KR20230066929A - Composition for preventing or treating for benign prostatic hyperplasia comprising schisandrae fructus extract and corni fructus extract and the method for manufacturing thereof - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 오미자와 산수유에 적합한 용매를 이용한 추출방법과, 오미자추출물과 산수유추출물을 최적배합비율로 혼합하여 전립선 비대증을 효과적으로 개선할 수 있는 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for preventing or treating prostatic hyperplasia containing Schisandra chinensis extract and cornus oil extract and a method for preparing the same, and more particularly, to an extraction method using a solvent suitable for Schisandra chinensis and cornus oil extract, and to optimally It relates to a composition for preventing or treating enlargement of the prostate, including Schisandra chinensis extract and Cornus officinalis extract, which can effectively improve BPH by mixing in a mixing ratio, and a method for producing the same.
전립선 비대증(BENIGN PROSTATIC HYPERPLASIA)은 방광 아래에 위치한 전립선이 과도하게 커지는 증상을 말한다. 커진 전립선은 전립선을 통과하는 요도를 누르게 되어 소변 배출이 방해되면서 각종 배뇨 증상이 나타나게 된다. 이에, 전립선 비대증은 적절한 관리와 치료가 이루어지지 않으면 야간뇨, 빈뇨 및 요실금 등의 배뇨 장애 또는 요로감염과 요로폐색 등의 질환으로 이어질 수 있어, 삶의 질을 저하시킬 수 있다. 전립선 비대증은 주로 60대 이상에게 많이 발생하는 질환이었으나, 인구의 노령화 심화와 서구화로 인해 최근에는 30대 및 40대 남성에게도 전립선 비대증 질환이 빈번하게 생겨나면서 신규 환자 수가 증가하고 있다. BENIGN PROSTATIC HYPERPLASIA refers to an excessive enlargement of the prostate gland located below the bladder. The enlarged prostate presses on the urethra passing through the prostate, preventing urine discharge, resulting in various urination symptoms. Accordingly, prostatic hyperplasia can lead to urinary disorders such as nocturia, urinary frequency and urinary incontinence, or diseases such as urinary tract infection and urinary tract obstruction, which can reduce quality of life if proper management and treatment are not performed. Prostatic hyperplasia was a disease that mainly occurred in people in their 60s or older, but recently, due to the aging of the population and westernization, prostatic hyperplasia has frequently occurred in men in their 30s and 40s, and the number of new patients is increasing.
전립선에 좋은 소재로는 라이코펜, 셀레늄, 비타민D, 비타민E 및 식물성 에스트로겐 등이 알려져 있으며, 그 중에서 가장 많이 이용되는 소재는 쏘팔메토추출물이다. 쏘팔메토(saw palmetto)추출물은 천연 야자열매 추출물로 전량 해외에서 수입되고 있어 수급문제와 제조단가 상승 등의 문제가 있어, 이를 대체할 수 있는 국내에서 생산된 전립선 개선 효능을 갖는 소재에 대한 수요가 증가하고 있다. Lycopene, selenium, vitamin D, vitamin E, and plant estrogens are known as good materials for the prostate, and among them, saw palmetto extract is the most used material. Saw palmetto extract is a natural coconut extract that is entirely imported from overseas, and there are problems such as supply and demand and increase in manufacturing cost. Demand for materials with prostate improvement effect produced in Korea that can replace it is increasing
또한, 종래의 쏘팔메토추출물을 함유한 식품은 섭취 후 구토, 변비, 위장장애, 무기력증 및 성욕 저하 등의 부작용 등이 나타나는 경우가 있어, 부작용을 줄일 수 있고 전립선 비대증의 예방 또는 치료 효능을 향상시킬 수 있는 천연 소재에 대한 개발이 요구되고 있다.In addition, conventional foods containing saw palmetto extract may have side effects such as vomiting, constipation, gastrointestinal disorders, lethargy, and decreased libido after ingestion, which can reduce side effects and improve the efficacy of preventing or treating enlarged prostate There is a demand for the development of natural materials that can be used.
한편, 산수유(CORNI FRUCTUS(또는, CORNUS OFFICINALIS))는 층층나무과에 속하는 관목인 산수유나무의 열매를 의미하는 것으로, 다양한 유기산을 함유하고 있으며, 항균 및 항염 효능이 있어 예로부터 약재로 사용되어 왔다. 최근, 산수유가 전립선 비대증을 개선하는 데에 효과적임을 입증하는 연구들이 진행되면서, 산수유를 이용한 건강식품들이 다양하게 출시되고 있다. On the other hand, cornelian fruit (CORNI FRUCTUS (or CORNUS OFFICINALIS)) refers to the fruit of the cornelian tree, a shrub belonging to the dogwood family, and contains various organic acids and has antibacterial and anti-inflammatory effects. It has been used as a medicine since ancient times. Recently, as studies proving that cornus milk is effective in improving prostatic hyperplasia are in progress, various health foods using cornelian milk are being released.
구체적으로, 선행기술1(대한민국 등록특허 제10-2081156호)에는 산수유추출물을 함유한 양성 전립선 비대증 개선을 위한 조성물 등이 개시되어 있다. 그러나, 산수유는 약간의 단맛과 함께 고유의 떫고 강한 신맛을 가지고 있어 소비자의 선호도를 높이기 위해서는 떫으면서 신맛을 보완할 필요가 있다. Specifically, prior art 1 (Korean Patent Registration No. 10-2081156) discloses a composition for improving benign prostatic hyperplasia containing cornelian extract. However, Cornus officinalis has a unique astringent and strong sour taste with a slight sweetness, so it is necessary to supplement the astringent and sour taste in order to increase consumer preference.
오미자(SCHISANDRAE FRUCTUS(또는, SCHIZANDRA))는 오미자나무에서 자라는 열매를 의미하는 것으로, 20 내지 30개의 빨간색의 낱알이 한 송이를 이룬다. 오미자는 신맛, 쓴맛, 단맛, 매운맛 및 짠맛, 즉 다섯가지 맛을 낸다는 의미로, 오미자 고유의 맛과 풍미를 갖고 있다. 오미자에는 사포닌을 비롯해, 항염, 항산화 작용을 하는 안토시아닌, 플라보노이드와 아미노산이 풍부하게 함유되어 있어, 피로회복, 감기예방 및 남성 질환에 좋은 것으로 알려져 있다. 이에, 예로부터 한방에서는 복분자, 구엽초 등과 함께 전립선 질환을 치료하는 데에 사용되었으며, 최근에는 선행기술2(대한민국 등록특허 제10-1634779호)과 같이, 오미자를 유효성분으로 포함하는 전립선 비대증 치료용 조성물에 대한 기술들이 지속적으로 연구되고 있다.Schisandrae FRUCTUS (or SCHIZANDRA) means a fruit that grows on Schizandrae trees, and 20 to 30 red grains form a cluster. Schisandra chinensis has its own taste and flavor, meaning that it produces five tastes: sour, bitter, sweet, spicy and salty. Schisandra chinensis is rich in saponin, anthocyanin, flavonoids and amino acids that act as anti-inflammatory and antioxidant, so it is known to be good for fatigue recovery, cold prevention and men's diseases. Therefore, in oriental medicine, it has been used to treat prostate diseases along with raspberry and guzelnut plants, and recently, as in prior art 2 (Korean Patent Registration No. 10-1634779), for the treatment of prostatic hyperplasia containing Schisandra chinensis as an active ingredient Techniques for the composition are continuously being studied.
하지만, 전립선 비대증의 예방 또는 치료 효능을 더욱 높일 수 있으면서 재료 고유의 부작용을 줄일 수 있고, 맛과 풍미를 더해 소비자의 선호도를 증가시킬 수 있는 천연재료 개발에 대한 수요가 나날이 높아지고 있다.However, there is a growing demand for the development of natural materials that can further increase the efficacy of prevention or treatment of benign prostatic hyperplasia, reduce the side effects inherent to the material, and increase consumer preference by adding taste and flavor.
상술한 문제점을 해결하기 위하여, 본 발명은 국내에서 생산되는 천연 소재인 오미자와 산수유를 적절하게 혼합하여 사용함으로써, 전립선 비대증을 더욱 효과적으로 개선할 수 있는 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물 및 이의 제조방법을 제공하는 데에 있다. In order to solve the above-described problems, the present invention is a natural material produced in Korea, Schisandra chinensis and Cornus officinalis are appropriately mixed and used to prevent prostatic hyperplasia, including Schisandra chinensis extract and Cornus officinalis extract, which can more effectively improve prostate enlargement. Or to provide a composition for treatment and a method for producing the same.
또한, 본 발명은 오미자와 산수유의 최적의 배합비율을 통해 산수유 고유의 떫고 신맛을 보완하여 맛과 풍미를 향상시킬 수 있으며, 오미자의 따뜻한 성질로 인해 다량 섭취가 제한되는 문제점을 개선할 수 있는 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물 및 이의 제조방법을 제공하는 데에 있다.In addition, the present invention can improve the taste and flavor by supplementing the astringent and sour taste inherent in cornus oil through the optimal blending ratio of Schisandra chinensis and cornus oil, and can improve the problem of limiting intake of large quantities due to the warm nature of Schisandra chinensis. It is to provide a composition for the prevention or treatment of prostatic hyperplasia comprising an extract and a cornelian extract and a method for producing the same.
아울러, 본 발명은 적절한 용매를 사용하여 오미자와 산수유가 갖는 유효성분을 효과적으로 추출할 수 있는 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물 및 이의 제조방법을 제공하는 데에 있다In addition, the present invention is to provide a composition for preventing or treating prostatic hyperplasia and a method for producing the same, including Schisandra chinensis extract and cornus oil extract, which can effectively extract the active ingredients of Schisandra chinensis and cornus oil using an appropriate solvent.
상기 과제를 이루기 위하여 본 발명의 일 측면은 오미자원물에 물과 에탄올이 혼합된 추출용매를 가해 추출한 후, 농축하여 형성된 오미자농축물을 건조시킨 오미자추출분말 및 산수유원물에 물과 에탄올이 혼합된 추출용매를 가해 추출한 후, 농축하여 형성된 산수유농축물을 건조시킨 산수유추출분말을 포함하며, 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 산수유추출분말이 15 내지 60중량부로 혼합된 것을 특징으로 하는 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, one aspect of the present invention is to extract by adding an extraction solvent mixed with water and ethanol to Schizandra chinensis resources, and then to concentrate Schisandra chinensis concentrate formed by drying Schizandra chinensis extract powder and Cornus oil extract in which water and ethanol are mixed. After extracting by applying a solvent, including cornus oil extract powder obtained by drying cornus oil concentrate formed by concentration, Schizandra extract and cornus oil, characterized in that the cornus oil extract powder is mixed in 15 to 60 parts by weight based on 30 parts by weight of the Schizandra extract powder Provided is a composition for preventing or treating prostatic hyperplasia containing an extract.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 추출용매에서, 상기 에탄올의 농도는 40 내지 60wt%인 것을 특징으로 한다.In one embodiment of the present invention, in the extraction solvent, the concentration of the ethanol is characterized in that 40 to 60wt%.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 상기 오미자농축물 30중량부 및 상기 산수유농축물 30중량부 각각에 대하여 70 내지 75중량부의 덱스트린이 더 포함된 것을 특징으로 한다.In one embodiment of the present invention, the composition is characterized in that 70 to 75 parts by weight of dextrin is further included with respect to 30 parts by weight of the Schizandra chinensis concentrate and 30 parts by weight of the Cornus officinalis concentrate, respectively.
본 발명의 다른 측면은, 오미자원물에 물과 에탄올이 혼합된 추출용매를 가해 60 내지 65℃에서 추출한 후, 농축시켜 오미자농축물을 형성하는 제 1단계, 상기 오미자농축물을 건조시켜 오미자추출분말을 형성하는 제 2단계, 산수유원물에 물과 에탄올이 혼합된 추출용매를 가해 50 내지 55℃에서 추출한 후, 농축시켜 산수유농축물을 형성하는 제 3단계, 상기 산수유농축물을 건조시켜 산수유추출분말을 형성하는 제 4단계 및 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 산수유추출분말을 15 내지 60중량부로 혼합하는 제 5단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물의 제조방법을 제공한다.Another aspect of the present invention is the first step of forming Schisandra chinensis concentrate by adding an extraction solvent mixed with water and ethanol to Schisandra chinensis resources, extracting at 60 to 65 ° C, and then concentrating Schisandra chinensis extract powder by drying the Schisandra chinensis concentrate The second step of forming, the third step of adding an extraction solvent mixed with water and ethanol to cornelian raw material, extracting at 50 to 55 ° C., and then concentrating to form cornus oil concentrate, drying the cornus oil concentrate to obtain cornus oil extract powder Prevention or A method for preparing a therapeutic composition is provided.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 추출용매에서, 상기 에탄올의 농도는 40 내지 60wt%인 것을 특징으로 한다. In one embodiment of the present invention, in the extraction solvent, the concentration of the ethanol is characterized in that 40 to 60wt%.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 제 1단계 이후에, 상기 오미자농축물 30중량부에 대하여 덱스트린을 70 내지 75중량부를 첨가하며, 상기 제 3단계 이후에, 상기 산수유농축물 30중량부에 대하여 덱스트린을 70 내지 75중량부를 첨가하는 것을 특징으로 한다.In one embodiment of the present invention, after the first step, 70 to 75 parts by weight of dextrin is added based on 30 parts by weight of the Schisandra chinensis concentrate, and after the third step, 30 parts by weight of the Cornus officinalis concentrate It is characterized in that 70 to 75 parts by weight of dextrin is added to the composition.
본 발명의 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물 및 이의 제조방법은 국내에서 생산되는 약용베리류인, 오미자와 산수유를 이용하여 전립선 비대증을 더욱 효과적으로 개선할 수 있다. The composition for preventing or treating prostatic hyperplasia containing Schisandra chinensis extract and cornus oil extract and the method for producing the same can improve prostatic hyperplasia more effectively by using Schisandra chinensis cornelian berry, a medicinal berry produced in Korea.
또한, 본 발명의 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물 및 이의 제조방법은 산수유 고유의 떫고 신맛을 보완하여 맛과 풍미를 향상시킬 수 있으며, 오미자의 따뜻한 성질로 인해 다량 섭취가 제한되는 문제점을 개선할 수 있다.In addition, the composition for preventing or treating prostatic hyperplasia containing Schisandra chinensis extract and cornus oil extract and its preparation method can improve the taste and flavor by supplementing the astringent and sour taste inherent in cornus oil, and due to the warm nature of Schisandra chinensis, a large amount The problem of limited intake can be improved.
아울러, 본 발명의 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물 및 이의 제조방법은 적절한 용매를 사용하여 오미자와 산수유가 갖는 유효성분을 효과적으로 추출할 수 있다.In addition, the composition for preventing or treating prostatic hyperplasia containing Schisandra chinensis extract and cornus oil extract and the method for producing the same can effectively extract the active ingredients of Schisandra chinensis and cornus oil using an appropriate solvent.
또한, 본 발명의 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물 및 이의 제조방법은 오미자농축물 및 산수유농축물 각각에 적정량의 덱스트린을 첨가함으로써 각 농축물의 신맛을 감소시킬 수 있다In addition, the composition for preventing or treating prostatic hyperplasia containing Schizandra chinensis extract and cornus oil extract and the method for preparing the same can reduce the acidity of each concentrate by adding an appropriate amount of dextrin to each of the Schisandra chinensis concentrate and cornus oil concentrate.
다만, 발명의 효과는 상기에서 언급한 효과로 제한되지 아니하며, 언급되지 않은 또 다른 효과들을 하기의 기재로부터 당업자에게 명확히 이해될 수 있을 것이다.However, the effects of the invention are not limited to the effects mentioned above, and other effects not mentioned will be clearly understood by those skilled in the art from the following description.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물 및 이의 제조방법을 설명하기 위한 순서도.
도 2의 A는 DHT의 농도에 따른 LNCaP 세포의 세포생존율을 나타낸 도표이며, 도 2의 B는 DHT의 처리시간에 따른 LNCaP 세포의 증식 정도(생존세포수)를 나타낸 도표이고, 도 2의 C는 DHT에 의한 LNCaP 세포의 형태학적 변화를 위상차 현미경으로 관찰한 이미지이며, 도 2의 D는 DHT의 농도에 따른 LNCaP 세포의 AR발현 정도를 나타낸 도표.
도 3의 A는 오미자열수추출물(비교예1)의 LNCaP 세포에 대한 세포독성실험(MTT assay)의 결과를 나타낸 도표이며, 도 3의 B는 산수유열수추출물(비교예2)의 LNCaP 세포에 대한 세포독성실험의 결과를 나타낸 도표이고, 도 3의 C는 오미자40% 에탄올추출물(비교예3)의 LNCaP 세포에 대한 세포독성실험의 결과를 나타낸 도표이며, 도 3의 D는 산수유40%에탄올추출물(비교예4)의 LNCaP 세포에 대한 세포독성실험의 결과를 나타낸 도표.
도 4의 A 내지 도 4의 C는 오미자 및 산수유 추출물이 DHT로 자극된 LNCaP 세포에서 BPH 관련 단백질, 성장 인자 및 Bcl-2 계열 단백질의 세포 생존 및 발현에 미치는 영향을 나타낸 도표.
도 5의 A는 LNCaP 세포를 100nM DHT로 처리하여 ROS 생성 정도를 나타낸 도표이며, 도 5의 B는 LNCaP 세포에 비교예1 내지 비교예4를 전처리한 후, 100nM DHT로 처리하여 ROS 생성 정도를 나타낸 도표이다.
도 6의 A는 오미자40%에탄올추출물과 산수유40%에탄올추출물을 각각의 혼합비율로 함유한 혼합물이 LNCaP 세포의 세포생존력에 미치는 영향을 나타낸 세포독성실험(MTT assay)의 결과를 도시한 도표이며, 도 6의 B 내지 도 6의 C는 오미자40%에탄올추출물과 산수유40%에탄올추출물을 각각의 혼합비율로 함유한 혼합물을 전처리한 LNCaP 세포의 DHT로 유도된 안드로겐 관련 유전자 발현 정도를 나타낸 도표.
도 7의 A 내지 도 7의 B는 오미자 또는 산수유의 40%에탄올추출물 및 오미자 또는 산수유의 60%에탄올 추출물, 오미자추출물과 산수유추출물의 1:1 혼합물이 LNCaP 세포의 DHT 자극 성장에 미치는 영향을 나타낸 세포독성실험(MTT assay)의 결과를 도시한 도표.
도 8의 A 내지 도 8의 B는 오미자 및 산수유 에탄올 추출물 함유 혼합물이 DHT로 자극된 LNCaP 세포에서 BPH 관련 단백질 발현 및 PSA 수준에 미치는 영향을 나타낸 도표.
도 9는 LNCaP 세포를 이용한 in vitro BPH 모델에서 오미자와 산수유의 열수 및 에탄올 추출물에 의한 BPH 개선 효과를 나타낸 이미지.Figure 1 is a flow chart for explaining a composition for preventing or treating prostatic hyperplasia comprising Schisandra chinensis extract and Cornus officinalis extract and a method for producing the same according to an embodiment of the present invention.
Figure 2A is a chart showing the cell viability of LNCaP cells according to the concentration of DHT, Figure 2B is a chart showing the degree of proliferation (number of viable cells) of LNCaP cells according to the treatment time of DHT, and Figure 2C is an image of the morphological changes of LNCaP cells by DHT observed under a phase contrast microscope, and FIG. 2D is a diagram showing the degree of AR expression in LNCaP cells according to the concentration of DHT.
Figure 3A is a chart showing the results of a cytotoxicity test (MTT assay) on LNCaP cells of Schisandra chinensis extract (Comparative Example 1), and B in Figure 3 is a chart showing the results of LNCaP cells of Cornus officinalis extract (Comparative Example 2). A diagram showing the results of the cytotoxicity test, C in FIG. 3 is a diagram showing the results of the cytotoxicity test for LNCaP cells of Schizandra 40% ethanol extract (Comparative Example 3), and D in FIG. 3 is a 40% ethanol extract of Cornus officinalis. A diagram showing the results of the cytotoxicity test on LNCaP cells of (Comparative Example 4).
4A to 4C are graphs showing the effects of Schizandra chinensis and Cornus officinalis extracts on cell survival and expression of BPH-related proteins, growth factors, and Bcl-2 family proteins in DHT-stimulated LNCaP cells.
Figure 5A is a graph showing the degree of ROS generation by treating LNCaP cells with 100 nM DHT, and Figure 5 B is a graph showing the degree of ROS generation by pre-treating LNCaP cells with Comparative Examples 1 to 4 and then treating with 100 nM DHT. is the diagram shown.
6A is a diagram showing the results of a cytotoxicity test (MTT assay) showing the effect of a mixture containing 40% ethanol extract of Schisandra chinensis and 40% ethanol extract of cornus oil in respective mixing ratios on the cell viability of LNCaP cells. 6B to 6C are diagrams showing the degree of androgen-related gene expression induced by DHT in LNCaP cells pretreated with a mixture containing Schisandra 40% ethanol extract and Cornus officinalis 40% ethanol extract at respective mixing ratios.
7A to 7B show the effects of a 40% ethanol extract of Schisandra or Cornus officinalis, a 60% ethanol extract of Schisandra or Cornus officinalis, and a 1: 1 mixture of Schizandra extract and Cornus officinalis extract on DHT-stimulated growth of LNCaP cells. Table showing the results of the cytotoxicity test (MTT assay).
8A to 8B are graphs showing the effects of mixtures containing ethanol extracts of Schizandra chinensis and Cornus officinalis on BPH-related protein expression and PSA levels in DHT-stimulated LNCaP cells.
Figure 9 is an image showing the BPH improvement effect by hot water and ethanol extracts of Schizandra cornus officinalis in an in vitro BPH model using LNCaP cells.
이하, 본 발명에 의한 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물 및 이의 제조방법의 바람직한 실시예가 첨부된 도면을 참고하여 상세하게 설명한다. Hereinafter, preferred embodiments of a composition for preventing or treating prostatic hyperplasia containing Schisandra chinensis extract and Cornus officinalis extract and a method for preparing the same according to the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings.
