KR20230120267A - A novel lactobacillus gaseri GFC_1220 strain with anti-inflammatory and antibacterial effects and fermented products prepared using it - Google Patents

A novel lactobacillus gaseri GFC_1220 strain with anti-inflammatory and antibacterial effects and fermented products prepared using it Download PDF

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KR20230120267A
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강희철
민진우
한우리자랑
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(주)지에프씨생명과학
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Abstract

본 발명은 신규한 락토바실러스 가세리 GFC_1220(Lactobacillus gasseri GFC_1220)균주(기탁번호:KCTC13840BP), 이를 이용하여 제조된 발효물에 관한 것이다.
본 발명으로부터 제공되는 신규한 락토바실러스 가세리 GFC_1220(Lactobacillus gasseri GFC_1220)균주(기탁번호:KCTC13840BP) 배양액의 피부-마이크로바이옴(skin-microbiome) 변화유도(염증을 일으키는 S. aures 균주의 감소), 염증의 감소, 항균 효과가 우수하기 때문에, 이를 유효 성분으로 화장료 베이스에 적용하였을 때 화장료 조성물로서의 효과가 우수하다.
The present invention relates to a novel Lactobacillus gasseri GFC_1220 (Accession Number: KCTC13840BP) strain, and a fermented product prepared using the same.
Induction of skin-microbiome changes in the culture medium of the novel Lactobacillus gasseri GFC_1220 strain (accession number: KCTC13840BP) provided by the present invention (reduction of inflammatory S. aures strains), Since it has excellent anti-inflammatory and antibacterial effects, it has excellent effects as a cosmetic composition when applied to a cosmetic base as an active ingredient.

Description

항염증 및 항균 효능을 갖는 신규의 락토바실러스 가세리 GFC_1220 균주 및 이를 이용하여 제조된 발효물 {A novel lactobacillus gaseri GFC_1220 strain with anti-inflammatory and antibacterial effects and fermented products prepared using it} A novel lactobacillus gaseri GFC_1220 strain with anti-inflammatory and antibacterial effects and fermented products prepared using it

본 발명은 항염증 및 항균 효능을 갖는 신규의 락토바실러스 가세리 GFC_1220 및 이를 이용하여 제조된 발효물에 관한 것이다.The present invention relates to a novel Lactobacillus gasseri GFC_1220 having anti-inflammatory and antibacterial effects and a fermented product prepared using the same.

피부의 생태계는 미생물에게 다양한 형태의 서식처를 제공하며, 광범위한 미생물들이 살고 있다. 숙주인 사람은 이들과 공생관계를 이루고 있으며, 숙주에 많은 긍정적인 영향을 미친다고 알려져 있다. 피부는 함입부, 특화되어있는 틈새 등 다양한 형태의 서식처를 구성하고 있으며, 넓은 분포의 미생물이 자랄 수 있도록 돕는다. 기본적으로 피부는 물리적인 막을 형성하며, 외부로부터 잠재적인 위험요소 및 독성 물질들로부터 방어를 하도록 도와준다. 피부는 외부환경과의 접속지점이 되며, 다양한 미생물들(진균, 세균, 바이러스 및 작은 유충)의 집합소이기도 하다. 물리적 및 화학적 기능의 선택에 맞게 미생물들은 특화된 틈새에 적응하여 서식처를 마련한다. 일반적으로 피부는 차갑고, 산성 성질을 나타내며, 건조된 상태로 유지된다. 구조적으로 표피(epidermis)는 피부장벽을 이루고 있으며, 미생물과 독소가 침투하는 것을 차단하고, 수분을 유지하는 중요한 역할을 한다. 표피의 최상위층은 각질층(stratum corneum)으로 구성되어 있고, 각질세포(keratinocyte)와는 분화하여 떨어져 있다. 상기 표피는, 일명 “벽돌과 몰탈 구조”라고 불리는 형태를 띄고 있다. 피부 조직은 계속적인 자가회복과정을 거치는데, 분화과정의 마지막을 거친 인설(squames)은 끊임없이 피부조직에서 탈락되는 과정을 반복하게 된다.The ecosystem of the skin provides various types of habitats for microorganisms, and a wide range of microorganisms live there. The human host forms a symbiotic relationship with them and is known to have many positive effects on the host. The skin constitutes various types of habitats, such as indentations and specialized crevices, and helps a wide range of microorganisms to grow. Basically, the skin forms a physical barrier and helps to defend against potential risk factors and toxic substances from the outside. The skin becomes a point of contact with the external environment and is also a gathering place for various microorganisms (fungi, bacteria, viruses, and small larvae). Depending on the selection of physical and chemical functions, microorganisms adapt and establish habitats in specialized niches. In general, the skin is cold, has an acidic nature, and remains dry. Structurally, the epidermis forms the skin barrier, blocks the penetration of microorganisms and toxins, and plays an important role in maintaining moisture. The uppermost layer of the epidermis is composed of the stratum corneum and differentiated from keratinocytes. The epidermis has a form called a so-called “brick and mortar structure”. The skin tissue undergoes a continuous self-healing process, and the squames that have passed through the end of the differentiation process repeat the process of being constantly eliminated from the skin tissue.

한편, 당류를 발효하여 에너지를 획득하고 다량의 락트산을 생성하는 세균을 총칭하여 유산균(Lactic acid bacteria)이라고 한다. 유산균은 장내에 서식하면서 인체의 소화계와 공생을 하며 섬유질 및 복합 단백질을 분해하여 중요한 영양성분으로 만드는 역할을 담당한다. 또한, 장내 환경을 산성으로 유지시킴으로 유해세균의 성장을 억제하고 설사 및 변비 개선, 비타민 합성, 혈중 콜레스테롤 저해 등의 역할을 한다. 유산균은 장의 점막과 상피세포에 강하게 결합할 수 있는 특성이 있어 정장작용에 많은 도움을 주며, 대식세포 및 비장의 활성을 증진하여 면역반응에 관여하는 물질을 분비 및 촉진하는 효과를 나타낸다. 또한, 면역 조절 기능도 가지고 있어 아토피 및 알러지 관련 질환에 효과가 있다. Meanwhile, bacteria that obtain energy by fermenting sugars and produce a large amount of lactic acid are collectively referred to as lactic acid bacteria. Lactic acid bacteria live in the intestines and live in symbiosis with the digestive system of the human body, and play a role in breaking down fiber and complex proteins into important nutrients. In addition, by keeping the intestinal environment acidic, it inhibits the growth of harmful bacteria, improves diarrhea and constipation, synthesizes vitamins, and lowers blood cholesterol. Lactic acid bacteria have the property of being able to bind strongly to intestinal mucosa and epithelial cells, so they help a lot in the intestinal function, and promote the activity of macrophages and spleen to secrete and promote substances involved in the immune response. In addition, it has an immunomodulatory function, so it is effective for atopy and allergy-related diseases.

