KR20220139082A - 울금과 용암해수를 이용한 간기능 개선용 울금추출분말소재 및 이를 이용하는 간기능 개선용 조성물 - Google Patents
울금과 용암해수를 이용한 간기능 개선용 울금추출분말소재 및 이를 이용하는 간기능 개선용 조성물 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20220139082A KR20220139082A KR1020210045259A KR20210045259A KR20220139082A KR 20220139082 A KR20220139082 A KR 20220139082A KR 1020210045259 A KR1020210045259 A KR 1020210045259A KR 20210045259 A KR20210045259 A KR 20210045259A KR 20220139082 A KR20220139082 A KR 20220139082A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- turmeric
- ethanol
- liver
- alcohol
- lava seawater
- Prior art date
Links
- 239000013535 sea water Substances 0.000 title claims abstract description 84
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims abstract description 34
- 230000003908 liver function Effects 0.000 title claims abstract description 34
- 239000000843 powder Substances 0.000 title claims abstract description 21
- 239000000463 material Substances 0.000 title claims abstract description 18
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 18
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 title abstract description 5
- 230000006872 improvement Effects 0.000 title description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 454
- 235000003392 Curcuma domestica Nutrition 0.000 claims abstract description 46
- 244000008991 Curcuma longa Species 0.000 claims abstract description 46
- 235000003373 curcuma longa Nutrition 0.000 claims abstract description 46
- 235000013976 turmeric Nutrition 0.000 claims abstract description 46
- 229940052016 turmeric extract Drugs 0.000 claims abstract description 29
- 235000020240 turmeric extract Nutrition 0.000 claims abstract description 29
- 239000008513 turmeric extract Substances 0.000 claims abstract description 29
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims abstract description 20
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 20
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 15
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims abstract description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 17
- 102000011632 Caseins Human genes 0.000 claims description 7
- 108010076119 Caseins Proteins 0.000 claims description 7
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 claims description 7
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 claims description 7
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 claims description 7
- 229940080237 sodium caseinate Drugs 0.000 claims description 7
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 claims description 7
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 6
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 5
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 abstract description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 121
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 86
- RUDATBOHQWOJDD-UHFFFAOYSA-N (3beta,5beta,7alpha)-3,7-Dihydroxycholan-24-oic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)CC2 RUDATBOHQWOJDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 65
- RUDATBOHQWOJDD-UZVSRGJWSA-N ursodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)CC1 RUDATBOHQWOJDD-UZVSRGJWSA-N 0.000 description 65
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 60
- IKHGUXGNUITLKF-UHFFFAOYSA-N Acetaldehyde Chemical compound CC=O IKHGUXGNUITLKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 46
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 45
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 45
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 39
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 32
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 31
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 31
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 27
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 23
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 description 22
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 22
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 19
- 231100000234 hepatic damage Toxicity 0.000 description 19
- 230000008818 liver damage Effects 0.000 description 19
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 17
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 17
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 16
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 15
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 15
- 102000005720 Glutathione transferase Human genes 0.000 description 15
- 108010070675 Glutathione transferase Proteins 0.000 description 15
- 108010021809 Alcohol dehydrogenase Proteins 0.000 description 14
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 14
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 14
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 description 14
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 description 14
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 14
- 102100036475 Alanine aminotransferase 1 Human genes 0.000 description 12
- 108010082126 Alanine transaminase Proteins 0.000 description 12
- 108020002663 Aldehyde Dehydrogenase Proteins 0.000 description 12
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 description 12
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 description 12
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 12
- 238000011888 autopsy Methods 0.000 description 11
- 230000008859 change Effects 0.000 description 11
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 10
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 10
- 206010019133 Hangover Diseases 0.000 description 10
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 10
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 10
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 9
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 8
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 8
- 208000022309 Alcoholic Liver disease Diseases 0.000 description 8
- 102000011779 Nitric Oxide Synthase Type II Human genes 0.000 description 8
- 108010076864 Nitric Oxide Synthase Type II Proteins 0.000 description 8
- 102100038280 Prostaglandin G/H synthase 2 Human genes 0.000 description 8
- 108050003267 Prostaglandin G/H synthase 2 Proteins 0.000 description 8
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 8
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 8
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 8
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 8
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 8
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 8
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 7
- 102100026802 72 kDa type IV collagenase Human genes 0.000 description 7
- 101710151806 72 kDa type IV collagenase Proteins 0.000 description 7
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 7
- 108010015302 Matrix metalloproteinase-9 Proteins 0.000 description 7
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 7
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 7
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 7
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 238000010195 expression analysis Methods 0.000 description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 description 7
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 7
- 102100030412 Matrix metalloproteinase-9 Human genes 0.000 description 6
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 6
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 5
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 5
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 5
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 5
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 5
- 108010074918 Cytochrome P-450 CYP1A1 Proteins 0.000 description 4
- 102000008142 Cytochrome P-450 CYP1A1 Human genes 0.000 description 4
- 108010001202 Cytochrome P-450 CYP2E1 Proteins 0.000 description 4
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 4
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 4
- 238000008214 LDL Cholesterol Methods 0.000 description 4
- NPGIHFRTRXVWOY-UHFFFAOYSA-N Oil red O Chemical compound Cc1ccc(C)c(c1)N=Nc1cc(C)c(cc1C)N=Nc1c(O)ccc2ccccc12 NPGIHFRTRXVWOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108090000340 Transaminases Proteins 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 230000035508 accumulation Effects 0.000 description 4
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 4
- 208000026594 alcoholic fatty liver disease Diseases 0.000 description 4
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 4
- -1 etc. Substances 0.000 description 4
- 239000000469 ethanolic extract Substances 0.000 description 4
- 208000010706 fatty liver disease Diseases 0.000 description 4
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 4
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 4
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 4
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 4
- 238000007449 liver function test Methods 0.000 description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 4
- 102000014898 transaminase activity proteins Human genes 0.000 description 4
- 208000007082 Alcoholic Fatty Liver Diseases 0.000 description 3
- 108010003415 Aspartate Aminotransferases Proteins 0.000 description 3
- 102000004625 Aspartate Aminotransferases Human genes 0.000 description 3
- 108010020076 Cytochrome P-450 CYP2B1 Proteins 0.000 description 3
- 102100024889 Cytochrome P450 2E1 Human genes 0.000 description 3
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 3
- 206010016262 Fatty liver alcoholic Diseases 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000023984 PPAR alpha Human genes 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 3
- 238000012742 biochemical analysis Methods 0.000 description 3
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 3
- 238000001784 detoxification Methods 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 3
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 3
- BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N nicotinamide-adenine dinucleotide Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 3
- 108091008725 peroxisome proliferator-activated receptors alpha Proteins 0.000 description 3
- 238000001223 reverse osmosis Methods 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 3
- BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 4-nitrophenol Chemical compound OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010074922 Cytochrome P-450 CYP1A2 Proteins 0.000 description 2
- 102100026533 Cytochrome P450 1A2 Human genes 0.000 description 2
- VYZAHLCBVHPDDF-UHFFFAOYSA-N Dinitrochlorobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(Cl)C([N+]([O-])=O)=C1 VYZAHLCBVHPDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000004930 Fatty Liver Diseases 0.000 description 2
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000006587 Glutathione peroxidase Human genes 0.000 description 2
- 108700016172 Glutathione peroxidases Proteins 0.000 description 2
- 108010023302 HDL Cholesterol Proteins 0.000 description 2
- 108010010234 HDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 2
- 206010019708 Hepatic steatosis Diseases 0.000 description 2
- 108010028554 LDL Cholesterol Proteins 0.000 description 2
- 102000002274 Matrix Metalloproteinases Human genes 0.000 description 2
- 108010000684 Matrix Metalloproteinases Proteins 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- IKHGUXGNUITLKF-XPULMUKRSA-N acetaldehyde Chemical compound [14CH]([14CH3])=O IKHGUXGNUITLKF-XPULMUKRSA-N 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 230000003627 anti-cholesterol Effects 0.000 description 2
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 239000012131 assay buffer Substances 0.000 description 2
- 238000010876 biochemical test Methods 0.000 description 2
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 2
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 2
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 2
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 239000013505 freshwater Substances 0.000 description 2
- 231100000753 hepatic injury Toxicity 0.000 description 2
- 230000002443 hepatoprotective effect Effects 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 2
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 231100000240 steatosis hepatitis Toxicity 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001116389 Aloe Species 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 208000015163 Biliary Tract disease Diseases 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710088194 Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 238000010631 GST assay Methods 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 206010019799 Hepatitis viral Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005913 Maltodextrin Substances 0.000 description 1
- 229920002774 Maltodextrin Polymers 0.000 description 1
- 101000819572 Mus musculus Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 150000001200 N-acyl ethanolamides Chemical class 0.000 description 1
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 1
- 239000004809 Teflon Substances 0.000 description 1
- 229920006362 Teflon® Polymers 0.000 description 1
- 102000046299 Transforming Growth Factor beta1 Human genes 0.000 description 1
- 101800002279 Transforming growth factor beta-1 Proteins 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 230000007059 acute toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 235000011399 aloe vera Nutrition 0.000 description 1
- XKMRRTOUMJRJIA-UHFFFAOYSA-N ammonia nh3 Chemical compound N.N XKMRRTOUMJRJIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003011 anion exchange membrane Substances 0.000 description 1
- 210000000709 aorta Anatomy 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 1
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 1
- 229910052793 cadmium Inorganic materials 0.000 description 1
- BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N cadmium atom Chemical compound [Cd] BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 238000005341 cation exchange Methods 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100000012 chronic liver injury Toxicity 0.000 description 1
- 230000007882 cirrhosis Effects 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000000909 electrodialysis Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 239000002621 endocannabinoid Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 125000002485 formyl group Chemical class [H]C(*)=O 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 208000035474 group of disease Diseases 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 210000004024 hepatic stellate cell Anatomy 0.000 description 1
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 1
- 230000036732 histological change Effects 0.000 description 1
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 1
- GPRLSGONYQIRFK-UHFFFAOYSA-N hydron Chemical compound [H+] GPRLSGONYQIRFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 239000003014 ion exchange membrane Substances 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 210000001865 kupffer cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000006372 lipid accumulation Effects 0.000 description 1
- 230000003859 lipid peroxidation Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000012317 liver biopsy Methods 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 229940035034 maltodextrin Drugs 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N mercury Chemical compound [Hg] QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052753 mercury Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 1
- 210000001589 microsome Anatomy 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000004660 morphological change Effects 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100000956 nontoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000004792 oxidative damage Effects 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 1
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 238000012257 pre-denaturation Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011552 rat model Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 1
- 238000006479 redox reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000003938 response to stress Effects 0.000 description 1
- 230000001932 seasonal effect Effects 0.000 description 1
- 230000007727 signaling mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007863 steatosis Effects 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 1
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 1
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000001862 viral hepatitis Diseases 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L19/00—Products from fruits or vegetables; Preparation or treatment thereof
- A23L19/01—Instant products; Powders; Flakes; Granules
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L3/00—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs
- A23L3/40—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs by drying or kilning; Subsequent reconstitution
- A23L3/46—Spray-drying
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
- A61K36/906—Zingiberaceae (Ginger family)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/334—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health treating the effects of consuming alcohol, narcotics or other addictive behavior, e.g. treating hangover or reducing blood alcohol levels
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2250/00—Food ingredients
- A23V2250/15—Inorganic Compounds
- A23V2250/156—Mineral combination
- A23V2250/1638—Undefined mineral extract
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2250/00—Food ingredients
- A23V2250/20—Natural extracts
- A23V2250/21—Plant extracts
- A23V2250/2112—Curcumin, turmeric
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Botany (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
본 발명은 울금으로부터 추출되는 울금추출물을 유효성분으로 함유하여 간기능 개선 효능을 갖도록 이루어진 울금과 용암해수를 이용한 간기능 개선용 울금추출분말소재 및 이를 이용한 간기능 개선용 조성물에 관한 것이다.
