KR20220123139A - 사프라날 고 농축된 식물 추출물, 이의 생산 방법 및 용도 - Google Patents

사프라날 고 농축된 식물 추출물, 이의 생산 방법 및 용도 Download PDF

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Abstract

본 발명은 HPLC 방법을 사용하여 측정된, 총 건조 물질 중량에 대해 최소 0.2 중량%의 사프라날 농도를 지지는, 사프론으로부터 수득된 식물 추출물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 이러한 추출물을 수득하기 위한 공정, 및 또한 이러한 추출물을 포함하는 조성물, 및 이의 용도에 관한 것이다.

Description

사프라날 고 농축된 식물 추출물, 이의 생산 방법 및 용도{PLANT EXTRACT HIGHLY CONCENTRATED IN SAFRANAL, PRODUCTION METHOD AND USES THEREOF}
본 발명은 사프라날, 특히 사프론(saffron)을 함유하는 식물-계 원료로부터 수득된 신규한 추출물에 관한 것이며, 상기 추출물은 현재 알려진 식물 추출물보다 더 높은 사프라날 농도를 갖는다.
본 발명은 또한 이러한 추출물이 수득되도록 할 수 있는 특수한 공정, 및 이러한 추출물을 포함하는 조성물, 및 이의 용도에 관한 것이다.
사프라날은 크로쿠스 사티부스(Crocus sativus), 센타우레아 시브토르피이(Centaurea sibthorpii), 센타우레아 콘사귀네아(Centaurea consanguinea), 센타우레아 암마니콜라(Centaurea amanicola), 에로디움 시쿠타리움(Erodium cicutarium), 차이니즈 그린 티(Chinese green tea), 칼리콥테리스 플로리분다(Calycopteris floribunda), 크로쿠스 헤우펠리아누스(Crocus heuffelianus), 삼부쿠스 니그라(Sambucus nigra), 가르데니아 자스미노이데스(Gardenia jasminoides), 시트루스 리몬(Citrus limon), 쿠미눔 사이미눔 엘.(Cuminum cyminum L.), 및 아칠레아 디스탄스(Achillea distans)와 같은 몇가지 식물로부터 추출될 수 있지만 대부분 사프론으로 또한 알려진 크로쿠스 사티부스로부터 추출된다.
사프론은 이란에서 전형적으로 재배되는 전통적인 향신료이다. 이는 문헌(Javadi B & al.　 "A survey on saffron in major islamic traditional medicine books" Iranian journal of basic medical sciences 2013; 16(1): 1-11)에 명확히 나타난 바와 같이, 감정 장애, 월경전 증후군(premenstrual syndrome), 발기 부전의 치료, 또는 피부 보호와 같은 몇가지 용도를 갖는다. 사프론의 효능을 입증하기 위한 몇가지 임상 연구, 특히 Akhondzadeh S & al. "Comparison of Crocus sativus L. and imipramine in the treatment of mild to moderate depression: a pilot double-blind randomized trial" [ISRCTN45683816]. BMC Complement Altern Med 2004; 4 : 12, 또는, 보다 최근에: Hausenblas HA & al. "사프론(Crocus sativus L.) and major depressive disorder: a meta-analysis of randomized clinical trials" Journal of integrative medicine 2013; 11 (6): 377-83에서의 경우와 같이, 우울증 및 불안증의 치료를 위한 이의 용도과 관련하여, 지난 수년에 걸쳐 수행되어 왔다.
사프론(크로쿠스 사티부스)은 향신료의 향을 생성하고 전술한 적용에 있어서 이의 효능에 대해 인식된 휘발성 분자인, 사프라날을 포함하는 수개의 분자로 구성되어 있다. 선행 분야에 사용된 추출물은 표준 ISO 3632-2:2010 (Spices - Saffron (Crocus sativus L.) - Part　2:　Test methods. ISO International standard; 2010: 1-42)에 따라서, UV 분광법을 사용하여 2% 사프라날에서 대부분 표준화되어 있다. 이러한 표준은 총괄적인 분석 프로토콜을 기술하며, 이는 사프론 추출물을 물 속에 용해시키는 단계, 이를 교반하는 단계, 이를 여과하는 단계 및 이후에 330 nm에서 분광광도법적 판독을 수행하는 단계로 이루어진다. 그럼에도 불구하고, 이러한 방법은 특정 용매 및/또는 특수한 시약의 사용의 부재가 사프라날 이외의 분자의 정량화를 생성하므로, 추출물의 실제 사프라날 농도를 반영하지 않기 때문에 비평받을 수 있다.
