KR20230026340A - 세포를 자동으로 처리하기 위한 현장 의료 시스템 - Google Patents
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Abstract
본 개시는 일반적으로 세포를 가공하기 위한 시스템 및 방법, 및 이러한 방법 및 프로세스와 함께 사용하기 위한 키트에 관한 것이다. 상기 시스템은 복수의 서브시스템을 포함하며, 여기서 서브시스템 중 적어도 하나는 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합된다.
Description
관련 출원에 대한 상호 참조
본 출원은 2020년 5월 22일에 출원된 미국 특허 가출원 제63/029,230호에 대한 우선권과 이익을 주장하며, 그 전체 내용은 모든 목적을 위해 그 전체가 참조로서 본원에 통합된다.
기술분야
본 개시는 일반적으로 세포를 가공하기 위한 시스템 및 방법, 및 세포를 가공하기 위한 이러한 시스템 및 방법과 함께 사용하기 위한 키트에 관한 것이다.
세포 기반 치료제와 같은 세포 치료제는 면역 반응을 촉진하도록 설계되고, 예를 들어 암과 같은 다수의 질환에 대한 점점 더 흔한 치료 옵션이 되고 있다. 특히, 암 치료를 위한 세포 기반 요법과 같은 세포 요법은 화학요법 및 방사선과 같은 전통적인 치료 방법에 비해 많은 이점을 가지며, 따라서 세포 요법은 그 용도가 더 확산되고 있다. 이러한 장점은, 화학요법 대비 더 짧은 치료 시간을 포함할 수 있는데, 이는 일부 경우에, 원하는 치료 결과를 달성하는 데 단 1회의 주입만이 필요할 수 있기 때문이다. 추가적인 장점은 화학요법으로부터 회복하는 것과 비교했을 때 더 빠른 회복 기간일 수 있다. 화학요법 대비 세포 치료제의 또 다른 장점은, 표준 화학요법이 신속하게 분열하는 정상 세포 및 암세포 모두에 작용하는 것과 반대로, 세포 치료제는 암과 연관된 특정 분자 표적을 표적화하는 치료제일 수 있다는 것이다.
그러나, 세포 기반 치료제와 같은 현재 승인된 세포 치료제의 이점에도 불구하고, 이들 세포 치료제의 제조 프로세스에 있어서의 제약이 당업계의 상당한 걸림돌이다. 이하에서 추가로 논의되는 바와 같이, 다른 제조 프로세스들은 원하는 세포 치료제를 생산하는 데 수일 내지 수주가 걸릴 수 있다. 또한, 이러한 다른 제조 프로세스들은 일반적으로 다수의 상이한 기기의 사용을 수반하는데, 이들 각각은 고유한 설정과 세정을 필요로 하여, 최종 완제의약품을 생산하는 데 상당한 시간이 추가된다. 또한, 세포 치료제를 생산하기 위한 다른 방법들은 다수의 상이한 기기와 멸균 환경을 필요로 하기 때문에, 제조 프로세스를 수행하기 위해서는 다수의 클린룸과 같은 필수 멸균 조건이 구비된 큰 물리적 공간이 필요하므로, 상당한 비용이 제조 프로세스에 추가된다.
이와 같이, 세포를 가공하기 위한, 예컨대 세포 치료제를 생산하기 위한 시스템 및 방법에 대한 필요성이 당업계에 존재하며, 이러한 시스템 및 방법은 현재 시스템 및 방법에 비해 개선을 나타낸다.
본 개시는 일반적으로 세포를 가공하기 위한 시스템에 관한 것으로, 상기 시스템은: 다음을 포함하는 현탁액 제조 서브시스템: 전달 배지 유입구; 세포를 단리하도록 구성된 세포 단리 장치; 단리된 세포를 전달 배지에 현탁하여 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 세포 현탁 장치; 세포 현탁액 제조 서브 시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 세포 변형 서브시스템: 세포 현탁액 유입구; 세포의 세포막에서 섭동을 일으켜 페이로드를 세포 내로 진입시켜 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 하나 이상의 세포 변형 협착부; 세포 변형 서브시스템과 유체연통하고, 다음을 포함하는 희석 서브시스템: 세포 현탁액 유입구; 완충액 유입구; 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액 및 유체 시약 또는 건조 시약을 수용하여, 유체 시약 또는 건조 시약을 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액과 혼합하여 희석된 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 용기; 희석 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 인큐베이션 서브시스템: 희석된 세포 현탁액 유입구; 희석된 세포 현탁액을 수용하도록 구성된 용기; 및 용기 내의 희석된 세포 현탁액의 온도롤 조절하여 인큐베이션된 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 플레이트; 인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 세포 세척 서브시스템: 인큐베이션된 세포 현탁액 유입구; 보존 배지 유입구; 인큐베이션된 세포 현탁액 및 보존 배지를 수용하는 용기로서, 보존 배지를 인큐베이션된 세포 현탁액과 용기 내에서 혼합하여 세포를 보존 배지에 현탁하도록 구성된 용기; 및 인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 용기 충진 서브시스템: 보존 배지에 현탁된 세포를 수용하도록 구성된 유입구; 보존 배지에 현탁된 세포를 수용하도록 구성된 하나 이상의 용기; 및 보존 배지에 현탁된 세포를 하나 이상의 용기 내로 펌핑하도록 구성된 하나 이상의 펌프를 포함하며; 여기서 서브시스템 중 적어도 하나는 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합된다.
일부 양태에서, 상기 시스템은 멸균 상태이며, 비멸균 위치에서 사용되도록 구성된다. 일부 양태에서, 상기 시스템은 약 5시간 내지 약 7시간 이내에 가공된 세포를 생산한다. 일부 양태에서, 세포는 적혈구(RBC)를 포함한다. 일부 양태에서, 세포는 RBC-유래 소포, 예를 들어 활성화 항원 담체(AAC), 내약성 유발 항원 담체(TAC)를 포함한다. 일부 양태에서, 세포는 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)를 포함한다. 일부 양태에서, 세포는 활성화 항원 담체(APC)를 포함한다. 일부 양태에서, 세포는 T 세포, B 세포, 수지상 세포, 단핵구, 대식세포, 호산구, 호염기구, 자연 살해(NK) 세포, 자연 살해 T(NKT) 세포, 비만 세포, 또는 호중구를 포함한다. 일부 양태에서, 희석 서브시스템의 세포 현탁액 유입구 및 완충액 유입구는 동일한 유입구이다. 일부 양태에서, 완충액 유입구는 희석 서브시스템에 유체를 전달하는 데 사용된다. 일부 양태에서, 완충액 유입구는 희석 서브시스템에 건조 시약을 전달하는 데 사용된다. 일부 양태에서, 페이로드는 하나 이상의 재프로그래밍 인자를 포함한다. 일부 양태에서, 페이로드는 하나 이상의 핵산을 포함한다. 일부 양태에서, 페이로드는 하나 이상의 분화 인자를 포함한다. 일부 양태에서, 페이로드는 하나 이상의 뉴런 재프로그래밍 인자를 포함한다. 일부 양태에서, 서브시스템 중 하나 이상은 시스템에 분리 가능하게 결합되도록 구성된 하나 이상의 구성요소를 포함한다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 세척 배지 유입구를 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 희석 배지 유입구를 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 세포에 대한 세포 단리 작업을 수행하도록 구성된 용출 시스템(elutriation system)을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 세포에 대한 세포 단리 작업을 수행하도록 구성된 적혈구 제거 필터(leukoreduction filter)를 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 완충액 교환 작업을 수행하도록 구성된 접선 유동 여과 시스템을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 전달 배지에 현탁된 세포를 수용하기 위한 적어도 하나의 용기에 결합되도록 구성된 적어도 하나의 배출구를 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 용기는 적어도 하나의 유입구 및 적어도 하나의 배출구를 포함하는 백(bag)이다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 용기를 칭량하도록 구성된 저울 시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 저울 시스템은 장력 로드 셀(tension load cell)을 포함한다. 일부 양태에서, 저울 시스템은 압축 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 저울 시스템은 직선 막대형 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은, 용기에 접촉하여 용기를 위아래로 진탕하도록 구성된 플랫폼을 포함하는 교반 시스템을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은, 용기에 접촉하여 용기에 접촉한 상태로 전후로 이동하도록 구성된 플레이트를 포함하는 교반 시스템을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 서브시스템 내에서 또는 유체 연결된 서브시스템들 간에 유체를 이동시키도록 구성된 하나 이상의 펌프를 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 혈장을 제거할 수 있다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 혈청을 제거할 수 있다.
일부 양태에서, 세포 변형 서브시스템은 하나 이상의 세포 변형 협착부를 통해 세포 현탁액을 가압하기 위한 압력을 생성하도록 구성된 가압 시스템을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 세포 변형 서브시스템은 하나 이상의 세포 변형 협착부를 통해 세포 현탁액을 유동시키도록 구성된 제제 용기를 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 제제 용기는 강성 저장조 서브어셈블리이다. 일부 양태에서, 세포 변형 서브시스템은 세포 현탁액의 온도를 조절하도록 구성된 가열식 플레이트를 포함하는 온도 조절 시스템을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 세포 변형 서브시스템은 세포 현탁액 또는 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 수용하기 위한 적어도 하나의 용기에 결합되도록 구성된 적어도 하나의 배출구를 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 용기는 적어도 하나의 유입구 및 적어도 하나의 배출구를 포함하는 백(bag)이다. 일부 양태에서, 세포 변형 서브시스템은, 적어도 하나의 용기와 접촉하여 용기를 위아래로 진탕하도록 구성된 플랫폼을 포함하는 교반 시스템을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 적어도 하나의 용기와 접촉하는 플랫폼을 포함하는 교반 시스템은, 세포 현탁액 또는 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액의 균질성을 촉진하기 위해 용기를 위아래로 진탕하여 세포 현탁액을 교반하도록 구성된다. 일부 양태에서, 세포 변형 서브시스템은, 용기에 접촉하여 용기에 접촉한 상태로 전후로 이동하도록 구성된 플레이트를 포함하는 교반 시스템을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 희석 서브시스템은 용기를 칭량하기 위한 저울 시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 용기를 칭량하기 위한 저울 시스템은 장력 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 용기를 칭량하기 위한 저울 시스템은 압축 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 용기를 칭량하기 위한 저울 시스템은 직선 막대형 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 희석 서브시스템은 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액의 세포에 첨가되는 완충액의 양을 측정하기 위한 저울 시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 완충액의 양을 측정하기 위한 저울 시스템은 장력 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 완충액의 양을 측정하기 위한 저울 시스템은 압축 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 완충액의 양을 측정하기 위한 저울 시스템은 직선 막대형 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 희석 서브시스템은 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 수용하도록 구성된 용기에 결합되도록 구성된 적어도 하나의 배출구를 포함한다. 일부 양태에서, 용기는 적어도 하나의 유입구 및 적어도 하나의 배출구를 포함하는 백(bag)이다. 일부 양태에서, 희석 서브시스템은, 용기와 접촉하여 용기를 위아래로 진탕하도록 구성된 플랫폼을 포함하는 교반 시스템을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 용기와 접촉하는 플랫폼을 포함하는 제1 교반 시스템은, 세포 현탁액 또는 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액 또는 희석된 세포 현탁액의 균질성을 촉진하기 위해 용기를 위아래로 진탕하여 세포 현탁액을 교반하도록 구성된다. 일부 양태에서, 희석 서브시스템은, 용기에 접촉하여 용기에 접촉한 상태로 전후로 이동하도록 구성된 플레이트를 포함하는 제1 교반 시스템을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 희석 서브시스템은 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액 및 희석된 세포 현탁액을 비추도록 구성된 조명 시스템을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 희석 서브시스템은, 용기와 접촉하여 용기를 위아래로 진탕하도록 구성된 플랫폼을 포함하는 제2 교반 시스템을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 제2 교반 시스템은 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액 또는 희석된 세포 현탁액의 균질성을 촉진하기 위해 용기를 위아래로 진탕시켜 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액 또는 희석된 세포 현탁액을 교반하도록 구성된다. 일부 양태에서, 희석 서브시스템은, 용기에 접촉하여 용기에 접촉한 상태로 전후로 이동하도록 구성된 플레이트를 포함하는 제2 교반 시스템을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 희석 서브시스템은 유체 연결된 서브시스템들 간에 유체를 이동시키도록 구성된 적어도 하나의 펌프를 포함한다.
일부 양태에서, 인큐베이션 서브시스템은 희석된 세포 현탁액의 온도를 조절하도록 구성된 온도 조절 장치를 포함한다. 일부 양태에서, 온도 조절 장치는 가열식 플레이트이다. 일부 양태에서, 인큐베이션 서브시스템은 희석된 세포 현탁액의 세포에 추가되는 완충액의 양을 측정하도록 구성된 저울 시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 저울 시스템은 장력 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 저울 시스템은 압축 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 저울 시스템은 직선 막대형 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 인큐베이션 서브시스템은, 용기와 접촉하여 용기를 위아래로 진탕하도록 구성된 플랫폼을 포함하는 제1 교반 시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 용기와 접촉하는 플랫폼을 포함하는 제1 교반 시스템은, 희석된 세포 현탁액 또는 인큐베이션된 세포 현탁액의 균질성을 촉진하기 위해 용기를 위아래로 진탕하여 희석된 세포 현탁액을 교반하도록 구성된다. 일부 양태에서, 인큐베이션 서브시스템은, 용기와 접촉하여 용기를 위아래로 진탕하도록 구성된 플랫폼을 포함하는 제2 교반 시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 용기와 접촉하는 플랫폼을 포함하는 제1 교반 시스템은, 희석된 세포 현탁액 또는 인큐베이션된 세포 현탁액의 균질성을 촉진하기 위해 용기를 위아래로 진탕하여 세포 현탁액을 교반하도록 구성된다. 일부 양태에서, 인큐베이션 서브시스템은 유체 연결된 서브시스템들 간에 유체를 이동시키도록 구성된 적어도 하나의 펌프를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 세척 서브시스템은 완충액 교환 작업을 수행하도록 구성된 접선 유동 여과 시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 세포 세척 서브시스템은 완충액 교환 작업 도중 세포에 첨가되는 완충액의 양을 측정하도록 구성된 저울 시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 저울 시스템은 장력 로드 셀이다. 일부 양태에서, 저울 시스템은 압축 로드 셀이다. 일부 양태에서, 저울 시스템은 직선 막대형 로드 셀이다. 일부 양태에서, 세포 세척 서브시스템은 용기에 결합되도록 구성된 적어도 하나의 배출구를 포함한다. 일부 양태에서, 용기는 적어도 하나의 유입구 및 적어도 하나의 배출구를 포함하는 백(bag)이다. 일부 양태에서, 세포 세척 서브시스템은, 용기와 접촉하여 용기를 위아래로 진탕하도록 구성된 플랫폼을 포함하는 교반 시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 용기와 접촉하는 플랫폼을 포함하는 교반 시스템은, 희석된 세포 현탁액 또는 보존 배지에 현탁된 세포의 균질성을 촉진하기 위해 용기를 위아래로 진탕하여 인큐베이션된 세포 현탁액 또는 보존 배지에 현탁된 세포를 교반하도록 구성된다. 일부 양태에서, 세포 세척 서브시스템은 희석된 세포 현탁액 또는 보존 배지에 현탁된 세포를 비추도록 구성된 조명 시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 보존 배지는 동결보호 배지이다. 일부 양태에서, 용기 충진 서브시스템은 하나 이상의 용기에 첨가되는 보존 배지에 현탁된 세포의 양을 측정하도록 구성된 저울 시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 저울 시스템은 장력 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 저울 시스템은 압축 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 저울 시스템은 직선 막대형 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 용기 충진 서브시스템은, 용기와 접촉하여 용기를 위아래로 진탕하도록 구성된 플랫폼을 포함하는 교반 시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 용기와 접촉하는 플랫폼을 포함하는 교반 시스템은, 하나 이상의 용기 내의 보존 배지에 현탁된 세포의 균질성을 촉진하기 위해 용기를 위아래로 진탕하여 보존 배지에 현탁된 세포를 교반하도록 구성된다. 일부 양태에서, 용기 충진 서브시스템은 하나 이상의 용기 내의 보존 배지에 현탁된 세포를 비추도록 구성된 조명 시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 용기 충진 서브시스템은 하나 이상의 용기에 결합되도록 구성된 하나 이상의 배출구를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 세척 서브시스템의 하나 이상의 용기는 적어도 하나의 유입구 및 적어도 하나의 배출구를 포함하는 하나 이상의 백을 포함한다. 일부 양태에서, 용기 충진 서브시스템은 서브시스템 내에서 또는 유체 연결된 서브시스템들 간에 유체를 이동시키도록 구성된 적어도 하나의 펌프를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 시스템은 서브시스템 중 2개 이상 간에 유체를 펌핑하도록 구성된 하나 이상의 펌프를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 시스템은 비-멸균 환경에서 사용된다. 일부 양태에서, 상기 시스템은 세포를 가공하기 위한 자동 시스템이다. 일부 양태에서, 상기 시스템은 세포 기반 치료제와 같은 세포 치료제용 세포를 가공한다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 다음 중 하나 이상을 추가로 포함한다: 세포 응집물 필터, 백혈구 제거 필터, 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 샘플링 벌브, 카보이(carboy), 및 공기 필터. 일부 양태에서, 세포 변형 서브시스템은 다음 중 하나 이상을 추가로 포함한다: 강성 샘플 용기, 세포 응집물 필터, 강성 제제 용기, 하나 이상의 미세유체 칩 카트리지, 하나 이상의 미세유체 칩, 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 공기 필터, 및 배럴 필터. 일부 양태에서, 희석 서브시스템은 다음 중 하나 이상을 추가로 포함한다: 세포 응집물 필터, 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 샘플링 벌브, 및 카보이. 일부 양태에서, 인큐베이션 서브시스템은 다음 중 하나 이상을 추가로 포함한다: 세포 응집물 필터, 배관, 배관 이음부, 커넥터, 및 클램프. 일부 양태에서, 세포 세척 서브시스템은 다음 중 하나 이상을 추가로 포함한다: 세포 응집물 필터, 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 샘플링 벌브, 공기 필터, 및 카보이. 일부 양태에서, 용기 충진 서브시스템은 다음 중 하나 이상을 추가로 포함한다: 세포 응집물 필터, 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 및 샘플링 벌브.
또한, 본 개시는 일반적으로 세포를 가공하기 위한 방법에 관한 것으로서, 상기 방법은 현탁액 제조 서브시스템, 세포 변형 서브시스템, 희석 서브시스템, 인큐베이션 서브시스템, 세포 세척 서브시스템, 및 용기 충진 서브시스템 중 하나 이상을 포함하는 시스템에 의해 수행되고, 상기 방법은: i. 현탁액 제조 서브시스템에서: (1) 용기로부터 세포를 수용하는 단계; (2) 세포에 대한 세포 단리 작업을 수행하여 단리된 세포를 생산하는 단계; (3) 전달 배지 유입구를 통해 전달 배지를 수용하는 단계; (4) 단리된 세포를 전달 배지에 현탁하여 세포 현탁액을 생산함으로써 세포 현탁액을 생산하는 단계; ii. 세포 변형 서브시스템에서: (1) 현탁액 제조 서브시스템으로부터 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계; (2) 세포의 세포막에 섭동을 유발하여 페이로드를 세포 내로 진입시켜, 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 생산하도록 구성된 하나 이상의 세포 변형 협착부를 통해 세포 현탁액을 유동시키는 단계; iii. 희석 서브시스템에서: (1) 세포-변형 서브시스템으로부터 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계; (2) 완충제 유입구를 통해 유체 시약 또는 건조 시약을 수용하는 단계; 및 (3) 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 유체 시약 또는 건조 시약과 혼합하여 희석된 세포 현탁액을 생산하는 단계; iv. 인큐베이션 서브시스템에서: (1) 희석 서브시스템으로부터 희석된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계; 및 (2) 희석된 세포 현탁액의 온도를 조절하여, 인큐베이션된 세포 현탁액을 생산하는 단계; v. 세포 세척 서브시스템에서: (1) 인큐베이션 서브시스템으로부터 인큐베이션된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계; (2) 세포에 대한 완충액 교환 작업을 수행하여 세포를 보존 배지에 현탁하는 단계; 및 vi. 용기 충진 서브시스템에서: (1) 세포 세척 서브시스템으로부터 보존 배지에 현탁된 세포의 흐름을 수용하는 단계; 및 (2) 보존 배지에 현탁된 세포를 하나 이상의 용기 내로 도입하는 단계를 포함한다.
일부 양태에서, 세포는 적혈구(RBC)를 포함한다. 일부 양태에서, 세포는 RBC-유래 소포, 예를 들어 활성화 항원 담체(AAC), 내약성 유발 항원 담체(TAC)를 포함한다. 일부 양태에서, 세포는 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)를 포함한다. 일부 양태에서, 세포는 활성화 항원 담체(APC)를 포함한다. 일부 양태에서, 세포는 T 세포, B 세포, 수지상 세포, 단핵구, 대식세포, 호산구, 호염기구, 자연 살해(NK) 세포, 자연 살해 T(NKT) 세포, 비만 세포, 또는 호중구를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 방법은 혈장을 제거한다. 일부 양태에서, 상기 방법은 혈청을 제거한다. 일부 양태에서, 상기 방법은 약 5 내지 약 7시간 이내에 수행이 완료된다. 일부 양태에서, 상기 방법은 세포 기반 치료제와 같은 세포 치료제를 생산한다. 일부 양태에서, 페이로드는 하나 이상의 재프로그래밍 인자를 포함한다. 일부 양태에서, 페이로드는 하나 이상의 핵산을 포함한다. 일부 양태에서, 페이로드는 하나 이상의 분화 인자를 포함한다. 일부 양태에서, 페이로드는 하나 이상의 뉴런 재프로그래밍 인자를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 방법은 세포를 가공하기 위한 자동 방법이다. 일부 양태에서, 상기 방법은 비-멸균 환경에서 멸균 시스템에 의해 수행된다.
또한, 본 개시는 일반적으로 세포를 가공하기 위한 시스템에 사용하기 위한 키트에 관한 것으로, 상기 키트는 다음 중 하나 이상을 포함한다: i. 상기 시스템의 현탁액 제조 서브시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있도록 구성된 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소를 포함하는 제1 키트로서, 제1 세트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소는 (1) 세포 단리 장치; 및/또는 (2) 세포 현탁 장치를 포함하는, 제1 키트; ii. 상기 시스템의 세포-변형 서브시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있도록 구성된 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소를 포함하는 제2 키트로서, 제2 세트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소는, 세포 막에 섭동을 야기하도록 세포가 가압될 수 있는 하나 이상의 세포 변형 협착부를 포함하는 하나 이상의 미세 유체 칩을 포함하는, 제2 키트; iii. 상기 시스템의 희석 서브시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있도록 구성된 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성 요소를 포함하는 제3 키트로서, 제3 세트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소는 적어도 하나의 세포 응집물 필터를 포함하는, 제3 키트; iv. 상기 시스템의 인큐베이션 서브시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있도록 구성된 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소를 포함하는 제4 키트로서, 제4 세트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소는 적어도 하나의 세포 응집물 필터를 포함하는, 제4 키트; v. 상기 시스템의 세포 세척 서브시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있도록 구성된 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소를 포함하는 제5 키트로서, 제5 세트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소는 제2 접선 유동 여과 막 어셈블리를 포함하는, 제5 키트; 및 vi. 상기 시스템의 용기 충진 서브시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있도록 구성된 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소를 포함하는 제6 키트로서, 제6 세트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소는 적어도 하나의 세포 응집물 필터를 포함하는, 제6 키트.
일부 양태에서, 키트 중 하나 이상의 구성요소 중 하나 이상은 상기 시스템의 상응하는 서브시스템의 하나 이상의 구성요소에 유체 연결되도록 구성된다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치는 적어도 하나의 용출 장치를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치는 적어도 하나의 백혈구 제거 필터를 포함한다. 일부 양태에서, 제1 키트는 세포 단리 장치를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 현탁 장치는 접선 유동 여과 막 어셈블리이다. 일부 양태에서, i. 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소들의 제2 키트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상은 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제1 키트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상에 유체 연결되도록 구성되고; ii. 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제3 키트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상은 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제2 키트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상에 유체 연결되도록 구성되고; iii. 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제4 키트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상은 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제3 키트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상에 유체 연결되도록 구성되고; iv. 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제5 키트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상은 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제4 키트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상에 유체 연결되도록 구성되고/되거나; v. 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제6 키트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상은 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제5 키트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상에 유체 연결되도록 구성된다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제1 키트는 세포 응집물 필터를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제1 키트는 백혈구 제거 필터를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제1 키트는 용기를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제1 키트는 접선 유동 여과 필터 어셈블리를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제1 키트는 다음 중 하나 이상을 포함한다: 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 샘플링 벌브, 카보이, 공기 필터, 및 접선 유동 여과 필터 어셈블리. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제2 키트는 강성 샘플 용기를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제2 키트는 세포 응집물 필터를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제2 키트는 제제 용기를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제2 키트는 하나 이상의 미세 유체 칩을 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제2 키트는 하나 이상의 미세 유체 칩 카트리지를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제2 키트는 다음 중 하나 이상을 포함한다: 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 용기, 백, 공기 필터, 및 배럴 필터. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제3 키트는 용기를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제3 키트는 세포 응집물 필터를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제3 키트는 다음 중 하나 이상을 포함한다: 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 샘플링 벌브, 및 카보이. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제4 키트는 세포 응집물 필터를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제4 키트는 하나 이상의 용기를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제4 키트는 다음 중 하나 이상을 포함한다: 배관, 배관 이음부, 커넥터, 및 클램프. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제5 키트는 세포 응집물 필터를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제5 키트는 용기를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제5 키트는 접선 유동 여과 필터 어셈블리를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제5 키트는 다음 중 하나 이상을 포함한다: 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 샘플링 벌브, 공기 필터, 및 카보이. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제6 키트는 용기를 포함한다. 일부 양태에서, 용기는 동결 보존 백이다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제6 키트는 세포 응집물 필터를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제6 키트는 다음 중 하나 이상을 포함한다: 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 및 샘플링 벌브. 일부 양태에서, 키트는 제1, 제2, 제3, 제4, 제5, 및 제6 키트를 포함한다. 일부 양태에서, 키트는 아코디언 트레이 패키지로 포장된다. 일부 양태에서, 키트는 말 수 있는 시트로서 포장된다. 일부 양태에서, 각각의 키트는 별도로 포장된다. 일부 양태에서, 적어도 2개의 키트가 함께 포장된다. 일부 양태에서, 키트는 멸균 상태이다.
또한, 본 개시는 일반적으로 세포를 가공하기 위한 시스템에 관한 것으로, 상기 시스템은: 다음을 포함하는 현탁액 제조 서브시스템: 세포 단리 장치; 접선 유동 여과 막 어셈블리; 세포 응집물 필터; 백혈구 제거 필터; 및 하나 이상의 용기; 현탁액 제조 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 세포 변형 서브시스템: 하나 이상의 미세 유체 칩; 강성 샘플 용기, 세포 응집물 필터; 세포 변형 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 희석 서브시스템: 용기, 세포 응집물 필터; 희석 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 인큐베이션 서브시스템: 세포 응집물 필터; 용기; 인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 세포 세척 서브시스템: 접선 유동 여과 막 어셈블리; 세포 응집물 필터; 용기; 및 인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하고 다음을 포함하는 용기 충진 서브시스템: 용기, 세포 응집물 필터를 포함하되, 서브시스템 i~vi는 상기 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합된다.
또한, 본 개시는 일반적으로 세포를 가공하기 위한 시스템에 관한 것으로, 상기 시스템은: 다음을 포함하는 현탁액 제조 서브시스템: 전달 배지 유입구; 세포를 단리하도록 구성된 세포 단리 장치; 단리된 세포를 전달 배지에 현탁하여 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 세포 현탁 장치; 세포 현탁액 제조 서브 시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 페이로드 진입 서브시스템: 세포 현탁액 유입구; 세포의 세포막에서 섭동을 일으켜 페이로드를 세포 내로 진입시키는 페이로드 진입 구성요소; 세포 변형 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 희석 서브시스템: 세포 현탁액 유입구; 완충액 유입구; 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액 및 완충액을 수용하여, 완충액을 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액과 혼합하여 희석된 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 용기; 희석 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 인큐베이션 서브시스템: 희석된 세포 현탁액 유입구; 희석된 세포 현탁액을 수용하도록 구성된 용기; 및 용기 내의 희석된 세포 현탁액의 온도롤 조절하여 인큐베이션된 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 플레이트; 인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 세포 세척 서브시스템: 인큐베이션된 세포 현탁액 유입구; 보존 배지 유입구; 인큐베이션된 세포 현탁액 및 보존 배지를 수용하도록 구성된 용기로서, 보존 배지를 인큐베이션된 세포 현탁액과 용기 내에서 혼합하여 세포를 보존 배지에 현탁하도록 구성된 용기; 인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 용기 충진 서브시스템: 보존 배지에 현탁된 세포를 수용하도록 구성된 유입구; 보존 배지에 현탁된 세포를 수용하도록 구성된 하나 이상의 용기; 및 보존 배지에 현탁된 세포를 하나 이상의 용기 내로 펌핑하도록 구성된 하나 이상의 펌프를 포함하며; 여기서 서브시스템 i~vi는 프레임에 분리 가능하게 결합된다. 일부 양태에서, 페이로드 진입 구성요소는 전기천공 장치를 포함한다. 일부 양태에서, 페이로드 진입 구성요소는, 세포 현탁액이 흐르는 하나 이상의 세포 변형 협착부를 포함하며, 이러한 세포 변형 협착부는 세포의 세포 막에 섭동을 일으켜 페이로드를 세포 내로 진입시키도록 구성된다.
또한, 본 개시는 일반적으로 세포를 가공하기 위한 시스템에 관한 것으로, 상기 시스템은: 현탁액 제조 서브시스템; 현탁액 제조 서브시스템과 유체 연통하는 세포 변형 서브시스템; 세포 변형 서브시스템과 유체 연통하는 희석 서브시스템; 희석 서브시스템과 유체 연통하는 인큐베이션 서브시스템; 인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하는 세포 세척 서브시스템; 인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하는 용기 충진 서브시스템을 포함하며, 여기서 서브시스템 중 적어도 하나는 상기 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합된다.
또한, 본 개시는 일반적으로 세포를 가공하기 위한 시스템에 관한 것으로, 상기 시스템은: 현탁액 제조 서브시스템; 현탁액 제조 서브시스템과 유체 연통하는 세포 변형 서브시스템; 세포 변형 서브시스템과 유체 연통하는 온도 조절 서브시스템; 온도 조절 서브시스템과 유체 연통하는 세포 세척 서브시스템; 인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하는 용기 충진 서브시스템을 포함하며, 여기서 서브시스템 중 적어도 하나는 상기 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합된다.
또한, 본 개시는 일반적으로 세포를 가공하기 위한 시스템에 관한 것으로, 상기 시스템은: 다음을 포함하는 현탁액 제조 서브시스템: 전달 배지 유입구; 세포를 전달 배지에 현탁하여 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 세포 현탁 장치; 세포 현탁액 제조 서브 시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 세포 변형 서브시스템: 세포 현탁액 유입구; 세포의 세포막에서 섭동을 일으켜 페이로드를 세포 내로 진입시켜 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 하나 이상의 세포 변형 협착부; 세포 변형 서브시스템과 유체연통하고, 다음을 포함하는 희석 서브시스템: 세포 현탁액 유입구; 완충액 유입구; 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액 및 유체 시약 또는 건조 시약을 수용하여, 유체 시약 또는 건조 시약을 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액과 혼합하여 희석된 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 용기; 희석 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 인큐베이션 서브시스템: 희석된 세포 현탁액 유입구; 희석된 세포 현탁액을 수용하도록 구성된 용기; 및 용기 내의 희석된 세포 현탁액의 온도롤 조절하여 인큐베이션된 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 플레이트; 인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 세포 세척 서브시스템: 인큐베이션된 세포 현탁액 유입구; 보존 배지 유입구; 인큐베이션된 세포 현탁액 및 보존 배지를 수용하는 용기로서, 보존 배지를 인큐베이션된 세포 현탁액과 용기 내에서 혼합하여 세포를 보존 배지에 현탁하도록 구성된 용기; 및 인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 용기 충진 서브시스템: 보존 배지에 현탁된 세포를 수용하도록 구성된 유입구; 보존 배지에 현탁된 세포를 수용하도록 구성된 하나 이상의 용기; 및 보존 배지에 현탁된 세포를 하나 이상의 용기 내로 펌핑하도록 구성된 하나 이상의 펌프를 포함하며; 여기서 서브시스템 중 적어도 하나는 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합된다.
또한, 본 개시는 일반적으로 세포를 가공하기 위한 시스템에 관한 것으로, 상기 시스템은: 다음을 포함하는 현탁액 제조 서브시스템: 전달 배지 유입구; 세포를 단리하도록 구성된 세포 단리 장치; 단리된 세포를 전달 배지에 현탁하여 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 세포 현탁 장치; 세포 현탁액 제조 서브 시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 세포 변형 서브시스템: 세포 현탁액 유입구; 세포의 세포막에서 섭동을 일으켜 페이로드를 세포 내로 진입시켜 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 하나 이상의 세포 변형 협착부; 세포 변형 서브시스템과 유체연통하고, 다음을 포함하는 온도 조절 서브시스템: 세포 현탁액 유입구; 완충액 유입구; 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액 및 유체 시약 또는 건조 시약을 수용하여, 유체 시약 또는 건조 시약을 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액과 혼합하여 희석된 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 용기; 용기 내의 희석된 세포 현탁액의 온도롤 조절하여 인큐베이션된 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 플레이트; 온도 조절 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 세포 세척 서브시스템: 인큐베이션된 세포 현탁액 유입구; 보존 배지 유입구; 인큐베이션된 세포 현탁액 및 보존 배지를 수용하는 용기로서, 보존 배지를 인큐베이션된 세포 현탁액과 용기 내에서 혼합하여 세포를 보존 배지에 현탁하도록 구성된 용기; 및 인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 용기 충진 서브시스템: 보존 배지에 현탁된 세포를 수용하도록 구성된 유입구; 보존 배지에 현탁된 세포를 수용하도록 구성된 하나 이상의 용기; 및 보존 배지에 현탁된 세포를 하나 이상의 용기 내로 펌핑하도록 구성된 하나 이상의 펌프를 포함하며; 여기서 서브시스템 중 적어도 하나는 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합된다. 일부 양태에서, 상기 시스템은 세포를 가공하기 위한 자동 시스템이다.
또한, 본 개시는 일반적으로 세포를 자동으로 가공하기 위한 시스템에 관한 것으로, 상기 시스템은: 다음을 포함하는 현탁액 제조 서브시스템: 전달 배지 유입구; 세포를 단리하도록 구성된 세포 단리 장치; 단리된 세포를 전달 배지에 현탁하여 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 세포 현탁 장치; 세포 현탁액 제조 서브 시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 세포 변형 서브시스템: 세포 현탁액 유입구; 세포의 세포막에서 섭동을 일으켜 페이로드를 세포 내로 진입시켜 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 하나 이상의 세포 변형 협착부; 세포 변형 서브시스템과 유체연통하고, 다음을 포함하는 희석 서브시스템: 세포 현탁액 유입구; 완충액 유입구; 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액 및 유체 시약 또는 건조 시약을 수용하여, 유체 시약 또는 건조 시약을 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액과 혼합하여 희석된 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 용기; 희석 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 인큐베이션 서브시스템: 희석된 세포 현탁액 유입구; 희석된 세포 현탁액을 수용하도록 구성된 용기; 및 용기 내의 희석된 세포 현탁액의 온도롤 조절하여 인큐베이션된 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 플레이트; 인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 세포 세척 서브시스템: 인큐베이션된 세포 현탁액 유입구; 보존 배지 유입구; 인큐베이션된 세포 현탁액 및 보존 배지를 수용하는 용기로서, 보존 배지를 인큐베이션된 세포 현탁액과 용기 내에서 혼합하여 세포를 보존 배지에 현탁하도록 구성된 용기; 및 인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 용기 충진 서브시스템: 보존 배지에 현탁된 세포를 수용하도록 구성된 유입구; 보존 배지에 현탁된 세포를 수용하도록 구성된 하나 이상의 용기; 및 보존 배지에 현탁된 세포를 하나 이상의 용기 내로 펌핑하도록 구성된 하나 이상의 펌프를 포함하며; 여기서 서브시스템 중 적어도 하나는 상기 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합되고, 추가로 상기 시스템은 멸균 상태이고 비-멸균 장소에서 사용되도록 구성된다.
또한, 본 개시는 일반적으로 세포를 가공하기 위한 방법에 관한 것으로서, 상기 방법은 현탁액 제조 서브시스템, 세포 변형 서브시스템, 희석 서브시스템, 인큐베이션 서브시스템, 세포 세척 서브시스템, 및 용기 충진 서브시스템 중 하나 이상을 포함하는 시스템에 의해 수행되고, 상기 방법은: i. 현탁액 제조 서브시스템에서: (1) 세포를 수용하는 단계; (2) 세포에 대한 세포 단리 작업을 수행하여 단리된 세포를 생산하는 단계; (3) 전달 배지를 수용하는 단계; (4) 단리된 세포를 전달 배지에 현탁하여 세포 현탁액을 생산함으로써 세포 현탁액을 생산하는 단계; ii. 세포 변형 서브시스템에서: (1) 현탁액 제조 서브시스템으로부터 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계; (2) 세포의 세포막에 섭동을 유발하여 페이로드를 세포 내로 진입시켜, 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 생산하도록 구성된 하나 이상의 세포 변형 협착부를 통해 세포 현탁액을 유동시키는 단계; iii. 희석 서브시스템에서: (1) 세포-변형 서브시스템으로부터 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계; (2) 유체 시약 또는 건조 시약을 수용하는 단계; 및 (3) 세포 현탁액을 유체 시약 또는 건조 시약과 혼합하여 희석된 세포 현탁액을 생산하는 단계; iv. 인큐베이션 서브시스템에서: (1) 희석 서브시스템으로부터 희석된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계; 및 (2) 희석된 세포 현탁액의 온도를 조절하여, 인큐베이션된 세포 현탁액을 생산하는 단계; v. 세포 세척 서브시스템에서: (1) 인큐베이션 서브시스템으로부터 인큐베이션된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계; (2) 세포에 대한 완충액 교환 작업을 수행하여 세포를 보존 배지에 현탁하는 단계; 및 vi. 용기 충진 서브시스템에서: (1) 세포 세척 서브시스템으로부터 보존 배지에 현탁된 세포의 흐름을 수용하는 단계; 및 (2) 보존 배지에 현탁된 세포를 하나 이상의 용기 내로 도입하는 단계를 포함한다.
