KR20220112261A - Gal3와 인슐린 수용체 또는 인테그린의 상호작용을 차단하는 항체 및 그의 사용 방법 - Google Patents
Gal3와 인슐린 수용체 또는 인테그린의 상호작용을 차단하는 항체 및 그의 사용 방법 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20220112261A KR20220112261A KR1020227021110A KR20227021110A KR20220112261A KR 20220112261 A KR20220112261 A KR 20220112261A KR 1020227021110 A KR1020227021110 A KR 1020227021110A KR 20227021110 A KR20227021110 A KR 20227021110A KR 20220112261 A KR20220112261 A KR 20220112261A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- seq
- cdr1
- cdr2
- cdr3
- chain variable
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2851—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the lectin superfamily, e.g. CD23, CD72
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/13—Amines
- A61K31/155—Amidines (), e.g. guanidine (H2N—C(=NH)—NH2), isourea (N=C(OH)—NH2), isothiourea (—N=C(SH)—NH2)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
- A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
- A61K31/196—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino group being directly attached to a ring, e.g. anthranilic acid, mefenamic acid, diclofenac, chlorambucil
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
- A61K31/351—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom not condensed with another ring
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/439—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom the ring forming part of a bridged ring system, e.g. quinuclidine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
- A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
- A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/4985—Pyrazines or piperazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
- A61K31/513—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. cytosine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
- A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
- A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
- A61K31/52—Purines, e.g. adenine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
- A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
- A61K31/52—Purines, e.g. adenine
- A61K31/522—Purines, e.g. adenine having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. hypoxanthine, guanine, acyclovir
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
- A61K31/57—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms, e.g. pregnane or progesterone
- A61K31/573—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms, e.g. pregnane or progesterone substituted in position 21, e.g. cortisone, dexamethasone, prednisone or aldosterone
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7048—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/26—Glucagons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/28—Insulins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/12—Antidiarrhoeals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
- A61P5/50—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones for increasing or potentiating the activity of insulin
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6854—Immunoglobulins
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6872—Intracellular protein regulatory factors and their receptors, e.g. including ion channels
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value
- G01N2500/02—Screening involving studying the effect of compounds C on the interaction between interacting molecules A and B (e.g. A = enzyme and B = substrate for A, or A = receptor and B = ligand for the receptor)
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
Abstract
갈렉틴-3과 인슐린 수용체 또는 인테그린의 상호작용을 차단하는 방법 및 조성물이 본원에 개시된다. 또한, 개체에서 질환 또는 장애의 치료, 예를 들면, 당뇨병, 염증성 장 증후군, 비알코올성 지방간 질환, 및 비알코올성 지방간염의 치료를 위한 방법 및 조성물이 본원에 개시된다.
Description
관련 출원에 대한 교차 참조
본 출원은 그 전체가 참조에 의해 본원에 통합된, 2019년 12월 6일자로 출원된 미국 임시특허출원 제62/944,833호의 우선권의 이익을 주장한다.
서열 목록에 대한 참조
본 출원은 전자 형식의 서열 목록과 함께 제출되었다. 서열 목록은 2020년 12월 2일에 생성되고 최종 수정된, 파일명 SeqListingIMMUT006WO.TXT의 파일로 제공되며, 크기는 405,344 바이트이다. 전자 서열 목록의 정보는 그 전체가 참조에 의해 본원에 통합된다.
본 개시의 양태는 일반적으로 갈렉틴-3 (Gal3)과 인슐린 수용체 (INSR) 또는 인테그린 (ITG) 간 상호작용을 차단하거나 방해하는 항체 또는 그의 결합 단편에 관한 것이다. 또한, INSR 및/또는 ITG 기능 장애와 연관될 수 있는, 당뇨병, 염증성 장 증후군, 비알코올성 지방간 질환(NAFLD), 및 비알코올성 지방간염(non-alcoholic steatohepatitis)과 같은 (그러나, 이에 한정되지 않는) 질환 또는 장애를 치료하는 방법 및 조성물이 본원에 개시된다.
갈렉틴-3 (Gal3, GAL3)은 베타-갈락토시드에 대한 특이성을 갖는, 렉틴 또는 탄수화물-결합 단백질이다. 인간 세포에서, Gal3이 발현되고, 핵, 세포질, 세포 표면 및 세포외 공간에서 발현되고 발견될 수 있다. Gal3는 다양한 단백질에 있는 베타-갈락토오스 접합체를 인식하고 상호작용한다.
요약
갈렉틴-3 (Gal3)와 a) 인슐린 수용체 (INSR) 또는 b) 인테그린, 또는 a) 및 b) 모두간 상호작용을 차단하는 방법이 본원에서 개시된다. 일부 구체예에서, 상기 방법은 Gal3와 인슐린 수용체 또는 인테그린, 또는 인슐린 수용체 및 인테그린 모두의 상호작용을 Gal3에 선택적으로 결합하여 상기 Gal3와 인슐린 수용체 또는 인테그린, 또는 둘 모두의 상호작용을 차단하는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편과 접촉시키는 단계를 포함한다.
또한, 필요로 하는 개체에서 당뇨병을 치료하는 방법이 개시된다. 일부 구체예에서, 상기 방법은 Gal3에 선택적으로 결합하고 Gal3와 인슐린 수용체 또는 인테그린, 또는 둘 모두의 상호작용을 차단하는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 상기 개체에게 투여하는 단계를 포함하여, 그에 의해 상기 개체에서 당뇨병을 치료한다.
또한, 필요로 하는 개체에서 염증성 장 증후군을 치료하는 방법이 본원에 개시된다. 일부 구체예에서, 상기 방법은 Gal3에 선택적으로 결합하고 Gal3와 인테그린의 상호작용을 차단하는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 상기 개체에게 투여하는 단계를 포함하여, 그에 의해 상기 개체에서 염증성 장 증후군을 치료한다.
또한, 필요로 하는 개체에서 비알코올성 지방간 질환 (NAFLD)를 치료하는 방법이 본원에 개시된다. 일부 구체예에서, 상기 방법은 Gal3에 선택적으로 결합하고 Gal3와 인슐린 수용체의 상호작용을 차단하는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 상기 개체에게 투여하는 단계를 포함하여, 그에 의해 상기 개체에서 NAFLD를 치료한다.
또한, 필요로 하는 개체에서 비알코올성 지방간염 (NASH)을 치료하는 방법이 본원에 개시된다. 일부 구체예에서, 상기 방법은 Gal3에 선택적으로 결합하고 Gal3와 인슐린 수용체의 상호작용을 차단하는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 상기 개체에게 투여하는 단계를 포함하여, 그에 의해 상기 개체에서 NASH를 치료한다.
또한, (1) VL-CDR1, VL-CDR2, 및 VL-CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역; 및 (2) VH-CDR1, VH-CDR2, 및 VH-CDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역을 포함하는 항-Gal3 항체로서, 상기 VL-CDR1은 서열번호 100-128에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고, 상기 VL-CDR2는 서열번호 129-144에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 상기 VL-CDR3은 서열번호 145-168에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고, 상기 VH-CDR1은 서열번호 27-47에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고, 상기 VH-CDR2는 서열번호 48-69에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 및 상기 VH-CDR3은 서열번호 70-99에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 항체가 본원에 개시된다.
또한, 본원에서 개시된 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편 중 하나 이상을 포함하는 약학적 조성물이 본원에 개시된다. 이러한 약학적 조성물은 당뇨병, 염증성 장 질환, NAFLD, 또는 NASH, 또는 이들의 조합의 치료를 위해 사용될 수 있다.
또한, 인간 Gal3에 결합하고 인간 Gal3로의 결합에 대해 본원에 개시된 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편과 경쟁하는 항체가 본원에 개시된다. 일부 구체예에서, 상기 인간 Gal3에 결합하는 항체는 Gal3의 특정한 펩티드에 결합하는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편과 경쟁할 수 있다. 일부 구체예에서, 상기 인간 Gal3에 결합하는 항체는 특정한 빈(bin)에 속하는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편과 경쟁할 수 있다. 일부 구체예에서, 상기 인간 Gal3에 결합하는 항체는 6H6.2D6, 20H5.A3, 20D11.2C6, 4G2.2G6, 13H12.2F8, 19B5.2E6, 15G7.2A7, 23H9.2E4, 19D9.2E5, 2D10.2B2, 4A11.2B5, 14H10.2C9, 3B11.2G2, 13A12.2E5, 7D8.2D8, 및 15F10.2D6, 23B10.2B12, 6B3.2D3, F846C.1B2, F846C.1F5, F846C.1H12, F846C.1H5, F846C.2H3, F846TC.14A2, F846TC.14E4, F846TC.16B5, F846TC.7F10, F847C.10B9, F847C.11B1, F847C.12F12, F847C.26F5, F847C.4B10, F849C.8D10, F849C.8H3, F847.14H4 (847.14H4), mIMT001, IMT001(TB001), 또는 IMT006 (TB006)과 경쟁할 수 있다.
또한, Gal3와 인슐린 수용체, 또는 인테그린의 상호작용을 차단할 수 있는 항체를 확인하는(identify) 방법이 본원에 개시된다. 일부 구체예에서, 상기 방법은 (a) Gal3 단백질을 Gal3에 선택적으로 결합하는 항체 또는 그의 결합 단편과 접촉시켜, Gal3-항체 복합체를 형성시키는 단계; (b) 상기 Gal3-항체 복합체를 상기 인슐린 수용체 또는 인테그린 또는 둘 모두와 접촉시키는 단계; (c) 결합되지 않은 인슐린 수용체 또는 인테그린 또는 둘 모두를 제거하는 단계; (d) 상기 Gal3-항체 복합체에 결합된, 상기 인슐린 수용체 또는 인테그린, 또는 둘 모두를 검출하는 단계;를 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 인슐린 수용체, 또는 인테그린, 또는 둘 모두가 (d)에서 검출되지 않는 경우, 상기 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3와 인슐린 수용체 또는 인테그린, 또는 둘 모두의 상호작용을 방해할 수 있다.
또한, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 생산하는 방법이 본원에 개시된다. 일부 구체예에서, 상기 방법은 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 코딩하는 핵산을 세포에서 발현시키는 단계, 및 발현된 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 상기 세포로부터 단리하는 단계를 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 방법은 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 원하는 농도로 농축시키는 단계를 더 포함할 수 있다. 일부 구체예에서, 상기 세포는 포유동물 세포, 곤충 세포, 또는 박테리아 세포이다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 본원에서 개시된 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편 중 하나이다.
본 개시의 상세한 설명
당뇨병은 연장된 기간 동안 높은 혈당 수준을 특징으로 하는 대사 질환의 군이다. 3종의 주요한 당뇨병이 있다: 타입 I 당뇨병, 타입 II 당뇨병, 및 임신성 당뇨병. 타입 I 당뇨병은 인슐린-생산 베타 세포의 감소 때문에 췌장이 충분한 인슐린을 생산하지 못하는 것에 의해 유발된다. 타입 II 당뇨병은 인슐린 저항성을 특징으로 하고, 비만, 불량한 식이, 및 스트레스를 포함한 다양한 생활방식, 식이, 및 유전적 인자들에서 기인될 수 있다. 임신성 당뇨병은 당뇨병의 이력이 없는 임신 여성이 고혈당 수준을 발현하는 경우 발생한다.
염증성 장 질환 (IBD)은 소장과 결장의 염증성 질환을 포괄하는 일반적인 의학 용어이다. 2개의 가장 우세한 IBD는 크론병 및 궤양성 대장염이고, 이들은 뚜렷한 발현 및 잠재적 치료법을 갖는다. IBD의 원인은 정확하게 알려져 있지 않으나, 미생물총(microbiota)의 활성 및 식이를 포함하는 것으로 생각된다. 증상은 위장 기관의 비정상적 면역 활성 및 염증과 연관된다. 일부 치료는 면역억제제 (예를 들면, 메살라진, 코르티코스테로이드), 또는 미생물총 중 특정한 박테리아를 억제하는 항생제를 포함하나, 지속적인 완화는 수술에 의해서만 가능할 수 있다. IBD의 효과적인 치료에 대한 지속적인 요구가 존재한다.
종종 지방간 질환(fatty liver disease)으로로 지칭되는, 간 지방증(hepatic steatosis)은 간의 세포에서 지질의 비정상적 축적을 일반적으로 특징으로 하는 질병이다. 간 지방증은 전세계적으로 수백만명에게 영향을 미친다. 예를 들면, 지방간 질환의 유병률은 전세계 다양한 국가에서 10-24% 범위로 추정되고 있다. 지방간 질환은 다양한 원인을 가질 수 있다. 예를 들면, 비알코올성 지방간 질환 (NAFLD)은 일반적으로, 알려진 이차적 원인이 없는 간 지방증을 특징으로 하는 다양한 간 지질 질환을 의미한다. NAFLD는 (a) 간세포 손상의 조직학적 증거의 부재 하에 지방증의 존재로 정의되는, 비알코올성 간 지방(NAFL), 및 (b) 간세포 손상 및 염증을 수반한 간 지방증인 비알코올성 지방간염 (NASH)로 세분될 수 있고; NASH는 섬유증과 함께 또는 섬유증 없이 일어날 수 있으나, 섬유증 및 간경화증으로 진행될 수 있다. NAFLD는 일반적으로 비만, 이상지질혈증, 당뇨병 및 대사 증후군을 포함한, 에너지 대사 병리와 연관된다. NAFLD의 유병률은 높다. 전체 집단의 유병률은 20%로 추정되고, NASH의 유병률은 3-5%인 것으로 추정된다. 비만 또는 당뇨병 환자에서 NAFLD의 유병률은 ~70%로 추정되고, 이상지질혈증 환자 중에서 NAFLD의 유병률은 ~50%로 추정된다. 그러나, 현재 NAFLD/NASH의 치료를 위한 허가된 약품은 없다.
갈렉틴-3 (Gal3)은 세포 증식, 부착, 분화, 혈관생성, 및 아폽토시스에서 중요한 역할을 수행한다. 이 활성은 적어도 부분적으로, 다른 면역 조절 단백질, 신호전달 단백질, 및 기타 세포 표면 마커에 대한 결합 친화도 및 면역조절 특성에서 기인한다. Gal3는 독특한 N-말단 및 C-말단 도메인에 의해 기능한다. N-말단 도메인 (동형(isoform) 1: 아미노산 1-111)은 탠뎀 반복 도메인 (TRD, 동형 1: 아미노산 36-109)을 포함하고, 주로 Gal3의 올리고머화를 담당한다. C-말단 도메인 (동형 1: 아미노산 112-250)은 탄수화물-인식-결합 도메인 (CRD)를 포함하고, 이는 β-갈락토시드에 결합한다.
갈렉틴-3 (Gal3)은 본원에서 면역조절 활성을 갖는 것으로 시사된다. 이것의 일 예는 Gal3과 TIM-3 (T-cell immunoglobulin and mucin-domain containing-3) 간 상호작용이고, 이는 T 세포 활성화와 같은 면역 반응의 억제를 유발하고, 암 세포가 면역 제거(immune responses)를 회피할 수 있게 한다. 항-Gal3 항체 및 사용 방법이 WO 2019/023247 및 WO 2020/160156에서 탐색되고, 이들 각각은 참조에 의해 전체로 명시적으로 본원에 포함된다.
또한, Gal3는 비만자에서 상승되는 것으로 확인되었고, 이러한 개체들에서 인슐린 저항성 및 당 불내성(glucose intolerance)을 유발하는 것으로 사료된다. Gal3는 인슐린 수용체에 직접적으로 결합하여 하류 신호전달을 억제하는 것으로 밝혀졌다. 따라서, Gal3는 비만-유도 인슐린 저항성 및 만성 조직 염증에 도움이 될 수 있다.
본원에서, 일부 구체예에서, 당뇨병, 염증성 장 질환, 비알코올성 지방간 질환, 및/또는 비알코올성 지방간염을 갖거나, 갖는 것으로 의심되거나, 또는 발병할 위험에 있는 개체를 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편으로 치료하는 방법이 개시된다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3와 인슐린 수용체의 상호작용을 차단한다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3와 인테그린의 상호작용을 차단한다. 추가적으로, Gal3와 인슐린 수용체 및/또는 Gal3와 인테그린의 상호작용을 차단하는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는 조성물이 제공된다.
일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 다양한 구체예가 본원에서 제공된다. 일부 구체예에서, 다양한 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3와 Gal3가 결합하는 다른 분자 간 상호작용을 차단할 수 있다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 임의의 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편, 또는 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 배열(arrangement)이 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자에 의해 대체될 수 있다. 따라서, 본 개시는 또한 항체 또는 그의 결합 단편을 언급할 때 항원 결합 분자도 고려하나, 간결성을 위해, 본 개시는 종종 간단하게 항체 또는 그의 결합 단편을 지칭한다.
일부 구체예에서, 본원에서 개시되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3와 인슐린 수용체 (INSR)의 상호작용을 차단한다. Gal3과 INSR의 상호작용을 강하게 (예를 들면, 90% 이상) 차단하는 일부 예시적인 항-Gal3 항체는 6H6.2D6, 20H5.A3, 20D11.2C6, 4G2.2G6, 13H12.2F8, 19B5.2E6, 15G7.2A7, 23H9.2E4, 19D9.2E5, 2D10.2B2, 4A11.2B5, 14H10.2C9, 3B11.2G2, 및 13A12.2E5를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. Gal3과 INSR의 상호작용을 중등도로(moderately) (예를 들면, 75% 이상) 차단하는 일부 예시적인 항-Gal3 항체는 7D8.2D8 및 15F10.2D6을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. Gal3과 INSR의 상호작용을 최소한으로 (예를 들면, 30% 이상) 차단하는 일부 예시적인 항-Gal3 항체는 9H2.2H1, 12G5.D7, 13G4.2F8, 및 24D12.2H9를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 임의의 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편, 또는 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 배열이 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자에 의해 대체될 수 있다. 용어 "항원 결합 분자 (antigen binding molecule)"는 항체 및 그의 결합 단편을 포함하고, 옵션들의 보다 넓은 속을 의미한다는 것에 주목한다.
일부 구체예에서, 본원에서 개시되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3와 인테그린 베타-1 (ITGb1)의 상호작용을 차단한다. Gal3와 ITGb1의 상호작용을 강하게 (예를 들면, 90% 이상) 차단하는, 일부 예시적 항-Gal3 항체는 TB001, TB006 및 846.1F5를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. Gal3와 ITGb1의 상호작용을 중등도로 (예를 들면, 40% 내지 60%) 차단하는, 일부 예시적 항-Gal3 항체는 3B11, 2D10, 7D8, 13A12, 14H10, 15F10, 20D11, 846.2H3, 846T.14A2, 847.10B9, 847.12F12, 및 847.26F5를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. Gal3와 ITGb1의 상호작용을 차단하지 않는, 일부 예시적 항-Gal3 항체는 6B3.2D3, 및 847.14H4를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 임의의 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편, 또는 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 배열이 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자에 의해 대체될 수 있다.
일부 구체예에서, 본원에서 개시되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3와 인테그린 알파-3 (ITGa3)의 상호작용을 차단한다. Gal3와 ITGa3의 상호작용을 강하게 (예를 들면, 90% 이상) 차단하는, 일부 예시적 항-Gal3 항체는 TB001, TB006, 2D10, 3B11, 7D8, 13A12, 14H10, 15F10, 19B5, 20D11.2C6, 20H5, 23H9, 846.1B2, 846.1F5, 846.1H5, 846.1H12, 846.2H3, 846T.14A2, 846T.14E4, 846T.16B5, 847.4B10, 847.10B9, 84712F12, 및 847.26F5를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. Gal3와 ITGa3의 상호작용을 약하게 (35% 미만) 차단하는, 일부 예시적 항-Gal3 항체는 6B3.2D3, 9H2.2H10, 12G5.D7, 13G4.2F8, 847.14H4, 및 847.11B1을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 임의의 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편, 또는 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 배열이 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자에 의해 대체될 수 있다.
일부 구체예에서, 본원에서 개시되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3와 인테그린 베타-3 (ITGb3)의 상호작용을 차단한다. Gal3와 ITGb3의 상호작용을 강하게 (예를 들면, 90% 이상) 차단하는, 일부 예시적 항-Gal3 항체는 TB001, TB006, 2D10, 3B11.2G2, 13A12.2E5, 14H10.2C9, 19B5, 20D11.2C6, 20H5.A3, 23H9.2E4, 846.1B2, 846.1F5, 846.1H12, 846.2H3, 846T.14A2, 846T.14E4, 846T.16B5, 847.10B9, 847.12F12, 및 847.26F5를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. Gal3와 ITGb3의 상호작용을 약하게 (10% 미만) 차단하는, 일부 예시적 항-Gal3 항체는 6B3.2D3, 9H2.2H10, 12G5.D7, 13G4.2F8, 847.11B1, 및 847.14H4를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 임의의 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편, 또는 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 배열이 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자에 의해 대체될 수 있다.
일부 구체예에서, 본원에서 개시되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3와 인테그린 알파-V (ITGaV)의 상호작용을 차단한다. Gal3와 ITGaV의 상호작용을 강하게 (예를 들면, 90% 이상) 차단하는, 일부 예시적 항-Gal3 항체는 TB001, TB006, 2D10, 3B11.2G2, 14H10.2C9, 19B5, 20D11.2C6, 20H5.A3, 23H9.2E4, 846.1B2, 846.1F5, 846.2H3, 846T.14A2, 846T.16B5, 847.10B9, 847.12F12, 847.26F5, 및 849.8D10을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. Gal3와 ITGaV의 상호작용을 약하게 (30% 미만) 차단하는, 일부 예시적 항-Gal3 항체는 6B3.2D3, 9H2.2H10, 12G5.D7, 13G4.2F8, 847.11B1, 및 847.14H4를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 임의의 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편, 또는 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 배열이 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자에 의해 대체될 수 있다.
일부 구체예에서, 본원에서 개시되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 개체에서 체중 증가, 인슐린 저항성, 간 지방증, 또는 간 기능장애, 또는 이들의 조합을 감소시킬 수 있다.
일부 구체예에서, Gal3와 인테그린의 상호작용의 차단은 림프구 부착을 감소시킨다. 일부 구체예에서, 본원에서 개시되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 개체에서 염증을 감소시킨다.
일부 구체예에서, 본원에서 개시되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 공복 혈당 수준의 변화를 감소시키거나, 또는 C-펩티드 수준을 회복시키거나 또는 둘 모두이고, 타입 I 당뇨병 및/또는 타입 II 당뇨병을 위한 치료로 이용될 수 있다.
일부 구체예에서, 본원에서 개시되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 염증-유도 결장 길이 감소의 회복 및 순환 염증성 사이토카인의 감소 중 둘 모두는 아닐지라도, 적어도 하나는 가져올 수 있다.
정의
하기 상세한 설명에서, 본원의 일부를 형성하는 첨부 도면을 참조한다. 도면에서, 유사한 기호는 문맥에서 달리 지시하지 않는 한, 일반적으로 유사한 구성요소를 식별한다. 상세한 설명, 도면 및 청구항에 기재된 예시적 구체예는 한정을 의미하지 않는다. 본원에 제시된 주제의 사상 또는 범위를 벗어나지 않으면서, 다른 구체예가 이용될 수 있고, 다른 변경이 이루어질 수 있다. 본원에서 일반적으로 기재되고 도면에 도시되는 바와 같이, 본 개시의 양태는 광범위한 상이한 구성으로 배열, 치환, 조합, 분리 및 디자인될 수 있다는 것을 쉽게 이해할 것이며, 이들 모두가 본원에서 명시적으로 고려된다.
본원에서 사용되는 기술 및 과학 용어는, 달리 정의하지 않는 한, 청구된 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 전술된 일반적 설명 및 하기의 상세한 설명은 예시 및 설명만을 위한 것이며, 청구된 발명을 한정하지 않는 것으로 이해되어야 한다.
본원에서 사용된 섹션 헤딩은 구성의 목적만을 위한 것이고 기술되는 대상(subject matter)을 한정하는 것으로 해석되어서는 안 된다.
본 출원에서, 단수의 사용은 구체적으로 달리 명시되지 않으면, 복수를 포함한다. 본원 및 첨부된 청구항에서 사용된, 단수형 ("a," "an" 및 "the")은 문맥이 달리 명시적으로 지시하지 않는 경우, 복수 지시물을 포함한다. 본 출원에서, 달리 명시되지 않으면, "또는(or)"의 사용은 "및/또는 (and/or)"을 의미한다. 또한, 용어 "포함하는(including)" 및 기타 형태, 예를 들면, "포함하다", 및 "포함된"은 한정하지 않는다.
"약 (about)"은 기준 수량, 수준, 값, 수, 빈도, 퍼센트, 치수, 크기, 양, 중량 또는 길이에 대해 30, 25, 20, 15, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 또는 1% 만큼 가변하는 수량, 수준, 값, 수, 빈도, 퍼센트, 치수, 크기, 양, 중량 또는 길이를 의미한다.
본 명세서 전체에서, 문맥이 달리 요구하지 않는 한, 단어 "포함하다 (comprise)", "포함한다 (comprises)" 및 "포함하는 (comprising)"은 언급된 단계 또는 요소 또는 단계들 또는 요소들의 그룹의 포함을 의미하지만, 임의의 다른 단계 또는 요소 또는 단계들 또는 요소들의 그룹을 배제하지 않는 것으로 이해될 것이다. "구성되는 (consisting of)"은 "구성되는"이라는 문구 뒤에 오는 것을 포함하고 이에 한정되는 것을 의미한다. 따라서, 문구 "구성되는"은 나열된 요소가 요구되거나 또는 필수이며, 그 외의 다른 요소가 존재하지 않을 수 있음을 나타낸다. "필수적으로 구성되는 (consisting essentially of)"은 상기 문구 뒤에 나열된 임의의 요소를 포함하고, 나열된 요소에 대해 개시에서 특정된 활성 또는 작용을 방해하지 않거나 또는 그에 기여하지 않는 기타 요소로 제한되는 것을 의미한다. 따라서, 문구 "필수적으로 구성되는"은 나열된 요소는 요구되거나 또는 필수이지만, 기타 요소는 선택적이고, 나열된 요소의 활성 또는 작용에 실질적으로 영향을 주는지 여부에 따라 존재할 수도 있고 또는 존재하지 않을 수 있음을 나타낸다.
본원에서 사용된, 용어 "개체(들) (individual(s))", "대상(들) (subject(s))" 및 "환자(들) (patient(s))"는 임의의 포유동물을 의미한다. 일부 구체예에서, 상기 포유동물은 인간이다. 일부 구체예에서, 상기 포유동물은 비-인간 (non-human)이다. 상기 용어 중 어느 것도 의료 종사자 (예를 들면, 의사, 공인 간호사, 개업 간호사, 의사 조수, 간호조무사 또는 호스피스 종사자)의 (예를 들면, 지속적 또는 간헐적) 관리를 특징으로 하는 상황을 필요로 하거나 또는 그에 한정되지 않는다.
본원에서 사용된, 용어 "폴리펩티드 (polypeptide)", "펩티드 (peptide)" 및 "단백질 (protein)"은 임의의 길이의 아미노산의 폴리머를 지칭하기 위해 본원에서 호환적으로 사용된다. 폴리머는 선형, 고리형 또는 분지형일 수 있고, 이는 변형된 아미노산을 포함할 수 있으며, 이는 비-아미노산에 의해 중단될 수 있다. 상기 용어는 또한 예를 들어 술페이트화, 글리코실화, 지질화, 아세틸화, 인산화, 요오드화, 메틸화, 산화, 단백질분해 가공 (proteolytic processing), 인산화, 프레닐화 (prenylation), 라세미화 (racemization), 셀레닐화 (selenoylation), 아미노산의 단백질로의 tRNA 매개 부가 (transfer-RNA mediated addition), 예를 들면, 아르기닐화, 유비퀴틴화, 또는 임의의 기타 조작, 예를 들면, 표지화 성분과의 접합을 통해 변형된 아미노산 폴리머를 포함한다.
본원에서 사용된, 용어 "아미노산 (amino acid)"은 글리신, 및 D 또는 L 광학 이성질체 모두를 포함한 천연 및/또는 비천연 또는 합성 아미노산, 및 아미노산 유사체 및 펩티드모방체 (peptidomimetics)를 의미한다.
지정된 단백질 "로부터 유래된 (derived from)" 폴리펩티드 또는 아미노산 서열은 폴리펩티드의 기원을 의미한다. 바람직하게는, 폴리펩티드는 서열에 있어서 코딩된 폴리펩티드의 아미노산 서열과 본질적으로 동일한 아미노산 서열, 또는 그의 일부를 가지며, 상기 일부는 적어도 10-20개의 아미노산, 또는 적어도 20-30개의 아미노산, 또는 적어도 30-50개의 아미노산으로 구성되거나, 또는 상기 서열로 코딩된 폴리펩티드와 면역학적으로 식별 가능하다. 이러한 용어는 또한 지정된 핵산 서열로부터 발현된 폴리펩티드를 포함한다.
본원에서 사용된, 용어 "항체 (antibody)"는 당업자에 의해 그에 주어지는 의미를 나타내고, 또한, 에피토프에 꼭 맞고 이를 인식하는 특이적 형태를 갖는 임의의 폴리펩티드 사슬-함유 분자 구조를 포함하는 것으로 의도되며, 하나 이상의 비-공유 결합 상호작용이 상기 분자 구조와 에피토프 간의 복합체를 안정화시킨다. 항체는 다중클론 항체일 수 있지만, 단일클론 항체가 세포 배양에 의해 또는 재조합으로 생산될 수 있고, 항원성을 감소시키기 위해 변형될 수 있기 때문에 단일클론 항체가 바람직하다.
전체 면역글로불린 (또는 이의 재조합 대응물) 외에, 에피토프 결합 부위를 포함하는 면역글로불린 단편 또는 "결합 단편 (binding fragment)" (예를 들면, Fab', F(ab')2, 단쇄 가변 단편 (scFv), 디아바디 , 미니바디, 나노바디, 단일-도메인 항체 (sdAb), 또는 기타 단편)이 본 발명에서 항체 모이어티로서 유용하다. 그러한 항체 단편은 리신 (ricin), 펩신, 파파인 또는 기타 프로테아제 절단에 의해 전체 면역글로불린으로부터 생성될 수 있다. 재조합 면역글로불린 기술을 이용하여 최소 면역글로불린이 디자인될 수 있다. 예를 들어, 본 발명에서 사용하기 위한 "Fv" 면역글로불린은 가변 경쇄 영역을 가변 중쇄 영역에 펩티드 링커 (예를 들면, 폴리-글리신, 또는 알파 헬릭스 또는 베타 쉬트(beta sheet) 모티프를 형성하지 않는 또 다른 서열)를 통해 연결함으로써 생성될 수 있다. 나노바디 또는 단일-도메인 항체는 또한 대안적 개체, 예를 들면, 단봉낙타 (dromedaries), 낙타, 라마, 알파카 또는 상어로부터 유래될 수 있다. 일부 구체예에서, 항체는 접합체, 예를 들면, 페길화 항체, 약물, 방사성 동위원소, 또는 독소 접합체일 수 있다. 특정 에피토프 또는 에피토프들의 조합에 대한 단일클론 항체는 마커를 발현하는 세포 집단의 표적화 및/또는 고갈을 가능하게 할 것이다. 마커(들)를 발현하는 세포 집단을 스크리닝하기 위해 단일클론 항체를 사용하는 다양한 기법들이 활용될 수 있고, 항체-코팅된 자기 비드를 사용한 자기 분리, 고체 매트릭스 (즉, 플레이트)에 부착된 항체를 사용한 "패닝 (panning)", 및 유세포 분석을 포함한다 (예를 들면, 전체가 참조에 의해 본원에 명시적으로 통합된, 미국 특허 제5,985,660호).
당해 분야에 알려진 바와 같이, 용어 "Fc 영역"은 면역글로불린 중쇄의 C-말단 영역을 정의하는데 사용된다. "Fc 영역"은 원형(native) 서열 Fc 영역 또는 변이체 Fc 영역일 수 있다. 면역글로불린 중쇄의 Fc 영역의 경계는 변할 수 있으나, 인간 IgG 중쇄 Fc 영역은 통상 위치 Cys226에 있는 아미노산 잔기 또는 Pro230으로부터 카르복시-말단까지 이어지는 것으로 정의된다. Fc 영역에서 잔기의 넘버링은 Kabat에서와 같이 EU 인덱스의 넘버링이다 (Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md., 1991). 면역글로불린의 Fc 영역은 일반적으로 2개의 불변 도메인, CH2 및 CH3을 포함한다. 당해 분야에 알려진 바와 같이, Fc 영역은 이량체 또는 단량체 형태로 존재할 수 있다.
당해 분야에 알려진 바와 같이, 항체의 "불변 영역 (constant region)"은 단독이거나 또는 조합된, 항체 경쇄의 불변 영역 또는 항체 중쇄의 불변 영역을 의미한다.
항체의 "가변 영역 (variable region)"은 단독이거나 또는 조합된, 항체 경쇄의 가변 영역 또는 항체 중쇄의 가변 영역을 의미한다. 당해 분야에 알려진 바와 같이, 중쇄 및 경쇄의 가변 영역은 각각 초가변 영역(hypervariable region)으로도 알려진 3개의 상보성 결정 영역 (CDR)에 의해 연결된 4개의 프레임워크 영역 (FR)으로 구성되며, 항체의 항원 결합 부위의 형성에 기여한다. 대상 가변 영역의 변이체, 특히 CDR 영역 외부 (즉, 프레임워크 영역 내)의 아미노산 잔기의 치환을 갖는 변이체가 요구되는 경우, 적절한 아미노산 치환, 바람직하게는 보존적 아미노산 치환이 대상 가변 영역을, 대상 가변 영역과 동일한 정규(canonical) 클래스의 CDR1 및 CDR2 서열을 함유하는 다른 항체의 가변 영역과 비교하는 것에 확인할 수 있다 (Chothia and Lesk, J Mol Biol 196(4): 901-917, 1987).
특정한 구체예에서, CDR의 명확한 기술 및 항체의 결합 부위를 구성하는 잔기의 확인은 항체의 구조를 해석하고 및/또는 항체-리간드 복합체의 구조를 해석하는 것에 의해 이루어진다. 특정한 구체예에서, 이는 X-선 결정학과 같은 당업자에게 알려진 다양한 기법들에 의해 달성될 수 있다. 특정한 구체예에서, 다양한 분석 방법을 이용하여 CDR 영역을 확인하거나 또는 근사화할 수 있다. 일부 구체예에서, 다양한 분석 방법을 이용하여 CDR 영역을 확인하거나 또는 근사화할 수 있다. 이러한 방법의 예로는 Kabat 정의, Chothia 정의, IMGT 접근 방식 (Lefranc et al., 2003) Dev Comp Immunol. 27:55-77), Paratome (Kunik et al., 2012, Nucl Acids Res. W521-4)과 같은 계산 프로그램 (computational programs), AbM 정의, 및 입체배좌 정의 (conformational definition)를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
Kabat 정의는 항체에서 잔기를 넘버링하는 표준이며, 일반적으로 CDR 영역을 확인하는데 사용된다. 예를 들어, Johnson & Wu, 2000, Nucleic Acids Res., 28: 214-8을 참조한다. Chothia 정의는 Kabat 정의와 유사하나, Chothia 정의는 특정한 구조적 루프 영역의 위치를 고려한다. 예를 들어, Chothia et al., 1986, J. Mol. Biol., 196: 901-17; Chothia et al., 1989, Nature, 342: 877-83을 참조한다. AbM 정의는 항체 구조를 모델링하는 Oxford Molecular Group에 의해 생성된 통합 컴퓨터 프로그램 제품군을 사용한다. 예를 들어, Martin et al., 1989, Proc Natl Acad Sci (USA), 86:9268-9272; "AbM.TM., A Computer Program for Modeling Variable Regions of Antibodies," Oxford, UK; Oxford Molecular, Ltd.를 참조한다. AbM 정의는 지식 데이터베이스 및 ab initio 방법, 예를 들면, Samudrala et al., 1999, "Ab Initio Protein Structure Prediction Using a Combined Hierarchical Approach," in PROTEINS, Structure, Function and Genetics Suppl., 3:194-198에 기재된 방법의 조합을 사용하여 1차 서열로부터 항체의 3차 구조를 모델링한다. 접촉 정의 (contact definition)는 이용 가능한 복잡한 결정 구조의 분석을 기반으로 한다. 예를 들어, MacCallum et al., 1996, J. Mol. Biol., 5:732-45를 참조한다. 본원에서 CDR의 "입체배좌 정의"로 지칭되는 또 다른 접근방식에서, CDR의 위치는 항원 결합에 엔탈피 기여하는 잔기로서 확인될 수 있다. 예를 들어, Makabe et al., 2008, Journal of Biological Chemistry, 283:1156-1166을 참조한다. 또 다른 CDR 경계 정의 (CDR boundary definitions)는 전술된 접근 방식들 중 하나를 엄격하게 따르지 않을 수 있으나, 그럼에도 불구하고 Kabat CDR들의 적어도 일부와 중복될 것이고, 특정 잔기 또는 잔기들의 그룹이 항원 결합에 유의한 영향을 주지 않는다는 예측 또는 실험 결과를 고려하여 이들은 단축되거나 또는 길어질 수 있다. 본원에서 사용된, CDR은 접근방식들의 조합을 포함하여, 당해 분야에 알려진 임의의 접근방식에 의해 정의된 CDR을 지칭할 수 있다. 본원에서 사용된 방법은 이들 접근방식 중 하나에 따라 정의된 CDR을 이용할 수 있다. 1개 초과의 CDR을 포함하는 임의의 주어진 구체예에 대해, CDR은 Kabat, Chothia, 연장된 (extended), IMGT, Paratome, AbM, 및/또는 입체배좌 정의, 또는 임의의 전술한 것들의 조합에 따라 정의될 수 있다.
항체와 관련하여 본원에서 사용된, 용어 "경쟁하다 (compete)"는 제1 항체 또는 그의 항원-결합 부분이 제2 항체 또는 그의 항원-결합 부분의 결합과 충분히 유사한 방식으로 에피토프에 결합하여, 상기 제2 항체의 존재시 상기 제1 항체의 그의 동족(cognate) 에피토프와의 결합의 결과가 상기 제2 항체의 부재시 상기 제1 항체의 결합과 비교하여 검출 가능하게 감소되는 것을 의미한다. 상기 제2 항체의 그의 에피토프로의 결합이 또한 상기 제1 항체의 존재시 검출 가능하게 감소되는 것인 대안이 가능하나, 반드시 그런 것은 아니다. 즉, 제2 항체가 제1 항체의 그의 각 에피토프에로의 결합을 억제하지 않으나, 상기 제1 항체가 상기 제2 항체의 그의 에피토프로의 결합을 억제할 수 있다. 그러나, 각 항체가 다른 항체와 그의 동족 에피토프 또는 리간드의 결합을 검출가능하게 억제하는 경우, 동일하거나 더 크거나, 또는 더 작은 정도인지 여부에 관계없이, 상기 항체들은 그들의 각 에피토프(들)의 결합에 대해 서로 "교차-경쟁 (cross-compete)"한다고 한다. 경쟁 및 교차-경쟁 항체 모두는 본 발명에 포함된다. 그러한 경쟁 또는 교차-경쟁이 일어나는 기전 (예를 들면, 입체 장애, 입체배좌 변화, 또는 공통 에피토프 또는 그의 일부에의 결합)에 관계없이, 숙련된 기술자는 본원에 제공된 교시를 기반으로, 그러한 경쟁 및/또는 교차-경쟁 항체가 포괄되며, 본원에 개시된 방법에 유용할 수 있다는 것을 이해할 것이다.
에피토프에 "우선적으로 결합하는 (preferentially binds)" 또는 "특이적으로 결합하는 (specifically binds)" (본원에서 호환적으로 사용됨) 항체는 당해 분야에서 잘 이해되는 용어이고, 그러한 특이적 또는 우선적 결합을 결정하는 방법이 또한 당해 분야에 잘 알려져 있다. 분자가 대안적인 세포 또는 물질과 반응하거나 결합하는 것에 비해 특정 세포 또는 물질과 더 빈번하게, 및/또는 더 빠르게, 및/또는 더 큰 지속 시간으로 및/또는 더 큰 친화력으로 반응 또는 결합하는 경우에, 상기 분자는 "특이적 결합" 또는 "우선적 결합"을 나타낸다고 한다. 항체가 표적과의 결합이 다른 물질과의 결합보다, 더 큰 친화도, 및/또는 결합력(avidity)으로, 및 /또는 더 용이하게, 및/또는 더 큰 지속 시간으로 결합하는 경우에, 상기 항체는 표적에 "특이적 결합" 또는 "우선적으로 결합"한다. 예를 들어, CFD 에피토프에 특이적으로 또는 우선적으로 결합하는 항체는 다른 CFD 에피토프 또는 비-CFD 에피토프에 결합하는 것보다, 상기 에피토프에 더 큰 친화도, 및/또는 결합력으로, 및/또는 더 용이하게, 및/또는 더 큰 지속 시간으로 결합하는 항체이다. 또한, 예를 들어, 제1 표적에 특이적으로 또는 우선적으로 결합하는 항체 (또는 모이어티 또는 에피토프)가 제2 표적에 특이적으로 또는 우선적으로 결합할 수 있거나 또는 결합하지 않을 수 있다는 것이 이러한 정의를 읽음으로써 이해된다. 따라서, "특이적 결합" 또는 "우선적 결합"은 배타적(exclusive) 결합을 (포함할 수 있으나) 반드시 요구되는 것은 아니다. 일반적으로, 반드시 그런 것은 아니지만, 결합에 대한 언급은 우선적 결합을 의미한다.
본원에서 사용된, 용어 "항원 결합 분자 (antigen binding molecule)"는 항원에 결합하는 항원 결합 부분, 및 선택적으로, 상기 항원 결합 부분의 결합을 촉진하는 형태(conformation)를 취할 수 있게 하거나, 항원 결합 분자에 일부 추가적인 특성을 제공하는 스캐폴드 또는 프레임워크 부분을 포함하는 분자를 의미한다. 일부 구체예에서, 상기 항원은 Gal3이다. 일부 구체예에서, 상기 항원 결합 부분은 항원에 결합하는 항체로부터의 하나 이상의 CDR을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 항원 결합 부분은 항원에 결합하는 항체의 중쇄, 또는 항원에 결합하는 항체의 경쇄로부터의 모든 3개의 CDR을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 항원 결합 부분은 항원에 결합하는 항체로부터의 모든 6개의 CDR (중쇄로부터의 3개 및 경쇄로부터의 3개)을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 항원 결합 부분은 항체 단편이다.
항원 결합 분자의 비한정적 예는 항체, 항체 단편 (예를 들면, 항체의 항원 결합 단편), 항체 유도체, 및 항체 유사체 (antibody analog)를 포함한다. 추가적인 특정한 예는 scFv(single-chain variable fragment), 나노바디(nanobody) (예를 들면, 카멜리드(camelid) 중쇄 항체의 VH 도메인; VHH 단편, Cortez-Retamozo et al., Cancer Research, Vol. 64:2853-57, 2004 참조), Fab 단편, Fab' 단편, F(ab')2 단편, Fv 단편, Fd 단편, 및 상보성 결정 영역(complementarity determining region: CDR) 단편을 포함하나, 그에 한정되지 않는다. 이러한 분자들은 포유동물 소스, 예를 들면, 인간, 마우스, 랫트, 토끼, 돼지, 개, 고양이, 말, 당나귀, 기니어 피그, 염소, 또는 카멜리드로부터 유래될 수 있다. 항체 단편은 표적 항원의 결합에 대해 온전한(intact) 항체와 경쟁할 수 있고, 단편은 온전한 항체의 변형(예를 들면, 효소 또는 화학적 절단)에 의해 생산되거나 또는 재조합 DNA 기술 또는 펩티드 합성을 이용하여 처음부터(de novo) 합성될 수 있다. 상기 항원 결합 분자는 예를 들면, 이식된 CDR 또는 CDR 유도체를 갖는 대안적인 단백질 스캐폴드, 또는 인공 스캐폴드를 포함할 수 있다. 그러한 스캐폴드는 예를 들면, 항원 결합 분자의 3차원 구조를 안정화시키기 위해 도입된 돌연변이를 포함하는 항체-유래 스개폴드, 및, 예를 들면, 생체적합성 폴리머를 포함하는 완전한 합성 스캐폴드를 포함하나, 그에 한정되지 않는다. 예를 들면, Korndorfer et al., 2003, Proteins: Structure, Function, and Bioinformatics, Volume 53, Issue 1:121-129 (2003); Roque et al., Biotechnol. Prog. 20:639-654 (2004)를 참조한다. 또한, 펩티드 항체 모방체 (peptide antibody mimetics) ("PAMs"), 및 스캐폴드로서 피브로넥틴 성분을 이용하는 항체 모방체에 기반한 스캐폴드가 이용될 수 있다.
항원 결합 분자는 또한 단일 펩티드 사슬 또는 복수의 폴리펩티드 사슬 내로 통합된 하나 이상의 항체 단편을 포함하는 단백질을 포함할 수 있다. 예를 들면, 항원 결합 분자는 디아바디 (예를 들면, EP 404,097; WO 93/11161; 및 Hollinger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, Vol. 90:6444-6448, 1993 참조); 인트라바디(intrabody); 도메인 항체 (단일 VL 또는 VH 도메인, 또는 펩티드 링커에 의해 연결된 2개 이상의 VH 도메인; Ward et al., Nature, Vol. 341:544-546, 1989 참조); 맥시바디(maxibody) (Fc 영역에 융합된 2개의 scFv, Fredericks et al., Protein Engineering, Design & Selection, Vol. 17:95-106, 2004 및 Powers et al., Journal of Immunological Methods, Vol. 251:123-135, 2001 참조); 트리아바디(triabody); 테트라바디(tetrabody); 미니바디(minibody) (CH3 도메인에 융합된 scFv; Olafsen et al., Protein Eng Des Sel., Vol.17:315-23, 2004 참조); 펩티바디(peptibody) (Fc 영역에 부착된 하나 이상의 펩티드, WO 00/24782 참조); 선형 항체 (상보적 경쇄 폴리펩티드와 함께 1쌍의 항원 결합 영역을 형성하는 1쌍의 탠뎀 Fd 세그먼트 (VH-CH1-VH-CH1), Zapata et al., Protein Eng., Vol. 8:1057-1062, 1995 참조); 소모듈 면역약제(small modular immunopharmaceutical) (U.S. Patent Publication No. 20030133939 참조); 및 면역글로불린 융합 단백질 (예를 들면, IgG-scFv, IgG-Fab, 2scFv-IgG, 4scFv-IgG, VH-IgG, IgG-VH, 및 Fab-scFv-Fc)을 포함할 수 있으나, 그에 한정되지 않는다.
특정한 구체예에서, 항원 결합 분자는 예를 들면, 면역글로불린의 구조를 가질 수 있다. "면역글로불린(immunoglobulin)"은 4량체 분자이고, 각각의 4량체는 폴리펩티드 사슬의 2개의 동일한 쌍을 포함하고, 각 쌍은 하나의 "경"쇄 (약 25 kDa) 및 하나의 "중"쇄 (약 50-70 kDa)를 갖는다. 각 사슬의 아미노-말단 부분은 항원 인식을 주로 담당하는 약 100 내지 110개 또는 그 이상의 아미노산의 가변 영역을 포함한다. 각 사슬의 카르복시-말단 부분은 이펙터(effector) 기능을 주로 담당하는 불변 영역을 정의한다.
비-인간(non-human) (예를 들면, 설치류 또는 영장류) 항체에 적용되는 용어 "인간화 (humanized)"는 비-인간 면역글로불린으로부터 유래된 최소 서열을 포함하는 하이브리드 면역글로불린, 면역글로불린 사슬 또는 그의 단편이다.
본원에서 사용된, 용어 "치료하는 (treating)" 또는 "치료 (treatment)" (및 당해 분야에서 잘 이해되는 바와 같음)는 임상 결과를 포함한, 개체의 병태에서 유익하거나 또는 원하는 결과를 수득하기 위한 접근방식을 의미한다. 유익하거나 또는 원하는 임상 결과는 부분적이거나 또는 전체적이거나 및 검출 가능하거나 또는 검출가능하지 않은, 하나 이상의 증상 또는 병태의 완화 또는 개선, 질병 정도의 감소, 질병 상태의 안정화 (즉, 악화되지 않음), 질병의 전파 또는 확산의 방지, 질병 진행의 지연 또는 감속, 질병 상태의 개선 또는 완화, 질병 재발의 감소, 및 관해 (remission)를 포함하나, 그에 한정되지 않는다. 본원에서 사용된 "치료하는" 및 "치료"는 또한 예방적 치료를 포함한다. 치료 방법은 개체에게 치료 유효량의 활성제를 투여하는 단계를 포함한다. 상기 투여하는 단계는 단일 투여로 구성될 수 있거나 또는 일련의 투여를 포함할 수 있다. 조성물은 개체를 치료하기에 충분한 양 및 기간 동안 개체에게 투여된다. 치료 기간의 길이는 다양한 요인, 예를 들면, 병태의 중증도, 대상 개체의 연령 및 유전적 프로파일, 활성제의 농도, 치료에 사용된 조성물의 활성, 또는 이들의 조합에 따라 좌우된다. 또한, 치료 또는 예방에 사용되는 활성제의 유효 용량(effective dosage)은 특정 치료 또는 예방 요법의 과정에 걸쳐 증가되거나 또는 감소될 수 있는 것으로 이해할 것이다. 용량의 변화는 당해 분야에 알려진 표준 진단 분석법에 의해 기인되고, 명백해질 수 있다. 일부 경우에, 장기적 투여가 필요할 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "유효량(effective amount)" 또는 "유효 용량(effective dose)"은 본 명세서를 고려하여 이해되는 그들의 명백하고 통상적인 의미를 가지며, 관찰가능한 표시된 효과를 초래하는 기재된 조성물 또는 화합물의 양을 의미한다. 본원에서 개시되는 발명(subject matter)의 활성 조성물 중 활성 성분의 실제 용량 수준은 특정한 개체 및/또는 적용에 대해 표시된 반응을 달성하기 위해 유효한 활성 조성물 또는 화합물의 양을 투여하기 위해 변할 수 있다. 선택된 용량 수준은 조성물의 활성, 제형, 투여 경로, 다른 약물 또는 치료제와의 조합, 치료 대상 질환의 중증도, 및 치료되는 개체의 신체 상태 및 이전 병력을 포함하나, 그에 한정되지 않는 다양한 인자들에 근거하여 달라질 수 있다. 일부 구체예에서, 최소량이 투여되고, 용량은 용량-한정 독성(dose-limiting toxicity)의 부재시 최소 유효량(minimally effective amount)까지 증가된다. 유효량의 결정 및 조정, 및 그러한 조정을 수행하는 시기 및 방법이 본원에서 고려된다.
용어 "투여하는 (administering)"은 개체로의 경구 투여, 국소 접촉, 좌약 투여, 정맥내, 복막내, 근육내, 병변내, 척추강내, 비강내 또는 피하 투여, 또는 서방성 장치, 예를 들면, 미니-삼투 펌프 (mini-osmotic pump)의 이식을 포함한다. 투여는 비경구 및 경점막 (예를 들면, 협측(buccal), 설하, 구개, 치은, 비강, 질, 직장 또는 경피)을 포함한 임의의 경로로 수행된다. 비경구 투여는 예를 들면, 정맥내, 근육내, 세동맥내 (intra-arteriole), 피부내, 피하, 복막내, 뇌실내 및 두개내를 포함한다. 기타 전달 방식은 리포좀 제제, 정맥내 주입, 경피 패치 등의 사용을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. "병용-투여 (co-administer)"는 본원에 기재된 제1 화합물이 본원에 기재된 제2 화합물의 투여와 동시에, 투여 직전에, 또는 투여 직후에 투여되는 것을 의미한다.
본원에서 사용된, 용어 "치료 표적 (therapeutic target)"은 유전자 또는 유전자 산물의 활성의 조절 시에 (예를 들면, 발현, 생물학적 활성 등의 조절에 의해), 질병 표현형의 조절을 제공할 수 있는 유전자 또는 유전자 산물을 의미한다. 전체에 걸쳐 사용되는, "조절 (modulation)"은 표시된 현상의 증가 또는 감소를 의미하는 것으로 의도된다 (예를 들면, 생물학적 활성의 조절은 생물학적 활성의 증가 또는 생물학적 활성의 감소를 의미한다).
본원에서 사용된, 용어 "치료 기준 (standard of care)", "베스트 프랙티스 (best pratice)" 및 "기준 치료법 (standard therapy)"은 특정한 질환에 대해 적절하고, 적합하고, 효과적이고, 및/또는 널리 사용되는 치료로 의사에 의해 인정되는 치료를 의미한다. 특정 질환의 치료 기준은 치료의 생물학적 효과, 신체 내의 영역 또는 위치, 환자 상태 (예를 들면, 연령, 체중, 성별, 유전적 위험, 기타 장애, 이차 질환), 독성, 대사, 생물축적, 치료 지수, 용량, 및 기타 당해 분야에서 공지된 인자들을 포함한, 다수의 상이한 인자들에 의존적이다. 질병에 대한 치료 기준을 결정하는 것은 또한 규제 기구, 예를 들면, 미국 FDA (US Food and Drug Administration), ICH (International Council for Harmonisation), HC (Health Canada), EMA (European Medicines Agency), TGA (Therapeutics Goods Administration), CDSCO (Central Drugs Standard Control Organization), NMPA (National Medical Products Administration), PhMDA (Pharmaceuticals and Medical Devices Agency), MFDS (Ministry of Food and Drug Safety), 및 WHO (World Health Organization)에 의해 표준화된 임상 시험에서 안전성 및 효능을 확립하는 것에 달려있다. 질환을 위한 치료 기준은 수술, 방사선 요법, 화학요법, 표적 치료, 또는 면역요법을 포함하나, 그에 한정되지 않는다.
용어 "% w/w" 또는 "% wt/wt"는 조성물의 총 중량에 대한 성분 또는 활성제의 중량에 100을 곱하여 표시되는 퍼센트를 의미한다.
달리 특정되지 않으면, 본원에 개시되는 상보성 결정 영역(complementarity defining region)은 IMGT 정의를 따른다. 일부 구체예에서, 본원에서 개시되는 CDR은 대신에 Kabat, Chothia, 또는 당업자에 의해 인정되는 기타 정의에 따라 해석될 수 있다.
본원에 기재되는 항체명을 가진 항체는 본원에 개시되는 또 다른 항체와 상충되지 않는 한, 항체명의 단축 버전을 이용하여 지칭될 수 있다. 예를 들면, 2D10.2B2는 2D10으로 지칭될 수 있다. 이는 또한 상기 항체의 단편 (예를 들면, 동일하게 1개, 3개, 또는 6개의 CDR을 갖는 단편)을 의미할 수 있다
Gal3 결합제
항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편이 본원에서 개시되고, 본원에서 개시되는 방법 또는 용도에 적용가능하다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3의 N-말단 도메인, Gal3의 N-말단, 또는 Gal3의 TRD (tandem repeat domain)에 결합한다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3의 N-말단 도메인, Gal3의 N-말단, 또는 Gal3의 TRD에 결합하지 않는다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3의 C-말단 도메인, Gal3의 C-말단, 또는 Gal3의 CRD에 결합한다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3의 C-말단 도메인, Gal3의 C-말단, 또는 Gal3의 CRD에 결합하지 않는다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 임의의 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편, 또는 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 배열이 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자에 의해 대체될 수 있다.
일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 서열번호 3-26의 펩티드 중 하나 이상에 결합한다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 펩티드 1 (ADNFSLHDALSGSGNPNPQG; 서열번호 3), 펩티드 4 (GAGGYPGASYPGAYPGQAPP; 서열번호 6), 펩티드 6 (GAYPGQAPPGAYPGAPGAYP; 서열번호 8), 펩티드 7 (AYPGAPGAYPGAPAPGVYPG; 서열번호 9), 또는 이들의 조합에 의해 정의된 Gal3의 영역 내에 존재하는 에피토프에 결합한다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 임의의 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편, 또는 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 배열이 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자에 의해 대체될 수 있다.
일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 GxYPG의 모티프를 포함하는 Gal3의 에피토프에 결합하고, x는 알라닌 (A), 글리신 (G), 또는 발린 (V)이다. 일부 구체예에서, 본원에 기재되는 항-Gal3 항체는 3개의 아미노산에 의해 분리된 2개의 GxYPG 모티프를 포함하는 Gal3의 에피토프에 결합하고, 상기 모티프에서 x는 A, G, 또는 V이다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 임의의 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편, 또는 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 배열이 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자에 의해 대체될 수 있다.
일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 (1) VL-CDR1, VL-CDR2, 및 VL-CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역; 및 (2) VH-CDR1, VH-CDR2, 및 VH-CDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 VL-CDR1은 서열번호 100-128에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 VL-CDR2는 서열번호 129-144에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 VL-CDR3은 서열번호 145-168에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 VH-CDR1은 서열번호 27-47에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 VH-CDR2는 서열번호 48-69에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 VH-CDR3은 서열번호 70-99에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 임의의 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편, 또는 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 배열이 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자에 의해 대체될 수 있다.
일부 구체예에서, 상기 항-GAL3 항체 또는 그의 단편은 하나 이상의 본원에서 제공되는 HCDR, 예를 들면, HCDR1, HCDR2, 또는 HCDR3을 포함한다.
일부 구체예에서, 예시적인 VH-CDR1 서열이 도 28a에 도시된다. 일부 구체예에서, 예시적인 VH-CDR2 서열이 도 28b에 도시된다. 일부 구체예에서, 예시적인 VH-CDR3 서열이 도 28c에 도시된다. 일부 구체예에서, 예시적인 VL-CDR1 서열이 도 29a에 도시된다. 일부 구체예에서, 예시적인 VL-CDR2 서열이 도 29b에 도시된다. 일부 구체예에서, 예시적인 VL-CDR3 서열이 도 29c에 도시된다.
일부 구체예에서, 본원에서 개시되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 중쇄 가변 영역은 서열번호 169-206에 따른 임의의 서열에 적어도 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 본원에서 개시되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 중쇄 가변 영역은 서열번호 169-206으로 구성된 군으로부터 선택된다. 일부 구체예에서, 예시적 VH가 도 30에 도시된다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 임의의 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편, 또는 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 배열이 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자에 의해 대체될 수 있다.
일부 구체예에서, 본원에서 개시되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 경쇄 가변 영역은 서열번호 207-245에 따른 임의의 서열에 적어도 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 본원에서 개시되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 경쇄 가변 영역은 서열번호 207-245로 구성된 군으로부터 선택된다. 일부 구체예에서, 예시적 VL가 도 31에 도시된다.
일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 a) 서열번호 169 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 207 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; b) 서열번호 170 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 208 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; c) 서열번호 171 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 209 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; d) 서열번호 172 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 210 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; e) 서열번호 173 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 211 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; f) 서열번호 174 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 212 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; g) 서열번호 175 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 213 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; h) 서열번호 176 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 214 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; i) 서열번호 177 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 215 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; j) 서열번호 178 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 216 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; k) 서열번호 179 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 217 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; l) 서열번호 180 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 218 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; m) 서열번호 181 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 219 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; n) 서열번호 181 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 220 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; o) 서열번호 182 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 221 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; p) 서열번호 183 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 222 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; q) 서열번호 184 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 223 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; r) 서열번호 185 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 224 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; s) 서열번호 186 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 225 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; t) 서열번호 187 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 226 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; u) 서열번호 188 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 227 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; v) 서열번호 189 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 228 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; w) 서열번호 190 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 229 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; x) 서열번호 191 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 230 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; y) 서열번호 192 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 231 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; z) 서열번호 193 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 232 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; aa) 서열번호 194 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 233 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; ab) 서열번호 195 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 234 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; ac) 서열번호 196 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 235 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; ad) 서열번호 197 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 236 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; ae) 서열번호 198 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 237 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; af) 서열번호 199 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 238 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; ag) 서열번호 197 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 239 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; ah) 서열번호 200 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 240 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; ai) 서열번호 201 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 241 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; aj) 서열번호 202 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 242 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; ak) 서열번호 203 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 240 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; al) 서열번호 204 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 243 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; am) 서열번호 205 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 244 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; 또는 an) 서열번호 206 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 245 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3를 포함한다. 일부 구체예에서, 중쇄 가변 영역 CDR의 예시적 조합이 도 34에 도시된다. 일부 구체예에서, 경쇄 가변 영역 CDR의 예시적 조합이 도 35에 도시된다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 임의의 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편, 또는 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 배열이 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자에 의해 대체될 수 있다.
일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 a) 서열번호 169의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 207의 경쇄 가변 영역; b) 서열번호 170의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 208의 경쇄 가변 영역; c) 서열번호 171의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 209의 경쇄 가변 영역; d) 서열번호 172의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 210의 경쇄 가변 영역; e) 서열번호 173의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 211의 경쇄 가변 영역; f) 서열번호 174의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 212의 경쇄 가변 영역; g) 서열번호 175의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 213의 경쇄 가변 영역; h) 서열번호 176의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 214의 경쇄 가변 영역; i) 서열번호 177의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 215의 경쇄 가변 영역; j) 서열번호 178의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 216의 경쇄 가변 영역; k) 서열번호 179의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 217의 경쇄 가변 영역; l) 서열번호 180의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 218의 경쇄 가변 영역; m) 서열번호 181의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 219의 경쇄 가변 영역; n) 서열번호 181의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 220의 경쇄 가변 영역; o) 서열번호 182의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 221의 경쇄 가변 영역; p) 서열번호 183의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 222의 경쇄 가변 영역; q) 서열번호 184의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 223의 경쇄 가변 영역; r) 서열번호 185의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 224의 경쇄 가변 영역; s) 서열번호 186의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 225의 경쇄 가변 영역; t) 서열번호 187의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 226의 경쇄 가변 영역; u) 서열번호 188의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 227의 경쇄 가변 영역; v) 서열번호 189의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 228의 경쇄 가변 영역; w) 서열번호 190의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 229의 경쇄 가변 영역; x) 서열번호 191의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 230의 경쇄 가변 영역; y) 서열번호 192의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 231의 경쇄 가변 영역; z) 서열번호 193의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 232의 경쇄 가변 영역; aa) 서열번호 194의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 233의 경쇄 가변 영역; ab) 서열번호 195의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 234의 경쇄 가변 영역; ac) 서열번호 196의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 235의 경쇄 가변 영역; ad) 서열번호 197의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 236의 경쇄 가변 영역; ae) 서열번호 198의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 237의 경쇄 가변 영역; af) 서열번호 199의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 238의 경쇄 가변 영역; ag) 서열번호 197의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 239의 경쇄 가변 영역; ah) 서열번호 200의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 240의 경쇄 가변 영역; ai) 서열번호 201의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 241의 경쇄 가변 영역; aj) 서열번호 202의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 242의 경쇄 가변 영역; ak) 서열번호 203의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 240의 경쇄 가변 영역; al) 서열번호 204의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 243의 경쇄 가변 영역; am) 서열번호 205의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 244의 경쇄 가변 영역; 또는 an) 서열번호 206의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 245의 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 임의의 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편, 또는 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 배열이 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자에 의해 대체될 수 있다.
일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 서열번호 246-286 중 하나의 중쇄 (HC) 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 예시적 HC 서열이 도 32에 도시된다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 임의의 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편, 또는 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 배열이 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자에 의해 대체될 수 있다.
일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 서열번호 287-324 중 하나의 경쇄 (LC) 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 예시적 HC 서열이 도 33에 도시된다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 임의의 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편, 또는 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 배열이 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자에 의해 대체될 수 있다.
일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 13H12.2F8, 19D9.2E5, 14H10.2C9, 2D10.2B2, 4A11.2B5, 6H6.2D6, 20H5.A3, 19B5.2E6, 23H9.2E4, 20D11.2C6, 15G7.2A7, 4G2.2G6, 3B11.2G2, 13A12.2E5, 7D8.2D8, 15F10.2D6, 12G5.D7, 24D12.2H9, 13G4.2F8, 9H2.2H1, 23B10.2B12, 6B3.2D3, F846C.1B2, F846C.1F5, F846C.1H12, F846C.1H5, F846C.2H3, F846TC.14A2, F846TC.14E4, F846TC.16B5, F846TC.7F10, F847C.10B9, F847C.11B1, F847C.12F12, F847C.26F5, F847C.4B10, F849C.8D10, F849C.8H3, F847.14H4 (847.14H4), mIMT001, IMT-001 (TB0001), 및 IMT-006 (TB006), 또는 그의 결합 단편으로 구성된 군으로부터 선택된다. 일부 구체예에서, 전술된 항체 각각과 연관된 중쇄 및 경쇄 CDR이 도 36에 도시된다. 일부 구체예에서, 전술된 항체 각각과 연관된 VH 및 VL가 도 37에 도시된다. 일부 구체예에서, 전술된 항체 각각과 연관된 HC 및 LC가 도 38에 도시된다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 임의의 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편, 또는 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 배열이 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자에 의해 대체될 수 있다.
일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3 단백질 내의 특이적 에피토프에 결합한다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 도 26에 제공된, 서열번호 1에 따른 아미노산 서열을 갖는 Gal3 단백질 내의 특이적 에피토프에 결합한다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 임의의 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편, 또는 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 배열이 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자에 의해 대체될 수 있다.
일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 도 27에 예시된 펩티드 내의 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 10, 15, 또는 20개 아미노산 잔기에 결합할 수 있다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 서열번호 1의 아미노산 잔기 1-20번 내의 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 10, 15, 또는 20개 아미노산 잔기에 결합할 수 있다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 서열번호 1의 아미노산 잔기 31-50번 내의 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 10, 15, 또는 20개 아미노산 잔기에 결합할 수 있다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 서열번호 1의 아미노산 잔기 51-70번 내의 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 10, 15, 또는 20개 아미노산 잔기에 결합할 수 있다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 서열번호 1의 아미노산 잔기 61-80번 내의 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 10, 15, 또는 20개 아미노산 잔기에 결합할 수 있다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 임의의 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편, 또는 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 배열이 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자에 의해 대체될 수 있다.
일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 펩티드 1 (서열번호 3), 펩티드 2 (서열번호 4), 펩티드 3 (서열번호 5), 펩티드 4 (서열번호 6), 펩티드 5 (서열번호 7), 펩티드 6 (서열번호 8), 펩티드 7 (서열번호 9), 펩티드 8 (서열번호 10), 또는 펩티드 17 (서열번호 19) 또는 이들의 조합 내에 있는 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20개 아미노산 잔기에 결합할 수 있다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 펩티드 6 (서열번호 8) 내에 있는 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20개 아미노산 잔기에 결합할 수 있다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 임의의 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편, 또는 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 배열이 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자에 의해 대체될 수 있다.
펩티드 1 (서열번호 3)에 결합하는 일부 예시적인 항체는 6H6.2D6, 20H5.A3, 20D11.2C6, 19B5.2E6, 15G7.2A7, 23H9.2E4, F846C.1H5, F846TC.14A2, F846TC.7F10, F847C.10B9, F847C.12F12, F847C.26F5, 및 F847C.4B10이다.
펩티드 2 (서열번호 4)에 결합하는 일부 예시적인 항체는 15F10.2D6, 7D8.2D8, F846TC.14E4, F849C.8D10, 및 F849C.8H3이다.
펩티드 3 (서열번호 5)에 결합하는 일부 예시적인 항체는 15F10.2D6, 7D8.2D8, 및 F849C.8D10이다.
펩티드 4 (서열번호 6)에 결합하는 일부 예시적인 항체는 4G2.2G6, 3B11.2G2, 13A12.2E5 및 15F10.2D6이다.
펩티드 5 (서열번호 7)에 결합하는 일부 예시적인 항체는 IMT001 (TB001), F846C.1B2 및 F846C.1H12이다.
펩티드 6 (서열번호 8)에 결합하는 일부 예시적인 항체는 IMT001 (TB001), IMT006 (TB006), 13H12.2F8, 19D9.2E5, 2D10.2B2, 4A11.2B5, 3B11.2D2, 13A12.2E5, 14H10.2C9, 23H9.2E4, F846C.1B2, F846C.1F5, F846C.1H12, F846C.1H12, F846C.2H3, 및 F846TC.16B5이다.
펩티드 7 (서열번호 9)에 결합하는 일부 예시적인 항체는 6H6.2D6, 20H5.A3, 20D11.2C6, 13H12.2F8, 19B5.2E6, 23H9.2E4, 15G7.2A7, 19D9.2E5, 14H10.2C9, 7D8.2D8, 15F10.2D6, 14H10.2C9, F846C.1B2, F846TC.14A2, F847C.10B9, F847C.12F12, 및 F847C.26F5이다.
펩티드 8 (서열번호 10)에 결합하는 일부 예시적인 항체는 23H9.2E4 및 F846TC.14A2이다.
펩티드 17 (서열번호 19)에 결합하는 일부 예시적인 항체는 7D8.2D8, F846C.1F5, F846C.1H12, F846TC.16B5, F847C.11B1, 및 F849C.8H3이다.
