KR20230129425A - Glp-1r 및 gcgr의 균형 잡힌 작용제를 사용하여 혈당및/또는 체중을 낮추기 위한 치료 요법 및 방법 - Google Patents

Glp-1r 및 gcgr의 균형 잡힌 작용제를 사용하여 혈당및/또는 체중을 낮추기 위한 치료 요법 및 방법 Download PDF

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Abstract

본 개시내용은 이중 GLP-1R 및 GCGR 작용제의 매주 1회 투여 요법, 서열 번호 1의 이중 작용제 펩타이드 생성물을 포함하지만 이에 제한되지 않는 제제, 및 만성 체중 관리, 비만의 치료 및/또는 혈당 조절을 위해 이를 사용하는 방법에 관한 것이다.

Description

GLP-1R 및 GCGR의 균형 잡힌 작용제를 사용하여 혈당 및/또는 체중을 낮추기 위한 치료 요법 및 방법
관련 출원
본 출원은 2020년 12월 7일에 출원된 미국 특허 가출원 제63/122,117호; 2021년 6월 16일에 출원된 미국 특허 가출원 제63/211,157호; 및 2021년 9월 28일에 출원된 미국 특허 가출원 제63/249,468호에 기초한 우선권을 주장하고, 상기 출원은 각각 그 전체가 본 출원에 포함된다.
서열 목록
본 출원은 EFS-Web을 통해 ASCII 형식으로 전자적으로 제출되고 그 전체가 본 명세서에 참조로 포함된 서열 목록을 포함한다. 2021년 12월 7일에 생성된 해당 ASCII 사본의 이름은 MED008PCT_ST25.TXT이고, 크기는 8453 바이트이다.
개시내용의 분야
본 개시내용은 GLP-1R 및 GCGR 작용제, 제제 및 이를 사용하는 방법 분야에 관한 것이다.
비만, 당뇨병, 비알코올성 지방간 질환(NAFLD) 및 이의 진행된 형태인 비알코올성 지방간염(NASH)의 유병률 증가는 전염병 수준의 세계 보건 위기이며, 환자 이환율 및 사망률의 주요 원인일 뿐만 아니라 큰 경제적 부담으로 작용하고 있다. 비만은 제2형 당뇨병 및 NASH의 중요한 위험 인자이며, 제2형 당뇨병 환자의 약 90%가 과체중이거나 비만이다. 비만은 전 세계적으로 빠르게 증가하는 문제이며, 현재 미국 성인의 65%를 초과하는 성인이 과체중이다(Hedley, A.A., et al. (2004) JAMA 291: 2847-2850). NASH는 가까운 장래에 간 이식의 주요 원인이 될 것으로 예상된다. 비만 및 당뇨병에 대한 안전하고 효과적인 약제학적 치료법의 개발이 필요하다. 본 개시내용은 비알코올성 지방간염(NASH) 및 다낭성 난소 증후군(PCOS)과 같은 비만 및/또는 당뇨병과 관련된 쟁애를 치료하기 위한 개선된 펩타이드 의약품을 제공한다.
미국(US)에서, NASH는 말기 간 질환 또는 간 이식의 주요 원인이 되고 있다. 비만은 NASH의 핵심 원인이며, 체중을 줄이면 간 지방이 감소하고, NASH가 개선된다. NASH가 있는 개체에서 80% 초과의 개체가 과체중이거나 비만이며, 현재 미국 식품의약국(FDA)에서 승인한 체중 감소를 유도하기 위한 약제학적 옵션이 없기 때문에 치료는 주로 체중 감소 달성을 위한 생활 습관 중재에 기반을 두고 있다. 그러나, 생활 습관의 변화만으로 장기적인 체중 감소를 달성하고 유지하는 것은 어렵다.
글루카곤 유사 펩타이드-1 수용체 작용제(GLP-1RA)는 승인된 용량에서 적당한 정도의 체중 감소와 관련이 있으며, 이러한 작용제는 NASH 환자를 위한 치료 옵션으로 등장하였다. 최근 임상 시험에서, 일일 GLP-1RA인 리라글루타이드가 간 섬유증 개선 경향과 함께 NASH 해결과 관련이 있는 것으로 나타났다. 그러나, 환자의 체중은 단지 5.5%만 감소하였다. 한 연구에서, 최적의 NASH 해결을 위해서는 10% 이상의 체중 감소가 필요하였다. 더 높은 수준의 체중 감소는 또한 NASH 환자가 직면하는 가장 심각한 동반이환을 나타내는 심혈관 질환 및 비간성 악성종양의 발생률 감소와 관련이 있다.
GLP-1RA는 식욕과 음식 섭취에 대한 중심 효과를 발휘하는 반면, GCR 작용제는 동물 모델 및 인간에서 증가된 에너지 소비를 유도한다. GCR 작용제 및 GLP-1RA의 효과는 GLP-1RA 단독에 비해 더 큰 정도의 체중 감소를 유도하는 데 시너지 효과가 있는 것으로 나타났다. 또한, GCR은 지방 분해를 촉진하고 간 지방 합성을 억제하여 간 지방 감소 및 NASH 해결을 위한 추가의 경로를 제공한다.
이중 작용제는 동일한 분자에서 GCR과 GLP-1RA를 조합한다. 비만인 비인간 영장류에서, GLP-1R/GCR 이중 작용제의 만성 투여는 GLP-1RA 단일 작용제에 비해 더 큰 정도로 체중을 감소시키고 포도당 내성을 개선하였다. 글루카곤 활성에 대한 GLP-1의 편향이 5:1인 GLP-1/GCR 이중 작용제인 코타두타이드의 임상 연구에서, 단 6주 만에 간 지방 함량이 39% 감소하고, 리라글루타이드 단독보다 NASH 관련 알라닌 아미노트랜스퍼라제(ALT) 감소가 크게 개선됨이 입증되었다. 그러나, 26주에 걸친 코타두타이드의 투여 동안 체중 감소 정도는 리라글루타이드와 대등하였고(5.4% vs. 5.5%), 이것은 5:1 비율이 간 지방 감소에는 허용되지만 체중 감소를 위해서는 최적량 미만임을 시사한다. 균형 잡힌(1:1) 작용제는 한 작용제를 다른 작용제보다 선호하는 편향된 비율보다 더 큰 체중 감소 및 대사 효과와 관련이 있는 것으로 나타났다. 균형 잡힌 이중 작용제인 JNJ 64565111을 사용한 최근 연구에서, 단 12주 만에 체중이 8%나 감소하였다(NCT03586830).
불행하게도, GLP-1RA는 높은 비율의 메스꺼움, 구토 및 설사와 관련이 있다. 이러한 작용제는 또한 부작용을 줄이기 위해 장기간에 걸쳐 적정해야 하며, 내약성 및 투여 요법이 개선된 작용제가 필요하다. 따라서, 혈당 조절 및/또는 위장 부작용 없이 치료 수준에 도달하기 위해 적정할 필요가 없는 체중 감소를 유도하기 위한 치료 용량의 편리한 투여(예를 들어, 매일 대신 매주 투여)에 대한 필요성이 남아 있다.
개시내용의 요약
이중 작용제 펩타이드 및 이의 제품(예를 들어, 제제), 및 인슐린 저항성 및/또는 비만, 예를 들어 제2형 당뇨병, 대사 증후군, 심혈관 질환(관상동맥 질환, 예를 들어 죽상동맥경화증 및 심근경색증 포함), 고혈압, NASH, 만성 신장 질환, 만성 체중 관리 및 PCOS를 포함하지만 이로 제한되지 않는, 글루카곤 유사 펩타이드 1 수용체(GLP-1R) 및 글루카곤 수용체(GCGR)의 기능과 관련된 장애를 치료하기 위한, 및 상기 장애와 관련된 병태를 치료하기 위한 그의 용도가 본원에서 설명된다. 이러한 이중 작용제 펩타이드는 GLP-1R 및 GCGR 둘 모두에 대해 친화도를 가지며, 이는 예를 들어 본원에서 설명되는 바와 같은 세포 검정에 의해 결정되거나 또는 이러한 결정을 위한 또 다른 검정을 사용하여 결정될 수 있다. 일부 실시양태에서, 이중 작용제 펩타이드는 서열 번호(SEQ ID NO) 1-10 중 임의의 하나, 또는 이의 유도체, 예를 들어 이의 보존적으로 치환된 유도체 및/또는 이들의 조합물이다. 일부 실시양태에서, 이중 작용제 펩타이드는 상기 언급된 세포 검정을 사용하여 결정될 수 있는 바와 같이 GLP-1R 및 GCGR에 대해 거의 동등한 친화도를 나타내고, 바람직한 실시양태에서 이중 작용제 펩타이드는 서열 번호 1 또는 그의 유도체이다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용은 GLP-1R 및 GCGR에 대한 불균형한 친화도를 갖는 작용제(예를 들어, 세마글루타이드) 또는 지나치게 큰 최대 농도(Cmax)를 갖는 작용제와 비교하여 하나 이상의 부작용의 감소와 함께 혈당을 조절하도록 구성된 상기 이중 작용제 펩타이드(들)의 약제학적 투여 제제를 제공한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용은 GLP-1R 및 GCGR에 대한 불균형한 친화도를 갖는 작용제와 비교하여 하나 이상의 부작용의 감소와 함께 만성 체중 관리를 위해 체중 감소를 유도하도록 구성된 상기 이중 작용제 펩타이드(들)의 약제학적 투여 제제를 제공한다. 부작용은 일부 실시양태에서 포유동물에게 투여 시 메스꺼움, 구토, 설사, 복통 및 변비로부터 선택된다. 이러한 부작용은 일반적으로 순환계로 빠르게 진입하여 과도하게 높은 Cmax를 유발하는(이중) 작용제의 투여 후에 관찰된다. 일부 실시양태에서, 본원에서 개시되는 이중 작용제 펩타이드(들)(예를 들어, 서열 번호 1-10 또는 이의 유도체)의 투여는 GLP-1R 및 GCGR에 대한 불균형한 친화도를 갖는 작용제(예를 들어, 세마글루타이드)와 비교하여 다른 결과(예를 들어, 체중 감소, 지방 손실, 지질 프로파일) 및/또는 약동학(PK) 파라미터의 개선을 유발할 수 있다.
바람직한 실시양태에서, 본 개시내용은 서열 번호 1을 포함하는 약제학적 투여 제제를 인간에게 투여하는 것을 포함하는 인간의 혈당 저하 및/또는 체중 감소 방법을 제공하며, 여기서 하나 이상의 부작용의 발생은 GLP-1R 및 GCGR에 대한 불균형한 친화도를 갖는 작용제와 비교하여 감소되며, 상기 부작용은 인간에게 투여 시 메스꺼움, 구토, 설사, 복통 및 변비로부터 선택된다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용은 만성 체중 관리를 위한 치료를 위해 구성된 상기 이중 작용제 펩타이드(들)의 약제학적 투여 제제를 제공한다. 일부 실시양태에서, 인간의 체중 감소를 유도함으로써 적어도 25의 체질량 지수(BMI; kg/m2)를 갖는 인간의 만성 체중 관리를 위한 치료가 제공되며, 상기 방법은 서열 번호 1을 포함하는 약제학적 투여 제제의 치료 유효량을 인간에게 매주 1회 투여하는 것을 포함하고, 여기서 인간의 체중은 제12주에 기준선으로부터 적어도 5%(바람직하게는 적어도 약 5% 내지 약 10%) 감소된다.
또한, 관련 기술 분야의 통상의 기술자에 의해 이해되는 바와 같이 본 개시내용의 다른 측면이 고려된다.
도 1은 43일에 걸쳐 측정된 위약과 비교하여 1.2 mg 및 1.8 mg의 투여량으로 ALT-801(본원에서 펨비두타이드로도 지칭됨)을 투여한 후의 체중 감소 결과를 나타낸 것이다(또한 표 7 참조).
도 2는 상이한 투여량 그룹(1.2 mg, 1.8 mg 및 2.4 mg) 대 위약 그룹에 걸쳐 6주 및 12주 치료 후에 ALT-801(펨비두타이드)의 매주 투여 후의 체중 감소 결과를 나타낸 것이다.
도 3은 ALT-801 1.8 mg을 12주 동안 매주 투여한 후 위약 대비 개별 대상체의 체중 감소 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 ALT-801 2.4 mg을 12주 동안 매주 투여한 후 위약 대비 개별 대상체의 체중 감소 결과를 나타낸 것이다.
도 5a 및 도 5b는 각각 체중 감소와 연령 또는 BMI(체질량 지수) 사이에 상관관계가 없음을 나타낸 것이다.
도 6은 측정 가능한 모든 대상체에서 치료 전 대 치료 후(ALT-801, 1.2, 1.8 또는 2.4 mg)의 간 지방 수준을 나타낸 것이고, 여기서 첫 번째 막대는 스크리닝 시 측정값(기준선)이고, 두 번째 막대는 6주차 측정값이다.
도 7은 위약과 비교하여 측정 가능한 모든 대상체에서 ALT-801(1.2, 1.8 또는 2.4 mg 치료)로 치료한 후 6주에 간 지방 수준의 절대적인 변화를 나타낸 것이다.
도 8은 위약과 비교하여 측정 가능한 모든 대상체에서 ALT-801(1.2, 1.8 또는 2.4 mg 치료)로 치료한 후 6주에 간 지방 수준의 상대적인 변화를 나타낸 것이다.
도 9는 위약과 비교하여 모든 지방증 대상체에서 ALT-801(1.8 또는 2.4 mg 치료)로 치료한 후 6주에 간 지방 수준의 절대적인 변화를 나타낸 것이다.
도 10은 위약과 비교하여 모든 지방증 대상체에서 ALT-801(1.8 또는 2.4 mg 치료)로 치료한 후 6주에 간 지방 수준의 상대적인 변화를 나타낸 것이다.
도 11은 ALT-801(1.8 및 2.4 mg 투여량)로 6주간 치료한 후 MRI-PDFF(자기 공명 영상 양성자 밀도 지방 분획: Magnetic Resonance Imaging Proton Density Fat Fraction)에 의해 간 지방이 검출할 수 없는 수준으로 90%를 초과하는 정도로 감소함을 보여주고, 여기서 각각의 대상체의 기준선 간 지방 함량은 각각 19.5%, 17% 및 12.5%이었다. 1.8 mg 또는 2.4 mg 용량의 ALT-801로 매주 치료하면, 간 지방 함량(LFC)이 검출할 수 없는 수준(LOD(검출 한계) 미만)으로 감소하였다.
도 12는 위약과 비교하여 ALT-801(1.2, 1.8 및 2.4 mg 투여량)로 12주 치료한 후 모든 그룹에서 심혈관 위험에 대한 바이오마커로서의 혈압의 개선을 나타낸 것이고, 여기서 각각의 그룹의 첫 번째 막대는 수축기 혈압이고, 두 번째 막대는 확장기 혈압이다. ALT-801을 사용한 매주 치료는 모든 투여 그룹(1.2 mg, 1.8 mg 또는 2.4 mg)에 걸쳐 혈압을 개선하였다.
도 13은 12주 치료 후 위약과 비교하여 모든 투여 그룹(1.2, 1.8 및 2.4 mg 용량)에 걸쳐 심혈관 위험의 바이오마커로서의 혈청 지질 수준(총 콜레스테롤("Tot. Chol."), 고밀도 지단백질("HDL Chol."), 저밀도 지단백질("LDL Chol.") 및 트리글리세라이드)의 개선을 나타낸 것이다.
도 14는 기준선(스크리닝) 및 1.2 mg, 1.8 mg 및 2.4 mg의 매주 용량으로 ALT-801를 사용한 치료 12주(제85일) 후에 측정된 BMI(체질량 지수)를 위약과 비교하여 보여준다. 모든 치료 그룹에서 BMI가 감소하였으며, 1.8 mg 및 2.4 투여량 치료 그룹은 위약과 비교하여 상당한 감소를 보였다.
도 15는 위약과 비교하여 1.2 mg, 1.8 mg 및 2.4 mg의 매주 용량으로 ALT-801을 사용한 치료 12주 후에 조기 포만감 시점에 측정된 식욕 억제를 보여준다. 모든 치료 그룹은 식욕 감퇴 및 용량 반응을 보였다.
개시내용의 상세한 설명
본 개시내용은 이중 작용제 펩타이드(들)뿐만 아니라, 이를 포함하는 약제학적 투여 제제 및 이를 사용하는 방법에 관한 것이다. 이중 작용제 펩타이드는 세포 검정을 사용하여 결정될 수 있는 바와 같이 글루카곤 유사 펩타이드 1 수용체(GLP-1R) 및 글루카곤 수용체(GCGR)에 대해 친화도를 갖고, 바람직한 실시양태에서는 거의 동등한 친화도를 갖는다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용은 혈당을 조절하도록 구성된 약제학적 투여 제제를 제공한다. 일부 실시양태에서, 혈당은 선택적(예를 들어, 세마글루타이드) 및/또는 불균형한 작용제와 비교하여 이중 작용제 펩타이드의 투여 후에 더 양호하게 조절(예를 들어, 저하 및 안정화)된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용은 만성 체중 관리의 치료를 비롯하여 체중 감소를 유도하도록 구성된 약제학적 투여 제제를 제공한다. 일부 실시양태에서, 체중 감소는 선택적(예를 들어, 세마글루타이드) 및/또는 불균형한 작용제와 비교하여 이중 작용제 펩타이드의 투여 후에 개선(예를 들어, 저하 및/또는 안정화)된다. 일부 실시양태에서, 이러한 약제학적 투여 제제는 GLP-1R 및 GCGR에 대해 선택적(예를 들어, 세마글루타이드) 및/또는 불균형한 친화도를 갖는 작용제와 비교하여 부작용의 감소를 나타낸다. 일부 실시양태에서, 부작용은 GLP-1R 및 GCGR에 대한 불균형한 친화도를 갖는 작용제(예를 들어, 세마글루타이드)를 포유동물에게 투여한 후 전형적으로 관찰되는 메스꺼움, 구토, 설사, 복통 및/또는 변비를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용은 비알코올성 지방간염(NASH)을 유발하는 근본적인 대사 기능 장애를 치료하기 위해 고안된 새로운 펩타이드 기반 이중 GLP-1/글루카곤 수용체 작용제를 제공한다.
일부 실시양태에서, 이중 작용제 펩타이드는 서열 번호 1-10 중 임의의 하나, 또는 이의 유도체이다. 바람직한 실시양태에서, 이중 작용제 펩타이드는 표 1에 제시된 바와 같이 EU-A1873(서열 번호 1), EU-A1588(서열 번호 2), EU-A1871(서열 번호 3), EU-A1872(서열 번호 4)이다:
E* 및 K*는 상기 잔기 사이의 측쇄 락탐 연결을 나타낸다.
(EPC17CO2H) = (17-카르복시헵타데카노일-(γ-Glu)-AEEA-AEEA); Z17CO2H = (베타-D-글루쿠론-1-일)-1-옥사)17-카르복시헵타데칸; Me15CO2H = (베타-D-멜로비오우라닐-1-일)-1-옥사)15-카르복시펜타데칸.
표 1에서, 맨 윗줄의 숫자 1, 5, 10, 15, 20, 25 및 30은 아미노산 잔기 번호(서열 번호 1-5 각각에 존재하는 총 29개의 아미노산 잔기)를 나타낸다. 표 1에 나타낸 세마글루타이드는 서열 번호 11(아미노산 잔기 31개)이다. 표 1에 나타낸 바와 같이, 서열 번호 1(표 1의 EU-A1873; ALT-801 또는 펨비두타이드로도 알려짐)은 다음 아미노산 서열을 갖는다:
여기서, *는 Glu16과 Lys20 사이에 형성되는 락탐 다리를 나타내고, 17Lys#는 글루쿠론산 C-18*(EuPort G, Z17CO2H)에 대한 부착 부위를 나타낸다.
달리 설명하면, 서열 번호 1은 29개의 아미노산 잔기 및 17Lys에 부착된 글루쿠론산/C18 이산 모이어티로 구성된 펩타이드 아미드이며, 여기서 16Glu와 20Lys의 측쇄는 아래에 나타낸 바와 같이 분자내 사이클을 형성한다:
일부 실시양태에서, 이중 작용제 펩타이드는 다음 중 임의의 것일 수 있다:
; 또는 이의 유도체
여기서, Xaa1은 임의의 아미노산, 바람직하게는 Aib(α-아미노이소부티르산(또는 2-메틸알라닌 또는 C알파-메틸알라닌))이고; Xaa2는 Lys(N-오메가(1-(17-카르복실-헵타데실옥시)베타-D-글루쿠로닐)) 또는 Lys(Z17CO2H)이며, 여기서 Z17CO2H는 (베타-D-글루쿠론-1-일)-1-옥사)17-카르복시헵타데칸이고; Glu16과 Lys20은 그 각각의 측쇄를 통해 서로 고리화되어 락탐 연결을 형성함;
; 또는 이의 유도체
여기서, Xaa1은 임의의 아미노산, 바람직하게는 Aib(α-아미노이소부티르산(또는 2-메틸알라닌 또는 C알파-메틸알라닌))이고; Xaa2는 Lys(Me17CO2H)이고, 여기서 Me17CO2H는 베타-D-멜로비오우라닐-1-일)-1-옥사)17-카르복시헵타데칸이고; Glu16과 Lys20은 그 각각의 측쇄를 통해 서로 고리화되어 락탐 연결을 형성함;
; 또는 이의 유도체
여기서, Xaa1은 임의의 아미노산, 바람직하게는 Aib(α-아미노이소부티르산(또는 2-메틸알라닌 또는 C알파-메틸알라닌))이고; Glu16과 Lys20은 그 각각의 측쇄를 통해 서로 고리화되어 락탐 연결을 형성하고; Xaa3은 Lys(Z15CO2H임)이고, 여기서 Z15CO2H는 (베타-D-글루쿠론-1-일)-1-옥사)15-카르복시헵타데칸임;
; 또는 이의 유도체
여기서, Xaa1은 임의의 아미노산, 바람직하게는 Aib(α-아미노이소부티르산(또는 2-메틸알라닌 또는 C알파-메틸알라닌))이고; Glu16과 Lys20은 그 각각의 측쇄를 통해 서로 고리화되어 락탐 연결을 형성하고; Xaa4는 Lys(Z17CO2H)이고, 여기서 Z17CO2H는 (베타-D-글루쿠론-1-일)-1-옥사)17-카르복시헵타데칸임; 또는
; 또는 이의 유도체
여기서, Xaa1은 임의의 아미노산, 바람직하게는 Aib(α-아미노이소부티르산(또는 2-메틸알라닌 또는 C알파-메틸알라닌))이고; Xaa2는 Lys(N-오메가(1-(17-카르복실-헵타데실옥시)베타-D-글루쿠로닐)) 또는 Lys(Z17CO2H)이고, 여기서 Z17CO2H는 (베타-D-글루쿠론-1-일)-1-옥사)17-카르복시헵타데칸이고; Xaa5는 Arg이고, Glu16과 Lys20은 그 각각의 측쇄를 통해 서로 고리화되어 락탐 연결을 형성함.
바람직한 실시양태에서, 이중 작용제 펩타이드는 서열 번호 1-10 중 어느 하나의 아미노산 서열을 갖는 것 또는 이의 유도체이다. 바람직한 실시양태에서, 이중 작용제 펩타이드는 서열 번호 1이다. 일부 실시양태에서, 본원에서 ALT-801로 지칭되는 수성 완충제 중의 서열 번호 1의 약제학적 제제가 제공된다. 서열 번호 1을 포함하는 본원의 이중 작용제 펩타이드 생성물은 아미노산 측쇄 아미드 연결(락탐 다리), 및 지방산 측쇄에 연결된 글루쿠론산으로 이루어진 EuPort 측쇄를 포함한다. 링커 아미노산을 통해 펩타이드에 공유 부착된 친수성 사카라이드 기 및 소수성 알킬 사슬 부분으로 이루어진 측쇄 계면활성제는 피하(SC) 주사 후 미셀(micelle)을 형성하고, 순환계 내로의 진입을 늦춘다. 더 느린 진입과 관련된 더 낮은 최대 농도(Cmax)는 더 적은 GI 부작용 및 더 나은 내약성을 초래할 수 있다. 상기 후자의 특징은 또한 혈장 단백질에 대한 결합을 강화하고, 대사 안정성을 개선하여 반감기(t1/2)를 연장한다. 서열 번호 1의 디자인은 대략 40 pM 및 100% 활성의 두 수용체 모두에서 동등한 효능(1:1) 활성을 갖는 공동 작용제를 성공적으로 유도하였다.
이중 작용제 펩타이드(예를 들어, 서열 번호 1-10, 또는 이의 유도체)의 합성은 본원(예를 들어, 실시예 1) 및 그 전체가 본 개시내용에 참고로 포함된 미국 특허 제9,856,306 B2호에 기재되어 있다. 일부 실시양태에서, 이중 작용제 펩타이드는 본원에서 설명되는 바와 같이 하나 이상의 보존적으로 치환된 아미노산을 포함할 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 서열 번호 1은 하나 이상의 보존적으로 치환된 아미노산을 포함할 수 있지만, 바람직하게는 아미노산 잔기 16, 17 또는 20에는 포함하지 않는다. 바람직한 실시양태에서, 서열 번호 2는 하나 이상의 보존적으로 치환된 아미노산을 포함할 수 있지만, 바람직하게는 아미노산 잔기 16, 17 또는 20에는 포함하지 않는다. 바람직한 실시양태에서, 서열 번호 3은 하나 이상의 보존적으로 치환된 아미노산을 포함할 수 있지만, 바람직하게는 아미노산 잔기 16, 20 또는 24에는 포함하지 않는다. 바람직한 실시양태에서, 서열 번호 4는 하나 이상의 보존적으로 치환된 아미노산을 포함할 수 있지만, 바람직하게는 아미노산 잔기 16, 20 또는 24에는 포함하지 않는다. 바람직한 실시양태에서, 서열 번호 5는 하나 이상의 보존적으로 치환된 아미노산을 포함할 수 있지만, 바람직하게는 아미노산 잔기 12, 16, 17 또는 20에는 포함하지 않는다.
서열 번호 1-10의 펩타이드는 그 각각이 글루카곤 유사 펩타이드 1 수용체(GLP-1R) 및 글루카곤 수용체(GCGR)에 대한 작용제이기 때문에 본원에서 집합적으로 "이중 작용제 펩타이드"(또는 개별적으로 "이중 작용제 펩타이드")로 지칭될 수 있다. 일부 실시양태에서, 펩타이드는 본원의 실시예 2에서 설명되는 것과 같은 세포 검정에 의해 결정될 수 있는 바와 같이 GLP-1R 및 GCGR의 이중 작용제이다. 간략하게 설명하면, 일부 실시양태에서, 세포 검정은 인간 GLP-1R 또는 GCGR이 발현되는 CHO 세포에서 cAMP 자극 또는 어레스틴 활성화를 측정함으로써 수행될 수 있다(LeadHunter 검정(DiscoveRx)). 바람직하게는, 이러한 검정은 서열 번호 1-10이 혈청 알부민(>99%)에 매우 단단하게 결합하고 결과를 왜곡할 수 있기 때문에(예를 들어, 본원의 실시예 2 참조), 전형적일 수 있는 0.1% 소 혈청 알부민(BSA)과 비교하여 0.1% 오발부민의 존재 하에 수행된다. 일부 실시양태에서, 이러한 검정을 사용하여 결정된 바와 같이, 이중 작용제 펩타이드는 GLP-1R 및 GCGR 둘 모두에 대해 친화도를 가질 수 있고, 바람직한 실시양태에서 GLP-1R 및 GCGR에 대해 거의 동등한 친화도를 가질 수 있다. "거의 동등한 친화도"는 이러한 세포 검정에 의해 결정될 수 있는 바와 같이, 이중 작용제 펩타이드가 다른 하나에 대한 친화도에 비해 단지 약 2배 내지 3배, 바람직하게는 2배 이하의 GLP-1R 또는 GCGR에 대한 친화도를 갖는다는 것을 의미한다. 예를 들어, 본원의 실시예에서 제시되는 바와 같이, 이중 작용제 펩타이드 서열 번호 1(EU-A1873)은 놀랍게도 GLP-1R 및 GCGR에 대해 거의 동등한 친화도를 갖는 이중 작용제 펩타이드(예를 들어, GLP-1R의 경우 약 39 pM(115% 고유 활성) 및 GCGR의 경우 44 pM(115% 고유 활성)의 EC50)로 밝혀졌다. 이것은 GLP-1R에 대해 강하게 편향되거나 오직 GLP-1R에 대해서만 친화도를 나타내는 세마글루타이드 및 엑센딘-4를 포함하는 GLP-1 "특이적" 화합물; 또는 GLP-1R과 GCGR 둘 모두에 대해 높은 또는 거의 동등한 친화도를 나타내지 않는 강하게 GCGR 편향된 호르몬 글루카곤과는 상이한 것이다. 천연 호르몬 옥신토모듈린은 GLP-1 및 글루카곤 수용체 둘 모두에서 작용제 작용을 갖지만, 이 활성은 강력하지 않고 균형이 맞지 않다. 관련 기술 분야의 통상의 기술자는 GLP-1R 및 GCGR에 대한 친화도가 본원에서 설명되는 것 이외의 다른 방법 및/또는 검정에 의해 결정될 수 있고, 이러한 친화도를 결정하기 위한 방법 및/또는 검정이 본원에서 고려된다는 것(예를 들어, 거의 동등한 친화도의 결정은 이러한 다른 방법 및/또는 검정에 의해 이루어질 수 있음)을 이해할 것이다.
일부 실시양태에서, 본원에서 사용되는 바와 같이, "글루카곤 유사 펩타이드 1 수용체(GLP-1R) 및 글루카곤 수용체(GCGR)에 대해 거의 동등한 친화도를 갖는 이중 작용제 펩타이드"는 상기 세포 검정에 의해 결정될 수 있는 바와 같이, 다른 하나에 대한 친화도에 비해 GLP-1R 또는 GCGR에 대해 단지 약 2배의 친화도를 갖는 이중 작용제 펩타이드를 의미한다. 일부 실시양태에서, 다른 수용체와 비교하여 하나의 수용체에 대한 본 개시내용의 이중 작용제 펩타이드의 결합 친화도는 공지된 세포 검정에 의해 결정될 수 있는 바와 같이 1.9배, 1.8배, 1.6배, 1.5배, 1.4배 또는 1.2배 이하이다. 일부 실시양태에서, 본원에서 사용되는 바와 같이, "GLP-1R 및 GCGR에 대해 불균형한 친화도를 갖는 작용제"는 공지된 세포 검정에 의해 결정될 수 있는 바와 같이 GLP-1R 또는 GCGR에 대해 다른 하나에 대한 친화도의 적어도 약 1.5배의 친화도를 갖는 작용제 펩타이드를 의미한다. 일부 실시양태에서, GLP-1R 및 GCGR에 대해 불균형한 친화도를 갖는 작용제의 결합 친화도는 공지된 세포 검정에 의해 결정될 수 있는 바와 같이 적어도 1.6, 1.8, 2, 2.5, 3, 5, 7.5, 10, 20배 또는 그 초과이다.
"펩타이드"(예를 들어, 이중 작용제 펩타이드)는 전형적으로 펩타이드 결합을 통해 연결된 2개 이상의 천연 및/또는 비천연 아미노산 잔기를 포함한다. 이러한 아미노산은 천연 발생 구조 변이체, 천연 발생 비단백질 생성 아미노산, 또는/및 천연 아미노산의 합성 비천연 발생 유사체를 포함할 수 있다. 용어 "펩타이드" 및 "폴리펩타이드"는 본원에서 교환 가능하게 사용된다. 펩타이드는 짧은 펩타이드(약 2-20개의 아미노산), 중간 길이 펩타이드(약 21-50개의 아미노산) 및 긴 펩타이드(약 50개 초과의 아미노산, "단백질"이라고도 함)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 펩타이드 생성물은 약 50, 40 또는 30개 이하의 아미노산으로 이루어지는 펩타이드에 공유적으로 안정적으로 부착된 계면활성제 모이어티를 포함한다. 예를 들어, 자동화된 펩타이드 합성기를 사용하여 합성 펩타이드를 합성할 수 있다. 펩타이드는 또한 펩타이드를 코딩하는 핵산 서열을 발현하는 세포에서 재조합 방식으로 생성될 수 있다. 본원에서는 펩타이드 서열을 나타내기 위해 통상적인 표기법을 사용한다: 펩타이드 서열의 왼쪽 끝은 아미노(N)-말단이고, 펩타이드 서열의 오른쪽 끝은 카르복실(C)-말단이다. 일반적인 아미노산에 대한 표준 한 글자 및 세 글자 약어가 여기에서 사용된다. 본원에서 개시되는 아미노산 서열에 사용되는 약어는 D- 또는 DL-로 지정되지 않는 한 L-아미노산을 나타내거나 아미노산은 비키랄이지만, 대응하는 D-이성질체가 일반적으로 임의의 위치에서 사용될 수 있다(예를 들어, 단백질 분해에 저항하기 위해). 본원에서 사용되는 다른 아미노산에 대한 약어는 다음을 포함한다: Aib = α-아미노이소부티르산(또는 2-메틸알라닌 또는 Cα-메틸알라닌); Xaa: 임의의 아미노산, 일반적으로 화학식 내에서 구체적으로 정의된다. 본원에서 설명되는 바와 같이 사용될 수 있는 다른 아미노산에 대한 약어는 다음을 포함한다: Ac3c = 1-아미노사이클로프로판-1-카르복실산; Ac4c = 1-아미노사이클로부탄-1-카르복실산; Ac5c = 1-아미노사이클로펜탄-1-카르복실산; Ac6c = 1-아미노사이클로헥산-1-카르복실산; Aib = 알파-아미노이소부티르산(또는 2-메틸알라닌 또는 C알파-메틸알라닌); Bip = 3-(비페닐-4-일)알라닌; Bip2Et = 3-(2'-에틸비페닐-4-일)알라닌; Bip2EtMeO = 3-(2'-에틸-4'-메톡시비페닐-4-일)알라닌; Cit = 시트룰린; Deg = 2,2-디에틸글리신; Dmt = (2, 6-디메틸)티로신; 2FPhe = (2-플루오로페닐)알라닌; 2FMePhe 또는 2FaMePhe = Ca-메틸-(2-플루오로페닐)알라닌; hArg = 호모아르기닌; MeLys 또는 aMeLys = Ca-메틸라이신; MePhe 또는 aMePhe = Ca-메틸페닐알라닌; MePro 또는 aMePro = Ca-메틸프롤린; Nal1 또는 Nal(1) = 3-(1-나프틸)알라닌; Nal2 또는 Nal(2) = 3-(2-나프틸)알라닌; Nle = 노르류신; Om = 오르니틴; 및 Tmp = (2,4,6-트리메틸페닐)알라닌; 다음 구조를 갖는 1,2,3,4-테트라하이드로이소퀴놀린-3-카르복실산(Tic) 및 잔기 사이에 감소된 아미드 결합을 갖는 Tic-Phe 디펩타이드 모이어티(Tic-Ψ[CFl2-NFl]-Ψ-Phe로 지정됨):
달리 구체적으로 언급되지 않거나 문맥이 달리 명시하지 않는 한, 본 개시내용은 이중 작용제 펩타이드가 합성 방식으로(예를 들어, 펩타이드 합성기를 사용하여) 또는 세포에 의해(예를 들어, 재조합 생산에 의해) 생성되는지와 상관없이 생성될 수 있는 임의의 모든 형태의 이중 작용제 펩타이드를 포함한다. 이중 작용제 펩타이드의 이러한 형태는 하나 이상의 변형이 의도적인지 여부와 관계없이 하나 이상의 번역 후 변형과 같은 펩타이드의 합성 또는 세포 생산 과정 동안 만들어질 수 있는 하나 이상의 변형을 포함할 수 있다. 이중 작용제 펩타이드는 2개 이상의 상이한 위치에서 동일한 유형의 변형을 가질 수 있고/있거나, 2개 이상의 상이한 유형의 변형을 가질 수 있다. 화학적 변형 및 번역 후 변형을 포함하는 이중 작용제 펩타이드의 합성 또는 세포 생산 과정 동안 이루어질 수 있는 변형은 글리코실화(예를 들어, N-연결 글리코실화 및 O-연결 글리코실화), 지질화, 인산화, 황산화, 아세틸화(예를 들어, N-말단의 아세틸화), 아미드화(예를 들어, C-말단의 아미드화), 하이드록실화, 메틸화, 분자내 또는 분자간 디설파이드 결합의 형성, 두 측쇄 사이의 락탐의 형성, 피로글루타메이트의 형성, 및 유비퀴틴화를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 이중 작용제 펩타이드는 N-말단, C-말단, 하나 이상의 아미노산 측쇄, 또는 이중 작용제 펩타이드 백본 또는 이들의 임의의 조합과 같이 어느 곳에서나 하나 이상의 변형을 가질 수 있다. 일부 실시양태에서, 이중 작용제 펩타이드는 N-말단에서 아세틸화되고/되거나 C-말단에 카르복사미드(-CONH2)를 갖고, 이것은 이중 작용제 펩타이드의 안정성을 증가시킬 수 있다.