또한, 본 개시는 일반적으로 세포를 가공하기 위한 방법에 관한 것으로서, 상기 방법은 현탁액 제조 서브시스템, 세포 변형 서브시스템, 온도 조절 서브시스템 중 하나 이상을 포함하는 시스템에 의해 수행되고, 상기 방법은: i. 현탁액 제조 서브시스템에서: (1) 용기로부터 세포를 수용하는 단계; (2) 세포에 대한 세포 단리 작업을 수행하여 단리된 세포를 생산하는 단계; (3) 전달 배지 유입구를 통해 전달 배지를 수용하는 단계; (4) 단리된 세포를 전달 배지에 현탁하여 세포 현탁액을 생산함으로써 세포 현탁액을 생산하는 단계; ii. 세포 변형 서브시스템에서: (1) 현탁액 제조 서브시스템으로부터 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계; (2) 세포의 세포막에 섭동을 유발하여 페이로드를 세포 내로 진입시켜, 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 생산하도록 구성된 하나 이상의 세포 변형 협착부를 통해 세포 현탁액을 유동시키는 단계; iii. 온도 조절 서브시스템에서: (1) 세포-변형 서브시스템으로부터 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계; (2) 유입구를 통해 유체 시약 또는 건조 시약을 수용하는 단계; (3) 세포 현탁액을 유체 시약 또는 건조 시약과 혼합하여 희석된 세포 현탁액을 생산하는 단계; 및 (4) 희석된 세포 현탁액의 온도를 조절하여, 인큐베이션된 세포 현탁액을 생산하는 단계; iv. 세포 세척 서브시스템에서: (1) 온도 조절 서브시스템으로부터 인큐베이션된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계; (2) 세포에 대한 완충액 교환 작업을 수행하여 세포를 보존 배지에 현탁하는 단계; 및 v. 용기 충진 서브시스템에서: (1) 세포 세척 서브시스템으로부터 보존 배지에 현탁된 세포의 흐름을 수용하는 단계; 및 (2) 보존 배지에 현탁된 세포를 하나 이상의 용기 내로 도입하는 단계를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 방법은 세포를 가공하기 위한 자동 방법이다. 일부 양태에서, 상기 방법은 비-멸균 환경에서 멸균 시스템에 의해 수행된다.
또한, 본 개시는 일반적으로 세포를 자동으로 가공하기 위한 방법에 관한 것으로서, 상기 방법은 비멸균 환경에서 멸균 시스템에 의해 수행되고, 추가로 상기 시스템은 현탁액 제조 서브시스템, 세포 변형 서브시스템, 희석 서브시스템, 인큐베이션 서브시스템, 세포 세척 서브시스템, 및 용기 충진 서브시스템 중 하나 이상을 포함하며, 상기 방법은: i. 현탁액 제조 서브시스템에서: (1) 용기로부터 세포를 수용하는 단계; (2) 세포에 대한 세포 단리 작업을 수행하여 단리된 세포를 생산하는 단계; (3) 전달 배지 유입구를 통해 전달 배지를 수용하는 단계; (4) 단리된 세포를 전달 배지에 현탁하여 세포 현탁액을 생산함으로써 세포 현탁액을 생산하는 단계; ii. 세포 변형 서브시스템에서: (1) 현탁액 제조 서브시스템으로부터 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계; (2) 세포의 세포막에 섭동을 유발하여 페이로드를 세포 내로 진입시켜, 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 생산하도록 구성된 하나 이상의 세포 변형 협착부를 통해 세포 현탁액을 유동시키는 단계; iii. 희석 서브시스템에서: (1) 세포-변형 서브시스템으로부터 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계; (2) 완충제 유입구를 통해 유체 시약 또는 건조 시약을 수용하는 단계; 및 (3) 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 유체 시약 또는 건조 시약과 혼합하여 희석된 세포 현탁액을 생산하는 단계; iv. 인큐베이션 서브시스템에서: (1) 희석 서브시스템으로부터 희석된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계; 및 (2) 희석된 세포 현탁액의 온도를 조절하여, 인큐베이션된 세포 현탁액을 생산하는 단계; v. 세포 세척 서브시스템에서: (1) 인큐베이션 서브시스템으로부터 인큐베이션된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계; (2) 세포에 대한 완충액 교환 작업을 수행하여 세포를 보존 배지에 현탁하는 단계; 및 vi. 용기 충진 서브시스템에서: (1) 세포 세척 서브시스템으로부터 보존 배지에 현탁된 세포의 흐름을 수용하는 단계; 및 (2) 보존 배지에 현탁된 세포를 하나 이상의 용기 내로 도입하는 단계를 포함한다.
또한, 본 개시는 일반적으로 세포를 가공하기 위한 방법에 관한 것으로서, 상기 방법은 현탁액 제조 서브시스템, 세포 변형 서브시스템, 희석 서브시스템, 인큐베이션 서브시스템, 세포 세척 서브시스템, 및 용기 충진 서브시스템 중 하나 이상을 포함하는 시스템에 의해 수행되고, 상기 방법은: i. 현탁액 제조 서브시스템에서: (1) 용기로부터 세포를 수용하는 단계; (2) 전달 배지 유입구를 통해 전달 배지를 수용하는 단계; (3) 세포를 전달 배지에 현탁하여 세포 현탁액을 생산함으로써 세포 현탁액을 생산하는 단계; ii. 세포 변형 서브시스템에서: (1) 현탁액 제조 서브시스템으로부터 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계; (2) 세포의 세포막에 섭동을 유발하여 페이로드를 세포 내로 진입시켜, 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 생산하도록 구성된 하나 이상의 세포 변형 협착부를 통해 세포 현탁액을 유동시키는 단계; iii. 희석 서브시스템에서: (1) 세포-변형 서브시스템으로부터 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계; (2) 완충제 유입구를 통해 유체 시약 또는 건조 시약을 수용하는 단계; 및 (3) 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 유체 시약 또는 건조 시약과 혼합하여 희석된 세포 현탁액을 생산하는 단계; iv. 인큐베이션 서브시스템에서: (1) 희석 서브시스템으로부터 희석된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계; 및 (2) 희석된 세포 현탁액의 온도를 조절하여, 인큐베이션된 세포 현탁액을 생산하는 단계; v. 세포 세척 서브시스템에서: (1) 인큐베이션 서브시스템으로부터 인큐베이션된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계; (2) 세포에 대한 완충액 교환 작업을 수행하여 세포를 보존 배지에 현탁하는 단계; 및 vi. 용기 충진 서브시스템에서: (1) 세포 세척 서브시스템으로부터 보존 배지에 현탁된 세포의 흐름을 수용하는 단계; 및 (2) 보존 배지에 현탁된 세포를 하나 이상의 용기 내로 도입하는 단계를 포함한다.
또한, 본 개시는 일반적으로 세포를 가공하기 위한 시스템에 사용하기 위한 키트에 관한 것으로, 상기 키트는 다음 중 하나 이상을 포함한다: i. 상기 시스템의 현탁액 제조 서브시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있도록 구성된 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소를 포함하는 제1 키트로서, 제1 세트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소는 (1) 세포 단리 장치; 및/또는 (2) 세포 현탁 장치를 포함하는, 제1 키트; ii. 상기 시스템의 세포-변형 서브시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있도록 구성된 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소를 포함하는 제2 키트로서, 제2 세트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소는, 세포의 세포 막에 섭동을 야기하도록 세포가 가압될 수 있는 하나 이상의 세포 변형 협착부를 포함하는 하나 이상의 미세 유체 칩을 포함하는, 제2 키트; iii. 상기 시스템의 온도 조절 서브시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있도록 구성된 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성 요소를 포함하는 제3 키트로서, 제3 세트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소는 적어도 하나의 세포 응집물 필터를 포함하는, 제3 키트; iv. 상기 시스템의 세포 세척 서브시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있도록 구성된 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소를 포함하는 제4 키트로서, 제5 세트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소는 제2 접선 유동 여과 막 어셈블리를 포함하는, 제4 키트; 및 v. 상기 시스템의 용기 충진 서브시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있도록 구성된 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소를 포함하는 제5 키트로서, 제6 세트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소는 적어도 하나의 세포 응집물 필터를 포함하는, 제5 키트.
도 1은 현장 진료 시스템의 사용을 포함하지 않는 말초 혈액 단핵 세포("PBMC") 제조 프로세스(현재 PBMC 제조 프로세스)와 현장 진료 시스템의 사용을 포함하는 PBMC 제조 프로세스(POC 제조 프로세스)를 비교한 흐름도를 제공한다.
도 2는 일 구현예에서 세포를 가공하기 위한 현장 진료 시스템의 사용을 포함하지 않는 PBMC 가공의 개략도를 제공한다.
도 3은 일 구현예에서 현장 진료 시스템의 사용을 포함하지 않는 PBMC 제조의 개략도를 제공한다.
도 4는 일 구현예에서 현장 진료 시스템의 사용을 포함하는 세포 가공 방법과 비교하여 현장 진료 시스템의 사용을 포함하지 않는 세포 가공 방법에 대한 단위 작업 시간을 비교하는 표를 제공한다.
도 5a는 일 구현예에서 현장 진료 시스템을 포함하지 않는 세포 가공 시스템에 의해 사용되는 저장조의 개략도를 제공한다.
도 5b는 일 구현예에서 현장 진료 세포 가공 시스템의 저장조의 개략도를 제공한다.
도 6은 일 구현예에서 현장 진료 시스템의 2가지 도면의 개략도를 제공한다.
도 7은 일 구현예에서 현장 진료 시스템의 개략도를 제공한다.
도 8은 일 구현예에서 현장 진료 시스템의 개략도를 제공한다.
도 9는 일 구현예에서 현장 진료 시스템과 사용하기 위한 일회용 키트의 개략도를 제공한다.
도 10은 일 구현예에서 현장 진료 시스템의 개략도를 제공한다.
도 11은 일 구현예에서 일회용 폐기물 탱크 키트의 개략도를 제공한다.
도 12는 일 구현예에서 세포 가공을 위한 현탁액 제조 서브시스템(구역 1) 일회용 키트의 개략도를 제공한다.
도 13은 일 구현예에서 세포 가공을 위한 현탁액 제조 서브시스템(구역 1) 일회용 키트의 개략도를 제공한다.
도 14는 일 구현예에서 세포 변형 서브시스템(구역 2) 일회용 키트의 개략도를 제공한다.
도 15는 일 구현예에서 희석 서브시스템(구역 3) 일회용 키트의 개략도를 제공한다.
도 16은 일 구현예에서 인큐베이션 서브시스템(구역 4) 일회용 키트의 개략도를 제공한다.
도 17은 일 구현예에서 세포 세척 서브시스템(구역 5) 일회용 키트의 개략도를 제공한다.
도 18은 일 구현예에서 용기 충진 서브시스템(구역 6) 일회용 키트의 개략도를 제공한다.
도 19는 일 구현예에서 현장 진료 시스템과 사용하기 위한 가열식 플레이트의 이미지를 제공한다.
도 20은 일 구현예에서 백의 개략도를 제공한다.
도 21은 일 구현예에서 현장 진료 시스템과 사용하기 위한 백 충진 및 칭량 스테이션의 이미지를 제공한다.
도 22는 일 구현예에서 현장 진료 시스템용 일회용 키트의 아코디온 트레이 설치의 개략도를 제공한다.
도 23은 일 구현예에서 현장 진료 시스템용 일회용 키트의 샤워 커튼 설치의 개략도를 제공한다.
도 24a는 일 구현예에서 현장 진료 시스템과 함께 사용하기 위한 직접 열전 냉각기(TEC) 액체 냉각 시스템의 개략도를 제공한다.
도 24b는 일 구현예에서 현장 진료 시스템과 함께 사용하기 위한 TEC 액체 냉각 시스템의 개략도를 제공한다.
도 25는 일 구현예에서 현장 진료 시스템과 사용하기 위한 교반 시스템의 개략도를 제공한다.
도 26은 일 구현예에서 현장 진료 시스템 PBMC 프로세스 흐름의 개략도를 제공한다.
도 27은 일 구현예에서 PBMC를 위한 현탁액 제조 서브시스템(구역 1) 프로세스 흐름의 개략도를 제공한다.
도 28은 일 구현예에서 RBC를 위한 현탁액 제조 서브시스템(구역 1) 프로세스 흐름의 개략도를 제공한다.
도 29는 일 구현예에서 PBMC를 위한 세포 변형 서브시스템(구역 2) 및 희석 서브시스템(구역 3) 프로세스 흐름의 개략도를 제공한다.
도 30은 일 구현예에서 RBC를 위한 세포 변형 서브시스템(구역 2) 및 희석 서브시스템(구역 3) 프로세스 흐름의 개략도를 제공한다.
도 31은 일 구현예에서 PBMC 및 RBC를 위한 인큐베이션 서브시스템(구역 4), 세포 세척 서브시스템(구역 5), 및 용기 충진 서브시스템(구역 6)의 프로세스 흐름의 개략도를 제공한다.
도 32는 일 구현예에서 현장 진료 시스템과 사용하기 위한 압력 무결성 시험의 개략도를 제공한다.
도 33은 일 구현예에서 현장 진료 시스템의 완충액 프라이밍 섹터의 개략도를 제공한다.
도 34는 일 구현예에서 세포 변형 프로세스의 개략도를 제공한다.
도 35는 일 구현예에서 현장 진료 시스템 RBC 프로세스 흐름의 개략도를 제공한다.
도 2는 일 구현예에서 세포를 가공하기 위한 현장 진료 시스템의 사용을 포함하지 않는 PBMC 가공의 개략도를 제공한다.
도 3은 일 구현예에서 현장 진료 시스템의 사용을 포함하지 않는 PBMC 제조의 개략도를 제공한다.
도 4는 일 구현예에서 현장 진료 시스템의 사용을 포함하는 세포 가공 방법과 비교하여 현장 진료 시스템의 사용을 포함하지 않는 세포 가공 방법에 대한 단위 작업 시간을 비교하는 표를 제공한다.
도 5a는 일 구현예에서 현장 진료 시스템을 포함하지 않는 세포 가공 시스템에 의해 사용되는 저장조의 개략도를 제공한다.
도 5b는 일 구현예에서 현장 진료 세포 가공 시스템의 저장조의 개략도를 제공한다.
도 6은 일 구현예에서 현장 진료 시스템의 2가지 도면의 개략도를 제공한다.
도 7은 일 구현예에서 현장 진료 시스템의 개략도를 제공한다.
도 8은 일 구현예에서 현장 진료 시스템의 개략도를 제공한다.
도 9는 일 구현예에서 현장 진료 시스템과 사용하기 위한 일회용 키트의 개략도를 제공한다.
도 10은 일 구현예에서 현장 진료 시스템의 개략도를 제공한다.
도 11은 일 구현예에서 일회용 폐기물 탱크 키트의 개략도를 제공한다.
도 12는 일 구현예에서 세포 가공을 위한 현탁액 제조 서브시스템(구역 1) 일회용 키트의 개략도를 제공한다.
도 13은 일 구현예에서 세포 가공을 위한 현탁액 제조 서브시스템(구역 1) 일회용 키트의 개략도를 제공한다.
도 14는 일 구현예에서 세포 변형 서브시스템(구역 2) 일회용 키트의 개략도를 제공한다.
도 15는 일 구현예에서 희석 서브시스템(구역 3) 일회용 키트의 개략도를 제공한다.
도 16은 일 구현예에서 인큐베이션 서브시스템(구역 4) 일회용 키트의 개략도를 제공한다.
도 17은 일 구현예에서 세포 세척 서브시스템(구역 5) 일회용 키트의 개략도를 제공한다.
도 18은 일 구현예에서 용기 충진 서브시스템(구역 6) 일회용 키트의 개략도를 제공한다.
도 19는 일 구현예에서 현장 진료 시스템과 사용하기 위한 가열식 플레이트의 이미지를 제공한다.
도 20은 일 구현예에서 백의 개략도를 제공한다.
도 21은 일 구현예에서 현장 진료 시스템과 사용하기 위한 백 충진 및 칭량 스테이션의 이미지를 제공한다.
도 22는 일 구현예에서 현장 진료 시스템용 일회용 키트의 아코디온 트레이 설치의 개략도를 제공한다.
도 23은 일 구현예에서 현장 진료 시스템용 일회용 키트의 샤워 커튼 설치의 개략도를 제공한다.
도 24a는 일 구현예에서 현장 진료 시스템과 함께 사용하기 위한 직접 열전 냉각기(TEC) 액체 냉각 시스템의 개략도를 제공한다.
도 24b는 일 구현예에서 현장 진료 시스템과 함께 사용하기 위한 TEC 액체 냉각 시스템의 개략도를 제공한다.
도 25는 일 구현예에서 현장 진료 시스템과 사용하기 위한 교반 시스템의 개략도를 제공한다.
도 26은 일 구현예에서 현장 진료 시스템 PBMC 프로세스 흐름의 개략도를 제공한다.
도 27은 일 구현예에서 PBMC를 위한 현탁액 제조 서브시스템(구역 1) 프로세스 흐름의 개략도를 제공한다.
도 28은 일 구현예에서 RBC를 위한 현탁액 제조 서브시스템(구역 1) 프로세스 흐름의 개략도를 제공한다.
도 29는 일 구현예에서 PBMC를 위한 세포 변형 서브시스템(구역 2) 및 희석 서브시스템(구역 3) 프로세스 흐름의 개략도를 제공한다.
도 30은 일 구현예에서 RBC를 위한 세포 변형 서브시스템(구역 2) 및 희석 서브시스템(구역 3) 프로세스 흐름의 개략도를 제공한다.
도 31은 일 구현예에서 PBMC 및 RBC를 위한 인큐베이션 서브시스템(구역 4), 세포 세척 서브시스템(구역 5), 및 용기 충진 서브시스템(구역 6)의 프로세스 흐름의 개략도를 제공한다.
도 32는 일 구현예에서 현장 진료 시스템과 사용하기 위한 압력 무결성 시험의 개략도를 제공한다.
도 33은 일 구현예에서 현장 진료 시스템의 완충액 프라이밍 섹터의 개략도를 제공한다.
도 34는 일 구현예에서 세포 변형 프로세스의 개략도를 제공한다.
도 35는 일 구현예에서 현장 진료 시스템 RBC 프로세스 흐름의 개략도를 제공한다.
1.
세포를 가공하기 위한 시스템
a. 배경
위에서 논의된 바와 같이, 세포를 가공하기 위한 다른 시스템 및 방법은 원하는 세포 치료제를 생산하는 데 수일 내지 수주가 걸릴 수 있다. 또한, 다른 제조 프로세스들은 일반적으로 다수의 상이한 기기의 사용을 수반하는데, 이들 각각은 고유한 설정과 세정을 필요로 하여, 최종 완제의약품을 생산하는 데 상당한 시간이 추가된다. 또한, 세포 치료제를 생산하기 위한 다른 방법들은 다수의 상이한 기기와 멸균 환경을 필요로 하기 때문에, 제조 프로세스를 수행하기 위해서는 큰 물리적 공간(즉 다수의 클린룸)이 요구된다. 예를 들어, 도 1은 PBMC가 가공되는 세포 가공 제조 프로세스로서, 현장 진료 시스템의 사용을 포함하지 않는 프로세스의 흐름도를 제공한다. 현장 진료 시스템의 사용을 포함하지 않는 PBMC 프로세스는 14개의 별도 단계를 포함하며(도 1, 현재 PBMC 제조 프로세스, 1~14 참조), 이들 각각은 특수한 장비와 물질을 필요로 한다. 비교에 의해서 및 본원에서 추가로 논의된 바와 같이, 본원에 기술된 것과 같은 세포를 가공하기 위한 현장 진료 시스템은 현장 진료 제조 프로세스의 일부로서 사용될 수 있으며, 상기 프로세스는 4개의 단계(도 1, POC 제조 프로세스, 1~4 참조)를 포함하고, 추가로 이들 단계는 본원에 기술된 것과 같은 단일 현장 진료 시스템을 사용해 수행된다.
위에서 논의된 바와 같이, 전반적인 프로세스 효율은 현재 이용 가능한 기존 기술(off-the-shelf technology), 및 세포를 가공하는 데 사용되는 기존 기술의 수에 의해 제약된다. 예를 들어, 도 2 내지 도 3을 참조하면, 현장 진료 시스템의 사용을 포함하지 않는 세포를 가공하기 위한 방법이 제시되며, 상기 프로세스는 기존 기술 구성요소의 사용을 포함한다. 도 2에 제시된 것과 같이, 다음을 포함하는 다수의 장비가 프로세스의 작업을 수행하는 데 사용된다: (1) 주어진 단계를 위해 유체를 펌핑하기 위한 연동 펌프; (2) 세포 세척 및 완충액 교환 작업을 수행하기 위한 LOVO 장치와 같은 장치; (3) 세포 단리를 수행하기 위한 용출 장치와 같은 세포 단리 장치; (4) 세포 변형 프로세스를 수행하기 위한 미세 유체 칩 및 카트리지; 및 (5) 진탕 인큐베이터와 냉동고와 같은 온도 조절 장치. 예를 들어, 도 2에 제시된 것과 같은, 현장 진료 시스템의 사용을 포함하지 않는 세포를 가공하기 위한 시스템 및 방법의 14개 단계 각각을 진행하는 동안 다음 구성요소가 사용된다: 단계 1에서, LeukoPak 입수와 같은, 샘플을 포함하는 용기; 단계 2에서, 혈액 희석용 장치; 단계 3에서, 용출 장치와 같은 PBMC 정제 장치; 단계 4에서, 사전-기계천공(pre-mechanoporation)을 위한 LOVO 장치; 단계 5에서, 기계천공 시스템과 같은 세포 변형 시스템; 단계 6에서, CpG 첨가용 장치; 단계 7에서, 생성물 여과용 장치; 단계 8에서, 진탕 인큐베이션용 장치; 단계 9에서, 제2 생성물 여과 장치; 단계 10에서, 사전 동결보존 작업용 LOVO 장치; 단계 11에서, 제3 생성물 여과 장치; 단계 12에서, 바이알 또는 용기 충진 장치; 단계 13에서, 속도 조절식 냉동고; 및 단계 14에서, 보관부, 예컨대 동결보존 탱크 내 보관부.
또한, 도 3에 제시된 것과 같이, 현장 진료 시스템의 사용을 포함하지 않는 세포를 가공하기 위한 시스템은, 14단계의 프로세스를 진행되는 동안 다음과 같은 다수의 숨겨진 작업을 포함한다: 인프로세스 멸균 밀봉/용접(도 3에 별표로 표시됨); 인프로세스 세포 계수(도 3에 사각형으로 표시됨); 및 인프로세스 칭량(도 3에 원으로 표시됨). 예를 들어, 세포 계수와 칭량은 몇 개의 장비를 위한 입력 파라미터로서 요구되는데, 각각의 세포 계수를 수행하는 데 최대 30분이 걸릴 수 있다. 또한, 도 2 및 도 3에 제시된 14단계 프로세스의 각 단계는 상당한 시간을 투자하여 문서화해야 하고, 서명을 해야하고, 누군가의 증언이 있어야 한다. 또한, 다수의 기기에는 각 제조 런 동안에만 조립될 수 있는 특수한 일회용 키트를 사용해야 한다. 또한, 도 5a에 제시된 것과 같이, 본원에 기술된 것과 같은 세포 가공용 시스템을 사용하여 세포를 가공하는 데 단 6개 또는 그 이하의 저장조가 필요한 것과 비교했을 때(도 5b 참조), 도 2 또는 도 3의 프로세스를 사용하여 세포를 가공하는 것은 12개 이상의 저장조를 필요로 할 수 있다.
또한, 도 2 또는 도 3의 프로세스를 사용하여 세포를 가공하는 것은 제조에만 적어도 15~18시간이 소요될 수 있다. 예를 들어, 도 4는 도 2 및 도 3에 제시된 것과 같은 현장 진료 시스템의 사용을 포함하지 않는 세포 제조 프로세스에서 각 단계를 완료하는 데 소요되는 평균 시간을 제시한다. 비교를 위해, 본원에 기술된 것과 같은 세포를 가공하기 위한 시스템을 사용할 때, 각각의 상응하는 단계에 대한 시간도 도 4에 제시되어 있다. 도 4에 제시된 것과 같이, 본원에 기술된 것과 같은 세포를 가공하기 위한 현장 진료 시스템의 사용은 현장 진료 시스템의 사용을 포함하지 않는 세포 제조 프로세스에 비해 더 적은 시간에 세포를 가공하는 데 사용될 수 있다. 예를 들어, 현장 진료 시스템의 사용을 포함하지 않는 제조 프로세스는 약 15시간 20분일 수 있는 반면, 본원에 기술된 것과 같은 세포를 가공하기 위한 시스템을 사용하여 세포를 제조하는 것은 약 7시간일 수 있는데, 이는 세포를 제조하기 위한 현재의 프로세스와 비교했을 때 상당한 시간 절약이다.
b. 현장 진료 시스템
이와 같이, 본 개시는 일반적으로 세포를 가공하기 위한 시스템 및 방법, 및 이러한 시스템 및 방법과 함께 사용하기 위한 키트에 관한 것이다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 다음을 포함할 수 있다: 다음을 포함하는 현탁액 제조 서브시스템(구역 1): 전달 배지 유입구; 세포를 단리하도록 구성된 세포 단리 장치(때로는 세포 분리 장치로서 지칭됨); 단리된 세포를 전달 배지에 현탁하여 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 세포 현탁 장치. 일부 양태에서, 구역 1의 전달 배지 유입구는 전달 배지와 같은 임의의 유형의 유체를 시스템 내에 도입하는 데 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 전달 배지는 전달 배지에 현탁될 양립할 수 있는 임의의 완충액 또는 유체일 수 있다. 일부 양태에서, 구역 1은 세포 단리 장치를 생략할 수 있다. 일부 양태에서, 구역 1은 다음과 같은 하나 이상의 추가 유입구를 포함할 수 있다: 샘플을 구역 1 내로 도입하기 위한 추가 유입구; 완충액을 구역 1 내로 도입하기 위한 유입구; RPMI 또는 PBS와 같은 세척 배지를 구역 1 내로 도입하기 위한 유입구; 희석 배지를 구역 1 내로 도입하기 위한 유입구; 및/또는 항원을 구역 1 내로 도입하기 위한 유입구. 일부 양태에서, 구역 1과 유체 연통하는 유입구는 구역 2와도 유체 연통할 수 있다. 일부 양태에서, 구역 1의 유입구 중 어느 하나를 통해 시스템 내로 도입된 유체는, 유체가 원하는 온도에서 시스템 내로 도입되도록 온도가 조절될 수 있다. 일부 양태에서, 구역 1 내로 도입되는 세포는, 예컨대 구역 1의 세포 단리 장치의 사용에 의해, 원하지 않는 세포 유형 및 응집물로부터 단리될 수 있다. 일부 양태에서, 구역 1 내로 도입되는 세포는, 예컨대 구역 1의 세포 현탁 장치의 사용에 의해 전달 배지 내로 완충액 교환될 수 있다. 일부 양태에서, 세포 현탁 장치는 하나 이상의 접선 유동 여과(TFF) 어셈블리를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 현탁 장치는 십자류 칩에 의한 하나 이상의 초음파 정재파를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 현탁 장치는 하나 이상의 겔 여과 크로마토그래피 장치를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 현탁 장치는 하나 이상의 원심 분리 세척 장치를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 현탁 장치는 하나 이상의 결정적 측방향 변위(DLD) 칩을 포함한다. 일부 양태에서, 세포 현탁 장치는 하나 이상의 원심분리 장치 및 가요성 다이아프램 장치를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치는 하나 이상의 백혈구 제거 필터를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치는 하나 이상의 나선형 관성 분리(SIS) 장치를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치는 하나 이상의 미세 유체 칩을 포함한다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치는 하나 이상의 결정적 측방향 변위(DLD) 칩을 포함한다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치는 하나 이상의 용출 장치를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치는 하나 이상의 유체역학적 미세 유체 분리 칩을 포함한다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치는 하나 이상의 면역자성 세포 단리 장치를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치는 하나 이상의 음향 세포 가공 장치를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치는 하나 이상의 형광 활성화 세포 분류(FACS) 장치를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치는 하나 이상의 미세 유체 원심분리기 조합 칩을 포함한다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치는 하나 이상의 TFF 필터 어셈블리를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치는 하나 이상의 유전영동(DEP) 칩을 포함한다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치는 하나 이상의 마이크로여과 칩을 포함한다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치는 하나 이상의 부력 활성화 세포 분류 장치를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치는 하나 이상의 침강 장치를 포함한다.
일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 다음을 포함할 수 있다: 현탁액 제조 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 세포 변형 서브시스템(구역 2): 세포 현탁앵 유입구; 세포 막에서 섭동을 일으켜 페이로드를 세포 내로 진입시켜, 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 하나 이상의 세포 변형 협착부; 하나 이상의 세포 변형 협착부를 통해 세포를 흘리도록 구성된 제조 용기. 일부 양태에서, 제조 용기는 강성 저장조 서브어셈블리일 수 있다. 일부 양태에서, 페이로드는 세포에 전달할 화물(cargo)을 포함한다. 예를 들어, 일부 양태에서, 페이로드는 하나 이상의 재프로그래밍 인자를 포함한다. 일부 양태에서, 재프로그래밍 인자는 분화 인자, 즉 상이한 유형의 세포로 세포의 분화를 유도할 수 있는 임의의 제제를 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 페이로드는 하나 이상의 뉴런 재프로그래밍 인자를 포함한다. 일부 양태에서, 페이로드는 폴리펩티드, 지질, 탄수화물, 소분자, 금속 함유 화합물, 항체, 전사 인자, 나노입자, 리포좀, 형광 태그된 분자, 또는 이들의 조합을 포함한다. 일부 양태에서, 페이로드는 하나 이상의 핵산을 포함한다. 일부 양태에서, 핵산은 DNA, RNA, 또는 둘 다를 포함한다. 소정의 양태에서, DNA는 재조합 DNA, cDNA, 게놈 DNA, 또는 이들의 조합을 포함한다. 소정의 양태에서, RNA는 siRNA, mRNA, miRNA, lncRNA, tRNA, shRNA, 자가 증폭 mRNA, 또는 이들의 조합을 포함한다. 일부 양태에서, 제조 용기는 강성 저장조 서브어셈블리일 수 있다. 일부 양태에서, 구역 2는 하나 이상의 유입구, 예컨대 완충액을 구역 2 내로 도입하기 위한 하나 이상의 유입구를 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 세포 현탁액을 세포 현탁액 유입구를 통해 구역 1로부터의 구역 2로 진입할 수 있다. 일부 양태에서, 구역 2는 세포 현탁액이 흘러 들어가서 저장될 수 있는 용기를 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 용기는 온도 조절식이고, 예컨대 본원에 기술된 것과 같은 TEC를 사용하여 냉각된다. 일부 양태에서, 용기에 포함된 세포 현탁액은, 예컨대 본원에 기술된 교반 시스템을 사용하여 교반될 수 있다. 이러한 교반은 세포가 가라앉는 것을 방지할 수 있다. 일부 양태에서, 세포 변형 프로세스는, 세포의 세포 막에 섭동을 일으켜 페이로드를 세포 내로 진입시키도록 구성된 하나 이상의 세포 변형 협착부보다는 전기천공 장치를 사용하여 실시될 수 있다. 전기천공 장치는 페이로드룰 세포 내로 진입시켜, 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 생성하는 데 사용될 수 있다.
일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 다음을 포함할 수 있다: 세포 변형 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 희석 서브시스템(구역 3): 세포 현탁액 유입구; 예컨대 유체 시약 또는 건조 시약을 도입하기 위한 유입구; 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액 및 완충액을 수용하고, 완충액을 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액과 혼합하여 희석된 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 용기. 일부 양태에서, 구역 3은 하나 이상의 추가 유입구, 예컨대 유체(예를 들어 CpG 완충액과 같은 완충액)를 구역 3 내로 도입하기 위한 하나 이상의 유입구를 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 구역 3은 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액이 흘러 들어가서 저장될 수 있는 용기를 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 구역 3의 용기 내에서, 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액은 완충액으로 희석될 수 있다. 일부 양태에서, 구역 3은 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액에 첨가되는 완충액의 양을 측정하는 데 사용될 수 있는 하나 이상의 저울 시스템을 추가로 포함한다. 이러한 저울 시스템은 장력 로드 셀, 압축 로드 셀, 또는 직선 막대형 로드 셀일 수 있다. 일부 경우에, 저울 시스템은 용기, 예컨대 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 포함하는 구역 3의 용기와 접촉할 수 있고, 용기의 중량을 측정하는 데 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 구역 3은 본원에 기술된 것과 같은 교반 시스템을 추가로 포함할 수 있다. 교반 시스템은, 예를 들어 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액 및 구역 3의 용기 내 완충액을 연속으로 혼합하는 데 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 구역 3은 세포 잔해 및/또는 응집물을 제거하기 위한 하나 이상의 응집물 필터, 예컨대 40 μm 응집물 필터를 추가로 포함한다.
일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템을 다음을 포함할 수 있다: 희석 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 인큐베이션 서브시스템(구역 4): 희석된 세포 현탁액 유입구; 희석된 세포 현탁액을 수용하도록 구성된 용기; 및 용기 내의 희석된 세포 현탁액의 온도를 조절하여 인큐베이션된 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 플레이트. 일부 양태에서, 구역 4는 희석된 세포 현탁액이 흘러 들어가서 저장될 수 있는 용기를 포함한다. 일부 양태에서, 구역 4의 용기는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트와 접촉한다. 일부 경우에, 온도 조절식 플레이트는 희석된 세포 현탁액의 온도를 조절하는 데 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 구역 4는 본원에 기술된 것과 같은 교반 시스템을 추가로 포함할 수 있다. 교반 시스템은, 예를 들어 구역 4의 용기 내 희석된 세포 현탁액을 연속으로 혼합하는 데 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 구역 4는 세포 잔해 및/또는 응집물을 제거하기 위한 하나 이상의 응집물 필터, 예컨대 40 μm 응집물 필터를 추가로 포함한다.
일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템을 다음을 포함할 수 있다: 인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 세포 세척 서브시스템(구역 5): 인큐베이션된 세포 현탁액 유입구; 보존 배지 유입구; 인큐베이션된 세포 현탁액 및 보존 배지를 수용하도록 구성된 용기로서, 보존 배지와 용기 내의 인큐베이션된 세포 현탁액을 혼합하여 세포를 보존 배지에 현탁하는, 용기. 일부 양태에서, 구역 5는 하나 이상의 추가 유입구, 예컨대 디메틸 설폭시드("DMSO") 완충액과 같은 완충액을 구역 5 내로 도입하기 위한 하나 이상의 유입구를 포함할 수 있다. 일부 경우에, 구역 5는 인큐베이션된 세포 현탁액에 첨가되는 완충액의 양을 측정하는 데 사용될 수 있는 하나 이상의 저울 시스템을 추가로 포함한다. 이러한 저울 시스템은 장력 로드 셀, 압축 로드 셀, 또는 직선 막대형 로드 셀일 수 있다. 일부 경우에, 저울 시스템은 용기, 예컨대 인큐베이션된 세포 현탁액을 포함하는 구역 5의 용기와 접촉할 수 있고, 용기의 중량을 측정하는 데 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 구역 5는 하나 이상의 TFF 어셈플리와 같은 하나 이상의 세포 현탁 장치를 추가로 포함할 수 있다. 이러한 세포 현탁 장치는, 인큐베이션된 세포 현탁액이 동결 보호 보존 배지 내로 완충액 교환되도록, 완충액 교환 작업에 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 세포 현탁 장치는 하나 이상의 접선 유동 여과(TFF) 어셈블리를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 현탁 장치는 십자류 칩에 의한 하나 이상의 초음파 정재파를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 현탁 장치는 하나 이상의 겔 여과 크로마토그래피 장치를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 현탁 장치는 하나 이상의 원심 분리 세척 장치를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 현탁 장치는 하나 이상의 결정적 측방향 변위(DLD) 칩을 포함한다. 일부 양태에서, 세포 현탁 장치는 하나 이상의 원심분리 장치 및 가요성 다이아프램 장치를 포함한다. 일부 양태에서, 구역 4는 본원에 기술된 것과 같은 교반 시스템을 추가로 포함할 수 있다. 교반 시스템은, 예를 들어 구역 5의 용기의 내용물을 연속으로 혼합하는 데 사용될 수 있다.
일부 경우에, 세포를 가공하기 위한 시스템은 다음을 포함할 수 있다: 인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 용기 충진 서브시스템(구역 6): 보존 배지에 현탁된 세포를 수용하도록 구성된 유입구; 보존 배지에 현탁된 세포를 수용하도록 구성된 하나 이상의 용기; 및 보존 배지에 현탁된 세포를 하나 이상의 용기 내로 펌핑하도록 구성된 하나 이상의 펌프. 일부 양태에서, 구역 6은 보존 배지에 현탁된 세포가 하나 이상의 용기를 충진하기 전에 흘러 들어가서 보관되는 추가 용기를 포함한다. 일부 양태에서, 구역 6은 본원에 기술된 바와 같은 하나 이상의 저울 시스템을 추가로 포함한다. 저울 시스템은 하나 이상의 용기 각각과 접촉할 수 있고, 하나 이상의 용기 각각의 중량을 측정하는 데 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 구역 6은 세포 잔해 및/또는 응집물이 하나 이상의 용기를 충진하기 전에 이를 제거하는 데 사용될 수 있는 응집물 필터, 예컨대 40 μm 응집물 필터를 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 구역 6은 본원에 기술된 것과 같은 교반 시스템을 추가로 포함할 수 있다. 교반 시스템은, 예를 들어 구역 6의 추가 용기의 내용물을 연속으로 혼합하는 데 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 구역 6의 용기 각각은 주어진 용기의 내용물의 온도를 제어하도록 각각의 온도 조절식 플레이트와 접촉할 수 있다.