본 발명인 울금과 용암해수를 이용한 간기능 개선용 울금추출분말소재 및 이를 이용한 간기능 개선용 조성물은 울금을 알코올과 용암해수를 이용하여 추출하되, 건조 울금 1㎏ 중량대비, 50% 에탄올(주정) 92.5중량%와 용암해수 7.5중량%로 이루어진 혼합(추출)용매 8L를 이용하여 60℃에서 7시간 추출하고, 보조첨가물을 첨가한 후 분무건조시켜 분말화시킨다.
본 발명인 울금과 용암해수를 이용한 간기능 개선용 울금추출분말소재 및 이를 이용한 간기능 개선용 조성물은 울금을 알코올과 용암해수를 이용하여 추출하되, 건조 울금 1㎏ 중량대비, 50% 에탄올(주정) 92.5중량%와 용암해수 7.5중량%로 이루어진 혼합(추출)용매 8L를 이용하여 60℃에서 7시간 추출하고, 보조첨가물을 첨가한 후 분무건조시켜 분말화시킨다.
Description
본 발명은 울금으로부터 추출되는 울금추출물을 유효성분으로 함유하여 간기능 개선 효능을 갖도록 이루어진 울금과 용암해수를 이용한 간기능 개선용 울금추출분말소재 및 이를 이용한 간기능 개선용 조성물에 관한 것이다.
만성 간질환은 국내에서 성인병 및 사망의 중요한 원인으로 부각되고 있으며, 간은 완충능력이 큰 생체기관으로 질환의 초기 단계에 자각증상이 없어 질병이 상당히 진전된 상태에 발견되는 경우가 많을 뿐 아니라 효과적인 치료제 등이 부적한 실정이다.
질환의 원인으로는 알코올, 약물, 화학약품, 바이러스성 간염, 담도질환과 같은 대사성 질환과 자가면역 질환 등이 있으며, 또한, 간은 인체에서 혈액의 저장과 순환, 혈액량 조절과 해독작용의 중추로서 최근 산업화에 따라 배출량이 늘어나는 유해물질에 노출되는 기회가 증가하면서 끊임없는 해독작용에 시달리고 있다.
알코올성 간질환은 단순 지방간염부터 심각한 질환인 섬유화, 경변증 및 간암에 이르는 폭넓은 범위를 보이는 일련의 질환군이며, 전 세계적으로 만성간질환의 가장 흔한 형태로 높은 유병률과 사망률을 나타내는 질환이다.
알코올성 지방간은 만성 음주의 가장 흔한 형태로 나타나는 질환으로 간세포 내 중성지방의 비정상적인 축적을 특징으로 하며, 간세포내 지방 축적의 주요 기전은 신생지질생성의 주요 조절인자인 sterol regulatory element-binding protein 1c(SREBP1c)의 유전자 발현이 증가하고 이와 반대로 유리 지방산(free fatty acid)의 합성과 수송 조절에 중요한 역할을 하는 peroxisome proliferator-activated receptor α(PPARα)의 유전자 발현감소를 통해 지방 대사 불균형에서 기인한다.
에탄올은 직접적으로 SREBP1c 유전자 전사를 증가시키고, 간세포 내에서 PPARα 활성을 억제하고, 간접적으로는 세포질 세망(Endoplasmic reticulum, ER)의 스트레스 반응과 싸이토크롬 효소(cytochrome P450 2E1, CYP2E1) 발현 증가에 의해 유래되는 산화적인 스트레스와 엔도카나비노이드 신호전달 기전을 통해 지방 대사의 불균형을 초래한다.
본 출원인은 울금 및 용암해수 활용을 높여 지역경제를 이바지하고자 하는 목적과, 간 기능 개선을 위하여 아래와 같은 선행특허기술를 제공하였다.
한국공개특허 10-2014-0084502호인 알로에와 울금을 이용한 혼합발효물을 유효성분으로 하는 간 기능 개선용 조성물과 그 제조방법 및 이를 이용한 간 기능 개선용 제제, 한국등록특허 10-1381850호인 울금 추출물을 유효성분으로 하는 항 콜레스테롤용 조성물과 그 울금 추출물의 추출방법, 한국등록특허 10-1577002호인 울금과 용암해수를 이용한 항콜레스테롤 또는 간기능 개선용 조성물과 기능성 식품.
본 발명의 출원인은 다양한 생약제를 이용한 소재탐색을 통한 울금과 제주지역내의 용암해수를 활용하여 간 기능 개선에 효능을 가지는 간기능 개선용 울금추출분말소재 개발 및 이를 이용하는 간기능 개선용 조성물를 제공하고자 한다.
또한, 본 발명은 출원인이 제공한 선행기술을 보완하고자 한다.
또한, 알코올성 지방간은 만성 음주의 가장 흔한 형태로 나타나는 질환으로 간세포 내 중성지방의 비정상적인 축적을 특징으로 현재, 알코올성 손상으로부터 간 보호에 도움을 주는 기능성원료가 국한되어 있으므로, 안전한 국내 소재로 가격 및 일일섭취량에서 경쟁력을 갖는 알코올성 간 손상 개선 소재를 개발하고자 한다.
이와 같은 목적을 달성하고자,
본 발명인 울금과 용암해수를 이용한 간기능 개선용 울금추출분말소재는 울금을 알코올과 용암해수를 이용하여 추출하되, 건조 울금 1㎏ 중량대비, 50% 에탄올(주정) 92.5중량%와 용암해수 7.5중량%로 이루어진 혼합(추출)용매 8L를 이용하여 60℃에서 7시간 추출하고, 보조첨가물을 첨가한 후 분무건조시켜 분말화시킴을 특징으로 한다.
상기 혼합(추출)용매를 이용하여 추출한 추출물은 여과과정과 농축과정를 거친 후 보조첨가물을 첨가한 후 분무건조시켜 분말화시키되, 상기 보조첨가물 고형분 함량 기준으로 카세인나트륨 20중량%와 덱스티린 20중량%이다.
다른 발명인 울금과 용암해수를 이용한 간기능 개선용 조성물은, 울금을 알코올과 용암해수를 이용하여 추출하되, 건조 울금 1㎏ 중량대비, 50% 에탄올(주정) 92.5중량%와 용암해수 7.5중량%로 이루어진 혼합(추출)용매 8L를 이용하여 60℃에서 7시간 추출하고, 보조첨가물을 첨가한 후 분무건조시켜 분말화시킨 울금추출분말을 포함함을 특징으로 한다.
상기 혼합(추출)용매를 이용하여 추출한 추출물은 여과과정과 농축과정를 거친 후 보조첨가물을 첨가한 후 분무건조시켜 분말화시키되, 상기 보조첨가물 고형분 함량 기준으로 카세인나트륨 20중량%와 덱스티린 20중량% 임을 특징으로 한다.
이와 같이 이루어진 본 발명인 울금과 용암해수를 이용한 간기능 개선용 울금추출분말소재 및 이를 이용하는 간기능 개선용 조성물은 간기능 개선용 울금추출분말소재가 분무건조로 분말화되어 이용되어 이용이 용이한 장점이 있다.
또한, 첨가물인 보조첨가물은 오일성분에 의한 분말화가 잘 이루어지지 않는 것을 해소할 수 있는 한편, 분말화 이후 수분 흡수를 방지하여 보관에 대한 안정성을 높일 수 있는 효과를 가진다.
이와 같이 이루어진 본 발명인 울금과 용암해수를 이용한 간기능 개선용 울금추출분말소재는 실험을 통하여 안정성이 있음을 확인하였으며, 간기능 개선에 효과가 있음을 확인하였음으로, 알코올에 손상된 간 개선에 널리 이용될 수 있으며, 이로 인하여 지역경제 발전에 이바지 할 수 있을 것으로 예상된다.
도 1은 국내 알코올성 간질환 유병률을 나타낸 그래프.
도 2는 알코올성 지방산 발생 기전(ref. WM Choi et al. Liver Research 2019)을 나타낸 개략도.
도 3은 Change of body weight in ethanol induced rat
도 4는 Change of liver weight in ethanol induced rat
도 5는 Effect of UDCA and C&JM_50E complex on serum total cholesterol and triglyeride level in ethanol-induced rat.
도 6은 Effect of UDCA and C&JM_50E complex on serum LDL cholesterol and HDL cholesterol level in ethanol-induced rat.
도 7은 Effect of UDCA and C&JM_50E complex on serum actate dehydrogenase(LDH) and total protein(T-P) level in ethanol-induced rat.
도 8은 Effect of UDCA and C&JM_50E complex on serum alkaline phosphatase(ALP) and albumin (ALB) level in ethanol-induced rat.
도 9는 Effect of UDCA and C&JM_50E complex on serum aspartate aminotransferase(AST) and alanine aminotransferase(ALT) level in ethanol-induced rat.
도 10은 Effect of UDCA and C&JM_50E complex on ADH activity in liver tissue and serum of ethanol-induced rat.
도 11은 Effect of UDCA and C&JM_50E complex on ALDH activity in liver tissue of ethanol-induced rat.