오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물Composition for preventing or treating prostatic hyperplasia containing Schisandra chinensis extract and Cornus officinalis extract
본 발명은 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다. 상기 본 발명의 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물은 오미자원물에 물과 에탄올이 혼합된 추출용매를 가해 추출한 후, 농축하여 형성된 오미자농축물을 건조시킨 오미자추출분말 및 산수유원물에 물과 에탄올이 혼합된 추출용매를 가해 추출한 후, 농축하여 형성된 산수유농축물을 건조시킨 산수유추출분말을 포함하며, 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 산수유추출분말이 15 내지 60중량부로 혼합된 것을 특징으로 하는 것일 수 있다. The present invention provides a composition for the prevention or treatment of prostatic hyperplasia comprising Schisandra chinensis extract and Cornus officinalis extract. The composition for preventing or treating prostatic hyperplasia of the present invention is obtained by adding and extracting an extraction solvent in which water and ethanol are mixed to Schizandra chinensis resources, and then concentrating and drying Schisandra chinensis concentrate. Cornus oil extract powder obtained by adding and extracting the extracted extraction solvent, and then drying the cornus oil concentrate formed by concentrating, and the cornus oil extract powder is mixed with 15 to 60 parts by weight based on 30 parts by weight of the Schisandra chinensis extract powder. there is.
즉, 본 발명은 전립선 비대증의 예방 또는 치료 효능을 갖는 오미자와 산수유를 적정용매로 각각 추출한 후, 이를 적정 당도를 갖도록 농축시켜 농축된 오미자농축물과 산수유농축물을 분말 형태가 되도록 건조시켜 오미자추출분말과 산수유추출분말이 형성된 것일 수 있다. 그런 다음, 상기 오미자추출분말과 상기 산수유추출분말을 적절한 비율로 혼합함으로써, 오미자와 산수유가 갖는 재료 고유의 효능은 유지하면서도 서로 조화롭게 어우러지는 맛과 풍미를 통해 소비자의 선호도를 개선할 수 있는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물을 제공하는 것일 수 있다.That is, the present invention extracts Schisandra chinensis and Cornus officinalis, which have an effect of preventing or treating prostatic hyperplasia, with an appropriate solvent, and then concentrates them to have an appropriate sugar content, and then dries the concentrated Schisandra chinensis concentrate and Cornus milk concentrate into powder form to extract Schisandra chinensis Powder and Cornus officinalis extract powder may be formed. Then, by mixing the Schisandra chinensis extract powder and the cornus oil extract powder in an appropriate ratio, prostatic hyperplasia that can improve consumer preference through the taste and flavor that harmonize with each other while maintaining the inherent efficacy of the ingredients of Schisandra chinensis and cornus oil It may be to provide a composition for the prevention or treatment of.
구체적으로, 상기 오미자추출분말은 오미자원물에 물과 에탄올이 혼합된 추출용매를 가해 추출하여 오미자추출물을 형성하고, 형성된 오미자추출물을 농축하여 오미자농축물을 형성하며, 형성된 오미자농축물을 건조시켜 형성된 것일 수 있다. 상기 추출용매는 원물 중량의 10 내지 15배수로 가하는 것일 수 있다.Specifically, the Schisandra extract powder is extracted by adding an extraction solvent mixed with water and ethanol to Schizandra chinensis resources, forming Schisandra chinensis extract, concentrating the Schisandra chinensis extract to form Schisandra chinensis concentrate, and drying the formed Schisandra chinensis concentrate. it could be The extraction solvent may be added in an amount of 10 to 15 times the weight of the raw material.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 오미자원물 5중량부에 대하여 상기 용매 75중량부를 투입하여 1차 추출한 후, 1차 여과하여 제 1오미자추출액이 형성되고, 상기 1차 여과공정에서 여과되지 않은 건더기인 오미자잔사 5중량부에 대하여 상기 용매 50중량부를 투입하여 2차 추출한 후, 2차 여과하여 제 2오미자추출액이 형성되어, 상기 제 1오미자추출액과 상기 제 2오미자추출액을 혼합하여 농축대상인 상기 오미자추출물을 형성하는 것일 수 있다.In one embodiment of the present invention, 75 parts by weight of the solvent is added to 5 parts by weight of the Schizandra chinensis resource material for primary extraction, and then filtered to form the first Schizandra chinensis extract, and unfiltered in the primary filtration process. After secondary extraction by adding 50 parts by weight of the solvent to 5 parts by weight of the Schizandra chinensis residue, which is the ingredient, a second Schisandra chinensis extract is formed by secondary filtration. It may be to form Schisandra chinensis extract.
또한, 구체적으로, 상기 산수유추출분말은 산수유원물에 물과 에탄올이 혼합된 추출용매를 가해 추출하여 산수유추출물을 형성하고, 형성된 산수유추출물을 농축하여 산수유농축물을 형성하며, 형성된 산수유농축물을 건조시켜 형성된 것일 수 있다. 상기 추출용매는 원물 중량의 10 내지 15배수로 가하는 것일 수 있다.In addition, specifically, the cornus oil extract powder is extracted by adding an extraction solvent mixed with water and ethanol to the cornus oil source to form a cornelian extract, concentrating the cornelian extract to form a cornelian concentrate, and drying the formed cornelian concentrate. It may have been formed by The extraction solvent may be added in an amount of 10 to 15 times the weight of the raw material.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 산수유원물 5중량부에 대하여 상기 용매 75중량부를 투입하여 1차 추출한 후, 1차 여과하여 제 1산수유추출액이 형성되고, 상기 1차 여과공정에서 여과되지 않은 건더기인 산수유잔사 5중량부에 대하여 상기 용매 50중량부를 투입하여 2차 추출한 후, 2차 여과하여 제 2산수유추출액이 형성되어, 상기 제 1산수유추출액과 상기 제 2산수유추출액을 혼합하여 농축대상인 상기 산수유추출물이 형성된 것일 수 있다.In one embodiment of the present invention, 75 parts by weight of the solvent is added to 5 parts by weight of the Cornus oil raw material, extracted first, and then filtered to form a first Cornus oil extract, and unfiltered in the first filtration step. After secondary extraction by adding 50 parts by weight of the solvent to 5 parts by weight of cornus oil residue, which is a dry matter, secondary filtration is performed to form a second cornus oil extract, and the first cornus oil extract and the second cornus oil extract are mixed to form Cornus officinalis extract may be formed.
상기와 같이, 상기 오미자원물 및 산수유원물 각각에 적정량의 추출용매를 투입하여 추출함으로써 상기 오미자원물 및 산수유원물에 함유된 유효성분이 효과적으로 추출될 수 있어 최종제품인 조성물의 맛과 풍미를 높일 수 있고, 전립선 비대증의 예방 또는 치료를 위한 오미자와 산수유의 효능이 충분히 부여될 수 있다.As described above, by injecting an appropriate amount of extraction solvent into each of the Schizandra chinensis chinensis extract and the chinsu chinensis extract, the active ingredients contained in the Schizandra chinensis extract and the schizandra chinensis extract can be effectively extracted, thereby enhancing the taste and flavor of the composition as a final product. The efficacy of Schizandra chinensis and Cornus officinalis for the prevention or treatment of hypertrophy can be fully imparted.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 물과 에탄올이 혼합된 추출용매에서 상기 에탄올의 농도는 40 내지 60wt%인 것일 수 있다. In one embodiment of the present invention, the concentration of the ethanol in the extraction solvent in which the water and ethanol are mixed may be 40 to 60 wt%.
상기 추출용매에서 상기 에탄올의 농도가 40wt% 미만인 추출용매를 사용하는 경우, 상기 오미자원물과 상기 산수유원물에 각각 함유된 유효성분들이 용이하게 추출되지 않아, 최종제품인 조성물의 효능과 품질이 낮아지거나 공정수율이 저하될 수 있다. 또한, 상기 추출용매에서 상기 에탄올의 농도가 60wt%를 초과하는 경우, 상기 추출용매 내 물의 함량이 줄어들면서 오미자와 산수유에 함유된 수용성 유효성분들이 추출되지 않아, 상기 오미자추출물 및 상기 산수유추출물의 맛과 풍미에 영향을 줄 수 있다.In the case of using an extraction solvent having an ethanol concentration of less than 40 wt% in the extraction solvent, the active ingredients contained in the Schisandra chinensis extract and the Cornus officinalis, respectively, are not easily extracted, resulting in low efficacy and quality of the composition as a final product or process Yield may decrease. In addition, when the concentration of the ethanol in the extraction solvent exceeds 60 wt%, the water content in the extraction solvent decreases and the water-soluble active ingredients contained in Schisandra chinensis and cornus oil are not extracted, resulting in the taste of the Schisandra chinensis extract and the cornus oil extract. and flavor can be affected.
본 발명의 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물에서, 상기 오미자추출분말 및 상기 산수유추출분말을 형성하기 위한, 각각의 원물의 추출온도, 추출시간, 농축온도 및 농축시간은 후술하는 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물의 제조방법 및 이의 실시예에서 상세하게 설명된다. In the composition for preventing or treating prostatic hyperplasia containing Schisandra extract and cornus oil extract of the present invention, the extraction temperature, extraction time, concentration temperature and concentration time of each raw material for forming the Schisandra extract powder and the Cornus oil extract powder. Will be described in detail in the method for preparing a composition for preventing or treating prostatic hyperplasia containing Schisandra chinensis extract and Cornus officinalis extract and examples thereof.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 상기 오미자농축물 30중량부 및 상기 산수유농축물 30중량부 각각에 대하여 70 내지 75중량부의 덱스트린이 더 포함된 것일 수 있다. 즉, 상기 오미자농축물 30중량부에 대하여 상기 덱스트린 70 내지 75중량부를 첨가하여 상기 오미자농축물과 상기 덱스트린이 혼합된 오미자혼합물을 형성하고, 상기 오미자혼합물을 건조시켜 오미자추출분말이 형성된 것일 수 있다. 그리고, 상기 산수유농축물 30중량부에 대하여 상기 덱스트린 70 내지 75중량부를 첨가하여 상기 산수유농축물과 상기 덱스트린이 혼합된 산수유혼합물을 형성하고, 상기 산수유혼합물을 건조시켜 산수유추출분말이 형성된 것일 수 있다.In one embodiment of the present invention, the composition may further contain 70 to 75 parts by weight of dextrin based on 30 parts by weight of the Schizandra chinensis concentrate and 30 parts by weight of the Cornus officinalis concentrate. That is, 70 to 75 parts by weight of the dextrin is added to 30 parts by weight of the Schisandra concentrate to form a Schisandra mixture in which the Schisandra concentrate and the dextrin are mixed, and drying the Schisandra mixture to form Schisandra extract powder. . In addition, 70 to 75 parts by weight of the dextrin is added to 30 parts by weight of the cornus oil concentrate to form a cornelian oil mixture in which the cornelian concentrate and the dextrin are mixed, and the cornelian oil mixture is dried to form a cornelian extract powder. .
상기 덱스트린(dextrin)은 화학식으로는 (C6H10O5)n이며, 녹말(전분)을 가수분해하여 얻어지는 저분자량의 탄수화물을 가리키는 용어로 다당류로 분류된다. 본 발명의 조성물은 상기 오미자추출분말 및 상기 산수유추출분말을 형성하기 위하여 상기 농축된 오미자농축물 및 산수유농축물 각각에 덱스트린을 혼합하여, 상기 각각의 농축물에 혼합되어 상기 오미자 및 상기 산수유 고유의 신맛이 너무 강하게 느껴지지 않도록 할 수 있어 본 발명의 조성물 및 이를 적용한 식품의 기호도를 높일 수 있다. 또한, 상기 덱스트린은 분말형태로 제조되는 본 발명의 조성물을 분말 그대로 섭취시 입 안에서 잘 녹아 삼킬 수 있도록 하며, 물 등의 액체에 첨가하여 음용하는 경우에는 용해가 잘 되도록 보조 역할을 수행하는 것일 수 있다. The dextrin has a chemical formula of (C 6 H 10 O 5 ) n , and is classified as a polysaccharide as a term indicating low molecular weight carbohydrates obtained by hydrolyzing starch (starch). In the composition of the present invention, dextrin is mixed with each of the concentrated Schisandra chinensis concentrate and Cornus officinalis extract to form the Schisandra chinensis extract powder and the Cornus officinalis extract powder, and mixed with each of the concentrates to form the Schizandra chinensis and Cornus officinalis unique It is possible to prevent the sour taste from being felt too strongly, so that the preference of the composition of the present invention and food to which it is applied can be increased. In addition, the dextrin enables the composition of the present invention prepared in powder form to be easily melted in the mouth when ingested as a powder, and when added to a liquid such as water for drinking, it may play an auxiliary role so that it is well dissolved. there is.
일 구현예에서, 상기 덱스트린이 상기 오미자농축물 30중량부 및 상기 산수유농축물 30중량부 각각에 대하여 70중량부 미만으로 첨가되는 경우, 덱스트린을 통한 상기 오미자농축물 및 상기 산수유농축물에 포함된 유기산으로 인한 신맛을 저감시키기 어려워 식음자의 기호도가 낮아질 수 있다.In one embodiment, when the dextrin is added in an amount of less than 70 parts by weight based on 30 parts by weight of the Schisandra chinensis concentrate and 30 parts by weight of the cornus oil concentrate, respectively, contained in the Schisandra chinensis concentrate and the cornus oil concentrate through the dextrin It is difficult to reduce the sour taste caused by organic acid, and the taste of food drinkers may be lowered.
또한, 상기 덱스트린이 상기 오미자농축물 30중량부 및 상기 산수유농축물 30중량부 각각에 대하여 75중량부를 초과하여 첨가되는 경우, 덱스트린으로 인한 강한 단맛으로 인해 오미자농축물 및 산수유농축물이 갖는 천연의 맛이 느껴지지 않을 수 있으며, 본 발명의 조성물 또는 이를 적용한 제품의 건강기능성이 낮아질 수 있다.In addition, when the dextrin is added in excess of 75 parts by weight with respect to 30 parts by weight of the Schisandra chinensis concentrate and 30 parts by weight of the cornus oil concentrate, respectively, due to the strong sweetness caused by the dextrin, the natural The taste may not be felt, and the health functionality of the composition of the present invention or a product to which it is applied may be lowered.
본 발명의 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물은, 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 상기 산수유추출분말이 15 내지 60중량부로 혼합된 것일 수 있다. The composition for preventing or treating prostatic hyperplasia containing Schisandra chinensis extract and cornus oil extract of the present invention may be a mixture of 15 to 60 parts by weight of the cornus oil extract powder based on 30 parts by weight of the Schisandra chinensis extract powder.
구체적으로, 일 실시예에서, 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 상기 산수유추출분말이 15중량부로 혼합되어 상기 오미자추출분말과 상기 산수유추출분말의 혼합비율이 2:1중량비일 수 있다. 또는, 다른 실시예에서 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 상기 산수유추출분말이 30중량부로 혼합되어 상기 오미자추출분말과 상기 산수유추출분말의 혼합비율이 1:1중량비일 수 있다. 또는, 또다른 실시예에서 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 상기 산수유추출분말이 60중량부로 혼합되어 상기 오미자추출분말과 상기 산수유추출분말의 혼합비율이 1:2중량비로 구성될 수 있다. Specifically, in one embodiment, the cornus oil extract powder is mixed in 15 parts by weight with respect to 30 parts by weight of the Schisandra chinensis extract powder, so that the mixing ratio of the Schizandra extract powder and the Cornus oil extract powder may be 2: 1 weight ratio. Alternatively, in another embodiment, the cornus oil extract powder is mixed in 30 parts by weight with respect to 30 parts by weight of the Schisandra chinensis extract powder, so that the mixing ratio of the Schisandra chinensis extract powder and the Cornus oil extract powder may be 1: 1 weight ratio. Alternatively, in another embodiment, 60 parts by weight of the cornus oil extract powder is mixed with respect to 30 parts by weight of the Schisandra chinensis extract powder, so that the mixing ratio of the Schisandra chinensis extract powder and the cornus oil extract powder is 1: 2 weight ratio.
일 구현예에서, 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 상기 산수유추출분말이 15중량부 미만으로 혼합되는 경우, 오미자추출분말 함량이 높아지면서 오미자의 다량 섭취에 따른 혈당 수치 저하 등의 영향을 줄 수 있으며, 산수유 고유의 효능, 맛과 풍미가 조화롭게 어우러지지 않을 수 있다. 또한, 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 상기 산수유추출분말이 60중량부를 초과하여 혼합되는 경우, 산수유 고유의 떫은 맛과 신맛이 강해져 전체적인 맛과 풍미가 저하될 수 있으며, 소비자의 기호도를 충족시키기 어려울 수 있다.In one embodiment, when the cornus oil extract powder is mixed in less than 15 parts by weight with respect to 30 parts by weight of the Schisandra chinensis extract powder, the content of Schisandra chinensis extract powder increases, which can affect blood sugar levels due to large intake of Schisandra chinensis. In addition, cornus oil's unique efficacy, taste and flavor may not harmonize. In addition, when the cornus oil extract powder is mixed in excess of 60 parts by weight with respect to 30 parts by weight of the Schizandra chinensis extract powder, the astringent taste and sourness inherent in cornus oil may be strengthened, resulting in a decrease in overall taste and flavor, to satisfy consumer preference It can be difficult.
상기와 같이, 본 발명의 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물은 국내에서 생산되는 천연소재의 약용베리류인, 오미자와 산수유를 이용하여 전립선 비대증의 예방 또는 치료 효과를 향상시킬 수 있다. 또한, 본 발명의 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물은 산수유 고유의 떫고 신맛을 보완하여 맛과 풍미를 높일 수 있다. 아울러, 오미자의 따뜻한 성질로 인해 다량 섭취가 제한되는 문제점을 개선할 수 있다.As described above, the composition for preventing or treating prostatic hyperplasia containing Schisandra chinensis extract and cornus oil extract of the present invention improves the prophylactic or therapeutic effect of prostatic hyperplasia by using Schisandra chinensis cornelin, a medicinal berry of natural material produced in Korea. can make it In addition, the composition for preventing or treating prostatic hyperplasia containing Schisandra chinensis extract and cornus oil extract of the present invention can enhance the taste and flavor by supplementing the astringent and sour taste inherent in cornus oil. In addition, due to the warm nature of Schisandra chinensis, it is possible to improve the problem of limiting large intake.
오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물의 제조방법Manufacturing method of composition for preventing or treating prostatic hyperplasia containing Schisandra chinensis extract and Cornus officinalis extract
본 발명의 다른 측면은, 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물의 제조방법을 제공한다. 이는, 앞서 상술한 “오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물”을 제조하는 방법에 관한 것으로, 일부 구성요소에 대한 설명은 상술된 내용을 원용하여 설명될 수 있다.Another aspect of the present invention provides a method for preparing a composition for preventing or treating prostatic hyperplasia comprising Schisandra chinensis extract and Cornus officinalis extract. This relates to a method for producing the above-described "composition for preventing or treating prostatic hyperplasia containing Schizandra chinensis extract and cornus oil extract", and descriptions of some components may be described by citing the above-described content.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물의 제조방법을 나타낸 순서도이다.1 is a flow chart showing a method for producing a composition for preventing or treating benign prostatic hyperplasia comprising Schisandra chinensis extract and Cornus officinalis extract according to an embodiment of the present invention.
도 1을 참조하면, 본 발명의 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물의 제조방법은 오미자원물에 물과 에탄올이 혼합된 추출용매를 가해 60 내지 65℃에서 추출한 후, 농축시켜 오미자농축물을 형성하는 제 1단계(S10), 상기 오미자농축물을 건조시켜 오미자추출분말을 형성하는 제 2단계(S20), 산수유원물에 물과 에탄올이 혼합된 추출용매를 가해 50 내지 55℃에서 추출한 후, 농축시켜 산수유농축물을 형성하는 제 3단계(S30), 상기 산수유농축물을 건조시켜 산수유추출분말을 형성하는 제 4단계(S40) 및 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 산수유추출분말을 15 내지 60중량부로 혼합하는 제 5단계(S50)를 포함하는 것을 특징으로 한다. Referring to Figure 1, the method for producing a composition for the prevention or treatment of benign prostatic hyperplasia containing Schisandra chinensis extract and cornus oil extract of the present invention is extracted at 60 to 65 ° C. by adding an extraction solvent mixed with water and ethanol to Schisandra chinensis resources, The first step of concentrating Schisandra chinensis concentrate (S10), the second step of drying the Schisandra chinensis concentrate to form Schisandra chinensis extract powder (S20), and adding an extraction solvent mixed with water and ethanol to the source water to obtain 50 to 50 After extraction at 55 ° C., the third step (S30) of concentrating to form a cornus oil concentrate, the fourth step (S40) of drying the cornus oil concentrate to form a cornus oil extract powder, and 30 parts by weight of the Schisandra chinensis extract powder It is characterized in that it comprises a fifth step (S50) of mixing cornus oil extract powder in 15 to 60 parts by weight.
도 1과 같이, 상기 S10은 오미자원물에 물과 에탄올이 혼합된 추출용매를 가해 60 내지 65℃에서 추출한 후, 농축시켜 오미자농축물을 형성하는 것일 수 있다. 즉, 통상의 추출용기에 상기 오미자원물과 상기 추출용매를 넣고 추출하는 것일 수 있다. 실시예에 따라 오미자추출물을 여과시켜 여과된 액을 사용하는 것일 수 있다. As shown in Figure 1, the S10 may be to form Schisandra chinensis concentrate by adding an extraction solvent mixed with water and ethanol to Schisandra chinensis raw material, extracting at 60 to 65 ° C, and then concentrating. That is, it may be to put the Schizandra chinensis material and the extraction solvent in a normal extraction container and perform extraction. According to the embodiment, it may be to use the filtered liquid by filtering the Schisandra chinensis extract.
상기 추출용기는 통상의 베리류(berries) 등의 과일, 과실이나 채소 등을 추출시에 사용하는 통상의 추출장치를 사용하는 것일 수 있다.The extraction vessel may be a conventional extraction device used when extracting fruits such as berries, fruits, or vegetables.
상기 오미자원물은 채취한 그대로 사용하거나, 또는, 채취한 후, 건조시켜 파쇄한 것을 사용할 수 있다. The Schizandra chinensis resources may be used as collected, or dried and crushed after being collected.
본 발명은 추출하기 위한 용매로써 물과 에탄올(예를 들어, 주정)이 혼합된 에탄올 수용액을 사용함으로써, 오미자와 후술하는 산수유에 함유된 지용성 유효성분과 수용성 유효성분을 모두 용이하게 추출할 수 있다. In the present invention, by using an ethanol aqueous solution in which water and ethanol (eg, alcohol) are mixed as a solvent for extraction, both fat-soluble active ingredients and water-soluble active ingredients contained in Schisandra chinensis and Cornus officinalis (described later) can be easily extracted.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 추출용매에서 상기 에탄올의 농도는 40 내지 60wt%인 것일 수 있다. 적정 농도를 갖는 에탄올 수용액을 이용하여 추출을 수행함으로써 상기 오미자원물과 후술하는 산수유원물에 함유된 유효성분을 추출하여 혼합원료 고유의 맛, 향 및 풍미를 추출물 내에 충분히 함유시킬 수 있다. In one embodiment of the present invention, the concentration of the ethanol in the extraction solvent may be 40 to 60wt%. Extraction is performed using an ethanol aqueous solution having an appropriate concentration to extract the active ingredients contained in the Schisandra chinensis plant and the Cornus officinalis plant to be described later, so that the unique taste, aroma and flavor of the mixed raw materials can be sufficiently contained in the extract.