일부 양태에서, 상기 시스템은 멸균 상태이며, 비멸균 위치에서 사용되도록 구성된다. 이러한 특징부는 유리하며, 현장 진료 시스템의 사용을 포함하지 않는 제조 프로세스에 비해 상당한 이점을 제공한다. 예를 들어, 현장 진료 시스템의 사용을 포함하지 않는 세포를 가공하기 위한 제조 프로세스는 일반적으로 적어도 하나의 클린룸 시설에서 이루어지는데, 이는 세포 가공을 수행하기 위해 상당한 양의 공간을 필요로 할 뿐만 아니라 상당한 설정 및 유지 비용이 지출됨을 나타낸다. 대조적으로, 본원에 기술된 것과 같은 세포를 가공하기 위한 시스템은 일부 양태에서 비멸균 환경, 즉 클린룸 환경이 아닌 환경에서 사용될 수 있는 멸균 시스템일 수 있다. 예컨대, 시스템은 세포 가공을 위한 클린룸을 제공하는 능력을 갖지 않는 많은 위치에서 사용될 수 있다. 이와 같이, 본원에 기술된 것과 같은 세포를 가공하기 위한 시스템은, 예를 들어, 병원이나 다른 현장 진료 위치에서 사용될 수 있다.
도 6을 참조하면, 일부 양태에서, 현장 진료 시스템은 현장 진료 시스템(4000)을 포함한다. 일부 경우에, 프레임(4052)은 도 8의 프레임(6000)을 포함할 수 있다. 예를 들어, 프레임(4052)은 다음을 포함할 수 있다: 용기가 놓이는 플레이트, 예컨대 온도 조절식 플레이트; 추가로 상술되는 것과 같이, 상기 시스템 전반에 걸쳐 용기의 내용물을 혼합하기 위한 교반 시스템; 상기 시스템 전반에 걸쳐 용기의 중량을 측정하기 위한 장력 로드 셀, 압축 로드 셀, 또는 직선 막대형 로드 셀과 같은 저울 시스템; 용기 또는 다른 구성요소를 프레임에 분리 가능하게 결합시키는 데 사용될 수 있는 후크와 같은 체결 요소; 구성요소를 프레임에 분리 가능하게 결합시키는 데 사용될 수 있는 필터 클립; 상기 시스템 전반에 걸쳐 유체 흐름을 조절하기 위한 밸브; 서브시스템 내에서 및 서브시스템들 간에 유체를 펌핑하기 위한 연동 펌프와 같은 펌프; 프레임 및/또는 조립된 시스템을 이동시키기 위한 하나 이상의 바퀴; 작업자가 상기 시스템을 제어하는 데 사용할 수 있는 그래픽 사용자 인터페이스(GUI); 및 상기 시스템 전반에 걸쳐 용기를 비추기 위한 백라이트. 일부 양태에서, 시스템 전반에 걸쳐, 체결 요소는 임의의 유형의 커넥터일 수 있다. 예를 들어, 체결 요소는 후크, 후크-앤드-루프 패스너(hook-and-loop fastener), 임시 접착제, 타이, 또는 핀일 수 있다. 일부 양태에서, 온도 조절식 플레이트가 주어진 플레이트와 접촉된 각 용기의 내용물의 온도를 조절하는 데 사용될 수 있다. 일부 경우에, 상기 시스템의 프레임(4052)은 시스템(4000)의 회전된 도면의 파선으로 표시되는 것과 같이 적어도 2개의 모듈로 분할되도록 설계된다. 상기 시스템의 프레임의 이러한 분할은 현장 진료 시스템의 운반을 용이하게 할 수 있다. 일부 양태에서, 상기 시스템의 조립된 프레임(4052)의 전체 크기는 약 8.0 피트 길이, 약 6.5 피트 높이, 및 약 2.3 피트 너비이다. 일부 양태에서, 현장 진료 시스템(4000)은 용기(4040)을 포함하는데, 용기는 시스템 내로 도입하기 위한 유체, 예를 들어, 일부 경우에 완충액 중의 항원을 포함할 수 있다. 용기(4040)는, 예를 들어 용기(4040)를 체결 요소(4041)에 결합함으로써 상기 시스템에 분리 가능하게 결합될 수 있는데, 체결 요소는 후크일 수 있고, 용기(4040)를 칭량하기 위한 메커니즘의 일부로서 기능할 수도 있으며, 예를 들어 체결 요소(4041)는 저울 시스템의 일부일 수 있다. 일부 양태에서, 용기(4040)는 배관(4010)과 같은 배관에 의해 구역 1에 유체 연결되고, 용기(4040) 내에 담긴 유체는 펌프(4008)와 같은 펌프에 의해 백으로부터 배관을 통해 펌핑된다. 배관(4010)은 PVC 배관, 예컨대 디(2-에틸헥실) 프탈레이트(DEHP)가 없는 PVC 튜브일 수 있고, 유체는 배관(4010)을 통해 흐를 수 있다. 현장 진료 시스템(4000)은 용기(4042)를 추가로 포함할 수 있는데, 용기는 완충액을 포함할 수 있다. 용기(4042)는, 예를 들어 용기(4042)를 체결 요소(4043)에 결합함으로써 상기 시스템에 분리 가능하게 결합될 수 있는데, 체결 요소는 용기(4042)를 칭량하기 위한 저울 시스템의 일부로서 기능할 수도 있다. 일부 양태에서, 용기(4042)는 배관에 의해 구역 1에 유체 연결되고, 용기(4042) 내에 담긴 유체는 펌프에 의해 용기로부터 배관을 통해 펌핑된다. 현장 진료 시스템(4000)은 용기(4044)를 추가로 포함할 수 있는데, 용기는 가공용 샘플, 예컨대 투입 혈액 샘플을 포함할 수 있다. 용기(4044)는, 예를 들어 용기(4044)를 체결 요소(4045)에 결합함으로써 상기 시스템에 분리 가능하게 결합될 수 있는데, 체결 요소(4045)는 후크일 수 있고, 용기(4044)를 칭량하기 위한 저울 시스템의 일부로서 기능할 수도 있다. 일부 양태에서, 용기(4044)는 배관(4010)과 같은 배관에 의해 구역 1에 유체 연결되고, 용기(4044) 내에 담긴 유체는 구역 1에 진입하기 전에, 중력에 의해 응집물 필터(4016)와 같은 응집물 필터를 통해 흐른다. 일부 경우에, 응집물 필터(4016)는 40 μm 응집물 필터일 수 있는데, 이는 세포 응집물 또는 세포 잔해와 같은 40 μm보나 큰 크기의 입자를 여과할 수 있다. 일부 경우에, 필터 직경은 주어진 프로세스에 맞게 변경될 수 있다. 예를 들어, 필터 크기는 약 10 μm, 약 20 μm, 약 30 μm, 약 40 μm, 또는 약 50 μm일 수 있다. 일부 양태에서, 응집물 필터(4016)의 필터 물질은 주어진 프로세스에 맞게 선택된다. 일부 경우에, 응집물 필터(4016)의 필터 물질은 혼합 셀룰로오스 에스테르, 셀룰로오스 아세테이트, 코팅된 셀룰로오스 아세테이트, 친수성 폴리테트라플루오로에틸렌(PTFE), 소수성 PTFE, 나일론, 또는 폴리카보네이트일 수 있다.
일부 양태에서, 용기(4044)로부터 응집물 필터(4016)를 통해 흐르는 샘플은 용기(4024) 내로 흘러 들어간다. 일부 양태에서, 용기(4024)는 플레이트(4025)와 같은 플레이트와 접촉한다. 플레이트(4025)와 같은 플레이트는, 예컨대 용기 내의 샘플을 가열하거나 냉각하기 위한 온도 조절식 플레이트일 수 있다. 플레이트를 가열하고 냉각하기 위한 메커니즘은 도 19 및 도 23a~23b에 각각 제시되어 있으며, 이하에서 추가로 논의된다. 일부 양태에서, 교반 시스템(4023)은 용기(4024)와 접촉한다. 일부 양태에서, 교반 시스템(4023)은 용기(4024) 내의 샘플을 균질화하는 데 사용될 수 있다. 교반 시스템(4023)은 도 25의 교반 시스템(2000), 로킹 플레이트, 또는 진탕 플레이트일 수 있다. 일부 양태에서, 용기(4024)는 배관을 통해 접선 유동 여과(TFF) 필터 어셈블리와 같은 세포 현탁 장치(4012)에 유체 연결되는데, TFF 필터 어셈블리는 상기 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합된다. TFF 필터 어셈블리와 같은 세포 현탁 장치(4012)는 밸브(4018)와 같은 밸브에 유체 연결되어, TFF 필터 어셈블리와 같은 세포 현탁 장치(4012) 내로 들어가는 흐름과 이로부터 나오는 흐름을 조절한다. TFF 필터 조립체와 같은 세포 현탁 장치(4012)는 전달 배지와 같은 원하는 유체에 세포를 현탁하는 데 사용될 수 있다. 또한, 세포 현탁 장치(4012)에 들어가기 전에, 유체는 공기 필터(4014)와 같은 하나 이상의 공기 필터를 통과하여 유체로부터 기포의 형태와 같은 공기를 제거한다. 일부 양태에서, 세포 현탁 장치(4012)는 세포 단리 장치(4020)와 같은 하나 이상의 세포 단리 장치와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치(4020)는 하나 이상의 미세 유체 칩을 포함한다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치(4020)는 하나 이상의 SIS 장치를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치(4020)는 하나 이상의 백혈구 제거 필터를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치(5020)는 하나 이상의 용출 장치를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치(4020)는 배관에 의해 용기(4024)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 구역 1은 세포 단리 장치(4020)를 생략할 수 있다.
일부 양태에서, 용기(4024)는 배관에 의해 구역 2의 용기(4047)에 유체 연결된다. 유체는 펌프에 의해 용기(4024)로부터 펌핑될 수 있고, 예를 들어 구역 1 전반에 걸쳐 유체를 펌핑함으로써 구역 1 프로세스 도중에 형성되었거나 예를 들어 세포 단리 프로세스 동안 형성되었을 수 있는 추가의 세포 잔해 또는 응집물을 제거하기 위해, 유체는 용기(4047)에 진입하기 전에 응집물 필터를 통과할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(4047)는 체결 요소, 예컨대 후크, 후크-앤드-루프 패스너, 임시 접착제, 타이, 또는 핀에 의해 프레임에 분리 가능하게 결합된다. 일부 양태에서, 용기(4047)는 플레이트(4046)와 같은 플레이트와 접촉한다. 플레이트(4046)는 용기(4047) 내의 샘플의 온도를 조절하기 위해, 가열되거나, 냉각되거나, 비교적 일정한 온도로 유지되는 것과 같은 온도 조절식일 수 있다. 용기(4047)는 배관에 의해 응집물 필터와 유체 연통하는데, 샘플은 세포 변형 장치(4026)에 진입하기 전에 응집물 필터를 통과할 수 있다. 일부 양태에서, 세포 변형 장치(4026)는 배관(4010)을 통해 구역 3의 용기(4030)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(4030)는 후크와 같은 체결 요소에 의해 시스템에 분리 가능하게 결합된다. 일부 양태에서, 용기(4030)는 플레이트(4031)와 접촉할 수 있으며, 플레이트는 가열되거나, 냉각되거나, 또는 비교적 일정한 온도로 유지되는 것과 같은 온도 조절식일 수 있다. 일부 양태에서, 온도 조절식 플레이트는 도 19에 제공된 것과 같은 플레이트일 수 있다. 일부 양태에서, 온도 조절식 플레이트는 용기의 내용물의 온도를 조절하는 데 사용된다. 일부 양태에서, 용기(4030)는 교반 시스템(4029)과 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(4048)는 배관에 의해 용기(4030)와 유체 연통할 수 있고, 여기서 용기(4048)는 완충액을 포함할 수 있다. 용기(4048)는, 예컨대 체결 요소(4049)에 의해 프레임(4042)에 분리 가능하게 결합될 수 있다.
일부 양태에서, 용기(4038)는 배관에 의해 용기(4050)와 유체 연통할 수 있고, 여기서 용기는 완충액을 포함할 수 있다. 용기(4050)는, 예컨대 체결 요소(4051)에 의해 프레임(4042)에 분리 가능하게 결합될 수 있다. 일부 양태에서, 용기(4030)는 응집물 필터(4016)와 유체 연통한다. 응집물 필터(4016)는 상기 시스템을 사용하여 세포를 가공하는 동안 축적되었을 수 있는 세포 잔해와 응집물을 여과하는 데 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 유체는 응집물 필터를 통해 용기(4030)로부터 흘러 나온 다음, 배관을 통해 응집물 필터 및 용기(4030)와 유체 연통하는 구역 4의 용기(4038)로 펌핑될 수 있다.
일부 양태에서, 용기(4038)는, 예컨대 체결 요소(4039)에 의해 프레임(4052)에 분리 가능하게 결합되며, 체결 요소는 일부 경우에 후크일 수 있다. 일부 경우에, 체결 요소(4039)는 용기(4038)의 중량을 측정하기 위한 저울 시스템의 일부로서 사용될 수도 있다. 일부 양태에서, 저울 시스템은 장력 로드 셀, 압축 로드 셀, 또는 직선 막대형 로드 셀이다. 일부 양태에서, 용기(4038)는 교반 시스템(4037)과 접촉한다. 교반 시스템(4037)은 예를 들어 도 25의 교반 시스템(2000), 로킹 플레이트, 또는 진탕 플레이트일 수 있다. 일부 양태에서, 용기(4038)는 배관에 의해 용기(4050)와 유체 연통한다. 일부 경우에, 용기(4038)는 세포 잔해 및/또는 세포 응집물을 제거하는 데 사용될 수 있는 응집물 필터, 예컨대 40 μm 응집물 필터와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 유체는 용기(4038)로부터 세포 응집물 필터를 통해 흐를 수 있고, 이어서 배관을 통해 구역 5의 용기(4034) 내로 흐를 수 있다.
일부 양태에서, 용기(4034)는 제2 TFF 필터 어셈블리와 같은 제2 세포 현탁 장치(4012)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 제2 TFF 필터 어셈블리와 같은 세포 현탁 장치(4012)는 동결 보존 배지에 세포를 현탁하는 데 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 제2 세포 현탁 장치(4012)는 상기 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합된다. 일부 양태에서, 용기(4034)는 배관에 의해 구역 6의 용기(4056)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(4034)는 교반 시스템(4033)과 접촉한다. 교반 시스템(4033)은 용기의 내용물을 혼합하는 데 사용될 수 있다. 용기(4034)는 일부 경우에 추가로 플레이트(4035) 상에 놓일 수 있으며, 여기서 플레이트는 온도 조절식 플레이트일 수 있다.
일부 양태에서, 용기(4056)는 교반 시스템(4057)과 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(4056)는 후크와 같은 체결 요소에 의해 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합된다. 일부 양태에서, 용기(4056)는 온도 조절식 플레이트와 같은 플레이트와 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(4056)는 백라이트(4056')와 접촉한다. 용기(4056)는, 가공된 세포를 위한 용기의 역할을 할 수 있는 용기(4054)와 추가로 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(4054)는 가공된 세포가 담긴 백의 중량을 측정하기 위해 저울 시스템(4055) 상에 놓일 수 있다. 일부 양태에서, 현장 진료 시스템(4000)은 완충액용 폐기물 용기(4002), 전체 시스템 폐기물 용기(4004), 및 DMSO 완충액용 폐기물 용기(4006)를 추가로 포함한다. 이들 용기 각각은 배관을 통해 시스템의 서브시스템, 예를 들어 구역 1~6과 유체 연통한다. 일부 양태에서, 폐기물 용기 각각은 저울 시스템과 접촉하며, 여기서 저울 시스템은 장력 로드 셀 또는 압축 로드 셀을 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 구역 1~6 중 하나 이상이 시스템에서 생략될 수 있다. 예를 들어, 구역 4는 시스템에서 생략될 수 있고, 구역 3이 구역 4에 의해 수행되는 기능을 달리 수행하는 데 사용될 수 있다. 예를 들어, 구역 3의 플레이트(4031)는 온도 조절식 플레이트일 수 있어서, 플레이트(4031)를 사용해 용기(4030)를 인큐베이션할 수 있다. 일부 양태에서, 구역 5는 시스템에서 생략될 수 있고, 구역 1이 구역 5에 의해 수행되는 기능을 달리 수행하는 데 사용될 수 있다. 예를 들어, 구역 5의 구성요소에 의해 수행될 수 있는 것과 같이, 구역 1의 세포 현탁 장치, 예컨대 TFF 필터 어셈블리가 동결보존 배지에 세포를 현탁하는 데 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 각 구역의 배관은, 제1 구역이 제1 및 제2 구역의 배관을 연결함으로써 상이한 제2 구역에 연결될 수 있도록, 상이한 제2 구역과 독립적으로 제조된다. 이렇게 제조하면, 주어진 공정에 대해 바람직할 수 있도록, 상이한 배향으로 상이한 수의 구역을 사용하여 구역을 조립하는 것이 가능하다.
일부 양태에서, 현장 진료 시스템은 온도 조절 서브시스템 키트를 포함한다. 온도 조절 서브시스템은 희석 서브시스템(구역 3) 및 인큐베이션 서브시스템(구역 4)에 의해 수행되는 기능을 달리 수행하는 데 사용될 수 있다. 예를 들어, 온도 조절 서브시스템은 세포 변형 서브시스템(구역 2)으로부터 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 수용하기 위한 용기 및 유체 시약 및/또는 건조 시약을 세포 현탁액이 포함된 용기에 도입하기 위한 하나 이상의 유입구를 포함할 수 있다. 유체 시약 및/또는 건조 시약은, 예컨대 교반 시스템을 사용하여 세포 현탁액과 혼합되어 희석된 세포 현탁액을 생성할 수 있다. 온도 조절 시스템은, 용기 내의 희석된 세포 현탁액의 온도를 조절하여 인큐베이션된 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 플레이트를 추가로 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 온도 조절 시스템은 세포 변형 서브시스템(구역 2)에 유체 연결될 수 있고, 세포 세척 서브시스템(구역 5)에도 유체 연결될 수 있다.
일부 양태에서, 구역 3 및 구역 4가 병합될 수 있다. 예를 들어, 구역 3과 구역 4를 병합할 때 여과 재순환 루프가 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 온도 조절식 플레이트와 접촉하는 구역 2의 제1 용기가 구역 1과 병합될 수 있다. 예를 들어, 온도 조절식 플레이트가 구역 1에 추가되어 용기와 접촉할 수 있고, 구역 2의 제1 용기는 제거될 수 있다. 일부 양태에서, 구역 1의 세포 현탁 장치, 예컨대 TFF 필터 어셈블리가 구역 5의 세포 현탁 장치에 의해 수행되는 세포 현탁 작업을 수행하는 데 사용될 수 있다. 이와 같이, 구역 5의 세포 현탁 장치를 제거할 수 있다. 예를 들어, 구역 1의 세포 현탁액 장치는 세포 세척 작업을 위해 재사용되기 전에 헹구어질 수 있다. 구역 5에서 구역 1까지의 가지가, 예컨대 배관에 의해 추가되어 구역 5와 구역 1을 직접 연결할 수 있다. 일부 경우에, 구역 1의 셀 현탁 장치는 둘 이상의 상이한 필터를 포함할 수 있다. 일부 경우에, 구역 1의 세포 현탁액 장치가 세포 세척 작업에 사용될 때 구역 5가 시스템으로부터 제거될 수 있다. 일부 양태에서, 구역 4가 구역 5와 병합될 수 있다. 예를 들어, 가열체 및 재순환 필터 루프가 구역 5 내에서 인큐베이션 및 세포 세척을 수행하도록 구역 5에 추가될 수 있다.
일부 양태에서, 현장 진료 시스템(4000)은 그래픽 사용자 인터페이스(GUI) 시스템(4060)을 추가로 포함할 수 있다. 사용자는 GUI와 인터페이스하여 현장 진료 시스템을 제어하여, 예컨대 현장 진료 시스템을 사용하여 세포 가공 런을 계획하고 실행할 수 있다.
일부 양태에서, 현장 진료 시스템의 작업 영역에 걸쳐 인클로저가 생성될 수 있다. 예를 들어, 일회용 키트가 현장 진료 시스템의 프레임 상에 설치될 수 있고, 이어서 새시(sash)와 같은 커버가 현장 진료 시스템의 전방을 폐쇄하는 데 사용될 수 있다. 이러한 시스템의 폐쇄는 일부 경우에 멸균 상태를 유지하는 데 도움이 될 수 있다. 일부 양태에서, 현장 진료 시스템은 환경 모니터링 시스템을 추가로 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 현장 지료 시스템은 도 7에 제시된 것과 같은 현장 진료 시스템(5000)을 포함한다. 일부 양태에서, 현장 진료 시스템(5000)의 프레임(5052)은 다음을 포함할 수 있다: 용기가 놓이는 플레이트, 예컨대 온도 조절식 플레이트; 추가로 후술하는 것과 같이, 상기 시스템 전반에 걸쳐 용기의 내용물을 혼합하기 위한 교반 시스템; 상기 시스템 전반에 걸쳐 용기의 중량을 측정하기 위한 장력 로드 셀, 압축 로드 셀, 또는 직선 막대형 로드 셀과 같은 저울 시스템; 용기 또는 다양한 다른 구성요소를 프레임에 분리 가능하게 결합시키는 데 사용될 수 있는 후크와 같은 체결 요소; 구성요소를 프레임에 분리 가능하게 결합시키는 데 사용될 수 있는 필터 클립; 상기 시스템 전반에 걸쳐 유체 흐름을 조절하기 위한 밸브; 서브시스템 내에서 및 서브시스템들 간에 유체를 펌핑하기 위한 연동 펌프와 같은 펌프; 프레임 및/또는 조립된 시스템을 이동시키기 위한 하나 이상의 바퀴; 작업자가 상기 시스템을 제어하는 데 사용할 수 있는 그래픽 사용자 인터페이스(GUI); 및 상기 시스템 전반에 걸쳐 용기를 비추기 위한 백라이트. 일부 양태에서, 시스템 전반에 걸쳐, 체결 요소는 임의의 유형의 커넥터일 수 있다. 예를 들어, 체결 요소는 후크, 후크-앤드-루프 패스너(hook-and-loop fastener), 임시 접착제, 타이, 또는 핀일 수 있다. 일부 양태에서, 온도 조절식 플레이트가 주어진 플레이트와 접촉된 각 용기의 내용물의 온도를 조절하는 데 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 현장 진료 시스템(5000)의 프레임(5052)은 도 8의 프레임(6000)을 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 현장 진료 시스템(5000)은 용기(5040)을 포함하며, 용기는 일부 경우에 항원을 포함할 수 있다. 용기(5040)는, 예를 들어 용기(5040)를 체결 요소(5041)에 결합함으로써 상기 시스템에 분리 가능하게 결합될 수 있는데, 체결 요소는 후크일 수 있고, 용기(5040)를 칭량하기 위한 저울 시스템의 일부로서 기능할 수도 있다. 일부 양태에서, 용기(4040)는 배관(5010)과 같은 배관에 의해 구역 1에 연결되고, 용기(5040) 내에 담긴 유체는 펌프(5008)와 같은 펌프에 의해 백으로부터 배관을 통해 펌핑된다. 배관(5010)는 PVC 배관일 수 있고, 유체는 배관(5010)을 통해 흐를 수 있다.
현장 진료 시스템(5000)은 용기(5042)를 추가로 포함할 수 있는데, 용기는 완충액을 포함할 수 있다. 용기(5042)는, 예를 들어 용기(5042)를 체결 요소(5043)에 결합함으로써 상기 시스템에 분리 가능하게 결합될 수 있는데, 체결 요소는 후크일 수 있고, 용기(5042)를 칭량하기 위한 메커니즘의 일부로서 기능할 수도 있다. 일부 양태에서, 용기(5042)는 배관(5010)과 같은 배관에 의해 구역 1에 연결되고, 용기(5042) 내에 담긴 유체는 펌프(5008)와 같은 펌프에 의해 백으로부터 배관을 통해 펌핑된다.
현장 진료 시스템(5000)은 용기(5044)를 추가로 포함할 수 있는데, 용기는 가공용 샘플, 예컨대 투입 혈액 샘플을 포함할 수 있다. 용기(5044)는, 예를 들어 용기(5044)를 체결 요소(5045)에 결합함으로써 상기 시스템에 분리 가능하게 결합될 수 있는데, 체결 요소(5045)는 후크일 수 있고, 용기(5044)를 칭량하기 위한 저울 시스템의 일부로서 기능할 수도 있다. 일부 양태에서, 용기(5044)는 배관(5010)과 같은 배관에 의해 구역 1에 연결되고, 용기(5044) 내에 담긴 유체는 구역 1에 진입하기 전에, 중력에 의해 응집물 필터(5016)를 통해 흐른다. 일부 경우에, 응집물 필터(5016)는 40 μm 응집물 필터일 수 있는데, 이는 세포 응집물 또는 세포 잔해와 같은 40 μm보나 큰 크기의 입자를 여과할 수 있다. 일부 경우에, 필터 직경은 주어진 프로세스에 맞게 변경될 수 있다. 예를 들어, 필터 크기는 약 10 μm, 약 20 μm, 약 30 μm, 약 40 μm, 또는 약 50 μm일 수 있다. 일부 양태에서, 응집물 필터(5016)의 필터 물질은 주어진 프로세스에 맞게 선택된다. 일부 경우에, 응집물 필터(5016)의 필터 물질은 혼합 셀룰로오스 에스테르, 셀룰로오스 아세테이트, 코팅된 셀룰로오스 아세테이트, 친수성 폴리테트라플루오로에틸렌(PTFE), 소수성 PTFE, 나일론, 또는 폴리카보네이트일 수 있다.
일부 양태에서, 용기(5044)로부터 응집물 필터(5016)를 통해 흐르는 샘플은 용기(5024) 내로 흘러 들어간다. 일부 양태에서, 용기(5024)는 플레이트(5025)와 같은 플레이트와 접촉한다. 플레이트(5025)와 같은 플레이트는, 예컨대 용기 내의 샘플을 가열하거나 냉각하기 위한 온도 조절식일 수 있다. 일부 양태에서, 교반 시스템(5023)은 용기(5024)와 접촉한다. 교반 시스템(5023)은 도 25의 교반 시스템(2000), 로킹 플레이트, 또는 진탕 플레이트일 수 있다. 일부 양태에서, 교반 시스템(5023)은 용기(5024) 내의 샘플을 균질화하는 데 사용될 수 있다. 일부에서, 용기(5024)는 배관을 통해 접선 유동 여과(TFF) 필터 어셈블리와 같은 세포 현탁 장치(5012)에 유체 연결되는데, TFF 필터 어셈블리는 상기 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합된다. 세포 현탁 장치(5012)는 밸브(5018)와 같은 밸브에 유체 연결되어, 세포 현탁 장치 내로 들어가는 흐름과 이로부터 나오는 흐름을 조절한다. TFF 필터 조립체와 같은 세포 현탁 장치는 전달 배지와 같은 원하는 유체에 세포를 현탁하는 데 사용될 수 있다. 또한, 세포 현탁 장치(5012)에 들어가기 전에, 유체는 공기 필터(5014)와 같은 하나 이상의 필터를 통과하여 유체로부터 기포의 형태와 같은 공기를 제거한다. 일부 양태에서, 세포 현탁 장치(5012)는 세포 단리 장치(5020)와 같은 하나 이상의 세포 단리 장치와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치(5020)는 하나 이상의 SIS 장치를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치(5020)는 SIS 장치이다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치는 다른 세포 유형으로부터 PBMC 세포를 분리하는 데 사용된다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치(5020)는 하나 이상의 백혈구 제거 필터를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치(5020)는 하나 이상의 용출 장치를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치(5020)는 배관에 의해 용기(5024)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 구역 1은 세포 단리 장치(5020)를 생략할 수 있다.
일부 양태에서, 용기(5024)는 세포 변형 프로세스가 이루어지도록 배관에 의해 구역 2의 용기(5047)에 유체 연결된다. 유체는 펌프에 의해 용기(5024)로부터 펌핑될 수 있고, 유체는 용기(5047)에 진입하기 전에 응집물 필터를 통과할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(5047)는 후크와 같은 체결 요소에 의해 프레임에 분리 가능하게 결합된다. 일부 양태에서, 용기(5047)는 플레이트(5046)와 접촉한다. 플레이트(5046)는 용기(5047) 내의 샘플의 온도를 조절하기 위해, 가열되거나, 냉각되거나, 비교적 일정한 온도로 유지되는 것과 같은 온도 조절식일 수 있다. 일부 양태에서, 온도 조절식 플레이트는 도 19에 제공된 것과 같은 플레이트일 수 있다. 일부 양태에서, 온도 조절식 플레이트는 용기의 내용물의 온도를 조절하는 데 사용된다. 용기(5047)는 배관에 의해 응집물 필터와 유체 연통하는데, 샘플은 세포 변형 장치(5026)에 진입하기 전에 응집물 필터를 통과할 수 있다. 일부 양태에서, 세포 변형 장치(5026)는 배관(5010)을 통해 구역 3의 용기(5030)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(5030)는 체결 요소, 예컨대 후크, 후크-앤드-루프 패스너, 임시 접착제, 타이, 또는 핀에 의해 상기 시스템에 분리 가능하게 결합된다. 일부 양태에서, 용기(5030)는 플레이트(5031)과 같은 플레이트 상에 놓일 수 있는데, 플레이트는 온도 조절식 플레이트일 수 있다. 또한, 용기(5030)는 플레이트와 접촉할 수 있으며, 플레이트는 가열되거나, 냉각되거나, 또는 비교적 일정한 온도로 유지되는 것과 같은 온도 조절식일 수 있다. 일부 양태에서, 용기(5030)는 교반 시스템(5029)과 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(5048)는 배관에 의해 용기(5030)와 유체 연통할 수 있고, 여기서 용기(5048)는 완충액을 포함할 수 있다. 용기(5048)는, 예컨대 체결 요소(5049)에 의해 프레임(5042)에 분리 가능하게 결합될 수 있다.
일부 양태에서, 용기(5038)는 배관에 의해 용기(5050)와 유체 연통할 수 있고, 여기서 용기는 완충액을 포함할 수 있다. 용기(5050)는, 예컨대 체결 요소(5051)에 의해 프레임(5042)에 분리 가능하게 결합될 수 있다. 일부 양태에서, 용기(5030)는 응집물 필터(5016)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 유체는 응집물 필터를 통해 용기(5030)로부터 흘러 나온 다음, 배관을 통해 응집물 필터 및 용기(5030)와 유체 연통하는 구역 4의 용기(5038)로 펌핑될 수 있다.
일부 양태에서, 용기(5038)는 예컨대 체결 요소(5039)에 의해 프레임(5052)에 분리 가능하게 결합된다. 일부 경우에, 체결 요소(5039)는 후크일 수 있고, 용기(5038)의 중량을 측정하기 위한 저울 시스템의 일부로서 사용될 수도 있다. 일부 양태에서, 용기(5038)는 교반 시스템(5037)과 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(5038)는 배관에 의해 용기(5050)와 유체 연통한다. 일부 경우에, 용기(5038)는 응집물 필터(5016)와 유체 연통한다. 응집물 필터(5016)는 상기 시스템을 사용하여 세포를 가공하는 동안 축적되었을 수 있는 세포 잔해와 응집물을 여과하는 데 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 유체는 용기(5038)로부터 세포 응집물 필터를 통해 흐를 수 있고, 이어서 배관을 통해 구역 5의 용기(5034) 내로 흐를 수 있다.
일부 양태에서, 용기(5034)는 상기 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합되는 제2 TFF 필터 어셈블리와 같은 제2 세포 단리 장치(5012)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(5034)는 배관에 의해 구역 6의 용기(5056)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(5034)는 교반 시스템(5033)과 접촉한다. 용기(5034)는 일부 경우에 플레이트(5035)에 추가로 접촉하며, 여기서 플레이트는 온도 조절식 플레이트일 수 있다.
일부 양태에서, 용기(5056)는 교반 시스템(5057)과 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(5056)는 후크와 같은 체결 요소에 의해 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합된다. 일부 양태에서, 용기(5056)는 온도 조절식 플레이트와 같은 플레이트와 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(5056)는 백라이트(4056)와 접촉한다. 용기(5056)는, 가공된 세포를 위한 용기의 역할을 할 수 있는 용기(5054)와 추가로 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(5054)는 가공된 세포가 담긴 백의 중량을 측정하기 위해 저울 시스템(5055)과 접촉할 수 있다.
일부 양태에서, 현장 진료 시스템(5000)은 완충액용 폐기물 용기(5002), 전체 시스템 폐기물 용기(5004), 및 DMSO 완충액용 폐기물 용기(5006)를 추가로 포함한다. 을이들 용기 각각은 배관을 통해 시스템의 서브시스템, 즉 구역 1~6과 유체 연통한다. 일부 양태에서, 폐기물 용기 각각은 저울 시스템과 접촉하며, 여기서 저울 시스템은 장력 로드 셀 또는 압축 로드 셀을 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 구역 1~6 중 하나 이상이 시스템에서 생략될 수 있다. 예를 들어, 구역 4는 시스템에서 생략될 수 있고, 구역 3이 구역 4에 의해 수행되는 기능을 달리 수행하는 데 사용될 수 있다. 예를 들어, 구역 3의 플레이트(5031)는 온도 조절식 플레이트일 수 있어서, 플레이트(5031)를 사용해 용기(5030)를 인큐베이션할 수 있다. 일부 양태에서, 구역 5는 시스템에서 생략될 수 있고, 구역 1이 구역 5에 의해 수행되는 기능을 달리 수행하는 데 사용될 수 있다. 예를 들어, 구역 5의 구성요소에 의해 수행될 수 있는 것과 같이, 구역 1의 세포 현탁 장치, 예컨대 TFF 필터 어셈블리가 동결보존 배지에 세포를 현탁하는 데 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 각 구역의 배관은, 제1 구역이 제1 및 제2 구역의 배관을 연결함으로써 상이한 제2 구역에 연결될 수 있도록, 상이한 제2 구역과 독립적으로 제조된다. 이렇게 제조하면, 주어진 공정에 대해 바람직할 수 있도록, 상이한 배향으로 상이한 수의 구역을 사용하여 구역을 조립하는 것이 가능하다.
일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템의 프레임은 시스템의 프레임에 내장된 다양한 상이한 구성요소, 예컨대 도 8에 제시된 것들을 포함할 수 있다. 도 8에 제시된 바와 같이, 시스템의 프레임은 일부 경우에 가열 스테이션(6022 및 6027)을 포함할 수 있으며, 가열 스테이션은 가열식 플레이트일 수 있다(예를 들어, 도 22 참조). 시스템(6000)은 냉각 스테이션(6023 및 6026)을 추가로 포함할 수 있으며, 냉각 스테이션은 인라인 TEC 액체 냉각 시스템일 수 있다(도 24a~도 24b 참조). 일부 양태에서, 시스템(6000)은 도 25에 제시된 교반 시스템과 같은 교반 시스템(6014, 6016, 6018, 6024, 및 6046)을 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 시스템(6000)은 폐기물 용기 홀더(예컨대 6002, 6004, 및 6006)를 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 폐기물 용기 홀더(6002, 6004, 및 6006)의 각각은 주어진 폐기물 용기를 칭량하기 위한 저울 시스템을 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 시스템(6000)은 필터 클립을 포함하며, 필터 클립은 구성요소들을 프레임(6000)에 분리 가능하게 결합시키는 데 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 프레임(6000)은 시스템을 통해 유체를 펌핑하기 위한 펌프(6008)를 포함한다. 일부 양태에서, 프레임(6000)은 시스템을 통해 유체의 흐름을 조절하기 위한 밸브(6012)를 포함한다. 일부 양태에서, 프레임(6000)은 체결 요소(6020, 6028, 6030, 6032, 6034, 6036, 6038, 6040, 6042, 및 6048)를 포함하며, 체결 요소는 일부 경우에 후크일 수 있다. 이러한 체결 요소는 용기를 프레임(6000)에 분리 가능하게 결합시키는 데 사용될 수 있다. 또한, 후크와 같은 이러한 체결 요소는 주어진 체결 요소에 분리 가능하게 결합된 용기의 중량을 측정하기 위한 저울 시스템의 일부로서 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 프레임(6000)은 용기 내의 샘플을 비추는 데 사용될 수 있는 백라이트(6044)를 포함하며, 여기서 용기는 체결 요소(6048)에 분리 가능하게 결합될 수 있다. 일부 양태에서, 시스템 전반에 걸쳐, 체결 요소는 임의의 유형의 커넥터일 수 있다. 예를 들어, 체결 요소는 후크, 후크-앤드-루프 패스너, 임시 접착제, 타이, 또는 핀일 수 있다.
일부 양태에서, 현장 진료 시스템은 도 24a 및 도 24b에 제시된 것과 같은 하나 이상의 TEC 냉각 루프를 포함할 수 있다. 이제 도 24a를 참조하면, TEC 냉각 루프(1000)는 유입구(1004 및 1006)를 포함하는 용기(1002)를 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(1002)는 플레이트(1010)와 접촉된 플레이트(1008)와 접촉한다. 일부 양태에서, 플레이트(1010)는 배관(1012)을 통해 냉각 루프와 접촉하며, 냉각 루프는 배관(1012)을 통해 냉각 스테이션(1014)에 연결된다. 이제 도 24b를 참조하면, TEC 냉각 루프(1000')는 유입구(1004' 및 1006')를 포함하는 용기(1002')를 포함할 수 있으며, 용기는 배관(1010')에 연결될 수 있다. 일부 양태에서, 배관(1010')은 (1012')에 추가로 연결되고, 배관(1010')은 플레이트(1014')와 접촉한다. 플레이트(1014')는 냉각 유닛(1018')과 접촉된 플레이트(1016')와 접촉한다. 일부 양태에서, 온도 조절식 플레이트는 TEC 냉각 루프와 접촉할 수 있다.