도 12는 Effect of UDCA and C&JM_50E complex on glutathione peroxidase(GSH-Px) activity in liver tissue and serum of ethanol-induced rat.
도 13은 Effect of UDCA and C&JM_50E complex on glutathione S-transferase(GST) activity in liver tissue and serum of ethanol-induced rat.
도 14는 Effect of UDCA and C&JM_50E complex on superoxide dismutase(SOD) activity in liver tissue and serum of ethanol-induced rat .
도 15는 Effect of UDCA and C&JM_50E complex on catalase(CAT) activity in liver tissue and serum of ethanol-induced rat.
도 16은 Effect of UDCA and C&JM_50E complex on pro-inflammatory cytokines mRNA expression in liver tissue of ethanol-induced rat.
도 17은 Effect of UDCA and C&JM_50E complex on inflammatory factor mRNA expression in liver tissue of ethanol-induced rat.
도 18은 Effect of UDCA and C&JM_50E complex on Matrix metalloproteinase(MMP) mRNA expression in liver tissue of ethanol-induced rat.
도 19는 Representative histological sections from the livers of ethanol-induced rat. 도 19a는 Histopathological sections of the liver were stained with hematoxylin and eosin(H&E). Magnification: ×100. Excessive fat accumulation(steatosis) in the form of macrovesicles(arrows) was primarily observed in ethanol-induced rat. 도 19b는 Representative microphotographs of Oil Red O staining of the hepatic lipid accumulation.
도 20는 Effect of easytomorrow and C&JM_50E complex on blood ethanol levels in drunken rats.
도 21은 Effect of easytomorrow and C&JM_50E complex on blood acetaldehyde levels in drunken rats.
도 2는 알코올성 지방산 발생 기전(ref. WM Choi et al. Liver Research 2019)을 나타낸 개략도.
도 3은 Change of body weight in ethanol induced rat
도 4는 Change of liver weight in ethanol induced rat
도 5는 Effect of UDCA and C&JM_50E complex on serum total cholesterol and triglyeride level in ethanol-induced rat.
도 6은 Effect of UDCA and C&JM_50E complex on serum LDL cholesterol and HDL cholesterol level in ethanol-induced rat.
도 7은 Effect of UDCA and C&JM_50E complex on serum actate dehydrogenase(LDH) and total protein(T-P) level in ethanol-induced rat.
도 8은 Effect of UDCA and C&JM_50E complex on serum alkaline phosphatase(ALP) and albumin (ALB) level in ethanol-induced rat.
도 9는 Effect of UDCA and C&JM_50E complex on serum aspartate aminotransferase(AST) and alanine aminotransferase(ALT) level in ethanol-induced rat.
도 10은 Effect of UDCA and C&JM_50E complex on ADH activity in liver tissue and serum of ethanol-induced rat.
도 11은 Effect of UDCA and C&JM_50E complex on ALDH activity in liver tissue of ethanol-induced rat.
도 12는 Effect of UDCA and C&JM_50E complex on glutathione peroxidase(GSH-Px) activity in liver tissue and serum of ethanol-induced rat.
도 13은 Effect of UDCA and C&JM_50E complex on glutathione S-transferase(GST) activity in liver tissue and serum of ethanol-induced rat.
도 14는 Effect of UDCA and C&JM_50E complex on superoxide dismutase(SOD) activity in liver tissue and serum of ethanol-induced rat .
도 15는 Effect of UDCA and C&JM_50E complex on catalase(CAT) activity in liver tissue and serum of ethanol-induced rat.
도 16은 Effect of UDCA and C&JM_50E complex on pro-inflammatory cytokines mRNA expression in liver tissue of ethanol-induced rat.
도 17은 Effect of UDCA and C&JM_50E complex on inflammatory factor mRNA expression in liver tissue of ethanol-induced rat.
도 18은 Effect of UDCA and C&JM_50E complex on Matrix metalloproteinase(MMP) mRNA expression in liver tissue of ethanol-induced rat.
도 19는 Representative histological sections from the livers of ethanol-induced rat. 도 19a는 Histopathological sections of the liver were stained with hematoxylin and eosin(H&E). Magnification: ×100. Excessive fat accumulation(steatosis) in the form of macrovesicles(arrows) was primarily observed in ethanol-induced rat. 도 19b는 Representative microphotographs of Oil Red O staining of the hepatic lipid accumulation.
도 20는 Effect of easytomorrow and C&JM_50E complex on blood ethanol levels in drunken rats.
도 21은 Effect of easytomorrow and C&JM_50E complex on blood acetaldehyde levels in drunken rats.
본 명세서 및 청구범위에 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정해서 해석되어서는 아니 될 것이며, 본 명세서에 기재된 실시 예와 도면에 도시된 구성은 본 발명의 가장 바람직한 일 실시 예에 불과할 뿐이고 본 발명의 기술적 사상을 모두 대변하는 것은 아니므로, 본 출원시점에 있어서 이들을 대체할 수 있는 다양한 균등물과 변형 예들이 있을 수 있음을 이해하여야 한다.
본 발명은 용암해수가 포함된 추출용매를 사용하여 울금을 추출하고, 추출된 울금추출물을 유효성분으로 함유하는 울금과 용암해수를 이용한 간기능 개선용 울금추출분말소재 및 이를 이용한 간기능 개선용 조성물에 관한 것이다.
본 발명인 울금과 용암해수를 이용한 간기능 개선용 울금추출분말소재는 울금을 알코올과 용암해수를 이용하여 추출하고, 추출한 추출물은 여과과정과 농축과정를 거친 후 보조첨가물을 첨가한 후 분무건조방식으로 분말화한다.
상기 혼합(추출)용매는 50% 에탄올(주정) 92.5중량%와 용암해수 7.5중량%로 이루어지며, 건조 울금 1㎏ 중량대비 혼합(추출)용매는 8L를 이용한다.
상기 용암해수를 이용한 울금의 추출과정은 추출용기에 건조 울금 1㎏ 중량대비 혼합(추출)용매는 8L를 넣고 60℃에서 7시간 추출한다.
상기 보조첨가물은 분무건조과정 전에 첨가하는 것으로 고형분 함량 기준으로 카세인나트륨 20중량%와 덱스티린 20중량%이 첨가된다.
상기 보조첨가물은 용암해수를 이용한 울금의 추출과정으로 추출되고 농축과정을 통하여 농축된 울금추출농축액에는 오일성분이 많이 함유되어 있어 분말화 가 잘 이루워지지 않는 단점이 있다. 이러한 단점을 해결하고자 분무건조 공정전에 보조첨가물인 카제인나트륨과 덱스트린 첨가한다. 상기 첨가된 보조첨가물은 분말화 이후에 수분 흡수가 잘 되지 않도록 하여 보관 안정성을 높이는 효과를 발휘한다.
상기 용암해수는 용암해수 원수를 직접 사용할 수 있으며, 용암해수를 처리하여 획득되는 ED미네랄수, RO염수, RO탈염수가 사용될 수 있다.
즉, 상기 용암해수로는 용암해수 원수, ED미네랄수, RO염수, RO탈염수 중 선택되는 하나가 사용될 수 있으며, 바람직하게는 ED미네랄수를 사용하는 것이 바람직하다.
상기 용암해수는, 「바닷물이 현무암층에 의해 여과돼 육지 지하로 흘러든 물」을 칭하며, 우리나라 제주도에서는 제주도 동부해안지역과 서부해안지역에 분포하고 있으며, 일일/계절변동 및 물리적 특성 변화가 적고, 수온은 16~18℃로 변함이 없으며, pH(수소이온농도)는 평균 75범위로서 해양심층수(78) 및 일반해수(80~86) 비교했을 때 안정한 특징을 가지고 있다. 또한 대장균, 암모니아성 질소, 페놀류, 수은, 카드뮴 등 유해성분이 검출되지 않아 산업화 적용에 장애요인이 없으며, 실험동물모델로 사망률에 미치는 급성독성이 없고, 간, 신장, 심장, 근육 등의 손상과 관련 있는 혈액지표 분석결과 조직이나 장기에 미치는 독성이 없다.
또한 일반해수, 해양심층수, 용암해수 원수는 해수를 기원으로 하기 때문에 주요미네랄(Mg, Ca 등) 성분은 유사하고 암반층에 의해 육지 지하로 스며들면서 인체에 유용한 미량 미네랄을 함유하고 있는 것을 특징으로 한다.
상기 ED미네랄수는, 용암해수를 전기투석을 거친 수(물)로 이온교환막(cation 교환막과 anion 교환막)을 사용하여 용암해수 중 염소와 나트륨을 제거하고 마그네슘과 칼슘 성분 등 몸에 이로운 이온은 그대로 유지시키는 수(물)을 칭하며, 용암해수는 ED 미네랄수와 염수로 분리된다.
상기 RO염수 및 RO 탈염수는, 용암해수를 역삼투막을 사용하여 획득한 것으로, 일반적으로 해수는 역삼투막의 방법에 의하여 담수와 염수로 분리된다. 즉, 용암해수를 역삼투막의 방법으로 처리하여 염수인 RO염수와 담수인 RO탈염수(물)를 획득한다.
상기와 같이 이루어진 울금과 용암해수를 이용한 간기능 개선용 울금추출분말소재는 간기능 개선용 조성물의 주요성분으로 사용될 수 있다.
본 발명의 울금과 용암해수를 이용한 간기능 개선용 울금추출분말소재를 유효성분으로 하는 간기능 개선용 조성물은, 투여를 위해서 상기 기재한 유효성분 이외에 추가로 약학적으로 허용가능 한 담체를 1종 이상 포함하여 제조할 수도 있다.
상기 약학적으로 허용 가능한 담체로는, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 덱스트로오스 용액, 말토덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 등이 있으며, 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수도 있다.
또한, 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있다.
[실시 예]
- 용암해수 울금추출분말 획득.
건조 울금 1㎏에 혼합(추출)용매 8L를 넣고 60℃에서 7시간 추출한 후 여과 및 농축을 진행하여 용암해수 울금추출물을 획득한다.
상기 혼합(추출)용매는 50% 에탄올(주정) 92.5중량%와 ED미네랄수 7.5중량%를 혼합한 혼합물을 사용하였다.
획득한 상기 용암해수 울금추출물에 고형분 함량 기준으로 카세인나트륨(Sodium Caseinate) 20중량%와 덱스티린(dextrin) 20중량%를 첨가한 후 분무건조과정을 통하여 용암해수 울금추출분말 250g을 획득하였다.
상기 용암해수는 제주도 해역내에서 획득되는 제주용암해수를 가공한 ED미네랄수를 사용하였다.