화장품 분야에서는 유산균 배양액이 1955년 상품화된 이후 현재까지 사용되고 있는데 주로 스트랩토코커스(Streptococcus) 속, 락토바실러스(Lactobacillus) 속, 락토코커스(Lactococcus) 속, 류코노스톡(Leuconostoc) 속, 비피도박테리움(Bifidobacterium) 속 등을 이용하여 직접 배양액에 발효하여 여과하거나 추출하는 등의 원료 형태 및 활성 소재에 접종하여 발효한 후 여과하거나 추출하는 등의 연구가 활발하게 이루어지고 있다. In the field of cosmetics, lactobacillus culture medium has been commercialized in 1955 and has been used until now, mainly Streptococcus, Lactobacillus , Lactococcus , Leuconostoc , and Bifidobacterium. ( Bifidobacterium ) Researches are being actively conducted such as filtering or extracting by directly fermenting the culture medium using the genus, etc., and filtering or extracting after inoculating and fermenting the raw material form and active material.

그 중에서도 락토바실러스(Lactobacillus) 속을 이용하여 다양한 용도에 적용되고 있는 기술로는, 대한민국 등록특허공보 제10-1801764호「양모 촉진 활성을 갖는 락토바실러스 카베투스 WIKIN55 및 이를 포함하는 조성물, 대한민국 등록특허공보 제10-2137252호「락토바실러스 플란타넘 J2K- 27 균주를 이용한 스트레스성 탈모방지용 혼합 발효 추출물 및 그 제조 방법, 그 혼합 발효 추출물을 함유하는 화장료 조성물」등이 개시되어 있다.Among them, as a technology applied to various uses using the genus Lactobacillus , Korean Patent Registration No. 10-1801764 "Lactobacillus cabetus WIKIN55 having hair promoting activity and a composition containing the same, Korean registered patent Publication No. 10-2137252, “Mixed fermented extract for preventing stress-induced hair loss using strain Lactobacillus plantanum J2K-27, manufacturing method thereof, and cosmetic composition containing the mixed fermented extract” and the like are disclosed.

피부 생태환경을 다시 살펴보면, 물리적인 요소들과 생물학적인 요소들이 잘 어우러져 다양한 서식처를 제공하며, 더 나아가 사람과 미생물 사이의 미묘한 균형에 대해 생각해 볼 수 있을 것이다. 공생관계의 균형이 무너지게 되면 그와 동시에 피부의 붕괴와 감염이 발생하게 된다.Looking back at the skin ecological environment, physical and biological factors are well harmonized to provide various habitats, and furthermore, we can think about the delicate balance between humans and microbes. When the balance of the symbiotic relationship collapses, skin breakdown and infection occur at the same time.

이에, 본 발명자들은 락토바실러스 가세리 GFC_1220(Lactobacillus gasseri GFC_1220)균주(기탁번호:KCTC13840BP)를 분리 동정하였고, 이를 이용하여 MRS 배지에 접종하고, 배양하는 단계를 통해 발효물을 제조할 경우, 두피-마이크로바이옴(skin-microbiome) 변화유도(염증을 일으키는 S. aureus 균주의 감소), 염증의 감소 효과를 부여할 수 있다는 사실을 발견하고 본 발명을 완성하게 되었다.Accordingly, the present inventors isolated and identified the Lactobacillus gasseri GFC_1220 strain (accession number: KCTC13840BP), and used it to inoculate the MRS medium and prepare a fermented product through the culturing step, scalp- The present invention was completed by discovering that it could induce skin-microbiome changes (reduction of inflammatory S. aureus strains) and reduce inflammation.

본 발명의 목적은 피부-마이크로바이옴(skin-microbiome) 변화유도(염증을 일으키는 S. aureus 균주의 감소), 염증의 감소 및 항균 효과를 갖는 신규한 균주를 제공하는 데 있다.An object of the present invention is to provide a novel strain having skin-microbiome change induction (reduction of inflammatory S. aureus strains), inflammation reduction and antibacterial effect.

본 발명의 다른 목적은 신규한 균주를 효능활성이 극대화 되게 조성된 배지에 접종하고, 배양하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 발효물의 제조방법 및 이로부터 제조된 발효물을 제공하는 데 있다.Another object of the present invention is to provide a method for producing a fermented product comprising the step of inoculating and culturing a novel strain in a medium formulated to maximize efficacy and activity, and a fermented product prepared therefrom.

본 발명의 또 다른 목적은 신규한 균주의 발효물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물을 제공하는 데 있다.Another object of the present invention is to provide a cosmetic composition comprising a fermented product of a novel strain as an active ingredient.

상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 피부-마이크로바이옴(skin-microbiome) 변화유도(염증을 일으키는 S. aureus 균주의 감소), 염증의 감소, 항균 효과 효과를 갖는 락토바실러스 가세리 GFC_1220(Lactobacillus gasseri GFC_1220)균주(기탁번호:KCTC13840BP)를 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention induces skin-microbiome changes (reduction of inflammatory S. aureus strains), reduces inflammation, and Lactobacillus gasseri GFC_1220 having antibacterial effects. ( Lactobacillus gasseri GFC_1220) strain (accession number: KCTC13840BP) is provided.

본 발명에 있어서, 상기 균주는 모유 유래인 것을 특징으로 한다.In the present invention, the strain is characterized in that it is derived from breast milk.

또한, 본 발명은 락토바실러스 가세리 GFC_1220(Lactobacillus gasseri GFC_1220)균주(기탁번호:KCTC13840BP)를 효능활성이 극대화 되게 조성된 배지에 접종하고, 배양하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 발효물의 제조방법을 제공한다.In addition, the present invention inoculates the Lactobacillus gasseri GFC_1220 strain (accession number: KCTC13840BP) into a medium formulated to maximize efficacy activity, and a method for producing a fermented product comprising the step of culturing to provide.

본 발명에 있어서, 상기 배지는 Maltose, Lactose, Glycine, Inulin을 포함하는 것을 특징으로 한다.In the present invention, the medium is characterized in that it contains Maltose, Lactose, Glycine, Inulin.

또한, 본 발명에 있어서, 상기 배양은 32 ~ 37℃에서 90 ~ 130시간 동안 수행되는 것을 특징으로 한다.In addition, in the present invention, the culture is characterized in that it is carried out for 90 to 130 hours at 32 ~ 37 ℃.

또한, 본 발명은 락토바실러스 가세리 GFC_1220(Lactobacillus gasseri GFC_1220)균주(기탁번호:KCTC13840BP)로 발효된 발효물을 제공한다.In addition, the present invention provides a fermented product fermented with the Lactobacillus gasseri GFC_1220 strain (Accession Number: KCTC13840BP).

