KR20220079129A - culture medium of lactic acid bacteria containing high concentration gaba and Preparing Method Thereof - Google Patents
culture medium of lactic acid bacteria containing high concentration gaba and Preparing Method Thereof Download PDFInfo
- Publication number
- KR20220079129A KR20220079129A KR1020200168588A KR20200168588A KR20220079129A KR 20220079129 A KR20220079129 A KR 20220079129A KR 1020200168588 A KR1020200168588 A KR 1020200168588A KR 20200168588 A KR20200168588 A KR 20200168588A KR 20220079129 A KR20220079129 A KR 20220079129A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- gaba
- lactic acid
- acid bacteria
- medium
- concentration
- Prior art date
Links
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 204
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 title claims abstract description 102
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 title claims abstract description 102
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 title claims abstract description 102
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 41
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 title claims abstract description 21
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 188
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 claims abstract description 187
- 241000209094 Oryza Species 0.000 claims abstract description 115
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 claims abstract description 115
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 claims abstract description 115
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims abstract description 79
- LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M monosodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M 0.000 claims abstract description 76
- 235000013923 monosodium glutamate Nutrition 0.000 claims abstract description 75
- 239000004223 monosodium glutamate Substances 0.000 claims abstract description 75
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 57
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 57
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 claims abstract description 54
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 48
- 240000001929 Lactobacillus brevis Species 0.000 claims abstract description 26
- 235000013957 Lactobacillus brevis Nutrition 0.000 claims abstract description 26
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 claims abstract description 26
- 239000006166 lysate Substances 0.000 claims abstract description 23
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 22
- UJKDYMOBUGTJLZ-RUCXOUQFSA-N ksc605q1h Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O.OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O UJKDYMOBUGTJLZ-RUCXOUQFSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims abstract description 11
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 40
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 claims description 27
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 20
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 18
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 18
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 18
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 claims description 12
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 12
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 11
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 claims description 10
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims description 10
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 9
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 8
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 8
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 8
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 claims description 8
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 8
- 239000005913 Maltodextrin Substances 0.000 claims description 7
- 229920002774 Maltodextrin Polymers 0.000 claims description 7
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 7
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 7
- 229940035034 maltodextrin Drugs 0.000 claims description 7
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 claims description 7
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 claims description 7
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 7
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 claims description 6
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 claims description 6
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 claims description 6
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 claims description 6
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 claims description 6
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 claims description 6
- 229920000881 Modified starch Polymers 0.000 claims description 6
- 239000004368 Modified starch Substances 0.000 claims description 6
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims description 6
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims description 6
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 claims description 6
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 6
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 claims description 6
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 claims description 6
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 claims description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims description 6
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 claims description 6
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 claims description 6
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 108010079058 casein hydrolysate Proteins 0.000 claims description 6
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 6
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 claims description 6
- 238000007602 hot air drying Methods 0.000 claims description 6
- RUTXIHLAWFEWGM-UHFFFAOYSA-H iron(3+) sulfate Chemical compound [Fe+3].[Fe+3].[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O RUTXIHLAWFEWGM-UHFFFAOYSA-H 0.000 claims description 6
- 229910000360 iron(III) sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 239000008101 lactose Substances 0.000 claims description 6
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims description 6
- 229940099596 manganese sulfate Drugs 0.000 claims description 6
- 239000011702 manganese sulphate Substances 0.000 claims description 6
- 235000007079 manganese sulphate Nutrition 0.000 claims description 6
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 6
- 235000019426 modified starch Nutrition 0.000 claims description 6
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims description 6
- 229950008882 polysorbate Drugs 0.000 claims description 6
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 claims description 6
- -1 soytone Substances 0.000 claims description 6
- 239000008107 starch Substances 0.000 claims description 6
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 6
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 claims description 6
- 102000008214 Glutamate decarboxylase Human genes 0.000 abstract description 17
- 108091022930 Glutamate decarboxylase Proteins 0.000 abstract description 17
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 abstract description 17
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 abstract description 16
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 abstract description 14
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract description 9
- 239000007788 liquid Substances 0.000 abstract description 8
- 239000002198 insoluble material Substances 0.000 abstract description 6
- 239000002195 soluble material Substances 0.000 abstract description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 37
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 10
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 6
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 6
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 6
- 229940049906 glutamate Drugs 0.000 description 5
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 5
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 5
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000021329 brown rice Nutrition 0.000 description 4
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 4
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 4
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 4
- ZWLUXSQADUDCSB-UHFFFAOYSA-N phthalaldehyde Chemical compound O=CC1=CC=CC=C1C=O ZWLUXSQADUDCSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 3
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 3
- 239000005515 coenzyme Substances 0.000 description 3
- NGVDGCNFYWLIFO-UHFFFAOYSA-N pyridoxal 5'-phosphate Chemical compound CC1=NC=C(COP(O)(O)=O)C(C=O)=C1O NGVDGCNFYWLIFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960001327 pyridoxal phosphate Drugs 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 102000004031 Carboxy-Lyases Human genes 0.000 description 2
- 108090000489 Carboxy-Lyases Proteins 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000008539 L-glutamic acids Chemical class 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 2
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 2
- 235000009569 green tea Nutrition 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 235000021109 kimchi Nutrition 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N (+/-)-DABA Natural products NCCC(N)C(O)=O OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DKIDEFUBRARXTE-UHFFFAOYSA-N 3-mercaptopropanoic acid Chemical compound OC(=O)CCS DKIDEFUBRARXTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010012289 Dementia Diseases 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 238000012356 Product development Methods 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 230000008344 brain blood flow Effects 0.000 description 1
- 210000004958 brain cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 235000021001 fermented dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 230000007102 metabolic function Effects 0.000 description 1
- 238000003801 milling Methods 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008288 physiological mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 239000013587 production medium Substances 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000005057 refrigeration Methods 0.000 description 1
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 235000013616 tea Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/005—Amino acids other than alpha- or beta amino acids, e.g. gamma amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
- C12N2500/30—Organic components
- C12N2500/32—Amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
- C12N2500/70—Undefined extracts
- C12N2500/76—Undefined extracts from plants
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
본 발명은 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
본 발명의 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액의 제조방법은 (a) 쌀눈 효소분해물을 포함하는 배지를 제조하는 단계; (b) 상기 배지에 MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)을 첨가하는 단계; 및 (c) 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis) 균주를 접종하고, 배양하여 발효시키는 단계를 포함한다.
본 발명에 의하여 수득된 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액은 쌀눈 효소분해물이 배지에 주발효원으로 포함되어 다양한 영양성분을 함유하고 있어 영양학적으로 매우 우수하다. 또한, 유산균이 보유하고 있는 글루타메이트 디카르복실라아제(Glutamate decarboxylase)에 의해 MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)이 가바(GABA)로 전환되어 고농도의 가바(GABA)를 제조할 수 있으며, 기존에 개발된 가바(GABA) 함유 제품 대비 가바(GABA) 함량이 월등하게 높다. 뿐만 아니라 최종적으로 적용되는 제품에 따라 용해성 및 비용해성 소재로 모두 이용될 수 있으며, 액상 및 분말 소재로 모두 적용이 가능하다.The present invention relates to a high-concentration GABA-containing lactic acid bacteria culture solution and a method for preparing the same.
The method for producing a high-concentration GABA-containing lactic acid bacteria culture solution of the present invention comprises the steps of: (a) preparing a medium containing rice bran enzyme lysate; (b) adding MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid to the medium; And (c) Lactobacillus brevis ( Lactobacillus brevis ) Inoculating the strain, and culturing and fermenting.
The high-concentration GABA-containing lactic acid bacteria culture medium obtained by the present invention is nutritionally excellent because it contains various nutrients as the rice bran enzyme lysate is included as the main fermentation source in the medium. In addition, MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid (L-glutamic acid) are converted to GABA by glutamate decarboxylase possessed by lactic acid bacteria to produce high concentration of GABA. It can be manufactured and has a significantly higher GABA content than previously developed products containing GABA. In addition, it can be used as both a soluble and insoluble material depending on the final applied product, and can be applied as both a liquid and a powder material.
Description
본 발명은 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액 및 이의 제조방법에 관한 것이다. The present invention relates to a high-concentration GABA-containing lactic acid bacteria culture solution and a method for preparing the same.
GABA(γ-Aminobutyric acid)는 비단백태 아미노산으로 동물의 경우 중추신경계의 주된 억제성 신경전달물질(Inhibitory Neurotransmitter)로서 잘 알려져 있다. GABA는 많은 생리학적 메카니즘에 관여하여 동물의 경우 뇌의 혈류를 활발하게 하고, 산소공급량을 증가시켜 뇌세포의 대사기능을 항진시키는 것으로 알려져 있으며, 프로락틴(Prolactin)의 분비와 성장호르몬의 분비 조절에도 관여하며 혈압강하 및 통증완화에도 효과가 있는 것으로 알려져 있어 약리적으로 매우 관심이 높은 물질이다. GABA (γ-Aminobutyric acid) is a non-protein amino acid and is well known as a major inhibitory neurotransmitter in the central nervous system in animals. GABA is involved in many physiological mechanisms and is known to stimulate brain blood flow in animals and increase oxygen supply to enhance the metabolic function of brain cells. It is known to be effective in lowering blood pressure and relieving pain, so it is a substance of high interest in pharmacology.
GABA가 고혈압, 치매의 예방 등에 중요한 역할을 하는 것으로 알려지면서 의약품으로서 뿐만 아니라 최근에는 기능성 식품소재로서의 관심이 고조되고 있다. 이와 같은 관심에 따라 각종 소재에 자연적으로 GABA의 함량을 증가시키는 연구가 활발히 진행되고 있다. 예를들어, 녹차의 생잎을 N2 가스에 6~8시간 동안 방치하거나 쌀눈배아 및 현미를 일정한 온도의 물에 침지하는 방법을 통하여 GABA의 함량이 증가된 녹차 및 GABA-함유 쌀눈배아 및 발아현미를 생산하고 있다.As GABA is known to play an important role in the prevention of hypertension and dementia, interest not only as a pharmaceutical, but also as a functional food material is rising recently. In response to such interest, studies to naturally increase the content of GABA in various materials are being actively conducted. For example, green tea with increased GABA content and GABA-containing rice germ and germinated brown rice can be obtained by immersing raw green tea leaves in N2 gas for 6 to 8 hours or immersing rice germ and brown rice in water at a constant temperature. are producing
그러나, 이러한 방법에 의하여 제조된 제품에서의 GABA 함량은 제품의 무게기준으로 최고 0.5%(w/w)를 넘지 못하는 문제점과 제품의 형태가 모두 불용성 형태로, GABA를 이용한 제품 개발에 한계점을 나타낸다. 이러한 문제의 해결을 위하여, 최근 일본에서는 유산균을 이용하여 기질 중에 첨가된 MSG(모노소듐글루타메이트)를 탈탄산효소를 이용하여 GABA로 전환시킨 후 배양액 중 축적되어있는 GABA만을 회수 농축한 제품이 개발되었다. 이렇게 유산균을 이용하여 생산되는 GABA는 발효 후 공정에 따라 고농도의 제품 생산이 가능하며, 완전 용해되는 제품으로 생산이 가능한 장점이 있다. However, the GABA content in the product manufactured by this method does not exceed 0.5% (w/w) at the maximum based on the weight of the product, and the shape of the product is both insoluble, indicating a limitation in product development using GABA. . To solve this problem, recently, in Japan, MSG (monosodium glutamate) added to the substrate using lactic acid bacteria was converted to GABA using decarboxylase, and only GABA accumulated in the culture medium was recovered and concentrated. . GABA produced using lactic acid bacteria in this way can produce high-concentration products according to the post-fermentation process, and has the advantage of being able to produce completely soluble products.
종래의 기술을 살펴보면, 대한민국 등록특허공보 제10-0558760호「GABA 성분이 강화된 발아현미의 제조 방법 및 GABA성분이 강화된 발아현미차의 제조방법」, 대한민국 등록특허공보 제10-0687599호「쌀눈도정 부산물을 이용한 GABA 제조방법」, 대한민국 등록특허공보 제10-1395855호「탈지미강을 포함한 배지 및 이를 이용한 고농도 GABA의 제조방법」 등 GABA 제조를 위하여 쌀눈을 이용하는 연구가 다수 이루어지고 있다. Looking at the prior art, Korean Patent Publication No. 10-0558760 「Method for manufacturing germinated brown rice with enhanced GABA component and method for manufacturing germinated brown rice tea with enhanced GABA component」, Korean Patent Publication No. 10-0687599 「 A number of studies using rice germ for GABA production have been conducted, such as 'Method for manufacturing GABA using rice bran milling by-products' and Korean Patent Publication No. 10-1395855 'Medium containing defatted rice bran and manufacturing method of high-concentration GABA using the same'.