[실 험]
울금-용압해수 추출물의 알코올성 간 손상 동물모델 효능평가
| No | Treatment | N | |
| 1 | Normal | SD rat male 6 weeks(대한바이오링크) | 8 |
| 2 | Control | 5g/㎏ EtOH | 5 |
| 3 | PC-UDCA | 5g/㎏ EtOH * UDCA 25㎎/㎏ | 8 |
| 4 | 울금 400 | 5g/㎏ EtOH * 울금 용암해수 50% 에탄올 추출물 400㎎/㎏ | 4 |
| 5 | 울금 200 | 5g/㎏ EtOH * 울금 용암해수 50% 에탄올 추출물 200㎎/㎏ | 3 |
| 6 | 울금 100 | 5g/㎏ EtOH * 울금 용암해수 50% 에탄올 추출물 100㎎/ | 5 |
| 7 | 울금 50 | 5g/㎏ EtOH * 울금 용암해수 50% 에탄올 추출물 50㎎/ | 6 |
2. 실험방법
1) 알코올 유도 간 손상 동물모델 제작
알코올은 5 g/kg body weight로 1주일 동안 매일 1회 경구투여 하여 유도하였다.
2) 혈액 및 간 균질액의 조제
알코올 마지막 처리 이후부터 24시간 절식시킨 후 대동맥으로부터 채혈하고, 채취한 혈액은 실온에 30분간 방치한 후 3,000 rpm에서 10분간 원심분리 하였다. 간 균질액은 간 조직 무게(g)에 10배의 0.1 M Tris HCl buffer(pH 7.4)를 가하고 유리-테프론분쇄기로 균질화하여 준비하고, 그 단백질량은 Bradford 방법으로 정량하여 항산화 효소 활성 측정에 이용하였다.
3) 혈청 중 간 기능 지표효소 활성 측정
Alanine amintransferase(ALT), aspartate aminotransferase(AST) 및 alkaline phosphatase(ALP) 활성도는 각 기질과 효소반응을 이용한 비색법에 의해 제조된 assay kit로 측정하였다. 총 콜레스테롤, HDL-콜레스테롤, LDL-콜레스테롤과 중성지방은 효소법을 이용한 자동 분석기를 사용하였고, FFA는 ACS-ACOD 효소 방법을 이용하였며 인슐린은 Radioimmunoassay(RIA) kits를 이용하여 측정하였다.
4) 항산화 효소 활성 측정
간조직 중 catalase(CAT) 활성은 20 mM 과산화수소를 기질로 균질액 내의 CAT에 의해 감소되는 과산화수소량을 측정하는 방법, superoxide dismutase(SOD) 활성은 xanthin과 xanthine oxidase의 반응에서 형성된 superoxide anion radical이 tetrazolium blue와 formazan을 형성하는 원리를 이용한 방법, glutathione-S-transferase(GST)의 활성은 reduced gluathione이 1-chloro-2,4-dinitrobenzene (CDNB)과 반응하는 원리를 이용한 방법으로 측정하였다.
5) GST colorimetric activity assay
간조직 100mg을 GST assay buffer 0.5ml로 homogenize하여 10,000g, 4℃에서 15분동안 원심분리하여 그 상등액을 본 실험에 사용하였다.
6) Superoxide Dismutase (SOD) activity assay
간조직을 150 mM KCl 관류시켜 적혈구를 제거하였다. 0.1M Tris/HCl, 0.5% Triton X-100, 5 mM β-ME, 0.1 mg/ml PMSF로 homogenize하여 14,000g, 4℃에서 5분동안 원심분리하여 그 상등액을 본 실험에 사용하였다.
위와 같이 처리하고 37℃에서 20분간 배양한 후 450nm의 파장에서 흡광도를 측정한다.
7) CYP2E1, CYP1A2, CYP2B1 및 CYP1A1의 효소활성 측정
CYP2E1 효소 활성은 colorimetric method로 특이적 기질인 p-nitrophenol(PNP)를 이용하여 간 micrisome 획분에서 측정하였다.
CYP1A2, CYP2B1, CYP1A1는 각각 7-ethoxyresorufin-O-deethylase(EROD), 7-pentoxyresorufin-O-dealkylase(PROD), 7-methoxyresorufin-O-deethylase(MROD) 활성측정으로 Pohl과 Fouts의 방법에 의해 간 microsome 획분을 이용하여 측정하였다.
8) 혈중 에탄올 및 아세트알데히드 농도 측정
혈중 에탄올과 아세트알데히드의 농도를 측정하기 위하여 에탄올 투여 전 및 투여 후 1, 3, 5, 7시간 후에 안와채혈을 통해 혈액을 채취하여 1,900×g에서 20분간 원심 분리하여 혈청만을 분리하였고, 알코올 측정 kit와 아세트알데히드 kit를 사용하여 NADH량의 변화를 340nm에서 흡광도로 측정하였다.
9) 간 조직에서의 ADH, ALDH 활성 측정
간 조직을 분리하여 분리된 간 조직은 액체질소에 급속 냉동시킨 후, 시험 당일 50mg씩 나누어 ADH activity kit와 ALDH activity kit에 포함되어 있는 각각의 assay buffer 200μL에 넣어 균질화하였고, 450nm에서 각각의 활성을 측정하였다.
10) 간 조직 유전자 발현 분석
각 실험동물로부터 적출한 간 조직에서의 유전자 발현 양상을 real-time PCR 증폭법을 사용하여 관찰하였다. 간 조직(0.05g)을 RNAzolB(Tel-Test)용액으로 Total RNA를 추출한 뒤 cDNA 합성 및 real-time PCR 분석을 하였다.
Rat Probe & Oligonucleotire primers for real time PCR amplification
유전자 발현은 TaqMan probe(FAM dye-labeled, ABi, USA)를, internal standard를Mouse GAPDH probe set; Endogenous Control(VIC®/ MGB Probe, Probe limited) from Applied Biosystems(4352338E)을 사용하였고, primer의 최종 농도가 200 nM이 되게 반응시켰다.
Real time quantitative PCR의 조건은: pre-denaturation은 2 min at 50 ℃, 10 min 94 ℃, 그리고 40 cycles을 0.15 min at 95 ℃, 1 min at 45 ℃에서 수행하였다.
11) Hepatic Hostological Examinations, Oil Red O staining
포르말린 용액에 의하여 고정된 간 조직은 기본 실험 방법 및 조직 절편으로 만든 후 파라핀으로 포매하고, hematoxylin과 eosin으로 염색하고 형태학적 변화의 차이를 관찰하였다. 중성지방 생성량을 확인하기 위해 intracytoplasmic lipids를 측정하는데 적합한 Oil Red O를 활용하였으며, 염색하여 생성량의 변화의 차이를 관찰하였다.
12) 급성 알코올 투여시 울금추출물 시료에 의한 혈중 알코올농도 변화(숙취분석); 혈중 에탄올 및 아세트알데히드 농도 측정
혈중 에탄올과 아세트알데히드의 농도 를 측정하기 위하여 8주령 SD 흰쥐에 3일간 울금추출물 시료(200mg/kg)와 상쾌한 아침 시료(200mg/kg)를 경구투여하였다. 3일째 울금추출물 시료와 상쾌한 아침 시료를 투여 후 1시간30분 후 Ethanol (2g/kg)을 경구투여 하였다. 에탄올 투여 30분, 60분, 90분, 120분. 240분, 360분에 꼬리끝부분 절단을 통해 혈액(0.5ml)을 채취하고 원심분리하여 혈청만을 분리하였다. 알코올 측정 kit와 아세트알데히드 kit를 사용하여 NADH량의 변화를 340nm 에서 흡광도로 측정하였다.
4. 실험결과
1) 알코올 유도 만성 간 손상 동물모델 제작 및 유효성 평가
① 체중 변화에 미치는 영향
알코올성 간 손상 개선 효능을 갖는 50% 에탄올 울금추출물 및 용암해수 혼합후보소재에 대하여 알코올성 간 손상 동물모델에서의 유효성 평가를 진행하여 효능을 검증을 실시하였다.
알코올은 5g/kg EtOH(50% with saline)농도로 투여한 대조군으로 하였고, 5주간 양성대조군으로 UDCA와 울금-용암해수 50% 에탄올(주정)추출물(C&JM_50E) 400㎎/㎏, 200㎎/㎏, 100㎎/㎏ 투여하였다. 1주 간격으로 체중변화를 측정한 결과, 정상군에 비하여 알코올 투여 대조군(EtOH_CTL)이 2주 이후 체중감소가 나타났고, UDCA와 울금-용암해수 50% 에탄올(주정)추출물(C&JM_50E) 농도에 따른 체중의 변화는 나타나지 않았다(도 3 참조).
② 간 무게 변화에 미치는 영향
알코올성 간 손상 개선 효능을 갖는 50% 에탄올 울금추출물 및 용암해수 혼합후보소재에 대한 간손상 보호효능을 관찰하고자 5주간 알코올 및 UDCA, C&JM_50E를 투여한 후 부검하여 간 무게를 측정하였다.
도 4에서와 같이 정상군 (SD rat_Nr)에 비하여 에탄올 대조군 (EtOH_CTL)이 통계학적 유의성 있게 감 무게가 증가하였고, UDCA와 C&JM_50E(400mg/kg, 200mg/kg, 100mg/kg,) 투여군에서 에탄올 대조군(EtOH_CTL)에 비하여 유의성 있게 감소를 나타내었다.
이러한 결과는 만성알콜성 투여는 간손상에 의한 염증증가로 간무게가 증가하고, UDCA와 C&JM_50E 투여에 의한 항산화 작용으로 간보호효과가 있음을 알 수 있다.
③ 혈청중 지질생화학적(lipid profile)분석
㉠ 총콜레스테롤과 중성지방 측정 변화
혈청중 지질생화학적 분석은 UDCA 및 C&JM_50E복합물를 5주간 투여 후 16시간 식이를 제거하여 공복상태에서 채혈하여 혈청 중 지질생화학검사를 측정하였다(도 5 참조).
도 5의 위표는 혈청 중 총콜레스테롤(total cholesterol) 수준을 분석한 결과로 정상군(SD rat_Nr)에 비하여 에탄올 대조군(EtOH_CTL)의 총콜레스테롤 수준이 22.5% 이상 유의성 있게 증가를 나타내었고, 실험군에서는 UDCA와 C&JM_50E복합물 100 mg/kg에서 통계학적 유의성 있게 감소하였다. 그러나 C&JM_50E복합물 400mg/kg과 200mg/kg 투여군은 에탄올 대조군 (EtOH_CTL)에 비하여 총콜레스테롤 수준이 감소를 나타냈지만, 통계학적 유의성은 없었다.
