는 황 함유 아미노산(즉, 방향족 아미노산 또는 하전된 아미노산 이외의 것), 예컨대, S, T, A, V, G 또는 C, 예컨대, S, T, A, V 또는 G이지만, 임의의 아미노산일 수 있다.
항체 중쇄 및/또는 경쇄의 아미노산 서열은 화학식 X1Z10X2Z20X3Z30의 적어도 5개의 아미노산의 서열을 제공하도록 변형될 수 있는데, 여기서,
Z10은 시스테인 또는 세린이고;
Z20은 프롤린 또는 알라닌 잔기이고;
Z30은 지방족 아미노산 또는 염기성 아미노산이고;
X1은 존재하거나 또는 존재하지 않고, 존재할 경우, 임의의 아미노산이고, 단 이종성 설파타제 모티프가 폴리펩티드의 N-말단에 존재할 경우, X1은 존재하고;
X2 및 X3은 각각 독립적으로 임의의 아미노산이다.
설파타제 모티프는, 일반적으로, 선택된 FGE, 예컨대 알데하이드 태그 부착된 폴리펩티드가 발현되는 숙주 세포에 존재하는 FGE 또는 무세포 시험관내 방법에서 알데하이드 태그 부착된 폴리펩티드와 접촉되는 FGE에 의해 전환될 수 있도록 선택된다.
예를 들어, FGE가 진핵생물 FGE(예를 들어, 인간 FGE를 포함하여 포유류 FGE)인 경우에, 설파타제 모티프는 하기 화학식의 것일 수 있다:
여기서
X1은 존재할 수 있거나 또는 존재하지 않을 수 있고, 존재할 경우, 임의의 아미노산, 예컨대, 지방족 아미노산, 황 함유 아미노산, 또는 극성, 비하전된 아미노산, (즉, 방향족 아미노산 또는 하전된 아미노산 이외의 것), 예컨대, L, M, S 또는 V일 수 있고, 단 설파타제 모티프가 표적 폴리펩티드의 N-말단에 존재할 경우, X1은 존재하고;
X2 및 X3은 독립적으로 임의의 아미노산, 예컨대, 지방족 아미노산, 황 함유 아미노산, 또는 극성, 비하전된 아미노산, (즉, 방향족 아미노산 또는 하전된 아미노산 이외의 것), 예컨대, S, T, A, V, G 또는 C, 예컨대, S, T, A, V 또는 G일 수 있고; 그리고
Z30은 염기성 아미노산(예를 들어, 아르기닌(R), 그리고 라이신(K) 또는 히스티딘(H), 예컨대, 라이신일 수 있음), 또는 지방족 아미노산(알라닌(A), 글리신(G), 류신(L), 발린(V), 이소류신(I), 또는 프롤린(P), 예컨대, A, G, L, V 또는 I이다.
설파타제 모티프의 구현예는 LCTPSR (서열번호://), MCTPSR (서열번호://), VCTPSR (서열번호://), LCSPSR (서열번호://), LCAPSR (서열번호://), LCVPSR (서열번호://), LCGPSR (서열번호://), ICTPAR (서열번호://), LCTPSK (서열번호://), MCTPSK (서열번호://), VCTPSK (서열번호://), LCSPSK (서열번호://), LCAPSK (서열번호://), LCVPSK (서열번호://), LCGPSK (서열번호://), LCTPSA (서열번호://), ICTPAA (서열번호://), MCTPSA (서열번호://), VCTPSA (서열번호://), LCSPSA (서열번호://), LCAPSA (서열번호://), LCVPSA (서열번호://), 및 LCGPSA (서열번호://)를 포함한다.
FGly 함유 서열
변형된 항체 중쇄 및/또는 경쇄에 FGE가 작용할 때, 설파타제 모티프의 세린 또는 시스테인은 FGly로 변형된다. 그러므로, FGly 함유 설파타제 모티프는 하기 화학식의 것일 수 있다:
여기서
FGly는 포르밀글리신 잔기이고;
Z20은 프롤린 또는 알라닌 잔기 중 어느 하나이고(이것은 또한 (P/A)로 표시될 수 있고);
Z30은 염기성 아미노산(예를 들어, 아르기닌(R), 그리고 라이신(K) 또는 히스티딘(H), 보통 라이신일 수 있음), 또는 지방족 아미노산(알라닌(A), 글리신(G), 류신(L), 발린(V), 이소류신(I), 또는 프롤린(P), 예컨대, A, G, L, V, 또는 I이고;
X1은 존재할 수 있거나 또는 존재하지 않을 수 있고, 존재할 경우, 임의의 아미노산, 예컨대, 지방족 아미노산, 황 함유 아미노산, 또는 극성, 비하전된 아미노산, (즉, 방향족 아미노산 또는 하전된 아미노산 이외의 것), 예컨대, L, M, V, S 또는 T, 예컨대, L, M 또는 V일 수 있고, 단 설파타제 모티프가 표적 폴리펩티드의 N-말단에 존재할 경우, X1은 존재하고; 그리고
X2 및 X3은 독립적으로 임의의 아미노산, 예컨대, 지방족 아미노산, 황 함유 아미노산, 또는 극성, 비하전된 아미노산, (즉, 방향족 아미노산 또는 하전된 아미노산 이외의 것), 예컨대, S, T, A, V, G 또는 C, 예컨대, S, T, A, V 또는 G일 수 있다.
위에서 기재된 바와 같이, FGly 잔기를 함유하는 변형된 폴리펩티드는 FGly'-함유 설파타제 모티프를 생성하기 위해 FGly와 약물(예컨대, 위에서 기재된 바와 같이, 하이드라진일-인돌릴 또는 하이드라진일-피롤로-피리딘일 접합 모이어티를 함유하는 약물)과 반응시킴으로써 약물(예컨대, 메이탄시노이드)에 접합체될 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 FGly'는 약물, 예컨대 메이탄신 또는 아우리스타틴에 커플링된 설파타제 모티프의 변형된 아미노산 잔기를 나타낸다. 그러므로, FGly' 함유 설파타제 모티프는 하기 화학식의 것일 수 있다:
여기서
FGly'은 화학식 (I)의 변형된 아미노산 잔기이고;
Z20은 프롤린 또는 알라닌 잔기 중 어느 하나이고(이것은 또한 (P/A)로 표시될 수 있고);
Z30은 염기성 아미노산(예를 들어, 아르기닌(R), 그리고 라이신(K) 또는 히스티딘(H), 보통 라이신일 수 있음), 또는 지방족 아미노산(알라닌(A), 글리신(G), 류신(L), 발린(V), 이소류신(I), 또는 프롤린(P), 예컨대, A, G, L, V, 또는 I이고;
X1은 존재할 수 있거나 또는 존재하지 않을 수 있고, 존재할 경우, 임의의 아미노산, 예컨대, 지방족 아미노산, 황 함유 아미노산, 또는 극성, 비하전된 아미노산, (즉, 방향족 아미노산 또는 하전된 아미노산 이외의 것), 예컨대, L, M, V, S 또는 T, 예컨대, L, M 또는 V일 수 있고, 단 설파타제 모티프가 표적 폴리펩티드의 N-말단에 존재할 경우, X1은 존재하고; 그리고
X2 및 X3은 독립적으로 임의의 아미노산, 예컨대, 지방족 아미노산, 황 함유 아미노산, 또는 극성, 비하전된 아미노산, (즉, 방향족 아미노산 또는 하전된 아미노산 이외의 것), 예컨대, S, T, A, V, G 또는 C, 예컨대, S, T, A, V 또는 G일 수 있다.
변형 부위
위에서 언급된 바와 같이, 항체의 아미노산 서열은 FGE의 작용에 의해 생체내에서(예컨대 세포에서 알데하이드 태그-함유 단백질의 번역 시) 또는 시험관내에서(예컨대 무세포계(cell-free system)에서 알데하이드 태그-함유 단백질을 FGE와 접촉시킴으로써) FGly 잔기로 전환(산화)될 수 있는 세린 또는 시스테인 잔기를 함유하는 설파타제 모티프를 포함하도록 변형된다. 본 개시내용의 접합체를 생성하는데 사용되는 항체는 적어도 Ig 불변 영역, 예컨대, Ig 중쇄 불변 영역(예를 들어, 적어도 CH1 도메인; 적어도 CH1 및 CH2 도메인; CH1, CH2 및 CH3 도메인; 또는 CH1, CH2, CH3 및 CH4 도메인), 또는 Ig 경쇄 불변 영역을 포함한다. 이러한 Ig 폴리펩티드는 본 명세서에서 "표적 Ig 폴리펩티드" 또는 "표적 항체"로 지칭된다.
설파타제 모티프가 도입되는 항체의 부위는 임의의 편리한 부위일 수 있다. 위에서 언급된 바와 같이, 일부 사례에서, 표적 폴리펩티드의 천연 아미노산 서열의 변형 정도는, 삽입되고, 결실되고, 치환(대체)되며 그리고/또는 (예를 들어 N- 또는 C-말단에) 첨가되는 아미노산 잔기의 수를 최소화시키기 위해, 최소화된다. 표적 항체의 아미노산 서열 변형 정도를 최소화하는 것은 이러한 변형들이 항체 기능 및/또는 구조에 미칠 수 있는 영향을 최소화할 수 있다.
항체 중쇄 불변 영역은 임의의 중쇄 이소타입의 Ig 불변 영역, 비천연 유래 Ig 중쇄 불변 영역(공통 Ig 중쇄 불변 영역 포함)을 포함할 수 있다. Ig 불변 영역은 알데하이드 태그를 포함하도록 변형될 수 있고, 여기서 알데하이드 태그는 Ig 불변 영역의 용매-접근 가능한 루프 영역에 또는 그에 인접하여 존재한다. Ig 불변 영역은, 위에서 기재된 바와 같은 설파타제 모티프의 아미노산 서열을 제공하기 위하여 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 또는 16개의 아미노산, 또는 16개 이상의 아미노산의 삽입 및/또는 치환에 의해 변형될 수 있다.
몇몇 경우에, 알데하이드-태그 부착된 항체는 알데하이드-태그 부착된 Ig 중쇄 불변 영역(예를 들어, 적어도 CH1 도메인; 적어도 CH1 및 CH2 도메인; CH1, CH2 및 CH3 도메인; 또는CH1, CH2, CH3 및 CH4 도메인)을 포함한다. 알데하이드 태그 부착된 Ig 중쇄 불변 영역은, FGE에 의해 FGly-변형된 Ig 폴리펩티드를 생성하도록 변형될 수 있는 적어도 하나의 설파타제 모티프를 포함하도록 변형된, IgA, IgM, IgD, IgE, IgG1, IgG2, IgG3, 또는 IgG4 이소타입 중쇄 또는 이것의 임의의 알로타입 변종의 중쇄 불변 영역 서열, 예컨대, 인간 중쇄 불변 영역 서열 또는 마우스 중쇄 불변 영역 서열, 하이브리드 중쇄 불변 영역, 합성 중쇄 불변 영역, 또는 공통 중쇄 불변 영역 서열 등을 포함할 수 있다. Ig 중쇄의 알로타입 변종은 당업계에 공지되어 있다. 예컨대, 문헌[Jefferis 및 Lefranc (2009) MAbs 1:4]을 참조한다.
몇몇 경우에, 알데하이드-태그 부착된 항체는 알데하이드-태그 부착된 Ig 경쇄 불변 영역을 포함한다. 알데하이드-태그 부착된 Ig 경쇄 불변 영역은, FGE에 의해 FGly-변형된 항체를 생성하도록 변형될 수 있는 적어도 하나의 설파타제 모티프를 포함하도록 변형된, 카파 경쇄, 람다 경쇄의불변 영역 서열, 예컨대, 인간 카파 또는 람다 경쇄 불변 영역, 하이브리드 경쇄 불변 영역, 합성 경쇄 불변 영역, 또는 공통 경쇄 불변 영역 서열 등을 포함할 수 있다. 예시적인 불변 영역은 인간 감마 1 및 감마 3 영역을 포함한다. 설파타제 모티프를 제외하고, 변형된 불변 영역은 야생형 아미노산 서열을 가질 수 있거나, 또는 이것은 야생형 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한(예를 들어, 적어도 80%, 적어도 90% 또는 적어도 95% 동일한) 아미노산 서열을 가질 수 있다.
일부 구현예에서, 설파타제 모티프는 Ig 폴리펩티드 중쇄의 C-말단 이외의 위치에, 또는 부가해서 C-말단에위치된다. 위에서 언급된 바와 같이, 단리된 알데하이드-태그 부착된 항체는 위에서 기재된 바와 같은 설파타제 모티프를 포함하도록 변형된 중쇄 불변 영역을 포함할 수 있는데, 여기서 설파타제 모티프는 항체 중쇄 불변 영역에 또는 그에 인접한 곳에 있다.
설파타제 모티프는 Ig 중쇄의 이러한 변형 부위의 이들 아미노산 서열 중 하나 이상 내에 또는 이에 인접하여 제공될 수 있다. 예를 들어, Ig 중쇄 폴리펩티드는 이들 변형 부위에 대해서 인접하여 N-말단에 그리고/또는 인접하여 C-말단에 설파타제 모티프를 제공하도록 이들 아미노산 서열의 하나 이상에서 변형될 수 있다(예를 들어, 여기서 변형은 1개 이상의 아미노산 잔기 삽입, 결실 및/또는 치환을 포함한다). 대안적으로 또는 부가적으로, Ig 중쇄 폴리펩티드는 Ig 중쇄 변형 부위의 임의의 2개의 잔기 사이에 설파타제 모티프를 제공하도록 이들 아미노산 서열의 하나 이상에서 변형될 수 있다(예를 들어, 여기서 변형은 1개 이상의 아미노산 잔기 삽입, 결실 및/또는 치환을 포함한다). 일부 구현예에서, Ig 중쇄 폴리펩티드는 2개의 모티프를 포함하도록 변형될 수 있는데, 이들은 서로 인접할 수 있거나, 또는 1, 2, 3, 4개 이상(예를 들어, 약 1 내지 약 25, 약 25 내지 약 50, 또는 약 50 내지 약 100개, 또는 그 이상의 아미노산에 의해 분리될 수 있다. 대안적으로 또는 부가적으로, 천연 아미노산 서열이 설파타제 모티프 서열의 1개 이상의 아미노산 잔기를 제공하는 경우, Ig 중쇄 폴리펩티드 아미노산 서열의 변형 부위의 선택된 아미노산 잔기는 변형 부위에 설파타제 모티프를 제공하도록 변형될 수 있다(예를 들어, 여기서 변형은 1개 이상의 아미노산 잔기 삽입, 결실 및/또는 치환을 포함한다).