효과적으로, 선행 기술에서 사용되었던, 추출물 속에서 사프라날의 HPLC(고 성능 액체 크로마토그래피)는 표준 ISO 3632-2에 따라서, UV 분광법을 사용한 분석에 의해 수득된 실제 농도보다 30 내지 1000배 더 낮은 실제 농도를 나타내며, 하기 표 1에 나타낸 결과에 의해 입증되는 바와 같이, 2개의 방법의 관련성에 있어서 유의적인 변동성이 있다:
사프론 추출물 사프라날
ISO 3632-2:2010 방법		 사프라날 HPLC 방법
사프론 건조 추출물 - 나탁(Natac) 2.71 0.0650
사프론 ES 암술머리-플란텍스(stigma-Plantex) 2.12 0.0040
Saffr'Activ®-녹색 식물 추출물 2.32 0.0380
Affron®-Pharmactive 2.90 0.0190
[표 1] 선행 기술로부터의 몇가지 사프론 추출물에 적용된 2개의 사프라날 측정 방법으로 수득된 결과의 비교(결과는 추출물의 건조 물질의 총 중량에 대해 중량%로 제공됨)
실제로, 선행 기술의 공정을 사용하여 수득할 수 있는, 사프라날을 함유하는 식물 추출물, 특히 사프론 추출물은 극소 용량의 사프라날을 갖는다.
따라서, 측정 방법은 생성물의 사프라날 농도를 측정하기 위해 체계적으로 사용되었던 분광법을 통한 선행 측정 방법을 사용하여 수득된 것과는 상이한 결과를 생성하므로, 중요하다. ISO3632-2:2010로 지칭되는 이러한 선행 방법은 본 출원, 및 또한 가르시아-로드리게즈(Garcia-Rodriguez) 등에 의한 2017 공보, "Comparative evaluation of an ISO 3632 method and an HPLC-DAD method for safranal quantity determination in saffron"에서 입증된 바와 같이, 사프라날 농도를 과대평가한다. 이러한 공보에서, 연구는 390 사프론 샘플을 사용하여 수행하였다. 과대평가는 20 내지 50배 사이일 수 있다. 따라서, 참고 측정 방법 ISO3632-2:2010을 사용하여 X%의 사프라날의 나타낸 농도를 지닌 추출물은 실제로는 사프라날을 훨씬 덜 함유한다.
본 발명의 목적은 현재의 추출물보다 더 높은 용량의 사프라날을 지닌 사프론 추출물을 제공함으로써 이러항 쟁점을 해결하는 것이다.
특히, 본 발명은 HPLC 방법을 사용하여 측정된, 추출물의 건조 물질의 총 중량에 대해 최소 0.2 중량%의 사프라날의 농도를 가지는, 사프론으로부터 수득된 식물 추출물에 관한 것이다.
이러한 추출물은 특히 열 처리 단계를 포함하는 공정, 특히 다음의 단계를 시행함을 포함하는 특수한 공정을 통해 수득될 수 있다:
- 원료를 가능한한 건조시키는 단계,
- 건조된 원료를 분쇄하는 단계,
- 수성 또는 하이드로알코올 추출(hydroalcoholic extraction)하거나, 유기 용매를 사용하여 추출하는 단계,
- 지지체(support) 상에 수득된 추출물을 함침시키는 단계,
- 추출물을 열 처리하는 단계.
시행하기 간단한, 이러한 경제적인 공정은 HPLC 방법을 사용하여 측정된, 사프론 추출물의 건조 물질의 총 중량에 대해 최소 0.2%의 사프라날의 농도로 사프론 추출물을 수득할 수 있도록 한다.
유리하게는, 이러한 추출물은 현재 알려진 추출물의 실제 사프라날 농도보다 더 큰 실제 사프라날 농도를 함유하므로 특히 우울증, 불안증, 감정 장애, 발기 부전 및 월경전 장애(premenstrual disorder)를 근절하는데 사용하기 위한 보다 큰 효능을 제공한다. 따라서, 본 발명은 또한 사프론 추출물을 함유하는 화장품, 식품, 영양 및 의약 조성물 외에, 이들 용도를 위한 사르폰 추출물에 관한 것이다.
다른 특징 및 이점은 다음을 나타내는 첨부된 도면과 관련하여, 하기하는 본 발명의 상세한 설명으로부터 나타날 것이다:
- 도 1: UHPLC 방법을 통해 수득된, 실시예 1로부터의 본 발명에 따른 추출물의 크로마토그램,
- 도 2: UHPLC 방법을 통해 수득된, 실시예 2로부터의 본 발명에 따른 추출물의 크로마토그램.
- 도 3a: UHPLC 방법을 통해 수득된 실시예 3a에 따른 선행 기술로부터의 추출물(열 처리없이 수득됨)의 크로마토그램,
- 도 3b: UHPLC 방법을 통해 수득된 실시예 3b에 따른 선행 기술로부터의 추출물(열 처리없이 수득됨)의 크로마토그램.