이중 작용제 펩타이드의 잠재적 변형은 또한 하나 이상의 아미노산의 결실, 하나 이상의 천연 및/및 비천연 아미노산의 부가/삽입, 또는 하나 이상의 천연 및/및 비천연 아미노산으로의 치환, 또는 이들의 임의의 조합 또는 모두를 포함한다. 치환은 보존적이거나 비보존적일 수 있다. 이러한 변형은 부위 지정 돌연변이 유발을 통해 또는 이중 작용제 펩타이드의 화학적 합성과 같이 의도적일 수 있거나, 이중 작용제 펩타이드를 생산하는 숙주 세포에서 발생하는 돌연변이를 통해 또는 PCR 증폭으로 인한 오류를 통해 발생하는 것과 같이 우발적일 수 있다. 비천연 아미노산은 상응하는 천연 아미노산과 동일한 화학 구조를 가질 수 있지만 D 입체화학을 갖거나, 또는 상이한 화학 구조 및 D 또는 L 입체화학을 가질 수 있다. 예를 들어, α-나선 형성을 촉진하고/하거나 이중 작용제 펩타이드의 안정성을 증가시키기 위해(예를 들어, 단백질 분해에 저항하기 위해) 비천연 아미노산이 이용될 수 있다. 참조 이중 작용제 펩타이드에 비해 하나 이상의 변형을 갖는 이중 작용제 펩타이드는 적절한 경우 참조 이중 작용제 펩타이드의 "유사체" 또는 "변이체"로 불릴 수 있다. "유사체"는 일반적으로 참조 이중 작용제 펩타이드의 하나 이상의 필수적인 특성(예를 들어, 수용체 결합, 수용체 또는 효소의 활성화, 수용체 또는 효소의 억제, 또는 기타 생물학적 활성)을 유지한다. "변이체"는 참조 이중 작용제 펩타이드의 생물학적 활성을 보유하거나 보유하지 않을 수 있고/있거나, 상이한 생물학적 활성을 가질 수 있다. 이러한 변이체는 GLP-1R 및 GCGR의 작용제로서 작용하는 능력을 유지하는 것이 바람직하며, 더욱 바람직한 실시양태에서 GLP-1R 및 GCGR에 대해 거의 동등한 친화도를 갖는다. 일부 실시양태에서, 참조 펩타이드의 유사체 또는 변이체는 참조 이중 작용제 펩타이드와 상이한 아미노산 서열을 갖는다.
용어 "보존적 치환"은 기능적으로, 구조적으로 또는 화학적으로 유사한 천연 또는 비천연 아미노산에 의한 이중 작용제 펩타이드 내의 아미노산의 치환을 지칭한다. 특정 실시양태에서, 다음 그룹은 각각 서로에 대해 보존적 치환인 천연 아미노산을 함유한다: 1) 글리신(Gly/G), 알라닌(Ala/A); 2) 이소류신(Ile/I), 류신(Leu/L), 메티오닌(Met/M), 발린(Val/V); 3) 페닐알라닌(Phe/F), 티로신(Tyr/Y), 트립토판(Trp/W); 4) 세린(Ser/S), 트레오닌(Thr/T), 시스테인(Cys/C); 5) 아스파라긴(Asn/N), 글루타민(Gln/Q); 6) 아스파르트산(Asp/D), 글루탐산(Glu/E); 및 7) 아르기닌(Arg/R), 리신(Lys/K), 히스티딘(His/H). 추가의 실시양태에서, 다음 그룹은 각각 서로에 대해 보존적 치환인 천연 아미노산을 함유한다: 1) 비극성: Ala, Val, Leu, Ile, Met, Pro(프롤린/P), Phe, Trp; 2) 소수성: Val, Leu, Ile, Phe, Trp; 3) 지방족: Ala, Val, Leu, Ile; 4) 방향족: Phe, Tyr, Trp, His; 5) 하전되지 않은 극성 또는 친수성: Gly, Ala, Pro, Ser, Thr, Cys, Asn, Gln, Tyr; 6) 지방족 하이드록실- 또는 설프히드릴 함유: Ser, Thr, Cys; 7) 아미드 함유: Asn, Gln; 8) 산성: Asp, Glu; 9) 염기성: Lys, Arg, His; 및 10) 작은: Gly, Ala, Ser, Cys. 다른 실시양태에서, 아미노산은 하기에 제시된 바와 같이 보존적 치환으로 분류될 수 있다: 1) 소수성: Val, Leu, Ile, Met, Phe, Trp; 2) 방향족: Phe, Tyr, Trp, His; 3) 중성 친수성: Gly, Ala, Pro, Ser, Thr, Cys, Asn, Gln; 4) 산성: Asp, Glu; 5) 염기성: Lys, Arg, His; 및, 6) 백본 배향에 영향을 미치는 잔기: Pro.
비천연 또는 비단백질 생성 아미노산의 예는 알라닌 유사체(예를 들어, α-에틸Gly [α-아미노부티르산 또는 Abu], α-n-프로필Gly [노르발린 또는 Nva], α-tert-부틸Gly [Tbg], α-비닐 Gly [Vg 또는 Vlg], α-알릴Gly [Alg], α-프로파르길Gly [Prg], 3-사이클로프로필Ala [Cpa] 및 Aib), 류신 유사체(예를 들어, 노르-류신, Nle), 프롤린 유사체(예를 들어, α-MePro), 페닐알라닌 유사체(예를 들어, Phe(2-F), Phe(2-Me), Tmp, Bip, Bip(2'-Et-4'-OMe), Nal1, Nal2, Tic, α-MePhe, α-MePhe(2-F) 및 α-MePhe(2-Me)), 티로신 유사체(예를 들어, Dmt 및 α-MeTyr), 세린 유사체(예를 들어, 호모세린 [이소트레오닌 또는 hSer]), 글루타민 유사체(예를 들어, Cit), 아르기닌 유사체(예를 들어, hArg, N,N'-g-디알킬-hArg), 라이신 유사체(예를 들어, 호모라이신 [hLys], Orn 및 α-MeLys), α,α-이치환된 아미노산(예를 들어, Aib, α,α-디에틸Gly [Deg], α-사이클로헥실Ala [2-Cha], Ac3c, Ac4c, Ac5c 및 Ac6c), 및 문헌 [A. Santoprete et al., Pept. Sci., 17:270-280 (2011)]에 개시된 기타 비천연 아미노산을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. α,α-이치환된 아미노산은 입체형태적 억제 및/또는 α-나선 안정화를 제공할 수 있다. 2개의 잔기 사이의 감소된 아미드 결합(예를 들어, Tic-Ψ[CFl2-NFl]-Ψ-Phe에서와 같이)은 프로테아제 저항성을 증가시키고, 또한 예를 들어 수용체 결합을 변경할 수 있다. 본 개시내용은양의 순 전하를 갖는 펩타이드, 의 순 전하를 갖는 펩타이드, 및 순 전하를 갖지 않는 펩타이드를 비롯한 이중 작용제 펩타이드의 모든 약제학적으로 허용 가능한 염을 포함한다.
"알킬" 기는 지방족 탄화수소 기를 의미한다. 알킬기는 포화되거나 불포화될 수 있으며, 직쇄(선형), 분지형 또는 환형일 수 있다. 일부 실시양태에서, 알킬기는 환형이 아니다. 일부 실시양태에서, 알킬기는 1-30, 6-30, 6-20 또는 8-20개의 탄소 원자를 함유한다. "치환된" 알킬기는 하나 이상의 치환체로 치환된다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 치환체는 할로겐, 니트로, 시아노, 옥소, 하이드록시, 알콕시, 할로알콕시, 아릴옥시, 티올, 알킬티오, 아릴티오, 알킬설폭시드, 아릴설폭시드, 알킬설폰, 아릴설폰, 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노, 아릴아미노, 알코일, 카르복실, 카르복실레이트, 에스테르, 아미드, 카르보네이트, 카르바메이트, 우레아, 알킬, 할로알킬, 플루오로알킬, 아르알킬, 아실기를 함유하는 알킬 사슬, 헤테로알킬, 헤테로지환족, 아릴, 알콕시아릴, 헤테로아릴, 소수성 천연 화합물(예를 들어, 스테로이드) 등으로부터 독립적으로 선택된다. 일부 실시양태에서, 치환체로서의 알킬기는 "저급 알킬"로 불릴 수 있는 선형 또는 분지형 C1-C6 알킬이다. 저급 알킬기의 비제한적인 예는 메틸, 에틸, 프로필(n-프로필 및 이소프로필 포함), 부틸(n-부틸, 이소부틸, sec-부틸 및/또는 tert-부틸과 같은 모든 이성질체 형태 포함), 펜틸(n-펜틸과 같은 모든 이성질체 형태 포함) 및 헥실(n-헥실과 같은 모든 이성질체 형태 포함)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 알킬기는 펩타이드의 잔기(예를 들어, Tyr 또는 Dmt)의 Na-원자에 부착된다. 특정 실시양태에서, N-알킬기는 직쇄 또는 분지형 C1-C10 알킬 또는 아릴 치환된 알킬, 예를 들어 벤질, 페닐에틸 등이다. 1개 또는 2개의 알킬기가 N-말단 잔기의 Na-원자에 부착될 수 있다. 일부 실시양태에서, 알킬기는 글리코사이드 결합(예를 들어, O-, S-, N- 또는 C-글리코사이드 결합)을 통해 사카라이드(예를 들어, 포도당)의 C-1 위치에 부착된 1-알킬기이다. 일부 실시양태에서, 상기 1-알킬기는 비치환 또는 치환된 C1-C30, C6-C30, C6-C20 또는 C8-C20 알킬기이다. 일부 실시양태에서, 알킬기(예를 들어, 1-알킬기)는 아릴, -OH, -OR1, -SH, -SR1, -NH2, - NHR1, -N(R1)2, 옥소(=O), -C(=O)R2, 카르복실(-CO2H), 카르복실레이트(-CO2 _), -C(=O)OR1, -OC(=O)R3, -C(=O)N(R1)2, -NR4C(=O)R3, -OC(=O)OR5, -OC(=O)N(R1)2, -NR4C(=O)OR5, 및 -NR4C(=O)N(R1)2로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상(예를 들어, 2 또는 3개)의 기로 치환되고, 여기서 R1은 각각의 경우에 독립적으로 수소, 알킬 또는 아릴이거나, 또는 R1 및 이들이 연결되는 질소 원자는 헤테로사이클릴 또는 헤테로아릴 고리를 형성하고; R2는 각각의 경우에 독립적으로 알킬, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이고; R3은 각각의 경우에 독립적으로 수소, 알킬, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이고; R4는 각각의 경우에 독립적으로 수소 또는 알킬이고; R5는 각각의 경우에 독립적으로 알킬 또는 아릴이다. 일부 실시양태에서, 알킬기(예를 들어, 1-알킬기)는 카르복실/카르복실레이트 기, 아릴기 또는 -O-아릴기로 내부에서 및/또는 말단에서 치환된다. 특정 실시양태에서, 알킬기(예를 들어, 1-알킬기)는 알킬기의 원위 말단에서 카르복실 또는 카르복실레이트 기로 치환된다. 추가의 실시양태에서, 알킬기(예를 들어, 1-알킬기)는 알킬기의 원위 말단에서 아릴기로 치환된다. 다른 실시양태에서, 알킬기(예를 들어, 1-알킬기)는 알킬기의 원위 말단에서 -O-아릴기로 치환된다. "할로겐", "할라이드" 및 "할로"라는 용어는 플루오라이드, 클로라이드, 브로마이드 및 요오다이드를 의미한다. 용어 "아실"은 -C(=O)R을 의미하며, 여기서 R은 포화되거나 불포화될 수 있는 지방족 기이고, 선형, 분지형 또는 환형일 수 있다. 특정 실시양태에서, R은 1-20, 1-10 또는 1-6개의 탄소 원자를 함유한다. 아실기는 할로겐, 옥소, 하이드록실, 알콕시, 티올, 알킬티오, 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노, 사이클로알킬, 아릴, 아실, 카르복실, 에스테르, 아미드, 소수성 천연 화합물(예를 들어, 스테로이드) 등과 같은 하나 이상의 기로 선택적으로 치환될 수 있다. 용어 "헤테로사이클릴" 및 "헤테로사이클릭"은 단일사이클릭 비방향족 기 또는 적어도 하나의 비방향족 고리를 포함하는 다중사이클릭 기를 지칭하며, 여기서 적어도 하나의 비방향족 고리는 O, N 및 S로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 포함한다. 하나 이상의 헤테로원자를 함유하는 비방향족 고리는 하나 이상의 포화, 부분 불포화 또는 방향족 고리에 부착되거나 융합될 수 있다. 특정 실시양태에서, 헤테로사이클릴 또는 헤테로사이클릭 기은 3 내지 15개, 또는 3 내지 12개, 또는 3 내지 10개, 또는 3 내지 8개, 또는 3 내지 6개의 고리 원자를 갖는다. 헤테로사이클릴 또는 헤테로사이클릭 기는 아지리디닐, 아제티디닐, 피롤리디닐, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피페라지닐, 아제파닐, 아조카닐, 옥시라닐, 옥세타닐, 테트라하이드로푸라닐(옥솔라닐), 테트라하이드로피라닐, 옥세파닐 및 옥소카닐을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 용어 "아릴"은 적어도 하나의 방향족 탄화수소 고리를 포함하는 단일사이클릭 방향족 탄화수소 기 또는 다중사이클릭 기를 의미한다. 특정 실시양태에서, 아릴기는 6 내지 15개, 또는 6 내지 12개, 또는 6 내지 10개의 고리 원자를 갖는다. 아릴기는 페닐, 나프탈레닐(나프틸), 플루오레닐, 아줄레닐, 안트릴, 페난트릴, 비페닐 및 터페닐을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 아릴기의 방향족 탄화수소 고리는 하나 이상의 포화, 부분 불포화 또는 방향족 고리 - 예를 들어 디하이드로나프틸, 인데닐, 인다닐 및 테트라하이드로나프틸(테트랄리닐)에 부착되거나 융합될 수 있다. 아릴기는 할로겐(-F 및 -Cl 포함), 시아노, 니트로, 하이드록실, 알콕시, 티올, 알킬티오, 알킬설폭사이드, 알킬설폰, 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노, 알킬, 할로알킬(트리플루오로메틸과 같은 플루오로알킬 포함), 아실, 카르복실, 에스테르, 아미드 등으로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상(예를 들어, 2 또는 3개)의 치환체로 선택적으로 치환될 수 있다. 용어 "헤테로아릴"은 적어도 하나의 방향족 고리를 포함하는 단일사이클릭 방향족 기 또는 다중사이클릭 기를 지칭하며, 여기서 적어도 하나의 방향족 고리는 O, N 및 S로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 포함한다. 헤테로방향족 고리는 탄소 원자만 포함할 수 있거나 하나 이상의 헤테로원자를 포함할 수 있는 하나 이상의 포화, 부분 불포화 또는 방향족 고리에 부착되거나 융합될 수 있다. 특정 실시양태에서, 헤테로아릴기는 5 내지 15개, 또는 5 내지 12개, 또는 5 내지 10개의 고리 원자를 갖는다. 단일사이클릭 헤테로아릴기는 피롤릴, 피라졸릴, 피라졸리닐, 이미다졸릴, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 티아졸릴, 티아디아졸릴, 이소티아졸릴, 푸라닐, 티에닐(티오페닐), 옥사디아졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 피리딜, 피리도닐, 피라지닐, 피리미디닐, 피리다지닐, 피리다지노닐 및 트리아지닐을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 비사이클릭 헤테로 아릴기의 비제한적인 예는 인돌릴, 벤조티아졸릴, 벤조티아디아졸릴, 벤족사졸릴, 벤즈이속사졸릴, 벤조티에닐(벤조티오페닐), 퀴놀리닐, 테트라하이드로이소퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 벤즈이미다졸릴, 벤조트리아졸릴, 인돌리지닐, 벤조푸라닐, 이소벤조푸라닐, 크로모닐, 쿠마리닐, 신놀리닐, 퀴나졸리닐, 퀴녹살리닐, 인다졸릴, 나프티리디닐, 프탈라지닐, 퀴나졸리닐, 퓨리닐, 피롤로피리디닐, 푸로피리디닐, 티에노피리디닐, 디하이드로이소인돌릴 및 테트라하이드로퀴놀리닐을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
일부 실시양태에서, 예를 들어, 이중 작용제 펩타이드는 약제학적으로 허용 가능한 조성물 또는 동결건조물 내에서와 같이 사카라이드와 회합될 수 있다. 사카라이드는 모노사카라이드, 디사카라이드 및 올리고사카라이드(예를 들어, 트리사카라이드, 테트라사카라이드 등)를 포함한다. 환원 사카라이드는 평형 상태로 고리 형태와 개방형 사슬 형태로 존재하며, 이는 일반적으로 고리 형태를 선호한다. 계면활성제 모이어티의 관능화된 사카라이드는 이중 작용제 펩타이드의 아미노산과 안정한 공유 결합을 형성하기에 적합한 관능기를 갖는다.
"약제학적으로 허용 가능한"이라는 용어는 과도한 자극, 알레르기 반응, 면역원성 및 독성 없이 대상체의 조직 및 장기와 접촉하여 사용하기에 적합하고 합리적인 이익/위험 비율에 상응하고 그의 의도된 용도에 효과적인 물질(예를 들어, 활성 성분 또는 부형제)을 의미한다. 약제학적 조성물의 "약제학적으로 허용 가능한" 부형제 또는 담체는 또한 조성물의 다른 성분과 상용성이다. 한 실시양태에서, 이중 작용제 펩타이드가 제제화될 수 있는 약제학적으로 허용 가능한 조성물은 증류수(DI) 내에 폴리소르베이트 20(예를 들어, 약 0.050%(w/w)); 선택적으로 메틸파라벤(예를 들어, 약 0.300%(w/w)); 아르기닌(약 0.348%(w/w)) 및 만니톨(예를 들어, 약 4.260%(w/w))을 포함한다.
용어 "치료 유효량"은 대상체에게 투여될 때, 치료되는 의학적 병태의 예방, 발생 위험의 감소, 발병의 지연, 진행의 둔화 또는 퇴행의 유발에 충분하거나, 또는 적어도 해당 화합물을 투여하는 대상체의 일부에서 의학적 병태 또는 해당 병태의 하나 이상의 증상 또는 합병증을 어느 정도 완화하기에 충분한 화합물의 양을 의미한다. 또한, 용어 "치료 유효량"은 의사 또는 임상의가 얻고자 하는 세포, 조직, 기관 또는 인간의 생물학적 또는 의학적 반응을 유도하기에 충분한 화합물의 양을 의미한다.
용어 "치료하다", "치료하는" 및 "치료"는 의학적 병태 또는 상기 병태와 관련된 하나 이상의 증상 또는 합병증의 경감, 개선, 진행 억제, 역전 또는 제거, 및 병태의 하나 이상의 원인의 경감, 개선 또는 근절을 포함한다. 의학적 병태의 "치료"라는 언급에는 병태의 예방이 포함된다. 용어 "예방하다", "예방하는" 및 "예방"은 의학적 병태 또는 상기 병태와 관련된 하나 이상의 증상 또는 합병증의 발병 방지, 발병 위험의 감소 및 발병의 지연을 포함한다. 용어 "의학적 병태"(또는 간략히 "병태")에는 질병 및 장애가 포함된다. 용어 "질병" 및 "장애"는 본원에서 교환 가능하게 사용된다.
본 개시내용은 또한 본원에서 설명되는 이중 작용제 펩타이드 생성물 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염, 및 하나 이상의 약제학적으로 허용 가능한 담체 또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다. 약제학적 조성물은 치료 유효량의 펩타이드 생성물 또는 이의 적절한 분획을 함유한다. 조성물은 선택적으로 추가의 치료제를 함유할 수 있다. 일부 실시양태에서, 펩타이드 생성물은 적어도 약 90%, 95% 또는 98% 순수하다. 약제학적으로 허용 가능한 부형제 및 담체는 약제학적으로 허용 가능한 물질, 재료 및 비히클을 포함한다. 부형제의 유형의 비제한적인 예는 액체 및 고체 충전제, 희석제, 결합제, 윤활제, 활택제, 계면활성제, 분산제, 붕해제, 유화제, 습윤제, 현탁제, 증점제, 용매, 등장화제, 완충제, pH 조절제, 흡수 지연제, 안정화제, 항산화제, 방부제, 항미생물제, 항박테리아제, 항진균제, 킬레이팅제, 보조제, 감미제, 향료, 착색제, 캡슐화 재료 및 코팅 재료를 포함한다. 약제학적 제제에서 이러한 부형제의 사용은 관련 기술 분야에 공지되어 있다. 예를 들어, 통상적인 비히클 및 담체는 오일(예를 들어, 올리브 오일 및 참기름과 같은 식물성 오일), 수성 용매(예를 들어, 식염수, 완충 식염수(예를 들어, 포스페이트 완충 식염수[PBS])) 및 등장액(예를 들어, 링거 용액)), 및 유기 용매(예를 들어, 디메틸 설폭사이드 및 알코올[예를 들어, 에탄올, 글리세롤 및 프로필렌 글리콜])을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 임의의 통상적인 부형제 또는 담체가 펩타이드 생성물과 양립할 수 없는 경우를 제외하고, 본 개시내용은 펩타이드 생성물을 함유하는 제제에 통상적인 부형제 및 담체를 사용하는 것을 포함한다. 예를 들어, 문헌 [Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st Ed., Lippincott Williams & Wilkins (Philadelphia, Pennsylvania) (2005)]; [Handbook of Pharmaceutical Excipients, 5th Ed., Rowe et al., Eds., The Pharmaceutical Press and the American Pharmaceutical Association (2005)]; [Handbook of Pharmaceutical Additives, 3rd Ed., Ash and Ash, Eds., Gower Publishing Co. (2007)]; 및 [Pharmaceutical Pre-formulation and Formulation, Gibson, Ed., CRC Press (Boca Raton, Florida) (2004)]을 참조한다.
일부 실시양태에서, 약제학적 제제는 펩타이드 생성물 및 탈이온수(pH 7.7 ± 0.1) 중의 약 0.025-0.075%(w/w) 폴리소르베이트 20, 약 0.2-0.5%(w/w) 아르기닌, 약 3-6%(w/w) 만니톨; 선택적으로 탈이온수(pH 7.7 ± 0.1) 중의 약 0.050%(w/w) 폴리소르베이트 20, 약 0.348%(w/w) 아르기닌, 약 4.260%(w/w) 만니톨을 포함한다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용의 약제학적 제제는 서열 번호 1 및 탈이온수(pH 7.7 ± 0.1) 중의 약 0.050%(w/w) 폴리소르베이트 20, 약 0.348%(w/w) 아르기닌, 약 4.260%(w/w) 만니톨을 포함한다. 특정 실시양태에서, 약제학적 제제는 서열 번호 1을 포함하고, 매주 치료 용량의 피하(SC) 투여용으로 구성된다.
적절하거나 적합한 제제는 선택된 투여 경로와 같은 다양한 인자에 따라 달라질 수 있다. 펩타이드 생성물을 포함하는 약제학적 조성물의 잠재적인 투여 경로는 경구, 비경구(피내, 피하, 근육내, 혈관내, 정맥내, 동맥내, 복강내, 강내 및 국소 포함) 및 국소(경피, 경점막, 비강내(예를 들어, 비강 스프레이 또는 점적), 안구(예를 들어, 점안액), 폐(예를 들어, 경구 또는 비강 흡입), 협측, 설하, 직장내(예를 들어, 좌약) 및 질내(예를 들어, 좌약)을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용의 이중 작용제 펩타이드 생성물은 비경구적으로(예를 들어, 피하, 정맥내 또는 근육내) 투여된다. 다른 실시양태에서, 펩타이드 생성물은 경구 흡입 또는 비강 흡입 또는 취입(insufflation)에 의해 투여된다. 일부 실시양태에서, 담체는 비경구(예를 들어, 피하, 정맥내 또는 근육내) 제제와 같은 수성 기반 담체이다. 다른 실시양태에서, 담체는 비수성 기반 담체이다. 특정 실시양태에서, 비수성 기반 담체는 경구 흡입 또는 비강 흡입 또는 취입에 의한 투여를 위한 제제에서와 같이 마이크로미터 미만의 무수 a-락토스 및/또는 다른 부형제를 포함할 수 있는 하이드로플루오로알칸(HFA) 또는 HFA 유사 용매이다.
일부 실시양태에서, 펩타이드 생성물은 주사에 의해 비경구적으로(예를 들어, 피하, 정맥 내로 또는 근육 내로) 투여된다. 비경구 투여는 위의 강산성 환경, 위장(GI) 흡수 및 초회 통과 대사를 우회한다. 비경구 제제를 제조하는 데 사용될 수 있는 부형제 및 담체는 용매(예를 들어, 물, 식염수, 생리 식염수, 완충 식염수[예를 들어, PBS], 평형 염 용액[예를 들어, 링거의 BSS] 및 수성 덱스트로스 용액과 같은 수성 용매), 등장성/등삼투압제(예를 들어, 염[예를 들어, NaCl, KCl 및 CaCl2] 및 당[예를 들어, 수크로스]), 완충제 및 pH 조절제(예를 들어, 인산이수소나트륨[일염기성 인산나트륨]/인산수소이나트륨[이염기성 인산나트륨], 시트르산/시트르산나트륨 및 L-히스티딘/L-히스티딘 HCl), 및 유화제(예를 들어, 폴리소르베이트[예를 들어, 폴리소르베이트 20 및 80] 및 폴록사머[예를 들어, 폴록사머 188]와 같은 비이온성 계면활성제)를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 펩타이드 제제 및 전달 시스템은 예를 들어 문헌 [A. J. Banga, Therapeutic Peptides and Proteins: Formulation, Processing, and Delivery Systems, 3rd Ed., CRC Press (Boca Raton, Florida) (2015)]에 논의되어 있다. 부형제는 선택적으로 펩타이드 안정성을 증가시키거나, 펩타이드 용해도를 증가시키거나, 펩타이드 응집을 억제하거나, 용액 점도를 감소시키는 하나 이상의 물질, 또는 이들의 임의의 조합 또는 전부를 포함할 수 있다. 이러한 물질에는 친수성 아미노산(예를 들어, 아르기닌 및 히스티딘), 폴리올(예를 들어, 미오이노시톨, 만니톨 및 소르비톨), 사카라이드(예를 들어, 포도당(D-포도당[덱스트로스] 포함), 락토스, 수크로스 및 트레할로스), 삼투질(예를 들어, 트레할로스, 타우린, 아미노산[예를 들어, 글리신, 사르코신, 알라닌, 프롤린, 세린, b-알라닌 및 g-아미노부티르산], 및 베타인[예를 들어, 트리메틸글리신 및 트리메틸아민 N-옥사이드]), 및 비이온성 계면활성제(예를 들어, 알킬 폴리글리코사이드, ProTek® 알킬사카라이드(예를 들어, 장쇄 지방산 또는 상응하는 장쇄 알코올에 커플링된 모노사카라이드[예를 들어, 포도당] 또는 디사카라이드[예를 들어, 말토스 또는 수크로스]), 및 폴리프로필렌 글리콜/폴리에틸렌 글리콜 블록 공중합체(예를 들어, 폴록사머[예를 들어, Pluronic™F-68] 및 Genapol® PF-10 및 이의 변형체)를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 이러한 물질은 펩타이드 용해도를 증가시키기 때문에, 제제에서 펩타이드 농도를 증가시키는 데 사용할 수 있다. 제제에서 더 높은 펩타이드 농도는 제한된 부피의 볼루스 투여(예를 들어, < 약 1.5 mL)를 갖는 피하 투여에 특히 유리하다. 또한, 이러한 물질은 동결건조된 펩타이드의 제조, 저장 및 재구성 동안 펩타이드를 안정화시키기 위해 사용될 수 있다. 예시적인 비경구 제제는 펩타이드 생성물, 만니톨, 메티오닌, 티오글리콜산나트륨, 폴리소르베이트 20, pH 조절제(예를 들어, NaOH 또는/및 HCl) 및 탈이온수를 포함한다. 본원에서 설명되는 이중 작용제 펩타이드와 함께 사용하기에 적합한 비경구 제제의 부형제(예를 들어, NaCl 등을 포함하는 부형제의 다양한 조합)는 관련 기술 분야의 통상의 기술자에게 알려져 있고, 입수할 수 있다.
비경구(예를 들어, 피하, 정맥내 또는 근육내) 투여를 위해, 하나 이상의 부형제를 함유하는 수성 용매 중의 펩타이드 생성물의 멸균 용액 또는 현탁액을 미리 제조할 수 있고, 예를 들어 일회용 펜의 사전 충전된 주사기 또는 용량 카운터가 있는 펜에 제공될 수 있다. 대안적으로, 펩타이드 생성물은 동결건조(동결 건조) 전에 선택적으로 하나 이상의 부형제를 함유할 수 있는 수성 용매에 용해되거나 현탁될 수 있다. 비경구 투여 직전에, 적합한 용기(예를 들어, 바이알)에 저장된 동결건조된 펩타이드 생성물은 예를 들어 선택적으로 하나 이상의 부형제를 함유할 수 있는 멸균수로 재구성될 수 있다. 다른 실시양태에서, 작용제 펩타이드 생성물은 비강 내로 투여된다. 코 점막은 넓은 표면적, 다공성 내피, 고도의 혈관성 상피하층 및 높은 흡수율을 제공하며, 이로 인해 높은 생체이용률을 허용한다. 비강내 제제는 용해도 향상제(예를 들어, 프로필렌 글리콜), 습윤제(예를 들어, 만니톨 또는 소르비톨), 완충제 및 물, 및 선택적으로 방부제(예를 들어, 벤즈알코늄 클로라이드), 점막접착제(예를 들어, 하이드록시에틸셀룰로오스) 및/또는 침투 증강제와 같은 부형제와 함께 펩타이드 생성물을 포함할 수 있다. 비강내 용액 또는 현탁액 제제는 점적기, 피펫, 또는 예를 들어 계량 분무 스프레이 펌프를 사용하는 스프레이를 포함하지만 이에 제한되지 않는 임의의 적합한 수단에 의해 비강에 투여될 수 있다. 표 2는 비강 스프레이 제제의 예시적인 부형제를 보여준다.
추가의 실시양태에서, 펩타이드 생성물은 경구 흡입 또는 비강 흡입과 같은 폐 경로를 통해 투여된다. 폐는 전신 순환계의 관문 역할을 하기 때문에, 약물의 폐 투여는 폐 장애 또는/및 전신 장애를 치료할 수 있다. 폐 약물 전달의 이점은 예를 들어 다음을 포함한다: 1) 초회 통과 대사 방지; 2) 빠른 약물 작용; 3) 흡수를 위한 폐포 영역의 넓은 표면적, 폐의 높은 투과성(얇은 공기-혈액 장벽), 및 기도의 풍부한 맥관 구조; 및 4) 큰 폐포 표면적으로 인한 위장관에 비해 세포외 효소 수치의 감소. 비강 흡입에 비해 구강 흡입의 이점은 비강 흡입이 폐뿐만 아니라 비강에서 경점막으로 전신 순환으로 약물을 전달할 수 있지만 약물이 폐로 더 깊게 침투/침착된다는 것을 포함한다. 구강 또는 비강 흡입은 예를 들어 정량 흡입기(MDI), 분무기 또는 건조 분말 흡입기(DPI)에 의해 달성될 수 있다. 예를 들어, 펩타이드 생성물은 구강 또는 비강 흡입에 의해 기도에 에어로졸로 투여하기 위해 제제화될 수 있다. 약물은 작은 입자 크기(예를 들어, 약 0.5 마이크로미터 내지 약 5 마이크로미터)로 전달되며, 이는 예를 들어 폐에서의 약물 침착 및 약물 현탁 안정성을 개선하기 위해 미분화에 의해 얻어질 수 있다. 약물은 하이드로플루오로알칸(HFA, 예를 들어 1,1,1,2-테트라플루오로에탄[HFA-134a]), 클로로플루오로카본(CFC, 예를 들어 디클로로디플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄 또는 디클로로테트라플루오로에탄), 또는 적합한 가스(예를 들어, 산소, 압축 공기 또는 이산화탄소)와 같은 적합한 추진제와 함께 압축 팩에 제공될 수 있다. 에어로졸 제제의 약물은 폐로 전달하기 위해 추진제에 용해되거나, 보다 자주는 현탁된다. 에어로졸은 계면활성제(폐포 내의 공기-물 계면에서 높은 표면 장력을 감소시킴으로써 폐 내로의 침투를 향상시키고, 또한 약물을 유화, 가용화 또는/및 안정화시킬 수 있고, 예를 들어 레시틴과 같은 인지질일 수 있음) 및/또는 안정화제와 같은 부형제를 함유할 수 있지만, 펩타이드 생성물의 계면활성제 모이어티가 계면활성제의 기능을 수행할 수 있다. 예를 들어, MDI 제제는 펩타이드 생성물, 추진제(예를 들어, 1,1,1,2-테트라플루오로에탄과 같은 HFA) 및 공용매(예를 들어, 에탄올과 같은 알코올), 및 선택적으로 계면활성제(예를 들어, 올레산과 같은 지방산)를 포함할 수 있다. MDI 제제는 선택적으로 용해된 가스(예를 들어, CO2)를 함유할 수 있다. 장치 작동 후, 방출된 에어로졸 액적 내의 CO2 기포 의 폭발은 액적을 더 작은 액적으로 분해하여 약물의 호흡 가능 분율을 증가시킨다. 또 다른 예로서, 분무기 제제는 펩타이드 생성물, 킬레이팅제 또는 방부제(예를 들어, 에데테이트 이나트륨), 등장화제(예를 들어, NaCl), pH 완충제(예를 들어, 시트르산/시트르산나트륨) 및 물, 및 선택적으로 계면활성제(예를 들어, 폴리소르베이트 80과 같은 Tween®)를 포함할 수 있다. 약물은 예를 들어 스페이서가 있거나 없는 분무기 또는 MDI에 의해 전달될 수 있고, 전달되는 약물 용량은 계량 챔버(분무기) 또는 계량 밸브(MDI)에 의해 제어될 수 있다.