일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 에피토프 비닝된다(epitope binned). 예시적 비닝 과정이 실시예 3 및 18에 상술된다. 일부 구체예에서, 항체 TB001은 빈(bin) 1로 분류된다. 일부 구체예에서, 항체 19D9.2E5는 빈 2로 분류된다. 일부 구체예에서, 항체 TB006, 4A11.2B5, 23B10.2B12, 19B5.2E6, 20H5.A3, 23H9.2E4, 및 2D10.2B2는 빈 3으로 분류된다. 일부 구체예에서, 항체 6H6.2D6은 빈 4로 분류된다. 일부 구체예에서, 항체 15G7.2A7, 20D11.2C6은 빈 5로 분류된다. 일부 구체예에서, 항체 4G2.2G6은 빈 6으로 분류된다. 일부 구체예에서, 항체 13A12.2E5 및 3B11.2G2는 빈 7로 분류된다. 일부 구체예에서, 항체 14H10.2C9, 15F10.2D6, 7D8.2D8, F846TC.14E4, F846TC.7F10, 및 F849C.8D10은 빈 8로 분류된다. 일부 구체예에서, 항체 6F7.C4는 빈 9로 분류된다. 일부 구체예에서, 항체 12G5.D7은 빈 10으로 분류된다. 일부 구체예에서, 항체 6B3.2D3은 빈 11로 분류된다. 일부 구체예에서, 항체 9H2.2H10 및 13G4.2F8은 빈 12로 분류된다. 일부 구체예에서, 항체 F846C.1B2, F846C.1F5, F846C.1H12, F846C.2H3, 및 F846TC.16B5는 빈 17로 분류된다. 일부 구체예에서, 항체 F847C.10B9, F847C.12F12, 및 F847C.26F5는 빈 49로 분류된다.
또한, 일부 구체예에서, 인간 Gal3에 결합하고 인간 Gal3로의 결합에 대해 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편과 경쟁하는 항체가 본원에 개시된다. 일부 구체예에서, 상기 경쟁되는(competed against) 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 임의의 본원에 개시된 항-Gal3 항체이다. 일부 구체예에서, 상기 경쟁되는 항-Gal3 항체 또는 그의 단편은 펩티드 1 (서열번호 3), 펩티드 2 (서열번호 4), 펩티드 3 (서열번호 5), 펩티드 4 (서열번호 6), 펩티드 5 (서열번호 7), 펩티드 6 (서열번호 8), 펩티드 7 (서열번호 9), 펩티드 8 (서열번호 10), 펩티드 17 (서열번호 19), 또는 이들의 조합에 결합한다. 일부 구체예에서, 상기 경쟁되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 빈 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 17, 또는 49에 속한다. 일부 구체예에서, 상기 경쟁되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 6H6.2D6, 20H5.A3, 20D11.2C6, 4G2.2G6, 13H12.2F8, 19B5.2E6, 15G7.2A7, 23H9.2E4, 19D9.2E5, 2D10.2B2, 4A11.2B5, 14H10.2C9, 3B11.2G2, 13A12.2E5, 7D8.2D8, 및 15F10.2D6, 23B10.2B12, 6B3.2D3, F846C.1B2, F846C.1F5, F846C.1H12, F846C.1H5, F846C.2H3, F846TC.14A2, F846TC.14E4, F846TC.16B5, F846TC.7F10, F847C.10B9, F847C.11B1, F847C.12F12, F847C.26F5, F847C.4B10, F849C.8D10, F849C.8H3, 847.14H4, mIMT001, IMT001(TB001), 및 IMT006 (TB006), 또는 이들의 결합 단편으로 구성된 군으로부터 선택된다. 일부 구체예에서, 상기 인간 Gal3에 결합하고, 항-Gal3 항체와 경쟁하는 항체는 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자로 대체될 수 있다. 일부 구체예에서, 상기 경쟁되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자에 의해 대체될 수 있다.
일부 경우에, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 인간화 항체 (humanized antibody) 또는 그의 결합 단편을 포함한다. 다른 경우에, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 키메라 항체 또는 그의 결합 단편을 포함한다. 일부 경우에, 상기 항-Gal3 항체는 전장 항체 또는 그의 결합 단편을 포함한다. 일부 경우에, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 이중특이성 항체 또는 그의 결합 단편을 포함한다. 일부 경우에, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 1가 Fab', 2가 Fab2, 단쇄 가변 단편 (scFv), 디아바디, 미니바디, 나노바디, 단일-도메인 항체 (sdAb), 또는 카멜리드 항체 또는 그의 결합 단편을 포함한다.
일부 경우에, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 이중특이성 항체 또는 그의 결합 단편이다. 예시되는 이중특이성 항체 포맷은 KiH(Knobs-into-Holes), ART-Ig (Asymmetric Re-engineering Technology-immunoglobulin), Triomab quadroma, 이중특이성 단일클론 항체 (BiMAb, BsmAb, BsAb, bsMab, BS-Mab, 또는 Bi-MAb), Azymetric, Biclonics, Fab-scFv-Fc, Two-in-one/Dual Action Fab (DAF), FinomAb, scFv-Fc-(Fab)-융합, DNL (Dock-aNd-Lock), TandAb (Tandem diAbody), DART (Dual-affinity-ReTargeting), 나노바디, 트리플바디 (triplebody), taFv (tandems scFv), 트리플 헤드 (triple heads), 탠뎀 dAb/VHH, 트리플 dAb/VHH, 또는 4가 dAb/VHH를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 일부 경우에, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 Brinkmann and Kontermann, "The making of bispecific antibodies," MABS 9(2): 182-212 (2017에 예시된 이중특이성 항체 포맷을 포함하는, 이중특이성 항체 또는 그의 결합 단편이다.
일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 IgM, IgG (예를 들면, IgG1, IgG2, IgG3, 또는 IgG4), IgA, 또는 IgE 프레임워크를 포함할 수 있다. 상기 IgG 프레임워크는 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4일 수 있다. 일부 경우에, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 IgG1 프레임워크를 포함한다. 일부 경우에, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 IgG2 프레임워크를 포함한다. 일부 경우에, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 IgG4 프레임워크를 포함한다. 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 Fc 돌연변이를 더 포함할 수 있다.
일부 구체예에서, 상기 Fc 영역은 Fc 수용체 상호작용을 조절하는, 예를 들면, ADCC 및/또는 CDC와 같은 이펙터 기능을 증진시키는 하나 이상의 돌연변이를 포함한다. 그러한 경우에, 돌연변이되어 이펙터 기능을 조절하는, 예시적인 잔기는 S239, K326, A330, I332, 또는 E333을 포함하고, 상기 잔기 위치는 IgG1에 해당하고, 잔기 넘버링은 Kabat 넘버링 (Kabat et al 1991 Sequences of Proteins of Immunological Interest의 EU 인덱스(index))에 따른다. 일부 경우에, 상기 하나 이상의 돌연변이는 S239D, K326W, A330L, I332E, E333A, E333S, 또는 이들의 조합을 포함한다. 일부 경우에, 상기 하나 이상의 돌연변이는 S239D, I332E, 또는 이들의 조합을 포함한다. 일부 경우에, 상기 하나 이상의 돌연변이는 S239D, A330L, I332E, 또는 이들의 조합을 포함한다. 일부 경우에, 상기 하나 이상의 돌연변이는 K326W, E333S, 또는 이들의 조합을 포함한다. 일부 경우에, 상기 돌연변이는 E333A를 포함한다.
사용 방법
일부 구체예에서, Gal3에 결합하고 Gal3과 다른 단백질의 상호작용을 차단하는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는 방법이 본원에 개시된다. 일부 구체예에서, 이는 Gal3와 상기 다른 단백질의 상호작용 구역의 직접적인 차단, 또는 간접적 변형, 예를 들면, Gal3의 형태적(conformational) 변화를 초래하여, 상기 다른 단백질에 더 이상 결합하지 않거나 또는 그에 대해 활성이 아니게 하는 결합일 수 있다. 일부 구체예에서, 이는 또한 Gal3의 제1 섹션으로의 결합에 의해 초래될 수 있고, 이 때, 상기 항체 또는 그의 결합 단편의 일부 다른 부분이 Gal3와 상기 다른 단백질의 상호작용을 차단하거나 또는 변형시킨다. 일부 구체예에서, 상기 Gal3의 제1 섹션은 Gal3의 N-말단 도메인, Gal3의 TRD (tandem repeat domain), 또는 Gal3의 C-말단 도메인이다. 일부 구체예에서, 상기 Gal3에 결합하는 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3의 C-말단 도메인에 결합하지 않는다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
Gal3와 인슐린 수용체 또는 인테그린, 또는 둘 모두와의 상호작용을 차단하는 방법이 본원에 개시된다. 일부 구체예에서, 상기 방법은 Gal3 상의 상호작용 부위 또는 표면 (Gal3이 a) 인슐린 수용체 또는 b) 인테그린, 또는 c) 둘 모두와 상호작용하는 부위)을 Gal3에 선택적으로 결합하고, Gal3과 상기 인슐린 수용체, 또는 인테그린, 또는 둘 모두와의 상호작용을 차단하는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편과 접촉시키는 것을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 Gal3는 세포 또는 복수의 세포에 의해 발현된다. 일부 구체예에서, 상기 Gal3는 세포 또는 복수의 세포에 의해 분비된다. 일부 구체예에서, 상기 인슐린 수용체, 또는 상기 인테그린, 또는 둘 모두는 세포 또는 복수의 세포에 의해 발현된다. 일부 경우에, 상기 방법은 Gal3를 발현하는 복수의 세포와 인슐린 수용체, 또는 인테그린, 또는 둘 모두를 발현하는 복수의 세포를 본 개시의 항체 또는 그의 항원 결합 단편과 접촉시키는 것을 포함한다. 일부 경우에, 상기 방법은 복수의 세포에 의해 분비된 Gal3과 인슐린 수용체, 또는 인테그린, 또는 둘 모두를 발현하는 복수의 세포를 본 개시의 항체 또는 그의 결합 단편과 접촉시키는 것을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3의 N-말단 도메인에 결합한다. 일부 구체예에서, 상기 상호작용은 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 부재시 상호작용의 80% 미만, 75% 미만, 70% 미만, 65% 미만, 60% 미만, 55% 미만, 50% 미만, 45% 미만, 40% 미만, 35% 미만, 30% 미만, 25% 미만, 20% 미만, 15% 미만, 10% 미만, 5% 미만, 또는 1% 미만까지 감소된다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 본원에 개시되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편 중 임의의 하나이다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
일부 구체예에서, 개체에서 질병 또는 장애, 또는 그의 증상을 진단하는 방법이 본원에 개시된다. 일부 구체예에서, 상기 질병 또는 장애는 당뇨병이다. 일부 구체예에서, 상기 질병 또는 장애는 인슐린-의존성 당뇨병이다. 일부 구체예에서, 상기 질병 또는 장애는 인슐린-비의존성 당뇨병이다. 일부 구체예에서, 상기 질병 또는 장애는 타입 I 당뇨병이다. 일부 구체예에서, 상기 질병 또는 장애는 타입 II 당뇨병이다. 일부 구체예에서, 상기 질병 또는 장애는 염증성 장 질환이다. 일부 구체예에서, 상기 질병 또는 장애는 비알코올성 지방간 질환이다. 일부 구체예에서, 상기 질병 또는 장애는 비알코올성 지방간염이다. 일부 구체예에서, 상기 방법은 상기 개체 또는 상기 개체의 일부 (예를 들면, 조직, 혈액/혈청)를 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편과 접촉시키는 단계를 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 검출가능한 모이어티에 접합된다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
본원에 개시되는 방법의 일부 구체예에서, 상기 인슐린 수용체는 서열번호 2의 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, Gal3-INSR 상호작용은 80% 미만, 75% 미만, 70% 미만, 60% 미만, 59% 미만, 50% 미만, 40% 미만, 34% 미만, 30% 미만, 20% 미만, 14% 미만, 10% 미만, 7% 미만, 5% 미만, 4%, 또는 1% 미만까지 감소될 수 있다.
일부 경우에, 상기 항-Gal3 항체는 Gal3에 1 nM 미만, 1.2 nM 미만, 2 nM 미만, 5 nM 미만, 10 nM 미만, 13.5 nM 미만, 15 nM 미만, 20 nM 미만, 25 nM 미만, 또는 30 nM 미만의 해리 상수 (KD)로 결합한다. 일부 경우에, 상기 항-Gal3 항체는 Gal3에 1 nM 미만의 KD로 결합한다. 일부 경우에, 상기 항-Gal3 항체는 Gal3에 1.2 nM 미만의 KD로 결합한다. 일부 경우에, 상기 항-Gal3 항체는 Gal3에 2 nM 미만의 KD로 결합한다. 일부 경우에, 상기 항-Gal3 항체는 Gal3에 5 nM 미만의 KD로 결합한다. 일부 경우에, 상기 항-Gal3 항체는 Gal3에 10 nM 미만의 KD로 결합한다. 일부 경우에, 상기 항-Gal3 항체는 Gal3에 13.5 nM 미만의 KD로 결합한다. 일부 경우에, 상기 항-Gal3 항체는 Gal3에 15 nM 미만의 KD로 결합한다. 일부 경우에, 상기 항-Gal3 항체는 Gal3에 20 nM 미만의 KD로 결합한다. 일부 경우에, 상기 항-Gal3 항체는 Gal3에 25 nM 미만의 KD로 결합한다. 일부 경우에, 상기 항-Gal3 항체는 Gal3에 30 nM 미만의 KD로 결합한다. 예시적인 항-Gal3 항체의 Gal3 결합의 KD 값이 도 41에 제공된다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
임의의 본원에 개시되는 방법의 일부 구체예에서, 상기 인테그린은 인테그린 알파-1 (ITGa1), 인테그린 알파-2 (ITGa2), 인테그린 알파-3 (ITGa3), 인테그린 알파-4 (ITGa4), 인테그린 알파-5 (ITGa5), 인테그린 알파-6 (ITGa6), 인테그린 알파-7 (ITGa7), 인테그린 알파-8 (ITGa8), 인테그린 알파-9 (ITGa9), 인테그린 알파-10 (ITGa10), 인테그린 알파-11 (ITGa11), 인테그린 알파-D (ITGaD), 인테그린 알파-E (ITGaE), 인테그린 알파-L (ITGaL), 인테그린 알파-M (ITGaM), 인테그린 알파-V (ITGaV), 인테그린 알파-2B (ITGa2B), 인테그린 알파-2X (ITGa2X), 인테그린 베타-1 (ITGb1), 인테그린 베타-2 (ITGb2), 인테그린 베타-3 (ITGb3), 인테그린 베타-4 (ITGb4), 인테그린 베타-5 (ITGb5), 인테그린 베타-6 (ITGb6), 인테그린 베타-7 (ITGb7), 인테그린 베타-8 (ITGb8), 또는 이들의 조합으로부터 선택된다. 일부 구체예에서, 상기 인테그린은 인테그린 베타-1, 인테그린 알파-3, 인테그린 베타, 또는 인테그린 알파-V, 또는 이들의 조합으로부터 선택된다. 일부 구체예에서, 상기 인테그린은 서열번호 339-342의 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 Gal3와 인테그린의 상호작용의 차단은 림프구 부착을 감소시킨다. 일부 구체예에서, 상기 림프구 부착은 적어도 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99%, 또는 전술된 퍼센트 중 2개에 의해 정의되는 범위 내의 퍼센트만큼 감소된다.
임의의 본원에서 개시되는 사용 방법에 적용되는 바와 같이, 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 서열번호 3-26의 펩티드 중 하나 이상에 결합한다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 펩티드 1 (ADNFSLHDALSGSGNPNPQG; 서열번호 3), 펩티드 4 (GAGGYPGASYPGAYPGQAPP; 서열번호 6), 펩티드 6 (GAYPGQAPPGAYPGAPGAYP; 서열번호 8), 펩티드 7 (AYPGAPGAYPGAPAPGVYPG; 서열번호 9), 또는 이들의 조합에 의해 정의된 Gal3의 영역 내에 존재하는 에피토프에 결합한다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
임의의 본원에서 개시되는 사용 방법에 적용되는 바와 같이, 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 GxYPG의 모티프를 포함하는 Gal3의 에피토프에 결합하고, x는 알라닌 (A), 글리신 (G), 또는 발린 (V)이다. 일부 구체예에서, 본원에서 개시된 항-Gal3 항체는 3개의 아미노산에 의해 분리된 2개의 GxYPG 모티프를 포함하는 Gal3의 에피토프에 결합하고, 상기 모티프에서 x는 A, G, 또는 V이다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
임의의 본원에서 개시되는 사용 방법에 적용되는 바와 같이, 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 (1) VL-CDR1, VL-CDR2, 및 VL-CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역; 및 (2) VH-CDR1, VH-CDR2, 및 VH-CDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 VL-CDR1은 서열번호 100-128에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 VL-CDR2는 서열번호 129-144에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 VL-CDR3은 서열번호 145-168에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 VH-CDR1은 서열번호 27-47에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 VH-CDR2는 서열번호 48-69에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 VH-CDR3은 서열번호 70-99에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
임의의 본원에서 개시되는 사용 방법에 적용되는 바와 같이, 일부 구체예에서, 예시적인 VH-CDR1 서열이 도 28a에 도시된다. 일부 구체예에서, 예시적인 VH-CDR2 서열이 도 28b에 도시된다. 일부 구체예에서, 예시적인 VH-CDR3 서열이 도 28c에 도시된다. 일부 구체예에서, 예시적인 VL-CDR1 서열이 도 29a에 도시된다. 일부 구체예에서, 예시적인 VL-CDR2 서열이 도 29b에 도시된다. 일부 구체예에서, 예시적인 VL-CDR3 서열이 도 29c에 도시된다.
임의의 본원에서 개시되는 사용 방법에 적용되는 바와 같이, 일부 구체예에서, 본원에서 개시되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 중쇄 가변 영역은 서열번호 169-206에 따른 임의의 서열에 적어도 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 본원에서 개시되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 중쇄 가변 영역은 서열번호 169-206으로 구성된 군으로부터 선택된다. 일부 구체예에서, 예시적 VH가 도 30에 도시된다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
임의의 본원에서 개시되는 사용 방법에 적용되는 바와 같이, 일부 구체예에서, 본원에서 개시되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 경쇄 가변 영역은 서열번호 207-245에 따른 임의의 서열에 적어도 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 본원에서 개시되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 경쇄 가변 영역은 서열번호 207-245로 구성된 군으로부터 선택된다. 일부 구체예에서, 예시적 VL가 도 31에 도시된다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
임의의 본원에서 개시되는 사용 방법에 적용되는 바와 같이, 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 a) 서열번호 169 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 207 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; b) 서열번호 170 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 208 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; c) 서열번호 171 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 209 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; d) 서열번호 172 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 210 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; e) 서열번호 173 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 211 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; f) 서열번호 174 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 212 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; g) 서열번호 175 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 213 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; h) 서열번호 176 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 214 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; i) 서열번호 177 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 215 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; j) 서열번호 178 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 216 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; k) 서열번호 179 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 217 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; l) 서열번호 180 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 218 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; m) 서열번호 181 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 219 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; n) 서열번호 181 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 220 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; o) 서열번호 182 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 221 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; p) 서열번호 183 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 222 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; q) 서열번호 184 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 223 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; r) 서열번호 185 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 224 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; s) 서열번호 186 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 225 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; t) 서열번호 187 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 226 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; u) 서열번호 188 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 227 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; v) 서열번호 189 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 228 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; w) 서열번호 190 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 229 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; x) 서열번호 191 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 230 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; y) 서열번호 192 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 231 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; z) 서열번호 193 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 232 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; aa) 서열번호 194 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 233 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; ab) 서열번호 195 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 234 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; ac) 서열번호 196 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 235 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; ad) 서열번호 197 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 236 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; ae) 서열번호 198 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 237 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; af) 서열번호 199 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 238 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; ag) 서열번호 197 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 239 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; ah) 서열번호 200 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 240 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; ai) 서열번호 201 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 241 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; aj) 서열번호 202 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 242 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; ak) 서열번호 203 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 240 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; al) 서열번호 204 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 243 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; am) 서열번호 205 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 244 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; 또는 an) 서열번호 206 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 245 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3를 포함한다. 일부 구체예에서, 중쇄 가변 영역 CDR의 예시적 조합이 도 34에 도시된다. 일부 구체예에서, 중쇄 가변 영역 CDR의 예시적 조합이 도 35에 도시된다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
임의의 본원에서 개시되는 사용 방법에 적용되는 바와 같이, 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 a) 서열번호 169의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 207의 경쇄 가변 영역; b) 서열번호 170의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 208의 경쇄 가변 영역; c) 서열번호 171의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 209의 경쇄 가변 영역; d) 서열번호 172의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 210의 경쇄 가변 영역; e) 서열번호 173의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 211의 경쇄 가변 영역; f) 서열번호 174의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 212의 경쇄 가변 영역; g) 서열번호 175의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 213의 경쇄 가변 영역; h) 서열번호 176의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 214의 경쇄 가변 영역; i) 서열번호 177의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 215의 경쇄 가변 영역; j) 서열번호 178의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 216의 경쇄 가변 영역; k) 서열번호 179의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 217의 경쇄 가변 영역; l) 서열번호 180의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 218의 경쇄 가변 영역; m) 서열번호 181의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 219의 경쇄 가변 영역; n) 서열번호 181의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 220의 경쇄 가변 영역; o) 서열번호 182의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 221의 경쇄 가변 영역; p) 서열번호 183의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 222의 경쇄 가변 영역; q) 서열번호 184의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 223의 경쇄 가변 영역; r) 서열번호 185의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 224의 경쇄 가변 영역; s) 서열번호 186의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 225의 경쇄 가변 영역; t) 서열번호 187의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 226의 경쇄 가변 영역; u) 서열번호 188의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 227의 경쇄 가변 영역; v) 서열번호 189의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 228의 경쇄 가변 영역; w) 서열번호 190의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 229의 경쇄 가변 영역; x) 서열번호 191의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 230의 경쇄 가변 영역; y) 서열번호 192의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 231의 경쇄 가변 영역; z) 서열번호 193의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 232의 경쇄 가변 영역; aa) 서열번호 194의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 233의 경쇄 가변 영역; ab) 서열번호 195의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 234의 경쇄 가변 영역; ac) 서열번호 196의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 235의 경쇄 가변 영역; ad) 서열번호 197의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 236의 경쇄 가변 영역; ae) 서열번호 198의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 237의 경쇄 가변 영역; af) 서열번호 199의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 238의 경쇄 가변 영역; ag) 서열번호 197의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 239의 경쇄 가변 영역; ah) 서열번호 200의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 240의 경쇄 가변 영역; ai) 서열번호 201의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 241의 경쇄 가변 영역; aj) 서열번호 202의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 242의 경쇄 가변 영역; ak) 서열번호 203의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 240의 경쇄 가변 영역; al) 서열번호 204의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 243의 경쇄 가변 영역; am) 서열번호 205의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 244의 경쇄 가변 영역; 또는 an) 서열번호 206의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 245의 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
임의의 본원에서 개시되는 사용 방법에 적용되는 바와 같이, 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 서열번호 246-286 중 하나의 중쇄 (HC) 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 예시적 HC 서열이 도 32에 도시된다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
임의의 본원에서 개시되는 사용 방법에 적용되는 바와 같이, 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 서열번호 287-324 중 하나의 경쇄 (LC) 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 예시적 HC 서열이 도 33에 도시된다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
임의의 본원에서 개시되는 사용 방법에 적용되는 바와 같이, 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 13H12.2F8, 19D9.2E5, 14H10.2C9, 2D10.2B2, 4A11.2B5, 6H6.2D6, 20H5.A3, 19B5.2E6, 23H9.2E4, 20D11.2C6, 15G7.2A7, 4G2.2G6, 3B11.2G2, 13A12.2E5, 7D8.2D8, 15F10.2D6, 12G5.D7, 24D12.2H9, 13G4.2F8, 9H2.2H1, 23B10.2B12, 6B3.2D3, F846C.1B2, F846C.1F5, F846C.1H12, F846C.1H5, F846C.2H3, F846TC.14A2, F846TC.14E4, F846TC.16B5, F846TC.7F10, F847C.10B9, F847C.11B1, F847C.12F12, F847C.26F5, F847C.4B10, F849C.8D10, F849C.8H3, 847.14H4, mIMT001, IMT-001 (TB001), 및 IMT-006 (TB006), 또는 그들의 결합 단편으로 구성된 군으로부터 선택된다. 일부 구체예에서, 전술된 항체 각각과 연관된 중쇄 및 경쇄 CDR이 도 36에 도시된다. 일부 구체예에서, 전술된 항체 각각과 연관된 VH 및 VL가 도 37에 도시된다. 일부 구체예에서, 전술된 항체 각각과 연관된 HC 및 LC가 도 38에 도시된다.
임의의 본원에서 개시되는 사용 방법에 적용되는 바와 같이, 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 페이로드를 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 페이로드는 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편에 접합된다. 일부 구체예에서, 상기 페이로드는 세포독성(cytotoxic) 페이로드, 미세소관 파괴제(microtubule disrupting agent), DNA 변형제(DNA modifying agent), Akt 억제제, 폴리머라아제 억제제, 검출가능한 모이어티, 면역조절제, 면역독소, 핵산 폴리머, 압타머, 펩티드, 또는 이들의 조합이다. 일부 구체예에서, 상기 페이로드는 검출가능한 모이어티이다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
임의의 본원에서 개시되는 사용 방법에 적용되는 바와 같이, 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 인간화 항체이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 전장 항체 또는 그의 결합 단편이거나 이를 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 이중특이성 항체 또는 그의 결합 단편이거나 이를 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 1가 Fab', 2가 Fab2, 단일-사슬 가변 단편 (scFv), 디아바디, 미니바디, 나노바디, 단일-도메인 항체 (sdAb), 또는 카멜리드 항체 또는 그의 결합 단편이거나 이를 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 IgG 프레임워크이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 IgG1, IgG2, 또는 IgG4 프레임워크이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
일부 경우에, 본원에 기재된 바와 같은 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 개체에서 질병 또는 장애, 또는 그의 증상을 치료하기 위해 이용될 수 있다. 일부 경우에, 상기 질병 또는 장애는 당뇨병이다. 일부 구체예에서, 상기 질병 또는 장애는 인슐린-의존성 당뇨병이다. 일부 구체예에서, 상기 질병 또는 장애는 인슐린-비의존성 당뇨병이다. 일부 구체예에서, 상기 질병 또는 장애는 타입 I 당뇨병이다. 일부 구체예에서, 상기 질병 또는 장애는 타입 II 당뇨병이다. 일부 구체예에서, 상기 질병 또는 장애는 염증성 장 질환 (IBD)이다. 일부 경우에, 상기 질병 또는 장애는 비알코올성 지방간 질환 (NAFLD)이다. 일부 구체예에서, 상기 질병 또는 장애는 비알코올성 지방간염 (NASH)이다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
일부 경우에, 상기 방법은 개체에서 질병 또는 장애의 치료를 제공한다. 일부 경우에, 상기 방법은 본원에 기재된 바와 같은 질병 또는 장애를 갖거나, 갖는 것으로 의심되거나, 또는 이를 발병할 위험이 있는 개체에게 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 방법은 당뇨병을 갖거나, 갖는 것으로 의심되거나, 또는 이를 발병할 위험이 있는 개체에게 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 방법은 IBD를 갖거나, 갖는 것으로 의심되거나, 또는 이를 발병할 위험이 있는 개체에게 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 방법은 NAFLD를 갖거나, 갖는 것으로 의심되거나, 또는 이를 발병할 위험이 있는 개체에게 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구체예에서, NASH를 갖거나, 갖는 것으로 의심되거나, 또는 이를 발병할 위험이 있는 개체에게 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
일부 양태에서, 상기 방법은 개체에서 당뇨병과 연관된 증상의 치료를 제공한다. 일부 구체예에서, 상기 방법은 상기 개체에게 본원에 기재된 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 투여하는 단계를 포함하여, 필요로 하는 개체에서 당 내성(glucose resistance)을 감소시키는 것을 제공한다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 상기 개체에서 당 내성을 적어도 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99%, 또는 전술된 퍼센트 중 2개에 의해 정의되는 범위 내의 퍼센트 만큼 감소시킨다. 일부 구체예에서, 상기 방법은 상기 개체에게 본원에 기재된 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 투여하는 단계를 포함하여, 필요로 하는 개체에서 인슐린 저항성(insulin resistance)을 감소시키는 것을 제공한다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 상기 개체에서 인슐린 저항성을 적어도 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99%, 또는 전술된 퍼센트 중 2개에 의해 정의되는 범위 내의 퍼센트 만큼 감소시킨다. 일부 구체예에서, 상기 방법은 상기 개체에게 본원에 기재된 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 투여하는 단계를 포함하여, 필요로 하는 개체에서 체중 증가를 감소시키는 것을 제공한다. 일부 구체예에서, 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 상기 개체에서 체중 증가를 적어도 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99%, 또는 전술된 퍼센트 중 2개에 의해 정의되는 범위 내의 퍼센트로 감소시킨다. 일부 구체예에서, 상기 방법은 상기 개체에게 본원에 기재된 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 투여하는 단계를 포함하여, 필요로 하는 개체에서 간 지방증(liver steatosis)을 경감시키는 것을 제공한다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 상기 개체에서 간 지방증을 적어도 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99%, 또는 전술된 퍼센트 중 2개에 의해 정의되는 범위 내의 퍼센트로 경감시킨다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
필요로 하는 개체에서 당뇨병을 치료하는 방법이 본원에 개시된다. 일부 구체예에서, 상기 방법은 Gal3에 선택적으로 결합하고 Gal3와 인슐린 수용체 또는 인테그린, 또는 둘 모두의 상호작용을 차단하는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 상기 개체에게 투여하는 단계를 포함하여, 그에 의해 상기 개체에서 당뇨병을 치료한다. 일부 구체예에서, 상기 당뇨병은 인슐린-의존성 당뇨병이다. 일부 구체예에서, 상기 당뇨병은 인슐린-비의존성 당뇨병이다. 일부 구체예에서, 상기 당뇨병은 타입 I 당뇨병이다. 일부 구체예에서, 상기 당뇨병은 타입 II 당뇨병이다. 일부 구체예에서, 상기 치료는 상기 필요로 하는 개체에서 당 내성을 감소시키는 것을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 치료는 상기 필요로 하는 개체에서 인슐린 감수성을 감소시키는 것을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 치료는 상기 필요로 하는 개체에서 체중 증가를 감소시키는 것을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 치료는 상기 필요로 하는 개체에서 간 지방증을 경감시키는 것을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 방법은 상기 투여하는 단계 전에 당뇨병을 갖거나 또는 당뇨병에 걸릴 위험을 갖는 개체를 선택하는 단계를 더 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 방법은 상기 투여하는 단계 후에 상기 개체에서 당뇨병과 연관된 증상의 개선을 검출하는 단계를 더 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 인슐린 수용체는 서열번호 2의 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 인테그린은 ITGa1, ITGa2, ITGa3, ITGa4, ITGa5, ITGa6, ITGa7, ITGa8, ITGa9, ITGa10, ITGa11, ITGaD, ITGaE, ITGaL, ITGaM, ITGaV, ITGa2B, ITGa2X, ITGb1, ITGb2, ITGb3, ITGb4, ITGb5, ITGb6, ITGb7, ITGb8, 또는 이들의 조합으로부터 선택된다. 일부 구체예에서, 상기 인테그린은 서열번호 339-342로부터 선택된 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 하나 이상의 추가적인 치료 조성물과 함께 투여된다. 일부 구체예에서, 상기 하나 이상의 추가적인 치료 조성물은 인슐린, 인슐린 유도체 또는 그의 모방체(mimetic), 인슐린 아스파르트(insulin aspart), 인슐린 글루리신(insulin glulisine), 인슐린 리스프로(insulin lispro), 인슐린 이소판(insulin isophane), 인슐린 데글루덱(insulin degludec), 인슐린 데테미르(insulin detemir), 인슐린 징크(insulin zinc), 인슐린 글라르긴(insulin glargine), 바나듐, 비구아니드(biguarnides), 메트포르민(metformin), 펜포르민(phenformin), 부포르민(buformin), 티아졸리디네디온(thiazolidinediones), 로시글리타존(rosiglitazone), 피오글리타존(pioglitazone), 트로글리타존(troglitazone), 톨리미돈(tolimidone), 술포닐우레아(sulfonylureas), 톨부타미드(tolbutamide), 아세토헥사미드(acetohexamide), 톨라자미드(tolazamide), 클로르프로파미드(chlorpropamide), 글리피지드(glipizide), 글리벤클라미드(glibenclamide), 글리메피리드(glimepiride), 글리클라지드(gliclazide), 글리클로피라미드(glyclopyramide), 글리퀴돈(gliquidone), 메글리티니드(meglitinides), 레파글리니드(repaglinide), 나테글리니드(nateglinide), 알파-글루코시다아제 억제제, 미글리톨(miglitol), 아카르보스(acarbose), 보글리보스(voglibose), 인크레틴(incretins), GLP-1(glucagon-like peptide 1), GLP 아고니스트(glucagon-like peptide agonists), 엑세나티드(exenatide), 리라글루티드(liraglutide), 타스포글루티드(taspoglutide), 릭시세나티드(lixisenatide), 세마글루티드(semaglutide), 둘라글루티드(dulaglutide), GIP(gastric inhibitory peptide), DPP-4(dipeptidyl peptidase-4) 억제제, 빌다글립틴(vildagliptin), 시타글립틴(sitagliptin), 삭사글립틴(saxagliptin), 리나글립틴(linagliptin), 알로글립틴(alogliptin), 셉타글립틴(septagliptin), 테넬리글립틴(teneligpliptin), 게미글립틴(gemigliptin), 프람린티드(pramlintide), 다파글리플로진(dapagliflozin), 카나글리플로진(canagliflozin), 엠파글리플로진(empagliflozin), 또는 레모글리플로진(remogliflozin), 또는 이들의 조합을 포함한다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
필요로 하는 개체에서 염증성 장 증후군을 치료하는 방법이 본원에 개시된다. 일부 구체예에서, 상기 방법은 Gal3에 선택적으로 결합하고 Gal3와 인테그린의 상호작용을 차단하는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 상기 개체에게 투여하는 단계를 포함하여, 그에 의해 상기 개체에서 염증성 장 증후군을 치료한다. 일부 구체예에서, 상기 염증성 장 증후군은 궤양성 대장염 또는 크론병, 또는 둘 모두이다. 일부 구체예에서, 상기 방법은 상기 투여하는 단계 전에 염증성 장 증후군을 갖거나 또는 염증성 장 증후군에 걸릴 위험을 갖는 개체를 선택하는 단계를 더 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 방법은 상기 투여하는 단계 후에 상기 개체에서 염증성 장 증후군과 연관된 증상의 개선을 검출하는 단계를 더 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 Gal3와 인테그린의 상호작용의 차단은 상기 개체에서 림프구 부착 또는 활성, 또는 둘 모두를 감소시킨다. 일부 구체예에서, 상기 림프구 부착 또는 활성, 또는 둘 모두는 적어도 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99%, 또는 전술된 퍼센트 중 2개에 의해 정의되는 범위 내의 퍼센트만큼 감소된다. 일부 구체예에서, 상기 인테그린은 ITGa1, ITGa2, ITGa3, ITGa4, ITGa5, ITGa6, ITGa7, ITGa8, ITGa9, ITGa10, ITGa11, ITGaD, ITGaE, ITGaL, ITGaM, ITGaV, ITGa2B, ITGa2X, ITGb1, ITGb2, ITGb3, ITGb4, ITGb5, ITGb6, ITGb7, ITGb8, 또는 이들의 조합으로부터 선택된다. 일부 구체예에서, 상기 인테그린은 서열번호 339-342로부터 선택된 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 하나 이상의 추가적인 치료 조성물과 함께 투여된다. 일부 구체예에서, 상기 하나 이상의 추가적인 치료 조성물은 메살라진, 면역억제제, 프레드니손, TNF 억제제, 아자티오프린, 메토트렉세이트, 6-머캅토퓨린, 또는 리팍시민, 또는 이들의 조합을 포함한다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
필요로 하는 개체에서 비알코올성 지방간 질환 (NAFLD)을 치료하는 방법이 본원에 개시된다. 일부 구체예에서, Gal3에 선택적으로 결합하고 Gal3와 인슐린 수용체의 상호작용을 차단하는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 상기 개체에게 투여하는 단계를 포함하여, 그에 의해 상기 개체에서 NAFLD를 치료한다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
필요로 하는 개체에서 비알코올성 지방간염 (NASH)을 치료하는 방법이 본원에 개시된다. 일부 구체예에서, 상기 방법은 Gal3에 선택적으로 결합하고 Gal3와 인슐린 수용체의 상호작용을 차단하는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 상기 개체에게 투여하는 단계를 포함하여, 그에 의해 상기 개체에서 NASH를 치료한다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
본원에 개시되는 방법의 일부 구체예에서, 상기 Gal3와 인슐린 수용체 또는 인테그린, 또는 둘 모두의 상호작용은 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 부재시 상호작용의 80% 미만, 75% 미만, 70% 미만, 65% 미만, 60% 미만, 55% 미만, 50% 미만, 45% 미만, 40% 미만, 35% 미만, 30% 미만, 25% 미만, 20% 미만, 15% 미만, 10% 미만, 5%, 또는 1% 미만까지 감소된다.
임의의 본원에서 개시되는 치료 방법에 적용되는 바와 같이, 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3의 N-말단 도메인에 결합한다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3에 1 nM 미만, 1.2 nM 미만, 2 nM 미만, 5 nM 미만, 10 nM 미만, 13.5 nM 미만, 15 nM 미만, 20 nM 미만, 25 nM 미만, 또는 30 nM 미만의 해리 상수 (KD)로 결합한다.
임의의 본원에서 개시되는 치료 방법에 적용되는 바와 같이, 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 서열번호 3-26의 펩티드 중 하나 이상에 결합한다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 펩티드 1 (ADNFSLHDALSGSGNPNPQG; 서열번호 3), 펩티드 4 (GAGGYPGASYPGAYPGQAPP; 서열번호 6), 펩티드 6 (GAYPGQAPPGAYPGAPGAYP; 서열번호 8), 펩티드 7 (AYPGAPGAYPGAPAPGVYPG; 서열번호 9), 또는 이들의 조합에 의해 정의된 Gal3의 영역 내에 존재하는 에피토프에 결합한다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
임의의 본원에서 개시되는 치료 방법에 적용되는 바와 같이, 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 GxYPG의 모티프를 포함하는 Gal3의 에피토프에 결합하고, x는 알라닌 (A), 글리신 (G), 또는 발린 (V)이다. 일부 구체예에서, 본원에서 개시된 항-Gal3 항체는 3개의 아미노산에 의해 분리된 2개의 GxYPG 모티프를 포함하는 Gal3의 에피토프에 결합하고, 상기 모티프에서 x는 A, G, 또는 V이다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
임의의 본원에서 개시되는 치료 방법에 적용되는 바와 같이, 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 (1) VL-CDR1, VL-CDR2, 및 VL-CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역; 및 (2) VH-CDR1, VH-CDR2, 및 VH-CDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 VL-CDR1은 서열번호 100-128에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 VL-CDR2는 서열번호 129-144에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 VL-CDR3은 서열번호 145-168에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 VH-CDR1은 서열번호 27-47에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 VH-CDR2는 서열번호 48-69에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 VH-CDR3은 서열번호 70-99에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다.
임의의 본원에서 개시되는 치료 방법에 적용되는 바와 같이, 일부 구체예에서, 예시적인 VH-CDR1 서열이 도 28a에 도시된다. 일부 구체예에서, 예시적인 VH-CDR2 서열이 도 28b에 도시된다. 일부 구체예에서, 예시적인 VH-CDR3 서열이 도 28c에 도시된다. 일부 구체예에서, 예시적인 VL-CDR1 서열이 도 29a에 도시된다. 일부 구체예에서, 예시적인 VL-CDR2 서열이 도 29b에 도시된다. 일부 구체예에서, 예시적인 VL-CDR3 서열이 도 29c에 도시된다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
임의의 본원에서 개시되는 치료 방법에 적용되는 바와 같이, 일부 구체예에서, 본원에서 개시되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 중쇄 가변 영역은 서열번호 169-206에 따른 임의의 서열에 적어도 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 본원에서 개시되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 중쇄 가변 영역은 서열번호 169-206으로 구성된 군으로부터 선택된다. 일부 구체예에서, 예시적 VH가 도 30에 도시된다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
임의의 본원에서 개시되는 치료 방법에 적용되는 바와 같이, 일부 구체예에서, 본원에서 개시되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 경쇄 가변 영역은 서열번호 207-245에 따른 임의의 서열에 적어도 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 본원에서 개시되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 경쇄 가변 영역은 서열번호 207-245로 구성된 군으로부터 선택된다. 일부 구체예에서, 예시적 VL가 도 31에 도시된다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
임의의 본원에서 개시되는 치료 방법에 적용되는 바와 같이, 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 a) 서열번호 169 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 207 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; b) 서열번호 170 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 208 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; c) 서열번호 171 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 209 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; d) 서열번호 172 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 210 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; e) 서열번호 173 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 211 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; f) 서열번호 174 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 212 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; g) 서열번호 175 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 213 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; h) 서열번호 176 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 214 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; i) 서열번호 177 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 215 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; j) 서열번호 178 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 216 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; k) 서열번호 179 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 217 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; l) 서열번호 180 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 218 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; m) 서열번호 181 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 219 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; n) 서열번호 181 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 220 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; o) 서열번호 182 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 221 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; p) 서열번호 183 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 222 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; q) 서열번호 184 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 223 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; r) 서열번호 185 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 224 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; s) 서열번호 186 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 225 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; t) 서열번호 187 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 226 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; u) 서열번호 188 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 227 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; v) 서열번호 189 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 228 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; w) 서열번호 190 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 229 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; x) 서열번호 191 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 230 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; y) 서열번호 192 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 231 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; z) 서열번호 193 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 232 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; aa) 서열번호 194 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 233 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; ab) 서열번호 195 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 234 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; ac) 서열번호 196 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 235 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; ad) 서열번호 197 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 236 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; ae) 서열번호 198 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 237 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; af) 서열번호 199 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 238 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; ag) 서열번호 197 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 239 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; ah) 서열번호 200 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 240 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; ai) 서열번호 201 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 241 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; aj) 서열번호 202 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 242 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; ak) 서열번호 203 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 240 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; al) 서열번호 204 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 243 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; am) 서열번호 205 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 244 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; 또는 an) 서열번호 206 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 245 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3를 포함한다. 일부 구체예에서, 중쇄 가변 영역 CDR의 예시적 조합이 도 34에 도시된다. 일부 구체예에서, 경쇄 가변 영역 CDR의 예시적 조합이 도 35에 도시된다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
임의의 본원에서 개시되는 치료 방법에 적용되는 바와 같이, 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 a) 서열번호 169의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 207의 경쇄 가변 영역; b) 서열번호 170의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 208의 경쇄 가변 영역; c) 서열번호 171의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 209의 경쇄 가변 영역; d) 서열번호 172의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 210의 경쇄 가변 영역; e) 서열번호 173의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 211의 경쇄 가변 영역; f) 서열번호 174의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 212의 경쇄 가변 영역; g) 서열번호 175의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 213의 경쇄 가변 영역; h) 서열번호 176의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 214의 경쇄 가변 영역; i) 서열번호 177의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 215의 경쇄 가변 영역; j) 서열번호 178의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 216의 경쇄 가변 영역; k) 서열번호 179의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 217의 경쇄 가변 영역; l) 서열번호 180의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 218의 경쇄 가변 영역; m) 서열번호 181의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 219의 경쇄 가변 영역; n) 서열번호 181의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 220의 경쇄 가변 영역; o) 서열번호 182의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 221의 경쇄 가변 영역; p) 서열번호 183의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 222의 경쇄 가변 영역; q) 서열번호 184의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 223의 경쇄 가변 영역; r) 서열번호 185의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 224의 경쇄 가변 영역; s) 서열번호 186의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 225의 경쇄 가변 영역; t) 서열번호 187의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 226의 경쇄 가변 영역; u) 서열번호 188의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 227의 경쇄 가변 영역; v) 서열번호 189의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 228의 경쇄 가변 영역; w) 서열번호 190의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 229의 경쇄 가변 영역; x) 서열번호 191의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 230의 경쇄 가변 영역; y) 서열번호 192의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 231의 경쇄 가변 영역; z) 서열번호 193의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 232의 경쇄 가변 영역; aa) 서열번호 194의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 233의 경쇄 가변 영역; ab) 서열번호 195의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 234의 경쇄 가변 영역; ac) 서열번호 196의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 235의 경쇄 가변 영역; ad) 서열번호 197의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 236의 경쇄 가변 영역; ae) 서열번호 198의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 237의 경쇄 가변 영역; af) 서열번호 199의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 238의 경쇄 가변 영역; ag) 서열번호 197의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 239의 경쇄 가변 영역; ah) 서열번호 200의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 240의 경쇄 가변 영역; ai) 서열번호 201의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 241의 경쇄 가변 영역; aj) 서열번호 202의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 242의 경쇄 가변 영역; ak) 서열번호 203의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 240의 경쇄 가변 영역; al) 서열번호 204의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 243의 경쇄 가변 영역; am) 서열번호 205의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 244의 경쇄 가변 영역; 또는 an) 서열번호 206의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 245의 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
임의의 본원에서 개시되는 치료 방법에 적용되는 바와 같이, 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 서열번호 246-286 중 하나의 중쇄 (HC) 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 예시적 HC 서열이 도 32에 도시된다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
임의의 본원에서 개시되는 치료 방법에 적용되는 바와 같이, 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 서열번호 287-324 중 하나의 경쇄 (LC) 서열을 포함한다. 일부 구체예에서, 예시적 HC 서열이 도 33에 도시된다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
임의의 본원에서 개시되는 치료 방법에 적용되는 바와 같이, 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 13H12.2F8, 19D9.2E5, 14H10.2C9, 2D10.2B2, 4A11.2B5, 6H6.2D6, 20H5.A3, 19B5.2E6, 23H9.2E4, 20D11.2C6, 15G7.2A7, 4G2.2G6, 3B11.2G2, 13A12.2E5, 7D8.2D8, 15F10.2D6, 12G5.D7, 24D12.2H9, 13G4.2F8, 9H2.2H1, 23B10.2B12, 6B3.2D3, F846C.1B2, F846C.1F5, F846C.1H12, F846C.1H5, F846C.2H3, F846TC.14A2, F846TC.14E4, F846TC.16B5, F846TC.7F10, F847C.10B9, F847C.11B1, F847C.12F12, F847C.26F5, F847C.4B10, F849C.8D10, F849C.8H3, 847.14H4, mIMT001, IMT-001 (TB001), 및 IMT-006 (TB006), 또는 그의 결합 단편으로 구성된 군으로부터 선택된다. 일부 구체예에서, 전술된 항체 각각과 연관된 중쇄 및 경쇄 CDR이 도 36에 도시된다. 일부 구체예에서, 전술된 항체 각각과 연관된 VH 및 VL가 도 37에 도시된다. 일부 구체예에서, 전술된 항체 각각과 연관된 HC 및 LC가 도 38에 도시된다.
임의의 본원에서 개시되는 치료 방법에 적용되는 바와 같이, 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 장내로, 경구로, 비강내로, 비경구로, 두개내로, 피하로, 근육내로, 피내로, 또는 정맥내로, 또는 이들의 조합으로 투여된다.
임의의 본원에서 개시되는 치료 방법에 적용되는 바와 같이, 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 페이로드를 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 페이로드는 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편에 접합된다. 일부 구체예에서, 상기 페이로드는 세포독성 페이로드, 미세소관 파괴제, DNA 변형제, Akt 억제제, 폴리머라아제 억제제, 검출가능한 모이어티, 면역조절제(immunomodulatory agent), 면역 조절자 (immune modulator), 면역독소, 핵산 폴리머, 압타머, 펩티드, 또는 이들의 조합이다. 일부 구체예에서, 상기 페이로드는 검출가능한 모이어티이다.
임의의 본원에서 개시되는 치료 방법에 적용되는 바와 같이, 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 인간화 항체이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 전장 항체 또는 그의 결합 단편이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 이중특이성 항체 또는 그의 결합 단편이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 1가 Fab', 2가 Fab2, 단일-사슬 가변 단편 (scFv), 디아바디, 미니바디, 나노바디, 단일-도메인 항체 (sdAb), 또는 카멜리드 항체 또는 그의 결합 단편이거나 이를 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 IgG 프레임워크이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 IgG1, IgG2, 또는 IgG4 프레임워크이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
임의의 본원에서 개시되는 치료 방법에 적용되는 바와 같이, 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 전신 투여를 위해 제제화된다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 비경구 투여를 위해 제제화된다. 일부 구체예에서, 1개 초과의 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편이 투여된다. 일부 구체예에서, 1개 초과의 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편이 투여되는 경우, 상기 1개 초과의 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 본원에 개시된 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편으로부터 선택될 수 있다. 일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는, 본원에 개시된 임의의 방법은 Gal3에 결합하는 항원 결합 분자를 이용하여 수행될 수 있다.
임의의 본원에서 개시되는 치료 방법에 적용되는 바와 같이, 상기 개체는 포유동물이다. 일부 구체예에서, 상기 포유동물은 인간, 고양이, 개, 마우스, 랫트, 햄스터, 설치류, 돼지, 소, 말, 양, 또는 염소이다. 일부 구체예에서, 상기 포유동물은 인간이다. 일부 구체예에서, 상기 개체는 타입 I 당뇨병 또는 타입 II 당뇨병을 갖는다.
항체 생산
일부 경우에, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 항원성 조성물을 생산 동물에게 주사함으로써 표준 프로토콜에 의해 생산된다. 예를 들어, Harlow and Lane, Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, 1988을 참조한다. 전체 단백질, 또는 상기 단백질의 더 큰 부분을 이용할 경우, 항체는 단백질 및 적합한 아쥬반트 (예를 들면, Freund's, Freund's 완전, 수중유 에멀젼 등)로 생산 동물을 면역화함으로써 생성될 수 있다. 더 작은 펩티드를 이용할 경우, 면역자극성 접합체를 제조하기 위해 상기 펩티드를 더 큰 분자와 접합시키는 것이 유리하다. 이러한 용도로 상업적으로 이용 가능한 통상적으로 사용되는 접합체 단백질은 우혈청 알부민 (BSA) 및 KLH (keyhole limpet hemocyanin)를 포함한다. 특정 에피토프에 대한 항체를 생성하기 위해, 전장 서열로부터 유래된 펩티드를 사용할 수 있다. 대안적으로, 단백질 표적의 비교적 짧은 펩티드 부분에 대한 항체를 생성하기 위해, 상기 폴리펩티드가 담체 단백질 예컨대 오브알부민 (ovalbumin), BSA 또는 KLH에 결합되는 경우 탁월한 면역 반응이 유도될 수 있다.
다중클론 또는 단일클론 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 인간 면역글로불린을 생성하도록 유전적으로 변형된 동물로부터 생성될 수 있다. 유전자이식 동물은 처음에 상기 동물의 천연 항체를 생성하지 않는 "넉-아웃 (knock-out)" 동물을 생산하고, 상기 동물을 인간 항체 유전자좌에 의해(예를 들면, 인간 인공 염색체의 사용에 의해) 안정적으로 형질전환시킴으로써 생성될 수 있다. 이러한 경우에, 상기 동물은 인간 항체 만을 만든다. 이러한 동물을 생성하고, 이로부터 항체를 유도하는 기술은 미국 특허 제6,162,963호 및 제6,150,584호에 기재되어 있고, 이들은 각각 전체가 본원에 참조로 통합된다. 이러한 항체는 인간 이종 항체 (human xenogenic antibodies)로 지칭될 수 있다.
대안적으로, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 인간 가변 영역을 포함하는 파아지 라이브러리로부터 생성될 수 있다. 전체가 참조에 의해 본원에 통합된, 미국 특허 제6,174,708호를 참조한다.
본원에 개시된 임의의 구체예의 일부 양태에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 하이브리도마 (hybridoma)에 의해 생성된다.
단일클론 항-Gal3 항체의 경우, 하이브리도마는 자극된 면역 세포, 예를 들면, 접종된 동물의 비장으로부터 자극된 면역 세포를 단리함으로써 형성될 수 있다. 그 후, 이러한 세포를 세포 배양에서 무한정 복제할 수 있는 불멸화 세포 (immortalized cells), 예를 들면, 골수종 세포 또는 형질전환된 세포에 융합시키고, 이에 의해 불멸의 면역글로불린-분비 세포주를 생산할 수 있다. 사용되는 불멸 세포주는 특정 영양소의 이용에 필요한 효소가 결핍된 것으로 선택될 수 있다. 다수의 이러한 세포주 (예를 들면, 골수종)가 당업자에게 알려져 있으며, 예를 들어 티미딘 키나제 (TK) 또는 하이포크산틴-구아닌 포스포리복실 트란스퍼라제 (HGPRT)를 포함한다. 이러한 결핍은 예를 들어 하이포크산틴 아미노프테린티미딘 배지 (HAT)에서 성장할 수 있는 이들의 능력에 따라 융합된 세포를 선택할 수 있게 한다.
또한, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 유전 공학에 의해 생성될 수 있다.
본원에 개시된 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 인간에서 바람직하지 않은 면역 반응, 예를 들어 아나필락시스 쇼크 (anaphylactic shock)를 유도하는 감소된 경향을 갖고, 또한 항체 치료제 또는 영상화제에 의한 반복 투여를 막는 면역 반응(예를 들면, 인간-항-마우스-항체 "HAMA" 반응)을 프라이밍하는 감소된 경향을 보일 수 있다. 이러한 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 인간화, 키메라 또는 이종 인간 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
키메라 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 예를 들어, 우세하게 인간 도메인을 갖는 항체를 생성하기 위해, 마우스 (또는 다른 동물-유래) 하이브리도마 클론으로부터 수득된 마우스 가변 경쇄 및 중쇄 영역 (VK 및 VH)을 인간 불변 경쇄 및 중쇄 영역과 결합시키는 재조합 수단에 의해 제조될 수 있다. 이러한 키메라 항체의 생산은 당해 분야에 잘 알려져 있고, (예를 들어, 전체가 본원에 참조로 통합된 미국 특허 제5,624,659호에 기재된 바와 같은) 표준 수단에 의해 달성될 수 있다.
비-인간 (예를 들면, 설치류 또는 영장류) 항체에 적용되는 용어 "인간화 (humanized)"는 비-인간 면역글로불린으로부터 유래된 최소 서열을 포함하는 하이브리드 면역글로불린, 면역글로불린 사슬 또는 이의 단편이다. 대부분의 경우, 인간화 항체는 인간 면역글로불린 (수령자 항체)이고, 수령자의 상보성 결정 영역 (CDR)의 잔기가 원하는 특이성, 친화도 및 용량을 갖는 비-인간 종 (공여자 항체), 예를 들면, 마우스, 랫트, 토끼 또는 영장류의 CDR로부터의 잔기로 대체된다. 일부 경우에, 인간 면역글로불린의 Fv 프레임워크 영역 (FR) 잔기가 상응하는 비-인간 잔기로 대체된다. 또한, 인간화 항체는 수령자 항체나 도입된 CDR 또는 프레임워크 서열에서 발견되지 않는 잔기를 포함할 수 있다. 항체 성능을 추가로 개선 및 최적화하고, 인체에 도입되는 경우 면역원성을 최소화하기 위해 이러한 변형이 이루어진다. 일부 예에서, 상기 인간화 항체는 적어도 하나, 전형적으로 2개의 가변 도메인을 실질적으로 전부 포함할 것이며, CDR 영역의 전부 또는 실질적으로 전부는 비-인간 면역글로불린의 것에 해당하고, FR 영역의 전부 또는 실질적으로 전부는 인간 면역글로불린 서열의 것이다. 인간화 항체는 또한 면역글로불린 불변 영역 (Fc), 전형적으로 인간 면역글로불린 불변 영역의 적어도 일부를 포함할 수 있다.
인간화 항체는 인간-유사 면역글로불린 도메인을 함유하고, 동물-유래 항체의 상보성-결정 영역만을 포함하도록 조작될 수 있다. 이는 단일클론 항원 결합 유닛 또는 단일클론 항체의 가변 영역의 초-가변 루프의 서열을 면밀하게 조사하고, 인간 항원 결합 유닛 또는 인간 항체 사슬의 구조에 이를 피팅함으로써 수행될 수 있다. 예를 들어, 전체가 본원에 참조로 통합된, 미국 특허 제6,187,287호를 참조한다.
비-인간 항체를 인간화하는 방법이 당해 분야에 잘 알려져 있다. "인간화 (humanized)" 항체는 서열의 적어도 일부가 그의 최초 형태로부터 인간 면역글로불린과 더 유사하게 변경된 항체이다. 일부 버전에서, 상기 중쇄 (H) 및 경쇄 (L) 불변 (C) 영역이 인간 서열로 대체된다. 이는 가변 (V) 영역 및 이종 면역글로불린 C 영역을 포함하는 융합 폴리펩티드일 수 있다. 일부 버전에서, 상보성 결정 영역 (CDR)은 비-인간 항체 서열을 포함하고, 반면에, V 프레임워크 영역은 또한 인간 서열로 전환된다. 예를 들어, EP 0329400을 참조한다. 일부 버전에서, V 영역은 인간 및 마우스 V 영역의 컨센서스 서열을 디자인하고, 상기 컨센서스 서열들 간에 상이한 CDR 외부의 잔기를 전환함으로써 인간화된다.
대체로, 인간화 항체로부터의 프레임워크 서열은 CDR 그래프팅 (CDR grafting)을 위한 주형으로 제공될 수 있으나; 이러한 프레임워크로의 직접적인 CDR 대체는 항원에 대한 결합 친화도의 상당한 손실을 초래할 수 있는 것으로 입증되었다. Glaser et al. (1992) J. Immunol. 149:2606; Tempest et al. (1992) Biotechnology 9:266; 및 Shalaby et al. (1992) J. Exp. Med. 17:217. 인간 항체 (HuAb)가 원래의 마우스 항체 (muAb)에 대해 더 상동성일수록, 인간 프레임워크가 마우스 CDR에 친화도를 감소시킬 수 있는 왜곡 (distortions)을 도입할 가능성이 낮아질 것이다. 항체 서열 데이터베이스에 대한 서열 상동성 검색을 기반으로, HuAb IC4는 muM4TS.22에 대한 우수한 프레임워크 상동성을 제공하며, 다른 고도로 상동성인 HuAb, 특히 인간 서브그룹 I로부터의 카파 L 사슬 또는 인간 서브그룹 III으로부터의 H 사슬도 적합할 것이다. Kabat et al. (1987). 다양한 컴퓨터 프로그램, 예를 들면, ENCAD (Levitt et al. (1983) J. Mol. Biol. 168:595)가 V 영역에 대한 이상적인 서열을 예측하기 위해 이용가능하다. 따라서, 본 개시는 상이한 가변 (V) 영역을 가진 HuAb를 포함한다. 적합한 V 영역 서열을 결정하고, 이들 서열을 최적화하는 것은 당업자의 기술 범위 내에 속한다. 면역원성이 감소된 항체를 수득하는 방법이 미국 특허 제5,270,202호 및 EP 699,755에 기재되며, 이들 각각은 참조에 의해 그 전체가 본원에 포함된다.
인간화 항체는 모체(parental) 서열 및 인간화 서열의 3차원 모델을 사용한, 모체 서열 및 다양한 개념적 인간화 산물의 분석 과정에 의해 제조될 수 있다. 3차원 면역글로불린 모델은 당업자에게 친숙하다. 선택된 후보 면역글로불린 서열의 가능한 3차원 입체 구조를 예시하고 표시하는 컴퓨터 프로그램이 이용가능하다. 이러한 표시(display)의 검사로, 후보 면역글로불린 서열의 기능에 있어서 잔기의 가능한 역할의 분석, 즉 상기 후보 면역글로불린이 그의 항원에 결합하는 능력에 영향을 미치는 잔기의 분석이 가능하다. 이러한 방식으로, 표적 항원(들)에 대한 친화도 증가와 같은 원하는 항체 특성이 달성되도록, 컨센서스 및 도입 서열로부터 FR 잔기들이 선택되고 조합될 수 있다.
대상 항원 결합 유닛의 인간화 과정은 하기와 같을 수 있다. 최적의 생식계열 억셉터(best-fit germline acceptor) 중쇄 및 경쇄 가변 영역을 그래프팅을 위한 인간 항체 생식계열의 상동성, 정규 구조(canonical structure) 및 물리적 특성에 기반하여 선택한다. mVH/VL 대 그래프팅된 hVH/VL의 컴퓨터 모델링이 수행되고, 프로토타입 인간화 항체 서열이 생성된다. 모델링이 프레임워크 역-돌연변이의 필요성을 나타내는 경우, 표시된 FW 변경을 가진 제2 변이체가 생성된다. 선택된 생식계열 프레임워크 및 마우스 CDR을 코딩하는 DNA 단편이 합성된다. 합성된 DNA 단편을 IgG 발현 벡터로 서브클로닝하고, DNA 시퀀싱으로 서열을 확인한다. 인간화 항체를 293F와 같은 세포에서 발현시키고, 단백질을, 예를 들면 MDM 식세포작용 분석 및 항원 결합 분석에서 테스트한다. 인간화 항원 결합 유닛은 항원 결합 친화도에 있어서, 표적 항원을 발현하는 세포에서, 예를 들면 FACS에 의해, 모체 항원 결합 유닛과 비교된다. 상기 친화도가 모체 항원 결합 유닛보다 2배 미만으로 더 큰 경우, 전술된 바와 같이 인간화 변이체의 제2 라운드가 생성되고, 테스트될 수 있다.
전술된 바와 같이, 항-Gal3 또는 그의 결합 단편은 "1가" 또는 "다가"일 수 있다. 전자는 항원-결합 유닛당 1개의 결합 부위를 갖는 반면, 후자는 동일하거나 또는 상이한 종류의 1개 초과의 항원에 결합할 수 있는 다수의 결합 부위를 포함한다. 항원 결합 유닛은 결합 부위의 수에 따라 2가 (2개의 항원-결합 부위를 가짐), 3가 (3개의 항원-결합 부위를 가짐), 4가 (4개의 항원-결합 부위를 가짐) 등일 수 있다.
다가 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 그의 결합 특이성에 근거하여 추가로 분류될 수 있다. "단일특이성 (monospecific)" 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 동일한 종류의 1개 이상의 항원에 결합할 수 있는 분자이다. "다중특이성 (multispecific)" 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 적어도 2개의 상이한 항원에 대한 결합 특이성을 갖는 분자이다. 이러한 분자는 통상 2개의 별개의 항원 에만 결합할 것이나(즉, 이중특이성 항-Gal3 항체), 삼중특이성 항체와 같은 추가적인 특이성을 갖는 항체는 본원에서 사용되는 경우 이러한 표현에 포함된다. 본 개시는 또한 다중특이성 항-Gal3 항체를 제공한다. 다중특이성 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 적어도 2개의 별개의 항원에 결합할 수 있는 다가 분자, 예를 들면, 각각 2개 및 3개의 별개의 항원에 대한 결합 특이성을 나타내는 이중특이성 및 삼중특이성 분자이다.
일부 구체예에서, 상기 방법은 또한 Gal3와 인슐린 수용체 또는 인테그린 또는 둘 모두간 상호작용을 차단할 수 있는 항체 또는 그의 결합 단편을 스크리닝하거나 또는 확인하는 것을 제공한다. 그러한 방법의 비-한정적 예가 실시예 1에 기재된다. 일부 양태에서, 상기 방법은: (a) Gal3 단백질을 Gal3에 선택적으로 결합하는 항체 또는 그의 결합 단편과 접촉시켜, Gal3-항체 복합체를 형성시키는 단계; (b) 상기 Gal3-항체 복합체를 상기 인슐린 수용체 또는 인테그린 또는 둘 모두와 접촉시키는 단계; (c) 결합되지 않은 인슐린 수용체 또는 인테그린 또는 둘 모두를 제거하는 단계; (d) 상기 Gal3-항체 복합체에 결합된, 상기 인슐린 수용체 또는 인테그린, 또는 둘 모두를 검출하는 단계;를 포함하고, 상기 인슐린 수용체 또는 인테그린, 또는 둘 모두가 (d)에서 검출되지 않는 경우, 상기 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3와 인슐린 수용체 또는 인테그린, 또는 둘 모두의 상호작용을 차단할 수 있는 것이다. 일부 경우에, 상기 방법은 면역분석을 포함한다. 일부 경우에, 상기 면역분석은 ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay)이다.
폴리뉴클레오티드 및 벡터
일부 구체예에서, 본 개시는 본원에서 개시되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 코딩하는 단리된 핵산을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 본 개시는 본원에서 개시되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 코딩하는 핵산 서열을 포함하는 벡터를 제공한다. 일부 구체예에서, 본 개시는 본원에서 개시되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 경쇄 CDR 및 중쇄 CDR을 코딩하는 단리된 핵산을 제공한다.
일부 구체예에서, 상기 핵산은 서열번호 27-47로부터 선택된 중쇄 CDR1 펩티드 서열을 코딩하는 핵산이다. 일부 구체예에서, 상기 핵산은 서열번호 48-69로부터 선택된 중쇄 CDR2 펩티드 서열을 코딩하는 핵산이다. 일부 구체예에서, 상기 핵산은 서열번호 70-99로부터 선택된 중쇄 CDR3 펩티드 서열을 코딩하는 핵산이다. 일부 구체예에서, 상기 핵산은 서열번호 100-128로부터 선택된 경쇄 CDR1 펩티드 서열을 코딩하는 핵산이다. 일부 구체예에서, 상기 핵산은 서열번호 129-144로부터 선택된 경쇄 CDR2 펩티드 서열을 코딩하는 핵산이다. 일부 구체예에서, 상기 핵산은 서열번호 145-168로부터 선택된 경쇄 CDR3 펩티드 서열을 코딩하는 핵산이다. 일부 구체예에서, 상기 핵산은 서열번호 169-206로부터 선택된 중쇄 가변영역 펩티드 서열을 코딩하는 핵산이다. 일부 구체예에서, 상기 핵산은 서열번호 207-245로부터 선택된 경쇄 가변영역 펩티드 서열을 코딩하는 핵산이다. 일부 구체예에서, 상기 핵산은 서열번호 246-286로부터 선택된 중쇄 펩티드 서열을 코딩하는 핵산이다. 일부 구체예에서, 상기 핵산은 서열번호 287-324로부터 선택된 경쇄 펩티드 서열을 코딩하는 핵산이다. 일부 구체예에서, 상기 핵산은 도 28a-33에 표시된 펩티드 서열을 코딩하는 핵산이다.
본원에 기재된 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 재조합 DNA 기술, 합성 화학 기술, 또는 이들의 조합에 의해 제조될 수 있다. 예를 들어, 경쇄 CDR 및 중쇄 CDR을 포함하는, 항-Gal3 항체의 원하는 성분들을 코딩하는 서열들이 일반적으로 조립되고, 당해 분야에 알려진 표준 분자 기술을 사용하여 발현 벡터로 클로닝된다. 이들 서열들은 원하는 단백질 서열을 코딩하는 다른 벡터로부터 조립되거나, 각각의 주형 핵산을 사용하는 PCR-생성 단편으로부터 조립되거나, 또는 원하는 서열을 코딩하는 합성 올리고뉴클레오티드의 조립에 의해 조립될 수 있다. 발현 시스템은 목적 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는 발현 벡터로 적절한 세포를 형질감염시키는 것에 의해 형성될 수 있다.
기존 항체의 경쇄 또는 중쇄의 다양한 영역에 해당하는 뉴클레오티드 서열이 용이하게 수득되고, 혼성화, PCR 및 DNA 시퀀싱을 포함하나 이에 한정되지 않는 통상적인 기술을 사용하여 시퀀싱될 수 있다. 단일클론 항체를 생산하는 하이브리도마 세포는 항체 뉴클레오티드 서열의 바람직한 공급원으로서 작용한다. 다양한 단일클론 항체를 생산하는 방대한 개수의 하이브리도마 세포가 공공 또는 민간 저장소로부터 입수할 수 있다. 가장 큰 기탁 기관은 특성이 잘 규명된 하이브리도마 세포주의 다양한 컬렉션을 제공하는 ATCC(American Type Culture Collection)이다. 대안적으로, 항체 뉴클레오티드는 면역화되거나 또는 면역화되지 않은 설치류 또는 인간, 및 비장 및 말초 혈액 림프구와 같은 기관으로부터 수득될 수 있다. 항체 뉴클레오티드를 추출하고 합성하는데 적용 가능한 구체적인 기법들이 Orlandi et al.(1989) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A 86: 3833-3837; Larrick et al. (1989) Biochem. Biophys. Res. Commun. 160:1250-1255; Sastry et al. (1989) Proc. Natl. Acad. Sci., U.S.A. 86: 5728-5732; 및 U.S. Pat. No. 5,969,108에 기재되어 있다.
항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 코딩하는 폴리뉴클레오티드는 또한 예를 들어 상동성 비-인간 서열 대신에 인간 중쇄 및 경쇄 불변 영역에 대한 코딩 서열로 대체하는 것에 의해 변형될 수 있다. 이러한 방식으로, 원래의 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 결합 특이성을 유지하는 키메라 항체가 제조된다.