따라서, 본 발명은 HPLC 방법을 사용하여 측정된, 건조 물질의 총 중량에 대해 최소 0.2 중량%의 사프라날의 농도를 지닌, 사프라날을 함유하는 식물(또는 식물-계 원료)로부터 수득된 식물 추출물에 관한 것이다.
표현 "사프라날을 함유하는 식물로부터 수득된 식물 추출물" 또는 "사프라날을 함유하는 식물-계 원료로부터 수득된 식물 추출물"은 사프라날을 함유하는 전체 식물 또는 식물의 일부로부터의 적어도 하나의 분자 또는 수개 분자의 세트를 지칭하는 것으로 이해된다. 이는 상기 천연 분자의 임의의 유형의 형질전환에 의해서 수득된 식물 또는 분자 속에 존재하는 천연 분자의 특수한 선택으로부터 유도될 수 있다. 추출물을 수득하는데 사용된 원료는 사프라날을 함유하는 식물 전체 또는 일부로 이루어질 수 있다. 사프라날을 함유하는 식물이 사프론인 경우, 본 발명에 따른 식물 추출물은 특히 사프론 암술머리(stigma) 및/또는 꽃잎 및/또는 구근으로부터 수득될 수 있다.
본 발명에 따른 추출물은 자체적으로는 원료가 아니다. 이는 식물, 식물의 일부, 건조 식물, 식물의 건조된 부분, 식물 샘플 또는 건조 식물 샘플인 것으로 고려되지 않는다. 이는 또한 필수 오일(essential oil)이 아니다.
용어 "사프라날을 함유하는 식물" 또는 "사프라날을 함유하는 원료"(용어 식물 및 식물-계 원료는 본 발명의 의미내에서 동등하게 사용될 수 있다)는 사프라날, 특히 크로쿠스 사티부스, 센타우레아 시브토르피이, 센타우레아 콘사귀네아, 센타우레아 암마니콜라, 에로디움 시쿠타리움, 차이니즈 그린 티, 칼리콥테리스 플로리분다, 크로쿠스 헤우펠리아누스, 삼부쿠스 니그라, 가르데니아 자스미노이데스, 시트루스 리몬, 쿠미눔 사이미눔 엘., 및 아칠레아 디스탄스(Achillea distans)를 함유하는 임의의 식물을 지칭하는 것으로 이해된다. 바람직하게는, 이로부터 본 발명에 따른 추출물이 수득되는 사프라날을 함유하는 식물은 크로쿠스 사티부스(사프론)이다.
본 발명에 따른 추출물은 적어도 사프라날을 포함하며, 사프라날은 HPLC 방법(고 성능 액체 크로마토그래피)을 사용하여 측정된, 건조 물질 중량의 측면에서, 적어도 0.2%의 농도로 존재한다. 측정 방법은 다른 측정 방법, 즉, UV 분광법(표준 ISO 3632-2)을 사용하여, 수득된 결과가 이러한 방법의 특이성 결여로 실제 사프라날 농도에 상응하지 않는다는 것을 고려할 때 매우 중요하다.
분자의 분석을 위한 HPLC 방법은 기술자에게 공지된 방법이다. 이는 개개 분자의 정밀한 확인 및 정량화를 가능하도록 한다.
바람직하게는, 본 발명에 따른 추출물 속에 함유된 분자, 특히 사프라날을 측정하기 위해 사용된 분석 방법은 UHPLC 방법(초 고 성능 액체 크로마토그래피)이다. 이러한 방법은 또한 화합물의 보다 큰 분해 및 분리 뿐만 아니라, 단일 샘플로부터 동일한 크로마토그램시 수개의 화합물의 검출도 가능하도록 한다.
특히 적합한 시행 방식에 따라서, HPLC 또는 UHPLC 분석 방법은 예를 들면, 다음 단계를 포함하는, 사전 제조 단계를 포함한다;
- 측정할 사프론 추출물을 하이드로알코올 용액으로 도입시키는 단계,
- 적어도 1시간 동안 자기 교반(magnetic stirring)하는 단계,
- 적어도 5분 동안 초음파 욕(ultrasonic bath) 속에 두는 단계,
- 막을 통해 여과한 후 투입하는 단계.
샘플의 제조 후, 분석 방법은 전통적으로 용출 단계에 이어 검출 단계를 포함한다.
용출은 이원 구배를 사용하여 바람직하게는 수행한다. 예를 들면, 제1 용매는 유기 용매 및 산일 수 있다. 바람직하게는, 아세토니트릴 중 포름산을 사용할 수 있다. 예를 들면, 제2 용매는 산성화된 수성 용매일 수 있다. 우성적으로, 수중 포름산이 사용될 수 있다.