일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 현장 진료 시스템은 도 10에 제시된 것과 같은 시스템(8000)을 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 현장 진료 시스템(8000)의 프레임(8001)은 다음을 포함할 수 있다: 용기가 놓이는 플레이트, 예컨대 온도 조절식 플레이트; 추가로 후술하는 것과 같이, 상기 시스템 전반에 걸쳐 용기의 내용물을 혼합하기 위한 교반 시스템; 상기 시스템 전반에 걸쳐 용기의 중량을 측정하기 위한 장력 로드 셀, 압축 로드 셀, 또는 직선 막대형 로드 셀과 같은 저울 시스템; 용기 또는 다양한 다른 구성요소를 프레임에 분리 가능하게 결합시키는 데 사용될 수 있는 체결 요소(예: 후크); 구성요소를 프레임에 분리 가능하게 결합시키는 데 사용될 수 있는 필터 클립; 상기 시스템 전반에 걸쳐 유체 흐름을 조절하기 위한 밸브; 서브시스템 내에서 및 서브시스템들 간에 유체를 펌핑하기 위한 연동 펌프와 같은 펌프; 프레임 및/또는 조립된 시스템을 이동시키기 위한 하나 이상의 바퀴; 작업자가 상기 시스템을 제어하는 데 사용할 수 있는 그래픽 사용자 인터페이스(GUI); 및 상기 시스템 전반에 걸쳐 용기를 비추기 위한 백라이트. 일부 양태에서, 시스템 전반에 걸쳐, 체결 요소는 임의의 유형의 커넥터일 수 있다. 예를 들어, 체결 요소는 후크, 후크-앤드-루프 패스너(hook-and-loop fastener), 임시 접착제, 타이, 또는 핀일 수 있다. 일부 양태에서, 온도 조절식 플레이트가 주어진 플레이트와 접촉된 각 용기의 내용물의 온도를 조절하는 데 사용될 수 있다.
일부 양태에서, 시스템(8000)은 바퀴(8002)를 포함한다. 바퀴(8002)는 작업자가 시스템(8000)을 이동시킬 수 있게 한다. 일부 양태에서, 시스템(8000)은 유입구(8049, 8051, 및 8056)를 포함하며, 유입구는 유체(예: 샘플, 완충액, 전달 배지 등)를 시스템(8000)의 구역 1 내로 도입하는 데 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 유입구는 유입구에 유체 연결된 공기 필터(8050)를 가질 수 있다. 공기 필터는 시스템 내로 도입된 유체로부터 기포의 형태와 같은 공기를 제거하는 데 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 시스템(8000)의 구역 1은 세포 단리 장치(8036)를 추가로 포함하며, 세포 단리 장치는 백혈구 제거 필터일 수 있다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치(8036)는 하나 이상의 미세 유체 칩을 포함한다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치(8036)는 하나 이상의 SIS 장치를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치(8036)는 하나 이상의 백혈구 제거 필터를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치(8036)는 하나 이상의 용출 장치를 포함한다. 일부 양태에서, 구역 1은 세포 단리 장치를 생략할 수 있다. 일부 양태에서, 구역 1은 플레이트(8022)와 접촉할 수 있는 TFF 필터 어셈블리(8020)와 같은 하나 이상의 세포 현탁 장치를 추가로 포함한다. 세포 현탁 장치(8020)는 전달 배지와 같은 원하는 완충액에 세포를 현탁하는 데 사용될 수 있다. 세포 현탁 장치(8020)는 압력을 모니터링하기 위한 압력 게이지(8038)에 추가로 연결된다. 세포 현탁 장치(8020)는 상기 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합된다. 일부 양태에서, 구역 1은 폐기물 배출구(8010)를 추가로 포함한다.
일부 양태에서, 구역 1은 용기(8052)를 추가로 포함하는데, 이 용기는 플레이트(8054)와 접촉하고, 추가로 체결 요소(8088)(일부 경우에 후크일 수 있음)에 의해 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있다. 일부 양태에서, 플레이트(8054)는 온도 조절식 플레이트, 예컨대 가열식, 냉각식, 또는 비교적 일정한 온도를 유지하는 플레이트일 수 있다. 일부 양태에서, 구역 1은 구역 1 내의 유체의 이동을 조절하기 위한 밸브(8018)와 같은 밸브를 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 용기(8052)는 8048과 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(8052)는 배관(8012)를 통해 세포 현탁 장치와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(8052)는 배관을 통해 구역 2의 용기(8058)와 유체 연통한다.
일부 양태에서, 구역 2의 용기(8058)는 플레이트(8059)와 접촉할 수 있으며, 플레이트는 온도 조절식 플레이트, 예컨대 가열식, 냉각식, 또는 비교적 일정한 온도를 유지하는 플레이트일 수 있다. 일부 양태에서, 용기(8058)는 후크일 수 있는 체결 요소(8090)에 의해 프레임(8001)에 분리 가능하게 결합된다. 일부 양태에서, 용기(8058)는 배관을 통해 용기(8060)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(8060)는 플레이트(8061)와 접촉할 수 있으며, 플레이트는 온도 조절식 플레이트, 예컨대 가열식, 냉각식, 또는 비교적 일정한 온도를 유지하는 플레이트일 수 있다. 일부 양태에서, 용기(8060)는 유입구(8064)와 추가로 유체 연통하며, 유입구는 공기 필터(8066)에 연결된다. 또한, 용기(8060)는 배관을 통해 응집물 필터(8062)에 유체 연결되고, 용기는 세포 변형 장치(8040)에 추가로 연결된다. 일부 양태에서, 세포 변형 장치(8040)는 전기천공 장치를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 변형 장치(8040)는 새포의 세포 막에 섭동을 일으켜 페이로드를 세포 내로 진입시키도록 구성된 하나 이상의 세포 변형 협착부를 포함하는 하나 이상의 미세 유체 칩을 포함한다. 일부 양태에서, 세포 변형 장치(8040)는 배관을 통해 구역 3의 용기(8028)에 유체 연결된다. 일부 양태에서, 밸브(8024)와 같은 밸브는 폐기물 배출구(8010)와 같은 폐기물 배출구 내로 유체 흐름을 유도할 수 있다.
일부 양태에서, 용기(8028)는 플레이트(8026)와 접촉할 수 있으며, 플레이트는 온도 조절식 플레이트, 예컨대 가열식, 냉각식, 또는 비교적 일정한 온도를 유지하는 플레이트일 수 있다. 일부 양태에서, 용기(8028)는 배관을 통해 응집물 필터(8030)와 추가로 유체 연통한다. 응집물 필터(8030)는 상기 시스템을 사용하여 세포를 가공하는 동안 축적되었을 수 있는 세포 잔해와 응집물을 여과하는 데 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 응집물 필터는 배관을 통해 구역 4의 용기(8070)에 유체 연결된다. 일부 양태에서, 용기(8070)는 체결 요소(8092)에 의해 프레임(8001)에 분리 가능하게 결합되며, 체결 요소는 일부 경우에 후크일 수 있다. 일부 양태에서, 용기(8070)는 플레이트(8072)와 접촉할 수 있으며, 플레이트는 온도 조절식 플레이트, 예컨대 가열식, 냉각식, 또는 비교적 일정한 온도를 유지하는 플레이트일 수 있다. 일부 양태에서, 용기(8070)는 배관을 통해 유입구(8068)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 유입구(8068)는 완충액을 구역 4 내로 도입하는 데 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 용기(8070)는 배관을 통해 응집물 필터(8074)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 응집물 필터(8074)는 배관을 통해 구역 5의 용기(8078)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 구역 5의 용기(8078)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(8080)와 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(8078)는 체결 요소(8094)에 의해 프레임(8001)에 분리 가능하게 결합되며, 체결 요소는 일부 경우에 후크일 수 있다. 일부 양태에서, 용기(8078)는 배관을 통해 유입구(8042)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(8078)는 배관을 통해 제2 TFF 필터 어셈블리(8032)와 같은 세포 현탁 장치와 유체 연통한다. 이러한 세포 현탁 장치는, 인큐베이션된 세포 현탁액이 동결 보호 보존 배지 내로 완충액 교환되도록, 완충액 교환 작업에 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 유입구(8076)는 배관을 통해 TFF 필터 어셈블리(8032)와 같은 세포 현탁 장치에 유체 연결된다. 일부 양태에서, TFF 필터 어셈블리(8032)와 같은 세포 현탁 장치는 상기 시스템의 프레임(8001)에 분리 가능하게 결합된다. 일부 양태에서, 구역 5로부터의 폐기물은 배관을 통해 폐기물 배출구(8014)로 흐를 수 있다.
일부 양태에서, 용기(8078)는 배관을 통해 구역 6의 용기(8084)에 유체 연결된다. 일부 양태에서, 용기(8084)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(8086)와 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(8084)는 체결 요소(8096)에 의해 프레임(8001)에 분리 가능하게 결합되며, 체결 요소는 일부 경우에 후크일 수 있다. 일부 양태에서, 용기(8084)는 배관을 통해 유입구(8082 및 8046)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(8084)는 배관을 통해 응집물 필터(8044)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(8084)는 샘플 용기(8016) 내로 유체의 흐름을 조절하는 밸브(8034)와 같은 밸브에 유체 연결된다. 일부 양태에서, 폐기물은 배관을 통해 주어진 구역으로부터 폐기물 용기, 예컨대 폐기물 용기(8004 및 8006) 내로 흐를 수 있다. 일부 양태에서, 2개 이상의 상이한 구역으로부터의 폐기물은 동일한 폐기물 용기 내로 흐른다. 일부 양태에서, 2개 이상의 상이한 구역으로부터의 폐기물은 이들 각각의 고유한 폐기물 용기 내로 흐른다. 일부 양태에서, 폐기물은 유형별로 그룹화되고 주어진 폐기물 유형별로 용기 내로 흐른다. 예를 들어, 시스템(8000)은 완충액 전용 폐기물 용기, 전체 시스템 폐기물 전용 용기(8004), 및 DMSO 완충액 전용 폐기물 용기(8006)을 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 폐기물 용기 각각은 저울 시스템과 접촉하며, 여기서 저울 시스템은 장력 로드 셀 또는 압축 로드 셀을 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 현장 진료 시스템은 도 19에 제시된 것과 같은 하나 이상의 가열식 플레이트를 포함한다. 이제 도 19를 참조하면, 가열식 플레이트(70)는 나사, 볼트, 너트, 와셔, 고정 링 등과 같은 패스너(702)에 의해 부착 바(704)에 결합될 수 있는 플레이트(700)를 포함한다. 플레이트(700)는 와이어 커넥터, 온도 링 커넥터 등과 같은 커넥터(708)에 의해 가열 유닛(706)에 추가로 연결되고, 가열 유닛은 플레이트의 온도를 조절하는 데 사용될 수 있다.
일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 세포를 가공하기 위한 자동 시스템일 수 있다. 예를 들어, 상기 시스템은, 예를 들어 하나 이상의 구역에서, 시스템과의 최소한의 작업자 상호 작용으로 작동될 수 있다. 일부 양태에서, 작업자는, 예컨대 LeukoPak을 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합시킴으로써 세포를 시스템에 로딩할 수 있고, 그런 다음 작업자는 시스템의 GUI를 사용하여 세포 가공을 개시할 수 있다. 일부 양태에서, 작업자는 GUI를 사용하여 세포 가공 런을 프로그래밍하고, 런의 진행 상황을 보고, 시스템의 오류를 보고/보거나, 세포 가공 런의 결과를 볼 수 있다.
일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 시스템의 구성요소들을 유체 연결하기 위한 배관을 포함한다. 예를 들어, 배관은 PVC 배관, 예컨대 DEHP 무함유 PVC 배관일 수 있다. 일부 양태에서, 배관은 가요성 플라스틱 배관일 수 있다. 일부 양태에서, 배관은 강성 플라스틱 배관일 수 있다. 일부 양태에서, 배관은 금속 배관일 수 있다.
위에서 논의된 바와 같이, 본원에 기술된 것과 같은 세포를 가공하기 위한 시스템은 약 5시간 내지 약 7시간 이내에 가공된 세포가 포함된 용기를 생산할 수 있는데, 이는 현장 진료 세스템의 사용을 포함하지 않는 제조 프로세스에 비해 상당한 시간을 절약한다. 이러한 시간 절약으로 인해 1일이 채 걸리지 않는 시간 이내에 환자로부터 세포를 수확하고, 시스템을 사용하여 이를 가공하고, 환자에게 투여하는 것이 가능하며, 이는 상당한 시간 절약이면서, 가공된 세포를 투여받는 환자에게는 상당한 이점이 될 수 있다. 또한, 위에서 논의된 바와 같이, 상기 시스템은 멸균 상태이며 비멸균 위치에서 사용되도록 구성된다. 예컨대, 시스템은 세포 가공을 위한 클린룸을 제공하는 능력을 갖지 않는 많은 위치에서 사용될 수 있기 때문에, 이러한 특징은 특히 유리하다. 이와 같이, 본원에 기술된 것과 같은 세포를 가공하기 위한 시스템은, 예를 들어 세포 가공을 수행하기 위한 클린룸 또는 달리 충분히 멸균된 환경을 갖지 않고, 현장 진료 시스템의 사용을 포함하지 않는 병원이나 현장 진료 위치에서 사용될 수 있다.
i. 서브시스템
전술한 바와 같이, 세포를 가공하기 위한 시스템은 하나 이상의 서브시스템을 포함할 수 있으며, 이에는 현탁액 제조 서브시스템(구역 1), 세포 변형 서브시스템(구역 2), 희석 서브시스템(구역 3), 인큐베이션 서브시스템(구역 4), 세포 세척 서브시스템(구역 5), 및 용기 충진 서브시스템(구역 6)이 포함된다. 일부 경우에, 세포를 가공하기 위한 시스템은 온도 조절 서브시스템을 포함할 수 있으며, 이는 일부 경우에, 추가로 후술하는 것과 같은 희석 서브시스템 및 인큐베이션 서브시스템 대신에 사용될 수 있다.
1. 현탁액 제조 서브시스템 (구역 1)
일부 양태에서, 본원에 기술된 것과 같은 세포를 가공하기 위한 시스템은 현탁액 제조 서브시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 PBMC를 가공하도록 설계된다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 RBC를 가공하도록 설계된다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 세포 잔해, 응집물, 및 원하지 않는 세포 유형으로부터 원하는 세포를 단리하고, 추가로 예컨대 세포 현탁액에 대한 완충액 교환 작업을 수행하기 위해 세포 현탁 장치를 사용하여 세포를 원하는 전달 배지에 현탁하는 데 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 도 12에 제시된 서브시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 도 13에 제시된 서브시스템을 포함한다.
이제 도 12를 참조하면, 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템(10)은 세포 현탁액 유입구(130)를 포함한다. 세포 현탁액 유입구(130)는 배관(102)을 통해 하나 이상의 백혈구 제거 필터와 같은 세포 단리 장치(128)에 유체 연결될 수 있다. 백혈구 제거 필터와 같은 세포 단리 장치(128)는 배관(102)을 통해 펌프 배관 서브어셈블리(104)에 유체 연결될 수 있다. 일부 양태에서, 구역 1은 세포 단리 장치를 생략할 수 있다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 전달 배지 유입구(126)를 포함하는데, 전달 배지 유입구는 현탁액 제조 서브시스템 내로 전달 배지를 도입하는 데 사용될 수 있다. 전달 배지 유입구(126)는 배관(102)을 통해 접선 유동 여과(TFF) 필터 어셈블리와 같은 세포 현탁 장치(124)에 유체 연결될 수 있다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 0.2 μm 공기 필터와 같은 하나 이상의 필터(110)에 결합되는 세척 배지 유입구(122)를 추가로 포함한다. 이러한 필터는 0.2 μm보다 큰 입자를 제거하며, 유체로부터 공기, 예컨대 기포 형태의 공기를 제거하는 데 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 백과 같은 용기(118)를 추가로 포함하며, 용기는 플레이트(114)와 같은 플레이트와 접촉하고, 플레이트는 일부 경우에 온도 조절식 플레이트이다. 용기(118)는 배관과 연결되는 유입구(115) 및 배출구(114)와 같은 유입구 및 배출구를 가질 수 있다. 플레이트(114)는 샘플 벌브(116)에 추가로 유체 연결된다. 일부 양태에서, 샘플과 같은 유체는 용기(118)로부터 샘플 벌브(116) 내로 흐를 수 있다. 일부 경우에, 샘플 벌브는 용접으로 제거하여, 샘플 벌브 내의 유체를 분석할 수 있다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 배관(102)를 통해 폐기물 용기에 유체 연결된 배출구, 예컨대 배출구(120 및 112)를 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 0.2 μm 공기 필터와 같은 하나 이상의 필터(110)에 결합되는 희석 배지 유입구(108)를 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 응집물 필터(106)를 추가로 포함하는데, 응집물 필터는 현탁액 제조 서브시스템의 단부에 위치되고 펌프 배관 서브어셈블리(104)에 연결되며, 펌프 배관 서브어셈블리는 배관(102)을 통해(배출구(100)를 통해) 세포 변형 서브시스템(20)에 유체 연결된다. 일부 양태에서, 응집물 필터(106)는 40 μm 응집물 필터일 수 있는데, 이는 세포 응집물 또는 세포 잔해와 같은 40 μm보나 큰 크기의 입자를 여과할 수 있다. 일부 경우에, 필터 직경은 주어진 프로세스에 맞게 변경될 수 있다. 예를 들어, 필터 크기는 약 10 μm, 약 20 μm, 약 30 μm, 약 40 μm, 또는 약 50 μm일 수 있다. 일부 양태에서, 응집물 필터(4016)의 필터 물질은 주어진 프로세스에 맞게 선택된다. 일부 경우에, 응집물 필터(4016)의 필터 물질은 혼합 셀룰로오스 에스테르, 셀룰로오스 아세테이트, 코팅된 셀룰로오스 아세테이트, 친수성 폴리테트라플루오로에틸렌(PTFE), 소수성 PTFE, 나일론, 또는 폴리카보네이트일 수 있다. 추가로 도 12를 참조하면, TW는 튜브 용접을 나타내고; CH는 시클로헥사논을 나타내고; LT는 접착제를 나타내고; TS는 밀봉을 나타낸다.
이제 도 13을 참조하면, 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템(10')은 세포 현탁액 유입구(138')를 포함한다. 세포 현탁액 유입구(138')는 배관(103')을 통해 하나 이상의 백혈구 제거 필터와 같은 세포 단리 장치(136')에 유체 연결될 수 있다. 일부 양태에서, 구역 1은 세포 단리 장치를 생략할 수 있다. 백혈구 제거 필터와 같은 세포 단리 장치(136')는 배관(103')을 통해 펌프 배관 서브어셈블리(104')에 유체 연결될 수 있다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 세척 배지 유입구(110')를 포함하는데, 세척 배지 유입구는 공기 필터와 같은 필터(108') 및 배관(103')에 결합된다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 전달 배지 유입구(126')를 포함하는데, 전달 배지 유입구는 공기 필터와 같은 필터(124') 및 배관(103')에 결합된다. 전달 배지 유입구(126')는 배관(103')을 통해 접선 유동 여과(TFF) 필터 어셈블리와 같은 세포 현탁 장치(134')에 유체 연결될 수 있다. 일부 경우에, 세포 현탁 장치(134')는 압력 게이지(132')와 같은 압력 게이지에 결합된다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템(10')은 백과 같은 용기(116')를 추가로 포함하며, 용기는 플레이트(114')와 같은 플레이트와 접촉하고, 플레이트는 일부 경우에 온도 조절식 플레이트이다. 용기(116')는 배관과 연결되는 유입구(122') 및 배출구(113')와 같은 유입구 및 배출구를 가질 수 있다. 플레이트(114')는 샘플 벌브(120')에 추가로 연결된다. 일부 양태에서, 샘플 유체와 같은 유체는 용기(116')로부터 샘플 벌브(120') 내로 흐를 수 있다. 일부 경우에, 샘플 벌브는 용접으로 제거하여, 샘플 벌브 내의 유체를 분석할 수 있다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 배관(102)를 통해 폐기물 용기에 유체 연결된 배출구, 예컨대 배출구(130', 128', 118', 및 102')를 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 용기(116)는 배관을 통해 응집물 필터(112')에 추가로 유체 연결되며, 응집물 필터는 배관을 통해 구역 2에 대한 배출구인 배출구(106')에 추가로 유체 연결된다. 일부 양태에서, 응집물 필터(106')는 40 μm 응집물 필터일 수 있는데, 이는 세포 잔해 및/또는 세포 응집물을 제거할 수 있다. 추가로 도 13을 참조하면, TW는 배관 용접을 나타내고; SB는 용매 결합을 나타내고; TS는 밀봉을 나타낸다.
일부 양태에서, 도 12 및 도 13의 현탁액 제조 서브시스템(구역 1) 구성요소는 도 6 내지 도 10에 제시된 것과 같이 POC 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템(구역 1) 구성요소는 세포 세척 서브시스템(구역 5)에 의해 수행되는 세포 세척을 수행하는 데 추가로 사용될 수 있는데, 이는 구역 1이 이러한 공정을 수행하는 데 필요한 구성요소를 포함하기 때문이다.
일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 세척 배지 유입구를 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 희석 배지 유입구를 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 세포에 대한 세포 단리 작업을 수행하도록 구성된 용출 시스템(elutriation system)을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 세포에 대한 세포 단리 작업을 수행하도록 구성된 적혈구 제거 필터(leukoreduction filter)를 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 완충액 교환 작업을 수행하도록 구성된 접선 유동 여과 시스템을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 전달 배지에 현탁된 세포를 수용하기 위한 적어도 하나의 용기에 결합되도록 구성된 적어도 하나의 배출구를 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 용기는 적어도 하나의 유입구 및 적어도 하나의 배출구를 포함하는 백(bag)이다.
일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 용기를 칭량하도록 구성된 저울 시스템을 포함한다. 저울 시스템은 상기 시스템의 프레임의 일부일 수 있다. 일부 양태에서, 저울 시스템은 장력 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 저울 시스템은 압축 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 저울 시스템은 직선 막대형 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 저울 시스템은 용기에 첨가된 완충액과 같은 유체의 부피를 측정하는 데 사용될 수 있다. 이러한 측정은, 예를 들어, 구역 3에서 세포를 희석할 때 또는 구역 6에서 산출물 용기를 충진할 때 수행되어 각 용기가 동일한 부피의 생성물을 수용하도록 보장할 수 있다.
일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은, 용기에 접촉하여 용기를 위아래로 진탕하도록 구성된 플랫폼을 포함하는 교반 시스템을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은, 용기에 접촉하여 용기에 접촉한 상태로 전후로 이동하도록 구성된 플레이트를 포함하는 교반 시스템을 추가로 포함한다. 예를 들어, 이러한 교반 시스템의 예는 도 25에 제시되어 있다. 도 25를 참조하면, 유입구(2008)를 갖는 백과 같은 용기(2004)가 플레이트(2002) 상에 놓인다. 교반 시스템은 플레이트(2006)를 추가로 포함하며, 플레이트는 이동 가능하고 용기(2004)와 접촉한다. 용기(2004)와 접촉하는 동안, 플레이트(2006)는 전후로 이동하여 백을 교반할 수 있다. 일부 양태에서, 교반 시스템은 상기 시스템의 프레임의 일부이다.
일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 서브시스템 내에서 유체를 이동시키도록 구성된 하나 이상의 펌프를 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 유체 연결된 서브시스템들 간에 유체를 이동시키도록 구성된 하나 이상의 펌프를 추가로 포함한다. 펌프는 상기 시스템의 프레임의 일부일 수 있다.
일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 서브시스템 내로 도입되는 샘플로부터 혈청을 제거할 수 있다. 일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 서브시스템 내로 도입되는 샘플로부터 혈장을 제거할 수 있다. 예를 들어, 현탁액 제조 서브시스템의 세포 현탁 장치, 예컨대 TFF 필터 어셈블리는 세포 현탁 프로세스 동안 TFF 필터 어셈블리를 사용하여 혈장 및/또는 혈청을 제거할 수 있다. 일부 양태에서, 구역 1의 세포 현탁 장치, 예를 들어 TFF 필터 어셈블리를 사용하는 세포 현탁은 세포 현탁을 거치지 않은 샘플에 비해 약 2배, 약 3배, 약 4배, 약 5배, 약 6배, 약 7배, 약 8배, 약 9배, 또는 약 10배 더 많은 혈청 및/혈장을 제거할 수 있다.
일부 양태에서, 현탁액 제조 서브시스템은 다음 구성요소 중 하나 이상을 추가로 포함한다: 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 샘플링 벌브, 카보이, 및 공기 필터.
2. 세포 변형 서브시스템 (구역 2)
일부 양태에서, 본원에 기술된 것과 같은 세포를 가공하기 위한 시스템은 세포 변형 서브시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 세포 변형 서브시스템은 페이로드를 세포 내로 도입하는 데 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 세포 변형 서브시스템은 하나 이상의 세포 변형 협착부를 통해 세포 현탁액을 가압하기 위한 압력을 생성하도록 구성된 가압 시스템을 추가로 포함한다. 예를 들어, 세포 변형 협착부를 통해 가압되는 세포의 개략도가 도 34에 제시되어 있다. 이제 도 34를 참조하면, 세포(17000)는 세포 변형 협착부(17002)를 통과하여 페이로드(17004)와 같은 페이로드를 세포의 중앙에 위치시킬 수 있다.
일부 양태에서, 세포 변형 서브시스템은 세포 변형 프로세스를 수행하기 위한 전기천공 장치를 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 세포 변형 서브시스템은 세포 현탁액의 온도를 조절하도록 구성된 가열식 플레이트를 포함하는 온도 조절 시스템을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 세포 변형 서브시스템은 세포 현탁액 또는 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 수용하기 위한 적어도 하나의 용기에 결합되도록 구성된 적어도 하나의 배출구를 추가로 포함한다.
일부 양태에서, 용기는 도 20에 제시된 것과 같은 백이다. 이제 도 20의 백(80)을 참조하면, 백(80)은 배출구 배관(800)을 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 백(80)은 유입구 배관(806) 및 그로밋(804)을 추가로 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 백 필름(802)은 초저밀도 폴리에틸렌/에틸렌 비닐 알코올(ULDPE/EVOH)을 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 용기는 플라스틱 용기, 상단 나사형 냉동 바이알, 백, 밀봉된 바이알, 유리 용기, 플라스틱 병, 또는 유리 용기이다.
일부 양태에서, 세포 변형 서브시스템은, 적어도 하나의 용기와 접촉하여 용기를 위아래로 진탕하도록 구성된 플랫폼을 포함하는 교반 시스템을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 적어도 하나의 용기와 접촉하는 플랫폼을 포함하는 교반 시스템은 세포 현탁액 또는 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액의 균질성을 촉진하기 위해 용기를 위아래로 진탕하도록 구성된다. 일부 양태에서, 세포 변형 서브시스템은, 용기에 접촉하여, 예를 들어 도 25에 제시된 것과 같이, 용기에 접촉한 상태로 전후로 이동하도록 구성된 플레이트를 포함하는 교반 시스템을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 교반 시스템은 상기 시스템의 프레임의 일부이다.
일부 양태에서, 세포 변형 서브시스템은 도 14에 제시된 세포 변형 서브시스템(20)을 포함한다. 일부 양태에서, 세포 변형 서브시스템은 배관(202)를 통해 현탁액 제조 서브시스템(10)에 유체 연결되는 세포 현탁액 유입구(208)를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 현탁액 유입구(208)는 배관(202)을 통해 배출구(218)와 추가로 유체 연결될 수 있으며, 여기서 배출구는 플레이트(219)와 접촉하는 용기(214)에 세포 현탁액을 전달하도록 구성된다. 일부 양태에서, 플레이트(219)는 온도 조절식 플레이트, 예컨대 가열식, 냉각식, 또는 비교적 일정한 온도를 유지하는 플레이트일 수 있다. 일부 양태에서, 플레이트(219)는, 예컨대 TEC 액체 냉각 시스템을 사용함으로써 냉각될 수 있다. 일부 양태에서, TEC 액체 냉각 시스템은 도 24a 내지 도 24b에 제시된 것과 같은 TEC 액체 냉각 시스템(1000)을 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(218)는 유입구(218) 및 배출구(211)를 포함하고, 이들은 배관 및 용기에 결합된다. 일부 양태에서, 플레이트(219)는 샘플 벌브(210)를 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 샘플과 같은 유체는 용기(218)로부터 샘플 벌브(210) 내로 흐를 수 있다. 일부 경우에, 샘플 벌브는 용접으로 제거하여, 샘플 벌브 내의 유체를 분석할 수 있다. 일부 양태에서, 세포 변형 서브시스템은 완충액 유입구(216)를 포함할 수 있으며, 완충액 유입구는 배관(202)을 통해 펌프 배관 서브어셈블리(212)에 유체 연결될 수 있다. 일부 양태에서, 세포 변형 서브시스템은 단부 캡(215)을 포함할 수 있으며, 단부 캡은 유입구(215')에 분리 가능하게 결합되고, 단부 캡은 상기 시스템의 프레임에 결합된 후에 제거될 수 있다. 유입구(215')는 0.2 μm 공기 필터일 수 있는 필터(217)와 유체 연통할 수 있다. 완충액 유입구(215')는 배관(202)을 통해 제조 용기(220)에 추가로 유체 연결될 수 있으며, 용기는 강성 저장조 어셈블리와 같은 제조 용기(220)일 수 있다. 제조 용기(220)는 배관(202)을 통해 배럴 필터 서브어셈블리(206)에 추가로 유체 연결될 수 있으며, 배럴 필터 서브어셈블리는 40 um 배럴 필터 서브어셈블리일 수 있다. 일부 양태에서, 배럴 필터 서브어셈블리(206)는 배관(202)을 통해 세포 변형 장치(204)에 유체 연결될 수 있다. 일부 양태에서, 세포 변형 장치(204)는 배관(202) 및 배출구(200)를 통해 희석 서브시스템(30)과 같은 희석 서브시스템에 유체 연결된다.
세포 변형 장치(204)는 미세 유체 장치를 포함할 수 있고, 일부 경우에 미세 유체 장치를 수용하는 카트리지를 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 세포 변형 장치는 세포의 세포 막에 섭동을 일으켜 페이로드를 세포 내로 진입시키도록 구성된 하나 이상의 세포 변형 협착부를 포함한다. 일부 양태에서, 섭동은, 세포 변형 서브시스템(20)을 사용함으로써 도입될 수 있는 것과 같이, 높은 압력 하에 세포 변형 협착부를 통해 세포 현탁액을 흘림으로서 야기된다. 일부 양태에서, 미세 유체 장치 및 카트리지와 같은 세포 변형 장치는 PCT/US2018/066295 및 PCT/US2020/026891에 의해 기술된 세포 변형 장치 중 어느 하나일 수 있으며, 이들 문헌 각각은 그 전체가 참조로서 본원에 통합된다.
일부 양태에서, 세포 현탁액은 세포 변형 장치의 미세 유체 칩의 협착부를 통과한 후 적어도 하나의 전극에 의해 생성된 전기장을 통과할 수 있다. 일부 양태에서, 전기장은 페이로드를 세포 현탁액의 세포에 전달하는 데 도움을 준다. 예를 들어, 세포 변형 협착부와 전기장의 조합을 사용하여 플라스미드와 같은 페이로드를 세포(예를 들어 세포 핵) 내로 전달할 수 있다. 일부 양태에서, 하나 이상의 전극은 미세 유체 칩의 세포 변형 협착부의 근위에 위치하여 전기장을 생성한다. 일부 양태에서, 전기장은 약 0.1 kV/m 내지 약 100 MV/m, 또는 이들 사이의 임의의 수 또는 수의 범위이다. 일부 양태에서, 전극을 구동하기 위한 전기 신호를 제공는 위해 집적 회로가 사용된다. 일부 양태에서, 세포 현탁액의 세포는 약 1 ns 내지 약 1 s의 펄스 폭, 약 100 ns 내지 약 10 s의 주기, 또는 이들 사이의 임의의 시간 또는 범위의 시간 동안 전기장에 노출된다.
일부 양태에서, 세포 변형 장치(204)는 전기천공 장치, 예컨대 세포 현탁액의 세포가 하나 이상의 전극에 의해 생성된 전기장에 노출되도록 위치된 하나 이상의 전극을 추가로 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 세포 현탁액의 세포는 적어도 하나의 전극에 의해 생성된 전기장을 통과한다. 일부 양태에서, 전기장은 약 0.1 kV/m 내지 약 100 MV/m, 또는 이들 사이의 임의의 수 또는 수의 범위이다. 일부 양태에서, 전극을 구동하기 위한 전기 신호를 제공는 위해 집적 회로가 사용된다. 일부 양태에서, 세포 현탁액의 세포는 약 1 ns 내지 약 1 s의 펄스 폭, 약 100 ns 내지 약 10 s의 주기, 또는 이들 사이의 임의의 시간 또는 범위의 시간 동안 전기장에 노출된다.
일부 양태에서, 세포 변형 장치(204)는 하나 이상의 협착부를 포함할 수 있으며, 하나 이상의 협착부는 기공이거나 기공 내에 포함된다. 일부 양태에서, 기공은 표면에 함유된다. 일부 양태에서, 표면은 필터이다. 일부 양태에서, 표면은 막이다. 일부 양태에서, 협착 크기는 세포 직경의 함수이다. 일부 양태에서, 협착 크기는 세포 직경의 약 20%, 약 30%, 약 40%, 약 50%, 약 60%, 약 70%, 약 80%, 약 90%, 또는 약 99%이다. 본원에 기술된 시스템, 방법, 및 키트와 함께 사용하기 위한 기공을 포함하는 세포 변형 장치의 예는 PCT/US2016/050287에 기술되어 있으며, 동 문헌은 그 전체가 참조로서 본원에 통합된다.
일부 양태에서, 도 14의 세포 변형 서브시스템 구성요소는 도 6 내지 도 10에 제시된 것과 같이 POC 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있다.
일부 양태에서, 세포 변형 서브시스템은 다음 구성요소 중 하나 이상을 추가로 포함한다: 강성 샘플 용기, 세포 응집물 필터, 제조 용기, 강성 저장조 어셈블리, 하나 이상의 미세유체 칩 카트리지, 하나 이상의 미세유체 칩, 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 공기 필터, 및 배럴 필터.
3. 희석 서브시스템(구역 3)
일부 양태에서, 본원에 기술된 것과 같은 세포를 가공하기 위한 시스템은 희석 서브시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액은 세포 변형 서브시스템으로부터 희석 서브시스템으로 흐르며, 여기서 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액은 희석 서브시스템의 용기 내에 놓일 수 있다. 일부 양태에서, 희석 서브시스템은, 예컨대 인큐베이션 전에 원하는 세포 농도 또는 원하는 완충액 조건을 달성하기 위해, 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 원하는 완충액에서 희석하는 데 사용될 수 있다. 일부 경우에, 세포 변형 후에, 희석 단계가 필요하지 않을 수 있으므로, 희석 서브시스템은 시스템에 포함되지 않는다. 일부 양태에서, 희석 서브시스템은 도 15에 제시된 희석 서브시스템(30)을 포함한다. 일부 양태에서, 희석 서브시스템(30)은 세포 현탁액 유입구(311)를 포함하며, 유입구는 배관(312)을 통해 세포 변형 서브시스템에 유체 연결된다. 일부 양태에서, 세포 현탁액 유입구(311)는 백과 같은 용기(306)에 추가로 유체 연결되고, 용기에 대한 연결은 배출구(310)를 통해 이루어질 수 있다. 일부 양태에서, 용기(306)는 플레이트(309)에 접촉할 수 있다. 일부 경우에, 플레이트(309)는 온도 조절식 플레이트, 예컨대 가열식, 냉각식, 또는 비교적 일정한 온도를 유지하는 플레이트일 수 있다. 일부 양태에서, 용기(306)는 샘플 벌브(302)에 추가로 연결된다. 일부 양태에서, 샘플과 같은 유체는 용기(306)로부터 샘플 벌브(302) 내로 흐를 수 있다. 일부 경우에, 샘플 벌브는 용접으로 제거하여, 샘플 벌브 내의 유체를 분석할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(306)는 유입구(310) 및 배관(312)을 통해 펌프 배관 서브어셈블리(308)와 폐기물 배출구(300)에 유체 연결된다. 용기(306)는 배출구(305) 및 배관(312)을 통해 응집물 필터(304)에 추가로 유체 연결될 수 있다. 응집물 필터(304)는 배관(312)을 통해 펌브 배관 서브어셈블리(308)에 연결될 수 있고, 추가로 배출구(314)를 통해 인큐베이션 서브시스템(40)과 같은 인큐베이션 서브시스템에 유체 연결될 수 있다. 추가로 도 15을 참조하면, TW는 배관 용접을 나타내고; SB는 용매 결합을 나타내고; TS는 밀봉을 나타낸다.
일부 양태에서, 도 15의 희석 서브시스템 구성요소는 도 6 내지 도 10에 제시된 것과 같이 POC 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있다. 위에서 논의된 것과 같은 일부 양태에서, 희석 서브시스템 구성요소는 희석이 필요하지 않은 경우에 현장 진료 시스템으로부터 생략될 수 있다. 일부 양태에서, 희석 서브시스템은, 용기(306)가 온도 조절식 플레이트와 접촉되는 경우에, 인큐베이션 서브시스템(구역 4)으로서 작용할 수도 있다.
일부 양태에서, 희석 서브시스템은 용기를 칭량하기 위한 저울 시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 용기를 칭량하기 위한 저울 시스템은 장력 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 용기를 칭량하기 위한 저울 시스템은 압축 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 용기를 칭량하기 위한 저울 시스템은 직선 막대형 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 희석 서브시스템은 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액의 세포에 첨가되는 완충액의 양을 측정하기 위한 저울 시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 완충액의 양을 측정하기 위한 저울 시스템은 장력 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 완충액의 양을 측정하기 위한 저울 시스템은 압축 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 완충액의 양을 측정하기 위한 저울 시스템은 직선 막대형 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 희석 서브시스템은 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 수용하도록 구성된 용기에 결합되도록 구성된 적어도 하나의 배출구를 포함한다. 일부 양태에서, 용기는 적어도 하나의 유입구 및 적어도 하나의 배출구를 포함하는 백(bag)이다. 일부 양태에서, 용기는 도 20에 제시된 백(80)과 같은 백이다.