표 2는 예시적인 MDI, 분무기 및 DPI 제제를 보여준다. 정량 흡입기(가압 정량 흡입기[pMDI]라고도 함)는 가장 널리 사용되는 흡입 장치이다. 계량 밸브는 장치가 작동될 때마다 정확한 양의 에어로졸(예를 들어, 약 20-100 pL)을 전달한다. MDI는 일반적으로 사용자가 흡입할 수 있는 것보다 더 빨리 에어로졸을 생성하여 입과 목에 많은 에어로졸을 축적할 수 있다. 장치 작동과 흡입 사이의 불량한 조정 문제는 예를 들어 호흡 작동식 MDI 또는 조정 장치를 사용하여 해결할 수 있다. 호흡 작동식 MDI(예를 들어, Easi Breath®)는 장치가 사용자의 흡기를 감지할 때 활성화되고, 이에 반응하여 약물 용량을 방출한다. 흡입 유속은 작동기를 통해 조정되며, 사용자는 흡입 중에 장치를 안정적으로 작동할 시간이 있다. 조정 장치에서, 흡입기의 마우스피스 끝에 부착된 튜브인 스페이서(또는 밸브가 있는 홀딩 챔버)는 흡입기에 의해 분사되는 약물을 보관하는 저장소 또는 챔버 역할을 하며, 에어로졸이 입으로 들어가는 속도를 감소시켜 더 큰 액적에서 추진제의 증발을 허용한다. 스페이서는 흡입기 사용을 단순화하고, 상기도 대신 폐에 침착되는 약물의 양을 증가시킨다. 스페이서는 방출된 약물 입자가 스페이서의 내벽에 정전기적으로 부착되는 것을 최소화하기 위해 정전기 방지 중합체로 만들어질 수 있다. 분무기는 약 1-5 마이크로미터의 에어로졸 방울을 생성한다. 분무기는 폐에 침착되는 약물의 양에 상당한 영향을 미칠 수 있는 장치 작동과 흡입 사이의 사용자 조정이 필요하지 않다. MDI 및 DPI와 비교할 때, 분무기는 투여 시간이 더 길지만 더 많은 양의 약물을 전달할 수 있다. 분무기의 예에는 인력 분무기, 제트 분무기(예를 들어, AeroEclipse® II BAN[호흡 작동], CompAIR™NE-C80l[가상 밸브], PARI LC® Plus[호흡 강화] 및 SideStream Plus[호흡 강화]), 초음파 분무기 및 진동 메쉬 분무기(예를 들어, Akita2® Apixneb, 계량 챔버가 있는 I-neb AAD 시스템, MicroAir® NE-U22, Omron U22 및 PARI eFlow® Rapid)를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 예를 들어, 펄스 초음파 분무기는 펄스당 고정된 양의 약물을 에어로졸화할 수 있고, 사용자가 각각의 호흡을 각각의 펄스에 동기화할 수 있게 해주는 광음향 트리거를 포함할 수 있다. 건조 분말 흡입기(DPI)를 사용하는 구강 또는 비강 흡입의 경우, 펩타이드 생성물은 건조 미세화 분말 형태로 제공될 수 있으며, 여기서 약물 입자는 예를 들어 분산된 분말의 공기역학적 특성 및 폐에서의 약물 침착을 개선하기 위해 특정한 작은 크기(예를 들어, 약 0.5 마이크로미터 내지 약 5 마이크로미터)를 갖는다. 약 0.5 마이크론에서 약 5 마이크론 사이의 입자는 말단 세기관지와 폐포 영역에서 침강에 의해 침착된다. 이와 대조적으로, 대부분의 더 큰 입자(> 5마이크로미터)는 공기 흐름을 따라 기도의 많은 분기점으로 들어가는 것이 아니라, 목구멍의 구인두 부위를 포함하여 상부 기도에 충격에 의해 침착된다. DPI 제제는 약물 입자만을 함유하거나, 또는 락토스, 전분, 전분 유도체(예를 들어, 하이드록시프로필메틸 셀룰로오스) 또는 폴리비닐피롤리딘과 같은 적합한 더 큰 베이스/담체의 분말과 혼합될 수 있다. 담체 입자는 흐름을 향상시키고, 응집을 줄이며, 용량 균일성을 개선하고, 약물 입자의 분산을 돕는다. DPI 제제는 입자간 결합을 방해함으로써(부착 방지 작용에 의해) 제제의 성능을 향상시키는 스테아르산마그네슘 또는/및 류신과 같은 부형제를 선택적으로 함유할 수 있다. 분말 제제는 캡슐(예를 들어, 젤라틴 캡슐) 또는 블리스터 팩 내의 카트리지와 같은 단위 투여 형태로 제공될 수 있으며, 이는 흡입기에 수동으로 로딩되거나 미리 로딩될 수 있다. 약물 입자는 흡입기의 마우스피스 또는 노즈피스를 입이나 코에 대고 날카롭고 깊게 흡입하여 와류 기류를 만들고, 일정 시간(예를 들어, 약 5-10초) 동안 호흡을 유지하여 세기관지 및 폐포 부위에 약물 입자가 가라앉도록 한다. 사용자가 DPI를 작동하고 흡입하면, 장치를 통과하는 기류가 전단 및 난류를 생성하고, 흡입된 공기가 분말 베드에 도입되며, 정적 분말 혼합물이 유동화되어 사용자의 기도로 들어간다. 여기서, 약물 입자는 난류로 인해 담체 입자로부터 분리되어 폐 깊숙이 운반되는 반면, 더 큰 담체 입자는 구강인두 표면에 충돌하여 제거된다. 따라서, 사용자의 흡기 기류는 분말 탈응집 및 공기 이온화를 거치고, 폐에서 약물 침착을 결정한다(패시브 DPI는 약물 입자를 탈응집하기 위해 빠른 흡기 기류가 필요하지만, MDI 또는 분무기에는 빠른 흡기가 권장되지 않고, 이것은 상부 기도의 충돌에 의해 약물 침착을 증가시키는 난류 기류 및 빠른 속도를 생성하기 때문이다). MDI와 비교하여, DPI(호흡 활성화 DPI 포함)는 더 많은 양의 약물 및 더 큰 크기의 약물(예를 들어, 거대분자)을 폐로 전달할 수 있다.
락토스(예를 들어, 알파-락토스 일수화물)는 DPI 제제에서 가장 일반적으로 사용되는 담체이다. DPI 제제용 락토스 일수화물의 등급/유형의 예는 DCL 11, 플로우락(Flowlac)® 100, 인할락(Inhalac)® 230, 락토헤일(Lactohale)® 300, 락토프레스(Lactopress)® SD 250(스프레이 건조 락토스), 레스피토스(Respitose)® SV003 및 소르볼락(Sorbolac)® 400을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. DPI 제제는 단일 락토스 등급 또는 상이한 락토스 등급의 조합을 포함할 수 있다. 예를 들어, 락토헤일® 300 또는 소르볼락® 400과 같은 미세한 락토스 등급은 적합한 DPI 담체가 아닐 수 있으며, 흐름을 개선하기 위해 DCL 11, 플로우락® 100, 인할락® 230 또는 레스피토스® SV003과 같은 거친 락토스 등급과 혼합할 필요가 있을 수 있다(예를 들어, 미세한 락토스 대 거친 락토스의 비율은 약 1:9).
표 3 및 4는 DPI 제제에 사용될 수 있는 락토스의 등급/유형의 비제한적 예를 보여준다. 담체 입자 크기의 분포는 약물의 미세 입자 분획/용량(FPF 또는 FPD)에 영향을 미치며, 높은 FPF는 폐로의 약물 전달에 바람직하다. FPF/FPD는 흡입 공기에서 공기역학적 입자 크기가 5 마이크로미터 미만인 DPI 장치의 호흡 가능한 분획/용량 질량이다. 높은 FPF, 따라서 우수한 DPI 성능은 캡슐 쉘 또는 DPI 장치에 약물이 침착되는 것을 방지하고 기본적으로 모든 약물을 기도로 전달하기 위해, 예를 들어 약 1:9의 미세한 락토스(예를 들어, 락토헤일® 300) 대 거친 락토스(예를 들어, 레스피토스® SV003)의 비율 및 약 20% w/w의 공급 과잉을 갖는 DPI 제제로부터 얻을 수 있다.
DPI 제제를 위한 다른 담체는 포도당, 만니톨(예를 들어, 결정화된 만니톨[Pearlitol 110 C] 및 분무 건조된 만니톨[Pearlitol 100 SD]), 말티톨(예를 들어, 결정화된 말티톨[Maltisorb P90]), 소르비톨 및 자일리톨을 포함하지만, 이로 제한되지 않는다. 대부분의 DPI는 에어로졸 생성을 위해 사용자의 흡입에 의존하는 호흡 활성화("수동")된다. 수동 DPI의 예로는 에어맥스(Airmax)®, 노볼라이저(Novolizer)® 및 오츠카(Otsuka) DPI(컴팩트 케이크)가 있다. 공기 분류기 기술(ACT)은 DPI에 사용되는 효율적인 수동 분말 분산 메커니즘이다. ACT에서, 여러 공급 채널은 흡입 동안 장치 내에서 사이클론을 발생시키는 접선 기류를 생성한다. 또한, 예를 들어 입자 탈응집을 돕기 위해 에너지를 사용하는 전력 지원("능동") DPI(예를 들어, 공기역학, 충격력 또는 진동 기반)가 있다. 예를 들어, 엑수베라(Exubera)® 흡입기의 능동 메커니즘은 스프링 또는 압축 공기 챔버에 저장된 기계 에너지를 이용한다. 능동 DPI의 예는 악티스파이어(Actispire)®(단일 용량), 아스피레어(Aspirair)®(다중 용량), 엑수베라®(단일 용량), 마이크로도스(MicroDose)®(다중 단위 용량 및 전자 활성화), 옴니할러(Omnihaler)®(단일 용량), 페이퍼(Pfeiffer) DPI(단일 단위 용량) 및 스피로스(Spiros)®(다중 단위 용량)를 포함하지만, 이로 제한되지 않는다. 펩타이드 생성물은 또한 경구와 같은 다른 경로에 의해 투여될 수 있다. 경구 제제는 관련 기술 분야에 공지된 펩타이드 생성물 및 통상적인 부형제, 및 선택적으로 나트륨 V-[8-(2-하이드록시벤조일)아미노카프릴레이트](SNAC)와 같은 흡수 증진제를 함유할 수 있다. SNAC는 국소 완충 작용을 통해 효소 분해에 대해 보호하고, GI 흡수를 향상시킨다. 경구 투여 형태(예를 들어, 정제, 캡슐 또는 알약)는 위의 강산 및 단백질 분해 효소로부터 그 내용물을 보호하기 위해 선택적으로 장용 코팅을 가질 수 있다. 일부 실시양태에서, 펩타이드 생성물은 지속 방출 조성물로부터 전달된다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "지속 방출 조성물"은 지속 방출, 장기 방출, 연장 방출, 지연 방출, 느린 방출 및 제어 방출 조성물, 시스템 및 장치를 포함한다. 일부 실시양태에서, 지속 방출 조성물은 적어도 약 1주, 2주, 3주, 1개월, 2개월, 3개월 또는 그 초과의 기간에 걸쳐 펩타이드 생성물을 전달한다. 일부 실시양태에서, 지속 방출 조성물은 생분해성 중합체로 구성되고 펩타이드 생성물을 포함하는 나노입자 또는 마이크로입자로 제제화된다. 특정 실시양태에서, 생분해성 중합체는 락트산 및/또는 글리콜산[예를 들어, 폴리(L-락타이드-코-글리콜라이드) 또는 폴리(L-락트산-코-D,L-2-하이드록시옥탄산)과 같은 L-락트산계 공중합체)]를 포함한다. 추가의 실시양태에서, 지속 방출 조성물은 펩타이드 생성물과 중합체의 혼합물이 대상체에게 근육 내로 또는 피하 주사될 때 생성되는 데포(depot) 형태이다. 특정 실시양태에서, 중합체는 PEG, 폴리락트산(PLA) 또는 폴리글리콜산(PGA), 또는 이들의 공중합체(예를 들어, PLGA 또는 PLA-PEG)이거나, 이를 포함한다.
약제학적 조성물은 모든 활성 및 불활성 성분이 적합한 시스템으로 조합되고 투여될 조성물을 형성하기 위해 성분을 혼합할 필요가 없는 단일 용량으로서 단위 투여 형태로 제공될 수 있다. 단위 투여 형태는 일반적으로 약물의 치료 유효 용량을 함유하지만, 다수의 단위 투여 형태를 복용하여 치료 유효 용량을 달성하도록 그의 적절한 분획을 함유할 수 있다. 단위 투여 형태의 예에는 경구 섭취를 위한 정제, 캡슐 또는 알약; 비경구(예를 들어, 정맥내, 피하 또는 근육내) 주사를 위한 일회용 펜 또는 용량 계수기가 있는 펜의 미리 채워진 주사기 내의 용액; 및 흡입기에 미리 로딩되거나 수동으로 로딩되는 캡슐, 카트리지 또는 블리스터가 포함된다. 대안적으로, 약제학적 조성물은 활성 성분, 부형제 및 담체(예를 들어, 용매)가 2개 이상의 별도 용기(예를 들어, 앰플, 바이알, 튜브, 병 또는 주사기)에 제공되는 키트로 제시될 수 있으며, 이들은 투여할 조성물을 형성하기 위해 조합될 필요가 있다. 키트는 조성물(예를 들어, 비경구적으로 주사되는 용액)의 저장, 준비 및 투여에 대한 지침을 포함할 수 있다. 키트는 모든 활성 및 불활성 성분을 단위 투여 형태로 또는 활성 성분 및 불활성 성분을 2개 이상의 별도 용기에 함유할 수 있고, 본원에서 개시되는 의학적 병태를 치료하기 위해 약제학적 조성물을 투여하거나 사용하기 위한 지침을 함유할 수 있다. 키트는 주사 펜 또는 흡입기와 같은 조성물을 전달하기 위한 장치를 추가로 함유할 수 있다. 일부 실시양태에서, 키트는 펩타이드 생성물 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염, 또는 이를 포함하는 약제학적 조성물, 및 본원에서 개시되는 의학적 병태, 예를 들어 인슐린 저항성, 당뇨병, 대사 증후군, 심혈관 질환, 비만(1년 초과의 기간 동안 지속되거나 인슐린 저항성, 당뇨병, 대사 증후군 및/또는 심혈관 질환과 같은 비만 관련 병태를 유발하는 비만을 의미하는 "만성 비만" 포함) 또는 상태 그와 관련된 병태(예를 들어, NASH 또는 PCOS)를 치료하기 위해 펩타이드 생성물 또는 조성물을 투여하거나 사용하기 위한 지침을 함유한다. 특정 실시양태에서, 키트는 주사 펜 또는 흡입기와 같은 펩타이드 생성물 또는 조성물을 전달하기 위한 장치를 추가로 함유한다.
본 개시내용은 인슐린 저항성, 당뇨병, 비만, 대사 증후군 및 심혈관 질환과 같으나 이에 제한되지 않는 GLP1R 및/또는 GCGR과 관련된 병태, 및 NASH 및 PCOS와 같은 이와 관련된 병태를 예방 및/또는 치료하기 위한, 본원에서 설명되는 이중 작용제 펩타이드 생성물의 용도를 추가로 제공한다. 일부 실시양태에서, 이중 작용제 펩타이드 생성물은 고혈당증, 인슐린 저항성, 고인슐린혈증, 당뇨병 전증, 당뇨병(제1형 및 제2형, 임신성 및 소아 당뇨병 포함), 당뇨병 합병증, 당뇨병성 신경병증, 당뇨병성 신장병증, 당뇨병성 망막병증, 고지혈증, 고콜레스테롤혈증, 고트리글리세라이드혈증, 혈중 유리 지방산 수치 상승, 비만, 대사 증후군, 증후군 X, 심혈관 질환(관상 동맥 질환 포함), 죽상동맥경화증, 급성 심혈관 증후군, 허혈(심근 허혈 및 대뇌 허혈/뇌졸중 포함), 허혈-재관류 손상(심근 및 대뇌 IRI 포함), 경색(심근 및 뇌경색 포함), 협심증, 심부전(예를 들어, 울혈성 심부전), 말초 혈관 질환, 혈전증(예를 들어, 심부 정맥 혈전증), 색전증(예를 들어, 폐색전증), 전신 염증(예를 들어, 상승된 C-반응성 단백질 혈중 농도를 특징으로 함) 및 고혈압을 치료하는 데 사용될 수 있다. 이중 작용제 펩타이드 생성물은 혈당 의존성 인슐린 분비 촉진, 인슐린 감수성 증가, 지방 연소 자극, 체중 감소 등의 다양한 메커니즘을 통해 치료 효과를 얻을 수 있다. 이중 작용제 펩타이드 생성물은 또한 예를 들어 췌장 베타 세포 보호, 심장 보호 및 상처 치료를 촉진할 수 있다.
본원에서 설명되는 펩타이드 생성물은 인슐린 저항성 및/또는 비만과 관련된 다른 병태를 치료하기 위해 사용될 수 있다. 인슐린 저항성 또는/및 비만과 관련된 다른 병태는 다음을 포함하지만, 이로 제한되지 않는다: 관절염(예를 들어, 골관절염), 요통, 호흡 장애(예를 들어, 천식, 비만 저호흡 증후군[픽위키안(Pickwickian) 증후군] 및 폐쇄성 수면 무호흡증), 피부 질환(예를 들어, 당뇨병 궤양, 흑색극세포증, 봉와직염, 다모증, 간찰진 및 림프부종), 위장 장애(예를 들어, 담석증[담석], 위식도 역류 질환[GERD] 및 위 마비), 통풍, 코르티솔 과다증(예를 들어, 쿠싱(Cushing) 증후군), 신장 장애(예를 들어, 만성 신장 질환), 간 장애(예를 들어, 알코올성 및 비알코올성 지방간 질환[FLD]을 포함하는 FLD), 신경학적 장애(예를 들어, 수근관 증후군, 치매[예를 들어, 알츠하이머(Alzheimer) 병 및 혈관성 치매], 감각 이상증, 편두통 및 다발성 경화증), 비뇨기 질환(예를 들어, 발기 부전, 성선 기능 저하증 및 요실금), 다낭성 난소 증후군, 불임, 월경 장애, 기분 장애(예를 들어, 우울증) 및 암(예를 들어, 자궁내막암, 식도암, 결장직장암, 담낭암, 신장암, 간암[예를 들어, 간세포 암종], 췌장암 및 피부암[예를 들어, 흑색종] 및 백혈병). 특정 실시양태에서, 본원에서 설명되는 이중 작용제 펩타이드 생성물은 다낭성 난소 증후군(PCOS)을 치료하기 위해 사용된다. 다른 실시양태에서, 펩타이드 생성물은 만성 신장/신 부전(CKF/CRF)으로도 알려진 만성 신장 질환(CKD)을 치료하기 위해 사용된다. CKD의 가장 흔한 원인은 당뇨병 및 장기간의 조절되지 않는 고혈압이다. 추가의 실시양태에서, 본원에서 설명되는 이중 작용제 펩타이드 생성물은 지방간 질환(FLD)을 치료하기 위해 사용된다. 일부 실시양태에서, FLD는 비알코올성 지방간 질환(NAFLD)이다. 특정 실시양태에서, NAFLD는 비알코올성 지방간염(NASH)이다. 간 지방증으로도 알려진 FLD는 간의 과도한 지방 축적이 특징이다. FLD에는 알코올성 지방간 질환(AFLD) 및 NAFLD가 포함된다. 만성 알코올 중독은 간에서 알코올 대사 과정에서 알데하이드와 같은 독성 대사물질이 생성되어 지방간을 유발한다. NAFLD는 아래에 설명되어 있다. FLD는 당뇨병, 비만 및 대사 증후군과 관련이 있다. 지방간은 간경화 또는 간암(예를 들어, 간세포 암종[HCC])으로 발전할 수 있다. 간경변성 AFLD 환자의 약 10% 미만에서 HCC가 발생하지만, 간경변증이 없는 NASH 환자의 약 45% 이하에서 HCC가 발생할 수 있다. HCC는 성인에서 가장 흔한 유형의 원발성 간암이며, 만성 간 염증 상태에서 발생한다. NAFLD는 지방, 특히 유리 지방산 및 트리글리세라이드가 과도한 알코올 섭취 이외의 다른 원인, 예를 들어 영양 과부하, 고칼로리 섭취 및 대사 기능 장애(예를 들어, 이상지질혈증 및 혈당 조절 장애)에 의해 간 세포에 축적(간 지방증)할 때 발생하는 지방간을 특징으로 한다. 간은 간 기능을 방해하지 않고 지방으로 남아 있을 수 있지만, 지방간은 지방증이 간 섬유화를 동반하거나 동반하지 않고 염증, 간세포 팽창 및 세포 손상을 동반하는 병태인 NASH로 진행될 수 있다. 섬유증은 NASH로 인한 사망률의 가장 강력한 예측인자이다. NAFLD는 지방증 단독; 소엽 또는 문맥 염증을 동반하지만 팽창하지 않는 지방증; 팽창하지만 염증은 없는 지방증; 또는 염증과 팽창을 동반하는 지방증을 특징으로 할 수 있다. NASH는 NAFLD의 가장 극단적인 형태이다. NASH는 진행성 질환으로서, 환자의 약 20%가 간경변증으로 발전하고, 약 10%가 간경화 또는 간암(예를 들어, HCC)과 같은 간 질환으로 사망한다. NAFLD는 선진국에서 가장 흔한 간 질환이며, NASH는 2020년까지 미국에서 간 이식의 주요 원인으로 C형 간염을 대체할 것으로 예상된다. 미국 인구의 약 12-25%가 NAFLD를 가지고 있으며, NASH는 미국 인구의 약 2-5%에서 발병한다. NASH를 포함한 NAFLD는 인슐린 저항성, 비만 및 대사증후군과 관련이 있다. 예를 들어, 인슐린 저항성은 지방간이 간 염증 및 섬유증으로 진행되어 NASH로 진행하는 데 기여한다. 또한, 비만은 NASH를 유발하고 악화시키며, 체중 감소는 NASH를 완화할 수 있다. 따라서, GLP-1 수용체(GLP1R) 작용제, 글루카곤 수용체(GCGR) 작용제 및 이중 GLP1R/GCGR 작용제를 포함하는 본원에서 설명되는 펩타이드 생성물은 NASH를 포함하는 NAFLD를 치료하는 데 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, NAFLD(예를 들어, NASH) 또는 PCOS와 같은 본원에서 개시되는 인슐린 저항성 및/또는 비만과 관련된 병태를 치료하기 위해 사용되는 이중 작용제 펩타이드 생성물은 서열 번호 1-10의 이중 작용제 펩타이드 생성물 및/또는 이의 유도체, 및 이의 약제학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 이중 작용제 펩타이드(들)는 GLP-1R 및 GCGR에 대해 불균형한 친화도를 갖는 작용제(예를 들어, 세마글루타이드)와 비교하여 하나 이상의 부작용(즉, 환자 및/또는 동물 복지에 부정적인 영향을 미치는 예상치 못한 사건)의 감소와 함께 혈당을 조절하기 위해 사용될 수 있다. 예시적이고 비제한적인 부작용은 메스꺼움, 구토, 설사, 복통 및/또는 변비를 포함할 수 있다. 또한, 부작용은 산업 자원에 열거된 것과 같이 관련 기술 분야의 통상의 기술자에게 공지된 임의의 것 및/또는 관련 기술 분야의 통상의 기술자에게 달리 공지된 것을 포함할 수 있다(예를 들어, 문헌 [Medical Dictionary for Regulatory Activities (MedDRA)(Pharm., Med. Transl. Med. 2018)] 및/또는 [Clark, M. J. Biomed. Inf., 54, April 2015, pp. 167-173] 참조). 이러한 부작용은 임상 시험에서 일반적으로 사용되는 표준 기술(예를 들어, 의사 방문, 설문 조사/질문)을 사용하여 인간에서 결정될 수 있다. GLP-1R 및 GCGR에 대해 불균형한 친화도를 갖는 작용제(예를 들어, 세마글루타이드)를 대상체에게 투여할 때 발생하는 이러한 부작용의 빈도 및/또는 중증도와 비교하여, 본 개시내용의 이중 작용제 펩타이드(예를 들어, 서열 번호 1-10 중 임의의 펩타이드, 또는 이의 유도체)는 이러한 빈도 및/또는 중증도를, 예를 들어 20%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 또는 그 초과(최대 100%)로 감소시킬 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 이중 작용제 펩타이드(예를 들어, 서열 번호 1-10 중 임의의 펩타이드 또는 이의 유도체)는 어떠한 부작용도 일으키지 않는다.
본 개시내용의 이중 작용제 펩타이드 생성물은 본원에서 개시되는 병태의 치료를 위한 임의의 적합한 경로에 의해 투여될 수 있다. 펩타이드 생성물의 잠재적인 투여 경로는 경구, 비경구(피내, 피하, 근육내, 혈관내, 정맥내, 동맥내, 복강내, 강내 및 국소 포함) 및 국소(경피, 경점막, 비강내(예를 들어, 비강 스프레이 또는 점적에 의한), 안구(예를 들어, 점안액에 의한), 폐(예를 들어, 구강 또는 비강 흡입에 의한), 협측, 설하, 직장(예를 들어, 좌약에 의한) 및 질내(예를 들어, 좌약에 의한)를 포함하지만, 이로 제한되지 않는다. 일부 실시양태에서, 펩타이드 생성물은 피하, 정맥내 또는 근육내와 같은 비경구 방식으로 투여된다. 다른 실시양태에서, 펩타이드 생성물은 경구 흡입 또는 비강 흡입 또는 취입에 의해 투여된다. 본원에서 개시되는 병태를 치료하기 위한 펩타이드 생성물의 치료 유효량 및 투여 빈도 및 치료 기간은 병태의 특성 및 중증도, 화합물의 효능, 투여 경로, 대상체의 연령, 체중, 전반적인 건강 상태, 성별 및 식이, 및 치료에 대한 대상체의 반응을 비롯한 다양한 요인에 따라 달라질 수 있고, 치료 의사에 의해 결정될 수 있다. 일부 실시양태에서, 펩타이드 생성물은 본원에서 개시되는 병태(예를 들어, NASH 또는 PCOS와 같은 인슐린 저항성 또는/및 비만과 관련된 병태)의 치료를 위해 약 1주일의 기간에 걸쳐 약 0.01 mg 내지 약 0.1, 1, 5 또는 10 mg, 또는 약 0.1-1 mg 또는 1-10 mg의 용량으로 비경구적으로(예를 들어, 피하(sc), 정맥내(iv) 또는 근육내(im)) 투여된다. 추가의 실시양태에서, 펩타이드 생성물은 약 1주의 기간에 걸쳐 약 0.1-0.5 mg, 0.5-1 mg, 1-5 mg 또는 5-10 mg의 용량으로 비경구적으로 (예를 들어, sc, iv 또는 im) 투여된다. 특정 실시양태에서, 펩타이드 생성물은 약 1주의 기간에 걸쳐 약 0.1-1 mg, 또는 약 0.1-0.5 mg 또는 0.5-1 mg의 용량으로 비경구적으로(예를 들어, 피하(SC), 정맥내(IV) 또는 근육내(IM)) 투여된다. 관련 기술 분야의 통상의 기술자는 마우스 또는 다른 전임상 동물 모델에서의 유효 용량이 인간에 대해 조정될 수 있음을 이해한다. 이런 방식으로, 상대 척도 조정(allometric scaling)(생물학적 스케일링으로도 지칭됨)을 통해 더 큰 동물의 용량은 동물의 체중 또는 체표면적에 따라 동등한 용량을 얻기 위해 마우스의 용량으로부터 외삽될 수 있다.
펩타이드 생성물은 본원에서 개시되는 병태(예를 들어, NASH 또는 PCOS와 같은 인슐린 저항성 및/또는 비만과 관련된 병태)의 치료를 위해 임의의 적합한 빈도로 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 이중 작용제 펩타이드 생성물은 예를 들어 sc 또는 iv로 1일 1회, 2일 1회, 3일 1회, 1주 2회, 1주 1회 또는 2주 1회 투여된다. 특정 실시양태에서, 펩타이드 생성물은 예를 들어 SC, IV 또는 IM으로 1주 1회 투여된다. 이중 작용제 펩타이드 생성물은 환자에게 편리한 하루 중 임의의 시간에 투여할 수 있다. 이중 작용제 펩타이드 생성물은 실질적으로 음식과 함께(예를 들어, 식사와 함께 또는 식사 전후 약 1시간 또는 30분 이내) 또는 실질적으로 음식 없이(예를 들어, 식사 전후 적어도 약 1시간 또는 2시간 시점에) 투여될 수 있다. 이중 작용제 펩타이드 생성물로 의학적 병태를 치료하는 기간은 예를 들어 병태의 성질 및 중증도 및 치료에 대한 대상체의 반응에 기초할 수 있고, 치료 의사에 의해 결정될 수 있다. 일부 실시양태에서, 이중 작용제 펩타이드 생성물은 적어도 약 2개월, 3개월, 6개월, 1년, 1.5년, 2년, 3년, 5년, 10년 또는 그 초과의 기간과 같은 본원에서 개시되는 병태를 치료하기 위해 만성적으로 투여된다. 또한, 이중 작용제 펩타이드 생성물은 병태의 임상 증상이 사라지거나 혈당 수치, 혈압, 혈중 지질 수치, 체중 또는 체질량 지수, 허리 대 엉덩이 비율 또는 체지방률 또는 이들의 임의의 조합과 같은 임상 목표가 달성될 때까지 임기응변으로(필요에 따라) 투여될 수 있다. 병태의 임상 증상이 다시 나타나거나 임상 목표가 유지되지 않는 경우, 이중 작용제 펩타이드 생성물의 투여를 재개할 수 있다. 본 개시내용은 본원에서 설명되는 펩타이드 생성물 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염, 또는 이를 포함하는 약제학적 조성물의 치료 유효량을 그 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 본원에서 설명되는 의학적 병태를 치료하는 방법을 제공한다. 본 개시내용은 의약으로 사용하기 위한, 본원에서 설명되는 펩타이드 생성물 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염, 또는 이를 포함하는 조성물을 추가로 제공한다. 또한, 본 개시내용은 의약의 제조에 있어서 본원에서 설명되는 펩타이드 생성물 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염의 용도를 제공한다. 펩타이드 생성물을 함유하는 의약은 본원에서 설명되는 임의의 의학적 병태를 치료하기 위해 사용될 수 있다. 펩타이드 생성물은 선택적으로 하나 이상의 추가의 치료제와 함께 사용될 수 있다.