사프라날 이외에, 본 발명에 따른 추출물은, 특히 사프론 추출물의 경우에, 피크로크로신으로부터 기원 하고/하거나 캠퍼롤로부터 기원한, 다른 분자, 특히 크로신 및/또는 플라보노이드를 포함할 수 있다.
크로신이 존재하는 경우에, 이들은 HPLC 방법을 사용하여 측정된, 추출물의 건조 물질 중량의 적어도 1%에서 바람직하게는 존재할 수 있다.
캠프페롤로부터 기원한 플라보노이드가 존재하는 경우에, 이들은 HPLC 방법을 사용하여 측정된, 추출물의 건조 물질 중량의 적어도 500 ppm으로 바람직하게는 존재할 수 있다.
피크로크로신이 존재하는 경우에, 이들은 HPLC 방법을 사용하여 측정된, 추출물의 건조 물질 중량의 적어도 0.5%로 바람직하게는 존재할 수 있다.
바람직하게는, 본 발명에 따른 추출물은 지지체 상에 함침된다. 본 발명의 의미내에서 용어 "지지체" 또는 "증량제(bulking agent)"는 본 발명의 추출물의 함침 및 희석을 가능하도록 하는 성분 또는 식품 첨가제로서 사용된 임의의 식물-, 광물- 또는 화학물질-계 식품 물질을 지칭하는 것으로 이해된다.
지지체는 다음 성분으로부터 선택될 수 있다: 말토덱스트린, 당, 실리카, 및 아카시아 검; 여기서, 말토덱스트린이 바람직하다.
추출물을 지지체 위에 함침시키는 경우, 추출물 속에 존재하는 분자의 퍼센트는 지지체를 포함하는, 추출물의 건조 물질 중량의 측면에서 표시된다.
본 발명에 따른 추출물은 추출물의 건조 물질 중량의 측면에서 적어도 0.2%의 사프라날이 수득될 수 있도록 하는 어떠한 수단으로도 수득될 수 있다. 바람직하게는, 본 발명에 따른 추출물은 열 처리 단계를 포함하는 공정을 통해 수득된다. 이러한 단계는 추출물을 수득하기 위한 공정의 시작시, 공정 동안, 또는 공정의 말기에 시행될 수 있다.
본 발명의 의미내에서, 열 처리는 주위 온도 이상의 온도까지 가열함을 지칭하는 것으로 이해된다. 바람직하게는, 열 처리 단계는 적어도 2시간, 바람직하게는 적어도 24시간 동안 30℃ 내지 95℃의 온도, 바람직하게는 30℃ 내지 60℃의 온도에서 수행된 열 처리로 이루어진다.
열 처리는 어떠한 공지된 수단, 특히 체임버(chamber) 내, 오븐 속에서, 취사(cooking), 저온살균 또는 탈세균화함으로써 수행될 수 있다. 바람직하게는, 열 처리는 체임버 속에서 수행되어야 한다.
특히 적합한 실시(implementation) 방식에 따라서, 본 발명에 따른 식물 추출물은 원료로서 사프론을 사용하여 완료하는, 다음의 단계의 실시를 포함하는 공정을 통해 수득된다:
- 가능한한 건조시키는 단계,
- 바람직하게는 50 내지 500 μm로, 분쇄시키는 단계,
- 수성 또는 하이드로알코올 추출, 또는 유기 용매를 사용한 추출 단계,
- 수득된 추출물을 지지체 상에 함침시키는 단계,
- 열 처리 단계.
수성 또는 하이드로알코올 추출 단계, 또는 유기 용매를 사용한 추출 및 수득된 추출물의 지지체 상으로의 함침 단계는 Tech'Care Extration®으로 명명된 공지된 추출 공정으로 구성된다.
열 처리 단계는 이러한 공정 동안, 바람직하게는는 공정의 말기에 어느 순간에도, 원료 사프론에 대해서 수행될 수 있으며, Tech'Care Extration® 공정을 완료한다.
특히 적합한 실시 방식에 따라서, 이러한 공정의 실시에서 열 처리 단계는 체임버 속에서 적어도 2시간 동안, 심지어 보다 바람직하게는 적어도 24시간 동안 30℃ 내지 95℃의 온도에서, 심지어 바람직하게는 30℃ 내지 60℃의 온도에서의 열 처리 단계이다.
분쇄 단계는 어떠한 적합한 공지된 수단, 특히 분쇄 밀(granulating mill), 핀 밀(pin mill) 또는 햄머 밀러(hammer miller)에 의해, 바람직하게는 핀 밀에 의해 수행될 수 있다.
추출 단계는 어떠한 적합한 공지된 수단으로 수행될 수 있다.
