KR20220131229A - N-(3-(5-(피리미딘-4-일)티아졸-4-일)페닐)설폰아미드 화합물 및 이의 용도 - Google Patents

Abstract

본 발명은 단백질 키나제, 보다 구체적으로 BRAF 또는 이의 돌연변이체 형태(mutant form)의 억제제로서 유용한 N-(3-(5-(피리미딘-4-일)티아졸-4-일)페닐설폰아미드 화합물, 이러한 화합물을 포함하는 약제학적 조성물, 및 조절저하된(deregulated) 단백질 키나제 활성과 관련된 질환, 예를 들면, 암의 치료 또는 예방에서 이러한 화합물의 용도에 관한 것이다.

Description

N-(3-(5-(피리미딘-4-일)티아졸-4-일)페닐)설폰아미드 화합물 및 이의 용도

본 발명은 단백질 키나제, 보다 구체적으로 BRAF 또는 이의 돌연변이체 형태(mutant form)의 억제제로서 유용한 N-(3-(5-(피리미딘-4-일)티아졸-4-일)페닐설폰아미드 화합물, 이러한 화합물을 포함하는 약제학적 조성물, 및 조절저하된(deregulated) 단백질 키나제 활성과 관련된 질환, 예를 들면, 암의 치료 또는 예방에서 이러한 화합물의 용도에 관한 것이다.

단백질 키나제는 단백질의 큰 계열(family)을 나타내며, 이는 광범위한 세포 공정의 조절 및 세포 기능에 걸친 제어의 유지에서 중요한 역할을 한다. 단백질 키나제는 타이로신 키나제 및 세린/트레오닌 키나제를 포함한다. 조절저하된 단백질 키나제 활성은 많은 질환, 예를 들면, 양성 및 악성 증식 장애 뿐만 아니라 면역 및 신경계의 부적절한 활성화로부터 야기되는 질환에서 관찰되었다.

BRAF는 촉매적으로 유능한(competent) 세린/트레오닌 단백질 키나제(2개의 슈도키나제 (pseudokinase), KSR1 및 KSR2 또한 RAF 계열에 포함된다)의 신속하게 가속화된 섬유육종(Rapidly Accelerated Fibrosarcoma)(RAF) 계열의 3개의 동형(isoform)(CRAF 및 ARAF와 함께) 중 하나이다. BRAF는 미토겐-활성화된 단백질 키나제(mitogen-activated protein kinase)(MAPK) 경로로서 또한 알려진, RAS/RAF/MEK/ERK 신호전달 캐스케이드(signalling cascade)에서 중요한 역할을 담당하며, 세포 증식 및 생존에 관여한다(M. J. Robinson et al., Curr. Opin. Cell Biol., 1997, 9, 180-186). RAS 결합, 활성 RAF 단독이량체 또는 이종이량체의 형성의 자극에 의한 구조적 변화의 도입시, RAF는 이의 포스포릴화 상태를 변화시키며, 이는 MEK(MEK1 및 MEK2)를 활성화시키는 이의 키나제 활성을 개시(trigger)하며, 이는 궁극적으로 하부 ERK(ERK1 및 ERK2)를 포스포릴화한다. RAF 및 MEK 키나제와는 대조적으로, ERK는 광범위한 기질 특이성을 가지고 수백개의 상이한 단백질을 포스포릴화할 수 있다(R. Roskoski, Pharmacol. Res., 2015, 100, 1-23). RAS는 사람 암의 대략 30%에서 돌연변이되므로, 억제제의 발달은 장기간 동안 연구 하에 있었지만, 유의적인 성공은 없었다(R. Roskoski, Pharmacol. Res., 2018, 135, 239-258). 또한, BRAF의 종양원성 활성화(oncogenic activation)는 MAPK 경로를 구성적으로 및 RAS-독립적으로 유도하여 하부 신호전달(downstream signalling)의 제어되지 않은 증폭을 초래하며, 이는 증식 및 최종적으로 종양형성(tumorigenesis)의 증가에 연루된다(H. Davies et al., Nature, 2002, 417, 949-954). 사람 암과 관련된 BRAF 유전자의 많은 돌연변이(>30)가 확인되었다(P.T.C. Wan et al., Cell, 2004, 116, 855-867). 이는 모발 세포 백혈병(hairy cell leukaemia)의 대략 100%(B. Falini et al., Blood, 2016, 128, 1918-1927), 흑색종(melanoma)의 50%, 갑상선의 45%, 결장의 10%, 및 난소 암종의 8%에 연루되어 있다(M. Pulici, ChemMedChem, 2015, 10, 276-295). 검출된 BRAF 돌연변이된 경우의 대략 90%를 차지하는, 가장 일반적인 돌연변이는 600번 위치에서 발린의 글루탐산으로의 대체(단축해서는 V600E)이고, 이는 키나제 도메인의 활성화 분절에 위치하여 불활성 구조를 탈안정화시킨다. 이러한 돌연변이는 야생형(WT) BRAF와 비교하여 약 500배 증가인 구성적 키나제 활성을 야기한다. 더욱이, WT와는 대조적으로, BRAF-V600E는 단량체로서의 신호전달이고 ERK 음성 피드백 메카니즘(ERK negative feedback mechanism)에 민감하지 않다(C.A. Pratilas, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2009, 106, 4519-4524). 따라서, BRAF의 억제 돌연변이체 형태, 예를 들면, BRAF-V600E는 암 치료를 위한 촉망되는 전략이다.

BRAF 억제제, 예를 들면, 베르무라페닙(P.B. Chapman et al., New Engl. J. Med., 2011, 364, 2507-2516), 소라페닙(P.T.C. Wan et al., Cell, 2004, 116, 855-867), 및 다브라페닙(G.T. Gibney et al., Expert. Opin. Drug. Metab. Toxicol., 2013, 9, 893-899)은 MAPK 신호전달 경로를 차단하고 BRAF 돌연변이체 V600E를 발현하는 세포 내에서 종양 세포 성장을 감소시키기 위해 개발되었다. BRAF-V600E의 선택적인 표적화는 전이성 흑색종의 치료를 위한 입증된 치료학적 전략이고 약물 베루라페닙 및 다브라페닙은 미국 식품 의약국(U.S. Food 및 Drug Administration)(FDA)에 의해 각각 2011년 및 2013년에 말기-단계 흑색종의 치료용으로 승인되었다(G. Kim et al.; Clin. Cancer Res., 2014, 20, 4994-5000; A.D. Ballantyne et al., Drugs, 2013, 76, 1367-1376; A.M. Menzies et al., Clin. Cancer Res., 2014, 20, 2035-2043). 약물 둘 다는 BRAF-V600E 돌연변이체 흑색종 환자의 개선된 반응 속도 및 전반적인 생존을 나타내지만, 불행하게도, 신속하게 획득되는 내성으로 인하여 대부분의 환자는 1년 내에 재발한다(W. Zhang, Curr. Opin. Pharmacol, 2015, 23, 68-73).

다브라페닙은 BRAF-V600E에 대한 강력하고 선택적인 억제제이지만, 이의 생이용능은 오히려 신속하게 감소하며(5시간의 반감기), 이는 시토크롬 P450s(CYPs)를 통한 이의 자체의 물질대사의 유도에 기인하는 경향이 있다. 다브라페닙 물질대사는 CYP3A4 및 CYP2C8에 의해 매개된다. 따라서, 다브라페닙은 CYP2C8 및/또는 CYP3A4의 강력한 억제제와의 약물-약물 상호작용의 대상인 것으로 제안되어 있다. CYP3A4 및 CYP2B6 mRNA 유도는 다브라페닙과 핵 수용체 프레그난 X 수용체(Pregnane X Receptor; PXR) 및/또는 구성적 안드로스탄 수용체(Constitutive Androstane Receptor; CAR)의 상호작용을 나타낸다(C.L. Denton et al., J. Clin. Pharmacol, 2013, 53, 955-961; D.A. Bershas et al., Drug Metab. Dispos, 2013, 41, 2215-2224; S.K. Lawrence et al., Drug Metab. Dispos, 2014, 42, 1180-1190; D. Ouellet, J. Clin. Pharmacol., 2014, 54, 696-706; J. Gil, et al., Cell Biol. Toxicol, 2019; A. Puszkiel et al. Clin. Pharmacokinetics, 2019, 58, 451-467).

NR 아계열(subfamily) I에 속하는 프레그난 X 수용체(Pregnane X Receptor; PXR)는 생체이물 물질대사(xenobiotic metabolism)를 위한 마스타 조절인자(master regulator)로서 공통적이고 두드러진 역할을 담당한다. 이는 외부 물질에 대한 유기체 방어에 관여하므로 매우 다양한 특성(조성, 형태 및 크기에 관한)을 지닌 광범위한 스펙트럼의 리간드(내인성 물질대사물, 약물 및 생체이물(xenobiotics))에 대한 센서로서 작용하는, 해독(detoxification)을 위한 주요 조절인자이다. 불행하게도, PXR에 대한 목적하지 않은 약물 결합은 많은 부작용을 유발한다. PXR은 레티노이드 X 수용체 α(RXRα)와 이종이량체를 형성하고 후속적으로 PXR 반응성 성분에 결합한다. 임상 용도에서 많은 약물에 대한 주요 물질대사 효소 중 하나인, 사이토크롬 P450 효소 CYP3A4의 주요 전사 유도인자로서, 이는 약물 분해를 유도하기 위한 주요 작동인자로서 작용하며 잠재적으로 목적하지 않은 약물-약물 상호작용을 유발할 수 있다(T.M. Willson et al., Nature Rev. Drug Discov., 2002, 1, 259-266). 신속한 물질대사는 많은 약물에 대한 효능을 감소시키지만, 활성 물질대사를 지닌 약물은 물질대사시 증가된 약물효과 및/또는 독성을 나타낼 수 있다. 목적하지 않은 약물-약물 상호작용은 또한 물질대사 쟁점이다. 동일한 효소를 통해 물질대사 경로를 공유하는 2개의 약물이 동일한 결합 부위에 대해 경쟁하는 경우, 보다 높은 효능을 지닌 것이 우세하며 경쟁하는 약물의 물질대사는 감소된다. 이는 궁극적으로 혈청 수준이 상승할 수 있으므로, 대사되지 않은 화합물의 독성 효과에 대해 증가된 위험을 초래할 수 있다. PXR은 또한 많은 상이한 종양(유방, 결장, 전립선 및 난소)에서 광범위하게 발현되며 여기서 이는 다중-약물 내성의 발달 및 향상된 암 세포 공격성 둘 다에 연루된 것으로 밝혀졌다(A. Geick et al., J. Biol. Chem., 2001, 276, 14581-14587). 증가하는 수의 약물이 암에서 임상적으로 시험되었고 때때로 오히려 제한된 성공을 이루고 있으며 또한 최근에 이들 중 일부는 pxr의 리간드를 지시함으로써, 이들 자신의 물질대사 또는 동시-투여된 약물의 물질대사를 유도하는 것으로 밝혀졌다. PXR은 cyp450 효소를 통한 분해 경로의 활성화를 피하기 위하여 이의 활성화를 피하는 것이 요구되는 원치않고 유해한 2차 표적으로 분류된다. 따라서, PXR과의 제한된 상호작용은 이의 주요 표적에 대한 약물의 효율적인 결합에 추가로 요구된다. 따라서, 약물의 개선은 다른 중요한 특성, 예를 들면, 안정성, 생이용능 등을 교란하지 않지만, PXR 결합은 방지하는 화학적 변화로 미세하게 조율하는 것을 포함한다.

BRAF 억제제의 예는 특허원 US 2009/0298815 A1, US 2011/0306625 A1, WO 2011/161216 A1, WO 2012/113774 A1 및 WO 2012/125981 A2에 개시되어 있지만, PXR에 대한 결합의 부재는 입증되어 있지 않다.

따라서, 단백질 키나제 억제제로서 작용하지만 PXR을 활성화시키지 않는 화합물이 여전히 요구되고 있다.

본 발명자는 본 발명에 이르러 항암제로서 치료요법에서 유용한, 후술된, 화학식 I의 화합물을 개발하는데 성공하였다.

이러한 화합물은 PXR을 활성화시키지 않으면서, 단백질 키나제, 특히 세린/트레오닌 키나제, 보다 특히 BRAF 또는 이의 돌연변이체를 억제하는 장점을 갖는다.

따라서, 본 발명은 화학식 I의 화합물, 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물 뿐만 아니라 단백질 키나제, 특히 세린/트레오닌 키나제, 보다 특히 BRAF 또는 이의 돌연변이체의 억제제로서, 이러한 화합물 또는 이러한 화합물을 포함하는 조성물의 용도에 관한 것이다.

일반적인 양태에서, 본 발명은 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물을 제공한다:

[화학식 I]

상기 화학식 I에서,

X는 할로겐이고;

R ¹ 은 C1-C6-알킬, 아미노-C1-C6-알킬, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤리디닐 및 아제티디닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 아미노-C1-C6-알킬, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤리디닐 및 아제티디닐은 탄소 원자를 통해 티아졸 환에 연결되고 C1-C6-알킬, C3-C6-사이클로알킬 또는 C1-C4-알킬옥시카보닐로 임의 치환되고;

R ² 는 C1-C6-알킬, 할로겐 및 NHR⁵로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 여기서 R ⁵ 는 H, -C(O)-C1-C6-알킬, -C(O)-C1-C6-알케닐 및 -C(O)-C1-C6-알키닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

R ³ 은 H, C1-C6-알킬 및 할로겐으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

R ⁴ 는 C1-C6-알킬 및 디할로게노아릴로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

단, R ² , R ³ 및 R ⁴ 중 하나가 C1-C6-알킬이거나 R ³ 이 H인 경우, R ¹ 은 C1-C6-알킬이 아니다.

다른 양태에서, 본 발명은 적어도 하나의 본 발명에 따른 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물 및 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 담체, 희석제, 부형제 및/또는 보조제(adjuvant)를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다.

본 발명은 또한 조절저하된 단백질 키나제 활성과 관련된 질환을 치료 또는 예방하는데 사용하기 위한 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물에 관한 것이다.

상기 설명한 바와 같이, 본 발명은 화학식 I의 화합물 뿐만 아니라 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물에 관한 것이다.

바람직한 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물은 X, R ¹ , R ² , R ³ 및 R ⁴ 중 하나 이상이 다음과 같이 정의된 것이다:

X는 할로겐이고; 특히 X는 클로로 또는 플루오로이고; 보다 특히 X는 플루오로이고;

R ¹ 은 C1-C6-알킬, 아미노-C1-C6-알킬, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤리디닐 및 아제티디닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 아미노-C1-C6-알킬, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤리디닐 및 아제티디닐은 탄소 원자를 통해 티아졸 환에 연결되고 C1-C6-알킬, C3-C6-사이클로알킬 또는 C1-C4-알킬옥시카보닐로 임의 치환되고; 특히 R ¹ 은 C1-C4-알킬, 아미노-C1-C4-알킬, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤리디닐 및 아제티디닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 아미노-C1-C4-알킬, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤리디닐 및 아제티디닐은 탄소 원자를 통해 티아졸 환에 연결되고 C1-C4-알킬, C3-C6-사이클로알킬 또는 C1-C4-알킬옥시카보닐에 의해 임의 치환되고; 보다 특히 R ¹ 은 C2-C4-알킬, 아미노-C1-C3-알킬, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 모르폴린-2-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-3-일, 피롤리딘-2-일, 아제티딘-3-일 및 아제티딘-2-일로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 아미노-C1-C3-알킬, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 모르폴린-2-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-3-일, 피롤리딘-2-일, 아제티딘-3-일 및 아제티딘-2-일은 C1-C4-알킬, C3-C6-사이클로알킬 또는 C1-C4-알킬옥시카보닐로 임의 치환되고; 심지어 보다 특히 R ¹ 은 3급-부틸, 3-아미노프로필, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-2-일 및 아제티딘-2-일로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 3-아미노프로필, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-2-일 및 아제티딘-2-일은 C3-C6-사이클로알킬 또는 C1-C4-알킬옥시카보닐로 임의로 N-치환되고; 여전히 보다 특히 R ¹ 은 3급-부틸, 3-아미노프로필, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-2-일 및 아제티딘-2-일로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 피페리딘-4-일 및 피페리딘-3-일은 사이클로프로필 또는 3급-부틸옥시카보닐에 의해 임의로 N-치환되고; 예를 들면, R ¹ 은 3급-부틸, 3-아미노프로필, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-2-일 및 아제티딘-2-일로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 3-아미노프로필, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-2-일 및 아제티딘-2-일은 C3-C6-사이클로알킬 또는 C1-C4-알킬옥시카보닐에 의해 임의로 N-치환되거나 C1-C4-알킬에 의해 C-치환되고; 다른 예에서, R ¹ 은 3급-부틸, 3-아미노프로필, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-2-일 및 아제티딘-2-일로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일 및 피페라진-2-일은 사이클로프로필 또는 3급-부틸옥시카보닐에 의해 임의로 N-치환되고 상기 모르폴린-3-일은 메틸에 의해 C-이치환되고;

R ² 는 C1-C6-알킬, 할로겐 및 NHR⁵로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 여기서 R ⁵ 는 H, -C(O)-C1-C6-알킬, -C(O)-C1-C6-알케닐 및 -C(O)-C1-C6-알키닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; 특히 R ² 는 C1-C4-알킬, 플루오로, 클로로 및 NHR⁵로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 여기서 R ⁵ 는 H, -C(O)-C1-C6-알킬, -C(O)-C1-C6-알케닐 및 -C(O)-C1-C6-알키닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; 보다 특히 R ² 는 NHR⁵이고, 여기서 R ⁵ 는 H, -C(O)-C1-C6-알킬, -C(O)-C1-C6-알케닐 및 -C(O)-C1-C6-알키닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; 심지어 보다 특히 R ² 는 NHR⁵이고, 여기서 R ⁵ 는 H, -C(O)-C1-C4-알킬, -C(O)-C1-C4-알케닐 및 -C(O)-C1-C4-알키닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; 여전히 보다 특히 R ² 는 NHR⁵이고,여기서 R ⁵ 는 H, -C(O)-C1-C2-알킬, -C(O)-CH=CH₂ 및 -C(O)-C≡CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; 여전히 보다 특히 R ² 는 NHR⁵이고, 여기서 R ⁵ 는 H, -C(O)Me 및 -C(O)-CH=CH₂로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

R ³ 은 H, C1-C6-알킬 및 할로겐으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; 특히 R ³ 은 H, C1-C4-알킬 및 할로겐으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; 보다 특히 R ³ 은 H, C1-C2-알킬, 플루오로 및 클로로로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; 심지어 보다 특히 R ³ 은 H 또는 클로로이고;

R ⁴ 는 C1-C6-알킬 및 디할로게노아릴로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; 특히, R ⁴ 는 C1-C6-알킬 및 디할로게노페닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; 보다 특히, R ⁴ 는 C1-C6-알킬 및 2,5-디할로게노페닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; 심지어 보다 특히, R ⁴ 는 C2-C6-알킬, 2,5-디플루오로페닐 및 2,5-디클로로페닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; 여전히 보다 특히, R ⁴ 는 C2-C4-알킬 또는 2,5-디플루오로페닐이고; 예를 들면, R ⁴ 는 C4-C6-알킬 및 2,5-디할로게노페닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; 다른 예에서, R ⁴ 는 C4-알킬 및 2,5-디할로게노페닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; 다른 예에서, R ⁴ 는 2급-부틸 및 2,5-디플루오로페닐로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

일 구현예에서, 화학식 I의 화합물은 X가 플루오로인 것이다.

일 구현예에서, 화학식 I의 화합물은 R ² 가 NHR⁵이고, 여기서 R ⁵ 가 상기 정의된 바와 같은 것이다.

일 구현예에서, 화학식 I의 화합물은 R ² 가 NHR⁵이고, 여기서 R ⁵ 가 H인 것이다.

일 구현예에서, 화학식 I의 화합물은 R ² 가 NHR⁵이고, 여기서 R ⁵ 가 H, -C(O)Me, -C(O)-CH=CH₂ 및 -C(O)-C≡CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 특히 R ⁵ 가 H, -C(O)Me 및 -C(O)-CH=CH₂로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 보다 특히 R ⁵ 가 H 또는 -C(O)Me인 것이다.

일 구현예에서, 화학식 I의 화합물은 R ³ 이 H 또는 클로로인 것이다.

일 구현예에서, 화학식 I의 화합물은 R ³ 이 H인 것이다.