본원에서 설명되는 이중 작용제 펩타이드 생성물은 단독 활성제로서 투여될 수 있거나, 또는 선택적으로 본원에서 개시되는 임의의 장애, 예를 들어 인슐린 저항성, 당뇨병, 비만, 대사 증후군 또는 심혈관 질환, 또는 NASH 또는 PCOS와 같은 관련된 임의의 병태를 치료하기 위한 하나 이상의 다른 이중 작용제 펩타이드 생성물 및/또는 추가의 치료제와 조합하여 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 추가의 치료제는 항당뇨병제, 항비만제(지질 저하제 및 포만감 촉진제 포함), 항죽상경화제, 항염증제, 항산화제, 항섬유증제, 항고혈압제 및 이들의 조합으로부터 선택된다. 항당뇨병제는 비제한적으로 다음을 포함한다: AMP-활성화 단백질 키나제(AMPK) 작용제, 예를 들어 비구아나이드(예를 들어, 부포르민 및 메트포르민); 퍼옥시좀 증식제-활성화 수용체 감마(PPAR-γ) 작용제, 예를 들어 티아졸리딘디온(예를 들어, 발라글리타존, 시글리타존, 다르글리타존, 엔글리타존, 로베글리타존, 네토글리타존, 피오글리타존, 리보글리타존, 로시글리타존 및 트로글리타존), MSDC-0602K 및 사로글리타자르(이중 PPAR-α/γ-작용제); 글루카곤 유사 펩타이드-1(GLP-1) 수용체 작용제, 예를 들어 엑센딘-4, 알비글루타이드, 둘라글루타이드, 엑세나타이드, 리라글루타이드, 릭시세나타이드, 세마글루타이드, 타스포글루타이드, CNT0736, CNT03649, HM11260C(LAPS-엑센딘), NN9926(OG9S7GT), TT401 및 ZYOGl; 디펩티딜 펩티다제 4(DPP-4) 억제제, 예를 들어 알로글립틴, 아나글립틴, 두토글립틴, 에보글립틴, 제미글립틴, 고소글립틴, 리나글립틴, 오마리글립틴, 삭사글립틴, 셉타글립틴, 시타글립틴, 테넬리글립틴, 트렐라글립틴 및 빌다글립틴; 나트륨-포도당 수송 단백질 2(SGLT2) 억제제, 예를 들어 카나글리플로진(또한 SGLT1을 억제함), 다파글리플로진, 엠파글리플로진, 에르투글리플로진, 이프라글리플로진, 루세오글리플로진, 레모글리플로진 에타보네이트, 소타글리플로진(또한 SGLT1을 억제함) 및 토포글리플로진; 췌장 베타 세포 상의 ATP 의존성 K+(KATP) 채널의 차단제, 예를 들어 르네글리티나이드(예를 들어, 미티글리나이드, 나테글리나이드, 레파기나이드) 및 설포닐우레아{1세대(예를 들어, 아세토헥사마이드, 카르부타마이드, 클로르프로파마이드, 기사이클라마이드[톨헥사마이드], 메타헥사마이드, 톨라자마이드, 톨부타마이드) 및 2세대(예를 들어, 글리벤클라마이드, 글리부라이드, 글리보르누라이드, 글리클라자이드, 글리메피라이드, 글리피자이드, 글리퀴돈, 글리속세파이드 및 글리클로피라마이드) 포함)}; 인슐린 및 이의 유사체, 예를 들어 속효형 인슐린(예를 들어, 인슐린 아스파리, 인슐린 글루리신 및 인슐린 리스프로), 중간형 인슐린(예를 들어, NPH 인슐린) 및 지속형 인슐린(예를 들어, 인슐린 데글루덱, 인슐린 데테미르 및 인슐린 글라르긴); 및/또는 이의 유사체, 유도체 및 염. 특정 실시양태에서, 항당뇨병제는 비구아나이드(예를 들어, 메트포르민), 티아졸리딘디온(예를 들어, 피오글리타존 또는 로시글리타존) 또는 SGLT2 억제제(예를 들어, 엠파글리플로진 또는 토포글리플로진), 또는 이들의 임의의 조합이거나 이를 포함한다. 항비만제는 다음을 포함하지만, 이로 제한되지 않는다: 식욕 억제제(식욕 감퇴제), 예를 들어 암페타민, 덱스암페타민, 암페프라몬, 클로벤조렉스, 마진돌, 펜테르민(토피라메이트를 포함하거나 포함하지 않음) 및 로르카세린; 포만감 촉진제, 예를 들어 섬모 신경영양 인자(예를 들어, 아코킨) 및 아밀린, 칼시토닌, 콜레시스토키닌(CCK), GLP-1, 렙틴, 옥신토모듈린, 췌장 폴리펩타이드(PP), 펩타이드 YY(PYY) 및 신경펩타이드 Y(NPY)의 장기 작용 유사체; 리파제 억제제, 예를 들어 카울러페닌, 세틸리스타트, 에벨락톤 A 및 B, 에스테라스틴, 립스타틴, 오를리스타트, 퍼시퀴닌, 판클리신 A-E, 발릴락톤 및 비브라락톤; 항고지혈증제; 및 이들의 유사체, 유도체 및 염. 항고지혈증제는 비제한적으로 다음을 포함한다: HMG-CoA 리덕타제 억제제, 예를 들어 스타틴(예를 들어, 아토르바스타틴, 세리바스타틴, 플루바스타틴, 메바스타틴, 모나콜린(예를 들어, 모나콜린 K(로바스타틴), 피타바스타틴, 프라바스타틴, 로수바스타틴, 심바스타틴) 및 플라바논(예를 들어, 나린게닌); 스쿠알렌 합성효소 억제제, 예를 들어 라파퀴스타트, 자라고즈산 및 RPR-107393, 아세틸-CoA 카르복실라제(ACC) 억제제, 예를 들어 안토시아닌, 아베나시올라이드, 클로로아세틸화된 비오틴, 사이클로딤, 디클로폽 할록시폽, 소라펜(예를 들어, 소라펜 A1a), 5-(테트라데실옥시)-2-푸란카르복실산(TOFA), CP-640186, GS-0976, NDI-010976; 7-(4-프로필옥시-페닐에티닐)-3,3-디메틸-3,4-디하이드로-2H-벤조[b][1,4]디옥세핀; N-에틸-N'-(3-{[4-(3,3-디메틸-1-옥소-2-옥사-7-아자스피로[4.5]dec-7-일)피페리딘-일]-카르보닐}-1-벤조티엔-2-일)우레아; 5-(3-아세트아미도부트-1-이닐)-2-(4-프로필옥시페녹시)티아졸; 및 1-(3-{[4-(3,3-디메틸-1-옥소-2-옥사-7-아자스피로[4.5]dec-7-일)피페리딘-1-일]-카르보닐}-5-(피리딘-2-일)-2- 티에닐)-3-에틸우레아; PPAR-α 작용제, 예를 들어 피브레이트(예를 들어, 베자피브레이트, 시프로피브레이트, 클리노피브레이트, 클로피브르산, 클로피브레이트, 알루미늄 클로피브레이트[알피브레이트], 클로피브라이드, 에토피브레이트, 페노피브르산, 페노피브레이트, 젬피브로질, 로니피브레이트 및 심피브레이트), 이소플라본(예를 들어, 다이드제인 및 제니스테인), 및 퍼플루오로알칸산(예를 들어, 퍼플루오로옥탄산 및 퍼플루오로노난산); PPAR-δ 작용제, 예를 들어 엘라피브라노르(이중 PPAR-α/γ 작용제), GFT505(이중 PPAR-α/γ 작용제), GW0742, GW501516(이중 PPAR-β/δ 작용제), 소델글리타자르(GW677954), MBX-8025, 및 이소플라본(예를 들어, 다이드제인 및 제니스테인); PPAR-γ 작용제, 예를 들어 티아졸리딘디온(상기), 사로글리타자르(이중 PPAR-α/γ 작용제), 4-옥소-2-티오옥소티아졸린(예를 들어, 로다닌), 베르베린, 호노키올, 퍼플루오로노난산, 사이클로펜테논 프로스타글란딘(예를 들어, 사이클로펜테논 15-데옥시-A--프로스타글란딘 J2[15d-PGJ2]) 및 이소플라본(예를 들어, 다이드제인 및 제니스테인); 간 X 수용체(LXR) 작용제, 예를 들어 내인성 리간드(예를 들어, 옥시스테롤, 예를 들어 22(i?)-하이드록시콜레스테롤, 24(A)-하이드록시 콜레스테롤, 27-하이드록시콜레스테롤 및 콜레스테노산) 및 합성 작용제(예를 들어, 아세틸-포도카르픽 이량체, 하이포콜아미드, A(X-디메틸-3b-하이드록시-콜렌아미드[DMHCA], GW3965 및 T0901317); 레티노이드 X 수용체(RXR) 작용제, 예를 들어 내인성 리간드(예를 들어, 9-시스-레티노산) 및 합성 작용제(예를 들어, 벡사로텐, AGN 191659, AGN 191701, AGN 192849, BMS649, LG100268, LG100754 및 LGD346); 아실-CoA 콜레스테롤 아실트랜스퍼라제(ACAT, 일명 스테롤 G-아실 트랜스퍼라제[SOAT], 예를 들어 ACAT1[SOAT1] 및 ACAT2[SOAT2])의 억제제, 예를 들어 아바시미브, 팩티미브, 펠리토린, 테르펜돌 C 및 플라바논(예를 들어, 나린제닌); 스테아로일-CoA 데사투라제-1(SCD-1, 일명 스테아로일-CoA 델타-9 데사투라제) 활성 또는 발현의 억제제, 예를 들어 아람콜, CAY-10566, CVT-11127, SAR-224, SAR-707, XEN-103; 3-(2-하이드록시에톡시)-4-메톡시-N-[5-(3-트리플루오로메틸벤질)티아졸-2-일]벤즈아미드 및 4-에틸아미노-3-(2-하이드록시에톡시)-N-[5-(3-트리플루오로메틸벤질)티아졸-2-일]벤즈아미드; 1'-{6-[5-(피리딘-3-일메틸)-1,3,4-옥사디아졸-2-일]피리다진-3-일}-5-(트리플루오로메틸)-3,4-디하이드로스피로[크로멘-2,4'-피페리딘]; 5-플루오로-1'-{6-[5-(피리딘-3-일메틸)-1,3,4-옥사디아졸-2-일]피리다진-3-일}-3,4-디하이드로스피로[크로멘-2,4'-피페리딘]; 6-[5-(사이클로프로필메틸)-4,5-디하이드로-1'H,3H-스피로[1,5-벤조옥사제핀-2,4'-피페리딘]-1'-일]-N-(2-하이드록시-2-피리딘-3-일에틸)피리다진-3-카르복스아미드; 6-[4-(2-메틸벤조일)피페리딘-1-일]피리다진-3-카르복실산(2-하이드록시-2-피리딘-3-일에틸)아미드; 4-(2-클로로페녹시)-N-[3-(메틸 카르바모일)페닐]피페리딘-1-카르복스아미드; 공액 리놀레산의 시스-9,트랜스-11 이성질체 및 트랜스-10,시스-12 이성질체, WO 2009/129625 A1에 개시된 치환된 헤테로방향족 화합물, SCD-1에 대한 mRNA를 표적으로 하는 안티센스 폴리뉴클레오타이드 및 펩타이드-핵산(PNA), 및 SCD-1 표적화 siRNA; 콜레스테롤에스테르 전달 단백질(CETP) 억제제, 예를 들어 아나세트라피브, 달세트라피브, 에바세트라피브, 토르세트라피브 및 AMG 899(TA-8995); 마이크로좀 트리글리세라이드 전달 단백질(MTTP) 활성 또는 발현의 억제제, 예를 들어 임플리타파이드, 로미타파이드, 디를로타파이드, 미트라타파이드, CP-346086, JTT-130, SLx-4090, MTTP에 대한 mRNA를 표적화하는 안티센스 폴리뉴클레오티드 및 PNA, MTTP-표적화 마이크로RNA(예를 들어, miRNA-30c) 및 MTTP-표적화 siRNA; GLP-1 수용체 작용제; 섬유모세포 성장 인자 21(FGF21) 및 이의 유사체 및 유도체, 예를 들어 BMS-986036(페길화된 FGF21); 프로단백질 컨버타제 서브틸리신/켁신 타이 9(PCSK9) 활성 또는 발현의 억제제, 예를 들어 베르베린(PC8K9 수준 감소), 애넥신 A2(PCSK9 활성 억제), 항-PCSK9 항체(예를 들어, 알리로쿠맙, 보코시주맙, 에볼로쿠맙, LGT-209, LY3015014 및 RG7652), PCSK9에 결합하는 LDL 수용체의 표피 성장 인자-A(EGF-A) 도메인을 모방하는 펩타이드, PCSK9 결합 애드넥틴(예를 들어, BMS-962476), PCSK9에 대한 mRNA를 표적으로 하는 안티센스 폴리뉴클레오타이드 및 PNA, 및 PCSK9 표적화 siRNA(예를 들어, 인클리시란[ALN-PCS] 및 ALN-PCS02); 아포지단백질 모방 펩타이드, 예를 들어 apoA-I 모방체(예를 들어, 2F, 3F, 3F-1, 3F-2, 3F-14, 4F, 4F-P-4F, 4F-IHS-4F, 4F2, 5F, 6F, 7F, 18F, 5A, 5A-C1, 5A-CH1, 5A-CH2, 5A-H1,18 A, 37pA [18A-P-18A], ELK, ELK-1A, ELK-1F, ELK-1K1A1E, ELK-1L1K, ELK-1W, ELK-2A, ELK-2A2K2E, ELK-2E2K, ELK-2F, ELK-3 E3EK, ELK-3E3K3A, ELK-3E3LK, ELK-PA, ELK-P2A, ELKA, ELKA-CH2, ATI-5261, CS-6253, ETC-642, FAMP, FREL 및 KRES 및 apoE 모방체(예를 들어, Ac-hEl8A-NH2, AEM-28, Ac-[R]hEl8A-NH2, AEM-28-14, EpK, hEp, mRl8L, COG-112, COG-133 및 COG-1410); 오메가-3 지방산, 예를 들어 도코사헥사엔산(DHA), 도코사펜타엔산(DPA), 에이코사펜타엔산(EPA), α-리놀렌산(ALA), 어유(예를 들어, DHA 및 EPA 포함) 및 이의 에스테르(예를 들어, 글리세릴 및 에틸 에스테르); 및 이들의 유사체, 유도체 및 염. 특정 실시양태에서, 항비만제는 리파제 억제제(예를 들어, 오를리스타트) 및/또는 항고지혈증제(예를 들어, 스타틴, 예를 들어 아토르바스타틴, 및/또는 피브레이트, 예를 들어 페노피브레이트)이거나, 이를 포함한다. 항고혈압제는 비제한적으로 다음을 포함한다: 레닌-안지오텐신-알도스테론 시스템(RAAS)의 길항제, 예를 들어 레닌 억제제(예를 들어, 알리스키렌), 안지오텐신 전환 효소(ACE) 억제제(예를 들어, 베나제프릴, 캅토프릴, 에날라프릴, 포시노프릴, 리시노프릴, 모엑시프릴, 페린도프릴, 퀴나프릴, 라미프릴 및 트란돌라프릴), 안지오텐신 II 수용체 타입 1(ATII1) 길항제(예를 들어, 아질사르탄, 칸데사르탄, 에프로사르탄, 피마사르탄, 이르베사르탄, 로사르탄, 올메사르탄 메독소밀, 올메사르탄, 텔미사르탄 및 발사르탄) 및 알도스테론 수용체 길항제(예를 들어, 에플레레논 및 스피로놀락톤); 이뇨제, 예를 들어 루프 이뇨제(예를 들어, 부메타나이드, 에타크린산, 푸로세마이드 및 토르세마이드), 티아지드 이뇨제(예를 들어, 벤드로플루메티아지드, 클로로티아지드, 하이드로클로로티아지드, 에피티자이드, 메티클로티아지드 및 폴리티아지드), 티아지드 유사 이뇨제(예를 들어, 클로르탈리돈, 인다파미드 및 메톨라존), 시클레타닌(초기 원위 세뇨관 이뇨제), 칼륨 보존성 이뇨제(예를 들어, 아밀로라이드, 에플레레논, 스피로놀락톤 및 트리암테렌) 및 테오브로민; 칼슘 채널 차단제, 예를 들어 디하이드로피리딘(예를 들어, 암로디핀, 레밤로디핀, 실니디핀, 클레비디핀, 펠로디핀, 이스라디핀, 레르카니디핀, 니카르디핀, 니페디핀, 니모디핀, 니솔디핀 및 니트렌디핀) 및 비-디하이드로피리딘(예를 들어, 딜티아젬 및 베라파밀); α2-아드레날린 수용체 작용제, 예를 들어 클로니딘, 구아나벤즈, 구안파신, 메틸도파 및 목소니딘; α1-아드레날린 수용체 작용제(알파 차단제), 예를 들어 독사조신, 인도라민, 니세르골린, 페녹시벤자민, 펜톨라민, 프라조신, 테라조신 및 톨라졸린; β-아드레날린 수용체(β1 또는/및 β2) 길항제(베타 차단제), 예를 들어 아테놀롤, 베탁솔롤, 비소프롤롤, 카르테올롤, 카르베딜롤, 라베탈롤, 메토프롤롤, 나돌롤, 네비볼롤, 옥스프레놀롤, 펜부톨롤, 핀돌롤, 프로프라놀롤 및 티몰롤; 혼합 알파/베타 차단제, 예를 들어 부신돌롤, 카르베딜롤 및 라베탈롤; 엔도텔린 수용체 길항제, 예를 들어 선택적 ETA 수용체 길항제(예를 들어, 암브리센탄, 아트라센탄, 에도넨탄, 시탁센탄, 지보텐탄 및 BQ-123) 및 이중 ETA/ETB 길항제(예를 들어, 보센탄, 마시텐탄 및 테조센탄); 기타 혈관확장제, 예를 들어 하이드랄라진, 미녹시딜, 테오브로민, 나트륨 니트로프루사이드, 유기 니트레이트(예를 들어, 체내에서 산화질소로 전환되는 이소소르비드 모노니트레이트, 이소소르비드 디니트레이트 및 니트로글리세린), 내피 산화질소 신타제(eNOS) 자극제(예를 들어, 시클레타닌), 가용성 구아닐레이트 시클라제의 활성제(예를 들어, 시나시구아트 및 리오시구아트), 포스포디에스테라아제 타입 5(PDE5) 억제제(예를 들어, 아바나필, 벤즈아미데나필, 다스탄필, 다이나필, 로데나필, 미로데나필, 실데나필, 타다라필, 우데나필, 바르데나필, 디피리다몰, 파파베린, 프로펜토필린, 자프리나스트 및 T-1032), 프로스타글란딘 Ei(알프로스타딜) 및 이의 유사체(예를 들어, 리마프로스트 및 미소프로스톨), 프로스타사이클린 및 이의 유사체(예를 들어, 아타프로스트, 베라프로스트[예, 에수베라프로스트], 5,6,7-트리노르-4,8-인터-w-페닐렌-9-플루오로-PGl2, 카르바사이클린, 이소카르바사이클린, 클린프로스트, 시프로스텐, 엡탈로프로스트, 시카프로스트, 일로프로스트, 피밀프로스트), SM-10906(데스-메틸 피밀프로스트), 낙사프로스텐, 타프로스텐, 트레프로스티닐, CS-570, OP-2507 및 TY-11223), 비-프로스타노이드 프로스타사이클린 수용체 작용제(예를 들어, 1-프탈라지놀, 랄리네파그, 셀렉시파그, ACT-333679 [MRE-269, 셀렉시파그의 활성 대사산물] 및 TRA-418), 포스포리파제 C(PLC) 억제제, 및 단백질 키나제 C(PKC) 억제제(예를 들어, BIM-1, BIM-2, BIM-3, BIM-8, 첼레리트린, 시클레타닌, 고시폴, 미야베놀 C, 미리시트린, 루복시스타우린 및 베르바스코사이드; 미네랄, 예를 들어 마그네슘 및 황산마그네슘; 및 이들의 유사체, 유도체 및 염. 특정 실시양태에서, 항고혈압제는 티아지드 또는 티아지드 유사 이뇨제(예를 들어, 하이드로클로로티아지드 또는 클로르탈리돈), 칼슘 채널 차단제(예를 들어, 암로디핀 또는 니페디핀), ACE 억제제(예를 들어, 베나제프릴, 캡토프릴 또는 페린도프릴) 또는 안지오텐신 II 수용체 길항제(예를 들어, 올메사르탄 메독소밀, 올메사르탄, 텔미사르탄 또는 발사르탄) 또는 이들의 임의의 조합이거나, 이를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본 명세서에서 설명되는 펩타이드 생성물은 NASH와 같은 NAFLD 치료를 위해 하나 이상의 추가의 치료제와 조합하여 사용된다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 추가의 추가의 치료제는 항당뇨병제, 항비만제, 항염증제, 항섬유화제, 항산화제, 항고혈압제 및 이들의 조합으로부터 선택된다. NAFLD(예를 들어, NASH)를 치료하기 위해 사용될 수 있는 치료제는 비제한적으로 다음을 포함한다: PPAR 작용제, 예를 들어 PPAR-δ 작용제(예를 들어, MBX-8025, 엘라피브라노르[이중 PPAR-α/δ 작용제] 및 GW501516[이중 PPAR-β/δ 작용제]) 및 PPAR-γ 작용제(예를 들어, 티아졸리딘디온, 예를 들어 피오글리타존, 및 사로글리타자르[이중 PPAR-α/γ 작용제])(PPAR-δ 및 -γ 작용제는 인슐린 감수성을 증가시키고, PPAR-α 작용제는 간 지방증을 감소시키고, PPAR-δ 작용제는 대식세포 및 쿠퍼(Kupffer) 세포의 활성화를 억제함); 파르네소이드 X 수용체(FXR) 작용제, 예를 들어 오베티콜산 및 비스테로이드성 FXR 작용제, 예를 들어 GS-9674(간 포도당 신생합성, 지방 생성, 지방증 및 섬유증을 감소시킴); 섬유모세포 성장 인자 19(FGF19) 및 이의 유사체 및 유도체, 예를 들어 NGM-282(FGF19 유사체는 간 포도당 신생합성 및 지방증을 감소시킴); 섬유모세포 성장 인자 21(FGF21) 및 이의 유사체 및 유도체, 예를 들어 BMS-986036(페길화된 FGF21)(FGF21 유사체는 간 지방증, 세포 손상 및 섬유증을 감소시킴); HMG-CoA 리덕타제 억제제, 예를 들어 스타틴(예를 들어, 로수바스타틴)(스타틴은 지방간염 및 섬유증을 감소시킴); ACC 억제제, 예를 들어 NDI-010976(간 표적) 및 GS-0976(ACC 억제제는 신생 지방 생성 및 간 지방증을 감소시킴); SCD-1 억제제, 예를 들어아람콜(SCD-1 억제제는 간 지방증을 감소시키고 인슐린 감수성을 증가시킴); SGLT2 억제제, 예를 들어 카나글리플로진, 이프라글리플로진 및 루세오글리플로진(SGLT2 억제제는 체중 감소, 간 ALT 수준 및 섬유증을 감소시킴); CCR2 또는/및 CCR5의 길항제, 예를 들어 세니크리비록(CCR2(CCL2에 결합함[MCP1]) 및 CCR5(CCL5에 결합함[RANTES])의 길항제는 염증 세포(예를 들어, 대식세포)의 활성화 및 간으로의 이동을 억제하고 간 섬유증을 감소시킴); 아폽토시스 억제제, 예를 들어 아폽토시스 신호 조절 키나제 1(ASK1) 억제제(예를 들어, 셀론세르팁) 및 카스파제 억제제(예를 들어, 엠리카산[범-카스파제 억제제])(아폽토시스 억제제는 간 지방증 및 섬유증을 감소시킴); 리실 옥시다제-유사 2 (LOXL2) 억제제, 예를 들어 심투주맙(LOXL2는 콜라겐 형성의 핵심 매트릭스 효소이며 간에서 고도로 발현됨); 갈렉틴-3 억제제, 예를 들어 GR-MD-02 및 TD139(갈렉틴-3은 간 섬유증 발병에 중요함); 항산화제, 예를 들어 비타민 E(예를 들어, α-토코페롤) 및 활성 산소종(ROS) 및 자유 라디칼 제거제(예를 들어, 시스테아민, 글루타티온, 멜라토닌 및 펜톡시필린[또한 TNF-α 및 포스포디에스테라아제 억제를 통한 항염증제])(비타민 E는 간 지방증, 간세포 팽창 및 소엽 염증을 감소시킴); 및 이들의 유사체, 유도체 및 염. 일부 실시양태에서, 본원에서 설명되는 펩타이드 생성물은 PPAR 작용제(예를 들어, PPAR-δ 작용제, 예를 들어 엘라피브라노르 및/및 PPAR-γ 작용제, 예를 들어 피오글리타존), HMG-CoA 리덕타제 억제제(예를 들어, 스타틴, 예를 들어 로수바스타틴), FXR 작용제(예를 들어, 오베티콜산) 또는 항산화제(예를 들어, 비타민 E), 또는 이들의 임의의 조합과 함께 NAFLD(예를 들어, NASH)를 치료하기 위해 사용된다. 특정 실시양태에서, NAFLD(예를 들어, NASH) 치료를 위한 하나 이상의 추가의 치료제는 비타민 E 및/또는 피오글리타존이거나, 이를 포함한다. 관련 기술 분야의 통상의 기술자가 이해하는 바와 같이 다른 조합도 사용될 수 있다.
약동학("PK") 파라미터는 피닉스(Phoenix)® 윈놀린(WinNonlin)® 버전 8.1 이상(Certara USA, Inc., 미국 뉴저지주 프린스톤 소재)을 사용하여 추정할 수 있다. 혈관외 투여 경로와 일치하는 비구획적 접근법이 파라미터 추정에 사용될 수 있다. 개별 혈장 농도-시간 데이터가 약동학 계산에 사용될 수 있다. 개별 동물에 대한 파라미터 추정치 외에도, 기술 통계(예를 들어, 평균, 표준 편차, 변동 계수, 중앙값, 최소값, 최대값)를 적절하게 결정할 수 있다. 정량 한계 미만의 농도 값은 기술 통계 및 약동학 분석의 결정을 위해 0으로 처리될 수 있다. 정량 한계 미만의 내장(embedded) 농도 값은 약동학 분석에서 제외될 수 있다. 모든 파라미터는 투여일(제1일)에 시험 물품으로 처리된 그룹으로부터의 혈장 중의 개별 이중 작용제 펩타이드(또는 이의 유도체 및/또는 대사산물) 농도로부터 생성될 수 있다. 파라미터는 명목 용량 수준을 사용하여 추정할 수 있지만, 사양 외의 용량 제제 분석 결과가 얻어지면 실제 용량 수준을 사용할 수 있다. 파라미터는 명목 샘플링 시간을 사용하여 추정할 수 있고, 생체 분석 샘플 수집 편차가 문서화되면 영향을 받는 시점에서 실제 샘플링 시간을 사용할 수 있다. 생체분석 데이터는 약동학 분석을 위해 받은 그대로 사용할 수 있으며, 제공된 단위로 표 및 도면으로 표시할 수 있다. 약동학적 파라미터는 분석 실험실에서 제공하는 단위로 계산 및 표시될 수 있다(크기는 보고서에 표시하기 위해 적절하게 조정될 수 있다(예를 들어, h*ng/mL는 h*μg/mL로 변환됨)). 기술 통계(예를 들어, 평균, 표준 편차, 변동 계수, 중앙값, 최소값, 최대값) 및 약동학적 파라미터는 적절하게 세 개의 유효 숫자로 결정될 수 있다. 추가의 데이터 처리 항목은 필요에 따라 문서화할 수 있다. 결정해야 할 PK 파라미터는 데이터가 허용하는 한, 다음을 포함할 수 있지만 이에 국한되지는 않는다: Cmax: 관찰된 최대 농도; DN Cmax: 용량 정규화 최대 농도(Cmax/용량으로 계산됨); Tmax: 관찰된 최대 농도의 시간; AUC0-t: 선형 사다리꼴 규칙을 사용하여 계산된 시간 0에서 마지막 측정 가능한 농도 시간까지의 곡선 아래 면적; AUC0-96: 선형 사다리꼴 규칙을 사용하여 계산된 시점 0에서 96시간까지의 곡선 아래 면적; DN AUC0-96: 용량 정규화 AUC0-96(AUC0-96/용량으로 계산됨); AUC0-inf: 시점 0부터 무한대(제1일만)까지의 곡선 아래 영역(AUC0-inf = AUC0-t + Ct / λz로 계산됨, 여기서 Ct는 마지막으로 관찰된 정량 가능한 농도이고, λz는 제거 속도 상수임); t1/2: 제거 반감기(ln(2) / λz로 계산됨). 추가의 파라미터 및 비교 항목(예를 들어, 성비, 용량 비례비(dose proportionality ratio) 등)도 관련 기술 분야의 통상의 기술자가 이해할 수 있는 바와 같이 결정될 수 있다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용은 글루카곤 유사 펩타이드 1 수용체(GLP-1R) 및 글루카곤 수용체(GCGR)에 대해 친화도를 갖는 적어도 하나의 이중 작용제 펩타이드를 포함하는 약제학적 투여 제제(들)를 제공하며, 여기서 펩타이드는 소수성 계면활성제로 변형되고; 투여량은 GLP-1R 및 GCGR에 대해 불균형한 친화도를 갖는 작용제와 비교하여 하나 이상의 부작용의 감소와 함께 혈당을 조절하고/하거나 체중 감소를 유도하도록 구성되며, 상기 부작용은 포유동물에게 투여 시 메스꺼움, 구토, 설사, 복통 및 변비로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 이중 작용제 펩타이드는 서열 번호 1-10 중 어느 하나, 또는 이의 유도체, 또는 이의 조합물이다. 일부 실시양태에서, 이중 작용제 펩타이드는 GLP-1R 및 GCGR에 대해 거의 동등한 친화도를 갖고, 훨씬 더 바람직한 실시양태에서 서열 번호 1이다. 일부 실시양태에서, 세마글루타이드의 대략 등몰 투여량의 투여와 비교하여 포유동물에 대한 이중 작용제 펩타이드의 투여는 다음을 유도한다: 투여 약 48 또는 96시간 후에 더 낮은 혈당(선택적으로 적어도 약 10, 20, 30, 40 또는 50% 중 임의의 수준으로 더 낮음, 바람직하게는 적어도 약 50% 더 낮음); 투여 약 72시간 후에 더 낮은 혈당(선택적으로 적어도 약 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 또는 100% 중 임의의 수준으로 더 낮음, 바람직하게는 적어도 약 100% 더 낮음); 및/또는 투여 약 120시간 후에 더 낮음 혈당. 일부 실시양태에서, 포유동물에 대한 이중 작용제 펩타이드의 투여는 대략 등몰 투여량의 세마글루타이드의 투여와 비교하여 전신 체중 감소를 유도하고/하거나, 간 중량 감소를 유발한다. 일부 실시양태에서, 포유동물에 대한 이중 작용제 펩타이드의 투여는 대략 등몰 투여량의 세마글루타이드의 투여와 비교하여 더 낮은 Cmax(선택적으로 적어도 약 10, 20, 30, 40, 50% 중 임의의 수준으로 더 낮음, 바람직하게는 적어도 약 50% 더 낮음)를 나타내고/내거나; 대략 같거나 더 큰 Tmax(선택적으로 적어도 약 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 또는 100% 더 큼, 바람직하게는 적어도 약 100% 더 큼)를 나타내고/내거나; 유사한 AUC(0-inf)(선택적으로 그의 적어도 약 50, 60, 70, 80, 90, 95, 100% 중 임의의 수준, 바람직하게는 그의 적어도 약 80-90%, 예를 들어 약 85-93%)를 나타내고/내거나; 대략 같거나 더 높은 T1/2(hr)(선택적으로 그의 적어도 약 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 또는 100% 중 임의의 수준, 바람직하게는 그의 적어도 약 50 또는 75%, 예를 들어 그의 약 50-75%)를 나타내고/내거나; 연장된 MRT(hr)(선택적으로 적어도 약 10, 20, 30, 40 또는 50% 중 임의의 수준으로 더 높음, 바람직하게는 적어도 약 25% 더 높음)를 나타내고/내거나; 지속된 PK/PD 프로파일을 나타내고/내거나, 동일하거나 더 큰 당 조절 효과를 나타내고/내거나; 더 큰 전신 체중 감소, 선택적으로 그의 약 2배의 체중 감소를 유도하고/하거나; 더 낮은 체지방량(선택적으로 약 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 또는 100% 중 임의의 수준으로 더 낮음, 바람직하게는 적어도 약 100% 더 낮음)을 유도하고/하거나; NASH를 치료하기 위해 투여될 때 전신 체중 감소의 증가, 간 중량의 감소, NAS 점수의 개선, 간지방증의 개선, 팽창의 개선, col1A1 염색의 개선, ALT의 개선, 간 TG/TC의 개선, 및 혈장 TG/TC의 개선을 유도한다. 일부 실시양태에서, 포유동물에 대한 이중 작용제 펩타이드의 투여는 대략 등몰 투여량의 세마글루타이드의 투여와 비교하여 투여 제제의 투여 후 대략 14일까지 더 큰 체중 감소(선택적으로 적어도 약 10, 20, 30, 40 또는 50% 더 큼, 바람직하게는 적어도 약 15% 더 큼); 및/또는 투여 제제의 투여 후 대략 20 내지 28일까지 더 큰 체중 감소(선택적으로 적어도 약 10, 20, 30, 40 또는 50% 더 큼, 바람직하게는 적어도 약 25% 더 큼)를 유도한다. 일부 실시양태에서, 포유동물에 대한 이중 작용제 펩타이드의 투여는 대략 등몰 투여량의 세마글루타이드의 투여와 비교하여, 군살이 없는 정상 포유동물의 정상 체중 범위로 회복하기에 충분한 체중 감소를 비만 포유물에서 유도한다.
부작용 또는 유해한 사건의 "저하" 또는 "감소"는 GLP1R 및 GCGR에 대한 균형 잡힌 친화도를 갖는 작용제를 투여한 후 대상체가 경험하는 부작용의 정도, 지속 기간 및/또는 빈도 및 대상체 그룹에서의 발생률이 GLP1R 및 GCGR에 대한 불균형한 친화도를 갖는 작용제와 비교하여 감소하는 것을 의미한다. 이러한 감소는 GLP1R 및 GCGR에 대해 불균형한 친화도를 갖는 작용제에 대한 반응으로 대상체가 경험하게 될 일부 부작용의 예방을 포함한다. 또한, 이러한 감소는 GLP1R 및 GCGR에 대해 불균형한 친화도를 갖는 작용제의 투여 후에 대상체가 이전에 경험한 부작용의 제거를 포함한다. 일부 실시양태에서, 부작용의 "저하" 또는 "감소"는 위장 부작용의 감소를 포함하며, 여기서 부작용은 0 또는 검출할 수 없는 수준으로 감소한다. 다른 실시양태에서, 부작용은 치료되지 않은 대상체와 동등한 수준으로 감소하지만, 완전히 제거되지는 않는다. 또한, GLP-1R 또는 GCGR에 대한 불균형한 친화도를 갖는 유사체를 포유동물에게 투여하면 리간드에 대한 감수성이 약한 수용체를 최대로 활성화하기 위해 과도하게 높은 용량을 투여해야 할 필요가 있을 수 있기 때문에, 다른 리간드에 대한 생물학적 유효 투여량을 초과하고 용량 관련된 원치 않는 부작용을 유발할 가능성이 있다.
