KR20230082946A - Method for producing natural seasoning materials using liquid fermented soybean product - Google Patents

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KR20230082946A
KR20230082946A KR1020210170929A KR20210170929A KR20230082946A KR 20230082946 A KR20230082946 A KR 20230082946A KR 1020210170929 A KR1020210170929 A KR 1020210170929A KR 20210170929 A KR20210170929 A KR 20210170929A KR 20230082946 A KR20230082946 A KR 20230082946A
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fermented
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soybean
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이정미
송예지
조유빈
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농업회사법인 순창장류주식회사
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Abstract

본 발명은 (1) 대두에 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) 균주를 접종한 코지 혼합물에 물을 첨가한 후, 발효하여 대두 코지를 제조하는 단계; (2) 상기 (1)단계의 제조한 대두 코지에 물을 첨가한 대두 코지액을 1차 발효시켜 대두 발효물을 제조하는 단계; 및 (3) 상기 (2)단계의 제조한 대두 발효물에 소금을 첨가하여 2차 발효한 후 여과하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 액상 발효 간장의 제조방법, 상기 방법으로 제조된 액상 발효 간장 및 상기 액상 발효 간장을 이용한 가공식품에 관한 것이다.The present invention comprises the steps of (1) preparing soybean koji by adding water to a koji mixture inoculated with an Aspergillus oryzae strain and then fermenting; (2) preparing a fermented soybean product by first fermenting the soybean koji liquid obtained by adding water to the soybean koji prepared in step (1); and (3) adding salt to the fermented soybean product prepared in step (2), performing secondary fermentation, and then filtering. It relates to fermented soy sauce and processed food using the liquid fermented soy sauce.

Description

액상 발효 장류를 이용한 천연 조미 소재의 제조방법{Method for producing natural seasoning materials using liquid fermented soybean product}Method for producing natural seasoning materials using liquid fermented soybean paste {Method for producing natural seasoning materials using liquid fermented soybean product}

본 발명은 특정 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102487 균주를 이용하여 제조하는 것을 특징으로 하는 액상 발효 간장의 제조방법, 상기 방법으로 제조된 액상 발효 간장 및 상기 액상 발효 간장을 이용한 가공식품에 관한 것이다.The present invention relates to a method for producing fermented liquid soy sauce, characterized in that it is prepared using a specific Aspergillus oryzae strain SRCM102487, a fermented liquid soy sauce prepared by the method, and a processed food using the fermented liquid soy sauce will be.

간장은 콩을 주원료로 하여 발효, 숙성시킨 우리나라의 대표적인 대두 발효식품이다. 간장은 단백질과 아미노산 함량이 높을 뿐만 아니라 저장성이 뛰어나며, 그 특유의 맛과 향을 지니고 있어 우리 조상들의 식생활에 널리 애용되어 왔다. 간장의 숙성과정 중 맛, 향, 색 등의 품질을 결정짓는 데에는 여러 가지 요인이 있으나 크게 원료, 제조방법, 메주 및 이에 적용되는 균주 등으로 나눌 수 있다. 좋은 원료와 숙성과정 중 미생물의 작용에 따라 그 맛과 향 등이 결정되지만, 간장은 제조방법에 따라 품질에 많은 영향을 미친다.Soy sauce is Korea's representative fermented soybean food made by fermenting and maturing soybeans as the main ingredient. Soy sauce has a high protein and amino acid content, excellent storage stability, and has a unique taste and aroma, so it has been widely used in the diet of our ancestors. There are many factors that determine the quality of soy sauce, such as taste, aroma, and color, during the aging process, but it can be largely divided into raw materials, manufacturing methods, fermented soybeans and strains applied to them. Good raw materials and the action of microorganisms during the maturation process determine its taste and aroma, but the manufacturing method of soy sauce has a great influence on its quality.

그리고, 종래에 시판되는 간장의 경우 염도가 18~19%로서 매우 높은 편이어서 음식에 직접 사용할 경우 강한 짠맛을 부여하게 되며, 염도를 낮출 경우에는 잡균오염에 의해 부패될 우려가 있다. 또한, 기존의 간장을 베이스로 하여 제조되는 맛간장의 경우 염도가 높거나 다양한 인공 첨가물에 의하여 향미가 매우 강해지고 발효에 의한 다양한 아미노산의 발현 및 건강한 풍미와는 차이가 있다고 하겠다.And, in the case of conventionally marketed soy sauce, the salinity is very high as 18 to 19%, so when used directly in food, it imparts a strong salty taste, and when the salinity is lowered, there is a risk of spoilage due to bacterial contamination. In addition, in the case of taste soy sauce prepared based on conventional soy sauce, the flavor is very strong due to high salinity or various artificial additives, and there is a difference between expression of various amino acids and healthy flavor by fermentation.

시판되는 조미료는 대부분 화학적 제조공정에 의해 단일 글루탐산 성분으로 이루어진 조미료로써 과거 안전성에 대한 문제가 대두된 바 있으며 최근에는 안전성에는 문제가 없는 것으로 알려진 바 있으나 주부들 사이에서는 발효에 의해 제조되는 천연 발효조미 소재에 대한 관심도가 높아지고 있는 것 또한 사실이다. 최근 국내의 조미료 시장은 1차 가공품 및 식품 완제품 등과 더불어 외식시장의 성장과 함께 성장하고 있다고 할 수 있으나, 그에 따라 소비자들의 관능선호도 또한 다양한 방향으로 확산되고 있으며 이러한 다양한 풍미를 요구하는 시장 선호도에 화학조미료만으로 대응하기는 어려워졌다. 또한, 식품제조 업체 입장에서도 첨가물 안전성에 대한 문제는 사실여부와 상관없이 끊임없이 논란거리가 될 것으로 예상되는 바 앞으로도 천연 발효 조미 제품에 대한 관심은 계속적으로 증가할 것으로 예상된다. Most commercially available seasonings are seasonings made of a single glutamic acid component through a chemical manufacturing process, and safety issues have emerged in the past. It is also true that interest in materials is increasing. Recently, the domestic seasoning market can be said to be growing along with the growth of the food service market along with primary processed products and finished food products, but accordingly, consumers' sensory preferences are also spreading in various directions, and chemical It has become difficult to respond with seasoning alone. In addition, from the perspective of food manufacturers, the issue of additive safety is expected to continue to be a controversial issue regardless of whether it is true or not, so interest in naturally fermented seasoning products is expected to continue to increase in the future.

한국등록특허 제2296716호에는 아로니아 조미액의 제조방법이 개시되어 있고, 한국공개특허 제2021-0014441호에는 천연식품소재를 함유하는 맛간장의 제조방법이 개시되어 있으나, 본 발명의 액상 발효 장류를 이용한 천연 조미 소재의 제조방법과는 상이하다.Korean Patent No. 2296716 discloses a method for producing aronia seasoning liquid, and Korean Patent Publication No. 2021-0014441 discloses a method for producing flavored soy sauce containing natural food ingredients. It is different from the manufacturing method of the natural seasoning material used.

본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명에서는 저염으로 제조된 액상 발효 장류 제조에 적합한 균주를 선정하고, 상기 선정된 균주를 이용하여 영양성분이 강화되고 기호도가 우수한 저염 액상 발효 장류의 제조방법을 제공하는 데 있다.The present invention was derived from the above request, and in the present invention, a strain suitable for producing low-salt liquid fermented soybean paste is selected, and a low-salt liquid fermented soybean paste with enhanced nutrients and excellent palatability is obtained by using the selected strain. It is to provide a manufacturing method of.

상기 과제를 해결하기 위해, 본 발명은 (1) 대두에 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) 균주를 접종한 코지 혼합물에 물을 첨가한 후, 발효하여 대두 코지를 제조하는 단계; (2) 상기 (1)단계의 제조한 대두 코지에 물을 첨가한 대두 코지액을 1차 발효시켜 대두 발효물을 제조하는 단계; 및 (3) 상기 (2)단계의 제조한 대두 발효물에 소금을 첨가하여 2차 발효한 후 여과하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 액상 발효 간장의 제조방법을 제공한다.In order to solve the above problems, the present invention (1) Aspergillus duck material ( Aspergillus oryzae ) After adding water to the koji mixture inoculated with the strain, fermenting to prepare soybean koji; (2) preparing a fermented soybean product by first fermenting the soybean koji liquid obtained by adding water to the soybean koji prepared in step (1); and (3) adding salt to the fermented soybean product prepared in step (2) to perform secondary fermentation and then filtering.

또한, 본 발명은 상기 방법으로 제조된 액상 발효 간장을 제공한다.In addition, the present invention provides a liquid fermented soy sauce prepared by the above method.

또한, 본 발명은 상기 액상 발효 간장을 이용한 가공식품을 제공한다.In addition, the present invention provides a processed food using the liquid fermented soy sauce.

본 발명의 선정된 특정 균주를 이용하여 액상 발효 간장을 제조함으로써, 고품질의 액상 발효 간장을 제조할 수 있으며, 상기 액상 발효 간장을 이용하여 다양한 조미 가공식품으로 활용이 가능하여, 전통식품산업에 유용하게 이용할 수 있을 것으로 판단된다.By producing liquid fermented soy sauce using the selected specific strain of the present invention, high-quality liquid fermented soy sauce can be produced, and the liquid fermented soy sauce can be used as various seasoning and processed foods, which is useful for the traditional food industry. It is considered to be usable.

도 1은 수분 함량을 달리하여 제조한 대두 코지의 사진을 비교한 것이다.
도 2는 발효 온도를 달리하여 제조한 대두 코지의 사진을 비교한 것이다.
도 3은 발효 시간을 달리하여 제조한 대두 코지의 사진을 비교한 것이다.
도 4는 저염 발효 장류 사진을 보여준다.
1 is a comparison of photographs of soybean koji prepared with different moisture contents.
Figure 2 compares photographs of soybean koji prepared by varying the fermentation temperature.
Figure 3 compares photos of soybean koji prepared with different fermentation times.
Figure 4 shows a picture of low-salt fermented soybean paste.

본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은In order to achieve the object of the present invention, the present invention

(1) 대두에 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) 균주를 접종한 코지 혼합물에 물을 첨가한 후, 발효하여 대두 코지를 제조하는 단계;(1) preparing soybean koji by adding water to a koji mixture inoculated with an Aspergillus oryzae strain in soybeans and then fermenting;

(2) 상기 (1)단계의 제조한 대두 코지에 물을 첨가한 대두 코지액을 1차 발효시켜 대두 발효물을 제조하는 단계; 및(2) preparing a fermented soybean product by first fermenting the soybean koji liquid obtained by adding water to the soybean koji prepared in step (1); and

(3) 상기 (2)단계의 제조한 대두 발효물에 소금을 첨가하여 2차 발효한 후 여과하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 액상 발효 간장의 제조방법을 제공한다.(3) Provides a method for producing fermented soybean sauce prepared in step (2), characterized in that it is prepared by adding salt to the fermented soybean product prepared in step (2), performing secondary fermentation, and then filtering.

본 발명의 액상 발효 간장의 제조방법에서, 상기 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) 균주는 전분 및 단백질분해효소 활성이 뛰어나, 간장 발효과정에서 중요한 효소인 프로테아제 및 아밀라아제의 생산 능력이 높고, 발암물질인 아플라톡신을 생산하지 않는 균주를 선정한 것으로, 한국미생물보존센터에 2020년 10월 15일자로 기탁하였다(기탁번호: KCCM12804P).In the method for producing liquid fermented soy sauce of the present invention, the Aspergillus duck material ( Aspergillus oryzae ) strain is excellent in starch and proteolytic enzyme activity, has high production ability of protease and amylase, which are important enzymes in the soy fermentation process, and carcinogens A strain that does not produce phosphorus aflatoxin was selected and deposited with the Korea Microorganism Conservation Center on October 15, 2020 (accession number: KCCM12804P).

또한, 본 발명의 액상 발효 간장의 제조방법에서, 상기 (1)단계의 대두 코지는 바람직하게는 대두에 대두 대비 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) 균주를 0.2~0.4%(v/w) 비율로 접종한 코지 혼합물의 수분 함량이 34~44%(v/w)가 되도록 물을 첨가한 후, 28~32℃ 온도에서 40~48시간 동안 발효하여 제조할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 대두에 대두 대비 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102487 균주(KCCM12804P)를 0.3%(v/w) 비율로 접종한 코지 혼합물의 수분 함량이 42%(v/w)가 되도록 물을 첨가한 후, 30℃ 온도에서 42시간 동안 발효하여 제조할 수 있다. 상기와 같은 조건으로 대두 코지를 제조하는 것이 단백질 분해 활성이 뛰어나면서 코지의 품질을 일정하게 유지시키면서 발효 효율이 우수한 이점이 있다. In addition, in the method for producing liquid fermented soy sauce of the present invention, the soybean koji in step (1) is preferably 0.2 to 0.4% (v / w) ratio of Aspergillus oryzae strain to soybean compared to soybean. It can be prepared by adding water so that the moisture content of the koji mixture inoculated with is 34 to 44% (v / w), and then fermented for 40 to 48 hours at a temperature of 28 to 32 ℃, more preferably soybean After adding water so that the water content of the Koji mixture inoculated with Aspergillus oryzae SRCM102487 strain (KCCM12804P) at a rate of 0.3% (v / w) was 42% (v / w), 30 It can be prepared by fermentation for 42 hours at a temperature of ° C. The production of soybean koji under the above conditions has the advantage of excellent fermentation efficiency while maintaining a constant quality of koji while having excellent proteolytic activity.