수성 추출의 경우에, 분쇄된 물질은 물 속에 50 g/L의 비율에서 도입된다.
하이드로알코올성 추출의 경우에, 용매는 에탄올일 수 있으며, 바람직하게는 60% v/v에서의 에탄올로 제공된다. 분쇄된 물질은 50 g/L의 비율로 하이드로알코올 용액내에 도입된다.
유기 용매를 사용한 추출의 경우에, 용매는 메탄올 또는 에틸 아세테이트일 수 있으며, 바람직하게는 30% v/v의 비율에서 제공된다. 분쇄된 물질은 유기 용매내로 100 g/L의 비율에서 도입된다.
추출 후, 이러한 공정은 또한 산성화 단계를 포함할 수 있다. 이러한 단계는 산을 수성 또는 하이드로알코올 용매내로 첨가하는 단계로 이루어진다. 이는 추출 용액의 pH가 3 내지 5로 감소할 수 있도록 한다. 이는 다음의 조건 하에서 수행될 수 있다: 시트르산 또는 염산을 하이드로알코올 용매에 첨가하여 pH를 4까지 조절하는 단계. 지지체로의 함침 단계는 증량제를 추출 용액내로 첨가하는 단계로 이루어진다. 지지체 또는 증량제는 다음 성분들 중에서 선택될 수 있다: 말토덱스트린, 당, 실리카, 및 아카시아검, 그러나 말토덱스트린이 바람직하다.
함침 단계 이후에, 공정은 또한 수득된 추출물에 대한 유화 단계 및/또는 캡슐화(encapsulation) 단계를 포함할 수 있다. 이러한 단계는 증량제 및, 가능하게는 보조 물질을 함유하는 추출 용액의 고-속 교반으로 이루어진다. 이는 아카시아 검, 사이클로덱스트린, 또는 지방 물질과 같은 보조 물질을 사용하여 수행될 수 있다.
본 발명에 따른 추출물은 단독으로 사용될 수 있거나, 화장품, 식품, 영양 또는 의약 조성물 내로, 조성물의 건조 물질 중량의 측면에서 0.1 내지 100%의 비율로 사용될 수 있다. 바람직하게는, 본 발명에 따른 추출물은 조성물 속에 1일당 사람 체중 kg당 본 발명에 따른 추출물을 최소 0.07 mg, 심지어 보다 바람직하게는 1일당 체중 kg당 본 발명에 따른 추출물을 1.4 내지 4.2 mg으로 투여되도록 할 수 있는 양으로 존재한다.
따라서, 본 발명은 이러한 조성물, 바람직하게는 캅셀제, 정제, 연질 캅셀, 스틱, 사셰(sachet), 제조된 디쉬(prepared dish), 오일, 로션, 크림 또는 유화액(emulsion) 형태로 존재하는 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 추출물을 포함하는 조성물은 부형제와 같은 다른 적합한 공지된 성분을 함유할 수 있으며, 이는 조성물, 또는 다른 활성 물질 또는 활성 분자의 형태 및 의도된 용도에 따라 선택된다.
본 발명에 따른 추출물 및 이를 포함하는 조성물은 수개의 적용을 위해, 특히 우울증 및 불안증의 예방 또는 치료를 위해, 또는 감정 장애(병리학적 감정 장애), 발기 부전, 또는 월경전 장애의 예방 또는 치료를 위해 사용될 수 있다.
본 발명은 또한 다음에서 이의 사용을 위한 추출물에 관한 것이다:
- 사람 또는 동물에서 우울증의 예방 또는 치료시,
- 사람 또는 동물에서 불안증의 예방 또는 치료시,
- 사람에서 감정 장애의 예방 또는 치료시,
- 사람(남성)에서 발기 부전의 예방 또는 치료시,
- 사람(여성)에서 월경전 장애의 예방 또는 치료시.
유리하게는, 이는 모든 존재하는 추출물의 양보다 더 높은 양을 함유하는, 이것이 함유하는 사프라날의 높은 양으로 인하여, 본 발명에 따른 추출물은 이들 적용에 큰 효능을 제공한다. 또한, 본 발명에 따른 추출물은 더 이상 꽃의 식물 매트릭스(plant matrix) 속에 갇혀있지 않으며, 유기체에 보다 용이하게 이용가능하므로 이러한 추출물은 활성 분자의 생체이용률(bioavailability)을 증가시킬 수 있기 때문에, 원료 자체(건조되거나 건조되지 않은, 전체 식물 또는 식물 부분)보다는 오히려 추출물을 사용하는 것이 중요하다. 추출물 속의 지지체의 존재는 가공된 생성물에 대해 요구되는 분자의 균질성이 개선되도록 한다.