일 구현예에서, 상기 추출용매에서 상기 에탄올의 농도가 40wt% 미만인 용매를 사용하는 경우, 추출대상인 원물에 각각 함유된 유효성분들이 용이하게 추출되지 않아, 최종제품인 조성물의 효능과 품질이 낮아지거나 공정수율이 저하될 수 있다. 또한, 상기 추출용매에서 상기 에탄올의 농도가 60wt%를 초과하는 경우, 상기 추출용매 내 물의 함량이 줄어들면서 추출대상인 원물에 함유된 수용성 유효성분들이 추출되지 않아, 제조된 조성물의 맛과 풍미에 영향을 줄 수 있다.In one embodiment, when using a solvent in which the concentration of ethanol is less than 40wt% in the extraction solvent, the active ingredients contained in the raw material to be extracted are not easily extracted, resulting in low efficacy and quality of the final product composition or process Yield may decrease. In addition, when the concentration of ethanol in the extraction solvent exceeds 60wt%, the water-soluble active ingredients contained in the raw material to be extracted are not extracted as the water content in the extraction solvent is reduced, affecting the taste and flavor of the prepared composition. can give
상기 S10에서 상기 오미자원물의 추출온도는 60 내지 65℃에서 수행하는 것일 수 있다. 본 발명의 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물의 제조방법은 각각의 원물의 특성에 적합한 적정온도에서 추출을 수행함으로써 상기 원물에 함유된 영양성분 및 유효성분 등이 변성되거나 파괴되지 않도록 할 수 있다. In the S10, the extraction temperature of the Schizandra chinensis raw material may be performed at 60 to 65 ° C. The method for producing a composition for the prevention or treatment of prostatic hyperplasia containing Schisandra chinensis extract and cornus oil extract of the present invention is extracted at an appropriate temperature suitable for the characteristics of each raw material, so that the nutrients and active ingredients contained in the raw material are denatured. may or may not be destroyed.
일 구현예에서, 상기 오미자원물을 추출하는 온도가 60℃ 미만에서 수행되는 경우, 오미자에 함유된 영양성분과 유효성분이 용이하게 추출되지 않아, 추출효율이 낮아질 수 있다. 또한, 상기 오미자원물을 추출하는 온도가 65℃를 초과하는 온도에서 수행되는 경우, 추출된 유효성분이 열변성될 수 있으며, 오미자원물로부터 추출된 추출물 고유의 맛과 향 등의 풍미가 증발될 수 있다. In one embodiment, when the temperature for extracting the Schizandra chinensis is lower than 60 ° C, nutrients and active ingredients contained in Schisandra chinensis are not easily extracted, and extraction efficiency may be lowered. In addition, when the extraction temperature of the Schizandra chinensis extract is performed at a temperature exceeding 65 ° C, the extracted active ingredient may be thermally denatured, and flavors such as taste and aroma unique to the extract extracted from the Schizandra chinensis extract may be evaporated. .
상기 S10에서 상기 오미자원물의 추출시간은 4 내지 9시간 동안 수행하는 것일 수 있다. 상기 오미자원물의 추출시간이 4시간 미만인 경우, 상기 원물에 함유된 고유의 성분들을 충분히 추출되지 않아 품질이 저하될 수 있다. 또한, 상기 오미자원물의 추출시간이 9시간을 초과하는 경우, 추출물의 일부가 증발될 수 있어, 추출효율이 낮아질 수 있다.In the S10, the extraction time of the Schizandra chinensis material may be performed for 4 to 9 hours. If the extraction time of the Schizandra chinensis extract is less than 4 hours, the quality may deteriorate because the original components contained in the raw material are not sufficiently extracted. In addition, when the extraction time of the Schizandra chinensis extract exceeds 9 hours, a part of the extract may be evaporated, and the extraction efficiency may be lowered.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 제 1단계(S10)는, 상기 오미자원물 5중량부에 대하여 상기 용매 75 내지 80중량부를 투입하여 60 내지 65℃에서 4 내지 4시간 30분동안 1차 추출한 후, 1차 여과하여 제 1오미자추출액이 형성하는 제 1-1단계(S11) 및 상기 1차 여과공정에서 여과되지 않은 건더기인 오미자잔사 5중량부에 대하여 상기 용매 50 내지 55중량부를 투입하여 60 내지 65℃에서 4 내지 4시간 30분동안 2차 추출한 후, 2차 여과하여 제 2오미자추출액을 형성하는 제 1-2단계(S12), 상기 제 1오미자추출액과 상기 제 2오미자추출액을 혼합하여 상기 오미자추출물을 형성하는 제 1-3단계(S13) 및 상기 오미자추출물을 농축시켜 오미자농축물을 형성하는 제 1-4단계(S14)를 포함하는 것일 수 있다.In one embodiment of the present invention, in the first step (S10), 75 to 80 parts by weight of the solvent is added to 5 parts by weight of the Schizandra chinensis extract, and primary extraction is performed at 60 to 65 ° C. for 4 to 4 hours and 30 minutes. Then, 50 to 55 parts by weight of the solvent is added to 5 parts by weight of the Schizandra residue, which is the unfiltered solid in the 1-1 step (S11) in which the first Schisandra extract is formed by primary filtration and the primary filtration process. After the second extraction at 65 ℃ for 4 to 4 hours and 30 minutes, the second step of filtering to form the second Schisandra chinensis extract (S12), mixing the first Schisandra chinensis extract and the second Schisandra chinensis extract It may include a 1-3 step (S13) of forming the Schisandra extract and a 1-4 step (S14) of concentrating the Schisandra extract to form a concentrate.
구체적으로, 상기 S11은 상기 오미자원물 5중량부에 대하여 상기 용매 75 내지 80중량부를 투입하여 60 내지 65℃에서 4 내지 4시간 30분동안 1차 추출한 후, 1차 여과하여 제 1오미자추출액이 형성하는 것일 수 있다. 상기 1차 여과공정은 통상의 방법으로 수행할 수 있으나, 구체적으로 예를 들어, 상기 1차 여과는 규조토 여과방법로 수행하는 것일 수 있다. 상기 1차 여과를 통해 여과된 액상 형태의 추출물을 제 1오미자추출액으로 준비하는 것일 수 있다.Specifically, in the S11, 75 to 80 parts by weight of the solvent is added to 5 parts by weight of the Schizandra chinensis source material, and the first extraction is performed at 60 to 65 ° C for 4 to 4 hours and 30 minutes, and then the first filtration is performed to form the first Schizandra chinensis extract. it may be The primary filtration process may be performed by a conventional method, but specifically, for example, the primary filtration may be performed by a diatomaceous earth filtration method. The extract in liquid form filtered through the primary filtration may be prepared as the first Schisandra chinensis extract.
일 구현예에서, 상기 오미자원물 1차 추출시 상기 오미자원물 5중량부에 대하여 상기 용매 75중량부 미만으로 투입하는 경우, 추출효율이 저하되며 추출된 양이 줄어들어 제품 수율이 낮아질 수 있다. 또한, 상기 오미자원물 1차 추출시 상기 오미자원물 5중량부에 대하여 상기 용매 80중량부를 초과하여 투입하는 경우, 후술하는 농축공정에서 농축시간이 증가하여 공정효율이 저하될 수 있다.In one embodiment, when less than 75 parts by weight of the solvent is added with respect to 5 parts by weight of the Schizandra chinensis raw material during the primary extraction, the extraction efficiency may decrease and the extracted amount may decrease, resulting in a lower product yield. In addition, when more than 80 parts by weight of the solvent is added with respect to 5 parts by weight of the Schizandra chinensis raw material during the primary extraction, the concentration time may increase in the concentration process described later, resulting in a decrease in process efficiency.
또한, 상기 S12는 상기 S12에서 1차 여과 후 여과되지 못하고 남은 건더기인 오미자잔사에 용매를 투입하여 2차 추출 및 여과를 수행하는 것일 수 있다. 구체적으로, 상기 오미자잔사 5중량부에 대하여 상기 용매 50 내지 55중량부를 투입하여 60 내지 65℃에서 4 내지 4시간 30분동안 2차 추출한 후, 2차 여과하여 제 2오미자추출액을 형성하는 것일 수 있다. 구체적으로 예를 들어, 상기 2차 여과는 규조토 여과방법으로 수행하는 것일 수 있다. 상기 1차 여과를 통해 여과된 액상 형태의 추출물을 제 1오미자추출액으로 준비하는 것일 수 있다.In addition, the S12 may be to perform secondary extraction and filtration by injecting a solvent into Schizandra chinensis, which is the remaining unfiltered after the primary filtration in the S12. Specifically, 50 to 55 parts by weight of the solvent is added to 5 parts by weight of the Schizandra chinensis residue, followed by secondary extraction at 60 to 65 ° C. for 4 to 4 hours and 30 minutes, followed by secondary filtration to form a second Schizandra chinensis extract. there is. Specifically, for example, the secondary filtration may be performed by a diatomaceous earth filtration method. The extract in liquid form filtered through the primary filtration may be prepared as the first Schisandra chinensis extract.
일 구현예에서, 상기 오미자잔사 2차 추출시 상기 오미자잔사 5중량부에 대하여 상기 용매 50중량부 미만으로 투입하는 경우, 상기 오미자잔사로부터 유효성분이 충분히 추출하기 어려울 수 있다. 또한, 상기 오미자잔사 2차 추출시 상기 오미자잔사 5중량부에 대하여 상기 용매 55중량부를 초과하여 투입하는 경우, 후술하는 농축공정에서의 공정시간을 늘어날 수 있다.In one embodiment, when less than 50 parts by weight of the solvent is added with respect to 5 parts by weight of the Schizandra residue during the secondary extraction of Schizandra residue, it may be difficult to sufficiently extract the active ingredient from the Schizandra residue. In addition, when adding more than 55 parts by weight of the solvent with respect to 5 parts by weight of the Schizandra residue during the secondary extraction of Schizandra residue, the process time in the concentration step described later may be increased.
아울러, 상기 S13은 상기 1차 추출 및 여과로 형성된 제 1오미자추출액과 상기 2차 추출 및 여과로 형성된 제 2오미자추출액을 혼합하여 후술하는 농축공정의 농축대상인 상기 오미자추출물을 형성하는 것일 수 있다.In addition, the S13 may be to form the Schizandra extract, which is the concentration target of the concentration process described later, by mixing the first Schizandra extract formed by the first extraction and filtration and the second Schizandra extract formed by the second extraction and filtration.
상기와 같이, 본 발명의 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물의 제조방법에 있어서, 상기 오미자추출물 형성시 추출 및 여과 공정을 반복적으로 2회 수행함으로써 오미자원물에 함유된 유효성분을 충분히 추출할 수 있다.As described above, in the method for producing a composition for preventing or treating prostatic hyperplasia containing Schisandra chinensis extract and Cornus officinalis extract of the present invention, by repeatedly performing the extraction and filtration process twice when forming the Schisandra chinensis extract, Active ingredients can be sufficiently extracted.
상기 S14는 상기 오미자추출물을 농축시켜 오미자농축물을 형성하는 것일 수 있다. 구체적으로, 상기 S13에서 형성된 오미자추출물을 45 내지 50℃의 온도에서 24 내지 27시간 동안 농축시키는 것일 수 있다. 상기 S14는 상기 오미자추출물이 목표하는 당도를 갖도록 농축시키는 것으로, 통상의 농축기를 사용하여 수행할 수 있다. The S14 may be to form a concentrate of Schisandra chinensis by concentrating the Schisandra chinensis extract. Specifically, the Schisandra chinensis extract formed in S13 may be concentrated at a temperature of 45 to 50 ° C for 24 to 27 hours. The S14 is to concentrate the Schisandra chinensis extract to have a target sugar content, which can be performed using a conventional concentrator.
일 구현예에서, 상기 오미자추출물의 농축온도가 45℃ 미만에서 수행하는 경우, 농축이 효과적으로 진행되지 않을 수 있다. 또한, 상기 오미자추출물의 농축온도가 50℃를 초과하여 수행하는 경우, 상기 오미자추출물 내 유효성분 일부가 열변성될 수 있다.In one embodiment, when the concentration temperature of the Schisandra chinensis extract is less than 45 ° C, the concentration may not proceed effectively. In addition, when the concentration temperature of the Schisandra chinensis extract exceeds 50 ° C, some of the active ingredients in the Schisandra chinensis extract may be thermally denatured.
일 구현예에서, 상기 오미자추출물의 농축시간이 24시간 미만인 경우, 상기 농축공정을 통한 당도 증가가 충분히 이뤄지지 않을 수 있다. 또한, 상기 오미자추출물의 농축시간이 27시간을 초과하는 경우, 전체 공정시간이 증가되어 공정효율이 저하될 수 있다.In one embodiment, when the concentration time of the Schisandra chinensis extract is less than 24 hours, the increase in sugar content through the concentration process may not be sufficiently achieved. In addition, when the concentration time of the Schisandra chinensis extract exceeds 27 hours, the total process time is increased and process efficiency may be reduced.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 제 1단계(S10) 이후에, 상기 오미자농축물에 덱스트린을 혼합하는 것일 수 있다. 구체적으로, 상기 오미자농축물 30중량부에 대하여 덱스트린을 70 내지 75중량부를 첨가하는 것일 수 있다. 상기 오미자농축물에 적정량의 덱스트린을 첨가하여 상기 오미자농축물의 신맛이 너무 강하게 느껴지지 않도록 신맛의 일부를 저감시키고 원하는 당도를 형성할 수 있도록 당도를 조절할 수 있다. 상기 오미자농축물과 상기 덱스트린이 혼합된 오미자덱스트린혼합물의 당도는 실시예에 따라 조절될 수 있으나, 구체적으로 예를 들어, 상기 오미자덱스트린혼합물의 당도는 25 내지 30 Brix를 갖는 것일 수 있다.In one embodiment of the present invention, after the first step (S10), dextrin may be mixed with the Schizandra chinensis concentrate. Specifically, 70 to 75 parts by weight of dextrin may be added to 30 parts by weight of the Schizandra chinensis concentrate. By adding an appropriate amount of dextrin to the Schisandra chinensis concentrate, it is possible to reduce some of the sour taste of the Schizandra chinensis concentrate so that it does not feel too strong, and to adjust the sugar content to form a desired sugar level. The sugar content of the Schizandra dextrin mixture in which the Schizandra chinensis concentrate and the dextrin are mixed may be adjusted according to embodiments, but specifically, for example, the sugar content of the Schisandra dextrin mixture may have 25 to 30 Brix.
일 구현예에서, 상기 오미자농축물 30중량부에 대하여 상기 덱스트린을 70중량부 미만으로 첨가하는 경우, 오미자농축물의 신맛 보완 및 목표당도 조절이 효과적으로 이뤄지지 않을 수 있다. 또한, 상기 오미자농축물 30중량부에 대하여 상기 덱스트린을 75중량부를 초과하여 첨가하는 경우, GI지수가 높은 덱스트린 과섭취로 위장질환이나 설사를 유발할 수 있다.In one embodiment, when the dextrin is added in an amount of less than 70 parts by weight based on 30 parts by weight of the Schisandra chinensis concentrate, the sour taste of the Schisandra chinensis concentrate and the target sugar level may not be effectively adjusted. In addition, when the dextrin is added in excess of 75 parts by weight with respect to 30 parts by weight of the Schizandra chinensis concentrate, excessive intake of dextrin having a high GI index may cause gastrointestinal diseases or diarrhea.
도 1을 참조하면, 상기 S20에서 상기 오미자농축물을 건조시켜 오미자분말을 형성하는 것일 수 있다. 구체적으로 예를 들어, 상기 건조공정은 분무건조(spray dryer) 방법을 이용하여 수행하는 것일 수 있다. 일 실시예에서, 상기 분무건조시 상부 온도는 180 내지 190℃일 수 있다. 상기 건조시간은 20 내지 24시간 동안 수행할 수 있으나, 1회 건조량에 따라 적정하게 변경적용할 수 있다.Referring to Figure 1, it may be to form Schizandra powder by drying the Schisandra chinensis concentrate in the S20. Specifically, for example, the drying process may be performed using a spray dryer method. In one embodiment, the upper temperature during the spray drying may be 180 to 190 ℃. The drying time may be carried out for 20 to 24 hours, but may be appropriately changed according to the amount of drying at one time.
도 1을 참조하면, 상기 S30은 산수유원물에 물과 에탄올이 혼합된 추출용매를 가해 50 내지 55℃에서 추출한 후, 농축시켜 산수유농축물을 형성하는 것일 수 있다. 구체적으로, 통상의 추출용기에 상기 산수유원물과 상기 용매를 넣고 추출한 후, 이를 여과시켜 여과된 액을 산수유추출물로 사용하는 것일 수 있다. Referring to Figure 1, the S30 may be to form cornus oil concentrate by adding an extraction solvent mixed with water and ethanol to cornelian water, extracting at 50 to 55 ° C, and then concentrating. Specifically, after extracting the cornus oil and the solvent into a conventional extraction container, it may be filtered to use the filtered solution as a cornelian oil extract.
상기 산수유원물은 채취한 그대로 사용하거나, 또는, 채취한 후, 건조시켜 파쇄한 것을 사용할 수 있다.The raw water can be used as it is collected, or dried and crushed after being collected.
상기 S30에서 상기 산수유원물의 추출온도는 50 내지 55℃에서 수행하는 것일 수 있다. 본 발명의 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물의 제조방법은 각각의 원물의 특성에 적합한 적정온도에서 추출을 수행함으로써 상기 원물에 함유된 영양성분 및 유효성분 등이 변성되거나 파괴되지 않도록 할 수 있다. In the S30, the extraction temperature of the cornus oil may be carried out at 50 to 55 ° C. The method for producing a composition for the prevention or treatment of prostatic hyperplasia containing Schisandra chinensis extract and cornus oil extract of the present invention is extracted at an appropriate temperature suitable for the characteristics of each raw material, so that the nutrients and active ingredients contained in the raw material are denatured. may or may not be destroyed.
일 구현예에서, 상기 산수유원물을 추출하는 온도가 50℃ 미만에서 수행되는 경우, 산수유에 함유된 유효성분이 효과적으로 추출되지 않아 유효성분으로 인한 맛, 풍미, 건강기능성 등 최종 조성물의 품질이 저하될 수 있다. 또한, 상기 산수유원물을 추출하는 온도가 55℃를 초과하는 온도에서 수행되는 경우, 추출된 유효성분 일부가 파괴거나 열변성될 수 있다. In one embodiment, when the temperature for extracting cornus oil is less than 50 ° C, active ingredients contained in cornus oil are not effectively extracted, and the quality of the final composition such as taste, flavor, and health functionalities due to the active ingredients may deteriorate. there is. In addition, when the temperature for extracting the coriander extract is carried out at a temperature exceeding 55 ° C, some of the extracted active ingredients may be destroyed or thermally denatured.
상기 S30에서 상기 산수유원물의 추출시간은 4 내지 9시간 동안 수행하는 것일 수 있다. 상기 산수유원물의 추출시간이 4시간 미만인 경우, 상기 원물에 함유된 고유의 성분들을 충분히 추출되지 않아 품질이 저하될 수 있다. 또한, 상기 산수유원물의 추출시간이 9시간을 초과하는 경우, 추출물 일부가 증발될 수 있어, 추출효율이 낮아질 수 있다.In the S30, the extraction time of the cornus oil extract may be performed for 4 to 9 hours. If the extraction time of the raw material of Sansuyu is less than 4 hours, the original ingredients contained in the raw material may not be sufficiently extracted, and thus the quality may deteriorate. In addition, when the extraction time of the Sansuyu crude product exceeds 9 hours, a part of the extract may be evaporated, and the extraction efficiency may be lowered.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 제 3단계(S30)는, 상기 산수유원물 5중량부에 대하여 상기 용매 75 내지 80중량부를 투입하여 50 내지 55℃에서 4 내지 4시간 30분동안 1차 추출한 후, 1차 여과하여 제 1산수유추출액이 형성하는 제 3-1단계(S31) 및 상기 1차 여과공정에서 여과되지 않은 건더기인 산수유잔사 5중량부에 대하여 상기 용매 50 내지 55중량부를 투입하여 50 내지 55℃에서 4 내지 4시간 30분동안 2차 추출한 후, 2차 여과하여 제 2산수유추출액을 형성하는 제 3-2단계(S32), 상기 제 1산수유추출액과 상기 제 2산수유추출액을 혼합하여 상기 산수유추출물을 형성하는 제 3-3단계(S33) 및 상기 산수유농축물을 건조시켜 산수유추출분말을 형성하는 제 3-4단계(S34)를 포함하는 것일 수 있다.In one embodiment of the present invention, in the third step (S30), 75 to 80 parts by weight of the solvent is added to 5 parts by weight of the corn water raw material, and the primary extraction is performed at 50 to 55 ° C. for 4 to 4 hours and 30 minutes. Then, 50 to 55 parts by weight of the solvent is added to 5 parts by weight of the cornus oil residue, which is the unfiltered solid in the 3-1 step (S31) of forming the first cornus oil extract by primary filtration and the primary filtration step. After secondary extraction at 55 ° C. for 4 to 4 hours and 30 minutes, a 3-2 step (S32) of forming a second cornus oil extract by secondary filtration, mixing the first cornus oil extract and the second cornus oil extract It may include a 3-3 step (S33) of forming the cornelian extract and a 3-4 step (S34) of drying the cornelian extract to form a cornelian extract powder.
구체적으로, 상기 S31은 상기 산수유원물 5중량부에 대하여 상기 용매 75 내지 80중량부를 투입하여 50 내지 55℃에서 4 내지 4시간 30분동안 1차 추출한 후, 1차 여과하여 제 1산수유추출액이 형성하는 것일 수 있다. 상기 1차 여과공정은 통상의 방법으로 수행할 수 있으나, 구체적으로 예를 들어, 상기 1차 여과는 규조토 여과방법로 수행하는 것일 수 있다. 상기 1차 여과를 통해 여과된 액상 형태의 추출물을 제 1산수유추출액으로 준비하는 것일 수 있다.Specifically, in the S31, 75 to 80 parts by weight of the solvent is added to 5 parts by weight of the cornus oil raw material, first extracted at 50 to 55 ° C. for 4 to 4 hours and 30 minutes, and then first filtered to form a first cornus oil extract. it may be The primary filtration process may be performed by a conventional method, but specifically, for example, the primary filtration may be performed by a diatomaceous earth filtration method. The extract in liquid form filtered through the primary filtration may be prepared as a first cornus oil extract.