그 중 쌀눈은 GABA를 생산하는 배지의 원료로서 많은 장점을 가지고 있다. 특히, 디카르복실라제(Decarboxylase)의 조효소로 쓰이는 피리독실인산이 포함되어 있다. 하지만, 쌀눈 열수 추출물 만으로는 쌀눈의 영양성분을 다 추출하지 못하므로 보다 효과적인 방법을 이용하여 GABA의 생산률을 높이기 위한 연구가 필요한 실정이다.Among them, rice germ has many advantages as a raw material for GABA producing medium. In particular, it contains pyridoxyl phosphate used as a coenzyme of decarboxylase. However, since it is not possible to extract all the nutrients from the rice bran with hot water extract alone, there is a need for research to increase the production rate of GABA using a more effective method.
유산균에 의하여 배지 중에 첨가된 글루탐산을 전환시킴으로써 GABA를 생산하는 연구가 시작된 일본의 경우, GABA의 생산과 관련된 많은 특허가 알려져 있으나, 배지 조성이 단순하거나, 알코올발효 부산물 등의 특정 성분을 이용하는 방법을 사용하였으며(일본등록특허공보 제4968869호), 유산균 및 효모의 배양을 이용한 GABA 생산을 위한 미강, 쌀눈배아, 밀배아 또는 이들의 추출물 등 다양한 배지 조성에 관하여 연구된 바는 있으나(일본 등록특허공보 제4137349호), 글루탐산 및 각종 글루탐산염들의 첨가량이 식품소재 전체 중에 0.1-5%에 불과하여 발효 후 GABA의 함량이 낮은 문제점이 있다. In Japan, where research on producing GABA by converting glutamic acid added to the medium by lactic acid bacteria has begun, many patents related to the production of GABA are known. (Japanese Patent Publication No. 4968869), and there have been studies on the composition of various media such as rice bran, rice germ, wheat germ, or extracts thereof for GABA production using lactic acid bacteria and yeast culture (Japanese Patent Publication) No. 4137349), glutamic acid and various glutamic acid salts are added in only 0.1-5% of the total food material, so there is a problem that the content of GABA after fermentation is low.
국내에서 진행된 발효에 의하여 제조되는 GABA의 생산성을 높이는 연구는 GABA 생산 균주를 김치 스타터로서 사용하는 경우(대한민국 공개특허공보 제10-2009-0036802호), 발효 유제품의 스타터로 사용하는 방법(대한민국 등록특허공보 제10-0661823호) 등이 있으나 모두 완제품인 김치 및 치즈의 GABA 함량을 높이는 것이 주목적이며, 아직 발효법을 통하여 고농도의 GABA를 생산하기 위한 방법은 제안된 바 없다.A study to increase the productivity of GABA produced by fermentation in Korea is a method of using a GABA-producing strain as a starter for kimchi (Korean Patent Publication No. 10-2009-0036802) and a method of using it as a starter for fermented dairy products (Registered in Korea) Patent Publication No. 10-0661823), but the main purpose is to increase the GABA content of finished products such as kimchi and cheese, and a method for producing high concentration of GABA through fermentation has not yet been proposed.
미국 및 유럽에서는 아직 유산균을 이용하여 배지 중에 인위적으로 첨가한 글루탐산 또는 그 염을 GABA로 전환시키는 생산방법과 관련된 특허가 알려져 있지 않으며, 단지 천연물에 존재하는 글루탐산을 글루타민산 디카르복실라아제 및 글루타미나아제로 처리하여 GABA를 얻는 공정의 기술만 있는 것으로 조사되었다.In the United States and Europe, a patent related to a production method for converting glutamic acid or its salt artificially added to the medium into GABA using lactic acid bacteria is not known yet, and only glutamic acid decarboxylase and glutamic acid present in natural products It has been investigated that there is only a description of the process of obtaining GABA by treatment with naphtha.
상기한 바와 같이, 종래기술로는 쌀눈 효소분해물을 원료로 발효를 진행하여 GABA를 생산한 바 없으며 발효법에 의하여 고농도의 GABA를 생산하는 방법에 대하여 논의된 바 없다.As described above, in the prior art, GABA has not been produced by fermenting rice bran enzyme lysate as a raw material, and a method for producing GABA of high concentration by fermentation has not been discussed.
이에, 본 발명자들은 상기 문제점을 해결하기 위하여 노력한 결과, 쌀눈 열수 추출물 만으로는 쌀눈의 영양성분을 다 추출하지 못하므로 보다 효과적인 쌀눈 효소분해물을 이용하여 가바(GABA) 생산배지를 제조하고, MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)을 첨가한 다음, 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis) 균주를 접종하고, 배양하여 발효시킬 경우, 유산균이 보유하고 있는 글루타메이트 디카르복실라아제(Glutamate decarboxylase)에 의해 MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)이 가바(GABA)로 전환되어 고농도의 가바(GABA) 함유 유산균 배양액을 생성시킬 수 있다는 것을 확인하고, 본 발명을 완성하게 되었다.Accordingly, as a result of the present inventors' efforts to solve the above problems, since the nutrient components of the rice germ alone cannot be extracted with only the hot water extract of the rice bran, a more effective GABA production medium is prepared using the enzyme decomposition product of the rice germ, and MSG (Mono Sodium) Glutamate) and L-glutamic acid (L-glutamic acid) are added, and then inoculated with Lactobacillus brevis strain, cultured and fermented, glutamate decarboxylase possessed by lactic acid bacteria MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid are converted to GABA by .
본 발명의 목적은 쌀눈 효소분해물을 주발효원으로 포함하는 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액 및 이의 제조방법을 제공하는데 있다.It is an object of the present invention to provide a culture solution of lactic acid bacteria containing high concentration GABA containing an enzyme decomposition product of rice germ as a main fermentation source and a method for preparing the same.
본 발명의 또 다른 목적은 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액을 이용한 고농도 가바(GABA) 분말의 제조방법을 제공하는데 있다.Another object of the present invention is to provide a method for producing a high-concentration GABA powder using a high-concentration GABA-containing lactic acid bacteria culture solution.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 (a) 쌀눈 효소분해물을 포함하는 배지를 제조하는 단계; (b) 상기 배지에 MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)을 첨가하는 단계; 및 (c) 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis) 균주를 접종하고, 배양하여 발효시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액의 제조방법을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention comprises the steps of (a) preparing a medium containing an enzyme lysate of rice germ; (b) adding MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid to the medium; And (c) Lactobacillus brevis ( Lactobacillus brevis ) It provides a method for producing a high concentration GABA (GABA)-containing lactic acid bacteria culture solution comprising the step of inoculating, culturing and fermenting the strain.
본 발명에 있어서, 상기 쌀눈 효소분해물은 쌀눈을 세척하는 단계; 세척된 쌀눈에 물을 2 내지 20배로 첨가하여 침지시키는 단계; 침지된 쌀눈을 AMG 300L 효소처리한 후, 55 내지 70℃에서 100 내지 150분 동안 교반하여 쌀눈을 분해시키는 단계; 및 분해된 쌀눈을 필터를 이용하여 쌀눈을 제거하고 남은 효소분해물을 수득하는 단계를 포함하는 방법으로 제조된 것을 특징으로 한다.In the present invention, the enzymatic decomposition product of rice germ washing the rice germ; immersing the washed rice germ by adding water 2 to 20 times; AMG 300L enzyme treatment on the immersed rice germ, followed by stirring at 55 to 70 ℃ for 100 to 150 minutes to decompose the rice germ; And it is characterized in that it is prepared by a method comprising the step of removing the rice germ using a filter to obtain the enzyme decomposition product remaining after removing the decomposed rice germ.
본 발명에 있어서, 상기 배지는 (ⅰ) 글루코오스, 수크로오스, 말토오스, 프럭토오스, 락토오스, 자일로오스, 갈락토오스, 아라비노오스 및 그의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 탄소원; (ⅱ) 효모 추출물, 소이톤(Soytone), 펩톤, 비프추출물(Beef extract), 트립톤, 카시톤 및 그의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 질소원; 및 (ⅲ) 마그네슘 설페이트, 소듐아세테이트, 망가네이즈 설페이트, 페릭 설페이트, 칼슘 클로라이드, 폴리솔베이트 및 그의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 미량성분을 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 한다.In the present invention, the medium includes (i) a carbon source selected from the group consisting of glucose, sucrose, maltose, fructose, lactose, xylose, galactose, arabinose, and combinations thereof; (ii) a nitrogen source selected from the group consisting of yeast extract, soytone, peptone, beef extract, tryptone, casitone, and combinations thereof; and (iii) a trace component selected from the group consisting of magnesium sulfate, sodium acetate, manganese sulfate, ferric sulfate, calcium chloride, polysorbate, and combinations thereof.
본 발명에 있어서, 상기 배지 총 중량에 대하여 탄소원은 0.5 내지 3중량%, 질소원은 0.5 내지 3중량% 및 무기성분은 0.5 내지 3중량%를 포함하는 것을 특징으로 한다.In the present invention, with respect to the total weight of the medium, the carbon source is 0.5 to 3% by weight, the nitrogen source is 0.5 to 3% by weight, and the inorganic component is characterized in that it contains 0.5 to 3% by weight.
본 발명에 있어서, 상기 MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)은 배지 총 중량에 대하여 1 내지 40중량%를 포함하는 것을 특징으로 한다.In the present invention, the MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid (L-glutamic acid) is characterized in that it comprises 1 to 40% by weight based on the total weight of the medium.
본 발명에 있어서, 상기 배양은 30 내지 40℃에서 44 내지 72시간 동안 수행되는 것을 특징으로 한다.In the present invention, the culture is characterized in that it is carried out at 30 to 40 ℃ for 44 to 72 hours.
본 발명은 또한, 상기 제조방법에 따라 수득된 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액을 제공한다.The present invention also provides a high-concentration GABA-containing lactic acid bacteria culture solution obtained according to the above production method.
본 발명에 있어서, 상기 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액은 건물 기준으로 가바(GABA) 함유량이 40 내지 90%인 것을 특징으로 한다. In the present invention, the high concentration GABA (GABA)-containing lactic acid bacteria culture medium is characterized in that the GABA (GABA) content is 40 to 90% on a dry matter basis.
본 발명은 또한, 상기 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액으로부터 불용성 성분을 제거하는 단계;(b) 불용성 성분이 제거된 배양액에 부형제를 혼합하는 단계; 및 (c) 부형제가 혼합된 배양액을 건조하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 고농도 가바(GABA) 분말의 제조방법을 제공한다.The present invention also comprises the steps of: removing insoluble components from the high-concentration GABA-containing lactic acid bacteria culture solution; (b) mixing an excipient in the culture medium from which the insoluble components are removed; And (c) provides a method for producing a high concentration GABA (GABA) powder, characterized in that it comprises the step of drying the culture solution mixed with excipients.
본 발명에 있어서, 상기 불용성 성분을 제거하는 단계는 규조토를 첨가한 다음 여과시키는 것을 특징으로 한다.In the present invention, the step of removing the insoluble component is characterized in that diatomaceous earth is added and then filtered.
본 발명에 있어서, 상기 부형제는 말토텍스트린, 가용성전분, 변성전분 및 분말유지로 구성된 군으로부터 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 한다.In the present invention, the excipient is characterized in that at least one selected from the group consisting of maltodextrin, soluble starch, modified starch and powdered oil.
본 발명에 있어서, 상기 건조는 동결건조, 분무건조, 감압건조 및 열풍건조로 구성된 군으로부터 선택되는 방법으로부터 수행되는 것을 특징으로 한다.In the present invention, the drying is characterized in that it is performed from a method selected from the group consisting of freeze drying, spray drying, reduced pressure drying and hot air drying.