또한, 본 발명의 액상 발효 간장의 제조방법에서, 상기 (2)단계의 대두 발효물은 바람직하게는 대두 코지에 물을 첨가한 22~25 Brix의 고형분 함량을 지니는 대두 코지액을 만들고 40~50℃에서 2~4일 동안 1차 발효시켜 제조할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 대두 코지에 물을 첨가한 23 Brix의 고형분 함량을 지니는 대두 코지액을 만들고 45℃에서 3일 동안 1차 발효시켜 제조할 수 있다. 상기와 같은 조건으로 대두 발효물을 제조하는 것이 발효 수율이 높으면서, 아미노태 질소 및 총 질소 함량과 글루탐산 함량이 높은 조건으로 제조할 수 있었다.In addition, in the method for producing liquid fermented soy sauce of the present invention, the fermented soybean product in step (2) is preferably soybean koji liquid having a solids content of 22 to 25 Brix by adding water to soybean koji and 40 to 50 Brix. It can be prepared by primary fermentation at ° C for 2 to 4 days, and more preferably, soybean koji liquid having a solid content of 23 Brix is prepared by adding water to soybean koji and primary fermentation at 45 ° C for 3 days. can do. Production of the fermented soybean product under the above conditions could be produced under conditions with high fermentation yield, high amino nitrogen content, total nitrogen content, and glutamic acid content.

또한, 본 발명의 액상 발효 간장의 제조방법에서, 상기 (3)단계는 바람직하게는 대두 발효물에 소금을 첨가하여 염 농도를 7~13%(w/v)로 맞춘 후, 40~50℃에서 1~7일 동안 2차 발효한 후 여과할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 대두 발효물에 소금을 첨가하여 염 농도를 10%(w/v)로 맞춘 후, 45℃에서 2일 동안 2차 발효한 후 여과할 수 있다. 상기와 같은 조건으로 발효하는 것이 저염하에서도 이상발효가 되지 않아 품질에 안정적이면서, 조미기능이 극대화된 저염 발효 간장으로 제조할 수 있었다.In addition, in the method of manufacturing liquid fermented soy sauce of the present invention, the step (3) is preferably adjusted to 7 to 13% (w / v) by adding salt to the fermented soybean product to adjust the salt concentration to 40 to 50 ° C. After secondary fermentation for 1 to 7 days, it can be filtered. More preferably, after adjusting the salt concentration to 10% (w / v) by adding salt to the fermented soybean product, secondary fermentation at 45 ° C. for 2 days After fermentation, it can be filtered. When fermented under the above conditions, abnormal fermentation did not occur even under low salt, so it was possible to produce low-salt fermented soy sauce with stable quality and maximized seasoning function.

본 발명의 액상 발효 간장의 제조방법은, 보다 구체적으로는The method for producing liquid fermented soy sauce of the present invention is more specifically

(1) 대두에 대두 대비 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102487 균주(KCCM12804P)를 0.2~0.4%(v/w) 비율로 접종한 코지 혼합물의 수분 함량이 34~44%(v/w)가 되도록 물을 첨가한 후, 28~32℃ 온도에서 40~48시간 동안 발효하여 대두 코지를 제조하는 단계;(1) Moisture content of the Koji mixture inoculated with soybean aspergillus duck material ( Aspergillus oryzae ) SRCM102487 strain (KCCM12804P) at a ratio of 0.2 to 0.4% (v / w) was 34 to 44% (v / w) Preparing soybean koji by adding water to be fermented at a temperature of 28 to 32° C. for 40 to 48 hours;

(2) 상기 (1)단계의 제조한 대두 코지에 물을 첨가한 22~25 Brix의 고형분 함량을 지니는 대두 코지액을 만들고 40~50℃에서 2~4일 동안 1차 발효시켜 대두 발효물을 제조하는 단계; 및(2) Soybean koji liquid having a solids content of 22 to 25 Brix was prepared by adding water to the soybean koji prepared in step (1), and primary fermentation was performed at 40 to 50 ° C for 2 to 4 days to obtain a fermented soybean product. manufacturing; and

(3) 상기 (2)단계의 제조한 대두 발효물에 소금을 첨가하여 염 농도를 7~13%(w/v)로 맞춘 후, 40~50℃에서 1~7일 동안 2차 발효한 후 여과하는 단계를 포함할 수 있으며,(3) Salt was added to the fermented soybean product prepared in step (2) to adjust the salt concentration to 7-13% (w/v), followed by secondary fermentation at 40-50 ° C for 1-7 days It may include filtering,

더욱 구체적으로는more specifically

(1) 대두에 대두 대비 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102487 균주(KCCM12804P)를 0.3%(v/w) 비율로 접종한 코지 혼합물의 수분 함량이 42%(v/w)가 되도록 물을 첨가한 후, 30℃ 온도에서 42시간 동안 발효하여 대두 코지를 제조하는 단계;(1) Soybeans were inoculated with Aspergillus oryzae SRCM102487 strain (KCCM12804P) at a rate of 0.3% (v / w) to soybeans, and water was added so that the moisture content of the mixture was 42% (v / w) After adding, fermenting at 30 ° C. for 42 hours to prepare soybean koji;

(2) 상기 (1)단계의 제조한 대두 코지에 물을 첨가한 23 Brix의 고형분 함량을 지니는 대두 코지액을 만들고 45℃에서 3일 동안 1차 발효시켜 대두 발효물을 제조하는 단계; 및(2) preparing a fermented soybean product by making a soybean koji liquid having a solid content of 23 Brix by adding water to the soybean koji prepared in step (1) and primary fermentation at 45 ° C. for 3 days; and

(3) 상기 (2)단계의 제조한 대두 발효물에 소금을 첨가하여 염 농도를 10%(w/v)로 맞춘 후, 45℃에서 2일 동안 2차 발효한 후 여과하는 단계를 포함할 수 있다.(3) Adding salt to the fermented soybean product prepared in step (2) to adjust the salt concentration to 10% (w / v), followed by secondary fermentation at 45 ° C for 2 days and filtering can

본 발명은 또한, 상기 방법으로 제조된 액상 발효 간장을 제공한다.The present invention also provides a liquid fermented soy sauce prepared by the above method.

본 발명은 또한, 상기 액상 발효 간장을 이용한 가공식품을 제공한다. 상기 가공식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 액상 발효 간장을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 조미료, 육류, 소세지, 국, 찌개, 탕, 전골, 라면, 기타 면류, 나물, 무침, 소스 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 가공식품을 모두 포함한다.The present invention also provides a processed food using the liquid fermented soy sauce. There is no particular limitation on the type of the processed food. Examples of foods to which the liquid fermented soy sauce can be added include seasonings, meat, sausages, soup, stew, soup, hotpot, ramen, other noodles, vegetables, seasonings, and sauces, and all processed foods in the conventional sense include

이하, 본 발명의 제조예 및 실시예를 들어 상세히 설명한다. 단, 하기 제조예 및 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 제조예 및 실시예에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, production examples and examples of the present invention will be described in detail. However, the following Preparation Examples and Examples are only to illustrate the present invention, and the content of the present invention is not limited to the following Preparation Examples and Examples.

제조예 1. 저염 액상 발효 간장Preparation Example 1. Low-sodium liquid fermented soy sauce

(1) 볶음 대두 분말에 볶음 대두 분말 대비 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102487 균주를 0.3%(v/w) 비율로 접종한 코지 혼합물의 수분 함량이 42%(v/w)가 되도록 정제수를 첨가한 후, 30℃ 온도에서 42시간 동안 발효하여 대두국(대두 코지)을 제조하였다.(1) Purified water so that the moisture content of the Koji mixture inoculated with the roasted soybean powder in the ratio of Aspergillus oryzae SRCM102487 strain to 0.3% (v / w) was 42% (v / w) compared to the roasted soybean powder After adding, fermented at 30 ° C. for 42 hours to prepare soybean soup (soybean koji).

(2) 상기 (1)단계의 제조한 대두 코지에 정제수를 첨가한 23 Brix의 고형분 함량을 지니는 대두 코지액을 45℃에서 3일 동안 1차 발효시켜 1차 대두 발효물을 제조하였다.(2) The first fermented soybean product was prepared by first fermenting the soybean koji liquid having a solid content of 23 Brix to which purified water was added to the soybean koji prepared in step (1) at 45 ° C. for 3 days.

(3) 상기 (2)단계의 제조한 1차 대두 발효물에 소금을 첨가하여 염 농도를 10%(w/v)로 맞춘 후, 45℃에서 2일 동안 2차 발효한 후 여과하였다.(3) Salt was added to the primary fermented soybean product prepared in step (2) to adjust the salt concentration to 10% (w / v), followed by secondary fermentation at 45 ° C. for 2 days, followed by filtration.

실험재료 및 실험방법Experiment material and experiment method

1. 재료 1. Materials

대두는 국내산 대두를 구입하여 사용하였으며, 볶음대두분은 외주를 통해 전처리과정을 거친 후 사용하였다. 천일염은 국내산을 사용하였고, 이외 배합용 원·부재료는 각각 해당업체에서 구입하여 테스트 후 적합한 제품을 사용하였다.For soybeans, domestic soybeans were purchased and used, and roasted soybean flour was used after going through a pre-processing process through outsourcing. Sea salt was domestically produced, and other raw and subsidiary materials for mixing were purchased from the respective companies and used after testing.

본 실험에 사용한 장류용 발효 균주로써 (재)발효미생물산업진흥원으로부터 1차년도 연구를 통해 최종 선정된 곰팡이 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102487 균주(KCCM12804P)를 사용하였고, 이와 비교할 곰팡이는 시판 종균으로 충무발효(주)로부터 장류용 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) 균주를 구매하여 사용하였다.As the fermented strain used in this experiment, the fungus Aspergillus oryzae SRCM102487 strain (KCCM12804P), which was finally selected through the 1st year research by the Korea Institute for Fermentation Microbiology Industry, was used. As a seed, an Aspergillus oryzae strain for soy sauce was purchased from Chungmu Fermentation Co., Ltd. and used.

2. 실험방법2. Experiment method

(1) 균주 특이성 적용 최적 코지 제조(1) Production of optimal Koji by applying strain specificity

본 제국에 사용한 단백질원으로는 대두를 사용하였으며 가공에 적합하도록 외주를 통해 대두를 가공한 볶음대두분을 사용하였다. 실험에 사용한 볶음대두분은 적절히 전처리한 후 (재)발효미생물산업진흥원으로부터 분양받은 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102487 균주를 0.3% 접종하고 발효 조건별(수분 함량, 발효 온도, 발효 시간) 단백질 분해 활성도를 분석하여 효소 활성을 고함량 획득하기 위한 고체발효 조건을 확립하고자 하였다. 이후 단백질 분해 활성도가 가장 높은 최적의 조건의 조건으로 대두 코지(koji)를 제조하였다. Soybean was used as the protein source used in this empire, and roasted soybean flour processed soybean through outsourcing was used to make it suitable for processing. The roasted soybean flour used in the experiment was properly pre-treated, and then inoculated with 0.3% of Aspergillus oryzae SRCM102487 strain distributed from the Institute for Fermentation Microbiology Industry, and fermented according to fermentation conditions (moisture content, fermentation temperature, fermentation time) By analyzing the proteolytic activity, we tried to establish solid state fermentation conditions for obtaining a high content of enzyme activity. Thereafter, soybean koji was prepared under optimal conditions with the highest proteolytic activity.

(2) 저염 액상 발효 간장 제조조건 확립(2) Establishment of manufacturing conditions for low-salt liquid fermented soy sauce

본 실험을 위한 저염 액상 발효 간장은 상기와 같이 확립된 최적의 조건으로 대두 코지를 제조한 후 제조된 대두 코지에 정수를 넣어 기본 베이스로 하고 목적에 맞게 천일염을 넣어 각각의 발효조건별(고형분 함량, 발효 온도, 발효 시간, 염 농도, 염 투입시기)로 균질 혼합하고 pH, 아미노태질소 함량(AN), 총질소 함량(TN), 글루탐산(glutamate) 함량(GA) 분석을 통해 효율적인 제법을 확립하고자 하였다. The low-salt liquid fermented soy sauce for this experiment was prepared by preparing soybean koji under the optimal conditions established as described above, and then adding purified water to the prepared soybean koji as a basic base and adding bay salt to suit the purpose for each fermentation condition (solids content). , fermentation temperature, fermentation time, salt concentration, salt input time), and established an efficient manufacturing method through pH, amino nitrogen content (AN), total nitrogen content (TN), and glutamate content (GA) analysis wanted to

(3) 저염 액상 발효 간장 제조공정 Scale-up 및 공정 표준화 (3) Scale-up and standardization of low-salt liquid fermented soy sauce manufacturing process

본 연구를 통한 조미성분의 용출이 극대화된 저염 액상 발효 간장은 1차적으로 본 생산 전에 lab-scale을 통하여 최적화 조건을 도출하고 2차적으로 대량 생산화 및 제품 출시를 위하여 현장에 적합한 pilot- scale 연구를 실시함으로써 제조공정에 대한 대량 공정을 확립하며 3차적으로 대량 scale-up 실험을 통해 생산된 제품에 대한 품질과 관능을 최종적으로 확인하여 대량생산체계를 갖추고자 하였다.Low-salt liquid fermented soy sauce with maximized elution of seasoning ingredients through this study was firstly optimized through lab-scale prior to production, and secondly, pilot-scale research suitable for the field for mass production and product launch By conducting a mass production process, the mass production process was established, and the quality and sensory quality of the produced product was finally confirmed through a third mass scale-up experiment to establish a mass production system.