또한, 본 발명은 상기 발효물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a cosmetic composition comprising the fermented product as an active ingredient.

본 발명에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부-마이크로바이옴(skin-microbiome) 변화유도(염증을 일으키는 S. aureus 균주의 감소), 염증의 감소 효과용으로 구성된 군으로부터 선택되는 용도인 것을 특징으로 한다.In the present invention, the cosmetic composition is characterized in that it is selected from the group consisting of skin-microbiome change induction (reduction of inflammatory S. aureus strains) and inflammation reduction effect .

본 발명으로부터 제공되는 락토바실러스 가세리 GFC_1220(Lactobacillus gasseri GFC_1220)균주(기탁번호:KCTC13840BP)는 피부-마이크로바이옴(skin- microbiome) 변화유도(염증을 일으키는 S. aureus 균주의 감소), 염증의 감소 효가 우수하기 때문에, 이를 유효 성분으로 화장료 베이스에 적용하였을 때 화장료 조성물로서의 효과가 우수하다. The Lactobacillus gasseri GFC_1220 strain (accession number: KCTC13840BP) provided by the present invention induces skin-microbiome changes (reduction of inflammatory S. aureus strains) and reduces inflammation Since the effect is excellent, the effect as a cosmetic composition is excellent when applied to a cosmetic base as an active ingredient.

도 1은 본 발명에 따른 락토바실러스 가세리 GFC_1220(Lactobacillus gasseri GFC_1220)균주(기탁번호:KCTC13840BP)의 염기서열을 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명에 따른 뉴락토바실러스 가세리 GFC_1220(Lactobacillus gasseri GFC_1220)균주(기탁번호:KCTC13840BP)의 발효물을 피부에 처리하였을 시 S. aureus 의 감소 변화를 나타낸 것이다.
도 3은 본 발명에 따른 락토바실러스 가세리 GFC_1220(Lactobacillus gasseri GFC_1220)균주(기탁번호:KCTC13840BP) 발효물의 염증성 사이토카인 조절에 의한 항염증를 나타낸 그래프이다.
1 shows the nucleotide sequence of the Lactobacillus gasseri GFC_1220 strain (accession number: KCTC13840BP) according to the present invention.
Figure 2 shows the reduction change of S. aureus when the fermented product of the Lactobacillus gasseri GFC_1220 strain (accession number: KCTC13840BP) according to the present invention is treated on the skin.
Figure 3 is a graph showing anti-inflammation by inflammatory cytokine regulation of the fermentation product of the Lactobacillus gasseri GFC_1220 strain (accession number: KCTC13840BP) according to the present invention.

이에, 본 발명에서는 피부-마이크로바이옴(skin-microbiome) 변화유도(염증을 일으키는 S. aureus 균주의 감소), 염증의 감소 효과를 갖는 균주를 스크리닝하여 우수한 균주를 선발하고, 16s rRNA 염기서열 분석을 실시한 결과, 락토바실러스 가세리와 유사한 염기서열을 가진 신규 미생물임을 확인하였다. 이에, 락토바실러스 가세리 GFC_1220(Lactobacillus gasseri GFC_1220)균주로 명명하고 한국생명공학연구원 생물자원센터에 기탁하였다. Therefore, in the present invention, strains having an effect of inducing skin-microbiome change (reduction of inflammatory S. aureus strains) and reducing inflammation are screened to select excellent strains, and 16s rRNA sequencing analysis As a result, it was confirmed that it was a novel microorganism having a nucleotide sequence similar to that of Lactobacillus gasseri. Accordingly, it was named Lactobacillus gasseri GFC_1220 ( Lactobacillus gasseri GFC_1220) strain and deposited at the Biological Resource Center of Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology.

따라서, 본 발명은 락토바실러스 가세리 GFC_1220(Lactobacillus gasseri GFC_1220)균주(기탁번호:KCTC13840BP)(이하 ‘GFC_1220’로 약칭함)에 관한 것이다.Accordingly, the present invention relates to the Lactobacillus gasseri GFC_1220 strain (accession number: KCTC13840BP) (hereinafter abbreviated as 'GFC_1220').

이때, 상기 GFC_1220 균주는 사람의 모유에서 유래한 것을 특징으로 한다.At this time, the GFC_1220 strain is characterized in that it is derived from human breast milk.

또한, 본 발명은 GFC_1220 균주를 효능활성이 극대화 되게 조성된 배지에 접종하고, 배양하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 발효물의 제조방법에 관한 것이다.In addition, the present invention relates to a method for producing a fermented product comprising the steps of inoculating and culturing the GFC_1220 strain in a medium formulated to maximize efficacious activity.

상기 배양에 사용되는 배지는 Maltose, Lactose, Glycine, Inulin을 포함하는 것을 특징으로 한다. 그 중에서도 MRS 배지(proteose peptone No.3 10g, beef extract 10g, yeast extract 5g, dextrose 20g, Polyoxyethylene sorbitan monooleate 1g, ammonium citrate 2g, maganessium sulfate 0.1g, manganesse selfate 0.05g, dipotassium phosphate 2g, sodium acetate 5g/L, pH 6.5)을 기본으로하여 Maltose 0.5g/L, Lactose 1.0g/L, Glycine 0.5g/L, Inulin 1.0g/L를 추가시킨 배지를 사용하여 발효 된 것이 발효물의 수율을 가장 효과적으로 향상 시키고 염증 유발균주의 감소를 그대화 시킬 수 있는 측면에서 바람직하다. The medium used for the culture is characterized in that it contains Maltose, Lactose, Glycine, and Inulin. Among them, MRS medium (proteose peptone No.3 10g, beef extract 10g, yeast extract 5g, dextrose 20g, polyoxyethylene sorbitan monooleate 1g, ammonium citrate 2g, maganessium sulfate 0.1g, manganesse selfate 0.05g, dipotassium phosphate 2g, sodium acetate 5g/ L, pH 6.5) as a base, and fermented using a medium to which 0.5 g/L of Maltose, 1.0 g/L of Lactose, 0.5 g/L of Glycine, and 1.0 g/L of Inulin were added to improve the yield of the fermentation product most effectively. It is preferable in terms of being able to reduce the inflammation-causing strain.