본 발명은 본 발명에 따른 추출물 및 공정의 예(실시예 1 및 2), 선행 기술의 추출물의 비교 예(실시예 3a 및 3b)를 이제 나타낸다.
모든 실시예의 경우, 추출물 속의 분자, 및 특히 사프라날에 대한 측정 방법은 UHPLC 방법이며, 다음의 특성을 갖는다:
1. 샘플 제조
하이드로알코올 용액을 사용한 샘플 추출. 적어도 1시간 동안 자기 교반한 후, 적어도 5분 동안 초음파 욕. 막을 통한 여과에 이어, 투입.
2. HPLC 용출
2원 구배(binary gradient):
용매 A(MeCN 중 포름산)
용매 B(수중 포름산)
3. 검출
크로신 440 nm
피크로크로신 유도체 250 nm
플라보노이드 350 nm
사프라날 310 nm
4. 표준물
트랜스-크로신-4-겐티오비오스-겐토비오스
트랜스-크로신 3-겐티오비오스-글루코즈
베타-사이클로시트랄
캠프페롤 글루코시드
사프라날
실시예 1: 본 발명에 따른 추출물
제1 추출물 예는 다음의 단계를 실시하는 것으로 이루어진, 공정의 실시를 통해 수득된 추출물이다:
- 크로쿠스 사티부스 암술머리의 사용,
- 핀 밀(pin mill)을 사용하여 250 μm까지 분쇄,
- 하이드로알코올 용액의 리터당 50g의 사프론의 비에서, 에탄올 60% v/v을 사용한 하이드로알코올 추출,
- 하이드로알코올 용액내로 도입된, 말토덱스트린에서의 함침,
- 체임버 속에서 48시간 동안 40℃에서 열 처리.
수득된 추출물은 실시예와 관련된 단락의 서문에 기술된 UHPLC 방법을 사용하여 수개의 분자에 대해 측정한다.
수득된 크로마토그램은 도 1에 나타낸다.
추출물은 다음에 의해 특성화된다:
- 0.238%의 사프라날 농도,
- 3.96%의 코르신 농도,
- 1.08%의 피크로크로신 유도체 농도, 및
- 0.25%의 플라보노이드 농도.
실시예 2: 본 발명에 따른 추출물
제2 추출물 실시예는 다음의 단계를 실시하는 것으로 이루어진, 공정의 실시를 통해 수득된 추출물이다:
- 크로쿠스 사티부스 암술머리의 사용,
- 핀 밀을 사용하여 250 μm로 분쇄,
- pH 4에서 염산을 사용한 수성 추출물의 산성화,
- 수용액내로 도입된, 아카시아 검에서 함침,
- 40℃에서 72시간 동안 체임버 속에서 열 처리.
수득된 추출물을 실시예와 관련된 단락의 서문에 기술된 UHPLC 방법을 사용하여 수개의 분자에 대해 측정한다.
수득된 크로마토그램은 도 2에 나타낸다.
추출물은 다음에 의해 특성화된다:
- 0.73%의 사프라날 농도,
- 1.0%의 크로신 농도,
- 2.93%의 피크로크로신 유도체 농도, 및
- 0.57%의 플라보노이드 농도.
실시예 3: 본 발명에 따른 추출물
추출물의 제3의 실시예는 다음의 단계의 실시로 이루어진, 공정의 실시를 통해 수득된 추출물이다:
- 크로쿠스 사티부스 암술머리의 사용,
- 핀 밀을 사용하여 250 μm로 분쇄,
- 105℃에서 2 내지 6시간 동안 체임버 속에서 제1 열 처리
- 140℃에서 2 내지 6시간 동안 체임버 속에서 제2 열 처리
- 하이드로알코올 용액 리터당 50g의 사프론의 비에서, 에탄올 60% v/v를 사용한 하이드로알코올 추출,
- 하이드로알코올 용액 내로 도입된, 말토덱스트린에서의 함침,
- 액체 추출물의 동결-건조.
추출물은 다음에 의해 특징화된다:
- 0.39%의 사프라날 농도,
- 2.31%의 크로신 농도,
- 1.37%의 피크로크로신 유도체 농도, 및
- 0.24%의 플라보노이드 농도.
실시예 3A: 미립화(atomization)에 의해 수득된 추출물(본 발명 제외)
제1 추출물 반례는 다음 단계의 실시로 이루어진, 공정의 실시를 통해 수득된 추출물이다:
- 크로쿠스 사티부스 암술머리의 사용,
- 핀 밀을 사용하여 250 μm로 분쇄,
- 하이드로알코올 용액 리터당 50g의 사프론의 비에서, 에탄올 60% v/v를 사용한 하이드로알코올 추출,
- 하이드로알코올 용매내로 도입된, 말토덱스트린에서의 함침,
- 액체 추출물의 분무-건조.