또한, 본 발명은 (a) 불용성 성분이 제거된 쌀눈 효소분해물을 포함하는 배지를 제조하는 단계; (b) 상기 배지에 MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)을 첨가하는 단계; 및 (c) 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis) 균주를 접종하고, 배양하여 발효시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액의 제조방법을 제공한다.In addition, the present invention comprises the steps of (a) preparing a medium comprising an enzyme decomposition product of rice bran from which insoluble components are removed; (b) adding MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid to the medium; And (c) Lactobacillus brevis ( Lactobacillus brevis ) It provides a method for producing a high concentration GABA (GABA)-containing lactic acid bacteria culture solution comprising the step of inoculating, culturing and fermenting the strain.
본 발명에 있어서, 상기 쌀눈 효소분해물은 쌀눈을 세척하는 단계; 세척된 쌀눈에 물을 2 내지 20배로 첨가하여 침지시키는 단계; 침지된 쌀눈을 AMG 300L 효소처리한 후, 55 내지 70℃에서 100 내지 150분 동안 교반하여 쌀눈을 분해시키는 단계; 및 분해된 쌀눈의 불용성 성분을 제거하고 남은 효소분해물을 수득하는 단계를 포함하는 방법으로 제조된 것을 특징으로 한다.In the present invention, the enzymatic decomposition product of rice germ washing the rice germ; immersing the washed rice germ by adding water 2 to 20 times; AMG 300L enzyme treatment on the immersed rice germ, followed by stirring at 55 to 70 ℃ for 100 to 150 minutes to decompose the rice germ; And it is characterized in that it is prepared by a method comprising removing the insoluble component of the decomposed rice germ and obtaining the remaining enzyme decomposition product.
본 발명에 있어서, 상기 불용성 성분이 제거된 쌀눈 효소분해물은 쌀눈 효소분해물에 규조토를 첨가한 다음 여과시키는 것을 특징으로 한다.In the present invention, the rice bran enzyme lysate from which the insoluble component is removed is characterized in that diatomaceous earth is added to the rice bran enzyme lysate and then filtered.
본 발명에 있어서, 상기 배지는 (ⅰ) 글루코오스, 수크로오스, 말토오스, 프럭토오스, 락토오스, 자일로오스, 갈락토오스, 아라비노오스 및 그의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 탄소원; (ⅱ) 효모 추출물, 소이톤(Soytone), 펩톤, 비프추출물(Beef extract), 트립톤, 카시톤 및 그의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 질소원; 및 (ⅲ) 마그네슘 설페이트, 소듐아세테이트, 망가네이즈 설페이트, 페릭 설페이트, 칼슘 클로라이드, 폴리솔베이트 및 그의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 무기성분을 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 한다.In the present invention, the medium includes (i) a carbon source selected from the group consisting of glucose, sucrose, maltose, fructose, lactose, xylose, galactose, arabinose, and combinations thereof; (ii) a nitrogen source selected from the group consisting of yeast extract, soytone, peptone, beef extract, tryptone, casitone, and combinations thereof; and (iii) an inorganic component selected from the group consisting of magnesium sulfate, sodium acetate, manganese sulfate, ferric sulfate, calcium chloride, polysorbate, and combinations thereof.
본 발명에 있어서, 상기 배지 총 중량에 대하여 탄소원은 0.5 내지 3중량%, 질소원은 0.5 내지 3중량% 및 무기성분은 0.5 내지 3중량%를 포함하는 것을 특징으로 한다.In the present invention, with respect to the total weight of the medium, the carbon source is 0.5 to 3% by weight, the nitrogen source is 0.5 to 3% by weight, and the inorganic component is characterized in that it contains 0.5 to 3% by weight.
본 발명에 있어서, 상기 MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)은 배지 총 중량에 대하여 1 내지 40중량%를 포함하는 것을 특징으로 한다.In the present invention, the MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid (L-glutamic acid) is characterized in that it comprises 1 to 40% by weight based on the total weight of the medium.
본 발명에 있어서, 상기 배양은 30 내지 40℃에서 44 내지 72시간 동안 수행되는 것을 특징으로 한다.In the present invention, the culture is characterized in that it is carried out at 30 to 40 ℃ for 44 to 72 hours.
본 발명은 또한, 상기 제조방법에 따라 수득된 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액을 제공한다.The present invention also provides a high-concentration GABA-containing lactic acid bacteria culture solution obtained according to the above production method.
본 발명에 있어서, 상기 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액은 건물 기준으로 가바(GABA) 함유량이 40 내지 90%인 것을 특징으로 한다.In the present invention, the high concentration GABA (GABA)-containing lactic acid bacteria culture medium is characterized in that the GABA (GABA) content is 40 to 90% on a dry matter basis.
본 발명은 또한, (a) 제20항의 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액에 부형제를 혼합하는 단계; 및The present invention also comprises the steps of (a) mixing an excipient in the high-concentration GABA-containing lactic acid bacteria culture solution of claim 20; and
(b) 부형제가 혼합된 배양액을 건조하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 고농도 가바(GABA) 분말의 제조방법을 제공한다.(b) provides a method for producing a high-concentration GABA powder, characterized in that it comprises the step of drying the culture solution mixed with excipients.
본 발명에 있어서, 상기 부형제는 말토텍스트린, 가용성전분, 변성전분 및 분말유지로 구성된 군으로부터 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 한다.In the present invention, the excipient is characterized in that at least one selected from the group consisting of maltodextrin, soluble starch, modified starch and powdered oil.
본 발명에 있어서, 상기 건조는 동결건조, 분무건조, 감압건조 및 열풍건조로 구성된 군으로부터 선택되는 방법으로부터 수행되는 것을 특징으로 한다.In the present invention, the drying is characterized in that it is performed from a method selected from the group consisting of freeze drying, spray drying, reduced pressure drying and hot air drying.
본 발명에 있어서, 상기 고농도 가바(GABA) 분말은 유산균 배양체를 포함하고, 유산균 배양체 수는 1X104~1X108cfu/g인 것을 특징으로 한다.In the present invention, the high-concentration GABA (GABA) powder includes a lactic acid bacteria culture, and the number of lactic acid bacteria cultures is 1X10 4 ~ 1X10 8 cfu/g.
본 발명에 의하여 수득된 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액은 쌀눈 효소분해물이 배지에 주발효원으로 포함되어 다양한 영양성분을 함유하고 있어 영양학적으로 매우 우수하다. 또한, 유산균이 보유하고 있는 글루타메이트 디카르복실라아제(Glutamate decarboxylase)에 의해 MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)이 가바(GABA)로 전환되어 고농도의 가바(GABA)를 제조할 수 있으며, 기존에 개발된 가바(GABA) 함유 제품 대비 가바(GABA) 함량이 월등하게 높다. 뿐만 아니라 최종적으로 적용되는 제품에 따라 용해성 및 비용해성 소재로 모두 이용될 수 있으며, 액상 및 분말 소재로 모두 적용이 가능하다.The high-concentration GABA-containing lactic acid bacteria culture medium obtained by the present invention is nutritionally excellent because it contains various nutrients as the rice bran enzyme lysate is included as the main fermentation source in the medium. In addition, MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid (L-glutamic acid) are converted to GABA by glutamate decarboxylase possessed by lactic acid bacteria to produce high concentration of GABA. It can be manufactured and has a significantly higher GABA content than previously developed products containing GABA. In addition, it can be used as both a soluble and insoluble material depending on the product to be finally applied, and can be applied as both a liquid and a powder material.
다른 식으로 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어들은 본 발명이 속하는 기술분야에서 숙련된 전문가에 의해서 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가진다. 일반적으로, 본 명세서에서 사용된 명명법 은 본 기술분야에서 잘 알려져 있고 통상적으로 사용되는 것이다.Unless defined otherwise, all technical and scientific terms used herein have the same meaning as commonly understood by one of ordinary skill in the art to which this invention belongs. In general, the nomenclature used herein is those well known and commonly used in the art.
본원 명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성 요소를 "포함" 한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성 요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다. Throughout this specification, when a part "includes" a component, it means that other components may be further included, rather than excluding other components, unless otherwise stated.
본 발명에서는 쌀눈 효소분해물을 이용하여 가바(GABA) 배지를 제조하고, MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)을 첨가한 다음, 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis) 균주를 접종하고, 배양하여 발효시킬 경우, 유산균이 보유하고 있는 글루타메이트 디카르복실라아제(Glutamate decarboxylase)에 의해 MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)이 가바(GABA)로 전환되어 고농도의 가바(GABA) 함유 유산균 배양액을 제조할 수 있다는 것을 확인하고자 하였다.In the present invention, a GABA medium is prepared by using an enzyme lysate of rice germ, MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid are added, and then Lactobacillus brevis is inoculated with a strain and , when cultured and fermented, MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid are converted to GABA by glutamate decarboxylase possessed by lactic acid bacteria, and high concentration of It was intended to confirm that GABA-containing lactic acid bacteria culture solution can be prepared.
이에, 본 발명의 실시예에서는 쌀눈을 세척한 다음 물을 첨가하여 침지시킨 후, 효소를 첨가하여 쌀눈을 분해시키고, 분해된 쌀눈을 필터를 이용하여 쌀눈을 제거하고 남은 쌀눈 효소분해물을 포함하는 배지를 제조하였다. 다음으로, 쌀눈 효소분해물을 포함하는 배지에 MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)을 첨가한 다음, 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis) 균주를 접종하고, 배양하여 발효시켜 고농도의 가바(GABA) 함유 유산균 배양액을 제조하였다. 제조된 가바(GABA) 함량을 HPLC를 통해 분석한 결과, 샘플 3개 모두 가바(GABA) 성분이 고함량 함유되어 있다는 것을 확인할 수 있었다.Accordingly, in an embodiment of the present invention, after washing the rice buds and immersing them by adding water, an enzyme is added to decompose the buds, and the decomposed buds are removed using a filter and the remaining medium containing the enzyme decomposition product of the rice buds. was prepared. Next, MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid (L-glutamic acid) were added to the medium containing the rice bran enzyme lysate, and then, the Lactobacillus brevis strain was inoculated, cultured and fermented to obtain a high concentration of A lactic acid bacteria culture solution containing GABA was prepared. As a result of analyzing the prepared GABA content through HPLC, it was confirmed that all three samples contained a high content of GABA component.
따라서, 본 발명은 일 관점에서, (a) 쌀눈 효소분해물을 포함하는 배지를 제조하는 단계; (b) 상기 배지에 MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)을 첨가하는 단계; 및 (c) 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis) 균주를 접종하고, 배양하여 발효시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액의 제조방법에 관한 것이다.Accordingly, the present invention, in one aspect, (a) preparing a medium comprising an enzyme lysate of rice; (b) adding MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid to the medium; And (c) Lactobacillus brevis ( Lactobacillus brevis ) It relates to a method for producing a high concentration GABA (GABA)-containing lactic acid bacteria culture solution comprising the step of inoculating, culturing and fermenting the strain.
본 발명에 따른 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액의 제조방법은 (a) 쌀눈 효소분해물을 포함하는 배지를 제조하는 단계; (b) 상기 배지에 MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)을 첨가하는 단계; 및 (c) 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis) 균주를 접종하고, 배양하여 발효시키는 단계를 포함한다.According to the present invention, a method for producing a high-concentration GABA-containing lactic acid bacteria culture solution comprises the steps of: (a) preparing a medium containing rice bran enzyme lysate; (b) adding MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid to the medium; And (c) Lactobacillus brevis ( Lactobacillus brevis ) Inoculating the strain, and culturing and fermenting.
본 발명에 있어서, 상기 쌀눈은 가바(GABA)를 생산하는 배지의 원료로서 많은 장점을 가지고 있다. 특히, 쌀눈은 디카르복실라아제(Glutamate decarboxylase)의 조효소로 쓰이는 피리독실인산이 포함되어 있다. 하지만, 쌀눈 열수 추출물 만으로는 쌀눈의 영양성분을 다 추출하지 못하므로, 본 발명에서는 쌀눈 효소분해물을 이용하여 가바(GABA)를 생산하는 배지를 제조하고자 하였다.In the present invention, the rice germ has many advantages as a raw material for a medium for producing GABA. In particular, rice germ contains pyridoxyl phosphate, which is used as a coenzyme of glutamate decarboxylase. However, since it is not possible to extract all the nutrients of the rice germ only with the hot water extract of the rice germ, in the present invention, a medium for producing GABA was prepared by using the enzyme decomposition product of the rice germ.