일 구현예에서, 화학식 I의 화합물은 R ³ 이 클로로인 것이다.

일 구현예에서, 화학식 I의 화합물은 R ⁴ 가 C1-C6-알킬 및 2,5-디할로게노페닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 특히 R ⁴ 가 C2-C6-알킬 및 2,5-디플루오로페닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 보다 특히 R ⁴ 가 C2-C4-알킬 및 2,5-디플루오로페닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; 여전히 보다 특히, R ⁴ 가 C4-알킬 또는 2,5-디플루오로페닐인 것이다.

일 구현예에서, 화학식 I의 화합물은 R ⁴ 가 C1-C2-알킬, C4-C6-알킬 및 2,5-디할로게노페닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 특히 R ⁴ 가 C4-C5-알킬 및 2,5-디플루오로페닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 보다 특히 R ⁴ 가 C4-알킬 및 2,5-디플루오로페닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; 여전히 보다 특히, R ⁴ 가 2급-부틸 또는 2,5-디플루오로페닐인 것이다.

일 구현예에서, 화학식 I의 화합물은 R ⁴ 가 C1-C6-알킬이고, 특히 R ⁴ 가 C2-C6-알킬이고, 보다 특히 R ⁴ 가 C2-C4-알킬이고, 여전히 보다 특히 R ⁴ 가 C4-알킬인 것이다.

일 구현예에서, 화학식 I의 화합물은 R ⁴ 가 C1-C2-알킬 및 C4-C6-알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 특히 R ⁴ 가 C4-C6-알킬, 보다 특히 R ⁴ 가 C4-C5-알킬이고, 여전히 보다 특히 R ⁴ 가 C4-알킬이고, 심지어 보다 특히, R ⁴ 가 2급-부틸인 것이다.

일 구현예에서, 화학식 I의 화합물은 R ⁴ 가 2,5-디할로게노페닐이고, 특히 R ⁴ 가 2,5-디플루오로페닐인 것이다.

일 구현예에서, 화학식 I의 화합물은 화학식 II의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물이다:

[화학식 II]

상기 화학식 II에서,

R ¹ , R ² 및 R ³ 은 화학식 I 및 임의의 이의 구현예와 관련하여 상기 정의된 바와 같다.

바람직한 화학식 II의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물은 R ¹ , R ² 및 R ³ 중 하나 이상의 다음과 같이 정의된 것이다:

R ¹ 은 C1-C6-알킬, 아미노-C1-C6-알킬, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤리디닐 및 아제티디닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 아미노-C1-C6-알킬, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤리디닐 및 아제티디닐은 탄소 원자를 통해 티아졸 환에 연결되고 C1-C6-알킬, C3-C6-사이클로알킬 또는 C1-C4-알킬옥시카보닐에 의해 임의 치환되고; 특히 R ¹ 은 C1-C4-알킬, 아미노-C1-C4-알킬, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤리디닐 및 아제티디닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 아미노-C1-C4-알킬, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤리디닐 및 아제티디닐은 탄소 원자를 통해 티아졸 환에 연결되고 C1-C4-알킬, C3-C6-사이클로알킬 또는 C1-C4-알킬옥시카보닐로 임의 치환되고; 보다 특히 R ¹ 은 C2-C4-알킬, 아미노-C1-C3-알킬, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 모르폴린-2-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-3-일, 피롤리딘-2-일, 아제티딘-3-일 및 아제티딘-2-일로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 아미노-C1-C3-알킬, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 모르폴린-2-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-3-일, 피롤리딘-2-일, 아제티딘-3-일 및 아제티딘-2-일은 C1-C4-알킬, C3-C6-사이클로알킬 또는 C1-C4-알킬옥시카보닐에 의해 임의 치환되고; 심지어 보다 특히 R ¹ 은 3급-부틸, 3-아미노프로필, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-2-일 및 아제티딘-2-일로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 3-아미노프로필, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-2-일 및 아제티딘-2-일은 C3-C6-사이클로알킬 또는 C1-C4-알킬옥시카보닐에 의해 임의로 N-치환되고; 여전히 보다 특히 R ¹ 은 3급-부틸, 3-아미노프로필, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-2-일 및 아제티딘-2-일로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 피페리딘-4-일 및 피페리딘-3-일은 사이클로프로필 또는 3급-부틸옥시카보닐에 의해 임의로 N-치환되고; 예를 들면, R ¹ 은 3급-부틸, 3-아미노프로필, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-2-일 및 아제티딘-2-일로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 3-아미노프로필, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-2-일 및 아제티딘-2-일은 C3-C6-사이클로알킬 또는 C1-C4-알킬옥시카보닐에 의해 임의로 N-치환되거나 C1-C4-알킬에 의해 C-치환되고; 다른 예에서, R ¹ 은 3급-부틸, 3-아미노프로필, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-2-일 및 아제티딘-2-일로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일 및 피페라진-2-일은 사이클로프로필 또는 3급-부틸옥시카보닐에 의해 임의로 N-치환되고 상기 모르폴린-3-일은 메틸에 의해 C-이치환되고;

R ² 는 C1-C6-알킬 또는 NHR⁵이고, 여기서 R ⁵ 는 H, -C(O)-C1-C6-알킬, -C(O)-C1-C6-알케닐 및 -C(O)-C1-C6-알키닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; 특히 R ² 는 C1-C4-알킬 또는 NHR⁵이고, 여기서 R ⁵ 는 H, -C(O)-C1-C6-알킬, -C(O)-C1-C6-알케닐 및 -C(O)-C1-C6-알키닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; 보다 특히 R ² 는 NHR⁵이고, 여기서 R ⁵ 는 H, -C(O)-C1-C6-알킬, -C(O)-C1-C6-알케닐 및 -C(O)-C1-C6-알키닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; 심지어 보다 특히 R ² 는 NHR⁵이고, 여기서 R ⁵ 는 H, -C(O)-C1-C4-알킬, -C(O)-C1-C4-알케닐 및 -C(O)-C1-C4-알키닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; 여전히 보다 특히 R ² 는 NHR⁵이고, 여기서 R ⁵ 는 H, -C(O)-C1-C2-알킬, -C(O)-CH=CH₂ 및 -C(O)-C≡CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; 여전히 보다 특히 R ² 는 NHR⁵이고, 여기서 R ⁵ 는 H, -C(O)Me 및 -C(O)-CH=CH₂로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

R ³ 은 H 또는 할로겐이고; 바람직하게는 R ³ 은 H, 플루오로 또는 클로로이고; 보다 바람직하게는 R ³ 은 H 또는 클로로이다.

일 구현예에서, 화학식 I의 화합물은 화학식 III의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물이다:

[화학식 III]

상기 화학식 III에서,

R ¹ , R ³ 및 R ⁵ 는 화학식 I 및 임의의 이의 구현예와 관련하여 상기 정의된 바와 같다.

바람직한 화학식 III의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물은 R ¹ , R ³ 및 R ⁵ 중 하나 이상의 다음과 같이 정의된 것이다:

R ¹ 은 C1-C6-알킬, 아미노-C1-C6-알킬, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤리디닐 및 아제티디닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 아미노-C1-C6-알킬, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤리디닐 및 아제티디닐은 탄소 원자를 통해 티아졸 환에 연결되고 C1-C6-알킬, C3-C6-사이클로알킬 또는 C1-C4-알킬옥시카보닐에 의해 임의 치환되고; 특히 R ¹ 은 C1-C4-알킬, 아미노-C1-C4-알킬, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤리디닐 및 아제티디닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 아미노-C1-C4-알킬, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤리디닐 및 아제티디닐은 탄소 원자를 통해 티아졸 환에 연결되고 C1-C4-알킬, C3-C6-사이클로알킬 또는 C1-C4-알킬옥시카보닐에 의해 임의 치환되고; 보다 특히 R ¹ 은 C2-C4-알킬, 아미노-C1-C3-알킬, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 모르폴린-2-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-3-일, 피롤리딘-2-일, 아제티딘-3-일 및 아제티딘-2-일로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 아미노-C1-C3-알킬, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 모르폴린-2-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-3-일, 피롤리딘-2-일, 아제티딘-3-일 및 아제티딘-2-일은 C1-C4-알킬, C3-C6-사이클로알킬 또는 C1-C4-알킬옥시카보닐에 의해 임의 치환되고; 심지어 보다 특히 R ¹ 은 3급-부틸, 3-아미노프로필, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-2-일 및 아제티딘-2-일, 상기 3-아미노프로필, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-2-일 및 아제티딘-2-일로 이루어진 그룹으로부터 선택되고 C3-C6-사이클로알킬 또는 C1-C4-알킬옥시카보닐에 의해 임의로 N-치환되고; 여전히 보다 특히 R ¹ 은 3급-부틸, 3-아미노프로필, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-2-일 및 아제티딘-2-일로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 피페리딘-4-일 및 피페리딘-3-일은 사이클로프로필 또는 3급-부틸옥시카보닐에 의해 임의로 N-치환되고; 예를 들면, R ¹ 은 3급-부틸, 3-아미노프로필, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-2-일 및 아제티딘-2-일로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 3-아미노프로필, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-2-일 및 아제티딘-2-일은 C3-C6-사이클로알킬 또는 C1-C4-알킬옥시카보닐에 의해 임의로 N-치환되거나 C1-C4-알킬에 의해 C-치환되고; 다른 예에서, R ¹ 은 3급-부틸, 3-아미노프로필, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-2-일 및 아제티딘-2-일로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일 및 피페라진-2-일은 사이클로프로필 또는 3급-부틸옥시카보닐에 의해 임의로 N-치환되고 상기 모르폴린-3-일은 메틸에 의해 C-이치환되고;

R ⁵ 는 H, -C(O)-C1-C6-알킬 및 -C(O)-C1-C6-알케닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; 특히 R ⁵ 는 H, -C(O)-C1-C4-알킬 및 -C(O)-C1-C4-알케닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; 보다 특히 R ⁵ 는 H, -C(O)-C1-C2-알킬 및 -C(O)-CH=CH₂로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; 여전히 보다 특히 R ⁵ 는 H, -C(O)Me 및 -C(O)-CH=CH₂로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

R ³ 은 H 또는 할로겐이고; 특히 R ³ 은 H, 플루오로 또는 클로로이고; 보다 특히 R ³ 은 H 또는 클로로이다.

일 구현예에서, 화학식 I의 화합물은 화학식 IV의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물이다:

[화학식 IV],

상기 화학식 IV에서,

R ¹ 및 R ⁵ 는 화학식 I 및 임의의 이의 구현예와 관련하여 상기 정의한 바와 같다.

바람직한 화학식 IV의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물은 R ¹ 및 R ⁵ 중 하나 이상이 다음과 같이 정의되는 것이다:

R ¹ 은 아미노-C1-C6-알킬, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤리디닐 및 아제티디닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 아미노-C1-C6-알킬, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤리디닐 및 아제티디닐은 탄소 원자를 통해 티아졸 환에 연결되고 C1-C6-알킬, C3-C6-사이클로알킬 또는 C1-C4-알킬옥시카보닐에 의해 임의 치환되고; 특히 R ¹ 은 아미노-C1-C4-알킬, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤리디닐 및 아제티디닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 아미노-C1-C4-알킬, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤리디닐 및 아제티디닐은 탄소 원자를 통해 티아졸 환에 연결되고 C1-C4-알킬, C3-C6-사이클로알킬 또는 C1-C4-알킬옥시카보닐에 의해 임의 치환되고; 보다 특히 R ¹ 은 아미노-C1-C3-알킬, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 모르폴린-2-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-3-일, 피롤리딘-2-일, 아제티딘-3-일 및 아제티딘-2-일로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 아미노-C1-C3-알킬, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 모르폴린-2-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-3-일, 피롤리딘-2-일, 아제티딘-3-일 및 아제티딘-2-일은 C1-C4-알킬, C3-C6-사이클로알킬 또는 C1-C4-알킬옥시카보닐에 의해 임의 치환되고; 심지어 보다 특히 R ¹ 은 3-아미노프로필, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-2-일 및 아제티딘-2-일로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 3-아미노프로필, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-2-일 및 아제티딘-2-일은 C3-C6-사이클로알킬 또는 C1-C4-알킬옥시카보닐에 의해 임의로 N-치환되고; 여전히 보다 특히 R ¹ 은 3-아미노프로필, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-2-일 및 아제티딘-2-일로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 피페리딘-4-일 및 피페리딘-3-일은 사이클로프로필 또는 3급-부틸옥시카보닐에 의해 임의로 N-치환되고; 예를 들면, R ¹ 은 3-아미노프로필, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-2-일 및 아제티딘-2-일로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 3-아미노프로필, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-2-일 및 아제티딘-2-일은 C3-C6-사이클로알킬 또는 C1-C4-알킬옥시카보닐에 의해 임의로 N-치환되거나 C1-C4-알킬에 의해 C-치환되고; 다른 예에서, R ¹ 은 3-아미노프로필, 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일, 모르폴린-3-일, 피페라진-2-일, 피롤리딘-2-일 및 아제티딘-2-일로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 피페리딘-4-일, 피페리딘-3-일 및 피페라진-2-일은 사이클로프로필 또는 3급-부틸옥시카보닐에 의해 임의로 N-치환되고 상기 모르폴린-3-일은 메틸에 의해 C-이치환되고;

R ⁵ 는 H, -C(O)-C1-C6-알킬 및 -C(O)-C1-C6-알케닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; 특히 R ⁵ 는 H, -C(O)-C1-C4-알킬, -C(O)-C1-C4-알케닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; 보다 특히 R ⁵ 는 H, -C(O)Me 및 -C(O)-CH=CH₂로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

일 구현예에서, 화학식 I의 화합물은 화학식 V의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물이다:

[화학식 V]

상기 화학식 V에서,

R ¹ 및 R ⁵ 는 화학식 I 및 이의 임의의 구현예와 관련하여 상기 정의된 바와 같다.

바람직한 화학식 V의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물은 R ¹ 및 R ⁵ 중 하나 이상의 다음과 같이 정의된 것이다:

R ¹ 은 C1-C6-알킬 및 모르폴리닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 모르폴리닐은 탄소 원자를 통해 티아졸 환에 연결되고 C1-C6-알킬, C3-C6-사이클로알킬 또는 C1-C4-알킬옥시카보닐에 의해 임의 치환되고; 특히 R ¹ 은 C1-C4-알킬 및 모르폴리닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 모르폴리닐은 탄소 원자를 통해 티아졸 환에 연결되고 C1-C4-알킬, C3-C6-사이클로알킬 또는 C1-C4-알킬옥시카보닐에 의해 임의 치환되고; 보다 특히 R ¹ 은 C1-C4-알킬, 모르폴린-3-일 및 모르폴린-2-일로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 모르폴린-3-일 및 모르폴린-2-일은 C1-C4-알킬, C3-C6-사이클로알킬 또는 C1-C4-알킬옥시카보닐에 의해 임의 치환되고; 심지어 보다 특히 R ¹ 은 C1-C4-알킬 및 모르폴린-3-일로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 모르폴린-3-일은 C3-C6-사이클로알킬 또는 C1-C4-알킬옥시카보닐에 의해 임의로 N-치환되고; 여전히 보다 특히 R ¹ 은 3급-부틸 또는 모르폴린-3-일이고;

R ⁵ 는 H이다.

일 구현예에서, 화학식 I의 화합물은 화학식 VI의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물이다:

[화학식 VI]

상기 화학식 VI에서,

R ¹ , R ³ 및 R ⁴ 는 화학식 I 및 임의의 구현예와 관련하여 상기 정의된 바와 같다.

특히 바람직한 본 발명의 화합물은 이후 표 1에 나타낸 것이다.

본 발명의 화합물은 당해 분야의 숙련가에게 공지된 반응으로 상이한 방식에의해 제조할 수 있다. 실시예 단락에 기술된 바와 같은 반응식은 상이한 가능한 접근법의 예로서 나타낸다.

본 발명의 화합물은 실제로 조절인자, 특히 단백질 키나제, 특히 세린/트레오닌 키나제, 보다 특히 BRAF 또는 이의 돌연변이체의 억제제이다. 따라서, 본 발명은 또한 단백질 키나제, 특히 세린/트레오닌 키나제, 보다 특히 BRAF 또는 이의 돌연변이체의 억제제로서의, 본 발명의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물의 용도를 제공한다.

따라서, 특히 바람직한 구현예에서, 본 발명은 조절인자, 특히 단백질 키나제, 특히 세린/트레오닌 키나제, 보다 특히 BRAF 또는 이의 돌연변이체의 억제제로서 화학식 I의 화합물 또는 임의의 이의 서브화학식, 특히 상기 표 1의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물의 용도에 관한 것이다.

적용

본 발명자는 본 발명에 따른 화학식 I의 화합물 또는 임의의 이의 서브화학식, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물이 프레그난 X 수용체(PXR)를 활성화시키지 않고, 단백질 키나제, 특히 세린/트레오닌 키나제, 보다 특히 BRAF 또는 이의 돌연변이체를 조절, 특히 억제하는 능력을 가짐을 입증하였다.

본 발명의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물은 비정상적이거나 조절저하된 단백질 키나제 활성과 관련된 질환 또는 장애의 치료 또는 예방에 유용하다. 다른 측면에서, 따라서 본 발명의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물은 단백질 키나제 신호전달에 의해 매개된 질환 또는 장애의 치료 또는 예방에 유용하다.

따라서, 본 발명은 조절저하된 단백질 키나제 활성과 관련된 질환 또는 장애를 치료 또는 예방하는데 사용하기 위한 본 발명의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물에 관한 것이다.

일 구현예에서, 본 발명은 조절저하된 단백질 키나제 활성과 관련된 질환 또는 장애를 치료 또는 예방하는데 사용하기 위한 본 발명의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물에 관한 것이고, 여기서 단백질 키나제는 타이로신 키나제, 세린/트레오닌 키나제 및 이중 특이성을 지닌 키나제로부터 선택되고, 특히 여기서 단백질 키나제는 RAF 계열, EGFR 계열, ALK, MEK, FGFR1, FGFR2, FGFR3, FGFR4, FLT3, IGF1R, c-Met, JAK 계열, PDGFR α 및 β, RET, AXL, c-KIT, TrkA, TrkB, TrkC, ROS1, BTK 및 Syk로부터 선택되고, 보다 특히 여기서 단백질 키나제는 A-RAF, B-RAF 및 C-RAF로부터 선택되고, 여전히 보다 특히 여기서 단백질 키나제는 B-RAF 또는 이의 돌연변이체 형태이고, 심지어 보다 특히 여기서 단백질 키나제는 B-RAF 또는 이의 돌연변이체 형태이고, 여기서 돌연변이체 형태는 R461I, I462S, G463E, G463V, G465A, G465E, G465V, G468A, G468E, N580S, E585K, D593V, F594L, G595R, L596V, T598I, V599D, V599E, V599K, V599R, V600E 및 A727V, 특히 V599E 및 V600E, 보다 특히 V599E로부터 선택된다.

본 발명의 의미 내에서 조절저하된 단백질 키나제 활성과 관련된 질환은 암, 특히 흑색종, 폐 암, 결장직장 암, 위장 기질 암(gastro-intestinal stromal cancer) 및 췌장 암으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 암을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.

따라서, 암을 치료 또는 예방하는데 사용하기 위한 본 발명의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물이 제공된다. 특히, 흑색종, 폐 암, 결장직장 암, 위장 기질 암 및 췌장 암으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 암을 치료 또는 예방하는데 사용하기 위한 본 발명의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물이 제공된다. 보다 특히, 흑색종, 폐 암, 결장직장 암 및 위장 기질 암으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 암을 치료 또는 예방하는데 사용하기 위한 본 발명의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물이 제공된다.

일 구현예에서, 흑색종, 특히 전이성 흑색종을 치료 또는 예방하는데 사용하기 위한 본 발명의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물이 제공된다.

일 구현예에서, 암, 특히 소 세포 폐 암종(small cell lung carcinoma; SCLC), 비-소 세포 폐 암종(non-small cell lung carcinoma; NSCLC) 및 폐 선암종(lung adenocarcinoma)을 치료 또는 예방하는데 사용하기 위한 본 발명의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물이 제공된다.

일 구현예에서, 결장직장 암을 치료 또는 예방하는데 사용하기 위한 본 발명의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물이 제공된다.

일 구현예에서, 위장 기질 암을 치료 또는 예방하는데 사용하기 위한 본 발명의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물이 제공된다.