도 5의 아래표는 혈청 중 중성지방(triglyceride) 수준을 분석한 결과로 정상군(SD rat_Nr)에 비하여 에탄올 대조군(EtOH_CTL)의 중성지방(triglyceride) 수준이 2배이상 유의성 있게 증가를 나타내었고, 실험군에서는 C&JM_50E복합물 400 mg/kg, 200 mg/kg, 100 mg/kg, 50 mg/kg에서 통계학적 유의성있게 2배이상 감소하였다. 그러나 UDCA 투여군은 에탄올 대조군(EtOH_CTL)에 비하여 중성지방(triglyceride) 수준이 감소를 나타냈지만 통계학적 유의성은 없었다.
㉡ 저밀도 콜레스테롤 (LDL cholesterol, LDL-c)과 고밀도 콜레스테롤 (HDL cholesterol, HDL-c) 수준 측정 변화
혈청중 지질생화학적 분석은 UDCA 및 C&JM_50E복합물를 5주간 투여 후 16시간 식이를 제거하여 공복상태에서 채혈하여 혈청 중 지질생화학검사를 측정하였다(도 6 참조).
도 6의 위표는 혈청 중 저밀도 콜레스테롤(LDL-c) 수준을 분석한 결과로 정상군 (SD rat_Nr)에 비하여 에탄올 대조군 (EtOH_CTL)의 저밀도 콜레스테롤(LDL-c)이 79.2% 이상 유의성 있게 증가를 나타내었고, 실험군에서는 UDCA와 C&JM_50E복합물 100mg/kg에서 통계학적 유의성있게 저밀도 콜레스테롤(LDL-c)이 감소하였다. 그러나 C&JM_50E복합물 50 mg/kg 투여군은 에탄올 대조군(EtOH_CTL)에 비하여 저밀도 콜레스테롤(LDL-c) 수준이 감소를 나타냈지만, 통계학적 유의성은 없었다.
도 6의 아래표는 혈청 중 고밀도 콜레스테롤(HDL-c) 수준을 분석한 결과로 정상군(SD rat_Nr)에 비하여 에탄올 대조군(EtOH_CTL)의 고밀도 콜레스테롤(HDL-c) 수준이 19.7% 이상 유의성 있게 증가를 나타내었고, 실험군에서는 UDCA와 C&JM_50E복합물 모든 투여 농도에서 에탄올 대조군(EtOH_CTL)과 차이가 나타나지 않았다.
㉢ 젖산탈수소효소(LDH)과 총단백질(Total protein, T-P) 수준 측정 변화
혈청중 지질생화학적 분석은 UDCA 및 C&JM_50E복합물를 5주간 투여 후 16시간 식이를 제거하여 공복상태에서 채혈하여 혈청 중 조직손상의 지표인 젖산탈수소효소(LDH)와 총단백질(T-P) 수준를 측정하였다(도 7 참조).
도 7의 위표는 혈청 중 젖산탈수소효소(LDH) 수준을 분석한 결과로 정상군(SD rat_Nr)에 비하여 에탄올 대조군(EtOH_CTL)의 젖산탈수소효소(LDH)이 8.8배 이상 유의성 있게 증가를 나타내었고, 실험군에서는 UDCA와 C&JM_50E복합물 (400, 200, 100, 50 mg/kg)에서 통계학적 유의성있게 젖산탈수소효소(LDH)이 감소하였다.
도 7의 아래표는 혈청 중 총단백질 (T-P) 수준을 분석한 결과로 정상군(SD rat_Nr)에 비하여 에탄올 대조군(EtOH_CTL)의 총단백질이 10.2% 이상 유의성 있게 증가를 나타내었고, 실험군에서는 UDCA와 C&JM_50E복합물 (400, 200, 100, 50 mg/kg)에서 통계학적 유의성 있게 총단백질(T-P)이 감소하였다.
㉣ 알칼리인산분해효소(ALP)과 알부민(Albumin) 수준 측정 변화
혈청중 간기능검사 분석은 UDCA 및 C&JM_50E복합물를 5주간 투여 후 16시간 식이를 제거하여 공복상태에서 채혈하여 혈청 중 간기능검사를 측정하였다(도 8 참조).
도 8의 위표는 혈청 중 알칼리인산분해효소(ALP) 수준을 분석한 결과로 정상군(SD rat_Nr)에 비하여 에탄올 대조군(EtOH_CTL)의 알칼리인산분해효소(ALP)이 56.9% 이상 유의성 있게 증가를 나타내었고, 실험군에서는 C&JM_50E 복합물 400mg/kg, 200mg/kg, 100mg/kg에서 통계학적 유의성 있게 알칼리인산분해효소(ALP)가 감소하였다. 그러나 UDCA와 C&JM_50E복합물 50mg/kg 투여군은 에탄올 대조군 (EtOH_CTL)에 비하여 알칼리인산분해효소(ALP) 수준이 감소를 나타냈지만, 통계학적 유의성은 없었다.
도 8의 아래표는 혈청 중 알부민(Albumin) 수준을 분석한 결과로 정상군(SD rat_Nr)에 비하여 에탄올 대조군(EtOH_CTL)의 알부민(Albumin) 수준이 10.2% 이상 유의성 있게 증가를 나타내었고, 실험군에서는 C&JM_50E복합물 400mg/kg, 200 mg/kg에서 통계학적 유의성 있게 알부민이 감소하였다. 그러나 UDCA와 C&JM_50E복합물 100mg/kg, 50mg/kg 투여군은 에탄올 대조군(EtOH_CTL)에 비하여 알부민(Albumin) 수준이 감소를 나타냈지만, 통계학적 유의성은 없었다.
㉤ 혈청중 간기능 아스파르테이트 아미노전달효소(AST)와 알라닌 아미노전이효소(ALT) 수준 측정 변화
혈청중 간기능검사 분석은 UDCA 및 C&JM_50E 복합물를 5주간 투여 후 16시간 식이를 제거하여 공복상태에서 채혈하여 혈청 중 간기능검사를 측정하였다(도 9 참조).
혈청 중 아미노전달효소(AST) 수준을 분석한 결과로 정상군(SD rat_Nr)에 비하여 에탄올 대조군(EtOH_CTL)의 아미노전달효소(AST)이 46.6% 이상 유의성 있게 증가를 나타내었고, 실험군에서는 UDCA와 C&JM_50E복합물 400mg/kg, 200mg/kg에서 통계학적 유의성 있게 아미노전달효소(AST)가 감소하였다. 그러나 C&JM_50E 복합물 100mg/kg, 50mg/kg 투여군은 에탄올 대조군(EtOH_CTL)에 비하여 아미노전달효소(AST) 수준이 감소를 나타냈지만, 통계학적 유의성은 없었다.
혈청 중 알라닌 아미노전이효소(ALT) 수준을 분석한 결과로 정상군(SD rat_Nr)에 비하여 에탄올 대조군(EtOH_CTL)의 알라닌 아미노전이효소(ALT) 수준이 89.3% 이상 유의성 있게 증가를 나타내었고, 실험군에서는 UDCA와 C&JM_50E 복합물 400mg/kg, 200mg/kg, 100mg/kg, 50mg/kg에서 통계학적 유의성 있게 알라닌 아미노전이효소(ALT)가 감소하였다.
④ 간 조직에서의 ADH와 ALDH 활성
에탄올에 의해 만성 간손상이 유도된 동물모델을 대상으로 UDCA 및 C&JM_50E복합물의 간 손상 보호 효과를 검증하고자, UDCA 및 C&JM_50E복합물이 알코올 분해효소의 활성에 미치는 영향을 확인하기 위하여 부검 후 간 조직과 혈청에서 ADH의 활성을 측정하였다(도 10 참조).
도 10의 왼쪽 표는 간 조직에서 ADH 활성을 측정한 결과로 정상군(SD rat_Nr)에 비하여 에탄올 대조군(EtOH_CTL)의 간 조직에서 ADH 활성이 50.3% 이상 유의성 있게 감소를 나타내었고, 실험군에서는 UDCA와 C&JM_50E 복합물 400mg/kg, 200mg/kg, 100mg/kg에서 통계학적 유의성 있게 간 조직에서 ADH 활성이 증가하였다. 그러나 C&JM_50E 복합물 50mg/kg 투여군은 에탄올 대조군(EtOH_CTL)에 비하여 간 조직에서 ADH 활성이 증가를 나타냈지만, 통계학적 유의성은 없었다.
도 10의 오른쪽 표는 혈청에서 ADH 활성을 측정한 결과로 정상군(SD rat_Nr)에 비하여 에탄올 대조군 (EtOH_CTL)의 간 조직에서 ADH 활성이 14.5% 이상 유의성 있게 감소를 나타내었고, 실험군에서는 UDCA와 C&JM_50E 복합물 400mg/kg, 200mg/kg에서 통계학적 유의성 있게 혈청에서 ADH 활성이 증가하였다. 그러나 C&JM_50E 복합물 100mg/kg, 50mg/kg 투여군은 에탄올 대조군(EtOH_CTL)에 비하여 혈청에서 ADH 활성이 증가를 나타냈지만, 통계학적 유의성은 없었다.
⑤ 간 조직에서의 ALDH 활성
에탄올에 의해 만성 간손상이 유도된 동물모델을 대상으로 UDCA 및 C&JM_50E 복합물의 간 손상 보호 효과를 검증하고자, ALDH 활성은 Bostian 방법을 변형 하여 측정하였으며, NADH의 생성속도를 지표로 사용하였다. UDCA 및 C&JM_50E복합물이 알코올 분해효소의 활성에 미치는 영향을 확인하기 위하여 부검 후 간 조직에서 ALDH의 활성을 측정하였다(도 11 참조).
도 11은 간 조직에서 ALDH 활성을 측정한 결과로 정상군(SD rat_Nr)에 비하여 에탄올 대조군(EtOH_CTL)의 간 조직에서 ALDH 활성이 43.0% 이상 유의성 있게 감소를 나타내었고, 실험군에서는 UDCA와 C&JM_50E 복합물 400mg/kg, 200mg/kg에서 통계학적 유의성 있게 간 조직에서 ALDH 활성이 증가하였다. 그러나 C&JM_50E 복합물 100mg/kg, 50mg/kg 투여군은 에탄올 대조군(EtOH_CTL)에 비하여 간 조직에서 ALDH 활성이 증가를 나타냈지만, 통계학적 유의성은 없었다.