본 발명에 있어서, 상기 쌀눈 효소분해물은 쌀눈을 세척하는 단계; 세척된 쌀눈에 물을 2 내지 20배로 첨가하여 침지시키는 단계; 침지된 쌀눈을 AMG 300L 효소처리한 후, 55 내지 70℃에서 100 내지 150분 동안 교반하여 쌀눈을 분해시키는 단계; 및 분해된 쌀눈을 필터를 이용하여 쌀눈을 제거하고 남은 효소분해물을 수득하는 단계를 포함하는 방법으로 제조된 것이 바람직하다.In the present invention, the enzymatic decomposition product of rice germ washing the rice germ; immersing the washed rice germ by adding water 2 to 20 times; AMG 300L enzyme treatment on the immersed rice germ, followed by stirring at 55 to 70 ℃ for 100 to 150 minutes to decompose the rice germ; And it is preferable that it is prepared by a method comprising the step of removing the decomposed rice germ using a filter and obtaining the remaining enzyme decomposition product.
상기 쌀눈 효소분해물은 보다 용이하게 영양분을 용출하기 위하여 쌀눈을 최적의 양으로 가수 후, 효소처리를 하는 것을 특징으로 한다.The rice bran enzyme decomposition product is characterized in that the rice germ is hydrolyzed in an optimal amount in order to more easily elute nutrients, and then subjected to enzyme treatment.
이때, 상기 쌀눈을 침지시키기 위하여 사용하는 물의 양은 쌀눈 대비 물의 양이 2 내지 20배가 되도록 첨가하여 침지시키는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 5 내지 15배이다. 만일, 쌀눈 대비 물의 양이 5배 미만일 경우에는 추출효율이 떨어지는 단점이 있고, 쌀눈 대비 물의 양이 20배를 초과할 경우에는 추출 후 유효성분의 농도가 낮아 발효원으로 사용될 경우 가바(GABA) 전환율이 낮은 문제점이 발생할 수 있기 때문에 바람직하지 않다.At this time, the amount of water used to immerse the rice germ is preferably added so that the amount of water compared to the rice germ is 2 to 20 times, and more preferably 5 to 15 times. If the amount of water compared to rice germ is less than 5 times, there is a disadvantage in that the extraction efficiency is lowered. This is undesirable because it can cause low problems.
또한, 침지된 쌀눈을 효소처리한 다음, 55 내지 70℃에서 100 내지 150분 동안 교반하여 쌀눈을 분해시키는 것이 바람직하고, 60℃에서 2시간 동안 수행하는 것이 가장 바람직하다. 만일, 온도가 55℃ 미만일 경우에는 온도가 낮아 시간이 오래 소요되고, 온도가 70℃를 초과할 경우에는 효소의 열 변성으로 분해가 되지 않는 경우가 생기 때문에 바람직하지 않다. In addition, after enzymatic treatment of the soaked rice germ, it is preferable to decompose the rice germ by stirring at 55 to 70 ℃ for 100 to 150 minutes, and it is most preferably carried out at 60 ℃ for 2 hours. If the temperature is less than 55 ℃, the temperature is low and it takes a long time, and when the temperature exceeds 70 ℃, it is not preferable because there is a case where decomposition is not possible due to thermal denaturation of the enzyme.
본 발명에 있어서, 상기 배지는 (ⅰ) 글루코오스, 수크로오스, 말토오스, 프럭토오스, 락토오스, 자일로오스, 갈락토오스, 아라비노오스 및 그의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 탄소원; (ⅱ) 효모 추출물, 소이톤(Soytone), 펩톤, 비프추출물(Beef extract), 트립톤, 카시톤 및 그의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 질소원; 및 (ⅲ) 마그네슘 설페이트, 소듐아세테이트, 망가네이즈 설페이트, 페릭 설페이트, 칼슘 클로라이드, 폴리솔베이트 및 그의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 미량성분을 추가적으로 포함하는 것일 수 있다.In the present invention, the medium includes (i) a carbon source selected from the group consisting of glucose, sucrose, maltose, fructose, lactose, xylose, galactose, arabinose, and combinations thereof; (ii) a nitrogen source selected from the group consisting of yeast extract, soytone, peptone, beef extract, tryptone, casitone, and combinations thereof; and (iii) a trace component selected from the group consisting of magnesium sulfate, sodium acetate, manganese sulfate, ferric sulfate, calcium chloride, polysorbate, and combinations thereof.
본 발명에 있어서, 상기 배지 총 중량에 대하여 탄소원은 0.5 내지 3중량%, 질소원은 0.5 내지 3중량% 및 무기성분은 0.5 내지 3중량%를 포함하는 것이 바람직하다.In the present invention, it is preferable to include 0.5 to 3% by weight of the carbon source, 0.5 to 3% by weight of the nitrogen source, and 0.5 to 3% by weight of the inorganic component with respect to the total weight of the medium.
상기 탄소원은 배지 총 중량에 대하여 0.5 내지 3중량% 포함하는 것이 바람직하다. 만일, 탄소원의 함량이 0.5중량% 미만일 경우에는 유산균의 생장에 필요한 탄소원이 부족하여 자라지 않고, 3중량%를 초과할 경우에는 유기산 생산이 많아져서 품질 저하를 야기 시키기 때문에 바람직하지 않다.The carbon source is preferably included in an amount of 0.5 to 3% by weight based on the total weight of the medium. If the content of the carbon source is less than 0.5% by weight, it does not grow due to insufficient carbon source necessary for the growth of lactic acid bacteria.
또한, 상기 질소원은 배지 총 중량에 대하여 0.5 내지 3중량% 포함하는 것이 바람직하다. 만일, 질소원의 함량이 0.5중량% 미만일 경우에는 질소원 부족으로 글루타메이트를 질소원으로 사용하여 GABA 농도가 줄어들고, 3중량%를 초과할 경우에는 남아있는 질소원과 탄소원의 마일라드 반응으로 분무건조가 잘되지 않을 수 있기 때문에 바람직하지 않다.In addition, the nitrogen source is preferably included in an amount of 0.5 to 3% by weight based on the total weight of the medium. If the content of the nitrogen source is less than 0.5% by weight, the GABA concentration is reduced by using glutamate as a nitrogen source due to the lack of a nitrogen source. It is not preferable because it can
또한, 상기 무기성분은 배지 총 중량에 대하여 0.5 내지 3중량% 포함하는 것이 바람직하다. 만일, 무기성분의 함량이 0.5중량% 미만일 경우에는 유산균 생육에 문제가 생기고, 3중량%를 초과할 경우에는 소모되지 않고 남아서 최종제품 품질의 저하를 야기시키기 때문에 바람직하지 않다.In addition, the inorganic component preferably contains 0.5 to 3% by weight based on the total weight of the medium. If the content of the inorganic component is less than 0.5% by weight, there is a problem in the growth of lactic acid bacteria, and when it exceeds 3% by weight, it is not consumed because it remains unconsumed and causes a decrease in the quality of the final product.
본 발명에 있어서, 상기 MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)은 배지 총 중량에 대하여 1 내지 40중량%를 포함하는 것이 바람직하고, 1 내지 40중량%를 포함하는 것이 가장 바람직하다. 만일, MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)의 함량이 배지 총 중량에 대하여 1중량% 미만일 경우에는 GABA가 거의 생성이 되지 않고, 40중량%를 초과할 경우에는 발효시간이 길어져서 효율이 떨어지기 때문에 바람직하지 않다.In the present invention, the MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid (L-glutamic acid) is preferably included in an amount of 1 to 40% by weight based on the total weight of the medium, and it is most preferable to include 1 to 40% by weight. desirable. If the content of MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid is less than 1% by weight based on the total weight of the medium, GABA is hardly produced, and when it exceeds 40% by weight, fermentation time This is not preferable because it becomes longer and the efficiency decreases.
상기 배지에 MSG(Mono Sodium Glutamate)를 첨가하면 고농도의 가바(GABA)가 생산되고, 글루타메이트 디카르복실라아제(Glutamate decarboxylase) 효소의 최대활성도 pH를 유지하기 위하여 L-글루탐산(L-glutamic acid) 염을 첨가하여 가바(GABA) 전환 시, L-글루탐산(L-glutamic acid) 염이 녹아 일정 pH를 유지하여 가바(GABA)의 생산속도 및 생산율이 증가한다. When MSG (Mono Sodium Glutamate) is added to the medium, a high concentration of GABA is produced, and in order to maintain the pH of the maximum activity of the glutamate decarboxylase enzyme, L-glutamic acid (L-glutamic acid) When GABA is converted by adding salt, the L-glutamic acid salt is dissolved to maintain a constant pH, thereby increasing the production rate and production rate of GABA.
본 발명에 있어서, 상기 쌀눈 효소분해물을 포함하는 배지에 MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)을 첨가하여 수득된 배지는 멸균 처리를 하는 것이 바람직하다. 상기 멸균 처리는 온도가 너무 낮거나 시간이 짧으면 멸균 효과가 감소하고, 온도가 너무 높거나 멸균 시간이 길면 영양소의 파괴가 심해지기 때문에 121℃에서 15분간 수행하는 것이 가장 바람직하다.In the present invention, it is preferable to sterilize the medium obtained by adding MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid to the medium containing the rice bran enzyme lysate. The sterilization treatment is most preferably performed at 121° C. for 15 minutes because the sterilization effect is reduced when the temperature is too low or the time is short, and the destruction of nutrients is severe when the temperature is too high or the sterilization time is long.
상기와 같이 멸균 처리가 완료된 배지에 유산균을 접종하게 되는데, 본 발명에서는 유산균 중 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis) 균주를 사용하는 것이 유산균이 보유하고 있는 글루타메이트 디카르복실라아제(Glutamate decarboxylase)에 의해 MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)을 가바(GABA)로 전환시키는 능력이 매우 탁월하다는 측면에서 바람직하다. As described above, lactic acid bacteria are inoculated into the sterilized medium, and in the present invention, the use of Lactobacillus brevis among lactic acid bacteria is MSG by glutamate decarboxylase possessed by lactic acid bacteria. (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid (L-glutamic acid) is preferable in terms of excellent ability to convert to GABA (GABA).
또한, 유산균의 접종양은 배지의 2 내지 10%로 하는 것이 바람직하다. 만일 유산균의 접종양이 배지의 2% 미만일 경우에는 가바(GABA)의 생산을 위한 배양 시간이 길어지며, 10%를 초과할 경우에는 종균의 생산에 부담이 되기 때문에 바람직하지 않다. 이때, 배지의 pH를 4.2~5.5로 조정한다.In addition, the inoculation of lactic acid bacteria is preferably 2 to 10% of the medium. If the inoculation of lactic acid bacteria is less than 2% of the medium, the culture time for the production of GABA is long, and if it exceeds 10%, it is not preferable because it becomes a burden on the production of the spawn. At this time, the pH of the medium is adjusted to 4.2-5.5.
본 발명에 있어서, 상기와 같이 유산균 접종을 한 다음, 배지를 골고루 혼합한 후 배양하여 발효시킬 수 있는데, 이때, 배양은 30 내지 40℃에서 44 내지 72시간 동안 수행되는 것이 바람직하다. 만일, 배양 온도가 30℃ 미만일 경우에는 발효가 쉽게 일어나지 않으며, 40℃를 초과할 경우에는 열에 약한 유산균이 사멸하여 가바(GABA)를 생산할 수 없기 때문에 바람직하지 않다. In the present invention, after inoculation of lactic acid bacteria as described above, the medium may be evenly mixed and then cultured and fermented. In this case, the culture is preferably performed at 30 to 40° C. for 44 to 72 hours. If the culture temperature is less than 30 ℃, fermentation does not occur easily, and when it exceeds 40 ℃, it is not preferable because the heat-sensitive lactic acid bacteria die and GABA cannot be produced.
상기와 같이 배지에 유산균을 접종하여 배양하여 발효시키는 단계를 통하여 유산균이 보유하고 있는 글루타메이트 디카르복실라아제(Glutamate decarboxylase)에 의해 MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)이 가바(GABA)로 전환되어 고농도의 가바(GABA) 함유 유산균 배양액)를 제조할 수 있다.MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid (L-glutamic acid) by glutamate decarboxylase possessed by the lactic acid bacteria through the step of inoculating the culture medium with lactic acid bacteria as described above and fermenting it It can be converted to GABA to prepare a high-concentration GABA-containing lactic acid bacteria culture solution).