상기 GFC_1220 균주를 Maltose, Lactose, Glycine 및 Inulin이 첨가 된 MRS 액체배지에 1.0x107 내지 1.0x109의 세균수가 되도록 하여 1~3% 수준으로 접종하고, 배양하는 단계는 혐기성 조건에서 정치 배양을 32 ~ 37℃에서 90 ~ 130시간 동안 수행되는 것을 특징으로 한다. 만일, 배양 온도 및 시간이 상기 범위를 벗어날 경우에는 발효균주의 배양조건이 맞지 않아 충분한 피부-마이크로바이옴(skin-microbiome) 변화유도(염증을 일으키는 S. aureus 균주의 감소), 염증의 감소, 항균 활성을 나타낼 수 없을 뿐만 아니라, 균주 증식이 되지 않기 때문에 바람직하지 않다. The GFC_1220 strain was 1.0x10 7 to 1.0x10 7 to MRS liquid medium supplemented with Maltose, Lactose, Glycine and Inulin. The step of inoculating and culturing at a level of 1 to 3% so that the number of bacteria is 1.0x10 9 is characterized by performing stationary culture at 32 to 37 ° C. for 90 to 130 hours in anaerobic conditions. If the incubation temperature and time are out of the above range, the culture conditions of the fermenting strain are not suitable, leading to sufficient skin-microbiome changes (reduction of inflammatory S. aureus strains), reduction of inflammation, and antibacterial activity. Not only can it not show activity, but it is not preferable because it does not propagate strains.

상기와 같이, 배양된 균주를 pH 3.8~4.2 조건에서 여과한 다음, 상기 여과된 균주를 20~30℃에서 10~16일 동안 숙성하여 발효물을 제조할 수 있다.As described above, the cultured strain is filtered under pH 3.8 to 4.2 conditions, and then the filtered strain is aged at 20 to 30 ° C. for 10 to 16 days to prepare a fermented product.

또한, 본 발명 락토바실러스 가세리 GFC_1220(Lactobacillus gasseri GFC_1220)균주(기탁번호:KCTC13840BP)의 발효물이 피부-마이크로바이옴(skin-microbiome) 변화유도(염증을 일으키는 S. aureus 균주의 감소), 염증의 감소, 항균 효과가 있어 화장료 조성물로서의 효과가 매우 우수하다.In addition, the fermented product of the Lactobacillus gasseri GFC_1220 strain (accession number: KCTC13840BP) of the present invention induces skin-microbiome changes (reduction of S. aureus strains causing inflammation), inflammation reduction and antibacterial effect, so the effect as a cosmetic composition is very excellent.

따라서, 본 발명은 락토바실러스 가세리 GFC_1220(Lactobacillus gasseri GFC_1220)균주(기탁번호:KCTC13840BP)로 발효된 발효물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물에 관한 것이다.Accordingly, the present invention relates to a cosmetic composition comprising a fermented product fermented with Lactobacillus gasseri GFC_1220 strain (Accession Number: KCTC13840BP) as an active ingredient.

상기 화장료 조성물은 피부-마이크로바이옴(skin-microbiome) 변화유도(염증을 일으키는 S.aureus 균주의 감소), 염증의 감소, 항균 효과용으로 구성된 군으로부터 선택되는 용도인 것일 수 있다.The cosmetic composition may be for use selected from the group consisting of skin-microbiome change induction (reduction of inflammatory S. aureus strains), inflammation reduction, and antibacterial effect.

본 발명의 피부-마이크로바이옴(skin-microbiome) 변화유도(염증을 일으키는 S. aureus 균주의 감소), 염증의 감소, 항균 활성 화장료 조성물은 피부외용연고, 크림, 유연화장수, 영양화장수, 팩, 에센스, 헤어토닉, 샴푸, 린스, 헤어 컨디셔너, 헤어 트리트먼트, 젤, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 마사지 크림, 영양크림, 아이크림, 모이스처 크림, 핸드 크림, 파운데이션, 영양에센스, 선스크린, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디 로션 및 바디 클렌저로 이루어지는 군으로부터 선택된 제형을 가질 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 이들 각 제형의 조성물은 그 제형의 제제화에 필요하고 적절한 각종의 기제와 첨가물을 함유할 수 있으며, 이들 성분의 종류와 양은 당업자에 의해 용이하게 선정될 수 있다.Induction of skin-microbiome change (reduction of inflammatory S. aureus strains), reduction of inflammation, and antibacterial active cosmetic composition of the present invention include external skin ointments, creams, softening lotions, nutrient lotions, packs, Essence, hair tonic, shampoo, conditioner, hair conditioner, hair treatment, gel, skin lotion, skin softener, skin toner, astringent, lotion, milk lotion, moisture lotion, nourishing lotion, massage cream, nourishing cream, eye cream, moisture It may have a formulation selected from the group consisting of cream, hand cream, foundation, nutrient essence, sunscreen, soap, cleansing foam, cleansing lotion, cleansing cream, body lotion and body cleanser, but is not limited thereto. The composition of each of these formulations may contain various bases and additives necessary and appropriate for the formulation of the formulation, and the types and amounts of these components can be easily selected by those skilled in the art.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, animal fiber, vegetable fiber, wax, paraffin, starch, tracanth, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc or zinc acid may be used as a carrier component. can

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.When the formulation of the present invention is a powder or spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as a carrier component, and in particular, in the case of a spray, additional chlorofluorohydrocarbon, propane / May contain a propellant such as butane or dimethyl ether.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르 등이 있다.When the formulation of the present invention is a solution or emulsion, a solvent, solvating agent or emulsifying agent is used as a carrier component, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene glycol, 1 , 3-butyl glycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or sorbitan fatty acid ester.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a suspension, as a carrier component, a liquid diluent such as water, ethanol or propylene glycol, an ethoxylated isostearyl alcohol, a suspending agent such as polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester, microcrystalline Cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracanth and the like may be used.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is surfactant-containing cleansing, as carrier components, aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivative, methyl taurate, sarcosinate, fatty acid amide Ether sulfates, alkylamidobetaines, fatty alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, linolin derivatives, or ethoxylated glycerol fatty acid esters may be used.

본 발명의 항염증 및 항균 증진 효과용 화장료 조성물에서, 상기 발효물은 상기 조성물의 총 중량을 기준으로 0.01 내지 90 중량% 함유되어 있을 수 있고, 바람직하게는 3 내지 15 중량% 함유되어 있을 수 있으나, 바람직한 피부-마이크로바이옴(skin-microbiome) 변화유도(염증을 일으키는 S. aureus 균주의 감소), 염증의 감소, 항균 효과를 제공할 수 있는 유효량을 포함한다면 이에 제한되지 않는다.In the cosmetic composition for anti-inflammatory and antibacterial enhancing effects of the present invention, the fermented product may be contained in an amount of 0.01 to 90% by weight, preferably 3 to 15% by weight, based on the total weight of the composition. , induction of desirable skin-microbiome changes (reduction of inflammatory S. aureus strains), reduction of inflammation, and an effective amount capable of providing antibacterial effects are not limited thereto.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명 하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다. Hereinafter, the present invention will be described in more detail through examples. These examples are only for explaining the present invention in more detail, and it is to those of ordinary skill in the art that the scope of the present invention is not limited by these examples according to the gist of the present invention. It will be self-explanatory.