본 개시내용의 항체-약물 접합체에 사용되는 항체는 임의의 다양한 항원 결합 특이성을 가질 수 있으며, 예를 들어 암세포에 존재하는 항원; 자가면역 세포에 존재하는 항원; 병원성 미생물에 존재하는 항원; 바이러스에 감염된 세포(예를 들어, 인간 면역결핍 바이러스에 감염된 세포)에 존재하는 항원; 질환 세포에 존재하는 항원 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 예를 들어, 항체 접합체는 항원에 결합할 수 있으며, 여기서 항원은 세포 표면에 존재한다. 본 개시내용의 항체 접합체는 적합한 결합 친화도, 예를 들어, 5 x 10-6 M 내지 10-7 M, 10-7 M 내지 5 x 10-7 M, 5 x 10-7 M 내지 10-8 M, 10-8 M 내지 5 x 10-8 M, 5 x 10-8 M 내지 10-9 M, 또는 10-9 M 초과의 결합 친화도로 항원에 결합할 수 있다.
비제한적 예로서, 대상 항체 접합체는 암 세포에 존재하는 항원(예를 들어, 종양-특이적 항원; 암 세포 상에서 과발현되는 항원 등)에 결합할 수 있고, 접합된 모이어티는 세포독성 화합물 (예를 들어, 세포독성 소분자, 세포독성 합성 펩티드, 등)과 같은 약물일 수 있다. 예를 들어, 대상 항체 접합체는 암 세포 상의 항원에 대해 특이적일 수 있으며, 여기서 접합된 모이어티는 세포독성 화합물(예를 들어, 세포독성 소분자, 세포독성 합성 펩티드 등)과 같은 약물이다.
추가의 비제한적 예로서, 대상 항체 접합체는 바이러스로 감염된 세포 상에 존재하는 항원(예를 들어, 항원이 바이러스에 의해 암호화되는 경우; 항원이 바이러스에 의해 감염된 세포 유형에서 발현되는 경우)에 결합할 수 있고, 접합 모이어티는 바이러스 융합 억제제와 같은 약물일 수 있다. 예를 들어, 대상 항체 접합체는 바이러스로 감염된 세포 상에 존재하는 항원에 결합할 수 있고 접합 모이어티는 바이러스 융합 억제제와 같은 약물일 수 있다.
폴리펩티드에의 접합을 위한 약물
상기 언급된 바와 같이, 본 개시내용의 접합체 또는 화합물은 치환기 W1로서 약물 또는 활성제를 포함할 수 있다. 다수의 약물 중 임의의 것이 항체에 접합하기 위한 반응성 파트너로서 사용하기에 적합하거나 사용하기에 적합하도록 변형될 수 있다. 약물의 예는 소분자 약물 및 펩티드 약물을 포함한다.
본 명세서에 사용된 "소분자 약물"은 관심 약제학적 활성을 나타내고 일반적으로 분자량이 800 Da 이하 또는 2000 Da 이하이지만, 최대 5kDa의 분자를 포괄할 수 있고 10 kDa만큼 클 수 있는 화합물, 예를 들어 유기 화합물을 지칭한다. 작은 무기 분자는 탄소 원자를 포함하지 않는 분자를 의미하는 반면, 작은 유기 분자는 적어도 하나의 탄소 원자를 함유하는 화합물을 지칭한다.
예를 들어, 약물 또는 활성제는 캄프토테신, 또는 이의 유사체 또는 유도체, 또는 약제학적 활성 캄프토테신 모이어티 및/또는 이의 부분일 수 있다. 폴리펩티드에 접합된 메이탄신은, 제한 없이, 본 명세서에 기재된 바와 같은 메이탄신 및 이의 유사체 및 유도체와 같은 다양한 메이탄시노이드 모이어티 중 임의의 것일 수 있다. 본 명세서에 기재된 접합체 및 화합물에서 사용되는 약물의 예는 캄프토테신 또는 캄프토테신 유도체, 예컨대 SN-38, 벨로테칸, 엑사테칸, 9-아미노캄프토테신 (9-AC), 이의 유도체 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
다른 구현예에서, 약물 또는 활성제는 메이탄신일 수 있다. "메이탄신", "메이탄신 모이어티", "메이탄신 활성제 모이어티" 및 "메이탄시노이드"는 메이탄신 및 유사체 및 이들의 유도체, 및 약제학적 활성 메이탄신 모이어티 및/또는 이의 부분을 지칭한다. 폴리펩티드에 접합된 메이탄신은, 제한 없이, 본 명세서에 기재된 바와 같은 메이탄신 및 이의 유사체 및 유도체(예를 들어, 데아실메이탄신)와 같은 다양한 메이탄시노이드 모이어티 중 임의의 것일 수 있다.
다른 사례에서, 약물 또는 활성제는 아우리스타틴, 또는 이의 유사체 또는 유도체, 또는 약제학적 활성 아우리스타틴 모이어티 및/또는 이의 부분일 수 있다. 폴리펩티드에 접합된 아우리스타틴은, 제한 없이, 본 명세서에 기재된 바와 같은 아우리스타틴 및 이의 유사체 및 유도체와 같은 다양한 아우리스타틴 모이어티 중 임의의 것일 수 있다. 본 명세서에 기재된 접합체 및 화합물에서 사용되는 약물의 예는 아우리스타틴 또는 아우리스타틴 유도체, 예컨대 모노메틸 아우리스타틴 D (MMAD), 모노메틸 아우리스타틴 E (MMAE), 모노메틸 아우리스타틴 F (MMAF), 이의 유도체, 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
다른 사례에서, 약물 또는 활성제는 듀오카르마이신, 또는 이의 유사체 또는 유도체, 또는 약제학적 활성 듀오카르마이신 모이어티 및/또는 이의 부분일 수 있다. 폴리펩티드에 접합된 듀오카르마이신은, 제한 없이, 본 명세서에 기재된 바와 같은 듀오카르마이신 및 이의 유사체 및 유도체와 같은 다양한 듀오카르마이신 모이어티 중 임의의 것일 수 있다. 본 명세서에 기재된 접합체 및 화합물에서 사용되는 약물의 예는 듀오카르마이신 또는 듀오카르마이신 유도체, 예컨대 듀오카르마이신 A, 듀오카르마이신 B1, 듀오카르마이신 B2, 듀오카르마이신 C1, 듀오카르마이신 C2, 듀오카르마이신 D, 듀오카르마이신 SA, 및 CC-1065, 이의 유도체, 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 일부 구현예에서, 듀오카르마이신은 아도젤레신, 바이젤레신 또는 카르젤레신과 같으나 이에 제한되지 않는 듀오카르마이신 유사체이다.
특정 구현예에서, 약물은 세포독소, 키나제 억제제, 면역자극제, 톨 유사 수용체(TLR) 효능제, 올리고뉴클레오티드, 압타머, 사이토카인, 스테로이드 및 펩티드로부터 선택된다.
예를 들어, 세포독소는 세포사(예를 들어, 괴사 또는 세포자멸) 또는 세포 생존력의 감소를 초래하는 임의의 화합물을 포함할 수 있다.
키나아제 억제제는 아다보세르팁, 아파티닙, 악시티닙, 보수티닙, 세툭시맙, 코비메티닙, 크리조티닙, 카보잔티닙, 다코미티닙, 다사티닙, 엔트렉티닙, 에르다피티닙, 에를로티닙, 포스타마티닙, 게피티닙, 이브루티닙, 이마티닙, 라파티닙, 렌바티닙, 무브리티닙, 닐로티닙, 파조파닙, 페갑타닙, 룩솔리티닙, 소라페닙, 수니티닙, 투카티닙, 반데타닙, 베무라페닙, 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
면역자극제는 백신(예를 들어, 박테리아 또는 바이러스 백신), 콜로니 자극 인자, 인터페론, 인터루킨 등을 포함할 수 있지만 이에 제한되지 않는다. TLR 효능제는 이미퀴모드, 레시퀴모드 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
올리고뉴클레오티드 약물은 포미비르센, 페갑타닙, 미포메르센, 에테플러센, 데피브로티드, 누시네르센, 골로디르센, 빌토라르센, 볼라네소르센, 이노테르센, 토페르센, 토미네르센 등을 포함하나 이에 제한되지 않는다.
압타머 약물은 페갑타닙, AS1411, REG1, ARC1779, NU172, ARC1905, E10030, NOX-A12, NOX-E36 등을 포함하나 이에 제한되지 않는다.
사이토카인은 알빈테르페론 알파-2B, 알데스류킨, ALT-801, 아나킨라, 안세스팀, 아보테르민, 발루그라스팀, 벰페갈데스류킨, 비네트라킨, 신트레데킨 베수도톡스, CTCE-0214, 다르베포에틴 알파, 데닐류킨 디프티톡스, 둘라네르민, 에도데킨 알파, 엠필레르민, 에포에틴 델타, 에리트로포이에틴, 인간 인터류킨-2, 인터페론 알파, 인터페론 알파-2c, 인터페론 알파-n1, 인터페론 알파-n3, 인터페론 알파콘-1, 인터페론 베타-1a, 인터페론 베타-1b, 인터페론 감마-1b, 인터페론 카파, 인터류킨-1 알파, 인터류킨-10, 인터류킨-7, 레노그라스팀, 레리디스팀, 리페그필그라스팀, 로루카푸스프 알파, Maxy-G34, 메톡시 폴리에틸렌 글리콜-에포에틴 베타, 몰그라모스팀, 무플레스팀, 나그레스티펜, 오프렐베킨, 페그필그라스팀, 페길로데카킨, 페그인터페론알파-2a, 페그인터페론알파-2b, 페그인터페론 베타-1a, 페그인터페론람다-1a, 재조합체 CD40-리간드, 레그라모스팀, 로미플로스팀, 사르그라모스팀, 트롬보포이에틴, 투코투주맙 셀모류킨, 바이러스 대식세포 염증 단백질 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
스테로이드 약물은 프레드니솔론, 베타메타손, 덱사메타손, 히드로코르티손, 메틸프레드니솔론, 데플라자코르트 등을 포함하나 이에 제한되지 않는다.
본 명세에서 사용된 "펩티드 약물"은 아미노산 함유 중합체 화합물을 의미하고, 천연 발생 및 비-천연 발생 펩티드, 올리고펩티드, 고리형 펩티드, 폴리펩티드 및 단백질 뿐만 아니라 펩티드 모방체를 포괄하는 것을 의미한다. 펩티드 약물은 화학적 합성에 의해 얻어지거나 유전적으로 암호화된 공급원(예를 들어, 재조합 공급원)으로부터 생산될 수 있다. 펩티드 약물은 분자량이 다양할 수 있으며 분자량이 200 Da 내지 10 kDa 또는 그 초과일 수 있다. 적합한 펩티드는 세포독성 펩티드; 혈관신생 펩티드; 항혈관형성 펩티드; B 세포를 활성화시키는 펩티드; T 세포를 활성화시키는 펩티드; 항바이러스 펩티드; 바이러스 융합을 억제하는 펩티드; 하나 이상의 림프구 집단의 생산을 증가시키는 펩티드; 항미생물 펩티드; 성장인자; 성장 호르몬 방출 인자; 혈관활성 펩티드; 항염증 펩티드; 포도당 대사를 조절하는 펩티드; 항혈전성 펩티드; 항통각성 펩티드; 혈관확장 펩티드; 혈소판 응집 억제제; 진통제; 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
본 명세서에 기재된 접합체 및 화합물에서 사용되는 약물의 추가 예는 튜불라이신 M, 칼리케아미신, STAT3 억제제, 알파-아마니틴, 오로라 키나제 억제제, 벨로테칸 및 안트라사이클린을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
약물의 다른 예는 소분자 약물, 예컨대, 암 화학요법제를 포함한다. 예를 들어, 폴리펩티드가 종양 세포에 대한 특이성을 갖는 항체(또는 이의 단편)인 경우, 항체는 변형된 아미노산을 포함하도록 본 명세서에 기재된 것과 같이 변형될 수 있고, 이것은 계속해서 암 화학요법제에 접합될 수 있다. 암 화학요법제는 암 세포의 증식을 감소시키는 비-펩타이드성 (즉, 비-단백질성) 화합물이고, 세포독성 제제 및 및 세포증식억제성 제제를 포함한다. 화학치료적 제제의 비-제한 예는 알킬화 제제, 니트로소우레아, 항대사물질, 항종양 항생제, 식물 (빈카) 알칼로이드, 및 스테로이드 호르몬을 포함한다. 펩티드 화합물도 사용할 수 있다.
적합한 암 화학요법제는 돌라스타틴 및 활성 유사체 및 이의 유도체; 및 아우리스타틴 및 활성 유사체 및 이의 유도체 (예를 들어, 모노메틸 아우리스타틴 D (MMAD), 모노메틸 아우리스타틴 E (MMAE), 모노메틸 아우리스타틴 F (MMAF), 등)을 포함한다. 예를 들어, 문헌[WO 96/33212, WO 96/14856, 및 미국 6,323,315] 참고. 예를 들어, 돌라스타틴 10 또는 아우리스타틴 PE가 본 개시내용의 항체-약물 접합체에 포함될 수 있다. 적합한 암 화학요법제는 또한 메이탄시노이드 및 이의 활성 유사체 및 유도체(예를 들어, 문헌[EP 1391213; 및 Liu et al(1996) Proc . Natl . Acad. Sci . USA 93:8618-8623] 참고); 듀오카르마이신 및 이의 활성 유사체 및 유도체(예를 들어, 합성 유사체, KW-2189 및 CB 1-TM1 포함); 및 벤조디아제핀 및 이의 활성 유사체 및 유도체(예를 들어, 피롤로벤조디아제핀(PBD))을 포함한다.