일 구현예에서, 췌장 암, 특히 췌장 신경내분비 암(pancreatic neuroendocrine cancer)을 예방 또는 치료하는데 사용하기 위한 본 발명의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물이 제공된다.

다른 측면에서, 본 발명은 또한 치료학적 유효량의 본 발명의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물을 이를 필요로 하는 환자에게 투여함을 포함하여, 조절저하된 단백질 키나제 활성과 관련된 질환 또는 장애를 치료 또는 예방하는 방법을 제공한다. 바람직하게는 환자는 온혈 동물, 보다 바람직하게는 사람이다. 조절저하된 단백질 키나제 활성과 관련된 질환 또는 장애는 바람직하게는 상기 정의된 것이다.

본 발명은 또한 치료학적 유효량의 본 발명의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물을 이를 필요로 하는 환자에게 투여함을 포함하는, 암의 치료 또는 예방 방법에 관한 것이다. 바람직하게는 환자는 온혈 동물, 보다 바람직하게는 사람이다. 특히, 본 발명은 치료학적 유효량의 본 발명의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물을 이를 필요로 하는 환자에게 투여함을 포함하는, 흑색종, 폐암, 결장직장 암, 위장 기질 암 및 췌장 암으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 암의 치료 또는 예방 방법에 관한 것이다.

본 발명은 또한 조절저하된 단백질 키나제 활성과 관련된 질환 또는 장애를 치료 또는 예방하는데 사용하기 위한 의약의 제조를 위한 본 발명의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물의 용도를 제공한다. 바람직하게는 환자는 온혈 동물, 보다 바람직하게는 사람이다. 조절저하된 단백질 키나제 활성과 관련된 질환 또는 장애는 바람직하게는 상기 정의된 것이다.

본 발명은 또한 암의 치료 또는 예방에서 사용하기 위한 의약의 제조를 위한본 발명의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물의 용도에 관한 것이다. 바람직하게는 환자는 온혈 동물, 보다 바람직하게는 사람이다. 특히, 본 발명은 흑색종, 폐 암, 결장직장 암, 위장 기질 암 및 췌장 암으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 암의 치료 또는 예방시 사용하기 위한 의약의 제조를 위한 본 발명의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물의 용도를 추가로 제공한다.

본 발명의 추가의 특징에 따라서, 이를 필요로 하는 환자에게 유효량의 본 발명의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물을 투여함을 포함하여, 이를 필요로 하는 환자에서 단백질 키나제, 특히 세린/트레오닌 키나제, 보다 특히 BRAF 또는 이의 돌연변이체를 조절하는데 사용하기 위한 본 발명의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물이 제공된다. 다른 측면에서, 본 발명은 또한 이러한 치료가 요구되는 환자에게 유효량의 본 발명의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물을 투여함을 포함하여, 이러한 치료가 요구되는 대상체에서 단백질 키나제, 특히 세린/트레오닌 키나제, 보다 특히 BRAF 또는 이의 돌연변이체를 조절, 특히 억제하는 방법을 제공한다. 바람직하게는, 환자는 온혈 동물이고, 심지어 보다 바람직하게는 사람이다.

본 발명에 따라서, 본 발명의 화합물은 임의의 허용되는 투여 방식, 바람직하게는 정맥내 또는 경구 경로에 의해, 치료학적 유효량으로 약제학적 제형으로서 투여될 수 있다.

치료학적 유효량 범위는 치료될 질환의 중증도, 대상체의 연령 및 상대적인 건장, 화합물의 효능, 투여 경로 및 형태, 투여가 지시된 처방, 및 연루된 의학 숙련의의 선호도 및 경험과 같은 다수의 요인에 따라, 전형적으로 매일 0.1 내지 50 000 μg/kg의 체중, 바람직하게는 매일 1 000 내지 40 000 μg/kg의 체중이다. 이러한 질환을 치료하는 당해 분야의 통상의 기술자는 개인 지식에 따라, 주어진 암에 대한 본 발명의 항신생물 제제의 치료학적 유효량을 추정할 수 있다.

일 구현예에 따라서, 본 발명의 화합물, 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물은 조합 치료요법의 부분으로서 투여될 수 있다. 따라서, 활성 성분으로서, 본 발명의 화합물 외에, 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물, 추가의 치료제 및/또는 활성 성분, 및 이를 함유하는 조성물 및 의약의 공-투여를 포함하는 구현예가 본 발명의 영역 내에 포함된다. 흔히 조합 치료요법으로서 지칭된, 이러한 다수의 약물 요법은 조절저하된 단백질 키나제 활성, 특히 상기 정의된 것과 관련된 임의의 질환 또는 장애의 치료 또는 예방에 사용될 수 있다.

따라서, 본 발명의 치료 방법 및 약제학적 조성물은 단독치료요법의 형태로서 본 발명의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물을 사용할 수 있지만, 상기 방법 및 조성물은 또한 다중 치료요법의 형태로 사용될 수 있고 여기서 하나 이상의 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물은 하나 이상의 다른 치료제와 함께 공-투여된다. 추가의 치료제는 다른 항암제, 통증 의약, 항우울제 또는 소염제를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.

본 발명은 또한 본 발명의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물 및 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다. 상기 나타낸 바와 같이, 본 발명은 또한 활성 성분으로서, 본 발명의 화합물 외에, 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물, 추가의 치료제 및/또는 활성 성분을 함유하는 약제학적 조성물을 포함한다.

본 발명은 또한 사람 또는 동물에서 치료학적 치료에 사용하기 위한 본 발명의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물을 제공한다.

본 발명의 다른 목적은 활성 성분으로서 적어도 하나의 본 발명의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물을 포함하는 의약이다.

일반적으로, 약제학적 사용을 위해, 본 발명의 화합물은 적어도 하나의 본 발명의 화합물 및 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 부형제, 및 임의로 하나 이상의 추가의 약제학적으로 허용되는 화합물을 포함하는 약제학적 제제로서 제형화될 수 있다.

비-제한적 예의 수단으로서, 이러한 제형은 경구 투여용으로 적합한 형태(예컨대, 정제, 캡슐제, 또는 소화성 액제로서), 비경구 투여용(예를 들면, 정맥내, 근육내 또는 피하 주사 또는 정맥내 주입에 의해), 국소 투여용(예를 들면, 눈), 대뇌 투여용, 설하 투여용, 에어로졸 투여용, 흡입에 의한, 피부 패치에 의한, 임플란트에 의한, 좌제에 의한 투여용 등에 적합한 형태일 수 있다. 이러한 적합한 투여형-이는 투여 방식에 따라, 고체, 반-고체 또는 액체일 수 있다- 뿐만 아니라 이의 제조시 사용하기 위한 담체, 희석제 및 부형제는 숙련가에게 명백할 것이고; Remington’s Pharmaceutical Sciences의 최근 판을 참고한다.

예를 들면, 본 발명의 화합물 또는 본 발명의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물은 즉시-, 지연된-, 개질된-, 지속된-, 펄스된(pulsed)- 또는 방출 제어된 적용을 위해, 정제, 코팅된 정제, 환제(pill), 캡슐제, 연질 젤라틴 캡슐제, 경구 산제, 과립제, 질좌제(ovule), 엘릭서르제, 액제 또는 현탁제의 형태로 경구 투여될 수 있고, 이는 풍미제 또는 착색제를 함유할 수 있다.

정제는 부형제, 예를 들면, 미세결정성 셀룰로스, 락토스, 시트르산나트륨, 탄산칼슘, 이염기성 인산칼슘 및 글리신, 붕해제, 예를 들면, 전분(바람직하게는 옥수수, 감자 또는 타피오카 전분), 나트륨 전분 글리콜레이트, 크로스카멜로스 나트륨 및 특정의 복합체 실리케이트, 결합제, 예를 들면, 폴리비닐피롤리돈, 하이드록시프로필메틸셀룰로스(HPMC), 하이드록시프로필 셀룰로스(HPC), 슈크로스, 젤라틴 및 아카시아, 윤활제, 예를 들면, 스테아르산마그네슘, 스테아르산, 글리세릴 베헤네이트를 함유할 수 있다. 유사한 유형의 고체 조성물은 또한 경질 젤라틴 갭슐 속에 충전제로서 사용될 수 있다. 이와 관련하여 바람직한 부형제는 락토스, 사카로스, 소르비톨, 만티톨, 감자 전분, 옥수수 전분, 아밀로펙틴, 셀룰로스 유도체 또는 젤라틴을 포함한다. 경질 젤라틴 캡슐제는 본 발명의 화합물의 과립을 함유할 수 있다.

연질 젤라틴 캡슐제는 본 발명의 화합물, 식물성 오일, 왁스, 지방, 또는 연질 젤라틴 캡슐용의 다른 적합한 비히클을 함유하는 캡슐제로 제조할 수 있다. 예로서, 허용되는 비히클은 유성 비히클(oleaginous vehicle), 예를 들면, 장쇄 트리글리세라이드 식물성 오일(예컨대, 옥수수 오일)일 수 있다.

물을 첨가함으로써 수성 현탁제를 제조하는데 적합한 분산성 산제 및 과립제는 분산제, 습윤제, 및 현탁제 및 하나 이상의 방부제와의 혼합물 속에 활성 성분을 함유할 수 있따. 추가의 부형제, 예를 들면, 감미제, 풍미제 및 착색제가 또한 존재할 수 있다. 이러한 조성물은 항-산화제, 예를 들면, 아스코르브산의 첨가에 의해 보존될 수 있다.

경구 투여용의 액체 투여량 형태는 약제학적으로 허용되는, 당해 분야에서 일반적으로 사용된 희석제, 예를 들면, 물 또는 유성 비히클을 함유하는 액제, 유제, 현탁제, 시럽제, 및 엘릭서르제를 포함할 수 있다. 액체 투여량 형태는 사용 전에 물 또는 다른 적합한 비히클과 구성시키기 위한 무수 생성물로서 존재할 수 있다. 이러한 조성물은 또한 보조제, 예를 들면, 습윤제, 유화제 및 현탁제, 착화제, 예를 들면, 2-하이드록시프로필-베타-사이클로덱스트린, 설포부틸에테르-베타-사이클로덱스트린, 및 감미제, 풍미제, 향미제, 착색 물질 또는 염료와 희석제, 예를 들면, 물, 에탄올, 프로필렌 글리콜 및 글리세린, 및 이의 조합을 포함할 수 있다. 이러한 조성물은 항-산화제, 예를 들면, 부틸화된 하이드록시아니솔 또는 알파-토코페롤을 첨가하여 보존할 수 있다.

본 발명의 화합물의 미분된 분말은 예를 들면, 마이크론화에 의해 또는 당해 분야에 공지된 공정에 의해 제조할 수 있다. 본 발명의 화합물은 공지된 분쇄 과정, 예를 들면, 습윤 분쇄를 사용하여 분쇄함으로써 정제 제형 및 다른 제형 유형에 적합한 입자 크기를 수득할 수 있다.

본 발명의 화합물을 비경구적으로 투여하는 경우, 이러한 투여의 예는 다음 중 하나 이상을 포함한다: 제제의 정맥내, 동맥내, 복강내, 척추강내, 심실내, 요도내, 흉골내, 두개내, 근육내 또는 피하 투여; 및/또는 주입 기술 사용.

본 발명의 화합물은 용이하게 이용가능한 비경구 경로 또는 데포트-형 제형을 통해 투여될 수 있다.

용이하게 이용가능한 제형의 비경구 투여용 약제학적 조성물은 무-독성의 비경구적으로 허용되는 희석제 또는 용매 속에 멸균 주사가능한 수성 또는 유성 액제 또는 현탁제의 형태일 수 있고 제형화제, 예를 들면, 현탁제, 안정화제, 분산제, 습윤제 및/또는 착화제, 예를 들면, 사이클로덱스트린, 예컨대, 2-하이드록시프로필-베타-사이클로덱스트린, 설포부틸에테르-베타-사이클로덱스트린을 함유할 수 있다.

비경구 투여용의 데포트-형 제형(depot-type formulation)은 생적합항 및 생분해성 중합체(예컨대, 폴리(β-카프롤락톤), 폴리(에틸렌 옥사이드), 폴리(글리콜산), 폴리[(락트산)-코-(글리콜산)...)], 폴리(락트산)...), 비-생분해성 중합체(예컨대, 에틸렌 비닐아세테이트 공중합체, 폴리우레탄, , 폴리에스테르(아미드), 폴리비닐 클로라이드...), 수성 및 비-수성 비히클(예컨대, 물, 참깨 오일, 면화씨 오일, 대두 오일, 피마자 오일, 아몬드 오일, 오일성 에스테르, 에틸 알코올 또는 분획화된 식물성 오일, 프로필렌 글리콜, DMSO, THF, 2-피롤리돈, N-메틸피롤리딘온, N-비닐피롤리딘온... )를 포함하나, 이에 한정되지 않는 약제학적으로 허용되는 부형제를 사용하여 통상의 기술로 제조할 수 있다.

대안적으로, 활성 성분은 적합한 비히클과 함께 구성하기 위한 무수 형태, 예를 들면, 분말, 결정성 또는 동결-건조된 고체일 수 있다. 멸균 조건 하에서 적합한 비경구 제형의 제조는 당해 분야의 숙련가에게 잘 공지된 표준 약제학적 기술에 의해 용이하게 달성할 수 있다. 멸균 조건 하에서 적합한 비경구 제형의 제조는 당해 분야의 숙련가에게 잘 공지된 표준 기술에 의해 용이하게 달성할 수 있다.

나타낸 바와 같이, 본 발명의 화합물은 비강내로 또는 흡입에 의해 투여할 수 있고 편리하게는 무수 분말 흡입제 또는 적합한 추진제, 예컨대, 디클로로디플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 디클로로테트라플루오로에탄(예를 들면, Ineos Fluor), 이산화탄소 또는 다른 적합한 가스를 사용한 가압 용기, 펌프, 스프레이 또는 네불라이저(nebuliser)로부터 에어로졸 분무 제시의 형태로 편리하게 전달된다. 가압된 에어오졸의 경우에, 투여량 단위는 밸브를 제공하여 계량된 양을 전달함으로써 측정할 수 있다. 가압된 용기, 펌프, 스프레이 또는 네불라이저는 활성 화합물의 액제 또는 현탁제를 함유할 수 있다. 흡입기 또는 취입기(insufflator)에서 사용하기 위한 캡슐제 및 카트릿지(cartridge)(예를 들면, 젤라틴으로부터 제조됨)는 화합물과 적합한 분말 기재, 예를 들면, 락토스 또는 전분의 분말 혼합물을 함유하도록 제형화될 수 있다. 흡입 투여용으로 적합하고/하거나 채택된 조성물의 경우, 화학식 I의 화합물 또는 염이 입자-크기-감소된 형태인 것이 바람직하고, 보다 바람직하게는 크기-감소된 형태는 마이크론화에 의해 수득되거나 수득가능하다. 크기-감소된(예컨대, 마이크론화돈) 화합물 또는 염 또는 용매화물의 바람직한 입자 크기는 약 0.5 내지 약 50 마이크론(예를 들면, 레이저 회절(laser diffraction)의 D50 값에 의해 정의될 수 있다.

대안적으로, 본 발명의 화합물은 좌제 또는 페서리제(pessary)의 형태로 투여될 수 있거나, 이는 겔제, 하이드로겔제, 로션제, 액제, 크림제, 연고제 또는 살포제(dusting powder)의 형태로 국소 적용될 수 있다. 본 발명의 화합물은 또한 예를 들면, 피부 패치를 사용함으로써 피부 또는 경피적으로 투여될 수 있다. 이는 또한 폐 또는 직장 경로에 의해 투여될 수 있다. 이는 또한 안구 경로에 의해 투여될 수 있다. 눈 사용을 위해, 화합물은 등장성, pH 조절된, 멸균 염수 속의 마이크론화된 현탁제로서, 또는 바람직하게는 등장성, pH 조절된, 멸균 염수 속의 액제로서, 임의로, 벤질알코늄 클로라이드와 같은 방부제와 함께 제형화될 수 있다. 대안적으로, 이는 바셀린과 같은 연고제로 제형화될 수 있다.

피부에 국소 적용시키기 위해, 본 발명의 제제는 예를 들면 다음 중 하나 이상과의 혼합물 속에 현탁되거나 분산된 활성 성분을 함유하는 적합한 연고제로서 제형화될 수 있다: 무기 오일, 액체 바셀린, 백색 바셀린, 프로필렌 글리콜, 폴리옥시에틸렌, 폴리옥시프로필렌 화합물, 유화 왁스 및 물. 대안적으로, 이는 적합한 로션제 또는 크림제로서 제형화되고, 예를 들면, 다음 중 하나 이상의 혼합물 속에 현탁 또는 용해될 수 있다: 무기 오일, 소르비탄 모노스테아레이트, 폴리에틸렌 글리콜, 액체 파라핀, 폴리소르베이트 60, 세틸 에스테르 왁스, 세테아릴 알코올, 2-옥틸도데칸올, 벤질 알코올 및 물.

정의

하기 정의 및 설명은 명세서 및 청구범위 둘 다를 포함하는, 전체 출원서에 사요오딘 바와 같은 용어에 대한 것이다.

달리 기술하지 않는 한, 본원의 본 발명의 화합물에 대한 임의의 참고는 화합물 자체 뿐만 아니라 이의 약제학적으로 허용되는 염 및 용매화물을 의미한다.

본 발명의 화합물을 설명하는 경우, 사용된 용어는 달리 나타내지 않는 한, 다음의 정의에 따라 구성되어야 한다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "비치환된"은 라디칼, 그룹 또는 잔기가 치환체를 수반하지 않음을 의미한다. 용어 "치환된"은 라디칼, 그룹 또는 잔기가 하나 이상의 치환체를 수반함을 의미한다. 용어 "N-치환된"은 하나 이상의 치환체가 라디칼, 그룹 또는 잔기의 N 원자 상에 수반됨을 의미한다.

용어 "할로" 또는 "할로겐"은 주기율표의 17족 원자(할로겐)를 지칭하고 특히 불소(F), 염소(Cl), 브롬(Br) 및 요오드(I) 원자를 포함한다. 바람직한 할로 그룹은 플루오로 (F) 및 클로로 (Cl)이고, 플루오로가 특히 바람직하다.

자체적으로 또는 다른 치환체의 부분으로서 용어 "알킬"은 식 C_nH_2n+1의 하이드로카빌 라디칼을 지칭하고, 여기서 n은 1 이상의 수이다. 따라서, 알킬 그룹은 1개 이상의 탄소 원자를 포함할 수 있고, 일반적으로, 본 발명에 따라서 1 내지 12개, 보다 바람직하게는 1 내지 8개의 탄소 원자, 및 여전히 보다 바람직하게는 1 내지 6개의 탄소 원자를 포함한다. 본 발명의 의미 내에서 알킬 그룹은 직쇄 또는 측쇄일 수 있다. 알킬 그룹의 예는 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 2급-부틸, 이소부틸, 3급-부틸, 펜틸, 2급-펜틸, 이소펜틸, 헥실 및 이소헥실을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.

용어 "알케닐"은 자체적으로 또는 다른 치환체의 부분으로서 적어도 하나의 이중 탄소-탄소 결합을 지닌 하이드로카빌 라디칼을 지칭한다. 따라서, 알케닐 그룹은 2개 이상의 탄소 원자를 포함할 수 있고 일반적으로 본 발명에 따라서 2 내지 12개, 보다 바람직하게는 2 내지 8개의 탄소 원자, 및 여전히 보다 바람직하게는 2 내지 6개의 탄소 원자를 포함한다.

용어 "알키닐"은 자체적으로 또는 다른 치환체의 부분으로서 적어도 하나의 삼중 탄소-탄소 결합을 포함하는 하이드로카빌 라디칼을 지칭한다. 따라서, 알키닐 그룹은 2개 이상의 탄소 원자를 포함할 수 있고 일반적으로, 본 발명에 따라서 2개 이상의 탄소 원자를 포함할 수 있고 일반적으로, 본 발명에 따라서, 2 내지 12개, 보다 바람직하게는 2 내지 8개의 탄소 원자, 및 여전히 보다 바람직하게는 2 내지 6개의 탄소 원자를 포함할 수 있다.

용어 "알콕시"는 자체적으로 또는 다른 치환체의 부분으로서 -O-알킬 그룹을 지칭하고, 여기서 알킬은 상기 정의된 바와 같다. 알콕시 그룹의 예는 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 이소프로폭시, 2급-부톡시, 이소부톡시, 3급-부톡시, 펜톡시, 2급-펜톡시 및 이소펜톡시를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.