⑥ 간 조직에서 항산화 효소계 활성 측정
㉠ 간 조직과 혈청에서 glutathione peroxidase(GSH-Px) 활성 측정 변화
에탄올에 의해 만성 간손상이 유도된 동물모델을 대상으로 UDCA 및 C&JM_50E복합물의 간 손상 보호 효과를 검증하고자, UDCA 및 C&JM_50E복합물이 알코올 분해효소의 활성에 미치는 영향을 확인하기 위하여 부검 후 간 조직과 혈청에서 GSH-Px 활성을 측정하였다(도 12 참조).
도 12의 왼쪽 표는 간 조직에서 GSH-Px 활성을 측정한 결과로 정상군(SD rat_Nr)에 비하여 에탄올 대조군(EtOH_CTL)의 간 조직에서 GSH-Px 활성이 18.1% 이상 유의성 있게 감소를 나타내었고, 실험군에서는 UDCA와 C&JM_50E 복합물 400mg/kg, 200mg/kg, 100mg/kg에서 통계학적 유의성 있게 간 조직에서 GSH-Px 활성이 증가하였다. 그러나 C&JM_50E 복합물 50mg/kg 투여군은 에탄올 대조군(EtOH_CTL)에 비하여 간 조직에서 GSH-Px 활성이 증가를 나타냈지만, 통계학적 유의성은 없었다.
도 12의 오른쪽 표는 혈청에서 GSH-Px 활성을 측정한 결과로 정상군(SD rat_Nr)에 비하여 에탄올 대조군(EtOH_CTL)의 간 조직에서 GSH-Px 활성이 30.8% 이상 유의성 있게 감소를 나타내었고, 실험군에서는 C&JM_50E 복합물 400mg/kg, 200 mg/kg에서 통계학적 유의성 있게 혈청에서 GSH-Px 활성이 증가하였다. 그러나 UDCA, C&JM_50E 복합물 100mg/kg, 50mg/kg 투여군은 에탄올 대조군(EtOH_CTL)에 비하여 혈청에서 GSH-Px 활성이 증가를 나타냈지만, 통계학적 유의성은 없었다.
㉡ 간 조직과 혈청에서 glutathione S-transferase(GST) 활성 측정 변화
에탄올에 의해 만성 간손상이 유도된 동물모델을 대상으로 UDCA 및 C&JM_50E복합물의 간 손상 보호 효과를 검증하고자, UDCA 및 C&JM_50E 복합물이 알코올 분해효소의 활성에 미치는 영향을 확인하기 위하여 부검 후 간 조직과 혈청에서 GST활성을 측정하였다(도 13 참조).
도 13의 왼쪽 표는 간 조직에서 GST 활성을 측정한 결과로 정상군(SD rat_Nr)에 비하여 에탄올 대조군(EtOH_CTL)의 간 조직에서 GST 활성이 50.6% 이상 유의성 있게 감소를 나타내었고, 실험군에서는 UDCA와 C&JM_50E 복합물 400mg/kg , 200mg/kg에서 통계학적 유의성 있게 간 조직에서 GST 활성이 증가하였다. 그러나 C&JM_50E 복합물 100 mg/kg, 50mg/kg 투여군은 에탄올 대조군(EtOH_CTL)에 비하여 간 조직에서 GST 활성이 차이가 없었다.
도 13의 오른쪽 표는 혈청에서 GST 활성을 측정한 결과로 정상군(SD rat_Nr)에 비하여 에탄올 대조군(EtOH_CTL)의 간 조직에서 GST 활성이 63.8% 이상 유의성 있게 감소를 나타내었고, 실험군에서는 UDCA와 C&JM_50E복합물 400mg/kg, 200mg/kg, 100mg/kg, 50mg/kg에서 통계학적 유의성 있게 혈청에서 GST 활성이 증가하였다.
㉢ 간 조직과 혈청에서 superoxide dismutase(SOD) 활성 측정 변화
에탄올에 의해 만성 간손상이 유도된 동물모델을 대상으로 UDCA 및 C&JM_50E복합물의 간 손상 보호 효과를 검증하고자, UDCA 및 C&JM_50E 복합물이 항산화 효소 활성에 미치는 영향을 확인하기 위하여 부검 후 간 조직과 혈청에서 SOD 활성을 측정하였다(도 14 참조).
도 14의 왼쪽 표는 간 조직에서 SOD 활성을 측정한 결과로 정상군(SD rat_Nr)에 비하여 에탄올 대조군(EtOH_CTL)의 간 조직에서 SOD 활성이 21.4% 이상 유의성 있게 감소를 나타내었고, 실험군에서는 UDCA와 C&JM_50E 복합물 400mg/kg, 200mg/kg, 100mg/kg, 50mg/kg에서 통계학적 유의성 있게 간 조직에서 SOD 활성이 증가하였다.
도 14의 오른쪽 표는 혈청에서 SOD 활성을 측정한 결과로 정상군(SD rat_Nr)에 비하여 에탄올 대조군(EtOH_CTL)의 간 조직에서 SOD 활성이 66.9% 이상 유의성 있게 감소를 나타내었고, 실험군에서는 UDCA와 C&JM_50E 복합물 400mg/kg, 200mg/kg, 100mg/kg, 50mg/kg에서 통계학적 유의성 있게 혈청에서 SOD 활성이 증가하였다.
㉣ 간 조직과 혈청에서 catalase(CAT) 활성 측정 변화
에탄올에 의해 만성 간손상이 유도된 동물모델을 대상으로 UDCA 및 C&JM_50E 복합물의 간 손상 보호 효과를 검증하고자, UDCA 및 C&JM_50E복합물이 항산화 효소 활성에 미치는 영향을 확인하기 위하여 부검 후 간 조직과 혈청에서 CAT활성을 측정하였다(도 15 참조).
도 15의 왼쪽 표는 간 조직에서 CAT 활성을 측정한 결과로 정상군(SD rat_Nr)에 비하여 에탄올 대조군(EtOH_CTL)의 간 조직에서 CAT 활성이 8.5% 이상 유의성 있게 감소를 나타내었고, 실험군에서는 UDCA와 C&JM_50E 복합물 400mg/kg, 200mg/kg, 100mg/kg, 50mg/kg에서 통계학적 유의성 있게 간 조직에서 CAT 활성이 증가하였다.
도 15의 오른쪽 표는 혈청에서 CAT 활성을 측정한 결과로 정상군(SD rat_Nr)에 비하여 에탄올 대조군(EtOH_CTL)의 간 조직에서 CAT 활성이 60.9% 이상 유의성 있게 감소를 나타내었고, 실험군에서는 UDCA와 C&JM_50E 복합물 400mg/kg, 200mg/kg, 100mg/kg, 50mg/kg에서 통계학적 유의성 있게 혈청에서 CAT 활성이 증가하였다.
⑦ 간 조직에서 real-time PCR 유전자 발현 분석
㉠ 간 조직 염증사이토카인 유전자 발현 분석
UDCA 및 C&JM_50E복합물이 간조직 mRNA유전자 발현에 미치는 영향을 확인하기 위하여 부검 후 간 조직을 real-time PCR 분석하였다(도 16 참조).
도 16은 간 조직에서 IL-1β(왼쪽 표), IL-6(중간 표), 그리고 TNF-α (오른쪽 표) mRNA를 분석한 결과로 정상군(SD rat_Nr)에 비하여 에탄올 대조군(EtOH_CTL)의 간 조직에서 IL-1β(왼쪽 표), IL-6(중간 표), 그리고 TNF-α (오오른쪽 표) mRNA 유전자 발현이 유의성 있게 증가를 나타내었고, 실험군에서는 UDCA와 C&JM_50E 복합물 400mg/kg, 200mg/kg에서 통계학적 유의성 있게 간 조직에서 IL-1β, IL-6, 그리고 TNF-α mRNA 유전자 발현이 감소하였다. 그러나 C&JM_50E 복합물 100mg/kg, 50mg/kg 투여군은 에탄올 대조군(EtOH_CTL)에 비하여 간 조직에서 IL-1β, IL-6, 그리고 TNF-α mRNA 유전자 발현이 감소를 나타냈지만, 통계학적 유의성은 없었다.
㉡ 간 조직 염증인자 NOS-II, COX-2 mRNA 유전자 발현 분석
UDCA 및 C&JM_50E복합물이 간조직 NOS-II, COX-2 mRNA유전자 발현에 미치는 영향을 확인하기 위하여 부검 후 간 조직을 real-time PCR 분석하였다(도 17 참조).
도 17은 간 조직에서 NOS-II mRNA(왼쪽 표), 그리고 COX-2 mRNA(오른쪽 표)를 분석한 결과로 정상군(SD rat_Nr)에 비하여 에탄올 대조군(EtOH_CTL)의 간 조직에서 NOS-II mRNA, 그리고 COX-2 mRNA 유전자 발현이 유의성 있게 증가를 나타내었고, 실험군에서는 UDCA와 C&JM_50E 복합물 400mg/kg, 200mg/kg에서 통계학적 유의성 있게 간 조직에서 NOS-II mRNA, 그리고 COX-2 mRNA 유전자 발현이 감소하였다. 그러나 C&JM_50E 복합물 100mg/kg, 50mg/kg 투여군은 에탄올 대조군(EtOH_CTL)에 비하여 간 조직에서 NOS-II mRNA, 그리고 COX-2 mRNA 유전자 발현이 감소를 나타냈지만, 통계학적 유의성은 없었다.
㉢ 간 조직 염증인자 MMP-2, 그리고 MMP-9 mRNA 유전자 발현 분석
UDCA 및 C&JM_50E복합물이 간조직 MMP-2, 그리고 MMP-9 mRNA유전자 발현에 미치는 영향을 확인하기 위하여 부검 후 간 조직을 real-time PCR 분석하였다(도 18 참조).
도 18은 간 조직에서 MMP-2 mRNA(왼쪽 표), 그리고 MMP-9 mRNA(오른쪽 표)를 분석한 결과로 정상군(SD rat_Nr)에 비하여 에탄올 대조군(EtOH_CTL)의 간 조직에서 MMP-2 mRNA, 그리고 MMP-9 mRNA 유전자 발현이 유의성 있게 증가를 나타내었고, 실험군에서는 UDCA와 C&JM_50E 복합물 400mg/kg, 200mg/kg에서 통계학적 유의성 있게 간 조직에서 MMP-2 mRNA, 그리고 MMP-9 mRNA 유전자 발현이 감소하였다. 그러나 C&JM_50E 복합물 100mg/kg, 50mg/kg 투여군은 에탄올 대조군(EtOH_CTL)에 비하여 간 조직에서 MMP-2 mRNA, 그리고 MMP-9 mRNA 유전자 발현이 감소를 나타냈지만, 통계학적 유의성은 없었다.