또한, 본 발명은 다른 관점에서, 상기 제조방법에 따라 수득된 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액에 관한 것이다.In addition, the present invention relates to a high concentration GABA-containing lactic acid bacteria culture solution obtained according to the above production method from another viewpoint.
본 발명에 있어서, 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액은 건물 기준으로 가바(GABA) 함유량이 40 내지 90%인 것일 수 있다.In the present invention, the high-concentration GABA-containing lactic acid bacteria culture medium may have a GABA content of 40 to 90% based on dry matter.
전술된 바와 같이 수득된 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액은 쌀눈 효소분해물이 배지에 주발효원으로 포함되어 다양한 영양성분을 함유하고 있어 영양학적으로 매우 우수하다. 또한, 유산균이 보유하고 있는 글루타메이트 디카르복실라아제(Glutamate decarboxylase)에 의해 MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)이 가바(GABA)로 전환되어 고농도의 함유 유산균 배양액을 제조할 수 있으며, 기존에 개발된 가바(GABA) 함유 제품 대비 가바(GABA) 함량이 월등하게 높다. 뿐만 아니라 최종적으로 적용되는 제품에 따라 용해성 및 비용해성 소재로 모두 이용될 수 있으며, 액상 및 분말 소재로 모두 적용이 가능하다.The high-concentration GABA-containing lactic acid bacteria culture medium obtained as described above is nutritionally very excellent because it contains various nutrients as the rice bran enzyme lysate is included as the main fermentation source in the medium. In addition, MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid are converted to GABA by glutamate decarboxylase possessed by lactic acid bacteria to prepare a high concentration of lactic acid bacteria culture solution It has a significantly higher GABA content than previously developed products containing GABA. In addition, it can be used as both a soluble and insoluble material depending on the product to be finally applied, and can be applied as both a liquid and a powder material.
또한, 본 발명은 다른 관점에서, 상기 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액으로부터 불용성 성분을 제거하는 단계; (b) 불용성 성분이 제거된 배양액에 부형제를 혼합하는 단계; 및 (c) 부형제가 혼합된 배양액을 건조하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 고농도 가바(GABA) 분말의 제조방법에 관한 것이다.In addition, the present invention, in another aspect, removing the insoluble component from the high concentration GABA (GABA)-containing lactic acid bacteria culture; (b) mixing an excipient in the culture solution from which insoluble components are removed; And (c) relates to a method for producing a high concentration GABA (GABA) powder, characterized in that it comprises the step of drying the culture solution mixed with excipients.
본 발명에 있어서, 상기 불용성 성분을 제거하는 단계는 규조토를 첨가한 다음 여과시키는 것이 여과시간을 단축시킨다는 측면에서 바람직하다. In the present invention, the step of removing the insoluble component is preferable in terms of shortening the filtration time by adding diatomaceous earth and then filtering.
불용성 성분이 존재할 경우, 불순물로 인한 품질 저하 때문에 고농도 가바(GABA) 분말의 제조 단계에서 불용성 성분이 존재하지 않도록 하는 것이 중요하다.When an insoluble component is present, it is important to prevent the insoluble component from being present in the manufacturing step of the high-concentration GABA powder due to deterioration of quality due to impurities.
상기와 같이 불용성 성분을 제거시킴으로써 불용성 성분과 함께 유산균이 함께 제거되어 순도 높은 rice GABA 제조가 가능하고, 유산균이 제거됨으로써 유통기한이 늘어나게 된다.By removing the insoluble component as described above, the lactic acid bacteria are removed together with the insoluble component, making it possible to manufacture high-purity rice GABA, and the shelf life is extended by removing the lactic acid bacteria.
상기 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액으로부터 불용성 성분을 제거하기 위하여 유산균 배양액 100 중량부에 대하여 규조토 5 내지 10 중량부를 첨가하고, 여과를 한 후 맑은 액체만 취하여 불용성 성분이 제거된 배양액을 수득하는 것이 바람직하다. 만일, 유산균 배양액 100 중량부에 대하여 규조토를 5 미만으로 첨가할 경우에는 불용성 성분 제거가 잘 되지 않을 뿐만 아니라 필터 시간도 증가되고, 10 중량부를 초과할 경우에는 10 중량부 이하일 때와 차이가 없기 때문에 바람직하지 않다.5 to 10 parts by weight of diatomaceous earth is added to 100 parts by weight of the lactic acid bacteria culture solution in order to remove insoluble components from the high concentration GABA-containing lactic acid bacteria culture medium, and after filtration, only the clear liquid is taken to obtain a culture solution from which insoluble components are removed desirable. If less than 5 parts by weight of diatomaceous earth is added to 100 parts by weight of the lactic acid bacteria culture medium, insoluble components are not easily removed and the filter time is increased. Not desirable.
본 발명에 있어서, 상기 부형제는 말토텍스트린, 가용성전분, 변성전분 및 분말유지로 구성된 군으로부터 선택되는 1종 이상인 것이 바람직하다.In the present invention, the excipient is preferably at least one selected from the group consisting of maltodextrin, soluble starch, modified starch, and powdered oil.
본 발명에 있어서, 상기 건조는 동결건조, 분무건조, 감압건조 및 열풍건조로 구성된 군으로부터 선택되는 방법으로부터 수행되는 것일 수 있다.In the present invention, the drying may be performed by a method selected from the group consisting of freeze drying, spray drying, reduced pressure drying and hot air drying.
전술된 바와 같이 수득된 고농도 가바(GABA) 분말은 쌀눈 효소분해물이 배지에 주발효원으로 포함되어 다양한 영양성분을 함유하고 있어 영양학적으로 매우 우수하다. 또한, 유산균이 보유하고 있는 글루타메이트 디카르복실라아제(Glutamate decarboxylase)에 의해 MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)이 가바(GABA)로 전환되어 고농도의 함유 유산균 배양액을 제조할 수 있으며, 기존에 개발된 가바(GABA) 함유 제품 대비 가바(GABA) 함량이 월등하게 높다. 뿐만 아니라 최종적으로 적용되는 제품에 따라 용해성 및 비용해성 소재로 모두 이용될 수 있으며, 액상 및 분말 소재 모두 사용할 수 있다. The high-concentration GABA powder obtained as described above is nutritionally excellent because it contains various nutrients as the rice bran enzyme lysate is included as the main fermentation source in the medium. In addition, MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid are converted to GABA by glutamate decarboxylase possessed by lactic acid bacteria to prepare a high concentration of lactic acid bacteria culture solution It has a significantly higher GABA content than previously developed products containing GABA. In addition, it can be used as both a soluble and insoluble material depending on the final applied product, and both liquid and powder materials can be used.
본 발명은 다른 관점에서,(a) 불용성 성분이 제거된 쌀눈 효소분해물을 포함하는 배지를 제조하는 단계; (b) 상기 배지에 MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)을 첨가하는 단계; 및 (c) 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis) 균주를 접종하고, 배양하여 발효시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액의 제조방법에 관한 것이다.In another aspect, the present invention comprises the steps of: (a) preparing a medium comprising an enzyme decomposition product of rice germ from which insoluble components are removed; (b) adding MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid to the medium; And (c) Lactobacillus brevis ( Lactobacillus brevis ) It relates to a method for producing a high concentration GABA (GABA)-containing lactic acid bacteria culture solution comprising the step of inoculating, culturing and fermenting the strain.
본 발명에 따른 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액의 제조방법은 (a) 불용성 성분이 제거된 쌀눈 효소분해물을 포함하는 배지를 제조하는 단계; (b) 상기 배지에 MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)을 첨가하는 단계; 및 (c) 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis) 균주를 접종하고, 배양하여 발효시키는 단계를 포함한다.The method for producing a high-concentration GABA-containing lactic acid bacteria culture solution according to the present invention comprises the steps of (a) preparing a medium containing an enzyme decomposition product of rice bran from which insoluble components have been removed; (b) adding MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid to the medium; And (c) Lactobacillus brevis ( Lactobacillus brevis ) Inoculating the strain, and culturing and fermenting.
본 발명에 있어서, 상기 쌀눈은 가바(GABA)를 생산하는 배지의 원료로서 많은 장점을 가지고 있다. 특히, 쌀눈은 디카르복실라아제(Glutamate decarboxylase)의 조효소로 쓰이는 피리독실인산이 포함되어 있다. 하지만, 쌀눈 열수 추출물 만으로는 쌀눈의 영양성분을 다 추출하지 못하므로, 본 발명에서는 쌀눈 효소분해물을 이용하여 가바(GABA)를 생산하는 배지를 제조하고자 하였다.In the present invention, the rice germ has many advantages as a raw material for a medium for producing GABA. In particular, rice germ contains pyridoxyl phosphate, which is used as a coenzyme of glutamate decarboxylase. However, since it is not possible to extract all the nutrients of the rice germ only with the hot water extract of the rice germ, in the present invention, a medium for producing GABA was prepared by using the enzyme decomposition product of the rice germ.
본 발명에 있어서, 상기 쌀눈 효소분해물은 쌀눈을 세척하는 단계; 세척된 쌀눈에 물을 2 내지 20배로 첨가하여 침지시키는 단계; 침지된 쌀눈을 AMG 300L 효소처리한 후, 55 내지 70℃에서 100 내지 150분 동안 교반하여 쌀눈을 분해시키는 단계; 및 분해된 쌀눈의 불용성 성분을 제거하고 남은 효소분해물을 수득하는 단계를 포함하는 방법으로 제조된 것이 바람직하다.In the present invention, the enzymatic decomposition product of rice germ washing the rice germ; immersing the washed rice germ by adding water 2 to 20 times; AMG 300L enzyme treatment on the immersed rice germ, followed by stirring at 55 to 70 ℃ for 100 to 150 minutes to decompose the rice germ; and removing the insoluble component of the decomposed rice germ and obtaining the remaining enzyme decomposition product.
본 발명에 있어서, 상기 쌀눈 효소분해물을 사용 시, 불용성 성분을 제거하고 사용하는 것일 수 있다. 상기 불용성 성분이 제거된 쌀눈 효소분해물은 쌀눈 효소분해물에 규조토를 첨가한 다음 여과시키는 것이 여과시간을 단축시킨다는 측면에서 바람직하다. In the present invention, when using the rice bran enzyme lysate, it may be used after removing the insoluble component. It is preferable in terms of shortening the filtration time to filter the enzymatic digest of rice bran from which the insoluble component has been removed by adding diatomaceous earth to the enzymatic digest of rice bran.
불용성 성분이 존재할 경우, 불순물로 인한 품질 저하 때문에 고농도 가바(GABA) 분말의 제조 단계에서 불용성 성분이 존재하지 않도록 하는 것이 중요하다.When an insoluble component is present, it is important to prevent the insoluble component from being present in the manufacturing step of the high-concentration GABA powder due to deterioration of quality due to impurities.
상기와 같이 불용성성분을 먼저 제거한 쌀눈 효소분해물을 사용할 경우 발효 후 필터링을 거치지 않아 유산균을 포함하여 인간의 면역기능 증진에 도움이된다.As described above, when using the rice bran enzyme lysate from which insoluble components have been removed first, it does not go through filtering after fermentation, which helps to enhance human immune function, including lactic acid bacteria.
상기 쌀눈 효소분해물을 불용성 성분을 제거하기 위하여 쌀눈 효소분해물 100 중량부에 대하여 규조토 5 내지 10 중량부를 첨가하고, 여과를 한 후 맑은 액체만 취하여 불용성 성분을 제거하는 것이 바람직하다. 만일, 쌀눈 효소분해물 100 중량부에 대하여 규조토를 5 미만으로 첨가할 경우에는 불용성 성분 제거가 잘 되지 않을 뿐만 아니라 필터 시간도 증가되고, 10 중량부를 초과할 경우에는 10 중량부 이하일 때와 차이가 없기 때문에 바람직하지 않다.It is preferable to add 5 to 10 parts by weight of diatomaceous earth based on 100 parts by weight of the enzyme digest of rice bran to remove insoluble components from the rice bran enzyme decomposition product, and to remove the insoluble component by taking only a clear liquid after filtering. If less than 5 diatomaceous earth is added to 100 parts by weight of the rice bran enzyme decomposition product, insoluble components are not easily removed and the filter time is increased. It is not preferable because
상기 쌀눈 효소분해물은 보다 용이하게 영양분을 용출하기 위하여 쌀눈을 최적의 양으로 가수 후, 효소처리를 하는 것을 특징으로 한다.The rice bran enzyme decomposition product is characterized in that the rice germ is hydrolyzed in an optimal amount in order to more easily elute nutrients, and then subjected to enzyme treatment.