용어 "아미노알킬"은 자체로서 또는 다른 치환체의 부분으로서 -알킬-NH₂ 그룹을 지칭하고, 여기서 알킬은 상기 정의된 바와 같다.

용어 "알킬옥시카보닐"은 자체로서 또는 다른 치환체의 부분으로서 -C(O)-O-알킬 그룹을 지칭하고, 여기서 알킬은 상기 정의된 바와 같다.

용어 "할로알킬" 또는 "할로게노알킬"은 단독으로 또는 함께 상기 정의된 바와 같은 의미를 갖는 알킬 라디칼을 지칭하고, 여기서 하나 이상의 수소는 상기 정의된 바와 같은 할로겐으로 대체된다. 이러한 할로알킬 라디칼의 비-제한적 예는 클로로메틸, 1-브로모에틸, 플루오로메틸, 디플루오로메틸, 트리플루오로메틸, 1,1,1-트리플루오로에틸 등을 포함한다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "사이클로알킬"은 1가의 포화되거나, 불포화된 모노사이클릭 또는 비사이클릭 하이브로카빌 그룹이다. 사이클로알킬 그룹은 환 내에 3개 이상의 탄소 원자를 포함할 수 있고, 일반적으로 본 발명에 따라서 3 내지 10개, 보다 바람직하게는 3 내지 8개의 탄소 원자, 및 여전히 보다 바람직하게는 3 내지 6개의 탄소 원자를 포함한다. 사이클로알킬 그룹의 예는 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실 및 사이클로헵틸을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "헤테로원자"는 탄소 또는 수소가 아닌 임의의 원자를 지칭한다. 이러한 헤테로원자의 비-제한적 예는 질소, 산소, 황, 및 인을 포함한다. 본 발명에 따른 바람직한 헤테로원자는 질소, 산소 및 황이다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "헤테로사이클릴", "헤테로사이클로알킬" 또는 "헤테로사이클로"는 적어도 하나의 탄소 원자-함유 환 내에 적어도 하나의 헤테로원자를 갖는 자체적으로 또는 다른 그룹의 부분으로서 비-방향족의, 완전 포화되거나 부분 불포화된 사이클릭 그룹(예를 들면, 3 내지 7원의 모노사이클릭, 7 내지 11원의 비사이클릭이거나, 총 3 내지 10개의 환 원자를 함유한다)을 지칭한다. 헤테로원자를 함유하는 헤테로사이클릭 그룹의 각각의 환은 질소, 산소 및/또는 황 원자로부터 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 헤테로원자를 가지고, 여기서 질소 및 황 헤테로원자는 임의 산화될 수 있고 질소 헤테로원자는 임의로 사급화될 수 있다. 헤테로사이클릭 그룹은 환 또는 환 시스템의 임의의 헤테로원자 또는 탄소 원자에 부착될 수 있고, 여기서 원자가가 허용된다. 헤테로사이클릴 그룹의 예는 아지리디닐, 아제티디닐, 피롤리디닐, 피페리디닐, 아제파닐, 피페라지닐, 모르폴리닐을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 본 발명에 따른 바람직한 헤테로사이클릴 그룹은 아제티디닐, 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐 및 모르폴리닐이다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "아릴"은 전형적으로 5 내지 12개의 원자; 바람직하게는 6 내지 10개의 원자를 갖는 단일 환(즉, 페닐) 또는 함께 융?u된 다중 방향족 환(예컨대, 나프틸)을 갖는 다중불포화된, 방향족 하이드로카빌 그룹을 지칭하고, 여기서 적어도 하나의 환은 방향족이다. 아릴 그룹의 예는 페닐, 비페닐, 1-나프틸(또는 나프탈렌-1-일), 2-나프틸(또는 나프탈렌-2-일), 안트라세닐, 인다닐, 인데닐, 1,2,3,4-테트라하이드로나프틸을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 본 발명에 따른 바람직한 아릴 그룹은 페닐이다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "헤테로아릴"은 자체적으로 또는 다른 그룹의 부분으로서 5 내지 12개의 탄소-원자 방향족 환 또는 전형적으로 5 내지 6개의 원자를 함유하는 함께 융합된 1 내지 2개의 환을 함유하는 환 시스템을 지칭하나 이에 한정되지 않고; 이들 중 적어도 하나는 방향족이고, 여기서 이들 환 중 하나 이상 내 하나 이상의 탄소 원자는 산소, 질소 및/또는 황 원자에 의해 대체되고 여기서 질소 및 황 헤테로원자는 임의 산화될 수 있고 질소 헤테로원자는 임의 사급화될 수 있다. 헤테로아릴 그룹의 예는 피리딜, 피라지닐, 피리미디닐, 피리다지닐, 트리아지닐, 퀴놀리닐, 퀴녹살리닐, 퀴나졸리닐, 푸라닐, 벤조푸라닐, 피롤릴, 인돌릴, 티오페닐, 벤조티오페닐, 이미다졸릴, 벤즈이미다졸릴, 피라졸릴, 인다졸릴, 옥사졸릴, 벤즈옥사졸릴, 이속사졸릴, 벤즈이속사졸릴, 티아졸릴, 및 벤조티아졸릴, 트리아졸릴, 옥사디아졸릴, 티아디아졸릴, 디옥사졸릴, 디티아졸릴 및 테트라졸릴을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 본 발명에 따른 바람직한 헤테로아릴 그룹은 티아졸릴이다.

용어 "할로아릴" 또는 "할로게노아릴"은 단독으로 또는 함께 상기 정의된 바와 같은 의미를 갖는 아릴 라디칼을 지칭하고 여기서 하나 이상의 수소는 상기 정의된 바와 같은 할로겐으로 대체된다.

기본적인 작용 그룹을 함유하는 본 발명의 화합물은 약제학적으로 허용되는 염의 형태일 수 있다. 하나 이상의 기본 작용 그룹을 함유하는 본 발명의 화합물의 약제학적으로 허용되는 염은 특히 이의 산 부가 염을 포함한다. 적합한 산 부가 염은 무-독성 염을 형성하는 산으로부터 형성된다. 예는 아세테이트, 아디페이트, 아스파르테이트, 벤조에이트, 베실레이트, 비카보네이트/카보네이트, 비설페이트/설페이트, 보레이트, 캄실레이트, 신나메이트, 시트레이트, 사이클라메이트, 에디실레이트, 에실레이트, 포르메이트, 푸마레이트, 글루셉테이트, 글루코네이트, 글루쿠로네이트, 헥사플루오로포스페이트,, 히벤제이트, 하이드로클로라이드/클로라이드, 하이브로브로마이드/브로마이드, 하이드로요오다이드/요오다이드, 이세티오네이트, 락테이트, 말레이트, 말레에이트, 말로네이트, 메실레이트, 메틸설페이트, 나프틸레이트, 2-납실레이트, 니코티네이트, 니트레이트, 오로테이트, 옥살레이트, 팔미테이트, 파모에이트, 포스페이트/인산수소/인산이수소, 피로글루타메이트, 사카레이트, 스테아레이트, 석시네이트, 탄네이트, 타르트레이트, 토실레이트, 트리플루오로아세테이트 및 크시노포에이트 염을 포함한다.

화학식 I 및 서브화학식의 화합물의 약제학적으로 허용되는 염은 예를 들면, 다음과 같이 제조할 수 있다:

(i) 화학식 I 또는 임의의 이의 서브화학식의 화합물을 목적한 산과 반응시키는 단계; 또는

(ii) 화학식 I 또는 임의의 이의 서브화학식의 화합물의 하나의 염을 적절한 산과 반응시키거나 적합한 이온 교환 컬럼의 수단에 의해 다른 것으로 전환시키는 단계.

모든 이러한 반응은 전형적으로 용액 속에서 수행된다. 염은, 용액으로부터 침전될 수 있거나 여과에 의해 수집될 수 있거나 용매의 증발에 의해 회수될 수 있다. 염 속의 이온화 정도는 완전히 이온화된 것으로부터 비-이온화된 것까지 변할 수 있다.

용어 "용매화물"은 본 발명의 화합물 및 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 용매 분자, 예를 들면, 에탄올을 포함하는 분자 복합체를 기술하기 위해 본원에 사용된다. 용어 "수화물"은 상기 용매가 물인 경우 사용된다.

본 발명의 화합물은 앞서 정의된 바와 같은 본 발명의 화합물, 예를 들면, 모든 다형체 및 이의 결정형, 이의 전구약물(prodrug) 및 이성체(예를 들면, 광학, 기하학적 및 호변이성체성(tautomeric) 이성체) 및 동위원소적으로 표지된 본 발명의 화합물을 포함한다.

또한, 일반적으로, 본 발명의 화합물의 염과 관련하여, 약제학적으로 허용되는 염이 바람직하지만, 본 발명은 이의 광범위한 의미에서 또한 비-약제학적으로 허용되는 염을 포함함에 주목하여야 하며, 이는 예를 들면, 본 발명의 화합물의 단리 및/또는 정제에 사용될 수 있다. 예를 들면, 광학적으로 활성인 산 또는 염기와 함께 형성된 염을 사용하여 본 발명의 화합물의 광학적으로 활성인 이성체의 분리를 촉진시킬 수 있다.

용어 "환자"는 건강 관리를 기다리거나 제공받거나 의학 수술의 대상이거나 대상이 될, 온혈 동물, 보다 바람직하게는 사람을 지칭한다.

용어 "사람"은 성별 둘 다 및 임의의 발달 단계(즉, 신생아, 영아, 어린이, 청소년, 성인)의 대상체(subject)를 지칭한다. 일 구현예에서, 사람은 어린이 또는 성인, 바람직하게는 성인이다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "치료하다", "치료하는" 및 "치료"는 상태 또는 질환을 경감시키거나 폐기하고/하거나 이의 수반되는 증상을 포함함을 의미한다.

용어 "치료학적 유효량"(또는 보다 단순하게는 "유효량" 또는 "적합한 용량")은 이것이 투여된 목적한 치료 또는 예방 효과를 달성하는데 충분한 활성제 또는 활성 성분의 양을 의미한다.

용어 "투여", 또는 이의 변이체(예컨대, 투여하는")은 활성제 또는 활성 성분을 단독으로 또는 약제학적으로 허용되는 조성물의 부분으로서, 상태, 증상 또는 질환이 치료되어야 하는 환자에게 제공함을 의미한다.

"약제학적으로 허용되는"은 약제학적 조성물의 성분이 서로 혼용성이고 이의 환자에게 유해하지 않음을 의미한다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "부형제"는 약제학적 조성물 또는 의약 속에서 활성제 또는 활성 성분과 함께 제형화된 물질을 의미한다. 치료학적 용도를 위한 허용가능한 부형제는 약제 분야에 잘 공지되어 있고 예를 들면, 문헌: Remington's Pharmaceutical Sciences, 21^st Edition 2011에 기술되어 있다. 부형제의 선택은 의도된 투여 경로 및 표준 약제학적 실시와 관련하여 선택될 수 있다. 부형제는 이의 수용체에게 유해하지 않은 의미에서 허용가능하여야만 한다. 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 부형제는 예를 들면, 결합제, 희석제, 담체, 윤활제, 붕해제, 습윤제, 분산제, 현탁제일 수 있다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "암"은 조절되지 않거나 조절저하된 세포 성장 또는 사멸에 의해 특징화된 생리학적 상태를 지칭한다. 용어 "암"은 악성 또는 양성에 상관없이 고형 종양 및 혈액 기원 종양을 포함한다.

암의 예는 다음을 포함하나, 이에 한정되지 않는다:

세엽 선암종(Acinar adenocarcinoma), 세엽 암종(acinar carcinoma), 말단흑자흑색종(acral-lentiginous melanoma), 광선각화증(actinic keratosis), 선암종(adenocarcinoma), 샘낭 암종(adenocystic carcinoma), 선평평세포 암종(adenosquamous carcinoma), 부속기관 암종(adnexal carcinoma), 부신 잔류 종양(adrenal rest tumor), 부신피질 암종(adrenocortical carcinoma), 알도스테론 분비 암종(aldosterone secreting carcinoma), 포상 연부 육종(alveolar soft part sarcoma), 멜라틴결핍 흑색종(amelanotic melanoma), 용혈성 갑상샘 암종(ameloblastic thyroid carcinoma), 혈관육종(angiosarcoma), 아포크린 암종(apocrine carcinoma), 아스킨 종양(Askin's tumor), 성상세포종(astrocytoma), 기저 세포 암종(basal cell carcinoma), 기저양 암종(basaloid carcinoma), 바닥편평 세포 암종(basosquamous cell carcinoma), 담도 암(biliary cancer), 골 암(bone cancer), 골수 암(bone marrow cancer), 포도상 육종(botryoid sarcoma), 뇌 암(brain cancer), 유방 암(breast cancer), 세기관지 암종(bronchioalveolar carcinoma), 기관지 선암종(bronchogenic adenocarcinoma), 기관지원성 암종(bronchogenic carcinoma), 다형 선종 유래 암종(carcinoma ex pleomorphic adenoma), 자궁경부 암(cervical cancer), 녹색종(chloroma), 담관세포 암종(cholangiocellular carcinoma), 연골육종(chondrosarcoma), 융모막암종(choriocarcinoma), 맥락총 암종(choroid plexus carcinoma), 투명세포샘 암종(clear cell adenocarcinoma), 결장 암(colon cancer), 결장직장 암(colorectal cancer), 면포암종(comedocarcinoma), 코르티솔-생산 암종(cortisol-producing carcinoma), 원주세포 암종(cylindrical cell carcinoma), 탈분화 지방육종(dedifferentiated liposarcoma), 전립선의 관 선암종(ductal adenocarcinoma of the prostate), 관 암종(ductal carcinoma), 유방 관상피내암(ductal carcinoma in situ), 십이지장 암(duodenal cancer), 에크린 암종(eccrine carcinoma), 배아 암종(embryonal carcinoma), 자궁내막 암종(endometrial carcinoma), 자궁내막 간질 육종(endometrial stromal carcinoma), 상피모양 육종(epithelioid sarcoma), 식도 암(esophageal cancer), 에윙 육종(Ewing's sarcoma), 외생성 암종(exophytic carcinoma), 섬유아세포 육종(fibroblastic sarcoma), 섬유육종(fibrocarcinoma), 섬유층판 암종(fibrolamellar carcinoma), 섬유육종(fibrosarcoma), 여포상 갑상선 암종(follicular thyroid carcinoma), 방광 암(gallbladder cancer), 위 선암종(gastric adenocarcinoma), 위-장 기질 암(gastro-intestinal stromal cancer), 거대 세포 암종(giant cell carcinoma), 거대 세포 육종(giant cell sarcoma), 골의 거대 세포 종양(giant cell tumor of bone), 신경교종(glioma), 교아세포종(glioblastoma) 또는 다형성 교아종(glioblastoma multiforme), 과립 세포 암종(granulose cell carcinoma), 두부 및 경부 암(head & neck cancer), 혈관종(hemangioma), 혈관육종(hemangiosarcoma), 간모세포종(hepatoblastoma), 간세포 암종(hepatocellular carcinoma), 휘르트레 세포 암종(Hurthle cell carcinoma), 회장 암(ileal cancer), 침윤성 소엽 암종(infiltrating lobular carcinoma), 유방의 섬유 암종(inflammatory carcinoma of the breast), 관내 암종(intraductal carcinoma), 표피내 암종(intraepidermal carcinoma), 공장 암(jejuna cancer), 카포시 육종(Kaposi's sarcoma), 크루켄베르그 종양(Krukenberg's tumor), 크롬친화성 세포 암종(Kulchitsky cell carcinoma), 쿠퍼 세포 암종(Kupffer cell sarcoma), 거대 세포 암종(large cell carcinoma), 후두 암(larynx cancer), 악성 검정사마귀 흑색종(lentigo maligna melanoma), 지방육종(liposarcoma), 간 암(liver cancer), 소엽 암종(lobular carcinoma), 소엽 제자리 암종(lobular carcinoma in situ), 폐 암(lung cancer), 림프상피종(lymphoepithelioma), 림프상피종(lymphoepithelioma), 림프육종(lymphosarcoma), 악성 흑색종(malignant melanoma), 수질 암종(medullary carcinoma), 갑상선 수질 암종(medullary thyroid carcinoma), 수모세포종(medulloblastoma), 뇌막 암종(meningeal carcinoma), 머켈 세포 암종(Merkel cell carcinoma), 미세유두 암종(micropapillary carcinoma), 혼합 세포 육종(mixed cell sarcoma), 점액 암종(mucinous carcinoma), 점액표피모양 암종(mucoepidermoid carcinoma), 점막 흑색종(mucosal melanoma), 점액모양 지방육종(myxoid liposarcoma), 점액육종(myxosarcoma), 비인두 암종(nasopharyngeal carcinoma), 신장모세포종(nephroblastoma), 신경모세포종(neuroblastoma), 결절 흑색종(nodular melanoma), 비-투명 세포 신장 암(non-clear cell renal cancer), 비-소 세포 폐 암(non-small cell lung cancer), 귀리 세포 암종(oat cell carcinoma), 눈 흑색종(ocular melanoma), 구강 암(oral cancer), 골양 암종(osteoid carcinoma), 골육종(osteosarcoma), 난소 암(ovarian cancer), 페제트 암종(Paget's carcinoma), 췌장 암(pancreatic cancer), 췌장아세포종(pancreatoblastoma), 유두모양 샘암종(papillary adenocarcinoma), 유두모양 암종(papillary carcinoma), 갑상선 유두암종(papillary thyroid carcinoma), 골방 암(pelvic cancer), 팽대부주위 암종(periampullary carcinoma), 엽상 종양(phyllodes tumor), 뇌하수체 암(pituitary cancer), 다형성 지방육종(pleomorphic liposarcoma), 가슴막폐모세포종(pleuropulmonary blastoma), 1차 뼈 내부 암종(primary intraosseous carcinoma), 전립선 암(prostate cancer), 직장 암(rectal cancer), 신장 세포 암종(renal cell carcinoma), 망막모세포종(retinoblastoma), 횡문근육종(rhabdomyosarcoma), 원형 세포 지질육종(round cell liposarcoma), 반흔 암(scar cancer), 주혈흡충속의 방광 암(schistosomal bladder cancer), 쉬나이더 암종(schneiderian carcinoma), 지선 암종(sebaceous carcinoma), 반지 세포 암종(signet-ring cell carcinoma), 피부 암(skin cancer), 소 세포 폐 암(small cell lung cancer), 소 세포 골육종(small cell osteosarcoma), 연 조직 육종(soft tissue sarcoma), 방추 세포 암종(splindle cell carcinoma), 방추 세포 육종(spindle cell sarcoma), 편평 세포 암종(squamous cell carcinoma), 위장 암(stomach cancer), 얕은 확산 흑색종(superficial spreading melanoma), 활막 육종(synovial sarcoma), 모세관확장 육종(telangiectatic sarcoma), 말단 관 암종(terminal duct carcinoma), 고환 암(testicular cancer), 갑상선 암(thyroid cancer), 이행 세포 암종(transitional cell carcinoma), 관 암종(tubular carcinoma), 종양형성 흑색종(tumorigenic melanoma), 미분화된 암종(undifferentiated carcinoma), 요관막 선암종(urachal adenocarcinoma), 방광 암(urinary bladder cancer), 자궁 암(uterine cancer), 자궁 체부 암종(uterine corpus carcinoma), 포도막 흑색종(uveal melanoma), 아기날 암(aginal cancer), 사마귀모양 암종(cerrucous carcinoma), 융모 암종(villous carcinoma), 잘-분화된 지방육종(well-differentiated liposarcoma), 윌름스 종양(Wilm's tumor) 또는 난황낭 종양(yolk sac tumor). 본 발명에 따라 바람직한 암은 흑색종, 폐 암, 결장직장 암, 위-장 기질 암 및 췌장 암이ㅏㄷ.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "항암제", "항암 약물", "화학치료제" 또는 "세포독성제"는 단독으로 또는 하나 이상의 제제와 함께 수일 내지 수주의 기간에 걸쳐 하나 이상의 주기의 요법으로 투여된, 암을 치료 또는 예방하는데 사용된 화학제를 지칭한다. 이러한 제제는 높은 증식 속도를 지닌 세포, 예를 들면, 암 세포에 대해 독성이다.

본 발명은 다음의 실시예를 참고로 가장 잘 이해될 것이다. 이러한 실시예는 본 발명의 구체적인 구현예를 대표하기 위해 의도되며, 본 발명의 영역을 제한하는 것으로 의도되지 않는다.