본 개시내용은 또한 포유동물의 혈당을 낮추고/낮추거나 안정화시키는 방법을 제공하며, 이 방법은 서열 번호 1-10(또는 이의 유도체)의 이중 작용제 펩타이드, 바람직하게는 GLP-1R 및 GCGR에 대해 거의 동등한 친화도를 갖는 이중 작용제 펩타이드(바람직하게는 서열 번호 1)를 포함하는 약제학적 투여 제제를 포유동물에게 투여하는 것을 포함하고, 여기서 상기 방법은 GLP-1R 및 GCGR에 대한 불균형한 친화도를 갖는 작용제(예를 들어, 세마글루타이드)와 비교하여 하나 이상의 부작용의 발생률 또는 중증도를 감소시키고, 상기 부작용은 포유동물에게 투여 시 메스꺼움, 구토, 설사, 복통 및 변비로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 이러한 방법은 대략 등몰 투여량의 세마글루타이드가 투여되는 방법과 비교하여, 대략 투여 약 48 또는 96시간 후에 더 낮은 혈당(10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 또는 100% 더 낮음, 바람직하게는 적어도 약 50% 더 낮음), 대략 투여 72시간 후에 더 낮은 혈당(선택적으로 적어도 약 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 또는 100% 더 낮음, 바람직하게는 적어도 약 100% 더 낮음), 및/또는 대략 투여 120시간 후에 더 낮은 혈당(선택적으로 적어도 약 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 또는 100% 중 임의의 수준으로 더 낮음, 바람직하게는 적어도 약 100% 더 낮음)을 유도하고/하거나; 전신 체중 감소를 유도하고/하거나, 간 중량 감소, 더 낮은 Cmax(선택적으로 약 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 또는 100% 더 낮음, 바람직하게는 적어도 약 50% 더 낮음); 대략 같거나 더 큰 Tmax(선택적으로 약 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 또는 100% 더 큼, 바람직하게는 적어도 약 100% 더 큰 Tmax); 유사한 AUC(0-inf)(선택적으로 그의 적어도 약 50, 60, 70, 80, 90, 95, 100% 중 임의의 수준, 바람직하게는 그의 적어도 약 80-90%, 예를 들어 그의 약 85-93%); 대략 같거나 더 높은 T1/2(hr)(선택적으로 그의 적어도 약 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 또는 100% 중 임의의 수준, 바람직하게는 그의 적어도 약 50 또는 75%, 또는 그의 약 50-75%); 연장된 MRT(hr)(선택적으로 적어도 약 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 또는 100%, 바람직하게는 적어도 약 25% 연장됨); 동일하거나 더 큰 당 조절 효과를 나타내는 지속된 PK/PD 프로파일; 더 큰 전신 체중 감소(선택적으로 그의 약 2배의 전신 체중 감소); 더 낮은 체지방량(선택적으로 적어도 약 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 또는 100% 중 임의의 수준으로 더 낮음, 바람직하게는 적어도 약 100% 더 낮음); 투여 제제의 투여 후 대략 14일까지 더 큰 체중 감소(선택적으로 적어도 약 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 또는 100% 중 임의의 수준으로 더 큼, 바람직하게는 적어도 약 15% 더 큼); 투여 제제의 투여 후 대략 20 내지 28일까지 더 큰 체중 감소(선택적으로 적어도 약 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 또는 100% 중 임의의 수준으로 더 큼, 바람직하게는 적어도 약 25% 더 큼); 및/또는 포유동물의 체중을 군살이 없는 정상 포유동물의 정상 체중 범위로 회복하기에 충분한 비만 동물의 체중 감소; 및/또는 NASH를 치료하기 위해 투여될 때 전신 체중 감소의 증가, 간 중량의 감소, NAS 점수의 개선, 간지방증의 개선, 팽창의 개선, col1A1 염색의 개선, ALT의 개선, 간 TG/TC의 개선, 및 혈장 트리글리세라이드(TG)/총 콜레스테롤(TC)의 개선을 유도한다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용은 탈이온수(pH 7.7 ± 0.1) 중의 작용제 펩타이드 생성물(예를 들어, 서열 번호 1) 및 약 0.025-0.075%(w/w) 폴리소르베이트 20, 약 0.2-0.5%(w/w) 아르기닌, 약 3-6%(w/w) 만니톨을 포함하는 약제학적 투여 제제를 제공한다. 바람직한 실시양태에서, 약제학적 투여 제제는 탈이온수(pH 7.7 ± 0.1) 중의 서열 번호 1, 약 0.050%(w/w) 폴리소르베이트 20, 약 0.348%(w/w) 아르기닌 및 약 4.260%(w/w) 만니톨을 포함하는 ALT-801이다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용은 약 0.15 mg/kg/용량 미만, 선택적으로 약 0.03 내지 0.10 mg/kg/용량으로 작용제 펩타이드 생성물(예를 들어, 서열 1)을 포유동물에게 투여하도록 구성된 약제학적 투여 제제를 제공한다. 일부 실시양태에서, 약제학적 투여 제제는 0.15 mg/kg/용량 미만의 작용제 펩타이드 생성물을 포유동물에게 투여하도록 구성된다. 일부 실시양태에서, 약제학적 투여 제제는 0.03-0.15 mg/kg/용량을 투여하도록 구성된다. 일부 실시양태에서, 약제학적 투여 제제는 주당 약 0.5 내지 약 10 mg; 선택적으로 주당 약 1 내지 약 7 mg; 또는 선택적으로 주당 약 1 내지 5 mg을 투여하도록 구성된다. 일부 실시양태에서, 약제학적 투여 제제는 최대 6주 동안 주당 1회 포유동물에게 투여되도록 구성된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용은 치료 용량에 도달하는 시간이 약 4주 이하이도록 구성된 약제학적 투여 제제를 제공한다. 일부 실시양태에서, 치료 용량은 약 400 내지 약 1300 ng/ml의 Cmax; 약 10 내지 약 36시간의 Tmax; 및/또는 약 15,000 내지 45,000 h*ng/mL의 AUC0-48를 나타낸다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용은 서열 번호 1을 포함하는 약제학적 투여 제제를 인간에게 투여하는 것을 포함하는, 인간의 혈당 저하 및/또는 체중 감소 방법을 제공하며, 여기서 하나 이상의 부작용의 발생이 GLP-1R 및 GCGR에 대한 불균형한 친화도를 갖는 작용제와 비교하여 감소되며, 상기 부작용은 포유동물에게 투여 시 메스꺼움, 구토, 설사, 복통 및 변비로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 a) GLP-1R 및 GCGR에 대해 불균형한 친화도를 갖는 작용제와 비교하여 포유동물에게 투여 시 메스꺼움, 구토, 설사, 복통 및 변비로부터 선택되는 하나 이상의 부작용의 발생률을 감소시키고/시키거나; b) 세마글루타이드의 대략 등몰 투여량을 투여하는 방법과 비교할 때, 투여 약 48 또는 96시간 후에 약 50% 더 낮은 혈당, 투여 약 72시간 후에 약 100% 더 낮은 혈당, 및 /또는 투여 약 120시간 후에 더 낮은 혈당을 유도하고/하거나; (c) 전신 체중 감소를 유도하고/하거나 간 지방 감소를 유도하고/하거나; d) 세마글루타이드의 대략 등몰 투여량이 투여되는 방법과 비교할 때, 더 낮은 Cmax 또는 선택적으로 약 50% 더 낮은 Cmax; 대략 같거나 더 큰 Tmax 또는 선택적으로 약 100% 더 큰 Tmax; 유사한 AUC(0-inf) 또는 선택적으로 대략 85-93% AUC(0-inf); 대략 같거나 더 낮은 T1/2(hr) 또는 선택적으로 대략 50-75% T1/2(hr); 연장된 MRT(hr) 또는 선택적으로 적어도 약 25% 더 긴 MRT(hr); 동일하거나 더 큰 당 조절 효과를 나타내는 지속된 PK/PD 프로파일; 더 큰 전신 체중 감소 또는 선택적으로 약 2배의 전신 체중 감소; 더 낮은 체지방량, 선택적으로 적어도 약 100% 더 낮은 체지방량; 및/또는 방법이 NASH를 치료하기 위해 투여될 때 전신 체중 감소의 증가, 간 중량의 감소, NAS 점수의 개선, 간지방증의 개선, 팽창의 개선, col1A1 염색의 개선, ALT의 개선, 간 TG/TC의 개선, 및 혈장 TG/TC의 개선을 유도하고/하거나; e) 대략 등몰 투여량으로 투여된 세마글루타이드와 비교하여, 투여 제제의 투여 후 대략 14일까지 더 큰 체중 감소, 선택적으로 약 15% 더 큰 체중 감소; 투여 제제의 투여 후 대략 20-28일까지 더 큰 체중 감소, 선택적으로 약 25% 더 큰 체중 감소를 유도하고/하거나; f) 포유동물의 체중을 군살이 없는 정상 포유동물의 정상 체중 범위로 회복하기에 충분한 비만 동물의 체중 감소를 유도한다. 바람직한 실시양태에서, 방법은 체중 감소를 유도하기 위한 것이다.
일부 실시양태에서, 본 명세서에서 개시되는 방법은 치료 개시 단계를 포함하지 않는다. 즉, 처음 투여된 용량은 유해한 위장관 부작용을 피하기 위해 적정할 필요 없이 치료에 효과적이다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 방법은 서열 번호 1과 같은 본 개시내용의 펩타이드의 제1의 1회 이상의 용량(치료 개시 단계)을 투여한 후, 제2의 1회 이상의 더 많은 용량의 펩타이드를 투여하는 것을 포함할 수 있고, 제1 및 제2 용량의 각각 1주 이상의 기간 동안 투여된다. 일부 실시양태에서, 제1 용량(들) 및 제2 용량(들) 다음에, 제2 용량(들)보다 많을 수 있는 하나 이상의 제3 용량이 뒤따를 수 있다. 제1 용량, 제2 용량 및 제3 용량의 전환은 매주 수행할 수 있다. 예를 들어, 제1 용량이 1주 이상의 기간 후에도 낮은 혈당 및/또는 체중 감소를 유발하지 않은 것으로 나타나면, 제2의 더 많은 용량을 1주 이상의 기간 동안 투여한 후, 제2 용량(들)의 효과를 분석할 수 있다. 유익한 효과가 관찰되면(예를 들어, 혈당 및/또는 체중 감소), 제2 용량을 계속 투여할 수 있다. 유익한 효과가 관찰되지 않으면, 제3 용량을 1주 이상의 기간 동안 투여한 후, 유익한 효과를 결정할 수 있다. 이 투여 및 분석 주기는 각각의 투여에서 부작용이 관찰되지 않는 한, 적절하게 반복할 수 있다. 일부 실시양태에서, 혈당 조절(예를 들어, 혈당 감소)이 제1의 1회 이상의 용량을 투여한 지 약 4주 후에 달성되지 않았기 때문에, 후속적으로 제2의 1회 이상의 보다 많은 용량의 펩타이드가 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 치료 효과(예를 들어, 혈당 감소 및/또는 체중 감소)를 생성하려는 의도 없이 제1의 1회 이상의 용량을 투여할 수 있다. 그러나, 일부 실시양태에서, 방법은 치료 개시 단계를 포함하지 않고 수행될 수 있다.
일부 실시양태에서, 방법은 인간의 혈당 조절 및/또는 체중 감소를 위한 바람직한 1차 요법일 수 있으며, 이는 이것이 인간의 혈당 조절 및/또는 체중 감소 유도를 목적으로 환자에게 투여되는 유일한 제1 활성제임을 의미한다. 일부 실시양태에서, 본원에서 개시되는 방법은 보조 식이요법 및/또는 운동 치료를 포함할 수 있다. 이러한 실시양태에서, 인간은 약제학적 투여량을 투여받을 수 있고, 약제학적 투여량의 유익한 효과를 향상시킬 수 있는 식이 및/또는 운동에 관한 지시사항을 제공받을 수 있다. 일부 실시양태에서, 약제학적 투여량이 투여되는 인간은 제2형 당뇨병을 갖는다. 일부 실시양태에서, 인간은 제2형 당뇨병을 동반하거나 동반하지 않는 확립된 심혈관 질환을 나타낼 수 있다.
일부 실시양태에서, 약제학적 투여량은 대략 매주 투여된다. 일부 실시양태에서, 약제학적 투여량은 약 2주 내지 약 8주 또는 그 이상 동안 대략 매주 인간에게 투여된다. 일부 실시양태에서, 대략 등몰 투여량의 세마글루타이드의 투여와 비교하여 약 4 내지 약 8주 동안, 선택적으로 약 6주 동안 매주 투여량으로서 인간에게 투여된 약제학적 투여량은 인간에게 투여한 지 약 1주, 약 2주, 약 3주, 약 4주, 약 5주, 약 6주 또는 약 7주 후에 더 큰 전신 체중 감소를 유도한다. 일부 실시양태에서, 약제학적 투여량은 약 제1일, 8일, 15일, 22일, 29일 및 36일에 투여된다. 일부 실시양태에서, 방법은 인간에게 단일 용량을 투여하는 것을 포함할 수 있고, 대략 등몰 투여량의 세마글루타이드의 투여와 비교하여 투여한 지 약 1일, 약 2일, 약 3일, 약 4일, 약 5일, 약 6일 또는 약 7일 후에 더 낮은 혈당을 유도한다. 일부 실시양태에서, 방법은 약 4주 내지 약 8주 동안, 선택적으로 약 6주 동안 매주 투여량을 인간에게 투여하는 것을 포함할 수 있고, 대략 등몰 투여량의 세마글루타이드의 투여와 비교하여 투여한 지 약 1주, 약 2주, 약 3주, 약 4주, 약 5주, 약 6주 또는 약 7주 후에 더 큰 전신 체중 감소를 유도한다. 일부 실시양태에서, 방법은 단일 투여량을 인간에게 투여하는 것을 포함할 수 있고, 대략 등몰 투여량의 세마글루타이드의 투여와 비교하여 투여한 지 약 1일, 약 2일, 약 3일, 약 4일, 약 5일, 약 6일 또는 약 7일 후에 더 낮은 Cmax를 나타낸다. 일부 실시양태에서, 방법은 성인 인간에게 약 0.5 mg/용량, 약 1.0 mg/용량, 약 1.5 mg/용량, 약 2.0 mg/용량, 약 2.5 mg/용량, 약 3.0 mg/용량, 약 3.5 mg/용량, 약 4.0 mg/용량, 약 4.5 mg/용량, 약 5.0 mg/용량, 또는 약 5.5 mg/용량으로 약제학적 투여량을 투여하는 것을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 약제학적 투여량은 선택적으로 적어도 1개월 동안 대략 1주에 1회 또는 2주에 1회 투여될 수 있고; 여기서 선택적으로 각각의 용량은 대략 동일한 양의 작용제 펩타이드 생성물을 포함한다. 일부 실시양태에서, 약제학적 투여량은 피하로 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 용량 중 하나 이상은 제1 경로(예를 들어, 피하) 및 후속적으로 상이한 경로(예를 들어, 경구)에 의해 투여된다. 일부 실시양태에서, 치료 용량에 도달하는 시간은 약 4주 이하이다. 일부 실시양태에서, 약제학적 투여 제제의 투여는 약 400 내지 약 1300 ng/ml의 Cmax; 약 10 내지 약 36시간의 Tmax; 및/또는 약 15,000 내지 45,000 h*ng/mL의 AUC0-48을 나타낸다. 바람직한 실시양태에서, 인간의 체중 감소는 적어도 5%, 적어도 10%; 또는 약 1% 내지 약 20%; 또는 약 5% 내지 약 10%(w/w)이다. 일부 실시양태에서, 약 1.8 mg의 서열 번호 1을 포함하는 약제학적 투여 제제의 투여는 적어도 6주 동안 주당 1회 투여(바람직하게는 피하)되어, 제제가 투여된 집단에서 약 3-5%, 바람직하게는 약 5% 초과의 전신 체중 감소("평균 체중 감소"), 및/또는 약 6%, 바람직하게는 약 6.3%의 위약으로부터의 순 변화를 유도한다. 일부 실시양태에서, 약 1.2 mg의 서열 번호 1을 포함하는 약제학적 투여 제제의 투여는 적어도 6주 동안 주당 1회 투여(바람직하게는 피하)되어, 제제가 투여된 집단에서 약 2, 바람직하게는 약 1.8%의 전신 체중 감소("평균 체중 감소"), 및/또는 약 3%, 바람직하게는 약 2.7%의 위약으로부터의 순 변화를 유발한다. 또한, 본 개시내용은 바람직한 실시양태인 표 7(체중 감소) 및/또는 표 8(부작용)에 나타낸 추가의 결과를 제공한다. 일부 실시양태에서, 포유동물에 대한 그의 투여는 인간을 군살이 없는 정상 인간의 정상 체중 범위로 회복하기에 충분한 체중 감소를 비만 포유물에서 유도한다. 일부 실시양태에서, 약제학적 투여 형태는 폴리소르베이트 20, 아르기닌 또는 만니톨 중 하나 이상을 포함하는 수성 제제이다.
관련 기술 분야의 통상의 기술자에 의해 이해되는 바와 같이 본 개시내용의 다른 측면이 또한 고려된다.
달리 정의되거나 본 명세서의 사용에 의해 달리 명확하게 표시되지 않는 한, 본 명세서에 사용된 모든 기술 및 과학 용어는 본 출원이 속하는 기술 분야의 통상의 기술자가 일반적으로 이해하는 것과 동일한 의미를 갖다. 명세서 및 첨부된 청구범위에서 사용되는 바와 같이, 단어 "a" 또는 "an"은 하나 이상을 의미한다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "또 다른"이라는 단어는 제2의 대상 또는 그 후의 추가의 대상을 의미한다. 약어 "aka"는 ~로도 알려진 것을 의미한다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "예시적인"이라는 용어는 "예, 실례 또는 예시로서의 역할을 하는 것"을 의미한다. 본 명세서에서 "예시적인" 것으로 특징지어지는 임의의 실시양태 또는 특징은 반드시 다른 실시양태 또는 특징보다 바람직하거나 유리한 것으로 해석되어서는 안 된다. 일부 실시양태에서, 용어 "약" 또는 "대략"은 지정된 값의 ± 10% 또는 5% 이내를 의미한다. "약" 또는 "대략"이라는 용어가 2개 이상의 일련의 수치값 또는 2개 이상의 일련의 수치값 범위에서 첫 번째 수치 앞에 올 때마다, "약" 또는 "대략"이라는 용어는 해당 일련의 수치값 또는 일련의 수치값 범위에 있는 각각의 수치값에 적용된다. 범위는 본 명세서에서 약 하나의 특정 값으로부터 및/또는 약 또 다른 특정 값으로 표현될 수 있다. 그러한 범위가 표현될 때, 또 다른 측면은 하나의 특정 값으로부터 및/또는 다른 특정 값까지를 포함한다. 이와 유사하게, 값이 근사치로 표현될 때, 앞에 제시되는 약 또는 대략의 사용은 특정 값이 또 다른 측면을 형성한다는 것이 이해될 것이다. 각각의 범위의 종료점은 다른 종료점과 관련하여 및 다른 종료점과는 독립적으로 중요하다는 것을 추가로 이해할 것이다. 범위(예를 들어, 90-100%)는 마치 각각의 값이 개별적으로 나열된 것처럼 범위 내의 각각의 독립 값뿐만 아니라 범위 그 자체를 포함하는 것을 의미한다. 선택적인 또는 선택적으로는 이후에 설명되는 사건 또는 상황이 발생할 수 있거나 발생할 수 없으며, 설명이 사건 또는 상황이 발생하는 경우와 발생하지 않는 경우를 포함함을 의미한다. 본 명세서에서 언급되는 모든 간행물, 특허 및 특허 출원은 마치 각각의 개별 간행물, 특허 또는 특허 출원이 구체적이고 개별적으로 참고로 포함되는 것으로 표시된 것과 동일한 정도로 그 전체가 본 명세서에 참고로 포함된다.
특정 실시양태는 다음 실시예에서 추가로 설명된다. 이들 실시양태는 단지 예로서 제공되며, 어떠한 방식으로든 청구범위를 제한하는 것을 의도하지 않는다.
실시예
실시예 1. 펩타이드 합성
전형적인 N-알파-Fmoc 기반 펩타이드 합성에 성공적으로 사용될 수 있는 많은 표준 보호기 및 커플링제가 존재한다. 전형적인 예는 미국 특허 제9,856,306 B2호에 제시되어 있고, 이는 그 전체가 본 개시내용에 참고로 포함된다. 추가의 예는 많은 리뷰 및 프로토콜, 예를 들어 노바바이오켐(Novabiochem)에 의해 온라인으로 발행되고 일상적으로 업데이트되는 것들 및 보다 전문적인 리뷰(예를 들어, 문헌 [Behrendt, R., et al. (2015) J Peptide Sci 22: 4-27] 및 그 안의 참고문헌)에서 찾을 수 있다. 많은 계약 펩타이드 합성 회사에서 사용하는 전형적인 상업적 프로토콜이 본 실시예에서 합성에 사용되었다. 보다 전문적인 프로토콜은 아래에 나와 있다.
C-말단 아미드 유사체의 제조 - 서열 번호 1
Boc-His(Trt)-Aib-Gln(Trt)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(tBu)-Tyr(tBu)-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Tyr(tBu)-Leu-Asp(tBu)-Glu*-Lys(ivDDE)-Ala-Ala-Lys*-Glu(tBu) Phe-Ile-Gln(Trt)-Trp(Boc)-Leu-Leu-Gln(Trt)-Thr(tBu)-Rink 아미드 수지(서열 번호 1)의 샘플은 표준 커플링 프로토콜, 예를 들어 디이소프로필카르보디이미드(DIC)/하이드록시벤즈트리아졸(HBT) 커플링을 사용하여 N-알파-Fmoc 보호된 아미노산을 순차적으로 첨가한 후, 피페라진을 사용한 표준 탈보호, 다음 단계 커플링 등을 수행하여 제조하였다(Glu* 및 Lys*는 Pd(PPh3)4/1,3-디메틸바르비투르산 촉매를 사용한 알릴 기반 측쇄 보호의 탈보호, NMP 중의 DIPEA 및 0.5% 나트륨 디에틸디티오카르바메이트 삼수화물 및 DIPEA를 사용한 세척, 이어서 DIC/옥시마(Oxyma)와의 커플링을 통해 달성된 측쇄 사이클릭 락탐 연결을 나타낸다). DMF에서 2% 이상의 하이드라진 수화물과 함께 인큐베이션한 후, DMF/CH2Cl2로 세척하여 잔기 17에서 Lys-N-엡실론 위치의 ivDDE 기를 탈보호하고, Lys 측쇄는 DIC/HBt 또는 다른 커플링제의 사용을 통해 DMF/CH2Cl2 중의 tert-부틸 18-([베타-D-글루쿠론-1-일]옥시)옥타데카노에이트로 아실화되었다. 커플링의 완료는 닌히드린에 의해 확인되었고, 생성물은 CH2Cl2로 광범위하게 세척되었다 .
생성물 수지는 실온에서 240분 동안 절단 칵테일(94% TFA: 2% EDT; 2% H2O; 2% TIS)로 처리함으로써 최종 탈보호되고 수지로부터 절단되었다. 혼합물을 Et2O로 처리하여 생성물을 침전시키고, Et2O로 광범위하게 세척하여 진공 하에 건조시킨 후 미정제 표제 펩타이드 생성물을 수득하였다.
정제는 역상(C18) HPLC에 의해 배치에서 수행하였다. 미정제 펩타이드를 약 15 mL/분의 유속으로 4.1x25 cm HPLC 컬럼에 로딩하고(수성 트리플루오로아세트산 0.1% 중의 CH3CN 유기 개질제, 완충제 A; 0.1% TFA를 함유한 CH3CN, 완충제 B), 40-70% 완충제 B로부터의 구배로 용출하였다. 생성물 분획을 동결건조하여 분석용 HPLC(10.5분; 0.1% TFA 중D 40-70% CH3CN)/질량 분석법(M+1 피크 = 1937.44; 측정된 분자량 3872.88)에 의해 94% 초과의 순도를 갖는 표제 생성물 펩타이드(서열 번호 1)를 산생성하였다. 유사한 방식으로, 실시예에 나타낸 바와 같이 제조된 글루쿠론산 또는 멜리비오우론산을 사용하여 본 발명의 다른 유사체를 제조하였다.
분석 데이터는 표 A에 제시되어 있다:
화합물은 순도 데이터 및 식별 데이터(분자 이온 검출)를 제공하기 위해 HPLC/MS로 분석된다. HPLC 기술은 나열된 입자 크기의 나열된 물질로 채워진 분석 컬럼을 활용하며, 데이터는 시스템 구성 및 불용 부피(dead volume)와 크게 독립적이지만 구배 및 충전 재료에 의존할 것으로 예상되는 k' 값(k'=(Tr-T0)/T0)으로 여기에서 보고된다. 모든 화합물은 순도가 약 95%인 것으로 보고되었다.
표제 화합물의 상응하는 1-메틸 및 1-옥틸 유사체는 시약 1'-메틸 β-D-글루쿠론산 및 1'-옥틸 β-D-글루쿠론산(Carbosynth)을 사용하는 것을 제외하고는 유사한 방식으로 제조된다. 상응하는 1-데실, 1-도데실, 1-테트라데실, 1-헥사데실, 1-옥타데실 및 1-에이코실 및 더 고등급의 유사체는 상기 기재된 바와 같이 제조된 상응하는 모노사카라이드 및 디사카라이드 우론산을 사용하여 제조된다. 대안적으로, 1-알킬 글루쿠로닐 또는 다른 우론산 아실화된 유사체는 탈보호되거나 부분적으로 탈보호된 펩타이드의 초기 정제, 이어서 우론산 시약에 의한 아실화에 의해 제조될 수 있다. 대안적으로, 1-알킬 글루쿠로닐, 또는 다른 우론산 아실화 유사체는 재조합 방식으로 제조된 펩타이드의 초기 정제, 이어서 원하는 우론산 시약에 의한 측쇄 아미노 관능기의 선택적인 아실화에 의해 제조될 수 있다
A. 1-알킬 β-d-글루쿠론산. 일반적인 산화 방법.
20 mL의 아세토니트릴 및 20 mL의 탈이온수 중의 1-도데실 β-d-글루코피라노사이드[2.0 g, 5.74 mmol]의 용액에 (디아세톡시요오도)벤젠[4.4 g, 13.7 mmol] 및 TEMPO[0.18 g, 1.15 mmol]를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 반응이 완료될 때까지(20시간까지) 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고, 동결건조하여 미정제 생성물을 펩타이드 Lys 측쇄에 커플링하는데 직접 사용하기에 충분한 순도의 백색 분말로서 수득하였다(1.52 g, 73%). 유사한 방식으로, 본원에서 설명되는 다른 펩타이드 생성물을 아실화하는데 사용되는 다른 1-알킬 β-d-글루쿠론산 또는 멜리비오우론산을 제조하였다. 상응하는 1-치환 글루코사이드 또는 멜리보사이드는 이들 실시예의 절차를 사용하여 제조되었으나, 예를 들어 옥타데칸디오산 대신에 헥사데칸디오산, 도데칸디오산 등과 같이 실시예의 합성 절차에서 원하는 사슬 길이를 얻기 위해 적절한 사슬 길이의 디카르복실 출발 물질을 사용하여 제조되었다.
B. 18-(tert-부톡시)-18-옥소옥타데칸산
톨루엔(500 ml) 중의 옥타데칸디오산(40 g, 127 mmol)의 현탁액을 질소 하에 95℃에서 가열하였다. 생성된 용액에 N,N-디메틸포름아미드 디-tert-부틸아세탈(98 g, 434 mmol)을 3-4시간에 걸쳐 적가하였다. 반응물을 동일한 온도에서 밤새 교반하고, 진공에서 농축 건조시키고, 고진공 하에 밤새 두었다. 생성된 고체를 열 및 초음파 처리로 CH2Cl2(200 ml)에 현탁시키고, 실온에서 여과하고, CH2Cl2로 세척하였다. 여액(2)을 농축하여 생성물을 고체(45 g, 86%)로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.
C. tert-부틸 18-하이드록시옥타데카노에이트
THF 중의 18-(tert-부톡시)-18-옥소옥타데칸산(45 g, 121 mmol)의 용액을 빙조에서 질소 하에서 냉각하고, 보란 디메틸설파이드 착물(16 ml, 158 mmol)을 적가하여 처리하였다. 처음 몇 밀리리터의 첨가 시에 격렬한 가스 방출이 발생하였다. 첨가 후, 혼합물을 천천히 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 반응물을 빙조 상에서 냉각시키고, 포화 탄산나트륨 용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 포화 탄산나트륨 용액으로 세척하였다. 유기층을 진공에서 농축하고, 밤새 고진공하에 두었다. 잔류물을 따뜻한 톨루엔(200 ml)에 용해시키고, 실온에서 몇 시간 동안 방치하였다. 침전된 디올을 셀라이트를 통한 여과에 의해 제거하고, 케이크를 톨루엔으로 세척하였다. 톨루엔 용액을 실리카겔 컬럼에 직접 적용한 후, 10% 에틸 아세테이트/헥산, 20% 에틸 아세테이트/헥산, 30% 에틸 아세테이트/헥산으로 용출하고, 농축하여 생성물(24 g, 51%)을 가만히 두면 고형화되는 오일로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, d4-MeOH): δ = 3.64 (m, 2H), 2.21 (t, 2H, J = 9), 1.44 (s, 9H) 1.50-1.62 (m, 4H), 1.20-1.40 (m, 27H).
D. tert-부틸 18-([1-베타-D-포도당-1-일]옥시)옥타데카노에이트
tert-부틸 18-하이드록시옥타데카노에이트(46 g, 129 mmol)를 톨루엔(400 ml)에 용해시키고, 진공에서 약 250 ml로 농축하고, 질소 하에 실온이 되게 하였다. 이 용액에 HgO(노란색)(22.3 g, 103 mmol), HgBr2 (37g, 103 mmol) 및 아세토브롬 포도당을 격렬하게 교반하면서 첨가하였다. 알코올이 소비될 때까지 밤새 교반을 계속하고, 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하였다. 여액을 구리(II) 트리플레이트(1 g)로 처리하고, 오르토에스테르(TLC에서 생성물 위의 반점)가 분해될 때까지 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응물을 물로 세척하고, 유기층을 진공에서 농축하였다. 잔류물을 메탄올(500 ml)에 용해시키고, 0.5 ml 분량의 나트륨 메톡사이드(메탄올 중의 5.4 M)로 처리하여 pH를 9로 만들었다(pH 종이에 직접 스포팅). 0.5시간마다 pH를 확인하고, pH를 9로 유지하기 위해 필요에 따라 더 많은 메톡사이드 나트륨을 첨가하였다. 반응은 4시간 만에 완료되었다. 아세트산을 적가하여 pH를 7로 만들고, 혼합물을 진공에서 농축하였다. 잔류물을 실리카겔에 로딩하고, 5% 메탄올/CH2Cl2, 이어서 10% 메탄올/CH2Cl2로 용리하는 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제하여 생성물을 백색 고체(55 g, 82%)로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, d4-MeOH): δ = 4.30 (d, 1H, J = 7.6), 3.84 (m, 1H), 3.77 (d, 1H, J = 9.6), 3.45-3.60 (m, 2H), 3.36 (t, 1H, J = 9.2), 3.21 (t, 1H, J = 8.4), 2.20 (t, 2H, J = 7.2), 1.50-1.67 (m, 4H), 1.43 (s, 9H), 1.43-1.33 (m, 2H), 1.28 (br s, 24H).
E. tert-부틸 18-([베타-D-글루쿠론-1-일]옥시)옥타데카노에이트
tert-부틸 18-([1-베타-D-포도당-1-일]옥시)옥타데카노에이트(50 g, 96 mmol)를 기계식 교반을 수행하면서 2000 ml의 3구 플라스크 중의 디옥산(800 ml)에 용해시키고, 10℃로 냉각하였다. 이 용액에 2,2,6,6-테트라메틸-1-피페리디닐옥시(TEMPO)(150 mg, 0.96 mmol) 및 KBr(1.14 g, 9.6 mmol)을 첨가하였다. 포화 Na2CO3 용액(300 ml) 및 13% NaOCl 용액(120 ml)이 담긴 적하 깔대기를 플라스크에 고정하였다. 카르보네이트 용액은 빠른 적가로 시작되었고, NaOCl은 느린 속도(약 1방울/초)로 첨가되었다. 100 ml의 카르보네이트를 첨가한 후, pH를 확인하고, 필요에 따라 약 pH 10을 유지하기 위해 더 첨가하였다. 온도는 전체적으로 10℃ 내지 15℃로 유지하였다. 3시간 후, 출발 물질이 남아 있으므로, 더 많은 NaOCl(10 ml)을 빠르게 첨가하였다. 0.5시간 후, 반응을 메탄올(10 ml)로 켄칭하였다. 혼합물을 4000 ml 에를렌마이어 플라스크에 붓고, 빙조에 담그고, 6 N HCl을 사용하여 pH 3으로 조정하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 1 N HCl로 세척하고, 증류수로 2회 세척하여 최종 세척 시에 층이 분리되도록 하였다. 유기층을 진공에서 농축하여 생성물을 백색 발포체(38 g, 74%)로서 수득하였다.
아노머 CH에 대한 2,3,4,5-테트라클로로니트로벤젠(TCNB) 내부 표준을 사용한 정량적 1H NMR(500 MHz, d4-MeOH)은 예상 중량의 94.8%를 제공한다. TLC에 의한 순도 >95%(20% MeOH/DCM/2 방울 HOAc, 20% H2SO4/EtOH + 열을 사용한 염색). 1H NMR (500 MHz, d4-MeOH): δ = 4.30 (d, 1H, J = 9.5), 3.85 (m, 1H), 3.77 (d, 1H, J = 7.5), 3.48-3.56 (m, 2H), 3.37 (t, 1H, J = 11.5), 3.21 (t, 1H, J = 9.5), 2.20 (t, 2H, J = 9.5), 1.52-1.66 (m, 4H), 1.44 (s, 9H), 1.34-1.42 (br, 2H), 1.28 (s, 25H).
실시예 2. 이중 작용제 펩타이드 - 시험관내 검정
세포 검정은 cAMP 자극 또는 어레스틴 활성화의 판독을 사용하는 표준 세포 검정(DiscoveRx, LeadHunter 검정)을 사용하여 수행되었다. 화합물은 약 1 mg의 양으로 정확하게 칭량되었고, 희석 및 검정을 위해 DiscoverX(미국 캘리포니아주 프레몬트 소재)로 배송되었다. 사용된 검정은 세포 검정에서 글루카곤(인간, CHO 세포 내로 클로닝됨) 및 GLP-1(인간, CHO 세포 내로 클로닝됨) 수용체에 대한 것이었다. 검정은 0.1% 오발부민의 존재 하에 수행되었다. 역사적으로 이러한 검정은 0.1% BSA의 존재 하에 수행되었지만, 혈청 알부민에 매우 강력하게 결합하는 이러한 화합물(>99%)의 경우 결과가 왜곡되어 화합물이 훨씬 덜 강력해 보일 수 있다. 0.1% 오발부민을 사용하면, 이 문제를 피할 수 있다. 오발부민을 사용할 때 관찰되는 개선은 펩타이드에 대한 혈청 알부민 결합의 상대적 단단함의 지표로 볼 수 있다.
EU-A1588 = 서열 번호 2; EU-A1871 = 서열 번호: 3; EU-A1872 = 서열 번호 4; EU-A1873 = 서열 번호: 1; 세마글루타이드 = 서열 번호 11.
검정은 0.1% 오발부민의 존재 하에 수행되었다. 역사적으로 이러한 검정은 0.1% BSA의 존재 하에 수행되었지만, 혈청 알부민에 매우 강력하게 결합하는 이러한 화합물(>99%)의 경우 결과가 왜곡되어 화합물이 훨씬 덜 강력해 보일 수 있다. 0.1% 오발부민을 사용하면, 이 문제를 피할 수 있다. 오발부민을 사용할 때 관찰되는 개선은 펩타이드에 대한 혈청 알부민 결합의 상대적 단단함의 지표로 볼 수 있다(아래 표 참조).