일 구현예에서, 상기 산수유원물 1차 추출시 상기 산수유원물 5중량부에 대하여 상기 용매 75중량부 미만으로 투입하는 경우, 추출효율이 저하되며 추출된 양이 줄어들어 제품 수율이 낮아질 수 있다. 또한, 상기 산수유원물 1차 추출시 상기 산수유원물 5중량부에 대하여 상기 용매 80중량부를 초과하여 투입하는 경우, 후술하는 농축공정에서 농축시간이 증가하여 공정효율이 저하될 수 있다.In one embodiment, when less than 75 parts by weight of the solvent is added with respect to 5 parts by weight of the corn water raw material during the first extraction of the corn water raw material, the extraction efficiency may decrease and the extracted amount may decrease, resulting in a low product yield. In addition, when adding more than 80 parts by weight of the solvent with respect to 5 parts by weight of the corn water raw material during the first extraction of the corn water raw material, the concentration time may increase in the concentration process described later, resulting in a decrease in process efficiency.
또한, 상기 S32는 상기 S31에서 1차 여과 후 여과되지 못하고 남은 건더기인 산수유잔사에 용매를 투입하여 2차 추출 및 여과를 수행하는 것일 수 있다. 구체적으로, 상기 산수유잔사 5중량부에 대하여 상기 용매 50 내지 55중량부를 투입하여 50 내지 55℃에서 4 내지 4시간 30분동안 2차 추출한 후, 2차 여과하여 제 2산수유추출액을 형성하는 것일 수 있다. 구체적으로 예를 들어, 상기 2차 여과는 규조토 여과방법으로 수행하는 것일 수 있다. 상기 1차 여과를 통해 여과된 액상 형태의 추출물을 제 1산수유추출액으로 준비하는 것일 수 있다.In addition, in S32, secondary extraction and filtration may be performed by injecting a solvent into cornus officinalis residue, which remains unfiltered after the primary filtration in S31. Specifically, 50 to 55 parts by weight of the solvent is added to 5 parts by weight of the cornus oil residue, followed by secondary extraction at 50 to 55 ° C. for 4 to 4 hours and 30 minutes, followed by secondary filtration to form a second cornus oil extract. there is. Specifically, for example, the secondary filtration may be performed by a diatomaceous earth filtration method. The extract in liquid form filtered through the primary filtration may be prepared as a first cornus oil extract.
일 구현예에서, 상기 산수유잔사 2차 추출시 상기 산수유잔사 5중량부에 대하여 상기 용매 50중량부 미만으로 투입하는 경우, 상기 산수유잔사로부터 유효성분이 충분히 추출하기 어려울 수 있다. 또한, 상기 산수유잔사 2차 추출시 상기 산수유잔사 5중량부에 대하여 상기 용매 55중량부를 초과하여 투입하는 경우, 후술하는 농축공정에서의 공정시간을 늘어날 수 있다.In one embodiment, when less than 50 parts by weight of the solvent is added to 5 parts by weight of the cornus oil residue during the secondary extraction, it may be difficult to sufficiently extract the active ingredient from the cornus oil residue. In addition, when more than 55 parts by weight of the solvent is added with respect to 5 parts by weight of the cornus oil residue during the secondary extraction of the cornus oil residue, the process time in the concentration step described later can be increased.
아울러, 상기 S33은 상기 1차 추출 및 여과로 형성된 제 1산수유추출액과 상기 2차 추출 및 여과로 형성된 제 2산수유추출액을 혼합하여 후술하는 농축공정의 농축대상인 상기 산수유추출물을 형성하는 것일 수 있다.In addition, the S33 is to mix the first cornus oil extract formed by the primary extraction and filtration and the second cornelian extract formed by the secondary extraction and filtration to form the cornus oil extract, which is the concentration target of the concentration process described later.
상기와 같이, 본 발명의 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물의 제조방법에 있어서, 상기 산수유추출물 형성시 추출 및 여과 공정을 반복적으로 2회 수행함으로써 산수유원물에 함유된 유효성분을 충분히 추출할 수 있다.As described above, in the method for producing a composition for preventing or treating prostatic hyperplasia containing Schisandra chinensis extract and cornus oil extract of the present invention, by repeatedly performing the extraction and filtration process twice when forming the cornus oil extract, Active ingredients can be sufficiently extracted.
상기 S34는 상기 산수유추출물을 농축시켜 산수유농축물을 형성하는 것일 수 있다. 구체적으로, 상기 산수유추출물을 45 내지 50℃의 온도에서 24 내지 27시간 동안 농축시키는 것일 수 있다. 상기 S34는 상기 산수유추출물이 목표하는 당도를 갖도록 농축시키는 것으로, 통상의 농축기를 사용하여 수행할 수 있다. The S34 may be to form a cornus oil concentrate by concentrating the cornus oil extract. Specifically, the cornus oil extract may be concentrated for 24 to 27 hours at a temperature of 45 to 50 ° C. The S34 is to concentrate the cornus oil extract to have a target sugar content, which can be performed using a conventional concentrator.
일 구현예에서, 상기 산수유추출물의 농축온도가 45℃ 미만에서 수행하는 경우, 농축이 효과적으로 진행되지 않을 수 있다. 또한, 상기 산수유추출물의 농축온도가 50℃를 초과하여 수행하는 경우, 상기 산수유추출물 내 유효성분 일부가 열변성될 수 있다.In one embodiment, when the concentration temperature of the cornus oil extract is performed at less than 45 ° C., the concentration may not proceed effectively. In addition, when the concentration temperature of the cornus oil extract exceeds 50 ° C., some of the active ingredients in the cornus oil extract may be thermally denatured.
일 구현예에서, 상기 산수유추출물의 농축시간이 24시간 미만인 경우, 상기 농축공정을 통한 당도 증가가 충분히 이뤄지지 않을 수 있다. 또한, 상기 산수유추출물의 농축시간이 27시간을 초과하는 경우, 전체 공정시간이 증가되어 공정효율이 저하될 수 있다.In one embodiment, when the concentration time of the cornus oil extract is less than 24 hours, the increase in sugar content through the concentration process may not be sufficiently achieved. In addition, when the concentration time of the cornus oil extract exceeds 27 hours, the total process time is increased and process efficiency may be reduced.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 제 3단계 이후에 상기 산수유농축물에 덱스트린을 혼합한 후, 건조시켜 산수유분말을 형성하는 것일 수 있다. In one embodiment of the present invention, after the third step, cornus oil concentrate may be mixed with dextrin and then dried to form cornus oil powder.
본 발명의 일 실시예에서, 상기 산수유농축물 30중량부에 대하여 상기 덱스트린을 70 내지 75중량부로 첨가하는 것일 수 있다. 상기 S20에서 산수유추출물을 농축시켜 형성한 산수유농축물에 적정량의 덱스트린을 첨가하여 상기 산수유농축물의 신맛이 너무 강하게 느껴지지 않도록 신맛의 일부를 저감시키고 원하는 당도를 형성할 수 있도록 당도를 조절할 수 있다. 상기 산수유농축물과 상기 덱스트린이 혼합된 산수유덱스트린혼합물의 당도는 실시예에 따라 조절될 수 있으나, 구체적으로 예를 들어, 상기 산수유덱스트린혼합물의 당도는 25 내지 30 Brix를 갖는 것일 수 있다.In one embodiment of the present invention, the dextrin may be added in an amount of 70 to 75 parts by weight based on 30 parts by weight of the cornus oil concentrate. An appropriate amount of dextrin is added to the cornus oil concentrate formed by concentrating the cornelian extract in S20 to reduce some of the sour taste so that the acidity of the cornelian concentrate is not felt too strongly, and the sugar content can be adjusted to form a desired sugar level. The sugar content of the cornus oil dextrin mixture in which the cornus oil concentrate and the dextrin are mixed may be adjusted according to the embodiment, but specifically, for example, the sugar content of the cornus oil dextrin mixture may have 25 to 30 Brix.
일 구현예에서, 상기 산수유농축물 30중량부에 대하여 상기 덱스트린을 70중량부 미만으로 첨가하는 경우, 산수유농축물의 신맛 보완 및 목표당도 조절이 효과적으로 이뤄지지 않을 수 있다. 또한, 상기 산수유농축물 30중량부에 대하여 상기 덱스트린을 75중량부를 초과하여 첨가하는 경우, GI지수가 높은 덱스트린의 과섭취로 위장질환이나 설사를 유발할 수 있다.In one embodiment, when the dextrin is added in an amount of less than 70 parts by weight based on 30 parts by weight of the cornus oil concentrate, the acidity supplement and target sugar level control of the cornelian concentrate may not be effectively performed. In addition, when the dextrin is added in excess of 75 parts by weight with respect to 30 parts by weight of the cornus milk concentrate, excessive intake of dextrin having a high GI index may cause gastrointestinal diseases or diarrhea.
그런 다음, 상기 S40에서 상기 산수유덱스트린혼합물을 건조시켜 산수유추출분말을 형성하는 것일 수 있다. 구체적으로 예를 들어, 상기 건조공정은 분무건조(spray dryer) 방법을 이용하여 수행하는 것일 수 있다. 일 실시예에서, 상기 분무건조시 상부 온도는 180 내지 190℃일 수 있다. 상기 건조시간은 20 내지 24시간 동안 수행할 수 있으나, 1회 건조량에 따라 적정하게 변경적용할 수 있다.Then, the cornus oil dextrin mixture may be dried in S40 to form a cornus oil extract powder. Specifically, for example, the drying process may be performed using a spray dryer method. In one embodiment, the upper temperature during the spray drying may be 180 to 190 ℃. The drying time may be carried out for 20 to 24 hours, but may be appropriately changed according to the amount of drying at one time.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 건조공정 이전에 살균공정을 수행하는 것일 수 있다. 구체적으로 예를 들어, 살균 공정은 90 내지 95℃에서 30 내지 40분동안 수행할 수 있으며, 통상의 살균장치를 사용하는 것일 수 있다. 상기 오미자덱스트린혼합물 및 상기 산수유혼합물을 각각 살균함으로써 보존성을 높일 수 있다. In one embodiment of the present invention, a sterilization process may be performed before the drying process. Specifically, for example, the sterilization process may be performed at 90 to 95° C. for 30 to 40 minutes, and a conventional sterilization device may be used. Preservability can be improved by sterilizing the Schizandra dextrin mixture and the cornus oil mixture, respectively.
도 1을 참조하면, 상기 S50은 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 산수유추출분말을 15 내지 60중량부로 혼합하는 것일 수 있다. Referring to Figure 1, the S50 may be to mix 15 to 60 parts by weight of Cornus officinalis extract powder with respect to 30 parts by weight of the Schisandra chinensis extract powder.
구체적으로, 일 실시예에서, 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 상기 산수유추출분말이 15중량부로 혼합되어 상기 오미자추출분말과 상기 산수유추출분말의 혼합비율이 2:1중량비일 수 있다. Specifically, in one embodiment, the cornus oil extract powder is mixed in 15 parts by weight with respect to 30 parts by weight of the Schisandra chinensis extract powder, so that the mixing ratio of the Schizandra extract powder and the Cornus oil extract powder may be 2: 1 weight ratio.
또는, 다른 실시예에서 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 상기 산수유추출분말이 30중량부로 혼합되어 상기 오미자추출분말과 상기 산수유추출분말의 혼합비율이 1:1중량비일 수 있다. Alternatively, in another embodiment, the cornus oil extract powder is mixed in 30 parts by weight with respect to 30 parts by weight of the Schisandra chinensis extract powder, so that the mixing ratio of the Schisandra chinensis extract powder and the Cornus oil extract powder may be 1: 1 weight ratio.
또는, 또 다른 실시예에서 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 상기 산수유추출분말이 60중량부로 혼합되어 상기 오미자추출분말과 상기 산수유추출분말의 혼합비율이 1:2중량비로 구성될 수 있다. Alternatively, in another embodiment, 60 parts by weight of the cornus oil extract powder is mixed with respect to 30 parts by weight of the Schisandra chinensis extract powder, so that the mixing ratio of the Schisandra chinensis extract powder and the cornus oil extract powder is 1: 2 weight ratio.
일 구현예에서, 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 상기 산수유추출분말이 15중량부 미만으로 혼합하는 경우, 오미자추출분말 함량이 높아지면서 오미자의 다량 섭취에 따른 혈당 수치 저하 등의 영향을 줄 수 있으며, 산수유 고유의 효능, 맛과 풍미가 조화롭게 어우러지지 않을 수 있다. In one embodiment, when the cornus oil extract powder is mixed in less than 15 parts by weight with respect to 30 parts by weight of the Schisandra chinensis extract powder, the content of Schisandra chinensis extract powder increases, which can affect blood sugar levels due to large intake of Schisandra chinensis. In addition, cornus oil's unique efficacy, taste and flavor may not harmonize.
또한, 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 상기 산수유추출분말이 60중량부를 초과하여 혼합하는 경우, 산수유 고유의 떫은 맛과 신맛이 강해져 전체적인 맛과 풍미가 저하될 수 있으며, 소비자의 기호도를 충족시키기 어려울 수 있다.In addition, when the cornus oil extract powder is mixed in excess of 60 parts by weight with respect to 30 parts by weight of the Schisandra chinensis extract powder, the astringent taste and sourness inherent in cornus oil may become stronger, resulting in a decrease in overall taste and flavor, to satisfy consumer preference It can be difficult.
이하, 상술한 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물 및 이의 제조방법을 사용하여 실험한 내용을 상세하게 설명한다.Hereinafter, the contents of the experiment using the composition for preventing or treating prostatic hyperplasia containing the above-mentioned Schisandra chinensis extract and Cornus officinalis extract and the preparation method thereof will be described in detail.
Ⅰ. 오미자추출물과 산수유추출물의 전립선 비대증에 미치는 영향에 대한 실험I. Experiment on the effects of Schisandra chinensis extract and Cornus officinalis extract on prostatic hyperplasia
본 실험은 5α-dihydrotestosterone에 의한 LNCaP 전립선 세포의 증식 촉진 및 전립선 비대증 유발 인자의 발현 증가에 미치는 오미자와 산수유 혼합추출물의 영향을 비교하는 실험을 수행하였다.In this experiment, an experiment was conducted to compare the effects of Schisandra chinensis and Cornus officinalis extracts on the promotion of LNCaP prostate cell proliferation and the increase in the expression of prostatic hyperplasia-inducing factors by 5α-dihydrotestosterone.
1. 실험재료 준비 및 실험방법1. Preparation of test materials and test method
본 연구에서 사용된 오미자추출물과 산수유추출물을 하기 표 1 및 실시예와 비교예와 같이 제조되었다.Schisandra extract and Cornus officinalis extract used in this study were prepared as shown in Table 1 and Examples and Comparative Examples.
본 연구에서 사용된 오미자열수추출물(WESF), 산수유열수추출물(WECF), 오미자40%에탄올추출물(40%WESF), 산수유40%에탄올추출물(40%WECF), 오미자40%에탄올추출물과 산수유40%에탄올추출물의 혼합(1:1), 오미자40%에탄올추출물과 산수유40%에탄올추출물의 혼합(1:2), 오미자40%에탄올추출물과 산수유40%에탄올추출물의 혼합(2:1) 및 오미자40%에탄올추출물과 산수유60%에탄올추출물의 혼합(1:1)은 하기 실시예 및 비교예를 통해 제조되었다.Schizandra hot water extract (WESF), Cornus officinalis hot water extract (WECF),
추출시 초고속진공저온추출기(Ultra-fast vaccum low-temperautre extractor, COSMOS 660, Kyungseo E&P Co., Incheon, Korea)를 이용하여 추출하였다. 추출된 용액은 여과 후 감압농축기(Eyela N-21NS, Tokyo Rikakikai Co. Ltd., Tokyo, Japan)를 이용하여 농축 및 분말화하였다.Extraction was performed using an ultra-fast vacuum low-temperature extractor (COSMOS 660, Kyungseo E&P Co., Incheon, Korea). After filtration, the extracted solution was concentrated and powdered using a vacuum concentrator (Eyela N-21NS, Tokyo Rikakikai Co. Ltd., Tokyo, Japan).
[비교예1][Comparative Example 1]
건조된 오미자원물과, 상기 건조된 오미자원물 10중량부에 대하여 물 100중량부를 추출기에 넣고 60℃에서 4시간 동안 열수추출하였다. 열수추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 분말형태의 오미자열수추출물을 제조하였다.The dried Schizandra chinensis raw material and 100 parts by weight of water based on 10 parts by weight of the dried Schizandra chinensis raw material were put into an extractor and hot water extraction was performed at 60 ° C. for 4 hours. The hot water extract was put into a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare Schisandra chinensis hot water extract in powder form.
[비교예2][Comparative Example 2]
건조된 산수유원물과, 상기 건조된 산수유원물 10중량부에 대하여 물 100중량부를 추출기에 넣고 50℃에서 4시간 동안 열수추출하였다. 열수추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 분말형태의 산수유열수추출물을 제조하였다.The dried sansuyu raw material and 100 parts by weight of water based on 10 parts by weight of the dried cornelian raw material were put into an extractor and hot water extraction was performed at 50 ° C. for 4 hours. The hot water extract was put into a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare a powdered Cornus officinalis extract.
[비교예3][Comparative Example 3]
건조된 오미자원물과, 상기 건조된 오미자원물 10중량부에 대하여 40%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 60℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 분말형태의 오미자40%에탄올추출물을 제조하였다.The dried Schisandra chinensis raw material and 100 parts by weight of a 40% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried Schisandra chinensis raw material were put into an extractor and extracted at 60 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare a 40% ethanol extract of Schisandra chinensis in powder form.
[비교예4][Comparative Example 4]
건조된 산수유원물과, 상기 건조된 산수유원물 10중량부에 대하여 40%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 50℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 분말형태의 산수유40%에탄올추출물을 제조하였다.The dried cornflower oil and 100 parts by weight of a 40% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried cornflower oil were put into an extractor and extracted at 50 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare a 40% ethanol extract of cornus oil in powder form.
[실시예1][Example 1]
건조된 오미자원물과, 상기 건조된 오미자원물 10중량부에 대하여 40%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 60℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 분말형태의 오미자40%에탄올추출물을 제조하였다.The dried Schisandra chinensis raw material and 100 parts by weight of a 40% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried Schisandra chinensis raw material were put into an extractor and extracted at 60 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare a 40% ethanol extract of Schisandra chinensis in powder form.
건조된 산수유원물과, 상기 건조된 산수유원물 10중량부에 대하여 40%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 50℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 분말형태의 산수유40%에탄올추출물을 제조하였다.The dried cornflower oil and 100 parts by weight of a 40% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried cornflower oil were put into an extractor and extracted at 50 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare a 40% ethanol extract of cornus oil in powder form.
상기 오미자40%에탄올추출물과, 상기 오미자40%에탄올추출물 30중량부에 대하여 상기 산수유40%에탄올추출물을 30중량부를 혼합하였다.30 parts by weight of the 40% ethanol extract of Schizandra chinensis and 30 parts by weight of the 40% ethanol extract of Cornus officinale were mixed with respect to 30 parts by weight of the 40% ethanol extract of Schizandra chinensis.
[실시예2][Example 2]
건조된 오미자원물과, 상기 건조된 오미자원물 10중량부에 대하여 40%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 60℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 분말형태의 오미자40%에탄올추출물을 제조하였다.The dried Schisandra chinensis raw material and 100 parts by weight of a 40% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried Schisandra chinensis raw material were put into an extractor and extracted at 60 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare a 40% ethanol extract of Schisandra chinensis in powder form.
건조된 산수유원물과, 상기 건조된 산수유원물 10중량부에 대하여 40%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 50℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 분말형태의 산수유40%에탄올추출물을 제조하였다.The dried cornflower oil and 100 parts by weight of a 40% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried cornflower oil were put into an extractor and extracted at 50 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare a 40% ethanol extract of cornus oil in powder form.
상기 오미자40%에탄올추출물과, 상기 오미자40%에탄올추출물 30중량부에 대하여 상기 산수유40%에탄올추출물을 60중량부를 혼합하였다.60 parts by weight of the 40% ethanol extract of Schizandra chinensis and 30 parts by weight of the 40% ethanol extract of
[실시예3][Example 3]
건조된 오미자원물과, 상기 건조된 오미자원물 10중량부에 대하여 40%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 60℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 분말형태의 오미자40%에탄올추출물을 제조하였다.The dried Schisandra chinensis raw material and 100 parts by weight of a 40% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried Schisandra chinensis raw material were put into an extractor and extracted at 60 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare a 40% ethanol extract of Schisandra chinensis in powder form.
건조된 산수유원물과, 상기 건조된 산수유원물 10중량부에 대하여 40%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 50℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 분말형태의 산수유40%에탄올추출물을 제조하였다.The dried cornflower oil and 100 parts by weight of a 40% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried cornflower oil were put into an extractor and extracted at 50 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare a 40% ethanol extract of cornus oil in powder form.
상기 오미자40%에탄올추출물과, 상기 오미자40%에탄올추출물 30중량부에 대하여 상기 산수유40%에탄올추출물을 15중량부를 혼합하였다.15 parts by weight of the 40% ethanol extract of Schizandra chinensis and 30 parts by weight of the 40% ethanol extract of
[실시예4][Example 4]
건조된 오미자원물과, 상기 건조된 오미자원물 10중량부에 대하여 60%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 60℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 분말형태의 오미자60%에탄올추출물을 제조하였다.Dried Schizandra chinensis extract and 100 parts by weight of a 60% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried Schizandra chinensis extract were placed in an extractor and extracted at 60° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare a 60% ethanol extract of Schisandra chinensis in powder form.
건조된 산수유원물과, 상기 건조된 산수유원물 10중량부에 대하여 60%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 50℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 분말형태의 산수유60%에탄올추출물을 제조하였다.The dried cornflower oil and 100 parts by weight of a 60% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried cornflower oil were put into an extractor and extracted at 50 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare a powdered Cornus officinalis 60% ethanol extract.
상기 오미자60%에탄올추출물과, 상기 오미자60%에탄올추출물 30중량부에 대하여 상기 산수유60%에탄올추출물을 30중량부를 혼합하였다.30 parts by weight of the 60% ethanol extract of Schizandra chinensis and 30 parts by weight of the 60% ethanol extract of Cornus officinale were mixed with respect to 30 parts by weight of the 60% ethanol extract of Schizandra chinensis.