실시예

약어

본 발명의 문맥에서, 다음의 약어 및 실험식이 사용된다:

Boc: 3급-부틸옥시카보닐

C18 컬럼: 역-상 C18 컬럼

℃: 섭씨 도(degree Celsius)

g: 그램(들)

h: 시간(들)

HATU: 헥사플루오로포스페이트 아자벤조트리아졸 테트라메틸 우로늄

HPLC: 고 성능 액체 크로마토그래피

LC/MS: 액체 크로마토그래피/질량 분광법

M: 리터 당 몰(들)

mg: 밀리그램(들)

MH⁺: 슈도-분자 이온(pseudo-molecular ion)(질량 분광법에서 양성 이온 방식)

MHz: 메가헤르츠(megahertz)

μL: 마이크로리터(들)

mL: 마이크로리터(들)

mmol: 밀리몰(들)

mol: 몰(들)

NMR: 핵 자기 공명

본 발명의 다른 특징, 특성 및 장점은 다음의 설명 및 실시예로부터 보다 명확하게 드러날 것이다.

실시예의 합성에 사용된 장치 및 분석 방법

극초단파 조사:

장치: Synergy 소프트웨어가 장착된 CEM 디스커버(Discover).

방법: 10 또는 30 mL의 밀봉된 튜브, 전압 50 W, 고속 교반, 및 15회 또는 30분 조사

섬광 크로마토그래피:

장치: 자가-수집기(auto-collector) 및 UV 검출(2 파장)을 지닌 Biotage SP.

정상 상 컬럼: Sigma-Aldrich 40-63 μm 실리카 겔이 팩킹된 10, 30 또는 100 g Biotage 외부 건조 로드 카트릿지 키트(external dry load cartridge kit).

역상 컬럼: 30, 120 g Biotage SNAP Cartridges, KP-C18-HS.

액체 크로마토그래피:

장치: 자동샘플러 및 Waters 2996 다이오드 배열 검출기(diode array detector)가 장착된 Waters alliance 2695 HPLC 시스템.

분석 방법:

컬럼: Macherey-Nagel Nucleoshell RP18 플러스(5 μm, 4 mm x 100 mm).

컬럼 온도: 40℃.

용매: A(H2O 99.9%, H2CO2 0.1%); B(CH3CN 99.9%, H2CO2 0.1%).

유동 속도: 1 mL/min.

구배(A/B v/v): 90/10 (t=0분), 90/10 (t=1분), 0/100 (t=7분), 0/100 (t=10분).

검출: 210-400 nm 범위.

질량 분광기:

장치: Waters Micromass ZQ (simple quad).

질량 검출법: 전자스프레이 양성 방식(Electrospray positive mode)(ESI+), 질량 범위: 50-800 uma.

NMR 분광기:

장치: Bruker 400 MHz.

방법: ¹H NMR 스펙트럼을 DMSO-d6 속에서 내부 표준으로서 DMSO-d5을 사용하여 수행하였고, 화학적 이동은 백만당 부(parts per million)(ppm)로 나타내었고, 신호는 다음과 같이 나타내었다: s = 단일선(singlet), d = 이중선(doublet), t = 삼중선(triplet), q = 사중선(quadruplet), sept = 칠중선(septuplet), dd = 이중 이중선(double doublet), dt = 이중 삼중선(double triplet), m = 다중선(multiplet) 또는 거대 단일선(large singlet), br = 광범위(broad), H = 양성자.

실시예 1: N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-모르폴린-3-일-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드

단계 1: 3-아미노-2-플루오로벤조산 메틸 에스테르

5.00 g(32.2 mmol)의 3-아미노-2-플루오로벤조산을 50 mL의 무수 메탄올 속에 아르곤 하에 용해하였다. 2.47 mL(33.8 mmol)의 티오닐 클로라이드를 0℃에서 서서히 가한 다음, 반응물을 4시간 동안 환류시켰다. 용액을 실온으로 냉각시켰다. 용매를 감압하에 제거하였다. 반응 혼합물을 중탄산나트륨의 포화된 용액으로 퀀칭시키고 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고 여과하였다. 여액을 감압하에 농축시키고 조 생성물을 섬광 크로마토그래피에 의해 100 g 실리카 겔 컬럼을 통해 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물을 사용하여 정제하였다. 5.03 g의 표제 화합물을 수득하였다.

수율: 92%.

MH⁺: 170.3.

단계 2: 3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로벤조산 메틸 에스테르

50 mL의 무수 피리딘 중 5.03 g(29.7 mmol)의 3-아미노-2-플루오로벤조산 메틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)의 용액에 아르곤 하에, 4.8 mL(35.7 mmol)의 2,5-디플루오로벤젠설포닐 클로라이드를 0℃에서 가하였다. 혼합물을 0℃에서 20분에 이어서, 실온에서 밤새 교반하였다. 완전한 전환 후, 반응 혼합물을 감압하게 농축시키고, 디클로로메탄 속에 용해하고, 염산 0.5 N로 4회 및 염수로 1회 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고 여과하였다. 여액을 감압하에 농축시키고 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 100 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물을 사용하여 정제하였다. 8.14 g의 표제 화합물을 수득한다.

수율: 80%.

MH⁺: 346.5.

단계 3: N-{3-[2-(2-클로로피리미딘-4-일)-아세틸]-2-플루오로-페닐}-2,5-디플루오로벤젠-설폰아미드

40 mL의 무수 테트라하이드로푸란 중 4 g(11.6 mmol)의 3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로벤조산 메틸 에스테르(앞서의 단계에 기술됨)의 용액에 -15℃에서 아르곤 하에, 40.5 mL(40.5 mmol)의 리튬 비스(트리메틸실릴)아미드(테트라하이드로푸란 중 1 M)의 용액에 가하였다. 반응물을 -15℃에서 20분 동안 교반한 다음 10 mL의 무수 테트라하이드로푸란 중 1.79 g(13.8 mmol)의 2-클로로-4-메틸피리미딘의 용액을 욕 온도를 -20 내지 -15℃로 유지시키면서 서서히 가하였다. 반응물을 당해 온도에서 30분 동안 교반한 다음, 15 mL의 염화암모늄의 포화 용액을 -15℃에 이어, 200 mL의 물을 서서히 가하였다. 용액을 분리하고, 유기 층을 물로 3회 세척하였다. 합한 수성 층을 염산 1 N로 pH 6-7로 산성화시키고 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 모든 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고 여과하였다. 여액을 감압하에 농축시키고 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 100 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물을 사용하여 정제하였다. 4.26 g의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다.

수율: 83%.

MH⁺: 442.6.

단계 4: 3-{5-(2-클로로피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-모르폴린-4-카복실산 3급-부틸 에스테르

400 mg (0.91 mmol)의 N-{3-[2-(2-클로로피리미딘-4-일)-아세틸]-2-플루오로-페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드(앞서의 단계에서 기술됨)를 4 mL의 무수 N,N'-디메틸아세트아미드를 실온에서 아르곤 하에 용해한 다음, 161 mg(0.91 mmol)의 N-브로모석신이미드를 가하고 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반한다. 222 mg(0.91 mmol)의 3-티오카바모일모르폴린-4-카복실산 3급-부틸 에스테르를 아르곤 하에 가하고 반응 혼합물을 80℃에서 30분 동안 가열한다. 용액을 실온으로 냉각시키고, 에틸 아세테이트로 희석시킨다. 유기 층을 물로 2회 염수로 1회 세척하고, 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 30 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 에틸 아세테이트/헥산 혼합물로 정제한다. 348 mg의 표제 화합물을 수득한다.

수율: 58%.

MH⁺: 668.8; 670.8.

단계 5: 3-{5-(2-아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-모르폴린-4-카복실산 3급-부틸 에스테르

348 mg(0.52 mmol)의 3-{5-(2-클로로피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-모르폴린-4-카복실산 3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 4 mL의 수산화암모늄 28%의 용액에 용해하고 용액을 90℃에서 극초단파 조사 하에 1시간 동안 가열한다. 혼합물을 100 mL의 염화암모늄 포화 용액으로 희석시키고 에틸 아세테이트로 3회 추출한다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 10 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한다. 193 mg의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다.

수율: 57%.

MH⁺: 649.8.

단계 6: N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-모르폴린-3-일-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드

50 mg(0.077 mmol)의 3-{5-(2-아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-모르폴린-4-카복실산 3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 1 mL의 디클로로메탄 속에 용해한 다음, 0.5 mL의 트리플루오로아세트산을 가한다. 용액을 1시간 동안 실온에서 교반한다. 이후에, 용매를 제거하고, 에틸 아세테이트를 가하고, 용액을 중탄산나트륨의 포화 용액으로 3회 세척한다. 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 10 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물에 이어, 다른 섬광 크로마토그래피로 30 g의 C18 컬럼 상에서 용출제로서 물/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한다. 20 mg의 표제 화합물을 수득한다.

수율: 50%.

MH⁺: 549.7.

¹H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 10.63 (br s, 1H); 7.98 (d, J=5.2 Hz, 1H); 7.58-7.34 (m, 4H); 7.32-7.16 (m, 2H); 6.74 (s, 2H); 5.88 (d, J=5.1 Hz, 1H); 4.18-4.08 (m, 1H); 3.96-3.87 (m, 1H); 3.76-3.68 (m, 1H); 3.54-3.40 (m, 2H); 2.94-2.84 (m, 2H).

실시예 2: N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-(1-사이클로프로필피페리딘-4-일)-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드

단계 1: 1-사이클로프로필피페리딘-4-카복스아미드

500 mg(3.90 mmol)의 피페리딘-4-카복스아미드를 40 mL의 메탄올 속에 용해한 다음, 1.18 mL(5.85 mmol)의 (1-에톡시사이클로프로폭시)트리메틸실란을 가한 다음, 0.67 mL(11.7 mmol)의 아세트산 및 394 mg(6.24 mmol)의 나트륨 시아노보로하이드라이드를 가한다. 용액을 실온에서 10분 동안 및 60℃에서 밤새 교반한다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 용매를 제거하고, 혼합물을 섬광 크로마토그래피로 30 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한다. 937 mg의 표제 화합물을 백색 고체로서 수득한다.

수율: 100%.

MH⁺: 169.2.

단계 2: 1-사이클로프로필피페리딘-4-카보티오아미드

656 mg(3.90 mmol)의 1-사이클로프로필피페리딘-4-카복스아미드(앞서의 단계에서 기술됨)를 15 mL의 테트라하이드로푸란 속에 용해한 다음, 1.36 g(3.35 mmol)의 라웨손 시약(Lawesson's reagent)을 가하고 혼합물을 60℃에서 5시간 동안 교반한다. 다른 0.7 g(1.73 mmol)의 라웨손 시약을 가하고 혼합물을 60℃에서 밤새 교반한다. 반응 혼합물을 실온에서 냉각시키고 용매를 감압하에 제거하였다. 에틸 아세테이트를 가하고, 용액을 중탄산나트륨의 포화 용액으로 3회 세척한다. 합한 수성 층을 에틸 아세테이트로 3회 추출한다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 30 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한다. 608 mg의 표제 화합물을 연황색 고체로서 수득한다.

수율: 85%.

MH⁺: 185.2.

단계 3: N-{3-[5-(2-클로로피리미딘-4-일)-2-(1-사이클로프로필피페리딘-4-일)-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드

화합물을 실시예 1 단계 4에 기술된 과정으로, 500 mg(1.13 mmol)의 N-{3-[2-(2-클로로피리미딘-4-일)-아세틸]-2-플루오로-페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드(실시예 1 단계 3에 기술됨), 5 mL의 무수 N,N'-디메틸아세트아미드, 201 mg(1.13 mmol)의 N-브로모석신이미드 및 208 mg(1.13 mmol)의 1-사이클로프로필피페리딘-4-카보티오아미드를 3-티오카바모일모르폴린-4-카복실산 3급-부틸 에스테르 대신에 사용하여 수득한다. 142 mg의 표제 화합물을 갈색 고체로서 수득한다.

수율: 21%.

MH⁺: 606.8; 608.8.

단계 4: N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-(1-사이클로프로필피페리딘-4-일)-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드

142 mg(0.23 mmol)의 N-{3-[5-(2-클로로피리미딘-4-일)-2-(1-사이클로프로필피페리딘-4-일)-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드(앞서의 단계에서 기술됨)를 3 mL의 수산화암모늄 28% 속에 용해하고 용액을 90℃에서 극초단파 조사 하에 1시간 동안 가열한다. 혼합물을 100 mL의 염화암모늄의 포화된 용액 속에 희석시키고 에틸 아세테이트로 3회 추출한다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 10 g 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한 다음, 다른 섬광 크로마토그래피로 30 g의 C18 컬럼 상에서 용출제로서 물/메탄올 혼합물로 정제한다. 38 mg의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다.

수율: 27%.

MH⁺: 587.8.

¹H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 10.65 (br s, 1H); 7.98 (d, J=5.2 Hz, 1H); 7.61-7.36 (m, 4H); 7.33-7.18 (m, 2H); 6.75 (s, 2H); 5.88 (d, J=5.1 Hz, 1H); 3.10-2.95 (m, 2H); 2.43-2.30 (m, 2H); 2.10-1.98 (m, 2H); 1.75-1.56 (m, 3H); 0.48-0.40 (m, 2H); 0.38-0.28 (m, 2H).

실시예 3: N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-피페리딘-3-일-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드

단계 1: 3-{5-(2-클로로피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-피페리딘e-1-카복실산 3급-부틸 에스테르

화합물을 실시예 1 단계 4에 기술된 과정에 의해, 222 mg(0.91 mmol)의 3-티오카바모일피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르를 3-티오카바모일모르폴린-4-카복실산 3급-부틸 에스테르 대신에 수득한다. 377 mg의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득한다.

수율: 62%.

MH⁺: 666.8; 670.8.

단계 2: 3-{5-(2-아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-피페리딘e-1-카복실산 3급-부틸 에스테르

화합물을 실시예 1 단계 5에 기술된 과정에 의해, 377 mg(0.57 mmol)의 3-{5-(2-클로로피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 사용하여 수득한다. 259 mg의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다.

수율: 71%.

MH⁺: 647.9.

단계 3: N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-피페리딘-3-일-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드

화합물을 실시예 1 단계 6에 기술된 과정에 의해, 50 mg(0.077 mmol)의 3-{5-(2-아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 수득한다. 6 mg의 표제 화합물을 수득한다.

수율: 15%.

MH⁺: 547.7.

¹H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8.65 (br s, 1H); 8.02 (d, J=5.2 Hz, 1H); 7.50-7.40 (m, 1H); 7.39-7.21 (m, 4H); 7.01-6.89 (m, 1H); 6.72 (s, 2H); 6.07 (d, J=5.0 Hz, 1H); 3.65-3.55 (m, 2H); 3.26-3.19 (m, 1H); 3.19-3.08 (m, 1H); 2.96-2.83 (m, 1H); 2.26-2.15 (m, 1H); 1.92-1.69 (m, 3H).

실시예 4: N-{3-[2-(3-아미노프로필)-5-(2-아미노피리미딘-4-일)-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드 트리플루오로아세테이트

단계 1: (3-{5-(2-클로로피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-프로필)-카밤산 3급-부틸 에스테르

화합물을 실시예 1 단계 4에 기술된 과정에 의해, 197 mg(0.90 mmol)의 (3-티오카바모일프로필)-카밤산 3급-부틸 에스테르를 3-티오카바모일모르폴린-4-카복실산 3급-부틸 에스테르 대신에 사용한다. 299 mg의 표제 화합물을 수득한다.

수율: 52%.

MH⁺: 640.8; 642.8.

단계 2: (3-{5-(2-아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-프로필)-카밤산 3급-부틸 에스테르

화합물을 실시예 1 단계 5에 기술된 과정에 의해, 299 mg(1.24 mmol)의 (3-{5-(2-클로로피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-프로필)-카밤산 3급 부틸에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 사용하여 수득한다. 222 mg의 표제 화합물을 오렌지색 고체로서 수득한다.

수율: 76%.

MH⁺: 621.8.

단계 3: N-{3-[2-(3-아미노프로필)-5-(2-아미노피리미딘-4-일)-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드 트리플루오로아세테이트

10 mg(0.016 mmol)의 (3-{5-(2-아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-프로필)-카밤산 3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 1 mL의 디클로로메탄 속에 용해하고, 0.5 mL의 트리플루오로아세트산을 가한다. 용액을 1시간 동안 실온에서 교반하고, 용매를 제거한다. 잔사를 디에틸에테르로 3회 연마하고 진공 하에 밤새 건조한다. 8.3 mg의 표제 화합물을 수득한다.

수율: 100%.

MH⁺: 521.7(유리 염기).

¹H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 10.75 (s, 1H); 8.00 (d, J=5.2 Hz, 1H); 7.80-7.63 (br s, 3H); 7.62-7.24 (m, 8H); 6.77 (s, 2H); 5.86 (d, J=5.1 Hz, 1H); 3.09 (t, J=7.4 Hz, 2H); 2.02 (m, 2H); 1.09 (t, J=7.0 Hz, 2H).

실시예 5: N-(4-{2-(1-사이클로프로필피페리딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐-아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-5-일}-피리미딘-2-일)-아세트아미드

30 mg(0.051 mmol)의 N-{3-[5-(2-클로로피리미딘-4-일)-2-(1-사이클로프로필피페리딘-4-일)-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드(실시예 2 단계 4에 기술됨)를 1 mL의 무수 피리딘 속에 아르곤 하에 용해한다. 이후에, 5.8 μL(0.061 mmol)의 아세트산 무수물을 가하고 용액을 1시간 동안 실온에서 교반한다. 용매를 감압 하에 제거하고, 에틸 아세테이트를 가하고, 용액을 염화암모늄 용액으로 3회 세척한다. 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 10 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한다. 14 mg의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득한다.

수율: 91%.

MH⁺: 629.8.

¹H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8.04 (d, J=5.2 Hz, 1H); 7.88-7.70 (m, 5H); 7.66-7.57 (m, 1H); 7.54 (t, J=8.1 Hz, 1H); 6.77 (s, 2H); 6.16 (d, J=5.3 Hz, 1H); 3.11-2.97 (m, 2H); 2.40-2.27 (m, 2H); 2.14-2.04 (m, 2H); 1.95 (s, 3H); 1.76-1.56 (m, 3H); 0.48-0.38 (m, 2H); 0.36-0.26 (m, 2H).

실시예 6: N-(4-{4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-2-피페리딘-3-일-티아졸-5-일}-피리미딘-2-일)-아세트아미드 트리플루오로아세테이트

단계 1: 3-{5-(2-아세틸아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-피페리딘e-1-카복실산 3급-부틸 에스테르

30 mg(0.046 mmol)의 3-{5-(2-아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(실시예 3 단계 2에 기술됨)를 1 mL의 무수 피리딘 아르곤 하에 용해한다. 이후에 5.3 μL(0.055 mmol)의 아세트산 무수물을 가하고 용액을 1시간 동안 실온에서 교반한다. 용매를 감압 하에 제거하고, 에틸 아세테이트를 가하고, 용액을 염화암모늄의 용액으로 3회 세척한다. 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 36 mg의 조 생성물을 수득하고 다음 단계에서 추가의 정제없이 직접 사용한다.

수율: 100%.

MH⁺: 689.7.

단계 2: N-(4-{4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-2-피페리딘-3-일-티아졸-5-일}-피리미딘-2-일)-아세트아미드 트리플루오로아세테이트

21 mg (0.030 mmol)의 3-{5-(2-아세틸아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 1 mL의 디클로로메탄 속에 용해하고, 0.5 mL의 트리플루오로아세트산을 가한다. 용액을 1시간 동안 실온에서 교반한다. 용매를 감압하에 제거한다. 잔사를 디에틸 에테르로 3회 연마하고 진공 하에 밤새 건조시킨다. 14.5 mg의 표제 화합물을 수득한다.

수율: 80%.

MH⁺: 589.7 (유리 염기).

¹H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8.85-8.70 (m, 1H); 8.63-8.47 (m, 1H); 8.07 (d, J=5.2 Hz, 1H); 7.88-7.70 (m, 5H); 7.67-7.52 (m, 2H); 6.81 (s, 2H); 6.18 (d, J=5.0 Hz, 1H); 3.73-3.62 (m, 2H); 3.03-2.87 (m, 1H); 2.30-2.20 (m, 1H); 1.95 (s, 3H); 1.99-1.88 (m, 1H); 1.88-1.69 (m, 3H).