또한, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 생산하는 방법이 본원에 개시된다. 일부 구체예에서, 상기 방법은 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 코딩하는 핵산을 세포에서 발현시키는 단계, 및 발현된 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 상기 세포로부터 단리하는 단계를 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 방법은 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 원하는 농도로 농축시키는 단계를 더 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 세포는 포유동물 세포, 곤충 세포, 또는 박테리아 세포이다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 본원에서 개시되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편 중 하나이다. 세포에서 항체의 발현 및 발현된 항체의 단리의 구체적인 절차는 당해 분야에서 통상적으로 알려져 있고, 당업자에 의해 실시될 수 있다.
숙주 세포
일부 구체예에서, 본 개시는 본원에서 개시되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 발현하는 숙주 세포를 제공한다. 대상 숙주 세포는 일반적으로 본원에서 개시되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 코딩하는 핵산을 포함한다.
본 개시는 전술된 폴리뉴클레오티드, 벡터, 또는 벡터의 라이브러리로 형질감염된 숙주 세포를 제공한다. 상기 벡터는 전기천공, 미세사출 충격 (microprojectile bombardment); 리포펙션, 감염 (벡터가 감염원에 결합된 경우), 염화칼슘, 염화루비듐, 인산칼슘, DEAE-덱스트란 또는 기타 물질을 사용한 형질감염을 포함한 다수의 적절한 수단들 중 하나에 의해 적절한 원핵 또는 진핵 세포로 도입될 수 있다. 벡터를 도입하기 위한 수단의 선택은 종종 숙주 세포의 특징에 따라 결정될 것이다.
대부분의 동물 세포의 경우, 전술된 방법들 중 임의의 방법이 벡터 전달에 적합하다. 바람직한 동물 세포는 외인성으로 도입된 유전자 산물을 다량으로, 예를 들어 밀리그램 수준으로 발현할 수 있는 척추동물 세포, 바람직하게는 포유동물 세포이다. 바람직한 세포의 비-한정적인 예로는 NIH3T3 세포, COS, HeLa, 및 CHO 세포가 있다.
적절한 숙주 세포로 도입되면, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 발현은 당해 분야에 알려진 임의의 핵산 또는 단백질 분석을 이용하여 결정될 수 있다. 예를 들어, 경쇄 CDR 또는 중쇄 CDR의 전사된 mRNA, 또는 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 존재는 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 코딩하는 폴리뉴클레오티드의 임의의 영역에 상보적인 프로브를 이용한, 통상적인 혼성화 분석법 (예를 들면, 노던 블롯 분석), 증폭 절차 (예를 들면, RT-PCR), SAGE (미국 특허 제5,695,937호), 및 어레이-기반 기술 (예를 들면, 미국 특허 제5,405,783호, 제5,412,087호 및 제5,445,934호 참조)에 의해 검출 및/또는 정량화될 수 있다.
상기 벡터의 발현은 또한 발현된 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 조사함으로써 결정될 수 있다. 단백질 분석을 위한 다양한 기법이 당해 분야에서 이용 가능하다. 그들은 방사면역측정법 (radioimmunoassay), ELISA (enzyme linked immunoradiometric assays), "샌드위치" 면역분석, 면역방사계수측정법 (immunoradiometric assay), 인 시투 면역분석 (예를 들면, 콜로이드 금, 효소 또는 방사성 동위원소 표지 사용), 웨스턴 블롯 분석, 면역침강 분석, 면역형광 분석, 및 SDS-PAGE를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
페이로드 (Payload)
일부 구체예에서, 본원에 개시되는 항-Gal3 항체는 페이로드를 더 포함한다. 일부 경우에, 상기 페이로드는 소분자, 단백질 또는 그의 기능성 단편(functional fragment), 펩티드, 또는 핵산 폴리머를 포함한다.
일부 경우에, 상기 항-Gal3 항체에 접합된 페이로드의 수 (예를 들면, 약물-대-항체 비율 (drug-to-antibody ratio) 또는 DAR)는 약 1:1로, 하나의 페이로드 대 하나의 항-Gal3 항체이다. 일부 경우에, 상기 페이로드 대 항-Gal3 항체의 비율은 약 2:1, 3:1, 4:1, 5:1, 6:1, 7:1, 8:1, 9:1, 10:1, 11:1, 12:1, 13:1, 14:1, 15:1, 16:1, 17:1, 18:1, 19:1, 또는 20:1이다. 일부 경우에, 상기 페이로드 대 항-Gal3 항체의 비율은 약 2:1이다. 일부 경우에, 상기 페이로드 대 항-Gal3 항체의 비율은 약 3:1이다. 일부 경우에, 상기 페이로드 대 항-Gal3 항체의 비율은 약 4:1이다. 일부 경우에, 상기 페이로드 대 항-Gal3 항체의 비율은 약 6:1이다. 일부 경우에, 상기 페이로드 대 항-Gal3 항체의 비율은 약 8:1이다. 일부 경우에, 상기 페이로드 대 항-Gal3 항체의 비율은 약 12:1이다.
일부 구체예에서, 상기 페이로드는 소분자이다. 일부 경우에, 상기 소분자는 세포독성 페이로드이다. 예시적인 세포독성 페이로드는 미세소관 파괴제, DNA 변형제, 또는 Akt 억제제를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
일부 구체예에서, 상기 페이로드는 미세소관 파괴제를 포함한다. 예시적인 미세소관 파괴제는 2-메톡시에스트라디올, 아우리스타틴, 칼콘, 콜히친, 콤브레타스타틴, 크립토피신, 딕티오스타틴, 디스코더몰라이드(discodermolide), 돌라스타인, 엘류테로빈, 에포틸론, 할리콘드린, 라우리말라이드, 마이탄신, 노스카피노이드, 파클리탁셀, 펠로루사이드, 포몹신, 포도필로톡신, 리족신, 스폰지스타틴, 탁산, 튜불리신, 빈카 알칼로이드, 비노렐빈, 또는 그의 유도체 또는 유사체를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
일부 구체예에서, 상기 마이탄신은 마이탄시노이드이다. 일부 구체예에서, 상기 마이탄시노이드는 DM1, DM4, 또는 안사미토신이다. 일부 구체예에서, 상기 마이탄시노이드는 DM1이다. 일부 구체예에서, 상기 마이탄시노이드는 DM4이다. 일부 구체예에서, 상기 마이탄시노이드는 안사미토신이다. 일부 구체예에서, 상기 마이탄시노이드는 미국 특허 제5208020호, 제5416064호, 제7276497호, 및 제6716821호 또는 미국 공개 제2013029900호, 및 제20130323268호에 기재된 바와 같은 마이탄시노이드 유도체 또는 유사체이다.
일부 구체예에서, 상기 페이로드는 돌라스타틴, 또는 그의 유도체 또는 유사체이다. 일부 구체예에서, 상기 돌라스타틴은 돌라스타틴 10 또는 돌라스타틴 15, 또는 그의 유도체 또는 유사체이다. 일부 구체예에서, 상기 돌라스타틴 10 유사체는 아우리스타틴, 소블리도틴, 심플로스타틴 1, 또는 심플로스타틴 3이다. 일부 구체예에서, 상기 돌라스타틴 15 유사체는 세마도틴 또는 타시도틴이다.
일부 구체예에서, 상기 돌라스타틴 10 유사체는 아우리스타틴 또는 아우리스타틴 유도체이다. 일부 구체예에서, 상기 아우리스타틴 또는 아우리스타틴 유도체는 아우리스타틴 E (AE), 아우리스타틴 F (AF), 아우리스타틴 E5-벤조일발레르산 에스테르 (AEVB), 모노메틸 아우리스타틴 E (MMAE), 모노메틸 아우리스타틴 F (MMAF), 또는 모노메틸 아우리스타틴 D (MMAD), 아우리스타틴 PE, 또는 아우리스타틴 PYE이다. 일부 구체예에서, 상기 아우리스타틴 유도체는 모노메틸 아우리스타틴 E (MMAE)이다. 일부 구체예에서, 상기 아우리스타틴 유도체는 모노메틸 아우리스타틴 F (MMAF)이다. 일부 구체예에서, 상기 아우리스타틴은 미국 특허 제6884869호, 제7659241호, 제7498298호, 제7964566호, 제7750116호, 제8288352호, 제8703714호, 및 제8871720호에 기재된 것과 같은 아우리스타틴 유도체 또는 유사체이다.
일부 구체예에서, 상기 페이로드는 DNA 변형제 (DNA modifying agent)를 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 DNA 변형제는 DNA 절단제(cleaver), DNA 삽입제(intercalator), DNA 전사 억제제, 또는 DNA 가교제를 포함한다. 일부 경우에, 상기 DNA 절단제는 블레오마이신 A2, 칼리케아미신, 또는 이의 유도체 또는 유사체를 포함한다. 일부 경우에, 상기 DNA 삽입제는 독소루비신, 에피루비신, PNU-159682, 듀오카르마이신, 피롤로벤조디아제핀, 올리고마이신 C, 다우노루비신, 발루비신, 토포테칸, 또는 이의 유도체 또는 유사체를 포함한다. 일부 경우에, 상기 DNA 전사 억제제는 닥티노마이신을 포함한다. 일부 경우에, 상기 DNA 가교제는 미토마이신 C를 포함한다.
일부 구체예에서, 상기 DNA 변형제는 암사크린, 안트라사이클린, 캄프토테신, 독소루비신, 듀오카르마이신, 에네디인 (enediyne), 에토포시드, 인돌리노벤조디아제핀, 네트롭신, 테니포시드, 또는 이의 유도체 또는 유사체를 포함한다.
일부 구체예에서, 상기 안트라사이클린은 독소루비신, 다우노루비신, 에피루비신, 이다루비신, 미토마이신-C, 닥티노마이신, 미트라마이신, 네모루비신, 픽산트론, 사바루비신, 또는 발루비신이다.
일부 구체예에서, 캄프토테신의 유사체는 토포테칸, 이리노테칸, 실라테칸, 코시테칸, 엑사테칸, 루르토테칸, 기마테칸, 벨로테칸, 루비테칸, 또는 SN-38이다.
일부 구체예에서, 상기 듀오카르마이신은 듀오카르마이신 A, 듀오카르마이신 B1, 듀오카르마이신 B2, 듀오카르마이신 C1, 듀오카르마이신 C2, 듀오카르마이신 D, 듀오카르마이신 SA, 또는 CC-1065이다. 일부 구체예에서, 상기 에네디인은 칼리케아미신(calicheamicin), 에스페라미신, 또는 다이네미신 A이다.
일부 구체예에서, 상기 피롤로벤조디아제핀은 안트라마이신, 아베이마이신, 치카마이신, DC-81, 마제트라마이신, 네오트라마이신 A, 네오트라마이신 B, 포로트라마이신, 프로트라카르신, 시바노미신 (DC-102), 시비로마이신, 또는 토마이마이신이다. 일부 구체예에서, 상기 피롤로벤조디아제핀은 미국 특허 제8404678호 및 제8163736호에 기재된 것과 같은 토마이마이신 유도체이다. 일부 구체예에서, 상기 피롤로벤조디아제핀은 미국 특허 제8426402호, 제8802667호, 제8809320호, 제6562806호, 제6608192호, 제7704924호, 제7067511호, US7612062, 제7244724호, 제7528126호, 제7049311호, 제8633185호, 제8501934호, 및 제8697688호 및 미국 공개 제US20140294868호에 기재된 것이다.
일부 구체예에서, 상기 피롤로벤조디아제핀은 피롤로벤조디아제핀 이량체이다. 일부 구체예에서, 상기 PBD 이량체는 대칭 이량체 (symmetric dimer)이다. 상기 대칭 PBD 이량체의 예는 SJG-136 (SG-2000), ZC-423 (SG2285), SJG-720, SJG-738, ZC-207 (SG2202), 및 DSB-120을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 일부 구체예에서, 상기 PBD 이량체는 비대칭 이량체 (unsymmetrical dimer)이다. 상기 비대칭 PBD 이량체의 예는 미국 특허 제8697688호 및 제9242013호 및 미국 공개 제20140286970호에 기재된 것과 같은 SJG-136 유도체를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
일부 구체예에서, 상기 페이로드는 Akt 억제제를 포함한다. 일부 경우에, 상기 Akt 억제제는 이파타세르팁 (GDC-0068) 또는 그의 유도체를 포함한다.
일부 구체예에서, 상기 페이로드는 폴리머라아제 억제제를 포함하고, 이는 폴리머라아제 II 억제제, 예를 들면, α-아마니틴, 및 폴리(ADP-리보스) 폴리머라아제 (PARP) 억제제를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 예시적인 PARP 억제제는 이니파립 (BSI 201), 탈라조파립 (BMN-673), 올라파립 (AZD-2281), 올라파립, 루카파립 (AG014699, PF-01367338), 벨리파립 (ABT-888), CEP 9722, MK 4827, BGB-290, 또는 3-아미노벤즈아미드를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
일부 구체예에서, 상기 페이로드는 검출가능한 모이어티를 포함한다. 본원에서 사용된, "검출가능한 모이어티 (detectable moiety)"는 표적 분자, 세포, 조직, 기관 등의 위치 및/또는 양을 진단, 검출, 또는 시각화하는데 유용한 원자, 분자, 또는 화합물을 포함할 수 있다. 본원의 구체예에 따라 사용될 수 있는 검출가능한 모이어티는 방사성 물질 (예를 들면, 방사성 동위원소, 방사성 핵종, 방사능 표지(radiolabel) 또는 방사성 트레이서(radiotracers)), 염료, 조영제, 형광 화합물 또는 분자, 생물발광 화합물 또는 분자, 효소, 및 증강제(enhancing agent) (예를 들면, 상자성 이온), 또는 특이적 결합 모이어티, 예를 들면, 스트렙타비딘, 아비딘 또는 비오틴을 포함하나, 그에 한정되지 않는다. 또한, 일부 나노입자, 예를 들면, 양자점 (quantum dot) 또는 금속 나노입자가 검출가능한 모이어티로서 사용하기에 적합할 수 있다.
본원의 구체예에 따라 검출가능한 모이어티로 사용될 수 있는 예시적 방사성 물질은 18F, 18F-FAC, 32P, 33P, 45Ti, 47Sc, 52Fe, 59Fe, 62Cu, 64Cu, 67Cu, 67Ga, 68Ga, 75Sc, 77As, 86Y, 90Y, 89Sr, 89Zr, 94Tc, 94Tc, 99mTc, 99Mo, 105Pd, 105Rh, 111Ag, 111In, 123I, 124I, 125I, 131I, 142Pr, 143Pr, 149Pm, 153Sm, 154-158Gd, 161Tb, 166Dy, 166Ho, 169Er, 175Lu, 177Lu, 186Re, 188Re, 189Re, 194Ir, 198Au, 199Au, 211At, 211Pb, 212Bi, 212Pb, 213Bi, 223Ra 및 225Ac를 포함하나, 그에 한정되지 않는다. 검출가능한 모이어티로 사용될 수 있는 예시적 상자성 이온 물질은 전이 금속 및 란탄계열 금속 (예를 들면, 6 내지 9, 21-29, 42, 43, 44, 또는 57-71의 원자 번호를 갖는 금속)을 포함하나, 그에 한정되지 않는다. 이러한 금속은 Cr, V, Mn, Fe, Co, Ni, Cu, La, Ce, Pr, Nd, Pm, Sm, Eu, Gd, Tb, Dy, Ho, Er, Tm, Yb 및 Lu의 이온을 포함한다.
검출가능한 마커가 방사성 금속 또는 상자성 이온인 경우, 일부 구체예에서, 상기 마커를 이러한 이온들을 결합하기 위해 하나 이상의 킬레이팅 기(chelating group)가 부착된 긴 테일(tail)을 갖는 시약과 반응시킬 수 있다. 상기 긴 테일은 폴리머, 예를 들면, 폴리라이신, 폴리사카라이드, 또는 이온을 결합하는 킬레이팅기에 결합될 수 있는 펜던트 기(pendant group)를 갖는 기타 유도체화된 또는 유도체화될 수 있는(derivatizable) 사슬일 수 있다. 본원의 구체예에 따라 이용될 수 있는 킬레이팅 기의 예는 에틸렌디아민테트라아세트산 (EDTA), 디에틸렌트리아민펜타아세트산 (DTPA), DOTA, NOTA, NOGADA, NETA, 데페록사민 (DfO), 포르피린, 폴리아민, 크라운 에테르 (crown ethers), 비스-티오세미카르바존(bis-thiosemicarbazones), 폴리옥심(polyoximes), 및 이들과 동등한 기를 포함하나, 그에 한정되지 않는다. 킬레이트는 면역반응성의 최소 상실 및 최소 응집 및/또는 내부 가교로 분자로의 결합 형성을 가능하게 하는 그룹에 의해 항원 결합 구조체(antigen binding construct)에 연결될 수 있다. 비-방사성 금속, 예를 들면, 망간, 철, 및 가돌리늄과 복합체를 형성한 경우, 동일한 킬레이트가 본원에 기재된 항원 결합 구조체 및 담체와 함께 사용시, MRI에 유용하다. 거대고리형 킬레이트(macrocyclic chelates). 예를 들면, NOTA, NOGADA, DOTA, 및 TETA는 각각 갈륨, 이트륨, 및 구리의 방사성핵종을 포함하나, 이에 한정되지 않는 다양한 금속 및 방사성금속(radiometal)과의 사용에 유용하다. RAIT를 위한 라듐-223과 같은, 방사성핵종을 안정적으로 결합하기 위한 목적으로 거대고리형 폴리에테르와 같은 기타 고리형 킬레이트가 이용될 수 있다. 특정한 구체예에서, 킬레이팅 모이어티가 PET 분석에서의 사용을 위한 표적화 분자에 PET 이미징제, 예를 들면, 알루미늄-18F 복합체를 부착하기 위해 이용될 수 있다.
본 개시의 구체예에 따라 검출가능한 모이어티로서 이용될 수 있는 예시적 조영제는 바륨, 디아트리아조에이트(diatrizoate), 에티오화유(ethiodized oil), 갈륨 시트레이트, 요오카름산(iocarmic acid), 요오세탐산(iocetamic acid), 요오드아미드(iodamide), 요오디파미드(iodipamide), 요오드옥사민산(iodoxamic acid), 요오굴아미드(iogulamide), 요오헥실(iohexyl), 요오파미돌(iopamidol), 요오판산(iopanoic acid), 요오프로셈산(ioprocemic acid), 요오세팜산(iosefamic acid), 요오세르산(ioseric acid), 요오술아미드 메굴루민(iosulamide meglumine), 요오세메트산(iosemetic acid), 요오타술(iotasul), 요오테트르산(iotetric acid), 요오탈람산(iothalamic acid), 요오트록산(iotroxic acid), 요옥사글산(ioxaglic acid), 요옥소트리조산(ioxotrizoic acid), 이포데이트(ipodate), 메글루민(meglumine), 메트리자미드(metrizamide), 메트리조에이트(metrizoate), 프로필리오돈(propyliodone), 염화탈륨(thallous chloride), 또는 이들의 조합을 포함하나, 그에 한정되지 않는다.
본 개시의 구체예에 따라 검출가능한 모이어티로 사용될 수 있는 생물발광 및 형광 화합물 또는 분자 및 염료는 플루오레세인 (플루오레세인 이소티오시아네이트 (FITC), OREGON GREEN™, 로다민, Texas red, 테트라로디민 이소티오시아네이트 (TRITC), Cy3, Cy5, 등), 형광 마커 (예를 들면, GFP (green fluorescent protein), 피코에리트린(phycoerythrin), 등), 종양-연관 프로테아제에 의해 활성화되는 자가소광(autoquenched) 형광 화합물, 효소 (예를 들면, 루시페라아제, 호스래디쉬 퍼옥시다아제(horseradish peroxidase), 알칼리 포스파타아제, 등), 나노입자, 비오틴, 디곡시게닌(digoxigenin) 또는 이들의 조합을 포함하나, 그에 한정되지 않는다.
본 개시의 구체예에 따라 검출가능한 모이어티로 사용될 수 있는 효소는 호스래디쉬 퍼옥시다아제, 알칼리 포스파타아제, 산 포스파타아제, 글루코오스 옥시다아제, β-갈락토시다아제, β-글루코로니다아제 또는 β-락타마아제를 포함하나, 그에 한정되지 않는다. 그러한 효소는 검출가능한 신호를 생성하는 발색원(chromogen), 형광(fluorogenic) 화합물, 또는 발광(luminogenic) 화합물과 함께 사용될 수 있다.
일부 구체예에서, 상기 페이로드는 나노입자이다. 용어 "나노입자 (nanoparticle)"는 크기가 나노미터로 측정되는 미시적(microscopic) 입자, 예를 들면, 약 100 nm 미만의 1개 이상의 치수를 갖는 입자를 의미한다. 나노입자들은 가시광을 흡수하지 않고 산란시킬 수 있을 정도로 충분히 작기 때문에 검출가능한 물질로 이용될 수 있다. 예를 들면, 금 나노입자는 상당한 가시광 흡광 특성을 갖고, 용액에서 다홍색(deep red) 내지 흑색으로 보인다. 결과적으로, 나노입자에 접합된 항원 결합 구조체를 포함하는 조성물이 개체에서 T-세포의 인 비보 이미징을 위해 이용될 수 있다. 크기 범위의 하한(small end)에서, 나노입자는 종종 클러스터(cluster)로 지칭된다. 하이브리드 구조 (예를 들면, 코어-쉘 나노입자) 및 금속, 유전성(dielectric), 및 반도체 나노입자가 형성되었다. 나노구(nanospheres), 나노막대(nanorods), 및 나노컵(nanocups)은 성장된 형태의 일부에 불과하다. 반도체 양자점 및 나노결정(nanocrystals)이 나노입자의 추가적인 타입의 예이다. 그러한 나노규모 입자들이 본원에서 개시되는 항-Gal3 항체 중 하나에 접합될 페이로드로서 이용될 수 있다.
일부 구체예에서, 상기 페이로드는 면역조절제를 포함한다. 유용한 면역조절제는 종양에 대한 호르몬 작용을 차단하는 항-호르몬, 및 사이토카인 생성을 억제하거나, 자기-항원 발현을 하향-조절하거나, 또는 MHC 항원을 가리는 면역억제제를 포함한다. 대표적인 항-호르몬은 항-에스트로겐, 예를 들면, 타목시펜, 랄록시펜, 아로마타아제 억제 4(5)-이미다졸, 4-히드록시타목시펜, 트리옥시펜, 케옥시펜, LY 117018, 오나프리스톤 (onapnstone), 및 토레미펜; 및 항-안드로겐, 예를 들면, 플루타미드, 닐루타미드, 비칼루타미드, 류프롤리드 및 고세렐린; 및 항-부신 제제 (anti-adrenal agents)를 포함한다. 예시적인 면역억제제는 2-아미노-6-아릴-5-치환된 피리미딘, 아자티오프린, 사이클로포스파미드, 브로모크립틴, 다나졸, 답손, 글루타르알데히드, MHC 항원 및 MHC 단편에 대한 항-이디오타입 항체 (anti-idiotypic antibodies), 사이클로스포린 A, 글루코코르티코스테로이드와 같은 스테로이드, 스트렙토키나제, 또는 라파마이신을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
일부 구체예에서, 상기 페이로드는 면역 조절제를 포함한다. 예시적인 면역 조절제는 간시클로비에, 에타너셉트, 타크롤리무스, 시롤리무스, 보클로스포린, 사이클로스포린, 라파마이신, 사이클로포스파미드, 아자티오프린, 미코페놀게이트 모페틸, 메토트렉트레이트, 글루코코르티코이드 및 그의 유사체, 크산틴, 줄기세포 성장 인자, 림포톡신, 조혈 인자, 종양 괴사 인자 (TNF) (예를 들면, TNFα), 인터루킨 (예를 들면, 인터루킨-1 (IL-1), IL-2, IL-3, IL-6, IL-10, IL-12, IL-18, 및 IL-21), 콜로니 자극 인자 (예를 들면, 과립구-콜로니 자극 인자 (G-CSF) 및 과립구 대식구-콜로니 자극 인자 (GM-CSF)), 인터페론 (예를 들면, 인터페론-알파, 인터페론-베타, 인터페론- 감마), "S1 인자"로 명명된 줄기세포 성장 인자, 에리트로포이에틴 및 트롬보포이에틴, 또는 이들의 조합을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
일부 구체예에서, 상기 페이로드는 면역독소를 포함한다. 면역독소는 리신(ricin), 방사성 핵종, 포크위드(pokeweed) 항바이러스 단백질, 슈도모나스 외독소 A, 디프테리아 독소, 리신 A 사슬, 진균 독소 예컨대 레스트릭토신(restrictocin) 및 포스포리파아제 효소를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 일반적으로, "Chimeric Toxins," Olsnes and Pihl, Pharmac. Ther. 15:355-381 (1981); and "Monoclonal Antibodies for Cancer Detection and Therapy," eds. Baldwin and Byers, pp. 159-179, 224-266, Academic Press (1985)를 참조한다.
일부 경우에, 상기 페이로드는 핵산 폴리머를 포함한다. 그러한 경우에, 상기 핵산 폴리머는 짧은 간섭 핵산 (siNA), 짧은 간섭 RNA (siRNA), 이중가닥 RNA (dsRNA), 마이크로-RNA (miRNA), 짧은 헤어핀 RNA (shRNA), 안티센스 올리고뉴클레오티드를 포함한다. 기타 경우에, 상기 핵산 폴리머는 예를 들어 세포독성 단백질 또는 펩티드 또는 아폽토시스 유발 단백질 또는 펩티드를 코딩하는 mRNA를 포함한다. 예시적인 세포독성 단백질 또는 펩티드는 박테리아 세포독소 예컨대 알파-포어 형성 독소 (alpha-pore forming toxin) (예를 들면, 대장균 유래의 세포용해소 A (cytolysin A)), 베타-포어 형성 독소 (예를 들면, α-헤모리신, PVL (panton Valentine leukocidin), 에어로리신(aerolysin), 클로스트리디움 (clostridial) 엡실론-독소, 클로스트리디움 퍼프린겐스 (clostridium perfringens) 장독소), 이원 독소(binary toxin) (탄저균 독소 (anthrax toxin), 부종 독소 (edema toxin), C. 보툴리눔 (C. botulinum) C2 독소, C 스피로폼 (C spirofome) 독소, C. 퍼프린겐스 (C. perfringens) 이오타 독소, C. 디피실리 (C. difficile) 세포-치사 독소 (A 및 B)), 프리온, 파라스포린, 콜레스테롤-의존성 세포용해소 (예를 들면, 뉴몰리신), 작은 기공-형성 독소 (예를 들면, 그라미시딘 A), 시아노톡신 (예를 들면, 마이크로시스틴, 노둘라린), 혈독소 (hemotoxin), 신경독 (예를 들면, 보툴리눔 신경독소), 세포독소 (cytotoxin), 콜레라 독소, 디프테리아 독소, 슈도모나스 외독소 A, 파상풍 독소, 또는 면역독소 (이다루비신, 리신 A, CRM9, 포크위드 항바이러스 단백질, DT)를 포함한다. 예시적인 아폽토시스 유발 단백질 또는 펩티드는 Apaf-1 (Apoptotic protease activating factor-1), 사이토크롬-c, 카스파제 개시제 단백질 (CASP2, CASP8, CASP9, CASP10), 아폽토시스 유도 인자 (AIF), p53, p73, p63, Bcl-2, Bax, 그랜자임 B, PARP(poly-ADP ribose polymerase), 및 PAK2 (P 21-activated kinase 2)를 포함한다. 추가적인 경우에, 상기 핵산 폴리머는 핵산 디코이 (nucleic acid decoy)를 포함한다. 일부 경우에, 상기 핵산 디코이는 RNA-기반 단백질-결합 모방체와 같은 단백질-결합 핵산의 모방체이다. 예시적인 핵산 디코이는 TAR (transactivating region) 디코이 및 RRE (Rev response element) 디코이를 포함한다.
일부 경우에, 상기 페이로드는 압타머 (aptamer)이다. 압타머는 특정 표적 분자에 결합하는 작은 올리고뉴클레오티드 또는 펩티드 분자이다. 예시적인 핵산 압타머는 DNA 압타머, RNA 압타머, 또는 하나 이상의 비천연 뉴클레오티드를 포함하는 RNA 및/또는 DNA 압타머인 XNA 압타머를 포함한다. 예시적인 핵산 압타머는 ARC19499 (Archemix Corp.), REG1 (Regado Biosciences), 및 ARC1905 (Ophthotech)를 포함한다.
본원에 기재된 일부 구체예에 따른 핵산은 선택적으로 자연 발생 핵산, 또는 하나 이상의 뉴클레오티드 유사체를 포함하거나, 또는 자연 발생 핵산의 구조와 달리 상이한 구조를 갖는다. 예를 들어, 2'-변형은 할로, 알콕시, 및 알릴옥시 기를 포함한다. 일부 구체예에서, 2'-OH 기는 H, OR, R, 할로, SH, SR, NH2, NHR, NR2 또는 CN으로부터 선택된 기로 대체되고, R은 C1-C6 알킬, 알케닐, 또는 알키닐이고, 할로는 F, Cl, Br, 또는 I이다. 변형된 결합(linkage)의 예로는 포스포로티오에이트 및 5'-N-포스포르아미다이트 결합을 포함한다.
다양한 상이한 뉴클레오티드 유사체, 변형된 백본, 또는 비-천연 뉴클레오시드간 결합(internucleoside linkage)을 갖는 핵산이 본원에 기재된 일부 구체예에 따라 사용된다. 일부 경우에, 핵산은 천연 뉴클레오시드 (즉, 아데노신, 티미딘, 구아노신, 시티딘, 우리딘, 데옥시아데노신, 데옥시티미딘, 데옥시구아노신, 및 데옥시시티딘) 또는 변형된 뉴클레오시드를 포함한다. 변형된 뉴클레오티드의 예는 염기 변형된 뉴클레오시드 (예를 들면, 아라시티딘, 이노신, 이소구아노신, 네불라린, 슈도우리딘, 2,6-디아미노퓨린, 2-아미노퓨린, 2-티오티미딘, 3-데아자-5-아자시티딘, 2'-데옥시우리딘, 3-니트로피롤, 4-메틸인돌, 4-티오우리딘, 4-티오티미딘, 2-아미노아데노신, 2-티오티미딘, 2-티오우리딘, 5-브로모시티딘, 5-요오도우리딘, 이노신, 6-아자우리딘, 6-클로로퓨린, 7-데아자아데노신, 7-데아자구아노신, 8-아자아데노신, 8-아지도아데노신, 벤즈이미다졸, M1-메틸아데노신, 피롤로-피리미딘, 2-아미노-6-클로로퓨린, 3-메틸 아데노신, 5-프로피닐시티딘, 5-프로피닐우리딘, 5-브로모우리딘, 5-플루오로우리딘, 5-메틸시티딘, 7-데아자아데노신, 7-데아자구아노신, 8-옥소아데노신, 8-옥소구아노신, O(6)-메틸구아닌, 및 2-티오시티딘), 화학적 또는 생물학적으로 변형된 염기 (예를 들면, 메틸화 염기), 변형된 당 (예를 들면, 2'-플루오로리보오스, 2'-아미노리보오스, 2'-아지도리보오스, 2'-O-메틸리보오스, L-거울상이성질체 뉴클레오시드 아라비노오스 및 헥소오스), 변형된 포스페이트 기 (예를 들면, 포스포로티오에이트 및 5'-N-포스포르아미다이트 결합), 및 이들의 조합을 포함한다. 핵산의 화학적 합성을 위한 천연 및 변형된 뉴클레오티드 단량체는 쉽게 입수 가능하다. 일부 경우에, 이러한 변형을 포함하는 핵산은 천연 뉴클레오티드로만 구성된 핵산에 비해 개선된 특성을 나타낸다. 일부 구체예에서, 본원에 기재된 핵산 변형은 뉴클레아제 (예를 들면, 엑소뉴클레아제, 엔도뉴클레아제 등)에 의한 분해(digestion)를 감소 및/또는 방지하기 위해 이용된다. 예를 들어, 핵산의 구조는 분해를 감소시키기 위해 한 가닥 또는 두 가닥 모두의 3' 말단에 뉴클레오티드 유사체를 포함함으로써 안정화될 수 있다.
상이한 뉴클레오티드 변형 및/또는 백본 구조가 핵산에서 다양한 위치에 존재할 수 있다. 이러한 변형에는 모르폴리노, 펩티드 핵산 (PNA), 메틸포스포네이트 뉴클레오티드, 티올포스포네이트 뉴클레오티드, 2'-플루오로 N3-P5'-포스포르아미다이트, 1',5'-안하이드로헥시톨 핵산 (HNA), 또는 이들의 조합을 포함한다.
본원에 개시된 항-Gal3 항체는 하나 이상(예를 들면, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10개, 또는 그 이상)의 본원에서 기재되는 페이로드에 접합될 수 있다.
접합 화학
일부 경우에, 상기 페이로드는 본원에 기재된 항-Gal3 항체에 본래의 라이게이션(native ligation)에 의해 접합된다. 일부 경우에, 접합은 Dawson, et al. "Synthesis of proteins by native chemical ligation," Science 1994, 266, 776-779; Dawson, et al. "Modulation of Reactivity in Native Chemical Ligation through the Use of Thiol Additives," J. Am. Chem. Soc. 1997, 119, 4325-4329; Hackeng, et al. "Protein synthesis by native chemical ligation: Expanded scope by using straightforward methodology.," Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1999, 96, 10068-10073; 또는 Wu, et al. "Building complex glycopeptides: Development of a cysteine-free native chemical ligation protocol," Angew. Chem. Int. Ed. 2006, 45, 4116-4125에 기재된 바와 같다. 일부 경우에, 상기 접합은 미국 특허 제8,936,910호에 기재된 바와 같다.
일부 경우에, 상기 페이로드는 본원에 기재된 항-Gal3 항체에, "무흔 (traceless)" 커플링 기술 (Philochem)을 사용하는 부위-지정 방법에 의해 접합된다. 일부 경우에, 상기 "무흔" 커플링 기술은 알데히드 기를 포함하는 폴리핵산 분자와 접합되는, 결합 모이어티의 N-말단 1,2-아미노티올 기를 이용한다. (Casi et al., "Site-specific traceless coupling of potent cytotoxic drugs to recombinant antibodies for pharmacodelivery," JACS 134(13): 5887-5892 (2012) 참조).
일부 경우에, 상기 페이로드는 본원에 기재된 항-Gal3 항체에, 결합 모이어티에 혼입된 비천연 아미노산을 이용하는 부위-지정 방법에 의해 접합된다. 일부 경우에, 상기 비천연 아미노산은 p-아세틸페닐알라닌 (pAcPhe)을 포함한다. 일부 경우에, pAcPhe의 케토 기는 알콕시-아민 유도체화 접합 모이어티(alkoxy-amine derivatized conjugating moiety)에 선택적으로 커플링되어 옥심 결합을 형성한다. (Axup et al., "Synthesis of site-specific antibody-drug conjugates using unnatural amino acids," PNAS 109(40): 16101-16106 (2012) 참조).
일부 경우에, 상기 페이로드는 본원에 기재된 항-Gal3 항체에, 효소-촉매화 과정을 이용하는 부위-지정 방법에 의해 접합된다. 일부 경우에, 상기 부위-지정 방법은 SMARTagTM 기술 (Redwood)을 활용한다. 일부 경우에, 상기 SMARTag™ 기술은 알데히드 태그의 존재 하에 산화 과정을 통해 포르밀글리신-생성 효소 (FGE)에 의해 시스테인으로부터 포르밀글리신 (FGly) 잔기를 생성하고, 뒤이어, HIPS (hydrazino-Pictet-Spengler) 라이게이션을 통해 FGly를 알킬하이드레인-관능화된(alkylhydraine-functionalized) 폴리핵산 분자에 접합시키는 것을 포함한다. (Wu et al., "Site-specific chemical modification of recombinant proteins produced in mammalian cells by using the genetically encoded aldehyde tag," PNAS 106(9): 3000-3005 (2009); Agarwal, et al., "A Pictet-Spengler ligation for protein chemical modification," PNAS 110(1): 46-51 (2013) 참조).
일부 경우에, 상기 효소-촉매화 과정은 미생물 트랜스글루타미나아제 (mTG)를 포함한다. 일부 경우에, 상기 페이로드는 미생물 트랜스글루타미나아제 촉매화 과정을 이용하여 항-Gal3 항체에 접합된다. 일부 경우에, mTG는 인식 서열 내의 글루타민의 아미드 측쇄 및 관능화된 폴리핵산 분자의 1차 아민 간의 공유 결합 형성을 촉매한다. 일부 경우에, mTG는 스트렙토마이세스 모바렌시스 (Streptomyces mobarensis)로부터 생성된다. (Strop et al., "Location matters: site of conjugation modulates stability and pharmacokinetics of antibody drug conjugates," Chemistry and Biology 20(2) 161-167 (2013) 참조).
일부 경우에, 상기 페이로드는, 서열-특이적 트란스펩티다아제를 이용하고, 명시적으로 참조에 의해 그 전체로 본원에 포함되는 PCT 공개 번호 WO2014/140317에 기재된 방법에 의해 항-Gal3 항체에 접합된다.
일부 경우에, 상기 페이로드는 미국 특허 공개 제2015/0105539호 및 제2015/0105540호에 기재된 방법에 의해 본원에 기재된 항-Gal3 항체에 접합된다.
링커
일부 경우에, 본원에 기재된 링커는 2차원 또는 3차원의 단량체의 가교된 네트워크 및/또는 분지형 또는 비분지형 단량체의 장쇄로 구성된, 천연 또는 합성 폴리머를 포함한다. 일부 경우에, 상기 링커는 폴리사카라이드, 리그닌, 고무, 또는 폴리알킬렌 옥사이드 (예를 들면, 폴리에틸렌 글리콜)를 포함한다.
일부 경우에, 상기 링커는 알파-, 오메가-디히드록실폴리에틸렌글리콜, 생분해성 락톤-기반 폴리머, 예를 들면, 폴리아크릴산, 폴리락티드산 (PLA), 폴리(글리콜산) (PGA), 폴리프로필렌, 폴리스티렌, 폴리올레핀, 폴리아미드, 폴리시아노아크릴레이트, 폴리이미드, 폴리에틸렌테레프탈라트(polyethylenterephthalat) (PET, PETG), 폴리에틸렌 테레프탈레이트 (PETE), 폴리테트라메틸렌 글리콜 (PTG), 또는 폴리우레탄 및 이들의 혼합물을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 본원에서 사용된, 혼합물은 블록 코폴리머에 대한 지칭뿐만 아니라 동일한 화합물내 상이한 폴리머들의 사용을 지칭한다. 일부 경우에, 블록 코폴리머는 폴리머의 적어도 하나의 섹션이 다른 폴리머의 단량체로부터 형성되는 것인 폴리머이다. 일부 경우에, 상기 링커는 폴리알킬렌 옥사이드를 포함한다. 일부 경우에, 상기 링커는 PEG를 포함한다. 일부 경우에, 상기 링커는 폴리에틸렌 이미드 (PEI) 또는 HES (hydroxy ethyl starch)를 포함한다.
일부 경우에, 상기 폴리알킬렌 옥사이드 (예를 들면, PEG)는 다분산 또는 단분산 화합물이다. 일부 구체예에서, 다분산 물질은 평균 중량 (중량 평균) 크기 및 분산도를 특징으로 하는, 물질의 상이한 분자량의 분산 분포 (disperse distribution)를 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 단분산 PEG는 하나의 크기의 분자를 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 링커는 다분산 또는 단분산 폴리알킬렌 옥사이드 (예를 들면, PEG)이고, 표시된 분자량은 폴리알킬렌 옥사이드, 예컨대 PEG, 분자의 분자량의 평균을 나타낸다.
일부 구체예에서, 상기 링커는 폴리알킬렌 옥사이드 (예를 들면, PEG)를 포함하고, 폴리알킬렌 옥사이드 (예를 들면, PEG)의 분자량은 약 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1450, 1500, 1600, 1700, 1800, 1900, 2000, 2100, 2200, 2300, 2400, 2500, 2600, 2700, 2800, 2900, 3000, 3250, 3350, 3500, 3750, 4000, 4250, 4500, 4600, 4750, 5000, 5500, 6000, 6500, 7000, 7500, 8000, 10,000, 12,000, 20,000, 35,000, 40,000, 50,000, 60,000, 또는 100,000 Da이다.
일부 구체예에서, 상기 폴리알킬렌 옥사이드 (예를 들면, PEG)는 별개의 PEG이고, 여기서 상기 별개의 PEG는 1개 초과의 반복 에틸렌 옥사이드 단위를 포함하는 폴리머 PEG이다. 일부 경우에, 별개의 PEG (dPEG)는 2 내지 60개, 2 내지 50개, 또는 2 내지 48개의 반복 에틸렌 옥사이드 단위를 포함한다. 일부 경우에, dPEG는 약 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 35, 40, 42, 48, 50개 또는 초과의 반복 에틸렌 옥사이드 단위를 포함한다. 일부 경우에, dPEG는 약 2개 이상의 반복 에틸렌 옥사이드 단위를 포함한다. 일부 경우에, dPEG는 단계적 방식 (step-wise fashion)으로 순수한 (예를 들면, 약 95%, 98%, 99%, 또는 99.5%) 출발 물질로부터 단일 분자량 화합물로서 합성된다. 일부 경우에, dPEG는 평균 분자량이 아닌, 특정한 분자량을 갖는다.
일부 경우에, 상기 링커는 dPEG(discrete PEG)이고, 선택적으로, 2 내지 60개, 2 내지 50개, 또는 2 내지 48개의 반복 에틸렌 옥사이드 단위를 포함한다. 일부 경우에, 상기 링커는 약 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 35, 40, 42, 48, 50개 또는 초과의 반복 에틸렌 옥사이드 단위를 포함하는 dPEG를 포함한다.
일부 구체예에서, 상기 링커는 폴리펩티드 링커이다. 일부 경우에, 상기 폴리펩티드 링커는 적어도 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90, 100개, 또는 그 이상의 아미노산 잔기를 포함한다. 일부 경우에, 상기 폴리펩티드 링커는 적어도 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8개, 또는 그 이상의 아미노산 잔기를 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 폴리펩티드 링커는 최대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8개, 또는 그 미만의 아미노산 잔기를 포함한다. 일부 경우에, 상기 폴리펩티드 링커는 (예를 들면, 효소적 또는 화학적으로) 절단 가능한 폴리펩티드 링커이다. 일부 경우에, 상기 폴리펩티드 링커는 비-절단성(non-cleavable) 폴리펩티드 링커이다. 일부 경우에, 상기 폴리펩티드 링커는 Val-Cit (발린-시트룰린), Gly-Gly-Phe-Gly, Phe-Lys, Val-Lys, Gly-Phe-Lys, Phe-Phe-Lys, Ala-Lys, Val-Arg, Phe-Cit, Phe-Arg, Leu-Cit, Ile-Cit, Trp-Cit, Phe-Ala, Ala-Leu-Ala-Leu, 또는 Gly-Phe-Leu-Gly을 포함한다. 일부 경우에, 상기 폴리펩티드 링커는 펩티드, 예를 들면, Val-Cit (발린-시트룰린), Gly-Gly-Phe-Gly, Phe-Lys, Val-Lys, Gly-Phe-Lys, Phe-Phe-Lys, Ala-Lys, Val-Arg, Phe-Cit, Phe-Arg, Leu-Cit, Ile-Cit, Trp-Cit, Phe-Ala, Ala-Leu-Ala-Leu, 또는 Gly-Phe-Leu-Gly을 포함한다. 일부 경우에, 상기 폴리펩티드 링커는 L-아미노산, D-아미노산, 또는 L- 및 D-아미노산의 혼합물을 포함한다.
일부 경우에, 상기 링커는 동종이관능성 링커(homobifuctional linker)를 포함한다. 예시적인 동종이관능성 링커는 로망 시약 (Lomant's reagent)인 디티오비스(숙신이미딜프로피오네이트) DSP, 3'3'-디티오비스(술포숙신이미딜 프로프리오네이트 (DTSSP), 디숙신이미딜 수베레이트 (DSS), 비스(술포숙신이미딜)수베레이트 (BS), 디숙신이미딜 타르트레이트 (DST), 디술포숙신이미딜 타르트레이트 (술포 DST), 에틸렌 글리코비스(숙신이미딜숙시네이트) (EGS), 디숙신이미딜 글루타레이트 (DSG), N,N'-디숙신이미딜 카르보네이트 (DSC), 디메틸 아디피미데이트 (DMA), 디메틸 피멜리미데이트 (DMP), 디메틸 수베리미데이트 (DMS), 디메틸-3,3'-디티오비스프로피온이미데이트 (DTBP), 1,4-디-3'-(2'-피리딜디티오)프로피온아미도)부탄 (DPDPB), 비스말레이미도헥산 (BMH), 아릴 할라이드-함유 화합물 (DFDNB), 예를 들면, 1,5-디플루오로-2,4-디니트로벤젠 또는 1,3-디플루오로-4,6-디니트로벤젠, 4,4'-디플루오로-3,3'-디니트로페닐술폰 (DFDNPS), 비스-[β-(4-아지도살리실아미도)에틸]디술피드 (BASED), 포름알데히드, 글루타르알데히드, 1,4-부탄디올 디글리시딜 에테르, 아디프산 디히드라지드, 카르보히드라지드, o-톨루이딘, 3,3'-디메틸벤지딘, 벤지딘, α,α'-p-디아미노디페닐, 디요오도-p-크실렌 술폰산, N,N'-에틸렌-비스(요오도아세트아미드), 또는 N,N'-헥사메틸렌-비스(요오도아세트아미드)를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
일부 구체예에서, 상기 링커는 이종이관능성 링커를 포함한다. 예시적인 이종이관능성 링커는 아민-반응성 및 술프히드릴 가교제, 예를 들면, N-숙신이미딜 3-(2-피리딜디티오)프로피오네이트 (sPDP), 장쇄 N-숙신이미딜 3-(2-피리딜디티오)프로피오네이트 (LC-sPDP), 수-용해성-장쇄 N-숙신이미딜 3-(2-피리딜디티오)프로피오네이트 (술포-LC-sPDP), 숙신이미딜옥시카르보닐-α-메틸-α-(2-피리딜디티오)톨루엔 (sMPT), 술포숙신이미딜-6-[α-메틸-α-(2-피리딜디티오)톨루아미도]헥사노에이트 (술포-LC-sMPT), 숙신이미딜-4-(N-말레이미도메틸)시클로헥산-1-카르복실레이트 (sMCC), 술포숙신이미딜-4-(N-말레이미도메틸)시클로헥산-1-카르복실레이트 (술포-sMCC), m-말레이미도벤조일-N-히드록시숙신이미드 에스테르 (MBs), m-말레이미도벤조일-N-히드록시술포숙신이미드 에스테르 (술포-MBs), N-숙신이미딜(4-요오도아세틸)아미노벤조에이트 (sIAB), 술포숙신이미딜(4-요오도아세틸)아미노벤조에이트 (술포-sIAB), 숙신이미딜-4-(p-말레이미도페닐)부티레이트 (sMPB), 술포숙신이미딜-4-(p-말레이미도페닐)부티레이트 (술포-sMPB), N-(γ-말레이미도부티릴옥시)숙신이미드 에스테르 (GMBs), N-(γ-말레이미도부티릴옥시)술포숙신이미드 에스테르 (술포-GMBs), 숙신이미딜 6-((요오도아세틸)아미노)헥사노에이트 (sIAX), 숙신이미딜 6-[6-(((요오도아세틸)아미노)헥사노일)아미노]헥사노에이트 (sIAXX), 숙신이미딜 4-(((요오도아세틸)아미노)메틸)시클로헥산-1-카르복실레이트 (sIAC), 숙신이미딜 6-((((4-요오도아세틸)아미노)메틸)시클로헥산-1-카르보닐)아미노) 헥사노에이트 (sIACX), p-니트로페닐 요오도아세테이트 (NPIA), 카르보닐-반응성 및 술프히드릴-반응성 가교제, 예를 들면, 4-(4-N-말레이미도페닐)부티르산 히드라지드 (MPBH), 4-(N-말레이미도메틸)시클로헥산-1-카르복실-히드라지드-8 (M2C2H), 3-(2-피리딜디티오)프로피오닐 히드라지드 (PDPH), 아민-반응성 및 광반응성 가교제, 예를 들면, N-히드록시숙신이미딜-4-아지도살리실산 (NHs-AsA), N-히드록시술포숙신이미딜-4-아지도살리실산 (술포-NHs-AsA), 술포숙신이미딜-(4-아지도살리실아미도)헥사노에이트 (술포-NHs-LC-AsA), 술포숙신이미딜-2-(ρ-아지도살리실아미도)에틸-1,3'-디티오프로피오네이트 (sAsD), N-히드록시숙신이미딜-4-아지도벤조에이트 (HsAB), N-히드록시술포숙신이미딜-4-아지도벤조에이트 (술포-HsAB), N-숙신이미딜-6-(4'-아지도-2'-니트로페닐아미노)헥사노에이트 (sANPAH), 술포숙신이미딜-6-(4'-아지도-2'-니트로페닐아미노)헥사노에이트 (술포-sANPAH), N-5-아지도-2-니트로벤조일옥시숙신이미드 (ANB-NOs), 술포숙신이미딜-2-(m-아지도-o-니트로벤즈아미도)-에틸-1,3'-디티오프로피오네이트 (sAND), N-숙신이미딜-4(4-아지도페닐)1,3'-디티오프로피오네이트 (sADP), N-술포숙신이미딜(4-아지도페닐)-1,3'-디티오프로피오네이트 (술포-sADP), 술포숙신이미딜 4-(ρ-아지도페닐)부티레이트 (술포-sAPB), 술포숙신이미딜 2-(7-아지도-4-메틸쿠마린-3-아세트아미드)에틸-1,3'-디티오프로피오네이트 (sAED), 술포숙신이미딜 7-아지도-4-메틸쿠마인-3-아세테이트 (술포-sAMCA), ρ-니트로페닐 디아조피루베이트 (ρNPDP), ρ-니트로페닐-2-디아조-3,3,3-트리플루오로프로피오네이트 (PNP-DTP), 술프히드릴-반응성 및 광반응성 가교제, 예를 들면, 1-(ρ-아지도살리실아미도)-4-(요오도아세트아미도)부탄 (AsIB), N-[4-(ρ-아지도살리실아미도)부틸]-3'-(2'-피리딜디티오)프로피온아미드 (APDP), 벤조페논-4-요오도아세트아미드, 벤조페논-4-말레이미드 카르보닐-반응성 및 광반응성 가교제 예컨대 ρ-아지도벤조일 히드라지드 (ABH), 카르복실레이트-반응성 및 광반응성 가교제, 예를 들면, 4-(ρ-아지도살리실아미도)부틸아민 (AsBA), 및 아르기닌-반응성 및 광반응성 가교제, 예를 들면, ρ-아지도페닐 글리옥살 (APG)을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
일부 구체예에서, 상기 링커는 벤조산 기, 또는 그의 유도체를 포함한다. 일부 경우에, 상기 벤조산 기 또는 그의 유도체는 파라아미노벤조산 (PABA)을 포함한다. 일부 경우에, 상기 벤조산 기 또는 그의 유도체는 감마-아미노부티르산 (GABA)을 포함한다.
일부 구체예에서, 상기 링커는 말레이미드 기, 펩티드 모이어티, 및/또는 벤조산 기 중 하나 이상을 임의의 조합으로 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 링커는 말레이미드 기, 펩티드 모이어티, 및/또는 벤조산 기의 조합을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 말레이미드 기는 말레이미도카프로일 (mc)이다. 일부 경우에, 상기 펩티드 기는 val-cit이다. 일부 경우에, 상기 벤조산 기는 PABA이다. 일부 경우에, 상기 링커는 mc-val-cit 기를 포함한다. 일부 경우에, 상기 링커는 val-cit-PABA 기를 포함한다. 추가 경우에, 상기 링커는 mc-val-cit-PABA 기를 포함한다.
일부 구체예에서, 상기 링커는 자기-희생 링커 (self-immolative linker) 또는 자기-제거 링커 (self-elimination linker)이다. 일부 경우에, 상기 링커는 자기-희생 링커이다. 다른 경우에, 상기 링커는 자기-제거 링커 (예를 들면, 고리화 자기-제거 링커)이다. 일부 경우에, 상기 링커는 미국 특허 제9,089,614호 또는 PCT 공개 번호 WO2015038426에 기재된 링커를 포함한다.
일부 구체예에서, 상기 링커는 수지상 타입 링커(dendritic type linker)이다. 일부 경우에, 상기 수지상 타입 링커는 분지형, 다관능성 링커 모이어티를 포함한다. 일부 경우에, 상기 수지상 타입 링커는 PAMAM 덴드리머를 포함한다.
일부 구체예에서, 상기 링커는 무흔 링커, 또는 절단 후에 항체 또는 페이로드에 대한 링커 모이어티 (예를 들면, 원자 또는 링커 그룹)를 남기지 않는 링커이다. 예시적인 무흔 링커는 게르마늄 링커, 규소 링커, 황 링커, 셀레늄 링커, 질소 링커, 인 링커, 붕소 링커, 크롬 링커, 또는 페닐히드라지드 링커를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 일부 경우에, 상기 링커는 Hejesen, et al., "A traceless aryl-triazene linker for DNA-directed chemistry," Org Biomol Chem 11(15): 2493-2497 (2013)에 기재된 바와 같은 무흔 아릴-트리아젠 링커이다. 일부 경우에, 상기 링커는 Blaney, et al., "Traceless solid-phase organic synthesis," Chem. Rev. 102: 2607-2024 (2002)에 기재된 무흔 링커이다. 일부 경우에, 상기 링커는 미국 특허 제6,821,783호에 기재된 무흔 링커이다.
약학적 제제 (Pharmaceutical Formulations)
본원에 기재되는 질환을 치료하기 위한 약학적 제제는 전술된 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 포함할 수 있다. 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 전신 투여용으로 제제화될 수 있다. 대안적으로, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 비경구 투여용으로 제제화될 수 있다.
일부 구체예에서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 비경구 (예를 들면, 정맥내, 피하, 근육내, 동맥내, 피부내, 복막내, 유리체내, 뇌내, 또는 뇌실내), 경구, 비강내, 협측, 직장, 또는 경피 투여 경로를 포함하나, 이에 한정되지 않는 투여 경로로 개체에게 투여하기 위한 약학적 조성물로서 제제화된다. 일부 경우에, 본원에 기재된 약학적 조성물은 비경구 (예를 들면, 정맥내, 피하, 근육내, 동맥내, 피부내, 복막내, 유리체내, 뇌내, 또는 뇌실내) 투여용으로 제제화된다. 기타 경우에, 본원에 기재된 약학적 조성물은 전신 투여용으로 제제화된다. 기타 경우에, 본원에 기재된 약학적 조성물은 경구 투여용으로 제제화된다. 기타 경우에, 본원에 기재된 약학적 조성물은 비강내 투여용으로 제제화된다.
일부 경우에, 상기 약학적 조성물은 아세트산, 붕산, 시트르산, 락트산, 인산 및 염산과 같은 산; 수산화나트륨, 인산나트륨, 붕산나트륨, 시트르산 나트륨, 아세트산 나트륨, 락트산 나트륨 및 트리스-히드록시메틸아미노메탄과 같은 염기; 및 버퍼, 예를 들면, 시트레이트/덱스트로오스, 중탄산 나트륨 및 염화 암모늄을 포함하는 pH 조정제 또는 완충제를 더 포함한다. 그러한 산, 염기 및 버퍼는 상기 조성물의 pH를 허용가능한 범위로 유지하기 위해 필요한 양으로 포함된다.
일부 경우에, 상기 약학적 조성물은 하나 이상의 염을 조성물의 오스몰농도를 허용가능한 범위로 맞추기 위해 필요한 양으로 포함한다. 그러한 염은 나트륨, 칼륨 또는 암모늄 양이온 및 클로라이드, 시트레이트, 아스코르베이트, 보레이트, 포스페이트, 비카르보네이트, 술페이트, 티오술페이트 또는 비술피트 음이온을 갖는 염을 포함하고; 적합한 염은 염화나트륨, 염화칼륨, 티오황산나트륨, 중아황산나트륨 및 황산암모늄을 포함한다.
일부 경우에, 상기 약학적 조성물은 화합물을 안정화시키는데 사용되는 희석제를 더 포함하고, 이들은 보다 안정한 환경을 제공할 수 있기 때문이다. 인산염 완충 식염수 용액을 포함하나, 이에 한정되지 않는, 완충 용액에 용해된 염(pH 조절 또는 유지를 제공할 수 있음)이 당해 분야에서 희석제로서 이용된다. 특정한 경우에, 희석제는 압축을 촉진하기 위해 조성물의 벌크를 증가시키거나 또는 캡슐 충전을 위한 균질한 블렌드에 충분한 벌크를 형성한다. 그러한 화합물은 예를 들어 락토오스, 전분, 만니톨, 소르비톨, 덱스트로오스, 미세결정 셀룰로오스, 예를 들면, Avicel®; 이염기성 인산칼슘, 인산이칼슘 이수화물; 인산삼칼슘, 인산칼슘; 무수 락토오스, 분무-건조된 락토오스; 호화 전분, 압축당 (compressible sugar), 예를 들면, Di-Pac® (Amstar); 만니톨, 히드록시프로필메틸셀룰로오스, 히드록시프로필메틸셀룰로오스 아세테이트 스테아레이트, 수크로스-기반 희석제, 가루 설탕 (confectioner's sugar); 일염기성 황산칼슘 일수화물, 황산칼슘 이수화물; 락트산 칼슘 삼수화물, 덱스트레이트; 가수분해된 곡물 고형물, 아밀로오스; 분말 셀룰로오스, 탄산칼슘; 글리신, 카올린; 만니톨, 염화나트륨; 이노시톨, 벤토나이트 등을 포함할 수 있다.
일부 구체예에서, 상기 약학적 제제는 수성 액체 분산액, 자기-유화 분산액, 고체 용액, 리포좀 분산액, 에어로졸, 고체 투여 형태, 산제, 즉시 방출 제제, 제어 방출 제제, 급속 용융 제제 (fast melt formulation), 정제, 캡슐, 환제, 지연 방출 제제, 연장 방출 제제, 박동성 방출(pulsatile release) 제제, 다중 미립자 제제 (예를 들면, 나노입자 제제), 및 혼합 즉시 및 제어 방출 제제를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
일부 경우에, 상기 약학적 제제는 추가적인 치료제를 더 포함할 수 있다. 추가적인 치료제의 비-한정적 예는 아카르보스 (Precose®) 및 미글리톨 (Glyset®)을 포함한 알파-글루코시다아제 억제제; 메트포르민-알로글립틴 (Kazano®), 메트포르민-카나글리플로진 (Invokamet®), 메트포르민-다파클리플로진 (Xigduo® XR), 메트포르민-엠파글리플로진 (Synjardy®), 메트포르민-글리피지드, 메트포르민-글리부리드 (Glucovance®), 메트포르민-리나글립틴 (Jentadueto®), 메트포르민-피오글리타존 (Actoplus®), 메트포르민-레파글리니드 (PrandiMet®), 메트포르민-로시글리타존 (Avandamet®), 메트포르민-삭사글립틴 (Kombiglyze® XR), 및 메트포르민-시타글립틴 (Janumet®)을 포함한 비구아니드; 브로모크립틴 (Cycloset®)을 포함한 도파민 아고니스트; 알로글립틴 (Nesina®), 알로글립틴-메트포르민 (Kazano®), 알로글립틴-피오글리타존 (Oseni®), 리나글립틴 (Tradjenta®), 리나글립틴-엠파글리플로진 (Glyxambi®), 리나글립틴-메트포르민 (Jentadueto®), 삭사글립틴 (Onglyza®), 삭사글립틴-메트포르민 (Kombiglyze® XR), 시타글립틴 (Januvia®), 시타글립틴-메트포르민 (Janumet® 및 Janumet® XR), 및 시타글립틴 및 심바스타틴 (Juvisync®)을 포함한 DPP-4 (Dipeptidyl peptidase-4) 억제제; 알비글루티드 (Tanzeum®), 둘라글루티드 (Trulicity®), 엑세나티드 (Byetta®), 연장 방출형 엑세나티드 (exenatide extended-release) (Bydureon®), 및 리라글루티드 (Victoza®), 세마글루티드 (Ozempic®)를 포함한, GLP-1 수용체 아고니스트 (Glucagon-like peptide-1 receptor agonists); 나테글리니드 (Starlix®), 레파글리니드 (Prandin®), 및 레파글리니드-메트포르민 (Prandimet®)을 포함한, 메글리티니드(Meglitinides); 다파글리플로진 (Farxiga®), 다파글리플로진-메트포르민 (Xigduo® XR), 카나글리플로진 (Invokana®), 카나글리플로진-메트포르민 (Invokamet®), 엠파글리플로진 (Jardiance®), 엠파글리플로진-리나글립틴 (Glyxambi®), 엠파글리플로진-메트포르민 (Synjardy®), 및 에르투글리플로진 (Steglatro®)을 포함한, SGLT (Sodium-glucose transporter) 2 억제제; 글리메피리드 (Amaryl®), 글리메피리드-피오글리타존 (Duetact®), 글리메피리드-로시글리타존 (Avandaryl®), 글리클라지드, 글리피지드 (Glucotrol®), 글리피지드-메트포르민 (Metaglip®), 글리부리드 (DiaBeta®, Glynase®, Micronase®), 글리부리드-메트포르민 (Glucovance®), 클로르프로파미드 (Diabinese®), 톨라자미드 (Tolinase®), 및 톨부타미드 (Orinase®, Tol-Tab®)를 포함한 술포닐우레아; 로시글리타존 (Avandia®), 로시글리타존-글리메피리드 (Avandaryl®), 로시글리타존-메트포르민 (Amaryl M®), 피오글리타존 (Actos®), 피오글리타존-알로글리틴 (Oseni®), 피오글리타존-글리메피리드 (Duetact®), 피오글리타존-메트포르민 (Actoplus Met®, Actoplus Met® XR)을 포함한, 티아졸리디네디온을 포함한다.
치료 요법 (Therapeutic Regimens)
일부 구체예에서, 본원에 개시된 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 치료 적용을 위해 투여된다. 일부 구체예에서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 1일 1회, 1일 2회, 1일 3회 또는 그 이상 투여된다. 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 일일, 매일, 격일, 1주당 5일, 1주당 1회, 격주, 1개월당 2주, 1개월당 3주, 1개월 1회, 1개월 2회, 1개월당 3회, 또는 그 이상으로 투여된다. 상기 항-Gal3 항체는 적어도 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월, 12개월, 18개월, 2년, 3년, 또는 그 이상 동안 투여된다.
환자 상태가 개선되는 경우에, 의사의 재량에 따라 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 투여가 지속적으로 제공되고; 대안적으로, 투여되는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 용량은 소정의 기간 동안 일시적으로 감소되거나 또는 일시적으로 중단된다 (즉, "휴약기 (drug holiday)"). 일부 경우에, 휴약기의 길이는 2일 내지 1년 사이에서 변하고, 단지 예시로서, 2일, 3일, 4일, 5일, 6일, 7일, 10일, 12일, 15일, 20일, 28일, 35일, 50일, 70일, 100일, 120일, 150일, 180일, 200일, 250일, 280일, 300일, 320일, 350일, 또는 365일을 포함한다. 휴약기 동안 용량 감소는 10%-100%이며, 단지 예시로서, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 또는 100%를 포함한다.
환자의 병태가 개선되면, 필요한 경우 유지 용량이 투여된다. 후속적으로, 투여의 용량 또는 빈도, 또는 이들 모두가 증상의 함수로서, 치료되는 질병, 장애 또는 병태가 유지되는 수준까지 감소될 수 있다.
일부 구체예에서, 그러한 양에 상응하는 주어진 물질의 양은 특정 화합물, 질병의 중증도, 치료를 필요로 하는 개체 또는 숙주의 정체(identity) (예를 들면, 체중)와 같은 요인에 따라 변하나, 그럼에도 불구하고, 예를 들어, 투여되는 특정 물질, 투여 경로, 및 치료되는 개체 또는 숙주를 포함한, 해당 케이스를 둘러싼 특정 상황에 따라 당해 분야에 알려진 방식으로 일상적으로 결정된다. 일부 경우에, 원하는 용량이 단일 용량으로 또는 동시에 (또는 단기간에 걸쳐) 또는 적절한 간격으로, 예를 들어 1일당 2, 3, 4회 또는 초과의 부분-용량(sub-dose)으로 투여되는 분할 용량으로 편리하게 제시된다.
개별 치료 요법과 관련된 변수의 수가 많고 이러한 권장 값으로부터 상당한 이탈이 드문 일은 아니기 때문에, 전술한 범위는 단지 제시하는 것이다. 그러한 투여량은 이에 한정되는 것은 아니지만, 사용된 화합물의 활성, 치료대상 질병 또는 병태, 투여 방식, 개별 대상의 요건, 치료되는 질병 또는 병태의 중증도, 및 의사의 판단과 같은 다수의 변수에 따라 변경된다.
일부 구체예에서, 그러한 치료 요법의 독성 및 치료 효능은 LD50 (집단의 50%에 치명적인 용량) 및 ED50 (집단의 50%에서 치료적으로 유효한 용량)의 결정을 포함하나, 이에 한정되지 않는, 세포 배양 또는 실험 동물에서 표준 약학적 절차에 의해 결정된다. 독성 효과와 치료 효과 간의 용량 비율이 치료 지수(therapeutic index)이고, LD50 및 ED50 간의 비율로 표현된다. 높은 치료 지수를 보이는 화합물이 바람직하다. 세포 배양 분석 및 동물 연구로부터 수득된 데이터는 인체에 사용하기 위한 용량 범위를 정하기 위해 이용된다. 그러한 화합물의 투여량은 바람직하게는 최소 독성을 갖는 ED50을 포함하는 순환 농도 범위 내에 있다. 투여량은 사용된 투여 형태 및 이용된 투여 경로에 따라 이러한 범위 내에서 가변된다.
키트/제품 (Kit/Article of Manufacture)
본원에서, 특정한 구체예에서, 본원에 기재된 조성물 및 방법 중 하나 이상과 함께 사용하기 위한 키트 및 제품이 개시된다. 그러한 키트는 바이알, 튜브 등과 같은 하나 이상의 용기를 수용하도록 구획화된 캐리어, 패키지 또는 용기를 포함하며, 각 용기(들)는 본원에 기재된 방법에 사용되는 별개의 요소들 중 하나를 포함한다. 적절한 용기는 예를 들어, 보틀, 바이알, 주사기 및 테스트 튜브를 포함한다. 일 구체예에서, 상기 용기는 유리 또는 플라스틱과 같은 다양한 재료로 제조된다.
본원에서 제공되는 제품은 패키징 재료를 포함한다. 약제 패키징 재료의 예는 블리스터 팩(blister pack), 보틀, 튜브, 백, 용기, 보틀, 및 선택된 제제 및 의도된 투여 및 치료 방식에 적합한 임의의 패키징 재료를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
예를 들어, 상기 용기(들)는 본원에 개시되는 항-Gal3 항체, 본원에 기재되는 하나 이상의 항체를 생산하기 위한 숙주 세포, 및/또는 본원에 기재되는 항체를 코딩하는 핵산 분자를 포함하는 벡터를 포함한다. 그러한 키트는 선택적으로 본원에 기재된 방법에서 그의 사용과 관련된 식별 설명(identification description) 또는 라벨 또는 설명서를 포함한다.
키트는 일반적으로 내용물 및/또는 사용 지침을 열거하는 라벨(label), 및 사용 설명서가 있는 패키지 삽입물(package insert)을 포함한다. 일반적으로, 일련의 지침(a set of instructions)도 포함될 것이다.
일 구체예에서, 라벨은 용기 상에 존재하거나 또는 용기와 결합된다. 일 구체예에서, 라벨을 형성하는 문자, 숫자 또는 기타 캐릭터가 용기 자체에 부착, 성형 또는 에칭되는 경우 상기 라벨은 용기 상에 존재하고; 예를 들어 패키지 삽입물로서, 용기를 보유하는 저장소 (receptacle) 또는 캐리어 내에 라벨이 존재하는 경우 라벨은 용기와 결합된다. 일 구체예에서, 라벨은 내용물이 특정 치료 적용을 위해 사용된다는 것을 표시하기 위해 사용된다. 라벨은 또한 본원에 기재된 방법에서와 같이, 내용물의 사용법을 표시한다.
특정한 구체예에서, 상기 약학적 조성물은 본원에서 제공되는 화합물을 포함하는 하나 이상의 단위 투여 형태를 포함하는 팩 또는 디스펜서 장치로 제시된다. 상기 팩은 예를 들어, 블리스터 팩과 같은 금속 또는 플라스틱 호일을 포함한다. 일 구체예에서, 상기 팩 또는 디스펜서 장치에는 투여 설명서가 동반된다. 일 구체예에서, 상기 팩 또는 디스펜서는 또한 의약품의 제조, 사용 또는 판매를 규제하는 정부 기관에 의해 규정된 형식으로, 용기와 결합된 고지를 동반하며, 그러한 고지는 인간 또는 동물 투여용 약물의 형태의 해당 기관의 허가를 반영한다. 그러한 고지는 예를 들어, 미국 FDA가 승인한 처방 약물에 대한 라벨링, 또는 승인된 제품 삽입물이다. 일 구체예에서, 적합한 약학적 담체 중에 제제화된 본원에서 제공되는 화합물을 함유하는 조성물이 또한 제조되고, 적절한 용기에 배치되고, 표시된 병태의 치료에 대해 라벨링된다.