<실시예 1> 락토바실러스 가세리 GFC_1220(<Example 1> Lactobacillus gasseri GFC_1220 ( Lactobacillus gasseri Lactobacillus gasseri GFC_1220)균주(기탁번호:KCTC13840BP) 균주의 분리Isolation of GFC_1220) strain (accession number: KCTC13840BP) strain

출산 산모의 모유 1ml을 10-4배(부피)로 희석한 샘플 0.1mL을 MRS 한천배지(Peptospecial 10 g, beef extract 10g, yeast extract 5g, Glucose 20g, Triammonium Citrate 2g, sodium acetate 5g, maganessium sulfate 0.2g, manganesse selfate 0.05g, dipotassium phosphate 2g, Agar 15g, Tween80 1g/L, pH 6.2±0.2, MBcell(Cat.No. MB-M1025))에 도말하여 혐기성 인큐베이터에서 37℃에서 2일간 배양하였다. 형성된 집락을 순수 분리 배양하여, 24 시간 동안 혐기 인큐베이터에서 재배양한 후 형성된 단일 colony를 분리하였다. 분리된 균주들 중 피두피-마이크로바이옴(skin-microbiome) 변화유도(염증을 일으키는 S. aureus 균주의 감소), 염증의 감소, 모유두세포의 증식 효과가 우수한 GFC_1220 균주를 선발하였다. 0.1mL of a sample diluted 10 -4 times (volume) of 1ml of mother's milk after giving birth was mixed with MRS agar medium (Peptospecial 10 g, beef extract 10g, yeast extract 5g, Glucose 20g, Triammonium Citrate 2g, sodium acetate 5g, maganessium sulfate 0.2 g, manganesse selfate 0.05g, dipotassium phosphate 2g, Agar 15g, Tween80 1g/L, pH 6.2±0.2, MBcell (Cat.No. MB-M1025)) and incubated at 37°C for 2 days in an anaerobic incubator. The formed colonies were cultured in pure separation and cultured in an anaerobic incubator for 24 hours, and then single colonies formed were isolated. Among the isolated strains, the GFC_1220 strain, which has excellent effects of inducing skin-microbiome changes (reduction of inflammatory S. aureus strains), reduction of inflammation, and proliferation of dermal papilla cells, was selected.

<실시예 2> 선발균주 16s rRNA 염기서열 분석<Example 2> Selected strain 16s rRNA sequencing analysis

최종 선발된 GFC1203H 균주의 gDNA와 Universal primer인 서열번호 1: 27F(5' AGA GTT TGA TCM TGG CTC AG 3')와 서열번호 2: 1492R(5' TAC GGY TAC CTT GTT ACG ACT T 3')를 이용하여 16s DNA 염기서열 분석을 통하여 락토바실러스 가세리 (Lactobacillus gasseri)와 상동성이 높은 균주인 것으로 확인하였으며, 락토바실러스 가세리 GFC_1220(Lactobacillus gasseri GFC_1220) 균주로 명명하였고, 국제미생물특허 기탁기관에 기탁하고, 수탁번호 KCTC13840BP를 부여받았다.The gDNA of the finally selected GFC1203H strain and the universal primer SEQ ID NO: 1: 27F (5' AGA GTT TGA TCM TGG CTC AG 3') and SEQ ID NO: 2: 1492R (5' TAC GGY TAC CTT GTT ACG ACT T 3') Through 16s DNA sequencing analysis, it was confirmed that it was a strain with high homology to Lactobacillus gasseri , and it was named as Lactobacillus gasseri GFC_1220 strain and deposited with the International Microbial Patent Depositary and received the accession number KCTC13840BP.

<실시예 3> GFC_1220 균주의 발효물 제조<Example 3> Preparation of fermented product of strain GFC_1220

분리된 GFC_1220 균주의 발효물을 제조하기 위해 MRS 배지에 Maltose, Lactose, Glycine 및 Inulin를 첨가하여 제조한 후 GFC_1220균주를 1.0x109의 균수가 되도록 하여 1% 접종하였다. 접종 후 혐기상태가 유지되도록 산소공급은 없으며, 정치배양을 37℃에서 120시간 동안 실시하였다. 배양을 마치고 pH가 4.0(오차 0.2)으로 형성되는지 확인한 뒤, 육안상으로 짙은 갈색인 것이 확인되면 배양을 마치고 0.2㎛필터(밀리포어) 제균을 실시하였다. 필터가 완료되면 상온에서 2주간 숙성기간을 거쳐 GFC_1220 균주의 발효물을 제조하였다.In order to prepare a fermented product of the separated GFC_1220 strain, Maltose, Lactose, Glycine, and Inulin were added to the MRS medium, and then the GFC_1220 strain was inoculated at 1% to a bacterial count of 1.0x10 9 . After inoculation, there is no oxygen supply so that the anaerobic state is maintained, and stationary culture was carried out at 37 ° C. for 120 hours. After the culture was completed, it was confirmed that the pH was formed at 4.0 (error 0.2), and when it was visually confirmed that the culture was dark brown, the culture was finished and sterilization was performed with a 0.2 μm filter (Millipore). When the filter was completed, the fermented product of the GFC_1220 strain was prepared through an aging period of 2 weeks at room temperature.

<비고예 2> 일반적인 락토바실러스 가세리 (<Remarks 2> General Lactobacillus gasseri ( Lactobacillus gasseriLactobacillus gasseri )균을 이용한 발효물) fermented product using bacteria

분리된 GFC_1220 균주가 아닌 Lactobacillus gasseri type strain을 활용한 것을 제외하면 <실시예 3>과 동일한 방법으로 비교예 1을 제조하였다. Comparative Example 1 was prepared in the same manner as in <Example 3>, except that the Lactobacillus gasseri type strain was used instead of the isolated GFC_1220 strain.

<실험예 1> 피험자와 피부 Microbiome 샘플채집<Experimental Example 1> Subject and Skin Microbiome Sample Collection

본 실험에 사용된 샘플은 지에프씨생명과학 연구소에서 사전동의를 얻은 피험자를 대상으로 실험을 실시하였다. 시험에 사용된 프로바이오틱스(Probiotics)로는 GFC_1220 균주의 발효물을 사용하였으며, 배양 후 균체를 제거한 배양액을 피험자의 얼굴 피부에 적용시켜 총 72시간 동안 피부샘플을 채집하여 분석에 사용하였으며 채집방법은 코튼스왑 방법을 이용하였으며 거즈를 이용하여 스크럽하여 피부 샘플을 채취하였다. 피부 상재 미생물을 채취는 처리 전, 처리 후, 미처리(휴지기) 및 재처리 그룹으로 이루어졌다. The samples used in this experiment were tested on subjects who obtained informed consent from the GFC Life Science Research Institute. The fermented product of the GFC_1220 strain was used as the probiotics used in the test. After culture, the culture medium from which the cells were removed was applied to the subject's facial skin, and skin samples were collected for a total of 72 hours and used for analysis. The collection method was cotton swab The method was used and skin samples were collected by scrubbing using gauze. Skin resident microorganisms were collected in pre-treatment, post-treatment, non-treatment (resting period) and re-treatment groups.