실시예 7: N-(4-{4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-2-모르폴린-3-일-티아졸-5-일}-피리미딘-2-일)-아세트아미드

단계 1: 3-{5-(2-아세틸아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-모르폴린-4-카복실산 3급-부틸 에스테르

화합물을 실시예 6 단계 1에 기술된 과정에 의해, 30 mg(0.046 mmol)의 3-{5-(2-아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-모르폴린-4-카복실산 3급-부틸 에스테르(실시예 1 단계 5에 기술됨) 및 5.3 μL(0.055 mmol)의 아세트산 무수물을 사용하여 수득한다. 39 mg의 조 생성물을 수득하고 다음 단계에서 추가의 정제없이 직접 사용한다.

수율: 100%.

MH⁺: 691.7.

단계 2: N-(4-{4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-2-모르폴린-3-일-티아졸-5-일}-피리미딘-2-일)-아세트아미드

32 mg(0.046 mmol)의 3-{5-(2-아세틸아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-모르폴린-4-카복실산 3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 1 mL의 디클로로메탄 속에 용해하고, 0.5 mL의 트리플루오로아세트산을 가한다. 용액을 1시간 동안 실온에서 교반한다. 용매를 감압하에 제거하고 잔사를 10 g 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물을 사용하여 직접 정제한다. 8.0 mg의 표제 화합물을 수득한다.

수율: 30%.

MH⁺: 591.7.

¹H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8.05 (d, J=5.2 Hz, 1H); 7.85-7.71 (m, 4H); 7.66-7.57 (m, 1H); 7.54 (t, J=8.0 Hz, 1H); 6.76 (s, 2H); 6.17 (d, J=5.0 Hz, 1H); 4.21-4.14 (m, 1H); 4.00-3.92 (m, 1H); 3.77-3.69 (m, 1H); 3.57-3.44 (m, 3H); 2.96-2.83 (m, 2H); 1.94 (s, 3H).

실시예 8: N-(4-{2-(3-아미노프로필)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-5-일}-피리미딘-2-일)-아세트아미드

단계 1: (3-{5-(2-아세틸아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-프로필)-카밤산 3급-부틸 에스테르

화합물을 실시예 6 단계 1에 기술된 과정으로, 30 mg(0.048 mmol)의 (3-{5-(2-아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-프로필)-카밤산 3급-부틸 에스테르(실시예 4 단계 2에 기술됨) 및 5.5 μL (0.058 mmol)의 아세트산 무수물로 수득한다. 32 mg의 조 생성물을 수득하고 다음 단계에서 추가의 정제없이 직접 사용한다.

수율: 100%.

MH⁺: 663.7.

단계 2: N-(4-{2-(3-아미노프로필)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-5-일}-피리미딘-2-일)-아세트아미드

32 mg (0.048 mmol)의 (3-{5-(2-아세틸아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-프로필)-카밤산 3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 1 mL의 디클로로메탄 속에 용해하고, 0.5 mL의 트리플루오로아세트산을 가한다. 용액을 1시간 동안 실온에서 교반한다. 용매를 감압하에 제거하고 잔사를 10 g 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올/수산화암모늄 0.5% 혼합물을 사용하여 정제한다. 11.0 mg의 표제 화합물을 수득한다.

수율: 40%.

MH⁺: 563.7.

¹H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 10.75 (s, 1H); 7.98 (d, J=5.2 Hz, 1H); 7.957.85 (br s, 1H); 7.64-7.21 (m, 5H); 6.75 (s, 2H); 5.85 (d, J=5.2 Hz, 1H); 3.16-3.08 (m, 2H); 2.99 (t, J=7.6 Hz, 2H); 1.91-1.79 (m, 2H); 1.79 (s, 3H).

실시예 9: N-(4-{4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로-페닐]-2-모르폴린-3-일-티아졸-5-일}-피리미딘-2-일)-아크릴아미드 트리플루오로아세테이트

단계 1: 3-{5-(2-아크릴로일아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-모르폴린-4-카복실산 3급-부틸 에스테르

15 mg(0.023 mmol)의 3-{5-(2-아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-모르폴린-4-카복실산 3급-부틸 에스테르(실시예 1 단계 5에 기술됨)를 1 mL의 무수 디클로로메탄 아르곤 하에 용해한 다음, 3.8 μL(0.028 mmol)의 트리에틸아민 및 2.2 μL(0.023 mmol)의 아크릴로일 클로라이드를 가한다. 용액을 1시간 동안 실온에서 교반한다. 용매를 감압 하에 제거하고, 에틸 아세테이트를 가하고, 용액을 물로 3회 및 염수로 1회 세척한다. 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 30 g의 C18 컬럼 상에서 용출제로서 물/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한다. 7 mg의 표제 화합물을 수득한다.

수율: 44%.

MH⁺: 703.8.

단계 2: N-(4-{4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로-페닐]-2-모르폴린-3-일-티아졸-5-일}-피리미딘-2-일)-아크릴아미드 트리플루오로아세테이트

7 mg(0.010 mmol)의 3-{5-(2-아크릴로일아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-모르폴린-4-카복실산 3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 3 mL의 디클로로메탄 속에 용해하고, 1 mL의 트리플루오로아세트산을 가한다. 용액을 1시간 동안 실온에서 교반한다. 용매를 감압하에 제거한다. 잔사를 디에틸 에테르로 3회 연마하고 진공 하에 밤새 건조시킨다. 2.2 mg의 표제 화합물을 담황색 고체로서 수득한다.

수율: 36%.

MH⁺: 603.7.

실시예 10: N-(4-{2-(3-아미노프로필)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-5-일}-피리미딘-2-일)-아크릴아미드 트리플루오로아세테이트

단계 1: (3-{5-(2-아크릴로일아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-프로필)-카밤산 3급-부틸 에스테르

27 mg(0.043 mmol)의 (3-{5-(2-아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-프로필)-카밤산 3급-부틸 에스테르(실시예 4 단계 2에 기술됨)를 1 mL의 무수 디클로로메탄 아르곤 하에 용해한 다음, 6.7 μL(0.048 mmol)의 트리에틸아민 및 3.9 μL(0.048 mmol)의 아크릴로일 클로라이드를 0℃에서 가한다. 용액을 0℃에서 10분 동안 및 실온에서 1시간 동안 교반한다. 용매를 감압 하에 제거하고, 에틸 아세테이트를 가하고, 용액을 물로 3회 및 염수로 1회 세척한다. 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 30 g C18 컬럼 상에서 용출제로서 물/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한다. 19 mg의 표제 화합물을 수득한다.

수율: 66%.

MH⁺: 675.9.

단계 2: N-(4-{2-(3-아미노프로필)-4-[3-(2,5-디플루오로-벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-5-일}-피리미딘-2-일)-아크릴아미드 트리플루오로아세테이트

12 mg(0.018 mmol)의 (3-{5-(2-아크릴로일아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-프로필)-카밤산 3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 3 mL의 디클로로메탄 속에 용해하고, 1 mL의 트리플루오로아세트산을 가한다. 용액을 1시간 동안 실온에서 교반한다. 용매를 감압하에 제거한다. 잔사를 디에틸 에테르로 3회 연마하고 감압하에 밤새 건조시킨다. 8.3 mg의 표제 화합물을 담황색 고체로서 수득한다.

수율: 83%.

MH⁺: 575.8.

실시예 11: 3-{5-(2-아크릴로일아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로-벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르

30 mg(0.046 mmol)의 3-{5-(2-아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(실시예 3 단계 2에 기술됨)를 1 mL의 무수 디클로로메탄 속에 아르곤 하에 용해한 다음, 7.7 μL(0.055 mmol)의 트리에틸아민 및 7.5 μL(0.093 mmol)의 아크릴로일 클로라이드를 가한다. 용액을 실온에서 1시간 동안 교반한다. 용매를 감압 하에 제거하고, 에틸 아세테이트를 가하고, 용액을 물로 3회 및 염수로 1회 세척한다. 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 30 g C18 컬럼 상에서 용출제로서 물/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한다. 5 mg의 표제 화합물을 수득한다.

수율: 13%.

MH⁺: 701.8.

실시예 12: 부탄-2-설폰산{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-피페리딘-4-일-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-아미드

단계 1: 3-(부탄-2-설포닐아미노)-2-플루오로벤조산 메틸 에스테르

15 mL의 무수 피리딘 중 1.49 g(8.81 mmol)의 3-아미노-2-플루오로벤조산 메틸 에스테르(실시예 1 단계 1에 기술됨)의 용액에, 아르곤 하에 1.65 g mL(10.6 mmol)의 부탄-2-설포닐 클로라이드를 0℃에서 가한다. 혼합물을 0℃에서 20분 동안에 이어서 실온에서 밤새 교반한다. 혼합물을 감압하에 농축시키고, 에틸 아세테이트 속에 용해하고, 중탄산나트륨의 포화 용액으로 3회 및 염수로 1회 세척한다. 이후에, 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고 여과한다. 여액을 감압하에 농축시키고 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 30 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한 다음, 다른 섬광 크로마토그래피로 120 g C18 컬럼 상에서 용출제로서 물/아세토니트릴을 사용하여 정제한다. 750 mg의 표제 화합물을 수득한다.

수율: 30%.

MH⁺: 290.3.

단계 2: 부탄-2-설폰산{3-[2-(2-클로로피리미딘-4-일)-아세틸]-2-플루오로페닐}-아미드

7 mL의 무수 테트라하이드로푸란 중 750 mg(2.59 mmol)의 3-(부탄-2-설포닐아미노)-2-플루오로벤조산 메틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)의 용액에 -15℃에서 아르곤 하에, 9 mL(9 mmol)의 리튬 비스(트리메틸실릴)아미드의 용액(테트라하이드로푸란 중 1 M)을 가한다. 혼합물을 -15℃에서 20분 동안 교반한 다음 2 mL의 무수 테트라하이드로푸란 중 400 mg(3.11 mmol)의 2-클로로-4-메틸피리미딘의 용액을 욕 온도를 -20 내지 -15℃ 사이에서 유지하면서 서서히 가한다. 반응물을 -15℃에서 30분 동안 교반한 다음, 5 mL의 염화암모늄의 포화 용액에 이어서, 100 mL의 에틸 아세테이트 및 100 mL의 물을 -15℃에서 서서히 가한다. 용액을 분리하고, 유기 층을 물로 2회 세척한다. 합한 수성 층을 염산 1 N로 pH 6-7로 산성화시키고 에틸 아세테이트로 3회 추출한다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고 여과한다. 여액을 감압하에 농축시키고 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 30 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한다. 882 mg의 표제 화합물을 암 오렌지색 오일로서 수득한다.

수율: 88%.

MH⁺: 386.3; 388.3.

단계 3: 4-[4-[3-(부탄-2-설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-5-(2-클로로피리미딘4-일)-티아졸-2-일]-피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르

100 mg(0.26 mmol)의 부탄-2-설폰산{3-[2-(2-클로로피리미딘-4-일)-아세틸]-2-플루오로페닐}-아미드(앞서의 단계에서 기술됨)를 2 mL의 무수 N,N'-디메틸아세트아미드에 실온에서 아르곤 하에 용해한 다음, 46 mg(0.26 mmol)의 N-브로모석신이미드를 가하고 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반한다. 63 mg(0.26 mmol)의 4-티오카바모일피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르를 아르곤 하에 가하고 반응 혼합물을 80℃에서 30분 동안 교반한다. 용액을 실온으로 냉각시키고, 에틸 아세테이트로 희석시킨다. 용액을 물로 3회 및 염수로 1회 세척하고, 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 10 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 에틸 아세테이트/헥산 혼합물을 사용하여 정제한다. 80 mg의 표제 화합물을 수득한다.

수율: 50%.

MH⁺: 610.5; 612.5.

단계 4: 4-{5-(2-아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(부탄-2-설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르

80 mg(0.13 mmol)의 4-[4-[3-(부탄-2-설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-5-(2-클로로피리미딘-4-일)-티아졸-2-일]-피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 3 mL의 수산화암모늄 28%의 용액 속에 용해하고 용액을 90℃에서 극초단파 조사 하에 1시간 동안 가열한다. 혼합물을 50 mL의 염화암모늄의 포화된 용액 속에 희석시키고 에틸 아세테이트로 3회 추출한다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 10 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한다. 63 mg의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득한다.

수율: 81%.

MH⁺: 591.4.

단계 5: 부탄-2-설폰산{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-피페리딘-4-일-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-아미드

63 mg(0.11 mmol)의 4-{5-(2-아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(부탄-2-설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 1 mL의 디클로로메탄 속에 용해하고 0.5 mL의 트리플루오로아세트산을 가한다. 용액을 1시간 동안 실온에서 교반한다. 이후에, 용매를 제거하고, 에틸 아세테이트를 가하고, the solution is washed 3 times 중탄산나트륨의 포화 용액으로. 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 10 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한 다음, 다른 섬광 크로마토그래피로 30 g의 C18 컬럼 상에서 용출제로서 물/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한다. 13 mg의 표제 화합물을 수득한다.

수율: 26%.

MH⁺: 491.4.

¹H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8.05 (d, J=5.2 Hz, 1H); 7.59-7.49 (m, 1H); 7.30-7.20 (m, 2H); 6.75 (s, 2H); 6.09 (d, J=5.2 Hz, 1H); 3.20-3.12 (m, 1H); 3.12-3.02 (m, 2H); 3.74-3.63 (m, 2H); 2.10-1.99 (m, 2H); 1.97-1.84 (m, 1H); 1.73-1.59 (m, 2H); 1.49-1.32 (m, 1H); 1.20 (d, J=6.8 Hz, 3H); 0.88 (t, J=7.4 Hz, 3H).

실시예 13: N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-모르폴린-3-일-티아졸-4-일]-5-클로로-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드

단계 1: 3-아미노-5-클로로-2-플루오로벤조산 메틸 에스테르

500 mg(2.64 mmol)의 3-아미노-5-클로로-2-플루오로벤조산을 5 mL의 무수 메탄올 속에 아르곤 하에 용해한다. 202 μL(2.77 mmol)의 티오닐 클로라이드를 0℃에서 서서히 가한 다음, 반응물을 3시간 동안 환류시킨다. 용액을 실온으로 냉각한다. 용매를 감압하에 제거한다. 반응 혼합물을 중탄산나트륨의 포화 용액 덕분으로 퀀칭시키고, 에틸 아세테이트로 3회 추출한다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고 여과하였다. 여액을 감압하에 농축시키고 조 생성물을 다음 단계에서 추가의 정제없이 직접 사용한다. 432 mg의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득한다.

수율: 80%.

단계 2: 5-클로로-3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로벤조산 메틸 에스테르

5 mL의 무수 피리딘 중 432 mg(2.12 mmol)의 3-아미노-5-클로로-2-플루오로벤조산 메틸 에스테르 (앞서의 단계에서 기술됨)의 용액에 아르곤 하에, 342 μL (2.55 mmol)의 2,5-디플루오로벤젠설포닐 클로라이드를 0℃에서 가한다. 혼합물을 0℃에서 20분 동안에 이어서 실온에서 밤새 교반한다. 혼합물을 감압하에 농축시키고 디클로로메탄 속에 용해하고, 염산 0.5 N으로 4회 및 염수로 1회 세척하고, 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고 여과한다. 여액을 감압하에 농축시키고 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 30 g 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한다. 438 mg의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득한다.

수율: 55%.

MH⁺: 380.4; 382.5.

단계 3: N-{5-클로로-3-[2-(2-클로로피리미딘-4-일)-아세틸]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드

4 mL의 무수 테트라하이드로푸란 중 438 mg(1.16 mmol)의 5-클로로-3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로벤조산 메틸 에스테르 (앞서의 단계에서 기술됨)의 용액에 -15℃에서 아르곤 하에 4 mL(4 mmol)의 리튬 비스(트리메틸실릴)아미드(테트라하이드로푸란 중 1 M)의 용액을 가한다. 반응물을 -15℃에서 20분 동안 교반한 다음, 1 mL의 무수 테트라하이드로푸란 중 178 mg (1.38 mmol)의 2-클로로-4메틸피리미딘을 욕 온도를 -20℃ 내지 -15℃로 유지시키면서 서서히 가한다. 반응물을 당해 온도에서 다른 30분 동안 교반하고, 1.5 mL의 염화암모늄의 포화된 용액을 15℃에 이어서, 10 mL의 에틸 아세테이트 및 10 mL의 물을 서서히 가한다. 용액을 분리하고, 유기 층을 물로 3회 세척한다. 합한 수성 층을 염산 1 N을 사용하여 pH 6-7로 산성화하고 에틸 아세테이트로 3회 추출한다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고 여과한다. 여액을 감압하에 농축시키고 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 30 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한다. 415 mg의 표제 화합물을 오렌지색 고체로서 수득한다.

수율: 76%.

MH⁺: 476.4; 478.4; 480.5.

단계 4: 3-[4-[5-클로로-3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-5-(2-클로로피리미딘-4-일)-티아졸-2-일]-모르폴린-4-카복실산 3급-부틸 에스테르

200 mg(0.42 mmol)의 N-{5-클로로-3-[2-(2-클로로피리미딘-4-일)-아세틸]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드(앞서의 단계에서 기술됨)를 2 mL의 무수 N,N'-디메틸아세트아미드 실온에서 아르곤 하에 용해한 다음, 75 mg(0.42 mmol)의 N-브로모석신이미드를 가하고 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반한다. 103 mg(0.42 mmol)의 3-티오카바모일모르폴린-4-카복실산 3급-부틸 에스테르를 아르곤 하에 가하고 반응 혼합물을 80℃에서 30분동안 가열한다. 용액을 실온으로 냉각시키고, 에틸 아세테이트로 희석시킨 다음, 물로 2회 및 염수로 1회 세척하고, 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 10 g 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 에틸 아세테이트/헥산 혼합물을 사용하여 정제한다. 140 mg의 표제 화합물을 수득한다.

수율: 47%.

MH⁺: 702.8; 704.8; 706.8.

단계 5: 3-{5-(2-아미노피리미딘-4-일)-4-[5-클로로-3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-모르폴린-4-카복실산 3급-부틸 에스테르

140 mg (0.20 mmol)의 3-[4-[5-클로로-3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-5-(2-클로로피리미딘-4-일)-티아졸-2-일]-모르폴린-4-카복실산 3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 2 mL의 수산화암모늄 28% 용액에 용해하고 용액을 90℃에서 극초단파 조사 하에 1시간 동안 가열한다. 혼합물을 50 mL의 염화암모늄의 포화 용액 속에 희석시키고 에틸 아세테이트로 3회 추출한다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 다음 단계에서 추가의 정제없이 직접 사용한다(92 mg의 갈색 고체).

수율: 68%.

MH⁺: 683.8; 685.8.

단계 6: N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-모르폴린-3-일-티아졸-4-일]-5-클로로-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드

92 mg(0.13 mmol)의 3-{5-(2-아미노피리미딘-4-일)-4-[5-클로로-3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-모르폴린-4-카복실산 3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 1 mL의 디클로로메탄 속에 용해하고 0.5 mL의 트리플루오로아세트산을 가한다. 용액을 1시간 동안 실온에서 교반한다. 이후에, 용매를 제거하고, 에틸 아세테이트를 가하고, 용액을 중탄산나트륨의 포화 용액으로 3회 세척한다. 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 10 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한 다음 다른 섬광 크로마토그래피로 30 g의 C18 컬럼 상에서 용출제로서 물/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한다. 33 mg의 표제 화합물을 연 오렌지색 고체로서 수득한다.

수율: 44%.

MH⁺: 583.7; 585.7.

¹H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8.07 (d, J=5.2 Hz, 1H); 7.55-7.34 (m, 4H); 7.18-7.04 (m, 1H); 6.77 (s, 2H); 6.07 (d, J=5.1 Hz, 1H); 4.41-4.29 (m, 1H); 4.05-3.95 (m, 1H); 3.82-3.73 (m, 1H); 3.60-3.47 (m, 2H); 3.04-2.89 (m, 2H).