세포성 증식을 감소시키는 작용을 하는 제제는 당업계에서 알려지고 널리 사용된다. 그러한 제제는, 비제한적으로, 메클로레타민, 사이클로포스파미드 (CytoxanTM), 멜팔란 (L-사르콜리신), 카르무스틴 (BCNU), 로무스틴 (CCNU), 세무스틴 (메틸-CCNU), 스트렙토조신, 클로로조토신, 우라실 머스타드, 클로르메틴, 이포스파미드, 클로람부실에틸렌, 피포브로만, 트리에틸렌멜라민, 트리에틸렌티오포스포라민, 부술판, 다카르바진, 및 테모졸로미드를 포함하는 알킬화 제제, 예컨대 질소 머스타드, 니트로소우레아, 에틸렌이민 유도체, 알킬 술포네이트, 및 트리아젠을 포함한다.
항대사물질 제제는, 비제한적으로, 시타라빈 (CYTOSAR-U), 시토신 아라비노시드, 플루오로우라실 (5-FU), 플록수리딘 (FudR), 6-티오구아닌, 6-메르캅토퓨린 (6-MP), 펜토스타틴, 5-플루오로우라실 (5-FU), 메토트렉세이트, 10-프로파길-5,8-디데아자폴레이트 (PDDF, CB3717), 5,8-디데아자테트라하이드로엽산 (DDATHF), 류코보린, 플루다라빈 포스페이트, 펜토스타틴, 및 젬시타빈을 포함하는 엽산 유사체, 피리미딘 유사체, 퓨린 유사체, 및 아데노신 데아미나제 억제제를 포함한다.
적합한 자연 산물 및 그들의 유도체, (예를 들면, 빈카 알칼로이드, 항종양 항생제, 효소, 림포카인, 및 에피포도필로톡신)은, 비제한적으로, Ara-C, 파클리탁셀 (Taxol®), 도세탁셀 (Taxotere®), 데옥시코포르마이신, 미토마이신-C, L-아스파라기나제, 아자티오프린; 브레퀴나르; 알칼로이드, 예를 들면 빈크리스틴, 빈블라스틴, 비노렐빈, 빈데신, 등; 포도필로톡신, 예를 들면 에토포시드, 테니포시드 등; 항생제, 예를 들면 안트라사이클린, 다우노루비신 하이드로클로라이드 (다우노마이신, 루비도마이신, 세루비딘), 이다루비신, 독소루비신, 에피루비신 및 모르폴리노 유도체 등; 페녹시존 비스사이클로펩티드, 예를 들면 닥티노마이신; 염기성 글리코펩티드, 예를 들면 블레오마이신; 안트라퀴논 글리코시드, 예를 들면 플리카마이신 (미트라마이신); 안트라세네디온, 예를 들면 미톡산트론; 아지리노피롤로 인돌레디온, 예를 들면 미토마이신; 거대환식 면역억압제, 예를 들면 사이클로스포린, FK-506 (타크롤리무스, 프로그라프), 라파마이신 등; 및 기타 등등을 포함한다.
다른 항-증식성 세포독성 제제는 나벨벤, CPT-11, 아나스트로졸, 레트라졸, 카페시타빈, 렐록사핀, 사이클로포스파미드, 이포스파미드, 및 드롤록사핀이다.
항증식성 활성을 갖는 미세소관 영향 제제는 또한 사용에 적합하고, 비제한적으로, 알로콜히신 (NSC 406042), 할리콘드린(Halichondrin) B (NSC 609395), 콜히친 (NSC 757), 콜히친 유도체 (예를 들면, NSC 33410), 돌스타틴 10 (NSC 376128), 메이탄신 (NSC 153858), 리족신 (NSC 332598), 파클리탁셀 (Taxol®), Taxol® 유도체, 도세탁셀 (Taxotere®), 티오콜히신 (NSC 361792), 트리틸 시스테린, 빈블라스틴 술페이트, 빈크리스틴 술페이트, 비제한적으로, 에오프틸론 A, 에포틸론 B, 디스코더몰리드를 포함하는 자연 및 합성 에포틸론; 에스트라무스틴, 노코다졸, 및 기타 등등을 포함한다.
사용에 적합한 호르몬 조절제 및 (합성 유사체를 포함하는) 스테로이드는, 비제한적으로, 아드레노코르티코스테로이드, 예를 들면 프레드니손, 덱사메타손 등; 에스트로겐 및 프레게스틴, 예를 들면 하이드록시프로게스테론 카프로에이트, 메드록시프로게스테론 아세테이트, 메게스트롤 아세테이트, 에스트라디올, 클로미펜, 타목시펜; 등; 및 부신피질 억압제, 예를 들면 아미노글루테티미드; 17α-에티닐에스트라디올; 디에틸스틸베스트롤, 테스토스테론, 플루옥시메스테론, 드로모스타놀론 프로피오네이트, 테스토락톤, 메틸프레드니솔론, 메틸- 테스토스테론, 프레드니솔론, 트리암시놀론, 클로로트리아니센, 하이드록시프로게스테론, 아미노글루테티미드, 에스트라무스틴, 메드록시프로게스테론 아세테이트, 류프롤라이드, 플루타미드(Flutamide) (Drogenil), 토레미펜(Toremifene) (Fareston), 및 Zoladex®를 포함한다. 에스트로겐은 증식 및 분화를 자극시키고, 그러므로 에스트로겐 수용체에 결합하는 화합물은 이 활성을 차단하는데 사용된다. 코르티코스테로이드는 T 세포 증식을 억제시킬 수 있다.
다른 적합한 화학치료적 제제는 금속 착물, 예를 들면 시스플라틴 (cis-DDP), 카보플라틴, 등; 우레아, 예를 들면 하이드록시우레아; 및 하이드라진, 예를 들면 N-메틸하이드라진; 에피도필로톡신; 토포이소머라제 억제제; 프로카르바진; 미톡산트론; 류코보린; 테가푸르; 등을 포함한다. 다른 관심의 항-증식성 제제는 면역억제제, 예를 들면 마이코페놀산, 탈리도미드, 데속시스페구알린, 아자스포린, 레플루노미드, 미조리빈, 아자스피란 (SKF 105685); Iressa® (ZD 1839, 4-(3-클로로-4-플루오로페닐아미노)-7- 메톡시-6-(3-(4-모르폴리닐)프로폭시)퀴나졸린 ); 등을 포함한다.
탁산이 사용하기에 적합하다. "탁산"은 파클리탁셀, 뿐만 아니라 임의의 활성 탁산 유도체 또는 전구약물을 포함한다. (본원에 유사체, 제형, 및 유도체 예컨대, 예를 들어, 도세탁셀, TAXOLTM, TAXOTERETM (도세탁셀의 제형), 파클리탁셀의 10-데스아세틸 유사체 및 파클리탁셀의 3'N-데스벤조일-3'N-t-부톡시카르보닐 유사체를 포함하는 것으로 이해되어야 하는) "파클리탁셀"은 당업자에게 공지된 기술을 이용하여 쉽게 제조될 수 있거나(또한 문헌[WO 94/07882, WO 94/07881, WO 94/07880, WO 94/07876, WO 93/23555, WO 93/10076; 미국 특허 제5,294,637호; 제5,283,253호; 제5,279,949호; 제5,274,137호; 제5,202,448호; 제5,200,534호; 제5,229,529호; 및 EP 590,267] 참고), 예를 들어 미국 미주리주 세인트 루이스 소재의 Sigma Chemical Co.(탁서스 브레비폴리아(Taxus brevifolia)의 T7402; 또는 탁서스 얀나넨시스(Taxus yannanensis)의 T-1912)를 포함하는 다양한 상업적 공급원으로부터 입수할 수 있다.
파클리탁셀은 파클리탁셀의 일반 화학적으로 이용가능한 형태뿐 아니라, 유사체 및 유도체 (예를 들면, 상기 언급된 대로, TaxotereTM 도세탁셀) 및 파클리탁셀 접합체 (예를 들면, 파클리탁셀-PEG, 파클리탁셀-덱스트란, 또는 파클리탁셀-자일로스)를 지칭하는 것으로 이해되어야 한다.
용어 "탁산" 내에 또한 포함된 것은 양쪽 친수성 유도체, 및 소수성 유도체를 포함하는 다양한 알려진 유도체이다. 탁산 유도체는, 비제한적으로, 국제 특허 출원 제WO 99/18113호에서 기재된 갈락토스 및 만노스 유도체; WO 99/14209에서 기재된 피페라지노 및 다른 유도체; WO 99/09021, WO 98/22451, 및 미국 특허 제5,869,680호에서 기재된 탁산 유도체; WO 98/28288에서 기재된 6-티오 유도체; 미국 특허 제5,821,263호에서 기재된 술펜아미드 유도체; 및 미국 특허 제5,415,869호에서 기재된 탁솔 유도체를 포함한다. 비제한적으로, WO 98/58927; WO 98/13059; 및 미국 특허 제5,824,701호에서 기재된 것들을 포함하는 파클리탁셀의 전구약물을 추가로 포함한다.
사용하기에 적합한 생물학적 반응 조절제는 (1) 티로신 키나제(RTK) 활성의 억제제; (2) 세린/트레오닌 키나제 활성 억제제; (3) 종양 항원에 특이적으로 결합하는 항체와 같은 종양 관련 항원 길항제; (4) 세포자멸 수용체 효능제; (5) 인터류킨-2; (6) IFN-α; (7) IFN-γ; (8) 콜로니 자극 인자; 및 (9) 혈관신생의 억제제를 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
약물의 예는 소분자 약물, 예컨대, 암 화학요법제를 포함한다. 예를 들어, 폴리펩티드가 종양 세포에 대한 특이성을 갖는 항체(또는 이의 단편)인 경우, 항체는 변형된 아미노산을 포함하도록 본 명세서에 기재된 것과 같이 변형될 수 있고, 이것은 계속해서 암 화학요법제, 예컨대, 미세소관 제제에 접합될 수 있다. 특정 구현예에서, 약물은 항증식 활성을 가지는 미세소관 작용제, 예컨대, 메이탄시노이드이다.
본 개시내용의 구현예는 항체가 1개 이상의 약물 모이어티, 예컨대, 2개의 약물 모이어티, 3개의 약물 모이어티, 4개의 약물 모이어티, 5개의 약물 모이어티, 6개의 약물 모이어티, 7개의 약물 모이어티, 8개의 약물 모이어티, 9개의 약물 모이어티, 또는 10개 이상의 약물 모이어티에 접합된 접합체이다. 약물 모이어티는, 본 명세서에 기재된 바와 같이, 항체의 하나 이상의 부위에서 항체에 접합될 수 있다. 특정 구현예에서, 접합체는 0.1 내지 10, 또는 0.5 내지 10, 또는 1 내지 10, 예컨대, 1 내지 9, 또는 1 내지 8, 또는 1 내지 7, 또는 1 내지 6, 또는 1 내지 5, 또는 1 내지 4, 또는 1 내지 3, 또는 1 내지 2의 범위의 평균 약물-대-항체 비(DAR)(몰비)를 갖는다. 특정 구현예에서, 접합체는 1 내지 2, 예컨대, 1, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9 또는 2의 평균 DAR을 갖는다. 특정 구현예에서, 접합체는 1 내지 5의 평균 DAR을 갖는다. 특정 구현예에서, 접합체는 1 내지 4의 평균 DAR을 갖는다. 특정 구현예에서, 접합체는 1 내지 3의 평균 DAR을 갖는다. 특정 구현예에서, 접합체는 1 내지 2의 평균 DAR을 갖는다. 평균은 산술적 평균을 의미한다.
폴리펩티드에 접합될 약물은 폴리펩티드와의 반응을 위한 반응성 파트너를 포함하도록 변형될 수 있다. 약물이 펩티드 약물인 경우, 반응성 모이어티(예를 들어, 아미노옥시 또는 하이드라지드)은 N-말단 영역, N-말단, C-말단 영역, C-말단 또는 펩티드 내부 위치에 위치할 수 있다. 예를 들어, 방법의 예는 아미노옥시 기를 갖는 펩티드 약물을 합성하는 것을 수반한다. 이 예에서, 펩티드는 Boc 보호 전구체에서 합성된다. 펩티드의 아미노 기는 카복실산 기와 옥시-N-Boc기를 포함하는 화합물과 반응할 수 있다. 예를 들어, 펩티드의 아미노 기는 3-(2,5-디옥소피롤리딘-1-일옥시)프로판산과 반응한다. 카복실산 기 및 옥시-N-보호 기를 포함하는 화합물에 대한 다른 변형은 알킬렌 링커 내의 상이한 수의 탄소 및 알킬렌 링커 상의 치환기를 포함할 수 있다. 펩티드의 아미노 기와 카복실산 기 및 옥시-N-보호기를 포함하는 화합물 사이의 반응은 표준 펩티드 커플링 화학을 통해 일어난다. 사용될 수 있는 펩티드 커플링 시약의 예는 DCC (디사이클로헥실카보디이미드), DIC (디이소프로필카보디이미드), 디-p-톨루오일카보디이미드, BDP (1-벤조트리아졸 디에틸포스페이트-1-사이클로헥실-3-(2-모폴리닐에틸)카보디이미드), EDC (1-(3-디메틸아미노프로필-3-에틸-카보디이미드 하이드로클로라이드), 시아누르산 플루오라이드, 시아누르산 클로라이드, TFFH (테트라메틸 플루오로포름아미디늄 헥사플루오로포스포스페이트), DPPA (디페닐포스포르아지데이트), BOP (벤조트리아졸-1-일옥시트리스(디메틸아미노)포스포늄 헥사플루오로포스페이트), HBTU (O-벤조트리아졸-1-일-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트), TBTU (O-벤조트리아졸-1-일-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트), TSTU (O-(N-석신이미딜)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트), HATU (N-[(디메틸아미노)-1-H-1,2,3-트리아졸로[4,5,6]-피리딘-1-일메틸렌]- -N-메틸메탄아미늄 헥사플루오로포스페이트 N-산화물), BOP-Cl (비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스핀산 클로라이드), PyBOP ((1-H-1,2,3-벤조트리아졸-1-일옥시)-트리스(피롤리디노)포스포늄 테트라플루오로포스페이트), BrOP (브로모트리스(디메틸아미노)포스포늄 헥사플루오로포스페이트), DEPBT (3-(디에톡시포스포릴옥시)-1,2,3-벤조트리아진-4(3H)-온) PyBrOP (브로모트리스(피롤리디노)포스포늄 헥사플루오로포스페이트)를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 비제한적 예로서, HOBt 및 DIC는 펩티드 커플링 시약으로 사용될 수 있다.