1) 세포 배양1) Cell culture
본 연구에서 사용된 사람 전립선 세포(LNCaP)는 American Type Culture Collection(ATCC, Manassas, VA, USA)에서 구입하였다. LNCaP 세포는 Roswell Park Memorial Institute Medium(RPMI-1640, WELGENE, Daegu, Republic of Korea)에 10% bovine calf serum(BCS, WELGENE)과 100 unit/ml penicillin/streptomycin(P/S)을 첨가하여 37℃ 5% CO2 하에서 배양하였다. Human prostate cells (LNCaP) used in this study were purchased from the American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, USA). LNCaP cells were prepared by adding 10% bovine calf serum (BCS, WELGENE) and 100 unit/ml penicillin/streptomycin (P/S) to Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI-1640, WELGENE, Daegu, Republic of Korea) at 37°C. Incubated under 5% CO 2 .
2) 약물의 준비2) Preparation of drugs
본 연구에서 사용된 추출물은 상기 비교예 및 실시예와 같이 본 출원인이 제조하였다. 5α-Dihydrotestosterone(DHT)는 Sigma-Aldrich Chemical Co.(St. Lousi, MO, USA)에서 구입하여 phosphate buffered saline (PBS)에 100 μM로 희석한 후, 적정 농도에 세포 배양 배지에 재희석하여 처리하였다. 오미자 및 산수유 추출물은 멸균수에 200 mg/ml로 stock solution을 만들어 실험에 따라 적절하게 희석, 혼합하여 사용하였다.The extract used in this study was prepared by the present applicant as in the Comparative Examples and Examples. 5α-Dihydrotestosterone (DHT) was purchased from Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Lousi, MO, USA), diluted to 100 μM in phosphate buffered saline (PBS), and re-diluted in cell culture medium at an appropriate concentration for treatment. did Omija and Cornus officinalis extracts were used after making a stock solution at 200 mg/ml in sterile water, appropriately diluted and mixed according to the experiment.
3) DHT, 오미자 및 산수유 추출물 처리에 따른 세포 증식률 측정 3) Measurement of cell proliferation rate according to treatment with DHT, Schizandra chinensis and Cornus officinalis extract
LNCaP 세포의 증식에 미치는 DHT, 오미자추출물 및 산수유추출물의 영향을 조사하기 위하여 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetra-zolium bromide (MTT) 분석법을 실시하였다. 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetra-zolium bromide (MTT) assay was performed to investigate the effects of DHT, Schisandra chinensis extract, and Cornus officinalis extract on the proliferation of LNCaP cells.
이를 위하여 6 well plate의 well 당 7ⅹ104개의 LNCaP 세포를 분주하고 24시간 동안 안정화시켰다. 이 후, 100 unit/ml의 P/S가 포함된 세포 배양용 배지로 교체 후 24시간 동안 배양하고, 5% FBS 및 100 unit/ml의 P/S가 포함된 배지를 사용하여 오미자 및 산수유 추출물을 다양한 농도로 1시간 동안 전처리한 후, DHT를 처리하여 48시간 동안 배양하였다. 그 후, 각 well에 0.5 mg/ml의 MTT (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) 용액을 첨가 후 37℃, 5% CO2 incubator에서 2시간 동안 반응시켰다. 그런 다음, 각 well에 형성된 formazan을 dimethyl sulfoxide (DMSO, Sigma-Aldrich Chemical Co.)를 이용하여 모두 용해시키고, microplate reader(Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA)를 이용하여 540nm에서 흡광도 값을 측정하였다. 각 물질에 대한 세포 독성은 대조군 값을 기준으로 백분율로 환산하여 나타내었다.To this end, 7ⅹ10 4 LNCaP cells per well of a 6-well plate were dispensed and stabilized for 24 hours. Then, after replacing with a cell culture medium containing 100 unit/ml of P/S, culturing for 24 hours, and using a medium containing 5% FBS and 100 unit/ml of P/S, extracts of Schizandra chinensis and Cornus officinalis. After pre-treatment for 1 hour at various concentrations, DHT was treated and cultured for 48 hours. Then, after adding 0.5 mg/ml of MTT (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) solution to each well, the mixture was reacted for 2 hours in a 37°C, 5% CO 2 incubator. Then, all of the formazan formed in each well was dissolved using dimethyl sulfoxide (DMSO, Sigma-Aldrich Chemical Co.), and the absorbance value was measured at 540 nm using a microplate reader (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA). . Cytotoxicity for each material was expressed as a percentage based on the control value.
4) Hemocytometer를 이용한 세포생존율 측정4) Measurement of cell viability using a hemocytometer
DHT 처리에 의한 세포 생존율을 확인하기 위하여 6 well plate의 well 당 7ⅹ104개의 LNCaP 세포를 분주하고 24시간 동안 안정화시켰다. 이후 100 unit/ml P/S가 포함된 배지로 교체하여 24시간 동안 배양하였으며, 그 후 5% FBS 및 100 unit/ml의 P/S가 포함된 배지를 사용하여 DHT를 농도별로 처리하여 48시간 동안 배양하였다. 배양한 세포를 수집하여 PBS에 희석한 후 동량의 0.5% trypan blue solution (Invitrogen)을 첨가하여 2분간 염색하고 hemocytometer에 적용하여 염색되지 않은 살아있는 세포의 수를 도립 현미경(inverted microscope, Carl Zeiss, Gottingen, Germany)을 이용하여 계수하였다.In order to confirm cell viability by DHT treatment, 7ⅹ10 4 LNCaP cells per well of a 6-well plate were dispensed and stabilized for 24 hours. Afterwards, the medium was replaced with a medium containing 100 unit/ml P/S and cultured for 24 hours. After that, the medium containing 5% FBS and 100 unit/ml P/S was used to treat DHT by concentration for 48 hours. cultured for a while. The cultured cells were collected, diluted in PBS, stained with the same amount of 0.5% trypan blue solution (Invitrogen) for 2 minutes, applied to a hemocytometer, and the number of unstained living cells was counted under an inverted microscope (Carl Zeiss, Gottingen). , Germany) was used to count.
5) 단백질의 분리 및 Western blot analysis5) Protein separation and Western blot analysis
다양한 조건에서 배양된 세포들을 수확한 후, 3,000 rpm에서 5분 동안 원심 분리하였다. 상층액을 제거한 후, pellet에 1X lysis buffer [25 mM Tris-Cl(pH 7.5), 250 mM NaCl, 5 mM ethylenediaminetetraacetic acid, 1% nonidet P40, 1 mM phenymethylsulfonyl fluoride 및 5 mM dithiothreitol]를 첨가하여 4℃, 30분간 반응시킨 후 14,000 rpm으로 30분간 원심 분리하여 상층액을 얻었다. 상층액의 단백질 농도는 Bio-Rad 단백질 정량 시약(Bio-Rad Laboratories, Inc., CA, USA)을 이용하여 정량하였고, 동량의 Laemmli sample buffer (Bio-Rad Laboratories, Inc.)를 혼합하여 단백질 샘플을 만들었다. 준비된 샘플은 sodium dodecyl sulphate (SDS)-polyacrylamide gel을 이용하여 전기 영동으로 분리하였고, nitrocellulose membrane (Schleicher and Schuell, Keene, NH, USA)으로 전이시켰다. 그 후 membrane을 5% skim milk 용액에 30분 동안 처리한 후, 검출 대상 단백질에 대한 1차 항체(Table 1)를 처리하여 4℃에서 반응시킨 다음 1x PBS-T (PBS with Tween 20)로 10분간 3번 세척하고 적정 2차 항체(Table 1)를 사용하여 상온에서 1시간 30분 반응시켰다. Membrane을 1x PBS-T로 세척 후 enhanced chemiluminescence (ECL) immunoblotting detection reagents (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA)와 Fusion Solo S system (Vilber Lourmat, Coll
6) 활성산소종(reactive oxygen species, ROS) 생성 변화 측정6) Measurement of changes in reactive oxygen species (ROS) generation
다양한 조건에서 배양된 세포를 대상으로 ROS 생성 변화를 측정하기 위해 2’,7’-dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCF-DA) 염색법을 이용하였다. 이를 위하여 LNCaP 세포에 적정 농도의 오미자 및 산수유 추출물을 1시간 전처리 후, DHT를 1시간 처리하였다. 준비된 세포들을 PBS로 수세 후 10μM의 DCF-DA (Invitrogen) 용액을 처리하여 37℃, 5% CO2 incubator에서 20분간 반응시키고 유세포 분석기(Accuri C6 flow cytometer, BD Sciences, Franklin Lakes, NJ, USA)를 이용하여 ROS 생성 변화 여부를 평가하였다.2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCF-DA) staining was used to measure changes in ROS production in cells cultured under various conditions. To this end, LNCaP cells were pretreated with Schisandra and Cornus officinalis extracts at appropriate concentrations for 1 hour and then treated with DHT for 1 hour. After washing the prepared cells with PBS, they were treated with a 10 μM DCF-DA (Invitrogen) solution, reacted for 20 minutes in a 37°C, 5% CO 2 incubator, and analyzed using a flow cytometer (Accuri C6 flow cytometer, BD Sciences, Franklin Lakes, NJ, USA). ROS production change was evaluated using .
7) PSA 생성 수준의 분석7) Analysis of PSA production level
PSA 생성에 미치는 영향을 분석하기 위하여 LifeSpan Biosciences, Inc. (Seattle, WA, USA)에서 구입한 Human KLK3/PSA enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kit를 사용하였다. 이를 위하여 DHT와 오미자추출물 및 산수유추출물이 처리된 세포의 배양액을 모아 2,000 rpm으로 5분간 원심분리하여 상층액을 얻었다. 상층액과 kit에 제공된 standard 용액을 혼합하여 항체가 결합되어 있는 96 well plate에 옮긴 후 37℃에서 2시간 동안 반응시키고, 1x Biotinylated detection antibody를 상층액과 standard 용액의 동량을 넣어 37℃에서 1시간 동안 반응시켰다. 그 후, 1x wash buffer로 5회 세척 후 1x horseradish peroxidase-avidin 용액을 96 well plate에 넣어 37℃에서 1시간 반응시키고 wash buffer로 5회 세척하였다. 세척 후, 3,3',5,5'-tetramethyl benzidine substrate 용액을 96 well plate에 넣어 15 내지 30분 반응시키고, stop 용액을 첨가하여 ELISA reader로 450 nm에서 흡광도를 측정하였다. 각각의 샘플 값은 standard curve에 대입하여 계산하였다. To analyze the effect on PSA production, LifeSpan Biosciences, Inc. Human KLK3/PSA enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kit purchased from (Seattle, WA, USA) was used. To this end, the cultures of cells treated with DHT, Schisandra chinensis extract, and Cornus officinalis extract were collected and centrifuged at 2,000 rpm for 5 minutes to obtain the supernatant. Mix the supernatant with the standard solution provided in the kit, transfer to a 96 well plate where the antibody is bound, and react at 37°C for 2 hours, add 1x Biotinylated detection antibody in the same amount of the supernatant and standard solution, and incubate at 37°C for 1 hour. reacted during Then, after washing 5 times with 1x wash buffer, 1x horseradish peroxidase-avidin solution was put into a 96 well plate, reacted at 37 ° C for 1 hour, and washed 5 times with wash buffer. After washing, a 3,3',5,5'-tetramethyl benzidine substrate solution was put into a 96 well plate and reacted for 15 to 30 minutes, and a stop solution was added to measure the absorbance at 450 nm using an ELISA reader. Each sample value was calculated by substituting it into a standard curve.
8) 통계 처리8) Statistical processing
GraphPad Prism® version 5.0 (Graphpad Inc., San Diego, CA, USA)의 one-way analysis of variance (ANOVA)를 사용하여 통계 분석을 실시하였으며, Tukey's test로 사후 검정하여 p<0.05 값을 유의한 값으로 보고 통계 처리하였다.Statistical analysis was performed using one-way analysis of variance (ANOVA) of GraphPad Prism® version 5.0 (Graphpad Inc., San Diego, CA, USA), and post hoc tests were performed with Tukey's test to determine p < 0.05 as a significant value. reported and statistically processed.
2. 실험결과2. Experimental results
1) LNCaP 세포를 이용한 in vitro DHT 유도 전립선 비대 모델 설정1) Establishing an in vitro DHT-induced prostate hypertrophy model using LNCaP cells
도 2의 A는 본 발명의 일 실시예에 따른 DHT의 농도에 따른 LNCaP 세포의 세포생존율을 나타낸 도표이며, 도 2의 B는 본 발명의 일 실시예에 따른 DHT의 처리시간에 따른 LNCaP 세포의 증식 정도(생존세포수)를 나타낸 도표이고, 도 2의 C는 본 발명의 일 실시예에 따른 DHT에 의한 LNCaP 세포의 형태학적 변화를 위상차 현미경(phase contrast)으로 관찰한 이미지이며, 도 2의 D는 본 발명의 일 실시예에 따른 DHT의 농도에 따른 LNCaP 세포의 AR발현 정도를 나타낸 도표이다. Figure 2A is a chart showing cell viability of LNCaP cells according to the concentration of DHT according to an embodiment of the present invention, and B of FIG. It is a chart showing the degree of proliferation (number of viable cells), and FIG. 2C is an image of morphological changes of LNCaP cells by DHT according to an embodiment of the present invention observed under a phase contrast microscope. D is a diagram showing the degree of AR expression in LNCaP cells according to the concentration of DHT according to an embodiment of the present invention.
도 2의 D에서 표시된 농도의 DHT로 48시간 동안 처리한 후 세포를 용해한 다음 동일한 양의 세포 용해물을 SDS-polyacrylamide gel에서 분리하고 니트로셀룰로오스(nitrocellulose)막으로 옮겼다. 세포 단백질은 표시된 항체와 ECL 검출시스템을 사용하여 시각화되었으며, 액틴(actin)은 내부 통제로 사용되었다. After treatment with DHT at the concentration indicated in FIG. 2D for 48 hours, the cells were lysed, and the same amount of cell lysate was separated on SDS-polyacrylamide gel and transferred to a nitrocellulose membrane. Cellular proteins were visualized using the indicated antibodies and ECL detection system, and actin was used as an internal control.
구체적으로, 도 2의 A 내지 도 2의 D에서 세포를 7x105 cells/ml로 6well plate에 접종하고 표시된 농도의 DHT로 24 또는 48시간 동안 처리했다. 세포생존율인 도 2의 A와 생존 세포수인 도 2의 B는 각각 대사 염료 기반 MTT 분석 및 트립판 블루 분석(trypan blue assay)로 측정되었다. 데이터는 평균 ± 표준 편차(n=3)로 표시되었다. 통계 분석은 그룹간의 분산분석 (ANOVA-Tukey의 pst-hoc test)을 사용하여 수행되었다. Specifically, in Figures 2A to 2D, the cells were inoculated into a 6-well plate at 7x10 5 cells/ml and treated with DHT at the indicated concentrations for 24 or 48 hours. The cell viability rate (A in FIG. 2) and the number of viable cells (B in FIG. 2) were measured by metabolic dye-based MTT assay and trypan blue assay, respectively. Data are expressed as mean ± standard deviation (n = 3). Statistical analysis was performed using between-group analysis of variance (ANOVA-Tukey's pst-hoc test).
대조군과 비교할 때 *은 p<0.05이며, ***은 p<0.001이다. Compared to the control group, * indicates p<0.05 and *** indicates p<0.001.
도 2의 A 내지 도 2의 D를 참조하면, LNCaP 세포를 이용한 BPH 모델의 설정을 위한 조건의 확립을 위하여 LNCaP 세포의 증식과 생존에 미치는 DHT의 영향을 먼저 조사하였다. 이를 위하여, 다양한 농도의 DHT를 처리하여 적정시간 배양 후 MTT 분석과 hemocytometer counting를 실시하였다. Referring to FIGS. 2A to 2D , in order to establish conditions for setting up a BPH model using LNCaP cells, the effects of DHT on the proliferation and survival of LNCaP cells were first investigated. To this end, MTT analysis and hemocytometer counting were performed after treatment with DHT at various concentrations and incubation for an appropriate time.
도 2의 A에서 나타난 바와 같이 DHT 처리 후 24시간 배양하였을 때 세포 증식율에 큰 차이를 보이지 않았으나, 48시간 배양 후 50 nM 이상의 DHT 처리군에서는 세포 증식율의 유의적 증가가 관찰되었다. As shown in A of Figure 2, there was no significant difference in cell proliferation rate when cultured for 24 hours after DHT treatment, but a significant increase in cell proliferation rate was observed in the DHT treatment group of 50 nM or more after 48 hours culture.
또한, 도 2의 B에서 DHT를 48시간 처리 후 LNCaP 세포의 증식 생존 정도를 확인한 결과에서도 DHT의 농도 의존적으로 생존 촉진 현상이 관찰되었다. In addition, as a result of confirming the degree of proliferation and survival of LNCaP cells after treatment with DHT for 48 hours in FIG. 2B, the phenomenon of promoting survival was observed in a concentration-dependent manner of DHT.
도 2의 C에서 세포의 형태적 관찰에서도 DHT의 처리 농도가 증가함에 따라 세포의 밀도가 증가되었다. In the morphological observation of the cells in FIG. 2C, the density of the cells increased as the concentration of DHT increased.
이러한 DHT 처리에 따른 LNCaP 세포의 세포 증식 및 생존 촉진이 in vitro BPH 모델로 적용하기에 적절한지를 평가하기 위하여 AR의 발현 변화를 조사하였으며 Western blotting의 결과에 의하면, 도 2의 D와 같이 DHT 처리 농도에 의존적으로 AR의 발현이 증가하였음을 확인하였다. In order to evaluate whether the promotion of cell proliferation and survival of LNCaP cells by DHT treatment is suitable for application as an in vitro BPH model, AR expression changes were investigated. According to the results of Western blotting, DHT treatment concentration as shown in FIG. It was confirmed that the expression of AR increased in a dependence-dependent manner.
이러한 결과는 동일 세포주를 사용한 선행 연구의 결과와 유사한 현상이었으며, LNCaP 세포를 이용한 in vitro BPH 모델 설정을 위한 DHT의 처리 농도는 100 nM로, 처리 시간은 48시간으로 고정하여 다음 실험을 수행하였다.These results were similar to those of previous studies using the same cell line, and the following experiments were performed by fixing the treatment concentration of DHT to 100 nM and the treatment time to 48 hours to set up an in vitro BPH model using LNCaP cells.
2) DHT 처리로 증가된 LNCaP 세포의 증식에 미치는 오미자추출물 및 산수유추출물의 영향2) Effects of Schisandra chinensis extract and Cornus officinalis extract on the proliferation of LNCaP cells increased by DHT treatment
도 3의 A는 본 발명의 일 실시예에 따른 오미자열수추출물(비교예1)의 LNCaP 세포에 대한 세포독성실험(MTT assay)의 결과를 나타낸 도표이며, 도 3의 B는 본 발명의 일 실시예에 따른 산수유열수추출물(비교예2)의 LNCaP 세포에 대한 세포독성실험의 결과를 나타낸 도표이고, 도 3의 C는 본 발명의 일 실시예에 따른 오미자40% 에탄올추출물(비교예3)의 LNCaP 세포에 대한 세포독성실험의 결과를 나타낸 도표이며, 도 3의 D는 본 발명의 일 실시예에 따른 산수유40%에탄올추출물(비교예4)의 LNCaP 세포에 대한 세포독성실험의 결과를 나타낸 도표이다. Figure 3A is a chart showing the results of a cytotoxicity test (MTT assay) on LNCaP cells of Schisandra hot water extract (Comparative Example 1) according to an embodiment of the present invention, and B of Figure 3 is an embodiment of the present invention It is a chart showing the results of the cytotoxicity test on LNCaP cells of Cornus officinalis extract (Comparative Example 2) according to the example, and C in FIG. It is a chart showing the results of the cytotoxicity test on LNCaP cells, and FIG. 3D is a diagram showing the results of the cytotoxicity test on LNCaP cells of
도 3의 A 내지 도 3의 D에서, 세포를 48시간 동안 상술한 추출물로 각각 처리했다. 그런 다음 MTT 분석으로 세포 생존력을 측정했다. 데이터는 평균 ± 표준 편차(n=3)로 표시하였다. 통계 분석은 그룹 간의 분산 분석(ANOVA-Tukey의 사후 테스트)을 사용하여 수행되었다. **은 p <0.01이며, ns는 대조군과 비교할 때 유의하지 않음을 의미한다. In FIG. 3A to FIG. 3D , cells were treated with the aforementioned extracts for 48 hours, respectively. Cell viability was then measured by the MTT assay. Data are expressed as mean ± standard deviation (n = 3). Statistical analysis was performed using analysis of variance between groups (ANOVA-Tukey's post hoc test). ** means p < 0.01, ns not significant compared with control.
도 3의 A 내지 도 3의 D와 같이, DHT 유도 in vitro BPH 모델에서 BPH 유발 관련 유전자들의 발현에 미치는 오미자추출물 및 산수유추출물의 영향 조사를 위한 조건 설정을 위하여 LNCaP 세포의 증식에 미치는 오미자 및 산수유의 열수 및 40% 에탄올 추출물의 영향을 먼저 조사하였다. As shown in Fig. 3A to Fig. 3D, Schizandra and Cornus officinalis on the proliferation of LNCaP cells in order to set conditions for investigating the effect of Schisandra chinensis extract and Cornus officinalis extract on the expression of genes related to BPH induction in the DHT-induced in vitro BPH model. The effects of hot water and 40% ethanol extract were first investigated.
도 3을 참조하면, 각 추출물의 처리 후 수행된 MTT 분석의 결과에 의하면, 오미자열수추출물(비교예1-WESF)은 350μg/ml에서 다소 LNCaP 세포의 증식을 억제하였지만, 산수유열수추출물(비교예2-WECF)과 오미자40%에탄올추출물(비교예3-40% EESF) 산수유40%에탄올추출물(비교예4-40%EECF)은 처리 농도 350μg/ml까지 세포 독성을 나타내지 않았다. 따라서, 4가지 추출물이 LNCaP 세포에 독성을 나타내지 않았던 농도인 250 μg/ml을 설정하여 향후 실험을 진행하였다. Referring to Figure 3, according to the results of the MTT assay performed after treatment of each extract, Schisandra chinensis extract (Comparative Example 1-WESF) slightly inhibited the proliferation of LNCaP cells at 350 μg / ml, but Cornus officinalis extract (Comparative Example 2-WECF) and
3) DHT가 처리된 LNCaP 세포에서 BPH 유도 관련 유전자 발현에 미치는 오미자추출물 및 산수유추출물의 영향3) Effects of Schisandra chinensis extract and Cornus officinalis extract on the expression of genes related to BPH induction in DHT-treated LNCaP cells
도 4의 A 내지 도 4의 C는 오미자 및 산수유 추출물이 DHT로 자극된 LNCaP 세포에서 BPH 관련 단백질, 성장 인자 및 Bcl-2 계열 단백질의 세포 생존 및 발현에 미치는 영향을 나타낸 도표이다. 4A to 4C are graphs showing the effects of extracts of Schizandra chinensis and Cornus officinalis on cell survival and expression of BPH-related proteins, growth factors, and Bcl-2 family proteins in DHT-stimulated LNCaP cells.