본원에서 제공되는 일부 구체예가 하기에 제공된 번호가 부여된 배열(arrangement)에 의해 기술되고, 또한 가능한 조합 또는 중첩되는 구체예로 제공된다:
1.
갈렉틴-3 (Gal3)와 인슐린 수용체의 상호작용을 차단하는 방법으로서, 상기 방법은:
Gal3와 인슐린 수용체의 상호작용을 Gal3에 선택적으로 결합하여 상기 Gal3와 인슐린 수용체의 상호작용을 차단하는 항체 또는 그의 결합 단편과 접촉시키는 단계를 포함하는 것인 방법.
2.
배열 1에 있어서, Gal3는 세포에 의해 발현되는 것인 방법.
3.
배열 1에 있어서, Gal3는 세포에 의해 분비되는 것인 방법.
4.
배열 1 내지 3 중 어느 하나에 있어서, 상기 인슐린 수용체는 세포에 의해 발현되는 것인 방법.
5.
배열 1 내지 4 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3의 N-말단 도메인에 결합하는 것인 방법.
6.
배열 1 내지 5 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체 또는 그의 결합 단편은 펩티드 1 (ADNFSLHDALSGSGNPNPQG; 서열번호 3), 펩티드 4 (GAGGYPGASYPGAYPGQAPP; 서열번호 6), 펩티드 6 (GAYPGQAPPGAYPGAPGAYP; 서열번호 8), 펩티드 7 (AYPGAPGAYPGAPAPGVYPG; 서열번호 9), 또는 이들의 조합에 의해 정의된 Gal3의 영역 내에 존재하는 에피토프에 결합하는 것인 방법.
7.
배열 1 내지 6 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체 또는 그의 결합 단편은 GxYPG의 아미노산 서열을 포함하는 Gal3의 에피토프에 결합하고, x는 알라닌, 글리신, 또는 발린인 것인 방법.
8.
배열 1 내지 7 중 어느 하나에 있어서, 상기 상호작용은 상기 항체 또는 그의 결합 단편의 부재시 상호작용의 80% 미만, 75% 미만, 70% 미만, 65% 미만, 60% 미만, 55% 미만, 50% 미만, 45% 미만, 40% 미만, 35% 미만, 30% 미만, 25% 미만, 20% 미만, 15% 미만, 10% 미만, 5% 미만, 또는 1% 미만까지 감소되는 것인 방법.
9.
배열 1 내지 8 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3에 1 nM 미만, 1.2 nM 미만, 2 nM 미만, 5 nM 미만, 10 nM 미만, 13.5 nM 미만, 15 nM 미만, 20 nM 미만, 25 nM 미만, 또는 30 nM 미만의 해리 상수(dissociation constant) (KD)로 결합하는 것인 방법.
10.
배열 1 내지 9 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 (1) VL-CDR1, VL-CDR2, 및 VL-CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역; 및 (2) VH-CDR1, VH-CDR2, 및 VH-CDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역을 포함하고,
상기 VL-CDR1은 서열번호 71-89에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며,
상기 VL-CDR2는 서열번호 90-100에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고,
상기 VL-CDR3은 서열번호 101-115에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며,
상기 VH-CDR1은 서열번호 27-38에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고,
상기 VH-CDR2는 서열번호 39-53에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고, 및
상기 VH-CDR3은 서열번호 54-70에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 방법.
11.
배열 1 내지 10 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 표 9에 예시된 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3, VH-CDR1, VH-CDR2, 및 VH-CDR3의 조합을 포함하는 것인 방법.
12.
배열 1 내지 11 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 13H12.2F8, 19D9.2E5, 14H10.2C9, 2D10.2B2, 4A11.2B5, 6H6.2D6, 20H5.A3, 19B5.2E6, 23H9.2E4, 20D11.2C6, 15G7.2A7, 4G2.2G6, 3B11.2G2, 13A12.2E5, 7D8.2D8, 15F10.2D6, 12G5.D7, 24D12.2H9, 13G4.2F8, 9H2.2H1, IMT-001 (TB001), 및 IMT-006 (TB006)으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 방법.
13.
배열 1 내지 12 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체 또는 그의 결합 단편은 인간화 항체를 포함하는 것인 방법.
14.
배열 1 내지 13 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체 또는 그의 결합 단편은 전장 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는 것인 방법.
15.
배열 1 내지 14 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체 또는 그의 결합 단편은 이중특이성 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는 것인 방법.
16.
배열 1 내지 15 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체 또는 그의 결합 단편은 1가 Fab', 2가 Fab2, scFv(single chain variable fragment), 디아바디(diabody), 미니바디(minibody), 나노바디(nanobody), sdAb(single-domain antibody), 또는 카멜리드(camelid) 항체, 또는 그의 결합 단편을 포함하는 것인 방법.
17.
배열 1 내지 16 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체 또는 그의 결합 단편은 IgG 프레임워크를 포함하는 것인 방법.
18.
배열 1 내지 17 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체 또는 그의 결합 단편은 IgG1 프레임워크, IgG2 프레임워크, 또는 IgG4 프레임워크를 포함하는 것인 방법.
19.
필요로 하는 개체에서 당뇨병을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은: Gal3에 선택적으로 결합하고 Gal3와 인슐린 수용체의 상호작용을 차단하는 항체 또는 그의 결합 단편을 상기 개체에게 투여하여, 상기 개체에서 당뇨병을 치료하는 단계를 포함하는 것인 방법.
20.
배열 19에 있어서, 상기 당뇨병은 인슐린-의존성 당뇨병인 것인 방법.
21.
배열 19에 있어서, 상기 당뇨병은 인슐린-비의존성 당뇨병인 것인 방법.
22.
배열 19에 있어서, 상기 당뇨병은 타입 I 당뇨병인 것인 방법.
23.
배열 19에 있어서, 상기 당뇨병은 타입 II 당뇨병인 것인 방법.
24.
배열 19 내지 23 중 어느 하나에 있어서, 상기 치료는 상기 필요로 하는 개체에서 당 내성(glucose tolerance)을 감소시키는 것을 포함하는 것인 방법.
25.
배열 19 내지 24 중 어느 하나에 있어서, 상기 치료는 상기 필요로 하는 개체에서 인슐린 감수성(insulin sensitivity)을 감소시키는 것을 포함하는 것인 방법.
26.
배열 19 내지 25 중 어느 하나에 있어서, 상기 치료는 상기 필요로 하는 개체에서 체중 증가를 감소시키는 것을 포함하는 것인 방법.
27.
배열 19 내지 26 중 어느 하나에 있어서, 상기 치료는 상기 필요로 하는 개체에서 간 지방증(liver steatosis)을 경감시키는 것을 포함하는 것인 방법.
28.
필요로 하는 개체에서 비알코올성 지방간 질환 (NAFLD)를 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 Gal3에 선택적으로 결합하고 Gal3와 인슐린 수용체의 상호작용을 차단하는 항체 또는 그의 결합 단편을 상기 개체에게 투여하여, 상기 개체에서 NAFLD를 치료하는 단계를 포함하는 것인 방법.
29.
필요로 하는 개체에서 비알코올성 지방간염 (NASH)을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 Gal3에 선택적으로 결합하고 Gal3와 인슐린 수용체의 상호작용을 차단하는 항체 또는 그의 결합 단편을 상기 개체에게 투여하여, 상기 개체에서 NASH를 치료하는 단계를 포함하는 것인 방법.
30.
배열 19 내지 29 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3의 N-말단 도메인에 결합하는 것인 방법.
31.
배열 19 내지 30 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체 또는 그의 결합 단편은 펩티드 1 (ADNFSLHDALSGSGNPNPQG; 서열번호 3), 펩티드 4 (GAGGYPGASYPGAYPGQAPP; 서열번호 6), 펩티드 6 (GAYPGQAPPGAYPGAPGAYP; 서열번호 8), 펩티드 7 (AYPGAPGAYPGAPAPGVYPG; 서열번호 9), 또는 이들의 조합에 의해 정의된 Gal3의 영역 내에 존재하는 에피토프에 결합하는 것인 방법.
32.
배열 19 내지 31 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체 또는 그의 결합 단편은 GxYPG의 아미노산 서열을 포함하는 Gal3의 에피토프에 결합하고, x는 알라닌, 글리신, 또는 발린인 것인 방법.
33.
배열 19 내지 32 중 어느 하나에 있어서, 상기 상호작용은 상기 항체 또는 그의 결합 단편의 부재시 상호작용의 80% 미만, 75% 미만, 70% 미만, 65% 미만, 60% 미만, 55% 미만, 50% 미만, 45% 미만, 40% 미만, 35% 미만, 30% 미만, 25% 미만, 20% 미만, 15% 미만, 10% 미만, 5% 미만, 또는 1% 미만까지 감소되는 것인 방법.
34.
배열 19 내지 33 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3에 1 nM 미만, 1.2 nM 미만, 2 nM 미만, 5 nM 미만, 10 nM 미만, 13.5 nM 미만, 15 nM 미만, 20 nM 미만, 25 nM 미만, 또는 30 nM 미만의 해리 상수 (KD)로 결합하는 것인 방법.
35.
배열 19 내지 34 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체 또는 그의 결합 단편은 (1) VL-CDR1, VL-CDR2, 및 VL-CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역; 및 (2) VH-CDR1, VH-CDR2, 및 VH-CDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역을 포함하고,
상기 VL-CDR1은 서열번호 71-89에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며,
상기 VL-CDR2는 서열번호 90-100에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고,
상기 VL-CDR3은 서열번호 101-115에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며,
상기 VH-CDR1은 서열번호 27-38에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고,
상기 VH-CDR2는 서열번호 39-53에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 및
상기 VH-CDR3은 서열번호 54-70에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 방법.
36.
배열 19 내지 35 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 표 9에 예시된 바와 같이 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3, VH-CDR1, VH-CDR2, 및 VH-CDR3의 조합을 포함하는 것인 방법.
37.
배열 19 내지 36 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 13H12.2F8, 19D9.2E5, 14H10.2C9, 2D10.2B2, 4A11.2B5, 6H6.2D6, 20H5.A3, 19B5.2E6, 23H9.2E4, 20D11.2C6, 15G7.2A7, 4G2.2G6, 3B11.2G2, 13A12.2E5, 7D8.2D8, 15F10.2D6, 12G5.D7, 24D12.2H9, 13G4.2F8, 9H2.2H1, IMT-001, 및 IMT-006으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 방법.
38.
배열 19 내지 37 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체 또는 그의 결합 단편은 인간화 항체를 포함하는 것인 방법.
39.
배열 19 내지 38 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체 또는 그의 결합 단편은 전장 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는 것인 방법.
40.
배열 19 내지 39 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체 또는 그의 결합 단편은 이중특이성 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는 것인 방법.
41.
배열 19 내지 40 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체 또는 그의 결합 단편은 1가 Fab', 2가 Fab2, scFv(single chain variable fragment), 디아바디, 미니바디, 나노바디, sdAb(single-domain antibody), 또는 카멜리드 항체, 또는 그의 결합 단편을 포함하는 것인 방법.
42.
배열 19 내지 41 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체 또는 그의 결합 단편은 IgG 프레임워크를 포함하는 것인 방법.
43.
배열 19 내지 42 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체 또는 그의 결합 단편은 IgG1 프레임워크, IgG2 프레임워크, 또는 IgG4 프레임워크를 포함하는 것인 방법.
44.
배열 19 내지 43 중 어느 하나에 있어서, 상기 개체는 타입 I 당뇨병 또는 타입 II 당뇨병으로 진단된 것인 방법
45.
배열 19 내지 44 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체 또는 그의 결합 단편은 전신 투여용으로 제제화되는 것인 방법.
46.
배열 19 내지 45 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체 또는 그의 결합 단편은 비경구 투여용으로 제제화되는 것인 방법.
47.
배열 19 내지 46 중 어느 하나에 있어서, 상기 개체는 포유동물인 것인 방법.
48.
배열 47에 있어서, 상기 포유동물은 인간인 것인 방법.
49.
(1) VL-CDR1, VL-CDR2, 및 VL-CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역; 및 (2) VH-CDR1, VH-CDR2, 및 VH-CDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역을 포함하는, 항-Gal3 항체 로서,
상기 VL-CDR1은 서열번호 71-89에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고,
상기 VL-CDR2는 서열번호 90-100에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며,
상기 VL-CDR3은 서열번호 101-115에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고,
상기 VH-CDR1은 서열번호 27-38에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며,
상기 VH-CDR2는 서열번호 39-53에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고, 및
상기 VH-CDR3은 서열번호 54-70에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 항체.
50.
배열 49에 있어서, 상기 항-Gal3 항체는 표 9에 예시된 바와 같이 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3, VH-CDR1, VH-CDR2, 및 VH-CDR3의 조합을 포함하는 것인 항-Gal3 항체.
51.
배열 49 또는 50에 있어서, 상기 항-Gal3 항체는 6H6.2D6, 20H5.A3, 20D11.2C6, 4G2.2G6, 13H12.2F8, 19B5.2E6, 15G7.2A7, 23H9.2E4, 19D9.2E5, 2D10.2B2, 4A11.2B5, 14H10.2C9, 3B11.2G2, 13A12.2E5, 7D8.2D8, 15F10.2D6, IMT-001 (TB001), 및 IMT-006 (TB006)으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 항-Gal3 항체.
52.
인간 Gal3에 결합하고, 인간 Gal3로의 결합에 대해 항-Gal3 항체와 경쟁하는 항체로서, 상기 항-Gal3 항체는 6H6.2D6, 20H5.A3, 20D11.2C6, 4G2.2G6, 13H12.2F8, 19B5.2E6, 15G7.2A7, 23H9.2E4, 19D9.2E5, 2D10.2B2, 4A11.2B5, 14H10.2C9, 3B11.2G2, 13A12.2E5, 7D8.2D8, and 15F10.2D6, IMT001, 및 IMT006으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 항체.
53.
Gal3와 인슐린 수용체의 상호작용을 차단할 수 있는 항체를 확인(identify)하는 방법으로서, 상기 방법은:
(a) Gal3 단백질을 Gal3에 선택적으로 결합하는 항체와 접촉시켜, Gal3-항체 복합체를 형성시키는 단계;
(b) 상기 Gal3-항체 복합체를 인슐린 수용체 단백질과 접촉시키는 단계;
(c) 결합되지 않은 인슐린 수용체 단백질을 제거하는 단계; 및
(d) 상기 Gal3-항체 복합체에 결합된 인슐린 수용체 단백질을 검출하는 단계;를 포함하고,
인슐린 수용체 단백질이 (d)에서 검출되지 않는 경우, 상기 항체는 Gal3와 인슐린 수용체의 상호작용을 차단할 수 있는 것인 방법.
54.
배열 53에 있어서, 상기 방법은 면역분석을 포함하는 것인 방법.
55.
배열 54에 있어서, 상기 면역분석은 ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)인 것인 방법.
56.
갈렉틴-3 (Gal3)와 인슐린 수용체 또는 인테그린, 또는 인슐린 수용체 및 인테그린의 상호작용을 차단하는 방법으로서, 상기 방법은:
Gal3와 인슐린 수용체 또는 인테그린, 또는 인슐린 수용체 및 인테그린의 상호작용을 Gal3에 선택적으로 결합하여 Gal3와 인슐린 수용체 또는 인테그린, 또는 인슐린 수용체 및 인테그린의 상호작용을 차단하는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편과 접촉시키는 단계를 포함하는 것인 방법.
57.
배열 56에 있어서, Gal3는 세포에 의해 발현되는 것인 방법.
58.
배열 56에 있어서, Gal3는 세포에 의해 분비되는 것인 방법.
59.
배열 56 내지 58 중 어느 하나에 있어서, 상기 인슐린 수용체 또는 인테그린, 또는 둘 모두는 세포에 의해 발현되는 것인 방법.
60.
배열 56 내지 59 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3의 N-말단 도메인에 결합하는 것인 방법.
61.
배열 56 내지 60 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 서열번호 3-26의 펩티드 중 하나 이상에 결합하는 것인 방법.
62.
배열 56 내지 61 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 펩티드 1 (ADNFSLHDALSGSGNPNPQG; 서열번호 3), 펩티드 4 (GAGGYPGASYPGAYPGQAPP; 서열번호 6), 펩티드 6 (GAYPGQAPPGAYPGAPGAYP; 서열번호 8), 펩티드 7 (AYPGAPGAYPGAPAPGVYPG; 서열번호 9), 또는 이들의 조합에 의해 정의된 Gal3의 영역 내에 존재하는 에피토프에 결합하는 것인 방법.
63.
배열 56 내지 62 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 GxYPG의 아미노산 서열을 포함하는 Gal3의 에피토프에 결합하고, x는 알라닌, 글리신, 또는 발린인 것인 방법.
64.
배열 56 내지 63 중 어느 하나에 있어서, 상기 상호작용은 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 부재시 상호작용의 80% 미만, 75% 미만, 70% 미만, 65% 미만, 60% 미만, 55% 미만, 50% 미만, 45% 미만, 40% 미만, 35% 미만, 30% 미만, 25% 미만, 20% 미만, 15% 미만, 10% 미만, 5% 미만, 또는 1% 미만까지 감소되는 것인 방법.
65.
배열 56 내지 64 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3에 1 nM 미만, 1.2 nM 미만, 2 nM 미만, 5 nM 미만, 10 nM 미만, 13.5 nM 미만, 15 nM 미만, 20 nM 미만, 25 nM 미만, 또는 30 nM 미만의 해리 상수 (KD)로 결합하는 것인 방법.
66.
배열 56 내지 65 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 (1) VL-CDR1, VL-CDR2, 및 VL-CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역; 및 (2) VH-CDR1, VH-CDR2, 및 VH-CDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역을 포함하고,
상기 VL-CDR1은 서열번호 100-128에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고,
상기 VL-CDR2는 서열번호 129-144에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며,
상기 VL-CDR3은 서열번호 145-168에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고,
상기 VH-CDR1은 서열번호 27-47에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고,
상기 VH-CDR2는 서열번호 48-69에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 및
상기 VH-CDR3은 서열번호 70-99에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 방법.
67.
배열 66에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 169-206에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 방법.
68.
배열 66 또는 67에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 169-206으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 방법.
69.
배열 66 내지 68 중 어느 하나에 있어서, 상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 207-245에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 방법.
70.
배열 66 내지 69 중 어느 하나에 있어서, 상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 207-245로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 방법
71.
배열 56 내지 70 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 도 36에 도시된 바와 같이 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3, VH-CDR1, VH-CDR2, 및 VH-CDR3의 조합을 포함하는 것인 방법.
72.
배열 56 내지 71 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은:
a) 서열번호 169 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 207 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
b) 서열번호 170 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 208 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
c) 서열번호 171 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 209 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
d) 서열번호 172 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 210 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
e) 서열번호 173 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 211 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
f) 서열번호 174 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 212 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
g) 서열번호 175 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 213 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
h) 서열번호 176 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 214 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
i) 서열번호 177 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 215 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
j) 서열번호 178 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 216 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
k) 서열번호 179 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 217 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
l) 서열번호 180 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 218 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
m) 서열번호 181 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 219 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
n) 서열번호 181 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 220 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
o) 서열번호 182 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 221 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
p) 서열번호 183 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 222 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
q) 서열번호 184 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 223 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
r) 서열번호 185 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 224 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
s) 서열번호 186 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 225 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
t) 서열번호 187 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 226 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
u) 서열번호 188 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 227 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
v) 서열번호 189 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 228 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
w) 서열번호 190 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 229 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
x) 서열번호 191 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 230 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
y) 서열번호 192 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 231 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
z) 서열번호 193 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 232 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
aa) 서열번호 194 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 233 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ab) 서열번호 195 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 234 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ac) 서열번호 196 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 235 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ad) 서열번호 197 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 236 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ae) 서열번호 198 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 237 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
af) 서열번호 199 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 238 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ag) 서열번호 197 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 239 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ah) 서열번호 200 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 240 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ai) 서열번호 201 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 241 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
aj) 서열번호 202 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 242 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ak) 서열번호 203 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 240 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
al) 서열번호 204 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 243 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
am) 서열번호 205 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 244 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; 또는
an) 서열번호 206 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 245 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3를 포함하는 것인 방법.
73.
배열 56 내지 72 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은:
a) 서열번호 169의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 207의 경쇄 가변 영역;
b) 서열번호 170의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 208의 경쇄 가변 영역;
c) 서열번호 171의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 209의 경쇄 가변 영역;
d) 서열번호 172의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 210의 경쇄 가변 영역;
e) 서열번호 173의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 211의 경쇄 가변 영역;
f) 서열번호 174의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 212의 경쇄 가변 영역;
g) 서열번호 175의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 213의 경쇄 가변 영역;
h) 서열번호 176의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 214의 경쇄 가변 영역;
i) 서열번호 177의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 215의 경쇄 가변 영역;
j) 서열번호 178의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 216의 경쇄 가변 영역;
k) 서열번호 179의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 217의 경쇄 가변 영역;
l) 서열번호 180의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 218의 경쇄 가변 영역;
m) 서열번호 181의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 219의 경쇄 가변 영역;
n) 서열번호 181의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 220의 경쇄 가변 영역;
o) 서열번호 182의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 221의 경쇄 가변 영역;
p) 서열번호 183의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 222의 경쇄 가변 영역;
q) 서열번호 184의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 223의 경쇄 가변 영역;
r) 서열번호 185의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 224의 경쇄 가변 영역;
s) 서열번호 186의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 225의 경쇄 가변 영역;
t) 서열번호 187의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 226의 경쇄 가변 영역;
u) 서열번호 188의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 227의 경쇄 가변 영역;
v) 서열번호 189의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 228의 경쇄 가변 영역;
w) 서열번호 190의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 229의 경쇄 가변 영역;
x) 서열번호 191의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 230의 경쇄 가변 영역;
y) 서열번호 192의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 231의 경쇄 가변 영역;
z) 서열번호 193의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 232의 경쇄 가변 영역;
aa) 서열번호 194의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 233의 경쇄 가변 영역;
ab) 서열번호 195의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 234의 경쇄 가변 영역;
ac) 서열번호 196의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 235의 경쇄 가변 영역;
ad) 서열번호 197의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 236의 경쇄 가변 영역;
ae) 서열번호 198의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 237의 경쇄 가변 영역;
af) 서열번호 199의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 238의 경쇄 가변 영역;
ag) 서열번호 197의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 239의 경쇄 가변 영역;
ah) 서열번호 200의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 240의 경쇄 가변 영역;
ai) 서열번호 201의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 241의 경쇄 가변 영역;
aj) 서열번호 202의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 242의 경쇄 가변 영역;
ak) 서열번호 203의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 240의 경쇄 가변 영역;
al) 서열번호 204의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 243의 경쇄 가변 영역;
am) 서열번호 205의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 244의 경쇄 가변 영역; 또는
an) 서열번호 206의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 245의 경쇄 가변 영역을 포함하는 것인 방법.
74.
배열 56 내지 73 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 13H12.2F8, 19D9.2E5, 14H10.2C9, 2D10.2B2, 4A11.2B5, 6H6.2D6, 20H5.A3, 19B5.2E6, 23H9.2E4, 20D11.2C6, 15G7.2A7, 4G2.2G6, 3B11.2G2, 13A12.2E5, 7D8.2D8, 15F10.2D6, 12G5.D7, 24D12.2H9, 13G4.2F8, 9H2.2H1, 23B10.2B12, 6B3.2D3, F846C.1B2, F846C.1F5, F846C.1H12, F846C.1H5, F846C.2H3, F846TC.14A2, F846TC.14E4, F846TC.16B5, F846TC.7F10, F847C.10B9, F847C.11B1, F847C.12F12, F847C.26F5, F847C.4B10, F849C.8D10, F849C.8H3, 847.14H4, mIMT001, IMT-001(TB001), 및 IMT-006 (TB006)으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 방법.
75.
배열 56 내지 74 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 인간화 항체를 포함하는 것인 방법.
76.
배열 56 내지 75 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 전장 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는 것인 방법.
77.
배열 56 내지 76 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 이중특이성 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는 것인 방법.
78.
배열 56 내지 77 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 1가 Fab', 2가 Fab2, scFv(single chain variable fragment), 디아바디, 미니바디, 나노바디, sdAb(single-domain antibody), 또는 카멜리드 항체, 또는 그의 결합 단편을 포함하는 것인 방법.
79.
배열 56 내지 78 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 IgG 프레임워크를 포함하는 것인 방법.
80.
배열 56 내지 79 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 IgG1 프레임워크, IgG2 프레임워크, 또는 IgG4 프레임워크를 포함하는 것인 방법.
81.
배열 56 내지 80 중 어느 하나에 있어서, 상기 Gal3와 인테그린의 상호작용을 차단하는 것은 림프구 부착(lymphocyte adhesion)을 감소시키는 것인 방법.
82.
배열 81에 있어서, 상기 림프구 부착은 적어도 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99%, 또는 전술된 퍼센트 중 2개에 의해 정의되는 범위 내의 퍼센트 만큼 감소되는 것인 방법.
83.
필요로 하는 개체에서 당뇨병을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은: Gal3에 선택적으로 결합하고 Gal3와 인슐린 수용체 또는 인테그린, 또는 둘 모두와의 상호작용을 차단하는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 상기 개체에게 투여하여, 상기 개체에서 당뇨병을 치료하는 단계를 포함하는 것인 방법.
84.
배열 83에 있어서, 상기 당뇨병은 인슐린-의존성 당뇨병인 것인 방법.
85.
배열 83에 있어서, 상기 당뇨병은 인슐린-비의존성 당뇨병인 것인 방법.
86.
배열 83에 있어서, 상기 당뇨병은 타입 I 당뇨병인 것인 방법.
87.
배열 83에 있어서, 상기 당뇨병은 타입 II 당뇨병인 것인 방법.
88.
배열 83 내지 87 중 어느 하나에 있어서, 상기 치료는 상기 필요로 하는 개체에서 당 내성을 감소시키는 것을 포함하는 것인 방법.
89.
배열 83 내지 88 중 어느 하나에 있어서, 상기 치료는 상기 필요로 하는 개체에서 인슐린 감수성을 감소시키는 것을 포함하는 것인 방법.
90.
배열 83 내지 89 중 어느 하나에 있어서, 상기 치료는 상기 필요로 하는 개체에서 체중 증가를 감소시키는 것을 포함하는 것인 방법.
91.
배열 83 내지 90 중 어느 하나에 있어서, 상기 치료는 상기 필요로 하는 개체에서 간 지방증을 경감시키는 것을 포함하는 것인 방법.
92.
배열 83 내지 91 중 어느 하나에 있어서, 상기 투여하는 단계 전에 당뇨병을 갖거나 또는 당뇨병에 걸릴 위험을 갖는 개체를 선택하는 단계를 더 포함하는 것인 방법.
93.
배열 83 내지 92 중 어느 하나에 있어서, 상기 투여하는 단계 후에 상기 개체에서 당뇨병과 연관된 증상의 개선을 검출하는 단계를 더 포함하는 것인 방법.
94.
배열 83 내지 93 중 어느 하나에 있어서, 상기 인슐린 수용체는 서열번호 2의 서열을 포함하는 것인 방법.
95.
배열 83 내지 94 중 어느 하나에 있어서, 상기 인테그린은 ITGa1, ITGa2, ITGa3, ITGa4, ITGa5, ITGa6, ITGa7, ITGa8, ITGa9, ITGa10, ITGa11, ITGaD, ITGaE, ITGaL, ITGaM, ITGaV, ITGa2B, ITGa2X, ITGb1, ITGb2, ITGb3, ITGb4, ITGb5, ITGb6, ITGb7, ITGb8, 또는 이들의 조합으로부터 선택되는 것인 방법.
96.
배열 83 내지 95 중 어느 하나에 있어서, 상기 인테그린은 서열번호 339-342로부터 선택된 서열을 포함하는 것인 방법.
97.
배열 83 내지 96 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 하나 이상의 추가적인 치료 조성물과 함께 투여되는 것인 방법.
98.
배열 97에 있어서, 상기 하나 이상의 추가적인 치료 조성물은 인슐린, 인슐린 유도체 또는 그의 모방체(mimetic), 인슐린 아스파르트(insulin aspart), 인슐린 글루리신(insulin glulisine), 인슐린 리스프로(insulin lispro), 인슐린 이소판(insulin isophane), 인슐린 데글루덱(insulin degludec), 인슐린 데테미르(insulin detemir), 인슐린 징크(insulin zinc), 인슐린 글라르긴(insulin glargine), 바나듐, 비구아니드(biguarnides), 메트포르민(metformin), 펜포르민(phenformin), 부포르민(buformin), 티아졸리디네디온(thiazolidinediones), 로시글리타존(rosiglitazone), 피오글리타존(pioglitazone), 트로글리타존(troglitazone), 톨리미돈(tolimidone), 술포닐우레아(sulfonylureas), 톨부타미드(tolbutamide), 아세토헥사미드(acetohexamide), 톨라자미드(tolazamide), 클로르프로파미드(chlorpropamide), 글리피지드(glipizide), 글리벤클라미드(glibenclamide), 글리메피리드(glimepiride), 글리클라지드(gliclazide), 글리클로피라미드(glyclopyramide), 글리퀴돈(gliquidone), 메글리티니드(meglitinides), 레파글리니드(repaglinide), 나테글리니드(nateglinide), 알파-글루코시다아제 억제제, 미글리톨(miglitol), 아카르보스(acarbose), 보글리보스(voglibose), 인크레틴(incretins), GLP-1(glucagon-like peptide 1), GLP 아고니스트(glucagon-like peptide agonists), 엑세나티드(exenatide), 리라글루티드(liraglutide), 타스포글루티드(taspoglutide), 릭시세나티드(lixisenatide), 세마글루티드(semaglutide), 둘라글루티드(dulaglutide), GIP(gastric inhibitory peptide), DPP-4(dipeptidyl peptidase-4) 억제제, 빌다글립틴(vildagliptin), 시타글립틴(sitagliptin), 삭사글립틴(saxagliptin), 리나글립틴(linagliptin), 알로글립틴(alogliptin), 셉타글립틴(septagliptin), 테넬리글립틴(teneligpliptin), 게미글립틴(gemigliptin), 프람린티드(pramlintide), 다파글리플로진(dapagliflozin), 카나글리플로진(canagliflozin), 엠파글리플로진(empagliflozin), 또는 레모글리플로진(remogliflozin), 또는 이들의 조합을 포함하는 것인 방법.
99.
필요로 하는 개체에서 염증성 장 증후군을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 Gal3에 선택적으로 결합하고 Gal3와 인테그린의 상호작용을 차단하는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 상기 개체에게 투여하는 단계를 포함하여, 그에 의해 상기 개체에서 염증성 장 증후군을 치료하는 것인 방법.
100.
배열 99에 있어서, 상기 염증성 장 증후군은 궤양성 대장염 또는 크론병, 또는 둘 모두인 것인 방법.
101.
배열 99 또는 100에 있어서, 상기 투여하는 단계 전에 염증성 장 증후군을 갖거나 또는 염증성 장 증후군에 걸릴 위험을 갖는 개체를 선택하는 단계를 더 포함하는 것인 방법.
102.
배열 99 내지 101 중 어느 하나에 있어서, 상기 투여하는 단계 후에 상기 개체에서 염증성 장 증후군과 연관된 증상의 개선을 검출하는 단계를 더 포함하는 것인 방법.
103.
배열 99 내지 102 중 어느 하나에 있어서, 상기 Gal3와 인테그린의 상호작용의 차단은 상기 개체에서 림프구 부착을 감소시키는 것인 방법.
104.
배열 103에 있어서, 상기 림프구 부착은 적어도 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99%, 또는 전술된 퍼센트 중 2개에 의해 정의되는 범위 내의 퍼센트 만큼 감소되는 것인 방법.
105.
배열 99 내지 104 중 어느 하나에 있어서, 상기 인테그린은 ITGa1, ITGa2, ITGa3, ITGa4, ITGa5, ITGa6, ITGa7, ITGa8, ITGa9, ITGa10, ITGa11, ITGaD, ITGaE, ITGaL, ITGaM, ITGaV, ITGa2B, ITGa2X, ITGb1, ITGb2, ITGb3, ITGb4, ITGb5, ITGb6, ITGb7, ITGb8, 또는 이들의 조합으로부터 선택되는 것인 방법.
106.
배열 99 내지 105 중 어느 하나에 있어서, 상기 인테그린은 서열번호 339-342로부터 선택된 서열을 포함하는 것인 방법.
107.
배열 99 내지 106 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 하나 이상의 추가적인 치료 조성물과 함께 투여되는 것인 방법.
108.
배열 107에 있어서, 상기 하나 이상의 추가적인 치료 조성물은 메살라진, 면역억제제, 프레드니손, TNF 억제제, 아자티오프린, 메토트렉세이트, 6-머캅토퓨린, 또는 리팍시민, 또는 이들의 조합을 포함하는 것인 방법.
109.
필요로 하는 개체에서 비알코올성 지방간 질환 (NAFLD)를 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 Gal3에 선택적으로 결합하고 Gal3와 인슐린 수용체의 상호작용을 차단하는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 상기 개체에게 투여하는 단계를 포함하여, 그에 의해 상기 개체에서 NAFLD를 치료하는 것인 방법.
110.
필요로 하는 개체에서 비알코올성 지방간염 (NASH)을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 Gal3에 선택적으로 결합하고 Gal3와 인슐린 수용체의 상호작용을 차단하는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 상기 개체에게 투여하는 단계를 포함하여, 그에 의해 상기 개체에서 NASH를 치료하는 것인 방법.
111.
배열 83 내지 110 중 어느 하나에 있어서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3의 N-말단 도메인에 결합하는 것인 방법.
112.
배열 83 내지 111 중 어느 하나에 있어서, 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 서열번호 3-26의 펩티드 중 하나 이상에 결합하는 것인 방법.
113.
배열 83 내지 112 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 펩티드 1 (ADNFSLHDALSGSGNPNPQG; 서열번호 3), 펩티드 4 (GAGGYPGASYPGAYPGQAPP; 서열번호 6), 펩티드 6 (GAYPGQAPPGAYPGAPGAYP; 서열번호 8), 펩티드 7 (AYPGAPGAYPGAPAPGVYPG; 서열번호 9), 또는 이들의 조합에 의해 정의된 Gal3의 영역 내에 존재하는 에피토프에 결합하는 것인 방법.
114.
배열 83 내지 113 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 GxYPG의 아미노산 서열을 포함하는 Gal3의 에피토프에 결합하고, x는 알라닌, 글리신, 또는 발린인 것인 방법.
115.
배열 83 내지 114 중 어느 하나에 있어서, 상기 상호작용은 상기 항체 또는 그의 결합 단편의 부재시 상호작용의 80% 미만, 75% 미만, 70% 미만, 65% 미만, 60% 미만, 55% 미만, 50% 미만, 45% 미만, 40% 미만, 35% 미만, 30% 미만, 25% 미만, 20% 미만, 15% 미만, 10% 미만, 5% 미만, 또는 1% 미만까지 감소되는 것인 방법.
116.
배열 83 내지 115 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3에 1 nM 미만, 1.2 nM 미만, 2 nM 미만, 5 nM 미만, 10 nM 미만, 13.5 nM 미만, 15 nM 미만, 20 nM 미만, 25 nM 미만, 또는 30 nM 미만의 해리 상수 (KD)로 결합하는 것인 방법.
117.
배열 83 내지 116 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 (1) VL-CDR1, VL-CDR2, 및 VL-CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역; 및 (2) VH-CDR1, VH-CDR2, 및 VH-CDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역을 포함하고,
상기 VL-CDR1은 서열번호 100-128에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고,
상기 VL-CDR2는 서열번호 129-144에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며,
상기 VL-CDR3은 서열번호 145-168에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고,
상기 VH-CDR1은 서열번호 27-47에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고,
상기 VH-CDR2는 서열번호 48-69에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 및
상기 VH-CDR3은 서열번호 70-99에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 방법.
118.
배열 117에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 169-206에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 방법.
119.
배열 117 또는 118에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 169-206으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 방법.
120.
배열 117 내지 119 중 어느 하나에 있어서, 상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 207-245에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 방법.
121.
배열 117 내지 120 중 어느 하나에 있어서, 상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 207-245로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 방법.
122.
배열 83 내지 121 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 도 36에 예시된 바와 같이 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3, VH-CDR1, VH-CDR2, 및 VH-CDR3의 조합을 포함하는 것인 방법.
123.
배열 83 내지 122 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은:
a) 서열번호 169 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 207 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
b) 서열번호 170 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 208 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
c) 서열번호 171 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 209 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
d) 서열번호 172 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 210 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
e) 서열번호 173 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 211 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
f) 서열번호 174 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 212 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
g) 서열번호 175 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 213 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
h) 서열번호 176 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 214 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
i) 서열번호 177 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 215 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
j) 서열번호 178 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 216 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
k) 서열번호 179 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 217 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
l) 서열번호 180 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 218 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
m) 서열번호 181 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 219 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
n) 서열번호 181 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 220 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
o) 서열번호 182 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 221 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
p) 서열번호 183 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 222 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
q) 서열번호 184 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 223 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
r) 서열번호 185 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 224 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
s) 서열번호 186 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 225 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
t) 서열번호 187 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 226 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
u) 서열번호 188 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 227 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
v) 서열번호 189 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 228 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
w) 서열번호 190 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 229 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
x) 서열번호 191 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 230 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
y) 서열번호 192 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 231 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
z) 서열번호 193 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 232 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
aa) 서열번호 194 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 233 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ab) 서열번호 195 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 234 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ac) 서열번호 196 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 235 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ad) 서열번호 197 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 236 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ae) 서열번호 198 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 237 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
af) 서열번호 199 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 238 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ag) 서열번호 197 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 239 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ah) 서열번호 200 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 240 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ai) 서열번호 201 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 241 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
aj) 서열번호 202 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 242 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ak) 서열번호 203 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 240 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
al) 서열번호 204 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 243 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
am) 서열번호 205 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 244 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; 또는
an) 서열번호 206 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 245 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3를 포함하는 것인 방법.
124.
배열 83 내지 123 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은:
a) 서열번호 169의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 207의 경쇄 가변 영역;
b) 서열번호 170의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 208의 경쇄 가변 영역;
c) 서열번호 171의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 209의 경쇄 가변 영역;
d) 서열번호 172의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 210의 경쇄 가변 영역;
e) 서열번호 173의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 211의 경쇄 가변 영역;
f) 서열번호 174의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 212의 경쇄 가변 영역;
g) 서열번호 175의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 213의 경쇄 가변 영역;
h) 서열번호 176의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 214의 경쇄 가변 영역;
i) 서열번호 177의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 215의 경쇄 가변 영역;
j) 서열번호 178의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 216의 경쇄 가변 영역;
k) 서열번호 179의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 217의 경쇄 가변 영역;
l) 서열번호 180의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 218의 경쇄 가변 영역;
m) 서열번호 181의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 219의 경쇄 가변 영역;
n) 서열번호 181의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 220의 경쇄 가변 영역;
o) 서열번호 182의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 221의 경쇄 가변 영역;
p) 서열번호 183의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 222의 경쇄 가변 영역;
q) 서열번호 184의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 223의 경쇄 가변 영역;
r) 서열번호 185의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 224의 경쇄 가변 영역;
s) 서열번호 186의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 225의 경쇄 가변 영역;
t) 서열번호 187의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 226의 경쇄 가변 영역;
u) 서열번호 188의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 227의 경쇄 가변 영역;
v) 서열번호 189의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 228의 경쇄 가변 영역;
w) 서열번호 190의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 229의 경쇄 가변 영역;
x) 서열번호 191의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 230의 경쇄 가변 영역;
y) 서열번호 192의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 231의 경쇄 가변 영역;
z) 서열번호 193의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 232의 경쇄 가변 영역;
aa) 서열번호 194의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 233의 경쇄 가변 영역;
ab) 서열번호 195의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 234의 경쇄 가변 영역;
ac) 서열번호 196의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 235의 경쇄 가변 영역;
ad) 서열번호 197의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 236의 경쇄 가변 영역;
ae) 서열번호 198의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 237의 경쇄 가변 영역;
af) 서열번호 199의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 238의 경쇄 가변 영역;
ag) 서열번호 197의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 239의 경쇄 가변 영역;
ah) 서열번호 200의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 240의 경쇄 가변 영역;
ai) 서열번호 201의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 241의 경쇄 가변 영역;
aj) 서열번호 202의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 242의 경쇄 가변 영역;
ak) 서열번호 203의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 240의 경쇄 가변 영역;
al) 서열번호 204의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 243의 경쇄 가변 영역;
am) 서열번호 205의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 244의 경쇄 가변 영역; 또는
an) 서열번호 206의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 245의 경쇄 가변 영역을 포함하는 것인 방법.
125.
배열 83 내지 124 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 13H12.2F8, 19D9.2E5, 14H10.2C9, 2D10.2B2, 4A11.2B5, 6H6.2D6, 20H5.A3, 19B5.2E6, 23H9.2E4, 20D11.2C6, 15G7.2A7, 4G2.2G6, 3B11.2G2, 13A12.2E5, 7D8.2D8, 15F10.2D6, 12G5.D7, 24D12.2H9, 13G4.2F8, 9H2.2H1, 23B10.2B12, 6B3.2D3, F846C.1B2, F846C.1F5, F846C.1H12, F846C.1H5, F846C.2H3, F846TC.14A2, F846TC.14E4, F846TC.16B5, F846TC.7F10, F847C.10B9, F847C.11B1, F847C.12F12, F847C.26F5, F847C.4B10, F849C.8D10, F849C.8H3, 847.14H4, mIMT001, IMT-001 (TB001), 및 IMT-006 (TB006)으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 방법.
126.
배열 83 내지 125 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 장내로(enterally), 경구로, 비강내로, 비경구로, 두개내로(intracranially), 피하로, 근육내로, 피내로, 또는 정맥내로, 또는 이들의 조합으로 투여되는 것인 방법.
127.
배열 83 내지 126 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 인간화 항체를 포함하는 것인 방법.
128.
배열 83 내지 127 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 전장 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는 것인 방법.
129.
배열 83 내지 128 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 이중특이성 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는 것인 방법.
130.
배열 83 내지 129 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 1가 Fab', 2가 Fab2, scFv(single chain variable fragment), 디아바디, 미니바디, 나노바디, sdAb(single-domain antibody), 또는 카멜리드 항체, 또는 그의 결합 단편을 포함하는 것인 방법.
131.
배열 83 내지 130 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 IgG 프레임워크를 포함하는 것인 방법.
132.
배열 83 내지 131 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 IgG1 프레임워크, IgG2 프레임워크, 또는 IgG4 프레임워크를 포함하는 것인 방법.
133.
배열 83 내지 132 중 어느 하나에 있어서, 상기 개체는 타입 I 당뇨병 또는 타입 II 당뇨병으로 진단된 것인 방법.
134.
배열 83 내지 133 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 또는 그의 결합 단편은 전신 투여용으로 제제화되는 것인 방법.
135.
배열 83 내지 134 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 비경구 투여용으로 제제화되는 것인 방법.
136.
배열 83 내지 135 중 어느 하나에 있어서, 1개 초과의 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편이 투여되는 것인 방법.
137.
배열 83 내지 136 중 어느 하나에 있어서, 상기 개체는 포유동물인 것인 방법.
138.
배열 137에 있어서, 상기 포유동물은 인간인 것인 방법.
139.
(1) VL-CDR1, VL-CDR2, 및 VL-CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역; 및 (2) VH-CDR1, VH-CDR2, 및 VH-CDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역을 포함하는, 항-Gal3 항체 로서,
상기 VL-CDR1은 서열번호 100-128에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고,
상기 VL-CDR2는 서열번호 129-144에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며,
상기 VL-CDR3은 서열번호 145-168에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고,
상기 VH-CDR1은 서열번호 27-47에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고,
상기 VH-CDR2는 서열번호 48-69에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 및
상기 VH-CDR3은 서열번호 70-99에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 항-Gal3 항체.
140.
배열 139에 있어서, 상기 항-Gal3 항체는 도 36에 예시된 바와 같이 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3, VH-CDR1, VH-CDR2, 및 VH-CDR3의 조합을 포함하는 것인 항-Gal3 항체.
141.
배열 139 또는 140에 있어서, 상기 항-Gal3 항체는 6H6.2D6, 20H5.A3, 20D11.2C6, 4G2.2G6, 13H12.2F8, 19B5.2E6, 15G7.2A7, 23H9.2E4, 19D9.2E5, 2D10.2B2, 4A11.2B5, 14H10.2C9, 3B11.2G2, 13A12.2E5, 7D8.2D8, 15F10.2D6, 23B10.2B12, 6B3.2D3, F846C.1B2, F846C.1F5, F846C.1H12, F846C.1H5, F846C.2H3, F846TC.14A2, F846TC.14E4, F846TC.16B5, F846TC.7F10, F847C.10B9, F847C.11B1, F847C.12F12, F847C.26F5, F847C.4B10, F849C.8D10, F849C.8H3, 847.14H4, mIMT001, IMT-001(TB001), 및 IMT-006 (TB006)으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 항-Gal3 항체.
142.
배열 139 내지 141 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체는 F846C.1B2, F846C.1F5, F846C.1H12, F846C.1H5, F846C.2H3, F846TC.14A2, F846TC.14E4, F846TC.16B5, F846TC.7F10, F847C.10B9, F847C.11B1, F847C.12F12, F847C.26F5, F847C.4B10, F849C.8D10, F849C.8H3, 및 847.14H4로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 항-Gal3 항체.
143.
배열 139 내지 142 중 어느 하나의 항-Gal3 항체를 포함하는 약학적 제제(formulation).
144.
배열 143에 있어서, 당뇨병의 치료에서의 용도를 위한 것인 약학적 제제.
145.
배열 143에 있어서, 염증성 장 질환의 치료에서의 용도를 위한 것인 약학적 제제.
146.
배열 143에 있어서, NAFLD 및/또는 NASH의 치료에서의 용도를 위한 것인 약학적 제제.
147.
인간 Gal3에 결합하고 인간 Gal3로의 결합에 대해 항-Gal3 항체와 경쟁하는 항체로서, 상기 항-Gal3 항체는 6H6.2D6, 20H5.A3, 20D11.2C6, 4G2.2G6, 13H12.2F8, 19B5.2E6, 15G7.2A7, 23H9.2E4, 19D9.2E5, 2D10.2B2, 4A11.2B5, 14H10.2C9, 3B11.2G2, 13A12.2E5, 7D8.2D8, 및 15F10.2D6, 23B10.2B12, 6B3.2D3, F846C.1B2, F846C.1F5, F846C.1H12, F846C.1H5, F846C.2H3, F846TC.14A2, F846TC.14E4, F846TC.16B5, F846TC.7F10, F847C.10B9, F847C.11B1, F847C.12F12, F847C.26F5, F847C.4B10, F849C.8D10, F849C.8H3, 847.14H4, mIMT001, IMT001(TB001), 및 IMT006 (TB006)으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 항체.
148.
Gal3와 인슐린 수용체, 또는 인테그린, 또는 둘 모두의 상호작용을 차단할 수 있는 항체를 확인하는 방법으로서, 상기 방법은
(a) Gal3 단백질을 Gal3에 선택적으로 결합하는 항체와 접촉시켜, Gal3-항체 복합체를 형성시키는 단계;
(b) 상기 Gal3-항체 복합체를 상기 인슐린 수용체, 또는 인테그린, 또는 둘 모두와 접촉시키는 단계;
(c) 결합되지 않은 인슐린 수용체, 또는 인테그린, 또는 둘 모두를 제거하는 단계; 및
(d) 상기 Gal3-항체 복합체에 결합된 인슐린 수용체, 또는 인테그린, 또는 둘 모두를 검출하는 단계;를 포함하고,
상기 인슐린 수용체, 또는 인테그린, 또는 둘 모두가 (d)에서 검출되지 않는 경우, 상기 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3와 인슐린 수용체, 또는 인테그린, 또는 둘 모두의 상호작용을 차단할 수 있는 것인 방법.
149.
배열 148에 있어서, 상기 방법은 면역분석을 포함하는 것인 방법.
150.
배열 149에 있어서, 상기 면역분석은 ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)인 것인 방법.
151.
항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 생산하는 방법으로서,
상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 코딩하는 핵산을 세포에서 발현시키는 단계; 및
발현된 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 상기 세포로부터 단리하는 단계를 포함하는 것인 방법.
152.
배열 151에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 원하는 농도로 농축시키는 단계를 더 포함하는 것인 방법.
153.
배열 151 또는 152에 있어서, 상기 세포는 포유동물 세포, 곤충 세포, 또는 박테리아 세포인 것인 방법.
154.
배열 151 내지 153 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 배열 56 내지 138 중 어느 한 하나의 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편인 것인 방법.
본 개시의 다양한 양태가 구체적으로 첨부된 청구항에 기재된다. 본 개시의 특징 및 장점의 보다 나은 이해는 본 개시의 원리가 이용되는 예시적 구체예를 기재하는 하기의 상세한 설명 및 첨부된 도면을 참조하여 수득될 것이다:
도 1은 10, 3, 및 1 ㎍/mL에서 ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay)에 의해 측정된, 갈렉틴-3 표적화 항체가 Gal3와 인슐린 수용체 (INSR)의 결합을 차단하는 능력을 보여준다. 막대는 평균 +/- 표준 편차를 나타낸다.
도 2는 ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay)에 의해 측정된, 한정된 일련의 갈렉틴-3 표적화 항체가 Gal3와 인슐린 수용체 (INSR)의 결합을 차단하는 능력의 적정(titration)을 도시한다. 막대는 평균 +/- 표준 편차를 나타낸다.
도 3a는 예시적 항-Gal3 항체에 대한 특성의 요약을 보여준다.
도 3b는 항체 경쟁에 의한 Gal3-결합 항체 빈의 확인을 보여준다. 값은 BLI (biolayer interferometry)에 의해 평가된 억제를 나타낸다.
도 4는 8주 동안 정상 식이, 또는 60% HFD (high fat diet)로 급이되고, 동형 대조군 항체(Isotype control antibody) HuIgG4, 또는 Gal3-표적화 IMT001-4 (TB001)가 투여된 마우스에서 체중 증가의 감소를 보여준다. 좌측 패널은 평균 절대값을 보여주고, 우측 패널은 동물당 평균 퍼센트 변화 +/- 표준 오차를 보여준다.
도 5는 도 4에서와 같이 처리된 마우스에서 당 내성을 보여준다. 좌측 패널은 글루코오스 볼루스(bolus) 후 혈청 평균 글루코오스 수준을 보여주고; 우측 패널은 좌측 패널에 표시된 데이터로부터의 평균 곡선하 면적 (AUC) +/- 표준 오차를 보여준다.
도 6은 도 4에서와 같이 처리된 마우스에서 인슐린 저항성을 보여준다. 좌측 패널은 인슐린 볼루스 후 혈청 평균 글루코오스 수준을 보여주고; 우측 패널은 좌측 패널에 표시된 데이터로부터의 평균 곡선하 면적 (AUC) +/- 표준 오차를 보여준다.
도 7은 도 4에서와 같이 처리된 마우스로부터의 포르말린 고정 파라핀 포매 간 절편 (formalin fixed paraffin embedded liver section)의 헤마톡실린 & 에오신 염색을 보여준다. 대조군 IgG4로 처리된 HFD-급이 마우스 중 지방증 및 IMT001-4 (TB001)로 처리된 HFD-급이 마우스 중 지방증의 부재의 증거에 주목한다.
도 8은 도 4에서와 같이 처리된 마우스에서 혈청 간 효소 ALT 수준을 보여준다. 막대는 평균 +/- 표준 오차를 나타낸다.
도 9는 ELISA에 의해 측정된, 인테그린 베타-1 (ITGb1)의 Gal3에 대한 상대적 결합 친화도의 평가를 보여준다.
도 10은 ELISA에 의해 측정된, 항-Gal3 항체에 의한 차단 후 ITGb1과 Gal3의 상대적 결합 친화도의 평가를 보여준다.
도 11은 ELISA에 의해 측정된, 인테그린 알파-3 (ITGa3)의 Gal3에 대한 상대적 결합 친화도의 평가를 보여준다.
도 12는 ELISA에 의해 측정된, 항-Gal3 항체에 의한 차단 후 ITGa3과 Gal3의 상대적 결합 친화도의 평가를 보여준다.
도 13은 ELISA에 의해 측정된, 인테그린 베타-3 (ITGb3)의 Gal3에 대한 상대적 결합 친화도의 평가를 보여준다.
도 14는 ELISA에 의해 측정된, 항-Gal3 항체에 의한 차단 후 ITGb3과 Gal3의 상대적 결합 친화도의 평가를 보여준다.
도 15는 ELISA에 의해 측정된, 인테그린 알파-V (ITGaV)의 Gal3에 대한 상대적 결합 친화도의 평가를 보여준다.
도 16은 ELISA에 의해 측정된, 항-Gal3 항체에 의한 차단 후 ITGaV와 Gal3의 상대적 결합 친화도의 평가를 보여준다.
도 17은 항-Gal3 항체 또는 동형 대조군에 의한 처리 후 Jurkat T 세포 부착의 상대적 억제의 평가를 보여준다.
도 18은 Bks-Db 또는 C57BL6/J 대조군 마우스에서 순환 Gal3의 양을 보여준다.
도 19는 항-Gal3 항체 mTB001, PBS 음성 대조군, 또는 세마글루티드 (semaglutide) 양성 대조군으로 처리된 건강한 C57BL6/J 마우스 및 Db/Db 마우스의 Kaplan-Meier 곡선을 보여준다.
도 20은 mTB001 또는 PBS로 처리된 건강한 C57BL6/J 마우스 또는 Db/Db 마우스의 공복 혈당(fasting blood glucose) 수준의 변화를 보여준다.
도 21은 미처리 대조군 (untreated control) 대비 mTB001로 처리된 NOD/ShiLtJ 마우스의 평균 생존율을 보여준다.
도 22a는 미처리 대조군 대비 mTB001로 처리된 NOD/ShiLtJ 마우스의 공복 혈당 수준의 변화를 보여준다.
도 22b는 미처리 대조군 대비 mTB001로 처리된 NOD/ShiLtJ 마우스, 및 정상 대조군 마우스에서 C-펩티드의 순환 수준을 보여준다.
도 23은 염증성 장 질환 (IBD) 마우스 모델에서 염증성 사이토카인의 정량을 위한 RT-qPCR을 위해 이용된 프라이머를 보여준다.
도 24는 정상 마우스 대비 mTB001 또는 PBS로 처리된 DSS-유도 IBD 마우스에서 측정된 결장 길이를 보여준다.
도 25는 정상 마우스 대비 mTB001 (10mg/kg 및 1mg/kg) 또는 PBS로 처리된 DSS-유도 IBD 마우스에서 순환 IFN-γ의 정량을 보여준다.
도 26(26a 내지 26c)는 Gal3, 인슐린 수용체 (INSR), 인테그린 베타-1 (ITGb1), 인테그린 알파-3 (ITGa3), 인테그린 베타-3 (ITGb3), 및 인테그린 알파-V (ITGaV)의 단백질 서열을 보여준다.
도 27은 항체를 생성하고 분석하기 위해 이용된 Gal3의 펩티드 서열을 보여준다.
도 28a는 본원에 개시된 항-Gal3 항체를 위한 예시적 가변 중쇄 CDR (complementarity-determining region) 1을 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 HCDR1을 포함할 수 있다.
도 28b는 본원에 개시된 항-Gal3 항체를 위한 예시적 가변 중쇄 CDR2를 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 HCDR2를 포함할 수 있다.
도 28c는 본원에 개시된 항-Gal3 항체를 위한 예시적 가변 중쇄 CDR3을 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 HCDR3을 포함할 수 있다.
도 29a는 본원에 개시된 항-Gal3 항체를 위한 예시적 가변 경쇄 CDR1을 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 LCDR1을 포함할 수 있다.
도 29b는 본원에 개시된 항-Gal3 항체를 위한 예시적 가변 경쇄 CDR2를 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 LCDR2를 포함할 수 있다.
도 29c는 본원에 개시된 항-Gal3 항체를 위한 예시적 가변 경쇄 CDR3을 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 LCDR3을 포함할 수 있다.
도 30(30a 내지 30c)는 본원에 개시된 항-Gal3 항체를 위한 예시적 중쇄 가변 영역 (VH) 서열을 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 VH 서열을 포함할 수 있다.
도 31(31a 내지 31c)는 본원에 개시된 항-Gal3 항체를 위한 예시적 경쇄 가변 영역 (VL) 서열을 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 VL 서열을 포함할 수 있다.
도 32(32a 내지 32g)는 본원에 개시된 항-Gal3 항체를 위한 예시적 중쇄 (HC) 서열을 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 HC 서열을 포함할 수 있다.
도 33(33a 내지 33d)는 본원에 개시된 항-Gal3 항체를 위한 예시적 경쇄 (LC) 서열을 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 LC 서열을 포함할 수 있다.
도 34는 본원에 개시된 항-Gal3 항체의 가변 중쇄 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 예시적 조합을 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 중쇄 CDR 조합을 포함할 수 있다.
도 35는 본원에 개시된 항-Gal3 항체의 가변 경쇄 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 예시적 조합을 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 경쇄 CDR 조합을 포함할 수 있다.
도 36은 본원에 개시된 항-Gal3 항체의 중쇄 및 경쇄 CDR의 예시적 조합을 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 중쇄 및 경쇄 CDR 조합을 포함할 수 있다.
도 37은 본원에 개시된 항-Gal3 항체의 중쇄 및 경쇄 가변 영역의 예시적 조합을 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 중쇄 및 경쇄 가변 영역 조합을 포함할 수 있다.
도 38은 본원에 개시된 항-Gal3 항체의 중쇄 및 경쇄의 예시적 조합을 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 중쇄 및 경쇄 조합을 포함할 수 있다.
도 39(39a 내지 39d)는 항-Gal3 항체의 다양한 구체예의 VH CDR 또는 VL CDR 영역의 일부 구체예의 정렬을 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 본원에서 제공되는 컨센서스 CDR 중 1, 2, 3, 4, 5, 6, 또는 7개를 이용할 수 있다.
도 40은 본원에서 개시되는 예시적 항-Gal3 항체에 결합하는 것으로 확인된 펩티드 (본원에서 논의된, 도 27에 도시된 펩티드 명명법에 따름)와 이러한 예시적 항체의 비닝(binning)을 보여준다.
도 41은 본원에서 개시된 예시적 항-Gal3 항체에 대한 Gal3 결합의 KD (M) 값을 보여준다.
도 1은 10, 3, 및 1 ㎍/mL에서 ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay)에 의해 측정된, 갈렉틴-3 표적화 항체가 Gal3와 인슐린 수용체 (INSR)의 결합을 차단하는 능력을 보여준다. 막대는 평균 +/- 표준 편차를 나타낸다.
도 2는 ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay)에 의해 측정된, 한정된 일련의 갈렉틴-3 표적화 항체가 Gal3와 인슐린 수용체 (INSR)의 결합을 차단하는 능력의 적정(titration)을 도시한다. 막대는 평균 +/- 표준 편차를 나타낸다.
도 3a는 예시적 항-Gal3 항체에 대한 특성의 요약을 보여준다.
도 3b는 항체 경쟁에 의한 Gal3-결합 항체 빈의 확인을 보여준다. 값은 BLI (biolayer interferometry)에 의해 평가된 억제를 나타낸다.
도 4는 8주 동안 정상 식이, 또는 60% HFD (high fat diet)로 급이되고, 동형 대조군 항체(Isotype control antibody) HuIgG4, 또는 Gal3-표적화 IMT001-4 (TB001)가 투여된 마우스에서 체중 증가의 감소를 보여준다. 좌측 패널은 평균 절대값을 보여주고, 우측 패널은 동물당 평균 퍼센트 변화 +/- 표준 오차를 보여준다.
도 5는 도 4에서와 같이 처리된 마우스에서 당 내성을 보여준다. 좌측 패널은 글루코오스 볼루스(bolus) 후 혈청 평균 글루코오스 수준을 보여주고; 우측 패널은 좌측 패널에 표시된 데이터로부터의 평균 곡선하 면적 (AUC) +/- 표준 오차를 보여준다.
도 6은 도 4에서와 같이 처리된 마우스에서 인슐린 저항성을 보여준다. 좌측 패널은 인슐린 볼루스 후 혈청 평균 글루코오스 수준을 보여주고; 우측 패널은 좌측 패널에 표시된 데이터로부터의 평균 곡선하 면적 (AUC) +/- 표준 오차를 보여준다.
도 7은 도 4에서와 같이 처리된 마우스로부터의 포르말린 고정 파라핀 포매 간 절편 (formalin fixed paraffin embedded liver section)의 헤마톡실린 & 에오신 염색을 보여준다. 대조군 IgG4로 처리된 HFD-급이 마우스 중 지방증 및 IMT001-4 (TB001)로 처리된 HFD-급이 마우스 중 지방증의 부재의 증거에 주목한다.
도 8은 도 4에서와 같이 처리된 마우스에서 혈청 간 효소 ALT 수준을 보여준다. 막대는 평균 +/- 표준 오차를 나타낸다.
도 9는 ELISA에 의해 측정된, 인테그린 베타-1 (ITGb1)의 Gal3에 대한 상대적 결합 친화도의 평가를 보여준다.
도 10은 ELISA에 의해 측정된, 항-Gal3 항체에 의한 차단 후 ITGb1과 Gal3의 상대적 결합 친화도의 평가를 보여준다.
도 11은 ELISA에 의해 측정된, 인테그린 알파-3 (ITGa3)의 Gal3에 대한 상대적 결합 친화도의 평가를 보여준다.
도 12는 ELISA에 의해 측정된, 항-Gal3 항체에 의한 차단 후 ITGa3과 Gal3의 상대적 결합 친화도의 평가를 보여준다.
도 13은 ELISA에 의해 측정된, 인테그린 베타-3 (ITGb3)의 Gal3에 대한 상대적 결합 친화도의 평가를 보여준다.
도 14는 ELISA에 의해 측정된, 항-Gal3 항체에 의한 차단 후 ITGb3과 Gal3의 상대적 결합 친화도의 평가를 보여준다.
도 15는 ELISA에 의해 측정된, 인테그린 알파-V (ITGaV)의 Gal3에 대한 상대적 결합 친화도의 평가를 보여준다.
도 16은 ELISA에 의해 측정된, 항-Gal3 항체에 의한 차단 후 ITGaV와 Gal3의 상대적 결합 친화도의 평가를 보여준다.
도 17은 항-Gal3 항체 또는 동형 대조군에 의한 처리 후 Jurkat T 세포 부착의 상대적 억제의 평가를 보여준다.
도 18은 Bks-Db 또는 C57BL6/J 대조군 마우스에서 순환 Gal3의 양을 보여준다.
도 19는 항-Gal3 항체 mTB001, PBS 음성 대조군, 또는 세마글루티드 (semaglutide) 양성 대조군으로 처리된 건강한 C57BL6/J 마우스 및 Db/Db 마우스의 Kaplan-Meier 곡선을 보여준다.
도 20은 mTB001 또는 PBS로 처리된 건강한 C57BL6/J 마우스 또는 Db/Db 마우스의 공복 혈당(fasting blood glucose) 수준의 변화를 보여준다.
도 21은 미처리 대조군 (untreated control) 대비 mTB001로 처리된 NOD/ShiLtJ 마우스의 평균 생존율을 보여준다.
도 22a는 미처리 대조군 대비 mTB001로 처리된 NOD/ShiLtJ 마우스의 공복 혈당 수준의 변화를 보여준다.
도 22b는 미처리 대조군 대비 mTB001로 처리된 NOD/ShiLtJ 마우스, 및 정상 대조군 마우스에서 C-펩티드의 순환 수준을 보여준다.
도 23은 염증성 장 질환 (IBD) 마우스 모델에서 염증성 사이토카인의 정량을 위한 RT-qPCR을 위해 이용된 프라이머를 보여준다.
도 24는 정상 마우스 대비 mTB001 또는 PBS로 처리된 DSS-유도 IBD 마우스에서 측정된 결장 길이를 보여준다.
도 25는 정상 마우스 대비 mTB001 (10mg/kg 및 1mg/kg) 또는 PBS로 처리된 DSS-유도 IBD 마우스에서 순환 IFN-γ의 정량을 보여준다.
도 26(26a 내지 26c)는 Gal3, 인슐린 수용체 (INSR), 인테그린 베타-1 (ITGb1), 인테그린 알파-3 (ITGa3), 인테그린 베타-3 (ITGb3), 및 인테그린 알파-V (ITGaV)의 단백질 서열을 보여준다.
도 27은 항체를 생성하고 분석하기 위해 이용된 Gal3의 펩티드 서열을 보여준다.
도 28a는 본원에 개시된 항-Gal3 항체를 위한 예시적 가변 중쇄 CDR (complementarity-determining region) 1을 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 HCDR1을 포함할 수 있다.
도 28b는 본원에 개시된 항-Gal3 항체를 위한 예시적 가변 중쇄 CDR2를 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 HCDR2를 포함할 수 있다.
도 28c는 본원에 개시된 항-Gal3 항체를 위한 예시적 가변 중쇄 CDR3을 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 HCDR3을 포함할 수 있다.
도 29a는 본원에 개시된 항-Gal3 항체를 위한 예시적 가변 경쇄 CDR1을 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 LCDR1을 포함할 수 있다.
도 29b는 본원에 개시된 항-Gal3 항체를 위한 예시적 가변 경쇄 CDR2를 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 LCDR2를 포함할 수 있다.
도 29c는 본원에 개시된 항-Gal3 항체를 위한 예시적 가변 경쇄 CDR3을 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 LCDR3을 포함할 수 있다.
도 30(30a 내지 30c)는 본원에 개시된 항-Gal3 항체를 위한 예시적 중쇄 가변 영역 (VH) 서열을 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 VH 서열을 포함할 수 있다.
도 31(31a 내지 31c)는 본원에 개시된 항-Gal3 항체를 위한 예시적 경쇄 가변 영역 (VL) 서열을 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 VL 서열을 포함할 수 있다.
도 32(32a 내지 32g)는 본원에 개시된 항-Gal3 항체를 위한 예시적 중쇄 (HC) 서열을 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 HC 서열을 포함할 수 있다.
도 33(33a 내지 33d)는 본원에 개시된 항-Gal3 항체를 위한 예시적 경쇄 (LC) 서열을 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 LC 서열을 포함할 수 있다.
도 34는 본원에 개시된 항-Gal3 항체의 가변 중쇄 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 예시적 조합을 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 중쇄 CDR 조합을 포함할 수 있다.
도 35는 본원에 개시된 항-Gal3 항체의 가변 경쇄 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 예시적 조합을 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 경쇄 CDR 조합을 포함할 수 있다.
도 36은 본원에 개시된 항-Gal3 항체의 중쇄 및 경쇄 CDR의 예시적 조합을 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 중쇄 및 경쇄 CDR 조합을 포함할 수 있다.
도 37은 본원에 개시된 항-Gal3 항체의 중쇄 및 경쇄 가변 영역의 예시적 조합을 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 중쇄 및 경쇄 가변 영역 조합을 포함할 수 있다.
도 38은 본원에 개시된 항-Gal3 항체의 중쇄 및 경쇄의 예시적 조합을 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 1개 이상의 본원에서 제공되는 중쇄 및 경쇄 조합을 포함할 수 있다.
도 39(39a 내지 39d)는 항-Gal3 항체의 다양한 구체예의 VH CDR 또는 VL CDR 영역의 일부 구체예의 정렬을 보여준다. 일부 구체예에서, 본원에서 제공되는 조성물 또는 방법은 본원에서 제공되는 컨센서스 CDR 중 1, 2, 3, 4, 5, 6, 또는 7개를 이용할 수 있다.
도 40은 본원에서 개시되는 예시적 항-Gal3 항체에 결합하는 것으로 확인된 펩티드 (본원에서 논의된, 도 27에 도시된 펩티드 명명법에 따름)와 이러한 예시적 항체의 비닝(binning)을 보여준다.
도 41은 본원에서 개시된 예시적 항-Gal3 항체에 대한 Gal3 결합의 KD (M) 값을 보여준다.
실시예
전술된 구체예들의 일부 양태가 하기 실시예에서 더 상세히 개시되며, 이는 어떤 방식으로도 본 개시의 범위를 한정하는 것으로 의도되지 않는다. 당업자는 본원에서 전술되고 청구항에 기재된 바와 같이, 다수의 다른 구체예가 또한 본 발명의 범위 내에 속한다는 것을 이해할 것이다.