(4) 액상 발효 간장 기반 천연발효 조미소재 최적 배합비 설계(4) Optimum mixing ratio design for naturally fermented seasoning based on liquid fermented soy sauce

저염 액상 발효 간장을 베이스로 하여 다양한 식품소재에 적용이 가능한 천연발효 조미소재를 개발하도록 하고 배합 조건별로 총 질소(TN)와 글루탐산(GA)을 분석하였으며, 또한, 관능특성에 대한 분석을 실시하도록 하여 이를 바탕으로 최종 배합비를 선정하였다. 선정된 제품은 최종 출시 가능성을 점검하기 위해 당사의 자체 연구원을 대상으로 1단계로 풍미, 기호도 분석을 통해 간이 실험을 진행하였으며 2단계로 풍미 기호도 분석을 진행하도록 하였다. 풍미 기호도 분석은 평점법에서 항목 척도를 사용하여 9점 척도로 평가토록 하였으며 관능특성 분석과 관련하여 관능평가인은 농업회사법인 순창장류(주)의 전직원을 대상으로 짠맛과 감칠맛에 대하여 농도별로 미맹테스트를 진행한 후 선발된 11명을 대상으로 실시하였다. 시료는 조미소재 10 g을 물에 풀어서 끓인 국을 기호도 분석에 사용하였다. Based on low-salt liquid fermented soy sauce, natural fermented seasoning materials that can be applied to various food materials were developed, total nitrogen (TN) and glutamic acid (GA) were analyzed for each mixing condition, and sensory characteristics were also analyzed. Based on this, the final mixing ratio was selected. In order to check the possibility of final release of the selected products, a simple experiment was conducted with our own researchers through flavor and preference analysis in the first step, and flavor preference analysis in the second step. The flavor preference analysis was evaluated on a 9-point scale using an item scale in the rating method. In relation to the sensory characteristics analysis, the sensory assessor targeted all employees of Sunchang Paste Co., Ltd., an agricultural corporation, for salty and savory taste by concentration. After the test was conducted, it was conducted on 11 selected people. For the sample, 10 g of seasoning material was dissolved in water and boiled soup was used for preference analysis.

(5) 액상 발효 간장 기반 천연발효 조미소재 제조공정 Scale-up 및 공정 표준화 (5) Scale-up and standardization of the manufacturing process of naturally fermented seasoning material based on liquid fermented soy sauce

개발된 배합비에 근거한 제조공정을 1차 실험 생산과 2차 Scale-up을 통해 천연 조미소재의 제품화를 완료하였다.The production of natural seasoning materials was completed through the first experimental production and the second scale-up of the manufacturing process based on the developed mixing ratio.

(6) 간편형 발효조미소재 기반 응용 소스 식품 개발 (6) Development of application sauce food based on simple fermented seasoning material

발효 조미소재를 적용한 간편형 맛간장 소스는 액상 발효 간장 베이스를 주 원료로 하여 발효 조미소재 및 다양한 식품소재를 배합비율별로 적절히 혼합하고 살균처리하여 유통품질을 갖추고 제품화 완료하였으며 품목 제조 보고하고 정식 제품을 출시토록 하였다. The simple taste soy sauce sauce to which fermented seasoning material is applied uses liquid fermented soy sauce base as the main raw material, properly mixes fermented seasoning material and various food ingredients by mixing ratio, and sterilizes them to ensure distribution quality and completes commercialization. Item manufacturing report and official product was made to be released.

(7) 단백질 분해 활성도(Protease 활성) 측정(7) Measurement of proteolytic activity (Protease activity)

시료 10 g을 취하고 증류수를 가하여 100 mL로 한 후 30℃에서 150 rpm으로 1시간 진탕 혼합하여 추출한 여과액을 조효소액으로 하여 효소액 0.5 mL, Mcllivine씨 완충액 1 mL, 2% 우유 카제인(milk casein) 0.5 mL를 첨가한 후 항온수조 38℃에서 1시간 중탕 반응시킨 후 0.4M TCA 3 mL를 첨가하여 38℃, 20분간 중탕 반응시켰다. 이를 여과하여 얻은 여액 1 mL과 0.4M Na2CO3 5 mL, 페놀 시약(phenol reagent) 2배 희석한 액을 1 mL 반응시켜 38℃에서 30분간 반응시킨 후 660 nm 흡광도를 측정하였다. Take 10 g of the sample, add distilled water to make 100 mL, and shake and mix at 30 ° C at 150 rpm for 1 hour. The extracted filtrate is used as a crude enzyme solution, 0.5 mL of enzyme solution, 1 mL of Mcllivine's buffer, 2% milk casein After adding 0.5 mL, the mixture was reacted in a water bath at 38° C. for 1 hour, and then 3 mL of 0.4M TCA was added and reacted in a water bath at 38° C. for 20 minutes. 1 mL of the filtrate obtained by filtration, 5 mL of 0.4M Na 2 CO 3 , and 1 mL of a 2-fold diluted solution of phenol reagent were reacted at 38 ° C. for 30 minutes, and the absorbance at 660 nm was measured.

(8) pH 측정(8) pH measurement

pH는 무게 5 g을 취하고 증류수를 45 mL에 희석하여 진탕시킨 후 pH 미터(Mettler Toledo Gmbh, Switzerland)를 이용하여 측정하였다.pH was measured using a pH meter (Mettler Toledo GmbH, Switzerland) after taking a weight of 5 g, diluting it with distilled water in 45 mL and shaking it.

(9) 아미노태 질소(amino-type nitrogen) 측정(9) Measurement of amino-type nitrogen

아미노태 질소는 Formol법으로 측정하였다. 시료 1 g을 비커에 취하고 증류수 50 mL를 가하고 240초 동안 진탕 혼합하여 충분히 용해한 다음 0.1N NaOH 용액으로 적정하여 pH 8.4로 한다. 여기에 중성 포르말린 20 mL를 가하고 20초 동안 진탕 혼합한 뒤 다시 0.1N NaOH 용액으로 pH 8.4가 되도록 중화·적정하였다.Amino nitrogen was measured by the Formol method. Take 1 g of the sample in a beaker, add 50 mL of distilled water, shake and mix for 240 seconds to fully dissolve, and then titrate with 0.1N NaOH solution to pH 8.4. 20 mL of neutral formalin was added thereto, mixed with shaking for 20 seconds, and then neutralized and titrated to pH 8.4 with 0.1N NaOH solution.

(10) 총질소(Total Nitrogen) 측정(10) Measurement of total nitrogen

총질소 함량은 시료 1 g을 분해장치(Foss Digester 2020)로 분해시키고 켈텍 장치(Foss Kjeltec System 2400)를 이용하여 증류한 후 적정하여 0.1N-HCl의 mL수를 총질소로 환산하여 양을 구하였다. For total nitrogen content, 1 g of the sample is digested with a digester (Foss Digester 2020), distilled using a Keltec device (Foss Kjeltec System 2400), and then titrated to calculate the amount by converting the number of mL of 0.1N-HCl into total nitrogen. did

(11) 글루탐산(glutamate) 함량 측정(11) Measurement of glutamate content

글루탐산 측정은 유리 아미노산 자동분석기(L-8900, Hitachi High-Technologies, Tokyo, Japan)를 이용하여 글루탐산 함량을 산출하였으며, 시료 2 g을 취한 후 여기에 3차 증류수 50 mL를 첨가하여 초음파(WUC-D22H, Daehan Scientific Co., Ltd) 처리로 20분간 추출한 후 970 ×g에서 10분간 원심분리하여 상등액을 취하였다. 상등액 2 mL에 5% TCA(trichloroacetic acid) 2 mL를 첨가한 후 10,000 rpm에서 10분간 원심분리한 다음 0.02N-HCl로 희석해 0.2 ㎛ 실린지 필터(syringe filter)로 여과하여 아미노산 자동분석기로 분석하였다.For the measurement of glutamic acid, the content of glutamic acid was calculated using an automatic free amino acid analyzer (L-8900, Hitachi High-Technologies, Tokyo, Japan), and after taking 2 g of the sample, 50 mL of tertiary distilled water was added thereto and ultrasonic (WUC- D22H, Daehan Scientific Co., Ltd) treatment and extraction for 20 minutes, followed by centrifugation at 970 × g for 10 minutes to obtain the supernatant. After adding 2 mL of 5% TCA (trichloroacetic acid) to 2 mL of the supernatant, centrifuged at 10,000 rpm for 10 minutes, diluted with 0.02N-HCl, filtered through a 0.2 ㎛ syringe filter, and analyzed with an automatic amino acid analyzer. did

유리 아미노산 분석을 위한 아미노산 자동분석기 조건Amino Acid Autoanalyzer Conditions for Free Amino Acid Analysis InstrumentInstrument Hitachi L-8900Hitachi L-8900 ColumnColumn Hitachi 4.6 ×60 mm (speration)
Hitachi 4.6 ×40 mm (ammonia filtering)
Hitachi 4.6 × 60 mm (speration)
Hitachi 4.6 ×40 mm (ammonia filtering)
DetectorDetector UV/Vis (440nm-570nm)UV/Vis (440nm-570nm) Ninhydrin flow rateNinhydrin flow rate 0.35 ml/min0.35ml/min Buffer flow rate Buffer flow rate 0.40 ml/min0.40ml/min TemperatureTemperature 50℃50℃ Mobile phase Mobile phase Column Buffer set (PH-SET KANTO)Column Buffer set (PH-SET KANTO) Injection volumeInjection volume 20 ㎕20 μl

실시예 1. 균주 특이성 적용 최적 코지 제조조건 확립Example 1. Establishment of optimal conditions for preparing Koji by applying strain specificity

코지는 천연발효 조미소재 제조를 위한 발효를 시작하는 스타터 컬처(starter culture)라고 할 수 있으며, 키우고자 하는 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae)가 잘 자라도록 하기 위해 적당한 온도와 습도 조건을 도출함으로써 질 좋은 코지를 다량으로 제조하는 것을 본 실험의 목적으로 한다. 주 원료인 대두는 알콩 자체를 사용하는 것보다도 호화를 위해 볶은 후 분쇄하여 미생물이 활동할 수 있는 적용면적을 넓혀줌으로써 발효효소의 획득에 유리하다는 것을 선행연구를 통해 확인하였으며 본 실험에서는 이러한 볶음대두분에 (재)발효미생물산업진흥원으로부터 1차년도에 분양받은 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102487 균주를 접종하고, 발효 조건별(수분 함량, 발효 온도, 발효 시간) 품질을 측정하기 위한 지표로써 단백질 분해 활성도(Protease activity)를 분석하여 최적의 고체배양조건을 확립하였다. 여기에 시판 곰팡이로 접종한 코지('C')와의 비교를 통해 단백질 분해 활성도가 가장 높은 조건을 최종 선정하여 이후 저염 발효간장 제조 조건 확립실험을 진행하였다.Koji can be said to be a starter culture that starts fermentation for the production of naturally fermented seasonings, and by deriving appropriate temperature and humidity conditions for Aspergillus oryzae to grow well, The purpose of this experiment is to manufacture a large amount of quality koji. Prior research has confirmed that soybeans, the main raw material, are advantageous in obtaining fermentation enzymes by roasting and then pulverizing them for luxury rather than using the soybeans themselves to expand the application area where microorganisms can operate. Aspergillus duck material ( Aspergillus oryzae ) sold in the first year from the Fermentation Microbial Industry Promotion Agency SRCM102487 strain was inoculated, and optimal solid culture conditions were established by analyzing protease activity as an index for measuring quality for each fermentation condition (moisture content, fermentation temperature, fermentation time). Here, through comparison with Koji ('C') inoculated with a commercial fungus, the condition with the highest proteolytic activity was finally selected, and then an experiment was conducted to establish conditions for low-salt fermented soy sauce.

(1) 수분 함량(1) Moisture content

수분 함량은 37%, 42% 그리고 47%로 구간을 나누어 코지의 수분 함량에 따른 단백질 분해 활성의 차이를 보고자 하였다. 발효온도는 30℃, 발효습도는 80%로 하였으며, 발효 시간은 48시간으로 동일하게 설정하였고 발효 진행에 따라 발효 품온이 상승할 때마다 뒤집기를 실시하여 원하는 품온을 유지하고자 하였다.Moisture content was divided into 37%, 42% and 47% to see the difference in proteolytic activity according to the moisture content of Koji. The fermentation temperature was 30℃, the fermentation humidity was 80%, and the fermentation time was set to 48 hours. As the fermentation proceeded, whenever the temperature of the fermentation product increased, it was turned over to maintain the desired product temperature.

그 결과, 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102487 균주를 접종한 코지의 수분 함량이 42% 조건일 때 395.77 u/g으로 가장 높은 단백질 분해 활성을 보였으며 이는 시판 곰팡이로 42% 조건일 때 제조한 코지(Control)의 단백질 분해 활성 결과인 366.57 u/g보다 높은 활성을 보였음을 알 수 있다. 코지의 수분 함량을 37%로 제조한 경우 세균의 오염없이 코지의 제조는 가능하나 곰팡이가 활발하게 자랄 수 있는 환경에는 상대적으로 부족한 것으로 판단되며 수분 함량이 47%인 구간에서는 높은 수분 함량에 따라 바실러스 계열의 다른 잡균이 함께 자라면서 암모니아취를 형성하는 것으로 관찰되었다. 특히, 수분 함량이 높을수록 미생물의 발효가 활발한 것은 맞으나 잡균으로부터 발효환경의 관리가 실험실에 비해 상대적으로 힘든 대량 현장 생산체계 하에서는 코지의 품질을 일정하게 관리하는 것이 어렵기 때문에 일정수준 이상의 수분 전처리를 거친 제국 조건은 잡균이 억제되면서 효소활성이 높은 코지의 생산으로써는 부적절하다고 판단된다. 따라서 본 실험결과를 통해 개발된 아스퍼질러스 SRCM102487 균주를 적용함에 있어 단백질 분해 활성이 뛰어나면서 코지의 품질을 일정하게 유지시키는 적당한 수분 함량은 42%임을 결론적으로 알 수 있었다(도 1).As a result, Aspergillus duck material ( Aspergillus oryzae ) Koji inoculated with the SRCM102487 strain showed the highest proteolytic activity at 395.77 u/g when the water content was 42%, which was 366.57 as a result of the proteolytic activity of Koji (Control) prepared at 42% as a commercial fungus. It can be seen that the activity was higher than u/g. When the moisture content of koji is 37%, it is possible to manufacture koji without bacterial contamination, but it is judged to be relatively insufficient in an environment where mold can grow actively. It was observed that other germs of the family grow together to form an ammonia odor. In particular, it is true that the higher the moisture content, the more active the fermentation of microorganisms. The harsh imperial conditions are judged to be inappropriate for the production of Koji with high enzyme activity while suppressing various germs. Therefore, Aspergillus developed through the results of this experiment In applying the SRCM102487 strain, it was concluded that the appropriate water content for maintaining the quality of Koji constant while having excellent proteolytic activity was 42% (FIG. 1).