수득된 크로마토그램은 도 3a에 나타낸다.
수득된 추출물은 다음에 의해 특징화된다:
- 0.028%의 사프라날 농도,
- 4.98%의 크로신 농도,
- 1.26%의 피크로크로신 유도체 농도, 및
- 0.24%의 플라보노이드 농도.
실시예 3B: 동결-건조에 의해 수득된 추출물(본 발명 제외)
제2 추출물 반례는 다음 단계의 실시로 이루어진, 공정의 실시를 통해 수득된 추출물이다:
- 크로쿠스 사티부스 암술머리의 사용,
- 핀 밀을 사용하여 250 μm로 분쇄,
- 하이드로알코올 용액 리터당 50g의 사프론의 비에서, 에탄올 60% v/v를 사용한 하이드로알코올 추출,
- 하이드로알코올 용매내로 도입된, 말토덱스트린에서의 함침,
- 액체 추출물의 동결-건조.
수득된 크로마토그램은 도 3b에 나타낸다.
추출물은 다음에 의해 특징화된다:
- 0.038%의 사프라날 농도,
- 4.40%의 크로신 농도,
- 1.15%의 피크로크로신 유도체 농도, 및
- 0.22%의 플라보노이드 농도.
실시예 4: 사람 용의 영양 조성물의 예
실시예 4는 다음으로 구성된 150 mg의 캅셀이다:
- 실시예 1: 15 mg으로부터의 본 발명에 따른 추출물
- 말토덱스트린: 135 mg.
조성물은 숙련가에게 공지된 전통적인 조건에서 성분을 혼합시켜 수득하며, 혼합물은 이후 또한 전통적인 조건에 따라 캅셀내로 이전시킨다.
권고 용량은 1일당 2개 캅셀이다.
실시예 5: 사람용 의약의 예
실시예 5는 다음으로 구성된 1500 mg의 정제이다:
- 실시예 2 :20mg으로부터의 본 발명에 따른 추출물,
- 소르비톨: 1430 mg,
- 스테아르산마그네슘: 27 mg,
- 브릴리언트 블루(Brilliant blue) FCF 래커 E133: 20 mg,
- 아세설팜 K (E950): 1.5 mg,
- 나트륨 사카린(E954): 1.5 mg.
조성물은 숙련가에게 공지된 전통적인 조건에서 성분을 혼합시켜 수득하며, 이후 혼합물을 또한 전통적인 조건에 따라 압축시킨다.
권고된 용량은 1일당 1개 정제이다.
실시예 6: 동물용의 영양 조성물의 예
실시예 6은 다음으로 구성된 300 mg의 정제이다:
- 실시예 1로부터의 사프론 추출물: 6 mg,
- 미세결정성 셀룰로즈: 135 mg,
- 스테아르산마그네슘: 10 mg.
조성물은 숙련가에게 공지된 전통적인 조건에서 성분을 혼합하여 수득하며, 이후 혼합물을 또한 전통적인 조건에 따라서 압축한다.
권고된 용량은 1일당 1개의 정제이다.
실시예 7: 데이 크림(day cream) 형태의 국소 적용용 화장 조성물
이러한 조성물은 피부에 적용될 크림 형태로 제시된다.
이는 다음으로 구성된다:
- 실시예 1로부터의 본 발명에 따른 추출물: 10 mg,
- 방부제: 0.5%,
- 향수: 0.6%,
- 지방 상(fatty phase) + 수성 상: 97.4%.
지방 상은 유화제 및 트리글리세라이드로 구성된다. 수성 상은 피롤리돈 카복실산과 조합된 물로 구성된다.
조성물은 실시예 1로부터의 사프론 추출물을 방부제 및 향수와 함께 교반하면서 10분의 기간에 걸쳐 수성 상에 첨가함으로써 수득한다. 이후, 수성 상 자체를 교반하면서 지방 상에 가하고 30분 동안 혼합한다.

Claims (18)

  1. 크로쿠스 사티부스(Crocus sativus), 센타우레아 시브토르피이(Centaurea sibthorpii), 센타우레아 콘사귀네아(Centaurea consanguinea), 센타우레아 암마니콜라(Centaurea amanicola), 에로디움 시쿠타리움(Erodium cicutarium), 차이니즈 그린 티(Chinese green tea), 칼리콥테리스 플로리분다(Calycopteris floribunda), 크로쿠스 헤우펠리아누스(Crocus heuffelianus), 삼부쿠스 니그라(Sambucus nigra), 가르데니아 자스미노이데스(Gardenia jasminoides), 시트루스 리몬(Citrus limon), 쿠미눔 사이미눔 엘.(Cuminum cyminum L.), 및 아칠레아 디스탄스(Achillea distans) 중에서 선택된, 사프라날을 함유하는 식물-계 원료로부터 수득된 식물 추출물로서, HPLC 방법을 사용하여 측정된, 건조 물질의 총 중량에 대해 적어도 0.2 중량%의 사프라날 농도를 포함함을 특징으로 하는 식물 추출물.