N-보호기를 포함하는 펩티드에 대해 아미노-옥시 관능기를 노출시키는 탈보호를 수행한다. 예를 들어 N-옥시석신이미드 기의 탈보호는 사이클릭 아미드 기에 대한 표준 탈보호 조건에 따라 발생한다. 탈보호 조건은 문헌[Greene 및 Wuts, Protective Groups in Organic Chemistry, 3판., 1999, John Wiley & Sons, NY 및 Harrison 등]에서 찾을 수 있다. 특정 탈보호 조건에는 하이드라진 시약, 아미노 시약 또는 수소화붕소나트륨이 포함된다. Boc 보호기의 탈보호는 TFA로 발생할 수 있다. 탈보호를 위한 다른 시약에는 하이드라진, 메틸하이드라진, 페닐하이드라진, 수소화붕소나트륨 및 메틸아민이 포함되나 이에 제한되지 않는다. 생성물 및 중간체는 HPLC 정제와 같은 종래의 수단으로 정제될 수 있다.
당업자는 pH 및 입체 장애(즉, 관심 있는 반응 파트너와의 반응에 대한 아미노산 잔기의 접근성)와 같은 인자가 중요하다는 것을 인식할 것이다. 최적의 접합 조건을 제공하기 위해 반응 조건을 수정하는 것은 당업자의 기술 범위 내에 있으며 당업계에서 일상적이다. 접합이 살아있는 세포 내에 또는 살아있는 세포 상에 존재하는 폴리펩티드와 함께 수행되는 경우, 조건은 생리학적으로 양립할 수 있도록 선택된다. 예를 들어, 반응이 일어나기에 충분한 시간 동안 그러나 세포가 허용하는 기간(예를 들어, 약 30분 내지 1시간) 동안 pH를 일시적으로 떨어뜨릴 수 있다. 세포 표면 상에서 폴리펩티드의 변형을 수행하기 위한 생리학적 조건은 세포-표면 아지드를 보유하는 세포의 변형에서 케톤-아지드 반응에 사용되는 것과 유사할 수 있다(예를 들어, 미국 6,570,040 참고).
본 명세서에 개시된 화합물 또는 접합체와의 반응성 파트너로서 작용하는 α-친핵성 기를 함유하거나 함유하도록 변형된 소분자 화합물은 또한 본 개시내용의 폴리펩티드-약물 접합체에서 약물로서 사용하기 위해 고려된다. 일반적인 방법은 관심 화합물을 합성하는데 유용한 화학 합성 도식 및 조건에 대해 당업계에 공지되어 있다(예를 들어, 문헌[Smith 및 March, March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, Fifth Edition, Wiley-Interscience, 2001; 또는 Vogel, A Textbook of Practical Organic Chemistry, Including Qualitative Organic Analysis, Fourth Edition, New York: Longman, 1978)] 참고).
제형
본 개시내용의 접합체는 다양한 상이한 방법으로 제형화될 수 있다. 일반적으로, 접합체가 항체-약물 접합체인 경우, 접합체는 약물, 항체, 치료할 병태 및 사용할 투여 경로와 호환되는 방식으로 제형화된다.
일부 구현예에서, 본 개시내용의 임의의 접합체 및 약제학적으로 허용 가능한 부형제를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다.
접합체(예를 들어, 항체-약물 접합체)는 임의의 적합한 형태, 예컨대, 약제학적으로 허용 가능한 염의 형태로 제공될 수 있고, 임의의 적합한 투여 경로, 예컨대, 경구, 국소 또는 비경구 투여에 대해 제형될 수 있다. 접합체가 주사 가능한 액체로서 (예컨대, 정맥내로 투여되거나 또는 조직으로 직접 투여되는 구현예들에서) 제공되는 경우, 접합체는 사용 준비가 되어 있는 투약 형태로서, 또는 복원 가능한 보관-안정한 분말 또는 약제학적으로 허용 가능한 담체 및 부형제로 구성된 액체로서 제공될 수 있다.
접합체를 제형화하는 방법은 쉽게 활용할 수 있는 방법으로부터 적응될 수 있다. 예를 들어, 접합체는 치료적 유효량의 접합체 및 약제학적으로 허용 가능한 담체(예를 들어, 식염수)를 포함하는 약제학적 조성물로 제공될 수 있다. 약제학적 조성물은 선택적으로 다른 첨가제(예를 들어, 완충제, 안정화제, 보존제 등)를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 제형은 포유류에 투여하기에 적합한데, 예컨대, 인간에 투여하기에 적합한 것들이다.
치료 방법
본 개시내용의 항체-약물 접합체는 모 약물(즉, 폴리펩티드에 접합되기 전의 약물)의 투여에 의한 치료를 잘 받아들이는 대상체에서의 병태 또는 질환의 치료에 사용될 수 있다.
몇몇 실시형태에서, 대상체에게 유효량(예를 들어, 치료학적 유효량)의 본 개시내용의 임의의 접합체를 투여하는 단계를 포함하는 방법이 제공된다.
소정의 양상에서, 대상체에서 표적 부위에 약물을 전달하는 방법이 제공되되, 해당 방법은 대상체에게 본 개시내용의 임의의 접합체를 포함하는 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 투여는 대상체의 표적 부위에 접합체로부터 치료적 유효량의 약물을 방출시키는데 효과적이다. 예를 들어, 본 명세서에 기재된 바와 같이, 본 개시내용의 항체-약물 접합체는 절단 가능한 링커, 예컨대 제1 효소적으로 절단 가능한 모이어티 및 제2 효소적으로 절단 가능한 모이어티를 포함하는 효소적으로 절단 가능한 링커를 포함할 수 있다. 일부 사례에서, 절단 가능한 링커는 약물에 대한 원하는 표적 작용 부위에서 항체로부터 약물을 분리하거나 방출하기 위해 적절한 조건 하에서 절단될 수 있다. 예를 들어, 제1 절단 가능한 링커를 절단으로부터 보호하는 제2 절단 가능한 링커는 제1 절단 가능한 모이어티가 절단될 수 있도록 절단될 수 있으며, 그 결과 절단 가능한 링커가 둘 이상의 부분으로 절단되어, 원하는 작용 부위에서 항체-약물 접합체로부터 약물을 방출한다.
특정 구현예에서, 제1 절단 가능한 모이어티는 효소적으로 절단 가능한 모이어티일 수 있다. 일부 사례에서, 제1 절단 가능한 모이어티의 절단을 촉진하는 효소는 치료될 대상체에게 투여되는(즉, 치료될 대상체에 외인성인) 효소이다. 예를 들어, 제1 효소는 본 명세서에 기재된 항체-약물 접합체의 투여 전, 투여와 동시에 또는 투여 후에 투여될 수 있다.
특정 구현예에서, 제2 절단 가능한 모이어티는 효소적으로 절단 가능한 모이어티일 수 있다. 일부 사례에서, 제2 절단 가능한 모이어티의 절단을 촉진하는 효소는 치료될 대상체에게 투여되는(즉, 치료될 대상체에 외인성인) 효소이다. 예를 들어, 제2 효소는 본 명세서에 기재된 항체-약물 접합체의 투여 전, 투여와 동시에 또는 투여 후에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 제1 효소 및 제2 효소는 상이한 효소이다.
다른 사례에서, 제1 절단 가능한 모이어티의 절단을 촉진하는 제1 효소는 치료될 대상체에 존재하는(즉, 치료될 대상체에 내인성인) 효소이다. 예를 들어, 제1 효소는 항체-약물 접합체의 약물에 대한 원하는 작용 부위에 존재할 수 있다. 항체-약물 접합체의 항체는 원하는 작용 부위에 특이적으로 표적화될 수 있고(예를 들어, 원하는 작용 부위에 존재하는 항원에 특이적으로 결합할 수 있음), 여기서 원하는 작용 부위는 또한 제1 효소의 존재를 포함한다. 일부 사례에서, 제1 효소는 치료될 대상체의 신체의 다른 영역과 비교하여 원하는 작용 부위에 과잉으로 존재한다. 예를 들어, 제1 효소는 치료될 대상체의 신체의 다른 영역과 비교하여 원하는 작용 부위에서 과발현될 수 있다. 일부 사례에서, 제1 효소는 특정 영역 또는 위치에서 제1 효소의 국소화로 인해 원하는 작용 부위에 과잉으로 존재한다. 예를 들어, 제1 효소는 리소좀과 같은 원하는 작용 부위 내의 특정 구조와 연관될 수 있다. 일부 경우에, 제1 효소는 대상체 신체의 다른 영역에 비해 리소좀에 과잉으로 존재한다. 일부 구현예에서, 제1 효소를 포함하는 리소좀은 약물로 치료될 암 또는 종양의 부위와 같은 항체-약물 접합체의 약물에 대한 원하는 작용 부위에서 발견된다. 특정 구현예에서, 제1 효소는 에스테라제이다.
특정 구현예에서, 제2 절단 가능한 모이어티의 절단을 촉진하는 제2 효소는 치료될 대상체에 존재하는(즉, 치료될 대상체에 내인성인) 효소이다. 예를 들어, 제2 효소는 항체-약물 접합체의 약물에 대한 원하는 작용 부위에 존재할 수 있다. 항체-약물 접합체의 항체는 원하는 작용 부위에 특이적으로 표적화될 수 있고(예를 들어, 원하는 작용 부위에 존재하는 항원에 특이적으로 결합할 수 있음), 여기서 원하는 작용 부위는 또한 제2 효소의 존재를 포함한다. 일부 사례에서, 제2 효소는 치료될 대상체의 신체의 다른 영역과 비교하여 원하는 작용 부위에 과잉으로 존재한다. 예를 들어, 제2 효소는 치료될 대상체의 신체의 다른 영역과 비교하여 원하는 작용 부위에서 과발현될 수 있다. 일부 사례에서, 제2 효소는 특정 영역 또는 위치에서 제2 효소의 국소화로 인해 원하는 작용 부위에 과잉으로 존재한다. 예를 들어, 제2 효소는 리소좀과 같은 원하는 작용 부위 내의 특정 구조와 연관될 수 있다. 일부 경우에, 제2 효소는 대상체 신체의 다른 영역에 비해 리소좀에 과잉으로 존재한다. 일부 구현예에서, 제2 효소를 포함하는 리소좀은 약물로 치료될 암 또는 종양의 부위와 같은 항체-약물 접합체의 약물에 대한 원하는 작용 부위에서 발견된다. 특정 구현예에서, 제2 효소는 글루쿠로니다제, 갈락토시다제, 글루코시다제, 만노시다제, 푸코시다제 등이다.
본 명세서에 기재된 항체-약물 접합체의 제1 절단 가능 부분 및 제2 절단 가능 부분의 절단을 위해 임의의 적합한 효소가 사용될 수 있다. 다른 효소, 예를 들어 다른 척추동물(예를 들어, 영장류, 마우스, 랫트, 고양이, 돼지, 메추라기, 염소, 개 등)로부터의 효소와 같으나 이에 제한되지 않는 본 명세서에 기재된 항체-약물 접합체의 제1 절단 가능한 부분 및 제2 절단 가능한 부분의 절단에 사용하기에 또한 적합할 수 있다.
특정 구현예에서, 항체-약물 접합체는 표준 조건 하에서 실질적으로 안정하다. 실질적으로 안정하다는 것은 항체-약물 접합체의 절단 가능한 링커가 상기 기재된 바와 같은 제1 효소 및 제2 효소의 부재 하에 상당한 양의 절단을 겪지 않는다는 것을 의미한다. 예를 들어, 상기 기재된 바와 같이, 제2 절단 가능한 모이어티는 절단되는 것으로부터 제1 절단 가능한 모이어티를 보호할 수 있고, 이와 같이 항체-약물 접합체의 절단 가능한 링커는 상기 기재된 바와 같은 제2 효소의 부재 하에 상당한 양의 절단을 겪지 않는다. 예를 들어, 항체-약물 접합체의 절단 가능한 링커는 항체-약물 접합체의 25% 이하, 예컨대 20% 이하, 또는 15% 이하, 또는 10% 이하, 또는 5% 이하, 또는 4% 이하, 또는 3% 이하, 또는 2% 이하, 또는 1% 이하가 제1 효소 및/또는 제2 효소의 부재하에 절단되도록 실질적으로 안정할 수 있다. 일부 경우에, 항체-약물 접합체는 실질적으로 안정하여, 항체-약물 접합체의 절단 가능한 링커가 제1 효소 및/또는 제2 효소의 부재 시 상당한 양의 절단을 겪지 않지만, 제1 효소와 제2 효소의 존재에서 절단될 수 있다. 예를 들어, 항체-약물 접합체는 대상체에게 투여된 후 실질적으로 안정할 수 있다. 일부 경우에, 항체-약물 접합체는 대상체에게 투여된 후 실질적으로 안정하고, 항체-약물 접합체가 원하는 작용 부위에서 제2 효소의 존재 하에 있을 때, 제2 절단 가능한 모이어티는 절단 가능한 링커로부터 절단될 수 있고, 따라서 제1 효소에 의한 후속 절단에 제1 절단 가능한 모이어티를 노출시키고, 이는 차례로 원하는 작용 부위에서 약물을 방출한다. 특정 구현예에서, 대상체에게 투여한 후, 항체-약물 접합체는 제1 효소 및/또는 제2 효소의 부재 하에 연장된 시간 동안, 예컨대 1시간 이상, 또는 2시간 이상, 또는 3시간 이상, 또는 4시간 이상, 또는 5시간 이상, 또는 6시간 이상, 또는 7시간 이상, 또는 8시간 이상, 또는 9시간 이상, 또는 10시간 이상, 또는 15시간 이상, 또는 20시간 이상, 또는 24시간 (1 day) 이상, 또는 2일 이상, 또는 3일 이상, 또는 4일 이상, 또는 5일 이상, 또는 6일 이상, 또는 7일 (1주) 또는 그 초과 동안 안정하다. 특정 구현예에서, 항체-약물 접합체는 제1 효소 및/또는 제2 효소의 부재 하에 연장된 기간 동안 일정 범위의 pH 값, 예를 들어 2 내지 10, 또는 3 내지 9, 또는 4 내지 8, 또는 5 내지 8, 또는 6 내지 8, 또는 7 내지 8의 pH에서 안정하다.