수분 함량에 따른 코지의 단백질 분해 활성도(u/g)Proteolytic activity of koji according to water content (u/g) 수분함량(%)Moisture content (%) ControlControl 아스퍼질러스 오리재 SRCM102487Aspergillus duck SRCM102487 3737 197.03±6.32197.03±6.32 205.07±6.05205.07±6.05 4242 366.57±9.35366.57±9.35 395.77±8.39395.77±8.39 4747 306.37±9.7306.37±9.7 336.20±7.78336.20±7.78

(2) 발효 온도(2) Fermentation temperature

상기 실험에서 코지 제조시 단백질 분해 활성도가 가장 높았던 제국시 수분 조건은 42%였으며 최적의 발효온도 구간을 도출하기 위하여 최적의 수분조건 42%, 발효 습도 80%하에서 48시간 발효를 진행토록 하고 이때의 발효 온도 실험구간으로써 25℃와 30℃ 그리고 35℃로 구분하여 실험을 진행하였다. 본 실험을 진행함에 있어 품온 상승시 뒤집기를 진행하여 품온을 유지하고자 하였으며 그 결과, 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102487 균주를 접종한 코지의 경우 발효온도 30℃ 조건에서 404.83 u/g으로 가장 높은 단백질 분해 활성을 나타냈으며, 시판 곰팡이로 제조한 코지보다 높은 단백질 분해 활성을 나타내었다. 발효 온도 25℃ 조건으로 제조한 코지의 경우 곰팡이의 생육이 활발해지는 품온까지 올라오는 시간이 길어지고 이로써 아무리 항습조건을 유지한다 하더라도 곰팡이 생육이 활발해지기 전에 표면의 수분이 증발하여 코지로써의 가치가 떨어지는 것을 확인할 수 있었다. 또한, 발효 온도를 35℃로 하여 진행할 경우 초반 미생물 증식이 활발하게 이루어 질 수 있으나 미생물의 증식이 활발해짐에 따라 발효품온이 40℃ 이상 올라가면서 온도의 제어가 힘들고 단백질 특히 콩을 배지로 하여 40℃ 이상에서 잘 자라는 고온성 잡균이 자라기 쉬운 것으로 관찰되었으며 이로 인해 주요 단백질 효소원인 곰팡이 균주의 생육에 간섭을 받아 단백질 분해 활성도가 낮게 측정되는 것으로 판단되었다. 특히 실험실 환경이 아닌 현장 대량 생산에 적용시 품온 유지나 잡균의 관리상 어려움이 많은 바 균일화된 품질의 코지를 대량 획득하기 위해서도 높은 온도에서의 제국이 바람직하지는 않은 것으로 판단하였다(도 2). In the above experiment, the moisture condition of Imperial City, which had the highest proteolytic activity during Koji production, was 42%. As the fermentation temperature experiment section, the experiment was conducted by dividing it into 25 ℃, 30 ℃, and 35 ℃. In this experiment, when the product temperature rises, the product temperature was maintained by turning over, and as a result, Aspergillus duck material ( Aspergillus oryzae ) In the case of koji inoculated with SRCM102487 strain, the highest proteolytic activity was shown at 404.83 u/g under the condition of fermentation temperature of 30 ° C, and it showed higher proteolytic activity than that of koji prepared with commercial fungi. In the case of koji manufactured under the fermentation temperature condition of 25℃, it takes longer to rise to the temperature at which mold growth is active, and even if the constant humidity condition is maintained, the moisture on the surface evaporates before mold growth becomes active, increasing the value of koji. I could see it falling. In addition, when the fermentation temperature is set at 35 ° C, the growth of microorganisms can be actively performed in the early stages, but as the growth of microorganisms becomes active, the temperature of the fermented product rises above 40 ° C, making it difficult to control the temperature. It was observed that thermophilic bacteria that grow well above ℃ were easy to grow, and this interfered with the growth of fungal strains, which are major protein enzyme sources, and it was judged that the proteolytic activity was measured low. In particular, when applied to field mass production rather than a laboratory environment, it is difficult to maintain product temperature or manage germs, so it was judged that empire at high temperature is not desirable to obtain a large amount of koji of uniform quality (FIG. 2).

발효 온도에 따른 코지의 단백질 분해 활성도(u/g)Proteolytic activity of koji according to fermentation temperature (u/g) 발효온도(℃)Fermentation temperature (℃) ControlControl 아스퍼질러스 오리재 SRCM102487Aspergillus duckweed SRCM102487 2525 193.13±4.74193.13±4.74 198.27±2.80198.27±2.80 3030 378.07±3.37378.07±3.37 404.83±5.86404.83±5.86 3535 231.77±6.14231.77±6.14 293.83±4.99293.83±4.99

(3) 발효 시간(3) Fermentation time

상기 실험에서 코지 제조 시 단백질 분해 활성도가 가장 높았던 수분 함량은 42%, 발효 온도 30℃였으며, 최적의 수분 및 온도 조건으로 고정하고 발효 습도는 80%로 하였으며, 여기에 발효 시간을 24시간, 30시간, 36시간, 42시간, 48시간으로 구분하여 최적의 단백질 분해 활성도를 관찰하였다. 그 결과 발효 42시간에 단백질 분해 활성도가 가장 높게 나타났으며 그 이후로 시간 연장에 따른 프로테아제 효소 활성도의 상승은 없는 것으로 나타났다. 아스퍼질러스 오리재 SRCM102487 균주로 제조한 코지의 경우 발효 42시간에서 392.50 u/g을 보여 시판 곰팡이로 제조한 코지보다 높은 활성을 나타냈으며 발효 48시간 이후에는 곰팡이가 포자를 형성하여 특유의 진녹색이 진해지며 포자가 공기중에 쉽게 날리게 됨에 따라 연구 환경의 조성에 해가 되었다. 또한, 포자를 생성하고난 후 효소 활성도의 상승 또한 크게 눈에 띄지 않는 바 발효 시간을 연장하는 것은 의미가 없는 것으로 판단하였다. 특히 영리목적 관점에서 최적의 효소활성도를 나타내는 발효시간이 길어짐에 따라 유틸리티 비용이나 재고비용이 상승하는바 발효를 42시간까지 유지하고 그 이후로는 발효를 중지시키는 것이 경제적인 면에서도 효율적인 것으로 판단하였다(도 3).In the above experiment, the moisture content with the highest proteolytic activity was 42%, the fermentation temperature was 30 ° C, and the optimum moisture and temperature conditions were fixed and the fermentation humidity was 80%. The optimal proteolytic activity was observed at 36 hours, 42 hours, and 48 hours. As a result, the proteolytic activity was the highest at 42 hours of fermentation, and thereafter, there was no increase in protease enzyme activity with time extension. Aspergillus duckweed In the case of koji prepared with SRCM102487 strain, 392.50 u/g at 42 hours of fermentation, showing higher activity than koji prepared with commercial fungi. As it is easily blown away during the flight, it is detrimental to the creation of the research environment. In addition, since the increase in enzyme activity after generating spores was also not very noticeable, it was judged that extending the fermentation time was meaningless. In particular, from the point of view of profit, as the fermentation time, which shows the optimal enzyme activity, increases, the utility cost or inventory cost rises, so it was judged to be economically efficient to maintain fermentation for up to 42 hours and stop fermentation after that. (Fig. 3).

발효시간에 따른 코지의 단백질 분해 활성도(u/g)Proteolytic activity of koji according to fermentation time (u/g) 발효시간(hr)Fermentation time (hr) ControlControl 아스퍼질러스 오리재 SRCM102487Aspergillus duckweed SRCM102487 2424 149.27±5.05149.27±5.05 142.92±6.99142.92±6.99 3030 193.60±2.10193.60±2.10 196.97±2.32196.97±2.32 3636 283.80±7.78283.80±7.78 306.23±4.76306.23±4.76 4242 370.27±6.58370.27±6.58 392.50±5.38392.50±5.38 4848 369.05±7.59369.05±7.59 383.70±4.42383.70±4.42

결과적으로 아스퍼질러스 오리재 SRCM102487균주를 적용한 대두 코지 제조의 최적 조건은 수분함량 42%, 발효온도 30℃, 발효시간 42시간이 발효 효율 및 대량 현장화 생산시의 경제적인 면에서도 가장 최적임을 알 수 있었다. As a result, the optimal conditions for manufacturing soybean koji using the Aspergillus duck stock SRCM102487 strain are 42% moisture content, 30℃ fermentation temperature, and 42 hours fermentation time. could

실시예 2. 저염 액상 발효 간장 제조조건 확립 Example 2. Establishment of manufacturing conditions for low-salt liquid fermented soy sauce

식품에 있어 완제품의 품질을 제어하기 위한 방법에는 보편적으로 특히 가공식품의 경우 보존료를 사용하거나 당을 활용한 brix의 상승이나 염 첨가에 의한 병원성 미생물의 활동 제어, 혹은 pH 저하를 위한 초절임 등의 천연제법이 존재한다고 알려져 있다. Methods for controlling the quality of finished products in food products include the use of preservatives, especially in the case of processed foods, the increase of brix using sugar, the control of the activity of pathogenic microorganisms by the addition of salt, or natural pickling in vinegar to lower the pH. It is known that a recipe exists.

본 실험에서는 저염 하에서 이상발효가 되지 않고 조미기능이 극대화된 액상 발효 간장의 제조조건을 도출하는 것이 가장 중요한 과제의 목표라고 할 수 있으며 본 연구를 위한 저염 액상 발효 간장은 상기와 같이 확립된 최적 대두 코지에 정수를 넣어 액상화하고 목적에 맞게 천일염을 투입하여 각 발효조건별(고형분 함량, 발효 온도, 발효 시간, 염 농도, 염 투입시기) 균질 혼합하여 저염 액상 발효 간장의 제조조건을 확립하였다. 또한, 시판 곰팡이인 충무발효 균주를 본 연구결과를 통해 확립된 제조조건에 적용하여 저염 액상 발효 간장(이하‘Control’)를 제조하여 대조구로 설정하고 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102487를 적용한 대두 코지로 제조한 저염 액상 발효 간장(이하‘Sample’)과의 이화학적 분석을 통하여 결과를 확인함으로써 본 과제의 목표를 완성코자 하였다. In this experiment, the goal of the most important task is to derive manufacturing conditions for liquid fermented soy sauce with maximized seasoning function without abnormal fermentation under low salt. Purified water was put into the koji to liquefy, and bay salt was added according to the purpose, and homogeneously mixed for each fermentation condition (solid content, fermentation temperature, fermentation time, salt concentration, salt input time) to establish the manufacturing conditions of low-salt liquid fermented soy sauce. In addition, low-salt liquid fermented soy sauce (hereinafter referred to as 'Control') was prepared by applying the commercially available fungus Chungmu fermentation strain to the manufacturing conditions established through the results of this study, set as a control, and Aspergillus duck material ( Aspergillus oryzae ) SRCM102487 was applied We tried to complete the goal of this task by confirming the results through physicochemical analysis with low-salt liquid fermented soy sauce (hereinafter referred to as 'Sample') prepared with soybean koji.

(1) 고형분(Brix) 함량 선정 실험(1) Solid content (Brix) content selection test

액상 발효 간장은 고형분인 콩 코지로부터 혼합된 물로 수용성 지미성분이 용출되는 과정이라고 할 수 있으며 고형분의 용출 효율을 최대한으로 높힐 수 있는 제조조건을 확립하는 것이 중요하다고 하겠다. 이때 고형분 대 물의 혼합비율이 높을수록 액상에 용출되는 성분의 함량이 높아질 수 있겠으나 너무 높은 고형분 함량은 용출을 용이하게 하기 위한 교반 등에 부적합하여 대량 생산에 부적합하며 너무 낮은 고형분 함량은 용출되는 성분의 수용성 brix의 함량이 낮음으로써 잡균 오염 등에 취약할 수 있으며 액상에 용출되는 성분의 함량이 낮아 지미성분의 함량이 낮고 상대적으로 조미 소재화할 때 염도 등에 비해 지미성분의 함량이 낮으면 배합비율이 한정적일 수 밖에 없는 등의 결론적으로 상품으로써의 가치가 낮아지는 문제점이 있다고 하겠다. 본 실험에서 성분의 용출이 용이하도록 하기위한 교반이 가능한 고형분 함량은 간이실험 결과 20~25 brix가 가장 적당하였으며 이에 따라 실험구간을 20 brix와 23 brix 그리고 25 brix로 설정하고 발효 온도를 45℃ 조건으로 하여 무염상태에서 24시간 동안 우선 발효테스트를 진행하였다. 그 결과, 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102487 균주를 접종한 코지로 제조한 시료의 pH는 고형분 함량이 높을수록 pH가 다소 하락하는 결과를 보였는데 이는 시판 곰팡이로 제조한 Control의 경우 고형분 함량이 높을수록 pH가 소폭 높아지는 결과와 상이한 양상을 보였으며 두 실험구에서 고형분 함량이 높을수록 아미노태 질소 함량(이하‘AN’)과 총 질소 함량(이하‘TN’) 그리고 글루탐산 함량(이하‘GA’)이 높아지는 경향을 확인할 수 있었다. 이화학적 결과로 볼 때 25 brix가 가장 결과가 좋았던 구간이였지만 균질화 부분이나 여과할 때 뻑뻑하여 수율이 굉장히 낮았음을 확인하였다. 또한, 고형분의 함량이 너무 높으면 대량 현장 생산시 교반이 불가능할 것으로 판단되며 23 brix에 비해 균질화가 어려울 경우 염의 용해나 잡균의 증식 등 대량 생산에 다른 문제점이 발생할 것으로 예상하여 조미소재로의 확장가능성이나 고 GA, 고 TN 생장액을 얻기 위해서는 고형분 함량 23 brix가 가장 적합할 것으로 본 실험 결과 판단하였다.Liquid fermented soy sauce can be said to be a process in which water-soluble flavor components are eluted from the solid soybean paste into the mixed water, and it is important to establish manufacturing conditions that can maximize the elution efficiency of the solid content. At this time, the higher the mixing ratio of solids to water, the higher the content of components eluted in the liquid phase. As the content of water-soluble brix is low, it may be vulnerable to bacterial contamination, and the content of ingredients eluted in the liquid phase is low, so the content of flavoring ingredients is relatively low. In conclusion, there is a problem that the value as a product is lowered. In this experiment, 20 to 25 brix was the most appropriate for the solid content that could be stirred to facilitate the dissolution of the components. As a result, a fermentation test was performed for 24 hours in a salt-free state. As a result, the pH of the sample prepared from Koji inoculated with Aspergillus oryzae SRCM102487 strain showed a slight decrease in pH as the solid content increased. The higher the pH, the higher the pH. In both experimental groups, the higher the solid content, the amino nitrogen content (hereinafter 'AN'), total nitrogen content (hereinafter 'TN'), and glutamic acid content (hereinafter 'GA'). ) was found to increase. Looking at the physicochemical results, it was confirmed that 25 brix was the section with the best results, but the yield was very low because it was stiff during homogenization or filtration. In addition, if the solid content is too high, it is judged that stirring will not be possible during mass field production, and if homogenization is difficult compared to 23 brix, it is expected that other problems will occur in mass production, such as dissolution of salt or proliferation of various germs. As a result of this experiment, it was judged that a solid content of 23 brix would be most appropriate to obtain a high GA, high TN growth fluid.