실시예 14: N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-3급-부틸-티아졸-4-일]-5-클로로-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드

단계 1: N-{3-[2-3급-부틸-5-(2-클로로피리미딘-4-일)-티아졸-4-일]-5-클로로-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드

100 mg(0.21 mmol)의 N-{5-클로로-3-[2-(2-클로로피리미딘-4-일)-아세틸]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드(실시예 13 단계 3에 기술됨)를 1 mL의 무수 N,N'-디메틸아세트아미드에 실온에서 아르곤 하에 용해한 다음, 38 mg(0.21 mmol)의 N-브로모석신이미드를 가하고 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반한다. 25 mg(0.21 mmol)의 2,2-디메틸티오프로피온아미드를 아르곤 하에 가하고 반응 혼합물을 80℃에서 30분 동안 가열한다. 용액을 실온으로 냉각하고, 에틸 아세테이트로 희석시킨다. 용액을 물로 2회 염수로 1회 세척하고, 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 10 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 에틸 아세테이트/헥산 혼합물을 사용하여 정제한다. 70 mg의 표제 화합물을 수득한다.

수율: 61%.

MH⁺: 573.6; 575.6; 577.6.

단계 2: N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-3급-부틸-티아졸-4-일]-5-클로로-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드

70 mg(0.12 mmol)의 N-{3-[2-3급-부틸-5-(2-클로로피리미딘-4-일)-티아졸-4-일]-5-클로로-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드(앞서의 단계에서 기술됨)를 2 mL의 수산화암모늄 28% 용액에 용해하고 용액을 90℃에서 극초단파 조사 하에 1시간 동안 가열한다. 혼합물을 50 mL의 염화암모늄 포화 용액 속에서 희석시키고 에틸 아세테이트로 3회 추출한다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 10 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한 후, 다른 섬광 크로마토그래피로 30 g의 C18 컬럼 상에서 용출제로서 물/아세토니트릴 혼합물을 사용하여 정제한다. 18 mg의 표제 화합물을 수득한다.

수율: 26%.

MH⁺: 554.7; 556.7.

¹H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 11.01 (br s, 1H); 8.04 (d, J=5.2 Hz, 1H); 7.63-7.37 (m, 5H); 6.76 (s, 2H); 5.99 (d, J=5.1 Hz, 1H); 1.40 (s, 9H).

실시예 15: N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-아제티딘-2-일-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드

단계 1: 2-{5-(2-클로로피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-아제티딘e-1-카복실산 3급-부틸 에스테르

200 mg(0.46 mmol)의 N-{3-[2-(2-클로로피리미딘-4-일)-아세틸]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드(실시예 1 단계 3에서 기술됨)를 2 mL의 무수 N,N'-디메틸아세트아미드 속에 실온에서 아르곤 하에 용해한 다음, 80 mg (0.46 mmol)의 N-브로모석신이미드를 가하고 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반한다. 98 mg(0.46 mmol)의 2-티오카바모일아제티딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르를 아르곤 하에 가하고 반응 혼합물을 80℃에서 30분 동안 가열한다. 용액을 실온으로 냉각시키고, 에틸 아세테이트로 희석시킨다. 유기 층을 물로 2회 염수로 1회 세척하고, 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 10 g 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 에틸 아세테이트/헥산 혼합물을 사용하여 정제한다. 157 mg의 표제 화합물을 수득한다.

수율: 55%.

MH⁺: 638.8; 640.9.

단계 2: 2-{5-(2-아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-아제티딘e-1-카복실산 3급-부틸 에스테르

157 mg (0.24 mmol)의 2-{5-(2-클로로피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-아제티딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 2 mL의 수산화암모늄 28% 용액에 용해하고 용액을 90℃에서 극초단파 조사 하에 1시간 동안 가열한다. 혼합물을 50 mL의 염화암모늄의 포화 용액 속에 희석시키고 에틸 아세테이트로 3회 추출한다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 다음 단계에서 추가의 정제없이 직접 사용한다(152 mg).

MH⁺: 619.9.

단계 3: N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-아제티딘-2-일-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드

152 mg(0.24 mmol)의 2-{5-(2-아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-아제티딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 1 mL의 디클로로메탄 속에 용해하고 0.5 mL의 트리플루오로아세트산을 가한다. 용액을 1시간 동안 실온에서 교반한다. 이후에, 용매를 제거하고, 에틸 아세테이트를 가하고, 용액을 중탄산나트륨의 포화 용액으로 3회 세척한다. 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 10 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한 다음, 다른 섬광 크로마토그래피로 30 g의 C18 컬럼 상에서 용출제로서 물/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한다. 24 mg의 표제 화합물을 연황색 고체로서 수득한다.

수율: 2개 단계에 걸쳐 19%.

MH⁺: 519.7.

¹H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): 8.00 (d, J=5.2 Hz, 1H); 7.52-7.30 (m, 4H); 7.10 (t, J=7.8 Hz, 1H); 7.06-6.97 (m, 1H); 6.72 (s, 2H); 5.98 (d, J=5.1 Hz, 1H); 5.20 (t, J=8.0 Hz, 1H); 3.76 (q, J=8.0 Hz, 1H); 3.41-3.31 (m, 1H); 2.71-2.61 (m, 1H); 2.46-2.35 (m, 1H).

실시예 16: N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-피롤리딘-2-일-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드

단계 1: 2-{5-(2-클로로피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-피롤리딘e-1-카복실산 3급-부틸 에스테르

191 mg(0.43 mmol)의 N-{3-[2-(2-클로로피리미딘-4-일)-아세틸]-2-플루오로-페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드(실시예 1 단계 3에 기술됨)를 2 mL의 무수 N,N'-디메틸아세트아미드에 실온에서 아르곤 하에 용해한 다음, 77 mg(0.43 mmol)의 N-브로모석신이미드를 가하고 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반한다. 100 mg(0.43 mmol)의 2-티오카바모일피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르를 아르곤 하에 가하고 반응 혼합물을 80℃에서 30분 동안 가열한다. 용액을 실온으로 냉각시키고, 에틸 아세테이트로 희석시킨다. 유기 층을 물로 2회 염수로 1회 세척하고, 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 10 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 에틸 아세테이트/헥산 혼합물을 사용하여 정제한다. 205 mg의 표제 화합물을 수득한다.

수율: 72%.

MH⁺: 652.9; 654.9.

단계 2: 2-{5-(2-아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르

205 mg(0.31 mmol)의 2-{5-(2-클로로피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 2 mL의 수산화암모늄 28%의 용액에 용해하고 용액을 90℃에서 극초단파 조사 하에 1시간 동안 가열한다. 혼합물을 50 mL의 에염화암모늄의 포화 용액 속에 용해하고 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 다음 단계에서 추가의 정제없이 사용한다(198 mg).

MH⁺: 633.9.

단계 3: N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-피롤리딘-2-일-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드

198 mg(0.31 mmol)의 2-{5-(2-아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-피롤리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)을 1 mL의 디클로로메탄 속에 용해하고 0.5 mL의 트리플루오로아세트산을 가한다. 용액을 1시간 동안 실온에서 교반한다. 이후에, 용매를 제거하고, 에틸 아세테이트를 가하고, 용액을 중탄산나트륨의 포화 용액으로 3회 세척한다. 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 10 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한 후, 다른 섬광 크로마토그래피로 30 g의 C18 컬럼 상에서 용출제로서 물/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한다. 30 mg의 표제 화합물을 담황색 고체로서 수득한다.

수율: 2개의 단계에 걸쳐 18%.

MH⁺: 533.7.

¹H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 7.98 (d, J=5.2 Hz, 1H); 7.52-7.31 (m, 4H); 7.19-7.05 (m, 2H); 6.71 (s, 2H); 5.93 (d, J=5.1 Hz, 1H); 4.62-4.55 (m, 1H); 3.10-2.95 (m, 2H); 2.29-2.17 (m, 1H); 1.96-1.84 (m, 1H); 1.84-1.74 (m, 2H).

실시예 17: N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-피페리딘-2-일-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드

단계 1: 2-{5-(2-클로로피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로-벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르

180 mg(0.41 mmol)의 N-{3-[2-(2-클로로피리미딘-4-일)-아세틸]-2-플루오로-페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드(실시예 1 단계 3에 기술됨)을 2 mL의 무수 N,N'-디메틸아세트아미드 실온에서 아르곤 하에 용해한 다음, 72 mg(0.41 mmol)의 N-브로모석신이미드를 가하고 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반한다. 100 mg(0.41 mmol)의 2-티오카바모일피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르를 아르곤 하에 가하고 반응 혼합물을 80℃에서 30분 동안 가열한다. 용액을 실온으로 냉각시키고, 에틸 아세테이트로 희석시킨다. 용액을 물로 2회, 염수로 1회 세척하고, 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 10 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 에틸 아세테이트/헥산 혼합물을 사용하여 정제한다. 169 mg의 표제 화합물을 수득한다.

수율: 62%.

MH⁺: 666.9; 668.9.

단계 2: 2-{5-(2-아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로-벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-피페리딘e-1-카복실산 3급-부틸 에스테르

169 mg(0.25 mmol)의 2-{5-(2-클로로피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로-벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 2 mL의 수산화암모늄 28% 용액에 용해하고 용액을 90℃에서 극초단파 조사 하에 1시간 동안 가열한다. 혼합물을 50 mL의 염화암모늄의 포화 용액 속에 용해하고 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 다음 단계에서 추가의 정제없이 직접 사용한다(163 mg).

MH⁺: 648.0.

단계 3: N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-피페리딘-2-일-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드

163 mg(0.25 mmol)의 2-{5-(2-아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로-벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 1 mL의 디클로로메탄 속에 용해하고 0.5 mL의 트리플루오로아세트산을 가한다. 용액을 1시간 동안 실온에서 교반한다. 이후에, 용매를 제거하고, 에틸 아세테이트를 가하고, 용액을 중탄산나트륨의 포화 용액으로 3회 세척한다. 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 10 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한 후, 다른 섬광 크로마토그래피로 30 g의 C18 컬럼 상에서 용출제로서 물/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한다. 62 mg의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득한다.

수율: 2개 단계에 걸쳐 45%.

MH⁺: 547.8.

¹H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8.02 (d, J=5.2 Hz, 1H); 7.51-7.31 (m, 4H); 7.09 (t, J=7.8 Hz, 1H); 7.03-6.93 (m, 1H); 6.75 (s, 2H); 6.00 (d, J=5.1 Hz, 1H); 4.35-4.24 (m, 1H); 3.19-3.09 (m, 1H); 2.88-2.77 (m, 1H); 2.16-2.06 (m, 1H); 1.86-1.76 (m, 1H); 1.70-1.43 (m, 4H).

실시예 18: N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-피페라진-2-일-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드

단계 1: 2-카바모일피페라진-1,4-디카복실산 디-3급-부틸 에스테르

229 mg(1.00 mmol)의 2-카바모일피페라진-1-카복실산 3급-부틸 에스테르를 3 mL의 무수 테트라하이드로푸란 속에 아르곤 하에 용해한 다음, 229 mg(1.05 mmol)의 디-3급-부틸 디카보네이트를 가하고 혼합물을 1시간 동안 교반한다. 이후에, 용액을 에틸 아세테이트로 희석시킨다. 유기 층을 중탄산나트륨의 포화 용액으로 및 염수로 1회 세척한다. 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 10 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한다. 329 mg의 표제 화합물을 백색 고체 발포체로서 수득한다.

수율: 정량적.

MH⁺: 330.6.

단계 2: 2-티오카바모일피페라진-1,4-디카복실산 디-3급-부틸 에스테르

360 mg (1.09 mmol)의 2-카바모일피페라진-1,4-디카복실산 디-3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 4 mL의 테트라하이드로푸란 속에 용해한 다음, 380 mg(0.94 mmol)의 라웨손 시약을 가하고 혼합물을 60℃에서 4시간 동안 교반한다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 용매를 감압하에 제거한다. 잔사를 중탄산나트륨의 포화 용액으로 퀀칭시키고, 에틸 아세테이트로 추출한다. 합산 유기물을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 10 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한다. 261 mg의 표제 화합물을 백색 고체로서 수득한다.

수율: 70%.

MH⁺: 346.7.

단계 3: 2-{5-(2-클로로피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-피페라진-1,4-디카복실산 디-3급-부틸 에스테르

191 mg(0.43 mmol)의 N-{3-[2-(2-클로로피리미딘-4-일)-아세틸]-2-플루오로-페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드(실시예 1 단계 3에서 기술됨)을 2 mL의 무수 N,N'-디메틸아세트아미드 소에 실온에서 아르곤 하에 용해한 다음, 78 mg(0.43 mmol)의 N-브로모석신이미드를 가하고 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반한다. 150 mg(0.43 mmol)의 2-티오카바모일피페라진-1,4-디카복실산 디-3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 아르곤 하에 가하고 반응 혼합물을 80℃에서 30분 동안 가열한다. 용액을 실온으로 냉각하고, 에틸 아세테이트로 희석시킨다. 용액을 물로 2회, 염수로 1회 세척하고, 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 10 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 에틸 아세테이트/헥산 혼합물을 사용하여 정제한다. 132 mg의 표제 화합물을 백색 고체로서 수득한다.

수율: 40%.

MH⁺: 768.0; 770.0.

단계 4: 2-{5-(2-아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-피페라진-1,4-디카복실산 디-3급-부틸 에스테르

132 mg(0.17 mmol)의 2-{5-(2-아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-피페라진-1,4-디카복실산 디-3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 2 mL의 수산화암모늄 28%의 용액에 용해하고 용액을 90℃에서 극초단파 조사 하에 1시간 동안 가열한다. 혼합물을 50 mL의 염화암모늄의 포화 용액 속에 용해하고 에틸 아세테이트로 3회 추출한다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 다음 단계에서 추가의 정제없이 직접 사용한다(122 mg).

MH⁺: 749.2.

단계 5: N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-피페라진-2-일-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드

122 mg(0.16 mmol)의 2-{5-(2-클로로피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-피페라진-1,4-디카복실산 디-3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 1 mL의 디클로로메탄 속에 용해하고 0.5 mL의 트리플루오로아세트산을 가한다. 용액을 1시간 동안 실온에서 교반한다. 이후에 용매를 제거하고, 에틸 아세테이트를 가하고, 용액을 중탄산나트륨의 포화 용액으로 3회 세척한다. 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 10 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한 다음, 다른 섬광 크로마토그래피로 30 g의 C18 컬럼 상에서 용출제로서 물/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한다. 14 mg의 표제 화합물을 담황색 고체로서 수득한다.

수율: 2개 단계에 걸쳐 16%.

MH⁺: 548.6.

¹H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8.00 (d, J=5.2 Hz, 1H); 7.51-7.42 (m, 1H); 7.34-7.20 (m, 3H); 6.92 (t, J=7.8 Hz, 1H); 6.71 (s, 2H); 6.69-6.62 (m, 1H); 6.05 (d, J=5.1 Hz, 1H); 4.27-4.18 (m, 1H); 3.47-3.36 (m, 1H); 3.12-3.00 (m, 2H); 2.99-2.77 (m, 3H).

실시예 19: N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-(6,6-디메틸모르폴린-3-일)티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드

단계 1: 5-카바모일-2,2-디메틸모르폴린-4-카복실산 3급-부틸 에스테르

150 mg(0.580 mmol)의 6,6-디메틸모르폴린-3,4-디카복실산 4-3급-부틸 에스테르를 3 mL의 무수 테트라하이드로푸란 속에 아르곤 하에 용해한 다음, 200 μL(1.16 mmol)의 N,N'-디이소프로필에틸아민 및 220 mg(0.580 mmol)의 HATU를 가하고 혼합물을 15분 동안 실온에서 교반한다. 2.9 mL(1.16 mmol)의 디옥산 중 암모니아 0.4 M를 가하고 혼합물을 3시간 동안 실온에서 교반한다. 이후에, 용액을 에틸 아세테이트로 희석시키고 중탄산나트륨의 포화 용액에 이어서, NH₄Cl의 포화된 용액 및 최종적으로 염수로 세척한다. 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 10 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한다. 182 mg의 표제 화합물을 무색 오일로서 수득한다.

수율: 정량적.

MH⁺: 259.5.

단계 2: 2,2-디메틸-5-티오카바모일모르폴린-4-카복실산 3급-부틸 에스테르

172 mg(0.666 mmol)의 5-카바모일-2,2-디메틸모르폴린-4-카복실산 3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 3 mL의 무수 테트라하이드로푸란 속에 아르곤 하에 용해한 다음, 232 mg(0.573 mmol)의 라웨손 시약을 가하고 혼합물을 60℃에서 2시간 30분 동안 교반한다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 용매를 감압하에 제거한다. 잔사를 중탄산나트륨의 포화 용액으로 퀀칭시키고, 에틸 아세테이트로 추출한다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 2개의 연속적인 섬광 크로마토그래피로 10 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서, a/ 디클로로메탄/메탄올 혼합물, 용출제로서 b/ 에틸 아세테이트/헥산 혼합물을 사용하여 정제한다. 70 mg의 표제 화합물을 무색 겔로서 수득한다.

수율: 38%.

MH⁺: 275.5.

단계 3: 5-{5-(2-클로로피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐-아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-2,2-디메틸모르폴린-4-카복실산 3급-부틸 에스테르

110 mg(0.249 mmol)의 N-{3-[2-(2-클로로피리미딘-4-일)-아세틸]-2-플루오로-페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드(실시예 1, 단계 3에 기술됨)을 2 mL의 무수 N,N'-디메틸아세트아미드 실온에서 아르곤 하에 용해한 다음, 44 mg(0.247 mmol)의 N-브로모석신이미드를 가하고 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반한다. 68 mg(0.248 mmol)의 2,2-디메틸-5-티오카바모일-모르폴린-4-카복실산 3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 아르곤 하에 가하고 반응 혼합물을 80℃에서 30분 동안 가열한다. 용액을 실온으로 냉각시키고, 에틸 아세테이트로 희석시킨다. 용액을 물/염수(1/1)의 혼합물로 5회 세척하고, 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 10 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 에틸 아세테이트/헥산 혼합물을 사용하여 정제한다. 98 mg의 표제 화합물을 회백색 고체로서 수득한다.

수율: 26%.

MH⁺: 696.6; 698.6.

단계 4: 5-{5-(2-아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐-아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-2,2-디메틸모르폴린-4-카복실산 3급-부틸 에스테르

96 mg(0.138 mmol)의 5-{5-(2-클로로피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로-벤젠설포닐아미노)-2-플루오로-페닐]-티아졸-2-일}-2,2-디메틸모르폴린-4-카복실산 3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 1.5 mL의 수산화암모늄 28% 용액에 용해한 다음 90℃에서 극초단파 조사 하에 1시간 동안 가열한다. 혼합물을 물/염수(1/1)의 혼합물 속에 희석시키고 에틸 아세테이트로 3회 추출한다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 다음 단계에서 추가의 정제없이 직접 사용한다(58 mg의 표제 화합물, 오렌지색 고체).

MH⁺: 677.7.

단계 5: N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-(6,6-디메틸모르폴린-3-일)-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드

58 mg(0.160 mmol)의 N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-(6,6-디메틸-모르폴린-3-일)-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드(앞서의 단계에서 기술됨)를 1 mL의 디클로로메탄 속에 용해하고 0.5 mL의 트리플루오로아세트산을 가한다. 용액을 1시간 동안 실온에서 교반한다. 이후에, 용매를 제거하고 잔사를 중탄산나트륨의 포화 용액과 혼합한다. 당해 수성 혼합물을 에틸 아세테이트를 사용하여 3회 추출한다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 10 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한 다음, 다른 섬광 크로마토그래피로 30 g의 C18 컬럼 상에서 용출제로서 물/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한다. 최종적으로, 제3의 컬럼(10 g의 실리카, 에틸 아세테이트/헥산)을 수행한다. 10 mg의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다.

수율: 2개의 단계에 걸쳐 13%.

MH⁺: 577.6.

¹H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 10.74 (br s, 1H); 7.99 (d, J=5.1 Hz, 1H); 7.67-7.00 (m, 6H); 6.74 (s, 2H); 5.88 (s, 1H); 4.06-3.98 (m, 1H); 3.80-3.73 (m, 1H); 3.66-3.57 (m, 1H); 2.74 (d, J=12.2 Hz, 1H); 2.69 (d, 1H); 1.25 (s, 3H); 1.14 (s, 3H).

실시예 20: N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-(4-사이클로프로필피페라진-2-일)-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드

단계 1: 4-사이클로프로필피페라진-1,2-디카복실산 1-3급-부틸 에스테르 2-메틸 에스테르

500 mg(2.05 mmol)의 피페라진-1,2-디카복실산 1-3급-부틸 에스테르 2-메틸 에스테르를 35 mL의 무수 메탄올 속에 아르곤 하에 용해한다. 617 μL(3.07 mmol)의 (1-에톡시사이클로프로폭시)-트리메틸실란, 351 μL(6.14 mmol)의 아세트산 및 206 mg(3.27 mmol)의 나트륨 시아노보로하이드라이드를 가하고 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반한다. 용매를 감압하에 제거하고 잔사를 섬광 크로마토그래피로 10 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한다. 남아있는 미량의 아세트산을 정제된 화합물을 중탄산나트륨의 포화 용액 속에 용해하여 제거하고 이를 에틸 아세테이트로 3회 추출한다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 569 mg의 표제 화합물을 무색 겔로서 수득한다.