상기에 기재된 바와 같이, 본 개시내용의 항체-약물 접합체는 모 약물의 투여에 의한 치료를 잘 받아들이는 대상체에서의 병태 또는 질환의 치료에 사용될 수 있다. "치료"는 적어도 숙주에 영향을 미치는 병태와 연관된 증상의 개선이 이루어지는 것을 의미하며, 여기서 개선은 적어도 치료 중인 병태와 연관된 파라미터, 예컨대, 증상의 정도의 저감을 나타내기 위해 넓은 의미로 사용된다. 그와 같이, 치료는 또한 병리적 병태, 또는 적어도 그것과 연관된 증상이 완전히 저해되어, 예컨대 발생하는 것이 예방되거나 중단되어, 예컨대 종결되어서, 더 이상 숙주가 그 병태로, 또는 그 병태를 특징으로 하는 적어도 증상으로 고생하지 않는 상황을 포함한다. 그러므로 치료는 (i) 임상적 증상이 발생하지 않도록 유발하는 것, 예컨대, 해로운 상태로의 질환 진행을 방지하는 것을 포함하여 예방, 즉 임상적 증상의 발생 위험을 감소시키는 것; (ii) 저해, 즉, 임상적 증상의 발생 또는 추가의 발달을 저지하는 것, 예컨대, 활성 질환을 경감시키거나 완전히 저해하는 것; 및/또는 (iii) 완화, 즉, 임상적 증상의 퇴행을 유발하는 것을 포함한다.
치료될 대상체는 치료를 필요로 하는 대상체일 수 있고, 치료될 대상체는 모 약물을 사용한 치료를 잘 받아들이는 숙주이다. 따라서, 다양한 대상체가 본 명세서에 개시된 항체-약물 접합체를 사용하여 치료를 받을 수 있다. 일반적으로, 이러한 대상체는 "포유동물"이며, 인간이 관심 대상이다. 다른 대상체는 반려동물(예를 들어, 개 및 고양이), 가축(예를 들어, 소, 돼지, 염소, 말 등), 설치류(예를 들어, 질환의 동물 모델로서, 예를 들어, 마우스, 기니피그 및 래트)뿐만 아니라 비인간 영장류(예를 들어, 침팬지 및 원숭이)를 포함할 수 있다.
투여된 항체-약물 접합체의 양은 처음에 모 약물의 용량 및/또는 투여 처방을 기반으로 결정될 수 있다. 일반적으로, 항체-약물 접합체는 표적화된 전달 및/또는 결합된 약물의 향상된 혈청 반감기를 제공할 수 있고, 그러므로 투여 처방에서 적어도 하나의 감소된 용량 또는 감소된 투여를 제공할 수 있다. 그러므로, 항체-약물 접합체는 본 개시내용의 항체-약물 접합체에 접합되기 전의 모 약물에 비해 투여 처방에서 감소된 용량 및/또는 감소된 투여를 제공할 수 있다.
나아가, 위에서 언급된 바와 같이, 항체-약물 접합체는 제어된 화학양론의 약물 전달을 제공할 수 있기 때문에, 항체-약물 접합체의 투여량은 항체-약물 접합체 기준당 제공된 약물 분자의 수를 기반으로 계산될 수 있다.
일부 구현예에서, 다회 용량의 항체-약물 접합체가 투여된다. 항체-약물 접합체의 투여 빈도는 다양한 요인, 예컨대, 증상의 중증도, 대상체의 병태 등 중의 임의의 요인에 따라 달라질 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 항체-약물 접합체는 1개월에 1회, 1개월에 2회, 1개월에 3회, 격주마다, 주 1회(qwk), 주 2회, 주 3회, 주 4회, 주 5회, 주 6회, 격일, 매일(qd/od), 1일 2회(bds/bid) 또는 1일 3회(tds/tid) 등으로 투여된다.
실시예
다음 실시예는 본 발명을 만들고 사용하는 방법에 대한 완전한 개시 및 설명을 당업자에게 제공하기 위해 제시되며, 이는 발명자가 이들의 발명으로 간주하는 것의 범위를 제한하려는 것이 아니며 아래의 실험이 수행된 모든 실험 또는 유일한 실험임을 나타내려는 의도도 아니다. 사용된 숫자(예를 들어, 양, 온도 등)와 관련하여 정확성을 보장하기 위해 노력하였지만, 일부 실험 오류 및 편차를 고려하여야 한다. 달리 나타내지 않는 한, 부(part)는 중량부이고, 분자량은 중량 평균 분자량이고, 온도는 섭씨 온도이고, 압력은 대기압이거나 또는 대기압에 가깝다. "평균"은 산술 평균을 의미한다. 예를 들어, bp, 염기쌍(들); kb, 킬로베이스(들); pl, 피코리터(들); s 또는 sec, 초(들); 분, 분(들); h 또는 hr, 시간(들); aa, 아미노산(들); kb, 킬로베이스(들); bp, 염기쌍(들); nt, 뉴클레오타이드(들); i.m., 근육내(로); i.p., 복강내(로); s.c., 피하(로); 등과 같은 표준 약어가 사용될 수 있다.
일반 합성 절차
개시된 화합물을 합성하는 데 유용한 일반적으로 알려진 화학적 합성 반응식 및 조건을 제공하는 많은 일반 참고문헌이 이용 가능하다(예를 들어, 문헌[Smith 및 March, March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, Fifth Edition, Wiley-Interscience, 2001; 또는 Vogel, A Textbook of Practical Organic Chemistry, Including Qualitative Organic Analysis, Fourth Edition, New York: Longman, 1978)] 참조).
본 명세서에 기재된 바와 같은 화합물은 HPLC, 분취용 박층 크로마토그래피, 플래시 칼럼 크로마토그래피 및 이온 교환 크로마토그래피와 같은 크로마토그래피를 포함하는 당업계에 공지된 임의의 정제 프로토콜에 의해 정제될 수 있다. 정상 및 역상뿐만 아니라 이온성 수지를 포함하여 임의의 적합한 고정상이 사용될 수 있다. 특정 구현예에서, 개시된 화합물은 실리카겔 및/또는 알루미나 크로마토그래피를 통해 정제된다. 예를 들어, 문헌[Introduction to Modern Liquid Chromatography, 2판, ed. L. R. Snyder 및 J. J. Kirkland, John Wiley and Sons, 1979; 및 Thin Layer Chromatography, ed E. Stahl, Springer-Verlag, New York, 1969] 참조.
대상 화합물을 제조하기 위한 임의의 과정 동안, 임의의 관련 분자 상의 민감성 또는 반응성 기를 보호하는 것이 필요하고/하거나 바람직할 수 있다. 이는 문헌[J. F. W. McOmie, "Protective Groups in Organic Chemistry", Plenum Press, London and New York 1973, T. W. Greene 및 P. G. M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis", Third edition, Wiley, New York 1999, "The Peptides"; 3권 (편집자: E. Gross 및 J. Meienhofer), Academic Press, London and New York 1981, "Methoden der organischen Chemie", Houben-Weyl, 4판, Vol. 15/l, Georg Thieme Verlag, Stuttgart 1974, H.-D. Jakubke 및 H. Jescheit, "Aminosauren, Peptide, Proteine", Verlag Chemie, Weinheim, Deerfield Beach, 및 Basel 1982, 및/또는 Jochen Lehmann, "Chemie der Kohlenhydrate: Monosaccharide and Derivate", Georg Thieme Verlag, Stuttgart 1974]에서와 같이 표준 작업에 기재된 바와 같이 종래의 보호기를 통해 달성될 수 있다. 보호기는 당업계에 공지된 방법을 사용하여 편리한 후속 단계에서 제거될 수 있다.
본 발명의 화합물은 상업적으로 입수 가능한 출발 물질 및/또는 통상적인 합성 방법에 의해 제조되는 출발 물질을 사용한 다양한 상이한 합성 경로를 통해 합성될 수 있다. 본 명세서에 개시된 화합물을 합성하는 데 사용될 수 있는 합성 경로의 다양한 예가 하기 반응식에 기재되어 있다.
실시예 1
이중 절단 에스테르 링커의 합성
물질 및 방법
일반 정보
합성 시약은 Sigma-Aldrich, Acros, AK Scientific 또는 기타 상업적 공급원에서 구입했으며 정제 없이 사용하였다. 무수 용매는 밀봉된 병에 담긴 상업적 공급원에서 얻었다. 세포독소 SN-38(12)은 MedChemExpress에서 구입하여 받은 그대로 사용하였다. 세포독소 28과 41은 상업적 공급원에서 구입하여 받은 그대로 사용하였다. 이전에 보고된 절차를 사용하여 화합물 9를 합성하였다.　합성 중간체 16, 19, 20, 22, 25 및 48은 Shanghai Medicilon에서 구입하여 정제 없이 사용하였다. 다른 모든 출발 물질은 상업적 공급원에서 구입했거나 이전에 보고된 절차를 사용하여 합성하였다. 모든 경우에, 용매는 Buchi V-700 진공 펌프가 장착된 Buchi Rotovapor R-114로 감압 하에 제거되었다. 컬럼 크로마토그래피는 Biotage 크로마토그래피 정제 시스템으로 수행되었다. 분취 HPLC 정제는 Phenomenex Kinetex 5 μm EVO C18 150 x 21.2 mm 컬럼이 장착된 Waters 분취 HPLC 장치를 사용하여 수행되었다. HPLC 분석은 0.05% 트리플루오로아세트산을 함유하는 물 및 아세토니트릴의 10-100% 구배를 사용하여 30℃에서 Model G1322A Degasser, Model G1311A Quarternary Pump, Model G1329A Autosampler, Model G1314 Variable Wavelength Detector, Agilent Poroshell 120 SB C18, 4.6 mm x 50 mm 컬럼이 장착된 Agilent 1100 시리즈 분석용 HPLC에서 수행되었다. HPLC는 254 또는 205 nm에서 모니터링되었다. 저해상도 질량 스펙트럼(LRMS)은 0.1% 포름산을 함유하는 물 및 아세토니트릴의 10-100% 구배를 사용하여 30 ℃에서 Agilent 1260 Infinity HPLC 시스템, G1314 가변 파장 검출기 및 Agilent Poroshell 120 SB C18, 4.6mm x 50mm 컬럼이 장착된 Agilent Technology 6120 Quadrupole LC/MS에서 획득되었다.
반응식 1. 중간체 11의 합성.
( 2S,3R,4S,5S,6S )-2-(2-( tert - 부톡시카보닐 )-5- 니트로페녹시 )-6-( 메톡시카보닐 ) 테트라하이드로 -2H-파이란-3,4,5-트리일 트리아세테이트 ( 10 )의 제조
20 mL의 무수 아세토니트릴 중 tert-부틸 2-하이드록시-4-니트로벤조에이트 (9, 160 mg, 0.67 mmol) 아세토브로모-D-글루쿠론산 메틸 에스테르 (8, 797 mg, 2.0 mmol)의 혼합물에 산화은(I) (463 mg, 2.0 mmol)을 첨가하였다. 수득한 혼합물을 암실에서 24시간 동안 격렬하게 교반하였다. 반응 혼합물을 실리카 겔 패드를 통해 여과하고 에틸 아세테이트로 용출시켰다. 조합한 여액을 농축 건조시키고, 잔류물을 실리카겔 (에틸 아세테이트-헥산, 0-30% v/v 구배) 상에서로 정제하여 210 mg의 생성물 10 (0.38 mmol, 56% 수율)을 백색 고체로서 얻었다. LRMS (ESI) m/z 578.1 [M+Na]+, C24H29NO14에 대한 계산치 578.2.
4-니트로-2-((( 2S,3R,4S,5S,6S )-3,4,5- 트리아세톡시 -6-( 메톡시카보닐 ) 테트라하이드로 -2H-파이란-2-일)옥시)벤조산 ( 11 )의 제조
tert-부틸 에스테르 10 (180 mg, 0.32 mmol)을 실온에서 4 mL의 TFA-DCM 혼합물 (1:1)에 용해시켰다. 생성된 용액을 30분 동안 방치한 다음, 용매를 진공 하에 제거하고, 잔류물을 실리카겔 (메탄올-DCM, 0-5% v/v 구배) 상에서 정제하여 155 mg의 생성물 11 (0.31 mmol, 97% 수율)을 분홍색 거품 고체로서 얻었다. LRMS (ESI) m/z 522.1 [M+Na]+, C20H21NO14에 대한 계산치 522.1.
반응식 2. SN-38 세포독소 및 페놀산 에스테르 이중 절단 링커를 보유하는 작제물 61의 합성
( 2S,3R,4S,5S,6S )-2-(2-((((S)-4,11- 디에틸 -4- 하이드록시 -3,14- 디옥소 -3,4,12,14-테트라하이드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-9-일)옥시)카보닐)-5-니트로페녹시)-6-(메톡시카보닐)테트라하이드로-2H-파이란-3,4,5-트리일 트리아세테이트 ( 53 )의 제조
2 mL의 무수 THF 중 SN-38 (12, 20 mg, 51 μmole) 및 카복실산 11 (26 mg, 51 μmole)의 혼합물에 10.5 mg의 DCC (51 μmole), 이어서 DMAP (6 mg, 51 μmole)을 실온에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 24시간 동안 교반한 다음, 고체를 여과 제거하고, 생성된 여액을 실리카겔 (MeOH-DCM 0-10% v/v 구배) 상에서 정제하여 40 mg의 생성물 53 (46 μmole, 90% 수율)을 황백색 고체로서 얻었다. LRMS (ESI) m/z 874.2 [M+H]+, C42H39N3O18에 대한 계산치 874.2.