고형분(Brix) 함량에 따른 저염 발효 간장 분석 결과Analysis result of low salt fermented soy sauce according to solid content (Brix) Quality characteristicsQuality characteristics BrixBrix ControlControl Sample Sample pHpH 2020 5.10±0.015.10±0.01 5.40±0.015.40±0.01 2323 5.17±0.015.17±0.01 5.28±0.025.28±0.02 2525 5.27±0.035.27±0.03 5.21±0.025.21±0.02 Amino type nitrogen content(mg%)Amino type nitrogen content (mg%) 2020 557.29±2.87557.29±2.87 625.11±1.26625.11±1.26 2323 642.73±12.88642.73±12.88 734.60±3.64734.60±3.64 2525 737.19±4.13737.19±4.13 783.87±5.46783.87±5.46 Total nitrogen content(N%)Total nitrogen content (N%) 2020 1.14±0.011.14±0.01 1.38±0.011.38±0.01 2323 1.39±0.011.39±0.01 1.67±0.011.67±0.01 2525 1.61±0.011.61±0.01 1.74±0.011.74±0.01 Glutamate content(%)Glutamate content (%) 2020 0.79±0.010.79±0.01 0.92±0.010.92±0.01 2323 0.90±0.010.90±0.01 1.00±0.011.00±0.01 2525 0.98±0.010.98±0.01 1.06±0.011.06±0.01

(2) 발효 온도 선정 실험(2) Fermentation temperature selection experiment

상기 실험 결과에 따라 brix 함량은 23 brix로 동일한 조건으로 설정하였으며, 발효온도를 35℃, 45℃ 그리고 55℃로 구간을 나누어 무염상태에서 24시간 동안 발효하였다. 온도별 분해 정도를 분석한 결과 두 처리구 모두 45℃에서 발효하였을 때 AN과 GA가 높게 측정되었으며 대표적인 간장의 품질지표로 사용되는 TN은 55℃로 발효하였을 때 높은 결과를 보였다. 반면 35℃로 발효하였을 때 이상발효 상태의 향이 관찰되었으며 발효온도 55℃로 분해하였을때도 pH는 높게 측정되었으며 고온 발효시 TN의 용출 함량이 높더라도 추후 조미소재로 배합하였을 때 색상이 진해질 우려가 있는 것으로 나타나 최적의 발효온도를 45℃로 셋팅하는 것이 바람직할 것으로 판단하였다.According to the above experimental results, the brix content was set to the same condition as 23 brix, and the fermentation temperature was divided into 35 ° C, 45 ° C and 55 ° C, and fermented for 24 hours in a salt-free state. As a result of analyzing the degree of decomposition by temperature, AN and GA were measured to be high when fermented at 45℃ in both treatments, and TN, which is used as a representative quality indicator of soy sauce, showed high results when fermented at 55℃. On the other hand, when fermented at 35 ℃, the fragrance of the abnormal fermentation state was observed, and even when the fermentation temperature was decomposed at 55 ℃, the pH was measured high. It was determined that it would be desirable to set the optimum fermentation temperature to 45 ° C.

발효 온도에 따른 저염 발효 간장 분석 결과Analysis of low-salt fermented soy sauce according to fermentation temperature Quality characteristicsQuality characteristics 발효 온도(℃)Fermentation temperature (℃) ControlControl Sample Sample pHpH 3535 5.92±0.015.92±0.01 6.10±0.026.10±0.02 4545 5.17±0.015.17±0.01 5.28±0.025.28±0.02 5555 6.01±0.016.01±0.01 6.03±0.016.03±0.01 Amino type nitrogen content(mg%)Amino type nitrogen content (mg%) 3535 592.49±1.54592.49±1.54 681.72±17.71681.72±17.71 4545 642.73±12.88642.73±12.88 734.59±3.65734.59±3.65 5555 472.09±6.83472.09±6.83 447.79±3.01447.79±3.01 Total nitrogen content(N%)Total nitrogen content (N%) 3535 1.39±0.011.39±0.01 1.53±0.011.53±0.01 4545 1.39±0.011.39±0.01 1.39±0.011.39±0.01 5555 1.44±0.021.44±0.02 1.86±0.011.86±0.01 Glutamate content(%)Glutamate content (%) 3535 0.75±0.010.75±0.01 0.71±0.010.71±0.01 4545 0.90±0.010.90±0.01 1.00±0.011.00±0.01 5555 0.28±0.010.28±0.01 0.53±0.010.53±0.01

(3) 발효 기간 선정 실험(3) Fermentation period selection experiment

최적의 발효 시간 선정을 위해 고형분 23 brix, 발효온도 45℃에서 총 7일에 거쳐 분해하고 발효 1일, 발효 3일, 발효 5일, 발효 7일로 구간을 나누어 품질 변화를 분석하였다. 다음과 같이 3일차에서 GA 분해용출이 관찰되었으며, 그 이후로 소폭 증가는 하였으나 큰 변화는 없었다. 다만 발효 7일차에 높은 AN, TN, GA 함량을 보였으나 pH의 변화 및 자체 관능을 확인했을 때 7일차 이후로 pH의 하락 및 약간 시큼한 향이 시작되어 소량 제조가 아닌 대량 생산시 안정적으로 운영하기에는 7일까지 분해를 연장하기에는 무리가 있다고 판단되므로 5일차에 발효를 종료하기로 하였다. In order to select the optimal fermentation time, it was decomposed over a total of 7 days at a solid content of 23 brix and a fermentation temperature of 45 ° C, and the quality change was analyzed by dividing into fermentation 1 day, fermentation 3 days, fermentation 5 days, and fermentation 7 days. As follows, GA decomposition and elution were observed on the 3rd day, and thereafter, there was a slight increase, but no significant change. However, high AN, TN, and GA contents were shown on the 7th day of fermentation, but when the pH change and self-sensory characteristics were confirmed, the pH decreased and a slightly sour scent began after the 7th day, so it was difficult to operate stably in mass production rather than small-scale production. It was judged that it was unreasonable to prolong the decomposition up to 5 days, so it was decided to end the fermentation on the 5th day.

발효 기간에 따른 저염 발효 간장 분석 결과Analysis of low-salt fermented soy sauce according to fermentation period Quality characteristicsQuality characteristics 발효기간(day)Fermentation period (day) ControlControl Sample Sample pHpH 1One 5.17±0.015.17±0.01 5.28±0.015.28±0.01 33 5.09±0.035.09±0.03 5.10±0.025.10±0.02 55 4.94±0.014.94±0.01 4.93±0.024.93±0.02 77 4.94±0.014.94±0.01 4.83±0.024.83±0.02 Amino type nitrogen content(mg%)Amino type nitrogen content (mg%) 1One 642.73±12.88642.73±12.88 734.59±3.64734.59±3.64 33 827.99±9.24827.99±9.24 860.30±2.66860.30±2.66 55 889.37±1.47889.37±1.47 939.61±2.31939.61±2.31 77 894.48±6.58894.48±6.58 959.41±1.82959.41±1.82 Total nitrogen content(N%)Total nitrogen content (N%) 1One 1.57±0.011.57±0.01 1.39±0.011.39±0.01 33 1.56±0.011.56±0.01 1.49±0.011.49±0.01 55 1.58±0.011.58±0.01 1.63±0.011.63±0.01 77 1.61±0.011.61±0.01 1.62±0.011.62±0.01 Glutamate content(%)Glutamate content (%) 1One 0.90±0.010.90±0.01 1.00±0.011.00±0.01 33 1.29±0.011.29±0.01 1.27±0.011.27±0.01 55 1.28±0.011.28±0.01 1.30±0.011.30±0.01 77 1.32±0.011.32±0.01 1.32±0.011.32±0.01

(4) 염 농도 선정 실험(4) Salt concentration selection experiment

염 농도 차이에 따른 액상 발효 간장의 이화학적 분석 결과는 표 8과 같다. 고형분 23 brix, 발효 온도 45℃, 발효 시간 5일 조건 하에서 염 농도는 무염(0%), 5%, 10%, 15%로 설정 후 발효시작 시점부터 염을 투입하여 실험을 진행하였다. Sample의 경우 염 농도가 높을수록 pH에서 비교적 안정적인 모습이 관찰되었으나 모든 실험구에서 염 농도가 높을수록 AN, TN, GA 함량은 상대적으로 낮아지는 것이 일관성있게 확인되었다. 따라서 단백질의 분해에 염이 끼치는 영향이 큰 것으로 판단되며 본 실험에서 염 포함구에 비해 무염조건의 분해효율이 월등히 우수한 바 대량 생산조건에서 품질열화가 되지 않는 선에서 발효조건을 어떻게 잡을 것인지가 중요한 실험 포인트로 판단되었다. 반복실험을 통해 염 5% 이하 구간에서는 발효시간이 경과됨에 따라 pH가 감소되고 잡균취가 나는 구간이 있었으므로 품질표준화에 애로사항이 발생할 것으로 판단되었으며 염 15%에서는 염 농도가 낮은 실험구에 비해 AN, TN, GA 함량이 일률적으로 낮게 나타남으로써 조미 소재로써의 가치가 떨어지므로 적당한 분해율과 품질에 안정적인 염 농도를 본 실험에서는 10%로 판단하였다. 염 10%는 일반적인 한식방식에서의 염도 18~22% 수준과 양조방식에서의 16~18% 수준과 비교에서 현저히 낮은 염농도 수준이나 본 실험의 목적을 달성하기 위해서는 염농도를 저염화하는 것이 중요한 실험의 목적이 된다고 할 수 있겠으며 발효시작일부터 염을 투입할 경우 조미소재의 가장 중요한 포인트인 GA 분해율이 낮아짐에 따라 초기 저염으로 시작하여 염도를 단계별로 상승시키는 등의 염 투입시기 조정을 통해 목적하는 바를 달성하기 위한 추가실험을 진행토록 하였다. The results of physicochemical analysis of liquid fermented soy sauce according to the difference in salt concentration are shown in Table 8. Under the conditions of solid content of 23 brix, fermentation temperature of 45 ° C, and fermentation time of 5 days, the salt concentration was set to no salt (0%), 5%, 10%, and 15%, and then the experiment was conducted by adding salt from the start of fermentation. In the case of samples, the higher the salt concentration, the more stable the pH was observed, but it was consistently confirmed that the higher the salt concentration, the lower the AN, TN, and GA contents in all experimental groups. Therefore, it is judged that salt has a great effect on protein degradation, and in this experiment, the degradation efficiency of salt-free conditions is far superior to that of the salt-containing group. It was judged as an experimental point. Through repeated experiments, it was judged that there would be difficulties in quality standardization because the pH decreased and there was a section where the fermentation time elapsed in the section with less than 5% salt, and there was a section with odors of germs. As the contents of AN, TN, and GA were uniformly low, the value as a seasoning material was reduced, so the appropriate decomposition rate and stable salt concentration for quality were determined to be 10% in this experiment. 10% salt is a significantly lower salt concentration level compared to the 18-22% salinity level in the general Korean cooking method and the 16-18% level in the brewing method, but it is important to reduce the salt concentration to achieve the purpose of this experiment It can be said that this is the purpose, and when salt is added from the start of fermentation, as the GA decomposition rate, which is the most important point of seasoning material, decreases, the purpose is achieved by adjusting the timing of salt input, such as starting with low salt and increasing the salinity step by step. Additional experiments were conducted to achieve this.