여기에서, 매우 강력한 혈청 알부민 결합제(CO2H 함유 치환체를 가짐, 지방산 헤드 기를 모방함)는 BSA를 지방산 모방체에 평가 가능하게 결합하지 않는 오발부민으로 대체할 때 상당한 개선 배수를 나타냄을 알 수 있다. 개선 배수의 정도는 BSA 상의 지방산 결합 부위에 대한 결합의 견고성에 대한 판독값을 제공할 수 있다. 따라서, 세마글루타이드는 12배(단단한 결합) 개선시키는 반면, EU-A1873은 30배 내지 40배 개선시키고, 이는 실질적으로 증가된 혈청 알부민 결합을 의미한다. 이러한 정도의 혈청 알부민 결합은 서열 번호 1에 대한 생물학적 검정에서 볼 수 있는 바와 같이 억제된 Cmax 및 연장된 작용 지속 시간을 유도할 것으로 예상될 수 있다.
상기 표 5 및 6에 제시된 데이터는 시험된 화합물이 GLP-1에 대해 편향된 높은 친화도를 나타내는 세마글루타이드와 달리, GLP-1R 및 GCGR 둘 모두의 작용제("이중 작용제")임을 입증한다. 또한, 이 데이터는 서열 번호 1이 GLP-1R 및 GCGR에 대해 거의 동등한 친화도를 갖는 이중 작용제 펩타이드임을 보여준다.
실시예 3. 건강한 과체중 및 비만 대상체에서 ALT-801의 단일 및 반복 SC 투여의 안전성 및 내약성을 결정하고 PK-PD 관계를 기초로 한 유효 용량 범위를 특성화하기 위한 임상 시험
이 연구는 건강한 과체중 및 비만 대상체(BMI 25.0 - 40.0 kg/m2)에서 ALT-801의 단일 및 반복 SC 투여의 안전성 및 내약성을 평가하고 약동학-약력학(PK-PD) 관계를 기초로 한 유효 용량 범위를 특성화하기 위해 설계되었다. 과체중 및 비만인 건강한 지원자는 이들 대상체의 PK가 정상 체중인 개체의 PK와 상이할 수 있으므로 연구된다. 또한, 이들 대상체는 체중 감소의 예측된 PD 효과를 더 잘 견딜 수 있으며, 심지어 치료의 혜택을 받을 수도 있다. 임신 가능성을 최소화하기 위해 적절한 피임 조치가 취해졌으며, 대상체를 GLP-1 또는 글루카곤 유사체로 치료할 위험이 있도록 만드는 기존의 병태를 배제하기 위한 예방 조치가 취해졌다. 포도당 항상성에 대한 ALT-801의 효과가 비당뇨병 집단에서 더 잘 특성화될 때까지 당뇨병 대상체는 제외되었다. 과체중 및 비만 대상체는 다양한 수준의 인슐린 저항성을 가질 것으로 예상되므로, 이러한 연구에서 관찰한 결과는 이 클래스의 다른 화합물에서 얻은 데이터와 함께 당뇨병 대상체를 연구할 때 관찰되는 효과를 예측할 수 있어야 한다. ALT-801이 안전성, PK 또는 PD에 미치는 영향의 정확한 평가에 영향을 미칠 수 있는 제외 사항이 확립되었다. 본 연구에 사용된 BMI 범위가 PK 및 PD 파라미터에 미치는 영향을 평가하기 위한 분석을 수행한다. 이 연구는 ALT-801이 체중에 미치는 영향을 제시함으로써 이를 비만에 대한 1차 치료제로 사용하기 위한 기초를 제공한다.
연구의 1차 목적은 부작용(AE), 활력 징후, 임상적 안전성 실험, 소변 검사, 신체 검사 및 주사 부위 반응; 포도당 항상성; 혈압; 심전도(ECK), 홀터(Holter) 모니터링 등을 평가함으로써 단일 및 다중 상승 피하(SC) 용량 투여 후의 건강한 과체중 및 비만 대상체에서 ALT-801의 안전성 및 내약성을 평가하는 것이다. 연구의 2차 목적은 다음을 평가하는 것이다: 1) 단일 및 다중 상승 SC 용량 투여 후 ALT-801의 PK; 및 2) 단일 및 다중 용량 투여 후 ALT-801의 PD 효과. 연구의 탐색적 목적은 다음의 평가를 포함한다: 1) 다중 용량 투여 후 ALT-801의 확장된 PD 효과; 및 2) 심박수 보정 QT 간격(QTc) 연장에 대한 ALT-801의 효과. MRI-PDFF에 의한 간 지방 함량, 체중, 전신 MRI에 의한 체성분, 인슐린 저항성, 전신 염증, 및 GLP-1 및 글루카곤 표적 결합을 포함한 연구 평가는 체중 감소 및 체성분 변화를 포함하는 ALT-801의 예상되는 PD 특성을 기반으로 한다. 포도당 항상성의 측정은 포도당 조절에 대한 GLP-1 및 글루카곤 유사체의 잠재적 효과를 기반으로 한다. 보행 혈압 모니터링(ABPM) 및 홀터 모니터링은 GLP-1 및 글루카곤 작용제가 혈압 및 심박수의 임상적으로 유의하지 않은 변화와 연관되어 있기 때문에 포함되었다. QT 간격 연장에 대한 ALT-801의 임의의 잠재적 영향에 대한 정보를 제공하기 위해 홀터 모니터링도 포함되었다. GLP-1 및 GLP-1/글루카곤 이중 작용제에 대한 약리학 및 안전성 경험에 기초하여, 메스꺼움 및 구토를 포함하는 GI AE의 용량 관련 발생이 관찰될 수 있다. 고혈당증 및 저혈당증의 발생률 및 중증도를 포함하여 포도당 항상성이 평가될 것이다. 체중 감소는 상기 화합물의 원하는 특성이므로, 안전성보다는 효능에 대해 모니터링된다. 그러나, 체중 감소가 과도하다고 판단되는 경우에는 후속 코호트에서 용량을 조정할 수 있다. 체중 감소 수준이 안전하지 않거나 과도한 것으로 간주되는 경우, 개별 대상체에서 연구 약물 투여를 일시 중지하거나 중단할 수 있다. 또한, 대상체는 약물 유발 간 손상에 대해 모니터링될 것이다. 혈액 샘플은 별도의 동의서를 제공하는 대상체에서 바이오뱅킹(biobanking)을 위해 연구 약물의 투여 전 및 최종 투여 후에 수집된다. 이들 샘플은 잠재적인 유전자 분석을 포함하는 NASH 및 관련 질환의 바이오마커를 발견 및/또는 검증하기 위해 사용된다.
여기서 설명되는 이 연구는 건강한 과체중 및 비만 대상체에서 ALT-801의 단일 상승 용량(SAD) 및 다중 상승 용량(MAD)의 최초 인간 대상(FIH: first-in-human)의 1상, 무작위 배정, 이중 맹검, 위약 대조, 2 파트 연구이다. 과체중 내지 비만 대상체(체질량 지수[BMI] 25.0-40.0 kg/m2)가 등록될 것이다. 파트 1에서는, 단일 상승 용량(SAD) 단계에서, 대상체가 최대 28일의 스크리닝 기간을 거친다. 포함 기준을 충족하고 제외 기준을 충족하지 않는 과체중 내지 비만 대상체는 ALT-801을 투여할 대상체 6명 및 위약을 투여할 대상체 2명으로 이루어지는 8명의 대상체의 코호트에서 3:1의 비율로 무작위 배정된다. 연구 약물(SC 투여를 위한 ALT-801로 제제화된 서열 번호 1)은 모든 SAD 코호트에서 복부 부위에 피하(SC) 투여된다. 대상체는 연구 약물 투여 약 1일 전(제-1일)에 연구 유닛에 입원하고, 제8일에 퇴원할 것이다. 대상체는 제1일에 ALT-801 또는 위약의 1 SC 투여량을 투여받을 것이다. 6개의 코호트가 계획되어 있고, 파트 1에 대한 2개의 추가의 선택적 코호트가 존재한다. 다음 용량 수준이 계획되어 있다: 60 kg의 인간을 기준으로 주 1회(QW) 투여되는 매주 용량으로서 0.4, 1.2, 2.4, 4.8, 7.2 및 9.4 mg. 이러한 용량은 임상 관찰 또는 가능한 경우 PK 데이터를 기반으로 수정될 수 있다. 각각의 SAD 코호트의 처음 2명의 대상체(ALT-801 1명 및 위약 1명)는 나머지 대상체보다 적어도 48시간 전에 센티넬(sentinel) 방식으로 투여된다. 대상체는 제-1일부터 제5일까지의 평가 전 및 제8일의 평가 전에 적어도 10시간 동안 밤새 단식하고, 식사는 표준화될 것이다. 대상체는 ECG, CGM 및 ABPM을 포함하여 안전성을 평가하기 위한 연구 평가를 받고, 아래에 설명되는 평가 일정에서 설명되는 바와 같이 PK를 위해 혈액 샘플을 수집할 것이다. 연구 유닛에서 퇴원한 후, 대상체는 제26일까지 3일마다 PK 및 안전성 평가를 위해 외래 방문을 위해, 및 투여 과정에서 결정된 바와 같이 제35일 또는 적어도 5회의 반감기에 후속 방문을 위해 돌아올 것이다. 약리학적 모델링을 기반으로 하여 예측된 유효 용량 및 노출이 달성되지 않고/않거나 6개의 계획된 코호트를 완료한 후 단일 용량에 대한 최대 내약 용량(MTD)이 확인되지 않는 경우, 최대 2개의 추가의 단일 용량 코호트가 파트 1에 등록된다. 다중 상승 용량(MAD) 단계인 파트 2는 SAD 코호트 3의 제8일이 완료되고 해당 코호트의 안전성이 평가되면 시작된다. 파트 2의 시작 용량은 일반적으로 SAD 코호트 3 용량의 절반이다.
정보에 기초한 동의서를 제공한 후, 과체중 내지 비만인 대상체는 최대 28일의 스크리닝 기간을 거친다. 대상체는 스크리닝 동안 정상적인 식단 및 활동을 유지하고 연구에 참여하는 동안 언제든지 새로운 식단, 보충제 또는 운동 프로그램을 시작하지 않도록 지시받는다. 대상체는 연구 약물 투여 약 4일 전(제-4일)에 연구 유닛에 들어가 식단 및 운동 적응 기간 동안 연구 유닛에 들어가고, 그 동안 표준화된 식사를 받게 될 것이다. 체중, 키, 연령 및 성별에 따른 대상체 간 차이를 설명하기 위해 예측 BMR x 1.5를 사용하여 개별화된 일일 칼로리와 함께 표준화된 식단이 제공된다. 또한, 연구 참가자의 활동 수준도 표준화된다. 포함 기준을 충족하고 제외 기준을 충족하지 않는 대상체는 6주 동안 ALT-801을 QW 투여할 대상체 10명 및 위약을 QW 투여할 대상체 2명으로 이루어지는 12명의 대상체의 코호트에서 5:1의 비율로 제-1일에 무작위 배정된다. 연구 약물은 모든 MAD 코호트에서 복부 부위에 피하(SC)로 투여된다.
대상체는 제1일에 연구 약물의 첫 번째 용량을 투여받고, 제8일에 두 번째 용량을 투여받을 때까지 연구 유닛에 남아 있는다. 그런 다음, 대상체는 1주 간격(제15일, 제22일 및 제29일)으로 3회의 외래 투여 방문을 위해 돌아오고, 제32일부터 제43일까지 재입원한다. 대상체는 제36일에 연구 약물의 마지막 용량을 투여받게 된다. 제43일에 퇴원한 후, 대상체는 제70일 또는 투여 후 5회의 반감기(둘 중 빠른 시기)에 후속 방문을 위해 돌아올 것이다. 대상체는 본원에서 설명되는 바와 같이 ALT-801의 안전성, PD 및 PK를 평가하기 위해 여러 연구 평가를 받는다. 안전성 평가에는 ECG, CGM 및 ABPM이 포함된다. PD 평가에는 신체 측정(anthropomorphic), 식이 평가, 이미징 및 바이오마커용 혈액 수집이 포함된다. 위장관 장애 증상 중증도 지수의 환자 평가(PAGI-SYM: Patient Assessment of Gastrointestinal Disorders Symptom Severity Index)는 위장관 증상에 대한 치료 효과를 평가하기 위해 시행된다. PK 및 면역원성을 위해 혈액 샘플을 수집한다. 대상체는 제-1일부터 제5일까지 및 제7, 8, 36, 37, 42 및 43일 이전에 적어도 10시간 동안 밤새 단식한다. 또한, 대상체는 제-1일, 7일, 42일에 혼합 식사 내성 시험을 위한 표준 아침 식사를 받게 된다.
MAD에 대한 용량은 임상 데이터 및 이용 가능한 경우 이전에 완료된 SAD 및 MAD 코호트로부터의 PK 데이터에 기초하여 선택될 것이다. 3개의 MAD 코호트는 필요한 경우 약리학적 모델링을 기반으로 예측된 효과적인 용량 및 노출을 달성하고, 이전에 연구된 용량 수준을 확장하고, 이 단계에 대한 MTD가 확인되지 않은 경우 용량 증량을 계속하거나 또는 약리학적 모델링을 기반으로 하여 최대 유효 용량에 도달하기 전에 GI 불내성이 관찰되는 경우 용량 적정 체계를 탐색하기 위해 최대 2개의 선택적인 추가의 코호트와 함께 계획된다.
파트 1의 최대 권장 시작 용량(MRSD)은 중추적인 우수 실험실 관리기준(Good Laboratory Practice) 독성 연구에서 동물(래트 및 원숭이)에서 결정된 NOAEL에서 인간 등가 용량(HED)의 10분의 1을 기준으로 한다. 쥐와 원숭이 둘 모두 ALT-801에 대해 유사한 임상 반응을 보이는 것으로 간주되었지만, NOAEL에서의 노출은 래트에서 약간 더 낮았으며, 따라서 보다 보수적인 인간 시작 용량을 사용하였다. 래트 NOAEL은 고용량인 0.45 mg/kg/wk이었으며, 이것은 체표면적 스케일링을 기초로 할 때 60 kg의 인간에서 0.44 mg/wk에 해당한다. 특히, 원숭이의 NOAEL은 0.25 mg/kg의 고용량이었고, 이것은 체표면적 스케일링을 기초로 할 때 60 kg의 인간에서 0.49 mg/wk에 해당한다. 안전을 위해 10배 스케일링 계수를 사용하여, 60 kg의 인간에 대해 0.40 mg/wk의 인간 시작 용량을 선택하였다. 또한, 최대 권장 시작 용량(MRSD)에서 외삽된 인체 노출은 특히 래트 NOAEL 노출과 대응한 원숭이 NOAEL 노출보다 훨씬 낮다. 가장 민감한 종은 아니지만 원숭이가 가장 임상적으로 관련된 독성(즉, 음식 섭취 감소 및 구토)과 생물학적으로 가장 관련이 있는 종이기 때문에, 이것은 특히 관련이 있다. 파트 1의 임상 관찰 및 PK는 궁극적으로 파트 2의 투여 고려 사항을 안내할 것이다.
래트 및 원숭이에서의 연구에서 ALT-801의 주요 발견은 체중 감소이었다(예를 들어, 실시예 4 참조). 매일 투여한 래트의 스케쥴을 주당 3일로 수정하면, ALT-801이 음식 소비와 체중 감소에 미치는 영향이 감소하여 내약성이 개선되었으며, 이는 작용 메커니즘과 일치하였다. GLP-1 및 글루카곤 작용제의 독성은 또한 인간 연구에서 잘 특성화되었다. 전임상 안전성 발견은 SAD 코호트 2에 대한 3배의 용량 증량을 지원한다. 후속 증량은 연구의 어느 파트에서도 2배를 초과하지 않을 것이다. 내약성을 개선하기 위해 필요한 경우 용량 적정 체계를 탐색할 수 있다. 이러한 예측에 대한 확신에 추가로, 인간의 용량-노출 관계는 여러 전임상 종(마우스, 래트, 미니 돼지, 원숭이)의 집단 PK 모델에 기초하여 선형인 것으로 예측된다. 모델은 연구가 진행되는 동안 인간 데이터로 업데이트된다. 인간에서 ALT-801의 예상 t1/2는 100시간 범위에 있으며, 이 가정은 파트 1부도 확인될 것이다. 주 1회(QW) 투여를 기준으로 하여, 정상 상태에서 반복 투여 시에 추정되는 축적은 2배를 초과하지 않는다. 다중 용량 노출이 단일 용량 노출 내에서 유지되도록 하기 위해, 파트 2의 시작 용량은 파트 1 코호트 3에 대한 용량의 절반으로 계획된다. 그러나, 후속 파트 2 코호트는 안전성 및 PK 데이터에 따라 조정될 수 있다. 각각의 연속 용량 수준으로 증량하기로 한 결정은 파트 1의 제8일(단일 투여 후 7일) 및 파트 2의 제15일(두 번째 투여 후 7일)의 안전성 및 내약성 평가를 기반으로 한다. 두 번째 주가 완료된 후 용량 증량에 대한 결정은 주로 메스꺼움 또는 구토로 예상되는 AE가 처음 투여 2주 동안 발생할 것이라는 초기 GLP-1 및 GLP-1/글루카곤 이중 작용제 연구의 관찰을 기반으로 한다. 또한, 예상은 투여 마지막 주의 Cmax 및 AUCtau가 이전에 완료되고 안전성이 평가된 SAD 코호트에서의 투여량의 Cmax 또는 AUCinf를 초과하지 않을 것이라는 것이다. 효과적인 투여량에서의 동물에서의 노출 및 인간 PK를 예측하기 위한 동물 PK 파라미터의 약리학적 모델링을 기반으로 하여, 성인 인간에서 ED80에서 ED90에 해당하는 최대 효능을 위한 목표 용량은 1 및 5 mg으로 추정되고, 목표 혈장 농도는 50 내지 100 ng/ml 사이이다. 따라서, 추정 시작 용량은 최저 예상 유효 용량보다 대략 2.5배 더 낮고, 비활성인 것으로 예상된다.
안전성을 최대화하기 위해, 단일 상승 용량(SAD) 및 다중 상승 용량(MAD) 증량은 래트의 NOAEL에서 노출을 초과하지 않도록 계획된다. 그러나, PD 및 내약성이 과체중 및 비만 대상체가 래트 NOAEL에서 노출을 초과할 것으로 예상되는 용량으로부터 이익을 얻을 것이라고 시사하는 경우, 뒷받침되는 안전성 및 효능 데이터가 IEC에 제시되고, SAD 및 MAD 증량을 계속하기 전에 동의를 얻는다.
최소 6명의 대상체가 파트 1에서 증량을 필요로 하고, 파트 2에서는 8명의 대상체가 증량을 필요로 하며, 각각의 코호트에서 적어도 1명의 대상체는 위약을 투여받는다. 관찰 결과 용량 증량이 MTD를 초과한다고 시사하는 경우, 이전 치료 코호트에서 관찰된 안전성 및 내약성 데이터의 평가를 기반으로 하여 제안된 다음 용량 수준을 하향 조정할 수 있다. 투여는 연구의 각각의 파트에 대해 별도로 결정되는, MTD가 확인될 때까지 진행될 수 있다. 사용 가능한 PK 데이터는 결정을 안내하는 데 사용될 수 있으며, 노출이 래트의 NOAEL을 초과할 것으로 예상되는 경우 명시적으로 고려된다. 안전성을 최대화하기 위해, 계획된 SAD 및 MAD 증량은 래트의 NOAEL 노출을 초과하지 않는다.
스크리닝 활동 완료 후, 모든 포함 기준을 충족하고 제외 기준 중 어느 것도 충족하지 않는 대상체는 쌍방향 웹 응답 시스템(IWRS: interactive web response system)에 의해 무작위로 배정된다. 파트 1에서, 각각의 코호트의 2명의 대상체는 센티넬 투여를 위해 ALT-801 또는 위약 치료 그룹에 1:1로 무작위로 배정된다. 8명의 대상체로 구성된 각각의 코호트의 나머지 6명의 대상체는 ALT-801 또는 위약 치료 그룹에 무작위로 할당되며, 5명은 ALT-801 그룹에 할당되고, 1명은 위약 그룹에 할당되어 각각의 코호트에서 전체 ALT-801 및 위약의 총 비율이 3:1이 된다. 파트 2에서는, 12명의 대상체로 구성된 코호트가 ALT-801 및 위약 치료 그룹에 5:1의 비율로 무작위로 할당되며, 10명은 ALT-801 그룹에, 2명은 위약 그룹에 할당된다.
서열 번호 1은 2.5 mg/mL의 최종 농도 및 1.2 mL의 총 충전 부피로 서열 번호 1을 포함하는 멸균 완충 수용액(예를 들어, 약 탈이온수(pH 7.7 ± 0.1) 중의 약 0.050%(w/w) 폴리소르베이트 20, 약 0.348%(w/w) 아르기닌, 4.260%(w/w) 만니톨) 내의 ALT-801로서 유리 바이알에서 제제화되고, 피하(SC) 주사로 투여된다. 파트 1에서, 연구 약물의 단일 용량이 제1일에 투여된다. 각각의 SAD 코호트의 처음 2명의 대상체(ALT-801 1명 및 위약 1명)는 나머지 대상체보다 적어도 48시간 전에 센티넬 방식으로 투여된다. 파트 2에서, 연구 약물은 6주 동안 QW 투여된다. 용량은 제1일, 8일, 15일, 22일, 29일 및 36일에 투여된다. 파트 1의 시작 용량은 0.40 mg이고, 이는 래트의 최대 무독성 용량(NOAEL: no observed adverse effect level)에서 인간 등가 용량의 1/10에 해당하며(안전을 위해 0.44 mg/wk에서 반내림), 용량 증량은 수정된 피보나치 계획을 따르며, 0.40, 1.2, 2.4, 4.8, 7.2 및 9.4 mg의 계획된 용량 수준(7일마다 한 번 투여되는 매주 용량과 동일함)으로서 3배 이하이다. 파트 2의 시작 용량은 파트 1 코호트 3의 용량의 절반으로 계획된다. 그러나, 후속 파트 2 코호트는 안전성 및 PK 데이터에 따라 조정될 수 있다. 각각의 연속적인 용량 수준으로 증량하는 결정은 파트 1의 제8일(단일 투여 후 7일) 및 파트 2의 제15일(두 번째 투여 후 7일)까지의 안전성 및 내약성 평가를 기반으로 한다. 용량 증량은 조정될 수 있고, 적절하거나 본 명세서에 기술된 바와 같이 용량 적정 체계를 조정할 수 있다. ALT-801 또는 위약의 각각의 용량은 적절하게 훈련된 임상 직원이 복부 영역에 SC 주사로 투여한다. 투여 부피는 선택한 용량 및 최종 의약품의 농도 2.5 mg/mL를 기준으로 한다. 식염수 위약은 해당 코호트에서 투여된 ALT-801의 용량 및 부피를 기준으로 부피에 대해 일치된다. 체중 감소는 이 화합물의 원하는 특성이므로, 안전성보다는 효능에 대해 모니터링된다. 그러나, 체중 감소가 과도하다고 판단되는 경우, 후속 코호트에서 용량을 조정할 수 있다. 체중 감소 수준이 과도한 것으로 간주되는 경우, 개별 대상체에서 연구 약물을 일시 중지하거나 중단할 수 있다. 항구토제 치료에도 불구하고 GI 부작용의 수준이 과도하고 참을 수 없는 것으로 간주되는 경우(예를 들어, 중증 GI AE가 24시간 초과로 지속됨), 개별 대상체에서 연구 약물을 일시 중지하거나 중단할 수 있다. 지속적인 구토가 있는 경우, 대상체에게 항구토제를 투여할 수 있다. 5HT3 수용체 길항제(예를 들어, 온단세트론)가 이러한 상황에서 바람직하다. 제안된 용량 수준은 이전 치료 코호트에서 관찰된 안전성 및 내약성 데이터의 평가에 기초하여, 관찰 결과 용량 증량이 MTD를 초과한다고 제안하는 경우 하향 조정될 수 있다. 투여는 연구의 각각의 파트에 대해 별도로 결정되는 MTD가 확인될 때까지 진행될 수 있다. 사용 가능한 PK 데이터는 의사 결정을 안내하는 데 사용될 수 있다.
혈액 샘플은 파트 1의 경우 제-1, 1, 2, 3, 4, 5, 8, 11, 14, 17, 20, 23 및 26일의 0, 1, 4, 6, 8, 12 및 16시간에, 파트 2의 경우에는 제-1, 1, 2, 3, 4, 5, 8, 15, 22, 29 및 36-38일의 0, 1, 4, 6, 8, 12 및 16시간에 PK 평가를 위해 수집된다. PK 샘플의 나머지 혈장은 시간 제한 없이 냉동 보관할 수 있으며, ALT-801 생체 분석 방법의 개발 또는 ALT-801 대사산물의 탐색에 사용할 수 있다. ECG 판독값은 PK 샘플 시간과 시간을 일치시킨다. 동일한 시점에 여러 활동이 발생하는 경우에는, ECG를 먼저 수집하고, 명목상 시간에 PK 채혈을 수행하여야 한다. PD 평가는 파트 2에서만 수행된다.
벽 장착형 높이 측정기 또는 밸런스 빔 저울에 장착된 측정기를 사용하여 센티미터 단위로 신장을 측정한다. 대상체는 양말을 신거나 맨발이어야 한다. 스크리닝 방문을 제외하고, 체중은 각각의 명목상 시점에서 하루 중 거의 같은 시간에 보정된 저울을 사용하여 킬로그램 단위로 측정된다. 측정은 가운(또는 임상 연구 유닛에서 제공하는 다른 표준 의류), 속옷 및 양말(신발 미착용)을 착용한 대상체가 단식하는 동안 및 대상체에게 배뇨(즉, 방광 비우기)를 요청한 후에 수행하여야 한다. 허리 둘레는 대상체가 가운을 입은 상태에서 측정해야 한다. 측정은 장골능선의 상방과 갈비뼈의 하부 외측 경계 사이의 중간 수준에서 수행된다. 배꼽 높이에서 측정할 필요는 없다. 측정 테이프는 수평으로 유지된다. 신장, 체중, 허리 둘레를 측정하고, BMI를 파트 1 및 파트 2의 스케쥴에 따라 계산하여 기록한다. 신장 측정은 스크리닝 시에만 필요하다. 허리 둘레는 파트 2의 대상체에 대해서만 측정된다.
FibroScan®은 진동 제어형 과도 탄성조영법(Vibration-Controlled Transient Elastography: VCTE) 및 CAP를 통해 각각 간 강직도 및 지방증을 동시에 측정할 수 있는 초음파와 유사한 기기이다. 파트 2의 대상체에 대해, FibroScan® CAP는 적어도 10시간의 하룻밤 금식 후에 스크리닝 동안 측정된다. FibroScan® CAP는 MRI-PDFF 전에 측정된다. MRI-PDFF는 간 전체에 걸쳐 간 지방의 정확하고 반복 가능하며 재현 가능한 정량적 평가를 가능하게 하는 정량적 이미징 바이오마커이다. 파트 2의 대상체에 대해, MRI-PDFF는 스크리닝 동안(CAP가 300 dB/m 이상인 경우에만 발생), 및 최소 10시간의 금식 후 EOS 방문 시에 측정된다. 간 지방 백분율은 간 지방 함량과 동시에 측정되는 총 간 부피에 대해 보정된다. 전신 MRI는 제지방량(lean body mass)을 포함한 체성분을 측정하는 데 사용되는 확립된 이미징 기술이다. 파트 2 대상체의 경우, MRI-PDFF와 연계하여 스크리닝 및 EOS 방문 동안 전신 MRI를 시행한다.
파트 1 및 2에서, 대상체는 연구 유닛에서 입원 기간 동안 표준화된 식사를 제공받는다. 일일 칼로리는 예측 BMR 식에 활동 계수 1.5를 곱하여 개별화되며, 다량 영양소 조성은 40-50% 탄수화물, 15-25% 단백질 및 30-40% 지방으로 표준화된다. 파트 2에서는, 제-1일 및 제42일에 PD 평가를 수행하기 전에 제-4일 내지 제-2일, 및 제39일 내지 제41일에 동일한 표준화된 식사가 제공된다. 또한, 식사의 시간 및 유형은 각각의 해당 매뉴얼에 설명된 바와 같이 ECG, MRI-PDFF 및 MMTT 평가에 따라 상이할 것이다.
음식 섭취 및 식욕은 자유로운 식사 시험 및 VAS 설문지를 사용하여 평가된다. VAS 설문지는 배고픔, 포만감, 팽만감, 특정 맛, 예를 들어 단맛, 짠맛, 짭짤한 맛, 및 기름진 맛을 먹고 싶은 욕구를 기록하는 식욕 연구의 표준 기술이다[Flint 2000]. 대상체는 평가 스케쥴에 지정된 날에 자유로운 식사 전후에 VAS 설문지를 작성할 것이다. 자유로운 식사의 크기는 건강한 과체중 및 비만 지원자의 예상 섭취량을 초과할 것이다. 시험 식사 동안, 대상체는 격리되고, 환경 신호가 최소화된다(예를 들어, TV, 휴대폰, 컴퓨터 등 없음). 대상체는 30분 동안 원하는 만큼 많거나 적게 섭취할 수 있으며, 편안하게 배가 부를 때까지 먹어야 한다. 식사 전후의 체중은 음식 섭취를 결정하기 위해 기록되고, 칼로리 소비가 결정된다.
기초 대사율(BMR) 및 휴식 에너지 소비(REE)는 금식 조건 하에 아침에 및 적어도 10시간의 금식 기간 후에 평가된다. 휴식 에너지 소비는 제-1일 및 제42일에 수행된다. BMR 및 REE는 환기 후드(ventilated hood) 방법(간접 열량계)을 사용하여 결정된다. BMR은 일반적으로 일일 에너지 소비의 주요 구성 요소이기 때문에, BMR의 변경은 에너지 소비를 목표로 하는 대사 약물 개발 프로그램의 맥락에서 임상적 관련성이 있을 수 있다.
최소 10시간의 금식 후에, 대상체는 표준화된 액체 식사(6 액량 온스의 Engure Plus[700 kcal], 표준 혼합 식사 부하 시험(MMTT)를 구성하는 지방, 탄수화물, 단백질의 성분을 함유하는 영양 보충물)을 5분 이내에 소비하는 것을 수반하는 MMTT를 거치게 된다. t=0분 샘플(즉, 표준화된 액체 식사 이전)은 마지막 HOMA IR 2 혈액 샘플(상기 참조)이다. 호르몬 마커에는 포도당, 인슐린 및 C-펩타이드가 포함될 것이다. 처음 15분 동안은 5분 간격으로 샘플을 수집하고, 그 후 표준화된 유동식 섭취 후 240분까지 30분 동안 샘플을 수집한다(이 시간 동안 추가의 음식 섭취 없음). MMTT 절차는 평가 스케쥴에 지정된 날짜에 수행된다. 검사를 표준화하고 변동성을 줄이기 위해, 각각의 시험 전에 임상 연구 유닛에 입소한 후 3일간의 표준화된 식단 및 표준화된 신체 활동 적응(run-in) 기간이 존재한다.
대상체가 적어도 10시간 동안 밤새 단식한 후, 첫 번째 및 두 번째 투여 1일 전 및 마지막 투여 6일 후에 케톤체의 평가를 위해 혈액 샘플을 수집한다. FGF-21 및 아디포넥틴의 평가를 위한 혈액 샘플은 대상체가 적어도 10시간 동안 밤새 금식한 후에 수집된다. 최소 10시간 동안 금식한 후, 표 4에 나타낸 바와 같이 연구 약물의 첫 번째 투여 전 및 마지막 투여 6일 후에 콜레스테롤(총, HDL, LDL), Apo A 및 B, 지단백질(a), TG 및 트리팔미틴을 포함하는 지질의 평가를 위해 혈액을 수집한다. 표 4에 나타낸 바와 같이 연구 약물의 첫 번째 투여 전 및 마지막 투여 6일 후에 TNF-α, hs-CRP, 렙틴, MCP-1 및 IL-6을 포함하는 염증 마커의 평가를 위해 혈액을 수집한다. 포도당 항상성은 파트 1 및 파트 2에 나타낸 기간 동안 Dexcom G6 CGM을 사용하여 24시간의 CGM에 의해 평가된다.
안전성 집단은 적어도 1회 용량의 연구 약물을 투여받는 모든 무작위 배정 대상체를 포함한다. 대상체는 투여받는 치료에 따라 분석된다. PK 집단은 ALT-801을 1회 이상 투여하고 분석을 위한 충분한 PK 데이터를 가진 모든 무작위 배정 대상체를 포함한다. QT 집단은 기준선에서 시간 일치된 적어도 1회의 ECG 및 상응하는 시간 일치된 투여 후 PK-ECG를 갖는 PK 집단의 모든 대상체를 포함한다. PD 집단은 적어도 1회 용량의 연구 약물을 투여받고 기준선 및 적어도 1회의 기준선 후 PD 평가 평가가 있는 모든 무작위 배정 대상체를 포함한다.
사용된 통계적 방법에서, 기술 통계는 인구통계학적 특성 및 기준선 특성의 차이를 평가하기 위해 사용된다. 병력은 최신 MedDRA(Medical Dictionary for Regulatory Activities) 버전을 사용하여 코딩되며, 대상체별로 나열된다. 지속적인 안전성 데이터는 용량 수준 및 치료(활성제 또는 위약)별로 기술 통계(산술 평균, 표준 편차[SD], 중앙값, 최소값 및 최대값)로 요약된다. 범주별 안전성 데이터는 연구 파트, 용량 수준, 치료 및 해당하는 경우 날짜에 따른 빈도 수 및 백분율로 요약된다.