  2. 청구항 1에 있어서,
    캠프페롤(kaempferol) 및/또는 피크로크로신(picrocrocin)으로부터 기원한 플라보노이드(flavonoid) 및/또는 크로신(crocin)을 또한 포함함을 특징으로하는 식물 추출물.
  3. 청구항 1 또는 청구항 2에 있어서,
    식물 추출물이 지지체 상에 함침됨을 특징으로 하는 식물 추출물.
  4. 청구항 1 내지 청구항 3 중 어느 한 항에 있어서,
    식물 추출물이 말토덱스트린, 당, 실리카, 및 아카시아 검 중에서 선택된 지지체 상에 함침됨을 특징으로 하는 식물 추출물.
  5. 청구항 1 내지 청구항 4 중 어느 한 항에 있어서,
    크로쿠스 사티부스(Crocus sativus) 암술머리(stigmas) 및/또는 꽃잎(petals) 및/또는 구근(bulbs)으로부터 수득됨을 특징으로 하는 식물 추출물.
  6. 청구항 1 내지 청구항 5 중 어느 한 항에 있어서,
    30℃ 내지 95℃의 온도에서 적어도 2시간 동안 지속되는 열 처리 단계를 포함하는 공정에 의해 수득될 수 있음을 특징으로 하는 식물 추출물.
  7. 청구항 6에 있어서,
    온도가 30℃ 내지 60℃임을 특징으로 하는 식물 추출물.
  8. 청구항 6 또는 청구항 7에 있어서,
    열 처리가 적어도 24시간의 기간 동안 수행됨을 특징으로 하는 식물 추출물.
  9. 청구항 6 내지 청구항 8 중 어느 한 항에 있어서,
    열 처리가 체임버, 오븐 속에서 취사(cooking), 저온 살균(pasteurization) 또는 탈세균화(debacterialization)에 의해 수행됨을 특징으로 하는 식물 추출물.
  10. 청구항 6 내지 청구항 9 중 어느 한 항에 있어서,
    열 처리 단계가 공정의 시작시, 공정 동안, 또는 공정의 말기에서, 원료 상에 시행될 수 있음을 특징으로 하는 식물 추출물.
  11. 하기의 단계의 실시를 포함함을 특징으로 하는, 청구항 1 내지 청구항 10 중 어느 한 항에 따른 식물 추출물을 수득하기 위한 공정:
    - 바람직하게는 미리 건조된, 사프라날을 함유하는 식물-계 원료를 분쇄하는 단계,
    - 수성 또는 하이드로알코올 추출, 또는 유기 용매를 사용한 추출 단계,
    - 지지체 상에의 수득된 추출물의 함침 단계,
    - 30℃ 내지 95℃의 온도에서 적어도 2시간 동안 체임버 속에서의 열 처리 단계.
  12. 청구항 11에 있어서,
    추출 단계 후 산성화 단계를 또한 포함함을 특징으로 하는 공정.
  13. 청구항 11 또는 청구항 12에 있어서,
    건조가 30℃ 내지 60℃의 온도에서 적어도 24시간에 걸쳐 수행됨을 특징으로 하는 공정.
  14. 청구항 11 내지 청구항 13 중 어느 한 항에 있어서,
    수득된 추출물에 대한 유화(emulsion) 단계 및/또는 캡슐화(encapsulation) 단계를 또한 포함함을 특징으로 하는 공정.
  15. 청구항 1 내지 청구항 9 중 어느 한 항에 따른 식물 추출물을 건조 물질 중량 측면에서 0.1 내지 100% 포함하는, 화장품, 식품, 영양 또는 의약 조성물.
  16. 청구항 15에 있어서,
    캅셀제, 정제, 연질 캅셀제, 스틱, 사셰(sachet), 제조된 디쉬, 오일, 로션, 크림 또는 유화액의 형태로 존재함을 특징으로 하는 조성물.
  17. 청구항 1 내지 청구항 10 중 어느 한 항에 있어서,
    사람 또는 동물에서, 우울증 또는 불안증의 예방 또는 치료에의 사용을 위한 식물 추출물.
  18. 청구항 1 내지 청구항 10 중 어느 한 항에 있어서,
    사람에서 감정 장애(mood disorder), 발기 부전(erectile dysfunction), 또는 월경전 장애(premenstrual disorder)의 예방 또는 치료에의 사용을 위한, 식물 추출물.
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