( 2S,3R,4S,5S,6S )-2-(5-아미노-2-((((S)-4,11- 디에틸 -4- 하이드록시 -3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라하이드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-9-일)옥시)카보닐)페녹시)-6-(메톡시카보닐)테트라하이드로-2H-파이란-3,4,5-트리일 트리아세테이트 ( 54 )의 제조
5 mL의 에틸 아세테이트 중 화합물 53 (40 mg, 46 μmole)의 교반 용액에 5 mg의 10 wt.% 탄소상 팔라듐 (4.6 μmole) 및 50 μL (0.36 mmol)의 트리에틸아민을 첨가하였다. 반응 플라스크를 아르곤으로 플러싱하고 고무 격막으로 밀봉하고 수소 풍선을 장착하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 다음, 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 진공 하에 농축하고, 실리카겔 (MeOH-DCM 0-10% v/v 구배) 상에서 정제하여 28 mg의 화합물 54 (34 μmole, 73% 수율)를 황색을 띤 고체로서 얻었다. LRMS (ESI) m/z 844.3 [M+H]+, C42H41N3O16에 대한 계산치 844.3.
( 2S,3R,4S,5S,6S )-2-(5-((S)-2-(( tert -부톡시카보닐)아미노)프로파나미도)-2-((((S)-4,11-디에틸-4-하이드록시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라하이드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-9-일)옥시)카보닐)페녹시)-6-(메톡시카보닐)테트라하이드로-2H-파이란-3,4,5-트리일 트리아세테이트 ( 56 )의 제조
1 mL의 DCM 중 화합물 54 (28 mg, 34 μmole) 및 Boc-L-Ala-OH (7 mg, 34 μmole)의 혼합물에 EEDQ (10 mg, 40 μmole)을 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물을 암실에서 24시간 동안 교반한 다음, 실리카겔 (MeOH-DCM 0-10% v/v 구배) 상에서 직접 정제하여 24 mg의 생성물 56 (24 μmole, 70% 수율)을 황갈색 고체로서 얻었다. LRMS (ESI) m/z 1015.4 [M+H]+, C50H54N4O19에 대한 계산치 1015.3.
( 2S,3S,4S,5R,6S )-6-(5-((S)-2-(( tert -부톡시카보닐)아미노)프로파나미도)-2-((((S)-4,11-디에틸-4-하이드록시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라하이드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-9-일)옥시)카보닐)페녹시)-3,4,5-트리하이드록시테트라하이드로-2H-파이란-2-카복실산 ( 57 )의 제조
2 mL의 메탄올-물 혼합물 (4:1) 중 화합물 55 (19 mg, 19 μmole)의 용액에 스칸듐(III) 트리플레이트 (19 mg, 38 μmole)을 실온에서 첨가하였다.
수득한 혼합물을 30℃에서 4일 동안 교반한 다음, 용매를 진공 하에 제거하고 잔류물을 역상 HPLC (C18 컬럼, 0.05% TFA를 갖는 CH3CN-H2O, 0-50% v/v 구배) 상에서 정제하여 원하는 생성물 57 및 상응하는 부분 가수분해된 메틸 에스테르 58 의 3.5 mg의 약 1:1 혼합물을 얻었다 (21%의 혼합물 수율).
혼합물을 추가 정제 없이 다음 단계로 옮겼다.
LRMS (ESI) m/z 875.4 [M+H]+, C43H46N4O16 (57)에 대한 계산치 875.3; LRMS (ESI) m/z 889.4 [M+H]+, C44H48N4O16 (58)에 대한 계산치 889.3.
반응식 3. 삼차 알코올에서 SN-38 세포독소 및 에스테르 이중-절단 링커를 보유하는 작제물 21의 합성
(S)- tert -부틸 (4,11- 디에틸 -4- 하이드록시 -3,14- 디옥소 -3,4,12,14- 테트라하이드로 -1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-9-일) 카보네이트 ( 13 )의 제조
디클로로메탄 (16 mL) 중 SN-38 12 (158 mg, 0.40 mmol) 및 Boc2O (114 mg, 1.3 mmol)의 혼합물에 피리딘 (0.98 mL, 12 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 1시간 후 용액을 실온으로 가온하고 2시간 동안 교반하였다. 그 다음 반응 혼합물을 진공 하에 농축하고, 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피 (헥산-EtOAc, 100:0 내지 0:100 v/v)로 정제하여 13 (160 mg, 0.33 mmol, 83%)을 황백색 고체로서 얻었다. LRMS (ESI): m/z 493.2 [M+H]+, C27H29N2O7에 대한 계산치 m/z 493.2.
( 2S,3R,4S,5S,6S )-2-(2-((((S)-9-(( tert - 부톡시카보닐 ) 옥시 )-4,11- 디에틸 -3,14- 디옥소 -3,4,12,14-테트라하이드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-4-일)옥시)카보닐)-5-니트로페녹시)-6-(메톡시카보닐)테트라하이드로-2H-파이란-3,4,5-트리일 트리아세테이트 ( 14 )의 제조
디클로로메탄 (1 mL) 및 DMF (0.5 mL) 카복실산 11 (18 mg, 36 μmol)의 용액에 Boc 보호된 SN-38 13 (14 mg, 28 μmol), 이어서 DCC (6 mg, 29 μmol) 및 DMAP (3 mg, 25 μmol)을 0℃에서 첨가하였다. 1시간 후, 반응 혼합물을 실온으로 데우고 2시간 동안 계속 교반하였다. 반응 혼합물을 C18 컬럼 (0.05% TFA를 갖는 H2O/CH3CN, 100:0 내지 0:100 v/v)를 사용하는 역상 크로마토그래피로 정제하여 화합물 14 (25 mg, 26 μmol, 93% 수율)를 황색 고체로서 얻었다. LRMS (ESI): m/z 974.3 [M+H]+, C47H47N3O20에 대한 계산치 m/z 974.3.
( 2S,3R,4S,5S,6S )-2-(5-아미노-2-((((S)-9-(( tert - 부톡시카보닐 ) 옥시 )-4,11- 디에틸 -3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라하이드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-4-일)옥시)카보닐)페녹시)-6-(메톡시카보닐)테트라하이드로-2H-파이란-3,4,5-트리일 트리아세테이트 ( 15 )의 제조
EtOAc (0.5 mL) 중 화합물 14 (35 mg, 36 μmol)의 용액에 Pd/C (10 wt.%, 2 mg) 및 트리에틸아민 (2 μL, 22 μmol))을 첨가하였다. 그 다음 플라스크를 비우고 세 번의 반복 주기로 풍선의 수소 가스로 채웠다. 반응 혼합물을 H2 풍선이 부착된 상태로 실온에서 48시간 동안 격렬하게 교반하였다. 고체를 셀라이트 패드를 통해 여과하여 제거하고, 여액을 농축하고 진공 하에 건조시켜 35 mg의 조 화합물 15을 얻었고, 이를 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LRMS (ESI): m/z 944.3 [M+H]+, C47H49N3O18에 대한 계산치 m/z 944.3.
( 2S,3R,4S,5S,6S )-2-(5-((S)-2-((S)-2-((((9H- 플루오렌 -9-일)메톡시)카보닐)아미노)-3-메틸부탄아미도)프로파나미도)-2-((((S)-9-((tert-부톡시카보닐)옥시)-4,11-디에틸-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라하이드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-4-일)옥시)카보닐)페녹시)-6-(메톡시카보닐)테트라하이드로-2H-파이란-3,4,5-트리일 트리아세테이트 ( 17 )의 제조
DMF (0.5 mL) 중 조 아민 15 (35 mg) 및 Fmoc-Val-Ala-OH 16 (60 mg, 0.15 mmol)의 혼합물에 HATU (56 mg, 0.15 mmol) 및 DIPEA (51 μL, 0.30 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 교반하고 C18 컬럼 (0.05% TFA를 갖는 H2O/CH3CN, 100:0 내지 0:100 v/v) 상에서 역상 크로마토그래피로 정제하여 화합물 17 (46 mg, 34 μmol, 94% 수율, 2개의 단계에 걸쳐)를 황색 고체로서 얻었다. LRMS (ESI): m/z 1336.5 [M+H] +, C70H73N5O22에 대한 계산치 m/z 1336.5.
( 2S,3S,4S,5R,6S )-6-(5-((S)-2-((S)-2-아미노-3- 메틸부탄아미도 ) 프로파나미도 )-2-((((S)-4,11-디에틸-9-하이드록시-3,14-디옥소-3,4,12,14-테트라하이드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-4-일)옥시)카보닐)페녹시)-3,4,5-트리하이드록시테트라하이드로-2H-파이란-2-카복실산 ( 18 )의 제조
MeOH-H2O 혼합물 (4:1 v/v, 1 mL) 중 화합물 17 (20 mg, 15 μmol)의 용액에 Sc(OTf)3 (180 mg, 0.36 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물을 2일 동안 교반하고 진공하에 농축하였다. 잔류물을 DMF-피페리딘 혼합물(10:1 v/v, 1.1 mL)에서 재구성하고 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 C18 컬럼 (0.05% TFA를 갖는 H2O/CH3CN, 90:10 내지 35:65 v/v) 상에서 역상 크로마토그래피로 정제하여 화합물 18 (8 mg, 9 μmol, 60% 수율)을 얻었다. LRMS (ESI): m/z 874.3 [M+H]+, C43H47N5O15에 대한 계산치 m/z 874.3.
(R)-2-(3-(2-((2-(((9H- 플루오렌 -9-일) 메톡시 ) 카보닐 )-1,2- 디메틸하이드라지닐 ) 메틸 )-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-1-일)프로파나미도)-3,31-디옥소-31-(퍼플루오로페녹시)-7,10,13,16,19,22,25,28-옥타옥사-4-아자헨트리아콘탄-1-설폰산 ( 20 )의 제조
4 mL의 무수 THF 중 카복실산 19 (180 mg, 0.17 mmol) 및 펜타플루오로페놀 (125 mg, 0.68 mmol)의 혼합물에 DCC (68 mg, 0.33 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물을 밤새 교반하고, 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 진공 하에 농축하고, 역상 크로마토그래피 (C18, 0-80% 아세토니트릴-물/0.05% TFA)로 정제하여 100 mg의 PFP 에스테르 20을 무색 오일 (0.08 mmol, 47% 수율)로서 얻었다. LRMS (ESI): m/z 1225.4 [M+H]+, C56H69F5N6O17S에 대한 계산치 m/z 1225.4.
( 2S,3S,4S,5R,6S )-6-(2-((((S)-4,11- 디에틸 -9- 하이드록시 -3,14- 디옥소 -3,4,12,14-테트라하이드로-1H-피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-4-일)옥시)카보닐)-5-((2S,5S,36R)-40-(2-((1,2-디메틸하이드라지닐)메틸)-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-1-일)-5-이소프로필-2-메틸-4,7,35,38-테트라옥소-36-(설포메틸)-10,13,16,19,22,25,28,31-옥타옥사-3,6,34,37-테트라아자테트라콘탄아미도)페녹시)-3,4,5-트리하이드록시테트라하이드로-2H-파이란-2-카복실산 ( 21 )의 제조
DMF (0.5 mL) 중 아민 18 (8 mg, 9 μmol) 및 PFP 에스테르 20 (12 mg, 10 μmol)의 혼합물에 HOAt (1.2 mg, 9 μmol) 및 DIPEA (5 μL, 27 μmol)을 주위 온도에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 교반한 다음, DMF (0.5 mL)을 혼합물에 첨가하고, 이어서 피페리딘 (50 μL)을 첨가하였다. 실온에서 15분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 C18 컬럼 (0.05% TFA를 갖는 H2O/CH3CN, 90:10 내지 45:55 v/v)을 사용하는 역상 HPLC로 직접 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 모으고 동결건조하여 화합물 21 (3.5 mg, 2 μmol, 22% 수율)를 황색 고체로서 얻었다. LRMS (ESI): m/z 1692.7 [M+H]+, C78H105N11O29S에 대한 계산치 m/z 1692.7.
반응식 4. 이차 알코올에서 에스테르 링커를 보유하는 MMAE 작제물 49의 합성
tert -부틸 ((S)-1-(((S)-1-(((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-(((1S,2R)-1-하이드록시-1-페닐프로판-2-일)아미노)-1-메톡시-2-메틸-3-옥소프로필)피롤리딘-1-일)-3-메톡시-5-메틸-1-옥소헵탄-4-일)(메틸)아미노)-3-메틸-1-옥소부탄-2-일)아미노)-3-메틸-1-옥소부탄-2-일)(메틸)카바메이트 ( 42 )의 제조
CH3CN (2 mL) 중 MMAE 41 (100 mg, 0.14 mmol) 및 Boc2O (56 mg, 0.26 mmol)의 혼합물에 DIPEA (44 μL, 0.26 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 밤새 교반한 후, 반응 혼합물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 (DCM/MeOH, 100:0 내지 90:10 v/v)를 사용하여 정제하여 화합물 42 (100 mg, 0.12 mmol, 86%)을 황백색 고체로서 얻었다. LRMS (ESI): m/z 818.6 [M+H]+, C44H75N5O9에 대한 계산치 m/z 818.6.