AE는 최신 MedDRA 버전을 사용하여 코딩된다. 약어, 우선순위 용어, SOC, 치료, 중증도 및 연구 약물과의 관계를 포함하는 대상체별 AE 데이터 목록이 제공된다. 치료 관련 AE(TEAE)를 경험한 대상체의 수 및 개별 TEAE 및 주사 부위 반응의 수를 치료 그룹, SOC 및 우선순위 용어별로 요약하였다. 또한, TEAE는 중증도(1 내지 4 등급) 및 연구 약물과의 관계(가능성 없음, 가능함, 개연성 있음)에 따라 요약된다. 중지 규칙에 대한 관련성은 가능한 또는 개연성 있게 관련된 것으로 정의된다. 실험실 평가, 활력 징후 평가, 지속적인 심장 모니터링, ECG 파라미터(홀터 모니터링 제외), CGM 측정, ABPM 측정 및 식사 허용성 시험 파라미터는 연구 파트, 치료 그룹, 용량 수준 및 프로토콜 지정 수집 시점별로 요약된다. 치료 그룹에 의해 각각의 프로토콜 지정된 시점에서의 기준선으로부터의 변화 요약도 제시될 것이다. 신체 검사의 변화는 각각의 대상체에 대해 나열된다. PAGI-SYM의 분석은 통계 분석 계획(SAP)에 자세히 설명되어 있다. 병용 약물은 대상체별로 나열되며, 최신 WHO 약물 사전을 사용하여 코딩된다.
약동학은 기술 통계(샘플 크기[N], 산술 평균, SD, 변동 계수[CV%], 중앙값, 최소값 및 최대값)와 함께 코호트별로 나열 및 요약된 개별 ALT-801 농도 데이터를 포함한다. 각각의 코호트에 대한 개별 및 평균 ± SD ALT-801 농도-시간 프로파일도 그래픽으로 표시될 것이다. 혈장 ALT-801 비구획(NCA) PK 파라미터 Cmax, 최대 혈장 농도까지의 시간(Tmax), AUC0-t, AUC0-inf, 제거 속도 상수(Kel), t1/2, 겉보기 전신 청소율(CL/F), 및 말기 동안 겉보기 분포 부피(Vz/F)(파라미터 결정에 데이터가 충분한 경우)가 SAD 파트에 대해 추정된다. MAD 파트의 경우, Tmax, Cmax 및 AUCtau PK 파라미터는 첫 번째 및 마지막 용량(제1주 및 제6주) 후에 추정된다. 데이터가 허용하는 경우, Kel, t1/2, 정상 상태에서 겉보기 전신 청소율(CLSS/F) 및 정상 상태에서 겉보기 분포 부피(VSS/F)는 제6주 투여 후에 추정된다. 약동학적 파라미터는 각각의 개체에 대해 나열되고, 기술 통계(N, 산술 평균, SD, CV%, 중앙값, 최소값, 최대값, 기하 평균 및 기하 CV%)를 사용하여 코호트별로 요약된다. PK 파라미터에 대한 기준선 BMI의 효과는 상관관계 분석에 의해 평가된다. 적절한 경우, 검정력 모델(power model) 접근법을 사용하여 용량 비례성을 평가한다. 축적은 제6주 대 제1주에서 Cmax 및 AUC0-tau의 비율로 평가된다. 정상 상태는 첫 번째 용량에서 마지막 용량까지 최저 농도를 비교하여 평가한다.
홀터 모니터링으로부터 추출된 ECG는 대상체, 방문, 치료 및 명목 시점에 대해 블라인드된 숙련된 판독자의 선택된 그룹과 함께 중앙 ECG 실험에 의해 분석된다. 품질 관리 또는 가용성에 기반한 두 번째 검토가 필요하지 않는 한, 단일 판독자가 개별 대상체의 ECG를 검토한다. 모든 ECG는 개별 대상체에 대해 동일한 리드(lead)를 사용하여 분석된다. 1차 분석 리드는 리드 II이며, 분석할 수 없는 경우가 아니면 V2 또는 V5가 개별 대상체의 전체 데이터 세트에 사용된다.
1차 분석은 프리데리시아(Fridericia) 보정된 QT 간격(ΔΔQTcF)을 사용하여 기준선 투여 후 시점으로부터 위약 보정된 변화에 대한 평균 변화 및 일측 상위 95% 신뢰 한계이다. 바제트(Bazett)(QTcB), 개별 보정(QTcI) 또는 모집단 보정(QTcP)과 같은 다른 보정 방법을 탐색하고, 비교할 수 있다. 최소한, 프리데리시아 및 바제트의 보정이 분석되고, 제시된다. 2차 분석에는 선형 혼합 효과 모델링을 사용하여 시간 일치 혈장 농도와 ΔΔQTcF 사이의 관계가 포함될 것이다. ALT-801의 반복 용량 투여의 면역원성은 MAD 단계의 최종 방문 시에 수집된 ELISA 기반 검정을 사용한 혈청 샘플의 평가에 의해 평가된다. 연구 종료 샘플이 양성이면, 중간 연구 샘플도 분석될 것이다. 면역원성은 적용 가능한 경우에 안전성 및 PK에 대해 상관관계가 있을 수 있다.
약력학적 연구는 간 지방 함량, 신체 측정 파라미터, GLP-1 결합 및 인슐린 저항성, 글루카곤 결합, 및 지질 및 염증 마커의 변화를 포함하고, 기술 통계(샘플 크기[N], 산술 평균, SD, 중앙값, 최소값, 최대값, 기하 평균 및 기하 CV%)를 사용하여 치료 그룹에 의해 요약된다. 해당하는 경우, 추론 통계가 적용된다. PD 파라미터에 대한 기준선 BMI의 영향은 공변량 분석으로 평가된다.
중간 분석은 MAD 코호트 3에서 2회 이상의 용량을 완료한 후 수행될 수 있다. 이 분석의 목적은 후속 시험을 위한 용량 선택을 허용하는 것이다. 이 분석을 위해, 연구는 블라인드 상태로 유지될 것이며, 대상체 수준 안전성, PD 및 이용 가능한 PK 데이터는 분석을 위해 식별되지 않는다. 연구 파트, 용량 수준, 치료 그룹(활성제 또는 위약) 및 해당되는 경우 날짜별 요약 데이터가 보고된다. 중간 분석의 수행은 SAP에 자세히 설명되어 있다.
실시예 4. 과체중 및 비만 지원자에 대한 ALT-801 1상 연구(6주 중간 데이터)
본 실시예는 ALT-801 1상 임상 시험의 결과를 제시하는데, 이는 임상 시험 신청에 따라 호주에서 수행되는 과체중 및 비만 지원자에서의 위약 대조, 최초 인간 대상, 단일 상승 용량(SAD) 및 다중 상승 용량(MAD) 연구를 제시한다. 이 연구의 주요 목적은 12주 동안 매주 투여하여 ALT-801 수용자의 안전성 및 내약성, 약동학 및 체중 감소를 위약과 비교하여 평가하는 것이다. MAD 단계에서의 투여는 매주 1회 1.2 mg의 ALT-801을 SC 투여하거나 위약을 투여한 코호트로 시작되었고, 더 높은 용량의 코호트를 통해 진행되고 있으며, 1.2 mg 및 1.8 mg 코호트의 대상체는 현재 6주간의 치료를 완료하였다. 처음 2개의 연구 코호트에 대해 6주 동안의 투여시에 중간 분석이 수행되었으며, 본 실시예에 제시되어 있다.
이 연구는 ALT-801이 건강한 과체중 및 비만 지원자에서 빠르고 강력한 체중 감소를 유도함을 보여준다. 건강한 과체중 및 비만 지원자에서 ALT-801의 진행 중인 12주, 1상, 위약 대조, 단일 및 다중 상승 용량 연구의 미리 지정된 6주 중간 분석으로부터의 체중 감소 결과가 표 7에 제시되어 있다. 주 1회 ALT-801의 용량 1.8 mg을 피하(SC)로 투여한 후, 분석은 위약 그룹의 0.9%의 체중 증가와 비교하여 제6주(제43일)에 평균 5.4%의 체중 감소(위약으로부터 6.3%의 순변화)가 달성되었고, 연구 전 치료 목표인 2% 체중 감소를 능가하였음을 보여주었다(표 7, 도 1). 피하(sc) 1.8 mg의 SC 용량을 투여받은 9명의 대상체 중 1명을 제외하고 모두 제6주까지 적어도 3%의 체중 감소를 달성하였다. 매주 1.2 mg의 SC 용량을 투여받은 저용량 코호트는 동일 시점에 1.8%의 체중 감소(위약으로부터 2.7%의 순변화)를 달성하였다.
본 실시예에서 제시된 연구는 또한 ALT-801이 용량 적정 없이 내약성이 양호하다는 것을 보여준다. 건강한 과체중 및 비만 지원자를 대상으로 ALT-801의 진행 중인 12주, 1상, 위약 대조, 단일 및 다중 증량 연구의 사전 지정된 6주 중간 분석의 부작용에 대한 결과가 표 8에 제시되어 있다. 데이터에 따르면, ALT-801은 용량 적정 없이도 내약성이 양호하였으며, 일시적 메스꺼움 비율은 1.2 mg의 용량에서 14.3%, 1.8 mg의 용량에서 22.2%이었으며, 어느 용량에서도 구토, 설사 또는 변비가 보고되지 않았다. 1.8 mg 용량에서 모든 메스꺼움 사례는 중증도가 경미하였다. 이러한 결과는 ALT-801이 GLP-1 기반 치료제 중 가장 효과적이고 내약성이 우수한 것임을 보여준다. 위장관 부작용은 적당한 내약성을 유지하기 위해 16 내지 20주에 걸쳐 용량을 적정하기 위한 다른 GLP-1 기반 치료제를 필요로 하였다.
분석은 매주 1회 ALT-801의 용량 1.8 mg을 피하(SC)로 투여한 후, 위약 그룹의 0.9%의 체중 증가와 비교하여 제6주에 평균 5.4%의 체중 감소(위약으로부터 6.3%의 순변화)가 달성되었고, 연구 전 치료 목표인 2% 체중 감소를 능가하였음을 보여주었다. 1.8 mg SC 용량을 투여받은 9명의 대상체 중 한 명을 제외하고는, 모두 6주까지 적어도 3%의 체중 감소를 달성하였다. 매주 1.2 mg의 SC 용량을 투여받은 저용량 코호트는 동일한 시점에 1.8%의 체중 감소를 달성하였다(위약으로부터 2.7%의 순변화). ALT-801은 용량 적정 없이도 내약성이 양호하였으며, 일시적 메스꺼움 비율은 1.2 mg의 용량에서 14.3%, 1.8 mg의 용량에서 22.2%이었으며, 어느 용량에서도 구토, 설사 또는 변비가 보고되지 않았다. 이러한 결과는 ALT-801이 GLP-1 기반 치료제 중 가장 효과적이고 내약성이 우수한 것임을 보여준다. 위장관 부작용은 적당한 내약성을 유지하기 위해 16 내지 20주에 걸쳐 용량을 적정하기 위한 다른 GLP-1 기반 치료제를 필요로 하였다.
실시예 5. 과체중 및 비만 지원자에 대한 ALT-801(펨비두타이드) 1상 연구 - 12주 결과
본 실시예는 임상 시험 신청에 따라 호주에서 수행된, 과체중 및 비만 지원자에서의 위약 대조, 최초 인간 대상, 단일 상승 용량(SAD) 및 다중 상승 용량(MAD) 연구인 ALT-801(펨비두타이드)을 사용한 1상 임상 시험의 결과를 제시한다. 연구의 1차 목적은 12주 동안 매주 1회 투여하는 위약과 비교하여 ALT-801을 투여한 대상체에서 안전성 및 내약성, 약동학 및 체중 감소를 평가하는 것이었다. 이 연구는 칼로리 제한 또는 행동 체중 감량 프로그램 없이 수행되었다. 특정 실시양태에서, ALT-801(펨비두타이드로도 알려짐)은 일차 및 단독 치료로서 비만(즉, BMI 30 이상) 또는 과체중(즉, BMI 25 이상) 대상체의 만성 체중 관리를 위한 치료제로서 사용될 수 있다. 다른 특정 실시양태에서, ALT-801(펨비두타이드로도 알려짐)은 칼로리 감소 식이 및/또는 증가된 신체 활동과 함께 비만(즉, BMI 30 이상) 또는 과체중(즉, BMI 25 이상) 대상체의 만성 체중 관리를 위한 보조 치료제로서 사용될 수 있다.
적격 참가자는 최소 체질량 지수(BMI)가 25 kg/m2인 건강한 비당뇨병 대상체를 포함하였다. 연구의 MAD 부분에 있는 34명의 대상체가 펨비두타이드(1.2 mg, 1.8 mg 및 2.4 mg)의 3가지 피하 용량 중 하나 또는 위약을 용량 적정 없이 12주 동안 매주 1회 투여하도록 지정되었다. 행동 및 칼로리 제한 개입은 사용되지 않았다. MAD 단계에서의 투여는 ALT-801 또는 위약 1.2 mg을 매주 1회 SC 투여받은 코호트에서 시작되었고, 더 높은 용량의 코호트를 통해 진행되었으며, 1.2 mg, 1.8 mg 및 2.4 mg ALT-801 용량 코호트의 대상체는 본 실시예에서 제시된 12주의 치료를 완료하였다. MAD 단계 참가자의 인구 통계는 표 9에 나와 있다.
건강한 과체중 및 비만 지원자에서 ALT-801을 매주 투여한 후 체중 감소 결과는 표 10에 제시되어 있다. 결과는 ALT-801이 건강한 과체중 및 비만 지원자에서 신속하고 강력한 체중 감소를 유도함을 보여준다. ALT-801 용량 1.8 mg을 매주 1회 피하(SC) 투여한 결과, 위약 그룹의 단지 1.6%에 불과한 평균 체중 감소와 비교하여 제12주(제85일)까지 평균 10.25%의 체중 감소가 달성되었다(표 10, 도 2). 또한, 1.8 mg 용량에서 대상체의 100%가 제12주까지 5% 이상의 체중 감소를 달성하였고, 55%의 대상체가 제12주까지 체중의 적어도 10%를 감량하였다(도 2). 제12주에, 매주 1.2 mg의 SC 용량을 투여받은 더 낮은 용량 코호트는 4.87%의 체중 감소를 달성한 반면, 매주 2.4 mg의 SC 용량을 투여받은 더 높은 용량 코호트는 8.95%의 체중 감소를 달성하였다(표 10). 2.4 mg 용량에서, 1명을 제외한 모든 대상체가 제12주까지 5%의 체중 감소를 달성하였다(도 3). 1.8 및 2.4 mg 용량에서 체중 감소량은 샘플 크기 및 중복 신뢰 구간을 고려할 때 본질적으로 동일하였다. 도 3 및 4에 나타낸 바와 같이, 체중 감소 추세는 제12주까지 유지되었으며, 이는 투여가 장기간 동안 유지될 경우 더 높은 수준의 체중 감소가 예상됨을 나타낸다. 이에 비해, 과체중 또는 비만인 참가자의 경우, 매주 1회 세마글루타이드 2.4 mg의 투여 및 생활 습관 중재를 병행하였을 때 기준선으로부터 제12주까지 평균 체중 변화는 6%에 불과하였다(Wilding JPH, Batterham RL, Calanna S, Davies M, Van Gaal LF, Lingvay I, McGowan BM, Rosenstock J, Tran MTD, Wadden TA, Wharton S, Yokote K, Zeuthen N, Kushner RF; STEP 1 Study Group. Once-Weekly Semaglutide in Adults with Overweight or Obesity. N Engl J Med. 2021 Mar 18;384(11):989). 흥미롭게도, 상이한 ALT-801 용량 그룹에 걸친 제12주의 체중 감소와 대상체 연령 또는 BMI(체질량 지수; kg/m2) 사이에 상관관계가 발견되지 않았으며(도 5), 이는 이 연구에서 관찰된 강력한 체중 감소가 모든 연령 및 체중 그룹에서 예상된다는 것을 의미한다.
주: SD = 표준편차, min = 최소, max = 최대
[1] 기준선은 연구 약물의 첫 번째 투여를 받기 전에 수집된 마지막 비결측값으로 정의된다.
[2] 본페로니(Bonferroni) 조정 p-값. p-값은 각각의 ALT-801 용량 그룹의 기준선으로부터의 변화 %를 통합 위약의 변화 %와 비교하는 스튜던트(Student) t-검정에서 얻은 것이다.
12주 모니터링에 대한 부작용이 표 11에 제시되어 있다. 결과는 ALT-801이 용량 적정의 필요 없이 내약성이 양호함을 보여준다. 모든 치료 관련 부작용은 약물로 해결되고 특별한 치료가 필요하지 않은, 본질적으로 경증 내지 중등도였다. 한 환자는 ALT 수치 상승을 경험하였으며, 투여 중단 후 빠르게 해소되었다. 특히, 위장관계 부작용은 대부분 일시적이고, 경미하였으며, 약물로 해결되었다. 또한, 이러한 위장관계 부작용은 본질적으로 일시적이어서, 대상체가 종종 단일 에피소드를 경험하고, 치료 기간 동안 빈도가 감소하였다. 부작용 때문에 연구에서 제외된 대상체는 없다(표 12 참조). 위장관계 부작용은 적절한 내약성을 유지하기 위해 16주에서 20주에 걸쳐 용량을 적정하기 위해 다른 GLP-1 기반 작용제를 필요로 하였다. 예를 들어, 성인 환자의 만성 체중 관리용으로 승인된 WEGOVY(세마글루타이드)(https://www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/label/2021/215256s000lbl.pdf)는 부작용의 발생을 관리하기 위해 16주 동안 0.5 mg에서 2.4 mg으로 용량을 증량해야 한다. 이러한 결과는 ALT-801이 GLP-1 기반 치료제 중 가장 효과적이고 내약성이 우수함을 나타낸다.
주: TEAE = 치료 관련 부작용;
주: PLT = 잠재적으로 생명 위협;
주: 부작용은 MedDRA 버전 MedDRA v23.1(2020년 9월)을 사용하여 코딩된다. 각각의 신체 기관 분류 및 우선순위 용어에 대해, 대상체는 신체 기관 분류 및 선호 용어당 한 번만 계산된다.
[1] 최대 중증도: 생명 위협 > 중증 > 중등도 > 경도.
1무작위 배정, 투여 및 1회 이상의 투여 후 평가를 받은 대상체
표 13에 제시된 바와 같이, ALT-801을 사용한 치료는 또한 심혈관 위험의 바이오마커로 간주되는 수축기 및 확장기 혈압의 감소를 나타내는 경향이 있다. 추가로, ALT-801에 의한 치료는 심혈관 위험의 바이오마커로 또한 간주되는 지질을 낮추는 경향이 또한 있다(표 14). 더욱이, ALT-801은 표 15에 나타낸 바와 같이 당뇨병 전증 및 대사 증후군을 감소시킨다. ALT-801을 사용한 치료는 포도당 항상성을 유지하며, 이는 ALT-801의 GLP-1 활성이 혈당에 대한 글루카곤 효과의 균형을 효과적으로 맞출 수 있다는 것을 나타낸다(표 16). 표 17은 ALT-801의 글루카곤 활성에 기인할 수 있는 효과인 지방 연소 증가에 대한 ALT-801의 영향을 나타내는 케톤체 생산의 결과를 보여준다.
ALT-801은 또한 매주 투여를 지원하고 표 18에 나타낸 바와 같이 허용 가능한 위장관 내약성과 관련될 수 있는 유리한 약동학(PK) 프로파일을 제시한다.
요약하면, 1.8 mg의 피하 용량의 ALT-801로 단 12주 치료 후에, 본 연구에서 인상적인 10.3%의 체중 감소가 관찰되었다. 이 효과는 2.4 mg 용량에서 유지되었다. 1.8 mg 용량의 대상체 대다수(55%)가 10% 초과의 체중 감소를 달성하였다. 체중 감소 추세는 제12주까지 유지되었다. ALT-801은 주로 경미한 부작용과 함께 내약성이 우수하였다. 치료는 부작용으로 인한 연구 중단으로 이어지지 않았다. 체중 감소의 선형 비율은 이러한 효과가 지속될 것임을 시사한다. 세마글루타이드와 같은 다른 GLP-1 수용체 편향 작용제와 비교할 때, 양호한 환자 순응도와 함께 체중 감소를 달성하기 위해 용량 적정이 필요하지 않다. 또한, 고혈당 AE가 없었고, 혈당 조절 또는 심박수에 대한 부작용도 관찰되지 않았다.
실시예 6: 제2형 당뇨병이 있는 과체중 및 비만 대상체에서 ALT-801의 안전성 및 내약성, 약력학 및 약동학을 평가하기 위한 1상, 무작위 배정, 이중 맹검, 위약 대조, 병렬 그룹 연구
이것은 스크리닝 전 적어도 3개월 동안 (1) 식이요법 및 운동, (2) 위장관 증상(메스꺼움, 구토 또는 설사)이 없거나 경증인 메트포르민 및/또는 (3) 나트륨 포도당 공수송체(SGLT-2) 요법의 임의의 조합을 실시한, 과체중 및 비만(체질량 지수(BMI)가 28.0-40.0 kg/m2인 18세 내지 65세의 남성 또는 비임신 여성 대상체) T2DM 대상체에서 ALT-801의 안전성 및 내약성, 약력학(PD) 및 약동학(PK) 및 혈당 조절에 대한 그의 효과를 평가하기 위한 1상, 무작위 배정, 이중 맹검, 위약 대조, 병렬 그룹 연구이다. 이 연구에서, ALT-801 또는 위약은 최대 35일의 스크리닝 기간, 85일의 치료 기간 및 25일의 추적 기간을 포함하는 약 4.5개월 동안 제2형 당뇨병(T2DM) 환자(예를 들어, 48명의 대상체)에게 최대 12회까지 매주 1회 피하(SC) 주사(바람직하게는 복부)로 투여된다.
1차 안전 목표는 T2DM 대상체에서 ALT-801의 안전성 및 내약성을 평가하는 것이고 2차 안전 목표는 T2DM 대상체에서 혈당 파라미터 및 고혈당증 및 저혈당증의 발생률에 대한 ALT-801의 효과를 평가하는 것이다. 1차 안전성 종료점에는 부작용(AE), 활력 징후, 심박수-혈압의 곱(평균 심박수 x 평균 수축기 혈압), 간 기능 검사, 고혈당 및 저혈당 부작용 발생률, 신체 검사, 주사 부위 반응 및 면역원성이 포함된다. 2차 안전성 종료점에는 공복 혈청 혈당, CGM 파라미터(포도당 농도-시간 프로파일 아래 면적, 범위 내 시간, 고혈당증 및 저혈당증) 및 HbA1c를 포함하는 기준선 혈당 파라미터로부터의 변화가 포함된다. 지속적인 안전성 데이터는 용량 수준 및 치료(활성제 또는 위약)별로 기술 통계(산술 평균, 표준 편차[SD], 중앙값, 최소값 및 최대값)로 요약될 것이다. 범주별 안전성 데이터는 해당되는 경우 용량 수준, 치료 그룹 및 날짜별 빈도 수 및 백분율로 요약될 것이다. AE는 최신 MedDRA(Medical Dictionary for Regulatory Activities) 버전을 사용하여 코딩될 것이다. 약어, 선호 용어, 신체 기관 분류(SOC), 치료, 중증도 및 연구 약물과의 관계를 포함하는 대상체별 AE 데이터 목록이 제공될 것이다. 치료 관련 AE(TEAE)를 경험한 대상체의 수 및 개별 TEAE 및 주사 부위 반응의 수가 치료 그룹, SOC 및 선호 용어별로 요약될 것이다. 또한, TEAE는 중증도 및 연구 약물과의 관계에 따라 요약될 것이다. 간기능 시험 및 공복 혈청 혈당을 포함하는 실험실 평가, 활력 징후(RPP의 계산 포함), 및 ECG 평가가 치료 그룹, 용량 수준 및 프로토콜 지정 수집 시점별로 요약될 것이다. 치료 그룹에 의해 각각의 프로토콜 지정된 시점에서 기준선으로부터의 변화의 요약도 제시될 것이다. 신체 검사의 변화는 각각의 대상체에 대해 나열될 것이다. 병용 약물은 대상체별로 나열되고 세계 보건 기구(WHO) 약물 사전의 최신 버전을 사용하여 코딩될 것이다. 병력은 최신 MedDRA 버전을 사용하여 코딩되며, 대상체별로 나열될 것이다.
1차 약력학(PD) 목적은 T2DM 대상체에서 인슐린 감수성 및 분비에 대한 ALT-801의 효과를 평가하는 것이다. 여기에는 MMTT(혈청 혈당, C-펩타이드 및 인슐린의 4시간 동안의 곡선 아래 면적(AUC0-4)) 및 인슐린 저항성에 대한 항상성 모델 평가(HOMA IR)(공복 혈장 혈당 및 인슐린)에 의해 측정되는 기준선 인슐린 분비 및 감수성으로부터의 변화가 포함된다. 2차 PD 목적은 T2DM에서 13C-스피룰리나 호흡 검사로 측정한 위 배출(지연기, 반감기, 위 배출 계수), 인체 측정 파라미터(예를 들어, 체중, 허리 둘레, BMI), 지질 대사(콜레스테롤(총, 저밀도 지단백질(LDL), 고밀도 지단백질(HDL), 아포지단백질(Apo) A 및 B, 지단백질(a), 트리글리세라이드(TG)), 대사 마커(렙틴, 아디포넥틴), 염증 마커(종양 괴사 인자(TNF), 고감도 C-반응성 단백질(hs-CRP), 플라스미노겐 활성화인자 억제제-1(PAI-1), 단핵구 화학유인 단백질-1(MCP-1), 인터루킨-6(IL-6)) 및 지방 독성 마커에 대한 ALT-801의 효과를 평가하는 것이다. 인슐린 감수성 및 분비, 인체 측정 파라미터, 지질 대사, 대사 마커, 지질 독성 마커, 및 염증 지표의 변화는 기술 통계(표본 크기(N), 산술 평균, SD, 중앙값, 최소, 최대, 기하 평균 및 기하 변동 계수(CV%))와 함께 치료 그룹별로 나열 및 요약된다. 기준선 BMI가 PD 파라미터에 미치는 영향은 공변량 분석을 통해 평가될 것이다. 기준선 지연 단계, 반감기, 위 배출 계수 데이터의 변화가 기술 통계(N, 산술 평균, SD, CV%, 중앙값, 최소값 및 최대값)와 함께 나열되고 요약될 것이다.
또한, 삶의 질(QoL) 효과도 모니터링된다(기준선과 비교하여 Short Form-36의 변화 및 삶의 질에 대한 체중의 영향-라이트 임상 시험 버전(Impact of Weight on Quality of Life-Lite Clinical Trials version)(CT용 IWQoL-Lite)). 신체 건강 및 정신 건강에 대한 2개의 요약 점수, 및 SF-36에 대한 8개의 영역 점수 및 CT용 IWQoL-Lite에 대한 복합 점수의 기준선으로부터의 변경 사항이 기술 통계(N, 산술 평균, SD, 중앙값, 최소값, 최대값, 기하 평균 및 기하 CV%)와 함께 치료 그룹별로 나열 및 요약될 것이다. 위에서 설명한 바와 같이, 연속 종료점에 적용할 수 있는 추론 통계가 적용될 것이다.
약동학(PK) 목적은 ALT-801 농도 및 기준선 메트포르민 농도로부터의 변화를 평가하는 것이다. 개별 ALT-801 및 메트포르민 농도 데이터가 기술 통계(N, 산술 평균, SD, CV%, 중앙값, 최소값 및 최대값)와 함께 치료 그룹 및 시점별로 나열되고 요약될 것이다. 각각의 코호트에 대한 개별 및 평균 ± SD ALT-801 농도-시간 프로파일도 그래픽으로 표시될 것이다. 기준선 메트포르민 농도로부터의 변화가 기술 통계(N, 산술 평균, SD, CV%, 중앙값, 최소값 및 최대값)와 함께 치료 그룹 및 시점별로 나열 및 요약될 것이다. 집단 PK 모델이 개별 대상체의 ALT-801 혈장 농도 시간 곡선 및 관련 PK 파라미터의 예측을 가능하게 하기 위해 개발될 것이다. 성별, 연령, 체중, BMI, 및 병용 약물을 포함하는 공변량이 가능한 경우 조사될 것이고, 노출 반응 관계가 가능한 경우 효능 및 안전성에 대해 조사될 것이다.
정보에 입각한 동의를 제공한 후, 대상체는 최대 35일의 스크리닝 기간을 겪게 될 것이다. 대상체는 연구에 참여하는 동안 정상적인 식단, 알코올 섭취 및 신체 활동을 유지하는 방법 및 임의의 새로운 식단, 보충제 또는 운동 프로그램을 시작하지 않는 방법을 교육받을 것이다. 제-8일 방문부터 식단 및 운동에 대한 상담이 제공되며, 치료 기간 동안 매 방문 시마다 강화될 것이다. 포함 기준을 충족하고 제외 기준을 충족하지 않는 대상체는 다음 치료 아암 중 하나에 1:1:1:1로 무작위 배정된다: ALT-801 1.2 mg 피하(SC), 12주 동안 매주 1회; ALT-801 1.8 mg SC, 12주 동안 매주 1회; 제1주에 ALT-801 0.6 mg SC, 제2주에 1.2 mg SC, 2주(제3주 및 제4주) 동안 1.8 mg SC, 매주 1회, 및 제5주에서 제12주까지 2.4 mg SC, 매주 1회; 및, 위약(0.9% NaCl) SC, 12주 동안 매주 1회. 대상체는 기준선에서 메트포르민 사용 유무에 따라 계층화될 것이다. 각각의 치료 아암에는 12명의 대상체가 있을 것이다. 대상체는 제1일에 연구 약물의 첫 번째 용량을 투여받게 될 것이다. 후속 방문은 제85일 또는 조기 종료까지 클리닉, 집 또는 직장에서 매주 수행될 것이다. 대상체는 제110일에 안전성 추적 조사 방문을 위해 돌아올 것이다. 조사자는 12주의 치료 기간 동안 비정상적인 간 기능 검사 결과가 악화된 대상체에 대한 개입 시기 및 방법에 대한 결정 기준을 따를 것이다. 대상체는 스크리닝 시, 제5주 동안 및 연구 마지막 주 동안 혈당을 측정하기 위해 7일 동안 연속 혈당 모니터링(CGM)을 받게 될 것이다. 포도당 및 호르몬 지표를 측정하는 혼합 식사 부하 시험(MMTT)은 스크리닝 시 및 치료 기간 종료 시에 수행될 것이다. 또한, 대상체는 ALT-801이 위 배출률에 미치는 영향을 평가하기 위해 스크리닝(제-8일) 및 제8주(제50일) 동안 13C-스피룰리나 위 배출 호흡 검사를 거치게 될 것이다. 공복 혈당 수치는 제-35일부터 시작하여 치료 기간 동안 방문할 때마다 연구 직원이 혈당측정기로 측정하고 기록하게 될 것이다. 또한, 방문하지 않는 날에는 대상체가 매일 아침 공복 혈당을 모니터링 및 기록하고, > 240 mg/dL 또는 < 70 mg/dL의 판독값에 대해 연구 기관에 연락할 것이다. CGM이 수행되는 주(스크리닝, 제4주 및 제12주) 동안, 70 mg/dL 미만의 임의의 CGM 수치는 혈당측정기 판독값에 의해 확인될 것이다. 또한, 대상체는 저혈당증의 증상 및 치료에 대해 교육을 받고, 70 mg/mL 미만의 혈당 또는 저혈당증을 암시하는 증상을 경험하는 경우 혈당측정기 판독값을 얻을 것이다. 대상체는 집에서 경험한 저혈당증의 임의의 증상을 사건 당시 혈당측정기 판독값과 함께 로그에 기록할 것이며, 이는 매 방문 시 조사관에 의해 검토될 것이다. 조사관은 반복적인 식이 상담을 포함하여 공복 혈당을 제한 내로 유지하는 방법에 대해 대상체에게 조언하고, 12주 치료 기간 동안 지속적인 고혈당증이 있는 대상체에 대한 개입 시기 및 방법에 대한 결정 기준을 따를 것이다. 공복 혈당의 현저한 감소가 반복적으로 관찰되거나(< 50 mg/dL) 또는 대상체가 저혈당을 치료하기 위해 개입 또는 외부 지원이 필요한 경우, 대상체는 연구에서 제외되고 교체될 수 있다. ALT-801 PK에 대해 희박한 혈액 샘플을 수집하여 집단 PK 및 PK-PD 모델링에서의 다른 연구의 데이터와 조합하고, 메트포르민 PK에 대해 ALT-801의 존재 하에서 시간 경과에 따른 메트포르민 농도의 변화를 평가할 것이다. 또한, 면역원성을 평가하기 위해 혈액 샘플도 수집될 것이다.
이 시험의 결과는 T2DM이 있는 대상체에서 최대 12회 용량으로 매주 1회 피하(SC) 주사로 투여되는 ALT-801이 안전하고 내약성이며, 긍적적인 PD, 삶의 질 및 PK 효과 및 대상체에서 혈당 조절을 제공함을 보여줄 것이다.