이때, 상기 쌀눈을 침지시키기 위하여 사용하는 물의 양은 쌀눈 대비 물의 양이 2 내지 20배가 되도록 첨가하여 침지시키는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 5 내지 15배이다. 만일, 쌀눈 대비 물의 양이 5배 미만일 경우에는 추출효율이 떨어지는 단점이 있고, 쌀눈 대비 물의 양이 20배를 초과할 경우에는 추출 후 유효성분의 농도가 낮아 발효원으로 사용될 경우 가바(GABA) 전환율이 낮은 문제점이 발생할 수 있기 때문에 바람직하지 않다.At this time, the amount of water used to immerse the rice germ is preferably added so that the amount of water compared to the rice germ is 2 to 20 times, and more preferably 5 to 15 times. If the amount of water compared to rice germ is less than 5 times, there is a disadvantage in that the extraction efficiency is lowered. This is undesirable because it can cause low problems.
또한, 침지된 쌀눈을 효소처리한 다음, 55 내지 70℃에서 100 내지 150분 동안 교반하여 쌀눈을 분해시키는 것이 바람직하고, 60℃에서 2시간 동안 수행하는 것이 가장 바람직하다. 만일, 온도가 55℃ 미만일 경우에는 온도가 낮아 시간이 오래 소요되고, 온도가 70℃를 초과할 경우에는 효소의 열 변성으로 분해가 되지 않는 경우가 생기 때문에 바람직하지 않다. In addition, after enzymatic treatment of the soaked rice germ, it is preferable to decompose the rice germ by stirring at 55 to 70 ℃ for 100 to 150 minutes, and it is most preferably carried out at 60 ℃ for 2 hours. If the temperature is less than 55 ℃, the temperature is low and it takes a long time, and when the temperature exceeds 70 ℃, it is not preferable because there is a case where decomposition is not possible due to thermal denaturation of the enzyme.
본 발명에 있어서, 상기 배지는 (ⅰ) 글루코오스, 수크로오스, 말토오스, 프럭토오스, 락토오스, 자일로오스, 갈락토오스, 아라비노오스 및 그의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 탄소원; (ⅱ) 효모 추출물, 소이톤(Soytone), 펩톤, 비프추출물(Beef extract), 트립톤, 카시톤 및 그의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 질소원; 및 (ⅲ) 마그네슘 설페이트, 소듐아세테이트, 망가네이즈 설페이트, 페릭 설페이트, 칼슘 클로라이드, 폴리솔베이트 및 그의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 미량성분을 추가적으로 포함하는 것일 수 있다.In the present invention, the medium includes (i) a carbon source selected from the group consisting of glucose, sucrose, maltose, fructose, lactose, xylose, galactose, arabinose, and combinations thereof; (ii) a nitrogen source selected from the group consisting of yeast extract, soytone, peptone, beef extract, tryptone, casitone, and combinations thereof; and (iii) a trace component selected from the group consisting of magnesium sulfate, sodium acetate, manganese sulfate, ferric sulfate, calcium chloride, polysorbate, and combinations thereof.
본 발명에 있어서, 상기 배지 총 중량에 대하여 탄소원은 0.5 내지 3중량%, 질소원은 0.5 내지 3중량% 및 무기성분은 0.5 내지 3중량%를 포함하는 것이 바람직하다.In the present invention, it is preferable to include 0.5 to 3% by weight of the carbon source, 0.5 to 3% by weight of the nitrogen source, and 0.5 to 3% by weight of the inorganic component with respect to the total weight of the medium.
상기 탄소원은 배지 총 중량에 대하여 0.5 내지 3중량% 포함하는 것이 바람직하다. 만일, 탄소원의 함량이 0.5중량% 미만일 경우에는 유산균의 생장에 필요한 탄소원이 부족하여 자라지 않고, 3중량%를 초과할 경우에는 유기산 생산이 많아져서 품질 저하를 야기 시키기 때문에 바람직하지 않다.The carbon source is preferably included in an amount of 0.5 to 3% by weight based on the total weight of the medium. If the content of the carbon source is less than 0.5% by weight, it does not grow due to insufficient carbon source necessary for the growth of lactic acid bacteria.
또한, 상기 질소원은 배지 총 중량에 대하여 0.5 내지 3중량% 포함하는 것이 바람직하다. 만일, 질소원의 함량이 0.5중량% 미만일 경우에는 질소원 부족으로 글루타메이트를 질소원으로 사용하여 GABA 농도가 줄어들고, 3중량%를 초과할 경우에는 남아있는 질소원과 탄소원의 마일라드 반응으로 분무건조가 잘 안 될수 있기 때문에 바람직하지 않다.In addition, the nitrogen source is preferably included in an amount of 0.5 to 3% by weight based on the total weight of the medium. If the content of the nitrogen source is less than 0.5% by weight, the GABA concentration is reduced by using glutamate as a nitrogen source due to the lack of a nitrogen source. It is not preferable because there is
또한, 상기 무기성분은 배지 총 중량에 대하여 0.5 내지 3중량% 포함하는 것이 바람직하다. 만일, 무기성분의 함량이 0.5중량% 미만일 경우에는 유산균 생육에 문제가 생기고, 3중량%를 초과할 경우에는 소모되지 않고 남아서 최종제품 품질의 저하를 야기시키기 때문에 바람직하지 않다.In addition, the inorganic component preferably contains 0.5 to 3% by weight based on the total weight of the medium. If the content of the inorganic component is less than 0.5% by weight, there is a problem in the growth of lactic acid bacteria, and when it exceeds 3% by weight, it is not consumed because it remains unconsumed and causes a decrease in the quality of the final product.
본 발명에 있어서, 상기 MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)은 배지 총 중량에 대하여 1 내지 40중량%를 포함하는 것이 바람직하고, 1 내지 40중량%를 포함하는 것이 가장 바람직하다. 만일, MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)의 함량이 배지 총 중량에 대하여 1중량% 미만일 경우에는 GABA가 거의 생성이 되지 않고, 40중량%를 초과할 경우에는 발효시간이 길어져서 효율이 떨어지기 때문에 바람직하지 않다.In the present invention, the MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid (L-glutamic acid) is preferably included in an amount of 1 to 40% by weight based on the total weight of the medium, and it is most preferable to include 1 to 40% by weight. desirable. If the content of MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid is less than 1% by weight based on the total weight of the medium, GABA is hardly produced, and when it exceeds 40% by weight, fermentation time This is not preferable because it becomes longer and the efficiency decreases.
상기 배지에 MSG(Mono Sodium Glutamate)를 첨가하면 고농도의 가바(GABA)가 생산되고, 글루타메이트 디카르복실라아제(Glutamate decarboxylase) 효소의 최대활성도 pH를 유지하기 위하여 L-글루탐산(L-glutamic acid) 염을 첨가하여 가바(GABA) 전환 시, L-글루탐산(L-glutamic acid) 염이 녹아 일정 pH를 유지하여 가바(GABA)의 생산속도 및 생산율이 증가한다. When MSG (Mono Sodium Glutamate) is added to the medium, a high concentration of GABA is produced, and in order to maintain the pH of the maximum activity of the glutamate decarboxylase enzyme, L-glutamic acid (L-glutamic acid) When GABA is converted by adding salt, the L-glutamic acid salt is dissolved to maintain a constant pH, thereby increasing the production rate and production rate of GABA.
본 발명에 있어서, 상기 쌀눈 효소분해물을 포함하는 배지에 MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)을 첨가하여 수득된 배지는 멸균 처리를 하는 것이 바람직하다. 상기 멸균 처리는 온도가 너무 낮거나 시간이 짧으면 멸균 효과가 감소하고, 온도가 너무 높거나 멸균 시간이 길면 영양소의 파괴가 심해지기 때문에 121℃에서 15분간 수행하는 것이 가장 바람직하다.In the present invention, it is preferable to sterilize the medium obtained by adding MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid to the medium containing the rice bran enzyme lysate. The sterilization treatment is most preferably performed at 121° C. for 15 minutes because the sterilization effect is reduced when the temperature is too low or the time is short, and the destruction of nutrients is severe when the temperature is too high or the sterilization time is long.
상기와 같이 멸균 처리가 완료된 배지에 유산균을 접종하게 되는데, 본 발명에서는 유산균 중 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis) 균주를 사용하는 것이 유산균이 보유하고 있는 글루타메이트 디카르복실라아제(Glutamate decarboxylase)에 의해 MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)을 가바(GABA)로 전환시키는 능력이 매우 탁월하다는 측면에서 바람직하다. As described above, lactic acid bacteria are inoculated into the sterilized medium, and in the present invention, the use of Lactobacillus brevis among lactic acid bacteria is MSG by glutamate decarboxylase possessed by lactic acid bacteria. (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid (L-glutamic acid) is preferable in terms of excellent ability to convert to GABA (GABA).
또한, 유산균의 접종양은 배지의 2 내지 10%로 하는 것이 바람직하다. 만일 유산균의 접종양이 배지의 2% 미만일 경우에는 가바(GABA)의 생산을 위한 배양 시간이 길어지며, 10%를 초과할 경우에는 종균의 생산에 부담이 되기 때문에 바람직하지 않다. 이때, 배지의 pH를 4.2~5.5로 조정한다.In addition, the inoculation of lactic acid bacteria is preferably 2 to 10% of the medium. If the inoculation of lactic acid bacteria is less than 2% of the medium, the culture time for the production of GABA is long, and if it exceeds 10%, it is not preferable because it becomes a burden on the production of the spawn. At this time, the pH of the medium is adjusted to 4.2-5.5.
본 발명에 있어서, 상기와 같이 유산균 접종을 한 다음, 배지를 골고루 혼합한 후 배양하여 발효시킬 수 있는데, 이때, 배양은 30 내지 40℃에서 44 내지 72시간 동안 수행되는 것이 바람직하다. 만일, 배양 온도가 30℃ 미만일 경우에는 발효가 쉽게 일어나지 않으며, 40℃를 초과할 경우에는 열에 약한 유산균이 사멸하여 가바(GABA)를 생산할 수 없기 때문에 바람직하지 않다. In the present invention, after inoculation of lactic acid bacteria as described above, the medium may be evenly mixed and then cultured and fermented. In this case, the culture is preferably performed at 30 to 40° C. for 44 to 72 hours. If the culture temperature is less than 30 ℃, fermentation does not occur easily, and when it exceeds 40 ℃, it is not preferable because the heat-sensitive lactic acid bacteria die and GABA cannot be produced.
상기와 같이 배지에 유산균을 접종하여 배양하여 발효시키는 단계를 통하여 유산균이 보유하고 있는 글루타메이트 디카르복실라아제(Glutamate decarboxylase)에 의해 MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)이 가바(GABA)로 전환되어 고농도의 가바(GABA) 함유 유산균 배양액)를 제조할 수 있다.MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid (L-glutamic acid) by glutamate decarboxylase possessed by the lactic acid bacteria through the step of inoculating the culture medium with lactic acid bacteria as described above and fermenting it It can be converted to GABA to prepare a high-concentration GABA-containing lactic acid bacteria culture solution).
또한, 본 발명은 다른 관점에서, 상기 제조방법에 따라 수득된 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액에 관한 것이다.In addition, the present invention relates to a high concentration GABA-containing lactic acid bacteria culture solution obtained according to the above production method from another viewpoint.
본 발명에 있어서, 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액은 건물 기준으로 가바(GABA) 함유량이 40 내지 90%인 것일 수 있다.In the present invention, the high-concentration GABA-containing lactic acid bacteria culture medium may have a GABA content of 40 to 90% based on dry matter.