피부 샘플 채집은 참고문헌을 바탕으로 멸균수와 스크래퍼를 이용하여 채집하였으며, 모든 작업은 clean bench 내에서 실시되었다. 본 연구는 IRB 심의기준에서 면제사유에 해당되는 것으로 확인하였다.Skin samples were collected using sterilized water and a scraper based on the reference literature, and all work was conducted in a clean bench. This study confirmed that it falls under the reason for exemption from the IRB review criteria.

<실험예 2> 피부 상재 미생물의 genomic DNA 추출 및 DNA 증폭<Experimental Example 2> Genomic DNA extraction and DNA amplification of skin resident microorganisms

피부로부터 채집된 샘플을 0.85% NaCl에 현탁한 상등액을 원심분리(17,000 rpm/m)하여 균체를 취하고 멸균된 생리식염수에 균체를 1회 세척한 후, FastDNA SPIN KIT(MP Biomedical, France)를 사용하여 DNA를 추출하였다. A sample collected from the skin is suspended in 0.85% NaCl, the supernatant is centrifuged (17,000 rpm/m) to obtain cells, and after washing the cells once in sterilized physiological saline, FastDNA SPIN KIT (MP Biomedical, France) is used DNA was extracted.

<실험예 3> DGGE 분석을 통한 두피 상재균 중 acne 균주 억제 확인<Experimental Example 3> Confirmation of inhibition of acne strains among scalp flora through DGGE analysis

DGGE 분석에는 D-code system(Bio-rad, USA)을 사용하였다. 사용한 polyacrylamide gel 농도는 8%였고, 40% polyacrylamide bis-solution 29:1(3.3% C)(Bio-Rad, USA)이 40%~60% 사이의 농도 구배가 수직으로 형성되도록 제작하였다. 이때 사용된 변성제는 7M urea와 40%(w/v) formamide(Sigma, USA)였다. D-code system에 약 7ℓ의 TAE buffer(20 mM Tris, 10 mM acetic acid, 0.5 mM EDTA, pH 8.0)를 채우고, 2Xloading dye(0.05% bromophenol blue, 0.05% xylene cyanol, 70% glycerol)와 PCR 산물을 동량 혼합해 50V에서 800 분간 전기영동을 실시하였다. 전기영동을 마친 polyacrylamide gel은 Redsafe(Intron, Korea) 용액에서 15분간 염색 후 나타난 특정 밴드를 분석하였다. DGGE 결과의 band intensity는 GelCompar2 (Bionumeric ,Belgium)를 이용하여 이미지를 히스토그램하고 수치화하여 분석하였다. D-code system (Bio-rad, USA) was used for DGGE analysis. The polyacrylamide gel concentration used was 8%, and a 40% polyacrylamide bis-solution 29:1 (3.3% C) (Bio-Rad, USA) was prepared so that a concentration gradient between 40% and 60% was formed vertically. The denaturants used at this time were 7M urea and 40% (w/v) formamide (Sigma, USA). Fill the D-code system with about 7ℓ of TAE buffer (20 mM Tris, 10 mM acetic acid, 0.5 mM EDTA, pH 8.0), 2Xloading dye (0.05% bromophenol blue, 0.05% xylene cyanol, 70% glycerol) and PCR product Electrophoresis was performed at 50V for 800 minutes by mixing the same amount. The polyacrylamide gel after electrophoresis was stained in Redsafe (Intron, Korea) solution for 15 minutes, and then a specific band appeared. The band intensities of the DGGE results were analyzed by histogram and digitizing the images using GelCompar2 (Bionumeric, Belgium).

그 결과, 도 2에서 확인할 수 있듯이, GFC_1220 균주 발효물 처리에 의존하여 대표 유해균주인 S. aureus의 감소를 확인하였다. As a result, as can be seen in Figure 2, it was confirmed that the representative harmful strain S. aureus was reduced depending on the treatment of the fermented product of the GFC_1220 strain.

<실험예 4> 항염증 시험 : Nitric Oxide(NO) <Experimental Example 4> Anti-inflammatory test: Nitric Oxide (NO)

실시예 및 비교예의 발효물을 이용하여 항염증 활성 효과를 확인하기 위해 니트릭 옥사이드(Nitric oxide)를 억제하는 정도를 측정하였다. The degree of inhibition of nitric oxide was measured to confirm the anti-inflammatory activity effect using the fermented products of Examples and Comparative Examples.

대식세포의 일종인 RAW 264.7 cell을 1% 페니실린/스크랩토마이신 및 10% FBS(fetal bovineserum)가 포함된 DMEM 배지를 이용하여 24Well plate에 1.0x104 cell/well씩 동일하게 계수하여 분주한 후, 37℃ 및 5%의 이산화탄소 조건에서 24시간 동안 배양하였다. 24시간 배양한 RAW 264.7 cell에 실시예 1~2 및 비교예 1~2를 50(㎍/㎖) 농도로 배지와 혼합 후, 각 Well에 1ml씩 첨가하고 37℃ 및 5% CO2 조건의 인큐베이터에서 24시간 반응시켰다. 이때, NO를 발현시키는 염증유발인자인 LPS(Lipo poly saccharide)를 1㎍/㎖의 농도로 같이 처리하고 37℃ 및 5%의 이산화탄소 조건에서 24시간 동안 반응시켰다. 다음으로, 각 well의 상등액 만을 따로 취한 뒤 각 Well에 Nitric Oxide detection kit를 이용하여 배양액 중 100㎖ 를 96 Well plate에 취하고 Griess reagent A(N-1-Naphthylethylenediamine (NEDHC)) 50㎕ 및 Griess reagent B(Sulfanilamide) 50㎕를 각각 넣어준 뒤 각각 10 분 동안 반응시킨 뒤, ELISA plate reader를 이용하여 540nm에서 흡광도를 측정하였다. 세포 배양액 내 NO의 농도는 sodium nitrite (NaNO2)의 농도별 표준곡선과 비교하여 산출하였다.RAW 264.7 cells, a type of macrophage, were equally counted and dispensed at 1.0x10 4 cell/well each in a 24-Well plate using DMEM medium containing 1% penicillin/scraptomycin and 10% FBS (fetal bovineserum), Incubated for 24 hours at 37°C and 5% carbon dioxide. Examples 1-2 and Comparative Examples 1-2 were mixed with the medium at a concentration of 50 (μg/ml) in RAW 264.7 cells cultured for 24 hours, and then 1ml was added to each well and incubated at 37°C and 5% CO 2 conditions. reacted for 24 hours. At this time, LPS (Lipo poly saccharide), an inflammatory inducing factor expressing NO, was also treated at a concentration of 1 μg/ml and reacted for 24 hours at 37° C. and 5% carbon dioxide. Next, after taking only the supernatant from each well, 100㎖ of the culture solution was taken in a 96 well plate using a Nitric Oxide detection kit for each well, and Griess reagent A (N-1-Naphthylethylenediamine (NEDHC)) 50μl and Griess reagent B After adding 50 μl of (Sulfanilamide) and reacting for 10 minutes, the absorbance was measured at 540 nm using an ELISA plate reader. The concentration of NO in the cell culture medium was calculated by comparison with the standard curve for each concentration of sodium nitrite (NaNO2).