이를 위하여, 도 4의 A 내지 도 4의 C에서 세포를 48시간 동안 100nM DHT 처리하기 전에 1시간 동안 250㎍/ml의 비교예1, 비교예2, 비교예3 및 비교예4에서 제조된 조성물의 존재 또는 부재하에 전처리하였다. To this end, the compositions prepared in Comparative Example 1, Comparative Example 2, Comparative Example 3 and Comparative Example 4 of 250 μg/ml for 1 hour before treating the cells in FIG. 4A to FIG. 4C with 100nM DHT for 48 hours. was pretreated in the presence or absence of
도 4의 A의 세포 생존력은 MTT 분석에 의해 측정되었고, 데이터는 평균 ± 표준 편차(n=4)로 표시하였다. 통계 분석은 그룹 간의 분산 분석(ANOVA-Tukey의 사후 테스트)을 사용하여 수행되었다. **는 p <0.01 대 대조군이며, #는 p <0.05이며, ##는 p <0.01 대 DHT 치료군이다. 도 4의 B 내지 도 4의 C에서 AR, AR 공동 활성화제(ARA70 및 SRC1) 및 PCNA의 발현 수준은 전체 세포 용해물을 사용한 웨스턴 블롯팅(Western blotting)에 의해 결정되었다. 동등한 단백질 로딩은 내부 대조군으로 액틴에 의해 확인되었다.Cell viability in Figure 4A was measured by MTT assay, and data are expressed as mean ± standard deviation (n = 4). Statistical analysis was performed using analysis of variance between groups (ANOVA-Tukey's post hoc test). ** is p < 0.01 versus the control group, # is p < 0.05, and ## is p < 0.01 versus the DHT treatment group. The expression levels of AR, AR co-activators (ARA70 and SRC1) and PCNA in FIG. 4B to FIG. 4C were determined by Western blotting using whole cell lysates. Equal protein loading was confirmed with actin as an internal control.
도 4의 A를 참조하면, DHT에 의한 LNCaP 세포의 증식 촉진은 오미자열수추출물(비교예1)에 의해 다소 감소된 경향을 나타내었다. 그러나 산수유열수추출물(비교예2)과 40% 오미자40%에탄올추출물(비교예3) 및 산수유40%에탄올추출물(비교예4)은 DHT에 의한 증식 촉진을 유의적으로 감소시켰다. 이러한 결과는 각각의 추출물이 BPH의 개시와 진행에 필수적인 전립선 세포의 과다 증식을 억제할 수 있음을 의미한다.Referring to Fig. 4A, the proliferation of LNCaP cells by DHT was slightly reduced by Schisandra chinensis extract (Comparative Example 1). However, Cornus officinalis hot water extract (Comparative Example 2), 40
도 4의 B의 Western blotting의 결과에서 알 수 있듯이, 오미자열수추출물(비교예1) 및 산수유열수추출물(비교예2)이 단독 처리된 세포에서는 AR의 발현이 대조군 수준으로 유지되었지만, 오미자40%에탄올추출물(비교예3) 및 산수유40%에탄올추출물(비교예4) 단독 처리군에서는 대조군에 비하여 AR의 발현이 다소 증가되었다. As can be seen from the Western blotting results in B of FIG. 4, AR expression was maintained at the control level in cells treated with Schisandra hot water extract (Comparative Example 1) and Cornus officinale extract (Comparative Example 2) alone, but
그러나 DHT 처리에 의해 크게 증가되었던 AR의 발현은 오미자와 산수유 추출물이 전처리된 조건에서는 모두 감소하였으며, AR 발현 억제의 정도는 열수 추출물에 비하여 에탄올추출물이 전처리된 경우에서 더 높게 나타났다. 이는 아마도 열수 추출물보다 통상적으로 에탄올과 같은 유기 용매를 이용한 추출물이 열수 추출물에 함유하고 있지 않을 수 있는 다양한 생리활성 성분들이 더 많이 추출되었기 때문이라고 볼 수 있다.However, the expression of AR, which was significantly increased by DHT treatment, was decreased in all pre-treated conditions of Schizandra chinensis and Cornus officinalis extract, and the degree of AR expression inhibition was higher in the case of pre-treatment with ethanol extract compared to the hot water extract. This is probably because the extract using an organic solvent such as ethanol extracts more various physiologically active components that may not be contained in the hot water extract than the hot water extract.
AR 활성 증가 의존적이면서 BPH 및 전립선암의 진단을 위해 사용되는 대표적인 바이오 마커인 PSA의 발현에 미치는 오미자 및 산수유 추출물의 영향을 조사한 결과, PSA는 DHT 단독 처리에 의하여 매우 증가되었으며, 오미자 및 산수유 추출물이 단독 또는 전처리된 조건에서는 AR의 발현 변화 유형과 매우 유사하게 관찰되었다. As a result of examining the effect of Schizandra and Cornus officinalis extracts on the expression of PSA, a representative biomarker used for the diagnosis of BPH and prostate cancer, which is dependent on the increase in AR activity, PSA was greatly increased by DHT alone treatment, and Schizandra and Cornus officinalis extracts In either alone or pre-treated conditions, AR expression changes were observed very similarly.
또한, 전립선 세포의 증식 상태를 반영하는 PCNA의 발현 또한 DHT 처리에 의하여 증가되었으며, 오미자 및 산수유 추출물이 단독 처리된 세포에서는 대조군 수준으로 유지되었다. 그러나 오미자40%에탄올추출물(비교예3) 산수유40%에탄올추출물(비교예4)이 전처리된 조건에서는 DHT에 의한 발현이 대조군 수준으로 억제되었다. In addition, the expression of PCNA, which reflects the proliferative state of prostate cells, was also increased by DHT treatment, and was maintained at the control level in cells treated with Schizandra chinensis and Cornus officinalis extracts alone. However, under the condition of pretreatment with 40% ethanol extract of Schizandra chinensis (Comparative Example 3) and 40% ethanol extract of Cornus officinalis (Comparative Example 4), the expression by DHT was suppressed to the control level.
아울러, 도 4의 B와 같이 대표적인 AR의 coactivator인 AR-associated protein 70(ARA70)의 발현 또한 DHT 단독 처리군에서 매우 증가되었지만, 오미자 및 산수유 추출물이 존재하는 조건에서는 유의적으로 억제되었음을 알 수 있었다. In addition, as shown in B of FIG. 4, the expression of AR-associated protein 70 (ARA70), a representative AR coactivator, was also greatly increased in the DHT alone treatment group, but was significantly inhibited in the presence of Schizandra chinensis and Cornus officinalis extracts. .
상기와 같이, 오미자와 산수유 추출물은 DHT에 의해 증가된 AR 뿐만 아니라 PSA와 PCNA의 발현을 모두 억제할 수 있었으며, 40% 에탄올 추출물이 열수 추출물에 비하여 억제 효과가 뛰어남을 알 수 있었다. As described above, Schizandra Cornus officinalis extract was able to suppress both the expression of PSA and PCNA as well as the AR increased by DHT, and it was found that the 40% ethanol extract had an excellent inhibitory effect compared to the hot water extract.
또한, 이러한 PSA와 PCNA의 발현 차단은 AR의 coactivator인 ARA70의 발현 감소와 연관성이 있었으며, 이는 오미자 및 산수유 추출물이 AR 신호계의 활성 억제를 통하여 BPH의 억제에 기여함을 의미할 수 있다. In addition, blocking the expression of PSA and PCNA was associated with a decrease in the expression of ARA70, a coactivator of AR, which could mean that Schizandra chinensis and Cornus officinalis extracts contributed to the inhibition of BPH through the inhibition of the AR signaling system.
한편, BPH의 개시와 진행이 전립선을 구성하는 세포들의 비정상적인 증식의 촉진에 의한 것이라는 측면에서 전립선 세포들의 증식과 사멸을 조절하는 유전자들의 제어는 BPH의 예방과 치료의 핵심 전략이 될 수 있다. 이를 잘 지지하여 주는 예로서, BPH 환자에서 성장인자(growth factor)들의 수준이 정상인에 비하여 높게 관찰되며, 세포사멸을 조절하는 유전자들의 발현은 정상 세포와는 매우 다르게 유지되고 있다. 특히 전립선 간질 세포는 AR 신호계와 상호 작용하여 epidermal growth factor(EGF)와 basic-fibroblast growth factor(b-FGF)와 같은 자가 분비 성장인자들을 생성을 증가시켜 전립선 세포의 증식 촉진에 기여한다. 아울러 BPH의 상피 및 간질 세포는 정상 전립선 세포에 비하여 세포증식을 촉진하기 위하여 세포사멸에 대한 저항성을 지니며, 이는 Bcl-2 family 단백질 중에서, 세포사멸을 억제하는 Bcl-2와 같은 유전자들의 발현이 증가되어 있는 반면, Bax와 같은 세포사멸 유도 유전자의 발현은 상대적으로 낮게 발현되어 있다. On the other hand, since the initiation and progression of BPH is due to the promotion of abnormal proliferation of cells constituting the prostate, the control of genes controlling the proliferation and death of prostate cells can be a key strategy for preventing and treating BPH. As an example that supports this well, the level of growth factors is observed to be higher in BPH patients than in normal people, and the expression of genes regulating apoptosis is maintained very differently from normal cells. In particular, prostate stromal cells interact with the AR signaling system to increase the production of autocrine growth factors such as epidermal growth factor (EGF) and basic-fibroblast growth factor (b-FGF), contributing to the promotion of prostate cell proliferation. In addition, epithelial and stromal cells of BPH have resistance to apoptosis in order to promote cell proliferation compared to normal prostate cells, and this is due to the expression of genes such as Bcl-2 that inhibit apoptosis among Bcl-2 family proteins. On the other hand, the expression of apoptosis-inducing genes such as Bax is relatively low.
도 4의 C와 같이, BPH 환자에서 관찰되는 이러한 병리적인 특징이 DHT 처리에 따른 in vitro LNCaP 세포 BPH 모델에서도 나타나는지를 조사한 결과, DHT가 단독 처리된 LNCaP 세포에서 EGF와 b-FGF의 발현이 증가하였으며, Bcl-2의 발현 또한 증가된 반면, Bax 및 Bad와 같은 세포사멸 촉진 유전자들의 발현은 감소되었다. As shown in Figure 4C, it was investigated whether these pathological features observed in BPH patients also appeared in the in vitro LNCaP cell BPH model following DHT treatment, and as a result, the expression of EGF and b-FGF increased in LNCaP cells treated with DHT alone. The expression of Bcl-2 was also increased, whereas the expression of apoptosis promoting genes such as Bax and Bad was decreased.
따라서, 이러한 유전자들의 발현에 미치는 오미자와 산수유 추출물의 영향을 조사한 결과, DHT 처리에 의하여 증가되었던 EGF와 b-FGF 발현이 오미자 및 산수유 추출물이 전처리된 조건에서는 모두 감소되었으며, 열수 추출물에 비하여 40% 에탄올 추출물군에서 더욱 감소되었다. 이와 유사하게 증가된 Bcl-2의 발현 또한 오미자 및 산수유 추출물의 전처리에 의하여 억제되었지만, Bax 및 Bad는 DHT 처리에 의해 감소되었으며, 오미자와 산수유 추출물이 존재하는 조건에서는 회복되었으며, 이러한 효과 역시 40% 에탄올 추출물에서 더욱 강하게 관찰되었다. Therefore, as a result of examining the effect of Schisandra chinensis and Cornus officinalis extracts on the expression of these genes, the EGF and b-FGF expressions, which were increased by DHT treatment, were all reduced under the pre-treated condition of Schisandra chinensis and Cornus officinalis extracts, compared to 40% of hot water extracts. It was further reduced in the ethanol extract group. Similarly, the increased expression of Bcl-2 was also suppressed by pretreatment with Schisandra and Cornus officinalis extracts, but Bax and Bad were reduced by DHT treatment and recovered in the presence of Schisandra and Cornus officinalis extracts, and these effects were also reduced by 40% It was more strongly observed in the ethanol extract.
이는, 오미자 및 산수유 추출물에 의한 BPH의 제어는 AR 신호계의 억제와 함께 전립선 세포에서 성장인자의 과다 생산 차단과 세포사멸 유도의 항상성 유지를 통하여 이루어지고 있음을 의미한다. This means that the control of BPH by extracts of Schisandra chinensis and Cornus officinalis is achieved through the inhibition of the AR signaling system, the blocking of excessive production of growth factors in prostate cells, and the maintenance of homeostasis inducing apoptosis.
4) DHT가 처리된 LNCaP 세포의 ROS 생성에 미치는 오미자 및 산수유 추출물의 영향4) Effects of Schisandra and Cornus officinalis extracts on ROS production in DHT-treated LNCaP cells
도 5의 A는 본 발명의 일 실시예에 따른 LNCaP 세포를 100nM DHT로 처리하여 ROS 생성 정도를 나타낸 도표이며, 도 5의 B는 본 발명의 일 실시예에 따른 LNCaP 세포에 비교예1 내지 비교예4를 전처리한 후, 100nM DHT로 처리하여 ROS 생성 정도를 나타낸 도표이다.Figure 5A is a chart showing the degree of ROS generation by treating LNCaP cells according to an embodiment of the present invention with 100 nM DHT, and Figure 5B is a graph showing the LNCaP cells according to an embodiment of the present invention Comparative Example 1 to Comparison After pretreatment of Example 4, it is a graph showing the degree of ROS generation after treatment with 100 nM DHT.
구체적으로, 도 5의 A는 LNCaP 세포를 100nM DHT로 처리한 결과이다. 도 5의 B에는 세포를 250μg/ml 비교예1 내지 비교예4에서 제조된 추출물로 1시간 동안 전처리한 다음, 100nM DHT로 1시간 동안 처리한 결과이다. 유세포 분석을 위해 세포를 수집하고 DCF-DA 염료로 염색했다. 세포 내 ROS 생성은 DCF-DA 염색된 세포의 백분율을 계산하여 결정되었다.Specifically, A of FIG. 5 shows the result of treating LNCaP cells with 100 nM DHT. B of FIG. 5 shows the results of pre-treatment of cells with 250 μg/ml of the extracts prepared in Comparative Examples 1 to 4 for 1 hour, followed by treatment with 100 nM DHT for 1 hour. Cells were collected and stained with DCF-DA dye for flow cytometric analysis. Intracellular ROS production was determined by calculating the percentage of DCF-DA stained cells.
비록 BPH 발달과 관련된 가장 중요한 요소 중 하나는 만성 염증이지만, 산화적 스트레스 또한 BPH의 병인 및 병리와 관련된 주요 인자이다. 실제로 ROS는 전립선 상피 세포와 간질 세포의 과증식을 유지하는 데 핵심적인 역할을 한다고 보고된 바 있다. 아울러 ROS 생산은 nicotinamide adenine dinucleotide phosphate 경로를 통해 다량의 반응성종(reactive species)을 생산하는 염증 세포의 모집을 증폭시키며, 산화적 스트레스는 BPH에서 염증 상태의 합병증 유발에 기여한다. 그럼에도 불구하고 in vitro BPH 모델에서 ROS 생성 관련 연구는 거의 이루어진 바 없다. Although one of the most important factors involved in the development of BPH is chronic inflammation, oxidative stress is also a major factor involved in the etiology and pathology of BPH. Indeed, it has been reported that ROS play a key role in maintaining hyperproliferation of prostate epithelial cells and stromal cells. In addition, ROS production amplifies the recruitment of inflammatory cells that produce large amounts of reactive species through the nicotinamide adenine dinucleotide phosphate pathway, and oxidative stress contributes to the complication of the inflammatory state in BPH. Nevertheless, few studies on ROS generation in in vitro BPH models have been conducted.
따라서, 본 연구에서 사용한 LNCaP 세포에서도 DHT 처리에 의하여 산화적 스트레스가 유도되는지, 이러한 산화적 스트레스가 오미자 및 산수유 추출물에 의하여 상쇄될 수 있는지에 관한 연구를 수행하였다. 이에, DHT가 처리된 LNCaP 세포에서 ROS가 생성되는지를 조사하기 위하여 DCF-DA 염색에 의한 유세포분석을 수행하였다. Therefore, we conducted a study on whether oxidative stress was induced by DHT treatment in LNCaP cells used in this study, and whether this oxidative stress could be offset by extracts of Schisandra chinensis and Cornus officinalis. Accordingly, flow cytometry analysis by DCF-DA staining was performed to investigate whether ROS were produced in DHT-treated LNCaP cells.
도 5의 A의 결과에서 알 수 있듯이, DHT에 노출된 LNCaP 세포는 DHT 처리 30분 이내부터 ROS의 생성이 매우 증가되었으며, DHT 처리 1시간의 조건에서 대조군 대비 10배 이상의 ROS가 생성되었고, 그 이후부터는 시간의 경과에 따라 점차 감소하여 6시간 경과 후에는 대조군과 유사한 수준으로 감소되었다. As can be seen from the results of FIG. 5A, in LNCaP cells exposed to DHT, the production of ROS was greatly increased within 30 minutes of DHT treatment, and ROS production was 10 times higher than that of the control group at 1 hour of DHT treatment. After that, it gradually decreased with the passage of time, and after 6 hours, it was reduced to a level similar to that of the control group.
따라서 오미자 및 산수유 추출물이 1시간 처리된 세포에 DHT를 1시간 처리한 후 ROS 생성 변화의 여부를 조사하였다. 도 5의 B의 결과에 의하면, DHT에 의한 ROS의 생성은 오미자와 산수유 추출물의 처리 농도 의존적으로 억제되었으며, ROS 생성의 억제 효능에서도 열수 추출물에 비하여 40% 에탄올 추출물에서 더 높게 나타났다. Therefore, after 1 hour of DHT treatment in cells treated with Schizandra chinensis and Cornus officinalis extracts for 1 hour, changes in ROS generation were investigated. According to the results in B of FIG. 5, the production of ROS by DHT was inhibited in a concentration-dependent manner in the treatment of Schizandra Cornus officinalis extract, and the inhibitory effect of ROS production was also higher in the 40% ethanol extract than in the hot water extract.
이는 DHT에 의한 in vitro BPH 모델 유도 초기 단계에 ROS 생성이 동반되었음을 보여주는 것이며, 오미자와 산수유 추출물의 이를 강력하게 억제하였음을 알 수 있다. 아울러 본 연구에서 관찰된 오미자와 산수유 추출물의 항산화 활성은 그동안 다양한 질환 모델에서 밝혀진 두 추출물의 항산화 활성에 대한 결과와 잘 일치된다. 또한 BPH 억제 효능을 가지는 몇 가지 천연물이 항산화 활성과 연관성을 가진다는 최근 선행 연구들 또한 본 연구의 결과를 잘 지지하여 준다.This shows that ROS production was accompanied by the initial stage of in vitro BPH model induction by DHT, and it can be seen that Schizandra chinensis and Cornus officinalis extract strongly inhibited it. In addition, the antioxidant activity of Schisandra chinensis and Cornus officinalis extracts observed in this study agrees well with the results of the antioxidant activity of the two extracts found in various disease models so far. In addition, recent previous studies showing that several natural products with BPH inhibitory effects are related to antioxidant activity also support the results of this study.
5) 5) In vitroIn vitro BPH LNCaP 세포 모델에서 40% 에탄올 추출물의 혼합물 효능 비교 Comparison of efficacy of mixtures of 40% ethanol extract in BPH LNCaP cell model
도 6의 A는 본 발명의 일 실시예에 따른 실시예1 내지 실시예3에서 제조된 오미자40%에탄올추출물과 산수유40%에탄올추출물을 각각의 혼합비율로 함유한 혼합물이 LNCaP 세포의 세포생존력에 미치는 영향을 나타낸 세포독성실험(MTT assay)의 결과를 도시한 도표이며, 도 6의 B 내지 도 6의 C는 본 발명의 일 실시예에 따른 실시예1 내지 실시예3에서 제조된 오미자40%에탄올추출물과 산수유40%에탄올추출물을 각각의 혼합비율로 함유한 혼합물을 전처리한 LNCaP 세포의 DHT로 유도된 안드로겐 관련 유전자 발현 정도를 나타낸 도표이다. 6A shows that a mixture containing 40% ethanol extract of Schisandra chinensis and 40% ethanol extract of Cornus officinalis prepared in Examples 1 to 3 according to an embodiment of the present invention in each mixing ratio has an effect on the cell viability of LNCaP cells. It is a chart showing the results of the cytotoxicity test (MTT assay) showing the effect, and FIG. 6B to FIG. 6C are Schizandra 40% prepared in Examples 1 to 3 according to an embodiment of the present invention. It is a chart showing the expression level of androgen-related genes induced by DHT in LNCaP cells pretreated with a mixture containing ethanol extract and 40% ethanol extract of Cornus officinalis at each mixing ratio.
도 6의 A에서 세포에는 실시예1 내지 실시예3에서 제조된 오미자40%에탄올추출물 및 산수유40%에탄올추출물이 1:1, 2:1 및 1:2로 함유한 혼합물이 48시간 동안 처리되었다. 그런 다음 MTT 분석으로 세포 생존력을 측정했다. 데이터는 평균 ± 표준 편차 (n=3)로 표시했다. 통계 분석은 그룹 간의 분산 분석 (ANOVA-Tukey의 사후 테스트)을 사용하여 수행되었다. ***는 p <0.0001 (대조군과 비교할 때)이며, #는 p <0.05이고, ##는 p <0.01이며, ###는 p <0.001 대 DHT 치료군을 의미한다.In Figure 6A, the cells were treated with a mixture containing the 40% ethanol extract of Schisandra chinensis and the 40% ethanol extract of Cornus officinalis prepared in Examples 1 to 3 at 1:1, 2:1 and 1:2 for 48 hours. . Cell viability was then measured by the MTT assay. Data are expressed as the mean ± standard deviation (n = 3). Statistical analysis was performed using analysis of variance between groups (ANOVA-Tukey's post hoc test). *** means p < 0.0001 (compared to the control group), # means p < 0.05, ## means p < 0.01, and ### means p < 0.001 versus the DHT treatment group.