염 농도에 따른 저염 발효 간장 분석 결과Analysis of low-salt fermented soy sauce according to salt concentration Quality characteristicsQuality characteristics 염 농도 salt concentration ControlControl Sample Sample pHpH 00 4.94±0.014.94±0.01 4.93±0.024.93±0.02 55 4.83±0.014.83±0.01 4.88±0.014.88±0.01 1010 4.65±0.024.65±0.02 5.14±0.015.14±0.01 1515 5.03±0.015.03±0.01 5.17±0.035.17±0.03 Amino type nitrogen content (mg%)Amino type nitrogen content (mg%) 00 889.37±1.47889.37±1.47 939.62±2.31939.62±2.31 55 619.09±7.14619.09±7.14 710.40±1.74710.40±1.74 1010 469.63±4.27469.63±4.27 532.62±8.05532.62±8.05 1515 347.12±5.39347.12±5.39 383.40±17.85383.40±17.85 Total nitrogen content (N%)Total nitrogen content (N%) 00 1.58±0.011.58±0.01 1.58±0.011.58±0.01 55 1.71±0.011.71±0.01 1.96±0.011.96±0.01 1010 1.65±0.011.65±0.01 1.64±0.011.64±0.01 1515 1.45±0.011.45±0.01 1.56±0.011.56±0.01 Glutamate content (%)Glutamate content (%) 00 1.27±0.021.27±0.02 1.29±0.021.29±0.02 55 0.87±0.010.87±0.01 1.04±0.021.04±0.02 1010 0.66±0.010.66±0.01 0.70±0.010.70±0.01 1515 0.42±0.020.42±0.02 0.52±0.010.52±0.01

(5) 염 투입시기 선정 실험(5) Experiment on selection of salt input period

상기 실험에서 저염 발효 간장의 품질에 안정적인 염 농도는 10%임을 확인하였고 이를 바탕으로 GA 분해율이 높으면서 품질을 안정적으로 운영할 수 있는 적당한 염 투입시기를 알아보기 위해 고형분 23 brix, 발효온도 45℃, 발효시간 5일, 염 농도 10% 조건 하에서 염 투입시기를 발효 1일차, 발효 2일차, 발효 3일차, 발효 4일차, 발효 5일차에 각각 염을 투입하여 최종 발효 완료일인 5일차에 목적하는 품질수준이 나오는지를 분석토록 하였다. 그 결과, 발효 4일차에 염을 투입한 처리구의 GA 함량이 가장 높게 나타났으며, 또한, AN과 TN 함량도 높은 결과를 보였으나 pH가 약간 저하되는 현상을 보였다. 한편 발효 1~2일차에 염을 투입한 처리구의 경우 pH는 안정적이나 GA, AN, TN 함량이 낮았고 발효 4일차 이후에는 GA, AN, TN 함량은 높으나 pH가 저하되는 현상을 보여 대량생산에서는 통제가 불안정한 모습을 보일 가능성이 있기에 발효 3일차에 염을 투입하여 공정을 안정적으로 운영하는 것이 대량 생산화에 유리할 것으로 판단하였다.In the above experiment, it was confirmed that the salt concentration stable for the quality of the low-salt fermented soy sauce was 10%. Under the condition of fermentation time of 5 days and salt concentration of 10%, salt was added on the 1st day of fermentation, 2nd day of fermentation, 3rd day of fermentation, 4th day of fermentation, and 5th day of fermentation, respectively, to achieve the desired quality on the 5th day, the final fermentation completion date. levels were analyzed. As a result, on the 4th day of fermentation, the salt-injected treatment group showed the highest GA content, and also showed high AN and TN contents, but the pH slightly decreased. On the other hand, in the case of the treatment group where salt was added on the 1st and 2nd day of fermentation, the pH was stable but the GA, AN, and TN contents were low, and after the 4th day of fermentation, the GA, AN, and TN contents were high, but the pH decreased. Since there is a possibility of showing an unstable appearance, it was judged that it would be advantageous for mass production to stably operate the process by adding salt on the third day of fermentation.

염 투입시기에 따른 저염 발효 간장 분석 결과Analysis result of low-salt fermented soy sauce according to salt input time Quality characteristicsQuality characteristics 발효기간(day)Fermentation period (day) ControlControl SampleSample pHpH 1One 4.77±0.014.77±0.01 5.12±0.015.12±0.01 22 4.66±0.024.66±0.02 4.86±0.024.86±0.02 33 4.64±0.014.64±0.01 4.84±0.014.84±0.01 44 4.62±0.014.62±0.01 4.63±0.014.63±0.01 55 4.59±0.014.59±0.01 4.57±0.014.57±0.01 Amino type nitrogen content (mg%)Amino type nitrogen content (mg%) 1One 617.49±2.31617.49±2.31 684.73±1.82684.73±1.82 22 781.50±14.84781.50±14.84 708.41±6.86708.41±6.86 33 818.93±11.48818.93±11.48 855.00±2.59855.00±2.59 44 832.93±9.31832.93±9.31 843.01±5.39843.01±5.39 55 826.38±6.93826.38±6.93 830.89±5.44830.89±5.44 Total nitrogen content (N%)Total nitrogen content (N%) 1One 1.48±0.011.48±0.01 1.61±0.011.61±0.01 22 1.51±0.011.51±0.01 1.52±0.011.52±0.01 33 1.54±0.011.54±0.01 1.65±0.011.65±0.01 44 1.50±0.011.50±0.01 1.67±0.011.67±0.01 55 1.61±0.011.61±0.01 1.67±0.011.67±0.01 Glutamate content (%)Glutamate content (%) 1One 0.87±0.020.87±0.02 0.93±0.010.93±0.01 22 1.11±0.011.11±0.01 0.96±0.010.96±0.01 33 1.14±0.011.14±0.01 1.17±0.021.17±0.02 44 1.14±0.011.14±0.01 1.20±0.011.20±0.01 55 1.11±0.011.11±0.01 1.18±0.011.18±0.01

최종적으로 개발코자 하는 저염 발효 간장은 고형분 함량 23 brix, 발효온도 45℃, 발효시간 5일, 최종 염 농도 10%, 발효 3일차 염을 투입하는 조건을 최적 발효조건으로 설정하였으며 , 본 실험에서 도출된 제조조건에 저염하에서 이상발효가 되지 않고 조미기능이 극대화된 저염 발효 간장의 제조조건을 도출하였다고 하겠다. The low-salt fermented soy sauce to be finally developed was set as the optimal fermentation conditions: solids content of 23 brix, fermentation temperature of 45 ℃, fermentation time of 5 days, final salt concentration of 10%, and salt input on the 3rd day of fermentation. It can be said that the production conditions of low-salt fermented soy sauce with maximized seasoning function were derived without abnormal fermentation under low salt.

실시예 3. 저염 발효 간장 제조공정 Scale-up 및 공정 표준화Example 3. Low-salt fermented soy sauce manufacturing process scale-up and process standardization

본 연구를 통해 조미성분의 용출이 극대화된 저염 발효 간장의 최종 제조공정은 본 생산전에 lab-scale을 거쳐 현장에 적합한 제법연구를 실시하고 품질과 관능을 확인함으로써 원하는 품질과 관능조건이 도출된 조건으로 Scale-up을 통해 대량 생산체계를 갖추도록 하였다. 표준화된 품질의 제품에 대한 대량 제조공정을 갖추는 것은 신제품의 레시피를 도출하고 개발하는 것 만큼이나 중요한 사항으로 이를 위해서는 대량 실험 생산을 통해 공정를 표준화하는 것이 필요하다. Through this study, the final manufacturing process of low-salt fermented soy sauce with maximized elution of seasoning ingredients went through a lab-scale before production, conducted a manufacturing method study suitable for the field, and confirmed the quality and sensory quality, conditions in which the desired quality and sensory conditions were derived. It was equipped with a mass production system through scale-up. Having a mass manufacturing process for standardized quality products is as important as deriving and developing recipes for new products, and for this, it is necessary to standardize the process through mass experimental production.

(1) 최종 조건으로 제조한 Scale-up 저염 발효 간장 품질 분석(1) Quality analysis of scale-up low-salt fermented soy sauce prepared under final conditions

최종 조건으로 제조한 Scale-up 저염 발효 간장의 품질 분석 결과는 하기 표 10 및 11과 같다. 최종 조건으로 제조한 저염 발효 간장은 높은 GA, AN, TN 함량을 나타내었고, 저염으로 나타났다.The quality analysis results of Scale-up low-salt fermented soy sauce prepared under the final conditions are shown in Tables 10 and 11 below. The low-salt fermented soy sauce prepared in the final condition showed high GA, AN, and TN contents and was low-salt.

최종 조건으로 제조한 Scale-up 저염 발효 간장 품질 분석 결과Scale-up low-salt fermented soy sauce quality analysis result prepared under final conditions Quality characteristicsQuality characteristics ControlControl Sample Sample pHpH 4.69±0.024.69±0.02 4.88±0.014.88±0.01 Amino type nitrogen content (mg%)Amino type nitrogen content (mg%) 805.50±7.21805.50±7.21 830.98±5.53830.98±5.53 Total nitrogen content (N%)Total nitrogen content (N%) 1.60±0.011.60±0.01 1.73±0.011.73±0.01 Glutamate content (%)Glutamate content (%) 1.10±0.011.10±0.01 1.21±0.011.21±0.01

Scale-up 저염 발효 간장 품질 분석 데이터Scale-up low salt fermented soy sauce quality analysis data Quality characteristicsQuality characteristics StandardStandard ResultResult Salinity (%)Salinity (%) 10.0±0.510.0±0.5 10.1±0.1510.1±0.15 Alcohol (%)Alcohol (%) 3.0 이상3.0 or higher 3.5±0.063.5±0.06 Brix(%)Brix (%) 32.5 이상32.5+ 33.5±0.2533.5±0.25 Pure-extract (%)Pure-extract (%) 23.0 이상23.0+ 23.4±0.1023.4±0.10

(2) 최종 조건으로 제조한 Scale-up 저염 발효 간장 안정성 실험(2) Scale-up low-salt fermented soy sauce stability test prepared under final conditions

본 연구는 천연조미소재의 베이스로 사용되는 저염 발효 간장의 미생물 오염 및 저장, 유통 중 2차 오염에 대한 안정성을 확인하기 위한 것으로 Scale-up을 통해 실험 생산된 발효 간장을 대상으로 안정성에 대한 검증작업을 진행하였으며 Scale-up 생산된 저염 발효 간장에 대한 분석 데이터는 하기 표 12와 같다.This study is to verify the stability of low-salt fermented soy sauce used as a base for natural seasoning against microbial contamination and secondary contamination during storage and distribution. The work was carried out and the analysis data for the scale-up produced low-salt fermented soy sauce is shown in Table 12 below.

본 연구를 통해 생산된 저염 발효 간장의 미생물 분석 결과 효모는 불검출되었으며 일반세균 또한 다른 양조 간장 및 간장과 비슷한 수준으로 실험 생산을 통한 Scale-up을 통한 제법상의 문제는 없는 것으로 판단하였다.As a result of microbiological analysis of the low-salt fermented soy sauce produced through this study, yeast was not detected, and general bacteria were also judged to have no problems with the manufacturing method through scale-up through experimental production at a level similar to that of other brewed soy sauce and soy sauce.

Scale-up 저염 발효 간장 미생물 분석 데이터Microbiological analysis data of scale-up low-salt fermented soy sauce microbial distributionmicrobial distribution 일반세균(cfu/ml)General bacteria (cfu/ml) 효모(cfu/ml)Yeast (cfu/ml) 제품화 1일차Day 1 of Productization 7.6 ×101 7.6 ×10 1 -- 제품화 3일차Productization Day 3 4.3 ×101 4.3 ×10 1 -- 제품화 7일차Productization Day 7 9.0 ×100 9.0 ×10 0 --

천연발효 조미소재 제품의 베이스로 사용될 예정인 저염 액상 발효 간장의 안정성을 판단하기 위하여 미생물 안정성 테스트를 실시하였다. 주정 함량이 3%(v/w) 함유된 저염 액상 발효 간장을 본 실험의 시료로 사용하였으며 효모를 접종하지 않은 대조구와 임의로 유통 중 오염에 의한 방부력을 측정하기 위해 효모(Zygosaccharomyces rouxii: 가스발생균) 및 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)를 최종 균수가 105 CFU/ml 수준이 되도록 활성화한 후 저염 액상 발효 간장에 접종하여 개봉한 호기적 상태와 밀봉한 혐기적 상태로 분류하여 30℃/37℃ 인큐베이터에서 일정기간 동안 보관하면서 산막효모와 기포 발생여부를 관찰하였다. A microbial stability test was conducted to determine the stability of the low-salt liquid fermented soy sauce to be used as a base for naturally fermented seasoning products. Low-salt liquid fermented soy sauce containing 3% (v / w) of alcohol content was used as a sample for this experiment, and yeast ( Zygosaccharomyces rouxii : gas generation bacteria) and Bacillus subtilis ( Bacillus subtilis ) were activated so that the final number of bacteria reached the level of 10 5 CFU / ml, and then inoculated into low-salt liquid fermented soy sauce and classified into an open aerobic state and a sealed anaerobic state at 30 ° C / While storing for a certain period of time in a 37 ° C. incubator, film yeast and air bubbles were observed.

실험결과 개발된 저염 액상 발효 간장 제품은 다음과 같이 30℃의 효모접종구 및 효모 비접종구 모두에서 가스 및 산막효모가 발생하지 않았다. 또한, 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)를 접종하고 37℃에서 배양한 결과 가스발생은 관찰되지 않아 식품용 소재로써 안전한 것으로 판단하였다(표 13 및 표 14). As a result of the experiment, the developed low-salt liquid fermented soy sauce product did not generate gas and film yeast in both the yeast inoculated area and the yeast non-inoculated area at 30 ° C as follows. In addition, as a result of inoculating Bacillus subtilis and incubating at 37 ° C., gas generation was not observed, and it was judged to be safe as a food material (Tables 13 and 14).

30℃에서의 저염 액상 발효 간장의 안정성 실험 결과Stability test result of low salt liquid fermented soy sauce at 30℃ 30℃ 보존기간(일)30℃ storage period (days) 개봉release 밀봉sealed 1One N.DN.D. N.DN.D. 33 N.DN.D. N.DN.D. 55 N.DN.D. N.DN.D. 77 N.DN.D. N.DN.D. 99 N.DN.D. N.DN.D. 1212 N.DN.D. N.DN.D. 1515 N.DN.D. N.DN.D. 1717 N.DN.D. N.DN.D. 2020 N.DN.D. N.DN.D.

37℃에서의 저염 액상 발효 간장의 안정성 실험 결과Stability test results of low-salt liquid fermented soy sauce at 37℃ 37℃ 보존기간(일)37℃ storage period (days) 개봉release 밀봉sealed 1One N.DN.D. N.DN.D. 33 N.DN.D. N.DN.D. 55 N.DN.D. N.DN.D. 77 N.DN.D. N.DN.D. 99 N.DN.D. N.DN.D. 1212 N.DN.D. N.DN.D. 1515 N.DN.D. N.DN.D. 1717 N.DN.D. N.DN.D. 2020 N.DN.D. N.DN.D.