실시예 1. Gal3-INSR 차단 활성을 갖는 및 갖지 않는 Gal3-결합 항체의 확인
Gal3 및 INSR의 회합을 차단하는 능력을 가진 GAL3-결합 항체를 확인하기 위해, 마우스에서 면역화 캠페인 (immunization campaign)을 수행했다. Balb/C, FVB 및 CD-1F 마우스에게 TLR 효능제 아쥬반트 믹스 (50 ㎍ MPL, 20 ㎍ CpG, 10㎍ Poly(I:C) 및 10 ㎍ R848)와 조합된 링커-이격 6-히스티딘 태그, Gal3-ECD-His (Acro GA3-H5129; Lot# 819-43PS1-5E.)에 융합된 Gal3 단백질 50 ㎍을 7일 간격으로 3회 반복으로 접종한 후에, 50 ㎍의 GAL3-His 단독 접종을 서혜부, 목의 뒤쪽 및 꼬리 부위의 기저, 및 비절 및 복막내 부위에 피하로 투여했다. 동물들을 IACUC 프로토콜에 따라 희생시키고, 비장, 대퇴골 및 림프절 (액와 (axillary), 액와부 (accessory axillary), 종격동 (mediastinal), 표재 서혜공 (superficial inguinal), 장골 (iliac), 천골 (sacral) 및 슬와 (popliteal))을 채취했다. 면역화된 림프절 (LN), 비장 및 골수 세포의 단일 세포 현탁액을 15 mL의 DMEM을 담은 조직 배양 페트리 디쉬에서 2개의 멸균 냉동 유리 슬라이드 (sterile frosted glass slides)를 이용하여 수득했다. 골수는 18-게이지 바늘이 장착된 5 mL의 주사기로 말단 캡 플러싱 (end-cap flushing)을 통해 대퇴골로부터 추출했다. 3마리 동물들로부터의 세포를 1200 RPM으로 5분간 원심분리하여 펠릿화하고, 10 mL의 DMEM (GIBCO 10564-011) 중에 재현탁하고, 유핵 세포 (nucleated cells)를 혈구계 카운트 (hemocytometer count)로 계수했다. 세포를 1200 RPM으로 펠릿화하고, SC-버퍼 (PBS, 2% FBS 및 1mM EDTA) 중에 재현탁하고, 혈장 세포를 제조사 권장 프로토콜에 따라 EasySep™ 마우스 CD138 양성 선택 키트 (StemCell Technologies)를 이용하여 단리했다. 농축된 CD138-양성 세포를 1200 RPM으로 5분간 원심분리하여 펠렛화하고, 50 mL의 전기융합 버퍼 (Eppendorf 940-00-220-6) 중에 재현탁하고, 계수했다. 별도로, SP2/0-mIL6 골수종 세포 (ATCC CRL2016)를 1200 RPM으로 5분간 원심분리하여 펠렛화하고, 50 mL의 전기융합 버퍼 중에 재현탁하고, 계수했다. 골수종 세포 및 CD138-양성 혈장 세포를 1:1 비율로 합치고, 부피를 전기융합 버퍼를 사용하여 50 mL로 증량시키고, 세포를 1200 RPM으로 5분간 원심분리하여 펠렛화하고, 상층액을 버렸다. 전기융합 버퍼에서 세척 및 펠렛화 단계를 반복한 후에, 세포를 10x10^6개 세포/ml의 농도로 전기융합 버퍼 중에 재현탁하고, 최대 9 mL의 세포 현탁액을 BTX 전기융합 챔버에 첨가하고, 세포를 800V 전기융합 프로토콜을 사용하여 융합시켰다. 융합된 세포를 5분 동안 휴지시키고, 40 mL의 배지 MM (DMEM, 15% FBS, 1% 글루타맥스 및 1% Pen/Strep)을 포함하는 조직 배양 디쉬로 옮기고, 37℃, 8% CO2에서 1시간 동안 인큐베이션시키고, 피펫을 사용하여 재현탁시키고, 1200 RPM으로 5분간 원심분리하여 펠릿화하고, ClonaCell HY Liquid HAT 선택 배지 (StemCell Technologies) 중에 재현탁시키고, 96-웰 조직 배양 평판 바닥 플레이트에 플레이팅했다. 10일 후에, 상층액을 샘플링하고, 단리된 Gal3에의 결합에 대해 ELISA로 평가했다. 희석제 (0.5% BSA를 포함하는 PBS) 중에 재현탁된 0.1 ㎍/mL Gal3-ECD-His (Acro GA3-H5129; Lot# 819-43PS1-5E) 50 ㎕를 각 웰에 45분 동안 첨가하고, 상층액을 버리고, 플레이트를 0.05% Tween20이 포함된 포스페이트 완충된 식염수 (PBS)로 세척했다. 희석제 중 하이브리도마 상층액의 1:5 희석물 50㎕를 각 웰에 1시간 동안 첨가하고, 이어서 PBS/0.05% Tween20으로 5회 연속 300㎕ 세척을 수행하고, 50 ㎕의 희석제 중에 호스래디쉬 퍼옥시다제 (Novex A16090)에 접합된 염소 항-마우스 Fc-특이적 항체의 1:3000 희석물을 각 웰에 1시간 동안 첨가하고, 이어서 PBS/0.05% Tween20으로 5회 연속 300 ㎕ 세척을 수행했다. 세척 후에, 50 ㎕의 ABTS (Novex #00-202-4)를 20-30분 동안 각 웰에 첨가하고, 405 nm의 흡광도에서 분광 광도계 (Molecular Devices)에서 판독했다.
양성으로 평가된 웰(positively scoring well)을 Gal3와 INSR의 회합(association)을 차단하는 능력에 대해 평가했다. Gal3와 INSR의 회합을 차단하는 능력을 갖는 Gal3-표적화 항체를 확인하기 위해, 정제된 Gal3 및 INSR 단백질을 전술된 Gal3-면역화 하이브리도마 상층액의 존재 하에, 또는 항체의 부재 하에 인큐베이션시키고, 단백질 상호작용을 ELISA에 의해 평가했다. 인간 갈렉틴-3 단백질 (Acro Biosystems, GA3-H5129)을 PBS (Corning, 21-030-CM)로 3 ㎍/ml의 농도까지 희석시키고, 96-웰 ELISA 플레이트 (Thermo Fisher, 44-2404-21)의 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 4℃에서 밤새 인큐베이션시킨 후에, 상기 플레이트를 PBST (0.05% Tween 20 [VWR, 0777]을 포함하는 PBS)로 3회 세척했다. 그 후, 상기 플레이트를 실온에서 부드럽게 흔들면서, PBST 중 2% BSA (EMD Millipore, 126609)로 1시간 동안 블록킹시켰다. 그 후, PBST 중 2% BSA를 제거하고, PBST 중 2% BSA 중 항체 또는 억제제 (20 ㎍/ml, 60 ㎍/ml, 또는 180 μM에서 출발하여 3-배 희석물)를 웰에 첨가했다. 그 후, PBST 중 2% BSA 중 인간 인슐린 수용체 (Sino Biological, 11086-H08H) 6 ㎍/ml를 상기 웰 중 항체 또는 억제제에 1:1의 비로 첨가했다. 상기 플레이트를 부드럽게 흔들면서 실온에서 1시간 동안 인큐베이션시켰다. 그 후, 상기 플레이트를 PBST로 3회 세척하고, 2% BSA를 포함하는 PBST 중 인간 INSR Biotinylated Antibody (R&D Systems, BAF1544) 0.3 ㎍/ml를 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 부드럽게 흔들면서 1시간 동안 인큐베이션시키고, PBST로 3회 세척했다. 그 후, Avidin-HRP (1:2000)를 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 부드럽게 흔들면서 실온에서 1시간 동안 인큐베이션시키고, PBST로 3회 세척했다. 그 후, TMB 기질 (Thermo Scientific, 34029)을 각 웰에 첨가했다. 반응을 1M HCl (JT Baker, 5620-02)로 정지시키고, 450 nm의 흡광도에서 플레이트 판독기 (Molecular Devices)를 이용하여 판독했다.
6H6.2D6, 20H5.A3, 20D11.2C6, 4G2.2G6, 13H12.2F8, 19B5.2E6, 15G7.2A7, 23H9.2E4, 19D9.2E5, 2D10.2B2, 4A11.2B5, 14H10.2C9, 3B11.2G2, 13A12.2E5를 포함한, Gal3의 INSR로의 결합을 강하게 차단하는 능력을 갖는 여러 hGal3-결합 항체가 확인되었고, 도 1 및 도 2에 도시되며, 이들은 3 ㎍/mL의 농도에서 Gal3과 INSR의 결합을 비차단(unblocked) 시료의 5% 미만까지 감소시켰다. 추가적으로, 7D8.2D8 및 15F10.2D6을 포함한, 3 ㎍/mL에서 Gal3-INSR 결합을 억제하는 능력이 비차단 시료의 수준의 15-25%까지 감소된 단일클론 항체가 확인되었다. 마지막으로, 9H2.2H1, 12G5.D7, 13G4.2F8, 및 24D12.2H9를 포함한, 3 ㎍/ml에서 Gal3-INSR 결합에 최소한으로 영향을 미치는 능력을 가진 단일클론 항체가 확인되었다.
Gal3와 INSR의 회합(assembly)을 차단하는 능력이 항체의 Gal3에 대한 친화도의 함수인지 여부를 평가하기 위해, 단일클론 Gal3 항체의 Gal3에 대한 친화도를 SPR에 의해 평가했다. 동역학 실험 (Kinetics experiments)은 25℃에서 고성능 모드로 BiacoreT200에서 수행했다. 항-인간 Fc 또는 항-마우스 Fc 항체가 커플링된 CM5 칩에 리간드 단백질인, 정제된 항체를 포획하고, 3개의 항체를 플루우 셀(flow cell) #2, 3 및 4 각각에 한 번에 로딩하고, 여기서 플로우 셀 #1을 기준으로 사용했다. HBS-EP 버퍼 중 분석물, 갈렉틴-3을 모든 4개의 플로우 셀에 100, 50, 25, 12.5, 6.25, 3.125 및 0 nM의 농도로 30 ㎕/분의 유속으로 주입했다. 각각 240초 및 300초 동안 복합체가 결합 및 해리될 수 있게 했다. 10 mM 글리신 pH 1.7 (유속 30 ㎕/분)을 30초간 주입하여 표면을 재생시켰다. BiacoreT200 평가 소프트웨어 V2.0 내 이용 가능한 글로벌 데이터 분석 옵션 (global data analysis option)을 사용하여 단순 1:1 상호작용 모델에 데이터를 핏팅시켰다.
Gal3 단일클론 항체의 친화도는 연구된 모든 항체에 대해 30nM보다 더 큰 것으로 확인되었다 (도 3a). 중요하게, 3 ㎍/mL에서 Gal3과 INSR의 회합을 99% 이상 감소시킨 항체, 15G7은 Gal3에 대해 27.8 nM의 친화도를 보여서, 이 수준 이하의 친화도를 갖는 항체에 의해 Gal3과 INSR의 회합을 차단하는 능력이 가능하다는 것을 나타냈다. 대조적으로, Gal3-INSR 회합을 열등하게 차단하는 Gal3-표적화 항체, 13G4.2F8, 9H2.2H1, 24D12.2H9, 및 12G5.D7은 각각 18.4, 2.53, 4.13, 및 1.9 nM의 친화도를 보였다. 따라서, 10 nM 미만의 Gal에 대한 항체 친화도는 Gal3와 INSR의 회합을 차단하는 능력을 예측하기에 충분하지 않다.
실시예 2. Gal3-INSR 차단 활성을 갖는 및 갖지 않는 Gal3-표적화 항체는 Gal3의 별개의 에피토프에 결합한다.
Gal3-INSR 차단 활성을 갖는 Gal3 항체 및 Gal3-INSR 차단 활성을 갖지 않는 Gal3 항체가 결합하는 에피토프를 확인하기 위해, 도 27에 도시된 Gal3의 일부를 나타내는 24개의 아미노산 펩티드의 라이브러리를 생성하고, 각 펩티드가 Gal3 항체에 결합하는 능력을 ELISA로 평가했다. 50㎕의 PBS 중 적어도 2㎍/ml의 hGal3 펩티드 또는 0.1㎍/ml의 전장 인간 Gal3 단백질 (GenScript) 및 인간 갈렉틴-3 단백질 (Acro Biosystems, GA3-H5129)을 PBS (Corning, 21-030-CM) 중에 각각 적어도 2 ㎍/ml 또는 0.1 ㎍/ml의 농도로 희석하고, 96-웰 ELISA 플레이트 (Thermo Fisher, 44-2404-21)의 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 4℃에서 밤새 인큐베이션시키고, 상기 플레이트를 PBST (0.05% Tween 20이 포함된 PBS [VWR, 0777])로 3회 세척했다. 그 후, 상기 플레이트를 실온에서 부드럽게 흔들면서 PBST 중 2% BSA (EMD Millipore, 126609)로 1시간 동안 블록킹시켰다. 그 후에, PBST 중 2% BSA를 버리고, 인간 갈렉틴-3 하이브리도마 상층액 또는 항체를 PBST 중 2% BSA에서 적어도 0.1㎍/ml의 농도로 희석하고, 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 실온에서 부드럽게 흔들면서 1시간 동안 인큐베이션한 다음에, PBST로 3회 세척했다. 그 후에, PBST 중 2% BSA에 희석된 (1:4000) 염소 항-마우스 IgG-HRP (Jackson ImmunoResearch,115-036-1461) 또는 염소 항-랫트 IgG HRP (Abcam, ab205720)를 상기 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 실온에서 부드럽게 흔들면서 30분 내지 1시간 동안 인큐베이션시키고, PBST로 3회 세척했다. 그 다음에 TMB 기질 (Thermo Scientific, 34029)을 각 웰에 첨가했다. 반응을 1M HCl (JT Baker, 5620-02)로 정지시키고, 450 nm의 흡광도에서 플레이트 판독기 (Molecular Devices)를 사용하여 판독했다.
Gal3-결합 항체의 펩티드 어레이로의 결합은 다수의 위치에서 관찰되었고, 대부분의 결합은 펩티드 1-8 (서열번호 3-10)에서 관찰되었으며, 이는 도 3a에 요약되어 있다. 현저하게, 강한 INSR-Gal3 차단 활성을 가진 모든 Gal3-결합 항체는 Gal3의 N-말단 도메인의 펩티드 서열에 상응하는, 펩티드 4, 6 또는 7에 결합하는 능력을 보였다. 구체적으로, 강한 Gal3-INSR 차단 활성을 가진 6개의 개별의 Gal3-결합 항체 (6H6.2D6, 20H5.A3, 20D11.2C6, 19B5.2E6, 15G7.2A7, 및 23H9.2E4) 모두는 Gal3의 아미노산 1-20, ADNFSLHDALSGSGNPNPQG (서열번호: 3)에 해당하는, Gal3의 펩티드 1에 결합했다. 반대로, Gal3-INSR 차단 활성이 떨어지는 Gal3-표적화 항체는 펩티드 1에 결합하는 것으로 관찰되지 않았다. 종합하면, 이들 데이터는 Gal3 펩티드 1로의 결합이 Gal3과 INSR의 상호작용을 차단하는 능력을 예측한다는 것을 나타낸다. 유사하게, 강한 Gal3-INSR 차단 활성을 갖는 2개의 별개의 Gal3-결합 항체 (4G2.2G6 및 3B11.2G2)는 Gal3의 아미노산 31-50, GAGGYPGASYPGAYPGQAPP (서열번호: 6)에 해당하는, Gal3의 펩티드 4에 결합했다. 반대로, Gal3-INSR 차단 활성이 떨어지는 Gal3-표적화 항체는 펩티드 4에 결합하는 것으로 관찰되지 않았다. 종합하면, 이들 데이터는 Gal3 펩티드 4로의 결합이 Gal3와 INSR의 상호작용을 차단하는 능력을 예측한다는 것을 나타낸다. 또한, 강한 Gal3-INSR 차단 활성을 가진 7개의 Gal3-결합 항체 (13H12.2F8, 19D9.2E5, 14H10.2C9, 2D10.2B2, 4A11.2B5, 3B11.2D2, 및 13A12.2E5) 모두는 Gal3의 아미노산 51-70, GAYPGQAPPGAYPGAPGAYP (서열번호: 8)에 해당하는, Gal3의 펩티드 6에 결합했다. 반대로, Gal3-INSR 차단 활성이 떨어지는 Gal3-표적화 항체는 펩티드 6에 결합하는 것으로 관찰되지 않았다. 종합하면, 이들 데이터는 Gal3 펩티드 6으로의 결합이 Gal3와 INSR의 상호작용을 차단하는 능력을 예측한다는 것을 나타낸다. 또한, Gal3-INSR 차단 활성을 가진 11개의 Gal3-결합 항체 (6H6.2D6, 20H5.A3, 20D11.2C6, 13H12.2F8, 19B5.2E6, 23H9.2E4, 15G7.2A7, 19D9.2E5, 14H10.2C9, 7D8.2D8, 및 15F10.2D6) 모두는 Gal3의 아미노산 61-80, AYPGAPGAYPGAPAPGVYPG (서열번호: 9)에 해당하는, Gal3의 펩티드 7에 결합했다. 반대로, Gal3-INSR 차단 활성이 떨어지는 Gal3-표적화 항체는 펩티드 7에 결합하는 것으로 관찰되지 않았다. 종합하면, 이들 데이터는 Gal3 펩티드 7로의 결합이 Gal3와 INSR의 상호작용을 차단하는 능력을 예측한다는 것을 나타낸다. 전체적으로, 이들 데이터는 Gal3과 INSR의 상호작용을 차단하는 능력의 예측으로서 Gal3 펩티드 1, 4, 6 및 7에 대한 항-Gal3 항체의 유용성을 나타낸다.
도 27에 예시된 바와 같이, 펩티드 4, 6 및 7은 프롤린-글리신 (PG) 및 티로신-프롤린-글리신 (YPG)으로 이루어진 반복되는 아미노산 서열을 공유하며, 이는 Gal3-표적화 항체가 다수의 Gal3 펩티드에 결합하는 능력을 설명할 수 있는 공통 특징을 시사한다. 또한, x는 아미노산 알라닌 (A), 글리신 (G) 또는 발린 (V)일 수 있는 것인 아미노산 서열 글리신-x-티로신-프롤린-글리신 (GxYPG)은 펩티드 4, 6, 및 7에서 공유되며, 각각은 3개의 아미노산에 의해 분리된 2개의 이러한 서열을 갖는다. 따라서, 근접하게 병치된 2개의 GxYPG 서열의 존재는 Gal3 및 INSR을 차단하는 능력으로 Gal3-표적화 항체에 결합하는 능력을 예측할 가능성이 있다. 또한, 알라닌, 글리신 및 발린의 Grantham 거리는 Ala-Val: 64, Ala-Gly: 60, Val-Gly: 109이므로, 프롤린 및 트레오닌을 포함하는, 유사하게 낮은 Grantham 거리를 가진 아미노산이 가변 영역에서 유사하게 치환될 수 있음을 예측한다.
실시예 3. 차단 활성을 갖는 Gal3-INSR 항체는 Gal3로의 결합에 대해 경쟁한다.
Gal3-INSR 차단 활성을 갖는 Gal3-결합 항체가 Gal3 분자의 동일 또는 중첩 영역에 결합하는지 여부를 결정하기 위해, 항체 비닝 분석법 (antibody binning assays)을 수행하여 항체가 Gal3에 동시에 결합하는 능력을 평가했다. 아민-반응성 프로브를 Gator 바이오센서 (Probe Life, Palo Alto, CA)에 로딩하고, dH20에서 60초 동안 평형화하고, 100 ㎕의 EDC 0.2M/NHS 0.05M 활성화 버퍼에 30초 동안 침지시킨 후에, 10 mM NaOAc 버퍼, pH 5에서 20㎍/㎕의 인간 Gal3-His의 용액에 결합이 포화될 때까지 침지시키고(dip), 1M 에탄올아민 pH 8.5로 300초 동안 퀀칭시켰다. Gal3-His 로딩 후에, 팁을 20 ㎍/mL의 포화 항체 (saturating antibody)에 침지시킨 다음에, 연속하여 5 ㎍/mL의 경쟁 항체 (competing antibody)에 침지시켰다. 도 3a-3b에 도시된 바와 같이, 경쟁적 결합 프로파일을 갖는 항체를 빈(bin)에 배정하고, 차단 활성에 대한 연관성을 파악했다.
Gal3에 대한 경쟁적 항체 결합 패턴의 개별 빈을 확립했다. 현저하게, 빈과 차단 Gal3-INSR 차단 활성 간의 강한 연관성이 관찰되었다. 빈 1, 2, 3, 4, 5, 6, 및 7로부터의 모든 항체는 도 3a에 요약된 바와 같이 Gal3의 INSR로의 결합을 강하게 억제했다. 대조적으로, 빈 8의 항체는 Gal3에 대한 강한 친화도에도 불구하고, Gal3의 INSR로의 차단의 다소 더 약한 차단제였다. 빈 10, 11 및 12의 항체는 Gal3와 INSR의 결합을 유의미하게 억제하는 능력을 균일하게 갖지 않았다. 따라서, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 및 7의 경쟁적 결합 빈은 Gal3-결합 항체가 Gal3과 INSR의 회합을 차단하는 능력을 예측하는데 유용하다.
실시예 4. Gal3-INSR 차단 항체 IMT001-4 (TB001)는 고-지방 식이가 급여된 당뇨병 마우스에서 체중 증가, 인슐린 저항성, 당 불감성(glucose insensitivity), 간 지방증, 및 간 기능장애를 감소시킨다.
Gal3-표적화 항체에 의한 Gal3-INSR 차단이 당뇨병 생리(biology)에 기능적으로 영향을 미쳤는지 여부를 평가하기 위해, 타입 II 당뇨병의 마우스 모델을 이용했다. 수컷 C57BL6J 마우스를 Jackson Lab으로부터 구입하고 7주령부터 시작하여 8주, 10주, 또는 16주 동안 HFD(high fat diet, 60% kcal from fat, Research Diet, Catalog #12492i)를 급이했다. SCD(standard chow diet)를 급이한 연령-일치 (age-matched) 수컷 C57BL6J 마우스를 대조군 마우스로 이용했다. 마우스를 실온에서 06:00-18:00 주-야 주기(day-night cycle)로 표준 시설 및 필터 상부를 갖는 일회용(disposable) 표준 케이지에 수용했다. 실험에서 표시된 바와 같이 단식시키는 때를 제외하고는, 마우스에 SCD 또는 HFD를 (ad libitum)자유 급이했다. 인슐린 저항성 및 당 불내성 표현형을 확인하기 위해, 각각 15주령 및 16주령 (HFD 후 8주 및 9주)에 GTT (glucose tolerance test) 및 ITT (insulin tolerance test)를 수행했다. GTT를 위해, 마우스를 사료 또는 분변물은 없으나, 음용수는 있는 클린 케이지로 옮겨서 6시간 동안 단식시킨 후에 2 g/kg 글루코오스 (Sigma)를 주사하고, 글루코오스 주사 후 0분, 15분, 30분, 60분, 90분, 및 120분에 혈당 수준(glucose level)을 측정하기 위해 혈액을 채취했다. ITT를 위해, 마우스를 6시간 동안 단식시키고, 그 후, 복막내로 Humalin-R (Eli Lilly)을 0.75 U/kg 체중으로 주사했다. HemoCue Glucose 201 Analyzer를 이용하여, 0분, 15분, 30분, 45분, 60분에 꼬리로부터의 혈액을 글루코오스 함량에 대해 측정했다. ITT로부터의 곡선하 면적 (AUC)에 근거하여, HFD 급이 마우스를 2개의 그룹으로 랜덤화했다: 인간 IgG4 동형(isotype) 그룹 및 IMT001-4 처리군. 17주령에, 마우스에 주당 2회 복막내 주사에 의해 항체 처리를 총 5회 용량으로 수행하고, ITT 및 GTT를 19주령 및 20주령에 수행했다. 인간 IgG4 동형 및 IMT001-4를 10 mg/kg으로 100 ㎕/마우스로 투여하고, BM을 10 mg/ml로 100 ㎕/마우스로 투여했다. 마우스가 21주령에 희생될 때까지, 처리를 지속했다. 마우스가 시설에 도착한 후 1주차에 마우스 체중을 모니터링했다. 저울을 이용하여 체중을 주당 1회 측정했다. 심장 천자를 이용하여 마우스 혈액을 수집했다. 간, 비복근(gastrocnemius muscle), 및 후 피하 백색 지방(posterior subcutaneous white adipose)을 수집하고 칭량했다.
HFD (High-fat diet) 급이 마우스는 상승된 기저 혈당 수준(basal glucose level)을 갖고, 대조군-식이 급여 동물에 비해 더 빠르게 체중이 증가했다. 중요한 것은, 동형 대조군으로 처리된 HFD-급이 마우스는 19일 연구에서 7% 이상 체질량(body mass)의 상당한 체중 증가를 보였으나, IMT001-4로 처리된 HFD-급이 동물은 알아볼 수 있을 정도의 체중 증가가 없었다 (도 4). 또한, 동형-대조군 처리 HFD-급이 마우스는 글루코오스 부하(glucose challenge)에 대해 지연된 반응을 보였으나, IMT001-4로 처리된 HFD-급이 마우스는 정상 식이가 급여된 마우스와 더 유사한 방식으로, 보다 빠르게 유의성있게 글루코오스를 제거했다 (도 5). 또한, 동형-대조군 처리 HFD-급이 동물은 인슐린 부하에 대해 지연된 혈당 감소를 보였으나, IMT001-4 처리 HFD-급이 마우스는 정상 식이가 급이된 비-당뇨병 마우스로부터 구별되지 않는 혈당 제거 (glucose clearance)를 보였다 (도 6). 종합하면, 이러한 데이터는 Gal3-INSR 차단 항체 IMT001-4가 인슐린 저항성, 당 불감성, 및 체중 증가를 포함한, 당뇨병의 다양한 양태를 해소시킨다는 결과를 뒷받침한다.
IMT001-4가 당뇨병의 병리적 후유증에 영향을 미치는 능력을 더 평가하기 위해, 도 3-5에서와 같이 처리된 동물로부터의 간 절편을 지방 축적, 예를 들면, 지방증의 징후에 대해 조사했다. 요약하면, 간 표본을 4% 파라포름알데히드에서 24시간 동안 고정시키고, 70% EtOH에 3일 동안 두고, 파라핀에 포매시키고, 10 ㎛ 절편으로 절단하고 유리 슬라이드 위에 배치하고, 헤마톡실린 및 에오신으로 염색하고 40X 배율로 Revolve 현미경에서 시각화시켰다. 지방증의 정도를 정량하기 위해 ImageJ에 의해 이미지를 평가했다.
H&E 염색된 절편에서 원형의 비-염색 영역에 의해 표시된, 지방증의 중등도(moderate) 수준이 대조군 항체로 처리된 HFD-급이 동물에서 관찰되었다 (도 7). 대조적으로, IMT001-4로 처리된 HFD-급이 동물은 무시할 만한 수준의 지방증을 보였고 정상 식이가 급이된 비-당뇨병 동물의 간과 구별하기 어려웠다. 육안 관찰은 이미지 정량화에 의해 확인되었고, 이미지 정량화는 동형-대조군 처리 동물 대비 IMT001-4 처리 동물에서 질병 상태의 완전한 역전(reversion)을 입증했다. 따라서, Gal3-표적화 Gal3-INSR 차단 항체, IMT001-4는 간 지방증의 경감에서 유용성을 갖는다.
조직학적 시료에서 관찰되는 간 질환을 더 규명하기 위해, 간 기능장애의 혈청 마커를 전술된 바와 같이 처리된 동물에서 ELISA에 의해 평가했다. 요약하면, 리튬 헤파린 채혈 튜브 중 전혈 시료로부터 마우스 혈장 시료를 수득했다. 100 ㎕의 혈청을 시료 포트를 통해 VetScan VS2 Blood Chemistry Analyzer (Abaxis)의 로터로 분주했다. 제조사의 설명서에 따라 ALT 수준을 측정했다. 정상-식이 급이 비-당뇨병 마우스 대비 동형-대조군 처리 HFD-급이 당뇨병 마우스에서 관찰된 증가된 수준의 지방증과 일치하게, 동형-대조군 HFD-급이 당뇨병 마우스는 정상-식이 급이 비-당뇨병 마우스 대비 ALT에서 거의 3배 증가를 보였다 (도 8). 현저하게, ALT 수준은 HFD-급이 동형-대조군 처리 마우스 대비 IMT001-4 처리 HFD-급이 마우스에서 정상-식이 급이 비-당뇨병 마우스와 동등한 수준까지 유의성있게 저하되었다. 따라서, Gal3-표적화 Gal3-INSR 차단 항체, IMT001-4는 혈청 간 효소의 저하에서 유용성을 갖는다.
실시예 5. Gal3는 ITGb1에 특이적으로 결합한다.
인간 갈렉틴-3 (GAL3)이 인간 인테그린 베타-1 (ITGb1)과 물리적으로 상호작용할 수 있다는 가능성을 평가하기 위해, 정제된 GAL3 및 ITGb1에 의한 ELISA 평가를 수행했다. 인간 GAL3 단백질 (TrueBinding, QCB200349; R&D Systems, 8259-GA)을 PBS (Corning, 21-030-CM)에 10, 5, 및 2.5 ㎍/ml의 농도까지 희석시키고, 96-웰 ELISA 플레이트 (Thermo Fisher, 44-2404-21)의 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 4℃에서 밤새 인큐베이션시킨 후에, 상기 플레이트를 PBST (0.05% Tween 20 [VWR, 0777]을 포함하는 PBS)로 3회 세척하고, 실온에서 부드럽게 흔들면서, PBST 중 2% BSA (EMD Millipore, 126609)로 1시간 동안 블록킹시켰다. 제조사의 설명서에 따라, 재조합 인간 ITGb1 (Sino Biological, 10587-H08H1)을 EZ Link Sulfo-NHS-LC-Biotin (ThermoFisher Scientific, A39257)으로 비오티닐화하고, Zeba Spin Desalting Column (ThermoFisher Scientific, 89882)을 이용하여 탈염시켰다. 상기 플레이트를 블록킹시킨 후에, PBST 중 2% BSA를 제거하고, 10, 5, 및 2.5 ㎍/ml의 2% BSA를 포함하는 PBST 중 비오티닐화된 재조합 ITGb1을 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 부드럽게 흔들면서 실온에서 1시간 동안 인큐베이션시켰다. 그 후, 상기 플레이트를 PBST로 3회 세척했다. 2% BSA를 포함하는 PBST에 Avidin HRP (Biolegend, 405103; 1:2000 희석)를 희석시키고, 상기 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 부드럽게 흔들면서 실온에서 1시간 동안 인큐베이션시키고, PBST로 3회 세척했다. 그 후, 각 웰에 TMB 기질 (Thermo Scientific, 34029)을 첨가했다. 반응을 1M HCl (JT Baker, 5620-02)로 정지시키고, 450 nm의 흡광도에서 플레이트 판독기 (Molecular Devices)를 이용하여 판독했다.
도 9에 도시된 바와 같이, ITGb1은 GAL3-코팅 웰에 강하게 결합한다. ITGb1은 비코팅(uncoated) ELISA 웰에 유의성있게 결합하지 않는다. 마찬가지로, GAL3 코팅만을 갖는 웰에서 유의한 결합 신호가 관찰되지 않는다.
실시예 6: GAL3-ITGb1 차단 활성을 갖는 GAL3-결합 항체의 확인
GAL3와 ITGb1의 상호작용을 차단하는 능력을 갖는 GAL3-표적화 항체를 확인하기 위해, 정제된 Gal3 및 ITGb1을 다양한 GAL3-표적화 또는 대조군 항체의 존재 (또는 부재), 또는 항체의 부재 하에 인큐베이션시키고, 단백질 상호작용을 ELISA에 의해 평가했다.
인간 GAL3 (TrueBinding, QCB200352)을 PBS (Corning, 21-030-CM)로 4 ㎍/ml의 농도까지 희석시키고, 96-웰 ELISA 플레이트 (Thermo Fisher, 44-2404-21)의 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 4℃에서 밤새 인큐베이션시킨 후에, 상기 플레이트를 PBST (0.05% Tween 20 [VWR, 0777]을 포함하는 PBS)로 3회 세척하고, 그 후, 실온에서 부드럽게 흔들면서, PBST 중 2% BSA (EMD Millipore, 126609)로 1시간 동안 블록킹시켰다. 제조사의 설명서에 따라, 재조합 인간 ITGb1 (Sino Biological, 10587-H08H1)을 EZ Link Sulfo-NHS-LC-Biotin (ThermoFisher Scientific, A39257)으로 비오티닐화하고, Zeba Spin Desalting Column (ThermoFisher Scientific, 89882)을 이용하여 탈염시켰다. 그 후, PBST 중 2% BSA를 제거하고 20, 6.6, 또는 2.2 ㎍/ml의 대조군 또는 항-GAL3 항체 30 ㎕를 각 웰에 첨가하고, 뒤이어, 2 ㎍/ml의 2% BSA를 포함하는 PBST 중 비오티닐화된 ITGb1 30 ㎕를 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 부드럽게 흔들면서 실온에서 1시간 동안 인큐베이션시켰다. 그 후, 상기 플레이트를 PBST로 3회 세척했다. 2% BSA를 포함하는 PBST에 Avidin HRP (Biolegend, 405103)를 1:2000 희석율로 희석하여 상기 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 부드럽게 흔들면서 실온에서 1시간 동안 인큐베이션시키고, PBST로 3회 세척했다. 그 후, 각 웰에 TMB 기질 (Thermo Scientific, 34029)을 첨가했다. 반응을 1M HCl (JT Baker, 5620-02)로 정지시키고, 450 nm의 흡광도에서 플레이트 판독기 (Molecular Devices)를 이용하여 판독했다. GAL3-ITGb1 상호작용의 차단율(percent blockade)을 백그라운드 신호를 뺀, 항체의 부재시 수득되는 신호의 분율(fraction)로 계산했다.
도 10에 도시된 바와 같이, 항-GAL3 항체는 GAL3과 ITGb1의 상호작용의 차등적 차단을 보인다. 3개의 항체는 > 90% 차단을 보이고 (TB001, TB006, 및 846.1F5), 12개의 항체는 40% 내지 60%의 중간 수준의 차단을 보이며 (3B11, 2D10, 7D8, 13A12, 14H10, 15F10, 20D11, 846.2H3, 846T.14A2, 847.10B9, 847.12F12, 및 847.26F5), 3개의 항체는 차단 능력을 보이지 않는다 (6B3.2D3, 847.14H4, 및 데이터 미도시). 항-GAL3 항체는 GAL3와 ITGb1의 상호작용을 차단하는 차등적 능력을 보이기 때문에, 이는 GAL3 결합 단독으로는 GAL3과 ITGb1의 상호작용을 방해하기에 충분하지 않고, 이러한 방해 활성을 위해 특정한 특성들이 요구된다는 것을 보여준다.
실시예 7: Gal3는 ITGa3에 특이적으로 결합한다.
인간 갈렉틴-3 (GAL3)이 인간 인테그린 알파-3 (ITGa3)과 물리적으로 상호작용할 수 있다는 가능성을 평가하기 위해, 정제된 GAL3 및 ITGa3에 의한 ELISA 평가를 수행했다. 인간 GAL3 단백질 (TrueBinding, QCB200349; TrueBinding, QCB200352)을 PBS (Corning, 21-030-CM)에 4, 2, 및 1 ㎍/ml의 농도까지 희석시키고, 96-웰 ELISA 플레이트 (Thermo Fisher, 44-2404-21)의 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 4℃에서 밤새 인큐베이션시킨 후에, 상기 플레이트를 PBST (0.05% Tween 20 [VWR, 0777]을 포함하는 PBS)로 3회 세척하고, 실온에서 부드럽게 흔들면서, PBST 중 2% BSA (EMD Millipore, 126609)로 1시간 동안 블록킹시켰다. 제조사의 설명서에 따라, 재조합 인간 ITGa3 (Novus Biological, NBP2-48514PEP)을 EZ Link Sulfo-NHS-LC-Biotin (ThermoFisher Scientific, A39257)으로 비오티닐화하고, Zeba Spin Desalting Column (ThermoFisher Scientific, 89882)을 이용하여 탈염시켰다. 상기 플레이트를 블록킹시킨 후에, PBST 중 2% BSA를 제거하고, 4, 2, 및 1 ㎍/ml의 2% BSA를 포함하는 PBST 중 비오티닐화된 재조합 ITGa3을 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 부드럽게 흔들면서 실온에서 1시간 동안 인큐베이션시켰다. 그 후, 상기 플레이트를 PBST로 3회 세척했다. 2% BSA를 포함하는 PBST에 Avidin HRP (Biolegend, 405103; 1:2000 희석)를 희석시키고, 상기 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 부드럽게 흔들면서 실온에서 1시간 동안 인큐베이션시키고, PBST로 3회 세척했다. 그 후, 각 웰에 TMB 기질 (Thermo Scientific, 34029)을 첨가했다. 반응을 1M HCl (JT Baker, 5620-02)로 정지시키고, 450 nm의 흡광도에서 플레이트 판독기 (Molecular Devices)를 이용하여 판독했다.
도 11에 도시된 바와 같이, ITGa3은 GAL3-코팅 웰에 강하게 결합한다. ITGa3은 비코팅 ELISA 웰에 유의성있게 결합하지 않는다. 마찬가지로, GAL3 코팅만을 갖는 웰에서 유의한 결합 신호가 관찰되지 않는다.
실시예 8: GAL3-ITGa3 차단 활성을 갖는 GAL3-결합 항체의 확인
GAL3와 ITGa3의 상호작용을 차단하는 능력을 갖는 GAL3-표적화 항체를 확인하기 위해, 정제된 Gal3 및 ITGa3을 다양한 GAL3-표적화 또는 대조군 항체의 존재 (또는 부재), 또는 항체의 부재 하에 인큐베이션시키고, 단백질 상호작용을 ELISA에 의해 평가했다.
인간 GAL3 (TrueBinding, QCB200352)을 PBS (Corning, 21-030-CM)로 4 ㎍/ml의 농도까지 희석시키고, 96-웰 ELISA 플레이트 (Thermo Fisher, 44-2404-21)의 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 4℃에서 밤새 인큐베이션시킨 후에, 상기 플레이트를 PBST (0.05% Tween 20 [VWR, 0777]을 포함하는 PBS)로 3회 세척하고, 그 후, 실온에서 부드럽게 흔들면서, PBST 중 2% BSA (EMD Millipore, 126609)로 1시간 동안 블록킹시켰다. 제조사의 설명서에 따라, 재조합 인간 ITGa3 단백질 항원 (Novus Biological, NBP2-48514PEP)을 EZ Link Sulfo-NHS-LC-Biotin (ThermoFisher Scientific, A39257)으로 비오티닐화하고, Zeba Spin Desalting Column (ThermoFisher Scientific, 89882)을 이용하여 탈염시켰다. 그 후, PBST 중 2% BSA를 제거하고 20, 6.6, 또는 2.2 ㎍/ml의 대조군 또는 항-GAL3 항체 30 ㎕를 각 웰에 첨가하고, 뒤이어, 4 ㎍/ml의 2% BSA를 포함하는 PBST 중 비오티닐화된 ITGa3 30 ㎕를 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 부드럽게 흔들면서 실온에서 1시간 동안 인큐베이션시켰다. 그 후, 상기 플레이트를 PBST로 3회 세척했다. 2% BSA를 포함하는 PBST에 Avidin HRP (Biolegend, 405103)를 1:2000 희석율로 희석하여 상기 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 부드럽게 흔들면서 실온에서 1시간 동안 인큐베이션시키고, PBST로 3회 세척했다. 그 후, 각 웰에 TMB 기질 (Thermo Scientific, 34029)을 첨가했다. 반응을 1M HCl (JT Baker, 5620-02)로 정지시키고, 450 nm의 흡광도에서 플레이트 판독기 (Molecular Devices)를 이용하여 판독했다. GAL3-ITGa3 상호작용의 차단율(percent blockade)을 백그라운드 신호를 뺀, 항체의 부재시 수득되는 신호의 분율로 계산했다.
도. 12에 도시된 바와 같이, 항-GAL3 항체는 GAL3과 ITGa3의 상호작용의 차등적 차단을 보인다. 24개의 항체가 > 90% 차단 능력을 보이고 (TB001, TB006, 2D10, 3B11, 7D8, 13A12, 14H10, 15F10, 19B5, 20D11.2C6, 20H5, 23H9, 846.1B2, 846.1F5, 846.1H5, 846.1H12, 846.2H3, 846T.14A2, 846T.14E4, 846T.16B5, 847.4B10, 847.10B9, 84712F12, 및 847.26F5), 13개의 항체는 < 35% 차단 능력을 보인다 (6B3.2D3, 9H2.2H10, 12G5.D7, 13G4.2F8, 847.14H4, 847.11B1, 및 데이터 미도시). 항-GAL3 항체는 GAL3와 ITGa3 상호작용을 차단하는 차등적 능력을 보이기 때문에, 이는 GAL3 결합 단독으로는 GAL3과 ITGa3의 상호작용을 방해하기에 충분하지 않고, 이러한 방해 활성을 위해 특정한 특성들이 요구된다는 것을 보여준다.
실시예 9: Gal3는 ITGb3에 특이적으로 결합한다.
인간 갈렉틴-3 (GAL3)이 인간 인테그린 베타-3 (ITGb3)과 물리적으로 상호작용할 수 있다는 가능성을 평가하기 위해, 정제된 GAL3 및 ITGb3에 의한 ELISA 평가를 수행했다. 인간 GAL3 단백질 (TrueBinding, QCB200349; R&D Systems, 8259-GA)을 PBS (Corning, 21-030-CM)에 10, 5, 및 2.5 ㎍/ml의 농도까지 희석시키고, 96-웰 ELISA 플레이트 (Thermo Fisher, 44-2404-21)의 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 4℃에서 밤새 인큐베이션시킨 후에, 상기 플레이트를 PBST (0.05% Tween 20 [VWR, 0777]을 포함하는 PBS)로 3회 세척하고, 실온에서 부드럽게 흔들면서, PBST 중 2% BSA (EMD Millipore, 126609)로 1시간 동안 블록킹시켰다. 제조사의 설명서에 따라, 재조합 인간 ITGb3 단백질 (Abbexa, abx067294)을 EZ Link Sulfo-NHS-LC-Biotin (ThermoFisher Scientific, A39257)으로 비오티닐화하고, Zeba Spin Desalting Column (ThermoFisher Scientific, 89882)을 이용하여 탈염시켰다. 상기 플레이트를 블록킹시킨 후에, PBST 중 2% BSA를 제거하고, 10, 5, 및 2.5 ㎍/ml의 2% BSA를 포함하는 PBST 중 비오티닐화된 재조합 ITGb3을 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 부드럽게 흔들면서 실온에서 1시간 동안 인큐베이션시켰다. 그 후, 상기 플레이트를 PBST로 3회 세척했다. 2% BSA를 포함하는 PBST에 Avidin HRP (Biolegend, 405103; 1:2000 희석)를 희석시키고, 상기 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 부드럽게 흔들면서 실온에서 1시간 동안 인큐베이션시키고, PBST로 3회 세척했다. 그 후, 각 웰에 TMB 기질 (Thermo Scientific, 34029)을 첨가했다. 반응을 1M HCl (JT Baker, 5620-02)로 정지시키고, 450 nm의 흡광도에서 플레이트 판독기 (Molecular Devices)를 이용하여 판독했다.
도 13에 도시된 바와 같이, ITGb3은 GAL3-코팅 웰에 강하게 결합한다. ITGb3은 비코팅 ELISA 웰에 유의성있게 결합하지 않는다. 마찬가지로, GAL3 코팅만을 갖는 웰에서 유의한 결합 신호가 관찰되지 않는다.
실시예 10: GAL3-ITGb3 차단 활성을 갖는 GAL3-결합 항체의 확인
GAL3와 ITGb3의 상호작용을 차단하는 능력을 갖는 GAL3-표적화 항체를 확인하기 위해, 정제된 GAL3 및 ITGb3을 다양한 GAL3-표적화 또는 대조군 항체의 존재 (또는 부재), 또는 항체의 부재 하에 인큐베이션시키고, 단백질 상호작용을 ELISA에 의해 평가했다.
인간 GAL3 (TrueBinding, QCB200352)을 PBS (Corning, 21-030-CM)로 4 ㎍/ml의 농도까지 희석시키고, 96-웰 ELISA 플레이트 (Thermo Fisher, 44-2404-21)의 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 4℃에서 밤새 인큐베이션시킨 후에, 상기 플레이트를 PBST (0.05% Tween 20 [VWR, 0777]을 포함하는 PBS)로 3회 세척하고, 그 후, 실온에서 부드럽게 흔들면서, PBST 중 2% BSA (EMD Millipore, 126609)로 1시간 동안 블록킹시켰다. 제조사의 설명서에 따라, 재조합 인간 ITGb3 단백질 (Abbexa, abx067294)을 EZ Link Sulfo-NHS-LC-Biotin (ThermoFisher Scientific, A39257)으로 비오티닐화하고, Zeba Spin Desalting Column (ThermoFisher Scientific, 89882)을 이용하여 탈염시켰다. 그 후, PBST 중 2% BSA를 제거하고 20, 6.6, 또는 2.2 ㎍/ml의 대조군 또는 항-GAL3 항체 30 ㎕를 각 웰에 첨가하고, 뒤이어, 2 ㎍/ml의 2% BSA를 포함하는 PBST 중 비오티닐화된 ITGb3 30 ㎕를 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 부드럽게 흔들면서 실온에서 1시간 동안 인큐베이션시켰다. 그 후, 상기 플레이트를 PBST로 3회 세척했다. 2% BSA를 포함하는 PBST에 Avidin HRP (Biolegend, 405103)를 1:2000 희석율로 희석하여 상기 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 부드럽게 흔들면서 실온에서 1시간 동안 인큐베이션시키고, PBST로 3회 세척했다. 그 후, 각 웰에 TMB 기질 (Thermo Scientific, 34029)을 첨가했다. 반응을 1M HCl (JT Baker, 5620-02)로 정지시키고, 450 nm의 흡광도에서 플레이트 판독기 (Molecular Devices)를 이용하여 판독했다. GAL3-ITGb3 상호작용의 차단율을 백그라운드 신호를 뺀, 항체의 부재시 수득되는 신호의 분율로 계산했다.
도 14에 도시된 바와 같이, 항-GAL3 항체는 GAL3과 ITGb3의 상호작용의 차등적 차단을 보인다. 20개의 항체는 > 90% 차단 능력을 보이고 (TB001, TB006, 2D10, 3B11.2G2, 13A12.2E5, 14H10.2C9, 19B5, 20D11.2C6, 20H5.A3, 23H9.2E4, 846.1B2, 846.1F5, 846.1H12, 846.2H3, 846T.14A2, 846T.14E4, 846T.16B5, 847.10B9, 847.12F12, 및 847.26F5), 13개의 항체는 < 10% 차단 능력을 보인다 (6B3.2D3, 9H2.2H10, 12G5.D7, 13G4.2F8, 847.11B1, 847.14H4, 및 데이터 미도시). 항-GAL3 항체는 GAL3와 ITGb3의 상호작용을 차단하는 차등적 능력을 보이기 때문에, 이는 GAL3 결합 단독으로는 GAL3과 ITGb3의 상호작용을 방해하기에 충분하지 않고, 이러한 방해 활성을 위해 특정한 특성들이 요구된다는 것을 보여준다.
실시예 11: Gal3는 ITGaV에 특이적으로 결합한다
인간 갈렉틴-3 (GAL3)이 인간 인테그린 알파-V (ITGaV)와 물리적으로 상호작용할 수 있다는 가능성을 평가하기 위해, 정제된 GAL3 및 ITGaV에 의한 ELISA 평가를 수행했다. 인간 GAL3 단백질 (TrueBinding, QCB200349; TrueBinding, QCB200352)을 PBS (Corning, 21-030-CM)에 4, 2, 및 1 ㎍/ml의 농도까지 희석시키고, 96-웰 ELISA 플레이트 (Thermo Fisher, 44-2404-21)의 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 4℃에서 밤새 인큐베이션시킨 후에, 상기 플레이트를 PBST (0.05% Tween 20 [VWR, 0777]을 포함하는 PBS)로 3회 세척하고, 실온에서 부드럽게 흔들면서, PBST 중 2% BSA (EMD Millipore, 126609)로 1시간 동안 블록킹시켰다. 제조사의 설명서에 따라, 재조합 인간 ITGaV 단백질 (abbexa, abx166523)을 EZ Link Sulfo-NHS-LC-Biotin (ThermoFisher Scientific, A39257)으로 비오티닐화하고, Zeba Spin Desalting Column (ThermoFisher Scientific, 89882)을 이용하여 탈염시켰다. 상기 플레이트를 블록킹시킨 후에, PBST 중 2% BSA를 제거하고, 4, 2, 및 1 ㎍/ml의 2% BSA를 포함하는 PBST 중 비오티닐화된 재조합 ITGaV를 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 부드럽게 흔들면서 실온에서 1시간 동안 인큐베이션시켰다. 그 후, 상기 플레이트를 PBST로 3회 세척했다. 2% BSA를 포함하는 PBST에 Avidin HRP (Biolegend, 405103; 1:2000 희석)를 희석시키고, 상기 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 부드럽게 흔들면서 실온에서 1시간 동안 인큐베이션시키고, PBST로 3회 세척했다. 그 후, 각 웰에 TMB 기질 (Thermo Scientific, 34029)을 첨가했다. 반응을 1M HCl (JT Baker, 5620-02)로 정지시키고, 450 nm의 흡광도에서 플레이트 판독기 (Molecular Devices)를 이용하여 판독했다.
도 15에 도시된 바와 같이, ITGaV는 GAL3-코팅 웰에 강하게 결합한다. ITGaV는 비코팅 ELISA 웰에 유의성있게 결합하지 않는다. 마찬가지로, GAL3 코팅만을 갖는 웰에서 유의한 결합 신호가 관찰되지 않는다.
실시예 12: GAL3-ITGaV 차단 활성을 갖는 GAL3-결합 항체의 확인
GAL3와 ITGaV의 상호작용을 차단하는 능력을 갖는 GAL3-표적화 항체를 확인하기 위해, 정제된 Gal3 및 ITGaV를 다양한 GAL3-표적화 또는 대조군 항체의 존재 (또는 부재), 또는 항체의 부재 하에 인큐베이션시키고, 단백질 상호작용을 ELISA에 의해 평가했다.
인간 GAL3 (TrueBinding, QCB200352)을 PBS (Corning, 21-030-CM)로 4 ㎍/ml의 농도까지 희석시키고, 96-웰 ELISA 플레이트 (Thermo Fisher, 44-2404-21)의 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 4℃에서 밤새 인큐베이션시킨 후에, 상기 플레이트를 PBST (0.05% Tween 20 [VWR, 0777]을 포함하는 PBS)로 3회 세척하고, 그 후, 실온에서 부드럽게 흔들면서, PBST 중 2% BSA (EMD Millipore, 126609)로 1시간 동안 블록킹시켰다. 제조사의 설명서에 따라, 재조합 인간 ITGaV (abbexa, abx166523)를 EZ Link Sulfo-NHS-LC-Biotin (ThermoFisher Scientific, A39257)으로 비오티닐화하고, Zeba Spin Desalting Column (ThermoFisher Scientific, 89882)을 이용하여 탈염시켰다. 그 후, PBST 중 2% BSA를 제거하고 20, 6.6, 또는 2.2 ㎍/ml의 대조군 또는 항-GAL3 항체 30 ㎕를 각 웰에 첨가하고, 뒤이어, 8 ㎍/ml의 2% BSA를 포함하는 PBST 중 비오티닐화된 ITGaV 30 ㎕를 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 부드럽게 흔들면서 실온에서 1시간 동안 인큐베이션시켰다. 그 후, 상기 플레이트를 PBST로 3회 세척했다. 2% BSA를 포함하는 PBST에 Avidin HRP (Biolegend, 405103)를 1:2000 희석율로 희석하여 상기 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 부드럽게 흔들면서 실온에서 1시간 동안 인큐베이션시키고, PBST로 3회 세척했다. 그 후, 각 웰에 TMB 기질 (Thermo Scientific, 34029)을 첨가했다. 반응을 1M HCl (JT Baker, 5620-02)로 정지시키고, 450 nm의 흡광도에서 플레이트 판독기 (Molecular Devices)를 이용하여 판독했다. GAL3-ITGaV 상호작용의 차단율을 백그라운드 신호를 뺀, 항체의 부재시 수득되는 신호의 분율로 계산했다.
도 16에 도시된 바와 같이, 항-GAL3 항체는 GAL3과 ITGaV의 상호작용의 차등적 차단을 보인다. 18개의 항체는 > 90% 차단 능력을 보이고 (TB001, TB006, 2D10, 3B11.2G2, 14H10.2C9, 19B5, 20D11.2C6, 20H5.A3, 23H9.2E4, 846.1B2, 846.1F5, 846.2H3, 846T.14A2, 846T.16B5, 847.10B9, 847.12F12, 847.26F5, 및 849.8D10), 2개의 항체는 중간 수준 (40 내지 60%) 차단 능력을 보이며 (데이터 미도시), 10개의 항체는 < 30% 차단 능력을 보인다 (6B3.2D3, 9H2.2H10, 12G5.D7, 13G4.2F8, 847.11B1, 847.14H4, 및 데이터 미도시). 항-GAL3 항체는 GAL3와 ITGaV의 상호작용을 차단하는 차등적 능력을 보이기 때문에, 이는 GAL3 결합 단독으로는 GAL3과 ITGaV의 상호작용을 방해하기에 충분하지 않고, 이러한 방해 활성을 위해 특정한 특성들이 요구된다는 것을 보여준다.
실시예 13: GAL3와 인테그린의 상호작용을 차단하는 항-GAL3 항체는 Jurkat T 세포 부착을 억제한다.
GAL3와 인테그린의 상호작용을 차단하는 항-GAL3 항체가 림프구 호밍(homing) (염증성 질환의 발병에서 중요한 양태)에 부정적으로 영향을 미치는지 여부를 평가하기 위해, 림프구 Jurkat T 세포주를 이용한 세포-기반 분석을 이용했다. 요약하면, 재조합 Gal-3 (PBS 중 10mg/ml) 및 항체 (PBS 중 5 mg/ml)를 얼음 위에서 30분 동안 인큐베이션시키고, 코팅 혼합물을 96-웰 플레이트로 옮기고 추가적으로 밤새 인큐베이션시켰다. 그 후, 코팅 혼합물을 제거하고, 플레이트를 0.5% BSA로 45분 동안 블록킹시켰다. Jurkat T 세포 (웰당 105개 세포)를 무혈청 RPMI에 플레이팅했다. 30분의 인큐베이션 후에, 상기 세포를 무혈청 배지로 부드럽게 1회 세척하고, 4% PFA로 10분 동안 고정시켰다. 부착된 세포들을 SYTOX™ Orange Nucleic Acid 염색 (ThermoFisher, S11368)으로 더 염색시키고, Cytation 1 Cell Imaging Multi-Mode Reader (Biotek)로 분석했다.
도 17에 도시된 바와 같이, 4개의 항-GAL3 항체가 > 90% 효능으로 Jurkat T 세포 부착을 억제했다 (3B11, 20D11, TB001, TB006). 5개의 항-GAL3 항체가 Jurkat T 세포 부착을 40% 내지 80% 억제했다(6H6, 7D8, 15F10, 20H5, 및 846T.14E4). 클론 23H9는 림프구 호밍을 억제하지 않았다. 종합하면, Jurkat T 세포 부착을 억제하기 위해 항-GAL3 항체의 특정한 특성들이 요구된다.
실시예 14: 항-GAL3 항체는 진행 타입 II 당뇨병의 모델에서 치료 잠재력을 갖는다
타입 II 당뇨병의 중증 케이스에 대한 치료 항-Gal-3 항체의 효과를 조사하기 위해, HFD (High Fat Diest)-급이 Db/Db 마우스를 이용한 마우스 모델을 구현했다. Jackson lab으로부터 수득된 4주령 수컷 Bks-Db 마우스 (000642)에 8주 동안 60% kcal HFD (Research Diet, 12492i)를 급이했다. 대조군 동물 (수컷 C57BL6/J (000662), Jackson lab)에는 NCD(normal chow diet)를 급이했다. Db/Db 동물은 증가된 수준의 순환 Gal-3를 가졌다 (도 18). EchoMRI-500TM (EchoMRI)를 이용하여 측정된 체성분에 근거하여 동물들을 랜덤화했다. HFD-급이 Db/Db 동물을 음성 대조군 (PBS), 양성 대조군 (세마글루티드), 또는 항-GAL3 TB001 항체로 Q1W (주당 1회) 처리했다. 야생형 동물을 대조(건강한 개체(Healthy))군으로 이용했다. 동물에 12주 동안 투여했다. TB001 (항-GAL3) 처리는 Db/Db 동물의 생존기간을 유의성있게 연장시켰다 (도 19). TB001-처리 동물의 연장된 생존 기간은 또한 도 20에 도시된 바와 같이 PBS-처리군 대비 공복혈당의 수준에서 변화의 부재와 연관되었다. 실시예 15에 기재된 바와 같이, 공복 혈당을 측정했다. 요약하면, 마우스를 물은 공급되나, 사료는 없는 클린 케이지에서 4-6 시간 동안 단식시켰다. 꼬리로부터의 혈액을 HemoCue Glucose 201 Analyzer 및 큐벳 (Mercedes Scientific 110706)을 이용하여 혈당 수준을 측정하기 전에 2.5배 희석시켰다.
실시예 15: 항-GAL3 항체는 타입 I 당뇨병의 마우스 모델에서 치료 잠재력을 갖는다
타입 I 당뇨병에서 항-Gal3 항체의 치료 잠재력을 평가하기 위해, 타입 I 당뇨병의 마우스 모델을 이용했다. 요약하면, 7주령 암컷 NOD/ShiLtJ 마우스 (Jackson lab (001976)) 및 대조군 동물 NOR/LtJ (Jackson Lab (002050))을 실온에서 06:00-18:00 주-야 주기로 필터 상부를 갖는 일회용 표준 케이지에 수용했다. 마우스를 글루코오스 모니터링 전 1주 동안 휴식하게 했다. 글루코오스 수준이 2일 연속 동안 250-400 (mg/dL)에 도달하면, 항체 처리를 개시했다. 글루코오스 수준을 확립하기 위해, 혈액 시료를 물은 있으나, 사료는 없는 클린 케이지에서 4-6 시간 동안 수용한 후 실험 동물의 꼬리 정맥으로부터 혈액 시료를 채취했다. 채취된 시료를 HemoCue Glucose 201 Analyzer 및 큐벳 (Mercedes Scientific 110706)을 이용하여 분석했다. 동물에 항-GAL3 항체 (mTB001) 또는 PBS 대조군을 주당 2회 (10mg/kg)로 투여했다. 글루코오스 수준이 >1000 (mg/dL)에 도달하거나, 또는 그들이 질병 증상(morbidity symptom) (즉, 구부린 자세 (hunched posture), 저체온증, 및 저활성(hypoactivity))을 보일때 동물들을 희생시켰다. 종료 단계에서, 증상이 있는 동물로부터 혈장 시료를 채취했다. C-펩티드 수준을 Alpco Mouse C-peptide ELISA 키트 (Alpco, 80-CPTMS-E01)로 측정했다. 도 21에 도시된 바와 같이, 항-GAL3 처리는 NOD/ShiLtJ 동물의 생존기간을 연장시키고, 혈당 수준을 안정화시키고(도 22a), C-펩티드 수준을 회복시키는 것(도 22b)에 의해 베타-세포 기능을 회복시켰다. 따라서, 항-Gal3 처리는 타입 II 및 타입 I 당뇨병 모두의 증상을 감소시킨다.
실시예 16: 항-GAL3 항체는 만성 염증성 장 질환 (IBD)의 마우스 모델에서 치료 잠재력을 갖는다
Gal3 항체의 효과를 연구하기 위해, 만성 염증성 장 질환의 마우스 모델을 구현했다. 요약하면, 7주령 수컷 C57BL/6J 마우스를 6:00-8:00 주-야 주기로 실온에서 필터 상부를 갖는 표준 일회용 케이지에 수용시켰다. 처리를 개시하기 전에 1주 동안 마우스를 휴식할 수 있게 했다.
마우스를 3개의 처리군으로 무작위로 나눴다: 덱스트란 술페이트 소디움 염 (DSS) 미처리, 물 중 3% DSS + PBS, 3% DSS + mTB001 (10mg/kg), 3% DSS + mTB001 (1mg/kg). 총 3회의 DSS 사이클 및 2회의 정상 물 사이클을 위해, DSS 물 혼합물을 5일 연속으로 투여하고, 뒤이어 7일 동안 정상 물을 투여했다. 체중, 변 점도 (stool consistency), 총 출혈 점수(gross bleeding score), 및 Hemoccult 점수 (Fisher, SK-61130)를 매일 모니터링했다. 부검 시, 결장, 공장, 회장, 십이지장, 및 비장을 보존하고 신속 동결(flash frozen)시켰다. 혈장 염증성 사이토카인을 Multi-spot Assay Systems (MSD) Proinflammatory Panel 1 (마우스) 키트 (MSD, K15048D)를 이용하여 측정했다. 동결된 결장 시료에 대해 RT-qPCR을 수행했다. 요약하면, Qiazol 용해 완충액 (Qiagen, 79306) 및 Qiagen Tissue Lyser II (Qiagen, 85300)를 이용하여 결장 조직을 파쇄시켰다. RNeasy mini kit (Qiagen, 74104)를 이용하여 RNA를 추출했다. BioRad C1000 터치 온도 순환기(touch thermal cycler) (BioRad, 1851138)에서 iScript Reverse Transcription Supermix (BioRad, 1708841)를 이용하여 cDNA를 합성했다. 도 23의 프라이머(서열번호 325-338)를 이용하여 CFX384 Touch Real-Time PCR 검출 시스템 (BioRad, 1955485)에서 SsoAdvanced Universal SYBR green supermix (BioRad, 1725272)를 이용하여 RT-qPCR을 수행했다.
항-갈렉틴-3 처리는 결장 길이의 DSS-유도 감소를 회복시키고 (도 24) IFN-감마의 순환 수준에 의해 결정된 DSS-유도 염증을 감소시켰다 (도 25). 또한, TB001 처리에 대한 반응으로, 여러 전-염증성 유전자 (예를 들면, IFN-감마, IL17a, IL-1베타, IL-21, IL-22)의 mRNA 수준이 감소되었다.
실시예 17. 항-Gal3 항체의 서열
다양한 빈(Bin)으로부터의 GAL3 결합 항체의 상보성 결정 영역을 Clustal Omega를 사용하여 정렬했다 (도 39). 빈 1 항체는 VH CDR1과 CDR2, 및 VL CDR1과 CDR3의 영역에서 상당한 상동성을 공유했다. 빈 2 항체는 조사된 모든 CDR에서 상당한 상동성을 공유했고, 상대적으로 보존적인 A/S, V/T, H/D, 및 L/F 치환들이 관찰되었다. 빈 3 항체는 다소 더 다양했으나, CDR1에서 상당한 서열 상동성을 보였으나, 다른 CDR 영역에서는 상대적으로 상이했다(divergent). 빈 4 항체는 조사된 모든 CDR에서 상당한 상동성을 공유했고, 상대적으로 보존적인 A/T, I/V, D/G, S/N, QK 및 V/L 치환이 관찰되었다. 빈 5 항체도 모든 CDR에서 상당한 상동성을 공유했고, 덜 보존적인 T/I, N/Y 치환 외에, 상대적으로 보존적인 Y/F, N/K 치환이 관찰되었다. 마지막으로, 빈 7 항체 CDR은 거의 동일하고, VL CDR2의 단일 V/L 치환이 3B11.2G2를 13A12.2E5와 구별시키는 것으로 관찰되었다. 도 28a-c, 29a-c, 30-33에 제공된 임의의 다른 서열들과의 정렬은 당해 분야에 알려진 기술로 수행될 수 있다.
실시예 18: 추가적인 예시적 항-Gal3 항체의 비닝 및 펩티드 결합 분석
추가적인 예시적 항-Gal3 항체에 대해 대규모 비닝 분석을 수행했다.
에피토프 비닝 분석(epitope binning assay)을 고속-대량(high-throughput) SPR-기반 Carterra LSA 유닛 (CarterraBio, Salt Lake City, UT)에서 샌드위치 포맷으로 수행했다. 먼저, 정제된 항체를 10 mM NaOAc (pH 5.0)에 10 ㎍/ml 농도까지 희석시키고 EDC 및 S-NHS에 의해 활성화된 HC200M 칩에 아민기를 통해 공유결합에 의해 커플링시켜서 384-스폿 어레이(384-spot array)의 상이한 위치들에 항체를 고정화시켰다. 138회의 비닝 사이클을 고정화된 항체의 어레이에서 수행했다. 각 사이클에서, 먼저, 인간 Gal3 (AcroBio GA3-H5129)을 전체 어레이에 주입하여 상이한 항체(일차 항체)에 결합시키고 뒤이어 테스트된 150개 항-GAL3 항체의 패널 중에서 선택된 하나의 항체(이차 항체)에 결합시켰다. 각 사이클의 종료 시, 상기 어레이를 10 mM 글리신 (pH 2.0)에 의해 재생시켜, 상기 어레이로부터 결합된 항원 및 이차 항체를 제거했다. CarterraBio에 의한 Epitope 소프트웨어를 이용하여 데이터 분석을 수행했다.
비닝 결과가 도 40에 도시된다. 전체로, hGAL3으로의 결합을 보이는 120개의 항-GAL3 항체에 대해 49개의 별개의 빈을 확인했다 (테스트된 150개의 항체 중 30개의 항체는 HC200M 칩에 고정화된 경우, hGAL3에 결합하지 않았고, 따라서, 추가적인 분석으로부터 배제시켰다). GAL3와 APP695의 회합을 강하게 차단하는 항체가 하기에 정의된 다수의 별개의 빈들에 속했다. 이는 GAL3 결합 활성의 예측자로서 이러한 빈들의 유용성을 보여준다.
항체 IMT001 (TB001)이 빈 1을 정의했다. 클론 IMT006 (TB006), 19B5.2E6, 20H5.A3, 23H9.2E4, 2D10.2B2는 Gal3에 대한 상호 경쟁적 결합(mutual competitive binding)을 보였으나, 클론의 나머지의 결합을 방해하지 않아서, 빈 3을 정의했다. 클론 3B11.2G2, 13A12.2E5는 Gal3에 대한 상호 경쟁적 결합을 보였으나, 클론의 나머지의 결합을 방해하지 않아서, 빈 7을 정의했다. 클론 14H10.2C9, 15F10.2D6, 7D8.2D8, F846TC.14E4, F846TC.7F10, F849C.8D10은 Gal3에 대한 상호 경쟁적 결합을 보였으나, 클론의 나머지의 결합을 방해하지 않아서, 빈 8을 정의했다. 클론 F846C.1B2, F846C.1F5, F846C.1H12, F846C.2H3, F846TC.16B5는 Gal3에 대한 상호 경쟁적 결합을 보였으나, 클론의 나머지의 결합을 방해하지 않아서, 빈 17을 정의했다. 클론 F847C.10B9, F847C.12F12, 및 F847C.26F5는 Gal3에 대한 상호 경쟁적 결합을 보였으나, 클론의 나머지의 결합을 방해하지 않아서, 빈 49를 정의했다. 또한, 다수의 클론은 테스트된 다른 항체들과 Gal3로의 결합에 대해 경쟁하지 않아서, 각각 빈 5 (클론 20D11.2C6) 및 빈 10 (클론 12G5.D7)을 정의했다.
추가적인 예시적 항-Gal3 항체의 Gal3 펩티드 결합 활성을 도 27에 기술된 것(서열번호 3-26)과 동일한 펩티드를 이용하여 평가했다. 인간 Gal3 펩티드 (LifeTein, custom order) 및 인간 Gal3 단백질 (R&D Systems, 8259-GA; TrueBinding, QCB200349)을 PBS (Corning, 21-030-CM)에 적어도 100 ㎍/mL (펩티드) 또는 1 ㎍/mL (단백질)의 농도까지 희석하고, 수개의 96-웰 ELISA 플레이트 (Thermo Fisher, 44-2404-21)의 웰에 첨가했다. 플레이트를 4℃에서 밤새 인큐베이션시킨 후에, 상기 플레이트를 PBST (0.05% Tween 20 [VWR, 0777]을 포함하는 PBS)로 3회 세척했다. 그 후, 상기 플레이트를 실온에서 부드럽게 흔들면서, PBST 중 2% BSA (EMD Millipore, 126609)로 1시간 동안 블록킹시켰다. 그 후, PBST 중 2% BSA를 제거하고, Gal3-결합 항체 (재포맷된(reformatted) hIgG4 [S228P])를 PBST 중 2% BSA에 5 ㎍/mL의 농도까지 희석시키고, 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 부드럽게 흔들면서 실온에서 1시간 동안 인큐베이션시키고, PBST로 3회 세척했다. 그 후, Peroxidase AffiniPure F(ab')2 Fragment Goat Anti-Human IgG (H+L) 다중클론 항체 (Jackson ImmunoResearch, 109-036-003)를 PBST 중 2% BSA에 희석시키고 (1:4000), 웰에 첨가했다. 상기 플레이트를 부드럽게 흔들면서 실온에서 1시간 동안 인큐베이션시키고, PBST로 3회 세척했다. 그 후, TMB 기질 (Thermo Scientific, 34029)을 각 웰에 첨가했다. 반응을 1M HCl (JT Baker, 5620-02)로 정지시키고, 450 nm의 흡광도에서 플레이트 판독기 (Molecular Devices)를 이용하여 판독했다.