( 2S,3R,4S,5S,6S )-2-(5-아미노-2-(((1S,2R)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((6S,9S,12S,13R)-12-((S)-sec-부틸)-6,9-디이소프로필-13-메톡시-2,2,5,11-테트라메틸-4,7,10-트리옥소-3-옥사-5,8,11-트리아자펜타데칸-15-오일)피롤리딘-2-일)-3-메톡시-2-메틸프로파나미도)-1-페닐프로폭시)카보닐)페녹시)-6-(메톡시카보닐)테트라하이드로-2H-파이란-3,4,5-트리일 트리아세테이트 ( 44 )의 제조
디클로로메탄 (1 mL) 및 DMF (0.5 mL) 중 카복실산 11 (160 mg, 320 μmol)의 용액에 Boc-MMAE 42 (100 mg, 120 μmol), 이어서 DCC (54 mg, 210 μmol) 및 DMAP (32 mg, 210 μmol)을 0℃에서 첨가하였다. 1시간 후, 반응을 실온으로 가온되도록 하고 밤새 교반하였다. 혼합물을 실리카겔 플래쉬 크로마토그래피(DCM 중 0-6% MeOH)로 정제하여 반순수 화합물 43을 얻었고, 이를 2 mL의 에틸 아세테이트에 용해시켰다. 이 용액에 Pd/C (10 wt.%, 40 mg) 및 트리에틸아민 (44 μL, 440 μmol)을 첨가하였다. 그 다음 플라스크를 비우고 세 번의 반복 주기로 풍선의 수소 가스로 채웠다. 반응 혼합물을 H2 풍선이 부착된 상태로 실온에서 48시간 동안 격렬하게 교반하였다. 셀라이트 패드를 통한 여과에 의해 촉매를 제거한 후, 여액을 진공 하에 농축하고 실리카겔 플래쉬 크로마토그래피 (DCM 중 0-5% MeOH)로 정제하여 화합물 44 (120 mg, 95 μmol, 79% 수율)를 황색 고체로서 얻었다. LRMS (ESI): m/z 1269.7 [M+H]+, C64H96N6O20에 대한 계산치 m/z 1269.7.
2S,3R,4S,5S,6S )-2-(5-((S)-2-((S)-2-((((9H- 플루오렌 -9-일) 메톡시 ) 카보닐 )아미노)-3-메틸부탄아미도)프로파나미도)-2-(((1S,2R)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((6S,9S,12S,13R)-12-((S)-sec-부틸)-6,9-디이소프로필-13-메톡시-2,2,5,11-테트라메틸-4,7,10-트리옥소-3-옥사-5,8,11-트리아자펜타데칸-15-오일)피롤리딘-2-일)-3-메톡시-2-메틸프로파나미도)-1-페닐프로폭시)카보닐)페녹시)-6-(메톡시카보닐)테트라하이드로-2H-파이란-3,4,5-트리일 트리아세테이트 ( 46 )의 제조
무수 DMF (1 mL) 중 아민 44 (120 mg, 94 μmol) 및 Fmoc-Ala-Cl 32 (63 mg, 180 μmol)의 혼합물에 DIPEA (32 μL, 180 μmol)을 실온에서 첨가하였다. 30분 후, 반응 혼합물을 실리카겔 플래쉬 크로마토그래피 (DCM 중 0-5% MeOH)로 간단히 정제하였다. 다음으로, CH3CN (5 mL) 중 화합물 45의 용액에 피페리딘 (80 μL)을 첨가하였다. 1시간 후, 반응 혼합물을 농축하고 CH3CN (1 mL)에서 재구성하였다. 이 용액에 Fmoc-Val-OPfp 34 (94 mg, 180 μmol) 및 DIPEA (22 μL, 120 μmol)을 첨가하였다. 20분 후, 반응을 실리카겔 크로마토그래피 (DCM 중 0 내지 5% v/v MeOH)로 정제하여 화합물 46 (120 mg, 72 μmol, 77% 수율)를 황색 고체로서 얻었다. LRMS (ESI): m/z 1661.9 [M+H]+, C87H120N8O24에 대한 계산치 m/z 1661.8.
( 2S,3S,4S,5R,6S )-6-(5-((S)-2-((S)-2-아미노-3- 메틸부탄아미도 ) 프로파나미도 )-2-(((1S,2R)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((6S,9S,12S,13R)-12-((S)-sec-부틸)-6,9-디이소프로필-13-메톡시-2,2,5,11-테트라메틸-4,7,10-트리옥소-3-옥사-5,8,11-트리아자펜타데칸-15-오일)피롤리딘-2-일)-3-메톡시-2-메틸프로파나미도)-1-페닐프로폭시)카보닐)페녹시)-3,4,5-트리하이드록시테트라하이드로-2H-파이란-2-카복실산 ( 47 )의 제조
MeOH/H2O (0.3 mL)의 4:1 (v/v) 혼합물 중 화합물 46 (15 mg, 9 μmol)의 용액에 ScOTf3 (100 mg, 0.20 mmol)을 교반하면서 실온에서 첨가하였다. 2일 후, 반응 혼합물을 진공 하에 농축하고 DMF-피페리딘 혼합물(10:1 v/v, 1.1 mL)에 재구성하고 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 그 다음 혼합물을 C18 컬럼 (0.05% TFA를 갖는 H2O/CH3CN, 90:10 내지 20:80 v/v) 상에서 역상 크로마토그래피로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 모으고 진공 하에 농축하여 화합물 47 (1.5 mg, 13% 수율)을 얻었다. LRMS (ESI): m/z 1299.7 [M+H]+, C65H102N8O19에 대한 계산치 m/z 1299.7.
( 2S,3S,4S,5R,6S )-6-(2-((( 1S,2R )-2-(( 2R,3R )-3-((S)-1-(( 3R,4S,5S )-4-((S)- N,3 -디메틸-2-((S)-3-메틸-2-(메틸아미노)부탄아미도)부탄아미도)-3-메톡시-5-메틸헵타노일)피롤리딘-2-일)-3-메톡시-2-메틸프로파나미도)-1-페닐프로폭시)카보닐)-5-((2S,5S,18R)-22-(2-((1,2-디메틸하이드라지닐)메틸)-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-1-일)-5-이소프로필-2-메틸-4,7,17,20-테트라옥소-18-(설포메틸)-10,13-디옥사-3,6,16,19-테트라아자도코산아미도)페녹시)-3,4,5-트리하이드록시테트라하이드로-2H-파이란-2-카복실산 ( 49 )의 제조
DMF (0.5 mL) 중 카복실산 48 (1 mg, 1.3 μmol) 및 HATU (0.4 mg, 1.1 μmol)의 혼합물에 DIPEA (1.0 uL, 6.1 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반한 다음, 아민 47 (1.5 mg, 1.2 μmol)을 혼합물에 첨가하였다. 1시간 후, 반응 혼합물을 농축하고 포름산(1 mL)에서 재구성하였다. 30분 후, 용매를 진공에서 제거하였다. 잔류물을 DMF(1 mL)에 용해시키고 실온에서 피페리딘(50 μL)으로 처리하였다. 실온에서 15분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 C18 컬럼 (0.05% TFA를 갖는 H2O/CH3CN, 90:10 내지 35:65 v/v)을 사용하는 역상 HPLC로 직접 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 모으고 동결건조하여 화합물 49 (0.7 mg, 35% 수율)을 얻었다. LRMS (ESI): m/z 1753.9 [M+H]+, C84H129N13O25S에 대한 계산치 m/z 1753.9.
반응식 5. 이차 알코올에서 에스테르 링커를 갖는 MMAE 작제물 52의 합성
( 2S,3S,4S,5R,6S )-6-(5-(1-(9H- 플루오렌 -9-일)-3-옥소-2,7,10,13,16,19,22,25,28-노나옥사-4-아자헨트리아콘탄-31-아미도)-2-(((1S,2R)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-N,3-디메틸-2-((S)-3-메틸-2-(메틸아미노)부탄아미도)부탄아미도)-3-메톡시-5-메틸헵타노일)피롤리딘-2-일)-3-메톡시-2-메틸프로파나미도)-1-페닐프로폭시)카보닐)페녹시)-3,4,5-트리하이드록시테트라하이드로-2H-파이란-2-카복실산 ( 50 )의 제조
DCM (0.5 mL) 및 MeOH (50 μL) 중 화합물 44 (32 mg, 25 μmol) 및 카복실산 37 (52 mg, 77 μmol)의 혼합물에 EEDQ (25 mg, 100 μmol)을 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물을 밤새 교반하고, 진공에서 농축하고, 실리카겔 크로마토그래피(0-10% MeOH/DCM)로 정제하였다. 얻어진 중간체를 300 μL의 MeOH 및 75 μL의 물에 용해시켰다. 이 용액을 스칸듐(III) 트리플레이트 (310 mg)로 처리하고 실온에서 2일 동안 교반한 다음, 역상 크로마토그래피(C18, 0-80% 아세토니트릴-물, 0.05% TFA)로 직접 정제하여 7 mg의 화합물 50 (4 μmol, 16 % 수율)을 무색 고체로서 얻었다. LRMS (ESI): m/z 1674.9 [M+H]+, C86H127N7O26에 대한 계산치 m/z 1674.9.
( 2S,3S,4S,5R,6S )-6-(5-(1-아미노-3,6,9,12,15,18,21,24- 옥타옥사헵타코산 -27-아미도)-2-(((1S,2R)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((6S,9S,12S,13R)-12-((S)-sec-부틸)-6,9-디이소프로필-13-메톡시-2,2,5,11-테트라메틸-4,7,10-트리옥소-3-옥사-5,8,11-트리아자펜타데칸-15-오일)피롤리딘-2-일)-3-메톡시-2-메틸프로파나미도)-1-페닐프로폭시)카보닐)페녹시)-3,4,5-트리하이드록시테트라하이드로-2H-파이란-2-카복실산 ( 51 )의 제조
1.5 mL의 무수 아세토니트릴 중 화합물 50 (7 mg, 4 μmol)의 용액을 실온에서 Boc2O (10 mg, 40 μmol) 및 DIPEA (7.3 μL, 40 μmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 4시간 동안 교반한 다음, 피페리딘(100 μL)으로 직접 처리하였다. 30분 후, 반응 혼합물을 역상 크로마토그래피 (C18, 0-70% 아세토니트릴-물/0.05% TFA)로 정제하여 3.6 mg의 화합물 51을 무색 고체 (2 μmol, 50% 수율)로서 얻었다. LRMS (ESI): m/z 1553.8 [M+H]+, C76H125N7O26에 대한 계산치 m/z 1553.9.
( 2S,3S,4S,5R,6S )-6-(2-((( 1S,2R )-2-(( 2R,3R )-3-((S)-1-(( 3R,4S,5S )-4-((S)- N,3 -디메틸-2-((S)-3-메틸-2-(메틸아미노)부탄아미도)부탄아미도)-3-메톡시-5-메틸헵타노일)피롤리딘-2-일)-3-메톡시-2-메틸프로파나미도)-1-페닐프로폭시)카보닐)-5-((R)-44-(2-((1,2-디메틸하이드라지닐)메틸)-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-1-일)-29,39,42-트리옥소-40-(설포메틸)-4,7,10,13,16,19,22,25,32,35-데카옥사-28,38,41-트리아자테트라테트라콘탄아미도)페녹시)-3,4,5-트리하이드록시테트라하이드로-2H-파이란-2-카복실산 ( 52 )의 제조
0.3 mL의 무수 DMF 중 카복실산 48 (3.6 mg, 4.5 μmol)의 용액을 실온에서 HATU (1.5 mg, 4 μmol) 및 DIPEA (3 μL)로 처리하였다. 수득한 혼합물을 30분 동안 교반하고 화합물 51 (3.5 mg, 2 μmol)과 조합하였다. 실온에서 1시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 진공 하에 농축하고 1 mL의 포름산에서 재구성하였다. 실온에서 1시간 후, 포름산을 진공에서 제거하고 잔류물을 1 mL의 DMF에 용해하고 실온에서 피페리딘(100 μL)으로 처리하였다. 30분 후, 반응 혼합물을 역상 분취 HPLC(0-70% 아세토니트릴-물/0,05% TFA)로 정제하였다. 순수한 분획을 조합하고 동결건조하여 3.6 mg (1.8 μmol, 90% 수율)의 화합물 52를 백색 고체로서 얻었다. LRMS (ESI): m/z 1004.6 [M+2H]2+, C94H151N13O32S에 대한 계산치 m/z 1004.5.
실시예 2
접합체의 제조
이중 절단 에스테르 링커를 함유하는 세포독소 작제물 21, 49 및 52는 HIPS 결찰을 사용하여 알데하이드 태그가 부착된 단클론성 항체 세트에 접합되었다(도 5). 생성된 접합체의 분석적 특성화는 도 1 내지 도 6 내지 21에 도시되어 있다.
실시예 3
생체접합, 정제 및 HPLC 분석론
알데하이드 태그 부착된 항체(15mg/mL)를 0.85% DMA를 함유하는 구연산나트륨/염화나트륨 완충액(pH 5.3-5.5)에서 37℃에서 72시간 동안 링커 페이로드(8-28몰 당량 약물:항체)에 접합하였다.　일부 경우에 링커-페이로드 용해도를 개선하기 위해 3% 수크로스, 0.05% Tween-20 및/또는 최대 10% vol/vol DMA를 첨가하였다.　접합 후, Amicon 0.5 mL 30 kD MWCO 원심 필터(Millipore Sigma #UFC5030BK) 또는 Zeba 탈염 컬럼(Fisher #PI87766)을 사용하여 접합 완충액으로 여러 번 희석하고 농축하여 유리 약물을 제거하였다.　최종 생성물의 DAR을 결정하기 위해, 분석용 HIC 또는 PLRP로 ADC를 검사하였다. HIC 컬럼(Tosoh #14947)은 이동상 A: 1.5M 황산암모늄, 25mM 인산나트륨 pH 7.0 및 이동상 B: 25% 이소프로판올, 18.75mM 인산나트륨 pH 7.0으로 실행되었다. PLRP 컬럼(Agilent #PL1912-1802)은 컬럼을 80℃로 가열한 상태에서 이동상 A: H2O 중 0.1% 트리플루오로아세트산 및 이동상 B: CH3CN 중 0.1% 트리플루오로아세트산으로 실행되었다. 응집을 결정하기 위하여, 샘플은 300mM NaCl, 25mM 인산나트륨 pH 6.8, 5% 이소프로판올의 이동상을 이용하는 분석적 크기 배제 크로마토그래피 (SEC; Tosoh #08541)를 사용해서 분석하였다.　
태그가 부착되지 않은(야생형) 항체의 말레이미드 접합
항체(5 mg/mL)는 PBS, pH 8.0, 1 mM DTPA에서 37℃에서 90분 동안 2.5-4 mol 당량의 TCEP를 사용하여 환원되었다. TCEP를 제거하고 단백질을 PBS, pH 7.4, 1 mM DTPA로 교환하였다. 환원된 항체(3 mg/mL)를 얼음 위에서 60분 동안 10 mol 당량의 CL2A-SN-38과 접합하였다. 유리 약물을 제거하고 최종 ADC를 pH 7.4의 PBS로 교환하였다.　