전술된 바와 같이 수득된 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액은 쌀눈 효소분해물이 배지에 주발효원으로 포함되어 다양한 영양성분을 함유하고 있어 영양학적으로 매우 우수하다. 또한, 유산균이 보유하고 있는 글루타메이트 디카르복실라아제(Glutamate decarboxylase)에 의해 MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)이 가바(GABA)로 전환되어 고농도의 함유 유산균 배양액을 제조할 수 있으며, 기존에 개발된 가바(GABA) 함유 제품 대비 가바(GABA) 함량이 월등하게 높다. 뿐만 아니라 최종적으로 적용되는 제품에 따라 용해성 및 비용해성 소재로 모두 이용될 수 있으며, 액상 및 분말 소재로 모두 적용이 가능하다.The high-concentration GABA-containing lactic acid bacteria culture medium obtained as described above is nutritionally very excellent because it contains various nutrients as the rice bran enzyme lysate is included as the main fermentation source in the medium. In addition, MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid are converted to GABA by glutamate decarboxylase possessed by lactic acid bacteria to prepare a high concentration of lactic acid bacteria culture solution It has a significantly higher GABA content than previously developed products containing GABA. In addition, it can be used as both a soluble and insoluble material depending on the product to be finally applied, and can be applied as both a liquid and a powder material.
또한, 본 발명은 다른 관점에서, 상기 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액에 부형제를 혼합하는 단계; 및 (b) 부형제가 혼합된 배양액을 건조하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 고농도 가바(GABA) 분말의 제조방법에 관한 것이다.In addition, the present invention, in another aspect, the step of mixing the excipient in the high concentration GABA (GABA)-containing lactic acid bacteria culture; And (b) relates to a method for producing a high concentration GABA (GABA) powder, characterized in that it comprises the step of drying the culture solution mixed with the excipients.
본 발명에 있어서, 상기 부형제는 말토텍스트린, 가용성전분, 변성전분 및 분말유지로 구성된 군으로부터 선택되는 1종 이상인 것이 바람직하다.In the present invention, the excipient is preferably at least one selected from the group consisting of maltodextrin, soluble starch, modified starch, and powdered oil.
본 발명에 있어서, 상기 건조는 동결건조, 분무건조, 감압건조 및 열풍건조로 구성된 군으로부터 선택되는 방법으로부터 수행되는 것일 수 있다.In the present invention, the drying may be performed by a method selected from the group consisting of freeze drying, spray drying, reduced pressure drying and hot air drying.
본 발명에 있어서, 상기 고농도 가바(GABA) 분말은 유산균 배양체를 포함하고, 유산균 배양체 수는 1X104~1X108cfu/g인 것일 수 있다.In the present invention, the high concentration GABA (GABA) powder includes a lactic acid bacteria culture, the number of lactic acid bacteria culture may be 1X10 4 ~ 1X10 8 cfu / g.
전술된 바와 같이 수득된 고농도 가바(GABA) 분말은 쌀눈 효소분해물이 배지에 주발효원으로 포함되어 다양한 영양성분을 함유하고 있어 영양학적으로 매우 우수하다. 또한, 유산균이 보유하고 있는 글루타메이트 디카르복실라아제(Glutamate decarboxylase)에 의해 MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)이 가바(GABA)로 전환되어 고농도의 함유 유산균 배양액을 제조할 수 있으며, 기존에 개발된 가바(GABA) 함유 제품 대비 가바(GABA) 함량이 월등하게 높다. 뿐만 아니라 최종적으로 적용되는 제품에 따라 용해성 및 비용해성 소재로 모두 이용될 수 있으며, 액상 및 분말 소재 모두 사용할 수 있다. The high-concentration GABA powder obtained as described above is nutritionally excellent because it contains various nutrients as the rice bran enzyme lysate is included as the main fermentation source in the medium. In addition, MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid are converted to GABA by glutamate decarboxylase possessed by lactic acid bacteria to prepare a high concentration of lactic acid bacteria culture solution It has a significantly higher GABA content than previously developed products containing GABA. In addition, it can be used as both a soluble and insoluble material depending on the final applied product, and both liquid and powder materials can be used.
이하 본 발명을 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail through examples. However, these examples are for illustrative purposes only, and the scope of the present invention is not limited to these examples.
[실시예][Example]
이하, 실시 예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시 예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시 예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다. Hereinafter, the present invention will be described in more detail through examples. These examples are only for illustrating the present invention, and it will be apparent to those of ordinary skill in the art that the scope of the present invention is not to be construed as being limited by these examples.
실시예 1: 쌀눈 효소분해물을 포함하는 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액 제조Example 1: Preparation of high-concentration GABA-containing lactic acid bacteria containing rice bran enzyme lysate
쌀눈 1kg을 세척한 다음, 10L의 물에 침지하고 쌀눈의 1%인 AMG 300L 효소를 첨가한 후, 60℃에서 2시간 동안 교반하면서 쌀눈을 분해하였다. 분해시킨 쌀눈을 필터를 통하여 쌀눈을 제거하고 남은 가수분해물 100ml을 삼각플라스크에 담은 후 포도당 1%, 효모추출물 1%, MSG 5% 및 L-glutamic acid 30%를 첨가한 다음, 물 36ml을 첨가한 후 121℃에서 15분 동안 멸균하였다. 멸균이 끝난 배지에 24시간 배양한 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis) BJ-20(KCTC11377BP) 균주 배양액 8ml을 접종한 후 72시간 동안 37℃에서 배양하여 최종 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액을 제조하였다.After washing 1 kg of rice germs, immersed in 10L of water, and after adding AMG 300L enzyme which is 1% of rice germs, the germs were decomposed while stirring at 60° C. for 2 hours. After removing the rice germ from the decomposed rice germ through a filter, 100 ml of the remaining hydrolyzate was put in an Erlenmeyer flask, and then glucose 1%, yeast extract 1%, MSG 5% and L-glutamic acid 30% were added, and then 36 ml of water was added. After that, it was sterilized at 121°C for 15 minutes. 8ml of Lactobacillus brevis BJ-20 (KCTC11377BP) strain culture solution cultured for 24 hours in the sterilized medium was inoculated, and then cultured at 37° C. for 72 hours to prepare a final high-concentration GABA-containing lactic acid bacteria culture solution.
비교예 1 : 쌀눈 효소분해물을 포함하지 않는 유산균 배양액 제조Comparative Example 1: Preparation of lactic acid bacteria culture solution not containing rice bran enzyme lysate
포도당 1%, 효모추출물 1%, MSG 5% 및 L-glutamic acid 30%를 첨가한 다음, 물 36ml을 첨가한 후 121℃에서 15분 동안 멸균하였다. 멸균이 끝난 배지에 24시간 배양한 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis) BJ-20(KCTC11377BP) 균주 배양액 8ml을 접종한 후 72시간 동안 37℃에서 배양하여 가바(GABA) 함유 유산균 배양액을 제조하였다.After adding glucose 1%, yeast extract 1%, MSG 5% and L-glutamic acid 30%, 36 ml of water was added and sterilized at 121° C. for 15 minutes. Lactobacillus brevis ( Lactobacillus brevis ) BJ-20 (KCTC11377BP) strain culture solution cultured for 24 hours in the sterilized medium was inoculated with 8ml, and then cultured at 37° C. for 72 hours to prepare a GABA-containing lactic acid bacteria culture solution.
실험예 1: 가바(GABA) 함량분석Experimental Example 1: GABA content analysis
본 실험예에서 가바(GABA)의 정량적 분석은 다음과 같이 HPLC를 이용하여 측정하였다. 시료를 적당한 농도로 0.02N 염산용액에 희석하였다. OPA 용액은 냉장보관된 OPA(O-Phthaldialdehyde, Sigma79760) powder 50mg에 1mL MeOH를 넣어 제조하였고, OPA 용액 200μL에 Borate 800μL 및 MPA(Mercaptopropionic acid, Sigma 63768) 20μL를 혼합하여 제조하였다.Quantitative analysis of GABA in this experimental example was measured using HPLC as follows. The sample was diluted in 0.02N hydrochloric acid solution to an appropriate concentration. OPA solution was prepared by putting 1mL MeOH in 50mg of OPA (O-Phthaldialdehyde, Sigma79760) powder stored in refrigeration, and 800μL of borate and 20μL of MPA (Mercaptopropionic acid, Sigma 63768) were mixed in 200μL of OPA solution.
HPLC 컬럼으로는 SUPERSIL 컬럼(4.6mm 250mm)을 사용하였으며, 이동상으로는 메탄올, 아세토니트릴 및 3차증류수가 각각 40:40:10(v/v)으로 혼합된 것을 용매 A로, 50mM 아세트산나트륨 용액 (ph 6.5)를 용매 B로 사용하였다. 이동상의 농도 구배는 용매 B를 90% 용매 A를 10%로 시작하여 12분 경과 후에는 용매 B가 60%, 용매 A가 40%, 13분 경과 후에는 용매 B가 10% 용매 A가 90%로 17분까지 유지되다가 17분부터 23분까지 용매 B 90% 용매 A 10%로 조절하였다. 이동상의 유속은 1mL/min으로 고정하였고, 338nm의 UV 검출기로 가바(GABA)를 검출하였다. 이런 조건에서 가바(GABA)와 글루타메이트의 보유 시간은 12.2 및 5.3분이었다.A SUPERSIL column (4.6 mm, 250 mm) was used as the HPLC column, and as a mobile phase, a mixture of methanol, acetonitrile and tertiary distilled water in 40:40:10 (v/v), respectively, was used as solvent A, and 50 mM sodium acetate solution ( pH 6.5) was used as solvent B. The concentration gradient of the mobile phase starts with 90% solvent B and 10% solvent A. After 12 minutes, solvent B is 60%, solvent A is 40%, and after 13 minutes, solvent B is 10%, solvent A is 90%. was maintained for 17 minutes, and then adjusted to 90% solvent B and 10% solvent A from 17 minutes to 23 minutes. The flow rate of the mobile phase was fixed at 1 mL/min, and GABA was detected with a 338 nm UV detector. The retention times of GABA and glutamate under these conditions were 12.2 and 5.3 minutes.
본 실험 예에서 실시예 1 및 비교예 1을 브릭스 미터와 밀도계를 이용하여 용질량을 구하고 가바(GABA) 농도는 HPLC를 이용하여 분석 후 계산을 통해 가바(GABA) 농도가 25%가 나오도록 말토덱스트린을 첨가한 다음 분무건조를 하여 가바(GABA) 분말을 제조하였다. In this experimental example, Example 1 and Comparative Example 1 were obtained using a Brix meter and a density meter to obtain the solute, and the GABA concentration was analyzed using HPLC so that the GABA concentration was 25%. After adding maltodextrin, spray drying was performed to prepare GABA powder.
각각 동일한 조건으로 날짜를 다르게 하여 배양한 샘플을 위의 방법으로 분무건조 후 나온 샘플 3개를 HPLC를 이용하여 분석하고, 그 결과를 표 1에 나타내었다. Samples cultured under the same conditions at different dates were analyzed using HPLC, and three samples obtained after spray-drying according to the above method were analyzed, and the results are shown in Table 1.
상기 표 1과 2에서 확인할 수 있듯이, 비교예 1 대비 실시예 1에서 쌀눈 효소분해물에 의하여 GABA 생성량이 현저하게 증가한 것을 확인하였다.As can be seen in Tables 1 and 2, it was confirmed that the amount of GABA production was significantly increased by the enzyme decomposition product of rice bran in Example 1 compared to Comparative Example 1.
이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시 양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.As a specific part of the present invention has been described in detail above, for those of ordinary skill in the art, it is clear that this specific description is only a preferred embodiment, and the scope of the present invention is not limited thereby. will be. Accordingly, it is intended that the substantial scope of the present invention be defined by the appended claims and their equivalents.
Claims (25)
(b) 상기 배지에 MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)을 첨가하는 단계; 및
(c) 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis) 균주를 접종하고, 배양하여 발효시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액의 제조방법.
(a) preparing a medium containing rice bran enzyme lysate;
(b) adding MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid to the medium; and
(C) Lactobacillus brevis ( Lactobacillus brevis ) Method for producing a high-concentration GABA-containing lactic acid bacteria culture solution comprising the step of inoculating, culturing and fermenting the strain.
The method according to claim 1, wherein the enzymatic decomposition product of the rice bran is washed with the rice germ; immersing the washed rice germ by adding water 2 to 20 times; AMG 300L enzyme treatment on the immersed rice germ, followed by stirring at 55 to 70 ℃ for 100 to 150 minutes to decompose the rice germ; And a method for producing a high-concentration GABA-containing lactic acid bacteria culture solution, characterized in that it is prepared by a method comprising the step of removing the rice germ using a filter and obtaining the remaining enzyme decomposition product.