구분division NO 생성농도(μM)NO production concentration (μM) 양성대조군positive control 15.1±0.9415.1±0.94 음성대조군negative control group 77.8±1.1577.8±1.15 실시예 1Example 1 14.1±1.0814.1±1.08 비교예 1Comparative Example 1 62.2±0.9962.2±0.99

그 결과, 표 1에 나타난 바와 같이 실시예는 비교예 대비 니트릭 옥사이드(Nitric oxide) 생성농도가 낮은 것으로 확인되어 니트릭 옥사이드(Nitric oxide) 생성 억제 효과가 우수한 것을 확인하였다. GFC_1220와 비교군의 type strain 균주가 Lactobacillus gasseri 로 동일한 학명을 가지는 균주임에도 불구하고 본 발명에서 제공하는 GFC_1220 의 균주의 항염증 효과가 훨씬 뛰어난 것을 확인 할수 있다. 이는 strain의 차이에 의해 나타나는 균주 자체의 고유의 특성으로 판단된다. 따라서, 락토바실러스 가세리 GFC_1220(Lactobacillus gasseri GFC_1220)는 기존에 Lactobacillus gasseri에서는 확인 할 수 없었던 NO 억제에 의한 항염증 효과를 가지는 균주임이 확인 되었다. As a result, as shown in Table 1, it was confirmed that the nitric oxide production concentration was lower in the Example compared to the Comparative Example, and thus the nitric oxide production inhibitory effect was excellent. Although the type strain strain of GFC_1220 and the control group has the same scientific name as Lactobacillus gasseri , it can be confirmed that the anti-inflammatory effect of the strain of GFC_1220 provided in the present invention is much better. This is judged by the unique characteristics of the strain itself, which is indicated by the difference in strain. Therefore, Lactobacillus gasseri GFC_1220 ( Lactobacillus gasseri GFC_1220) was previously used in Lactobacillus gasseri . It was confirmed that the strain had an anti-inflammatory effect by inhibiting NO, which could not be confirmed.

이러한 결과는 GFC_1220 균주(수탁번호: KCTC13840BP) 균주 발효물에 항염 효과가 있다는 것을 의미한다. These results mean that the fermented product of the GFC_1220 strain (accession number: KCTC13840BP) has an anti-inflammatory effect.

<실험예 5> 항염증 시험 : 사이토카인 억제 <Experimental Example 5> Anti-inflammatory test: cytokine inhibition

염증반응은 NO와 더불어 염증 유발 사이토카인의 생성 및 분비에 의해 조절된다. 따라서 균주 lysate가 염증 유발 사이토카인들의 분비와 발현에 미치는 영향을 조사하기 위해, 세포에 LPS와 다양한 농도의 두피유래 유산균 발효물을 처리한 후, 배양 배지로부터 분비된 염증유발 사이토카인의 양을 ELISA 분석법을 사용하여 측정하였다. 또한, 염증유발 사이토카인의 발현 변화를 realtime PCR 분석법을 통해 확인하였다. 그 결과, 도3에서 보는 것과 같이 LPS 처리로 유도된 IL-1β, IL-6, TNF-α의 분비와 발현이 GFC_1220 균주(수탁번호: KCTC13840BP) 균주 발효물 처리에 있어 감소함을 확인하였다. 모유 미생물 GFC_1220 균주(수탁번호: KCTC13840BP) 균주 발효물을 처리하였을 때 농도 의존적으로 저농도에서도 유의하게 감소됨을 확인하였다. 이 결과를 통해 발효물은 LPS로 유도된 염증반응에서 염증 산물인 NO 조절뿐만 아니라 염증 유발 사이토카인의 분비와 발현 억제를 통해 항염증 효과를 나타낸다는 사실을 확인하였다. The inflammatory response is regulated by the production and secretion of pro-inflammatory cytokines along with NO. Therefore, in order to investigate the effect of strain lysate on the secretion and expression of inflammatory cytokines, cells were treated with LPS and scalp-derived lactic acid bacteria fermented product at various concentrations, and then the amount of inflammatory cytokines secreted from the culture medium was measured by ELISA It was measured using an assay. In addition, changes in the expression of inflammatory cytokines were confirmed through real-time PCR analysis. As a result, as shown in FIG. 3, it was confirmed that the secretion and expression of IL-1β, IL-6, and TNF-α induced by LPS treatment decreased in the treatment of the fermented product of the GFC_1220 strain (accession number: KCTC13840BP). When the fermented product of the breast milk microorganism GFC_1220 strain (accession number: KCTC13840BP) was treated, it was confirmed that it was significantly reduced even at low concentrations in a concentration-dependent manner. Through these results, it was confirmed that the fermented product exhibits anti-inflammatory effects not only by regulating NO, an inflammatory product, but also by suppressing the secretion and expression of inflammatory cytokines in the LPS-induced inflammatory response.

<실험예 6> 항균 효능 시험 : MIC 테스트<Experimental Example 6> Antibacterial efficacy test: MIC test

실시예 및 비교예의 발효물을 이용하여 항균 활성 정도를 확인하였다. The degree of antibacterial activity was confirmed using the fermented products of Examples and Comparative Examples.

1. 평가 배지의 준비1. Preparation of evaluation medium

평가 방법으로 원형여과지법(Paper disc method)을 이용하였으며, 항균 활성 평가에는 유해한 표준시험균주(식약처 및 MIC test guide line)인 대장균(Escherichia coli, ATCC 8739), 황색 포도상구균(Staphylococcus aureus, ATCC 6538P), 녹농균(Pseudomonas aeruginosa, ATCC 9027), 칸디다 알비칸스(Candida albicans, ATCC 10231)를 한국미생물자원센터(KCTC, Korea) 및 한국미생물보존센터(KCCM, Korea)로부터 분양받아 사용하였다. 상기 표준시험균주 중 대장균, 황색 포도상구균 및 녹농균의 배양에는 TSA 배지(Tryptic Soy Agar) 배지를 사용하였으며, 칸디다 알비칸스의 배양에는 YM 배지(Yeast extract Media) 배지를 사용하였다.The paper disc method was used as an evaluation method, and for the evaluation of antibacterial activity, harmful standard test strains (Ministry of Food and Drug Safety and MIC test guideline) Escherichia coli (ATCC 8739) and Staphylococcus aureus (ATCC) were used. 6538P), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 9027), and Candida albicans (ATCC 10231) were purchased from the Korea Microbial Resources Center (KCTC, Korea) and the Korea Microbial Conservation Center (KCCM, Korea). TSA medium (Tryptic Soy Agar) medium was used for culturing Escherichia coli, Staphylococcus aureus, and Pseudomonas aeruginosa among the standard test strains, and YM medium (Yeast extract Media) medium was used for culturing Candida albicans.