다음은 이상에서 얻은 결과를 바탕으로 다양한 평가항목에서 효능이 우수하였던 오미자 및 산수유 에탄올 추출물을 대상으로 복합 비율을 달리한 조건에서 최적의 BPH 제어 효과 조합 비율의 도출을 시도하였다. 이를 위하여 서로 다른 처리 혼합 비율(40% 오미자 및 산수유 에탄올 추출물의 1:1, 2:1 및 1:2 조합)에 따른 DHT로 유도된 세포증식 억제 효능을 평가하였다. Next, based on the results obtained above, an attempt was made to derive the optimal BPH control effect combination ratio under conditions of different complex ratios for Schisandra and Cornus officinalis ethanol extracts, which had excellent efficacy in various evaluation items. To this end, the cell proliferation inhibitory effect induced by DHT according to different treatment mixing ratios (1:1, 2:1, and 1:2 combinations of 40% ethanol extracts of Schizandra chinensis and Cornus officinalis) was evaluated.
도 6의 A의 MTT 분석 결과에 의하면, 1:1, 2:1 및 1:2 비율의 오미자 및 산수유 40% 에탄올 추출물의 혼합물을 각각 250 μg/ml으로 처리시 LNCaP 세포에 유의적인 독성을 나타내지 않았으며, DHT로 유도된 LNCaP 세포증식 유도 현상이 오미자 및 산수유 40% 에탄올 추출물의 2:1 복합 혼합물에서도 유의적으로 억제되었지만, 1:1 및 1:2 비율의 복합 혼합물에서 더욱 억제되었다. According to the MTT analysis results of FIG. 6A, when the mixture of 40% ethanol extracts of Schisandra and Cornus officinalis at 1:1, 2:1, and 1:2 ratios was treated with 250 μg/ml, respectively, no significant toxicity was shown to LNCaP cells. The induction of LNCaP cell proliferation induced by DHT was significantly inhibited in the 2:1 complex mixture of 40% ethanol extracts of Schizandra chinensis and Cornus officinalis, but was further suppressed in the complex mixtures with 1:1 and 1:2 ratios.
또한, 도 6의 B를 참조하면, DHT로 유도된 AR, ARA70, PSA와 PCNA 발현 역시 2:1 복합 혼합물에 비해 1:1 및 1:2 비율의 복합 혼합물에서 더욱 감소되었다. In addition, referring to FIG. 6B , DHT-induced expression of AR, ARA70, PSA and PCNA was also further reduced in the 1:1 and 1:2 complex mixtures compared to the 2:1 complex mixtures.
아울러, 도 6의 C를 참조하면, 성장인자들의 발현을 평가한 결과에서는 1:1 비율의 혼합물 처리군에서 EGF와 b-FGF의 발현이 모두 억제되었으며, 1:2 비율의 혼합물 처리군에서는 b-FGF만이 억제되었고, 2:1 비율의 복합 혼합물 처리군에서는 두 인자의 억제 효과가 미미하였다. 또한, Bcl-2 family에 속하는 단백질 중에서 DHT에 의한 Bcl-2의 발현 증가에서는 세 가지 조합의 복합물 처리에서 모두 유사한 억제 효과를 보였으며, Bax 및 Bad의 발현 억제 효과는 1:2 및 2:1 복합 혼합물 처리군에서 상대적으로 높은 발현 유도 현상을 보여주었다. In addition, referring to FIG. 6C, in the result of evaluating the expression of growth factors, the expression of both EGF and b-FGF was suppressed in the mixture treatment group at a 1:1 ratio, and in the mixture treatment group at a 1:2 ratio, b Only -FGF was suppressed, and in the group treated with the complex mixture at a ratio of 2:1, the inhibitory effect of the two factors was insignificant. In addition, among the proteins belonging to the Bcl-2 family, the increase in Bcl-2 expression by DHT showed similar inhibitory effects in all three combinations of complex treatments, and the inhibitory effect of Bax and Bad expression was 1:2 and 2:1 The complex mixture treatment group showed a relatively high expression induction phenomenon.
6) 오미자 및 산수유 40% 에탄올추출물과 60% 에탄올 추출물이 DHT에 의한 LNCaP 세포의 세포 증식 촉진에 대한 개선 효능 비교 6) Comparison of improvement efficacy of 40% ethanol extract and 60% ethanol extract of Schizandra chinensis and Cornus officinalis on promoting cell proliferation of LNCaP cells by DHT
도 7의 A 내지 도 7의 B는 오미자 또는 산수유의 40%에탄올추출물 및 오미자 또는 산수유의 60%에탄올 추출물, 오미자추출물과 산수유추출물의 1:1 혼합물이 LNCaP 세포의 DHT 자극 성장에 미치는 영향을 나타낸 세포독성실험(MTT assay)의 결과를 도시한 도표이다.7A to 7B show the effects of a 40% ethanol extract of Schisandra or Cornus officinalis, a 60% ethanol extract of Schisandra or Cornus officinalis, and a 1: 1 mixture of Schizandra extract and Cornus officinalis extract on DHT-stimulated growth of LNCaP cells. It is a chart showing the results of the cytotoxicity test (MTT assay).
도 7의 A에서 세포는 40% EESF 및 40% EECF를 포함하는 250㎍/ml 40% EESF 및 40% EECF, 1:1, 2:1 및 1:2 혼합물로 세포를 1시간 동안 처리한 다음, 100nM으로 자극하였다. In Figure 7A, the cells were treated with 250 μg/
도 7의 B에서 세포를 1시간 동안 250μg/ml 40% 또는 60% EESF 및 EECF 또는 이들의 1:1 혼합물로 처리한 다음 1시간 동안 100nM DHT를 처리하거나 또는 처리하지 않았다. 세포를 수집하고 유세포 분석을 위해 DCF-DA 염료로 염색했다. 세포내 ROS 생성 수준은 DCF-DA로 염색된 세포의 백분율을 계산하여 결정되었다. 데이터는 평균 ± SD로 표시하였다(*p<0.05 및 ***p<0.001 대 대조군; ###p<0.001 대 DHT 처리군).In FIG. 7B , cells were treated with 250 μg/
도 7의 A를 참조하면, DHT 처리에 의해 증가된 ROS의 생성은 1:1 비율의 오미자 및 산수유 40% 에탄올 추출물 복합 처리군에서는 거의 대조군 수준으로 유지되었으며, 2:1 및 1:2 비율의 오미자 및 산수유 40% 에탄올 추출물의 혼합물 전처리군에서도 유의적인 감소 효과가 나타났다. 결론적으로 세 가지 비율의 복합 혼합물 중 1:1 비율의 조합에서 DHT에 의해 증가된 BPH 유도 관련 인자, 성장인자 및 ROS의 생성을 억제하는 능력이 상대적으로 높은 것으로 나타나, 1:1 비율의 복합 혼합물이 최적의 조합임을 알 수 있다. Referring to A in FIG. 7, the production of ROS increased by DHT treatment was maintained at almost the control level in the 1:1 ratio of Schizandra chinensis and Cornus officinalis 40% ethanol extract complex treatment group, and at 2:1 and 1:2 ratios A significant reduction effect was also observed in the mixture pretreatment group of 40% ethanol extracts of Schizandra chinensis and Cornus officinalis. In conclusion, the combination of 1:1 ratio among the three ratios of the complex mixture showed a relatively high ability to inhibit the production of BPH induction-related factors, growth factors and ROS increased by DHT, and the 1:1 ratio of the complex mixture It can be seen that this is an optimal combination.
이상의 결과에 의하면, 오미자 및 산수유의 열수 추출물에 비해 40% 에탄올 추출물이 DHT에 의한 LNCaP 세포의 증식, AR 관련 유전자 발현 및 ROS 생성의 억제에 더 효과적으로 나타나 추출 방법에 따라 효능의 차이가 있음을 알 수 있었다. 이를 바탕으로 오미자 및 산수유 에탄올 추출과정에서 에탄올의 농도 변화에 따른 차이점을 확인하기 위하여 60% 에탄올 추출물과 40% 에탄올 추출물의 효능을 추가로 비교하였다. 이를 위하여 LNCaP 세포를 대상으로 60% 에탄올 추출물 및 1:1 비율의 혼합 복합물을 처리하여 MTT 분석을 실시한 결과에 의하면, 250 μg/ml 처리 범위에서도 세포 독성을 나타내지 않았다. 그리고 DHT로 유도된 LNCaP 세포증식의 억제 효과도 40% 에탄올 추출물과 유사하게 나타났다(Data not shown). According to the above results, the 40% ethanol extract was more effective in inhibiting DHT-induced proliferation of LNCaP cells, AR-related gene expression, and ROS generation than the hot water extracts of Schisandra chinensis and Cornus officinalis, indicating that there was a difference in efficacy depending on the extraction method. could Based on this, the efficacy of the 60% ethanol extract and the 40% ethanol extract was further compared to confirm the difference according to the concentration change of ethanol in the ethanol extraction process of Schizandra chinensis and Cornus officinalis. To this end, LNCaP cells were treated with 60% ethanol extract and the mixed complex at a ratio of 1:1, and MTT assay was performed. According to the results, cytotoxicity was not shown even in the treatment range of 250 μg/ml. In addition, the inhibitory effect of DHT-induced LNCaP cell proliferation was similar to that of the 40% ethanol extract (Data not shown).
그러나, 도 7의 B를 참조하면, ROS 생성 억제 측면에서는 40%의 에탄올 오미자 및 산수유 추출물에 비하여 60%의 에탄올 추출물에서 매우 강하게 나타났으며, 40%의 에탄올 오미자 및 산수유 추출물의 1:1 비율의 복합 혼합물에 비하여 60%의 에탄올 복합 혼합물 처리군에서 더 높은 ROS 생성 억제 효과를 나타냈다. However, referring to B of FIG. 7, in terms of inhibiting ROS generation, it was very strong in 60% ethanol extract compared to 40% ethanol Schizandra and Cornus officinalis extracts, and 1: 1 ratio of 40% ethanol Schizandra and Cornus officinalis extracts Compared to the complex mixture of 60% ethanol complex mixture treated group showed a higher ROS production inhibitory effect.
7) 7) In vitroIn vitro BPH LNCaP 세포 모델에서 40% 및 60% 에탄올 추출물 복합 혼합물의 효능 비교 Comparison of efficacy of 40% and 60% ethanol extract complex mixtures in BPH LNCaP cell model
도 8의 A 내지 B는 오미자 및 산수유 에탄올 추출물 함유 혼합물이 DHT로 자극된 LNCaP 세포에서 BPH 관련 단백질 발현 및 PSA 수준에 미치는 영향을 나타낸 도표이다.8A to B are graphs showing the effects of mixtures containing ethanol extracts of Schizandra chinensis and Cornus officinalis on BPH-related protein expression and PSA levels in DHT-stimulated LNCaP cells.
도 8의 A에서, 세포를 1시간 동안 250㎍/ml 40% 또는 60% EESF 및 EECF 또는 이들의 1:1 혼합물로 처리한 다음 48시간 동안 100nM DHT를 처리하거나 또는 처리하지 않았다. 도 8의 B에서, 세포를 1시간 동안 EESF, EECF 및 이들의 1:1 혼합물의 표시 농도로 처리한 다음, 48시간 동안 100nM DHT를 처리하거나 또는 처리하지 않았다. In Fig. 8A, cells were treated with 250 μg/
세포 배양 상층액을 수집한 후 PSA 수준을 ELISA로 조사하였다. After collecting cell culture supernatants, PSA levels were examined by ELISA.
데이터는 평균 ± SD로 표시하였다(***p<0.001 대 대조군; #p<0.05, ##p<0.01 및 ###p<0.001 대 DHT 처리군). Data are presented as mean±SD (***p<0.001 vs control group; #p<0.05, ##p<0.01 and ###p<0.001 vs DHT treated group).
도 8의 A를 참조하면, DHT에 의해 유도된 AR 관련 유전자들의 발현 억제 효과에서도 40%의 에탄올 추출물에 비하여 60%의 에탄올 추출물이 각각의 단독 그리고 1:1 비율로의 복합물 처리군에서 높게 나타났다. Referring to A of FIG. 8, the effect of inhibiting the expression of AR-related genes induced by DHT was higher in the 60% ethanol extract than in the 40% ethanol extract alone and in the 1:1 ratio treatment group. .
이상에서 확인된 오미자 및 산수유의 추출물에 의한 BPH 개선 효과가 PSA 수준의 감소와 직접 연관성이 있는지를 조사하였다. 이를 위하여 40% 및 60%의 에탄올 추출물을 각각 단독 또는 1:1 비율의 복합 혼합물을 전처리한 후, DHT가 존재하는 배지에서 48시간 배양된 LNCaP 세포를 대상으로 PSA 생성의 정도를 비교하였다. Fig. 7B의 ELISA 결과에 의하면, 대조군에 비하여 DHT가 단독 처리된 LNCaP 세포에서 PSA의 생성 수준은 10배 이상 증가되어, 도 4의 B에 제시한 단백질 수준에서의 PSA 발현의 증가와 잘 일치되었다. We investigated whether the BPH improvement effect of the extracts of Schizandra and Cornus officinalis confirmed above was directly related to the decrease in PSA level. To this end, after pretreatment with 40% and 60% ethanol extracts alone or a complex mixture at a ratio of 1:1, the degree of PSA production was compared for LNCaP cells cultured for 48 hours in a medium containing DHT. Fig. According to the ELISA result of 7B, the level of PSA production in LNCaP cells treated with DHT alone was increased more than 10-fold compared to the control group, which coincided well with the increase in PSA expression at the protein level shown in FIG. 4B.
그러나 도 4의 B에서 40% 에탄올 오미자 및 산수유 추출물 단독 처리군에서도 단백질 수준에서의 PSA 발현의 다소 증가하였듯이, 도 8의 B를 참조하면, 40% 및 60% 에탄올 오미자 및 산수유 추출물 단독 처리군에서도 PSA의 수준이 처리 농도 의존적으로 다소 증가되었다. However, as shown in FIG. 4B, the PSA expression at the protein level was slightly increased even in the 40% ethanol Schizandra and Cornus officinalis extract alone treatment group, referring to FIG. The level of PSA was slightly increased in a treatment concentration dependent manner.
반면, DHT 처리에 의해 증가된 PSA의 생성의 정도가 에탄올 단독 및 1:1 복합 혼합물 처리군에서 처리 농도 증가 따라 유의적인 감소를 보였다. 특히 40% 에탄올 1:1 복합 혼합물 처리군에 비하여 60% 1:1 복합 혼합물 처리군에서 PSA 생성 억제 효능이 높게 관찰되어 60% 에탄올 추출물이 DHT로 유도된 BPH의 개선하는 효과가 좀 더 높은 것으로 추측된다. On the other hand, the degree of PSA production increased by DHT treatment showed a significant decrease as the treatment concentration increased in the ethanol alone and 1:1 complex mixture treatment groups. In particular, a higher efficacy of inhibiting PSA production was observed in the 60% 1:1 complex mixture treatment group compared to the 40% ethanol 1:1 complex mixture treatment group, indicating that the 60% ethanol extract has a higher effect on improving DHT-induced BPH. guessed
3. 결론: LNCaP 세포를 이용한 3. Conclusion: using LNCaP cells in vitroin vitro BPH 모델에서 오미자와 산수유의 열수 및 에탄올 추출물에 의한 BPH 개선 효과 Effects of BPH improvement by hot water and ethanol extracts of Schizandra Cornus officinalis in BPH model
도 9는 본 발명의 일 실시예에 따른 오미자(SF) 또는 산수유(CF)의 40% 본 연구에서는 LNCaP 세포를 이용한 in vitro BPH 모델에서 오미자와 산수유의 열수 및 에탄올 추출물에 의한 BPH 개선 효과를 나타낸 이미지이다. 9 is 40% of Schisandra (SF) or Cornus officinalis (CF) according to an embodiment of the present invention. In this study, in an in vitro BPH model using LNCaP cells, the BPH improvement effect by hot water and ethanol extracts of Schisandra chinensis and Cornus officinalis was shown. It is an image.
도 9와 같이, 본 발명의 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물 및 이의 제조방법에 따른 실험결과, 오미자 및 산수유 에탄올 추출물이 열수 추출물에 비하여 DHT에 의하여 유도된 LNCaP 세포의 증식 억제능이 우수하였으며, 이는 BPH의 바이오 마커(AR, PSA, PCNA 및 ARA70) 뿐만 아니라 성장인자(EGF 및 b-FGF)의 발현 저해 및 세포사멸 조절 인자(Bcl-2 family 단백질)의 발현 조절과 연관이 있었다. 아울러 오미자 및 산수유 추출물은 DHT에 의한 산화적 스트레스(ROS) 완화 효과가 있었으며, 열수 추출물에 비하여 에탄올 추출물에서 항산화 효능이 높게 나타났다. 그리고 이러한 효능은 오미자와 산수유의 에탄올 단독 추출물에 비하여 1:1 비율로 조합하여 혼합한 복합물에서 높게 나타났으며, 40% 에탄올 추출물에 비하여 60% 에탄올 추출물의 1:1 복합 혼합물에서 BPH의 바이오 마커에 대한 개선 효과가 우수하였다. As shown in FIG. 9, as a result of the experiment according to the composition for preventing or treating prostatic hyperplasia of the present invention and its manufacturing method, the ethanol extract of Schizandra chinensis and Cornus officinalis was superior to the hot water extract in inhibiting the proliferation of LNCaP cells induced by DHT, which is It was associated with inhibition of expression of growth factors (EGF and b-FGF) as well as biomarkers of BPH (AR, PSA, PCNA and ARA70) and regulation of expression of apoptosis regulators (Bcl-2 family proteins). In addition, extracts of Schizandra chinensis and Cornus officinalis had an effect of relieving oxidative stress (ROS) by DHT, and antioxidant efficacy was higher in ethanol extract than in hot water extract. In addition, this efficacy was higher in the compound mixed in a 1:1 ratio than the ethanol alone extract of Schisandra chinensis and Cornus officinalis, and the biomarker of BPH in the 1:1 complex mixture of the 60% ethanol extract compared to the 40% ethanol extract. The improvement effect on was excellent.
Ⅱ. 오미자추출물과 산수유추출물의 혼합비율에 따른 관능평가 II. Sensory evaluation according to the mixing ratio of Schisandra chinensis extract and Cornus officinalis extract
하기의 실험은 본 발명의 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물의 제조방법에서 오미자추출물과 산수유추출물의 혼합비율에 따른 관능평가를 실시하기 위하여, 오미자추출물과 산수유추출물의 배합비를 각각 달리하여 하기 실시예와 같이 제조하였다. The following experiment was conducted to evaluate the sensory evaluation according to the mixing ratio of Schisandra chinensis extract and Cornus oil extract in the method for preparing a composition for preventing or treating prostatic hyperplasia containing Schisandra chinensis extract and Cornus oil extract of the present invention. It was prepared as in the following examples by varying the mixing ratio.
검사원으로서의 적합성이 인정된 식품공학과 대학원생을 본 실험의 목적에 적합한 훈련을 시킨 후에 관능평가를 하였다. 관능평가 항목은 맛, 향 및 전반적인 기호도로 굉장히 좋으면 9점, 매우 나쁘면 1점으로 평가하는 9점 척도법으로 실시하였다.Sensory evaluation was conducted after training graduate students of the Department of Food Science and Engineering who were recognized for their suitability as inspectors suitable for the purpose of this experiment. Sensory evaluation items were conducted on a 9-point scale in which taste, aroma, and overall acceptability were evaluated with 9 points for very good and 1 point for very bad.
[비교예5][Comparative Example 5]
건조된 오미자원물과, 상기 건조된 오미자원물 10중량부에 대하여 물 100중량부를 추출기에 넣고 60℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 오미자추출분말을 제조하였다.The dried Schizandra chinensis extract and 100 parts by weight of water based on 10 parts by weight of the dried Schizandra chinensis extract were put into an extractor and extracted at 60° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare Schisandra chinensis extract powder.
건조된 산수유원물과, 상기 건조된 산수유원물 10중량부에 대하여 물 100중량부를 추출기에 넣고 50℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 산수유추출분말을 제조하였다.The dried Cornus oil raw material and 100 parts by weight of water based on 10 parts by weight of the dried Corn water raw material were put into an extractor and extracted at 50 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare cornus oil extract powder.
상기 오미자추출분말과, 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 상기 산수유추출분말 15중량부를 혼합하였다.The Schisandra chinensis extract powder and 15 parts by weight of the Cornus officinalis extract powder were mixed with respect to 30 parts by weight of the Schisandra chinensis extract powder.
[비교예6][Comparative Example 6]
건조된 오미자원물과, 상기 건조된 오미자원물 10중량부에 대하여 물 100중량부를 추출기에 넣고 60℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 오미자추출분말을 제조하였다.The dried Schizandra chinensis extract and 100 parts by weight of water based on 10 parts by weight of the dried Schizandra chinensis extract were put into an extractor and extracted at 60° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare Schisandra chinensis extract powder.
건조된 산수유원물과, 상기 건조된 산수유원물 10중량부에 대하여 물 100중량부를 추출기에 넣고 50℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 산수유추출분말을 제조하였다.The dried Cornus oil raw material and 100 parts by weight of water based on 10 parts by weight of the dried Corn water raw material were put into an extractor and extracted at 50 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare cornus oil extract powder.
상기 오미자추출분말과, 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 상기 산수유추출분말 30중량부를 혼합하였다.The Schisandra chinensis extract powder and 30 parts by weight of the Cornus officinalis extract powder were mixed with respect to 30 parts by weight of the Schizandra chinensis extract powder.
[비교예7][Comparative Example 7]
건조된 오미자원물과, 상기 건조된 오미자원물 10중량부에 대하여 물 100중량부를 추출기에 넣고 60℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 오미자추출분말을 제조하였다.The dried Schizandra chinensis extract and 100 parts by weight of water based on 10 parts by weight of the dried Schizandra chinensis extract were put into an extractor and extracted at 60° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare Schisandra chinensis extract powder.
건조된 산수유원물과, 상기 건조된 산수유원물 10중량부에 대하여 물 100중량부를 추출기에 넣고 50℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 산수유추출분말을 제조하였다.The dried Cornus oil raw material and 100 parts by weight of water based on 10 parts by weight of the dried Corn water raw material were put into an extractor and extracted at 50 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare cornus oil extract powder.
상기 오미자추출분말과, 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 상기 산수유추출분말 60중량부를 혼합하였다.The Schisandra chinensis extract powder and 60 parts by weight of the Cornus officinalis extract powder were mixed with respect to 30 parts by weight of the Schisandra chinensis extract powder.
[실시예5][Example 5]
건조된 오미자원물과, 상기 건조된 오미자원물 10중량부에 대하여 40%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 60℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 오미자추출분말을 제조하였다.The dried Schisandra chinensis raw material and 100 parts by weight of a 40% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried Schisandra chinensis raw material were put into an extractor and extracted at 60 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare Schisandra chinensis extract powder.
건조된 산수유원물과, 상기 건조된 산수유원물 10중량부에 대하여 40%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 50℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 산수유추출분말을 제조하였다.The dried cornflower oil and 100 parts by weight of a 40% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried cornflower oil were put into an extractor and extracted at 50 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare cornus oil extract powder.