According to claim 1, wherein the medium is (i) a carbon source selected from the group consisting of glucose, sucrose, maltose, fructose, lactose, xylose, galactose, arabinose, and combinations thereof; (ii) a nitrogen source selected from the group consisting of yeast extract, soytone, peptone, beef extract, tryptone, casitone, and combinations thereof; and (iii) magnesium sulfate, sodium acetate, manganese sulfate, ferric sulfate, calcium chloride, polysorbate, and an inorganic component selected from the group consisting of combinations thereof. manufacturing method.
The high concentration GABA-containing lactic acid bacteria according to claim 3, wherein the carbon source is 0.5 to 3% by weight, the nitrogen source is 0.5 to 3% by weight, and the inorganic component is 0.5 to 3% by weight, based on the total weight of the medium. A method for preparing a culture solution.
According to claim 1, wherein the MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid (L-glutamic acid) is a high concentration GABA (GABA) containing lactic acid bacteria culture medium, characterized in that it comprises 1 to 40% by weight based on the total weight of the medium. manufacturing method.
The method of claim 1, wherein the culturing is performed at 30 to 40° C. for 44 to 72 hours.
[Claim 7] A high-concentration GABA-containing lactic acid bacteria culture solution obtained according to the method of any one of claims 1 to 6.
According to claim 7, wherein the high-concentration GABA (GABA)-containing lactic acid bacteria culture medium has a high concentration of GABA (GABA)-containing lactic acid bacteria culture medium, characterized in that the GABA (GABA) content is 40 to 90% on a dry matter basis.
(b) 불용성 성분이 제거된 배양액에 부형제를 혼합하는 단계; 및
(c) 부형제가 혼합된 배양액을 건조하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 고농도 가바(GABA) 분말의 제조방법.
(a) removing the insoluble component from the high concentration GABA (GABA)-containing lactic acid bacteria culture solution of claim 7;
(b) mixing an excipient in the culture solution from which insoluble components are removed; and
(c) a method for producing a high-concentration GABA powder, characterized in that it comprises the step of drying the culture solution mixed with the excipients.
[10] The method of claim 9, wherein the removing of the insoluble component comprises adding diatomaceous earth and then filtering.
[10] The method of claim 9, wherein the excipient is at least one selected from the group consisting of maltodextrin, soluble starch, modified starch, and powdered oil.
[10] The method of claim 9, wherein the drying is performed by a method selected from the group consisting of freeze drying, spray drying, reduced pressure drying, and hot air drying.
(b) 상기 배지에 MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 L-글루탐산(L-glutamic acid)을 첨가하는 단계; 및
(c) 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis) 균주를 접종하고, 배양하여 발효시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 고농도 가바(GABA) 함유 유산균 배양액의 제조방법.
(a) preparing a medium containing the rice bran enzyme lysate from which insoluble components are removed;
(b) adding MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid to the medium; and
(C) Lactobacillus brevis ( Lactobacillus brevis ) Method for producing a high-concentration GABA-containing lactic acid bacteria culture solution comprising the step of inoculating, culturing and fermenting the strain.
14. The method of claim 13, wherein the enzyme decomposition product of rice germ washing the rice germ; immersing the washed rice germ by adding water 2 to 20 times; AMG 300L enzyme treatment on the immersed rice germ, followed by stirring at 55 to 70 ℃ for 100 to 150 minutes to decompose the rice germ; and removing the insoluble component of the decomposed rice germ and obtaining the remaining enzyme decomposition product.
[Claim 14] The method of claim 13, wherein the enzymatic digest of rice bran from which the insoluble component has been removed is filtered after adding diatomaceous earth to the enzyme digest of rice bran.
14. The method of claim 13, wherein the medium comprises (i) a carbon source selected from the group consisting of glucose, sucrose, maltose, fructose, lactose, xylose, galactose, arabinose, and combinations thereof; (ii) a nitrogen source selected from the group consisting of yeast extract, soytone, peptone, beef extract, tryptone, casitone, and combinations thereof; and (iii) magnesium sulfate, sodium acetate, manganese sulfate, ferric sulfate, calcium chloride, polysorbate, and an inorganic component selected from the group consisting of combinations thereof. manufacturing method.
[Claim 17] The high-concentration GABA-containing lactic acid bacteria according to claim 16, wherein the carbon source is 0.5 to 3% by weight, the nitrogen source is 0.5 to 3% by weight, and the inorganic component is 0.5 to 3% by weight, based on the total weight of the medium. A method for preparing a culture solution.
14. The method of claim 13, wherein the MSG (Mono Sodium Glutamate) and L-glutamic acid (L-glutamic acid) of the high concentration GABA (GABA) containing lactic acid bacteria culture medium, characterized in that it comprises 1 to 40% by weight based on the total weight of the medium. manufacturing method.
The method of claim 13, wherein the culturing is performed at 30 to 40° C. for 44 to 72 hours.
A high concentration GABA-containing lactic acid bacteria culture solution obtained according to the method of any one of claims 13 to 19.
21. The method of claim 20, wherein the high-concentration GABA (GABA)-containing lactic acid bacteria culture medium is a high concentration GABA (GABA) containing lactic acid bacteria culture medium, characterized in that the GABA (GABA) content is 40 to 90% on a dry matter basis.
(b) 부형제가 혼합된 배양액을 건조하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 고농도 가바(GABA) 분말의 제조방법.
(a) mixing the excipient in the high concentration GABA (GABA) containing lactic acid bacteria culture of claim 20; and
(B) A method for producing a high concentration GABA powder, characterized in that it comprises the step of drying the culture solution mixed with excipients.
23. The method of claim 22, wherein the excipient is at least one selected from the group consisting of maltodextrin, soluble starch, modified starch, and powdered oil.
23. The method of claim 22, wherein the drying is performed by a method selected from the group consisting of freeze drying, spray drying, reduced pressure drying and hot air drying.
The method of claim 22, wherein the high-concentration GABA powder comprises a lactic acid bacteria culture, and the number of lactic acid bacteria cultures is 1X10 4 to 1X10 8 cfu/g.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020200168588A KR102599956B1 (en) | 2020-12-04 | 2020-12-04 | culture medium of lactic acid bacteria containing high concentration gaba and Preparing Method Thereof |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020200168588A KR102599956B1 (en) | 2020-12-04 | 2020-12-04 | culture medium of lactic acid bacteria containing high concentration gaba and Preparing Method Thereof |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20220079129A true KR20220079129A (en) | 2022-06-13 |
| KR102599956B1 KR102599956B1 (en) | 2023-11-08 |
Family
ID=81983857
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020200168588A KR102599956B1 (en) | 2020-12-04 | 2020-12-04 | culture medium of lactic acid bacteria containing high concentration gaba and Preparing Method Thereof |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR102599956B1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR102560141B1 (en) * | 2022-12-26 | 2023-07-25 | 김미진 | Manufacturingt method of fermentates containg gaba and fermented food manufactured by the methdo |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20110077882A (en) * | 2009-12-30 | 2011-07-07 | (주)마린바이오프로세스 | The producing process of functional and fermented material containing high-concentration gaba by fermentation with yeast extract |
| KR20140046937A (en) * | 2012-10-11 | 2014-04-21 | (주) 네추럴웨이 | Media containing defatted rice bran and methods for preparing high-concentrated gaba using the same |
| KR20150088588A (en) * | 2014-01-24 | 2015-08-03 | 충북대학교 산학협력단 | Novel Gamma-Amino Butyric Acid Producing Strain of Lactobacillus Brevis CFM11 and Use of the Same |
| KR20190047247A (en) * | 2017-10-27 | 2019-05-08 | 주식회사 설곡 | Method of enhancement for γ-aminobutyricacid in by-product of rice by addition of hydrolyzed protein and multi-environmental stress treatments |
| KR20200062882A (en) * | 2018-11-27 | 2020-06-04 | (주)마린바이오프로세스 | GABA Salts of Granular type Preventing High Blood Pressure and Thrombus and Preparing Method Thereof |
-
2020
- 2020-12-04 KR KR1020200168588A patent/KR102599956B1/en active IP Right Grant
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20110077882A (en) * | 2009-12-30 | 2011-07-07 | (주)마린바이오프로세스 | The producing process of functional and fermented material containing high-concentration gaba by fermentation with yeast extract |
| KR20140046937A (en) * | 2012-10-11 | 2014-04-21 | (주) 네추럴웨이 | Media containing defatted rice bran and methods for preparing high-concentrated gaba using the same |
| KR20150088588A (en) * | 2014-01-24 | 2015-08-03 | 충북대학교 산학협력단 | Novel Gamma-Amino Butyric Acid Producing Strain of Lactobacillus Brevis CFM11 and Use of the Same |
| KR20190047247A (en) * | 2017-10-27 | 2019-05-08 | 주식회사 설곡 | Method of enhancement for γ-aminobutyricacid in by-product of rice by addition of hydrolyzed protein and multi-environmental stress treatments |
| KR20200062882A (en) * | 2018-11-27 | 2020-06-04 | (주)마린바이오프로세스 | GABA Salts of Granular type Preventing High Blood Pressure and Thrombus and Preparing Method Thereof |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR102560141B1 (en) * | 2022-12-26 | 2023-07-25 | 김미진 | Manufacturingt method of fermentates containg gaba and fermented food manufactured by the methdo |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR102599956B1 (en) | 2023-11-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR100683948B1 (en) | MEDIUM COMPRISING GOCHUJANG-FERMENTATION OR SOYBEAN SAUCE AND PRODUCTION METHOD OF gamma;-AMINOBUTYRIC ACID | |
| KR100740867B1 (en) | Media for Culturing Lactic Acid Bacteria Used for Preparing High Concentrated ???? | |
| KR100773125B1 (en) | Manufacturing Method for Meju increased ?-Aminobutyric acid content | |
| KR100825901B1 (en) | The odorless fermented garlic, the production method of it and the nature seasoning using the odorless fermented garlic | |
| CN113564089B (en) | Lactobacillus plantarum LHP710 capable of producing gamma-aminobutyric acid and application thereof | |
| US20090258110A1 (en) | Seed Koji for Brewing, Koji for Brewing, Brewed Foods and Method for Producing the Same | |
| KR101395855B1 (en) | Media Containing Defatted Rice Bran and Methods for Preparing High-Concentrated GABA Using the Same | |
| KR102599956B1 (en) | culture medium of lactic acid bacteria containing high concentration gaba and Preparing Method Thereof | |
| KR101740968B1 (en) | Method for production of GABA with lactic acid bacteria through L-glutamic acid feeding | |
| EP0266088B1 (en) | Quality improvement of alcoholic liquors | |
| KR101761710B1 (en) | Fermented Salt Containing GABA and Preparing Method Thereof | |
| CN102229879B (en) | Flavor blending liquid and preparation method thereof | |
| KR100687599B1 (en) | Method for Preparing ???? Using By-Products from Rice Polishing | |
| US5667999A (en) | Process for preparing a fermentation product having SOD activity using a microorganism and a beverage containing the same | |
| KR101407231B1 (en) | Method for producing fermented herb extract with high GABA content using Lactobacillus helveticus RMK85 | |
| JP2004180672A (en) | Microorganism which produces riboflavin and method for producing the riboflavin by using the same | |
| KR101298111B1 (en) | Preparation Method of GABA(γ-Amino butyric acid)- Enriched Rice Bran Extract | |
| KR20220094359A (en) | Method for manufacturing Morinda citrifolia fortified with higher GABA content using Lactic acid bacteria having GABA-producing activity | |
| CN112899117A (en) | Method for co-fermenting high gamma-aminobutyric acid red date and pearl barley vinegar by combining monascus with lactobacillus and spore bacteria | |
| CN108300669B (en) | Fermented bean curd ripening fermentation complex microbial inoculant and preparation method thereof | |
| KR20110010433A (en) | The preparing method for soybean milk with natural gaba using serial fermentation of plant originated lactic acid bacteria with gaba-producing ability and protease-producing ability | |
| CN106722201B (en) | Production process of cowpea seed natto powder | |
| KR20160047117A (en) | Process for preparing functional vinegar using soybean mejoo | |
| KR102554307B1 (en) | GABA Salt Containing Live Lactic acid Bacteria and Preparing Method Thereof | |
| KR102359020B1 (en) | Method for alcohol reduction of fermented solution using bacillus subtilis or Bacillus amyloliquefaciens |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| AMND | Amendment | ||
| E601 | Decision to refuse application | ||
| X091 | Application refused [patent] | ||
| AMND | Amendment | ||
| X701 | Decision to grant (after re-examination) |