2. MIC 테스트2. MIC test

121℃에서 15분간 멸균한 독립적인 영양배지(Nutrient Broth)를 준비한 후, 각 표준 시험균주를 3X105cfu/㎖의 양으로 접종하였다. 실시예 1 및 비교예 1을 대표적으로 시험 농도 1%, 0.5%, 0.25%, 0.125%, 0.0625%, 0.03125%, 0.015625%, 0.0078125% 농도로 맞추고, 시험 균주의 Single colony 이용하여 접종하여 배양하였다. 배양이 끝난 후 흡광도(600nm)를 측정하여 결과를 확인하였다. 미생물이 검출되지 않는 최저 농도로 항균 효과를 확인하였다.After preparing an independent nutrient medium (Nutrient Broth) sterilized at 121 ° C. for 15 minutes, each standard test strain was inoculated in an amount of 3X10 5 cfu / ml. Example 1 and Comparative Example 1 were typically set to 1%, 0.5%, 0.25%, 0.125%, 0.0625%, 0.03125%, 0.015625%, 0.0078125% concentration, and inoculated and cultured using a single colony of the test strain. . After the incubation, the absorbance (600 nm) was measured to confirm the result. The antibacterial effect was confirmed at the lowest concentration at which microorganisms were not detected.

구분(단위: %)Classification (unit: %) 대장균Escherichia coli 황색 포도상구균Staphylococcus aureus 녹농균Pseudomonas aeruginosa 칸디다 알비칸스candida albicans GFC_1220 GFC_1220 0.250.25 0.1250.125 0.1250.125 0.500.50 비교예comparative example 0.50.5 0.50.5 0.50.5 --

그 결과, 표 2에 나타난 바와 같이 GFC_1220 균주 배양물은 4개의 공시 기준시험균주(식약처 및 MIC test guide line 참조)인 대장균(Escherichia coli, ATCC 8739), 황색 포도상구균(Staphylococcusaureus, ATCC 6538P), 녹농균(Pseudomonas aeruginosa, ATCC 9027), 칸디다 알비칸스(Candida albicans, ATCC 10231)에 대한 억제 효과가 확인되어 항균 효과가 우수한 것을 확인하였다. 비교예의 type strain 균주가 Lactobacillus gasseri가 칸디다 알비칸스에 대한 억제능이 나타니지 않는 것으로 확인 된 바, 동일한 학명을 가지는 균주임에도 불구하고 본 발명에서 제공하는 GFC_1220 의 균주의 항균효과가 뛰어나다는 것이 확인되었다. As a result, as shown in Table 2, the GFC_1220 strain culture was tested against four published standard test strains (refer to the Ministry of Food and Drug Safety and MIC test guideline), Escherichia coli (ATCC 8739), Staphylococcus aureus (ATCC 6538P), The inhibitory effect on Pseudomonas aeruginosa (ATCC 9027) and Candida albicans (ATCC 10231) was confirmed, confirming that the antibacterial effect was excellent. It was confirmed that the type strain strain of the comparative example did not show inhibitory activity against Candida albicans in Lactobacillus gasseri , and it was confirmed that the antibacterial effect of the GFC_1220 strain provided in the present invention was excellent despite the strain having the same scientific name.

이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시 양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.Having described specific parts of the present invention in detail above, it will be clear to those skilled in the art that these specific descriptions are only preferred embodiments, and the scope of the present invention is not limited thereby. will be. Accordingly, the substantial scope of the present invention will be defined by the appended claims and their equivalents.

한국생명공학연구원Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology KCTC13840BPKCTC13840BP 2019042220190422

Claims (7)

피부-마이크로바이옴(skin-microbiome) 변화유도(염증을 일으키는 S. aureus 균주의 감소), 염증의 감소, 항균 효과를 갖는 신규한 락토바실러스 가세리 GFC_1220(Lactobacillus gasseri GFC_1220)균주(기탁번호:KCTC13840BP).
Induction of skin-microbiome changes (reduction of inflammatory S. aureus strains), reduction of inflammation, novel Lactobacillus gasseri GFC_1220 strain having antibacterial effects (accession number: KCTC13840BP) ).
제1항에 있어서, 상기 균주는 모유 유래인 것을 특징으로 하는 신규한 락토바실러스 가세리 GFC_1220(Lactobacillus gasseri GFC_1220)균주(기탁번호:KCTC13840BP).
The novel Lactobacillus gasseri GFC_1220 strain (Accession No.: KCTC13840BP) according to claim 1, wherein the strain is derived from breast milk.
신규한 락토바실러스 가세리 GFC_1220(Lactobacillus gasseri GFC_1220)균주(기탁번호:KCTC13840BP)를 Maltose, Lactose, Glycine 및 Inulin가 포함된 배지에 접종하고, 배양하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 발효물의 제조방법.
A method for producing a fermented product comprising the steps of inoculating a novel Lactobacillus gasseri GFC_1220 strain (accession number: KCTC13840BP) into a medium containing Maltose, Lactose, Glycine and Inulin and culturing it.
제3항에 있어서, 상기 배양은 32 ~ 37℃에서 90 ~ 130시간 동안 수행되는 것을 특징으로 하는 발효물의 제조방법.
The method of claim 3, wherein the culturing is performed at 32 to 37° C. for 90 to 130 hours.
신규한 락토바실러스 가세리 GFC_1220(Lactobacillus gasseri GFC_1220)균주(기탁번호:KCTC13840BP)로 발효된 발효물.
Fermented product fermented with a novel Lactobacillus gasseri GFC_1220 (Accession Number: KCTC13840BP) strain.
제5항의 발효물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
A cosmetic composition comprising the fermented product of claim 5 as an active ingredient.
제6항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부-마이크로바이옴(skin-microbiome) 변화유도(염증을 일으키는 S. aureus 균주의 감소), 염증의 감소, 항균 효과용으로 구성된 군으로부터 선택되는 용도인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.The method of claim 6, wherein the cosmetic composition is selected from the group consisting of skin-microbiome change induction (reduction of inflammatory S. aureus strains), inflammation reduction, and antibacterial effect. A cosmetic composition characterized by
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