일부 양태에서, 희석 서브시스템은, 용기와 접촉하여 용기를 위아래로 진탕하도록 구성된 플랫폼을 포함하는 교반 시스템을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 용기와 접촉하는 플랫폼을 포함하는 제1 교반 시스템은, 세포 현탁액 또는 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액 또는 희석된 세포 현탁액의 균질성을 촉진하기 위해 용기를 위아래로 진탕하여 세포 현탁액을 교반하도록 구성된다. 일부 양태에서, 희석 서브시스템은, 용기에 접촉하여, 도 25에 제시된 것과 같이, 용기에 접촉한 상태로 전후로 이동하도록 구성된 플레이트를 포함하는 제1 교반 시스템을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 교반 시스템은 상기 시스템의 프레임의 일부이다.
일부 양태에서, 희석 서브시스템은 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액 및 희석된 세포 현탁액을 비추도록 구성된 조명 시스템을 추가로 포함한다. 이와 같은 조명 시스템은 작업자가 세포 응집물 또는 세포 잔해와 같은 바람직하지 않은 물질에 대해 용기를 육안으로 검사할 수 있게 한다. 일부 양태에서, 희석 서브시스템은, 용기와 접촉하여 용기를 위아래로 진탕하도록 구성된 플랫폼을 포함하는 제2 교반 시스템을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 제2 교반 시스템은 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액 또는 희석된 세포 현탁액의 균질성을 촉진하기 위해 용기를 위아래로 진탕시켜 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액 또는 희석된 세포 현탁액을 교반하도록 구성된다. 일부 양태에서, 희석 서브시스템은, 용기에 접촉하여, 도 25에 제시된 것과 같이, 용기에 접촉한 상태로 전후로 이동하도록 구성된 플레이트를 포함하는 제2 교반 시스템을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 교반 시스템은 상기 시스템의 프레임의 일부이다. 일부 양태에서, 희석 서브시스템은 유체 연결된 서브시스템들 간에 유체를 이동시키도록 구성된 적어도 하나의 펌프를 포함한다.
일부 양태에서, 희석 서브시스템은 다음 구성요소 중 하나 이상을 추가로 포함한다: 세포 응집물 필터, 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 샘플링 벌브, 및 카보이.
4. 인큐베이션 서브시스템(구역 4)
일부 양태에서, 본원에 기술된 것과 같은 세포를 가공하기 위한 시스템은 인큐베이션 서브시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 희석된 세포 현탁액은 희석 서브시스템으로부터 인큐베이션 서브시스템으로 흐르는데, 여기서 희석된 세포 현탁액은 인큐베이션 서브시스템의 용기에서 인큐베이션될 수 있다. 일부 양태에서, 인큐베이션 온도는 약 10℃ 내지 약 40℃, 약 15℃ 내지 약 40℃, 약 20℃ 내지 약 40℃, 약 25℃ 내지 약 40℃, 또는 약 30℃ 내지 40℃의 범위이다. 일부 경우에, 세포 변형 후에, 희석 단계가 필요하지 않을 수 있으므로, 희석 서브시스템은 시스템에 포함되지 않고 인큐베이션 서브시스템은 세포 변형 서브시스템에 유체 연결된다. 일부 경우에, 인큐베이션 서브시스템은 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 희석시켜 희석된 세포 현탁액을 형성하는 데 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 인큐베이션 서브시스템은 하나 이상의 추가 유입구, 예컨대 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 구역 4가 희석할 수 있도록 구역 4에 완충액을 전달하기 위한 유입구를 추가로 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 인큐베이션 서브시스템은 도 16에 제시된 희석 서브시스템(40)을 포함한다. 일부 양태에서, 인큐베이션 서브시스템(40)은 희석된 세포 현탁액 유입구(411)를 포함하며, 여기서 유입구는 배관(412)을 통해 희석 서브시스템에 유체 연결된다. 일부 양태에서, 세포 현탁액 유입구(411)는 백과 같은 용기(406)에 추가로 유체 연결되고, 용기에 대한 연결은 배출구(410)를 통해 이루어질 수 있다. 일부 양태에서, 용기(406)는 플레이트(409)에 접촉할 수 있다. 일부 경우에, 플레이트(409)는 온도 조절식 플레이트, 예컨대 가열식, 냉각식, 또는 비교적 일정한 온도를 유지하는 플레이트일 수 있다. 일부 양태에서, 용기(406)는 샘플 벌브(402)에 추가로 유체 연결된다. 일부 양태에서, 샘플과 같은 유체는 용기(406)로부터 샘플 벌브(402) 내로 흐를 수 있다. 일부 경우에, 샘플 벌브는 용접으로 제거하여, 샘플 벌브 내의 유체를 분석할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(406)는 유입구(410) 및 배관(412)을 통해 펌프 배관 서브어셈블리(408)와 폐기물 배출구(400)에 유체 연결된다. 용기(406)는 배출구(405) 및 배관(412)를 통해 응집물 필터(404)에 추가로 유체 연결될 수 있다. 응집물 필터(404)는 배관(412)을 통해 펌브 배관 서브어셈블리(408)에 연결될 수 있고, 추가로 배출구(414)를 통해 세포 세척 서브시스템(50)과 같은 세포 세척 서브시스템에 유체 연결될 수 있다. 추가로 도 16을 참조하면, TW는 배관 용접을 나타내고; SB는 용매 결합을 나타내고; TS는 밀봉을 나타낸다.
일부 양태에서, 도 16의 인큐베이션 서브시스템 구성요소는 도 6 내지 도 10에 제시된 것과 같이 POC 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있다. 위에서 논의된 것과 같은 일부 양태에서, 희석 서브시스템 구성요소는 희석이 필요하지 않은 경우에 현장 진료 시스템으로부터 생략될 수 있고, 이와 같이 구역 2는 구역 4에 유체 연결된다. 일부 양태에서, 인큐베이션 서브시스템이 완충액, 예컨대 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 희석하기 위한 완충액을 도입하기 위한 하나 이상의 유입구를 포함하는 경우, 인큐베이션 서브시스템은 희석 서브시스템(구역 3)으로서 작용할 수도 있다.
일부 양태에서, 인큐베이션 서브시스템은 희석된 세포 현탁액의 온도를 조절하도록 구성된 온도 조절 장치를 포함한다. 일부 양태에서, 온도 조절 장치는 가열식 플레이트이다. 일부 양태에서, 가열식 플레이트는 도 19에 제시된 것과 같은 가열식 플레이트(70)이다. 일부 양태에서, 플레이트는 상기 시스템의 프레임의 일부이다. 일부 양태에서, 인큐베이션 서브시스템은 희석된 세포 현탁액의 세포에 추가되는 완충액의 양을 측정하도록 구성된 저울 시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 저울 시스템은 장력 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 저울 시스템은 압축 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 저울 시스템은 직선 막대형 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 인큐베이션 서브시스템은, 용기와 접촉하여 용기를 위아래로 진탕하도록 구성된 플랫폼을 포함하는 제1 교반 시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 용기와 접촉하는 플랫폼을 포함하는 제1 교반 시스템은 희석된 세포 현탁액 또는 인큐베이션된 세포 현탁액의 균질성을 촉진하기 위해 용기를 위아래로 진탕하여 희석된 세포 현탁액을 교반하도록 구성된다. 일부 양태에서, 인큐베이션 서브시스템은, 용기와 접촉하여 용기를 위아래로 진탕하도록 구성된 플랫폼을 포함하는 제2 교반 시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 용기와 접촉하는 플랫폼을 포함하는 제2 교반 시스템은 희석된 세포 현탁액 또는 인큐베이션된 세포 현탁액의 균질성을 촉진하기 위해 용기를 위아래로 진탕하여 세포 현탁액을 교반하도록 구성된다. 일부 양태에서, 제1 및 제2 교반 시스템은 상기 시스템의 프레임의 일부이다. 일부 양태에서, 인큐베이션 서브시스템은 유체 연결된 서브시스템들 간에 유체를 이동시키도록 구성된 적어도 하나의 펌프를 포함한다. 일부 양태에서, 인큐베이션 서브시스템은 다음 구성요소 중 하나 이상을 추가로 포함한다: 세포 응집물 필터, 배관, 배관 이음부, 커넥터, 및 클램프.
5. 세포 세척 서브시스템
일부 양태에서, 본원에 기술된 것과 같은 세포를 가공하기 위한 시스템은 세포 세척 서브시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 인큐베이션된 세포 현탁액은 인큐베이션 서브시스템으로부터 세포 세척 서브시스템으로 흐르는데, 여기서 인큐베이션된 세포 현탁액은 동결보호 배지와 같은 원하는 완충액 내로 세척될 수 (예를 들어 완충액 교환될 수) 있다. 완충액 교환은 TFF 필터 어셈블리와 같은 구역 5의 하나 이상의 세포 현탁 장치를 사용하여 이루어질 수 있다. 일부 양태에서, 세포 세척 서브시스템은 현장 진료 시스템에서 생략될 수 있고, 대신에 구역 1의 구성요소가 세포 세척 서브시스템(구역 5)에 의해 수행되는 세포 세척을 수행하는 데 사용될 수 있다.
일부 양태에서, 세포 세척 서브시스템은 도 17에 제시된 세포 세척 서브시스템(50)을 포함한다. 일부 양태에서, 세포 세척 서브시스템(50)은 인큐베이션된 세포 현탁액 유입구(528)를 포함하며, 여기서 유입구는 배관(500)을 통해 인큐베이션 서브시스템(40)과 같은 인큐베이션 서브시스템에 유체 연결된다. 일부 양태에서, 인큐베이션된 세포 현탁액 유입구(528)는 배관(500)을 통해 접선 유동 여과(TFF) 필터 어셈블리와 같은 세포 현탁 장치(526)에 유체 연결된다. TFF 필터 어셈블리와 같은 세포 현탁 장치(526)는 세포 현탁 장치(526)의 유입구 및 배출구에 연결된 압력 센서(524)를 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 세포 현탁 장치(526)는 배관(500) 및 펌프 배관 서브어셈블리(506)를 통해 용기(512)에 추가로 유체 연결된다. 일부 양태에서, 용기(512)는 백이다. 일부 양태에서, 용기(512)는 플레이트(514)에 접촉하는데, 일부 경우에 플레이트는 온도 조절식 플레이트, 예컨대 가열식, 냉각식, 또는 비교적 일정한 온도를 유지하는 플레이트일 수 있다. 일부 양태에서, 용기(512)는 샘플 벌브(518)에 유체 연결된다. 일부 양태에서, 샘플과 같은 유체는 용기(512)로부터 샘플 벌브(518) 내로 흐를 수 있다. 일부 경우에, 샘플 벌브는 용접으로 제거하여, 샘플 벌브 내의 유체를 분석할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(512)는 유입구(515) 및 배출구(511)를 포함하고, 유입구 및 배출구는 배관에 결합된다. 일부 양태에서, 세포 세척 서브시스템은 0.2 μm 공기 필터일 수 있는 필터(510)에 결합되는 완충액 유입구(520)를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 세척 서브시스템은 배관(500)에 의해 용기(512)에 유체 연결되는 완충액 유입구(523)를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 세척 서브시스템(50)은 보존 배지 유입구(504)를 포함하는데, 상기 유입구는 0.2 μm 공기 필터일 수 있는 필터(510)에 결합되고, 배관(500)을 통해 용기(512)에 추가로 유체 연결된다. 일부 양태에서, 세포 세척 서브시스템은 폐기물 배출구(522 및 516)를 포함한다. 일부 양태에서, 용기(512)는 배관(500)을 통해 40 μm 응집체 필터일 수 있는 응집물 필터(508)에 유체 연결된다. 일부 양태에서, 응집물 필터(508)는 배관(500) 및 펌프 배관 서브어셈블리(506)를 통해 유출구(502)에 유체 연결되고, 배출구(502)는 용기 충진 서브시스템(60)과 같은 용기 충진 서브시스템에 유체 연결된다. 추가로 도 17을 참조하면, TW는 배관 용접을 나타내고; SB는 용매 결합을 나타내고; TS는 밀봉을 나타낸다.
일부 양태에서, 도 17의 세포 세척 서브시스템 구성요소는 도 6 내지 도 10에 제시된 것과 같이 POC 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있다. 일부 양태에서, 세포 세척 서브시스템은 현장 진료 시스템으로부터 생략될 수 있고, 현탁액 제조 서브시스템(구역 1)의 구성 요소는 세포 세척을 수행하는 데, 예컨대 인큐베이션된 세포 현탁액을 보존 배지(예를 들어 동결 보존 배지)로 교환하는 데 사용될 수 있다.
일부 양태에서, 세포 세척 서브시스템은 완충액 교환 작업을 수행하도록 구성된 장치를 포함한다. 일부 양태에서, 장치는 완충액 교환 작업을 수행하도록 구성된 접선 유동 여과 시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 세포 세척 서브시스템은 완충액 교환 작업 도중 세포에 첨가되는 완충액의 양을 측정하도록 구성된 저울 시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 저울 시스템은 장력 로드 셀이다. 일부 양태에서, 저울 시스템은 압축 로드 셀이다. 일부 양태에서, 저울 시스템은 직선 막대형 로드 셀이다. 일부 양태에서, 세포 세척 서브시스템은 용기에 결합되도록 구성된 적어도 하나의 배출구를 포함한다. 일부 양태에서, 용기는 적어도 하나의 유입구 및 적어도 하나의 배출구를 포함하는 백(bag)이다. 일부 양태에서, 세포 세척 서브시스템은, 용기와 접촉하여 용기를 위아래로 진탕하도록 구성된 플랫폼을 포함하는 교반 시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 용기와 접촉하는 플랫폼을 포함하는 교반 시스템은, 희석된 세포 현탁액 또는 보존 배지에 현탁된 세포의 균질성을 촉진하기 위해 용기를 위아래로 진탕하여 인큐베이션된 세포 현탁액 또는 보존 배지에 현탁된 세포를 교반하도록 구성된다. 일부 양태에서, 세포 세척 서브시스템은 희석된 세포 현탁액 또는 보존 배지에 현탁된 세포를 비추도록 구성된 조명 시스템을 포함한다. 이와 같은 조명 시스템은 작업자가 세포 응집물 또는 세포 잔해와 같은 바람직하지 않은 물질에 대해 용기를 육안으로 검사할 수 있게 한다. 일부 양태에서, 세포 세척 서브시스템은 다음 구성요소 중 하나 이상을 추가로 포함한다: 세포 응집물 필터, 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 샘플링 벌브, 공기 필터, 및 카보이.
일부 양태에서, 보존 배지는 동결보호 배지이다. 동결 보호 배지는 다음과 같은 당업계에 알려진 임의의 동결보호 배지일 수 있지만 이에 한정되지는 않는다: DMSO, 글리세롤, 에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 수크로오스, 트레할로스, 2-메틸-2,4-펜탄디올(MPD), 소르비톨, 프롤린, 글리세롤 3-포스페이트, 및 포름아미드.
6. 용기 충진 서브시스템
일부 양태에서, 본원에 기술된 것과 같은 세포를 가공하기 위한 시스템은 용기 충진 서브시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 용기 충진 서브시스템은, 용기 충진 서브시스템의 하나 이상의 응집물 필터를 사용하여 보존 배지에 현탁된 세포로부터 응집물 및 잔해를 제거하고, 이어서 가공된 세포로 서브시스템의 하나 이상의 용기를 충진하는 데 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 용기 충진 서브시스템은, 가공된 세포를 포함하는 하나 이상의 용기 각각이 원하는 부피로 충진되는 것을 보장하기 위한 저울 시스템을 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 본원에 기술된 것과 같은 세포를 가공하기 위한 시스템은 도 18에 제시된 용기 충진 서브시스템(60)을 포함한다. 일부 양태에서, 용기 충진 서브시스템(60)은 보존 배지(614)에 현탁된 세포를 수용하기 위한 유입구를 포함하며, 유입구는 배관(613)을 통해 용기(605)에 유체 연결된다. 일부 경우에, 용기(605)는 백일 수 있다. 일부 양태에서, 용기(605)는 플레이트(606)와 접촉할 수 있으며, 플레이트는 온도 조절식 플레이트, 예컨대 가열식, 냉각식, 또는 비교적 일정한 온도를 유지하는 플레이트일 수 있다. 일부 양태에서, 용기(605)는 샘플 벌브(608)에 유체 연결된다. 일부 양태에서, 샘플과 같은 유체는 용기(406)로부터 샘플 벌브(608) 내로 흐를 수 있다. 일부 경우에, 샘플 벌브는 용접으로 제거하여, 샘플 벌브 내의 유체를 분석할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(605)는 배관에 결합된 유입구(609)를 포함한다. 일부 양태에서, 용기(605)는 배출구(607), 배관(613), 및 펌프 배관 서브어셈블리(604)를 통해 배출구(600)에 추가로 유체 연결되고, 배출구는 수용된 가공된 세포를 위한 용기에 결합되도록 구성된다. 일부 양태에서, 용기 충진 서브시스템(60)은 폐기물 배출구(612)를 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 용기 충진 서브시스템(60)은 완충액 유입구(610)를 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 용기 충진 서브시스템(60)은 배관(613)을 통해 용기(605)에 유체 연결되는 응집물 필터(602)를 추가로 포함한다. 추가로 도 18을 참조하면, TW는 배관 용접을 나타내고; SB는 용매 결합을 나타내고; TS는 밀봉을 나타낸다.
일부 양태에서, 도 18의 용기 충진 서브시스템 구성요소는 도 6 내지 도 10에 제시된 것과 같이 POC 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있다. 일부 양태에서, 가공된 세포를 수용하기 위한 용기의 수는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115, 120, 125, 130, 135, 140, 145, 150, 155, 160, 165, 170, 175, 180, 185, 190, 195, 또는 200개의 개별 용기, 예컨대 백 또는 바이알일 수 있다. 일부 양태에서, 가공된 세포를 수용하기 위한 용기의 수는 5 내지 20개 용기일 수 있다.
일부 양태에서, 용기 충진 서브시스템(60)은 도 21에 제시된 용기 충진 시스템(90)과 같은 용기 충진 시스템을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 용기 충진 스테이션(90)은 하우징(900)을 포함한다. 일부 양태에서, 충진 스테이션은 유입구(906)를 포함하는 용기(904)를 더 포함하며, 용기는 저울 시스템(902)과 접촉한다. 용기(904)는 밸브(908)에 추가로 결합될 수 있다. 저울 시스템(902)은 예를 들어 장력 로드 셀, 압축 로드 셀, 또는 직선 막대형 로드 셀을 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 용기 충진 스테이션은 용기(918)을 포함하고, 용기는 밸브(920)에 결합된 유입구(922)를 포함한다. 용기(918)는 배관(910)에 결합된 배출구(916)를 또한 포함한다. 또한, 용기(918)는 교반 시스템(914)과 접촉한다. 용기 충진 스테이션(90)은 스테이션 내의 유체 흐름을 조절하기 밸브(예컨대 912)를 추가로 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 용기 충진 서브시스템은 하나 이상의 용기에 첨가되는 보존 배지에 현탁된 세포의 양을 측정하도록 구성된 저울 시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 저울 시스템은 장력 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 저울 시스템은 압축 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 저울 시스템은 직선 막대형 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 용기 충진 서브시스템은, 용기와 접촉하여 용기를 위아래로 진탕하도록 구성된 플랫폼을 포함하는 교반 시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 용기와 접촉하는 플랫폼을 포함하는 교반 시스템은, 하나 이상의 용기 내의 보존 배지에 현탁된 세포의 균질성을 촉진하기 위해 용기를 위아래로 진탕하여 보존 배지에 현탁된 세포를 교반하도록 구성된다. 일부 양태에서, 용기 충진 서브시스템은 하나 이상의 용기 내의 보존 배지에 현탁된 세포를 비추도록 구성된 조명 시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 용기 충진 서브시스템은 하나 이상의 용기에 결합되도록 구성된 하나 이상의 배출구를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 세척 서브시스템의 하나 이상의 용기는 적어도 하나의 유입구 및 적어도 하나의 배출구를 포함하는 하나 이상의 백을 포함한다. 일부 양태에서, 용기 충진 서브시스템은 서브시스템 내에서 또는 유체 연결된 서브시스템들 간에 유체를 이동시키도록 구성된 적어도 하나의 펌프를 포함한다. 일부 양태에서, 용기 충진 서브시스템은 다음 구성요소 중 하나 이상을 추가로 포함한다: 세포 응집물 필터, 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 및 샘플링 벌브.
7. 온도 조절 서브시스템
일부 양태에서, 본원에 기술된 것과 같은 세포를 가공하기 위한 시스템은 온도 조절 서브시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 온도 조절 서브시스템은 희석 서브시스템(구역 3) 및 인큐베이션 서브시스템(구역 4)에 의해 수행되는 기능을 달리 수행하는 데 사용될 수 있다. 예를 들어, 일부 양태에서, 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액은 세포 변형 서브시스템으로부터 온도 조절 서브시스템으로 흐르며, 여기서 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액은 온도 조절 서브시스템의 용기 내에 놓일 수 있다. 일부 양태에서, 온도 조절 서브시스템은, 예컨대 인큐베이션 전에 원하는 세포 농도 또는 원하는 완충액 조건을 달성하기 위해, 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 원하는 유체 또는 완충액에 희석하고/하거나 건조 시약을 세포 현탁액에 첨가하는 데 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 희석된 세포 현탁액은 온도 조절 서브시스템의 용기에서 인큐베이션될 수 있다. 일부 양태에서, 인큐베이션 온도는 약 10℃ 내지 약 40℃, 약 15℃ 내지 약 40℃, 약 20℃ 내지 약 40℃, 약 25℃ 내지 약 40℃, 또는 약 30℃ 내지 40℃의 범위이다. 일부 양태에서, 용기는 샘플 벌브에 추가로 유체 연결된다. 일부 양태에서, 샘플과 같은 유체는 용기로부터 샘플 벌브 내로 흐를 수 있다. 일부 경우에, 샘플 벌브는 용접으로 제거하여, 샘플 벌브 내의 유체를 분석할 수 있다. 일부 양태에서, 온도 조절 서브시스템은 희석된 세포 현탁액의 온도를 조절하도록 구성된 온도 조절 장치를 포함한다. 일부 양태에서, 온도 조절 장치는 가열식 플레이트이다. 일부 양태에서, 가열식 플레이트는 도 19에 제시된 것과 같은 가열식 플레이트(70)이다. 일부 양태에서, 플레이트는 상기 시스템의 프레임의 일부이다.
일부 양태에서, 온도 조절 서브시스템 구성 요소는 도 6 내지 도 10에 제시된 것과 같이, POC 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있다.
일부 양태에서, 온도 조절 서브시스템은 용기를 칭량하기 위한 저울 시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 용기를 칭량하기 위한 저울 시스템은 장력 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 용기를 칭량하기 위한 저울 시스템은 압축 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 용기를 칭량하기 위한 저울 시스템은 직선 막대형 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 온도 제어 서브시스템은 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액의 세포에 첨가되는 완충액의 양을 측정하기 위한 저울 시스템을 포함한다. 일부 양태에서, 완충액의 양을 측정하기 위한 저울 시스템은 장력 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 완충액의 양을 측정하기 위한 저울 시스템은 압축 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 완충액의 양을 측정하기 위한 저울 시스템은 직선 막대형 로드 셀을 포함한다. 일부 양태에서, 온도 조절 서브시스템은 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 수용하도록 구성된 용기에 결합되도록 구성된 적어도 하나의 배출구를 포함한다. 일부 양태에서, 용기는 적어도 하나의 유입구 및 적어도 하나의 배출구를 포함하는 백(bag)이다. 일부 양태에서, 용기는 도 20에 제시된 백(80)과 같은 백이다.
일부 양태에서, 온도 조절 서브시스템은, 용기와 접촉하여 용기를 위아래로 진탕하도록 구성된 플랫폼을 포함하는 교반 시스템을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 용기와 접촉하는 플랫폼을 포함하는 제1 교반 시스템은, 세포 현탁액 또는 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액 또는 희석된 세포 현탁액의 균질성을 촉진하기 위해 용기를 위아래로 진탕하여 세포 현탁액을 교반하도록 구성된다. 일부 양태에서, 희석 서브시스템은, 용기에 접촉하여, 도 25에 제시된 것과 같이, 용기에 접촉한 상태로 전후로 이동하도록 구성된 플레이트를 포함하는 제1 교반 시스템을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 교반 시스템은 상기 시스템의 프레임의 일부이다.
일부 양태에서, 온도 조절 서브시스템은 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액 및 희석된 세포 현탁액을 비추도록 구성된 조명 시스템을 추가로 포함한다. 이와 같은 조명 시스템은 작업자가 세포 응집물 또는 세포 잔해와 같은 바람직하지 않은 물질에 대해 용기를 육안으로 검사할 수 있게 한다. 일부 양태에서, 희석 서브시스템은, 용기와 접촉하여 용기를 위아래로 진탕하도록 구성된 플랫폼을 포함하는 제2 교반 시스템을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 제2 교반 시스템은 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액 또는 희석된 세포 현탁액의 균질성을 촉진하기 위해 용기를 위아래로 진탕시켜 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액 또는 희석된 세포 현탁액을 교반하도록 구성된다. 일부 양태에서, 희석 서브시스템은, 용기에 접촉하여, 도 25에 제시된 것과 같이, 용기에 접촉한 상태로 전후로 이동하도록 구성된 플레이트를 포함하는 제2 교반 시스템을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 교반 시스템은 상기 시스템의 프레임의 일부이다. 일부 양태에서, 희석 서브시스템은 유체 연결된 서브시스템들 간에 유체를 이동시키도록 구성된 적어도 하나의 펌프를 포함한다.
일부 양태에서, 온도 조절 서브시스템은 다음 구성요소 중 하나 이상을 추가로 포함한다: 세포 응집물 필터, 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 샘플링 벌브, 및 카보이.
ii. 저장조
일부 양태에서, 본원에 기술된 것과 같은 세포를 가공하기 위한 시스템은 시스템의 각 구역에 하나 이상의 용기를 포함한다. 일부 경우에, 이들 용기는 "저장조"로서 지칭될 수 있으며, 저장조(또는 용기)는 도 33 및 도 34에 제시된 것과 같은 다양한 상이한 부피를 가질 수 있다.
도 33을 참조하면, 일부 경우에, 도 33의 프로세스 저장조 1로서 표시된 구역 1은 도 33의 완충액 A와 같은 원하는 완충액으로 프라이밍될 수 있으며, 여기서 완충액은 임의의 원하는 완충액일 수 있다. 이와 같이, 세포 단리 장치, TFF 필터 어셈블리, 응집물 필터 등과 같은 구역 1의 구성요소는 원하는 완충액으로 프라이밍된다. 일부 경우에, SQZ 저장조, SQZ 출력믈 저장조, 및 도 33의 인큐베이션 저장조로서 표시된 구역 2, 3, 및 4는 도 33의 완충액 B와 같은 원하는 완충액으로 프라이밍될 수 있으며, 여기서 완충액은 임의의 원하는 완충액일 수 있다. 이와 같이, 세포 변형 장치, 응집물 필터 등과 같은 구역 2~4의 구성요소는 원하는 완충액으로 프라이밍될 수 있다. 일부 경우에, 완충액 B는 구역 2에만 연결되지만, 구역 2는 구역 3과 유체 연통하고, 구역 3은 구역 4와 연통하여, 완충액 B가 구역 2~4 각각을 프라이밍할 수 있다. 일부 양태에서, 도 33의 인프로세스 저장조 2 및 제형 저장조로 표시된 구역 5 및 6은 DMSO 완충액가 같은 원하는 완충액으로 프라이밍될 수 있다. 이와 같이, TFF 필터 어셈블리, 응집물 필터 등과 같은 구역 5 및 6의 구성요소는 원하는 완충액으로 프라이밍될 수 있다. 일부 경우에, DMSO와 같은 완충액은 구역 5와 유체 연통하고, 구역 5는 구역 6과 유체 연통하여, 원하는 완충액이 구역 5와 구역 6 모두를 프라이밍할 수 있다.
일부 양태에서, 저장조(용기)의 부피는 약 0.10 L 내지 약 4.00 L, 약 0.20 L 내지 약 4.00 L, 약 0.30 L 내지 약 4.00 L, 약 0.40 L 내지 약 4.00 L, 약 0.50 L 내지 약 4.00 L, 약 0.75 L 내지 약 4.00 L, 약 1.00 L 내지 약 4.00 L, 약 1.25 L 내지 약 4.00 L, 약 1.50 L 내지 약 4.00 L, 약 1.75 L 내지 약 4.00 L, 약 2.0 L 내지 약 4.00 L, 약 2.25 L 내지 약 4.00 L, 약 2.50 L 내지 약 4.00 L, 약 2.75 L 내지 약 4.00 L, 약 3.00 L 내지 약 4.00 L, 약 3.25 L 내지 약 4.00 L, 약 3.50 L 내지 약 4.00 L, 약 3.75 L 내지 약 4.00 L, 또는 약 4.00 L일 수 있다.
일부 양태에서, 시스템의 저장조는 완충액의 공급부에 유체 연결될 수 있다. 일부 양태에서, 적어도 하나의 완충액 라인은 적어도 하나의 저장조에 연결될 수 있다. 일부 양태에서, 적어도 하나의 제1 저장조는 적어도 하나의 상이한 제2 저장조에 연결된다. 일부 양태에서, 완충액은 제1 저장조로부터 제2 저장조로 운반될 수 있다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 도 33에 제시된 것과 같이 적어도 1개, 적어도 2개, 또는 적어도 3개의 프라임 섹터를 포함한다.
iii. 압력 시험
일부 양태에서, 본원에 기술된 것과 같은 세포를 가공하기 위한 시스템은 하나 이상의 서브시스템의 압력 시험을 거칠 수 있다. 예를 들어, 압력 시험은 도 32의 개략도에 제시된 것과 같이 이루어질 수 있다. 도 32를 참조하면, 현탁액 제조 서브시스템은 10 내지 30 psi의 압력 범위에서 시험될 수 있고, 세포 현탁 장치, 세포 단리 장치, 백혈구 제거 필터, 및 응집물 필터와 같은 구성 요소가 압력 시험을 거칠 수 있다. 일부 양태에서, 세포 변형 서브시스템은 약 80 psi에서 시험될 수 있고, 응집물 필터 및 세포 변형 장치와 같은 구성 요소가 압력 시험을 거칠 수 있다. 일부 양태에서, 희석 서브시스템, 인큐베이션 서브시스템, 세포 세척 서브시스템, 및 용기 충진 서브시스템은 도 32에 제시된 것과 같이 압력 시험을 위해 동일한 라인에 연결될 수 있고, 압력 시험은 약 10 psi에서 수행될 수 있다. 응집물 필터 및 TFF 필터 조립체와 같은 구성요소는 압력 무결성 시험을 거칠 수 있다. 일부 양태에서, 압력 시험은 시스템 내의 공기압을 조절하는 전자 조절기(electronic regulator)의 사용을 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 전자 조절기는 시험된 압력 섹터 각각에 대한 압력을 조절한다. 일부 양태에서, 밸브는 도 32의 리본 형상에 의해 도시된 것과 같이 시험된 각 압력 섹터 내로의 공기 흐름을 조절한다. 일부 양태에서, 압력 시험은 일회용 키트의 구성요소가 시스템의 프레임에 결합된 후 각 키트의 무결성을 시험하는 데 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 세포 현탁 서브시스템(구역 1), 세포 변형 서브시스템(구역 2), 희석 서브시스템(구역 3), 및 용기 충진 서브시스템(구역 6) 각각은 개별적으로 압력 시험되고, 인큐베이션 서브시스템(구역 4) 및 세포 세척 서브시스템(구역 5)은 함께 압력 시험된다.
c. 가공용 세포
일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 적혈구(RBC)를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 단핵 세포(PBMC)를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 활성화 항원 담체(AAC) 세포를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 내약성 유도 항원 담체(TAC) 세포를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 항원 제시 세포(APC)를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 T 세포를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 B 세포를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 대식세포를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 자연 살해(NK) 세포를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 수지상 세포를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 면역 세포를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 단핵구를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 단핵구 백혈구를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 호산구를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 호염기구를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 자연 살해 T(NKT) 세포를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 비반 세포를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 호중구를 가공한다. 일부 양태에서, 세포 변형 서브시스템은 세포의 세포 막에 섭동을 일으켜 페이로드를 세포 내로 진입시키도록 구성된 하나 이상의 세포 변형 협착부를 포함한다. 일부 양태에서, 페이로드는 하나 이상의 재프로그래밍 인자를 포함한다. 일부 양태에서, 페이로드는 하나 이상의 핵산을 포함한다. 일부 양태에서, 페이로드는 하나 이상의 분화 인자를 포함한다. 일부 양태에서, 페이로드는 하나 이상의 뉴런 재프로그래밍 인자를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 시스템은 세포 치료제, 예를 들어 세포 기반 치료제용 세포를 가공한다. 일부 양태에서, 가공을 위한 세포는 LEUKOPAK과 같은 백혈구제거 산물 또는 유사한 산물이 풍부한 세포를 포함할 수 있다.
d. 프로세스 흐름
위에서 논의된 것과 같이, 본원에 기술된 것과 같은 세포를 가공하기 위한 현장 진료 시스템은 세포를 가공하기 위한 하나 이상의 서브시스템, 즉, 구역을 포함할 수 있다. 서브시스템 각각은 제2 서브시스템에 유체 연결되어 구역들 간의 유체 교환을 가능하게 할 수 있다. 일부 양태에서, 본원에 기술된 것과 같은 세포를 가공하기 위한 시스템은 현탁액 제조 서브시스템(구역 1), 세포 변형 서브시스템(구역 2), 희석 서브시스템(구역 3), 인큐베이션 서브시스템(구역 4), 세포 세척 서브시스템(구역 5), 및 용기 충진 서브시스템(구역 6)을 포함한다. 일부 양태에서, 이하에서 추가로 기술되는 것과 같이, 본원에 기술된 시스템에 대한 프로세스 흐름은 도 26~도 31에 제시되어있다.
RBC 및 PBMC를 위한 프로세스 흐름은 일부 경우에 동일할 수 있지만, 일부 양태는 상이할 수 있다. 예를 들어, 일부 양태에서, RBC 및 PBMC를 위한 프로세스 흐름은 현탁액 제조 서브시스템(구역 1) 및 세포 변형 서브시스템에서 상이하다. 일부 양태에서, RBC 및 PBMC를 위한 현탁액 제조 서브시스템의 프로세스 흐름은 희석 서브시스템(구역 3), 인큐베이션 서브시스템(구역 4), 세포 세척 서브시스템(구역 5), 및 용기 충진 서브시스템(구역 6)에서 동일하다.
이제 도 26을 참조하면, 일부 양태에서, 현장 진료 시스템의 프로세스 흐름은 18000에 제시된 것과 같은 흐름이다. 검은 실선(18008)은 흐름 경로를 나타낸다는 것을 주목한다. 회색 육각형(18002)은 필터를 나타내며, 이는 일부 양태에서 공기 필터이다. 검은색 원(18010)은 배관 이음부를 나타낸다. 회색 원(18012)은 펌프를 나타낸다. 검은색 리본(18023)은 밸브를 나타내며, 이는 일부 양태에서 비례 핀치 밸브일 수 있다. 회색 리본(18014)은 밸브를 나타내며, 이는 일부 양태에서 핀치 밸브일 수 있다. 흰색 마름모(18020)은 압력 게이지를 나타낸다. 회색 반원(18030)은 버블 센서를 나타낸다. 물결 사각형(18050)은 흐름 센서를 나타낸다. 일부 양태에서, 용기(예컨대 18036, 18040, 및 18044)는 배관을 통해 구역 1에 유체 연결될 수 있다. 일부 양태에서, 용기(18036)는 플레이트(18034)와 접촉하며, 이는 온도 조절식 플레이트일 수 있다. 용기(18036)는 배관을 통해 필터(18032)(40 μm 응집체 필터일 수 있음) 및 용기(18028)에 추가로 유체 연결될 수 있다. 일부 양태에서, 용기(18040)는 플레이트(18038)와 접촉하며, 이는 온도 조절식 플레이트일 수 있다. 용기(18040)는 배관를 통해 용기(18028)에 유체 연결될 수 있다. 일부 양태에서, 용기(18044)는 플레이트(18042)와 접촉하며, 이는 온도 조절식 플레이트일 수 있다. 용기(18044)는 추가로 배관을 통해 용기(18028)와 유체 연통할 수 있다. 용기(18028)는 플레이트(18026)와 접촉할 수 있으며, 이는 일부 양태에서 온도 조절식 플레이트일 수 있다. 일부 양태에서, 용기(18028)는 저울 시스템, 예컨대 압축 로드 셀 또는 장력 로드 셀과 접촉할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(18028)는 배관을 통해, TFF 필터 어셈블리일 수 있는 세포 현탁 장치(18022)와 유체 연통할 수 있다. 일부 양태에서, 세포 현탁 장치(18022)는 압력 게이지(18020)과 같은 압력 게이지와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 유입구(18024)는 현장 진료 시스템의 압력 시험 구역 1을 위한 유입구로서 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 구역 1로부터의 폐기물은 배관을 통해 폐기물 용기(18004) 내로 흐를 수 있으며, 이는 일부 경우에 장력 로드 셀 또는 압축 로드 셀일 수 있는 저울 시스템(18006)과 접촉할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(18028)는 40 μm 응집물 필터일 수 있는 필터(18016)와 유체 연통하고, 추가로 배관 및 구역 1 배출구(18046)를 통해 구역 2와 유체 연통한다.
추가로 도 26을 참조하면, 구역 1은 구역 1 배출구(18046)를 통해 구역 2와 유체 연통할 수 있으며, 이 배출구는 유체(예를 들어 전달 배지에 현탁된 세포)가 구역 1에서 구역 2로 흐를 수 있도록 구역 2를 위한 유입구의 역할을 한다. 구역 1 배출구(18046)는 배관을 통해 용기(18062)와 유체 연통할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(18062)는 플레이트(18060), 예컨대 가열, 냉각, 또는 비교적 일정한 온도로 유지하기 위한 온도 조절식 플레이트와 접촉할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(18066)는 플레이트(18064)와 접촉하며, 이는 온도 조절식 플레이트일 수 있다. 일부 양태에서, 용기(18066)는 배관을 통해 용기(18062)와 유체 연통할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(18062)는 배관을 통해 용기(18058)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(18058)는 플레이트(18056), 예컨대 가열, 냉각, 또는 비교적 일정한 온도로 유지하기 위한 온도 조절식 플레이트와 접촉할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(18058)는 40 μm 응집물 필터일 수 있는 필터(18052)와 유체 연통하고, 추가로 배관을 통해 세포 변형 장치(18048)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 유입구(18054)는 구역 2의 압력 시험에 사용된다. 일부 양태에서, 세포 변형 장치(18048)는 구역 2 배출구(18059)를 통해 구역 3과 유체 연통하며, 이 배출구는 구역 3 유입구일 수도 있다.