⑧간조직의 조직학적 분석
UDCA 및 C&JM_50E복합물이 간조직에 치는 영향을 확인하기 위하여 부검 후 간 조직학적 검사를하였다(도 19참조).
알코올성 간질환 초기의 조직학적 변화는 간세포의 지방증(steatosis)으로 작은 지방방울에서 큰 지방방울로 진행되면서 지방간염(steatohepatitis), 알코올성 간질환의 마지막 단계인 간조직의 섬유화에 의한 간경변증(steatofibrosis)으로 진행된다(Lefkowitch et al., 2005). 이러한 알코올성 간질환에서 UDCA 및 C&JM_50E 복합물의 간손상 개선 활성을 직접적으로 확인하고자 간 조직을 염색하였다.
도 19는 간 조직검사를 H&E, Oil red O 염색으로 분석한 결과로 정상군(SD rat_Nr)에 비하여 에탄올 대조군(EtOH_CTL)의 간 조직에서 periportal region에 더 많은 양의 lipid droplet이 축적되어 있는 macrosteatosis와 microsteatosis가 관찰되었다. 또한, 지방성 염증의 한 증상으로 보이는 neutorophil이 peripheral 영역에서 관찰되었다. 실험군에서는 UDCA와 C&JM_50E 복합물 400mg/kg, 200mg/kg 투여로 지방구 크기, 지방 축적과 지방성 염증이 농도 의존적으로 개선되는 것으로 나타났다.
2) 급성 알코올 투여시 울금-용암해수 50% 에탄올(주정)추출물(C&JM_50E)에 의한 혈중 알코올농도 변화
① 혈중 에탄올 농도 측정(숙취분석)
혈중 에탄올과 아세트알데히드의 농도 를 측정하기 위하여 8주령 SD 흰쥐에 3일간 울금-용암해수 50% 에탄올(주정)추출물(C&JM_50E) 200mg/kg과 상쾌환 아침(easytomorrow) 시료 200mg/kg를 경구투여하였다.
3일째 울금-용암해수 50% 에탄올(주정)추출물(C&JM_50E) 200mg/kg과 상쾌환 아침 시료 200mg/kg 시료를 투여 후 1시간30분 후 Ethanol 2g/kg을 경구투여 하였다.
에탄올 투여 30분, 60분, 90분, 120분. 240분, 360분에 꼬리끝부분 절단을 통해 혈액(0.5ml)을 채취하여 1,900×g에서 20분 간 원심 분리하여 혈청만을 분리하였고, 알코올 측정 kit를 사용하여 NADH량의 변화를 340nm 에서 흡광도로 측정한 결과이다.
울금-용암해수 50% 에탄올(주정)추출물 200 mg/kg과 상쾌환 아침 시료 200 mg/kg가 알코올 분해 대사에 미치는 영향을 알아 보기 위해 SD rat에 알코올을 투여하기 30분 전에 시료를 경구 투여하고, 알코올 투여 전 및 투여 후 30, 60, 90, 120, 240, 360분 후에 혈액을 채취해 에탄올 농도를 측정하였다.
도 20에서와 같이 측정 kit의 Master reaction mix와 blood serum의 반응시간을 0.5시간, 1시간, 2시간, 4시간으로 측정한 결과, 1시간 이후 비슷한 반응결과를 나타내었다. Reaction반응 1시간(1.0h Reaction) 분석결과를 보면 알코올 숙취유도 대조군은 알코올 섭취 후 6시간 이후도 혈중 에탄올 농도가 크게 감소되지 않았고, 상쾌환 아침 시료 200mg/kg 투여군은 알코올 투여 후 30분 혈중 에탄올 수준에 비하여 55.2% 에탄올 농도가 급격히 감소하였고 알콜올 투여 6시간에서 숙취유도 대조군(Ethanol_CTL)에 비하여 상쾌환 아침 시료 투여군의 혈중 에탄올 농도가 60.7% 급격히 통계적으로 유의하게 감소하는 결과를 보였다. 그리고 Reaction반응 1시간(1.0h Reaction) 분석결과를 보면 울금-용암해수 50% 에탄올(주정)추출물 200mg/kg투여군은 알코올 투여 후 30분 혈중 에탄올 수준에 비하여 34.7% 에탄올 농도가 급격히 감소하였고 알콜올 투여 6시간에서 숙취유도 대조군(Ethanol_CTL)에 비하여 울금-용암해수 50% 에탄올(주정)추출물 200 mg/kg 투여군의 혈중 에탄올 농도가 34.9% 급격히 통계적으로 유의하게 감소하는 결과를 보였다.
② 혈중 아세트알데히드 농도 측정(숙취분석)
혈중 에탄올과 아세트알데히드의 농도 를 측정하기 위하여 8주령 SD 흰쥐에 3일간 울금-용암해수 50% 에탄올(주정)추출물(C&JM_50E) 200mg/kg과 상쾌환 아침 (easytomorrow) 시료 200 mg/kg을 경구투여한다. 3일째 울금-용암해수 50% 에탄올(주정)추출물 200mg/kg과 상쾌환 아침 시료 200mg/kg을 투여 후 1시간30분 후 Ethanol(2g/kg)을 경구투여 한다. 에탄올 투여 30분, 60분, 90분, 120분. 240분, 360분에 꼬리끝부분 절단을 통해 혈액(0.5ml)을 채취하여 1,900×g에서 20분 간 원심 분리하여 혈청만을 분리하였고, 아세트알데히드 kit를 사용하여 NADH량의 변화를 340nm 에서 흡광도로 측정하였다.
혈중 알코올이 분해될 때 생성되는 아세트알데히드(acetaldehyde)는 숙취의 주된 원인으로 알코올 대사가 빠르게 진행되지 않아 쌓이는 많은 양의 아세트알데히드(acetaldehyde)는 지방간과 간 손상을 유발하는 것으로 알려져 있다. 실험동물에 30% 알코올을 투여 후 알코올 대사 중간산물인 아세트알데히드(acetaldehyde)의 농도를 확인한 결과로, 울금-용암해수 50% 에탄올(주정)추출물(C&JM_50E) 200mg/kg과 상쾌환 아침(easytomorrow) 시료(200 mg/kg)이 알코올 분해 대사에 미치는 영향을 알아 보기 위해 SD rat에 알코올을 투여하기 30분 전에 시료를 경구 투여하고, 알코올 투여 전 및 투여 후 30, 60, 90, 120, 240, 360분 후에 혈액을 채취해 아세트알데히드(acetaldehyde) 농도를 측정하였다.
도 21에서와 같이 측정 kit의 Master reaction mix와 blood serum의 반응시간을 0.5시간, 1시간, 2시간, 4시간으로 측정한 결과, 1시간 이후 비슷한 반응결과를 나타내었다. Reaction반응 1시간 (2.0h Reaction) 분석결과를 보면 알코올 숙취유도 대조군은 알코올 섭취 후 6시간 이후도 혈중 아세트알데히드(acetaldehyde) 농도가 크게 감소되지 않았고, 상쾌환 아침(easytomorrow) 시료(200 mg/kg)투여군은 알코올 투여 후 90분후 혈중 아세트알데히드(acetaldehyde) 수준에 비하여 48.7% 아세트알데히드(acetaldehyde) 농도가 급격히 감소하였고 알콜올 투여 6시간에서 숙취유도 대조군(Ethanol_CTL)에 비하여 상쾌환 아침(easytomorrow) 시료 (200mg/kg)투여군의 혈중 아세트알데히드(acetaldehyde) 농도가 59.1% 급격히 통계적으로 유의하게 감소하는 결과를 보였다. 그리고 Reaction반응 1시간(2.0h Reaction) 분석결과를 보면 울금-용암해수 50% 에탄올(주정)추출물(C&JM_50E) 200mg/kg투여군은 알코올 투여 후 60분후 혈중 아세트알데히드(acetaldehyde) 수준에 비하여 50.7% 아세트알데히드(acetaldehyde) 농도가 급격히 감소하였고 알콜올 투여 6시간에서 숙취유도 대조군(Ethanol_CTL)에 비하여 울금-용암해수 50% 에탄올(주정)추출물(C&JM_50E) 200mg/kg투여군의 혈중 아세트알데히드(acetaldehyde) 농도가 36.7% 급격히 통계적으로 유의하게 감소하는 결과를 보였다.
이상의 결과로 보아 시험 물질인 울금-용암해수 50% 에탄올(주정)추출물(C&JM_50E)은 에탄올의 분해뿐 아니라, 흡수를 지연시켜 혈중 에탄올 및 아세트알데히드(acetaldehyde)의 농도를 효과적으로 감소시키며, 장시간 지속적인 효과를 나타냄을 알 수 있다.
정리해보면,
울금-용암해수 50% 에탄올(주정)추출물(C&JM_50E) 400㎎/㎏, 200㎎/㎏, 100㎎/㎏ 투여로 SOD와 Catalase 활성이 대조군에 비해 유의성 있게 증가된 것으로 보아 항산화 효소들을 효과적으로 활성화시켜 알코올성 산화스트레스로부터 간 보호 효과를 갖는다.
지질과산화는 활성산소종들에 의해 매개된 기작으로서 여러 동물 인체실험들을 통하여 다양한 종류의 간 손상을 일으키는 것으로 알려져 왔다. GSH는 생명체에 존재하는 주요 비단백 thiol로서 인체의 산화적 손상에 대한 방어체계에서 중요한 역할을 담당한다.
과산화물을 환원시키는 다양한 효소 과정에서 각종 효소들과 함께 세포 내외적으로 주요한 역할을 하는 비효소계 항산화제인 GSH는 redox 반응 및 해독작용을 통하여 정상 세포들의 구조 및 기능을 유지시켜준다.
GSH 함량은 SD rat_Nr(정상군)에 비해 EtOH_CTL(대조군)에서 감소하였으며, 울금-용암해수 50% 에탄올(주정)추출물(C&JM_50E) 400㎎/㎏, 200㎎/㎏ 투여군에서 유의성 있게 증가된 것으로 보아 알코올 섭취로 인해 GSH 함량이 감소되는 것을 보호했을 것이라고 사료된다.