수율: 98%.

MH⁺: 285.6.

단계 2: 4-사이클로프로필피페라진e-1,2-디카복실산 1-3급-부틸 에스테르

569 mg(2.00 mmol)의 4-사이클로프로필피페라진-1,2-디카복실산 1-3급-부틸 에스테르 2-메틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 12 mL의 메탄올/물(1/1) 혼합물 속에 용해한다. 105 mg(4.4 mmol)의 수산화리튬을 가하고 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반한다. 혼합물을 감압하에 농축시키고 물로 희석시키고 디클로로메탄으로 3회 추출한다. 수성 층을 HCl 2 N에 이어서, 포화된 염화나트륨을 사용하여 pH 2-3로 산성화한 다음, 에틸 아세테이트로 18회 추출한다. 조 생성물을 다음 단계에서 추가의 정제없이 직접 사용한다(492 mg의 표제 화합물, 무색 겔).

수율: 91%.

MH⁺: 271.5.

단계 3: 2-카바모일-4-사이클로프로필피페라진-1-카복실산 3급-부틸 에스테르

492 mg(1.82 mmol)의 4-사이클로프로필피페라진-1,2-디카복실산 1-3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 9 mL의 무수 테트라하이드로푸란 속에 아르곤 하에 용해한 다음, 629 μL(3.64 mmol)의 N,N'-디이소프로필에틸아민 및 692 mg(1.82 mmol)의 HATU를 가하고 혼합물을 20분 동안 실온에서 교반한다. 디옥산 중 9.1 mL(3.64 mmol)의 암모니아 0.4 M 용액을 가하고 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반한다. 이후에, 용액을 중탄산나트륨의 포화 용액으로 희석시키고 에틸 아세테이트를 사용하여 3회 추출한다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 30 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한다. 532 mg의 표제 화합물을 무색 겔로서 수득한다.

수율: 정량적.

MH⁺: 270.5.

단계 4: 4-사이클로프로필-2-티오카바모일피페라진-1-카복실산 3급-부틸 에스테르

532 mg(1.98 mmol)의 2-카바모일-4-사이클로프로필피페라진-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 7 mL의 무수 테트라하이드로푸란 속에 아르곤 하에 용해한 다음, 687 mg(1.70 mmol)의 라웨손 시약을 가하고 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반한다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 중탄산나트륨의 포화 용액으로 퀀칭시키고, 에틸 아세테이트로 3회 추출한다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 30 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한다. 127 mg의 표제 화합물을 황색 오일로서 수득한다.

수율: 24%.

MH⁺: 286.5.

단계 5: 2-{5-(2-클로로피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-4-사이클로프로필피페라진-1-카복실산 3급-부틸 에스테르

97 mg(0.445 mmol)의 N-{3-[2-(2-클로로피리미딘-4-일)-아세틸]-2-플루오로-페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드(실시예 1, 단계 3에 용해됨)를 1 mL의 무수 N,N'-디메틸아세트아미드 실온에서 아르곤 하에 용해한 다음, 79 mg(0.445 mmol)의 N-브로모석신이미드를 가하고 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반한다. 127 mg(0.445 mmol)의 4-사이클로프로필-2-티오카바모일피페라진-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 아르곤 하에 가하고 반응 혼합물을 80℃에서 30분 동안 가열한다. 용액을 실온으로 냉각시키고, 에틸 아세테이트로 희석시킨다. 용액을 물/염수(1/1)의 혼합물로 5회 세척하고, 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 10 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 에틸 아세테이트/헥산 혼합물을 사용하여 정제한다. 158 mg의 표제 화합물을 황색 겔로서 수득한다.

수율: 50%.

MH⁺: 707.7; 709.7.

단계 6: 2-{5-(2-아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐-아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-4-사이클로프로필피페라진-1-카복실산 3급-부틸 에스테르

58 mg(0.223 mmol)의 2-{5-(2-클로로피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로-벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-4-사이클로프로필피페라진-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 5 mL의 수산화암모늄 28% 용액에 용해하고 용액을 90℃에서 극초단파 조사 하에 1시간 20분 동안 가열한다. 혼합물을 물/염수(1/1)의 혼합물로 희석시키고 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 다음 단계에서 추가의 정제없이 직접 사용한다(110 mg의 표제 화합물, 황색 겔).

MH⁺: 688.7.

단계 7: N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-(4-사이클로프로필피페라진-2-일)-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드

110 mg(0.160 mmol)의 2-{5-(2-아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로-벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-4-사이클로프로필피페라진-1-카복실산 3급-부틸 에스테르(앞서의 단계에서 기술됨)를 3 mL의 디클로로메탄 속에 용해하고 1.5 mL의 트리플루오로아세트산을 가한다. 용액을 1시간 동안 실온에서 교반한다. 이후에 용매를 제거하고 잔사를 중탄산나트륨의 포화 용액으로 퀀칭시킨다. 당해 수성 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시킨다. 조 생성물을 섬광 크로마토그래피로 10 g의 실리카 겔 컬럼 상에서 용출제로서 디클로로메탄/메탄올 혼합물를 사용하여 정제한 다음, 다른 섬광 크로마토그래피로 30 g의 C18 컬럼 상에서 용출제로서 물/메탄올 혼합물을 사용하여 정제한다. 56 mg의 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다.

수율: 2개의 단계에 걸쳐 43%.

MH⁺: 588.7.

¹H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 7.99 (d, J=5.2 Hz, 1H); 7.55-7.35 (m, 4H); 7.27-7.17 (m, 2H); 6.73 (s, 2H); 5.90 (d, J=5.1 Hz, 1H); 4.10-4.03 (m, 1H); 3.11-3.04 (m, 1H); 2.97-2.89 (m, 1H); 2.82-2.70 (m, 2H); 2.44-2.30 (m, 2H); 1.72-1.63 (m, 1H); 0.47-0.27 (m, 4H).

실시예 21: BRAF 결합 검정

BRAF에 결합하는 화합물의 능력을 평가하기 위해, Life technologies로부터의 LanthaScreen Biochemical 키나제 결합 검정을 제조업자의 설명서에 따라 사용하였다. 요약하면, 100% DMSO 중 160 nL의 100X 화합물 용액, 3.84 μL의 키나제 완충액, 8.0 μL의 2X BRAF/Eu-항-GST 혼합물 및 4.0 μL의 4X 트레이서(Tracer)를 함유하는 백색 384-웰 플레이트를 사용하였다. 플레이트를 30초 동안 진탕시키고 60분 동안 실온에서 항온처리하였다. 플레이트 판독기를 사용하여 형광성을 판독하였다. 당해 검정에서, BRAF 효소를 5 nM의 농도에서 및 Eu-항-GST 항체를 2 nM의 농도에서 사용하였다. 트레이서 178은 20 nM(20 nM의 Kd)의 농도에서 사용하였다. 키나제 완충액은 50 mM의 HEPES pH 7.5, 0.01%의 BRIJ-35, 10 mM의 MgCl₂, 1 mM의 EGTA로 이루어졌다. 화합물 IC50을 3배 일련 희석(중복으로 10점 적정)으로 측정하였다.

선택된 화합물의 BRAF 결합("BRAF IC50")은 다음과 같이 표 2에 보고한다:

모든 시험한 화합물은 BRAF 키나제에 결합하는 능력을 나타내었다.

특히, "A"로서 지정된 활성을 갖는 화합물은 < 10 nM의 IC₅₀ 값을 제공하였다. "B"로 지정된 활성을 갖는 화합물은 10 nM 내지 25 nM의 IC₅₀ 값을 제공하였다. "C"로 지정된 활성을 갖는 화합물은 25 nM 내지 50 nM의 IC₅₀ 값을 제공하였다. "D"로 지정된 활성을 갖는 화합물은 50 nM 내지 100 nM의 IC₅₀ 값을 제공하였다. "E"로 지정된 활성을 갖는 화합물은 > 100 nM의 IC₅₀ 값을 제공하였다.

실시예 22: BRAF V599E 결합 검정

BRAF V599E에 결합하는 화합물 능력을 평가하기 위하여, Life technologies로부터의 LanthaScreen Biochemical 키나제 결합 검정을 제조업자의 설명서에 따라 사용하였다. 요약하면, 100% DMSO 중 160 nL의 100X 화합물 용액, 3.84 μL의 키나제 완충제, 8.0 μL의 2X BRAF V599E/Eu-항-GST 혼합물 및 4.0 μL의 4X 트레이서를 함유하는 백색 384-웰 플레이트를 사용하였다. 플레이트를 30초 동안 진탕시키고 60분 동안 실온에서 항온처리하였다. 플레이트 판독기를 사용하여 형광성을 판독하였다. 당해 검정에서, BRAF V599E 효소를 5 nM의 농도에서 사용하였고 Eu-항-GST 항체는 2 nM의 농도에서 사용하였다. 트레이서 178은 20 nM(33 nM의 Kd)의 농도에서 사용하였다. 키나제 완충액은 50 mM의 HEPES pH 7.5, 0.01%의 BRIJ-35, 10 mM의 MgCl2, 1 mM의 EGTA로 이루어져 있다. 화합물 IC50은 3-배 일련 희석(중복으로 10점 적정)으로 측정하였다.

선택된 화합물의 BRAF V599E 결합("BRAF V599E IC50")은 다음과 같이 표 3에 보고한다:

모든 시험한 화합물은 BRAF V599E 키나제에 결합하는 능력을 나타내었다.

특히, "A"로서 지정된 활성을 갖는 화합물은 < 10 nM의 IC₅₀ 값을 제공하였다. "B"로 지정된 활성을 갖는 화합물은 10 nM 내지 25 nM의 IC₅₀ 값을 제공하였다. "C"로 지정된 활성을 갖는 화합물은 25 nM 내지 50 nM의 IC₅₀ 값을 제공하였다. "D"로 지정된 활성을 갖는 화합물은 50 nM 내지 100 nM의 IC₅₀ 값을 제공하였다. "E"로 지정된 활성을 갖는 화합물은 > 100 nM의 IC₅₀ 값을 제공하였다.

실시예 23: 세포주 증식 검정

A375 세포 증식을 앞서 기술한 바와 같이(Delfosse et al, 2012) 표준 MTT 검정을 사용하여 평가하였다.

요약하면, A375 세포를 96-웰 조직 배양 플레이트 속에서 웰당 500개 세포의 밀도로 씨딩(seeding)하고 시험 배양 배지 속에서 성장시켰다. 시험 화합물을 씨딩 후 24시간째에 가하였다. 세포주를 4일 동안 37℃에서 항온처리하였다. 항온처리 기간 후, 시험 화합물을 함유하는 배지를 제거하고 0.4 mg/mL MTT를 함유하는 시험 배양 배지로 대체하였다. 항온처리(4 시간) 후, 생존하는 세포는 MTT 테트라졸륨 환을 암청색 포르마잔 반응 생성물로 분해한 반면, 죽은 세포를 무색으로 남았다. MTT­함유 배지를 조심스럽게 제거하고 DMSO를 웰당 가하였다. 진탕시킨 후, 플레이트를 540 nm의 흡광도에서 판독하였다. 시험을 적어도 3개의 독립된 실험에서 4번 반복하여 수행하였다. 데이타는 리간드의 부재시 수득한 최대 활성의 %로 나타내었다.

선택된 화합물("BRAF V599E IC50")의 세포 증식을 참고 화합물 다브라페닙에 대해 표 4에 보고한다.

시험 화합물 대부분은 참고 화합물과 비교하여 거의 동일하거나 약간 더 낮은 수준이지만 A375 세포 증식을 억제하는 능력을 나타낸다.

실시예 24: PXR 전사촉진(transactivation) 검정

PXR 활성을 이미 확립된 HG5LN GAL4­hPXR 리포터 세포주(reporter cell line)를 사용하여 특성화하였다(Lemaire et al, 2007). 요약하면, HG5LN 세포를 HeLA 세포 내에서 GAL4­반응성 유전자(GAL4RE5­bGlob­Luc­SV­Neo)의 통합에 의해 수득하였다(Seimandi et al., 2005). HG5LN GAL4(DBD)­hPXR(LBD) 세포주는 HG5LN 세포를 hPXR(Met107-Ser434)의 리간드 결합 도메인에 융합된 효모 활성인자 GAL4(Met1 - Ser147)의 DNA 결합 도메인의 발현을 가능하도록 하여 푸로마이신에 대한 내성을 부여하는, 플라스미드 [pSG5­GAL4(DBD)­hPXR(LBD)­puro]로 형질감염시킴으로써 수득하였다.

HG5LN 및 HG5LN GAL4­hPXR 세포를 둘베코 변형 이글배지(Dulbecco's Modified EagleMedium): 페놀 레드(phenol red) 및 1 g/L 글루코스를 함유하고 5% 태아 소 혈청, 100 유닛(unit)/mL의 페니실린, 100 μg/mL의 스트렙토마이신 및 1 mg/mL 게네티시닌이 보충된 영양 혼합물 F­12(DMEM/F­12) 속에서 5% CO₂ 습윤화된 대기 속에서 37℃에서 배양하였다. HG5LN GAL4­hPXR 세포는 0.5 μg/mL 푸로마이신이 보충된 동일한 배지 속에서 배양하였다.

전사촉진 실험을 위하여, HG5LN 및 HG5LN­PXR를 96-웰 백색 불투명 조직 배양 플레이트(Greiner CellStar) 속에서 웰당 25,000개의 세포의 밀도로 둘베코 변형 이글 배지: 페놀 레드 및 1 g/L의 글루코스가 없고 5% 스트라이프된 태아 소 혈청, 100 units/mL의 페니실린, 100 μg/mL의 스트렙토마이신(시험 배지)가 보충된 영양 혼합물 F­12(DMEM/F­12) 속에서 배양하였다. 시험할 화합물을 24시간 후 시험하고, 세포를 37℃에서 16시간 동안 항온처리하였다. 항온처리 기간 말기에, 배양 배지를 0.3 mM 루시페린을 함유하는 시험 배지로 대체하였다. 루시페린 활성을 2초 동안 완전히 살아있는 세포 속에서 MicroBeta Wallac 광도계(luminometer) (PerkinElmer)를 사용하여 측정하였다. 시험은 적어도 3개의 독립된 실험에서 4개 반복하여 수행하였다. 데이타는 리간드(HG5LN 세포)의 부재하에 또는 SR12813 μM(HG5LN PXR 세포)의 존재하에 수득된 최대 활성의 %로 나타내었다.

선택된 화합물의 PXR 전사촉진은 참고 화합물 다브라페닙과 관련하여 표 5에 보고한다.

아브라페닙(GL214)의 염소화된 유사체를 제외한, 모든 시험한 화합물은 참고 화합물 다브라페닙과 비교하여 리포터 검정에서 PXR의 훨씬 더 낮은 활성화를 나타낸다.

Claims (16)

1. 하기 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물:
   [화학식 I]
   

   

   
   상기 화학식 I에서,
   X는 할로겐이고;
   R ¹ 은 C1-C6-알킬, 아미노-C1-C6-알킬, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤리디닐 및 아제티디닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 아미노-C1-C6-알킬, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤리디닐 및 아제티디닐은 탄소 원자를 통해 티아졸 환에 연결되고 C1-C6-알킬, C3-C6-사이클로알킬 또는 C1-C4-알킬옥시카보닐로 임의로 치환되고;
   R ² 는 C1-C6-알킬, 할로겐 및 NHR⁵로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 여기서 R ⁵ 는 H, -C(O)-C1-C6-알킬, -C(O)-C1-C6-알케닐 및 -C(O)-C1-C6-알키닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
   R ³ 은 H, C1-C6-알킬 및 할로겐으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
   R ⁴ 는 C1-C6-알킬 및 디할로게노아릴로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
   단, R ² , R ³ 및 R ⁴ 중 하나가 C1-C6-알킬이거나 R ³ 이 H인 경우, R ¹ 은 C1-C6-알킬이 아니다.
2. 제1항에 있어서,
   X는 플루오로(fluoro)인, 화합물.
3. 제1항 또는 제2항에 있어서,
   R ² 는 NHR⁵이고, R ⁵ 는 H, -C(O)Me 및 -C(O)-CH=CH₂ 및 -C(O)-C≡CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 화합물.
4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
   R ³ 은 H 또는 클로로인, 화합물.
5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서,
   R ⁴ 는 C1-C6-알킬 및 2,5-디할로게노페닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 화합물.
6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,
   하기 화학식 II를 가지는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물:
   [화학식 II]
   

   

   
   상기 화학식 II에서,
   R ¹ , R ² , 및 R ³ 는 청구항 1에 정의된 바와 같다.
7. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,
   하기 화학식 III를 가지는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물:
   [화학식 III]
   

   

   
   상기 화학식 III에서,
   R ¹ , R ³ 및 R ⁵ 는 청구항 1에 정의된 바와 같다.
8. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,
   하기 화학식 IV를 가지는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물:
   [화학식 IV]
   

   

   
   상기 화학식 IV에서,
   R ¹ 및 R ⁵ 는 청구항 1에 정의된 바와 같다.
9. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,
   하기 화학식 V를 가지는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물:
   [화학식 V]
   

   

   
   상기 화학식 V에서,
   R ¹ 및 R ⁵ 는 청구항 1에 정의된 바와 같다.
10. 제1항에 있어서,
    N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-모르폴린-3-일-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드;
    N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-(1-사이클로프로필피페리딘-4-일)-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드;
    N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-피페리딘-3-일-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드;
    N-{3-[2-(3-아미노프로필)-5-(2-아미노피리미딘-4-일)-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드 트리플루오로아세테이트;
    N-(4-{2-(1-사이클로프로필피페리딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오르벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-5-일}-피리미딘-2-일)-아세트아미드;
    N-(4-{4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-2-피페리딘-3-일-티아졸-5-일}-피리미딘-2-일)-아세트아미드 트리플루오로아세테이트;
    N-(4-{4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-2-모르폴린-3-일-티아졸-5-일}-피리미딘-2-일)-아세트아미드;
    N-(4-{2-(3-아미노프로필)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-5-일}-피리미딘-2-일)-아세트아미드;
    N-(4-{4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-2-모르폴린-3-일-티아졸-5-일}-피리미딘-2-일)-아크릴아미드 트리플루오로아세테이트;
    N-(4-{2-(3-아미노프로필)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-5-일}-피리미딘-2-일)-아크릴아미드 트리플루오로아세테이트;
    3-{5-(2-아크릴로일아미노피리미딘-4-일)-4-[3-(2,5-디플루오로벤젠설포닐아미노)-2-플루오로페닐]-티아졸-2-일}-피페리딘-1-카복실산 3급-부틸 에스테르;
    부탄-2-설폰산{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-피페리딘-4-일-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-아미드;
    N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-모르폴린-3-일-티아졸-4-일]-5-클로로-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드;
    N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-3급-부틸-티아졸-4-일]-5-클로로-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드;
    N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-아제티딘-2-일-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드;
    N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-피롤리딘-2-일-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드;
    N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-피페리딘-2-일-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드;
    N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-피페라진-2-일-티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드;
    N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-(6,6-디메틸모르폴린-3-일)티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드; 및
    N-{3-[5-(2-아미노피리미딘-4-일)-2-(4-사이클로프로필피페라진-2-일)티아졸-4-일]-2-플루오로페닐}-2,5-디플루오로벤젠설폰아미드;로 이루어진 그룹에서 선택되는, 화합물.
11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물 및 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물.
12. 사람 또는 동물에서 치료학적 치료(therapeutic treatment)에 사용하기 위한 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물.
13. 조절저하된 단백질 키나제 활성과 관련된 질환 또는 장애를 치료 또는 예방하는데 사용하기 위한 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물.
14. 제13항에 있어서,
    상기 단백질 키나제는 B-RAF 또는 이의 돌연변이체 형태인, 화합물.
15. 암을 치료 또는 예방하는데 사용하기 위한 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물.
16. 제15항에 있어서,
    상기 암은 흑색종, 폐 암, 결장직장 암, 위장 기질 암 및 췌장 암으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 화합물.