추가로 도 26을 참조하면, 일부 양태에서, 구역 3 유입구(18059)는 배관을 통해 용기(18072)와 유체 연통할 수 있다. 용기(18072)는 장력 로드 셀 또는 압축 로드 셀일 수 있는 저울 시스템(18070)과 접촉할 수 있다. 용기(18078)는 플레이트(18076)와 접촉할 수 있으며, 이는 온도 조절식 플레이트일 수 있다. 용기(18078)는 추가로 배관을 통해 용기(18072)와 유체 연통할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(18082)는 플레이트(18080)와 접촉하며, 이는 온도 조절식 플레이트일 수 있다. 용기(18082)는 추가로 배관을 통해 용기(18072)와 유체 연통할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(18074)는 용기(18072)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(18072)는 40 μm 응집물 필터일 수 있는 필터(18068)와 유체 연통하고, 추가로 배관을 통해 구역 3 배출구(18075)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 구역 3 배출구(18075)는 구역 4의 유입구일 수도 있다. 일부 양태에서, 구역 4 유입구(18075)는 배관을 통해 용기(18088)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(18088)는 플레이트(18086)와 접촉하며, 이는 온도 조절식 플레이트일 수 있다. 일부 양태에서, 유입구(18090)은 구역 4 및 구역 3의 압력 테스트에 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 용기(18088)는 필터(18084), 예컨대 40 μm 응집물 필터와 유체 연통하고, 추가로 배관을 통해 구역 4 배출구(18092)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 구역 4 배출구(18092)는 구역 5 유입구일 수도 있다. 일부 양태에서, 구역 4 배출구(18092)는 배관을 통해 용기(18100)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(18100)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(18098)와 접촉할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(18106)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(18104)와 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(18110)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(18108)와 접촉할 수 있다. 일부 양태에서, 유입구(18102)는 구역 5의 압력 테스트에 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 용기(18100)는 TFF 필터 어셈블리일 수 있는 세포 현탁 장치(18094)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 세포 현탁 장치(18094)는 배관을 통해 용기(18100)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(18100)는 40 μm 응집물 필터일 수 있는 필터(18096)과 유체 연통하고, 추가로 배관을 통해 구역 5 배출구(18112)에 유체 연결된다. 일부 양태에서, 구역 5 배출구(18112)는 구역 6 유입구이기도 하다.
일부 양태에서, 구역 5 배출구(18112)는 배관을 통해 용기(18126)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(18126)는 저울 시스템(18122)과 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(18126)는 백라이트 조명(18124)과 추가로 접촉할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(18134)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(18132)와 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(18134)는 배관을 통해 용기(18126)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(18126)는 40 μm 응집물 필터일 수 있는 필터(18120)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 유입구(18118)는 필터(18120)와 유체 연통할 수 있다. 일부 양태에서, 유입구(18118)는 구역 6의 압력 테스트에 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 용기(18126)는 배관을 통해 용기(18130)와 유체 연통한다. 일부 경우에, 용기(18130)는 저울 시스템(18128)과 접촉한다. 일부 양태에서, 구역 5 또는 구역 6으로부터의 폐기물은 배관을 통해 폐기물 용기(18116) 내로 흐를 수 있고, 용기는 저울 시스템(18114)과 접촉할 수 있다.
이제 도 35를 참조하면, 일부 양태에서, 현장 진료 시스템의 프로세스 흐름은 19000에 제시된 것과 같은 흐름이다. 검은 실선(19012)은 흐름 경로를 나타낸다는 것에 주목한다. 회색 육각형(19002)은 필터를 나타내며, 이는 일부 양태에서 공기 필터이다. 검은색 원(19008)은 배관 이음부를 나타낸다. 회색 원(19010)은 펌프를 나타낸다. 검은색 리본(19014)은 밸브를 나타내며, 이는 일부 양태에서 비례 핀치 밸브일 수 있다. 회색 리본(19016)은 밸브를 나타내며, 이는 일부 양태에서 핀치 밸브일 수 있다. 흰색 마름모(19018)는 압력 게이지를 나타낸다. 회색 반원(19032)은 버블 센서를 나타낸다. 물결 사각형(19052)은 흐름 센서를 나타낸다. 일부 양태에서, 용기(19036)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(19038)와 접촉할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(19036)는 세포 단리 장치(19034), 예컨대 백혈구 제거 필터와 유체 연통하고, 추가로 배관을 통해 용기(19026)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(19026)는 저울 시스템(19024)과 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(19030)는 배관을 통해 용기(19026)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 유입구(19028)는 구역 1의 압력 테스트에 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 용기(19021)는 배관을 통해 용기(19026)와 유체 연통한다. 용기(19026)는 TFF 필터 어셈블리와 같은 세포 현탁 장치(19020)와 추가로 유체 연통할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(19040)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(19042)와 접촉한다. 용기(19040)는 배관을 통해 용기(19026)와 유체 연통할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(19046)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(19044)와 접촉한다. 용기(19046)는 배관을 통해 용기(19026)와 추가로 유체 연통할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(19026)는 응집물 필터(19022), 예컨대 40 μm 응집물 필터와 유체 연통하고, 추가로 배관을 통해 구역 1 배출구(19048)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 구역 1로부터의 폐기물은 배관을 통해 폐기물 용기(19006) 내로 흐를 수 있고, 용기는 저울 시스템(19004)과 접촉할 수 있다.
도 35를 참조하면, 구역 1 배출구(19048)은 구역 2 유입구일 수 있다. 일부 양태에서, 구역 1 배출구(19048)는 용기(19064)와 유체 연통한다. 용기(19064)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(19062)와 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(19070)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(19068)와 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(19070)는 배관을 통해 용기(19064)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(19064)는 배관을 통해 용기(19058)와 유체 연통한다. 일부 경우에, 용기(19058)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(19060)와 접촉한다. 일부 양태에서, 유입구(19056)는 구역 3의 압력 테스트에 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 용기(19058)는 배관을 통해 40 μm 응집물 필터와 같은 필터(19054) 및 세포 변형 장치(19050)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 세포 변형 장치(19050)는 구역 3에 대한 유입구일 수 있는 구역 2 배출구(19066)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 유입구(19066)는 배관을 통해 용기(19076)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(19076)는 저울 시스템(19074)과 접촉한다. 일부 양태에서, 유입구(19078)는 배관을 통해 용기(19076)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(19076)는 40 μm 응집체 필터와 같은 필터(19072)와 유체 연통하고, 추가로 배관을 통해 구역 3 배출구(19079)에 유체 연결된다. 일부 양태에서, 구역 3 배출구(19079)는 구역 4에 대한 유입구일 수 있다. 일부 양태에서, 구역 3 배출구(19079)는 배관을 통해 용기(19084)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(19084)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(19082)와 접촉한다. 일부 양태에서, 유입구(19086)는 구역 4 및 구역 3의 압력 테스트에 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 용기(19084)는 40 μm 응집물 필터와 같은 필터(19080)과 유체 연통하고, 추가로 배관을 통해 구역 4 배출구(19088)와 유체 연통한다. 구역 4 배출구(19088)은 구역 5에 대한 유입구일 수 있다. 일부 양태에서, 구역 4 배출구(19088)는 용기(19098)와 유체 연통한다. 용기(19098)는 저울 시스템(19096)과 접촉할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(19098)는 배관을 통해 용기(19098)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(19104)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(19102)와 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(19108)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(19106)와 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(19108)는 배관을 통해 용기(19098)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 유입구(19100)는 구역 5의 압력 테스트에 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 용기(19098)는 배관을 통해 TFF 필터 어셈블리와 같은 세포 현탁 장치(19090)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 유입구(19092)는 배관을 통해 용기 및 세포 현탁 장치(19090)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(19098)는 40 μm 응집물 필터일 수 있는 응집물 필터(19094)와 유체 연통하고, 추가로 구역 5 배출구(19110)와 유체 연통한다.
일부 양태에서, 구역 5 배출구(19110)는 배관을 통해 용기(19124)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(19124)는 저울 시스템(19120)과 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(19124)는 백라이트 조명(19122)과 추가로 접촉할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(19132)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(19130)와 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(19132)는 배관을 통해 용기(19124)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(19124)는 40 μm 응집물 필터일 수 있는 필터(19118)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 유입구(19116)는 필터(19118)와 유체 연통할 수 있다. 일부 양태에서, 유입구(19116)는 구역 6의 압력 테스트에 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 용기(19124)는 배관을 통해 용기(19128)와 유체 연통한다. 일부 경우에, 용기(19128)는 저울 시스템(19126)과 접촉한다. 일부 양태에서, 구역 5 또는 구역 6으로부터의 폐기물은 배관을 통해 폐기물 용기(19114) 내로 흐를 수 있고, 용기는 저울 시스템(19112)과 접촉할 수 있다.
이제 도 27을 참조하면, 일부 양태에서, PBMC의 프로세스 흐름은 12000에 제시된 것과 같은 흐름이다. 흐름 경로(12006)은 검은 실선으로 표시되고; 임의의 흐름 경로(12021)은 검은 파선으로 표시되고; 폐기물 경로(12004)는 회색 파선으로 표시되어 있음이 주목한다. 채워진 검은색 원(12002)은 스위치 밸브를 나타낸다. 회색 리본(12010)은 밸브를 나타낸다. 회색 원(12012)은 펌프를 나타낸다. 일부 양태에서, 용기(예컨대 12030, 12038, 12044, 및 12048)는 배관과 펌프, 예컨대 용기(12030)의 경우 펌프(12028) 또는 용기(12038)의 경우 펌프(12012)를 통해 구역 1에 유체 연결될 수 있다. 일부 양태에서, 용기(12030)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(12033)와 접촉할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(12030)는 체결 요소(12032)에 분리 가능하게 결합될 수 있으며, 체결 요소는 후크일 수 있고 저울 시스템의 일부로서 기능할 수도 있다. 일부 양태에서, 용기(12030)으로부터의 샘플은 펌프(12028)에 의해 배관을 통해 응집물 필터(12029)로 펌핑될 수 있다. 응집물 필터(12029)는 배관 및 밸브에 의해 용기(12024)와 유체 연통할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(12038)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(12036)와 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(12038)는 체결 요소(12034)에 분리 가능하게 결합될 수 있으며, 체결 요소는 저울 시스템의 일부로서 기능할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(12044)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(12042)와 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(12044)는 체결 요소(12046)에 분리 가능하게 결합되며, 체결 요소는 저울 시스템의 일부로서 기능할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(12044)는 플레이트(12040)와 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(12050)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(12048)와 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(12050)는 체결 요소(12052)에 분리 가능하게 결합되며, 체결 요소는 저울 시스템의 일부로서 기능할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(12038, 12044, 및 12050)는 배관 및 밸브를 통해 구역 1에 유체 연결된다. 일부 양태에서, 용기(12050)는 배관 및 밸브를 통해 추가로 구역 2에 유체 연결된다. 일부 양태에서, 용기(12038, 12044, 및 12050)의 각각은 배관 및 밸브를 통해 용기(12024)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(12024)는 배관 및 밸브를 통해 분류 칩(12020) 및 TFF 필터 어셈블리(12018)와 유체 연통한다. 용기(12024)로부터의 유체는 펌프(12012)에 구역 1 전체에 펌핑될 수 있다. 일부 양태에서, TFF 필터 어셈블리(12018)는 압력 게이지(12008), 버블 센서(12026), 및 추가로 흐름 센서와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 구역 1은 하나 이상의 분류 칩(12020), 예컨대 2개의 분류 칩(12020)을 포함한다. 일부 양태에서, 용기(12022)는 응집물 필터(12016) 및 흐름 센서(12014)와 유체 연통하고, 추가로 배출구(12054)를 통해 구역 2와 유체 연통한다.
이제 도 28을 참조하면, 일부 양태에서, RBC의 프로세스 흐름은 13000에 제시된 것과 같은 흐름이다. 흐름 경로(13006)는 검은 실선으로 표시되고; 임의의 흐름 경로(13021)는 검은 파선으로 표시되고; 폐기물 경로(13004)는 회색 파선으로 표시되어 있음에 주의한다. 검은색 채워진 원(13002)은 스위치 밸브를 나타냅니다. 회색 리본(13012)은 밸브를 나타낸다. 회색 원(13010)은 펌프를 나타낸다. 반원(13024)은 버블 센서를 나타낸다. 검은색 물결 사각형(13008)은 압력 게이지를 나타낸다. 회색 물결 사각형(13018)은 흐름 센서를 나타낸다. 일부 양태에서, 용기(13030)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(13031)와 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(13030)는 저울 시스템의 일부로서 기능할 수도 있는 체결 요소(13032)에 분리 가능하게 결합된다. 일부 양태에서, 용기(13030)는 펌프(13028)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(13030)은 응집물 필터(13026)와 유체 연통하고, 추가로 용기(13022)에 유체 연결된다. 용기(13036)는 플레이트(13034)와 접촉할 수 있으며, 플레이트는 온도 조절식 플레이트일 수 있다. 용기(13038)는 체결 요소(13038)에 분리 가능하게 결합될 수 있으며, 체결 요소는 일부 경우에 후크일 수 있다. 일부 양태에서, 용기(13042)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(13040)와 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(13042)는 체결 요소(13044)에 분리 가능하게 결합된다. 일부 양태에서, 용기(13048)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(13046)와 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(13048)는 체결 요소(13050)에 분리 가능하게 결합된다. 일부 양태에서, 용기(13030, 13036, 13042, 및 13048)의 각각은 구역 1과 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(13048)는 구역 2와 추가로 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(13033)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(13020)와 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(13022)는 TFF 필터(13016)과 유체 연통한다. 용기(13022)는 백혈구 제거 필터(13014)와 추가로 유체 연통하고, 배출구(13019)를 통해 구역 2와도 유체 연통한다.
이제 도 29를 참조하면, 일부 양태에서, 구역 2 및 구역 3을 위한 PBMC의 프로세스 흐름 14000이 제시된다. 반원(14016)은 버블 센서를 나타내고; 검은색 채워진 원(14002)은 스위치 밸브를 나타내고; 리본(14004)은 밸브를 나타내고; 회색 물결 삼각형(14010)은 흐름 센서를 나타낸다는 것을 주목한다. 검은 실선(14008)은 흐름 경로를 나타낸다. 검은색 파선(14012)은 임의의 흐름 경로를 나타낸다. 구역 1로부터의 유체는 용기(14018)와 유체 연통하는 유입구(14015)를 통해 구역 2로 진입할 수 있다. 용기(14018)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(14020)와 접촉할 수 있다. 용기(14018)는 세포 응집물 필터(14014)와 추가로 유체 연통하고, 세포 변형을 위한 미세 유체 칩과 같은 세포 변형 장치(14006)와도 유체 연통한다. 일부 양태에서, 세포 변형 장치(14006)는 배출구(14022)를 통해 구역 3과 유체 연통한다. 구역 3을 참조하면, 검은 실선(14024)은 흐름 경로를 나타내고; 검은 실선(14030)은 스위치 밸브를 나타내고; 회색 사각형(14026)은 흐름 센서를 나타내고; 회색 점선(14032)는 임의의 유동 경로를 나타내고; 리본(14035)는 밸브를 나타내고; 반원(14036)은 버블 센서를 나타내고; 회색 원(14028)은 펌프를 나타낸다. 일부 양태에서, 구역 2로부터의 유체는 구역 2의 배출구(14022)(구역 3에 대한 유입구의 역할도 함)를 통해 구역 3으로 진입하고, 용기(14038) 내로 흐른다. 용기(14038)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(14040)와 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(14038)는 응집물 필터(14034)와 유체 연통하고, 추가로 배출구(14037)를 통해 구역 4와 유체 연통한다. 또한, 용기(14046)는, 용기(14046)로부터의 유체가 펌프(14042)에 의해 구역 3으로 펌핑될 수 있도록 구역 3과 유체 연통할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(14046)는 체결 요소(14044)에 분리 가능하게 결합된다. 일부 양태에서, 용기(14050)은 펌프(14052)가 용기(14050)로부터 구역 3으로 유체를 펌핑할 수 있도록 구역 3과 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(14050)는 체결 요소(14048)에 분리 가능하게 결합된다.
이제 도 30을 참조하면, 일부 양태에서, 구역 2 및 구역 3을 위한 RBC의 프로세스 흐름 15000이 제시된다. 반원(15016)은 버블 센서를 나타내고; 검은색 채워진 원(15002)은 스위치 밸브를 나타내고; 리본(15004)은 밸브를 나타내고; 회색 물결 삼각형(15010)은 흐름 센서를 나타낸다는 것을 주목한다. 검은 실선(15008)은 흐름 경로를 나타낸다. 검은색 파선(15012)은 임의의 흐름 경로를 나타낸다. 구역 1로부터의 유체는 용기(15018)와 유체 연통하는 유입구(15015)를 통해 구역 2로 진입할 수 있다. 용기(15018)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(15020)와 접촉할 수 있다. 용기(15018)는 세포 응집물 필터(15014)와 추가로 유체 연통하고, 세포 변형을 위한 미세 유체 칩과 같은 세포 변형 장치(15006)와도 유체 연통한다. 일부 양태에서, 세포 변형 장치(15006)는 배출구(15022)를 통해 구역 3과 유체 연통한다. 구역 3을 참조하면, 검은 실선(15024)은 흐름 경로를 나타내고; 검은 실선(15030)은 스위치 밸브를 나타내고; 회색 사각형(15026)은 흐름 센서를 나타내고; 회색 점선(15032)는 임의의 유동 경로를 나타내고; 리본(15035)는 밸브를 나타내고; 반원(15036)은 버블 센서를 나타내고; 회색 원(15028)은 펌프를 나타낸다. 일부 양태에서, 구역 2로부터의 유체는 구역 2의 배출구(15022)(구역 3에 대한 유입구의 역할도 함)를 통해 구역 3으로 진입하고, 용기(15038) 내로 흐른다. 용기(15038)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(15040)와 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(15038)는 응집물 필터(15034)와 유체 연통하고, 추가로 배출구(15037)를 통해 구역 4와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(15044)은 용기(15044)로부터의 유체가 펌프(15042에 의해 구역 3으로 펌핑될 수 있도록 구역 3과 유체 연통할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(15044)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(15046)와 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(15044)는 저울(15048)과 접촉할 수 있다.
이제 도 31을 참조하면, 일부 양태에서, PBMC 또는 RBC 프로세스 흐름은 프로세스 흐름 16000일 수 있다. 구역 4를 참조하면, 검은 실선(16002)은 흐름 경로를 나타내고; 검은 실선(16004)은 스위치 밸브를 나타내고; 회색 원(16008)은 펌프를 나타내고; 회색 물결 사각형(16006)은 흐름 센서를 나타내고; 리본(16014)은 밸브를 나타내고; 반원(16018)은 버블 센서를 나타내고; 검은 파선(16010)은 임의의 흐름 경로를 나타낸다. 일부 양태에서, 유체는 구역 3의 유입구(16016)를 통해 구역 4로 진입하고, 용기(16022) 내로 흐른다. 용기(16022)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(16020)와 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(16022)는 응집물 필터(16012)와 유체 연통하고, 추가로 구역 4 배출구/구역 5 유입구(16024)를 통해 구역 5와 유체 연통한다.
구역 5를 참조하면, 검은 실선(16026)은 스위치 밸브를 나타내고; 검은 물결 사각형(16032)은 압력 게이지를 나타내고; 반원(16042)은 버블 센서를 나타내고; 회색 원(16034)은 펌프를 나타내고; 리본(16040)은 밸브를 나타내고; 회색 물결 사각형(16043)은 흐름 센서를 나타내고; 검은 파선(16030)은 임의의 흐름 경로를 나타내고; 회색 파선(16028)은 폐기물 흐름 경로를 나타낸다. 일부 양태에서, 구역 4로부터의 유체는 유입구(16024)를 통해 구역 5로 진입하고, 용기(16046)로 흘러간다. 용기(16046)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(16044)와 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(16044)는 TFF 필터 어셈플리(16038)와 유체 연통한다. 또한, 용기(16044)는 응집물 필터(16036)와 유체 연통하고, 추가로 구역 6에 대한 배출구/구역 6에 대한 유입구(16076)를 통해 구역 6과 유체 연통한다.
이제 구역 6을 참조하면, 회색 파선(16058)은 폐기물 흐름 경로를 나타내고; 검은색 실선(16078)은 흐름 경로를 나타내고; 검은 파선(16064)는 임의의 흐름 경로를 나타내고; 회색 원(16068)은 펌프를 나타내고; 검은색 원(16060)은 스위치 밸브를 나타내고; 리본(16070)은 밸브를 나타내고; 반원(16084)는 버블 센서를 나타낸다. 일부 양태에서, 구역 5로부터의 유체는 구역 6에 대한 유입구(16076)를 통해 구역 6에 진입하고 용기(16080) 내로 흐른다. 일부 양태에서, 용기(16080)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(16082)와 접촉한다. 일부 양태에서, 용기(16080)는 응집물 필터(16066)와 유체 연통한다. 일부 양태에서, 용기(16080)는 용기(16074)와 유체 연통한다. 용기(16074)는, 온도 조절식 플레이트일 수 있고 추가로 저울 시스템의 일부일 수 있는 각각의 플레이트(16072) 상에 각각 놓일 수 있다. 또한, 구역 6은, 폐기물이 폐기물 흐름 경로(16058)을 그 안으로 흐르는 폐기물 탱크(16062)를 포함할 수 있다. 폐기물 탱크(16062)는 저울 시스템과 접촉할 수 있다. 일부 양태에서, 저울 시스템은 장력 로드 셀 또는 압축 로드 셀을 포함한다. 추가로 도 31을 참조하면, 용기(16054)는 온도 조절식 플레이트일 수 있는 플레이트(16052)와 접촉할 수 있다. 일부 양태에서, 용기(16054)는, 펌프(16050)가 스위치 밸브(16048)가 가르키는 어느 하나의 구역 내로 유체를 펌핑할 수 있도록, 구역 5 및 구역 6에 유체 연결된다. 일부 양태에서, 용기(16054)는 저울 시스템(16056)과 접촉한다.
2.
세포를 가공하기 위한 방법
일부 양태에서, 본 개시는 일반적으로 세포를 가공하기 위한 방법에 관한 것으로서, 상기 방법은 현탁액 제조 서브시스템, 세포 변형 서브시스템, 희석 서브시스템, 인큐베이션 서브시스템, 세포 세척 서브시스템, 및 용기 충진 서브시스템 중 하나 이상을 포함하는 시스템에 의해 수행되고, 상기 방법은 다음을 포함한다: i. 현탁액 제조 서브시스템에서: 1. 용기로부터 세포를 수용하는 단계; 2. 임의로 세포에 대한 세포 단리 작업을 수행하여 단리된 세포를 생산하는 단계; 3. 전달 배지 유입구를 통해 전달 배지를 수용하는 단계; 4. 세포 또는 단리된 세포를 전달 배지에 현탁시켜 세포 현탁액을 생산함으로써 세포 현탁액을 생산하는 단계; ii. 세포 변형 서브시스템에서: 1. 현탁액 제조 서브시스템으로부터 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계; 2. 세포의 세포막에 섭동을 유발하여 페이로드를 세포 내로 진입시켜, 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 생산하도록 구성된 하나 이상의 세포 변형 협착부를 통해 세포 현탁액을 흘리는 단계; iii. 희석 서브시스템에서: 1. 세포 변형 서브시스템으로부터 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계; 2. 완충액 유입구를 통해 유체 시약 또는 건조 시약을 수용하고, 세포 현탁액을 유체 시약 또는 건조 시약과 혼합하여 희석된 세포 현탁액을 생산하는 단계; iv. 인큐베이션 서브시스템에서: 1. 인큐베이션 서브시스템으로부터 인큐베이션된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계; 2. 세포에 대한 완충액 교환 작업을 수행하여 세포를 보존 배지에 현탁하는 단계; 및 vi. 용기 충진 서브시스템에서: 1. 세포 세척 서브시스템으로부터 보존 배지에 현탁된 세포의 흐름을 수용하는 단계; 및 2. 보존 배지에 현탁된 세포를 하나 이상의 용기 내로 도입하는 단계.
일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 적혈구(RBC)를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 단핵 세포(PBMC)를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 활성화 항원 담체(AAC) 세포를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 내약성 유도 항원 담체(TAC) 세포를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 항원 제시 세포(APC)를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 T 세포를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 B 세포를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 대식세포를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 자연 살해(NK) 세포를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 수지상 세포를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 면역 세포를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 단핵구를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 단핵구 백혈구를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 호산구를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 호염기구를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 자연 살해 T(NKT) 세포를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 비반 세포를 가공한다. 일부 양태에서, 세포를 가공하기 위한 시스템은 호중구를 가공한다. 일부 양태에서, 상기 방법은 응고 혈장 및/또는 혈청을 제거한다. 일부 양태에서, 상기 방법은 약 5 내지 약 7시간 이내에 수행이 완료된다. 일부 양태에서, 상기 방법은 세포 치료제를 생산한다. 일부 양태에서, 페이로드는 하나 이상의 재프로그래밍 인자를 포함한다. 일부 양태에서, 페이로드는 하나 이상의 핵산을 포함한다. 일부 양태에서, 페이로드는 하나 이상의 분화 인자를 포함한다. 일부 양태에서, 페이로드는 하나 이상의 뉴런 재프로그래밍 인자를 포함한다. 일부 양태에서, 세포 단리 작업은 세포를 가공하기 위한 방법의 일부로서 수행되지 않는다. 일부 양태에서, 세포 단리 작업은 TAC를 가공하기 위한 프로세스의 일부로서 수행되지 않는다. 일부 양태에서, 세포 단리 작업은 APC를 가공하기 위한 프로세스의 일부로서 수행되지 않는다. 일부 양태에서, 세포 단리 작업은 PBMC를 가공하기 위한 프로세스의 일부로서 수행되지 않는다.
3.
키트
일부 양태에서, 본 개시는 일반적으로 혈액을 가공하기 위한 시스템에 사용하기 위한 키트에 관한 것으로서, 상기 키트는 다음 중 하나 이상을 포함한다: i. 상기 시스템의 현탁액 제조 서브시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있도록 구성된 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소를 포함하는 제1 키트로서, 제1 세트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소는 1. 세포 단리 장치; 또는 2. 접선 유동 여과 막 어셈블리를 포함하는, 제1 키트; ii. 상기 시스템의 세포 변형 서브시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있도록 구성된 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소를 포함하는 제2 키트로서, 제2 세트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소는, 세포의 세포 막에 섭동을 야기하도록 세포가 가압될 수 있는 하나 이상의 세포 변형 협착부를 포함하는 하나 이상의 미세 유체 칩을 포함하는, 제2 키트; iii. 상기 시스템의 희석 서브시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있도록 구성된 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성 요소를 포함하는 제3 키트로서, 제3 세트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소는 적어도 하나의 세포 응집물 필터를 포함하는, 제3 키트; iv. 상기 시스템의 인큐베이션 서브시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있도록 구성된 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소를 포함하는 제4 키트로서, 제4 세트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소는 적어도 하나의 세포 응집물 필터를 포함하는, 제4 키트; v. 상기 시스템의 세포 세척 서브시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있도록 구성된 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소를 포함하는 제5 키트로서, 제5 세트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소는 제2 접선 유동 여과 막 어셈블리를 포함하는, 제5 키트; 및 vi. 상기 시스템의 용기 충진 서브시스템에 분리 가능하게 결합되도록 구성된 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소를 포함하는 제6 키트로서, 제6 세트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소는 적어도 하나의 세포 응집물 필터를 포함하는, 제6 키트.
일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제2 키트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상은 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제1 키트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상에 유체 연결되도록 구성된다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제3 키트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상은 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제2 키트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상에 유체 연결되도록 구성된다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제4 키트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상은 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제3 키트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상에 유체 연결되도록 구성된다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제5 키트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상은 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제4 키트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상에 유체 연결되도록 구성된다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제6 키트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상은 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제5 키트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상에 유체 연결되도록 구성된다.
일부 양태에서, 키트 중 하나 이상의 구성요소 중 하나 이상은 상기 시스템의 상응하는 서브시스템의 하나 이상의 구성요소에 유체 연결되도록 구성된다. 일부 양태에서, 키트는 제1, 제2, 제3, 제4, 제5, 및 제6 키트를 포함한다. 일부 양태에서, 각각의 키트는 별도로 포장된다. 일부 양태에서, 적어도 2개의 키트가 함께 포장된다.
일부 양태에서, 현장 진료 시스템과 함께 사용하기 위한 일회용 키트는 도 9의 일회용 키트(7000)를 포함한다. 이제 도 9를 참조하면, 일부 경우에, 키트(7000)은 예를 들어 전달 배지, 완충액, 또는 샘플을 전달하는 데 사용될 수 있는 투입 라인(7028, 7030, 및 7034)을 포함한다. 유입구(7028 및 7030)는 배관과 유입구(7015)를 통해 용기(7016)에 유체 연결될 수 있다. 일부 양태에서, 유입구(7034)는 응집물 필터(7032)에 유체 연결되고, 이는 용기(7016)에 유체 연결된다. 일부 양태에서, 용기(7016)는 배관을 통해 TFF 필터 어셈블리(7004)에 유체 연결된다. 일부 경우에, 키트(7000)는 TFF 필터 어셈블리(7004)를 포함하며, 이는 배관(7002)을 통해 세포 단리 장치(7014)에 유체 연결된다. 일부 양태에서, 세포 단리 장치(7014)는 배출구(7013) 및 배관을 통해 용기(7016)에 유체 연결된다. 용기(7016)는 응집물 필터(7006)에 유체 연결될 수 있고, 이는 배관을 통해 용기(7038)에 유체 연결된다. 일부 양태에서, 용기(7038)는 유입구(7037) 및 배출구(7035)를 포함하고, 이들은 배관에 결합된다. 일부 양태에서, 용기(7038)는 배출구(7035) 및 배관을 통해 응집물 필터(7036)에 유체 연결되고, 이는 세포 변형 장치(7018)에 추가로 연결된다. 일부 양태에서, 세포 변형 장치(7018)는 배관을 통해 용기(7020)에 유체 연결된다. 유입구(7040 및 7042)는 배관과 유입구(7023)를 통해 용기(7020)에 유체 연결될 수 있다. 용기(7020)는 배출구(7021) 및 배관을 통해 응집물 필터(7008)에 유체 연결되고, 이들은 배관 및 유입구(7043)를 통해 용기(7044)에 유체 연결된다. 일부 양태에서, 용기(7044)는 배출구(7041) 및 배관을 통해 응집물 필터(7022)에 유체 연결되고, 이들은 배관 및 유입구(7025)를 통해 용기(7024)에 유체 연결된다. 일부 양태에서, 유입구(7009)는 배관 및 유입구(7025)를 통해 용기(7024)에 유체 연결된다. 일부 양태에서, 용기(7024)는 배출구(7025') 및 배관을 통해 TFF 어셈블리(7010)에 유체 연결되고, 이는 배관 및 유입구(7025)를 통해 용기(7024)에 추가적으로 유체 연결될 수 있다. 일부 양태에서, 용기(7024)는 배출구(7024)를 통해 응집물 필터(7012)에 유체 연결될 수 있고, 이는 배관 및 유입구(7047)를 통해 용기(7046)에 유체 연결된다. 일부 양태에서, 용기(7047)는 배출구(7045')를 통해 응집물 필터(7048)에 유체 연결되고, 이는 배관 및 유입구(7047)를 통해 용기(7046)에 유체 연결될 수 있다. 용기(7046)는 배출구(7045) 및 배관을 통해 외부 용기(7026)에 유체 연결될 수 있다. 일부 양태에서, 키트(7000)는 폐기물 용기(7001)를 추가로 포함할 수 있고, 이는 배관에 결합된다.
대조적으로, 일부 양태에서, 이하에서 논의되는 바와 같이, 각각의 서브시스템마다 별도의 키트가 사용될 수 있다. 각각의 키트는, 상기 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있고 상기 시스템의 상응하는 서브시스템에 추가로 결합될 수 있는 구성요소를 포함한다.
일부 양태에서, 현장 진료 시스템과 함께 사용하기 위한 일회용 키트는 멸균 상태이다. 일부 양태에서, 현장 진료 시스템과 함께 사용하기 위한 일회용 키트는 클린룸 환경에서 조립된다. 일부 양태에서, 현장 진료 시스템과 함께 사용하기 위한 일회용 키트를 멸균하는 데 감마선이 사용된다. 일부 양태에서, 현장 진료 시스템과 함께 사용하기 위한 일회용 키트를 멸균하는 데 에탄올이 사용된다. 일부 양태에서, 현장 진료 시스템과 함께 사용하기 위한 일회용 키트는 클린룸에서 포장된다. 일부 양태에서, 현장 진료 시스템과 함께 사용하기 위한 일회용 키트는 열성형된 트레이에서 포장된다.
a. 현탁액 제조 서브시스템 (구역 1)
일부 양태에서, 구역 1 키트는 도 12 또는 도 13에 제시된 구성요소를 포함하며, 이는 위에서 논의되었다.
일부 양태에서, 키트는 현탁액 제조 서브시스템 키트를 포함하는 제1 키트를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제1 키트는 세포 응집물 필터를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제1 키트는 백혈구 제거 필터를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제1 키트는 용기를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제1 키트는 접선 유동 여과 필터 어셈블리를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제1 키트는 다음 중 하나 이상을 포함한다: 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 샘플링 벌브, 카보이, 공기 필터, 및 접선 유동 여과 필터 어셈블리.
b. 세포 변형 서브시스템 (구역 2)
일부 양태에서, 구역 2 키트는 도 14에 제시된 구성요소를 포함하며, 이는 위에서 논의되었다.
일부 양태에서, 키트는 세포 변형 서브시스템을 포함하는 제2 키트를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제2 키트는 강성 샘플 용기를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제2 키트는 세포 응집물 필터를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제2 키트는 제조 용기를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제2 키트는 하나 이상의 미세 유체 칩을 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제2 키트는 하나 이상의 미세 유체 칩 카트리지를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제2 키트는 다음 중 하나 이상을 포함한다: 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 용기, 백, 공기 필터, 및 배럴 필터.
c. 희석 서브시스템(구역 3)
일부 양태에서, 구역 3 키트는 도 15에 제시된 구성요소를 포함하며, 이는 위에서 논의되었다.
일부 양태에서, 키트는 희석 서브시스템을 포함하는 제3 키트를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제3 키트는 용기를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제3 키트는 세포 응집물 필터를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제3 키트는 다음 중 하나 이상을 포함한다: 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 샘플링 벌브, 및 카보이.
d. 인큐베이션 서브시스템(구역 4)
일부 양태에서, 구역 4 키트는 도 16에 제시된 구성요소를 포함하며, 이는 위에서 논의되었다.
일부 양태에서, 키트는 인큐베이션 서브시스템을 포함하는 제4 키트를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제4 키트는 세포 응집물 필터를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제4 키트는 하나 이상의 용기를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제4 키트는 다음 중 하나 이상을 포함한다: 배관, 배관 이음부, 커넥터, 및 클램프.
e. 세포 세척 서브시스템 (구역 5)
일부 양태에서, 구역 5 키트는 도 17에 제시된 구성요소를 포함하며, 이는 위에서 논의되었다.
일부 양태에서, 키트는 세포 세척 서브시스템을 포함하는 제5 키트를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제5 키트는 세포 응집물 필터를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제5 키트는 용기를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제5 키트는 접선 유동 여과 필터 어셈블리를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제5 키트는 다음 중 하나 이상을 포함한다: 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 샘플링 벌브, 공기 필터, 및 카보이.
f. 용기 충진 서브시스템(구역 6)
일부 양태에서, 구역 6 키트는 도 18에 제시된 구성요소를 포함하며, 이는 위에서 논의되었다.
일부 양태에서, 키트는 용기 충진 서브시스템을 포함하는 제6 키트를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제6 키트는 적어도 하나의 용기를 포함한다. 일부 양태에서, 용기는 동결 보존 백이다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제6 키트는 세포 응집물 필터를 포함한다. 일부 양태에서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제6 키트는 다음 중 하나 이상을 포함한다: 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 및 샘플링 벌브.
g. 온도 조절 서브시스템
일부 양태에서, 온도 조절 서브시스템 키트는 전술한 바와 같은 희석 서브시스템(구역 3) 및 인큐베이션 서브시스템(구역 4)에 의해 수행되는 기능을 달리 수행하기 위한 구성요소를 포함한다. 예를 들어, 온도 조절 서브시스템 키트는 세포 변형 서브시스템(구역 2)으로부터 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 수용하기 위한 용기 및 유체 시약 및/또는 건조 시약을 세포 현탁액이 포함된 용기에 도입하기 위한 하나 이상의 유입구를 포함할 수 있다. 시스템의 프레임에 부착될 때, 용기는 온도 조절식 플레이트와 접촉할 수 있다.
일부 양태에서, 키트는 온도 제어 서브시스템 키트를 포함한다. 일부 양태에서, 온도 조절 키트는 용기를 포함한다. 일부 양태에서, 온도 조절 키트 구성 요소는 세포 응집물 필터를 포함한다. 일부 양태에서, 온도 조절 키트는 다음 중 하나 이상을 포함한다: 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 샘플링 벌브, 및 카보이.
h. 폐기물 용기 키트
일부 양태에서, 키트는 폐기물 용기 키트(9000)와 같은 폐기물 용기 키트를 포함한다. 이제 도 11을 참조하면, 폐기물 용기 키트(900)는 캡(9004)에 결합된 폐기물 용기(9002)를 포함한다. 캡(9004)은, 예컨대 배출구(9005)를 통해 배관(9006)에 결합될 수 있다.
i. 키트 설치
일부 양태에서, 구역 1~구역 6을 위한 키트 중 하나 이상을 포함하는 키트는 아코디언 트레이 패키지에 포장될 수 있다. 일부 양태에서, 이러한 키트는 도 22에 제시된 것과 같이, 키트를 시스템의 프레임에 결합함으로써 설치될 수 있다. 도 22를 참조하면, 키트(10002)는, 예를 들어 하나 이상의 서브시스템을 포함하는 장치에 패널을 부착함으로써 프레임(10004)에 분리 가능하게 결합될 수 있다. 나머지 서브시스템은 아코디언 트레이 키트(10002)를 펼침으로써 부착될 수 있다. 예를 들어, 키트(10002)의 패널(10006) 상에 포함된 서브시스템은 아코디언 트레이를 펼침으로써 프레임(10004)에 분리 가능하게 연결될 수 있다. 일부 양태에서, 패널(10010)은 하나 이상의 서브시스템을 포함할 수 있는데, 이들은 패널을 펼침으로써 프레임(10004)에 연결될 수 있다.