시험관 내 세포독성 검정
세포주를 -1일째에 96-웰 플레이트(Corning #3603)에 100 μL의 성장 배지에서 4 x 103개 세포/웰의 밀도로 플레이팅하고 밤새 배양하였다. 0일째에, 테스트 샘플의 연속 희석을 최종 농도의 6x로 성장 배지에서 수행하고 20 μL를 세포에 첨가하였다. 37℃, 5% CO2에서 5일 동안 인큐베이션한 후, 제조업체의 권장 사항에 따라 Promega CellTiter-Glo®를 사용하여 생존력을 측정하였다. GI50 곡선은 페이로드 농도로 정규화된 GraphPad Prism에서 계산되었다.　세포독성 검정의 그래프(생존율(%) 대 약물 농도(nM))는 도 22 내지 도 31에 도시되어 있다.
본 발명은 이의 특정 구현예를 참조하여 설명되었지만, 당업자는 본 발명의 진정한 사상 및 범위를 벗어나지 않고 다양한 변경이 이루어질 수 있고 등가물이 대체될 수 있음을 이해하여야 한다. 또한, 본 발명의 목적, 사상 및 범위에 특정 상황, 물질, 물질의 조성, 공정, 공정 단계 또는 단계들을 적합화하기 위해 많은 수정이 이루어질 수 있다. 모든 이러한 수정은 본 명세서에 첨부된 청구범위의 범위 내에 있는 것으로 의도된다.

Claims (40)

  1. 화학식 (I)의 접합체:

    여기서:
    W1은 약물이고;
    W2는 폴리펩티드이고;
    A는 아미노산 잔기이고, 여기서 k는 0 또는 1 내지 5의 정수이고;
    L은 링커이고;
    G는 접합 모이어티이고;
    X1은 및 -(CHR1)j(CHR2)-로부터 선택되고;
    R1은 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 치환된 헤테로사이클릴 및 R3으로부터 선택되고, 여기서 R1은 R3으로 선택적으로 치환되고;
    j는 0 또는 1 내지 5의 정수이고;
    R2은 R3이거나; R2은 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택되고, 여기서 R2는 R3으로 선택적으로 치환되고;
    X2는 -NH- 또는 -C(O)-이고;
    각각의 R3은 독립적으로 글리코시드 또는 글리코시드 유도체이다.
  2. 제1항에 있어서, X1은 인, 접합체:
  3. 제1항에 있어서, X1은 -(CHR1)j(CHR2)-인, 접합체.
  4. 제3항에 있어서, j는 0인, 접합체.
  5. 제4항에 있어서, R2는 알킬인, 접합체.
  6. 제4항에 있어서, R2는 아릴인, 접합체.
  7. 제3항에 있어서, j는 1인, 접합체.
  8. 제7항에 있어서, R1은 수소인, 접합체.
  9. 제7항에 있어서, R1은 R3으로 치환되는, 접합체.
  10. 제1항에 있어서, 각각의 R3은 하기로부터 독립적으로 선택되는, 접합체:

    및
  11. 제1항에 있어서, 접합체는 하기 화학식 (II)의 것인, 접합체:

    여기서 R4는 아미노산 측쇄이다.
  12. 제11항에 있어서, 접합체는 하기로부터 선택되는, 접합체:

    및
  13. 제1항에 있어서, 접합체는 하기 화학식 (III)의 것인, 접합체:

    여기서 R4는 아미노산 측쇄이다.
  14. 제13항에 있어서, 접합체는 하기로부터 선택되는, 접합체:
    및
  15. 제11항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, k는 2인, 접합체.
  16. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, L은 하기를 포함하는, 접합체:
    -(T1-V1)a-(T2-V2)b-(T3-V3)c-(T4-V4)d-(T5-V5)e-(T6-V6)f-,
    여기서
    a, b, c, d, e 및 f는 각각 독립적으로 0 또는 1이고;
    T1, T2, T3, T4, T5 및 T6은 각각 공유 결합, (C1-C12)알킬, 치환된 (C1-C12)알킬, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 및 치환된 헤테로사이클릴, (EDA)w, (PEG)n, (AA)p, -(CR13OH)m-, 4-아미노-피페리딘 (4AP), 메타-아미노-벤질옥시 (MABO), 메타-아미노-벤질옥시카보닐 (MABC), 파라-아미노-벤질옥시 (PABO), 파라-아미노-벤질옥시카보닐 (PABC), 파라-아미노벤질 (PAB), 파라-아미노-벤질아미노 (PABA), 아세탈, 하이드라진, 디설파이드, 및 에스테르로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 EDA는 에틸렌 디아민 모이어티이고, PEG는 폴리에틸렌 글리콜이고, 그리고 AA는 아미노산 잔기 또는 아미노산 유사체이고, 여기서 각각의 w는 1 내지 20의 정수이고, 각각의 n은 1 내지 30의 정수이고, 각각의 p는 1 내지 20의 정수이고, 그리고 각각의 m은 1 내지 12의 정수이고;
    V1, V2, V3, V4, V5 및 V6은 각각 공유 결합, -CO-, -NR15-, -NR15(CH2)q-, -NR15(C6H4)-, -CONR15-, -NR15CO-, -C(O)O-, -OC(O)-, -O-, -S-, -S(O)-, -SO2-, -SO2NR15-, -NR15SO2- 및 -P(O)OH-로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 각각의 q는 1 내지 6의 정수이고;
    각각의 R13은 수소, 알킬, 치환된 알킬, 아릴, 및 치환된 아릴로부터 독립적으로 선택되고; 그리고
    각각의 R15는 독립적으로 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 카복실, 카복실 에스테르, 아실, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택된다.
  17. 제16항에 있어서, 하기인, 접합체:
    여기서:
    T1은 (C1-C12)알킬이고 V1은 -CO-이고;
    T2는 아미노산 유사체이고 V2는 -NH-이고;
    T3은 (PEG)n이고 V3은 -CO-이고; 그리고
    d 내지 f는 각각 0이거나; 또는
    여기서:
    T1은 (C1-C12)알킬이고 V1은 -CO-이고;
    T2는 아미노산 유사체이고 V2는 -NH-이고;
    T3은 (PEG)n이고 V3은 -CONH-이고;
    T4는 (PEG)n이고 V4는 -CO-이고;
    e 및 f는 각각 0이다.
  18. 제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, G는 인, 접합체:
    여기서:
    Z는 CR10 또는 N이고,
    R7은 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 및 치환된 헤테로사이클릴헤테로사이클릴로부터 선택되고;
    R8 및 R9는 각각 독립적으로 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 알콕시, 치환된 알콕시, 아미노, 치환된 아미노, 카복실, 카복실 에스테르, 아실, 아실옥시, 아실 아미노, 아미노 아실, 알킬아미드, 치환된 알킬아미드, 설포닐, 티오알콕시, 치환된 티오알콕시, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택되거나, 또는 R8 및 R9는 선택적으로 환상으로 연결되어 5 또는 6-원 헤테로사이클릴을 형성하고;
    각각의 R10은 독립적으로 수소, 할로겐, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 알콕시, 치환된 알콕시, 아미노, 치환된 아미노, 카복실, 카복실 에스테르, 아실, 아실옥시, 아실 아미노, 아미노 아실, 알킬아미드, 치환된 알킬아미드, 설포닐, 티오알콕시, 치환된 티오알콕시, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택된다.
  19. 제1항에 있어서 G는 아세탈, 하이드라존, 옥심, 설파이드, 디설파이드, 트리아졸, 에스테르 및 아미드로부터 선택되는, 접합체.
  20. 하기 화학식 (IV)의 화합물;

    여기서:
    W1은 약물이고;
    A는 아미노산 잔기이고, 여기서 k는 0 또는 1 내지 5의 정수이고;
    L은 링커이고;
    G는 접합 모이어티이고;
    X1은 및 -(CHR1)j(CHR2)-로부터 선택되고;
    R1은 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 치환된 헤테로사이클릴 및 R3으로부터 선택되고, 여기서 R1은 R3으로 선택적으로 치환되고;
    j는 0 또는 1 내지 5의 정수이고;
    R2은 R3이거나; R2은 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택되고, 여기서 R2는 R3으로 선택적으로 치환되고;
    X2는 -NH- 또는 -C(O)-이고;
    각각의 R3은 독립적으로 글리코시드 또는 글리코시드 유도체이다.
  21. 제20항에 있어서, X1은 인, 화합물.
  22. 제20항에 있어서, X1은 -(CHR1)j(CHR2)-인, 화합물.
  23. 제22항에 있어서, j는 0인, 화합물.
  24. 제23항에 있어서, R2는 알킬인, 화합물.
  25. 제23항에 있어서, R2는 아릴인, 화합물.
  26. 제22항에 있어서, j는 1인, 화합물.
  27. 제26항에 있어서, R1은 수소인, 화합물.
  28. 제26항에 있어서, R1은 R3으로 치환된 것인, 화합물.
  29. 제20항에 있어서, 각각의 R3은 하기로부터 독립적으로 선택되는, 화합물:

    및
  30. 제20항에 있어서, 화합물은 화학식 (V)의 것인, 화합물:

    여기서 R4는 아미노산 측쇄이다.
  31. 제30항에 있어서, 화합물은 하기로부터 선택되는, 화합물:

    및
  32. 제20항에 있어서, 화합물은 화학식 (VI)의 것인, 화합물:

    여기서 R4는 아미노산 측쇄이다.
  33. 제32항에 있어서, 화합물은 하기로부터 선택되는, 화합물:
    및
  34. 제30항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, k는 2인, 화합물.
  35. 제20항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서, L은 하기를 포함하는, 화합물:
    -(T1-V1)a-(T2-V2)b-(T3-V3)c-(T4-V4)d-(T5-V5)e-(T6-V6)f-,
    여기서
    a, b, c, d, e 및 f는 각각 독립적으로 0 또는 1이고;
    T1, T2, T3, T4, T5 및 T6은 각각 공유 결합, (C1-C12)알킬, 치환된 (C1-C12)알킬, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 및 치환된 헤테로사이클릴, (EDA)w, (PEG)n, (AA)p, -(CR13OH)m-, 4-아미노-피페리딘 (4AP), 메타-아미노-벤질옥시 (MABO), 메타-아미노-벤질옥시카보닐 (MABC), 파라-아미노-벤질옥시 (PABO), 파라-아미노-벤질옥시카보닐 (PABC), 파라-아미노벤질 (PAB), 파라-아미노-벤질아미노 (PABA), 아세탈, 하이드라진, 디설파이드, 및 에스테르로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 EDA는 에틸렌 디아민 모이어티이고, PEG는 폴리에틸렌 글리콜이고, 그리고 AA는 아미노산 잔기 또는 아미노산 유사체이고, 여기서 각각의 w는 1 내지 20의 정수이고, 각각의 n은 1 내지 30의 정수이고, 각각의 p는 1 내지 20의 정수이고, 그리고 각각의 m은 1 내지 12의 정수이고;
    V1, V2, V3, V4, V5 및 V6은 각각 공유 결합, -CO-, -NR15-, -NR15(CH2)q-, -NR15(C6H4)-, -CONR15-, -NR15CO-, -C(O)O-, -OC(O)-, -O-, -S-, -S(O)-, -SO2-, -SO2NR15-, -NR15SO2- 및 -P(O)OH-로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 각각의 q는 1 내지 6의 정수이고;
    각각의 R13은 수소, 알킬, 치환된 알킬, 아릴, 및 치환된 아릴로부터 독립적으로 선택되고; 그리고
    각각의 R15는 독립적으로 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 카복실, 카복실 에스테르, 아실, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택된다.
  36. 제35항에 있어서, 하기인 화합물:
    여기서:
    T1은 (C1-C12)알킬이고 V1은 -CO-이고;
    T2는 아미노산 유사체이고 V2는 -NH-이고;
    T3은 (PEG)n이고 V3은 -CO-이고; 그리고
    d 내지 f는 각각 0이거나; 또는
    여기서:
    T1은 (C1-C12)알킬이고 V1은 -CO-이고;
    T2는 아미노산 유사체이고 V2는 -NH-이고;
    T3은 (PEG)n이고 V3은 -CONH-이고;
    T4는 (PEG)n이고 V4는 -CO-이고;
    e 및 f는 각각 0이다.
  37. 제20항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서, G는 인, 화합물:
    여기서:
    Z는 CR10 또는 N이고,
    R8 및 R9는 각각 독립적으로 수소, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 알콕시, 치환된 알콕시, 아미노, 치환된 아미노, 카복실, 카복실 에스테르, 아실, 아실옥시, 아실 아미노, 아미노 아실, 알킬아미드, 치환된 알킬아미드, 설포닐, 티오알콕시, 치환된 티오알콕시, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택되거나, 또는 R8 및 R9는 선택적으로 환상으로 연결되어 5 또는 6-원 헤테로사이클릴을 형성하고;
    각각의 R10은 독립적으로 수소, 할로겐, 알킬, 치환된 알킬, 알케닐, 치환된 알케닐, 알키닐, 치환된 알키닐, 알콕시, 치환된 알콕시, 아미노, 치환된 아미노, 카복실, 카복실 에스테르, 아실, 아실옥시, 아실 아미노, 아미노 아실, 알킬아마이드, 치환된 알킬아마이드, 설포닐, 티오알콕시, 치환된 티오알콕시, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클릴 및 치환된 헤테로사이클릴로부터 선택된다.
  38. 제20항에 있어서, G는 아세탈, NHS-에스테르, PFP-에스테르, TFP-에스테르, 이소시아네이트, 이소티오시아네이트, 아실 할라이드, 말레이미드, 요오도아세트아미드, 포스핀, 알킨, 아지드, 하이드라진, 알콕시아민, 디설파이드, 에스테르, 및 아미드로부터 선택되는, 화합물.
  39. 하기를 포함하는, 약제학적 조성물:
    제1항 내지 제19항 중 어느 한 항의 접합체; 및
    약제학적으로 허용 가능한 부형제.
  40. 유효량의 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항의 접합체를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법.
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