이상의 실험결과를 통해 Scale-up 생산된 저염 액상 발효 간장은 연구소 설계 제품과 동일하게 생산되었으며 식품용 소재로써 안정할 것으로 판단된다.Through the above experimental results, the scale-up produced low-salt liquid fermented soy sauce was produced identically to the laboratory-designed product, and it is judged to be stable as a food material.

실시예 4. 만능요리용 조미소스 개발Example 4. Development of seasoning sauce for all-purpose cooking

본 연구를 통해 제조공정이 확립된 액상 발효 간장은 염도가 대표적인 액상발효 간장에 비해 낮으며 발효시간이 짧음에 의해 색상이 옅음으로 다양한 소재에 본연의 색상을 해치지 않는 제품의 개발이 가능하며 높은 지미 풍미를 기반으로 요리의 맛을 돋으는 역할을 할 것으로 기대된다. 본 실험을 통해 개발된 저염 발효 간장을 기반으로 하는 천연발효 조미소재는 다양한 식품 및 요리에 감칠맛과 다양한 풍미를 줌으로써 요리의 질을 한층 높힐 수 있을 것으로 판단된다.The liquid fermented soy sauce, the manufacturing process of which was established through this study, has a lower salinity than typical liquid fermented soy sauce, and the color is pale due to the short fermentation time, so it is possible to develop products that do not harm the natural color of various materials and have high taste. It is expected to play a role in enhancing the taste of dishes based on flavor. The naturally fermented seasoning material based on low-salt fermented soy sauce developed through this experiment is expected to enhance the quality of cooking by giving richness and various flavors to various foods and dishes.

본 실험에서는 저염 발효 간장의 개발 뿐만 아니라 이러한 저염 발효 간장을 베이스로 다양한 고부가가치 식품소재를 이용한 배합공정을 거치도록 하며 적절한 배합비율별로 혼합 후 살균과 유통품질의 안정성을 확보하기 위한 공정을 포함하여 최적의 배합비를 설계하도록 하였다. 최종적으로 확정된 배합비를 토대로 저염 발효 간장 베이스로 배합한 조미소스(Sample)의 아미노태 질소 함량(AN)과 총질소 함량(TN) 그리고 글루탐산 함량(GA)을 여과 전과 여과 후로 나누어 분석을 진행하도록 하였다. 여기에 기존의 액상 발효 간장이라고 할 수 있는 양조간장을 베이스로 하여 배합한 조미소스(Control)를 대조구로 설정하여 기존 양조 베이스 조미소스와 개발 저염 발효 간장 베이스 조미소스 간의 품질특성을 본 연구를 통해 비교하도록 하였다. 저염 발효 간장 베이스 조미소스의 경우 양조 베이스 조미소스에 비해 AN, TN 함량이 높았으며 특히 GA 함량의 경우 약 2.5배 이상 높은 것을 확인할 수 있었다. 개발된 조미소재는 여과 전/후의 경우 AN, TN, GA 함량의 차이가 크지 않았으며 여과 후의 색상이 맑아 외관상에도 좋을 것으로 판단되어 최종적으로 배합한 조미소스의 경우 여과처리를 하는 것이 좋을 것으로 판단하였다(도 4). In this experiment, not only the development of low-salt fermented soy sauce, but also the mixing process using various high value-added food materials based on this low-salt fermented soy sauce, including the process to ensure the stability of sterilization and distribution quality after mixing by appropriate mixing ratio The optimal mixing ratio was designed. Based on the finally determined mixing ratio, the amino nitrogen content (AN), total nitrogen content (TN), and glutamic acid content (GA) of the seasoning sauce (Sample) blended with a low-salt fermented soy sauce base were analyzed before and after filtration. did Here, by setting the seasoning sauce (Control) based on the brewed soy sauce, which can be called the existing liquid fermented soy sauce, as a control, the quality characteristics between the existing brewed-based seasoning sauce and the developed low-salt fermented soy sauce-based seasoning sauce were evaluated through this study. made to compare. In the case of the low-salt fermented soy sauce-based seasoning sauce, the AN and TN contents were higher than that of the brewed-based seasoning sauce, and in particular, the GA content was about 2.5 times higher. The developed seasoning material had no significant difference in AN, TN, and GA contents before and after filtration, and the color after filtration was clear, so it was judged to be good for the appearance, so it was judged that it would be better to filter the seasoning sauce that was finally mixed. (Fig. 4).

만능요리용 조미소스 배합비(양조간장 베이스 조미소재와 저염 발효 간장 베이스 조미소재)Mixing ratio of seasoning sauce for all-purpose cooking (fermented soy sauce-based seasoning material and low-salt fermented soy sauce-based seasoning material) Raw materialsRaw materials ControlControl Sample Sample BaseBase 55.055.0 55.055.0 Vegetable concentrateVegetable concentrate 0.40.4 0.40.4 Yeast powderYeast powder 4.04.0 4.04.0 GlucoseGlucose 5.05.0 5.05.0 SaltSalt 7.07.0 7.07.0 AlcoholAlcohol 4.04.0 4.04.0 WaterWater 24.624.6 24.624.6 중량%weight% 100100 100100

양조간장 베이스 조미소스와 저염 발효 간장 베이스 조미소스 여과 전/여과 후 분석 결과Analysis results of brewed soy sauce-based seasoning sauce and low-sodium fermented soy sauce-based seasoning sauce before/after filtration Quality characteristicsQuality characteristics ConditionCondition Control Control Sample Sample Amino type nitrogen content (mg%)Amino type nitrogen content (mg%) Before filtrationBefore filtration 377.78±5.14377.78±5.14 583.11±7.14583.11±7.14 After filtrationAfter filtration 372.33±5.53372.33±5.53 566.30±8.68566.30±8.68 Total nitrogen content(N%)Total nitrogen content (N%) Before filtrationBefore filtration 1.44±0.011.44±0.01 1.59±0.011.59±0.01 After filtrationAfter filtration 1.41±0.011.41±0.01 1.53±0.011.53±0.01 Glutamate content(%)Glutamate content (%) Before filtrationBefore filtration 0.46±0.010.46±0.01 1.25±0.011.25±0.01 After filtrationAfter filtration 0.45±0.010.45±0.01 1.19±0.011.19±0.01

또한. 저염 발효 간장 기반 천연발효 조미소스 최종 개발제품에 대한 출시 가능성을 점검하기 위해 1단계 자체 연구원을 대상으로 풍미, 기호도 분석을 5점 척도로 간이 기호도 실험을 실시하고 Scale-up으로 가기 위한 기초자료로써 활용하고자 하였으며 이후 대량 Scale-up으로 시제품을 제작하여 2단계 풍미 기호도 분석으로 평점법에서 항목척도를 사용하여 9점 척도로 관능 기호도를 평가하였다. 관능을 비교할 대조구는 양조 베이스로 배합한 조미소스(Control)로 하였으며, 양조 베이스 조미소재와 저염 발효 간장 베이스 조미소스(Sample)간의 관능특성 비교분석을 실시하여 개발제품에 대한 가치를 판단하고 안정적인 시장정착을 위한 완제품 개발로 가기 위한 기초자료로써 활용하고자 하였다. also. In order to check the possibility of launching the final product of low-salt fermented soy sauce-based naturally fermented seasoning sauce, a simple preference test was conducted on a 5-point scale for flavor and preference analysis targeting the first-stage self-researchers and used as basic data for scale-up. Afterwards, prototypes were produced by mass scale-up, and sensory acceptability was evaluated on a 9-point scale using an item scale in the rating method as a two-step flavor acceptability analysis. The control for sensory comparison was the seasoning sauce (Control) blended with the brewing base, and a comparative analysis of sensory characteristics between the brewing base seasoning material and the low-sodium fermented soy sauce-based seasoning sauce (Sample) was conducted to determine the value of the developed product and stabilize the market It was intended to be used as basic data to go to the development of finished products for settlement.

상기의 방식으로 풍미, 기호도에 대한 실험을 실시하고 의견을 종합해 본 결과 기호도에 있어서 개발된 저염 발효 간장 베이스 조미소스의 기호도가 양조 베이스 조미소스보다 윌등히 높았음을 알 수 있었다. 양조 베이스 조미소스의 경우 색이 진하고 맛과 향이 강한 간장제품의 느낌이 강하다는 의견이 가장 많았으며 저염 발효간장 베이스는 감칠맛이 풍부하며 조미소스류의 느낌이 강하다는 의견이 많았다. 전반적으로 점수를 살펴보았을 때 외관과 맛, 향에서 차이가 특히 많이 났으며 이는 저염 발효간장 자체에서 나오는 감칠맛과 다양한 풍미의 영향으로 판단하였다. 이를 토대로 본 연구를 통해 개발된 저염 발효간장 기반 천연발효 조미소스에 대한 품질과 관능에 대한 점검을 완료함으로써 대량 프로세스를 적용하여 대량 생산 체계를 갖추었다.As a result of conducting experiments on flavor and preference in the above manner and synthesizing opinions, it was found that the preference of the developed low-salt fermented soy sauce-based seasoning sauce was significantly higher than that of the brewed-based seasoning sauce. In the case of brewed seasoning sauce, most of the opinions were that it had a strong feeling of a soy sauce product with a dark color and strong taste and aroma. Overall, when looking at the scores, there were particularly large differences in appearance, taste, and aroma, which was judged to be due to the savory taste and various flavors from the low-salt fermented soy sauce itself. Based on this, by completing the quality and sensory inspection of the low-salt fermented soy sauce-based naturally fermented seasoning sauce developed through this study, a mass production system was established by applying a mass process.

양조 베이스 조미소스와 저염 발효간장 베이스 조미소스의 1단계 관능비교 결과Result of first-stage sensory comparison between brewing-based seasoning sauce and low-salt fermented soy sauce-based seasoning sauce AttributesAttributes ControlControl Sample Sample 선호도(Preference)Preference 1.51.5 4.04.0 외관(Appearance)Appearance 1.81.8 3.83.8 맛(Taste)Taste 1.81.8 4.04.0 향(Aroma)Aroma 1.31.3 3.83.8

양조 베이스 조미소스와 저염 발효 간장 베이스 조미소스의 2단계 관능비교 결과Result of sensory comparison of two-step seasoning sauce based on brewing and low-sodium fermented soy sauce based seasoning AttributesAttributes ControlControl Sample Sample 선호도(Preference)Preference 4.14.1 6.86.8 외관(Appearance)Appearance 4.54.5 6.46.4 맛(Taste)Taste 3.53.5 6.76.7 향(Aroma)Aroma 3.23.2 5.55.5

실시예 5. 무침, 절임 및 찍어먹는용 조미소스 개발Example 5. Development of seasoning sauce for seasoning, pickling and dipping

(1) 조미소스 시리즈 최적 설계 (1) Optimal design for seasoning sauce series

본 연구를 통해 제조공정이 확립된 발효조미소재는 지미가 강함으로써 기존의 양조간장을 사용한 소스에 비해 풍미가 우수하고 원재료의 색상을 살릴 수 있는 장점을 가지고 있다고 할 수 있어, 다양한 요리에 적합한 소스 시리즈를 개발하였다. The fermented seasoning material, the manufacturing process of which has been established through this study, has a strong flavor compared to sauces using conventional brewed soy sauce and has the advantage of being able to preserve the color of the raw material, making it a suitable sauce for various dishes. series was developed.

당사에서는 최근의 소비 트렌드에 적합한 소스 시리즈를 개발함에 있어 다양한 식품소재를 구입하여 배합 비율별로 적절히 믹스 처리하고 유통 중 안정성 확보를 위해 살균처리하여 제품화를 완료하였으며 도출된 최적비율의 소스 제품은 품목제조보고를 통해 상품화를 진행하였다.In developing a sauce series suitable for the recent consumption trend, our company purchases various food materials, properly mixes them by mixing ratio, and sterilizes them to ensure stability during distribution to complete commercialization. Commercialization was carried out through reporting.

상품화한 무침소스 재료는 액상 발효 간장에 올리고당, 물, 피쉬 소스, 주정, 소금, 효모 추출물, 참깨, 비타민B1 라우릴황산염(Thiamine Dilaurylsulfate, TLS), 마늘 추출액 및 잔탄검을 배합하여 제조하였다. Commercialized non-chill sauce ingredients were prepared by mixing oligosaccharide, water, fish sauce, alcohol, salt, yeast extract, sesame, vitamin B1 lauryl sulfate (TLS), garlic extract, and xanthan gum in liquid fermented soy sauce.

또한, 절임소스는 액상 발효 간장에 올리고당, 식초, 물, 설탕, 소금, 효모 추출물, 구연산, 생강 추출액 및 비타민B1 라우릴황산염(Thiamine Dilaurylsulfate, TLS)을 배합하여 제조하였다.In addition, the pickled sauce was prepared by mixing oligosaccharide, vinegar, water, sugar, salt, yeast extract, citric acid, ginger extract, and vitamin B1 lauryl sulfate (Thiamine Dilaurylsulfate, TLS) in liquid fermented soy sauce.

또한, 찍어먹는 소스는 액상 발효 간장에 올리고당, 전분 시럽, 식초, 레몬 추출액, 소금, 구연산, 양파 추출액, 무 추출액, 생강 추출액, 감초 추출액, 효모 추출액, 비타민B1 라우릴황산염(Thiamine Dilaurylsulfate, TLS), 주정 및 물을 배합하여 제조하였다.In addition, the dipping sauce is liquid fermented soy sauce, oligosaccharide, starch syrup, vinegar, lemon extract, salt, citric acid, onion extract, radish extract, ginger extract, licorice extract, yeast extract, vitamin B1 lauryl sulfate (Thiamine Dilaurylsulfate, TLS) , It was prepared by combining alcohol and water.