일부 양태에서, 구역 1~구역 6을 위한 키트 중 하나 이상을 포함하는 키트는 말 수 있는 시트로서 포장될 수 있다. 일부 양태에서, 이러한 키트는 도 23에 제시된 것과 같이, 키트를 시스템의 프레임에 결합함으로써 설치될 수 있다. 도 23을 참조하면, 말 수 있는 시트(11002)는 시트를 펴서 프레임(110004)에 연결함으로써 프레임(11004)에 분리 가능하게 결합될 수 있다. 예를 들어, 부분적으로 펼쳐진 시트(11006)는 추가로 펼쳐져 완전히 펼쳐진 시트(11008)이 된 다음 프레임에 연결된다.
4.
세포를 가공하기 위한 추가 시스템
세포를 가공하기 위한 시스템이 제공된다. 상기 시스템은 예컨대 혈액의 형태로 또는 임의의 적절한 배지에 현탁된 세포의 형태로 투입되는 세포를 수용하고, 세포를 자동으로 가공하여 세포에 대한 하나 이상의 작업, 예컨대 단리, 하나 이상의 배지에 현탁, 완충액 교환, 페이로드 전달, 희석, 인큐베이션, 용기 충진, 온도 조절, 여과, 교반, 가압, 및/또는 동결 보존을 수행하도록 구성될 수 있다.
일부 구현예에서, 상기 시스템은 복수의 서브시스템을 포함할 수 있으며, 각각의 서브시스템은 하나 이상의 세포 가공 작업을 수행하도록 구성된다. 일부 구현예에서, 서브시스템 중 하나 이상은, 유체(예: 세포 현탁액)가 하나의 서브시스템에서 다음 서브시스템으로 자동적으로(예를 들어 중력에 의해 및/또는 가압에 의해) 흐로도록 다른 서브시스템 중 하나 이상과 유체 연통할 수 있다. 일부 구현예에서, 상기 시스템은 가공 중인 세포가 인간의 수동적인 (예를 들어 물리적인) 개입 없이 하나의 서브시스템에서 다음 서브시스템으로(및/또는 시스템 투입에서 시스템 산출로) 전달되도록 구성될 수 있다. 일부 구현예에서, 서브시스템 중 하나 이상은 (예를 들어 온도, 압력 등이) 다른 서브시스템 중 하나 이상과 독립적으로 제어될 수 있도록 구성될 수 있다.
일부 구현예에서, 상기 시스템은 현탁액 제조 서브시스템을 포함할 수 있으며, 현탁액 제조 서브시스템은 세포를 수용하고, 세포에 대한 세포 단리 작업을 수행하고, 전달 배지를 수용하고/하거나, 세포를 전달 배지에 현탁시켜 세포 현탁액을 생성하도록 구성된다. 그런 다음, 전달 배지에 현탁된 세포는 현탁액 제조 서브시스템으로부터 세포 변형 서브시스템으로 흐를 수 있다.
일부 구현예에서, 세포 변형 서브시스템은 하나 이상의 세포 변형 협착부를 통해 세포 현탁액을 흘려 세포의 세포 막에서 섭동을 일으켜 페이로드를 세포 내로 진입시키도록 구성될 수 있다. 페이로드의 섭동 및/또는 전달 후, 세포 현탁액은 이어서 세포 변형 서브시스템으로부터 희석 서브시스템으로 흐를 수 있다.
일부 구현예에서, 희석 서브시스템은 수용된 세포 현탁액을 완충액과 혼합함으로써 희석된 세포 현탁액을 생성하도록 구성될 수 있다. 세포 현탁액을 희석한 후, 희석된 세포 현탁액은 이어서 희석 서브시스템으로부터 인큐베이션 서브시스템으로 흐를 수 있다.
일부 구현예에서, 인큐베이션 서브시스템은, 예컨대 온도를 증가, 감소, 또는 유지함으로써 희석된 세포 현탁액의 온도를 조절하도록 구성될 수 있다. 인큐베이션 후, 희석된 세포 현탁액은 이어서 인큐베이션 서브시스템으로부터 세포 세척 서브시스템으로 흐를 수 있다.
일부 구현예에서, 세포 세척 서브시스템은, 수용된 희석된 세포 현탁액에 대한 완충액 교환 작업을 수행하고, 동결보호 배지와 같은 배지에 세포를 현탁하도록 구성될 수 있다. 그런 다음, 배지에 현탁된 세포는 세포 세척 서브시스템으로부터 용기 충진 서브시스템으로 흐를 수 있다.
일부 구현예에서, 용기 충진 서브시스템은, 예를 들어 저장 및/또는 보존(예: 동결보존)을 위해, 배지 내에 현탁된 세포를 하나 이상의 백 내로 흘리도록 구성될 수 있다.
일부 구현예에서, 상기 시스템의 하나 이상의 작업은 자동으로 제어되도록 구성될 수 있는데, 이는 상기 시스템의 하나 이상의 프로세서에 의해 제어될 수 있다. 사용자는 사용자 인터페이스에 대해 입력을 실행하여 상기 시스템의 기능을 제어할 수 있다.
일부 구현예에서, 상기 시스템은 시스템에 삽입되거나, 시스템에 부착되거나, 달리 시스템과 함께 사용하도록 구성될 수 있는 하나 이상의 일회용 구성요소를 수용하도록 구성될 수 있다. 일회용 구성요소 중 하나 이상은 시스템을 통해 흐르는 세포를 위한 유체 유동 경로의 전부 또는 일부를 형성할 수 있다. 일회용 구성요소는 시스템의 특정 서브시스템과 함께 사용하도록 구성될 수 있다. 일회용 구성요소는 하나 이상의 키트로서 제공될 수 있다. 일부 구현예에서, 일회용 구성요소는 다음 중 하나 이상을 포함할 수 있다: 나선형 관성 분리 미세 유체 소모품, 접선 유동 여과 막 어셈블리, 세포 응집물 필터, 백혈구 제거 필터, 샘플링 벌브, 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 백, 및 카보이, 강성 샘플 용기, 세포가 가압되어 세포 막에 섭동을 일으킬 수 있는 하나 이상의 세포 변형 협착부를 포함하는 구성요소, 및 유체를 수용하고 하나 이상의 세포 변형 협착부를 포함하는 상기 구성요소에 유체를 전달하거나 이로부터 유체를 전달하는 카트리지.
다음의 예시적인 구현예가 제공된다:
1. 세포를 가공하기 위한 시스템으로서, 상기 시스템은:
세포를 수용하고, 세포에 대한 세포 단리 작업을 수행하고, 전달 배지를 수용하고, 세포를 전달 배지에 현탁시켜 세포 현탁액을 생성하도록 구성되는 현탁액 제조 서브시스템;
현탁액 제조 서브시스템과 유체 연통하도록 구성된 세포 변형 서브시스템으로서, 현탁액 제조 서브시스템으로부터 세포 현탁액을 수용하고, 하나 이상의 세포 변형 협착부를 통해 세포 현탁액을 흘려 세포의 세포 막에서 섭동을 일으켜 페이로드를 세포 내로 진입시키도록 구성되는, 세포 변형 서브시스템;
세포 변형 서브시스템과 유체 연통하는 희석 서브시스템으로서, 세포 변형 서브시스템으로부터 세포 현탁액을 수용하고, 유체 시약 또는 건조 시약을 수용하고, 세포 현탁액을 유체 시약 또는 건조 시약과 혼합시켜 희석된 세포 현탁액을 생성하도록 구성되는, 희석 서브시스템;
희석 서브시스템과 유체 연통하는 인큐베이션 서브시스템으로서, 희석 서브시스템으로부터 희석된 세포 현탁액을 수용하고 희석된 세포 현탁액의 온도를 조절하도록 구성되는, 인큐베이션 서브시스템;
인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하는 세포 세척 서브시스템으로서, 희석된 세포 현탁액을 수용하고 세포에 대해 제1 완충액 교환 작업을 수행하여 세포를 보존 배지에 현탁하도록 구성되는, 세포 세척 서브시스템; 및
인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하는 용기 충진 서브시스템으로서, 세포 세척 서브시스템으로부터 보존 배지에 현탁된 세포를 수용하고, 보존 배지에 현탁된 세포를 하나 이상의 용기 내로 흘리도록 구성되는 용기 충진 시스템을 포함하는, 시스템.
2. 구현예 1에 있어서, 현탁액 제조 서브시스템은 세척 배지를 수용하도록 구성되는, 시스템.
3. 구현예 1 내지 2 중 어느 하나에 있어서, 현탁액 제조 서브시스템은 희석 배지를 수용하도록 구성되는, 시스템.
4. 구현에 1 내지 3 중 어느 하나에 있어서, 현탁액 제조 서브시스템은 세포에 대해 세포 단리 작업을 수행하도록 구성된 나선형 관성 분리 시스템을 포함하는, 시스템.
5. 구현에 1 내지 4 중 어느 하나에 있어서, 현탁액 제조 서브시스템은 세포에 대해 세포 단리 작업을 수행하도록 구성된 백혈구 제거 필터 시스템을 포함하는, 시스템.
6. 구현예 1 내지 5 중 어느 하나에 있어서, 현탁액 제조 서브시스템은 제2 완충액 교환 작업을 수행하도록 구성된 제1 접선 유동 여과 시스템을 포함하는, 시스템.
7. 구현예 1 내지 6 중 어느 하나에 있어서, 세포 변형 서브시스템은 하나 이상의 세포 변형 협착부를 통해 세포 현탁액을 가압하도록 압력을 생성하도록 구성된 가압 시스템을 포함하는, 시스템.
8. 구현예 1 내지 7 중 어느 하나에 있어서, 세포 변형 서브시스템은 세포 현탁액의 온도를 조절하도록 구성된 제1 온도 조절 시스템을 포함하는, 시스템.
9. 구현예 1 내지 8 중 어느 하나에 있어서, 세포 변형 서브시스템은 세포 현탁액의 균질성을 촉진하기 위해 세포 현탁액을 교반하도록 구성된 제1 교반 시스템을 포함하는, 시스템.
10. 실시예 1 내지 9 중 어느 하나에 있어서, 현탁 준비 서브시스템에서 세포를 수용하는 단계는 혈액을 수용하는 단계 및 혈액 이외에 유체에 현탁된 세포를 수용하는 단계 중 하나 이상을 포함하는, 시스템.
11. 구현예 1 내지 10 중 어느 하나에 있어서, 희석 서브시스템은 희석된 세포 현탁액의 세포에 첨가되는 유체 시약 또는 건조 시약의 양을 측정하도록 구성된 제1 저울 시스템을 포함하는, 시스템.
12. 구현예 1 내지 11 중 어느 하나에 있어서, 희석 서브시스템은 세포 현탁액의 균질성을 촉진하기 위해 세포 현탁액을 교반하도록 구성된 제2 교반 시스템을 포함하는, 시스템.
13. 구현예 1 내지 12 중 어느 하나에 있어서, 희석 서브시스템은 세포 현탁액 및 희석된 세포 현탁액을 비추도록 구성된 제1 조명 시스템을 포함하는, 시스템.
14. 구현예 1 내지 13 중 어느 하나에 있어서, 인큐베이션 서브시스템은 희석된 세포 현탁액의 온도를 조절하도록 구성된 온도 조절 장치를 포함하는, 시스템.
15. 구현예 1 내지 14 중 어느 하나에 있어서, 희석 서브시스템은 희석된 세포 현탁액의 균질성을 촉진하기 위해 희석된 세포 현탁액을 교반하도록 구성된 제3 교반 시스템을 포함하는, 시스템.
16. 구현예 1 내지 15 중 어느 하나에 있어서, 세포 세척 서브시스템은 제1 완충액 교환 작업을 수행하도록 구성된 제3 접선 유동 여과 시스템을 포함하는, 시스템.
17. 구현예 1 내지 16 중 어느 하나에 있어서, 세포 세척 서브시스템은 제1 완충액 교환 작업 동안 세포에 첨가되는 제2 완충액의 양을 측정하도록 구성된 제2 저울 시스템을 포함하는, 시스템.
18. 구현예 1 내지 17 중 어느 하나에 있어서, 세포 세척 서브시스템은 희석된 세포 현탁액 및 보존 배지에 현탁된 세포 중 하나 이상을 교반하여 균질성을 촉진하도록 구성된 제4 교반 시스템을 포함하는, 시스템.
19. 구현예 1 내지 18 중 어느 하나에 있어서, 세포 세척 서브시스템은 희석된 세포 현탁액 및 보존 배지에 현탁된 세포 중 하나 이상을 비추도록 구성된 제2 조명 시스템을 포함하는, 시스템.
20. 구현예 1 내지 19 중 어느 하나에 있어서, 보존 배지는 동결 보호 배지인, 시스템.
21. 구현예 1 내지 20 중 어느 하나에 있어서, 용기 충진 서브시스템은 하나 이상의 용기에 첨가되는 보존 배지에 현탁된 세포의 양을 측정하도록 구성된 제3 저울 시스템을 포함하는, 시스템.
22. 구현예 1 내지 21 중 어느 하나에 있어서, 용기 충진 서브시스템은 하나 이상의 용기 내의 보존 배지에 현탁된 세포를 교반하여 균질성을 촉진하도록 구성된 제5 교반 시스템을 포함하는, 시스템.
23. 구현예 1 내지 22 중 어느 하나에 있어서, 용기 충진 서브시스템은 하나 이상의 용기 내의 보존 배지에 현탁된 세포를 비추도록 구성된 제3 조명 시스템을 포함하는, 시스템.
24. 구현예 1 내지 23 중 어느 하나에 있어서, 상기 시스템은 유체가 서브시스템 중 2개 이상의 사이에서 중력에 의해 흐르도록 구성되는, 시스템.
25. 구현예 1 내지 34 중 어느 하나에 있어서, 상기 시스템은 서브시스템 중 2개 이상 간에 유체를 흘리도록 구성된 하나 이상의 펌프를 포함하는, 시스템.
26. 구현예 1 내지 25 중 어느 하나에 있어서, 서브시스템 중 하나 이상은 서브시스템의 하나 이상의 구성요소의 무결성을 개별적으로 테스트할 수 있는, 시스템.
27. 세포를 가공하기 위한 방법으로서, 상기 방법은 현탁액 제조 서브시스템, 세포 변형 서브시스템, 희석 서브시스템, 인큐베이션 서브시스템, 세포 세척 서브시스템, 및 용기 충진 서브시스템을 포함하는 시스템에 의해 수행되고, 상기 방법은 다음 단계를 포함하는, 방법:
현탁액 제조 서브시스템에서:
세포를 수용하는 단계;
세포에 대해 세포 단리 작업을 수행하는 단계;
전달 배지를 수용하는 단계; 및
세포를 전달 배지에 현탁시켜 세포 현탁액을 생성하는 단계;
세포 변형 서브시스템에서:
현탁액 제조 서브시스템으로부터 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계; 및
하나 이상의 세포 변형 협착부를 통해 세포 현탁액을 흘려 세포의 세포 막에서 섭동을 일으켜 페이로드를 세포 내로 진입시키는 단계;
희석 서브시스템에서:
세포 변형 서브시스템으로부터 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계;
유체 시약 또는 건조 시약을 수용하는 단계; 및
세포 현탁액을 유체 시약 또는 건조 시약과 혼합함으로써 희석된 세포 현탁액을 생성하는 단계;
인큐베이션 서브시스템에서:
희석 서브시스템으로부터 희석된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계; 및
세포 현탁액의 온도를 조절하는 단계;
세포 세척 서브시스템에서:
인큐베이션 서브시스템으로부터 희석된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계; 및
세포에 대한 제1 완충액 교환 작업을 수행하여 세포를 보존 배지에 현탁하는 단계; 및
용기 충진 서브시스템에서:
세포 세척 서브시스템으로부터 보존 배지에 현탁된 세포의 흐름을 수용하는 단계; 및
보존 배지에 현탁된 세포를 하나 이상의 용기 내로 흘리는 단계.
28. 혈액을 가공하기 위한 시스템에 사용하기 위한 일회용 키트로서, 다음을 포함하는 키트:
상기 시스템의 현탁액 제조 서브시스템에 사용 가능하도록 구성되고, 다음 중 하나 또는 둘 다를 포함하는 제1 세트의 일회용 구성요소:
나선형 관성 분리 미세 유체 소모품; 및
제1 접선 유동 여과 막 어셈블리;
상기 시스템의 세포 변형 서브시스템에 사용 가능하도록 구성되고, 다음 중 하나 또는 둘 다를 포함하는 제2 세트의 일회용 구성요소:
세포를 가압하여 세포 막의 섭동을 일으킬 수 있는 하나 이상의 세포 변형 협착부를 포함하는 구성요소; 및
유체를 수용하여, 하나 이상의 세포 변형 협착부를 포함하는 구성요소로 및 이로부터 유체를 전달하기 위한 카트리지;
상기 시스템의 현탁액 제조 서브시스템에 사용 가능하도록 구성되고, 제1 세포 응집물 필터를 포함하는 제3 세트의 일회용 구성요소:
상기 시스템의 인큐베이션 서브시스템에 사용 가능하도록 구성되고, 제2 세포 응집물 필터를 포함하는 제4 세트의 일회용 구성요소:
상기 시스템의 세포 세척 서브시스템에 사용 가능하도록 구성되고, 제2 접선 유동 여과 막 어셈블리를 포함하는 제5 세트의 일회용 구성요소; 및
상기 시스템의 용기 충진 서브시스템에 사용 가능하도록 구성되고, 제3 세포 응집물 필터를 포함하는 제6 세트의 일회용 구성요소.
29. 구현예 28에 있어서, 키트의 일회용 구성요소 세트 중 하나 이상의 구성요소 중 하나 이상은 상기 시스템의 상응하는 서브시스템의 하나 이상의 구성요소에 유체 연결되도록 구성되는, 키트.
30. 구현예 28 내지 29 중 어느 하나에 있어서,
제2 세트의 일회용 구성요소의 일회용 구성요소 중 하나 이상은 제1 세트의 일회용 구성요소의 일회용 구성요소 중 하나 이상에 유체 연결되어 이로부터 유체 흐름을 수용하도록 구성되고;
제3 세트의 일회용 구성요소의 일회용 구성요소 중 하나 이상은 제2 세트의 일회용 구성요소의 일회용 구성요소 중 하나 이상에 유체 연결되어 이로부터 유체 흐름을 수용하도록 구성되고;
제4 세트의 일회용 구성요소의 일회용 구성요소 중 하나 이상은 제3 세트의 일회용 구성요소의 일회용 구성요소 중 하나 이상에 유체 연결되어 이로부터 유체 흐름을 수용하도록 구성되고;
제5 세트의 일회용 구성요소의 일회용 구성요소 중 하나 이상은 제4 세트의 일회용 구성요소의 일회용 구성요소 중 하나 이상에 유체 연결되어 이로부터 유체 흐름을 수용하도록 구성되고;
제6 세트의 일회용 구성요소의 일회용 구성요소 중 하나 이상은 제5 세트의 일회용 구성요소의 일회용 구성요소 중 하나 이상에 유체 연결되어 이로부터 유체 흐름을 수용하도록 구성되는, 키트.
31. 구현예 28 내지 30 중 어느 하나에 있어서, 제1 세트의 일회용 구성요소는 세포 응집물 필터를 포함하는, 키트.
32. 구현예 28 내지 31 중 어느 하나에 있어서, 제1 세트의 일회용 구성요소는 백혈구 제거 필터를 포함하는, 키트.
33. 구현예 28 내지 32 중 어느 하나에 있어서, 제1 세트의 일회용 구성요소는 샘플링 벌브를 포함하는, 키트.
34. 구현예 28 내지 33 중 어느 하나에 있어서, 제1 세트의 일회용 구성요소는 다음 중 하나 이상을 포함하는, 키트: 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 백, 및 카보이.
35. 구현예 28 내지 34 중 어느 하나에 있어서, 제2 세트의 일회용 구성요소는 강성 샘플 용기를 포함하는, 키트.
36. 구현예 28 내지 35 중 어느 하나에 있어서, 제2 세트의 일회용 구성요소는 세포 응집물 필터를 포함하는, 키트.
37. 구현예 28 내지 36 중 어느 하나에 있어서, 제2 세트의 일회용 구성요소는 다음 중 하나 이상을 포함하는, 키트: 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 및 백.
38. 구현예 28 내지 37 중 어느 하나에 있어서, 제3 세트의 일회용 구성요소는 샘플링 벌브를 포함하는, 키트.
39. 구현예 28 내지 38 중 어느 하나에 있어서, 제3 세트의 일회용 구성요소는 다음 중 하나 이상을 포함하는, 키트: 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 백, 및 카보이.
40. 구현예 28 내지 39 중 어느 하나에 있어서, 제4 세트의 일회용 구성요소는 다음 중 하나 이상을 포함하는, 키트: 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 및 백.
41. 구현예 28 내지 40 중 어느 하나에 있어서, 제5 세트의 일회용 구성요소는 세포 응집물 필터를 포함하는, 키트.
42. 구현예 28 내지 41 중 어느 하나에 있어서, 제5 세트의 일회용 구성요소는 샘플링 벌브를 포함하는, 키트.
43. 구현예 28 내지 42 중 어느 하나에 있어서, 제5 세트의 일회용 구성요소는 다음 중 하나 이상을 포함하는, 키트: 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 백, 및 카보이.
44. 구현예 28 내지 43 중 어느 하나에 있어서, 제6 세트의 일회용 구성요소는 샘플링 벌브를 포함하는, 키트.
45. 구현예 28 내지 44 중 어느 하나에 있어서, 제6 세트의 일회용 구성요소는 다음 중 하나 이상을 포함하는, 키트: 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 및 백.
46. 세포를 가공하기 위한 시스템으로서, 상기 시스템은:
세포를 수용하고, 세포에 대한 세포 단리 작업을 수행하고, 전달 배지를 수용하고, 세포를 전달 배지에 현탁시켜 세포 현탁액을 생성하도록 구성되는 현탁액 제조 서브시스템;
현탁액 제조 서브시스템과 유체 연통하도록 구성된 세포 변형 서브시스템으로서, 현탁액 제조 서브시스템으로부터 세포 현탁액을 수용하고, 하나 이상의 세포 변형 협착부를 통해 세포 현탁액을 흘려 세포의 세포 막에서 섭동을 일으켜 페이로드를 세포 내로 진입시키도록 구성되는, 세포 변형 서브시스템;
세포 변형 서브시스템과 유체 연통하는 온도 조절 서브시스템으로서, 세포 변형 서브시스템으로부터 세포 현탁액을 수용하고, 유체 시약 또는 건조 시약을 수용하고, 세포 현탁액을 유체 시약 또는 건조 시약과 혼합시켜 희석된 세포 현탁액을 생성하도록 구성되고; 추가로, 희석된 세포 현탁액의 온도를 조절하도록 구성되는, 온도 조절 서브시스템;
인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하는 세포 세척 서브시스템으로서, 희석된 세포 현탁액을 수용하고 세포에 대해 제1 완충액 교환 작업을 수행하여 세포를 보존 배지에 현탁하도록 구성되는, 세포 세척 서브시스템; 및
인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하는 용기 충진 서브시스템으로서, 세포 세척 서브시스템으로부터 보존 배지에 현탁된 세포를 수용하고, 보존 배지에 현탁된 세포를 하나 이상의 용기 내로 흘리도록 구성되는 용기 충진 시스템을 포함하는, 시스템.
5.
용어
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "약" 및 "대략"이 수치 값 또는 수치 범위를 수식하는 데 사용될 때, 이들 용어는 값 또는 범위보다 최대 10%의 상방 편차 최대 10%의 하방 편차가 인용된 값 또는 범위의 의도된 의미 내에서 유지된다는 것을 나타낸다. 양태가 "약" 또는 "대략"이라는 용어와 함께 본원에서 기술되는 곳마다, 특정 수치 값 또는 범위를 지칭하는 수치 값 또는 범위, 달리 유사한 양태가 또한 제공된다는 것을 이해할 것이다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "일회용"은 예를 들어 프레임, 다른 장치, 또는 다른 구성요소에 분리 가능하게 결합될 수 있는 장치 또는 구성요소를 일반적으로 지칭한다. 일부 양태에서, 본원에 기술된 세포를 가공하기 위한 현장 진료 시스템은 이하에서 추가로 기술된 것과 같은 이러한 일회용 구성요소를 사용한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "연통하다"(예를 들어 제1 구성요소는 제2 구성요소와 "연통한다") 및 "결합되다"(예를 들어 제1 구성 요소는 제2 구성 요소에 "결합된다")는 2개 이상의 구성요소 또는 요소 간의 구조적, 기능적, 기계적, 광학적, 전기적, 또는 유체적 관계, 또는 이들의 임의의 조합을 나타내도록 본원에서 사용된다. 이와 같이, 하나의 구성요소가 제2 구성요소와 연통하거나 결합된다고 언급되는 사실은 추가 구성요소가 제1 구성요소와 제2 구성요소 사이에 존재할 수 있고/있거나 이들과 작동 가능하게 결합 또는 맞물릴 수 있는 가능성을 배제하도록 의도되지는 않는다. 또한, 용어 "유체 연통하는" 및 "유체 연결되는"은 본원에서 상호 교환적으로 사용된다는 점에 주목한다.
본 발명은 본원에 기술된 특정 양태에 의해 그 범주가 제한되지 않는다. 실제로, 기술된 것들 이외에 본 발명의 다양한 변형은 전술한 설명 및 첨부 도면으로부터 당업자에게 명백해질 것이다. 이러한 변형은 첨부된 청구범위의 범주 내에 포함되도록 의도된다.
Claims (176)
- 세포를 가공하기 위한 시스템으로서, 상기 시스템은:
다음을 포함하는 현탁액 제조 서브시스템:
전달 배지 유입구;
세포를 단리하도록 구성된 세포 단리 장치;
단리된 세포를 전달 배지에 현탁시켜 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 세포 현탁 장치;
현탁액 제조 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 세포 변형 서브시스템:
세포 현탁액 유입구;
세포의 세포 막에서 섭동을 일으켜 페이로드를 세포 내로 진입시켜 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 생산하도록 구성된 하나 이상의 세포 변형 협착부;
세포 변형 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 희석 서브시스템:
세포 현탁액 유입구;
완충액 유입구;
조작된 세포가 포함된 세포 현탁액 및 유체 시약 또는 건조 시약을 수용하고, 유체 시약 또는 건조 시약과 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 혼합하여 희석된 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 용기;
희석 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 인큐베이션 서브시스템:
희석된 세포 현탁액 유입구;
희석된 세포 현탁액을 수용하도록 구성된 용기; 및
용기 내의 희석된 세포 현탁액의 온도를 조절하여 인큐베이션된 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 플레이트;
인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 세포 세척 서브시스템:
인큐베이션된 세포 현탁액 유입구;
보존 배지 유입구;
인큐베이션된 세포 현탁액 및 보존 배지를 수용하는 용기로서, 용기 내에서 보존 배지와 인큐베이션된 세포 현탁액을 혼합하여 세포를 보존 배지에 현탁시키도록 구성된 용기;
인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 용기 충진 서브시스템:
보존 배지에 현탁된 세포를 수용하도록 구성된 유입구;
보존 배지에 현탁된 세포를 수용하도록 구성된 하나 이상의 용기; 및
보존 배지에 현탁된 세포를 하나 이상의 용기 내로 펌핑하도록 구성된 하나 이상의 펌프를 포함하되,
서브시스템 중 적어도 하나는 상기 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합되는, 시스템. - 제1항에 있어서, 상기 시스템은 멸균 상태이고, 비멸균 위치에서 사용되도록 구성되는, 시스템.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 시스템은 가공된 세포를 약 5시간 내지 약 7시간 이내에 생산하는, 시스템.
- 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 세포는 적혈구(RBC)를 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 세포는 적혈구 유래 소포를 포함하는, 방법.
- 제5항에 있어서, 적혈구 유래 소포는 활성화 항원 담체(AAC)를 포함하는, 방법.
- 제5항에 있어서, 적혈구 유래 소포는 내약성 유도 항원 담체(TAC)을 포함하는, 방법.
- 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 세포는 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)를 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, T 세포, B 세포, 수지상 세포, 단핵구, 대식세포, 호산구, 호염기구, 자연 살해(NK) 세포, 자연 살해 T(NKT) 세포, 비만 세포, 또는 호중구를 포함하는, 방법.
- 제1항 내지 제4항 또는 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 세포는 항원 제시 세포(APC)를 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 희석 서브시스템의 세포 현탁액 유입구와 완충액 유입구는 동일한 유입구인, 방법.
- 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 완충액 유입구는 유체를 희석 서브시스템에 전달하는 데 사용되는, 방법.
- 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 완충액 유입구는 건조 시약을 희석 서브시스템에 전달하는 데 사용되는, 방법.
- 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 페이로드는 하나 이상의 재프로그래밍 인자를 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 페이로드는 하나 이상의 핵산을 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 페이로드는 하나 이상의 분화 인자를 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 페이로드는 하나 이상의 뉴런 재프로그래밍 인자를 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 서브시스템 중 하나 이상은 상기 시스템에 분리 가능하게 결합하도록 구성된 하나 이상의 구성요소를 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 현탁액 제조 서브시스템은 세척 배지 유입구를 추가로 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 현탁액 제조 서브시스템은 희석 배지 유입구를 추가로 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 현탁액 제조 서브시스템은 세포에 대해 세포 단리 작업을 수행하도록 구성된 용출 시스템을 추가로 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 현탁액 제조 서브시스템은 세포에 대해 세포 단리 작업을 수행하도록 구성된 백혈구 제거 필터 시스템을 추가로 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 현탁액 제조 서브시스템은 완충액 교환 작업을 수행하도록 구성된 접선 유동 여과 시스템을 추가로 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 현탁액 제조 서브시스템은 전달 배지에 현탁된 세포를 수용하기 위한 적어도 하나의 용기에 결합되도록 구성된 적어도 하나의 배출구를 추가로 포함하는, 시스템.
- 제24항에 있어서, 용기는 적어도 하나의 유입구 및 적어도 하나의 배출구를 포함하는 백인, 시스템.
- 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 현탁액 제조 서브시스템은 용기를 칭량하도록 구성된 저울 시스템을 포함하는, 시스템.
- 제26항에 있어서, 저울 시스템은 장력 로드 셀을 포함하는, 시스템.
- 제26항에 있어서, 저울 시스템은 압축 로드 셀을 포함하는, 시스템.
- 제26항에 있어서, 저울 시스템은 직선 막대형 로드 셀을 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서, 현탁액 제조 서브시스템은, 용기와 접촉하여 용기를 위아래로 진탕하도록 구성된 플랫폼을 포함하는 교반 시스템을 추가로 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, 현탁액 제조 서브시스템은, 용기와 접촉하여 용기와 접촉한 상태로 앞뒤로 이동하도록 구성된 플레이트를 포함하는 교반 시스템을 추가로 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, 현탁액 제조 서브시스템은 서브시스템 내에서 또는 유체 연결된 서브시스템들 간에 유체를 이동시키도록 구성된 하나 이상의 펌프를 추가로 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서, 현탁액 제조 서브시스템은 혈장을 제거할 수 있는, 시스템.
- 제1항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 현탁액 제조 서브시스템은 혈청을 제거할 수 있는, 시스템.
- 제1항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 변형 서브시스템은 하나 이상의 세포 변형 협착부를 통해 세포 현탁액을 가압하도록 압력을 생성하도록 구성된 가압 시스템을 추가로 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제35항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 변형 서브시스템은 하나 이상의 세포 변형 협착부를 통해 세포 현탁액을 유동시키도록 구성된 제조 용기를 추가로 포함하는, 시스템.
- 제36항에 있어서, 제조 용기는 강성 저장조 서브어셈블리인, 시스템.
- 제1항 내지 제37항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 변형 서브시스템은 세포 현탁액의 온도를 조절하도록 구성된 가열식 플레이트를 포함하는 온도 조절 시스템을 추가로 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 변형 서브시스템은 세포 현탁액 또는 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 수용하기 위한 적어도 하나의 용기에 결합되도록 구성된 적어도 하나의 배출구를 추가로 포함하는, 시스템.
- 제39항에 있어서, 용기는 적어도 하나의 유입구 및 적어도 하나의 배출구를 포함하는 백인, 시스템.
- 제39항 또는 제40항에 있어서, 세포 변형 서브시스템은, 적어도 하나의 용기와 접촉하여 용기를 위아래로 진탕하도록 구성된 플랫폼을 포함하는 교반 시스템을 추가로 포함하는, 시스템.
- 제41항에 있어서, 적어도 하나의 용기와 접촉하는 플랫폼을 포함하는 교반 시스템은 세포 현탁액 또는 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액의 균질성을 촉진하기 위해 용기를 위아래로 진탕하도록 구성되는, 시스템.
- 제41항 또는 제42한 항에 있어서, 세포 변형 서브시스템은, 용기와 접촉하여 용기와 접촉한 상태로 앞뒤로 이동하도록 구성된 플레이트를 포함하는 교반 시스템을 추가로 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, 희석 서브시스템은 용기를 칭량하기 위한 저울 시스템을 포함하는, 시스템.
- 제44항에 있어서, 용기를 칭량하기 위한 저울 시스템은 장력 로드 셀을 포함하는, 시스템.
- 제44항에 있어서, 용기를 칭량하기 위한 저울 시스템은 압축 로드 셀을 포함하는, 시스템.
- 제44항에 있어서, 용기를 칭량하기 위한 저울 시스템은 직선 막대형 로드 셀을 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제47항 중 어느 한 항에 있어서, 희석 서브시스템은 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액의 세포에 첨가되는 완충액의 양을 측정하기 위한 저울 시스템을 포함하는, 시스템.
- 제46항에 있어서, 완충액의 양을 측정하기 위한 저울 시스템은 장력 로드 셀을 포함하는, 시스템.
- 제46항에 있어서, 완충액의 양을 측정하기 위한 저울 시스템은 압축 로드 셀을 포함하는, 시스템.
- 제46항에 있어서, 완충액의 양을 측정하기 위한 저울 시스템은 직선 막대형 로드 셀을 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제51항 중 어느 한 항에 있어서, 희석 서브시스템은 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 수용하도록 구성된 용기에 결합되도록 구성된 적어도 하나의 배출구를 포함하는, 시스템.
- 제52항에 있어서, 용기는 적어도 하나의 유입구 및 적어도 하나의 배출구를 포함하는 백인, 시스템.
- 제1항 내지 제53항 중 어느 한 항에 있어서, 희석 서브시스템은, 용기와 접촉하여 용기를 위아래로 진탕하도록 구성된 플랫폼을 포함하는 교반 시스템을 추가로 포함하는, 시스템.
- 제54항에 있어서, 용기와 접촉하는 플랫폼을 포함하는 제1 교반 시스템은 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액 또는 희석된 세포 현탁액의 균질성을 촉진하기 위해 용기를 위아래로 진탕하여 세포 현탁액을 교반하도록 구성되는, 시스템.
- 제1항 내지 제55항 중 어느 한 항에 있어서, 희석 서브시스템은, 용기와 접촉하여 용기와 접촉한 상태로 앞뒤로 이동하도록 구성된 플레이트를 포함하는 제1 교반 시스템을 추가로 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제56항 중 어느 한 항에 있어서, 희석 서브시스템은 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액 및 희석된 세포 현탁액을 비추도록 구성된 조명 시스템을 추가로 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제57항 중 어느 한 항에 있어서, 희석 서브시스템은, 용기와 접촉하여 용기를 위아래로 진탕하도록 구성된 플랫폼을 포함하는 제2 교반 시스템을 추가로 포함하는, 시스템.
- 제58항에 있어서, 제2 교반 시스템은 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액 또는 희석된 세포 현탁액의 균질성을 촉진하기 위해 용기를 위아래로 진탕하여 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액 또는 희석된 세포 현탁액을 교반하도록 구성되는, 시스템.
- 제1항 내지 제59항 중 어느 한 항에 있어서, 희석 서브시스템은, 용기와 접촉하여 용기와 접촉한 상태로 앞뒤로 이동하도록 구성된 플레이트를 포함하는 제2 교반 시스템을 추가로 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제60항 중 어느 한 항에 있어서, 희석 서브시스템은 유체 연결된 서브시스템들 간에 유체를 이동시키도록 구성된 적어도 하나의 펌프를 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, 인큐베이션 서브시스템은 희석된 세포 현탁액의 온도를 조절하도록 구성된 온도 조절 장치를 포함하는, 시스템.
- 제62항에 있어서, 온도 조절 장치는 가열식 플레이트인, 시스템.
- 제1항 내지 제63항 중 어느 한 항에 있어서, 인큐베이션 서브시스템은 희석된 세포 현탁액의 세포에 첨가되는 완충액의 양을 측정하도록 구성된 저울 시스템을 포함하는, 시스템.
- 제64항에 있어서, 저울 시스템은 장력 로드 셀을 포함하는, 시스템.
- 제64항에 있어서, 저울 시스템은 압축 로드 셀을 포함하는, 시스템.
- 제64항에 있어서, 저울 시스템은 직선 막대형 로드 셀을 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제67항 중 어느 한 항에 있어서, 인큐베이션 서브시스템은, 용기와 접촉하여 용기를 위아래로 진탕하도록 구성된 플랫폼을 포함하는 제1 교반 시스템을 포함하는, 시스템.
- 제68항에 있어서, 용기와 접촉하는 플랫폼을 포함하는 제1 교반 시스템은 희석된 세포 현탁액 또는 인큐베이션된 세포 현탁액의 균질성을 촉진하기 위해 용기를 위아래로 진탕하여 희석된 세포 현탁액을 교반하도록 구성되는, 시스템.