상기 오미자추출분말과, 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 상기 산수유추출분말 5중량부를 혼합하였다.The Schisandra chinensis extract powder and 5 parts by weight of the Cornus officinalis extract powder were mixed with respect to 30 parts by weight of the Schizandra chinensis extract powder.
[실시예6][Example 6]
건조된 오미자원물과, 상기 건조된 오미자원물 10중량부에 대하여 40%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 60℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 오미자추출분말을 제조하였다.The dried Schisandra chinensis raw material and 100 parts by weight of a 40% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried Schisandra chinensis raw material were put into an extractor and extracted at 60 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare Schisandra chinensis extract powder.
건조된 산수유원물과, 상기 건조된 산수유원물 10중량부에 대하여 40%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 50℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 산수유추출분말을 제조하였다.The dried cornflower oil and 100 parts by weight of a 40% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried cornflower oil were put into an extractor and extracted at 50 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare cornus oil extract powder.
상기 오미자추출분말과, 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 상기 산수유추출분말 10중량부를 혼합하였다.The Schisandra chinensis extract powder and 10 parts by weight of the Cornus officinalis extract powder were mixed with 30 parts by weight of the Schisandra chinensis extract powder.
[실시예7][Example 7]
건조된 오미자원물과, 상기 건조된 오미자원물 10중량부에 대하여 40%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 60℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 오미자추출분말을 제조하였다.The dried Schisandra chinensis raw material and 100 parts by weight of a 40% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried Schisandra chinensis raw material were put into an extractor and extracted at 60 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare Schisandra chinensis extract powder.
건조된 산수유원물과, 상기 건조된 산수유원물 10중량부에 대하여 40%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 50℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 산수유추출분말을 제조하였다.The dried cornflower oil and 100 parts by weight of a 40% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried cornflower oil were put into an extractor and extracted at 50 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare cornus oil extract powder.
상기 오미자추출분말과, 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 상기 산수유추출분말 15중량부를 혼합하였다.The Schisandra chinensis extract powder and 15 parts by weight of the Cornus officinalis extract powder were mixed with respect to 30 parts by weight of the Schisandra chinensis extract powder.
[실시예8][Example 8]
건조된 오미자원물과, 상기 건조된 오미자원물 10중량부에 대하여 40%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 60℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 오미자추출분말을 제조하였다.The dried Schisandra chinensis raw material and 100 parts by weight of a 40% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried Schisandra chinensis raw material were put into an extractor and extracted at 60 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare Schisandra chinensis extract powder.
건조된 산수유원물과, 상기 건조된 산수유원물 10중량부에 대하여 40%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 50℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 산수유추출분말을 제조하였다.The dried cornflower oil and 100 parts by weight of a 40% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried cornflower oil were put into an extractor and extracted at 50 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare cornus oil extract powder.
상기 오미자추출분말과, 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 상기 산수유추출분말 30중량부를 혼합하였다.The Schisandra chinensis extract powder and 30 parts by weight of the Cornus officinalis extract powder were mixed with respect to 30 parts by weight of the Schizandra chinensis extract powder.
[실시예9][Example 9]
건조된 오미자원물과, 상기 건조된 오미자원물 10중량부에 대하여 40%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 60℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 오미자추출분말을 제조하였다.The dried Schisandra chinensis raw material and 100 parts by weight of a 40% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried Schisandra chinensis raw material were put into an extractor and extracted at 60 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare Schisandra chinensis extract powder.
건조된 산수유원물과, 상기 건조된 산수유원물 10중량부에 대하여 40%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 50℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 산수유추출분말을 제조하였다.The dried cornflower oil and 100 parts by weight of a 40% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried cornflower oil were put into an extractor and extracted at 50 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare cornus oil extract powder.
상기 오미자추출분말과, 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 상기 산수유추출분말 60중량부를 혼합하였다.The Schisandra chinensis extract powder and 60 parts by weight of the Cornus officinalis extract powder were mixed with respect to 30 parts by weight of the Schisandra chinensis extract powder.
[실시예10][Example 10]
건조된 오미자원물과, 상기 건조된 오미자원물 10중량부에 대하여 40%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 60℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 오미자추출분말을 제조하였다.The dried Schisandra chinensis raw material and 100 parts by weight of a 40% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried Schisandra chinensis raw material were put into an extractor and extracted at 60 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare Schisandra chinensis extract powder.
건조된 산수유원물과, 상기 건조된 산수유원물 10중량부에 대하여 40%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 50℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 산수유추출분말을 제조하였다.The dried cornflower oil and 100 parts by weight of a 40% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried cornflower oil were put into an extractor and extracted at 50 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare cornus oil extract powder.
상기 오미자추출분말과, 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 상기 산수유추출분말 90중량부를 혼합하였다.The Schisandra chinensis extract powder and 90 parts by weight of the Cornus officinalis extract powder were mixed with respect to 30 parts by weight of the Schizandra chinensis extract powder.
[실시예11][Example 11]
건조된 오미자원물과, 상기 건조된 오미자원물 10중량부에 대하여 40%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 60℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 오미자추출분말을 제조하였다.The dried Schisandra chinensis raw material and 100 parts by weight of a 40% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried Schisandra chinensis raw material were put into an extractor and extracted at 60 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare Schisandra chinensis extract powder.
건조된 산수유원물과, 상기 건조된 산수유원물 10중량부에 대하여 40%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 50℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 산수유추출분말을 제조하였다.The dried cornflower oil and 100 parts by weight of a 40% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried cornflower oil were put into an extractor and extracted at 50 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare cornus oil extract powder.
상기 오미자추출분말과, 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 상기 산수유추출분말 180중량부를 혼합하였다.The Schisandra chinensis extract powder and 180 parts by weight of the Cornus officinalis extract powder were mixed with respect to 30 parts by weight of the Schizandra chinensis extract powder.
[실시예12][Example 12]
건조된 오미자원물과, 상기 건조된 오미자원물 10중량부에 대하여 60%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 60℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 오미자추출분말을 제조하였다.Dried Schizandra chinensis extract and 100 parts by weight of a 60% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried Schizandra chinensis extract were placed in an extractor and extracted at 60° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare Schisandra chinensis extract powder.
건조된 산수유원물과, 상기 건조된 산수유원물 10중량부에 대하여 60%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 50℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 산수유추출분말을 제조하였다.The dried cornflower oil and 100 parts by weight of a 60% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried cornflower oil were put into an extractor and extracted at 50 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare cornus oil extract powder.
상기 오미자추출분말과, 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 상기 산수유추출분말 5중량부를 혼합하였다.The Schisandra chinensis extract powder and 5 parts by weight of the Cornus officinalis extract powder were mixed with respect to 30 parts by weight of the Schizandra chinensis extract powder.
[실시예13][Example 13]
건조된 오미자원물과, 상기 건조된 오미자원물 10중량부에 대하여 60%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 60℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 오미자추출분말을 제조하였다.Dried Schizandra chinensis extract and 100 parts by weight of a 60% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried Schizandra chinensis extract were placed in an extractor and extracted at 60° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare Schisandra chinensis extract powder.
건조된 산수유원물과, 상기 건조된 산수유원물 10중량부에 대하여 60%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 50℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 산수유추출분말을 제조하였다.The dried cornflower oil and 100 parts by weight of a 60% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried cornflower oil were put into an extractor and extracted at 50 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare cornus oil extract powder.
상기 오미자추출분말과, 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 상기 산수유추출분말 10중량부를 혼합하였다.The Schisandra chinensis extract powder and 10 parts by weight of the Cornus officinalis extract powder were mixed with 30 parts by weight of the Schisandra chinensis extract powder.
[실시예14][Example 14]
건조된 오미자원물과, 상기 건조된 오미자원물 10중량부에 대하여 60%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 60℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 오미자추출분말을 제조하였다.Dried Schizandra chinensis extract and 100 parts by weight of a 60% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried Schizandra chinensis extract were placed in an extractor and extracted at 60° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare Schisandra chinensis extract powder.
건조된 산수유원물과, 상기 건조된 산수유원물 10중량부에 대하여 60%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 50℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 산수유추출분말을 제조하였다.The dried cornflower oil and 100 parts by weight of a 60% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried cornflower oil were put into an extractor and extracted at 50 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare cornus oil extract powder.
상기 오미자추출분말과, 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 상기 산수유추출분말 15중량부를 혼합하였다.The Schisandra chinensis extract powder and 15 parts by weight of the Cornus officinalis extract powder were mixed with respect to 30 parts by weight of the Schisandra chinensis extract powder.
[실시예15][Example 15]
건조된 오미자원물과, 상기 건조된 오미자원물 10중량부에 대하여 60%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 60℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 오미자추출분말을 제조하였다.Dried Schizandra chinensis extract and 100 parts by weight of a 60% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried Schizandra chinensis extract were placed in an extractor and extracted at 60° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare Schisandra chinensis extract powder.
건조된 산수유원물과, 상기 건조된 산수유원물 10중량부에 대하여 60%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 50℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 산수유추출분말을 제조하였다.The dried cornflower oil and 100 parts by weight of a 60% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried cornflower oil were put into an extractor and extracted at 50 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare cornus oil extract powder.
상기 오미자추출분말과, 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 상기 산수유추출분말 30중량부를 혼합하였다.The Schisandra chinensis extract powder and 30 parts by weight of the Cornus officinalis extract powder were mixed with respect to 30 parts by weight of the Schizandra chinensis extract powder.
[실시예16][Example 16]
건조된 오미자원물과, 상기 건조된 오미자원물 10중량부에 대하여 40%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 60℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 오미자추출분말을 제조하였다.The dried Schisandra chinensis raw material and 100 parts by weight of a 40% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried Schisandra chinensis raw material were put into an extractor and extracted at 60 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare Schisandra chinensis extract powder.
건조된 산수유원물과, 상기 건조된 산수유원물 10중량부에 대하여 60%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 50℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 산수유추출분말을 제조하였다.The dried cornflower oil and 100 parts by weight of a 60% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried cornflower oil were put into an extractor and extracted at 50 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare cornus oil extract powder.
상기 오미자추출분말과, 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 상기 산수유추출분말 60중량부를 혼합하였다.The Schisandra chinensis extract powder and 60 parts by weight of the Cornus officinalis extract powder were mixed with respect to 30 parts by weight of the Schisandra chinensis extract powder.
[실시예17][Example 17]
건조된 오미자원물과, 상기 건조된 오미자원물 10중량부에 대하여 60%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 60℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 오미자추출분말을 제조하였다.Dried Schizandra chinensis extract and 100 parts by weight of a 60% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried Schizandra chinensis extract were placed in an extractor and extracted at 60° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare Schisandra chinensis extract powder.
건조된 산수유원물과, 상기 건조된 산수유원물 10중량부에 대하여 60%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 50℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 산수유추출분말을 제조하였다.The dried cornflower oil and 100 parts by weight of a 60% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried cornflower oil were put into an extractor and extracted at 50 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare cornus oil extract powder.
상기 오미자추출분말과, 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 상기 산수유추출분말 90중량부를 혼합하였다.The Schisandra chinensis extract powder and 90 parts by weight of the Cornus officinalis extract powder were mixed with respect to 30 parts by weight of the Schizandra chinensis extract powder.
[실시예18][Example 18]
건조된 오미자원물과, 상기 건조된 오미자원물 10중량부에 대하여 60%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 60℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 오미자추출분말을 제조하였다.Dried Schizandra chinensis extract and 100 parts by weight of a 60% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried Schizandra chinensis extract were placed in an extractor and extracted at 60° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare Schisandra chinensis extract powder.
건조된 산수유원물과, 상기 건조된 산수유원물 10중량부에 대하여 60%에탄올수용액 100중량부를 추출기에 넣고 50℃에서 4시간 동안 추출하였다. 추출물을 농축기에 넣고 농축시켰다. 농축된 추출물을 살균한 후, 여과시키고, 건조하여 산수유추출분말을 제조하였다.The dried cornflower oil and 100 parts by weight of a 60% ethanol aqueous solution based on 10 parts by weight of the dried cornflower oil were put into an extractor and extracted at 50 ° C. for 4 hours. The extract was placed in a concentrator and concentrated. After sterilizing the concentrated extract, it was filtered and dried to prepare cornus oil extract powder.
상기 오미자추출분말과, 상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 상기 산수유추출분말 180중량부를 혼합하였다.The Schisandra chinensis extract powder and 180 parts by weight of the Cornus officinalis extract powder were mixed with respect to 30 parts by weight of the Schizandra chinensis extract powder.
상기 비교예5 내지 비교예7 및 실시예5 내지 실시예18에서 제조된 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물의 관능평가 결과를, 하기 표 3에 나타냈다.The sensory evaluation results of the compositions for preventing or treating prostatic hyperplasia prepared in Comparative Examples 5 to 7 and Examples 5 to 18 are shown in Table 3 below.
표 3을 참조하면, 오미자추출물과 산수유추출물의 혼합비율에 따른 관능평가 결과, 실시예7 내지 실시예9 및 실시예 14 내지 실시예16의 관능평가 점수가 평균 8점 이상으로 다른 비교예 및 실시예들에 비해 높게 나타났다. Referring to Table 3, the results of sensory evaluation according to the mixing ratio of Schisandra chinensis extract and Cornus officinalis extract, the sensory evaluation scores of Examples 7 to 9 and Examples 14 to 16 averaged 8 points or more, and other comparative examples and experiments higher than in the examples.
실시예7 내지 실시예9 및 실시예 14 내지 실시예16의 조성물은 오미자 고유의 적정한 단맛과 오묘한 맛이 잘 느껴지면서도 산수유 고유의 쓴맛, 떫은맛이나 신맛이 크게 느껴지지 않았다는 평가였다. 즉, 본 발명의 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물은 상기 오미자추출물 30중량부에 대하여 상기 산수유추출물이 15 내지 60중량부로 혼합되는 경우, 오미자와 산수유 고유의 맛과 풍미가 적절하게 어우러져 서로 상승작용을 일으켜 식음자의 높은 기호도를 만족시킬 수 있음을 알 수 있다.The compositions of Examples 7 to 9 and Examples 14 to 16 were evaluated that the appropriate sweetness and subtle taste inherent in Schisandra chinensis were well felt, but the bitterness, astringency or sourness inherent in Cornus officinalis were not felt significantly. That is, when the composition for preventing or treating prostatic hyperplasia of the present invention is mixed with 15 to 60 parts by weight of the cornus oil extract based on 30 parts by weight of the Schisandra chinensis extract, the unique taste and flavor of Schisandra chinensis and cornus oil are properly harmonized and act synergistically with each other. It can be seen that it can satisfy the high preference of drinkers.
비교예5 내지 비교예7은 오미자와 산수유의 맛과 향을 느낄 수 있었으나, 원물 고유의 풍미가 희석된 것처럼 옅게 느껴져 밋밋한 맛과 향에 특색이 없었다는 평가가 많았다. Comparative Examples 5 to 7 were able to feel the taste and aroma of Schisandra chinensis and Cornus officinalis, but many evaluated that the original flavor was diluted as if it were diluted, and there was no distinctive taste and aroma.
실시예5 내지 실시예6은 산수유추출물에 비해 오미자추출물의 함량인 많아지면서 오미자 고유의 신맛과 매운맛이 강해지면서 평가원의 전반적인 기호도가 낮아진 것으로 볼 수 있다. 향은 오미자 고유의 향만 느껴져서 아쉬웠다는 평가가 있었다.In Examples 5 to 6, it can be seen that the overall preference of the evaluators was lowered as the content of Schisandra chinensis extract increased compared to cornus oil extract, and the unique sour and spicy taste of Schisandra chinensis became stronger. There was an evaluation that it was regrettable that only the scent of Omija was felt.
실시예9 내지 실시예10은 오미자추출물에 비해 산수유추출물의 함량이 많아지면서 산수유 고유의 떫은 맛과 쓴맛이 강해져 실시예5 내지 실시예6보다도 맛에 대한 평가점수가 더 낮게 나타났다. 향은 산수유 고유의 은은한 향이 나타났으나 오미자 고유의 새콤달콤한 향이 거의 느껴지지 않았다는 평가가 많았다.Examples 9 to 10 showed a lower evaluation score for taste than Examples 5 to 6 as the content of cornus oil extract increased compared to Schisandra chinensis extract, and the astringency and bitterness inherent in cornus oil became stronger. In terms of fragrance, there was a subtle scent unique to Sansuyu, but many evaluated that the sweet and sour scent unique to Schisandra chinensis was barely felt.
실시예12 내지 실시예13는 오미자추출물의 함량이 높아지면서 오미자원물의 맛이 많이 느껴져 맛은 있었으나, 오미자의 맛이 다소 강해지면서 식음자의 기호도에 영향을 주어 관능평가 점수가 낮아진 것으로 파악된다.In Examples 12 to 13, as the content of Schisandra chinensis extract increased, the taste of Schisandra chinensis was felt a lot, and the taste was good.
실시예17 내지 실시예18은 산수유추출물의 함량이 많아지면서 산수유추출물에서 유래된 떫은 맛, 쓴 맛이 많이 느껴졌으며, 산수유 고유의 은은한 향이 나타났으나 오미자 고유의 새콤달콤한 향이 거의 느껴지지 않았다는 평가가 많았다.In Examples 17 to 18, as the content of cornus oil extract increased, a lot of astringency and bitterness derived from cornus oil extract were felt, and a subtle scent unique to cornus oil appeared, but the sweet and sour scent unique to Schisandra chinensis was evaluated. There were many.
이와 같이, 상술한 본 발명의 기술적 구성은 본 발명이 속하는 기술 분야의 당업자가 본 발명의 그 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다.As such, it will be understood that the technical configuration of the present invention described above can be implemented in other specific forms without changing the technical spirit or essential features of the present invention by those skilled in the art to which the present invention belongs.
그러므로, 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로서 이해되어야 하고, 본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허청구범위에 의하여 나타나며, 특허청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.Therefore, the embodiments described above should be understood as illustrative and not limiting in all respects, and the scope of the present invention is indicated by the claims to be described later rather than the detailed description, and the meaning and scope of the claims and All changes or modified forms derived from the equivalent concept should be construed as being included in the scope of the present invention.
Claims (6)
산수유원물에 물과 에탄올이 혼합된 추출용매를 가해 추출한 후, 농축하여 형성된 산수유농축물을 건조시킨 산수유추출분말;을 포함하며,
상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 산수유추출분말이 15 내지 60중량부로 혼합된 것을 특징으로 하는 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물. Schisandra chinensis extract powder obtained by applying and extracting an extraction solvent mixed with water and ethanol to Schisandra chinensis resources, and then drying the Schisandra chinensis concentrate formed by concentrating; and
Containing cornus oil extract powder obtained by extracting cornus oil by adding an extraction solvent mixed with water and ethanol to the cornus oil, and then drying the cornus oil concentrate formed by concentrating,
A composition for preventing or treating prostatic hyperplasia comprising Schisandra extract and cornus oil extract, characterized in that the cornus oil extract powder is mixed in 15 to 60 parts by weight based on 30 parts by weight of the Schisandra chinensis extract powder.
상기 추출용매에서,
상기 에탄올의 농도는 40 내지 60wt%인 것을 특징으로 하는 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물.According to claim 1,
In the extraction solvent,
The concentration of the ethanol is 40 to 60wt%, characterized in that Schizandra chinensis extract and Cornus officinalis extract for preventing or treating prostatic hyperplasia composition.
상기 조성물은,
상기 오미자농축물 30중량부 및 상기 산수유농축물 30중량부 각각에 대하여 70 내지 75중량부의 덱스트린이 더 포함된 것을 특징으로 하는 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물.According to claim 1,
The composition,
A composition for preventing or treating prostatic hyperplasia comprising Schisandra extract and cornus oil extract, characterized in that 70 to 75 parts by weight of dextrin is further included with respect to 30 parts by weight of the Schizandra chinensis concentrate and 30 parts by weight of the Cornus milk concentrate.
상기 오미자농축물을 건조시켜 오미자추출분말을 형성하는 제 2단계;
산수유원물에 물과 에탄올이 혼합된 추출용매를 가해 50 내지 55℃에서 추출한 후, 농축시켜 산수유농축물을 형성하는 제 3단계;
상기 산수유농축물을 건조시켜 산수유추출분말을 형성하는 제 4단계; 및
상기 오미자추출분말 30중량부에 대하여 산수유추출분말을 15 내지 60중량부로 혼합하는 제 5단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물의 제조방법.A first step of adding an extraction solvent mixed with water and ethanol to Schisandra chinensis raw materials, extracting at 60 to 65 ° C, and then concentrating to form Schisandra chinensis concentrate;
A second step of drying the Schisandra chinensis concentrate to form Schisandra chinensis extract powder;
A third step of adding an extraction solvent in which water and ethanol are mixed to cornus oil, extracting at 50 to 55° C., and then concentrating to form a cornus oil concentrate;
A fourth step of drying the cornus oil concentrate to form cornus oil extract powder; and
A fifth step of mixing 15 to 60 parts by weight of cornus oil extract powder with respect to 30 parts by weight of the Schisandra chinensis extract powder; method for producing a composition for preventing or treating prostatic hyperplasia containing Schisandra chinensis extract and Cornus oil extract, comprising .
상기 추출용매에서,
상기 에탄올의 농도는 40 내지 60wt%인 것을 특징으로 하는 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물의 제조방법.According to claim 4,
In the extraction solvent,
Method for producing a composition for preventing or treating prostatic hyperplasia comprising Schizandra chinensis extract and Cornus officinalis extract, characterized in that the concentration of the ethanol is 40 to 60 wt%.
상기 제 1단계 이후에, 상기 오미자농축물 30중량부에 대하여 덱스트린을 70 내지 75중량부를 첨가하며,
상기 제 3단계 이후에, 상기 산수유농축물 30중량부에 대하여 덱스트린을 70 내지 75중량부를 첨가하는 것을 특징으로 하는 오미자추출물과 산수유추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물의 제조방법.According to claim 4,
After the first step, 70 to 75 parts by weight of dextrin is added to 30 parts by weight of the Schisandra chinensis concentrate,
After the third step, 70 to 75 parts by weight of dextrin is added with respect to 30 parts by weight of the cornus oil concentrate. Method for producing a composition for preventing or treating prostatic hyperplasia containing Schizandra chinensis extract and cornelian extract.
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| KR101634779B1 (en) | 2014-01-24 | 2016-06-30 | 사회복지법인 삼성생명공익재단 | Compositions for Preventing or Treating Benign prostatic hyperplasia and Dysuresia Comprising Schisandra chinensis Extracts as Active Ingredients |
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