펩티드 결합 결과가 도 40에 도시된다. Gal3-결합 항체의 펩티드 어레이로의 결합이 복수의 위치에서 관찰되었고, 대부분의 결합은 펩티드 1-8에서 관찰되고, 펩티드 17로의 약한 결합이 있었다. 13개의 별개의 Gal3-결합 항체 (19B5.2E6, 20D11.2C6, 20H5.A3, 23H9.2E4, 2D10.2B2, F846C.1H5, F846TC.14A2, F846TC.7F10, F847C.10B9, F847C.26F5, F847C.4B10, F847C.12F12, 15FG7.2A7) 모두, Gal3의 아미노산 ADNFSLHDALSGSGNPNPQG (서열번호 3)에 해당하는, Gal3의 펩티드 1에 결합했다. 유사하게, 15개의 별개의 Gal3-결합 항체 (IMT006 (TB006), 13A12.2E5, 14H10.2C9, 20D11.2C6, 20H5.A3, 23H9.2E4, 2D10.2B2, 3B11.2G2, F846C.1B2, F846C.1F5, F846C.1H12, F846C.2H3, F846TC.16B5, 15FG7.2A7, 및 IMT001 (TB001))는 Gal3의 아미노산 GAYPGQAPPGAYPGAPGAYP (서열번호 8)에 해당하는, Gal3의 펩티드 6에 결합했다. 또한, 13개의 Gal3-결합 항체 (14H10.2C9, 19B5.2E6, 20D11.2C6, 20H5.A3, 23H9.2E4, 2D10.2B2, 3B11.2G2, F846C.1B2, F846TC.14A2, F847C.10B9, F847C.26F5, F847C.12F12, 15FG7.2A7)는 Gal3의 아미노산 AYPGAPGAYPGAPAPGVYPG (서열번호 9)에 해당하는, Gal3의 펩티드 7에 모두 결합했다.
실시예 19: 당뇨병의 치료에서의 용도를 위한 항-Gal3 항체
환자는 타입 I 또는 타입 II 당뇨병을 갖는다. 하나 이상의 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편이 상기 환자에게 장내로, 경구로, 비강내로, 비경구로, 두개내로, 피하로, 근육내로, 또는 정맥내로 투여된다.
항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 1 ng의 양 (또는 대안적으로: 10, 100, 1000 ng, 또는 1, 10, 50, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000 ㎍, 또는 1, 10, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000 mg의 양, 또는 전술된 양 중 임의의 2개에 의해 정의된 범위 내의 양, 또는 인간에서 최적 효능을 위해 적합한 다른 양)의 용량으로 투여된다. 상기 용량은 매일 (또는 대안적으로: 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 24, 36일, 또는 48일마다, 또는 전술된 시간들 중 임의의 2개에 의해 정의된 범위 내의 임의의 시간 마다) 투여된다.
항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 투여 후에 당뇨병 또는 당뇨병과 연관된 증상의 치료가 관찰된다. 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 또 다른 당뇨병 치료제, 예를 들면, 인슐린, 인슐린 유도체 또는 그의 모방체, 인슐린 아스파르트, 인슐린 글루리신, 인슐린 리스프로, 인슐린 이소판, 인슐린 데글루덱, 인슐린 데테미르, 인슐린 징크, 인슐린 글라르긴, 바나듐, 비구아니드, 메트포르민, 펜포르민, 부포르민, 티아졸리디네디온, 로시글리타존, 피오글리타존, 트로글리타존, 톨리미돈, 술포닐우레아, 톨부타미드, 아세토헥사미드, 톨라자미드, 클로르프로파미드, 글리피지드, 글리벤클라미드, 글리메피리드, 글리클라지드, 글리클로피라미드, 글리퀴돈, 메글리티니드, 레파글리니드, 나테글리니드, 알파-글루코시다아제 억제제, 미글리톨, 아카르보스, 보글리보스, 인크레틴, GLP-1, GLP 아고니스트, 엑세나티드, 리라글루티드, 타스포글루티드, 릭시세나티드, 세마글루티드, 둘라글루티드, GIP, DPP-4 억제제, 빌다글립틴, 시타글립틴, 삭사글립틴, 리나글립틴, 알로글립틴, 셉타글립틴, 테넬리글립틴, 게미글립틴, 프람린티드, 다파글리플로진, 카나글리플로진, 엠파글리플로진, 또는 레모글리플로진과 함께 수행될 수 있다.
실시예 20: 염증성 장 질환의 치료에서의 용도를 위한 항-Gal3 항체
환자는 크론병 또는 궤양성 대장염과 같은, 그러나 그에 한정되지 않는 염증성 장 질환을 갖는다. 하나 이상의 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편이 상기 환자에게 장내로, 경구로, 비강내로, 비경구로, 두개내로, 피하로, 근육내로, 또는 정맥내로 투여된다.
항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 1 ng의 양 (또는 대안적으로: 10, 100, 1000 ng, 또는 1, 10, 50, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000 ㎍, 또는 1, 10, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000 mg의 양, 또는 전술된 양 중 임의의 2개에 의해 정의된 범위 내의 양, 또는 인간에서 최적 효능을 위해 적합한 다른 양)의 용량으로 투여된다. 상기 용량은 매일 (또는 대안적으로: 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 24, 36일, 또는 48일마다, 또는 전술된 시간들 중 임의의 2개에 의해 정의된 범위 내의 임의의 시간 마다) 투여된다.
항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 투여 후 염증성 장 질환 또는 염증성 장 질환과 연관된 증상의 치료가 환자에서 관찰된다. 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 투여는 염증성 장 질환을 위한 또 다른 치료법, 예를 들면, 수술, 메살라진, 면역억제제, 프레드니손, TNF 억제제, 아자티오프린, 메토트렉세이트, 6-머캅토퓨린, 또는 리팍시민과 함께 수행될 수 있다.
본 개시의 바람직한 구체예가 본원에서 입증되고 설명되며, 그러한 구체예는 예시로서만 제공된다는 것이 당업자에게 자명할 것이다. 본 개시로부터 벗어나지 않으면서, 다수의 변형, 변경, 및 치환이 당업자에게 떠오를 것이다. 본원에 기술된 개시의 구체예에 대한 애안들이 본 개시의 실시에서 채택될 수 있다는 것이 이해되어야 한다. 하기 청구항이 본 개시의 범위를 정의하고, 이러한 청구항 및 그의 균등물의 범위 내의 방법 및 구조가 그에 포함되는 것으로 의도된다.
본원에서 실질적으로 임의의 복수 및/또는 단수 용어의 사용과 관련하여, 당해 분야의 숙련가는 문맥 및/또는 적용에 적절하게 복수에서 단수로 및/또는 단수에서 복수로 해석할 수 있다. 다양한 단수/복수 변경(permuatation)은 명료함을 위해 본원에서 명시적으로 제시될 수 있다.
당업자는 일반적으로 본원에서, 특히 첨부된 청구항 (예를 들면, 첨부된 청구항의 본문(body))에서 사용된 용어는 일반적으로 "개방형(open)" 용어 (예를 들면, 용어 "포함하는"은 "포함하지만, 이에 한정되지 않음"으로 해석되어야 하고, 용어 "갖는"은 "적어도 갖는(having at least)"으로 해석되어야 하며, 용어 "포함한다"는 "포함하나, 이에 한정되지 않는다"로 해석되어야 함)로서 의도되는 것으로 이해할 것이다. 또한 당업자는 특정한 개수의 도입된 청구항 기재가 의도되는 경우, 이러한 의도가 청구항에 명시적으로 기재될 것이며, 그러한 기재의 부재시, 그러한 의도가 존재하지 않는 것으로 이해할 것이다. 예를 들어, 이해를 돕기 위해, 하기 첨부된 청구항에는 청구항 기재를 도입하기 위해 "적어도 하나" 및 "하나 이상"이라는 도입 문구의 사용을 포함할 수 있다. 그러나, 그러한 문구의 사용은 부정관사 "a" 또는 "an"에 의한 청구항 기재의 도입부가, 동일한 청구항이 도입 문구 "하나 이상" 또는 "적어도 하나" 및 부정관사 예컨대 "a" 또는 "an" (예를 들면, "a" 및/또는 "an"은 "적어도 하나" 또는 "하나 이상"을 의미하는 것으로 해석되어야 함)을 포함하는 경우에도, 그러한 도입된 청구항 기재를 포함하는 임의의 특정 청구항을 단 하나의 그러한 기재를 포함하는 구체예로 제한한다는 것을 의미하는 것으로 해석되어서는 안되며; 청구항 기재를 도입하기 위해 사용되는 정관사를 사용하는 경우에도 마찬가지이다. 또한, 특정한 수의 도입된 청구항 기재가 명시적으로 기재된 경우에도, 당업자는 그러한 기재는 적어도 기재된 수를 포함하는 것으로 해석되어야 한다는 것을 이해할 것이다 (예를 들면, 다른 수식어 없이, "2개의 기재(two recitations)"의 단순한 기재 (bare recitation)는 적어도 2개의 기재, 또는 2개 이상의 기재를 의미한다). 또한, "A, B, 및 C 등 중 적어도 하나(at least one of A, B, and C, etc.)"와 유사한 관례가 사용되는 경우, 일반적으로 그러한 구성은 해당 기술 분야의 숙련자가 그 관례를 이해할 것이라는 의미로 의도된다 (예를 들면, "A, B, 및 C 중 적어도 하나를 갖는 시스템"은 A 단독, B 단독, C 단독, A 및 B 함께, A 및 C 함께, B 및 C 함께, 및/또는 A, B, 및 C 함께 등을 가진 시스템들을 포함하나, 이에 한정되지 않을 것이다). "A, B, 또는 C, 등 중 적어도 하나(at least one of A, B, or C, etc.)"와 유사한 관례가 사용되는 경우, 일반적으로 그러한 구성은 해당 기술 분야의 숙련자가 그 관례를 이해할 것이라는 의미로 의도된다 (예를 들면, "A, B, 또는 C 중 적어도 하나를 가진 시스템"은 A 단독, B 단독, C 단독, A 및 B 함께, A 및 C 함께, B 및 C 함께, 및/또는 A, B, 및 C 함께 등을 가진 시스템들을 포함하나, 이에 한정되지 않는다). 또한, 명세서, 청구범위, 또는 도면에서 2개 이상의 대안적인 용어를 제시하는 사실상 모든 이접적(disjunctive) 단어 및/또는 문구는 용어들 중 하나, 각 용어, 또는 이들 용어 모두를 포함할 가능성을 고려하는 것으로 이해되어야 한다는 것이 당업자에 의해 이해될 것이다. 예를 들어, 문구 "A 또는 B"는 "A" 또는 "B" 또는 "A 및 B"의 가능성을 포함하는 것으로 이해될 것이다.
또한, 본 개시내용의 특징 또는 양태가 마쿠쉬(Markush) 그룹의 측면에서 기재되는 경우, 당업자는 본 개시내용이 이에 의해 Markush 그룹의 임의의 개별적 일원(member), 또는 일원들의 서브그룹의 측면에서 기재된다는 것을 이해할 것이다.
당업자가 이해하는 바와 같이, 서면 설명을 제공하는 것과 같은 모든 목적을 위해, 본원에 개시된 모든 범위는 또한 모든 가능한 하위-범위 및 이들의 하위-범위들의 조합을 포함한다. 나열된 모든 범위는 동일한 범위를 적어도 동일한 1/2, 1/3, 1/4, 1/5, 1/10 등으로 나눌 수 있도록 충분히 설명하는 것으로 용이하게 이해될 수 있다. 비-한정적인 예로서, 본원에 논의된 각 범위는 용이하게 하위 1/3, 중위 1/3 및 상위 1/3 등으로 나눌 수 있다. 당업자에 의해 이해될 수 있는 바와 같이, "최대(up to)", "적어도(at least)", "초과(greater than)", "미만(les than)" 등과 같은 모든 언어는 기재된 수를 포함하고, 앞서 검토된 바와 같이 후속적으로 하위-범위로 세분될 수 있는 범위를 의미한다. 마지막으로, 당업자에 의해 이해되는 바와 같이, 범위는 각 개별 일원을 포함한다. 따라서, 예를 들어, 1-3개의 물건을 가진 그룹은 1개, 2개, 또는 3개의 물건을 가진 그룹들을 의미한다. 유사하게, 1-5개의 물건을 가진 그룹은 1, 2, 3, 4 또는 5개의 물건을 가진 그룹들을 의미한다.
다양한 양태 및 구체예가 본원에 개시되나, 기타 양태 및 구체예가 당업자에게 명백할 것이다. 본원에 개시된 다양한 양태 및 구체예는 예시를 위한 것이며, 한정하는 것으로 의도되지 않으며, 진정한 범위 및 사상은 하기 청구범위에 의해 표시된다.
공개 및 미공개 출원, 특허, 및 문헌 참조를 포함하나, 이에 한정되지 않는 모든 참조는 그 전체로 참조에 의해 본원에 포함되고, 이에 의해 본 명세서의 일부가 된다. 참조에 의해 포함된 공개문헌 및 특허 또는 특허 출원이 명세서에 포함된 개시와 모순되는 경우, 본 명세서가 임의의 그러한 모순되는 자료를 대체하고 및/또는 그에 대해 우선하는 것으로 의도된다.
SEQUENCE LISTING
<110> TrueBinding, Inc.
<120> ANTIBODIES THAT DISRUPT THE INTERACTION OF GAL3 AND INSULIN
RECEPTOR OR INTEGRINS AND METHODS OF USE THEREOF
<130> IMMUT.006WO
<150> US 62/944,833
<151> 2019-12-06
<160> 342
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 250
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 1
Met Ala Asp Asn Phe Ser Leu His Asp Ala Leu Ser Gly Ser Gly Asn
1 5 10 15
Pro Asn Pro Gln Gly Trp Pro Gly Ala Trp Gly Asn Gln Pro Ala Gly
20 25 30
Ala Gly Gly Tyr Pro Gly Ala Ser Tyr Pro Gly Ala Tyr Pro Gly Gln
35 40 45
Ala Pro Pro Gly Ala Tyr Pro Gly Gln Ala Pro Pro Gly Ala Tyr Pro
50 55 60
Gly Ala Pro Gly Ala Tyr Pro Gly Ala Pro Ala Pro Gly Val Tyr Pro
65 70 75 80
Gly Pro Pro Ser Gly Pro Gly Ala Tyr Pro Ser Ser Gly Gln Pro Ser
85 90 95
Ala Thr Gly Ala Tyr Pro Ala Thr Gly Pro Tyr Gly Ala Pro Ala Gly
100 105 110
Pro Leu Ile Val Pro Tyr Asn Leu Pro Leu Pro Gly Gly Val Val Pro
115 120 125
Arg Met Leu Ile Thr Ile Leu Gly Thr Val Lys Pro Asn Ala Asn Arg
130 135 140
Ile Ala Leu Asp Phe Gln Arg Gly Asn Asp Val Ala Phe His Phe Asn
145 150 155 160
Pro Arg Phe Asn Glu Asn Asn Arg Arg Val Ile Val Cys Asn Thr Lys
165 170 175
Leu Asp Asn Asn Trp Gly Arg Glu Glu Arg Gln Ser Val Phe Pro Phe
180 185 190
Glu Ser Gly Lys Pro Phe Lys Ile Gln Val Leu Val Glu Pro Asp His
195 200 205
Phe Lys Val Ala Val Asn Asp Ala His Leu Leu Gln Tyr Asn His Arg
210 215 220
Val Lys Lys Leu Asn Glu Ile Ser Lys Leu Gly Ile Ser Gly Asp Ile
225 230 235 240
Asp Leu Thr Ser Ala Ser Tyr Thr Met Ile
245 250
<210> 2
<211> 1382
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 2
Met Ala Thr Gly Gly Arg Arg Gly Ala Ala Ala Ala Pro Leu Leu Val
1 5 10 15
Ala Val Ala Ala Leu Leu Leu Gly Ala Ala Gly His Leu Tyr Pro Gly
20 25 30
Glu Val Cys Pro Gly Met Asp Ile Arg Asn Asn Leu Thr Arg Leu His
35 40 45
Glu Leu Glu Asn Cys Ser Val Ile Glu Gly His Leu Gln Ile Leu Leu
50 55 60
Met Phe Lys Thr Arg Pro Glu Asp Phe Arg Asp Leu Ser Phe Pro Lys
65 70 75 80
Leu Ile Met Ile Thr Asp Tyr Leu Leu Leu Phe Arg Val Tyr Gly Leu
85 90 95
Glu Ser Leu Lys Asp Leu Phe Pro Asn Leu Thr Val Ile Arg Gly Ser
100 105 110
Arg Leu Phe Phe Asn Tyr Ala Leu Val Ile Phe Glu Met Val His Leu
115 120 125
Lys Glu Leu Gly Leu Tyr Asn Leu Met Asn Ile Thr Arg Gly Ser Val
130 135 140
Arg Ile Glu Lys Asn Asn Glu Leu Cys Tyr Leu Ala Thr Ile Asp Trp
145 150 155 160
Ser Arg Ile Leu Asp Ser Val Glu Asp Asn Tyr Ile Val Leu Asn Lys
165 170 175
Asp Asp Asn Glu Glu Cys Gly Asp Ile Cys Pro Gly Thr Ala Lys Gly
180 185 190
Lys Thr Asn Cys Pro Ala Thr Val Ile Asn Gly Gln Phe Val Glu Arg
195 200 205
Cys Trp Thr His Ser His Cys Gln Lys Val Cys Pro Thr Ile Cys Lys
210 215 220
Ser His Gly Cys Thr Ala Glu Gly Leu Cys Cys His Ser Glu Cys Leu
225 230 235 240
Gly Asn Cys Ser Gln Pro Asp Asp Pro Thr Lys Cys Val Ala Cys Arg
245 250 255
Asn Phe Tyr Leu Asp Gly Arg Cys Val Glu Thr Cys Pro Pro Pro Tyr
260 265 270
Tyr His Phe Gln Asp Trp Arg Cys Val Asn Phe Ser Phe Cys Gln Asp
275 280 285
Leu His His Lys Cys Lys Asn Ser Arg Arg Gln Gly Cys His Gln Tyr
290 295 300
Val Ile His Asn Asn Lys Cys Ile Pro Glu Cys Pro Ser Gly Tyr Thr
305 310 315 320
Met Asn Ser Ser Asn Leu Leu Cys Thr Pro Cys Leu Gly Pro Cys Pro
325 330 335
Lys Val Cys His Leu Leu Glu Gly Glu Lys Thr Ile Asp Ser Val Thr
340 345 350
Ser Ala Gln Glu Leu Arg Gly Cys Thr Val Ile Asn Gly Ser Leu Ile
355 360 365
Ile Asn Ile Arg Gly Gly Asn Asn Leu Ala Ala Glu Leu Glu Ala Asn
370 375 380
Leu Gly Leu Ile Glu Glu Ile Ser Gly Tyr Leu Lys Ile Arg Arg Ser
385 390 395 400
Tyr Ala Leu Val Ser Leu Ser Phe Phe Arg Lys Leu Arg Leu Ile Arg
405 410 415
Gly Glu Thr Leu Glu Ile Gly Asn Tyr Ser Phe Tyr Ala Leu Asp Asn
420 425 430
Gln Asn Leu Arg Gln Leu Trp Asp Trp Ser Lys His Asn Leu Thr Ile
435 440 445
Thr Gln Gly Lys Leu Phe Phe His Tyr Asn Pro Lys Leu Cys Leu Ser
450 455 460
Glu Ile His Lys Met Glu Glu Val Ser Gly Thr Lys Gly Arg Gln Glu
465 470 475 480
Arg Asn Asp Ile Ala Leu Lys Thr Asn Gly Asp Gln Ala Ser Cys Glu
485 490 495
Asn Glu Leu Leu Lys Phe Ser Tyr Ile Arg Thr Ser Phe Asp Lys Ile
500 505 510
Leu Leu Arg Trp Glu Pro Tyr Trp Pro Pro Asp Phe Arg Asp Leu Leu
515 520 525
Gly Phe Met Leu Phe Tyr Lys Glu Ala Pro Tyr Gln Asn Val Thr Glu
530 535 540
Phe Asp Gly Gln Asp Ala Cys Gly Ser Asn Ser Trp Thr Val Val Asp
545 550 555 560
Ile Asp Pro Pro Leu Arg Ser Asn Asp Pro Lys Ser Gln Asn His Pro
565 570 575
Gly Trp Leu Met Arg Gly Leu Lys Pro Trp Thr Gln Tyr Ala Ile Phe
580 585 590
Val Lys Thr Leu Val Thr Phe Ser Asp Glu Arg Arg Thr Tyr Gly Ala
595 600 605
Lys Ser Asp Ile Ile Tyr Val Gln Thr Asp Ala Thr Asn Pro Ser Val
610 615 620
Pro Leu Asp Pro Ile Ser Val Ser Asn Ser Ser Ser Gln Ile Ile Leu
625 630 635 640
Lys Trp Lys Pro Pro Ser Asp Pro Asn Gly Asn Ile Thr His Tyr Leu
645 650 655
Val Phe Trp Glu Arg Gln Ala Glu Asp Ser Glu Leu Phe Glu Leu Asp
660 665 670
Tyr Cys Leu Lys Gly Leu Lys Leu Pro Ser Arg Thr Trp Ser Pro Pro
675 680 685
Phe Glu Ser Glu Asp Ser Gln Lys His Asn Gln Ser Glu Tyr Glu Asp
690 695 700
Ser Ala Gly Glu Cys Cys Ser Cys Pro Lys Thr Asp Ser Gln Ile Leu
705 710 715 720
Lys Glu Leu Glu Glu Ser Ser Phe Arg Lys Thr Phe Glu Asp Tyr Leu
725 730 735
His Asn Val Val Phe Val Pro Arg Lys Thr Ser Ser Gly Thr Gly Ala
740 745 750
Glu Asp Pro Arg Pro Ser Arg Lys Arg Arg Ser Leu Gly Asp Val Gly
755 760 765
Asn Val Thr Val Ala Val Pro Thr Val Ala Ala Phe Pro Asn Thr Ser
770 775 780
Ser Thr Ser Val Pro Thr Ser Pro Glu Glu His Arg Pro Phe Glu Lys
785 790 795 800
Val Val Asn Lys Glu Ser Leu Val Ile Ser Gly Leu Arg His Phe Thr
805 810 815
Gly Tyr Arg Ile Glu Leu Gln Ala Cys Asn Gln Asp Thr Pro Glu Glu
820 825 830
Arg Cys Ser Val Ala Ala Tyr Val Ser Ala Arg Thr Met Pro Glu Ala
835 840 845
Lys Ala Asp Asp Ile Val Gly Pro Val Thr His Glu Ile Phe Glu Asn
850 855 860
Asn Val Val His Leu Met Trp Gln Glu Pro Lys Glu Pro Asn Gly Leu
865 870 875 880
Ile Val Leu Tyr Glu Val Ser Tyr Arg Arg Tyr Gly Asp Glu Glu Leu
885 890 895
His Leu Cys Val Ser Arg Lys His Phe Ala Leu Glu Arg Gly Cys Arg
900 905 910
Leu Arg Gly Leu Ser Pro Gly Asn Tyr Ser Val Arg Ile Arg Ala Thr
915 920 925
Ser Leu Ala Gly Asn Gly Ser Trp Thr Glu Pro Thr Tyr Phe Tyr Val
930 935 940
Thr Asp Tyr Leu Asp Val Pro Ser Asn Ile Ala Lys Ile Ile Ile Gly
945 950 955 960
Pro Leu Ile Phe Val Phe Leu Phe Ser Val Val Ile Gly Ser Ile Tyr
965 970 975
Leu Phe Leu Arg Lys Arg Gln Pro Asp Gly Pro Leu Gly Pro Leu Tyr
980 985 990
Ala Ser Ser Asn Pro Glu Tyr Leu Ser Ala Ser Asp Val Phe Pro Cys
995 1000 1005
Ser Val Tyr Val Pro Asp Glu Trp Glu Val Ser Arg Glu Lys Ile
1010 1015 1020
Thr Leu Leu Arg Glu Leu Gly Gln Gly Ser Phe Gly Met Val Tyr
1025 1030 1035
Glu Gly Asn Ala Arg Asp Ile Ile Lys Gly Glu Ala Glu Thr Arg
1040 1045 1050
Val Ala Val Lys Thr Val Asn Glu Ser Ala Ser Leu Arg Glu Arg
1055 1060 1065
Ile Glu Phe Leu Asn Glu Ala Ser Val Met Lys Gly Phe Thr Cys
1070 1075 1080
His His Val Val Arg Leu Leu Gly Val Val Ser Lys Gly Gln Pro
1085 1090 1095
Thr Leu Val Val Met Glu Leu Met Ala His Gly Asp Leu Lys Ser
1100 1105 1110
Tyr Leu Arg Ser Leu Arg Pro Glu Ala Glu Asn Asn Pro Gly Arg
1115 1120 1125
Pro Pro Pro Thr Leu Gln Glu Met Ile Gln Met Ala Ala Glu Ile
1130 1135 1140
Ala Asp Gly Met Ala Tyr Leu Asn Ala Lys Lys Phe Val His Arg
1145 1150 1155
Asp Leu Ala Ala Arg Asn Cys Met Val Ala His Asp Phe Thr Val
1160 1165 1170
Lys Ile Gly Asp Phe Gly Met Thr Arg Asp Ile Tyr Glu Thr Asp
1175 1180 1185
Tyr Tyr Arg Lys Gly Gly Lys Gly Leu Leu Pro Val Arg Trp Met
1190 1195 1200
Ala Pro Glu Ser Leu Lys Asp Gly Val Phe Thr Thr Ser Ser Asp
1205 1210 1215
Met Trp Ser Phe Gly Val Val Leu Trp Glu Ile Thr Ser Leu Ala
1220 1225 1230
Glu Gln Pro Tyr Gln Gly Leu Ser Asn Glu Gln Val Leu Lys Phe
1235 1240 1245
Val Met Asp Gly Gly Tyr Leu Asp Gln Pro Asp Asn Cys Pro Glu
1250 1255 1260
Arg Val Thr Asp Leu Met Arg Met Cys Trp Gln Phe Asn Pro Lys
1265 1270 1275
Met Arg Pro Thr Phe Leu Glu Ile Val Asn Leu Leu Lys Asp Asp
1280 1285 1290
Leu His Pro Ser Phe Pro Glu Val Ser Phe Phe His Ser Glu Glu
1295 1300 1305
Asn Lys Ala Pro Glu Ser Glu Glu Leu Glu Met Glu Phe Glu Asp
1310 1315 1320
Met Glu Asn Val Pro Leu Asp Arg Ser Ser His Cys Gln Arg Glu
1325 1330 1335
Glu Ala Gly Gly Arg Asp Gly Gly Ser Ser Leu Gly Phe Lys Arg
1340 1345 1350
Ser Tyr Glu Glu His Ile Pro Tyr Thr His Met Asn Gly Gly Lys
1355 1360 1365
Lys Asn Gly Arg Ile Leu Thr Leu Pro Arg Ser Asn Pro Ser
1370 1375 1380
<210> 3
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Gal3 Peptide 1
<400> 3
Ala Asp Asn Phe Ser Leu His Asp Ala Leu Ser Gly Ser Gly Asn Pro
1 5 10 15
Asn Pro Gln Gly
20
<210> 4
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Gal3 Peptide 2
<400> 4
Ser Gly Ser Gly Asn Pro Asn Pro Gln Gly Trp Pro Gly Ala Trp Gly
1 5 10 15
Asn Gln Pro Ala
20
<210> 5
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Gal3 Peptide 3
<400> 5
Trp Pro Gly Ala Trp Gly Asn Gln Pro Ala Gly Ala Gly Gly Tyr Pro
1 5 10 15
Gly Ala Ser Tyr
20
<210> 6
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Gal3 Peptide 4
<400> 6
Gly Ala Gly Gly Tyr Pro Gly Ala Ser Tyr Pro Gly Ala Tyr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Ala Pro Pro
20
<210> 7
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Gal3 Peptide 5
<400> 7
Pro Gly Ala Tyr Pro Gly Gln Ala Pro Pro Gly Ala Tyr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ala Pro Pro Gly
20
<210> 8
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Gal3 Peptide 6
<400> 8
Gly Ala Tyr Pro Gly Gln Ala Pro Pro Gly Ala Tyr Pro Gly Ala Pro
1 5 10 15
Gly Ala Tyr Pro
20
<210> 9
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Gal3 Peptide 7
<400> 9
Ala Tyr Pro Gly Ala Pro Gly Ala Tyr Pro Gly Ala Pro Ala Pro Gly
1 5 10 15
Val Tyr Pro Gly
20
<210> 10
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Gal3 Peptide 8
<400> 10
Gly Ala Pro Ala Pro Gly Val Tyr Pro Gly Pro Pro Ser Gly Pro Gly
1 5 10 15
Ala Tyr Pro Ser
20
<210> 11
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Gal3 Peptide 9
<400> 11
Pro Pro Ser Gly Pro Gly Ala Tyr Pro Ser Ser Gly Gln Pro Ser Ala
1 5 10 15
Thr Gly Ala Tyr
20
<210> 12
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Gal3 Peptide 10
<400> 12
Ser Gly Gln Pro Ser Ala Thr Gly Ala Tyr Pro Ala Thr Gly Pro Tyr
1 5 10 15
Gly Ala Pro Ala
20
<210> 13
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Gal3 Peptide 11
<400> 13
Pro Ala Thr Gly Pro Tyr Gly Ala Pro Ala Gly Pro Leu Ile Val Pro
1 5 10 15
Tyr Asn Leu Pro
20
<210> 14
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Gal3 Peptide 12
<400> 14
Gly Pro Leu Ile Val Pro Tyr Asn Leu Pro Leu Pro Gly Gly Val Val
1 5 10 15
Pro Arg Met Leu
20
<210> 15
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Gal3 Peptide 13
<400> 15
Leu Pro Gly Gly Val Val Pro Arg Met Leu Ile Thr Ile Leu Gly Thr
1 5 10 15
Val Lys Pro Asn
20
<210> 16
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Gal3 Peptide 14
<400> 16
Ile Thr Ile Leu Gly Thr Val Lys Pro Asn Ala Asn Arg Ile Ala Leu
1 5 10 15
Asp Phe Gln Arg
20
<210> 17
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Gal3 Peptide 15
<400> 17
Ala Asn Arg Ile Ala Leu Asp Phe Gln Arg Gly Asn Asp Val Ala Phe
1 5 10 15
His Phe Asn Pro
20
<210> 18
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Gal3 Peptide 16
<400> 18
Gly Asn Asp Val Ala Phe His Phe Asn Pro Arg Phe Asn Glu Asn Asn
1 5 10 15
Arg Arg Val Ile
20
<210> 19
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Gal3 Peptide 17
<400> 19
Arg Phe Asn Glu Asn Asn Arg Arg Val Ile Val Cys Asn Thr Lys Leu
1 5 10 15
Asp Asn Asn Trp
20
<210> 20
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Gal3 Peptide 18
<400> 20
Val Cys Asn Thr Lys Leu Asp Asn Asn Trp Gly Arg Glu Glu Arg Gln
1 5 10 15
Ser Val Phe Pro
20
<210> 21
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Gal3 Peptide 19
<400> 21
Gly Arg Glu Glu Arg Gln Ser Val Phe Pro Phe Glu Ser Gly Lys Pro
1 5 10 15
Phe Lys Ile Gln
20
<210> 22
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Gal3 Peptide 20
<400> 22
Phe Glu Ser Gly Lys Pro Phe Lys Ile Gln Val Leu Val Glu Pro Asp
1 5 10 15
His Phe Lys Val
20
<210> 23
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Gal3 Peptide 21
<400> 23
Val Leu Val Glu Pro Asp His Phe Lys Val Ala Val Asn Asp Ala His
1 5 10 15
Leu Leu Gln Tyr
20
<210> 24
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Gal3 Peptide 22
<400> 24
Ala Val Asn Asp Ala His Leu Leu Gln Tyr Asn His Arg Val Lys Lys
1 5 10 15
Leu Asn Glu Ile
20
<210> 25
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Gal3 Peptide 23
<400> 25
Asn His Arg Val Lys Lys Leu Asn Glu Ile Ser Lys Leu Gly Ile Ser
1 5 10 15
Gly Asp Ile Asp
20
<210> 26
<211> 19
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Gal3 Peptide 24
<400> 26
Ser Lys Leu Gly Ile Ser Gly Asp Ile Asp Leu Thr Ser Ala Ser Tyr
1 5 10 15
Thr Met Ile
<210> 27
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR1_1
<400> 27
Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr
1 5
<210> 28
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR1_2
<400> 28
Gly Tyr Thr Phe Ser Asp Tyr
1 5
<210> 29
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR1_3
<400> 29
Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
1 5
<210> 30
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR1_4
<400> 30
Gly Tyr Ser Phe Thr Asn Tyr
1 5
<210> 31
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR1_5
<400> 31
Gly Tyr Ala Phe Thr Thr Tyr
1 5
<210> 32
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR1_6
<400> 32
Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Phe
1 5
<210> 33
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR1_7
<400> 33
Gly Tyr Lys Phe Lys Thr Tyr
1 5
<210> 34
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR1_8
<400> 34
Gly Phe Ala Phe Ser Ser Tyr
1 5
<210> 35
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR1_9
<400> 35
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
1 5
<210> 36
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR1_10
<400> 36
Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr
1 5
<210> 37
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR1_11
<400> 37
Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
1 5
<210> 38
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR1_12
<400> 38
Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
1 5
<210> 39
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR1_13
<400> 39
Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Gly
1 5
<210> 40
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR1_14
<400> 40
Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Phe Gly
1 5
<210> 41
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR1_15
<400> 41
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala
1 5
<210> 42
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR1_16
<400> 42
Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser Gly Met Gly
1 5 10
<210> 43
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR1_17
<400> 43
Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Gly
1 5
<210> 44
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR1_18
<400> 44
Gly Tyr Ile Phe Thr Asn Tyr Gly
1 5
<210> 45
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR1_19
<400> 45
Gly Asn Thr Phe Thr Asp His Asn
1 5
<210> 46
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR1_20
<400> 46
Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Trp
1 5
<210> 47
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR1_21
<400> 47
Gly Phe Ser Leu Ser Thr Phe Gly Met Gly
1 5 10
<210> 48
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR2_1
<400> 48
Ile Asn Thr Tyr Ser Gly Val Pro
1 5
<210> 49
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR2_2
<400> 49
Ile Tyr Pro Val Ser Val Asn Thr
1 5
<210> 50
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR2_3
<400> 50
Ile Tyr Pro Gly Ser Asn Asp Thr
1 5
<210> 51
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR2_4
<400> 51
Ile Tyr Pro Gly Ser Gly Asn Thr
1 5
<210> 52
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR2_5
<400> 52
Val Asn Thr Tyr Ser Gly Val Pro
1 5
<210> 53
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR2_6
<400> 53
Ile Asn Pro Asn Asn Gly Gly Thr
1 5
<210> 54
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR2_7
<400> 54
Ile Asn Pro Lys Asn Gly Gly Ile
1 5
<210> 55
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR2_8
<400> 55
Ile Asn Thr His Ser Gly Val Pro
1 5
<210> 56
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR2_9
<400> 56
Ile Ser Asp Gly Gly Val Tyr Thr
1 5
<210> 57
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR2_10
<400> 57
Ile Ser Asp Gly Gly Ile Tyr Thr
1 5
<210> 58
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR2_11
<400> 58
Ile Tyr Pro Gly Thr Gly Asn Thr
1 5
<210> 59
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR2_12
<400> 59
Ile Trp Ser Gly Gly Ser Thr
1 5
<210> 60
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR2_13
<400> 60
Ile His Pro Asn Ser Gly Ser Thr
1 5
<210> 61
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR2_14
<400> 61
Ile Asp Pro Ser Asp Ser Glu Thr
1 5
<210> 62
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR2_15
<400> 62
Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro
1 5
<210> 63
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR2_16
<400> 63
Ile Ser Ser Gly Gly Asp Thr
1 5
<210> 64
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR2_17
<400> 64
Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys
1 5
<210> 65
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR2_18
<400> 65
Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr
1 5
<210> 66
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR2_19
<400> 66
Ile Tyr Pro Tyr Asn Gly Gly Thr
1 5
<210> 67
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR2_20
<400> 67
Ile Ser Ser Gly Gly Ser Thr
1 5
<210> 68
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR2_21
<400> 68
Ile Tyr Pro Gly Ser Ser Ser Ile
1 5
<210> 69
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR2_22
<400> 69
Asn Thr Asn Thr Gly Glu
1 5
<210> 70
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_1
<400> 70
Ala Val Pro Tyr Glu Tyr Asp Gly Ala Tyr
1 5 10
<210> 71
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_2
<400> 71
Ser Thr Pro Tyr Glu Tyr Asp Gly Ala Tyr
1 5 10
<210> 72
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_3
<400> 72
Ala Thr Pro Tyr Glu Tyr Asp Gly Ala Tyr
1 5 10
<210> 73
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_4
<400> 73
Ala Tyr Leu Asp Tyr
1 5
<210> 74
<211> 13
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_5
<400> 74
Ala Asn Tyr Phe Gly Cys Ser Gly Trp Phe Phe Asp Val
1 5 10
<210> 75
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_6
<400> 75
Ser Thr Ala Pro Gly Gly Phe Asp Val
1 5
<210> 76
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_7
<400> 76
Ala Arg Gly Pro Tyr Ala Met Asp Tyr
1 5
<210> 77
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_8
<400> 77
Thr Ser Gly Tyr Gly Phe Pro Tyr
1 5
<210> 78
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_9
<400> 78
Thr Arg Asp Gly Asn Asp Gly Asp Ala Met Asp Asn
1 5 10
<210> 79
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_10
<400> 79
Ala Arg Asp Gly Asn Tyr Gly Asp Pro Met Asp Tyr
1 5 10
<210> 80
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_11
<400> 80
Val Arg Asp Gly Gly Tyr
1 5
<210> 81
<211> 15
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_12
<400> 81
Ala Arg Phe Ala Tyr Tyr Tyr Gly Ser Gly Gly Tyr Phe Asp Tyr
1 5 10 15
<210> 82
<211> 14
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_13
<400> 82
Ala Lys Ser Pro Asp Gly Tyr Asp Val Ala Trp Phe Gly Tyr
1 5 10
<210> 83
<211> 14
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_14
<400> 83
Ala Lys Gly Pro Tyr Asp Tyr Asp Leu Gly Trp Phe Ala Tyr
1 5 10
<210> 84
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_15
<400> 84
Thr Arg Trp Gly Ile Tyr Tyr Tyr Ala Arg Asp Tyr
1 5 10
<210> 85
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_16
<400> 85
Ala Arg His Gly Tyr Tyr Asp Tyr
1 5
<210> 86
<211> 15
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_17
<400> 86
Ala Arg Trp Gly Gly Tyr Ala Gly Asp Tyr Tyr Ala Met Asp Phe
1 5 10 15
<210> 87
<211> 15
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_18
<400> 87
Ala Arg Trp Gly Gly Tyr Asp Gly Asp Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr
1 5 10 15
<210> 88
<211> 15
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_19
<400> 88
Ala Arg Trp Gly Gly Tyr Ala Gly Asp Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr
1 5 10 15
<210> 89
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_20
<400> 89
Ala Ser Tyr Gly Asn Ser Leu Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 90
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_21
<400> 90
Val Arg Tyr Thr Met Asp Tyr
1 5
<210> 91
<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_22
<400> 91
Ala Arg Asn Leu Tyr Asp Gly Ser Tyr Gly Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr
1 5 10 15
<210> 92
<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_23
<400> 92
Ala Arg His Ala His Tyr Tyr Gly Val Ser Pro Tyr Tyr Phe Asp Tyr
1 5 10 15
<210> 93
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_24
<400> 93
Ala Lys Phe Gly Asn Tyr Val Gly Ala Met Asp Tyr
1 5 10
<210> 94
<211> 13
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_25
<400> 94
Ala Arg Gly Glu Tyr Asp Tyr Leu Ala Trp Phe Ala Tyr
1 5 10
<210> 95
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_26
<400> 95
Thr Arg Phe Thr Thr Val Val Glu Met Asp Tyr
1 5 10
<210> 96
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_27
<400> 96
Ala Arg Trp Gly Tyr
1 5
<210> 97
<211> 13
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_28
<400> 97
Ala Arg Ile Asp Tyr Gly Asp Tyr Val Gly Phe Ala Tyr
1 5 10
<210> 98
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_29
<400> 98
Ala Arg Tyr Pro Met Asp Tyr
1 5
<210> 99
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH_CDR3_30
<400> 99
Ala Pro Tyr Asp Asn Phe Phe Ala Tyr
1 5
<210> 100
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR1_1
<400> 100
Gln Ser Leu Phe His Ser Asp Gly Lys Thr Tyr
1 5 10
<210> 101
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR1_2
<400> 101
Gln Ser Leu Phe Asp Ser Asp Gly Lys Thr Tyr
1 5 10
<210> 102
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR1_3
<400> 102
Gln Ser Leu Leu His Ser Asp Gly Lys Thr Tyr
1 5 10
<210> 103
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR1_4
<400> 103
Lys Ser Leu Leu His Ser Asp Gly Ile Thr Tyr
1 5 10
<210> 104
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR1_5
<400> 104
Gln Gly Ile Asn Asn Tyr
1 5
<210> 105
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR1_6
<400> 105
Gln Asp Ile Ser Asn Tyr
1 5
<210> 106
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR1_7
<400> 106
Gln Gly Ile Ser Asn Tyr
1 5
<210> 107
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR1_8
<400> 107
Gln Asn Ile Asn Ile Trp
1 5
<210> 108
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR1_9
<400> 108
Gln Asn Ile Tyr Ile Trp
1 5
<210> 109
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR1_10
<400> 109
Gln Ser Leu Leu Tyr Thr Asp Gly Lys Thr Tyr
1 5 10
<210> 110
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR1_11
<400> 110
Gln Ser Leu Leu Tyr Thr Asn Gly Lys Thr Tyr
1 5 10
<210> 111
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR1_12
<400> 111
Gln Ser Ile Val His Asn Asn Gly Asn Thr Tyr
1 5 10
<210> 112
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR1_13
<400> 112
Gln Ser Ile Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr
1 5 10
<210> 113
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR1_14
<400> 113
Gln Gly Ile Asn Ser Asn
1 5
<210> 114
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR1_15
<400> 114
Gln Asp Val Arg Thr Ala
1 5
<210> 115
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR1_16
<400> 115
Gln Ser Val Ser Asn Asp
1 5
<210> 116
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR1_17
<400> 116
Gln Asn Val Gly Thr Asn
1 5
<210> 117
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR1_18
<400> 117
Gln Asp Val Ser Thr Ala
1 5
<210> 118
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR1_19
<400> 118
Gln Ser Val Leu Tyr Ser Ser Asn Gln Lys Asn Tyr
1 5 10
<210> 119
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR1_20
<400> 119
Gln Ser Val Leu Tyr Ser Ser Ser Gln Lys Asn Tyr
1 5 10
<210> 120
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR1_21
<400> 120
Gln Ser Leu Val His Asn Ser Gly Asn Thr Tyr
1 5 10
<210> 121
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR1_22
<400> 121
Thr Gly Ala Val Thr Thr Ser Asn Tyr
1 5
<210> 122
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR1_23
<400> 122
Lys Ser Leu Leu His Thr Asn Gly Ile Thr Phe
1 5 10
<210> 123
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR1_24
<400> 123
Gln Ser Leu Leu Asn Ser Ser Asn Gln Lys Asn Tyr
1 5 10
<210> 124
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR1_25
<400> 124
Gln Asn Ile Asn Val Trp
1 5
<210> 125
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR1_26
<400> 125
Ile Asp Ile Asp Asp Asp
1 5
<210> 126
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR1_27
<400> 126
Gln Asp Ile Val His Ser Ser Gly Asn Thr Tyr
1 5 10
<210> 127
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR1_28
<400> 127
Lys Ser Leu Leu Tyr Ser Asn Gly Ile Thr Tyr
1 5 10
<210> 128
<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR1_29
<400> 128
Arg Ser Ser Lys Ser Leu Leu Tyr Lys Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn
1 5 10 15
<210> 129
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR2_1
<400> 129
Leu Val Ser
1
<210> 130
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR2_2
<400> 130
Arg Met Ser
1
<210> 131
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR2_3
<400> 131
Tyr Ala Ser
1
<210> 132
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR2_4
<400> 132
Tyr Thr Ser
1
<210> 133
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR2_5
<400> 133
Lys Ala Ser
1
<210> 134
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR2_6
<400> 134
Leu Leu Ser
1
<210> 135
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR2_7
<400> 135
Lys Val Ser
1
<210> 136
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR2_8
<400> 136
His Ala Thr
1
<210> 137
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR2_9
<400> 137
Trp Ala Ser
1
<210> 138
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR2_10
<400> 138
Gly Ala Ser
1
<210> 139
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR2_11
<400> 139
Gly Ile Asn
1
<210> 140
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR2_12
<400> 140
Gln Met Ser
1
<210> 141
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR2_13
<400> 141
Phe Ala Ser
1
<210> 142
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR2_14
<400> 142
Glu Gly Asn
1
<210> 143
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR2_15
<400> 143
Gly Thr Asn
1
<210> 144
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR2_16
<400> 144
Leu Met Ser Thr His Ala Ser
1 5
<210> 145
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR3_1
<400> 145
Trp Gln Gly Thr His Phe Pro Leu Thr
1 5
<210> 146
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR3_2
<400> 146
Ala Gln Met Leu Glu Phe Pro Leu Thr
1 5
<210> 147
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR3_3
<400> 147
Ala Gln Met Ile Glu Phe Pro Leu Thr
1 5
<210> 148
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR3_4
<400> 148
Gln Gln Tyr Ser Gln Val Pro Tyr Thr
1 5
<210> 149
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR3_5
<400> 149
Gln Gln Tyr Ser Lys Leu Pro Tyr Thr
1 5
<210> 150
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR3_6
<400> 150
Gln Gln Tyr Ser Glu Leu Pro Tyr Thr
1 5
<210> 151
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR3_7
<400> 151
Leu Gln Gly Gln Ser Tyr Pro Leu Thr
1 5
<210> 152
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR3_8
<400> 152
Leu Gln Ser Thr His Phe Pro Leu Thr
1 5
<210> 153
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR3_9
<400> 153
Phe Gln Gly Ser His Val Pro Leu Thr
1 5
<210> 154
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR3_10
<400> 154
Val Gln Tyr Ala Gln Phe Pro Pro Thr
1 5
<210> 155
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR3_11
<400> 155
Gln Gln Tyr Ser Ser Tyr Pro Trp Thr
1 5
<210> 156
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR3_12
<400> 156
Gln Gln Asp Tyr Thr Ser Pro Tyr Thr
1 5
<210> 157
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR3_13
<400> 157
Glu Gln Tyr Ser Asn Phe Pro Leu Thr
1 5
<210> 158
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR3_14
<400> 158
Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Leu Thr
1 5
<210> 159
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR3_15
<400> 159
His Gln Tyr Leu Ser Ser Leu Thr
1 5
<210> 160
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR3_16
<400> 160
Ser Gln Ser Thr His Val Pro Pro Thr
1 5
<210> 161
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR3_17
<400> 161
Ala Leu Trp Tyr Ser Asn His Trp Val
1 5
<210> 162
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR3_18
<400> 162
Ala Gln Asn Leu Glu Leu Pro Trp Thr
1 5
<210> 163
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR3_19
<400> 163
Gln Gln His Tyr Ser Thr Pro Tyr Thr
1 5
<210> 164
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR3_20
<400> 164
Gln Gln Gly Gln Ser Tyr Pro Tyr Thr
1 5
<210> 165
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR3_21
<400> 165
Leu Gln Ser Asp Asn Lys Pro Leu Thr
1 5
<210> 166
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR3_22
<400> 166
Ala Leu Trp Tyr Ser Asn His Leu Val
1 5
<210> 167
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR3_23
<400> 167
Phe Gln Gly Ser His Val Pro Pro Thr
1 5
<210> 168
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-CDR3_24
<400> 168
Gln Gln Leu Val Asp Tyr Pro Leu Thr
1 5
<210> 169
<211> 117
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-1
<400> 169
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Ser Gly Val Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Val Pro Tyr Glu Tyr Asp Gly Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ala
115
<210> 170
<211> 117
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-2
<400> 170
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr
20 25 30
Gly Met Gly Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Asp Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Ser Gly Val Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Ser Asn Leu Lys Asn Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ser Thr Pro Tyr Glu Tyr Asp Gly Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ala
115
<210> 171
<211> 117
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-3
<400> 171
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr
20 25 30
Gly Met Gly Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Ser Gly Val Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Met Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Thr Pro Tyr Glu Tyr Asp Gly Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ala
115
<210> 172
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-4
<400> 172
Gln Val Gln Leu Lys Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Asp
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ala Gly Tyr Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Ile Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Trp Ile Tyr Pro Val Ser Val Asn Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Gly Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Tyr Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala
100 105 110
<210> 173
<211> 120
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-5
<400> 173
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Tyr Ile Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Trp Ile Tyr Pro Gly Ser Asn Asp Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Gly Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Asn Tyr Phe Gly Cys Ser Gly Trp Phe Phe Asp Val Trp Gly Thr
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 174
<211> 116
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-6
<400> 174
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Trp Ile Tyr Pro Gly Ser Gly Asn Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Ser Ser Thr Thr Asn
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ser Thr Ala Pro Gly Gly Phe Asp Val Trp Gly Ser Gly Thr Thr Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 175
<211> 116
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-7
<400> 175
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Ser Gly Val Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Leu
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Pro Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 176
<211> 116
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-8
<400> 176
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Thr Thr Tyr
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Gln Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Val Asn Thr Tyr Ser Gly Val Pro Thr Cys Ala Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Asn Asn Leu Arg Asn Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Pro Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 177
<211> 116
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-9
<400> 177
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Ala Trp Ile Asn Thr Tyr Ser Gly Val Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Asn Asn Leu Thr Asn Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Pro Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 178
<211> 115
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-10
<400> 178
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met Asn Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Asp Ile Asn Pro Asn Asn Gly Gly Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Ser Gly Tyr Gly Phe Pro Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ala
115
<210> 179
<211> 115
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-11
<400> 179
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Phe
20 25 30
Tyr Ile Asn Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Asp Ile Asn Pro Lys Asn Gly Gly Ile Asn Tyr Asn Pro Lys Phe
50 55 60
Lys Ile Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ser Tyr
65 70 75 80
Met Asp Leu Arg Gly Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Ser Gly Tyr Gly Phe Pro Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ala
115
<210> 180
<211> 119
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-12
<400> 180
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Asp Leu Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr
20 25 30
Val Met Ser Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Asp Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr His Ser Gly Val Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Asp Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Asn Thr Ala Phe
65 70 75 80
Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Thr Arg Asp Gly Asn Asp Gly Asp Ala Met Asp Asn Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 181
<211> 119
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-13
<400> 181
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Thr Ser Gly Tyr Lys Phe Lys Thr Tyr
20 25 30
Val Met Ser Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Ala Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Ser Gly Val Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Glu Ile Ile Asn Leu Lys Asn Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Gly Asn Tyr Gly Asp Pro Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 182
<211> 113
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-14
<400> 182
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ala Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Thr Ile Ser Asp Gly Gly Val Tyr Thr Tyr Tyr Thr Asp His Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asp Asn Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Ser His Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Val Arg Asp Gly Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser
100 105 110
Ser
<210> 183
<211> 113
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-15
<400> 183
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Thr Ile Ser Asp Gly Gly Ile Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Asn Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Asn Leu Phe
65 70 75 80
Leu Gln Met Ser His Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Val Arg Asp Gly Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser
100 105 110
Ser
<210> 184
<211> 122
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-16
<400> 184
Gln Val Gln Leu Lys Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Tyr Ile Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Ala Arg Ile Tyr Pro Gly Thr Gly Asn Thr Asp Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Ala Thr Leu Thr Ala Glu Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Phe Ala Tyr Tyr Tyr Gly Ser Gly Gly Tyr Phe Asp Tyr Trp
100 105 110
Gly His Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 185
<211> 120
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-17
<400> 185
Gln Val Gln Leu Lys Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Gln Pro Ser Gln
1 5 10 15
Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr
20 25 30
Gly Val His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Gly Val Ile Trp Ser Gly Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Ala Ala Phe Met
50 55 60
Ser Arg Leu Ser Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Phe
65 70 75 80
Lys Met Asn Ser Leu Gln Ala Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Lys Ser Pro Asp Gly Tyr Asp Val Ala Trp Phe Gly Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala
115 120
<210> 186
<211> 120
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-18
<400> 186
Gln Val Gln Leu Lys Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Gln Pro Ser Gln
1 5 10 15
Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr
20 25 30
Gly Val His Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Gly Val Ile Trp Ser Gly Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Ala Ala Phe Ile
50 55 60
Ser Arg Leu Ser Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Phe
65 70 75 80
Lys Met Asn Ser Leu Gln Ala Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Lys Gly Pro Tyr Asp Tyr Asp Leu Gly Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala
115 120
<210> 187
<211> 119
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-19
<400> 187
Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Met Ile His Pro Asn Ser Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Lys Ala Thr Leu Asn Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Ile Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Arg Trp Gly Ile Tyr Tyr Tyr Ala Arg Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser
115
<210> 188
<211> 115
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-20
<400> 188
Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Gly Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Trp Ile His Trp Val Lys Gln Arg Pro Leu Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Asn Ile Asp Pro Ser Asp Ser Glu Thr His Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Tyr Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr
100 105 110
Val Ser Ser
115
<210> 189
<211> 122
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-21
<400> 189
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Gly Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Ser Tyr Ala Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Met Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Trp Gly Gly Tyr Ala Gly Asp Tyr Tyr Ala Met Asp Phe Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 190
<211> 122
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-22
<400> 190
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Gly Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Ser Tyr Ala Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Met Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Trp Gly Gly Tyr Asp Gly Asp Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 191
<211> 122
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-23
<400> 191
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Phe
20 25 30
Gly Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Ser Tyr Ala Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Trp Gly Gly Tyr Ala Gly Asp Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 192
<211> 116
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-24
<400> 192
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Ser Ile Ser Ser Gly Gly Asp Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Arg Asn Ile Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Ser Tyr Gly Asn Ser Leu Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 193
<211> 114
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-25
<400> 193
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Gly Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Gly Asp Leu
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Val Arg Tyr Thr Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val
100 105 110
Ser Ser
<210> 194
<211> 124
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-26
<400> 194
Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Ile Leu Gln Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ser Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser
20 25 30
Gly Met Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Ser Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Leu Ala His Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Thr Ala
50 55 60
Leu Lys Ser Gly Leu Thr Ile Ser Lys Asp Ala Ser Lys Asn Gln Val
65 70 75 80
Phe Leu Lys Ile Ala Ser Met Asp Thr Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Asn Leu Tyr Asp Gly Ser Tyr Gly Tyr Tyr Ala Met Asp
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 195
<211> 122
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-27
<400> 195
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Gly Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Ala Tyr Ala Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Met Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Trp Gly Gly Tyr Asp Gly Asp Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 196
<211> 123
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-28
<400> 196
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Gly Leu Ser Trp Ile Arg Gln Thr Pro Asp Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Thr Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Ser Ala Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Ala His Tyr Tyr Gly Val Ser Pro Tyr Tyr Phe Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Cys Leu Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 197
<211> 119
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-29
<400> 197
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Gly Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Thr Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Lys Phe Gly Asn Tyr Val Gly Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 198
<211> 120
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-30
<400> 198
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Asn Thr Phe Thr Asp His
20 25 30
Asn Met His Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Tyr Pro Tyr Asn Gly Gly Thr Gly Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Ser Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Asn Ser Ser Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Glu Tyr Asp Tyr Leu Ala Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala
115 120
<210> 199
<211> 119
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-31
<400> 199
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Gly Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Val Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Arg Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Lys Phe Gly Asn Tyr Val Gly Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 200
<211> 117
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-32
<400> 200
Glu Val Gln Leu Val Glu Thr Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Ser Ile Ser Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Arg Asn Ile Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Thr
85 90 95
Arg Phe Thr Thr Val Val Glu Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 201
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-33
<400> 201
Gln Val Gln Leu Gln Gln Thr Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Asn Ile Tyr Pro Gly Ser Ser Ser Ile Tyr Tyr Ser Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Ser Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Asp Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Trp Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser
100 105 110
<210> 202
<211> 121
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-34
<400> 202
Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Ile Leu Gln Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ser Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Phe
20 25 30
Gly Met Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Ser Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Leu Ala His Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys His Tyr Asn Pro Ala
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val
65 70 75 80
Phe Leu Arg Ile Ala Asn Val Asp Thr Ala Asp Asn Ala Thr Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Ile Asp Tyr Gly Asp Tyr Val Gly Phe Ala Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala
115 120
<210> 203
<211> 114
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-35
<400> 203
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Thr Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Glu Thr Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Ser Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Val Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Pro Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val
100 105 110
Ser Ser
<210> 204
<211> 116
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-36
<400> 204
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Asn Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Val Glu Glu Phe
50 55 60
Thr Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Glu Thr Ser Val Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Pro Tyr Asp Asn Phe Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 205
<211> 116
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-37
<400> 205
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Arg Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Tyr Pro Gly Ser Gly Asn Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ser Thr Ala Pro Gly Gly Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 206
<211> 116
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-38
<400> 206
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Gly Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Asn Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Val Glu Glu Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Pro Tyr Asp Asn Phe Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ala
115
<210> 207
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-1
<400> 207
Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Leu Ser Val Thr Ile Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Phe His Ser
20 25 30
Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly
85 90 95
Thr His Phe Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Met Lys
100 105 110
<210> 208
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-2
<400> 208
Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Leu Ser Val Thr Ile Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Phe Asp Ser
20 25 30
Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly
85 90 95
Thr His Phe Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Met Lys
100 105 110
<210> 209
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-3
<400> 209
Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Leu Ser Val Thr Ile Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser
20 25 30
Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Pro
35 40 45
Pro Lys Arg Leu Met Tyr Leu Val Ser Thr Leu Asp Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly
85 90 95
Thr His Phe Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Pro Glu Leu Lys
100 105 110
<210> 210
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-4
<400> 210
Asp Ile Val Met Thr Gln Ala Ala Phe Ser Asn Pro Val Thr Leu Gly
1 5 10 15
Thr Ser Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser Leu Leu His Ser
20 25 30
Asp Gly Ile Thr Tyr Phe Tyr Trp Tyr Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Arg Met Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Gln Met
85 90 95
Leu Glu Phe Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Arg Ala
100 105 110
<210> 211
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-5
<400> 211
Asp Ile Val Met Thr Gln Ala Ala Phe Ser Asn Pro Val Thr Leu Gly
1 5 10 15
Thr Ser Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser Leu Leu His Ser
20 25 30
Asp Gly Ile Thr Tyr Leu Tyr Trp Tyr Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Arg Met Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Gln Met
85 90 95
Ile Glu Phe Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Ile Leu Glu Leu Lys
100 105 110
<210> 212
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-6
<400> 212
Asp Ile Val Met Thr Gln Ala Ala Phe Ser Asn Pro Val Thr Leu Gly
1 5 10 15
Thr Ser Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser Leu Leu His Ser
20 25 30
Asp Gly Ile Thr Tyr Leu Tyr Trp Tyr Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Arg Met Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Gln Met
85 90 95
Leu Glu Phe Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105 110
<210> 213
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-7
<400> 213
Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Ala Ser Gln Gly Ile Asn Asn Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Tyr Ala Ser Ser Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Gln Val Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 214
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-8
<400> 214
Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Asn Cys Ser Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Tyr Thr Ser Ser Leu Leu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Ser Lys Leu Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Ser Gly Thr His Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 215
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-9
<400> 215
Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Ala Ser Gln Gly Ile Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Tyr Thr Ser Ser Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Glu Leu Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 216
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-10
<400> 216
Asp Ile Gln Met Asn Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Thr Ile Ser Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Asn Ile Trp
20 25 30
Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Asn Ile Pro Gln Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Gly Gln Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Val Met Lys
100 105
<210> 217
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-11
<400> 217
Asp Ile Gln Met Asn Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Thr Ile Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Tyr Ile Trp
20 25 30
Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Asn Ile Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Thr Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Leu Gln Gly Gln Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Met Lys
100 105
<210> 218
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-12
<400> 218
Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Leu Ser Val Thr Ile Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Thr
20 25 30
Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Ser Trp Phe Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Ser
85 90 95
Thr His Phe Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Val Lys
100 105 110
<210> 219
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-13
<400> 219
Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Leu Ser Val Ala Ile Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Thr
20 25 30
Asn Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Leu Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Ala Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Ser
85 90 95
Thr His Phe Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Met Lys
100 105 110
<210> 220
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-14
<400> 220
Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Leu Ser Val Ala Ile Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Thr
20 25 30
Asn Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Ser
85 90 95
Thr His Phe Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105 110
<210> 221
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-15
<400> 221
Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Asn
20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser His Val Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105 110
<210> 222
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-16
<400> 222
Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser His Val Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105 110
<210> 223
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-17
<400> 223
Asp Ile Leu Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Met Ser Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Thr Val Ser Ile Thr Cys His Ala Ser Gln Gly Ile Asn Ser Asn
20 25 30
Met Gly Trp Leu Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Phe Lys Gly Leu Ile
35 40 45
Tyr His Ala Thr Asn Leu Glu Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Ala Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ser
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Asp Tyr Tyr Cys Val Gln Tyr Ala Gln Phe Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 224
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-18
<400> 224
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser His Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Arg Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Leu Ser Asn Val Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Asp Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Ser Ser Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 225
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-19
<400> 225
Ser Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Lys Phe Leu Leu Val Ser Ala Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Ser Asn Asp
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Tyr Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Thr Val Gln Ala
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Asp Tyr Thr Ser Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 226
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-20
<400> 226
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Gln Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly
1 5 10 15
Glu Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Asn
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Ala Gly Gln Ser Leu Glu Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Gly Ala Ser Asn Arg His Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Thr Asn Val Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Met Thr Asn Tyr Phe Cys Glu Gln Tyr Ser Asn Phe Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105
<210> 227
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-21
<400> 227
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser His Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Ala
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Leu Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105
<210> 228
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-22
<400> 228
Asn Ile Trp Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Val Ser Ala Gly
1 5 10 15
Glu Met Val Thr Met Thr Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser
20 25 30
Ser Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln
85 90 95
Tyr Leu Ser Ser Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105 110
<210> 229
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-23
<400> 229
Asn Ile Met Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Val Ser Ala Gly
1 5 10 15
Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser
20 25 30
Ser Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Val Gln Pro Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln
85 90 95
Tyr Leu Ser Ser Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105 110
<210> 230
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-24
<400> 230
Asn Ile Met Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Val Ser Ala Gly
1 5 10 15
Gln Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser
20 25 30
Ser Ser Gln Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Val Gln Pro Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln
85 90 95
Tyr Leu Ser Ser Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105 110
<210> 231
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-25
<400> 231
Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Asn
20 25 30
Ser Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Asn Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Ala Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Phe Cys Ser Gln Ser
85 90 95
Thr His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 232
<211> 109
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-26
<400> 232
Gln Ala Val Val Thr Gln Glu Ser Ala Leu Thr Thr Ser Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Thr Ser
20 25 30
Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Asp His Leu Phe Thr Gly
35 40 45
Leu Ile Gly Gly Ile Asn Asn Arg Val Pro Gly Val Pro Ala Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Leu Ile Gly Asp Lys Ala Ala Leu Thr Ile Thr Gly Ala
65 70 75 80
Gln Thr Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Phe Cys Ala Leu Trp Tyr Ser Asn
85 90 95
His Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 233
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-27
<400> 233
Asp Ile Val Met Thr Gln Ala Ala Phe Ser Asn Pro Val Thr Leu Gly
1 5 10 15
Thr Ser Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser Leu Leu His Thr
20 25 30
Asn Gly Ile Thr Phe Leu Tyr Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Pro Leu Ile Tyr Gln Met Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Ser Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Gln Asn
85 90 95
Leu Glu Leu Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Asn
100 105 110
<210> 234
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-28
<400> 234
Asn Ile Met Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Val Ser Ala Gly
1 5 10 15
Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser
20 25 30
Ser Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln
85 90 95
Tyr Leu Ser Ser Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105 110
<210> 235
<211> 113
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-29
<400> 235
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Met Ser Val Gly
1 5 10 15
Gln Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser
20 25 30
Ser Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Ser Pro Lys Leu Leu Val Tyr Phe Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Ile Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Asp Tyr Phe Cys Gln Gln
85 90 95
His Tyr Ser Thr Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Ala Lys Leu Glu Ile
100 105 110
Lys
<210> 236
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-30
<400> 236
Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Thr Ile Thr Ile Thr Cys His Ala Ser Gln Asn Ile Asn Val Trp
20 25 30
Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Asn Ile Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Gln Ser Tyr Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105
<210> 237
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-31
<400> 237
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Val Thr Thr Gly
1 5 10 15
Glu Lys Val Thr Ile Arg Cys Ile Thr Ser Ile Asp Ile Asp Asp Asp
20 25 30
Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Glu Pro Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Ser Glu Gly Asn Thr Leu Arg Pro Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Ser
50 55 60
Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Val Phe Thr Ile Glu Asn Thr Leu Ser
65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Asp Tyr Tyr Cys Leu Gln Ser Asp Asn Lys Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105
<210> 238
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-32
<400> 238
Asp Ile Gln Val Ile Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Thr Ile Thr Ile Thr Cys His Ala Ser Gln Asn Ile Asn Val Trp
20 25 30
Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Asn Ile Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Gln Ser Tyr Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105
<210> 239
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-33
<400> 239
Glu Ile Lys Met Asn Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Thr Ile Thr Ile Thr Cys His Ala Ser Gln Asn Ile Asn Val Trp
20 25 30
Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Asn Ile Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Gln Ser Tyr Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105
<210> 240
<211> 109
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-34
<400> 240
Gln Ala Val Val Thr Gln Glu Ser Ala Leu Thr Thr Ser Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Thr Ser
20 25 30
Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Asp His Leu Phe Thr Gly
35 40 45
Leu Ile Gly Gly Thr Asn Asn Arg Ala Pro Gly Val Pro Ala Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Leu Ile Gly Asp Lys Ala Ala Leu Thr Ile Thr Gly Ala
65 70 75 80
Gln Thr Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Phe Cys Ala Leu Trp Tyr Ser Asn
85 90 95
His Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 241
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-35
<400> 241
Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Asp Ile Val His Ser
20 25 30
Ser Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Leu Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Ala Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 242
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-36
<400> 242
Asp Ile Gly Met Arg Gln Ala Ala Phe Ser Asn Pro Val Thr Leu Gly
1 5 10 15
Thr Ser Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser Leu Leu Tyr Ser
20 25 30
Asn Gly Ile Thr Tyr Leu Tyr Trp Phe Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Gln Met Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Ser Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Asp Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Gln Asn
85 90 95
Leu Glu Leu Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 243
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-37
<400> 243
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser Leu Leu Tyr Lys
20 25 30
Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Phe Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Met Ser Thr His Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu
85 90 95
Val Asp Tyr Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 244
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-38
<400> 244
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Lys Ser Leu Leu His Ser
20 25 30
Asp Gly Ile Thr Tyr Leu Tyr Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Arg Met Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Gln Met
85 90 95
Leu Glu Phe Pro Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 245
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL-39
<400> 245
Asp Ile Val Ile Thr Gln Asp Glu Leu Ser Asn Pro Val Thr Ser Gly
1 5 10 15
Glu Ser Val Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser Leu Leu Tyr Lys
20 25 30
Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Phe Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Met Ser Thr His Ala Ser Gly Val Ser
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Glu Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Lys Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu
85 90 95
Val Asp Tyr Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105 110
<210> 246
<211> 471
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-1
<400> 246
Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly
20 25 30
Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala
35 40 45
Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr Gly Met Ser Trp Val Lys Gln Ala
50 55 60
Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Ser Gly
65 70 75 80
Val Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu
85 90 95
Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn
100 105 110
Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Val Pro Tyr Glu Tyr Asp Gly
115 120 125
Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala Ala Lys Thr
130 135 140
Thr Pro Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly Asp Thr Thr
145 150 155 160
Gly Ser Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu
165 170 175
Pro Val Thr Leu Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His
180 185 190
Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser
195 200 205
Val Thr Val Thr Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile Thr Cys Asn
210 215 220
Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Glu Pro
225 230 235 240
Arg Gly Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys Pro Ala Pro
245 250 255
Asn Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Ile Lys
260 265 270
Asp Val Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys Val Val Val
275 280 285
Asp Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asn
290 295 300
Asn Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg Glu Asp Tyr
305 310 315 320
Asn Ser Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln His Gln Asp
325 330 335
Trp Met Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Asp Leu
340 345 350
Gly Ala Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly Ser Val Arg
355 360 365
Ala Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu Met Thr Lys
370 375 380
Lys Gln Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met Pro Glu Asp
385 390 395 400
Ile Tyr Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu Asn Tyr Lys
405 410 415
Asn Thr Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Met Tyr Ser
420 425 430
Lys Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn Ser Tyr Ser
435 440 445
Cys Ser Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Thr Lys Ser
450 455 460
Phe Ser Arg Thr Pro Gly Lys
465 470
<210> 247
<211> 471
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-2
<400> 247
Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly
20 25 30
Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala
35 40 45
Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr Gly Met Gly Trp Val Lys Gln Ala
50 55 60
Pro Gly Lys Asp Leu Lys Trp Met Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Ser Gly
65 70 75 80
Val Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu
85 90 95
Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr Leu Gln Ile Ser Asn Leu Lys Asn
100 105 110
Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ser Thr Pro Tyr Glu Tyr Asp Gly
115 120 125
Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala Ala Lys Thr
130 135 140
Thr Pro Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly Asp Thr Thr
145 150 155 160
Gly Ser Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu
165 170 175
Pro Val Thr Leu Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His
180 185 190
Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser
195 200 205
Val Thr Val Thr Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile Thr Cys Asn
210 215 220
Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Glu Pro
225 230 235 240
Arg Gly Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys Pro Ala Pro
245 250 255
Asn Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Ile Lys
260 265 270
Asp Val Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys Val Val Val
275 280 285
Asp Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asn
290 295 300
Asn Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg Glu Asp Tyr
305 310 315 320
Asn Ser Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln His Gln Asp
325 330 335
Trp Met Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Asp Leu
340 345 350
Gly Ala Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly Ser Val Arg
355 360 365
Ala Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu Met Thr Lys
370 375 380
Lys Gln Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met Pro Glu Asp
385 390 395 400
Ile Tyr Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu Asn Tyr Lys
405 410 415
Asn Thr Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Met Tyr Ser
420 425 430
Lys Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn Ser Tyr Ser
435 440 445
Cys Ser Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Thr Lys Ser
450 455 460
Phe Ser Arg Thr Pro Gly Lys
465 470
<210> 248
<211> 471
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-3
<400> 248
Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly
20 25 30
Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala
35 40 45
Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr Gly Met Gly Trp Val Lys Gln Ala
50 55 60
Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Ser Gly
65 70 75 80
Val Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu
85 90 95
Glu Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn
100 105 110
Glu Asp Met Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Thr Pro Tyr Glu Tyr Asp Gly
115 120 125
Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala Ala Lys Thr
130 135 140
Thr Pro Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly Asp Thr Thr
145 150 155 160
Gly Ser Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu
165 170 175
Pro Val Thr Leu Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His
180 185 190
Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser
195 200 205
Val Thr Val Thr Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile Thr Cys Asn
210 215 220
Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Glu Pro
225 230 235 240
Arg Gly Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys Pro Ala Pro
245 250 255
Asn Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Ile Lys
260 265 270
Asp Val Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys Val Val Val
275 280 285
Asp Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asn
290 295 300
Asn Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg Glu Asp Tyr
305 310 315 320
Asn Ser Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln His Gln Asp
325 330 335
Trp Met Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Asp Leu
340 345 350
Gly Ala Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly Ser Val Arg
355 360 365
Ala Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu Met Thr Lys
370 375 380
Lys Gln Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met Pro Glu Asp
385 390 395 400
Ile Tyr Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu Asn Tyr Lys
405 410 415
Asn Thr Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Met Tyr Ser
420 425 430
Lys Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn Ser Tyr Ser
435 440 445
Cys Ser Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Thr Lys Ser
450 455 460
Phe Ser Arg Thr Pro Gly Lys
465 470
<210> 249
<211> 466
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-4
<400> 249
Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Gln Val Gln Leu Lys Gln Ser Gly
20 25 30
Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Asp Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala
35 40 45
Ala Gly Tyr Thr Phe Ser Asp Tyr Tyr Ile Asn Trp Val Lys Gln Arg
50 55 60
Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly Trp Ile Tyr Pro Val Ser Val
65 70 75 80
Asn Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val
85 90 95
Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser
100 105 110
Glu Asp Ser Gly Val Tyr Phe Cys Ala Tyr Leu Asp Tyr Trp Gly Gln
115 120 125
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser Val
130 135 140
Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly Asp Thr Thr Gly Ser Ser Val Thr
145 150 155 160
Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Leu Thr
165 170 175
Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
180 185 190
Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val Thr Val Thr Ser
195 200 205
Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala
210 215 220
Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Glu Pro Arg Gly Pro Thr Ile
225 230 235 240
Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys Pro Ala Pro Asn Ala Ala Gly Gly
245 250 255
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Ile Lys Asp Val Leu Met Ile
260 265 270
Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Glu Asp
275 280 285
Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asn Asn Val Glu Val His
290 295 300
Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg Glu Asp Tyr Asn Ser Thr Leu Arg
305 310 315 320
Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln His Gln Asp Trp Met Ser Gly Lys
325 330 335
Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Asp Leu Gly Ala Pro Ile Glu
340 345 350
Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly Ser Val Arg Ala Pro Gln Val Tyr
355 360 365
Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu Met Thr Lys Lys Gln Val Thr Leu
370 375 380
Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met Pro Glu Asp Ile Tyr Val Glu Trp
385 390 395 400
Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu Asn Tyr Lys Asn Thr Glu Pro Val
405 410 415
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Met Tyr Ser Lys Leu Arg Val Glu
420 425 430
Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn Ser Tyr Ser Cys Ser Val Val His
435 440 445
Glu Gly Leu His Asn His His Thr Thr Lys Ser Phe Ser Arg Thr Pro
450 455 460
Gly Lys
465
<210> 250
<211> 474
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-5
<400> 250
Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly
20 25 30
Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala
35 40 45
Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Tyr Ile Asn Trp Val Lys Gln Arg
50 55 60
Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly Trp Ile Tyr Pro Gly Ser Asn
65 70 75 80
Asp Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val
85 90 95
Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Met Gln Leu Gly Ser Leu Thr Ser
100 105 110
Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys Ala Asn Tyr Phe Gly Cys Ser Gly
115 120 125
Trp Phe Phe Asp Val Trp Gly Thr Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
130 135 140
Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly
145 150 155 160
Asp Thr Thr Gly Ser Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr
165 170 175
Phe Pro Glu Pro Val Thr Leu Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser
180 185 190
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu
195 200 205
Ser Ser Ser Val Thr Val Thr Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile
210 215 220
Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys
225 230 235 240
Ile Glu Pro Arg Gly Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys
245 250 255
Pro Ala Pro Asn Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
260 265 270
Lys Ile Lys Asp Val Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys
275 280 285
Val Val Val Asp Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp
290 295 300
Phe Val Asn Asn Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg
305 310 315 320
Glu Asp Tyr Asn Ser Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln
325 330 335
His Gln Asp Trp Met Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn
340 345 350
Lys Asp Leu Gly Ala Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly
355 360 365
Ser Val Arg Ala Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu
370 375 380
Met Thr Lys Lys Gln Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met
385 390 395 400
Pro Glu Asp Ile Tyr Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu
405 410 415
Asn Tyr Lys Asn Thr Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe
420 425 430
Met Tyr Ser Lys Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn
435 440 445
Ser Tyr Ser Cys Ser Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr
450 455 460
Thr Lys Ser Phe Ser Arg Thr Pro Gly Lys
465 470
<210> 251
<211> 470
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-6
<400> 251
Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly
20 25 30
Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala
35 40 45
Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Asn Tyr Tyr Ile His Trp Val Lys Gln Arg
50 55 60
Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly Trp Ile Tyr Pro Gly Ser Gly
65 70 75 80
Asn Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala
85 90 95
Asp Thr Ser Ser Ser Thr Thr Asn Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser
100 105 110
Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Ser Thr Ala Pro Gly Gly Phe Asp
115 120 125
Val Trp Gly Ser Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Lys Thr Thr