실시예 7: 비알코올성 지방간 질환을 앓는 당뇨병 및 비당뇨병 과체중 및 비만 대상체에서 ALT-801의 1상, 12주, 무작위 배정, 이중 맹검, 위약 대조 연구
ALT-801은 글루카곤 유사 펩타이드 1 수용체(GLP-1R) 및 글루카곤 수용체(GCGR)에 대해 동등한 이중 작용제 특성을 갖는 변형된 29개 아미노산의 펩타이드이다. ALT-801은 섬유증이 있거나 없는 상태로 지방증이 간세포 손상 및 염증(지방간염)을 유발하는 비알코올성 지방간 질환(NAFLD)의 하위 그룹인 비알코올성 지방간염(NASH)을 위해 개발되고 있다. 미국(US)에서, NASH는 말기 간 질환 또는 간 이식의 주요 원인이 되었다[Goldberg 2017]. 비만은 NASH의 핵심 원인이며, 체중을 줄이면 간 지방이 감소하고, NASH가 개선된다[Vilar-Gomez 2015]. NASH가 있는 개체에서 80% 초과의 개체가 과체중이거나 비만이며[Diehl 2017], 현재 미국 식품의약국(FDA)에서 승인한 체중 감소를 유도하기 위한 약제학적 옵션이 없기 때문에 치료는 주로 체중 감소 달성을 위한 생활 습관 중재에 기반을 두고 있다. 그러나, 생활 습관의 변화만으로 장기적인 체중 감소를 달성하고 유지하는 것은 어렵다. 글루카곤 유사 펩타이드-1 수용체 작용제(GLP-1RA)는 NASH 환자를 위한 치료 옵션으로 등장하였다. 일일 GLP-1RA인 리라글루타이드가 간 섬유증 개선 경향과 함께 NASH 해결과 관련이 있는 것으로 나타났다[Armstrong 2016]. 최근의 시험에서, 최대 0.4 mg/일의 세마글루타이드 투여는 유의하게 더 높은 NASH 해소율과 함께 최대 12.5%의 평균 체중 감소와 연관되었다. 10% 이상의 체중 감소는 컷오프 최적 NASH 해소 및 섬유증 개선으로 간주되었다[Vilar-Gomez 2015]. 또한, 더 높은 수준의 체중 감소는 NASH 환자가 직면하는 가장 심각한 동반 질환을 나타내는 심혈관 질환 및 비간 악성 종양의 발생률 감소와 관련이 있다. 불행하게도, 이들 연구에 사용된 리라글루타이드 및 세마글루타이드의 용량은 환자의 불편함 및 비순응도를 유발할 수 있는 위장관(GI) AE의 높은 비율과 관련이 있었다. GLP-1RA는 식욕 및 음식 섭취에 중요한 영향을 미치는 반면, GCGR 작용제(GCGRA)는 동물 모델과 인간에서 에너지 소비를 증가시킨다[Lynch 2014]. GCGRA 및 GLP-1RA의 효과는 GLP-1RA 단독에 비해 더 큰 체중 감소를 유도하는 데 시너지 효과가 있는 것으로 나타났다[Day 2012]. 또한, GCGRA는 지방 분해를 강화하고, 간 지방 합성을 억제하여, 간 지방 감소 및 NASH 해소를 위한 추가의 경로를 제공한다[Schade 1979]. 이중 작용제는 동일한 분자에서 GCGRA와 GLP-1RA를 조합한다. 비만인 비인간 영장류에서, GLP-1RA/GCGRA 이중 작용제의 만성 투여는 GLP-1RA 단일 작용제에 비해 또는 큰 정도로 체중을 감소시키고 포도당 내성을 개선하였다[Tschop 2016]. 글루카곤 활성에 대한 GLP-1의 편향이 5:1인 GLP-1/GCGR 이중 작용제인 코타두타이드의 임상 연구는 단 6주 만에 간 지방 분획이 39%라는 인상적인 감소 및 리라글루타이드 단독보다 NASH 관련 알라닌 아미노트랜스퍼라제(ALT) 감소의 더 큰 개선을 입증하였다. 그러나, 26주에 걸친 코타두타이드 투여 시에 체중 감소의 정도는 리라글루타이드보다 유의하게 크지 않았고(5.4% vs 5.5%), 이것은 5:1의 비율이 간 지방 감소에는 수용 가능하지만 체중 감소에는 최적이 아님을 시사한다[Alba 2021, Ambery 2018, Nahra 2021, Armstrong 2016]. 균형 잡힌(1:1) 작용제는 다른 작용제보다 한 가지 작용제를 선호하는 편향된 비율보다 더 큰 체중 감소 및 대사 효과와 관련이 있는 것으로 나타났다[Day 2012]. 균형 잡힌 이중 작용제인 JNJ 64565111[Alba 2021]을 사용한 최근 연구에서 단 12주 만에 인상적인 체중 감소를 달성하였다(NCT03586830). 증거는 GLP-1RA/GCGRA 이중 작용제가 또한 혈당 조절에 긍정적인 효과를 나타낼 수 있다는 것을 시사한다[Nahra 2021]. GLP-1에 편향된 GLP-1R 및 GLP-1 기반 이중 수용체 작용제는 일반적으로 메스꺼움, 구토 및 설사를 포함하는 GI 부작용과 관련이 있다[Filippatos 2014]. 또한, 이러한 작용제는 부작용을 줄이기 위해 장기간에 걸쳐 적정해야 하며[Ambery 2018, Newsome 2020, Frias 2018], 내약성 및 투여 요법이 개선된 작용제가 필요하다. GLP-1R 및 GCGR 작용제는 둘 모두 체중 감소에 기여하기 때문에, 단일분자 GLP-1R/GCGR 이중 작용제로 덜 공격적인 투여가 예상되어 더 낮은 비율의 GI 독성 가능성을 제공한다.
본 실시예는 당뇨병 및 비당뇨병 과체중 및 비만(체질량 지수[BMI] 28.0-40.0 kg/m2)인 비알코올성 지방간 질환(NAFLD)이 있는 대상체에서 ALT-801의 안전성 및 간 지방 분획, 인체 측정 파라미터, 지질 대사, 염증 마커 및 섬유증 마커에 대한 그의 효과를 평가하기 위한 1상, 무작위 배정, 이중 맹검, 위약 대조, 병렬 그룹 연구를 설명한다. 이 연구는 ALT-801 치료 12주 후에 NAFLD가 있는 당뇨병 및 비당뇨병 과체중 및 비만 환자에서 MRI-PDFF에 의해 간 지방 분획의 변화를 평가하도록 설계되었다. 또한, 이 연구는 12주 치료 후에 ALT-801의 체중, 지질 대사, 대사 마커 및 염증 마커의 변화 및 안전성 및 내약성을 평가할 것이다. 대상체는 기준선에서 당뇨병의 부재에 대해 계층화될 것이다. 이 연구는 ALT-801 치료 12주 후에 NAFLD가 있는 당뇨병 및 비당뇨병의 과체중 및 비만 환자에서 MRI-PDFF에 의해 간 지방 분획의 변화를 평가하도록 설계되었다. 또한, 이 연구는 ALT-801 치료 12주 후에 체중, 지질 대사, 대사 마커 및 염증 마커의 변화 및 ALT-801의 안전성 및 내약성을 평가할 것이다. 대상체는 기준선에서 당뇨병의 부재에 대해 계층화될 것이다.
이 연구를 위해, 적합한 대상체는 FibroScan® 제어 감쇠 파라미터(CAP: controlled attenuation parameter) ≥ 280 dB/m 및 간 경직도 측정(LSM) < 8.5 kPa 및 자기 공명 영상 유도 양성자 밀도 지방 분획(MRI-PDFF) ≥ 10%으로 정의되는 유의한 섬유증이 없는 NAFLD 환자이다. 대상체가 제2형 당뇨병(T2DM)을 앓고 있는 경우, 스크리닝 전 적어도 3개월 동안 (1) 식이요법 및 운동, (2) 위장관 증상(메스꺼움, 구토 또는 설사)이 없거나 경증인 메트포르민 및/또는 (3) 나트륨 포도당 공수송체-2(SGLT-2) 요법의 임의의 조합의 안정한 요법을 실시한다. 정보에 입각한 동의를 제공한 후, 대상체는 최대 35일의 스크리닝 기간을 거칠 것이다. 대상체는 연구에 참여하는 동안 정상적인 식단, 알코올 섭취 및 신체 활동을 유지하는 방법 및 임의의 새로운 식단, 보충제 또는 운동 프로그램을 시작하지 않는 방법을 교육받을 것이다. 제1일 방문 시에 식단 및 운동에 대한 상담이 제공되며, 후속 방문 시에 강화될 것이다. 포함 기준을 충족하고 제외 기준을 충족하지 않는 대상체는 다음 치료 아암 중 하나에 1:1:1:1로 무작위로 배정될 것이다: 1) ALT-801 1.2 mg SC, 12주 동안 매주 1회; 2) ALT-801 1.8 mg SC, 12주 동안 매주 1회; 3) 제1주에 ALT-801 0.6 mg SC, 제2주에 1.2 mg SC, 2주(제3주 및 제4주) 동안 1.8 mg SC, 매주 1회, 및 제5주에서 제12주까지 2.4 mg SC, 매주 1회; 또는 위약(0.9% NaCl) 피하(SC), 12주 동안 매주 1회. 대상체는 기준선에서 당뇨병 유무에 따라 계층화될 것이다. 각각의 치료 아암에는 18명의 대상체가 있을 것이다. 대상체는 제1일에 연구 약물의 첫 번째 용량을 투여받게 될 것이다. 후속 방문은 제85일 또는 조기 종료까지 클리닉, 집 또는 직장에서 매주 수행될 것이다. 대상체는 제110일에 안전성 추적 조사 방문을 위해 돌아올 것이다. 조사자는 12주의 치료 기간 동안 비정상적인 간 기능 검사 결과가 악화된 대상체에 대한 개입 시기 및 방법에 대한 결정 기준을 따를 것이다. 공복 혈장 혈당(FPG) 수준은 혈당측정기로 측정되고, 기준선에서 및 각각의 투여 전에 연구 직원에 의해 문서화될 것이다. 방문하지 않는 날에는, 대상체가 매일 아침 FPG를 모니터링 및 기록하고, > 240 mg/dL 또는 < 70 mg/dL 판독값을 위해 연구 기관에 연락할 것이다. 또한, 대상체는 저혈당증의 증상 및 치료에 대해 교육을 받고, 70 mg/mL 미만의 혈장 혈당 또는 저혈당증을 암시하는 증상을 경험하는 경우 혈당측정기 판독값을 얻을 것이다. 대상체는 집에서 경험한 저혈당증의 임의의 증상을 로그에 기록할 것이며, 이는 제8일에 시작하여 매 방문 시에 조사관에 의해 검토될 것이다. 조사관은 반복적인 식이 상담을 포함하여 FPG를 제한 내로 유지하는 방법에 대해 대상체에게 조언하고, 12주 치료 기간 동안 지속적인 고혈당증이 있는 대상체에 대한 개입 시기 및 방법에 대한 결정 기준을 따를 것이다. FPG의 현저한 감소가 반복적으로 관찰되거나(FPG < 50 mg/dL) 또는 대상체가 저혈당을 치료하기 위해 개입 또는 외부 지원이 필요한 경우, 대상체는 연구에서 제외되고 교체될 수 있다. ALT-801 약동학(PK)에 대해 희박한 혈액 샘플을 수집하여 집단 PK 및 PK-PD(약력학) 모델링에서의 다른 연구의 데이터와 조합하고, 메트포르민 PK에 대해 ALT-801의 존재 하에서 시간 경과에 따른 메트포르민 농도의 변화를 평가할 것이다. 또한, 면역원성을 평가하기 위해 혈액 샘플도 수집될 것이다.
안전성 종료점은 부작용(AE), 활력 징후 및 심박수-혈압의 곱(평균 심박수 x 평균 수축기 혈압으로서 계산된 RPP), 간 기능 검사 및 혈청 혈당을 포함하는 안전성 실험, 소변 검사, 신체 검사, 주사 부위 반응 및 면역원성(중화 항체)이 포함된다. 약력학(PD) 종료점에는 기준선과 비교하여 MRI-PDFF에 의한 간 지방 분획의 변화(상대적 및 절대적 변화 %, 간 지방 분획에서 30%, 40% 및 50%의 상대적 감소를 달성한 대상체의 비율, 간 지방의 정상화를 보인 대상체의 비율), 신체 측정 파라미터(MRI 스캐닝에 의한 체중, 허리 둘레 및 체성분), 지질 대사(총 콜레스테롤(TC), 저밀도 지단백질 콜레스테롤(LDL-C), 저밀도 지단백질 콜레스테롤(LDL-C), 고밀도 지단백질 콜레스테롤(HDL-C), 아포지단백질 A(Apo A) 및 B(Apo B), 지단백질(a), 트리글리세라이드(TG)), 대사 마커(헤모글로빈 A1c(HbA1c), 아디포넥틴, 렙틴), 염증 마커(TNF, 고감도 C-반응성 단백질(hs-CRP), 단핵구 화학유인 단백질-1(MCP-1), 인터루킨-6(IL-6), 플라스미노겐 활성화인자 억제제-1(PAI-1)), 섬유증 마커(N-말단 유형 III 콜라겐 프로펩타이드(Pro-C3), 강화된 간 섬유증(ELF) 시험), 지방 독성 마커, 삶의 질 종료점 및 약동학(PK) 종료점이 포함된다. NAFLD에 대한 이전 연구에서 관찰된 치료 효과를 기반으로, 이 연구는 ALT-801을 가진 대상체와 위약 SC 주사를 맞은 대상체에서 기준선과 비교하여 MRI-PDFF에 의한 간 지방 분획 변화의 의미 있는 차이를 0.05 유의 수준(양측 검정)으로 검출할 수 있는 충분한 검정력을 가지고 있다. 적어도 1회 용량의 연구 약물을 투여받은 모든 무작위 배정 대상체(안전성 집단)가 안전성 분석에 포함될 것이다.
안전성 목적은 NAFLD를 가진 대상체에서 ALT-801의 안전성 및 내약성을 평가하는 것이다. 1차 안전성 종료점에는 부작용(AE), 활력 징후, 심박수-혈압의 곱(평균 심박수 x 평균 수축기 혈압), 간 기능 검사, 고혈당 및 저혈당 부작용 발생률, 신체 검사, 주사 부위 반응 및 면역원성이 포함된다. 2차 안전성 종료점에는 공복 혈청 혈당, CGM 파라미터(포도당 농도-시간 프로파일 아래 면적, 범위 내 시간, 고혈당증 및 저혈당증) 및 HbA1c를 포함하는 기준선 혈당 파라미터로부터의 변화가 포함된다. 지속적인 안전성 데이터는 용량 수준 및 치료(활성제 또는 위약)별로 기술 통계(산술 평균, 표준 편차[SD], 중앙값, 최소값 및 최대값)로 요약될 것이다. 범주별 안전성 데이터는 해당되는 경우 용량 수준, 치료 그룹 및 날짜별 빈도 수 및 백분율로 요약될 것이다. AE는 최신 MedDRA(Medical Dictionary for Regulatory Activities) 버전을 사용하여 코딩될 것이다. 약어, 선호 용어, 신체 기관 분류(SOC), 치료, 중증도 및 연구 약물과의 관계를 포함하는 대상체별 AE 데이터 목록이 제공될 것이다. 치료 관련 AE(TEAE)를 경험한 대상체의 수 및 개별 TEAE 및 주사 부위 반응의 수가 치료 그룹, SOC 및 선호 용어별로 요약될 것이다. 또한, TEAE는 중증도 및 연구 약물과의 관계에 따라 요약될 것이다. 간기능 시험 및 공복 혈청 혈당을 포함하는 실험실 평가, 활력 징후(RPP의 계산 포함), 및 ECG 평가가 치료 그룹, 용량 수준 및 프로토콜 지정 수집 시점별로 요약될 것이다. 치료 그룹에 의해 각각의 프로토콜 지정된 시점에서 기준선으로부터의 변화의 요약도 제시될 것이다. 신체 검사의 변화는 각각의 대상체에 대해 나열될 것이다. 병용 약물은 대상체별로 나열되고 세계 보건 기구(WHO) 약물 사전의 최신 버전을 사용하여 코딩될 것이다. 병력은 최신 MedDRA 버전을 사용하여 코딩되며, 대상체별로 나열될 것이다.
약력학(PD) 목적은 NASH 대상체에서 간 지방 분획, 신체 측정 파라미터(예를 들어, 체중, 허리 둘레, BMI), 지질 대사(예를 들어, 콜레스테롤(총, 저밀도 지단백질(LDL-C), 고밀도 지단백질(HDL-C), 아포지단백질(Apo) A 및 B, 지단백질(a), 트리글리세라이드(TG)), 대사 마커(예를 들어, 렙틴, 헤모글로빈 A1c(HbA1c), 아디포넥틴), 염증 마커(예를 들어, 종양 괴사 인자(TNF), 고감도 C-반응성 단백질(hs-CRP), 플라스미노겐 활성화인자 억제제-1(PAI-1), 단핵구 화학유인 단백질-1(MCP-1), 인터루킨-6(IL-6), 및 플라스미노겐 활성화인자 억제제-1(PAI-1)), 섬유증 마커(예를 들어, N-말단 유형 III 콜라겐 프로펩타이드(Pro-C3), 강화된 간 섬유증(ELF) 시험), 및 지방 독성 마커에 대한 ALT-801의 효과를 평가하는 것이다. 인슐린 감수성 및 분비, 신체 측정 파라미터, 지질 대사, 대사 마커, 지방 독성 마커 및 염증 마컹 변화는 기술 통계(샘플 크기(N), 산술 평균, SD, 중앙값, 최소값, 최대값, 기하 평균 및 기하 변동 계수(CV%))를 사용하여 치료 그룹별로 나열 및 요약될 것이다. PD 파라미터에 대한 기준선 BMI의 영향은 공변량 분석에 의해 평가될 것이다.
또한, 삶의 질(QoL) 효과도 모니터링된다(기준선과 비교하여 Short Form-36의 변화 및 삶의 질에 대한 체중의 영향-라이트 임상 시험 버전(CT용 IWQoL-Lite)). 신체 건강 및 정신 건강에 대한 2개의 요약 점수, 및 SF-36에 대한 8개의 영역 점수 및 CT용 IWQoL-Lite에 대한 복합 점수의 기준선으로부터의 변경 사항이 기술 통계(N, 산술 평균, SD, 중앙값, 최소값, 최대값, 기하 평균 및 기하 CV%)와 함께 치료 그룹별로 나열 및 요약될 것이다. 위에서 설명한 바와 같이, 연속 종료점에 적용할 수 있는 추론 통계가 적용될 것이다.
약동학(PK) 목적은 ALT-801 농도 및 기준선 메트포르민 농도로부터의 변화를 평가하는 것이다. 개별 ALT-801 및 메트포르민 농도 데이터가 기술 통계(N, 산술 평균, SD, CV%, 중앙값, 최소값 및 최대값)와 함께 치료 그룹 및 시점별로 나열되고 요약될 것이다. 각각의 코호트에 대한 개별 및 평균 ± SD ALT-801 농도-시간 프로파일도 그래픽으로 표시될 것이다. 기준선 메트포르민 농도로부터의 변화가 기술 통계(N, 산술 평균, SD, CV%, 중앙값, 최소값 및 최대값)와 함께 치료 그룹 및 시점별로 나열 및 요약될 것이다. 집단 PK 모델이 개별 대상체의 ALT-801 혈장 농도 시간 곡선 및 관련 PK 파라미터의 예측을 가능하게 하기 위해 개발될 것이다. 성별, 연령, 체중, BMI, 및 병용 약물을 포함하는 공변량이 가능한 경우 조사될 것이고, 노출 반응 관계가 가능한 경우 효능 및 안전성에 대해 조사될 것이다.
이 시험의 결과는 NASH가 있는 대상체에서 최대 12회 용량으로 매주 1회 피하(SC) 주사로 투여되는 ALT-801이 안전하고 내약성이 양호하며, 대상체에서 긍정적인 PD, 삶의 질 및 PK 효과, 및 혈당 조절을 유도할 수 있다는 것을 보여줄 것이다.
실시예 8: ALT-801을 사용한 치료에 의한 간 지방의 감소
본 실시예는 인간 대상체에서 간 지방 분획에 대한 ALT-801의 효과를 평가하는 연구를 설명한다. 포함 기준을 충족하고 제외 기준을 충족하지 않는 대상체는 다음 치료 아암 중 하나에 1:1:1:1로 무작위 배정된다: 1) ALT-801 1.2 mg SC, 12주 동안 매주 1회; 2) ALT-801 1.8 mg SC, 12주 동안 매주 1회; 3) 제1주에 ALT-801 0.6 mg SC, 제2주에 1.2 mg SC, 2주(제3주 및 제4주) 동안 1.8 mg SC, 매주 1회, 및 제5주에서 제12주까지 2.4 mg SC, 매주 1회; 또는, 위약(0.9% NaCl) 피하(SC), 12주 동안 매주 1회. 결과는 표 19-23(또한, 이전 실시예의 표 11 및 16-18 참조) 및 도 6-13에 제시되어 있다. 도 6-8은 측정 가능한 모든 대상체에 대한 데이터를 나타내며, 유의한 안전성 문제 없이 간 지방이 감소함을 보여준다. 도 9-10은 지방증 대상체(지장 간 질환이 존재하는 대상체)에 관한 데이터를 보여준다.
*LOD(검출 한계) = 1.5%; 절대적 및 상대적 변화(△)의 경우, LOD 미만의 값은 0.75%로 설정된다.
*LOD(검출 한계) = 1.5%; 절대적 및 상대적 변화(△)의 경우, LOD 미만의 값은 0.75%로 설정된다.
*1.8 mg 용량을 투여받은 대상체 1명 및 위약을 투여받은 대상체 1명은 3-5배의 ALT 상승을 경험하였고, 후속 약물 투여로 해결되었다. 1.8 mg 용량에서 가장 흔하게 경도 AE가 발생하였으며, 이는 약물 해결이 가능하고 치료를 필요로 하지 않았다. 부작용(AE)으로 인한 연구 중단은 발생하지 않았다.
위에서 나타낸 바와 같이, 1.8 및 2.4 mg의 ALT-801로 6주간 치료한 후 기준선에서 MRI-PDFF > 5%를 갖는 대상체에서 MRI-PDFF에 의해 결정된 간 지방 함량의 뚜렷한 변화(90% 초과의 평균 상대적 변화)가 관찰되었다. 제6주의 평균 체중 감소는 ALT-801 1.2 mg, 1.8 및 2.4 mg에서 각각 1.8%, 5.4% 및 4.7%이었으며, 위약에서는 0.9%의 평균 체중 증가가 관찰되었다. 이 시험의 결과는 ALT-801이 지방증(지방간 질환)이 있는 대상체를 포함하여 대상체에서 간 지방을 감소시켰음을 보여준다. PK 프로파일은 매주 투여가 적절함을 확인하였다. 또한, 혈압 및 혈청 지질 수치도 모든 그룹에서 개선되었다. 포도당 항상성이 유지되었다. 또한, 지방 연소 증가(예상되는 글루카곤 효과)의 지표인 케톤체 생성도 개선되었다.
시약 및 이를 사용하는 방법의 다른 이점은 관련 기술 분야의 통상의 기술자가 이해하는 바와 같이 본원에서 또한 제공된다. 특정 실시양태가 바람직한 실시양태의 관점에서 설명되었지만, 변형 및 수정이 관련 기술 분야의 통상의 기술자에 의해 이루어질 수 있다는 것이 이해된다. 따라서, 첨부되는 청구범위는 다음 청구항의 범위 내에 있는 모든 상기 동등한 변형을 포함하는 것으로 의도된다.
SEQUENCE LISTING <110> Spitfire Pharma <120> Therapeutic Regimens and Methods for Lowering Blood Glucose and/or Body Weight using GLP-1R and GCGR Balanced Agonists <130> MED008.PCT <150> 63/122,117 <151> 2021-12-07 <150> 63/211,157 <151> 2021-06-16 <150> 63/249,468 <151> 2021-09-28 <160> 11 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 30 <212> PRT <213> Artificial squence <220> <223> Synthetic Peptide <220> <221> MOD_RES <222> (2)..(2) <223> Aib <220> <221> SITE <222> (16)..(16) <223> Glu side chain lactam linkage to Lys <220> <221> SITE <222> (16)..(20) <223> cyclic <220> <221> MOD_RES <222> (17)..(17) <223> Z17CO2H <220> <221> SITE <222> (20)..(20) <223> Lys side chain lactam linkage to Glu <220> <221> MOD_RES <222> (30)..(30) <223> NH2 <400> 1 His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu 1 5 10 15 Lys Ala Ala Lys Glu Phe Ile Gln Trp Leu Leu Gln Thr Xaa 20 25 30 <210> 2 <211> 30 <212> PRT <213> Artificial squence <220> <223> Synthetic Peptide <220> <221> MOD_RES <222> (2)..(2) <223> Aib <220> <221> SITE <222> (16)..(16) <223> Glu side chain lactam linkage to Lys <220> <221> SITE <222> (16)..(20) <223> cyclic <220> <221> MOD_RES <222> (17)..(17) <223> Me15CO2H <220> <221> SITE <222> (20)..(20) <223> Lys side chain lactam linkage to Glu <220> <221> MOD_RES <222> (30)..(30) <223> NH2 <400> 2 His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu 1 5 10 15 Lys Ala Ala Lys Glu Phe Ile Gln Trp Leu Leu Gln Thr Xaa 20 25 30 <210> 3 <211> 30 <212> PRT <213> Artificial squence <220> <223> Synthetic Peptide <220> <221> MOD_RES <222> (2)..(2) <223> Aib <220> <221> SITE <222> (16)..(16) <223> Glu side chain lactam linkage to Lys <220> <221> SITE <222> (16)..(20) <223> cyclic <220> <221> SITE <222> (20)..(20) <223> Lys side chain lactam linkage to Glu <220> <221> MOD_RES <222> (24)..(24) <223> Z15CO2H <220> <221> MOD_RES <222> (30)..(30) <223> NH2 <400> 3 His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu 1 5 10 15 Gln Ala Ala Lys Glu Phe 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Claims (39)

  1. 인간의 혈당 저하, 체중 감소 및/또는 간 지방 감소 방법으로서, 서열 번호 1을 포함하는 약제학적 투여 제제의 치료 유효량을 매주 1회 인간에게 투여하는 것을 포함하고, 하나 이상의 부작용의 발생이 GLP-1R 및 GCGR에 대한 불균형한 친화도를 갖는 작용제와 비교하여 감소되며, 상기 부작용은 인간에게 투여 시 메스꺼움, 구토, 설사, 복통 및 변비로부터 선택되는 것인 방법.
  2. 제1항에 있어서, 상기 방법이
    a) GLP-1R 및 GCGR에 대해 불균형한 친화도를 갖는 작용제와 비교하여 인간에게 투여 시 메스꺼움, 구토, 설사, 복통 및 변비로부터 선택되는 하나 이상의 부작용의 발생률을 감소시키고/시키거나;
    b) 세마글루타이드의 대략 등몰 투여량을 투여하는 방법과 비교할 때, 투여 대략 48 또는 96시간 후에 대략 50% 더 낮은 혈당, 투여 대략 72시간 후에 대략 100% 더 낮은 혈당, 및 /또는 투여 대략 120시간 후에 더 낮은 혈당을 유도하고/하거나;
    c) 전신 체중 감소를 유도하고/하거나 간 지방 감소를 유도하고/하거나;
    d) 세마글루타이드의 대략 등몰 투여량이 투여되는 방법과 비교할 때,
    더 낮은 Cmax 또는 선택적으로 약 50% 더 낮은 Cmax;
    대략 같거나 더 큰 Tmax 또는 선택적으로 약 100% 더 큰 Tmax;
    유사한 AUC(0-inf) 또는 선택적으로 대략 85-93% AUC(0-inf);
    대략 같거나 더 낮은 T1/2(hr) 또는 선택적으로 대략 50-75% T1/2(hr);
    연장된 MRT(hr) 또는 선택적으로 적어도 약 25% 더 긴 MRT(hr);
    동일하거나 더 큰 당 조절 효과를 나타내는 지속된 PK/PD 프로파일;
    더 큰 전신 체중 감소 또는 선택적으로 약 2배의 전신 체중 감소;
    더 낮은 체지방량, 선택적으로 약 100% 더 낮은 체지방량; 및/또는
    방법이 비알코올성 지방간 질환(NAFLD) 및/또는 비알코올성 지방간염(NASH)을 치료할 때, 전신 체중 감소의 증가, 간 중량의 감소, NAS 점수의 개선, 간지방증의 개선, 팽창의 개선, col1A1 염색의 개선, ALT의 개선, 간 TG/TC의 개선, 및 혈장 TG/TC의 개선
    을 유도하고/하거나;
    e) 대략 등몰 투여량으로 투여된 세마글루타이드와 비교하여, 투여 제제의 투여 후 대략 14일까지 더 큰 체중 감소, 선택적으로 약 15% 더 큰 체중 감소를 유도하고/하거나; 투여 제제의 투여 후 대략 20-28일까지 더 큰 체중 감소를 유도하고/하거나;
    f) 인간의 체중을 군살이 없는 정상 인간의 정상 체중 범위로 회복하기에 충분한 비만 인간의 체중 감소를 유도하는 것인 방법.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 방법이 비만 치료인 방법.
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서, 방법이 혈당 조절을 위한 치료인 방법.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 방법이 약제학적 투여 제제의 치료 용량을 적정하기 위한 치료 개시 단계를 포함하지 않는 것인 방법.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 방법이 혈당 조절, 비만, NAFLD, NASH 및/또는 지방증에 대한 1차 치료인 방법.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 식이요법 및/또는 운동과 함께 시행되는 보조 치료인 방법.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 인간이 제2형 당뇨병을 갖고, 선택적으로 인간이 또한 확립된 심혈관 질환을 나타내는 것인 방법.
  9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 약제학적 투여량이 약 2주 내지 약 8주 또는 그 초과의 기간 동안 대략 매주 투여되는 것인 방법.
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 대략 등몰 투여량의 세마글루타이드의 투여와 비교하여 약 4 내지 약 8주 동안, 선택적으로 약 6주 동안 매주 투여량으로서 인간에게 약제학적 투여량을 투여하는 것이 인간에게 투여한 지 약 1주, 약 2주, 약 3주, 약 4주, 약 5주, 약 6주 또는 약 7주 후에 더 큰 전신 체중 감소를 유도하는 것인 방법.
  11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 약제학적 투여량이 약 제1일, 제8일, 제15일, 제22일, 제29일 및 제36일에 투여되는 것인 방법.
  12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 대략 등몰 투여량의 세마글루타이드의 투여와 비교하여 인간에게 단일 용량을 투여하는 것이 투여한 지 약 1일, 약 2일, 약 3일, 약 4일, 약 5일, 약 6일 또는 약 7일 후에 더 낮은 혈당을 유도하는 것인 방법.
  13. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 대략 등몰 투여량의 세마글루타이드의 투여와 비교하여 약 4주 내지 약 8주 동안, 선택적으로 약 6주 동안 매주 투여량을 인간에게 투여하는 것이 투여한 지 약 1주, 약 2주, 약 3주, 약 4주, 약 5주, 약 6주 또는 약 7주 후에 더 큰 전신 체중 감소를 유도하는 것인 방법.
  14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 대략 등몰 투여량의 세마글루타이드의 투여와 비교하여 단일 투여량을 인간에게 투여하는 것이 투여한 지 약 1일, 약 2일, 약 3일, 약 4일, 약 5일, 약 6일 또는 약 7일 후에 더 낮은 Cmax를 나타내는 것인 방법.
  15. 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 주당 약 0.5 내지 약 10 mg; 선택적으로 주당 약 1 내지 약 7 mg, 주당 약 1 내지 약 5 mg; 주당 약 1 내지 약 2 mg; 주당 약 1.2 mg; 또는 주당 약 1.8 mg의 약제학적 투여량을 투여하는 것을 포함하는 방법.
  16. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 약제학적 투여량이 선택적으로 적어도 1개월 동안 주당 약 1회 또는 2주마다 1회 투여되고; 선택적으로 각각의 투여량이 대략 동일한 양의 서열 번호 1을 포함하는 것인 방법.
  17. 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 치료 용량에 도달하는 시간이 약 4주 이하인 방법.
  18. 제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 약제학적 투여량이 1주 이상 동안 매주 제1 용량으로 투여되고, 이어서 1주 이상 동안 매주 더 높은 제2 용량으로 투여되는 것인 방법.
  19. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 약제학적 투여 제제의 투여가 약 400 내지 약 1300 ng/ml의 Cmax; 약 10 내지 약 36시간의 Tmax; 및/또는 약 15,000 내지 45,000 h*ng/mL의 AUC0-48을 나타내는 것인 방법.
  20. 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 인간의 체중 감소가 적어도 5%, 적어도 10%; 또는 약 1% 내지 약 20%; 또는 약 5% 내지 약 10%(w/w)인 방법.
  21. 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 인간에 대한 약제학적 투여 제제의 투여가 비만인 인간을 군살이 없는 정상 인간의 정상 체중 범위로 회복하기에 충분한 체중 감소를 비만인 인간에서 유도하는 것인 방법.
  22. 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 약제학적 투여 제제가 피하로 투여되는 것인 방법.
  23. 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 약제학적 투여 제제가 폴리소르베이트 20, 아르기닌 또는 만니톨 중 하나 이상을 포함하는 수성 제제인 방법.
  24. 제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 약제학적 투여 제제가 탈이온수(pH 7.7 ± 0.1) 중의 약 0.025-0.075%(w/w) 폴리소르베이트 20, 약 0.2-0.5%(w/w) 아르기닌, 약 3-6%(w/w) 만니톨; 선택적으로 탈이온수(pH 7.7 ± 0.1) 중의 약 0.050%(w/w) 폴리소르베이트 20, 약 0.348%(w/w) 아르기닌, 약 4.260%(w/w) 만니톨을 포함하는 것인 방법.
  25. 제1항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, 약 1.8 mg의 서열 번호 1을 포함하는 약제학적 투여 제제가 적어도 6주 동안 주당 1회 인간에게 투여되고, 적어도 약 3-5%의 전신 체중 감소, 선택적으로 5% 초과의 전신 체중 감소를 유도하는 것인 방법.
  26. 제25항에 있어서, 위약과 비교하여 전신 체중 감소의 순 변화가 적어도 약 6%, 선택적으로 약 6.3%인 방법.
  27. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 약 1.2 mg의 서열 번호 1을 포함하는 약제학적 투여 제제가 적어도 6주 동안 주당 1회 인간에게 투여되고, 적어도 약 2%의 전신 체중 감소, 선택적으로 약 1.8%의 전신 체중 감소를 유도하는 것인 방법.
  28. 제27항에 있어서, 위약과 비교하여 전신 체중 감소의 순 변화가 적어도 약 3%, 선택적으로 약 2.7%인 방법.
  29. 제25항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, 약제학적 투여 제제가 피하로 투여되는 것인 방법.
  30. 인간의 체중 감소를 유도함으로써 적어도 25의 체질량 지수(BMI; kg/m2)를 갖는 인간의 만성 체중 관리를 위한 치료 방법으로서, 서열 번호 1을 포함하는 약제학적 투여 제제의 치료 유효량을 인간에게 매주 1회 투여하는 것을 포함하고, 여기서 인간의 체중은 제12주에 기준선으로부터 적어도 5% 감소되는 것인 방법.
  31. 제30항에 있어서, 인간의 체중이 제12주에 기준선으로부터 적어도 6%; 제12주에 기준선으로부터 적어도 7%; 제12주에 기준선으로부터 적어도 8%; 제12주에 기준선으로부터 적어도 9% 또는 제12주에 기준선으로부터 적어도 10% 감소되는 것인 방법.
  32. 제30항에 있어서, 서열 번호 1을 포함하는 약제학적 투여 제제의 매주 1회 치료 유효량이 서열 번호 1 약 1.8 mg인 방법.
  33. 제30항에 있어서, 치료는 증가된 신체 활동 및/또는 저칼로리 식이요법과 함께 시행되는 보조 치료인 방법.
  34. 제30항에 있어서, 치료는 증가된 신체 활동 및/또는 저칼로리 식이요법과 조합되지 않는 것인 방법.
  35. 제30항에 있어서, 인간의 BMI가 적어도 30 kg/m2인 방법.
  36. 제30항에 있어서, 제0주의 인간이 당뇨병에 걸리지 않은 것인 방법.
  37. 제30항에 있어서, 약제학적 투여 제제가 인간에게 피하로 투여되는 것인 방법.
  38. 제32항에 있어서, 약제학적 투여 제제가 적어도 6주 동안 주당 1회 인간에게 투여되고, 적어도 약 3%의 전신 체중 감소를 유도하는 것인 방법.
  39. 제1항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, 간 지방을 감소시키는 방법.
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