상기 3종의 소스 제품은 저염 발효간장에서 오는 지미 뿐만 아니라 요리에 어울리는 단맛을 위해 설탕, 과당, 올리고당 등의 다양한 당류에 대한 적용 실험과 요리의 미각 증진을 위한 식초류, 다양한 천연 향신료 등의 첨가를 통해 간편하게 가정내에서 조리하는 제품에 맛과 영양을 주므로써 한식이나 양식을 즐길 수 있다고 하겠다. 개발된 소스류는 양조간장을 사용하는 제품에 비해 염도의 조절이 용이하고 지미가 높았으며 양조간장 베이스에 비해 색상이 짙지 않아 원재료의 색상을 보다 살릴 수 있어 제품으로써의 가치가 있는 것으로 판단되었다. 결론적으로 개발되는 소스 제품은 편의성을 도모한 제품으로 다른 양념이나 지미소재의 첨가없이 간편하게 원재료만으로써 요리가 완성되거나 맛있는 요리에 도움을 주는 제품이라고 할 수 있으며 해당년도에는 해당제품에 대한 시생산 후 메가쇼 등의 전시회에 출품함으로써 제품화 가능성을 테스트하였으며 향후 매출실적 발생을 통한 회사 이익 실현에 도움이 되고자 하였다. The above three sauce products are applied to various sugars such as sugar, fructose, and oligosaccharide for sweetness suitable for cooking as well as jimi from low-salt fermented soy sauce, and addition of vinegar and various natural spices to enhance the taste of cooking It can be said that you can enjoy Korean or Western food by giving taste and nutrition to products that are easily cooked at home. Compared to products using brewed soy sauce, the developed sauces were easier to adjust in salinity and had higher spiciness, and were less dark in color than brewed soy sauce base products, so they were judged to be of value as products because they could preserve the color of the raw material. In conclusion, the sauce product developed is a product that promotes convenience, and can be said to be a product that can be completed with only raw ingredients or that helps delicious dishes without adding other seasonings or seasoning materials. By exhibiting at exhibitions such as mega shows, the possibility of commercialization was tested, and it was intended to help the company realize profits through future sales performance.

저염 천연 발효간장을 적용한 소스는 간장시장 내에서 성장하고 있는 소스시장으로의 매출진입 카테고리를 정착시키고자 하였으며 소비자 기호도에 맞춘 갖은 양념을 포함하여 프리미엄급 풍미를 강화하였으며 소스의 염도는 양조간장을 활용하였을 때에 비해 염도는 낮으며 색상은 진하지 않아 요리의 색상을 살리기에 적합한 것으로 나타났다.The sauce applied with low-salt natural fermented soy sauce was intended to establish a sales entry category into the growing sauce market within the soy sauce market. It was found that the salinity was low and the color was not dark, so it was suitable for enhancing the color of the dish.

찍어먹는 소스에 대한 기호도 검사는 미맹테스트를 완료하여 선발된 당사 인원 총 11명을 대상으로 물만두를 소스에 찍어먹도록 하였으며 양조 간장을 베이스로 하는 제품에 두 개발 제품 모두 전체 기호도가 앞서는 것으로 나타났다. 저염 발효 간장을 베이스로 한 소스 제품에 비해 양조간장을 베이스로 한 제품에 비해 향에 있어서 유의차 없는 수준에서 좀 낮은 것으로 나타났으나 맛 기호도와 전체 기호도에 있어 높은 수준으로 나타났다.As for the acceptance test for the dipping sauce, a total of 11 selected employees of our company who completed the taste test were asked to dip dumplings in the sauce and eat them. Compared to sauce products based on low-salt fermented soy sauce, compared to products based on brewed soy sauce, the fragrance was found to be slightly lower at a level with no significant difference, but it was found to be at a higher level in taste preference and overall preference.

찍어먹는 소스 제품 관능 수준(양조간장 베이스와 저염 발효 간장 베이스) Sensory level of dipping sauce products (brewed soy sauce base and low salt fermented soy sauce base) AttributesAttributes 양조간장 베이스brewed soy sauce base 저염 발효 간장 베이스Low-salt fermented soy sauce base 외관(Appearance)Appearance 4.74.7 6.16.1 맛(Taste)Taste 4.24.2 6.96.9 향(Aroma)Aroma 6.16.1 5.95.9 전체 선호도
(Total preference)
All Preferences
(Total preference)
4.64.6 6.96.9

(2) 발효조미소재 응용 제품 조미소스 안정성 실험(2) Fermented seasoning material application product seasoning sauce stability test

발효간장 기반 천연발효 조미소재 응용 제품인 찍어먹는 소스제품의 유통 안정성 여부를 판단하기 위해 미생물 안정성 테스트를 실시하였다. 실험시료는 효모를 접종하지 않은 대조구와 임의로 유통 중 오염에 의한 방부력을 측정하기 위해 효모(Zygo. rouxii : 가스발생균) 및 바실러스 서브틸리스 최종 균수가 105 CFU/ml 수준이 되도록 접종한 천연발효 조미소재를 개봉과 밀봉조건으로 분류하여 30℃/37℃ 인큐베이터에서 일정기간 동안 보관하면서 산막효모와 기포 발생여부를 관찰하였다. A microbial stability test was conducted to determine the distribution stability of the dipping sauce product, which is a fermented soy sauce-based naturally fermented seasoning material application product. Experimental samples were inoculated so that the final number of yeast ( Zygo. rouxii : gas generating bacteria) and Bacillus subtilis reached a level of 10 5 CFU / ml to measure the preservative power due to contamination during distribution with the control group that was not inoculated with yeast. The naturally fermented seasoning materials were classified according to opening and sealing conditions and stored for a certain period of time in an incubator at 30 ° C / 37 ° C, and the formation of acid film yeast and bubbles were observed.

실험결과, 본 연구를 통해 개발된 천연발효 조미소재 제품은 다음과 같이 30℃의 효모접종구 및 효모 비접종구 모두에서 가스 및 산막효모가 발생하지 않았다. 또한, 바실러스 서브틸리스를 접종하고 37℃에서 배양한 결과 가스발생은 관찰되지 않아 제품으로써 유통 중 안전한 것으로 사료되며, 결론적으로 본 연구에 의해 개발된 천연발효 조미소재 응용 소스 제품은 살균 처리 후 유통 시 가스 발생 및 산막효모 생성으로부터 안전할 것으로 판단하였다.As a result of the experiment, the naturally fermented seasoning material product developed through this study did not generate gas and acid film yeast in both yeast inoculated and yeast non-inoculated areas at 30 ° C as follows. In addition, as a result of inoculating Bacillus subtilis and culturing at 37 ° C, gas generation was not observed, so it is considered safe during distribution as a product. In conclusion, the naturally fermented seasoning material application source product developed by this study is distributed after sterilization. It was judged to be safe from gas generation and acid film yeast production.

30℃에서의 천연발효 조미소재 응용제품의 안정성 실험 결과(기포발생 및 산막생성)Stability test results of natural fermented seasoning material application products at 30℃ (bubbles and acid film formation) 30℃ 보존기간(일)30℃ storage period (days) 개봉release 밀봉sealed 1One N.DN.D. N.DN.D. 33 N.DN.D. N.DN.D. 77 N.DN.D. N.DN.D. 1010 N.DN.D. N.DN.D. 1212 N.DN.D. N.DN.D. 1414 N.DN.D. N.DN.D.

30℃에서의 천연발효 조미소재 응용제품의 안정성 실험 결과(효모 증감계수)Stability test results of natural fermented seasoning material application products at 30℃ (yeast increase/decrease coefficient) 30℃ 보존기간(일)30℃ storage period (days) 개봉release 밀봉sealed 접종농도inoculation concentration 3.9×105 3.9×10 5 3.9×105 3.9×10 5 33 N.DN.D. N.DN.D. 44 N.DN.D. N.DN.D. 55 N.DN.D. N.DN.D. 66 N.DN.D. N.DN.D. 77 N.DN.D. N.DN.D.

효모(Zygo. rouxii : 가스발생균)를 105 CFU/ml 수준으로 오염시켰을 경우 혐기적, 호기적 조건 모두에서 기포 발생 및 산막 생성이 없었으며 균수를 측정한 결과 모두 사멸한 것으로 나타났다. 상기의 실험 결과로 보아 제품 개봉 후 효모에 의해 오염이 되었을 경우 소스 간장제품은 안전할 것으로 판단하였다(표 22 및 23). When yeast ( Zygo. rouxii : gas-generating bacteria) was contaminated at a level of 10 5 CFU/ml, there was no bubble generation and acid film formation under both anaerobic and aerobic conditions, and the number of bacteria was measured and all were found to be dead. Judging from the above experimental results, it was determined that the sauce soy sauce product would be safe if it was contaminated by yeast after opening the product (Tables 22 and 23).

37℃에서의 천연발효 조미 소재의 안정성 실험 결과(세균 접종실험) Stability test result of naturally fermented seasoning material at 37℃ (bacteria inoculation test) 37℃ 보존기간(일)37℃ storage period (days) 개봉release 밀봉sealed 1One N.DN.D. N.DN.D. 88 N.DN.D. N.DN.D. 1212 N.DN.D. N.DN.D. 1717 N.DN.D. N.DN.D.

N.D: Not DetectN.D: Not Detect

37℃에서의 천연발효 조미소재 응용제품의 안정성 실험 결과(세균증감계수)Stability test results of natural fermented seasoning material application products at 37℃ (bacterial increase/decrease coefficient) 30℃ 보존기간(일)30℃ storage period (days) 개봉release 밀봉sealed 접종농도inoculation concentration 4.2×105 4.2×10 5 4.2×105 4.2×10 5 22 2.3×102 2.3×10 2 1.3×102 1.3×10 2 66 3.7×101 3.7×10 1 8.8×101 8.8×10 1

세균(Bacillus subtilis)를 105 CFU/ml 수준으로 오염시켰을 경우 혐기적, 호기적 조건 모두에서 기포 발생이 없었으며 균수를 계수한 결과 101~102 CFU/ml 수준을 유지하며 더 이상 증식하지 않았다. 일반적으로 일반세균수는 식품의 선도판장의 지표가 되며 식품 1 g당 105인 때가 미생물학적 안전 한계이며 108인 때를 초기부패의 단계로 본다. 위의 실험 결과 제품의 생산 및 유통 중 세균에 의해 오염이 되었을 경우라고 해당 소스 간장 제품은 안전할 것으로 판단하였다(표 25 및 26).When contaminated with bacteria ( Bacillus subtilis ) at a level of 10 5 CFU / ml, there was no bubble generation under both anaerobic and aerobic conditions, and as a result of counting the number of bacteria, 10 1 to 10 2 CFU / ml level was maintained and no longer proliferated. did not In general, the general bacterial count is an indicator of the leading market for food, and 10 5 per 1 g of food is the microbiological safety limit, and 10 8 is regarded as the stage of initial decay. As a result of the above experiment, it was determined that the source soy sauce product was safe if it was contaminated by bacteria during production and distribution of the product (Tables 25 and 26).

한국미생물보존센터(국외)Korea Microbial Conservation Center (Overseas) KCCM12804PKCCM12804P 2020101520201015

Claims (5)

(1) 대두에 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) 균주를 접종한 코지 혼합물에 물을 첨가한 후, 발효하여 대두 코지를 제조하는 단계;
(2) 상기 (1)단계의 제조한 대두 코지에 물을 첨가한 대두 코지액을 1차 발효시켜 대두 발효물을 제조하는 단계; 및
(3) 상기 (2)단계의 제조한 대두 발효물에 소금을 첨가하여 2차 발효한 후 여과하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 액상 발효 간장의 제조방법.
(1) preparing soybean koji by adding water to a koji mixture inoculated with an Aspergillus oryzae strain in soybeans and then fermenting;
(2) preparing a fermented soybean product by first fermenting the soybean koji liquid obtained by adding water to the soybean koji prepared in step (1); and
(3) A method for producing liquid fermented soy sauce, characterized in that it is produced by adding salt to the fermented soybean product prepared in step (2), performing secondary fermentation, and then filtering.
제1항에 있어서, 상기 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) 균주는 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102487 균주(KCCM12804P)인 것을 특징으로 하는 액상 발효 간장의 제조방법.The method of claim 1, wherein the Aspergillus duck stock ( Aspergillus oryzae ) strain is Aspergillus duck stock ( Aspergillus oryzae ) SRCM102487 strain (KCCM12804P), characterized in that the liquid fermented soy sauce manufacturing method. 제2항에 있어서,
(1) 대두에 대두 대비 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102487 균주(KCCM12804P)를 0.2~0.4%(v/w) 비율로 접종한 코지 혼합물의 수분 함량이 34~44%(v/w)가 되도록 물을 첨가한 후, 28~32℃ 온도에서 40~48시간 동안 발효하여 대두 코지를 제조하는 단계;
(2) 상기 (1)단계의 제조한 대두 코지에 물을 첨가한 22~25 Brix의 고형분 함량을 지니는 대두 코지액을 만들고 40~50℃에서 2~4일 동안 1차 발효시켜 대두 발효물을 제조하는 단계; 및
(3) 상기 (2)단계의 제조한 대두 발효물에 소금을 첨가하여 염 농도를 7~13%(w/v)로 맞춘 후, 40~50℃에서 1~7일 동안 2차 발효한 후 여과하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 액상 발효 간장의 제조방법.
According to claim 2,
(1) Moisture content of the Koji mixture inoculated with soybean aspergillus duck material ( Aspergillus oryzae ) SRCM102487 strain (KCCM12804P) at a ratio of 0.2 to 0.4% (v / w) was 34 to 44% (v / w) Preparing soybean koji by adding water to be fermented at a temperature of 28 to 32° C. for 40 to 48 hours;
(2) Soybean koji liquid having a solids content of 22 to 25 Brix was prepared by adding water to the soybean koji prepared in step (1), and primary fermentation was performed at 40 to 50 ° C for 2 to 4 days to obtain a fermented soybean product. manufacturing; and
(3) Salt was added to the fermented soybean product prepared in step (2) to adjust the salt concentration to 7-13% (w/v), followed by secondary fermentation at 40-50 ° C for 1-7 days A method for producing liquid fermented soy sauce, characterized in that it is produced by including the step of filtering.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항의 방법으로 제조된 액상 발효 간장.A liquid fermented soy sauce prepared by the method of any one of claims 1 to 3. 제4항의 액상 발효 간장을 이용한 가공식품.A processed food using the liquid fermented soy sauce of claim 4.
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