130 135 140
Pro Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly Asp Thr Thr Gly
145 150 155 160
Ser Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro
165 170 175
Val Thr Leu Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr
180 185 190
Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val
195 200 205
Thr Val Thr Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile Thr Cys Asn Val
210 215 220
Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Glu Pro Arg
225 230 235 240
Gly Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys Pro Ala Pro Asn
245 250 255
Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Ile Lys Asp
260 265 270
Val Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys Val Val Val Asp
275 280 285
Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asn Asn
290 295 300
Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg Glu Asp Tyr Asn
305 310 315 320
Ser Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln His Gln Asp Trp
325 330 335
Met Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Asp Leu Gly
340 345 350
Ala Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly Ser Val Arg Ala
355 360 365
Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu Met Thr Lys Lys
370 375 380
Gln Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met Pro Glu Asp Ile
385 390 395 400
Tyr Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu Asn Tyr Lys Asn
405 410 415
Thr Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Met Tyr Ser Lys
420 425 430
Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn Ser Tyr Ser Cys
435 440 445
Ser Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Thr Lys Ser Phe
450 455 460
Ser Arg Thr Pro Gly Lys
465 470
<210> 252
<211> 470
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-7
<400> 252
Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly
20 25 30
Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala
35 40 45
Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr Ala Met Ser Trp Val Lys Gln Ala
50 55 60
Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Ser Gly
65 70 75 80
Val Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Leu Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu
85 90 95
Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn
100 105 110
Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Gly Pro Tyr Ala Met Asp
115 120 125
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Lys Thr Thr
130 135 140
Pro Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly Asp Thr Thr Gly
145 150 155 160
Ser Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro
165 170 175
Val Thr Leu Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr
180 185 190
Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val
195 200 205
Thr Val Thr Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile Thr Cys Asn Val
210 215 220
Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Glu Pro Arg
225 230 235 240
Gly Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys Pro Ala Pro Asn
245 250 255
Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Ile Lys Asp
260 265 270
Val Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys Val Val Val Asp
275 280 285
Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asn Asn
290 295 300
Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg Glu Asp Tyr Asn
305 310 315 320
Ser Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln His Gln Asp Trp
325 330 335
Met Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Asp Leu Gly
340 345 350
Ala Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly Ser Val Arg Ala
355 360 365
Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu Met Thr Lys Lys
370 375 380
Gln Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met Pro Glu Asp Ile
385 390 395 400
Tyr Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu Asn Tyr Lys Asn
405 410 415
Thr Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Met Tyr Ser Lys
420 425 430
Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn Ser Tyr Ser Cys
435 440 445
Ser Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Thr Lys Ser Phe
450 455 460
Ser Arg Thr Pro Gly Lys
465 470
<210> 253
<211> 470
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-8
<400> 253
Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly
20 25 30
Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala
35 40 45
Ser Gly Tyr Ala Phe Thr Thr Tyr Gly Met Ser Trp Val Gln Gln Ala
50 55 60
Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met Gly Trp Val Asn Thr Tyr Ser Gly
65 70 75 80
Val Pro Thr Cys Ala Asp Asp Phe Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu
85 90 95
Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr Leu Gln Ile Asn Asn Leu Arg Asn
100 105 110
Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Gly Pro Tyr Ala Met Asp
115 120 125
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Lys Thr Thr
130 135 140
Pro Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly Asp Thr Thr Gly
145 150 155 160
Ser Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro
165 170 175
Val Thr Leu Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr
180 185 190
Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val
195 200 205
Thr Val Thr Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile Thr Cys Asn Val
210 215 220
Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Glu Pro Arg
225 230 235 240
Gly Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys Pro Ala Pro Asn
245 250 255
Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Ile Lys Asp
260 265 270
Val Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys Val Val Val Asp
275 280 285
Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asn Asn
290 295 300
Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg Glu Asp Tyr Asn
305 310 315 320
Ser Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln His Gln Asp Trp
325 330 335
Met Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Asp Leu Gly
340 345 350
Ala Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly Ser Val Arg Ala
355 360 365
Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu Met Thr Lys Lys
370 375 380
Gln Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met Pro Glu Asp Ile
385 390 395 400
Tyr Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu Asn Tyr Lys Asn
405 410 415
Thr Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Met Tyr Ser Lys
420 425 430
Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn Ser Tyr Ser Cys
435 440 445
Ser Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Thr Lys Ser Phe
450 455 460
Ser Arg Thr Pro Gly Lys
465 470
<210> 254
<211> 470
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-9
<400> 254
Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly
20 25 30
Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala
35 40 45
Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr Ala Met Ser Trp Val Lys Gln Ala
50 55 60
Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Ser Gly
65 70 75 80
Val Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Leu Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu
85 90 95
Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn
100 105 110
Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Gly Pro Tyr Ala Met Asp
115 120 125
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Lys Thr Thr
130 135 140
Pro Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly Asp Thr Thr Gly
145 150 155 160
Ser Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro
165 170 175
Val Thr Leu Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr
180 185 190
Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val
195 200 205
Thr Val Thr Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile Thr Cys Asn Val
210 215 220
Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Glu Pro Arg
225 230 235 240
Gly Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys Pro Ala Pro Asn
245 250 255
Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Ile Lys Asp
260 265 270
Val Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys Val Val Val Asp
275 280 285
Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asn Asn
290 295 300
Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg Glu Asp Tyr Asn
305 310 315 320
Ser Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln His Gln Asp Trp
325 330 335
Met Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Asp Leu Gly
340 345 350
Ala Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly Ser Val Arg Ala
355 360 365
Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu Met Thr Lys Lys
370 375 380
Gln Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met Pro Glu Asp Ile
385 390 395 400
Tyr Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu Asn Tyr Lys Asn
405 410 415
Thr Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Met Tyr Ser Lys
420 425 430
Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn Ser Tyr Ser Cys
435 440 445
Ser Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Thr Lys Ser Phe
450 455 460
Ser Arg Thr Pro Gly Lys
465 470
<210> 255
<211> 470
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-10
<400> 255
Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly
20 25 30
Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala
35 40 45
Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr Gly Met Ser Trp Val Lys Gln Ala
50 55 60
Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met Ala Trp Ile Asn Thr Tyr Ser Gly
65 70 75 80
Val Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu
85 90 95
Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr Leu Gln Ile Asn Asn Leu Thr Asn
100 105 110
Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Gly Pro Tyr Ala Met Asp
115 120 125
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Lys Thr Thr
130 135 140
Pro Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly Asp Thr Thr Gly
145 150 155 160
Ser Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro
165 170 175
Val Thr Leu Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr
180 185 190
Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val
195 200 205
Thr Val Thr Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile Thr Cys Asn Val
210 215 220
Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Glu Pro Arg
225 230 235 240
Gly Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys Pro Ala Pro Asn
245 250 255
Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Ile Lys Asp
260 265 270
Val Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys Val Val Val Asp
275 280 285
Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asn Asn
290 295 300
Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg Glu Asp Tyr Asn
305 310 315 320
Ser Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln His Gln Asp Trp
325 330 335
Met Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Asp Leu Gly
340 345 350
Ala Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly Ser Val Arg Ala
355 360 365
Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu Met Thr Lys Lys
370 375 380
Gln Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met Pro Glu Asp Ile
385 390 395 400
Tyr Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu Asn Tyr Lys Asn
405 410 415
Thr Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Met Tyr Ser Lys
420 425 430
Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn Ser Tyr Ser Cys
435 440 445
Ser Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Thr Lys Ser Phe
450 455 460
Ser Arg Thr Pro Gly Lys
465 470
<210> 256
<211> 469
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-11
<400> 256
Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly
20 25 30
Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala
35 40 45
Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Tyr Met Asn Trp Val Lys Gln Ser
50 55 60
His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile Gly Asp Ile Asn Pro Asn Asn Gly
65 70 75 80
Gly Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val
85 90 95
Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser
100 105 110
Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Thr Ser Gly Tyr Gly Phe Pro Tyr
115 120 125
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala Ala Lys Thr Thr Pro
130 135 140
Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly Asp Thr Thr Gly Ser
145 150 155 160
Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val
165 170 175
Thr Leu Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe
180 185 190
Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val Thr
195 200 205
Val Thr Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile Thr Cys Asn Val Ala
210 215 220
His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Glu Pro Arg Gly
225 230 235 240
Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys Pro Ala Pro Asn Ala
245 250 255
Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Ile Lys Asp Val
260 265 270
Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys Val Val Val Asp Val
275 280 285
Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asn Asn Val
290 295 300
Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg Glu Asp Tyr Asn Ser
305 310 315 320
Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln His Gln Asp Trp Met
325 330 335
Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Asp Leu Gly Ala
340 345 350
Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly Ser Val Arg Ala Pro
355 360 365
Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu Met Thr Lys Lys Gln
370 375 380
Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met Pro Glu Asp Ile Tyr
385 390 395 400
Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu Asn Tyr Lys Asn Thr
405 410 415
Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Met Tyr Ser Lys Leu
420 425 430
Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn Ser Tyr Ser Cys Ser
435 440 445
Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Thr Lys Ser Phe Ser
450 455 460
Arg Thr Pro Gly Lys
465
<210> 257
<211> 469
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-12
<400> 257
Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly
20 25 30
Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala
35 40 45
Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Phe Tyr Ile Asn Trp Val Lys Gln Ser
50 55 60
His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile Gly Asp Ile Asn Pro Lys Asn Gly
65 70 75 80
Gly Ile Asn Tyr Asn Pro Lys Phe Lys Ile Lys Ala Thr Leu Thr Val
85 90 95
Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ser Tyr Met Asp Leu Arg Gly Leu Thr Ser
100 105 110
Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Thr Ser Gly Tyr Gly Phe Pro Tyr
115 120 125
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala Ala Lys Thr Thr Pro
130 135 140
Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly Asp Thr Thr Gly Ser
145 150 155 160
Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val
165 170 175
Thr Leu Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe
180 185 190
Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val Thr
195 200 205
Val Thr Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile Thr Cys Asn Val Ala
210 215 220
His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Glu Pro Arg Gly
225 230 235 240
Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys Pro Ala Pro Asn Ala
245 250 255
Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Ile Lys Asp Val
260 265 270
Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys Val Val Val Asp Val
275 280 285
Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asn Asn Val
290 295 300
Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg Glu Asp Tyr Asn Ser
305 310 315 320
Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln His Gln Asp Trp Met
325 330 335
Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Asp Leu Gly Ala
340 345 350
Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly Ser Val Arg Ala Pro
355 360 365
Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu Met Thr Lys Lys Gln
370 375 380
Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met Pro Glu Asp Ile Tyr
385 390 395 400
Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu Asn Tyr Lys Asn Thr
405 410 415
Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Met Tyr Ser Lys Leu
420 425 430
Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn Ser Tyr Ser Cys Ser
435 440 445
Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Thr Lys Ser Phe Ser
450 455 460
Arg Thr Pro Gly Lys
465
<210> 258
<211> 473
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-13
<400> 258
Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly
20 25 30
Pro Asp Leu Lys Lys Pro Gly Glu Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala
35 40 45
Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr Val Met Ser Trp Val Lys Gln Ala
50 55 60
Pro Gly Lys Asp Leu Lys Trp Met Gly Trp Ile Asn Thr His Ser Gly
65 70 75 80
Val Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe Lys Gly Arg Phe Asp Phe Ser Leu
85 90 95
Glu Thr Ser Ala Asn Thr Ala Phe Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn
100 105 110
Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Thr Arg Asp Gly Asn Asp Gly Asp
115 120 125
Ala Met Asp Asn Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala
130 135 140
Lys Thr Thr Pro Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly Asp
145 150 155 160
Thr Thr Gly Ser Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe
165 170 175
Pro Glu Pro Val Thr Leu Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly
180 185 190
Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser
195 200 205
Ser Ser Val Thr Val Thr Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile Thr
210 215 220
Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile
225 230 235 240
Glu Pro Arg Gly Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys Pro
245 250 255
Ala Pro Asn Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys
260 265 270
Ile Lys Asp Val Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys Val
275 280 285
Val Val Asp Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp Phe
290 295 300
Val Asn Asn Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg Glu
305 310 315 320
Asp Tyr Asn Ser Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln His
325 330 335
Gln Asp Trp Met Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys
340 345 350
Asp Leu Gly Ala Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly Ser
355 360 365
Val Arg Ala Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu Met
370 375 380
Thr Lys Lys Gln Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met Pro
385 390 395 400
Glu Asp Ile Tyr Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu Asn
405 410 415
Tyr Lys Asn Thr Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Met
420 425 430
Tyr Ser Lys Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn Ser
435 440 445
Tyr Ser Cys Ser Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Thr
450 455 460
Lys Ser Phe Ser Arg Thr Pro Gly Lys
465 470
<210> 259
<211> 473
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-14
<400> 259
Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly
20 25 30
Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Thr
35 40 45
Ser Gly Tyr Lys Phe Lys Thr Tyr Val Met Ser Trp Val Lys Gln Ala
50 55 60
Pro Gly Lys Ala Leu Lys Trp Met Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Ser Gly
65 70 75 80
Val Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu
85 90 95
Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr Leu Glu Ile Ile Asn Leu Lys Asn
100 105 110
Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Asp Gly Asn Tyr Gly Asp
115 120 125
Pro Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala
130 135 140
Lys Thr Thr Pro Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly Asp
145 150 155 160
Thr Thr Gly Ser Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe
165 170 175
Pro Glu Pro Val Thr Leu Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly
180 185 190
Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser
195 200 205
Ser Ser Val Thr Val Thr Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile Thr
210 215 220
Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile
225 230 235 240
Glu Pro Arg Gly Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys Pro
245 250 255
Ala Pro Asn Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys
260 265 270
Ile Lys Asp Val Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys Val
275 280 285
Val Val Asp Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp Phe
290 295 300
Val Asn Asn Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg Glu
305 310 315 320
Asp Tyr Asn Ser Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln His
325 330 335
Gln Asp Trp Met Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys
340 345 350
Asp Leu Gly Ala Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly Ser
355 360 365
Val Arg Ala Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu Met
370 375 380
Thr Lys Lys Gln Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met Pro
385 390 395 400
Glu Asp Ile Tyr Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu Asn
405 410 415
Tyr Lys Asn Thr Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Met
420 425 430
Tyr Ser Lys Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn Ser
435 440 445
Tyr Ser Cys Ser Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Thr
450 455 460
Lys Ser Phe Ser Arg Thr Pro Gly Lys
465 470
<210> 260
<211> 473
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-15
<400> 260
Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly
20 25 30
Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Thr
35 40 45
Ser Gly Tyr Lys Phe Lys Thr Tyr Val Met Ser Trp Val Lys Gln Ala
50 55 60
Pro Gly Lys Ala Leu Lys Trp Met Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Ser Gly
65 70 75 80
Val Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu
85 90 95
Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr Leu Glu Ile Ile Asn Leu Lys Asn
100 105 110
Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Asp Gly Asn Tyr Gly Asp
115 120 125
Pro Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala
130 135 140
Lys Thr Thr Pro Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly Asp
145 150 155 160
Thr Thr Gly Ser Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe
165 170 175
Pro Glu Pro Val Thr Leu Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly
180 185 190
Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser
195 200 205
Ser Ser Val Thr Val Thr Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile Thr
210 215 220
Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile
225 230 235 240
Glu Pro Arg Gly Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys Pro
245 250 255
Ala Pro Asn Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys
260 265 270
Ile Lys Asp Val Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys Val
275 280 285
Val Val Asp Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp Phe
290 295 300
Val Asn Asn Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg Glu
305 310 315 320
Asp Tyr Asn Ser Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln His
325 330 335
Gln Asp Trp Met Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys
340 345 350
Asp Leu Gly Ala Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly Ser
355 360 365
Val Arg Ala Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu Met
370 375 380
Thr Lys Lys Gln Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met Pro
385 390 395 400
Glu Asp Ile Tyr Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu Asn
405 410 415
Tyr Lys Asn Thr Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Met
420 425 430
Tyr Ser Lys Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn Ser
435 440 445
Tyr Ser Cys Ser Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Thr
450 455 460
Lys Ser Phe Ser Arg Thr Pro Gly Lys
465 470
<210> 261
<211> 467
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-16
<400> 261
Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly
20 25 30
Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala
35 40 45
Ser Gly Phe Ala Phe Ser Ser Tyr Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Thr
50 55 60
Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val Ala Thr Ile Ser Asp Gly Gly Val
65 70 75 80
Tyr Thr Tyr Tyr Thr Asp His Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg
85 90 95
Asp Asn Ala Glu Asp Asn Leu Tyr Leu Gln Met Ser His Leu Lys Ser
100 105 110
Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Val Arg Asp Gly Gly Tyr Trp Gly
115 120 125
Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser
130 135 140
Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly Asp Thr Thr Gly Ser Ser Val
145 150 155 160
Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Leu
165 170 175
Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala
180 185 190
Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val Thr Val Thr
195 200 205
Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile Thr Cys Asn Val Ala His Pro
210 215 220
Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Glu Pro Arg Gly Pro Thr
225 230 235 240
Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys Pro Ala Pro Asn Ala Ala Gly
245 250 255
Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Ile Lys Asp Val Leu Met
260 265 270
Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Glu
275 280 285
Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asn Asn Val Glu Val
290 295 300
His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg Glu Asp Tyr Asn Ser Thr Leu
305 310 315 320
Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln His Gln Asp Trp Met Ser Gly
325 330 335
Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Asp Leu Gly Ala Pro Ile
340 345 350
Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly Ser Val Arg Ala Pro Gln Val
355 360 365
Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu Met Thr Lys Lys Gln Val Thr
370 375 380
Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met Pro Glu Asp Ile Tyr Val Glu
385 390 395 400
Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu Asn Tyr Lys Asn Thr Glu Pro
405 410 415
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Met Tyr Ser Lys Leu Arg Val
420 425 430
Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn Ser Tyr Ser Cys Ser Val Val
435 440 445
His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Thr Lys Ser Phe Ser Arg Thr
450 455 460
Pro Gly Lys
465
<210> 262
<211> 467
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-17
<400> 262
Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly
20 25 30
Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala
35 40 45
Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Thr
50 55 60
Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val Ala Thr Ile Ser Asp Gly Gly Ile
65 70 75 80
Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Asn Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg
85 90 95
Asp Asn Ala Lys Asn Asn Leu Phe Leu Gln Met Ser His Leu Lys Ser
100 105 110
Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Val Arg Asp Gly Gly Tyr Trp Gly
115 120 125
Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser
130 135 140
Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly Asp Thr Thr Gly Ser Ser Val
145 150 155 160
Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Leu
165 170 175
Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala
180 185 190
Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val Thr Val Thr
195 200 205
Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile Thr Cys Asn Val Ala His Pro
210 215 220
Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Glu Pro Arg Gly Pro Thr
225 230 235 240
Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys Pro Ala Pro Asn Ala Ala Gly
245 250 255
Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Ile Lys Asp Val Leu Met
260 265 270
Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Glu
275 280 285
Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asn Asn Val Glu Val
290 295 300
His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg Glu Asp Tyr Asn Ser Thr Leu
305 310 315 320
Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln His Gln Asp Trp Met Ser Gly
325 330 335
Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Asp Leu Gly Ala Pro Ile
340 345 350
Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly Ser Val Arg Ala Pro Gln Val
355 360 365
Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu Met Thr Lys Lys Gln Val Thr
370 375 380
Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met Pro Glu Asp Ile Tyr Val Glu
385 390 395 400
Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu Asn Tyr Lys Asn Thr Glu Pro
405 410 415
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Met Tyr Ser Lys Leu Arg Val
420 425 430
Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn Ser Tyr Ser Cys Ser Val Val
435 440 445
His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Thr Lys Ser Phe Ser Arg Thr
450 455 460
Pro Gly Lys
465
<210> 263
<211> 476
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-18
<400> 263
Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Gln Val Gln Leu Lys Gln Ser Gly
20 25 30
Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala
35 40 45
Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Tyr Ile Asn Trp Val Lys Gln Arg
50 55 60
Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile Ala Arg Ile Tyr Pro Gly Thr Gly
65 70 75 80
Asn Thr Asp Tyr Asn Glu Lys Phe Lys Gly Arg Ala Thr Leu Thr Ala
85 90 95
Glu Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser
100 105 110
Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys Ala Arg Phe Ala Tyr Tyr Tyr Gly
115 120 125
Ser Gly Gly Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly His Gly Thr Thr Leu Thr Val
130 135 140
Ser Ser Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val
145 150 155 160
Cys Gly Asp Thr Thr Gly Ser Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys
165 170 175
Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Leu Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu
180 185 190
Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr
195 200 205
Thr Leu Ser Ser Ser Val Thr Val Thr Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln
210 215 220
Ser Ile Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp
225 230 235 240
Lys Lys Ile Glu Pro Arg Gly Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys
245 250 255
Lys Cys Pro Ala Pro Asn Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe
260 265 270
Pro Pro Lys Ile Lys Asp Val Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val
275 280 285
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile
290 295 300
Ser Trp Phe Val Asn Asn Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr
305 310 315 320
His Arg Glu Asp Tyr Asn Ser Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro
325 330 335
Ile Gln His Gln Asp Trp Met Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val
340 345 350
Asn Asn Lys Asp Leu Gly Ala Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro
355 360 365
Lys Gly Ser Val Arg Ala Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu
370 375 380
Glu Glu Met Thr Lys Lys Gln Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp
385 390 395 400
Phe Met Pro Glu Asp Ile Tyr Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr
405 410 415
Glu Leu Asn Tyr Lys Asn Thr Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
420 425 430
Tyr Phe Met Tyr Ser Lys Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu
435 440 445
Arg Asn Ser Tyr Ser Cys Ser Val Val His Glu Gly Leu His Asn His
450 455 460
His Thr Thr Lys Ser Phe Ser Arg Thr Pro Gly Lys
465 470 475
<210> 264
<211> 474
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-19
<400> 264
Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Gln Val Gln Leu Lys Gln Ser Gly
20 25 30
Pro Gly Leu Val Gln Pro Ser Gln Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val
35 40 45
Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr Gly Val His Trp Val Arg Gln Ala
50 55 60
Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu Gly Val Ile Trp Ser Gly Gly Ser
65 70 75 80
Thr Asp Tyr Asn Ala Ala Phe Met Ser Arg Leu Ser Ile Ser Lys Asp
85 90 95
Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Phe Lys Met Asn Ser Leu Gln Ala Asp
100 105 110
Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Lys Ser Pro Asp Gly Tyr Asp Val
115 120 125
Ala Trp Phe Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala
130 135 140
Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly
145 150 155 160
Asp Thr Thr Gly Ser Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr
165 170 175
Phe Pro Glu Pro Val Thr Leu Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser
180 185 190
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu
195 200 205
Ser Ser Ser Val Thr Val Thr Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile
210 215 220
Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys
225 230 235 240
Ile Glu Pro Arg Gly Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys
245 250 255
Pro Ala Pro Asn Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
260 265 270
Lys Ile Lys Asp Val Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys
275 280 285
Val Val Val Asp Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp
290 295 300
Phe Val Asn Asn Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg
305 310 315 320
Glu Asp Tyr Asn Ser Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln
325 330 335
His Gln Asp Trp Met Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn
340 345 350
Lys Asp Leu Gly Ala Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly
355 360 365
Ser Val Arg Ala Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu
370 375 380
Met Thr Lys Lys Gln Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met
385 390 395 400
Pro Glu Asp Ile Tyr Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu
405 410 415
Asn Tyr Lys Asn Thr Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe
420 425 430
Met Tyr Ser Lys Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn
435 440 445
Ser Tyr Ser Cys Ser Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr
450 455 460
Thr Lys Ser Phe Ser Arg Thr Pro Gly Lys
465 470
<210> 265
<211> 474
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-20
<400> 265
Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Gln Val Gln Leu Lys Gln Ser Gly
20 25 30
Pro Gly Leu Val Gln Pro Ser Gln Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val
35 40 45
Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr Gly Val His Trp Val Arg Gln Pro
50 55 60
Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu Gly Val Ile Trp Ser Gly Gly Ser
65 70 75 80
Thr Asp Tyr Asn Ala Ala Phe Ile Ser Arg Leu Ser Ile Ser Lys Asp
85 90 95
Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Phe Lys Met Asn Ser Leu Gln Ala Asp
100 105 110
Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Lys Gly Pro Tyr Asp Tyr Asp Leu
115 120 125
Gly Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala
130 135 140
Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly
145 150 155 160
Asp Thr Thr Gly Ser Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr
165 170 175
Phe Pro Glu Pro Val Thr Leu Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser
180 185 190
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu
195 200 205
Ser Ser Ser Val Thr Val Thr Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile
210 215 220
Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys
225 230 235 240
Ile Glu Pro Arg Gly Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys
245 250 255
Pro Ala Pro Asn Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
260 265 270
Lys Ile Lys Asp Val Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys
275 280 285
Val Val Val Asp Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp
290 295 300
Phe Val Asn Asn Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg
305 310 315 320
Glu Asp Tyr Asn Ser Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln
325 330 335
His Gln Asp Trp Met Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn
340 345 350
Lys Asp Leu Gly Ala Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly
355 360 365
Ser Val Arg Ala Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu
370 375 380
Met Thr Lys Lys Gln Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met
385 390 395 400
Pro Glu Asp Ile Tyr Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu
405 410 415
Asn Tyr Lys Asn Thr Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe
420 425 430
Met Tyr Ser Lys Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn
435 440 445
Ser Tyr Ser Cys Ser Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr
450 455 460
Thr Lys Ser Phe Ser Arg Thr Pro Gly Lys
465 470
<210> 266
<211> 473
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-21
<400> 266
Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly
20 25 30
Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala
35 40 45
Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg
50 55 60
Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly Met Ile His Pro Asn Ser Gly
65 70 75 80
Ser Thr Asp Tyr Asn Glu Lys Phe Lys Asn Lys Ala Thr Leu Asn Val
85 90 95
Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Ile Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser
100 105 110
Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Thr Arg Trp Gly Ile Tyr Tyr Tyr
115 120 125
Ala Arg Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser Ala
130 135 140
Lys Thr Thr Pro Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly Asp
145 150 155 160
Thr Thr Gly Ser Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe
165 170 175
Pro Glu Pro Val Thr Leu Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly
180 185 190
Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser
195 200 205
Ser Ser Val Thr Val Thr Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile Thr
210 215 220
Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile
225 230 235 240
Glu Pro Arg Gly Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys Pro
245 250 255
Ala Pro Asn Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys
260 265 270
Ile Lys Asp Val Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys Val
275 280 285
Val Val Asp Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp Phe
290 295 300
Val Asn Asn Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg Glu
305 310 315 320
Asp Tyr Asn Ser Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln His
325 330 335
Gln Asp Trp Met Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys
340 345 350
Asp Leu Gly Ala Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly Ser
355 360 365
Val Arg Ala Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu Met
370 375 380
Thr Lys Lys Gln Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met Pro
385 390 395 400
Glu Asp Ile Tyr Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu Asn
405 410 415
Tyr Lys Asn Thr Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Met
420 425 430
Tyr Ser Lys Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn Ser
435 440 445
Tyr Ser Cys Ser Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Thr
450 455 460
Lys Ser Phe Ser Arg Thr Pro Gly Lys
465 470
<210> 267
<211> 469
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-22
<400> 267
Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly
20 25 30
Ala Glu Leu Val Gly Pro Gly Ser Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala
35 40 45
Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Trp Ile His Trp Val Lys Gln Arg
50 55 60
Pro Leu Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly Asn Ile Asp Pro Ser Asp Ser
65 70 75 80
Glu Thr His Tyr Asn Gln Lys Phe Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Val
85 90 95
Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser
100 105 110
Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg His Gly Tyr Tyr Asp Tyr
115 120 125
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser Ala Lys Thr Thr Pro
130 135 140
Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly Asp Thr Thr Gly Ser
145 150 155 160
Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val
165 170 175
Thr Leu Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe
180 185 190
Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val Thr
195 200 205
Val Thr Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile Thr Cys Asn Val Ala
210 215 220
His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Glu Pro Arg Gly
225 230 235 240
Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys Pro Ala Pro Asn Ala
245 250 255
Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Ile Lys Asp Val
260 265 270
Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys Val Val Val Asp Val
275 280 285
Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asn Asn Val
290 295 300
Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg Glu Asp Tyr Asn Ser
305 310 315 320
Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln His Gln Asp Trp Met
325 330 335
Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Asp Leu Gly Ala
340 345 350
Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly Ser Val Arg Ala Pro
355 360 365
Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu Met Thr Lys Lys Gln
370 375 380
Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met Pro Glu Asp Ile Tyr
385 390 395 400
Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu Asn Tyr Lys Asn Thr
405 410 415
Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Met Tyr Ser Lys Leu
420 425 430
Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn Ser Tyr Ser Cys Ser
435 440 445
Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Thr Lys Ser Phe Ser
450 455 460
Arg Thr Pro Gly Lys
465
<210> 268
<211> 448
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-23
<400> 268
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Gly Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Ser Tyr Ala Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Met Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Trp Gly Gly Tyr Ala Gly Asp Tyr Tyr Ala Met Asp Phe Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro
115 120 125
Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr
130 135 140
Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr
145 150 155 160
Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro
165 170 175
Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr
180 185 190
Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp
195 200 205
His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr
210 215 220
Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
275 280 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305 310 315 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
385 390 395 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys
405 410 415
Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
420 425 430
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 269
<211> 448
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-24
<400> 269
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Gly Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Ser Tyr Ala Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Met Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Trp Gly Gly Tyr Asp Gly Asp Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro
115 120 125
Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr
130 135 140
Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr
145 150 155 160
Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro
165 170 175
Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr
180 185 190
Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp
195 200 205
His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr
210 215 220
Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
275 280 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305 310 315 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
385 390 395 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys
405 410 415
Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
420 425 430
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 270
<211> 448
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-25
<400> 270
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Phe
20 25 30
Gly Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Ser Tyr Ala Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Trp Gly Gly Tyr Ala Gly Asp Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro
115 120 125
Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr
130 135 140
Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr
145 150 155 160
Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro
165 170 175
Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr
180 185 190
Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp
195 200 205
His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr
210 215 220
Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
275 280 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305 310 315 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
385 390 395 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys
405 410 415
Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
420 425 430
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 271
<211> 442
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-26
<400> 271
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Ser Ile Ser Ser Gly Gly Asp Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Arg Asn Ile Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Ser Tyr Gly Asn Ser Leu Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu
100 105 110
Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala
115 120 125
Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu
130 135 140
Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
145 150 155 160
Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser
165 170 175
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu
180 185 190
Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr
195 200 205
Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro
210 215 220
Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro
225 230 235 240
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
245 250 255
Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn
260 265 270
Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg
275 280 285
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val
290 295 300
Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser
305 310 315 320
Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys
325 330 335
Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu
340 345 350
Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe
355 360 365
Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu
370 375 380
Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe
385 390 395 400
Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly
405 410 415
Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr
420 425 430
Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440
<210> 272
<211> 448
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-27
<400> 272
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Gly Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Ser Tyr Ala Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Met Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Trp Gly Gly Tyr Asp Gly Asp Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro
115 120 125
Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr
130 135 140
Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr
145 150 155 160
Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro
165 170 175
Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr
180 185 190
Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp
195 200 205
His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr
210 215 220
Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
275 280 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305 310 315 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
385 390 395 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys
405 410 415
Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
420 425 430
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 273
<211> 440
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-28
<400> 273
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Gly Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Gly Asp Leu
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Val Arg Tyr Thr Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val
100 105 110
Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys
115 120 125
Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys
130 135 140
Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu
145 150 155 160
Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu
165 170 175
Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr
180 185 190
Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val
195 200 205
Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro
210 215 220
Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys
225 230 235 240
Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val
245 250 255
Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr
260 265 270
Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu
275 280 285
Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His
290 295 300
Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys
305 310 315 320
Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln
325 330 335
Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met
340 345 350
Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro
355 360 365
Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn
370 375 380
Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu
385 390 395 400
Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val
405 410 415
Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln
420 425 430
Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440
<210> 274
<211> 450
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-29
<400> 274
Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Ile Leu Gln Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ser Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser
20 25 30
Gly Met Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Ser Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Leu Ala His Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Thr Ala
50 55 60
Leu Lys Ser Gly Leu Thr Ile Ser Lys Asp Ala Ser Lys Asn Gln Val
65 70 75 80
Phe Leu Lys Ile Ala Ser Met Asp Thr Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Asn Leu Tyr Asp Gly Ser Tyr Gly Tyr Tyr Ala Met Asp
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys
115 120 125
Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu
130 135 140
Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro
145 150 155 160
Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr
165 170 175
Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val
180 185 190
Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn
195 200 205
Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser
210 215 220
Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly
225 230 235 240
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
245 250 255
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln
260 265 270
Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
275 280 285
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr
290 295 300
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
305 310 315 320
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile
325 330 335
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
340 345 350
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
355 360 365
Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
370 375 380
Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
385 390 395 400
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val
405 410 415
Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met
420 425 430
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
435 440 445
Leu Gly
450
<210> 275
<211> 448
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-30
<400> 275
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Gly Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Ala Tyr Ala Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Met Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Trp Gly Gly Tyr Asp Gly Asp Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro
115 120 125
Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr
130 135 140
Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr
145 150 155 160
Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro
165 170 175
Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr
180 185 190
Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp
195 200 205
His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr
210 215 220
Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
275 280 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305 310 315 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
385 390 395 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys
405 410 415
Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
420 425 430
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 276
<211> 449
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-31
<400> 276
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Gly Leu Ser Trp Ile Arg Gln Thr Pro Asp Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Thr Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Ser Ala Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Ala His Tyr Tyr Gly Val Ser Pro Tyr Tyr Phe Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Cys Leu Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly
115 120 125
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser
130 135 140
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
145 150 155 160
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
165 170 175
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
180 185 190
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val
195 200 205
Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys
210 215 220
Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu
325 330 335
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
340 345 350
Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp
405 410 415
Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu
435 440 445
Gly
<210> 277
<211> 445
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-32
<400> 277
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Gly Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Thr Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Lys Phe Gly Asn Tyr Val Gly Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
115 120 125
Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu
130 135 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145 150 155 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
165 170 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
180 185 190
Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro
195 200 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro
210 215 220
Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe
225 230 235 240
Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro
245 250 255
Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val
260 265 270
Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr
275 280 285
Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val
290 295 300
Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys
305 310 315 320
Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser
325 330 335
Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro
340 345 350
Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val
355 360 365
Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly
370 375 380
Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp
385 390 395 400
Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp
405 410 415
Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His
420 425 430
Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 278
<211> 446
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-33
<400> 278
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Asn Thr Phe Thr Asp His
20 25 30
Asn Met His Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Tyr Pro Tyr Asn Gly Gly Thr Gly Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Ser Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Asn Ser Ser Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Glu Tyr Asp Tyr Leu Ala Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 279
<211> 445
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-34
<400> 279
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Gly Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Val Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Arg Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Lys Phe Gly Asn Tyr Val Gly Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
115 120 125
Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu
130 135 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145 150 155 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
165 170 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
180 185 190
Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro
195 200 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro
210 215 220
Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe
225 230 235 240
Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro
245 250 255
Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val
260 265 270
Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr
275 280 285
Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val
290 295 300
Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys
305 310 315 320
Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser
325 330 335
Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro
340 345 350
Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val
355 360 365
Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly
370 375 380
Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp
385 390 395 400
Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp
405 410 415
Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His
420 425 430
Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 280
<211> 445
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-35
<400> 280
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Gly Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Thr Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Lys Phe Gly Asn Tyr Val Gly Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
115 120 125
Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu
130 135 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145 150 155 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
165 170 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
180 185 190
Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro
195 200 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro
210 215 220
Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe
225 230 235 240
Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro
245 250 255
Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val
260 265 270
Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr
275 280 285
Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val
290 295 300
Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys
305 310 315 320
Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser
325 330 335
Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro
340 345 350
Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val
355 360 365
Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly
370 375 380
Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp
385 390 395 400
Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp
405 410 415
Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His
420 425 430
Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 281
<211> 443
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-36
<400> 281
Glu Val Gln Leu Val Glu Thr Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Ser Ile Ser Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Arg Asn Ile Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Thr
85 90 95
Arg Phe Thr Thr Val Val Glu Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu
115 120 125
Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys
130 135 140
Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160
Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175
Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
180 185 190
Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn
195 200 205
Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
245 250 255
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe
260 265 270
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285
Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320
Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
325 330 335
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln
340 345 350
Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400
Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu
405 410 415
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440
<210> 282
<211> 438
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-37
<400> 282
Gln Val Gln Leu Gln Gln Thr Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Asn Ile Tyr Pro Gly Ser Ser Ser Ile Tyr Tyr Ser Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Ser Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Asp Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Trp Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser
100 105 110
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
115 120 125
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
130 135 140
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
145 150 155 160
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
165 170 175
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr
180 185 190
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
195 200 205
Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
210 215 220
Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
225 230 235 240
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
245 250 255
Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp
260 265 270
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe
275 280 285
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
290 295 300
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu
305 310 315 320
Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
325 330 335
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys
340 345 350
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
355 360 365
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
370 375 380
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
385 390 395 400
Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser
405 410 415
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
420 425 430
Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435
<210> 283
<211> 447
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-38
<400> 283
Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Ile Leu Gln Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ser Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Phe
20 25 30
Gly Met Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Ser Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Leu Ala His Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys His Tyr Asn Pro Ala
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val
65 70 75 80
Phe Leu Arg Ile Ala Asn Val Asp Thr Ala Asp Asn Ala Thr Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Ile Asp Tyr Gly Asp Tyr Val Gly Phe Ala Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser
115 120 125
Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala
130 135 140
Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val
145 150 155 160
Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala
165 170 175
Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val
180 185 190
Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His
195 200 205
Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly
210 215 220
Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser
225 230 235 240
Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg
245 250 255
Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro
260 265 270
Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala
275 280 285
Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val
290 295 300
Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr
305 310 315 320
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr
325 330 335
Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu
340 345 350
Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys
355 360 365
Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser
370 375 380
Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp
385 390 395 400
Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser
405 410 415
Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala
420 425 430
Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 284
<211> 440
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-39
<400> 284
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Thr Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Glu Thr Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Ser Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Val Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Pro Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val
100 105 110
Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys
115 120 125
Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys
130 135 140
Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu
145 150 155 160
Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu
165 170 175
Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr
180 185 190
Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val
195 200 205
Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro
210 215 220
Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys
225 230 235 240
Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val
245 250 255
Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr
260 265 270
Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu
275 280 285
Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His
290 295 300
Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys
305 310 315 320
Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln
325 330 335
Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met
340 345 350
Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro
355 360 365
Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn
370 375 380
Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu
385 390 395 400
Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val
405 410 415
Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln
420 425 430
Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440
<210> 285
<211> 461
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-40
<400> 285
Met Gly Ser Thr Ala Ile Leu Gly Leu Leu Leu Ala Val Leu Gln Gly
1 5 10 15
Val Cys Ala Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe
35 40 45
Thr Asn Tyr Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu
50 55 60
Lys Trp Met Gly Trp Ile Asn Thr Asn Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Val
65 70 75 80
Glu Glu Phe Thr Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Glu Thr Ser Val Ser
85 90 95
Thr Ala Tyr Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Ala Glu Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Phe Cys Ala Pro Tyr Asp Asn Phe Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
115 120 125
Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
130 135 140
Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu
145 150 155 160
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
165 170 175
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
180 185 190
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
195 200 205
Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro
210 215 220
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro
225 230 235 240
Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe
245 250 255
Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro
260 265 270
Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val
275 280 285
Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr
290 295 300
Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val
305 310 315 320
Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys
325 330 335
Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser
340 345 350
Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro
355 360 365
Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val
370 375 380
Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly
385 390 395 400
Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp
405 410 415
Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp
420 425 430
Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His
435 440 445
Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
450 455 460
<210> 286
<211> 466
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HC-41
<400> 286
Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly
20 25 30
Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala
35 40 45
Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Asn Tyr Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala
50 55 60
Pro Gly Gln Arg Leu Glu Trp Met Gly Trp Ile Tyr Pro Gly Ser Gly
65 70 75 80
Asn Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala
85 90 95
Asp Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser
100 105 110
Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ser Thr Ala Pro Gly Gly Phe Asp
115 120 125
Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys
130 135 140
Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu
145 150 155 160
Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro
165 170 175
Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr
180 185 190
Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val
195 200 205
Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn
210 215 220
Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser
225 230 235 240
Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly
245 250 255
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
260 265 270
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln
275 280 285
Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
290 295 300
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr
305 310 315 320
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
325 330 335
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile
340 345 350
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
355 360 365
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
370 375 380
Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
385 390 395 400
Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
405 410 415
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val
420 425 430
Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met
435 440 445
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
450 455 460
Leu Gly
465
<210> 287
<211> 239
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-1
<400> 287
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Leu Ser
20 25 30
Val Thr Ile Gly Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser
35 40 45
Leu Phe His Ser Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg
50 55 60
Pro Gly Gln Ser Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp
65 70 75 80
Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe
85 90 95
Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr
100 105 110
Cys Trp Gln Gly Thr His Phe Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys
115 120 125
Leu Glu Met Lys Arg Ala Asp Val Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro
130 135 140
Pro Ser Ser Glu Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe
145 150 155 160
Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp
165 170 175
Gly Ser Glu Arg Gln Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp
180 185 190
Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys
195 200 205
Asp Glu Tyr Glu Arg His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys
210 215 220
Thr Ser Thr Ser Pro Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
225 230 235
<210> 288
<211> 239
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-2
<400> 288
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Leu Ser
20 25 30
Val Thr Ile Gly Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser
35 40 45
Leu Phe Asp Ser Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg
50 55 60
Pro Gly Gln Ser Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp
65 70 75 80
Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe
85 90 95
Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr
100 105 110
Cys Trp Gln Gly Thr His Phe Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys
115 120 125
Leu Glu Met Lys Arg Ala Asp Val Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro
130 135 140
Pro Ser Ser Glu Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe
145 150 155 160
Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp
165 170 175
Gly Ser Glu Arg Gln Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp
180 185 190
Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys
195 200 205
Asp Glu Tyr Glu Arg His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys
210 215 220
Thr Ser Thr Ser Pro Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
225 230 235
<210> 289
<211> 239
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-3
<400> 289
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Leu Ser
20 25 30
Val Thr Ile Gly Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser
35 40 45
Leu Leu His Ser Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg
50 55 60
Pro Gly Gln Pro Pro Lys Arg Leu Met Tyr Leu Val Ser Thr Leu Asp
65 70 75 80
Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe
85 90 95
Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr
100 105 110
Cys Trp Gln Gly Thr His Phe Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys
115 120 125
Pro Glu Leu Lys Arg Ala Asp Val Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro
130 135 140
Pro Ser Ser Glu Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe
145 150 155 160
Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp
165 170 175
Gly Ser Glu Arg Gln Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp
180 185 190
Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys
195 200 205
Asp Glu Tyr Glu Arg His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys
210 215 220
Thr Ser Thr Ser Pro Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
225 230 235
<210> 290
<211> 237
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-4
<400> 290
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Asp Ile Val Met Thr Gln Ala Ala Phe Ser Asn Pro
20 25 30
Val Thr Leu Gly Thr Ser Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser
35 40 45
Leu Leu His Ser Asp Gly Ile Thr Tyr Phe Tyr Trp Tyr Leu Gln Arg
50 55 60
Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Arg Met Ser Asn Leu Ala
65 70 75 80
Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe
85 90 95
Thr Leu Arg Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr
100 105 110
Cys Ala Gln Met Leu Glu Phe Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys
115 120 125
Leu Glu Arg Ala Asp Val Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser
130 135 140
Ser Glu Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn
145 150 155 160
Asn Phe Tyr Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser
165 170 175
Glu Arg Gln Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys
180 185 190
Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu
195 200 205
Tyr Glu Arg His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser
210 215 220
Thr Ser Pro Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
225 230 235
<210> 291
<211> 239
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-5
<400> 291
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Asp Ile Val Met Thr Gln Ala Ala Phe Ser Asn Pro
20 25 30
Val Thr Leu Gly Thr Ser Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser
35 40 45
Leu Leu His Ser Asp Gly Ile Thr Tyr Leu Tyr Trp Tyr Leu Gln Arg
50 55 60
Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Arg Met Ser Asn Leu Ala
65 70 75 80
Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe
85 90 95
Thr Leu Arg Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr
100 105 110
Cys Ala Gln Met Ile Glu Phe Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Ile
115 120 125
Leu Glu Leu Lys Arg Ala Asp Val Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro
130 135 140
Pro Ser Ser Glu Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe
145 150 155 160
Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp
165 170 175
Gly Ser Glu Arg Gln Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp
180 185 190
Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys
195 200 205
Asp Glu Tyr Glu Arg His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys
210 215 220
Thr Ser Thr Ser Pro Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
225 230 235
<210> 292
<211> 239
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-6
<400> 292
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Asp Ile Val Met Thr Gln Ala Ala Phe Ser Asn Pro
20 25 30
Val Thr Leu Gly Thr Ser Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser
35 40 45
Leu Leu His Ser Asp Gly Ile Thr Tyr Leu Tyr Trp Tyr Leu Gln Arg
50 55 60
Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Arg Met Ser Asn Leu Ala
65 70 75 80
Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe
85 90 95
Thr Leu Arg Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr
100 105 110
Cys Ala Gln Met Leu Glu Phe Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys
115 120 125
Leu Glu Leu Lys Arg Ala Asp Val Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro
130 135 140
Pro Ser Ser Glu Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe
145 150 155 160
Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp
165 170 175
Gly Ser Glu Arg Gln Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp
180 185 190
Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys
195 200 205
Asp Glu Tyr Glu Arg His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys
210 215 220
Thr Ser Thr Ser Pro Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
225 230 235
<210> 293
<211> 234
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-7
<400> 293
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser
20 25 30
Ala Ser Leu Gly Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Ala Ser Gln Gly
35 40 45
Ile Asn Asn Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val
50 55 60
Lys Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Ser Leu His Ser Gly Val Pro Ser
65 70 75 80
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser
85 90 95
Asn Leu Glu Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser
100 105 110
Gln Val Pro Tyr Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg
115 120 125
Ala Asp Val Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu Gln
130 135 140
Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe Tyr
145 150 155 160
Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg Gln
165 170 175
Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
180 185 190
Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu Arg
195 200 205
His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser Pro
210 215 220
Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
225 230
<210> 294
<211> 234
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-8
<400> 294
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser
20 25 30
Ala Ser Leu Gly Asp Arg Val Thr Ile Asn Cys Ser Ala Ser Gln Asp
35 40 45
Ile Ser Asn Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val
50 55 60
Lys Leu Leu Ile Tyr Tyr Thr Ser Ser Leu Leu Ser Gly Val Pro Ser
65 70 75 80
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser
85 90 95
Asn Leu Glu Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Ser
100 105 110
Lys Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Ser Gly Thr His Leu Glu Ile Lys Arg
115 120 125
Ala Asp Val Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu Gln
130 135 140
Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe Tyr
145 150 155 160
Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg Gln
165 170 175
Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
180 185 190
Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu Arg
195 200 205
His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser Pro
210 215 220
Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
225 230
<210> 295
<211> 234
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-9
<400> 295
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser
20 25 30
Ala Ser Leu Gly Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Ala Ser Gln Gly
35 40 45
Ile Ser Asn Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val
50 55 60
Lys Leu Leu Ile Tyr Tyr Thr Ser Ser Leu His Ser Gly Val Pro Ser
65 70 75 80
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser
85 90 95
Asn Leu Glu Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser
100 105 110
Glu Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg
115 120 125
Ala Asp Val Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu Gln
130 135 140
Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe Tyr
145 150 155 160
Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg Gln
165 170 175
Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
180 185 190
Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu Arg
195 200 205
His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser Pro
210 215 220
Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
225 230
<210> 296
<211> 234
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-10
<400> 296
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Asp Ile Gln Met Asn Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser
20 25 30
Ala Ser Leu Gly Asp Thr Ile Ser Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asn
35 40 45
Ile Asn Ile Trp Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Asn Ile Pro
50 55 60
Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro Ser
65 70 75 80
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
85 90 95
Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Gly Gln
100 105 110
Ser Tyr Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Val Met Lys Arg
115 120 125
Ala Asp Val Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu Gln
130 135 140
Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe Tyr
145 150 155 160
Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg Gln
165 170 175
Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
180 185 190
Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu Arg
195 200 205
His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser Pro
210 215 220
Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
225 230
<210> 297
<211> 234
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-11
<400> 297
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Asp Ile Gln Met Asn Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser
20 25 30
Ala Ser Leu Gly Asp Thr Ile Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asn
35 40 45
Ile Tyr Ile Trp Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Asn Ile Pro
50 55 60
Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro Ser
65 70 75 80
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
85 90 95
Thr Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Leu Gln Gly Gln
100 105 110
Ser Tyr Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Met Lys Arg
115 120 125
Ala Asp Val Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu Gln
130 135 140
Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe Tyr
145 150 155 160
Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg Gln
165 170 175
Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
180 185 190
Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu Arg
195 200 205
His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser Pro
210 215 220
Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
225 230
<210> 298
<211> 239
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-12
<400> 298
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Leu Ser
20 25 30
Val Thr Ile Gly Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser
35 40 45
Leu Leu Tyr Thr Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Ser Trp Phe Leu Gln Arg
50 55 60
Pro Gly Gln Ser Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp
65 70 75 80
Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe
85 90 95
Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr
100 105 110
Cys Leu Gln Ser Thr His Phe Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys
115 120 125
Leu Glu Val Lys Arg Ala Asp Val Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro
130 135 140
Pro Ser Ser Glu Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe
145 150 155 160
Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp
165 170 175
Gly Ser Glu Arg Gln Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp
180 185 190
Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys
195 200 205
Asp Glu Tyr Glu Arg His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys
210 215 220
Thr Ser Thr Ser Pro Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
225 230 235
<210> 299
<211> 239
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-13
<400> 299
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Leu Ser
20 25 30
Val Ala Ile Gly Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser
35 40 45
Leu Leu Tyr Thr Asn Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg
50 55 60
Pro Gly Gln Ser Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Leu Ser Lys Leu Asp
65 70 75 80
Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Ala Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe
85 90 95
Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr
100 105 110
Cys Leu Gln Ser Thr His Phe Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys
115 120 125
Leu Glu Met Lys Arg Ala Asp Val Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro
130 135 140
Pro Ser Ser Glu Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe
145 150 155 160
Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp
165 170 175
Gly Ser Glu Arg Gln Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp
180 185 190
Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys
195 200 205
Asp Glu Tyr Glu Arg His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys
210 215 220
Thr Ser Thr Ser Pro Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
225 230 235
<210> 300
<211> 239
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-14
<400> 300
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Leu Ser
20 25 30
Val Ala Ile Gly Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser
35 40 45
Leu Leu Tyr Thr Asn Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg
50 55 60
Pro Gly Gln Ser Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp
65 70 75 80
Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe
85 90 95
Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr
100 105 110
Cys Leu Gln Ser Thr His Phe Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys
115 120 125
Leu Glu Leu Lys Arg Ala Asp Val Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro
130 135 140
Pro Ser Ser Glu Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe
145 150 155 160
Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp
165 170 175
Gly Ser Glu Arg Gln Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp
180 185 190
Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys
195 200 205
Asp Glu Tyr Glu Arg His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys
210 215 220
Thr Ser Thr Ser Pro Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
225 230 235
<210> 301
<211> 239
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-15
<400> 301
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro
20 25 30
Val Ser Leu Gly Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser
35 40 45
Ile Val His Asn Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys
50 55 60
Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe
65 70 75 80
Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe
85 90 95
Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr
100 105 110
Cys Phe Gln Gly Ser His Val Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys
115 120 125
Leu Glu Leu Lys Arg Ala Asp Val Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro
130 135 140
Pro Ser Ser Glu Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe
145 150 155 160
Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp
165 170 175
Gly Ser Glu Arg Gln Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp
180 185 190
Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys
195 200 205
Asp Glu Tyr Glu Arg His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys
210 215 220
Thr Ser Thr Ser Pro Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
225 230 235
<210> 302
<211> 239
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-16
<400> 302
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro
20 25 30
Val Ser Leu Gly Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser
35 40 45
Ile Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys
50 55 60
Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe
65 70 75 80
Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe
85 90 95
Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr
100 105 110
Cys Phe Gln Gly Ser His Val Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys
115 120 125
Leu Glu Leu Lys Arg Ala Asp Val Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro
130 135 140
Pro Ser Ser Glu Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe
145 150 155 160
Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp
165 170 175
Gly Ser Glu Arg Gln Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp
180 185 190
Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys
195 200 205
Asp Glu Tyr Glu Arg His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys
210 215 220
Thr Ser Thr Ser Pro Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
225 230 235
<210> 303
<211> 234
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-17
<400> 303
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Asp Ile Leu Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Met Ser
20 25 30
Val Ser Leu Gly Asp Thr Val Ser Ile Thr Cys His Ala Ser Gln Gly
35 40 45
Ile Asn Ser Asn Met Gly Trp Leu Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Phe
50 55 60
Lys Gly Leu Ile Tyr His Ala Thr Asn Leu Glu Asp Gly Val Pro Ser
65 70 75 80
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ala Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser
85 90 95
Ser Leu Glu Ser Glu Asp Phe Ala Asp Tyr Tyr Cys Val Gln Tyr Ala
100 105 110
Gln Phe Pro Pro Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg
115 120 125
Ala Asp Val Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu Gln
130 135 140
Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe Tyr
145 150 155 160
Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg Gln
165 170 175
Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
180 185 190
Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu Arg
195 200 205
His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser Pro
210 215 220
Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
225 230
<210> 304
<211> 234
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-18
<400> 304
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Asp Ile Val Met Thr Gln Ser His Lys Phe Met Ser
20 25 30
Thr Ser Val Gly Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp
35 40 45
Val Arg Thr Ala Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro
50 55 60
Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Asp
65 70 75 80
Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Leu Ser
85 90 95
Asn Val Gln Ser Glu Asp Leu Ala Asp Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Ser
100 105 110
Ser Tyr Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg
115 120 125
Ala Asp Val Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu Gln
130 135 140
Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe Tyr
145 150 155 160
Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg Gln
165 170 175
Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
180 185 190
Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu Arg
195 200 205
His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser Pro
210 215 220
Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
225 230
<210> 305
<211> 234
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-19
<400> 305
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Ser Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Lys Phe Leu Leu
20 25 30
Val Ser Ala Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Ser
35 40 45
Val Ser Asn Asp Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro
50 55 60
Lys Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp
65 70 75 80
Arg Phe Thr Gly Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser
85 90 95
Thr Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Asp Tyr
100 105 110
Thr Ser Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg
115 120 125
Ala Asp Val Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu Gln
130 135 140
Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe Tyr
145 150 155 160
Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg Gln
165 170 175
Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
180 185 190
Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu Arg
195 200 205
His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser Pro
210 215 220
Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
225 230
<210> 306
<211> 234
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-20
<400> 306
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Gln Lys Phe Met Ser
20 25 30
Thr Ser Val Gly Glu Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn
35 40 45
Val Gly Thr Asn Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Ala Gly Gln Ser Leu
50 55 60
Glu Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Asn Arg His Thr Gly Val Pro Asp
65 70 75 80
Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Thr
85 90 95
Asn Val Gln Ser Glu Asp Met Thr Asn Tyr Phe Cys Glu Gln Tyr Ser
100 105 110
Asn Phe Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg
115 120 125
Ala Asp Val Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu Gln
130 135 140
Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe Tyr
145 150 155 160
Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg Gln
165 170 175
Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
180 185 190
Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu Arg
195 200 205
His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser Pro
210 215 220
Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
225 230
<210> 307
<211> 234
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-21
<400> 307
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Asp Ile Val Met Thr Gln Ser His Lys Phe Met Ser
20 25 30
Thr Ser Val Gly Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp
35 40 45
Val Ser Thr Ala Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro
50 55 60
Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Asp
65 70 75 80
Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser
85 90 95
Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Leu Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr
100 105 110
Thr Thr Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg
115 120 125
Ala Asp Val Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu Gln
130 135 140
Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe Tyr
145 150 155 160
Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg Gln
165 170 175
Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
180 185 190
Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu Arg
195 200 205
His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser Pro
210 215 220
Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
225 230
<210> 308
<211> 219
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-22
<400> 308
Asn Ile Trp Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Val Ser Ala Gly
1 5 10 15
Glu Met Val Thr Met Thr Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser
20 25 30
Ser Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln
85 90 95
Tyr Leu Ser Ser Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105 110
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
115 120 125
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
130 135 140
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
145 150 155 160
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
165 170 175
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
180 185 190
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
195 200 205
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215
<210> 309
<211> 219
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-23
<400> 309
Asn Ile Met Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Val Ser Ala Gly
1 5 10 15
Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser
20 25 30
Ser Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Val Gln Pro Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln
85 90 95
Tyr Leu Ser Ser Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105 110
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
115 120 125
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
130 135 140
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
145 150 155 160
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
165 170 175
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
180 185 190
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
195 200 205
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215
<210> 310
<211> 219
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-24
<400> 310
Asn Ile Met Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Val Ser Ala Gly
1 5 10 15
Gln Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser
20 25 30
Ser Ser Gln Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Val Gln Pro Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln
85 90 95
Tyr Leu Ser Ser Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105 110
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
115 120 125
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
130 135 140
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
145 150 155 160
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
165 170 175
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
180 185 190
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
195 200 205
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215
<210> 311
<211> 219
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-25
<400> 311
Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Asn
20 25 30
Ser Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Asn Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Ala Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Phe Cys Ser Gln Ser
85 90 95
Thr His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
115 120 125
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
130 135 140
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
145 150 155 160
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
165 170 175
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
180 185 190
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
195 200 205
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215
<210> 312
<211> 216
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-26
<400> 312
Gln Ala Val Val Thr Gln Glu Ser Ala Leu Thr Thr Ser Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Thr Ser
20 25 30
Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Asp His Leu Phe Thr Gly
35 40 45
Leu Ile Gly Gly Ile Asn Asn Arg Val Pro Gly Val Pro Ala Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Leu Ile Gly Asp Lys Ala Ala Leu Thr Ile Thr Gly Ala
65 70 75 80
Gln Thr Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Phe Cys Ala Leu Trp Tyr Ser Asn
85 90 95
His Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Arg Thr Val
100 105 110
Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys
115 120 125
Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg
130 135 140
Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn
145 150 155 160
Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser
165 170 175
Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys
180 185 190
Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr
195 200 205
Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215
<210> 313
<211> 219
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-27
<400> 313
Asp Ile Val Met Thr Gln Ala Ala Phe Ser Asn Pro Val Thr Leu Gly
1 5 10 15
Thr Ser Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser Leu Leu His Thr
20 25 30
Asn Gly Ile Thr Phe Leu Tyr Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Pro Leu Ile Tyr Gln Met Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Ser Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Gln Asn
85 90 95
Leu Glu Leu Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Asn
100 105 110
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
115 120 125
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
130 135 140
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
145 150 155 160
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
165 170 175
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
180 185 190
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
195 200 205
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215
<210> 314
<211> 219
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-28
<400> 314
Asn Ile Met Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Val Ser Ala Gly
1 5 10 15
Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser
20 25 30
Ser Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln
85 90 95
Tyr Leu Ser Ser Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105 110
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
115 120 125
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
130 135 140
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
145 150 155 160
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
165 170 175
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
180 185 190
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
195 200 205
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215
<210> 315
<211> 220
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-29
<400> 315
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Met Ser Val Gly
1 5 10 15
Gln Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser
20 25 30
Ser Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Ser Pro Lys Leu Leu Val Tyr Phe Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Ile Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Asp Tyr Phe Cys Gln Gln
85 90 95
His Tyr Ser Thr Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Ala Lys Leu Glu Ile
100 105 110
Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp
115 120 125
Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn
130 135 140
Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu
145 150 155 160
Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp
165 170 175
Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr
180 185 190
Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser
195 200 205
Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215 220
<210> 316
<211> 214
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-30
<400> 316
Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Thr Ile Thr Ile Thr Cys His Ala Ser Gln Asn Ile Asn Val Trp
20 25 30
Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Asn Ile Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Gln Ser Tyr Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 317
<211> 214
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-31
<400> 317
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Val Thr Thr Gly
1 5 10 15
Glu Lys Val Thr Ile Arg Cys Ile Thr Ser Ile Asp Ile Asp Asp Asp
20 25 30
Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Glu Pro Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Ser Glu Gly Asn Thr Leu Arg Pro Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Ser
50 55 60
Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Val Phe Thr Ile Glu Asn Thr Leu Ser
65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Asp Tyr Tyr Cys Leu Gln Ser Asp Asn Lys Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 318
<211> 214
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-32
<400> 318
Asp Ile Gln Val Ile Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Thr Ile Thr Ile Thr Cys His Ala Ser Gln Asn Ile Asn Val Trp
20 25 30
Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Asn Ile Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Gln Ser Tyr Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 319
<211> 214
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-33
<400> 319
Glu Ile Lys Met Asn Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Thr Ile Thr Ile Thr Cys His Ala Ser Gln Asn Ile Asn Val Trp
20 25 30
Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Asn Ile Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Gln Ser Tyr Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 320
<211> 216
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-34
<400> 320
Gln Ala Val Val Thr Gln Glu Ser Ala Leu Thr Thr Ser Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Thr Ser
20 25 30
Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Asp His Leu Phe Thr Gly
35 40 45
Leu Ile Gly Gly Thr Asn Asn Arg Ala Pro Gly Val Pro Ala Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Leu Ile Gly Asp Lys Ala Ala Leu Thr Ile Thr Gly Ala
65 70 75 80
Gln Thr Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Phe Cys Ala Leu Trp Tyr Ser Asn
85 90 95
His Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Arg Thr Val
100 105 110
Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys
115 120 125
Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg
130 135 140
Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn
145 150 155 160
Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser
165 170 175
Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys
180 185 190
Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr
195 200 205
Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215
<210> 321
<211> 219
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-35
<400> 321
Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Asp Ile Val His Ser
20 25 30
Ser Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Leu Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Ala Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
115 120 125
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
130 135 140
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
145 150 155 160
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
165 170 175
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
180 185 190
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
195 200 205
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215
<210> 322
<211> 219
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-36
<400> 322
Asp Ile Gly Met Arg Gln Ala Ala Phe Ser Asn Pro Val Thr Leu Gly
1 5 10 15
Thr Ser Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser Leu Leu Tyr Ser
20 25 30
Asn Gly Ile Thr Tyr Leu Tyr Trp Phe Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Gln Met Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Ser Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Asp Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Gln Asn
85 90 95
Leu Glu Leu Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
115 120 125
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
130 135 140
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
145 150 155 160
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
165 170 175
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
180 185 190
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
195 200 205
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215
<210> 323
<211> 241
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-37
<400> 323
Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp
1 5 10 15
Leu Arg Gly Ala Arg Cys Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Leu Ser
20 25 30
Leu Pro Val Thr Pro Gly Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser
35 40 45
Lys Ser Leu Leu Tyr Lys Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Phe Leu
50 55 60
Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Met Ser Thr
65 70 75 80
His Ala Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr
85 90 95
Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu Val Asp Tyr Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly
115 120 125
Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile
130 135 140
Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val
145 150 155 160
Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys
165 170 175
Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu
180 185 190
Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu
195 200 205
Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr
210 215 220
His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu
225 230 235 240
Cys
<210> 324
<211> 239
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LC-38
<400> 324
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser
20 25 30
Val Thr Pro Gly Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Lys Ser
35 40 45
Leu Leu His Ser Asp Gly Ile Thr Tyr Leu Tyr Trp Tyr Leu Gln Lys
50 55 60
Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Arg Met Ser Asn Leu Ala
65 70 75 80
Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe
85 90 95
Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr
100 105 110
Cys Ala Gln Met Leu Glu Phe Pro Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys
115 120 125
Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro
130 135 140
Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu
145 150 155 160
Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp
165 170 175
Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp
180 185 190
Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys
195 200 205
Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln
210 215 220
Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
225 230 235
<210> 325
<211> 21
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IFNg-2 Forward
<400> 325
acagcaaggc gaaaaaggat g 21
<210> 326
<211> 19
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IFNg-2 Reverse
<400> 326
tggtggacca ctcggatga 19
<210> 327
<211> 23
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL1beta Forward
<400> 327
atgatggctt attacagtgg caa 23
<210> 328
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL1beta Reverse
<400> 328
gtcggacatt cgtagctgga 20
<210> 329
<211> 23
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL10-1 Forward
<400> 329
cttactgact ggcatgagga tca 23
<210> 330
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL10-1 Reverse
<400> 330
gcagctctag gagcatgtgg 20
<210> 331
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL17a Forward
<400> 331
tgagcttccc agatcacaga 20
<210> 332
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL17a Reverse
<400> 332
tccagaaggc cctcagacta 20
<210> 333
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL21 Forward
<400> 333
cgcctcctga ttagacttcg 20
<210> 334
<211> 21
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL21 Reverse
<400> 334
tgggtgtcct tttctcatac g 21
<210> 335
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL22 Forward
<400> 335
tcgccttgat ctctccactc 20
<210> 336
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL22 Reverse
<400> 336
gctcagctcc tgtcacatca 20
<210> 337
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> TGFbeta-2 Forward
<400> 337
gagcccgaag cggactacta 20
<210> 338
<211> 23
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> TGFbeta-2 Reverse
<400> 338
tggttttctc atagatggcg ttg 23
<210> 339
<211> 798
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 339
Met Asn Leu Gln Pro Ile Phe Trp Ile Gly Leu Ile Ser Ser Val Cys
1 5 10 15
Cys Val Phe Ala Gln Thr Asp Glu Asn Arg Cys Leu Lys Ala Asn Ala
20 25 30
Lys Ser Cys Gly Glu Cys Ile Gln Ala Gly Pro Asn Cys Gly Trp Cys
35 40 45
Thr Asn Ser Thr Phe Leu Gln Glu Gly Met Pro Thr Ser Ala Arg Cys
50 55 60
Asp Asp Leu Glu Ala Leu Lys Lys Lys Gly Cys Pro Pro Asp Asp Ile
65 70 75 80
Glu Asn Pro Arg Gly Ser Lys Asp Ile Lys Lys Asn Lys Asn Val Thr
85 90 95
Asn Arg Ser Lys Gly Thr Ala Glu Lys Leu Lys Pro Glu Asp Ile His
100 105 110
Gln Ile Gln Pro Gln Gln Leu Val Leu Arg Leu Arg Ser Gly Glu Pro
115 120 125
Gln Thr Phe Thr Leu Lys Phe Lys Arg Ala Glu Asp Tyr Pro Ile Asp
130 135 140
Leu Tyr Tyr Leu Met Asp Leu Ser Tyr Ser Met Lys Asp Asp Leu Glu
145 150 155 160
Asn Val Lys Ser Leu Gly Thr Asp Leu Met Asn Glu Met Arg Arg Ile
165 170 175
Thr Ser Asp Phe Arg Ile Gly Phe Gly Ser Phe Val Glu Lys Thr Val
180 185 190
Met Pro Tyr Ile Ser Thr Thr Pro Ala Lys Leu Arg Asn Pro Cys Thr
195 200 205
Ser Glu Gln Asn Cys Thr Thr Pro Phe Ser Tyr Lys Asn Val Leu Ser
210 215 220
Leu Thr Asn Lys Gly Glu Val Phe Asn Glu Leu Val Gly Lys Gln Arg
225 230 235 240
Ile Ser Gly Asn Leu Asp Ser Pro Glu Gly Gly Phe Asp Ala Ile Met
245 250 255
Gln Val Ala Val Cys Gly Ser Leu Ile Gly Trp Arg Asn Val Thr Arg
260 265 270
Leu Leu Val Phe Ser Thr Asp Ala Gly Phe His Phe Ala Gly Asp Gly
275 280 285
Lys Leu Gly Gly Ile Val Leu Pro Asn Asp Gly Gln Cys His Leu Glu
290 295 300
Asn Asn Met Tyr Thr Met Ser His Tyr Tyr Asp Tyr Pro Ser Ile Ala
305 310 315 320
His Leu Val Gln Lys Leu Ser Glu Asn Asn Ile Gln Thr Ile Phe Ala
325 330 335
Val Thr Glu Glu Phe Gln Pro Val Tyr Lys Glu Leu Lys Asn Leu Ile
340 345 350
Pro Lys Ser Ala Val Gly Thr Leu Ser Ala Asn Ser Ser Asn Val Ile
355 360 365
Gln Leu Ile Ile Asp Ala Tyr Asn Ser Leu Ser Ser Glu Val Ile Leu
370 375 380
Glu Asn Gly Lys Leu Ser Glu Gly Val Thr Ile Ser Tyr Lys Ser Tyr
385 390 395 400
Cys Lys Asn Gly Val Asn Gly Thr Gly Glu Asn Gly Arg Lys Cys Ser
405 410 415
Asn Ile Ser Ile Gly Asp Glu Val Gln Phe Glu Ile Ser Ile Thr Ser
420 425 430
Asn Lys Cys Pro Lys Lys Asp Ser Asp Ser Phe Lys Ile Arg Pro Leu
435 440 445
Gly Phe Thr Glu Glu Val Glu Val Ile Leu Gln Tyr Ile Cys Glu Cys
450 455 460
Glu Cys Gln Ser Glu Gly Ile Pro Glu Ser Pro Lys Cys His Glu Gly
465 470 475 480
Asn Gly Thr Phe Glu Cys Gly Ala Cys Arg Cys Asn Glu Gly Arg Val
485 490 495
Gly Arg His Cys Glu Cys Ser Thr Asp Glu Val Asn Ser Glu Asp Met
500 505 510
Asp Ala Tyr Cys Arg Lys Glu Asn Ser Ser Glu Ile Cys Ser Asn Asn
515 520 525
Gly Glu Cys Val Cys Gly Gln Cys Val Cys Arg Lys Arg Asp Asn Thr
530 535 540
Asn Glu Ile Tyr Ser Gly Lys Phe Cys Glu Cys Asp Asn Phe Asn Cys
545 550 555 560
Asp Arg Ser Asn Gly Leu Ile Cys Gly Gly Asn Gly Val Cys Lys Cys
565 570 575
Arg Val Cys Glu Cys Asn Pro Asn Tyr Thr Gly Ser Ala Cys Asp Cys
580 585 590
Ser Leu Asp Thr Ser Thr Cys Glu Ala Ser Asn Gly Gln Ile Cys Asn
595 600 605
Gly Arg Gly Ile Cys Glu Cys Gly Val Cys Lys Cys Thr Asp Pro Lys
610 615 620
Phe Gln Gly Gln Thr Cys Glu Met Cys Gln Thr Cys Leu Gly Val Cys
625 630 635 640
Ala Glu His Lys Glu Cys Val Gln Cys Arg Ala Phe Asn Lys Gly Glu
645 650 655
Lys Lys Asp Thr Cys Thr Gln Glu Cys Ser Tyr Phe Asn Ile Thr Lys
660 665 670
Val Glu Ser Arg Asp Lys Leu Pro Gln Pro Val Gln Pro Asp Pro Val
675 680 685
Ser His Cys Lys Glu Lys Asp Val Asp Asp Cys Trp Phe Tyr Phe Thr
690 695 700
Tyr Ser Val Asn Gly Asn Asn Glu Val Met Val His Val Val Glu Asn
705 710 715 720
Pro Glu Cys Pro Thr Gly Pro Asp Ile Ile Pro Ile Val Ala Gly Val
725 730 735
Val Ala Gly Ile Val Leu Ile Gly Leu Ala Leu Leu Leu Ile Trp Lys
740 745 750
Leu Leu Met Ile Ile His Asp Arg Arg Glu Phe Ala Lys Phe Glu Lys
755 760 765
Glu Lys Met Asn Ala Lys Trp Asp Thr Gly Glu Asn Pro Ile Tyr Lys
770 775 780
Ser Ala Val Thr Thr Val Val Asn Pro Lys Tyr Glu Gly Lys
785 790 795
<210> 340
<211> 916
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 340
Met Gly Pro Gly Pro Ser Arg Ala Pro Arg Ala Pro Arg Leu Met Leu
1 5 10 15
Cys Ala Leu Ala Leu Met Val Ala Ala Gly Gly Cys Val Val Ser Ala
20 25 30
Phe Asn Leu Asp Thr Arg Phe Leu Val Val Lys Glu Ala Gly Asn Pro
35 40 45
Gly Ser Leu Phe Gly Tyr Ser Val Ala Leu His Arg Gln Thr Glu Arg
50 55 60
Gln Gln Arg Tyr Leu Leu Leu Ala Gly Ala Pro Arg Glu Leu Ala Val
65 70 75 80
Pro Asp Gly Tyr Thr Asn Arg Thr Gly Ala Val Tyr Leu Cys Pro Leu
85 90 95
Thr Ala His Lys Asp Asp Cys Glu Arg Met Asn Ile Thr Val Lys Asn
100 105 110
Asp Pro Gly His His Ile Ile Glu Asp Met Trp Leu Gly Val Thr Val
115 120 125
Ala Ser Gln Gly Pro Ala Gly Arg Val Leu Val Cys Ala His Arg Tyr
130 135 140
Thr Gln Val Leu Trp Ser Gly Ser Glu Asp Gln Arg Arg Met Val Gly
145 150 155 160
Lys Cys Tyr Val Arg Gly Asn Asp Leu Glu Leu Asp Ser Ser Asp Asp
165 170 175
Trp Gln Thr Tyr His Asn Glu Met Cys Asn Ser Asn Thr Asp Tyr Leu
180 185 190
Glu Thr Gly Met Cys Gln Leu Gly Thr Ser Gly Gly Phe Thr Gln Asn
195 200 205
Thr Val Tyr Phe Gly Ala Pro Gly Ala Tyr Asn Trp Lys Gly Asn Ser
210 215 220
Tyr Met Ile Gln Arg Lys Glu Trp Asp Leu Ser Glu Tyr Ser Tyr Lys
225 230 235 240
Asp Pro Glu Asp Gln Gly Asn Leu Tyr Ile Asp Ile Ala Val Gly Ala
245 250 255
Pro Phe Glu Gly Leu Gly Lys Val Tyr Ile Tyr His Ser Ser Ser Lys
260 265 270
Gly Leu Leu Arg Gln Pro Gln Gln Val Ile His Gly Glu Lys Leu Gly
275 280 285
Leu Pro Gly Leu Ala Thr Phe Gly Tyr Ser Leu Ser Gly Gln Met Asp
290 295 300
Val Asp Glu Asn Phe Tyr Pro Asp Leu Leu Val Gly Ser Leu Ser Asp
305 310 315 320
His Ile Val Leu Leu Arg Ala Arg Pro Val Ile Asn Ile Val His Lys
325 330 335
Thr Leu Val Pro Arg Pro Ala Val Leu Asp Pro Ala Leu Cys Thr Ala
340 345 350
Thr Ser Cys Val Gln Val Glu Leu Cys Phe Ala Tyr Asn Gln Ser Ala
355 360 365
Gly Asn Pro Asn Tyr Arg Arg Asn Ile Thr Leu Ala Tyr Thr Leu Glu
370 375 380
Ala Asp Arg Asp Arg Arg Pro Pro Arg Leu Arg Phe Ala Gly Ser Glu
385 390 395 400
Ser Ala Val Phe His Gly Phe Phe Ser Met Pro Glu Met Arg Cys Gln
405 410 415
Lys Leu Glu Leu Leu Leu Met Asp Asn Leu Arg Asp Lys Leu Arg Pro
420 425 430
Ile Ile Ile Ser Met Asn Tyr Ser Leu Pro Leu Arg Met Pro Asp Arg
435 440 445
Pro Arg Leu Gly Leu Arg Ser Leu Asp Ala Tyr Pro Ile Leu Asn Gln
450 455 460
Ala Gln Ala Leu Glu Asn His Thr Glu Val Gln Phe Gln Lys Glu Cys
465 470 475 480
Gly Pro Asp Asn Lys Cys Glu Ser Asn Leu Gln Met Arg Ala Ala Phe
485 490 495
Val Ser Glu Gln Gln Gln Lys Leu Ser Arg Leu Gln Tyr Ser Arg Asp
500 505 510
Val Arg Lys Leu Leu Leu Ser Ile Asn Val Thr Asn Thr Arg Thr Ser
515 520 525
Glu Arg Ser Gly Glu Asp Ala His Glu Ala Leu Leu Thr Leu Val Val
530 535 540
Pro Pro Ala Leu Leu Leu Ser Ser Val Arg Pro Pro Gly Ala Cys Gln
545 550 555 560
Ala Asn Glu Thr Ile Phe Cys Glu Leu Gly Asn Pro Phe Lys Arg Asn
565 570 575
Gln Arg Met Glu Leu Leu Ile Ala Phe Glu Val Ile Gly Val Thr Leu
580 585 590
His Thr Arg Asp Leu Gln Val Gln Leu Gln Leu Ser Thr Ser Ser His
595 600 605
Gln Asp Asn Leu Trp Pro Met Ile Leu Thr Leu Leu Val Asp Tyr Thr
610 615 620
Leu Gln Thr Ser Leu Ser Met Val Asn His Arg Leu Gln Ser Phe Phe
625 630 635 640
Gly Gly Thr Val Met Gly Glu Ser Gly Met Lys Thr Val Glu Asp Val
645 650 655
Gly Ser Pro Leu Lys Tyr Glu Phe Gln Val Gly Pro Met Gly Glu Gly
660 665 670
Leu Val Gly Leu Gly Thr Leu Val Leu Gly Leu Glu Trp Pro Tyr Glu
675 680 685
Val Ser Asn Gly Lys Trp Leu Leu Tyr Pro Thr Glu Ile Thr Val His
690 695 700
Gly Asn Gly Ser Trp Pro Cys Arg Pro Pro Gly Asp Leu Ile Asn Pro
705 710 715 720
Leu Asn Leu Thr Leu Ser Asp Pro Gly Asp Arg Pro Ser Ser Pro Gln
725 730 735
Arg Arg Arg Arg Gln Leu Asp Pro Gly Gly Gly Gln Gly Pro Pro Pro
740 745 750
Val Thr Leu Ala Ala Ala Lys Lys Ala Lys Ser Glu Thr Val Leu Thr
755 760 765
Cys Ala Thr Gly Arg Ala His Cys Val Trp Leu Glu Cys Pro Ile Pro
770 775 780
Asp Ala Pro Val Val Thr Asn Val Thr Val Lys Ala Arg Val Trp Asn
785 790 795 800
Ser Thr Phe Ile Glu Asp Tyr Arg Asp Phe Asp Arg Val Arg Val Asn
805 810 815
Gly Trp Ala Thr Leu Phe Leu Arg Thr Ser Ile Pro Thr Ile Asn Met
820 825 830
Glu Asn Lys Thr Thr Trp Phe Ser Val Asp Ile Asp Ser Glu Leu Val
835 840 845
Glu Glu Leu Pro Ala Glu Ile Glu Leu Trp Leu Val Leu Val Ala Val
850 855 860
Gly Ala Gly Leu Leu Leu Leu Gly Leu Ile Ile Leu Leu Leu Trp Lys
865 870 875 880
Cys Gly Phe Phe Lys Arg Ala Arg Thr Arg Ala Leu Tyr Glu Ala Lys
885 890 895
Arg Gln Lys Ala Glu Met Lys Ser Gln Pro Ser Glu Thr Glu Arg Leu
900 905 910
Thr Asp Asp Tyr
915
<210> 341
<211> 788
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 341
Met Arg Ala Arg Pro Arg Pro Arg Pro Leu Trp Ala Thr Val Leu Ala
1 5 10 15
Leu Gly Ala Leu Ala Gly Val Gly Val Gly Gly Pro Asn Ile Cys Thr
20 25 30
Thr Arg Gly Val Ser Ser Cys Gln Gln Cys Leu Ala Val Ser Pro Met
35 40 45
Cys Ala Trp Cys Ser Asp Glu Ala Leu Pro Leu Gly Ser Pro Arg Cys
50 55 60
Asp Leu Lys Glu Asn Leu Leu Lys Asp Asn Cys Ala Pro Glu Ser Ile
65 70 75 80
Glu Phe Pro Val Ser Glu Ala Arg Val Leu Glu Asp Arg Pro Leu Ser
85 90 95
Asp Lys Gly Ser Gly Asp Ser Ser Gln Val Thr Gln Val Ser Pro Gln
100 105 110
Arg Ile Ala Leu Arg Leu Arg Pro Asp Asp Ser Lys Asn Phe Ser Ile
115 120 125
Gln Val Arg Gln Val Glu Asp Tyr Pro Val Asp Ile Tyr Tyr Leu Met
130 135 140
Asp Leu Ser Tyr Ser Met Lys Asp Asp Leu Trp Ser Ile Gln Asn Leu
145 150 155 160
Gly Thr Lys Leu Ala Thr Gln Met Arg Lys Leu Thr Ser Asn Leu Arg
165 170 175
Ile Gly Phe Gly Ala Phe Val Asp Lys Pro Val Ser Pro Tyr Met Tyr
180 185 190
Ile Ser Pro Pro Glu Ala Leu Glu Asn Pro Cys Tyr Asp Met Lys Thr
195 200 205
Thr Cys Leu Pro Met Phe Gly Tyr Lys His Val Leu Thr Leu Thr Asp
210 215 220
Gln Val Thr Arg Phe Asn Glu Glu Val Lys Lys Gln Ser Val Ser Arg
225 230 235 240
Asn Arg Asp Ala Pro Glu Gly Gly Phe Asp Ala Ile Met Gln Ala Thr
245 250 255
Val Cys Asp Glu Lys Ile Gly Trp Arg Asn Asp Ala Ser His Leu Leu
260 265 270
Val Phe Thr Thr Asp Ala Lys Thr His Ile Ala Leu Asp Gly Arg Leu
275 280 285
Ala Gly Ile Val Gln Pro Asn Asp Gly Gln Cys His Val Gly Ser Asp
290 295 300
Asn His Tyr Ser Ala Ser Thr Thr Met Asp Tyr Pro Ser Leu Gly Leu
305 310 315 320
Met Thr Glu Lys Leu Ser Gln Lys Asn Ile Asn Leu Ile Phe Ala Val
325 330 335
Thr Glu Asn Val Val Asn Leu Tyr Gln Asn Tyr Ser Glu Leu Ile Pro
340 345 350
Gly Thr Thr Val Gly Val Leu Ser Met Asp Ser Ser Asn Val Leu Gln
355 360 365
Leu Ile Val Asp Ala Tyr Gly Lys Ile Arg Ser Lys Val Glu Leu Glu
370 375 380
Val Arg Asp Leu Pro Glu Glu Leu Ser Leu Ser Phe Asn Ala Thr Cys
385 390 395 400
Leu Asn Asn Glu Val Ile Pro Gly Leu Lys Ser Cys Met Gly Leu Lys
405 410 415
Ile Gly Asp Thr Val Ser Phe Ser Ile Glu Ala Lys Val Arg Gly Cys
420 425 430
Pro Gln Glu Lys Glu Lys Ser Phe Thr Ile Lys Pro Val Gly Phe Lys
435 440 445
Asp Ser Leu Ile Val Gln Val Thr Phe Asp Cys Asp Cys Ala Cys Gln
450 455 460
Ala Gln Ala Glu Pro Asn Ser His Arg Cys Asn Asn Gly Asn Gly Thr
465 470 475 480
Phe Glu Cys Gly Val Cys Arg Cys Gly Pro Gly Trp Leu Gly Ser Gln
485 490 495
Cys Glu Cys Ser Glu Glu Asp Tyr Arg Pro Ser Gln Gln Asp Glu Cys
500 505 510
Ser Pro Arg Glu Gly Gln Pro Val Cys Ser Gln Arg Gly Glu Cys Leu
515 520 525
Cys Gly Gln Cys Val Cys His Ser Ser Asp Phe Gly Lys Ile Thr Gly
530 535 540
Lys Tyr Cys Glu Cys Asp Asp Phe Ser Cys Val Arg Tyr Lys Gly Glu
545 550 555 560
Met Cys Ser Gly His Gly Gln Cys Ser Cys Gly Asp Cys Leu Cys Asp
565 570 575
Ser Asp Trp Thr Gly Tyr Tyr Cys Asn Cys Thr Thr Arg Thr Asp Thr
580 585 590
Cys Met Ser Ser Asn Gly Leu Leu Cys Ser Gly Arg Gly Lys Cys Glu
595 600 605
Cys Gly Ser Cys Val Cys Ile Gln Pro Gly Ser Tyr Gly Asp Thr Cys
610 615 620
Glu Lys Cys Pro Thr Cys Pro Asp Ala Cys Thr Phe Lys Lys Glu Cys
625 630 635 640
Val Glu Cys Lys Lys Phe Asp Arg Gly Ala Leu His Asp Glu Asn Thr
645 650 655
Cys Asn Arg Tyr Cys Arg Asp Glu Ile Glu Ser Val Lys Glu Leu Lys
660 665 670
Asp Thr Gly Lys Asp Ala Val Asn Cys Thr Tyr Lys Asn Glu Asp Asp
675 680 685
Cys Val Val Arg Phe Gln Tyr Tyr Glu Asp Ser Ser Gly Lys Ser Ile
690 695 700
Leu Tyr Val Val Glu Glu Pro Glu Cys Pro Lys Gly Pro Asp Ile Leu
705 710 715 720
Val Val Leu Leu Ser Val Met Gly Ala Ile Leu Leu Ile Gly Leu Ala
725 730 735
Ala Leu Leu Ile Trp Lys Leu Leu Ile Thr Ile His Asp Arg Lys Glu
740 745 750
Phe Ala Lys Phe Glu Glu Glu Arg Ala Arg Ala Lys Trp Asp Thr Ala
755 760 765
Asn Asn Pro Leu Tyr Lys Glu Ala Thr Ser Thr Phe Thr Asn Ile Thr
770 775 780
Tyr Arg Gly Thr
785
<210> 342
<211> 1048
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 342
Met Ala Phe Pro Pro Arg Arg Arg Leu Arg Leu Gly Pro Arg Gly Leu
1 5 10 15
Pro Leu Leu Leu Ser Gly Leu Leu Leu Pro Leu Cys Arg Ala Phe Asn
20 25 30
Leu Asp Val Asp Ser Pro Ala Glu Tyr Ser Gly Pro Glu Gly Ser Tyr
35 40 45
Phe Gly Phe Ala Val Asp Phe Phe Val Pro Ser Ala Ser Ser Arg Met
50 55 60
Phe Leu Leu Val Gly Ala Pro Lys Ala Asn Thr Thr Gln Pro Gly Ile
65 70 75 80
Val Glu Gly Gly Gln Val Leu Lys Cys Asp Trp Ser Ser Thr Arg Arg
85 90 95
Cys Gln Pro Ile Glu Phe Asp Ala Thr Gly Asn Arg Asp Tyr Ala Lys
100 105 110
Asp Asp Pro Leu Glu Phe Lys Ser His Gln Trp Phe Gly Ala Ser Val
115 120 125
Arg Ser Lys Gln Asp Lys Ile Leu Ala Cys Ala Pro Leu Tyr His Trp
130 135 140
Arg Thr Glu Met Lys Gln Glu Arg Glu Pro Val Gly Thr Cys Phe Leu
145 150 155 160
Gln Asp Gly Thr Lys Thr Val Glu Tyr Ala Pro Cys Arg Ser Gln Asp
165 170 175
Ile Asp Ala Asp Gly Gln Gly Phe Cys Gln Gly Gly Phe Ser Ile Asp
180 185 190
Phe Thr Lys Ala Asp Arg Val Leu Leu Gly Gly Pro Gly Ser Phe Tyr
195 200 205
Trp Gln Gly Gln Leu Ile Ser Asp Gln Val Ala Glu Ile Val Ser Lys
210 215 220
Tyr Asp Pro Asn Val Tyr Ser Ile Lys Tyr Asn Asn Gln Leu Ala Thr
225 230 235 240
Arg Thr Ala Gln Ala Ile Phe Asp Asp Ser Tyr Leu Gly Tyr Ser Val
245 250 255
Ala Val Gly Asp Phe Asn Gly Asp Gly Ile Asp Asp Phe Val Ser Gly
260 265 270
Val Pro Arg Ala Ala Arg Thr Leu Gly Met Val Tyr Ile Tyr Asp Gly
275 280 285
Lys Asn Met Ser Ser Leu Tyr Asn Phe Thr Gly Glu Gln Met Ala Ala
290 295 300
Tyr Phe Gly Phe Ser Val Ala Ala Thr Asp Ile Asn Gly Asp Asp Tyr
305 310 315 320
Ala Asp Val Phe Ile Gly Ala Pro Leu Phe Met Asp Arg Gly Ser Asp
325 330 335
Gly Lys Leu Gln Glu Val Gly Gln Val Ser Val Ser Leu Gln Arg Ala
340 345 350
Ser Gly Asp Phe Gln Thr Thr Lys Leu Asn Gly Phe Glu Val Phe Ala
355 360 365
Arg Phe Gly Ser Ala Ile Ala Pro Leu Gly Asp Leu Asp Gln Asp Gly
370 375 380
Phe Asn Asp Ile Ala Ile Ala Ala Pro Tyr Gly Gly Glu Asp Lys Lys
385 390 395 400
Gly Ile Val Tyr Ile Phe Asn Gly Arg Ser Thr Gly Leu Asn Ala Val
405 410 415
Pro Ser Gln Ile Leu Glu Gly Gln Trp Ala Ala Arg Ser Met Pro Pro
420 425 430
Ser Phe Gly Tyr Ser Met Lys Gly Ala Thr Asp Ile Asp Lys Asn Gly
435 440 445
Tyr Pro Asp Leu Ile Val Gly Ala Phe Gly Val Asp Arg Ala Ile Leu
450 455 460
Tyr Arg Ala Arg Pro Val Ile Thr Val Asn Ala Gly Leu Glu Val Tyr
465 470 475 480
Pro Ser Ile Leu Asn Gln Asp Asn Lys Thr Cys Ser Leu Pro Gly Thr
485 490 495
Ala Leu Lys Val Ser Cys Phe Asn Val Arg Phe Cys Leu Lys Ala Asp
500 505 510
Gly Lys Gly Val Leu Pro Arg Lys Leu Asn Phe Gln Val Glu Leu Leu
515 520 525
Leu Asp Lys Leu Lys Gln Lys Gly Ala Ile Arg Arg Ala Leu Phe Leu
530 535 540
Tyr Ser Arg Ser Pro Ser His Ser Lys Asn Met Thr Ile Ser Arg Gly
545 550 555 560
Gly Leu Met Gln Cys Glu Glu Leu Ile Ala Tyr Leu Arg Asp Glu Ser
565 570 575
Glu Phe Arg Asp Lys Leu Thr Pro Ile Thr Ile Phe Met Glu Tyr Arg
580 585 590
Leu Asp Tyr Arg Thr Ala Ala Asp Thr Thr Gly Leu Gln Pro Ile Leu
595 600 605
Asn Gln Phe Thr Pro Ala Asn Ile Ser Arg Gln Ala His Ile Leu Leu
610 615 620
Asp Cys Gly Glu Asp Asn Val Cys Lys Pro Lys Leu Glu Val Ser Val
625 630 635 640
Asp Ser Asp Gln Lys Lys Ile Tyr Ile Gly Asp Asp Asn Pro Leu Thr
645 650 655
Leu Ile Val Lys Ala Gln Asn Gln Gly Glu Gly Ala Tyr Glu Ala Glu
660 665 670
Leu Ile Val Ser Ile Pro Leu Gln Ala Asp Phe Ile Gly Val Val Arg
675 680 685
Asn Asn Glu Ala Leu Ala Arg Leu Ser Cys Ala Phe Lys Thr Glu Asn
690 695 700
Gln Thr Arg Gln Val Val Cys Asp Leu Gly Asn Pro Met Lys Ala Gly
705 710 715 720
Thr Gln Leu Leu Ala Gly Leu Arg Phe Ser Val His Gln Gln Ser Glu
725 730 735
Met Asp Thr Ser Val Lys Phe Asp Leu Gln Ile Gln Ser Ser Asn Leu
740 745 750
Phe Asp Lys Val Ser Pro Val Val Ser His Lys Val Asp Leu Ala Val
755 760 765
Leu Ala Ala Val Glu Ile Arg Gly Val Ser Ser Pro Asp His Val Phe
770 775 780
Leu Pro Ile Pro Asn Trp Glu His Lys Glu Asn Pro Glu Thr Glu Glu
785 790 795 800
Asp Val Gly Pro Val Val Gln His Ile Tyr Glu Leu Arg Asn Asn Gly
805 810 815
Pro Ser Ser Phe Ser Lys Ala Met Leu His Leu Gln Trp Pro Tyr Lys
820 825 830
Tyr Asn Asn Asn Thr Leu Leu Tyr Ile Leu His Tyr Asp Ile Asp Gly
835 840 845
Pro Met Asn Cys Thr Ser Asp Met Glu Ile Asn Pro Leu Arg Ile Lys
850 855 860
Ile Ser Ser Leu Gln Thr Thr Glu Lys Asn Asp Thr Val Ala Gly Gln
865 870 875 880
Gly Glu Arg Asp His Leu Ile Thr Lys Arg Asp Leu Ala Leu Ser Glu
885 890 895
Gly Asp Ile His Thr Leu Gly Cys Gly Val Ala Gln Cys Leu Lys Ile
900 905 910
Val Cys Gln Val Gly Arg Leu Asp Arg Gly Lys Ser Ala Ile Leu Tyr
915 920 925
Val Lys Ser Leu Leu Trp Thr Glu Thr Phe Met Asn Lys Glu Asn Gln
930 935 940
Asn His Ser Tyr Ser Leu Lys Ser Ser Ala Ser Phe Asn Val Ile Glu
945 950 955 960
Phe Pro Tyr Lys Asn Leu Pro Ile Glu Asp Ile Thr Asn Ser Thr Leu
965 970 975
Val Thr Thr Asn Val Thr Trp Gly Ile Gln Pro Ala Pro Met Pro Val
980 985 990
Pro Val Trp Val Ile Ile Leu Ala Val Leu Ala Gly Leu Leu Leu Leu
995 1000 1005
Ala Val Leu Val Phe Val Met Tyr Arg Met Gly Phe Phe Lys Arg
1010 1015 1020
Val Arg Pro Pro Gln Glu Glu Gln Glu Arg Glu Gln Leu Gln Pro
1025 1030 1035
His Glu Asn Gly Glu Gly Asn Ser Glu Thr
1040 1045
Claims (99)
- 갈렉틴-3 (Gal3)와 인슐린 수용체 또는 인테그린, 또는 둘 모두의 상호작용을 차단하는 방법으로서, 상기 방법은:
Gal3와 인슐린 수용체 또는 인테그린, 또는 둘 모두의 상호작용을 Gal3에 선택적으로 결합하여 상기 Gal3와 인슐린 수용체 또는 인테그린, 또는 둘 모두의 상호작용을 차단하는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편과 접촉시키는 단계를 포함하는 것인 방법. - 청구항 1에 있어서, Gal3는 세포에 의해 발현되는 것인 방법.
- 청구항 1에 있어서, Gal3는 세포에 의해 분비되는 것인 방법.
- 청구항 1 내지 3 중 어느 하나에 있어서, 상기 인슐린 수용체 또는 인테그린, 또는 둘 모두는 세포에 의해 발현되는 것인 방법.
- 청구항 1 내지 4 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3의 N-말단 도메인에 결합하는 것인 방법.
- 청구항 1 내지 5 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 서열번호 3-26의 펩티드 중 하나 이상에 결합하는 것인 방법.
- 청구항 1 내지 6 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 펩티드 1 (ADNFSLHDALSGSGNPNPQG; 서열번호 3), 펩티드 4 (GAGGYPGASYPGAYPGQAPP; 서열번호 6), 펩티드 6 (GAYPGQAPPGAYPGAPGAYP; 서열번호 8), 펩티드 7 (AYPGAPGAYPGAPAPGVYPG; 서열번호 9), 또는 이들의 조합에 의해 정의된 Gal3의 영역 내에 존재하는 에피토프에 결합하는 것인 방법.
- 청구항 1 내지 7 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 GxYPG의 아미노산 서열을 포함하는 Gal3의 에피토프에 결합하고, x는 알라닌, 글리신, 또는 발린인 것인 방법.
- 청구항 1 내지 8 중 어느 하나에 있어서, 상기 상호작용은 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 부재시 상호작용의 80% 미만, 75% 미만, 70% 미만, 65% 미만, 60% 미만, 55% 미만, 50% 미만, 45% 미만, 40% 미만, 35% 미만, 30% 미만, 25% 미만, 20% 미만, 15% 미만, 10% 미만, 5% 미만, 또는 1% 미만까지 감소되는 것인 방법.
- 청구항 1 내지 9 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3에 1 nM 미만, 1.2 nM 미만, 2 nM 미만, 5 nM 미만, 10 nM 미만, 13.5 nM 미만, 15 nM 미만, 20 nM 미만, 25 nM 미만, 또는 30 nM 미만의 해리 상수 (KD)로 결합하는 것인 방법.
- 청구항 1 내지 10 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 (1) VL-CDR1, VL-CDR2, 및 VL-CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역; 및 (2) VH-CDR1, VH-CDR2, 및 VH-CDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역을 포함하고,
상기 VL-CDR1은 서열번호 100-128에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고,
상기 VL-CDR2는 서열번호 129-144에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며,
상기 VL-CDR3은 서열번호 145-168에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고,
상기 VH-CDR1은 서열번호 27-47에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고,
상기 VH-CDR2는 서열번호 48-69에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 및
상기 VH-CDR3은 서열번호 70-99에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 방법. - 청구항 11에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 169-206에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 방법.
- 청구항 11 또는 12에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 169-206으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 방법.
- 청구항 11 내지 13 중 어느 하나에 있어서, 상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 207-245에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 방법.
- 청구항 11 내지 14 중 어느 하나에 있어서, 상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 207-245로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 방법.
- 청구항 1 내지 15 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 도 36에 도시된 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3, VH-CDR1, VH-CDR2, 및 VH-CDR3의 조합을 포함하는 것인 방법.
- 청구항 1 내지 16 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은:
a) 서열번호 169 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 207 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
b) 서열번호 170 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 208 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
c) 서열번호 171 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 209 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
d) 서열번호 172 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 210 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
e) 서열번호 173 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 211 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
f) 서열번호 174 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 212 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
g) 서열번호 175 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 213 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
h) 서열번호 176 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 214 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
i) 서열번호 177 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 215 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
j) 서열번호 178 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 216 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
k) 서열번호 179 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 217 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
l) 서열번호 180 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 218 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
m) 서열번호 181 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 219 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
n) 서열번호 181 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 220 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
o) 서열번호 182 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 221 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
p) 서열번호 183 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 222 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
q) 서열번호 184 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 223 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
r) 서열번호 185 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 224 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
s) 서열번호 186 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 225 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
t) 서열번호 187 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 226 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
u) 서열번호 188 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 227 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
v) 서열번호 189 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 228 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
w) 서열번호 190 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 229 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
x) 서열번호 191 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 230 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
y) 서열번호 192 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 231 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
z) 서열번호 193 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 232 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
aa) 서열번호 194 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 233 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ab) 서열번호 195 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 234 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ac) 서열번호 196 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 235 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ad) 서열번호 197 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 236 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ae) 서열번호 198 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 237 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
af) 서열번호 199 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 238 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ag) 서열번호 197 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 239 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ah) 서열번호 200 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 240 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ai) 서열번호 201 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 241 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
aj) 서열번호 202 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 242 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ak) 서열번호 203 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 240 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
al) 서열번호 204 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 243 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
am) 서열번호 205 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 244 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; 또는
an) 서열번호 206 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 245 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3를 포함하는 것인 방법. - 청구항 1 내지 17 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은:
a) 서열번호 169의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 207의 경쇄 가변 영역;
b) 서열번호 170의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 208의 경쇄 가변 영역;
c) 서열번호 171의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 209의 경쇄 가변 영역;
d) 서열번호 172의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 210의 경쇄 가변 영역;
e) 서열번호 173의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 211의 경쇄 가변 영역;
f) 서열번호 174의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 212의 경쇄 가변 영역;
g) 서열번호 175의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 213의 경쇄 가변 영역;
h) 서열번호 176의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 214의 경쇄 가변 영역;
i) 서열번호 177의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 215의 경쇄 가변 영역;
j) 서열번호 178의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 216의 경쇄 가변 영역;
k) 서열번호 179의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 217의 경쇄 가변 영역;
l) 서열번호 180의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 218의 경쇄 가변 영역;
m) 서열번호 181의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 219의 경쇄 가변 영역;
n) 서열번호 181의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 220의 경쇄 가변 영역;
o) 서열번호 182의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 221의 경쇄 가변 영역;
p) 서열번호 183의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 222의 경쇄 가변 영역;
q) 서열번호 184의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 223의 경쇄 가변 영역;
r) 서열번호 185의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 224의 경쇄 가변 영역;
s) 서열번호 186의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 225의 경쇄 가변 영역;
t) 서열번호 187의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 226의 경쇄 가변 영역;
u) 서열번호 188의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 227의 경쇄 가변 영역;
v) 서열번호 189의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 228의 경쇄 가변 영역;
w) 서열번호 190의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 229의 경쇄 가변 영역;
x) 서열번호 191의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 230의 경쇄 가변 영역;
y) 서열번호 192의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 231의 경쇄 가변 영역;
z) 서열번호 193의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 232의 경쇄 가변 영역;
aa) 서열번호 194의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 233의 경쇄 가변 영역;
ab) 서열번호 195의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 234의 경쇄 가변 영역;
ac) 서열번호 196의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 235의 경쇄 가변 영역;
ad) 서열번호 197의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 236의 경쇄 가변 영역;
ae) 서열번호 198의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 237의 경쇄 가변 영역;
af) 서열번호 199의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 238의 경쇄 가변 영역;
ag) 서열번호 197의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 239의 경쇄 가변 영역;
ah) 서열번호 200의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 240의 경쇄 가변 영역;
ai) 서열번호 201의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 241의 경쇄 가변 영역;
aj) 서열번호 202의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 242의 경쇄 가변 영역;
ak) 서열번호 203의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 240의 경쇄 가변 영역;
al) 서열번호 204의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 243의 경쇄 가변 영역;
am) 서열번호 205의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 244의 경쇄 가변 영역; 또는
an) 서열번호 206의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 245의 경쇄 가변 영역을 포함하는 것인 방법. - 청구항 1 내지 18 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 13H12.2F8, 19D9.2E5, 14H10.2C9, 2D10.2B2, 4A11.2B5, 6H6.2D6, 20H5.A3, 19B5.2E6, 23H9.2E4, 20D11.2C6, 15G7.2A7, 4G2.2G6, 3B11.2G2, 13A12.2E5, 7D8.2D8, 15F10.2D6, 12G5.D7, 24D12.2H9, 13G4.2F8, 9H2.2H1, 23B10.2B12, 6B3.2D3, F846C.1B2, F846C.1F5, F846C.1H12, F846C.1H5, F846C.2H3, F846TC.14A2, F846TC.14E4, F846TC.16B5, F846TC.7F10, F847C.10B9, F847C.11B1, F847C.12F12, F847C.26F5, F847C.4B10, F849C.8D10, F849C.8H3, 847.14H4, mIMT001, IMT-001(TB001), 및 IMT-006 (TB006)으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 방법.
- 청구항 1 내지 19 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 인간화 항체를 포함하는 것인 방법.
- 청구항 1 내지 20 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 전장 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는 것인 방법.
- 청구항 1 내지 21 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 이중특이성 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는 것인 방법.
- 청구항 1 내지 22 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 1가 Fab', 2가 Fab2, scFv(single chain variable fragment), 디아바디(diabody), 미니바디(minibody), 나노바디(nanobody), sdAb(single-domain antibody), 또는 카멜리드(camelid) 항체, 또는 그의 결합 단편을 포함하는 것인 방법.
- 청구항 1 내지 23 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 IgG 프레임워크를 포함하는 것인 방법.
- 청구항 1 내지 24 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 IgG1 프레임워크, IgG2 프레임워크, 또는 IgG4 프레임워크를 포함하는 것인 방법.
- 청구항 1 내지 25 중 어느 하나에 있어서, 상기 Gal3와 인테그린의 상호작용을 차단하는 것은 림프구 부착을 감소시키는 것인 방법.
- 청구항 26에 있어서, 상기 림프구 부착은 적어도 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99%, 또는 전술된 퍼센트 중 2개에 의해 정의되는 범위 내의 퍼센트만큼 감소되는 것인 방법.
- 필요로 하는 개체에서 당뇨병을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 Gal3에 선택적으로 결합하고 Gal3와 인슐린 수용체 또는 인테그린, 또는 둘 모두의 상호작용을 차단하는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 상기 개체에게 투여하는 단계를 포함하여, 상기 개체에서 당뇨병을 치료하는 것인 방법.
- 청구항 28에 있어서, 상기 당뇨병은 인슐린-의존성 당뇨병인 것인 방법.
- 청구항 28에 있어서, 상기 당뇨병은 인슐린-비의존성 당뇨병인 것인 방법.
- 청구항 28에 있어서, 상기 당뇨병은 타입 I 당뇨병인 것인 방법.
- 청구항 28에 있어서, 상기 당뇨병은 타입 II 당뇨병인 것인 방법.
- 청구항 28 내지 32 중 어느 한 항에 있어서, 상기 치료는 상기 필요로 하는 개체에서 당 내성을 감소시키는 것을 포함하는 것인 방법.
- 청구항 28 내지 33 중 어느 한 항에 있어서, 상기 치료는 상기 필요로 하는 개체에서 인슐린 감수성을 감소시키는 것을 포함하는 것인 방법.
- 청구항 28 내지 34 중 어느 한 항에 있어서, 상기 치료는 상기 필요로 하는 개체에서 체중 증가를 감소시키는 것을 포함하는 것인 방법.
- 청구항 28 내지 35 중 어느 한 항에 있어서, 상기 치료는 상기 필요로 하는 개체에서 간 지방증(liver steatosis)을 경감시키는 것을 포함하는 것인 방법.
- 청구항 28 내지 36 중 어느 한 항에 있어서, 상기 투여하는 단계 전에 당뇨병을 갖거나 또는 당뇨병에 걸릴 위험을 갖는 개체를 선택하는 단계를 더 포함하는 것인 방법.
- 청구항 28 내지 37 중 어느 한 항에 있어서, 상기 투여하는 단계 후에 상기 개체에서 당뇨병과 연관된 증상의 개선을 검출하는 단계를 더 포함하는 것인 방법.
- 청구항 28 내지 38 중 어느 한 항에 있어서, 상기 인슐린 수용체는 서열번호 2의 서열을 포함하는 것인 방법.
- 청구항 28 내지 39 중 어느 한 항에 있어서, 상기 인테그린은 ITGa1, ITGa2, ITGa3, ITGa4, ITGa5, ITGa6, ITGa7, ITGa8, ITGa9, ITGa10, ITGa11, ITGaD, ITGaE, ITGaL, ITGaM, ITGaV, ITGa2B, ITGa2X, ITGb1, ITGb2, ITGb3, ITGb4, ITGb5, ITGb6, ITGb7, ITGb8, 또는 이들의 조합으로부터 선택되는 것인 방법.
- 청구항 28 내지 40 중 어느 한 항에 있어서, 상기 인테그린은 서열번호 339-342로부터 선택된 서열을 포함하는 것인 방법.
- 청구항 28 내지 41 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 하나 이상의 추가적인 치료 조성물과 함께 투여되는 것인 방법.
- 청구항 42에 있어서, 상기 하나 이상의 추가적인 치료 조성물은 인슐린, 인슐린 유도체 또는 그의 모방체(mimetic), 인슐린 아스파르트(insulin aspart), 인슐린 글루리신(insulin glulisine), 인슐린 리스프로(insulin lispro), 인슐린 이소판(insulin isophane), 인슐린 데글루덱(insulin degludec), 인슐린 데테미르(insulin detemir), 인슐린 징크(insulin zinc), 인슐린 글라르긴(insulin glargine), 바나듐, 비구아니드(biguarnides), 메트포르민(metformin), 펜포르민(phenformin), 부포르민(buformin), 티아졸리디네디온(thiazolidinediones), 로시글리타존(rosiglitazone), 피오글리타존(pioglitazone), 트로글리타존(troglitazone), 톨리미돈(tolimidone), 술포닐우레아(sulfonylureas), 톨부타미드(tolbutamide), 아세토헥사미드(acetohexamide), 톨라자미드(tolazamide), 클로르프로파미드(chlorpropamide), 글리피지드(glipizide), 글리벤클라미드(glibenclamide), 글리메피리드(glimepiride), 글리클라지드(gliclazide), 글리클로피라미드(glyclopyramide), 글리퀴돈(gliquidone), 메글리티니드(meglitinides), 레파글리니드(repaglinide), 나테글리니드(nateglinide), 알파-글루코시다아제 억제제, 미글리톨(miglitol), 아카르보스(acarbose), 보글리보스(voglibose), 인크레틴(incretins), GLP-1(glucagon-like peptide 1), GLP 아고니스트(glucagon-like peptide agonists), 엑세나티드(exenatide), 리라글루티드(liraglutide), 타스포글루티드(taspoglutide), 릭시세나티드(lixisenatide), 세마글루티드(semaglutide), 둘라글루티드(dulaglutide), GIP(gastric inhibitory peptide), DPP-4(dipeptidyl peptidase-4) 억제제, 빌다글립틴(vildagliptin), 시타글립틴(sitagliptin), 삭사글립틴(saxagliptin), 리나글립틴(linagliptin), 알로글립틴(alogliptin), 셉타글립틴(septagliptin), 테넬리글립틴(teneligpliptin), 게미글립틴(gemigliptin), 프람린티드(pramlintide), 다파글리플로진(dapagliflozin), 카나글리플로진(canagliflozin), 엠파글리플로진(empagliflozin), 또는 레모글리플로진(remogliflozin), 또는 이들의 조합을 포함하는 것인 방법.
- 필요로 하는 개체에서 염증성 장 증후군을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 Gal3에 선택적으로 결합하고 Gal3와 인테그린의 상호작용을 차단하는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 상기 개체에게 투여하는 단계를 포함하여, 상기 개체에서 염증성 장 증후군을 치료하는 것인 방법.
- 청구항 44에 있어서, 상기 염증성 장 증후군은 궤양성 대장염 또는 크론병, 또는 둘 모두인 것인 방법.
- 청구항 44 또는 45에 있어서, 상기 투여하는 단계 전에 염증성 장 증후군을 갖거나 또는 염증성 장 증후군에 걸릴 위험을 갖는 개체를 선택하는 단계를 더 포함하는 것인 방법.
- 청구항 44 내지 46 중 어느 한 항에 있어서, 상기 투여하는 단계 후에 상기 개체에서 염증성 장 증후군과 연관된 증상의 개선을 검출하는 단계를 더 포함하는 것인 방법.
- 청구항 44 내지 47 중 어느 한 항에 있어서, 상기 Gal3와 인테그린의 상호작용의 차단은 상기 개체에서 림프구 부착을 감소시키는 것인 방법.
- 청구항 48에 있어서, 상기 림프구 부착은 적어도 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99%, 또는 전술된 퍼센트 중 2개에 의해 정의되는 범위 내의 퍼센트 만큼 감소되는 것인 방법.
- 청구항 44 내지 49 중 어느 한 항에 있어서, 상기 인테그린은 ITGa1, ITGa2, ITGa3, ITGa4, ITGa5, ITGa6, ITGa7, ITGa8, ITGa9, ITGa10, ITGa11, ITGaD, ITGaE, ITGaL, ITGaM, ITGaV, ITGa2B, ITGa2X, ITGb1, ITGb2, ITGb3, ITGb4, ITGb5, ITGb6, ITGb7, ITGb8, 또는 이들의 조합으로부터 선택되는 것인 방법.
- 청구항 44 내지 50 중 어느 한 항에 있어서, 상기 인테그린은 서열번호 339-342로부터 선택된 서열을 포함하는 것인 방법.
- 청구항 44 내지 51 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 하나 이상의 추가적인 치료 조성물과 함께 투여되는 것인 방법.
- 청구항 52에 있어서, 상기 하나 이상의 추가적인 치료 조성물은 메살라진, 면역억제제, 프레드니손, TNF 억제제, 아자티오프린, 메토트렉세이트, 6-머캅토퓨린, 또는 리팍시민, 또는 이들의 조합을 포함하는 것인 방법.
- 필요로 하는 개체에서 비알코올성 지방간 질환 (NAFLD)를 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 Gal3에 선택적으로 결합하고 Gal3와 인슐린 수용체의 상호작용을 차단하는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 상기 개체에게 투여하는 단계를 포함하여, 상기 개체에서 NAFLD를 치료하는 것인 방법.
- 필요로 하는 개체에서 비알코올성 지방간염 (NASH)을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 Gal3에 선택적으로 결합하고 Gal3와 인슐린 수용체의 상호작용을 차단하는 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 상기 개체에게 투여하는 단계를 포함하여, 상기 개체에서 NASH를 치료하는 것인 방법.
- 청구항 28 내지 55 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3의 N-말단 도메인에 결합하는 것인 방법.
- 청구항 28 내지 56 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 서열번호 3-26의 펩티드 중 하나 이상에 결합하는 것인 방법.
- 청구항 28 내지 57 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 펩티드 1 (ADNFSLHDALSGSGNPNPQG; 서열번호 3), 펩티드 4 (GAGGYPGASYPGAYPGQAPP; 서열번호 6), 펩티드 6 (GAYPGQAPPGAYPGAPGAYP; 서열번호 8), 펩티드 7 (AYPGAPGAYPGAPAPGVYPG; 서열번호 9), 또는 이들의 조합에 의해 정의된 Gal3의 영역 내에 존재하는 에피토프에 결합하는 것인 방법.
- 청구항 28 내지 58 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 GxYPG의 아미노산 서열을 포함하는 Gal3의 에피토프에 결합하고, x는 알라닌, 글리신, 또는 발린인 것인 방법.
- 청구항 28 내지 59 중 어느 하나에 있어서, 상기 상호작용은 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편의 부재시 상호작용의 80% 미만, 75% 미만, 70% 미만, 65% 미만, 60% 미만, 55% 미만, 50% 미만, 45% 미만, 40% 미만, 35% 미만, 30% 미만, 25% 미만, 20% 미만, 15% 미만, 10% 미만, 5% 미만, 또는 1% 미만까지 감소되는 것인 방법.
- 청구항 28 내지 60 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3에 1 nM 미만, 1.2 nM 미만, 2 nM 미만, 5 nM 미만, 10 nM 미만, 13.5 nM 미만, 15 nM 미만, 20 nM 미만, 25 nM 미만, 또는 30 nM 미만의 해리 상수 (KD)로 결합하는 것인 방법.
- 청구항 28 내지 61 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 (1) VL-CDR1, VL-CDR2, 및 VL-CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역; 및 (2) VH-CDR1, VH-CDR2, 및 VH-CDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역을 포함하고,
상기 VL-CDR1은 서열번호 100-128에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고,
상기 VL-CDR2는 서열번호 129-144에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며,
상기 VL-CDR3은 서열번호 145-168에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고,
상기 VH-CDR1은 서열번호 27-47에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고,
상기 VH-CDR2는 서열번호 48-69에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 및
상기 VH-CDR3은 서열번호 70-99에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 방법. - 청구항 62에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 169-206에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 방법.
- 청구항 62 또는 63에 있어서, 상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 169-206으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 방법.
- 청구항 62 내지 64 중 어느 하나에 있어서, 상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 207-245에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 방법.
- 청구항 62 내지 65 중 어느 하나에 있어서, 상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 207-245로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 방법.
- 청구항 28 내지 66 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 도 36에 도시된 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3, VH-CDR1, VH-CDR2, 및 VH-CDR3의 조합을 포함하는 것인 방법.
- 청구항 28 내지 67 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은:
a) 서열번호 169 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 207 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
b) 서열번호 170 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 208 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
c) 서열번호 171 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 209 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
d) 서열번호 172 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 210 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
e) 서열번호 173 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 211 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
f) 서열번호 174 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 212 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
g) 서열번호 175 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 213 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
h) 서열번호 176 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 214 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
i) 서열번호 177 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 215 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
j) 서열번호 178 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 216 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
k) 서열번호 179 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 217 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
l) 서열번호 180 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 218 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
m) 서열번호 181 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 219 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
n) 서열번호 181 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 220 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
o) 서열번호 182 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 221 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
p) 서열번호 183 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 222 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
q) 서열번호 184 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 223 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
r) 서열번호 185 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 224 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
s) 서열번호 186 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 225 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
t) 서열번호 187 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 226 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
u) 서열번호 188 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 227 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
v) 서열번호 189 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 228 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
w) 서열번호 190 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 229 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
x) 서열번호 191 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 230 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
y) 서열번호 192 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 231 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
z) 서열번호 193 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 232 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
aa) 서열번호 194 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 233 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ab) 서열번호 195 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 234 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ac) 서열번호 196 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 235 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ad) 서열번호 197 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 236 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ae) 서열번호 198 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 237 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
af) 서열번호 199 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 238 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ag) 서열번호 197 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 239 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ah) 서열번호 200 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 240 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ai) 서열번호 201 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 241 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
aj) 서열번호 202 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 242 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
ak) 서열번호 203 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 240 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
al) 서열번호 204 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 243 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3;
am) 서열번호 205 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 244 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3; 또는
an) 서열번호 206 내의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3 및 서열번호 245 내의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3의 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3를 포함하는 것인 방법. - 청구항 28 내지 68 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은:
a) 서열번호 169의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 207의 경쇄 가변 영역;
b) 서열번호 170의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 208의 경쇄 가변 영역;
c) 서열번호 171의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 209의 경쇄 가변 영역;
d) 서열번호 172의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 210의 경쇄 가변 영역;
e) 서열번호 173의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 211의 경쇄 가변 영역;
f) 서열번호 174의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 212의 경쇄 가변 영역;
g) 서열번호 175의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 213의 경쇄 가변 영역;
h) 서열번호 176의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 214의 경쇄 가변 영역;
i) 서열번호 177의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 215의 경쇄 가변 영역;
j) 서열번호 178의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 216의 경쇄 가변 영역;
k) 서열번호 179의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 217의 경쇄 가변 영역;
l) 서열번호 180의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 218의 경쇄 가변 영역;
m) 서열번호 181의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 219의 경쇄 가변 영역;
n) 서열번호 181의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 220의 경쇄 가변 영역;
o) 서열번호 182의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 221의 경쇄 가변 영역;
p) 서열번호 183의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 222의 경쇄 가변 영역;
q) 서열번호 184의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 223의 경쇄 가변 영역;
r) 서열번호 185의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 224의 경쇄 가변 영역;
s) 서열번호 186의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 225의 경쇄 가변 영역;
t) 서열번호 187의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 226의 경쇄 가변 영역;
u) 서열번호 188의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 227의 경쇄 가변 영역;
v) 서열번호 189의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 228의 경쇄 가변 영역;
w) 서열번호 190의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 229의 경쇄 가변 영역;
x) 서열번호 191의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 230의 경쇄 가변 영역;
y) 서열번호 192의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 231의 경쇄 가변 영역;
z) 서열번호 193의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 232의 경쇄 가변 영역;
aa) 서열번호 194의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 233의 경쇄 가변 영역;
ab) 서열번호 195의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 234의 경쇄 가변 영역;
ac) 서열번호 196의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 235의 경쇄 가변 영역;
ad) 서열번호 197의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 236의 경쇄 가변 영역;
ae) 서열번호 198의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 237의 경쇄 가변 영역;
af) 서열번호 199의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 238의 경쇄 가변 영역;
ag) 서열번호 197의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 239의 경쇄 가변 영역;
ah) 서열번호 200의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 240의 경쇄 가변 영역;
ai) 서열번호 201의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 241의 경쇄 가변 영역;
aj) 서열번호 202의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 242의 경쇄 가변 영역;
ak) 서열번호 203의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 240의 경쇄 가변 영역;
al) 서열번호 204의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 243의 경쇄 가변 영역;
am) 서열번호 205의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 244의 경쇄 가변 영역; 또는
an) 서열번호 206의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 245의 경쇄 가변 영역을 포함하는 것인 방법. - 청구항 28 내지 69 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 13H12.2F8, 19D9.2E5, 14H10.2C9, 2D10.2B2, 4A11.2B5, 6H6.2D6, 20H5.A3, 19B5.2E6, 23H9.2E4, 20D11.2C6, 15G7.2A7, 4G2.2G6, 3B11.2G2, 13A12.2E5, 7D8.2D8, 15F10.2D6, 12G5.D7, 24D12.2H9, 13G4.2F8, 9H2.2H1, 23B10.2B12, 6B3.2D3, F846C.1B2, F846C.1F5, F846C.1H12, F846C.1H5, F846C.2H3, F846TC.14A2, F846TC.14E4, F846TC.16B5, F846TC.7F10, F847C.10B9, F847C.11B1, F847C.12F12, F847C.26F5, F847C.4B10, F849C.8D10, F849C.8H3, 847.14H4, mIMT001, IMT-001 (TB001), 및 IMT-006 (TB006)으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 방법.
- 청구항 28 내지 70 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 장내로, 경구로, 비강내로, 비경구로, 두개내로, 피하로, 근육내로, 피내로, 또는 정맥내로, 또는 이들의 조합으로 투여되는 것인 방법.
- 청구항 28 내지 71 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 인간화 항체를 포함하는 것인 방법.
- 청구항 28 내지 72 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 전장 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는 것인 방법.
- 청구항 28 내지 73 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 이중특이성 항체 또는 그의 결합 단편을 포함하는 것인 방법.
- 청구항 28 내지 74 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 1가 Fab', 2가 Fab2, scFv(single chain variable fragment), 디아바디, 미니바디, 나노바디, sdAb(single-domain antibody), 또는 카멜리드 항체, 또는 그의 결합 단편을 포함하는 것인 방법.
- 청구항 28 내지 75 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 IgG 프레임워크를 포함하는 것인 방법.
- 청구항 28 내지 76 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 IgG1 프레임워크, IgG2 프레임워크, 또는 IgG4 프레임워크를 포함하는 것인 방법.
- 청구항 28 내지 77 중 어느 하나에 있어서, 상기 개체는 타입 I 당뇨병 또는 타입 II 당뇨병으로 진단된 것인 방법.
- 청구항 28 내지 78 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 전신 투여용으로 제제화되는 것인 방법.
- 청구항 28 내지 79 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 비경구 투여용으로 제제화되는 것인 방법.
- 청구항 28 내지 80 중 어느 하나에 있어서, 1개 초과의 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편이 투여되는 것인 방법.
- 청구항 28 내지 81 중 어느 하나에 있어서, 상기 개체는 포유동물인 것인 방법.
- 청구항 82에 있어서, 상기 포유동물은 인간인 것인 방법.
- (1) VL-CDR1, VL-CDR2, 및 VL-CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역; 및 (2) VH-CDR1, VH-CDR2, 및 VH-CDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역을 포함하는, 항-Gal3 항체로서,
상기 VL-CDR1은 서열번호 100-128에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고,
상기 VL-CDR2는 서열번호 129-144에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며,
상기 VL-CDR3은 서열번호 145-168에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고,
상기 VH-CDR1은 서열번호 27-47에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고,
상기 VH-CDR2는 서열번호 48-69에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 및
상기 VH-CDR3은 서열번호 70-99에 따른 아미노산 서열 중 하나에 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 항체. - 청구항 84에 있어서, 상기 항-Gal3 항체는 도 36에 도시된 VL-CDR1, VL-CDR2, VL-CDR3, VH-CDR1, VH-CDR2, 및 VH-CDR3의 조합을 포함하는 것인 항체.
- 청구항 84 또는 85에 있어서, 상기 항-Gal3 항체는 6H6.2D6, 20H5.A3, 20D11.2C6, 4G2.2G6, 13H12.2F8, 19B5.2E6, 15G7.2A7, 23H9.2E4, 19D9.2E5, 2D10.2B2, 4A11.2B5, 14H10.2C9, 3B11.2G2, 13A12.2E5, 7D8.2D8, 15F10.2D6, 23B10.2B12, 6B3.2D3, F846C.1B2, F846C.1F5, F846C.1H12, F846C.1H5, F846C.2H3, F846TC.14A2, F846TC.14E4, F846TC.16B5, F846TC.7F10, F847C.10B9, F847C.11B1, F847C.12F12, F847C.26F5, F847C.4B10, F849C.8D10, F849C.8H3, 847.14H4, mIMT001, IMT-001(TB001), 및 IMT-006 (TB006)으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 항체.
- 청구항 84 내지 86 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-Gal3 항체는 F846C.1B2, F846C.1F5, F846C.1H12, F846C.1H5, F846C.2H3, F846TC.14A2, F846TC.14E4, F846TC.16B5, F846TC.7F10, F847C.10B9, F847C.11B1, F847C.12F12, F847C.26F5, F847C.4B10, F849C.8D10, F849C.8H3, 및 847.14H4로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 항체.
- 청구항 84 내지 87 중 어느 하나의 항-Gal3 항체를 포함하는 약학적 제제.
- 청구항 88에 있어서, 당뇨병의 치료에서의 용도를 위한 것인 약학적 제제.
- 청구항 88에 있어서, 염증성 장 질환의 치료에서의 용도를 위한 것인 약학적 제제.
- 청구항 88에 있어서, 비알코올성 지방간 질환(NAFLD) 및/또는 비알코올성 지방간염 (NASH)의 치료에서의 용도를 위한 것인 약학적 제제.
- 인간 Gal3에 결합하고 인간 Gal3로의 결합에 대해 항-Gal3 항체와 경쟁하는 항체로서, 상기 항-Gal3 항체는 6H6.2D6, 20H5.A3, 20D11.2C6, 4G2.2G6, 13H12.2F8, 19B5.2E6, 15G7.2A7, 23H9.2E4, 19D9.2E5, 2D10.2B2, 4A11.2B5, 14H10.2C9, 3B11.2G2, 13A12.2E5, 7D8.2D8, and 15F10.2D6, 23B10.2B12, 6B3.2D3, F846C.1B2, F846C.1F5, F846C.1H12, F846C.1H5, F846C.2H3, F846TC.14A2, F846TC.14E4, F846TC.16B5, F846TC.7F10, F847C.10B9, F847C.11B1, F847C.12F12, F847C.26F5, F847C.4B10, F849C.8D10, F849C.8H3, 847.14H4, mIMT001, IMT001(TB001), 및 IMT006 (TB006)으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 항체.
- Gal3와 인슐린 수용체 또는 인테그린 또는 둘 모두의 상호작용을 차단할 수 있는 항체를 확인하는 방법으로서,
(a) Gal3 단백질을 Gal3에 선택적으로 결합하는 항체 또는 그의 결합 단편과 접촉시켜, Gal3-항체 복합체를 형성시키는 단계;
(b) 상기 Gal3-항체 복합체를 상기 인슐린 수용체 또는 인테그린 또는 둘 모두와 접촉시키는 단계;
(c) 결합되지 않은 인슐린 수용체 또는 인테그린 또는 둘 모두를 제거하는 단계;
(d) 상기 Gal3-항체 복합체에 결합된, 상기 인슐린 수용체 또는 인테그린, 또는 둘 모두를 검출하는 단계;를 포함하고,
상기 인슐린 수용체 또는 인테그린, 또는 둘 모두가 (d)에서 검출되지 않는 경우, 상기 항체 또는 그의 결합 단편은 Gal3와 인슐린 수용체 또는 인테그린, 또는 둘 모두의 상호작용을 차단할 수 있는 것인 방법. - 청구항 93에 있어서, 상기 방법은 면역분석(immunoassay)을 포함하는 것인 방법.
- 청구항 94에 있어서, 상기 면역분석은 ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)인 것인 방법.
- 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 생산하는 방법으로서,
상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 코딩하는 핵산을 세포에서 발현시키는 단계; 및
발현된 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 상기 세포로부터 단리하는 단계를 포함하는 것인 방법. - 청구항 96에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편을 원하는 농도로 농축시키는 단계를 더 포함하는 것인 방법.
- 청구항 96 또는 97에 있어서, 상기 세포는 포유동물 세포, 곤충 세포, 또는 박테리아 세포인 것인 방법.
- 청구항 96 내지 98 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편은 청구항 1 내지 83 중 어느 한 항의 항-Gal3 항체 또는 그의 결합 단편인 것인 방법.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201962944833P | 2019-12-06 | 2019-12-06 | |
US62/944,833 | 2019-12-06 | ||
PCT/US2020/063134 WO2021113527A1 (en) | 2019-12-06 | 2020-12-03 | Antibodies that disrupt the interaction of gal3 and insulin receptor or integrins and methods of use thereof |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
KR20220112261A true KR20220112261A (ko) | 2022-08-10 |
Family
ID=76222298
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020227021110A KR20220112261A (ko) | 2019-12-06 | 2020-12-03 | Gal3와 인슐린 수용체 또는 인테그린의 상호작용을 차단하는 항체 및 그의 사용 방법 |
Country Status (9)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20230094463A1 (ko) |
EP (1) | EP4069749A4 (ko) |
JP (1) | JP2023504199A (ko) |
KR (1) | KR20220112261A (ko) |
CN (1) | CN115279789A (ko) |
AU (1) | AU2020396539A1 (ko) |
CA (1) | CA3164060A1 (ko) |
MX (1) | MX2022006713A (ko) |
WO (1) | WO2021113527A1 (ko) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP3918323A4 (en) * | 2019-01-30 | 2022-12-28 | TrueBinding, Inc. | ANTI-GAL3 ANTIBODIES AND THEIR USES |
EP4370555A1 (en) | 2021-07-13 | 2024-05-22 | TrueBinding, Inc. | Methods of preventing protein aggregation |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20050158321A1 (en) * | 2003-12-17 | 2005-07-21 | Entelos, Inc. | Treatment of rheumatoid arthritis with galectin-3 antagonists |
MX2019013536A (es) * | 2017-05-12 | 2020-02-13 | Galectin Sciences Llc | Compuestos para el tratamiento de los trastornos de resistencia sistemica a la insulina y el uso de los mismos. |
AU2018308088A1 (en) * | 2017-07-25 | 2020-02-20 | Truebinding, Inc. | Treating cancer by blocking the interaction of TIM-3 and its ligand |
JP2021501180A (ja) * | 2017-10-31 | 2021-01-14 | ガレクティン・サイエンシーズ・リミテッド・ライアビリティ・カンパニーGalectin Sciences, LLC | 全身インスリン抵抗性障害の治療のためのセレノガラクトシド化合物およびその使用 |
AU2019215202A1 (en) * | 2018-02-01 | 2020-08-20 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | Antibodies to Galectin-3 and methods of use thereof |
-
2020
- 2020-12-03 US US17/777,573 patent/US20230094463A1/en active Pending
- 2020-12-03 WO PCT/US2020/063134 patent/WO2021113527A1/en unknown
- 2020-12-03 CN CN202080095869.2A patent/CN115279789A/zh active Pending
- 2020-12-03 AU AU2020396539A patent/AU2020396539A1/en active Pending
- 2020-12-03 MX MX2022006713A patent/MX2022006713A/es unknown
- 2020-12-03 CA CA3164060A patent/CA3164060A1/en active Pending
- 2020-12-03 EP EP20896254.8A patent/EP4069749A4/en active Pending
- 2020-12-03 JP JP2022534314A patent/JP2023504199A/ja active Pending
- 2020-12-03 KR KR1020227021110A patent/KR20220112261A/ko unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2023504199A (ja) | 2023-02-01 |
AU2020396539A1 (en) | 2022-06-16 |
EP4069749A1 (en) | 2022-10-12 |
WO2021113527A1 (en) | 2021-06-10 |
CA3164060A1 (en) | 2021-06-10 |
EP4069749A4 (en) | 2023-12-20 |
MX2022006713A (es) | 2022-07-12 |
CN115279789A (zh) | 2022-11-01 |
US20230094463A1 (en) | 2023-03-30 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2708075C2 (ru) | Конъюгаты анти-ртк7 антитело-лекарственное средство | |
CN113423735B (zh) | 抗-紧密连接蛋白抗体及其用途 | |
US11427638B2 (en) | Anti-Gal3 antibodies and uses thereof | |
US20210371533A1 (en) | Methods of treating inflammatory diseases by blocking galectin-3 | |
WO2019165233A1 (en) | Treating cancer by blocking the interaction of vista and its binding partner | |
US20230036181A1 (en) | Anti-gal3 antibodies and methods of use | |
US20230094463A1 (en) | Antibodies that disrupt the interaction of gal3 and insulin receptor or integrins and methods of use thereof | |
US20220411514A1 (en) | Anti-gal3 antibodies and methods of use for insulin resistance | |
US20240158512A1 (en) | Anti-gal3 antibody formulations and methods of use thereof |