그리고 혈청중 alcohol과 acetaldehyde 농도 및 total cholesterol, HDL-cholesterol, LDL-cholesterol, triglyceride, free fatty acid, total protein, albumin 농도 및 AST, ALT, LDH 활성를, 알코올 대사과정의 효소인 ADH와 ALDH의 활성, 그리고 간 조직의 병리조직학적((H&E, oil red o) 관찰로 알코올성 지방간에 대한 개선 효과를 검증하여 울금-용암해수 50% 에탄올(주정)추출물(C&JM_50E) 400㎎/㎏, 200㎎/㎏ 투여군에서 간손상을 억제하는 유의성 있는 결과를 확인하였다.
또한, 급성으로 알코올을 투여한 알코올성 지방간 휜쥐모델에서 혈중 alcohol및 acetaldehyde농도 측정하여 울금-용암해수 50% 에탄올(주정)추출물(C&JM_50E) 400㎎/㎏, 200㎎/㎏ 투여군에서 EtOH_CTL(대조군)에 비하여 유의성 있게 감소하였다.
간세포의 염증과 관련된 cytokine 유전자인 TNF-α, TGF-β1, IL-1β, IL-6, IL-8 등의 발현정도와 간 손상 정도와는 상당한 연관성이 있다고 알려져 있으며, 모두 간조직의 감염이 시작 또는 진행되는 과정에서 그 발현이 증가한다.
염증 cytokine 유전자 발현 분석은 염증 인자인 NOS-II, COX-2, TNF-α, IL-1 β, IL-6을 통하여 mRNA 유전자발현 분석을 하였으며, 울금-용암해수 50% 에탄올(주정)추출물(C&JM_50E) 400㎎/㎏, 200㎎/㎏투여군에서 대조군에 비해 IL-1β, TNF-α, NOS-II mRNA 유전자발현은 유의성 있게 감소되었으며, IL-6와 COX-2 mRNA 유전자 발현도 감소되는 것을 확인하였다. 또한 간성상세포와 쿠퍼세포에서 생성되는 간 섬유화 관련 유전자인 MMP-2, MMP-9 mRNA 유전자 발현은 울금-용암해수 50% 에탄올(주정)추출물(C&JM_50E) 400㎎/㎏, 200㎎/㎏, 투여군에서 대조군에 비하여 감소되는 것으로 나타났다.
그리고 급성 알코올 숙취유도 동물모델에서 울금-용암해수 50% 에탄올(주정)추출물(C&JM_50E)은 에탄올의 분해뿐 아니라, 흡수를 지연시켜 혈중 에탄올 및 아세트알데히드(acetaldehyde)의 농도를 효과적으로 감소시키며, 장시간 지속적인 효과를 나타내었다.
즉, 울금-용암해수 50% 에탄올(주정)추출물(C&JM_50E)은는 알코올에 의한 간 손상을 보호하는데 기여할 수 있다.
Claims (4)
- 울금을 알코올과 용암해수를 이용하여 추출하되,
건조 울금 1㎏ 중량대비,
50% 에탄올(주정) 92.5중량%와 용암해수 7.5중량%로 이루어진 혼합(추출)용매 8L를 이용하여 60℃에서 7시간 추출하고, 보조첨가물을 첨가한 후 분무건조시켜 분말화시킴을 특징으로 하는 울금과 용암해수를 이용한 간기능 개선용 울금추출분말소재. - 제1항에 있어서,
상기 혼합(추출)용매를 이용하여 추출한 추출물은 여과과정과 농축과정를 거친 후 보조첨가물을 첨가한 후 분무건조시켜 분말화시키되,
상기 보조첨가물 고형분 함량 기준으로 카세인나트륨 20중량%와 덱스티린 20중량% 임을 특징으로 하는 울금과 용암해수를 이용한 간기능 개선용 울금추출분말소재. - 울금을 알코올과 용암해수를 이용하여 추출하되,
건조 울금 1㎏ 중량대비,
50% 에탄올(주정) 92.5중량%와 용암해수 7.5중량%로 이루어진 혼합(추출)용매 8L를 이용하여 60℃에서 7시간 추출하고, 보조첨가물을 첨가한 후 분무건조시켜 분말화시킨 울금추출분말을 포함하는 울금과 용암해수를 이용한 간기능 개선용 조성물. - 제3항에 있어서,
상기 혼합(추출)용매를 이용하여 추출한 추출물은 여과과정과 농축과정를 거친 후 보조첨가물을 첨가한 후 분무건조시켜 분말화시키되,
상기 보조첨가물 고형분 함량 기준으로 카세인나트륨 20중량%와 덱스티린 20중량% 임을 특징으로 하는 울금과 용암해수를 이용한 간기능 개선용 조성물.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020210045259A KR20220139082A (ko) | 2021-04-07 | 2021-04-07 | 울금과 용암해수를 이용한 간기능 개선용 울금추출분말소재 및 이를 이용하는 간기능 개선용 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020210045259A KR20220139082A (ko) | 2021-04-07 | 2021-04-07 | 울금과 용암해수를 이용한 간기능 개선용 울금추출분말소재 및 이를 이용하는 간기능 개선용 조성물 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20220139082A true KR20220139082A (ko) | 2022-10-14 |
Family
ID=83599835
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020210045259A KR20220139082A (ko) | 2021-04-07 | 2021-04-07 | 울금과 용암해수를 이용한 간기능 개선용 울금추출분말소재 및 이를 이용하는 간기능 개선용 조성물 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR20220139082A (ko) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101381850B1 (ko) | 2012-11-01 | 2014-04-10 | (주)휴럼 | 울금 추출물을 유효성분으로 하는 항 콜레스테롤용 조성물과 그 울금 추출물의 추출방법 |
| KR20140084502A (ko) | 2012-12-27 | 2014-07-07 | (주)휴럼 | 알로에와 울금을 이용한 혼합발효물을 유효성분으로 하는 간 기능 개선용 조성물과 그 제조방법 및 이를 이용한 간 기능 개선용 제제 |
| KR101577002B1 (ko) | 2013-11-29 | 2015-12-14 | (주)휴럼 | 울금과 용암해수를 이용한 항콜레스테롤 또는 간기능 개선용 조성물과 기능성 식품 |
-
2021
- 2021-04-07 KR KR1020210045259A patent/KR20220139082A/ko not_active Application Discontinuation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101381850B1 (ko) | 2012-11-01 | 2014-04-10 | (주)휴럼 | 울금 추출물을 유효성분으로 하는 항 콜레스테롤용 조성물과 그 울금 추출물의 추출방법 |
| KR20140084502A (ko) | 2012-12-27 | 2014-07-07 | (주)휴럼 | 알로에와 울금을 이용한 혼합발효물을 유효성분으로 하는 간 기능 개선용 조성물과 그 제조방법 및 이를 이용한 간 기능 개선용 제제 |
| KR101577002B1 (ko) | 2013-11-29 | 2015-12-14 | (주)휴럼 | 울금과 용암해수를 이용한 항콜레스테롤 또는 간기능 개선용 조성물과 기능성 식품 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Abo-Salem et al. | Experimental diabetic nephropathy can be prevented by propolis: effect on metabolic disturbances and renal oxidative parameters | |
| Karthikeyan et al. | Cardioprotective effect of grape seed proanthocyanidins on isoproterenol-induced myocardial injury in rats | |
| Ghalayini et al. | Prophylaxis and therapeutic effects of raspberry (Rubus idaeus) on renal stone formation in Balb/c mice | |
| Park et al. | Olive leaf down-regulates the oxidative stress and immune dysregulation in streptozotocin-induced diabetic mice | |
| Rao et al. | Remnant B-cell-stimulative and anti-oxidant effects of Persea americana fruit extract studied in rats introduced into streptzotocin-induced hyperglycaemic state | |
| Lee | Supplementation of Pueraria radix water extract on changes of antioxidant enzymes and lipid profile in ethanol-treated rats | |
| CN106474145B (zh) | 辣木叶多糖在制备防治酒精性肝损伤药物和食品中的应用 | |
| Bae et al. | Hepatoprotective effects of aqueous extracts from leaves of Dendropanax morbifera leveille against alcohol-induced hepatotoxicity in rats and in vitro anti-oxidant effects | |
| Aly et al. | Effect of Egyptian radish and clover sprouts on blood sugar and lipid metabolisms in diabetic rats | |
| Rao et al. | Insulin stimulative and anti-oxidative effects of Persea americana fruit extract on streptozotocin induced hyperglycemic rats | |
| Chen et al. | Effects of acute diquat poisoning on liver mitochondrial apoptosis and autophagy in ducks | |
| Nworu et al. | Hepato-and nephroprotective activities of a Nigerian local king tuber oyster mushroom, Pleurotus tuberregium (higher Basidiomycetes), in chemically induced organ toxicities in rats | |
| Onah et al. | Amelioratory effect of methanolic leaf extract of Moringa oleifera on some liver and kidney function and oxidative stress markers in lead-intoxicated rats | |
| Ramarajan et al. | Nephroprotective effects of Colpomenia sinuosa (Derbes & Solier) against carbon tetrachloride induced kidney injury in Wistar rats | |
| KR20220139082A (ko) | 울금과 용암해수를 이용한 간기능 개선용 울금추출분말소재 및 이를 이용하는 간기능 개선용 조성물 | |
| Saravanan et al. | Impact of Hemidesmus indicus R. Br. extract on ethanol-mediated oxidative damage in rat kidney | |
| Achuba et al. | Effects of siam weed (Chromolaena odorata) leaf extract on crude oil-induced toxicity | |
| BASU et al. | Protective role of crude extract of amorphophallus campanulatus against ethanolinduced oxidative renal damage | |
| Nithiya et al. | Protective effect of phloretin on hyperglycemia mediated oxidative stress in experimental diabetic rats | |
| KR101404297B1 (ko) | 광천수를 함유한 숙취 해소용 조성물 | |
| Oubeid | Evaluation The synergism Activity of Portunus armatus and Apium graveolens Extract as Antioxidant in Rats Exposed to Oxidative Stress | |
| Elkarim | Presumptive Ameliorative Effect of Lycopene on Lead-induced Nephrotoxicity in Males Wistar Rats | |
| El-Senosiy et al. | Hepatoprotective effect of asparagus racemosus in paracetamol induced hepatotoxicity in rats | |
| CN105030952B (zh) | 一种组合物在制备预防尿结石药物中的应用 | |
| Ajiboye et al. | Effect of Artocarpus altilis fruit based-diet on liver and kidney function indices on alloxan-induced diabetic rats |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| E601 | Decision to refuse application |