- 제1항 내지 제69항 중 어느 한 항에 있어서, 인큐베이션 서브시스템은, 용기와 접촉하여 용기를 위아래로 진탕하도록 구성된 플랫폼을 포함하는 제2 교반 시스템을 포함하는, 시스템.
- 제70항에 있어서, 용기와 접촉하는 플랫폼을 포함하는 제1 교반 시스템은 희석된 세포 현탁액 또는 인큐베이션된 세포 현탁액의 균질성을 촉진하기 위해 용기를 위아래로 진탕하여 세포 현탁액을 교반하도록 구성되는, 시스템.
- 제1항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, 인큐베이션 서브시스템은 유체 연결된 서브시스템들 간에 유체를 이동시키도록 구성된 적어도 하나의 펌프를 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제72항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 세척 서브시스템은 완충액 교환 작업을 수행하도록 구성된 접선 유동 여과 시스템을 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제73항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 세척 서브시스템은 완충액 교환 작업 동안 세포에 첨가되는 완충액의 양을 측정하도록 구성된 저울 시스템을 포함하는, 시스템.
- 제74항에 있어서, 저울 시스템은 장력 로드 셀인, 시스템.
- 제74항에 있어서, 저울 시스템은 압축 로드 셀인, 시스템.
- 제74항에 있어서, 저울 시스템은 직선 막대형 로드 셀인, 시스템.
- 제1항 내지 제77항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 세척 서브시스템은 용기에 결합되도록 구성된 적어도 하나의 배출구를 포함하는, 시스템.
- 제78항에 있어서, 용기는 적어도 하나의 유입구 및 적어도 하나의 배출구를 포함하는 백인, 시스템.
- 제1항 내지 제79항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 세척 서브시스템은, 용기와 접촉하여 용기를 위아래로 진탕하도록 구성된 플랫폼을 포함하는 교반 시스템을 포함하는, 시스템.
- 제80항에 있어서, 용기와 접촉하는 플랫폼을 포함하는 교반 시스템은 희석된 세포 현탁액 또는 보존 배지에 현탁된 세포의 균질성을 촉진하기 위해 용기를 위아래로 진탕하여 인큐베이션된 세포 현탁액 또는 보존 배지에 현탁된 세포를 교반하도록 구성되는, 시스템.
- 제1항 내지 제81항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 세척 서브시스템은 희석된 세포 현탁액 또는 보존 배지에 현탁된 세포를 비추도록 구성된 조명 시스템을 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제82항 중 어느 한 항에 있어서, 보존 배지는 동결 보호 배지인, 시스템.
- 제1항 내지 제83항 중 어느 한 항에 있어서, 용기 충진 서브시스템은 하나 이상의 용기에 첨가되는 보존 배지에 현탁된 세포의 양을 측정하도록 구성된 저울 시스템을 포함하는, 시스템.
- 제84항에 있어서, 저울 시스템은 장력 로드 셀을 포함하는, 시스템.
- 제84항에 있어서, 저울 시스템은 압축 로드 셀을 포함하는, 시스템.
- 제84항에 있어서, 저울 시스템은 직선 막대형 로드 셀을 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제87항 중 어느 한 항에 있어서, 용기 충진 서브시스템은, 용기와 접촉하여 용기를 위아래로 진탕하도록 구성된 플랫폼을 포함하는 교반 시스템을 포함하는, 시스템.
- 제88항에 있어서, 용기와 접촉하는 플랫폼을 포함하는 교반 시스템은 하나 이상의 용기 내의 보존 배지에 현탁된 세포의 균질성을 촉진하기 위해 용기를 위아래로 진탕하여 보존 배지에 현탁된 세포를 교반하도록 구성되는, 시스템.
- 제1항 내지 제89항 중 어느 한 항에 있어서, 용기 충진 서브시스템은 하나 이상의 용기 내의 보존 배지에 현탁된 세포를 비추도록 구성된 조명 시스템을 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제90항 중 어느 한 항에 있어서, 용기 충진 서브시스템은 하나 이상의 용기에 결합되도록 구성된 적어도 하나의 배출구를 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제91항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 세척 서브시스템의 하나 이상의 용기는 적어도 하나의 유입구 및 적어도 하나의 배출구를 포함하는 하나 이상의 백을 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제92항 중 어느 한 항에 있어서, 용기 충진 서브시스템은 서브시스템 내에서 또는 유체 연결된 서브시스템들 간에 유체를 이동시키도록 구성된 적어도 하나의 펌프를 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제93항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 시스템은 서브시스템 중 둘 이상 간에 유체를 펌핑하도록 구성된 하나 이상의 펌프를 포함하는, 시스템.
- 제1항 내지 제94항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 시스템은 비멸균 환경에서 사용되는, 시스템.
- 제1항 내지 제95항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 시스템은 세포를 가공하기 위한 자동 시스템인, 시스템.
- 제1항 내지 제96항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 시스템은 세포 치료제용 세포를 가공하는, 시스템.
- 제1항 내지 제97항 중 어느 한 항에 있어서, 현탁액 제조 서브시스템은 다음 중 하나 이상을 추가로 포함하는, 시스템: 세포 응집물 필터, 백혈구 제거 필터, 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 샘플링 벌브, 카보이, 및 공기 필터.
- 제1항 내지 제98항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 변형 서브시스템은 다음 중 하나 이상을 추가로 포함하는, 시스템: 강성 샘플 용기, 셀 응집물 필터, 강성 제조 용기, 하나 이상의 미세 유체 칩 카트리지, 하나 이상의 미세 유체 칩, 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 공기 필터, 및 배럴 필터.
- 제1항 내지 제99항 중 어느 한 항에 있어서, 희석 서브시스템은 다음 중 하나 이상을 추가로 포함하는, 시스템: 세포 응집물 필터, 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 샘플링 벌브, 및 카보이.
- 제1항 내지 제100항 중 어느 한 항에 있어서, 인큐베이션 서브시스템은 다음 중 하나 이상을 추가로 포함하는, 시스템: 세포 응집물 필터, 배관, 배관 이음부, 커넥터, 및 클램프.
- 제1항 내지 제101항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 세척 서브시스템은 다음 중 하나 이상을 추가로 포함하는, 시스템: 세포 응집물 필터, 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 샘플링 벌브, 공기 필터, 및 카보이.
- 제1항 내지 제102항 중 어느 한 항에 있어서, 용기 충진 서브시스템은 다음 중 하나 이상을 추가로 포함하는, 시스템: 세포 응집물 필터, 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 및 샘플링 벌브.
- 세포를 가공하기 위한 방법으로서, 상기 방법은 현탁액 제조 서브시스템, 세포 변형 서브시스템, 희석 서브시스템, 인큐베이션 서브시스템, 세포 세척 서브시스템, 및 용기 충진 서브시스템 중 하나 이상을 포함하는 시스템에 의해 수행되고, 상기 방법은 다음 단계를 포함하는, 방법:
i. 현탁액 제조 서브시스템에서:
(1) 용기로부터 세포를 수용하는 단계;
(2) 세포에 대한 세포 단리 작업을 수행하여 단리된 세포를 생산하는 단계;
(3) 전달 배지 유입구를 통해 전달 배지를 수용하는 단계; 및
(4) 단리된 세포를 전달 배지에 현탁시켜 세포 현탁액을 생산함으로써 세포 현탁액을 생산하는 단계;
ii. 세포 변형 서브시스템에서:
(1) 현탁액 제조 서브시스템으로부터 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계;
(2) 세포의 세포 막에서 섭동을 일으켜 페이로드를 세포 내로 진입시켜 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 생산하도록 구성된 하나 이상의 세포 변형 협착부를 통해 세포 현탁액을 흘리는 단계;
iii. 희석 서브시스템에서:
(1) 세포 변형 서브시스템으로부터 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계;
(2) 완충액 유입구를 통해 유체 시약 또는 건조 시약을 수용하는 단계; 및
(3) 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 유체 시약 또는 건조 시약과 혼합함으로써 희석된 세포 현탁액을 생산하는 단계;
iv. 인큐베이션 서브시스템에서:
(1) 희석 서브시스템으로부터 희석된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계; 및
(2) 희석된 세포 현탁액의 온도를 조절하여, 인큐베이션된 세포 현탁액을 생산하는 단계;
v. 세포 세척 서브시스템에서:
(1) 인큐베이션 서브시스템으로부터 인큐베이션된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계;
(2) 세포에 대한 완충액 교환 작업을 수행하여 세포를 보존 배지에 현탁하는 단계; 및
vi. 용기 충진 서브시스템에서:
(1) 세포 세척 서브시스템으로부터 보존 배지에 현탁된 세포의 흐름을 수용하는 단계; 및
(2) 보존 배지에 현탁된 세포를 하나 이상의 용기 내로 도입하는 단계. - 제104항에 있어서, 세포는 적혈구(RBC)를 포함하는, 방법.
- 제104항 또는 제105항에 있어서, 세포는 적혈구 유래 소포를 포함하는, 방법.
- 제106항에 있어서, 적혈구 유래 소포는 활성화 항원 담체(AAC)를 포함하는, 방법.
- 제106항에 있어서, 적혈구 유래 소포는 내약성 유도 항원 담체(TAC)를 포함하는, 방법.
- 제104항에 있어서, 세포는 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)를 포함하는, 방법.
- 제104항에 있어서, 세포는 T 세포, B 세포, 수지상 세포, 단핵구, 대식세포, 호산구, 호염기구, 자연 살해(NK) 세포, 자연 살해 T(NKT) 세포, 비만 세포, 또는 호중구를 포함하는, 방법.
- 제104항, 제105항, 또는 제109항에 있어서, 세포는 항원 제시 세포(APC)를 포함하는, 방법.
- 제104항 내지 제111항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 혈장을 제거하는, 방법.
- 제104항 내지 제112항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 혈청을 제거하는, 방법.
- 제104항 내지 제113항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 약 5 내지 약 7시간 이내에 수행되는, 방법.
- 제104항 내지 제114항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 세포 치료제를 생산하는, 방법.
- 제104항 내지 제115항 중 어느 한 항에 있어서, 페이로드는 하나 이상의 재프로그래밍 인자를 포함하는, 방법.
- 제104항 내지 제116항 중 어느 한 항에 있어서, 페이로드는 하나 이상의 핵산을 포함하는, 방법.
- 제104항 내지 제117항 중 어느 한 항에 있어서, 페이로드는 하나 이상의 분화 인자를 포함하는, 방법.
- 제104항 내지 제118항 중 어느 한 항에 있어서, 페이로드는 하나 이상의 뉴런 재프로그래밍 인자를 포함하는, 방법.
- 제104항 내지 제119항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 세포를 가공하기 위한 자동 방법인, 방법.
- 제104항 내지 제120항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 비멸균 환경에서 멸균 시스템에 의해 수행되는, 방법.
- 세포를 가공하기 위한 시스템에서 사용하기 위한 키트로서, 상기 키트는 다음 중 하나 이상을 포함하는, 키트:
i. 상기 시스템의 현탁액 제조 서브시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있도록 구성된 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소를 포함하는 제1 키트로서, 제1 세트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소는 다음을 포함하는, 제1 키트:
(1) 세포 단리 장치; 및/또는
(2) 세포 현탁 장치;
ii. 상기 시스템의 세포 변형 서브시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있도록 구성된 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소를 포함하는 제2 키트로서, 제2 세트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소는, 세포 막의 섭동을 야기하도록 세포가 가압될 수 있는 하나 이상의 세포 변형 협착부를 포함하는 하나 이상의 미세 유체 칩을 포함하는, 제2 키트;
iii. 상기 시스템의 희석 서브시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있도록 구성된 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소를 포함하는 제3 키트로서, 제3 세트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소는 적어도 하나의 세포 응집물 필터를 포함하는, 제3 키트;
iv. 상기 시스템의 인큐베이션 서브시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있도록 구성된 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소를 포함하는 제4 키트로서, 제4 세트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소는 적어도 하나의 세포 응집물 필터를 포함하는, 제4 키트;
v. 상기 시스템의 세포 세척 서브시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있도록 구성된 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소를 포함하는 제5 키트로서, 제5 세트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소는 제2 접선 유동 여과 막 어셈블리를 포함하는, 제5 키트;
vi. 상기 시스템의 용기 충진 서브시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있도록 구성된 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소를 포함하는 제6 키트로서, 제6 세트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소는 적어도 하나의 세포 응집물 필터를 포함하는, 제6 키트. - 제122항에 있어서, 키트 중 하나 이상의 구성요소 중 하나 이상은 상기 시스템의 상응하는 서브시스템의 하나 이상의 구성요소에 유체 연결되도록 구성되는, 키트.
- 제122항에 있어서, 세포 단리 장치는 적어도 하나의 용출 장치를 포함하는, 키트.
- 제122항에 있어서, 세포 단리 장치는 적어도 하나의 백혈구 제거 필터를 포함하는, 키트.
- 제122항 내지 제125항 중 어느 한 항에 있어서, 제1 키트는 세포 단리 장치를 포함하는, 키트.
- 제122항 내지 제126항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 현탁 장치는 접선 유동 여과 막 어셈블리인, 키트.
- 제122항 내지 제127항 중 어느 한 항에 있어서,
i. 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제2 키트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상은 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제1 키트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상에 유체 연결되도록 구성되고;
ii. 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제3 키트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상은 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제2 세트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상에 유체 연결되도록 구성되고;
iii. 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제4 키트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상은 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제3 키트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상에 유체 연결되도록 구성되고;
iv. 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제5 키트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상은 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제4 키트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상에 유체 연결되도록 구성되고/되거나;
v. 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제6 키트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상은 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제5 키트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소 중 하나 이상에 유체 연결되도록 구성되는, 키트. - 제122항 내지 제128항 중 어느 한 항에 있어서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제1 키트는 세포 응집물 필터를 포함하는, 키트.
- 제122항 내지 제129항 중 어느 한 항에 있어서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제1 키트는 백혈구 제거 필터를 포함하는, 키트.
- 제122항 내지 제130항 중 어느 한 항에 있어서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제1 키트는 용기를 포함하는, 키트.
- 제122항 내지 제131항 중 어느 한 항에 있어서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제1 키트는 접선 유동 여과 필터 어셈블리를 포함하는, 키트.
- 제122항 내지 제132항 중 어느 한 항에 있어서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제1 키트는 다음 중 하나 이상을 포함하는, 키트: 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 샘플링 벌브, 카보이, 공기 필터, 및 접선 유동 여과 필터 어셈블리.
- 제122항 내지 제133항 중 어느 한 항에 있어서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제2 키트는 강성 샘플 용기를 포함하는, 키트.
- 제122항 내지 제134항 중 어느 한 항에 있어서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제2 키트는 세포 응집물 필터를 포함하는, 키트.
- 제122항 내지 제135항 중 어느 한 항에 있어서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제2 키트는 제조 용기를 포함하는, 키트.
- 제122항 내지 제136항 중 어느 한 항에 있어서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제2 키트는 하나 이상의 미세 유체 칩을 포함하는, 키트.
- 제122항 내지 제137항 중 어느 한 항에 있어서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제2 키트는 하나 이상의 미세 유체 칩 카트리지을 포함하는, 키트.
- 제122항 내지 제138항 중 어느 한 항에 있어서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제2 키트는 다음 중 하나 이상을 포함하는, 키트: 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 용기, 백, 공기 필터, 및 배럴 필터.
- 제122항 내지 제139항 중 어느 한 항에 있어서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제3 키트는 용기를 포함하는, 키트.
- 제122항 내지 제140항 중 어느 한 항에 있어서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제3 키트는 세포 응집물 필터를 포함하는, 키트.
- 제122항 내지 제141항 중 어느 한 항에 있어서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제3 키트는 다음 중 하나 이상을 포함하는, 키트: 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 샘플링 벌브, 및 카보이.
- 제122항 내지 제142항 중 어느 한 항에 있어서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제4 키트는 세포 응집물 필터를 포함하는, 키트.
- 제122항 내지 제143항 중 어느 한 항에 있어서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제4 키트는 하나 이상의 용기를 포함하는, 키트.
- 제122항 내지 제144항 중 어느 한 항에 있어서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제4 키트는 다음 중 하나 이상을 포함하는, 키트: 배관, 배관 이음부, 커넥터, 및 클램프.
- 제122항 내지 제145항 중 어느 한 항에 있어서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제5 키트는 세포 응집물 필터를 포함하는, 키트.
- 제122항 내지 제146항 중 어느 한 항에 있어서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제5 키트는 용기를 포함하는, 키트.
- 제122항 내지 제147항 중 어느 한 항에 있어서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제5 키트는 접선 유동 여과 필터 어셈블리를 포함하는, 키트.
- 제122항 내지 제148항 중 어느 한 항에 있어서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제5 키트는 다음 중 하나 이상을 포함하는, 키트: 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 샘플링 벌브, 공기 필터, 및 카보이.
- 제122항 내지 제149항 중 어느 한 항에 있어서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제6 키트는 용기를 포함하는, 키트.
- 제150항에 있어서, 용기는 동결 보존 백인, 키트.
- 제122항 내지 제151항 중 어느 한 항에 있어서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제6 키트는 세포 응집물 필터를 포함하는, 키트.
- 제122항 내지 제152항 중 어느 한 항에 있어서, 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소의 제3 키트는 다음 중 하나 이상을 포함하는, 키트: 배관, 배관 이음부, 커넥터, 클램프, 및 샘플링 벌브.
- 제122항 내지 제153항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 키트는 제1, 제2, 제3, 제4, 제5, 및 제6 키트를 포함하는, 키트.
- 제154항에 있어서, 상기 키트는 아코디언 트레이 패키지로 포장되는, 키트.
- 제154항에 있어서, 상기 키트는 말 수 있는 시트로서 포장되는, 키트.
- 제154항에 있어서, 각각의 키트는 별도로 포장되는, 키트.
- 제154항에 있어서, 적어도 2개의 키트가 함께 포장되는, 키트.
- 제122항 내지 제158항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 키트는 멸균 상태인, 키트.
- 세포를 가공하기 위한 시스템으로서, 상기 시스템은:
다음을 포함하는 현탁액 제조 서브시스템: 세포 단리 장치; 접선 유동 여과 막 어셈블리; 세포 응집물 필터; 백혈구 제거 필터; 및 하나 이상의 용기;
현탁액 제조 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 세포 변형 서브시스템: 하나 이상의 미세 유체 칩; 강성 샘플 용기; 세포 응집물 필터;
세포 변형 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 희석 서브시스템: 용기, 세포 응집물 필터;
희석 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 인큐베이션 서브시스템: 세포 응집물 필터; 용기;
인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 세포 세척 서브시스템: 접선 유동 여과 막 어셈블리; 세포 응집물 필터; 용기; 및
인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 용기 충진 서브시스템: 용기, 세포 응집물 필터를 포함하고,
서브시스템 i~vi는 상기 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합되는, 시스템. - 세포를 가공하기 위한 시스템으로서, 상기 시스템은:
다음을 포함하는 현탁액 제조 시스템: 전달 배지 유입구; 세포를 단리하도록 구성된 세포 단리 장치; 단리된 세포를 전달 배지에 현탁시켜 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 세포 현탁 장치;
현탁액 제조 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 페이로드 진입 서브시스템: 셀 현탁액 유입구; 세포의 세포 막에 섭동을 일으켜 페이로드를 세포 내로 진입시키는 페이로드 진입 구성요소;
세포 변형 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 희석 서브시스템: 세포 현탁액 유입구; 완충액 유입구; 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액 및 완충액을 수용하고, 완충액을 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액과 혼합하여 희석된 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 용기;
희석 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 인큐베이션 서브시스템: 희석된 세포 현탁액 유입구; 희석된 세포 현탁액을 수용하도록 구성된 용기; 및 용기 내의 희석된 세포 현탁액의 온도를 조절하여 인큐베이션된 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 플레이트;
인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 세포 세척 서브시스템: 인큐베이션된 세포 현탁액 유입구; 보존 배지 유입구; 인큐베이션된 세포 현탁액 및 보존 배지를 수용하도록 구성된 용기로서, 보존 배지와 용기 내의 인큐베이션된 세포 현탁액을 혼합하여 세포를 보존 배지에 현탁하는, 용기;
인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 용기 충진 서브시스템: 보존 배지에 현탁된 세포를 수용하도록 구성된 유입구; 보존 배지에 현탁된 세포를 수용하도록 구성된 하나 이상의 용기; 및 보존 배지에 현탁된 세포를 하나 이상의 용기 내로 펌핑하도록 구성된 하나 이상의 펌프를 포함하고,
서브시스템 i~vi는 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있는, 시스템. - 제161항에 있어서, 페이로드 진입 구성요소는 전기천공 장치를 포함하는, 시스템.
- 제161항에 있어서, 페이로드 진입 구성요소는 세포 현탁액이 흐르는 하나 이상의 세포 변형 협착부를 포함하고, 세포 변형 협착부는 세포의 세포 막에 섭동을 일으켜 페이로드를 세포 내로 진입시키도록 구성되는, 시스템.
- 세포를 가공하기 위한 시스템으로서, 상기 시스템은:
현탁액 제조 서브시스템;
현탁액 제조 서브시스템과 유체 연통하는 세포 변형 서브시스템;
세포 변형 서브시스템과 유체 연통하는 희석 서브시스템;
희석 서브시스템과 유체 연통하는 인큐베이션 서브시스템;
인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하는 세포 세척 서브시스템;
인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하는 용기 충진 서브시스템을 포함하되,
서브시스템 중 적어도 하나는 상기 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합되는, 시스템. - 세포를 가공하기 위한 시스템으로서, 상기 시스템은:
현탁액 제조 서브시스템;
현탁액 제조 서브시스템과 유체 연통하는 세포 변형 서브시스템;
세포 변형 서브시스템과 유체 연통하는 온도 조절 서브시스템;
온도 조절 서브시스템과 유체 연통하는 세포 세척 서브시스템;
인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하는 용기 충진 서브시스템을 포함하되,
서브시스템 중 적어도 하나는 상기 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합되는, 시스템. - 세포를 가공하기 위한 시스템으로서, 상기 시스템은:
다음을 포함하는 현탁액 제조 서브시스템:
전달 배지 유입구;
세포를 전달 배지에 현탁하여 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 세포 현탁 장치;
현탁액 제조 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 세포 변형 서브시스템:
세포 현탁액 유입구;
세포의 세포 막에서 섭동을 일으켜 페이로드를 세포 내로 진입시켜 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 생산하도록 구성된 하나 이상의 세포 변형 협착부;
세포 변형 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 희석 서브시스템:
세포 현탁액 유입구;
완충액 유입구;
조작된 세포가 포함된 세포 현탁액 및 유체 시약 또는 건조 시약을 수용하고, 유체 시약 또는 건조 시약과 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 혼합하여 희석된 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 용기;
희석 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 인큐베이션 서브시스템:
희석된 세포 현탁액 유입구;
희석된 세포 현탁액을 수용하도록 구성된 용기; 및
용기 내의 희석된 세포 현탁액의 온도를 조절하여 인큐베이션된 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 플레이트;
인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 세포 세척 서브시스템:
인큐베이션된 세포 현탁액 유입구;
보존 배지 유입구;
인큐베이션된 세포 현탁액 및 보존 배지를 수용하는 용기로서, 용기 내에서 보존 배지와 인큐베이션된 세포 현탁액을 혼합하여 세포를 보존 배지에 현탁시키도록 구성된 용기;
인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 용기 충진 서브시스템:
보존 배지에 현탁된 세포를 수용하도록 구성된 유입구;
보존 배지에 현탁된 세포를 수용하도록 구성된 하나 이상의 용기; 및
보존 배지에 현탁된 세포를 하나 이상의 용기 내로 펌핑하도록 구성된 하나 이상의 펌프를 포함하되,
서브시스템 중 적어도 하나는 상기 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합되는, 시스템. - 세포를 가공하기 위한 시스템으로서, 상기 시스템은:
다음을 포함하는 현탁액 제조 서브시스템:
전달 배지 유입구;
세포를 단리하도록 구성된 세포 단리 장치;
단리된 세포를 전달 배지에 현탁시켜 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 세포 현탁 장치;
현탁액 제조 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 세포 변형 서브시스템:
세포 현탁액 유입구;
세포의 세포 막에서 섭동을 일으켜 페이로드를 세포 내로 진입시켜 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 생산하도록 구성된 하나 이상의 세포 변형 협착부;
세포 변형 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 온도 조절 서브시스템:
세포 현탁액 유입구;
완충액 유입구;
조작된 세포가 포함된 세포 현탁액 및 유체 시약 또는 건조 시약을 수용하고, 유체 시약 또는 건조 시약과 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 혼합하여 희석된 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 용기;
용기 내의 희석된 세포 현탁액의 온도를 조절하여 인큐베이션된 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 플레이트;
온도 조절 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 세포 세척 서브시스템:
인큐베이션된 세포 현탁액 유입구;
보존 배지 유입구;
인큐베이션된 세포 현탁액 및 보존 배지를 수용하는 용기로서, 용기 내에서 보존 배지와 인큐베이션된 세포 현탁액을 혼합하여 세포를 보존 배지에 현탁시키도록 구성된 용기;
인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 용기 충진 서브시스템:
보존 배지에 현탁된 세포를 수용하도록 구성된 유입구;
보존 배지에 현탁된 세포를 수용하도록 구성된 하나 이상의 용기; 및
보존 배지에 현탁된 세포를 하나 이상의 용기 내로 펌핑하도록 구성된 하나 이상의 펌프를 포함하되,
서브시스템 중 적어도 하나는 상기 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합되는, 시스템. - 제163항에 있어서, 상기 시스템은 세포를 가공하기 위한 자동 시스템인, 시스템.
- 세포를 자동으로 가공하기 위한 시스템으로서, 상기 시스템은:
다음을 포함하는 현탁액 제조 서브시스템:
전달 배지 유입구;
세포를 단리하도록 구성된 세포 단리 장치;
단리된 세포를 전달 배지에 현탁시켜 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 세포 현탁 장치;
현탁액 제조 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 세포 변형 서브시스템:
세포 현탁액 유입구;
세포의 세포 막에서 섭동을 일으켜 페이로드를 세포 내로 진입시켜 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 생산하도록 구성된 하나 이상의 세포 변형 협착부;
세포 변형 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 희석 서브시스템:
세포 현탁액 유입구;
완충액 유입구;
조작된 세포가 포함된 세포 현탁액 및 유체 시약 또는 건조 시약을 수용하고, 유체 시약 또는 건조 시약과 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 혼합하여 희석된 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 용기;
희석 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 인큐베이션 서브시스템:
희석된 세포 현탁액 유입구;
희석된 세포 현탁액을 수용하도록 구성된 용기; 및
용기 내의 희석된 세포 현탁액의 온도를 조절하여 인큐베이션된 세포 현탁액을 생성하도록 구성된 플레이트;
인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 세포 세척 서브시스템:
인큐베이션된 세포 현탁액 유입구;
보존 배지 유입구;
인큐베이션된 세포 현탁액 및 보존 배지를 수용하는 용기로서, 용기 내에서 보존 배지와 인큐베이션된 세포 현탁액을 혼합하여 세포를 보존 배지에 현탁시키도록 구성된 용기;
인큐베이션 서브시스템과 유체 연통하고, 다음을 포함하는 용기 충진 서브시스템:
보존 배지에 현탁된 세포를 수용하도록 구성된 유입구;
보존 배지에 현탁된 세포를 수용하도록 구성된 하나 이상의 용기; 및
보존 배지에 현탁된 세포를 하나 이상의 용기 내로 펌핑하도록 구성된 하나 이상의 펌프를 포함하되,
서브시스템 중 적어도 하나는 상기 시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합되고, 추가로 상기 시스템은 멸균 상태이고 비멸균 위치에서 사용되도록 구성되는, 시스템. - 세포를 가공하기 위한 방법으로서, 상기 방법은 현탁액 제조 서브시스템, 세포 변형 서브시스템, 희석 서브시스템, 인큐베이션 서브시스템, 세포 세척 서브시스템, 및 용기 충진 서브시스템 중 하나 이상을 포함하는 시스템에 의해 수행되고, 상기 방법은 다음 단계를 포함하는, 방법:
i. 현탁액 제조 서브시스템에서:
(1) 세포를 수용하는 단계;
(2) 세포에 대한 세포 단리 작업을 수행하여 단리된 세포를 생산하는 단계;
(3) 전달 배지를 수용하는 단계; 및
(4) 단리된 세포를 전달 배지에 현탁시켜 세포 현탁액을 생산함으로써 세포 현탁액을 생산하는 단계;
ii. 세포 변형 서브시스템에서:
(1) 현탁액 제조 서브시스템으로부터 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계;
(2) 세포의 세포 막에서 섭동을 일으켜 페이로드를 세포 내로 진입시켜 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 생산하도록 구성된 하나 이상의 세포 변형 협착부를 통해 세포 현탁액을 흘리는 단계;
iii. 희석 서브시스템에서:
(1) 세포 변형 서브시스템으로부터 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계;
(2) 유체 시약 또는 건조 시약을 수용하는 단계; 및
(3) 세포 현탁액을 유체 시약 또는 건조 시약과 혼합함으로써 희석된 세포 현탁액을 생산하는 단계;
iv. 인큐베이션 서브시스템에서:
(1) 희석 서브시스템으로부터 희석된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계; 및
(2) 희석된 세포 현탁액의 온도를 조절하여, 인큐베이션된 세포 현탁액을 생산하는 단계;
v. 세포 세척 서브시스템에서:
(1) 인큐베이션 서브시스템으로부터 인큐베이션된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계;
(2) 세포에 대한 완충액 교환 작업을 수행하여 세포를 보존 배지에 현탁하는 단계; 및
vi. 용기 충진 서브시스템에서:
(1) 세포 세척 서브시스템으로부터 보존 배지에 현탁된 세포의 흐름을 수용하는 단계; 및
(2) 보존 배지에 현탁된 세포를 하나 이상의 용기 내로 도입하는 단계. - 세포를 가공하기 위한 방법으로서, 상기 방법은 현탁액 제조 서브시스템, 세포 변형 서브시스템, 온도 조절 서브시스템 중 하나 이상을 포함하는 시스템에 의해 수행되고, 상기 방법은 다음 단계를 포함하는, 방법:
i. 현탁액 제조 서브시스템에서:
(1) 용기로부터 세포를 수용하는 단계;
(2) 세포에 대한 세포 단리 작업을 수행하여 단리된 세포를 생산하는 단계;
(3) 전달 배지 유입구를 통해 전달 배지를 수용하는 단계; 및
(4) 단리된 세포를 전달 배지에 현탁시켜 세포 현탁액을 생산함으로써 세포 현탁액을 생산하는 단계;
ii. 세포 변형 서브시스템에서:
(1) 현탁액 제조 서브시스템으로부터 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계;
(2) 세포의 세포 막에서 섭동을 일으켜 페이로드를 세포 내로 진입시켜 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 생산하도록 구성된 하나 이상의 세포 변형 협착부를 통해 세포 현탁액을 흘리는 단계;
iii. 온도 제어 서브시스템에서:
(1) 세포 변형 서브시스템으로부터 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계;
(2) 유입구를 통해 유체 시약 또는 건조 시약을 수용하는 단계;
(3) 세포 현탁액을 유체 시약 또는 건조 시약과 혼합함으로써 희석된 세포 현탁액을 생산하는 단계; 및
(4) 희석된 세포 현탁액의 온도를 조절하여, 인큐베이션된 세포 현탁액을 생산하는 단계;
iv. 세포 세척 서브시스템에서:
(1) 온도 조절 서브시스템으로부터 인큐베이션된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계;
(2) 세포에 대한 완충액 교환 작업을 수행하여 세포를 보존 배지에 현탁하는 단계; 및
v. 용기 충진 서브시스템에서:
(1) 세포 세척 서브시스템으로부터 보존 배지에 현탁된 세포의 흐름을 수용하는 단계; 및
(2) 보존 배지에 현탁된 세포를 하나 이상의 용기 내로 도입하는 단계. - 제167항에 있어서, 상기 방법은 세포를 가공하기 위한 자동 방법인, 방법.
- 제167항 또는 제168항에 있어서, 상기 방법은 비멸균 환경에서 멸균 시스템에 의해 수행되는, 방법.
- 세포를 자동으로 가공하기 위한 방법으로서, 상기 방법은 비멸균 환경에서 멸균 시스템에 의해 수행되고, 추가로 상기 시스템은 현탁액 제조 서브시스템, 세포 변형 서브시스템, 희석 서브시스템, 인큐베이션 서브시스템, 세포 세척 서브시스템, 및 용기 충진 서브시스템 중 하나 이상을 포함하고, 상기 방법은 다음 단계를 포함하는, 방법:
i. 현탁액 제조 서브시스템에서:
(1) 용기로부터 세포를 수용하는 단계;
(2) 세포에 대한 세포 단리 작업을 수행하여 단리된 세포를 생산하는 단계;
(3) 전달 배지 유입구를 통해 전달 배지를 수용하는 단계; 및
(4) 단리된 세포를 전달 배지에 현탁시켜 세포 현탁액을 생산함으로써 세포 현탁액을 생산하는 단계;
ii. 세포 변형 서브시스템에서:
(1) 현탁액 제조 서브시스템으로부터 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계;
(2) 세포의 세포 막에서 섭동을 일으켜 페이로드를 세포 내로 진입시켜 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 생산하도록 구성된 하나 이상의 세포 변형 협착부를 통해 세포 현탁액을 흘리는 단계;
iii. 희석 서브시스템에서:
(1) 세포 변형 서브시스템으로부터 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계;
(2) 완충액 유입구를 통해 유체 시약 또는 건조 시약을 수용하는 단계; 및
(3) 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 유체 시약 또는 건조 시약과 혼합함으로써 희석된 세포 현탁액을 생산하는 단계;
iv. 인큐베이션 서브시스템에서:
(1) 희석 서브시스템으로부터 희석된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계; 및
(2) 희석된 세포 현탁액의 온도를 조절하여, 인큐베이션된 세포 현탁액을 생산하는 단계;
v. 세포 세척 서브시스템에서:
(1) 인큐베이션 서브시스템으로부터 인큐베이션된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계;
(2) 세포에 대한 완충액 교환 작업을 수행하여 세포를 보존 배지에 현탁하는 단계; 및
vi. 용기 충진 서브시스템에서:
(1) 세포 세척 서브시스템으로부터 보존 배지에 현탁된 세포의 흐름을 수용하는 단계; 및
(2) 보존 배지에 현탁된 세포를 하나 이상의 용기 내로 도입하는 단계. - 세포를 가공하기 위한 방법으로서, 상기 방법은 현탁액 제조 서브시스템, 세포 변형 서브시스템, 희석 서브시스템, 인큐베이션 서브시스템, 세포 세척 서브시스템, 및 용기 충진 서브시스템 중 하나 이상을 포함하는 시스템에 의해 수행되고, 상기 방법은 다음 단계를 포함하는, 방법:
i. 현탁액 제조 서브시스템에서:
(1) 용기로부터 세포를 수용하는 단계;
(2) 전달 배지 유입구를 통해 전달 배지를 수용하는 단계; 및
(3) 세포를 전달 배지에 현탁하여 세포 현탁액을 생산함으로써 세포 현탁액을 생산하는 단계;
ii. 세포 변형 서브시스템에서:
(1) 현탁액 제조 서브시스템으로부터 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계;
(2) 세포의 세포 막에서 섭동을 일으켜 페이로드를 세포 내로 진입시켜 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 생산하도록 구성된 하나 이상의 세포 변형 협착부를 통해 세포 현탁액을 흘리는 단계;
iii. 희석 서브시스템에서:
(1) 세포 변형 서브시스템으로부터 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계;
(2) 완충액 유입구를 통해 유체 시약 또는 건조 시약을 수용하는 단계; 및
(3) 조작된 세포가 포함된 세포 현탁액을 유체 시약 또는 건조 시약과 혼합함으로써 희석된 세포 현탁액을 생산하는 단계;
iv. 인큐베이션 서브시스템에서:
(1) 희석 서브시스템으로부터 희석된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계; 및
(2) 희석된 세포 현탁액의 온도를 조절하여, 인큐베이션된 세포 현탁액을 생산하는 단계;
v. 세포 세척 서브시스템에서:
(1) 인큐베이션 서브시스템으로부터 인큐베이션된 세포 현탁액의 흐름을 수용하는 단계;
(2) 세포에 대한 완충액 교환 작업을 수행하여 세포를 보존 배지에 현탁하는 단계; 및
vi. 용기 충진 서브시스템에서:
(1) 세포 세척 서브시스템으로부터 보존 배지에 현탁된 세포의 흐름을 수용하는 단계; 및
(2) 보존 배지에 현탁된 세포를 하나 이상의 용기 내로 도입하는 단계. - 세포를 가공하기 위한 시스템에서 사용하기 위한 키트로서, 상기 키트는 다음 중 하나 이상을 포함하는, 키트:
i. 상기 시스템의 현탁액 제조 서브시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있도록 구성된 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소를 포함하는 제1 키트로서, 제1 세트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소는 다음을 포함하는, 제1 키트:
(1) 세포 단리 장치; 및/또는
(2) 세포 현탁 장치;
ii. 상기 시스템의 세포 변형 서브시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있도록 구성된 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소를 포함하는 제2 키트로서, 제2 세트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소는, 세포 막의 섭동을 야기하도록 세포가 가압될 수 있는 하나 이상의 세포 변형 협착부를 포함하는 하나 이상의 미세 유체 칩을 포함하는, 제2 키트;
iii. 상기 시스템의 온도 조절 서브시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있도록 구성된 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소를 포함하는 제3 키트로서, 제3 세트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소는 적어도 하나의 세포 응집물 필터를 포함하는, 제3 키트;
iv. 상기 시스템의 세포 세척 서브시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있도록 구성된 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소를 포함하는 제4 키트로서, 제5 세트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소는 제2 접선 유동 여과 막 어셈블리를 포함하는, 제4 키트;
v. 상기 시스템의 용기 충진 서브시스템의 프레임에 분리 가능하게 결합될 수 있도록 구성된 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소를 포함하는 제5 키트로서, 제6 세트의 분리 가능하게 결합될 수 있는 구성요소는 적어도 하나의 세포 응집물 필터를 포함하는, 제5 키트.
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