KR20220045199A - 소아 환자를 위한 발록사비르 마르복실의 개선된 투여량 - Google Patents

Abstract

본 발명은 인플루엔자 바이러스 감염을 치료하는 방법에 관한 것이며, 여기서 상기 방법은 유효량의 화합물을 인플루엔자 바이러스 감염을 갖는 환자에게 투여하는 것을 포함하며, 여기서 화합물은 화학식 (I) 및 (II) 중 하나를 갖거나 또는 그의 제약상 허용되는 염이고, 여기서 하기 투여량이 사용된다: (i) 1세 미만인 환자에서: (a) 환자가 4주 미만인 경우, 유효량은 0.8-1.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 1 mg/kg 체중임; (b) 환자가 4주 이상 3개월 미만인 경우, 유효량은 0.8-1.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 1 mg/kg 체중임; (c) 환자가 3개월 이상 12개월 미만인 경우, 유효량은 1.8-2.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 2 mg/kg 체중임; (ii) 1세 이상 12세 미만인 환자에서: (a) 환자가 20 kg 미만의 체중을 갖는 경우, 유효량은 1.8-2.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 2 mg/kg 체중임; 또는 (b) 환자가 20 kg 이상의 체중을 갖는 경우, 유효량은 35-45 mg, 바람직하게는 약 40 mg임.

Description

소아 환자를 위한 발록사비르 마르복실의 개선된 투여량

본 발명은 인플루엔자 바이러스 감염을 치료하는 방법에 관한 것이며, 여기서 상기 방법은 유효량의 화합물을 인플루엔자 바이러스 감염을 갖는 환자에게 투여하는 것을 포함하며, 여기서 화합물은 화학식 I 및 II 중 하나를 갖거나 또는 그의 제약상 허용되는 염이고, 여기서 하기 투여량이 사용된다: (i) 1세 미만인 환자에서: (a) 환자가 4주 미만인 경우, 유효량은 0.8-1.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 1 mg/kg 체중임; (b) 환자가 4주 이상 3개월 미만인 경우, 유효량은 0.8-1.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 1 mg/kg 체중임; (c) 환자가 3개월 이상 12개월 미만인 경우, 유효량은 1.8-2.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 2 mg/kg 체중임; (ii) 1세 이상 12세 미만인 환자에서: (a) 환자가 20 kg 미만의 체중을 갖는 경우, 유효량은 1.8-2.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 2 mg/kg 체중임; 또는 (b) 환자가 20 kg 이상의 체중을 갖는 경우, 유효량은 35-45 mg, 바람직하게는 약 40 mg임.

인플루엔자는 오르토믹소바이러스과의 바이러스에 의해 유발되는 급성 호흡기 감염성 질환이다. 2가지 형태, 인플루엔자 A 및 B가 인간을 감염시키는 것으로 공지되어 있다. 이들 바이러스는 1 내지 4일의 잠복기 후에 호흡기관의 급성 열성 감염을 유발하며, 열, 기침, 피로, 두통 및 근육 통증의 갑작스러운 발병을 특징으로 한다. 연간 인플루엔자 유행병은 매년 전 세계적으로 3 내지 5백만 건의 중증 질병, 및 250,000 및 500,000명의 사망을 초래하는 것으로 생각된다 (WHO fact sheet 211: influenza (seasonal). 2018).

상태는 일반적으로 건강한 성인에서 자기 제한적이지만, 아동, 노인 및 면역저하자에서 상당한 이환율 및 간헐적 사망률과 연관될 수 있다 (Paules, Subbarao. Lancet 2017; 390: 697-708). 아동은 이들의 상대적인 혈청감수성 및 결과적으로 더 높은 질병 발병률 때문에 지역 사회에서 인플루엔자의 전파에서 중심적인 역할을 한다. 급성 질병 이외에, 어린 아동은 특히 2차 박테리아 감염의 위험이 있다. 이러한 2차 박테리아 감염은 특히 아동에서 불량한 예후를 유발한다. 심장 및 신경계 합병증을 포함한 다른 심각한 합병증이 또한 발생할 수 있다. 아동은 성인과 비교하여 더 중증인 질환을 발병하며, 특히 < 5세 연령의 아동에서 입원율이 더 높다 (Rotrosen, Neuzil. Pediatr Clin North Am 2017; 64: 911-36). 현재 소아 환자의 치료에는 NA 억제제, 예컨대 오셀타미비르, 자나미비르 및 페라미비르가 사용될 수 있지만, 하기 이유로 사용의 제한 없이 보다 간편하고 강력한 항인플루엔자 바이러스 약물이 필요하다: 1) 자나미비르는 이 그룹에서 흡입 어려움으로 인해 매우 어린 아동 (국가에 따라 < 5세 또는 7세 연령)에서 인플루엔자 치료에 대해 허가되지 않았고, 2) 페라미비르는 정맥내로 투여될 필요가 있고, 3) 오셀타미비르는 5일 동안 1일 2회 (BID) 경구 투약을 요구한다. 또한, 소아 환자에서 합병증 예방에 대한 현재 시판되는 항바이러스제의 효능은 입증되지 않았다.

발록사비르 마르복실은 시오노기 앤드 캄파니, 리미티드(Shionogi & Co., Ltd.)에서 발견한, 인플루엔자에 대한 항바이러스 효과를 발휘하는 화합물이다. 발록사비르 마르복실 (S-033188, 시오노기 화합물 식별 번호로도 지칭됨)은 가수분해라고 하는 대사 과정을 통해 혈액, 간 및 소장에서 활성 형태 발록사비르 (S-033447, 시오노기 화합물 식별 번호로도 지칭됨)로 전환되는 전구약물이다. 발록사비르 마르복실은 인플루엔자 바이러스에 특이적인 효소인 cap-의존적 엔도뉴클레아제에 작용하고 바이러스 cap-탈취를 억제하여, 이에 의해 인플루엔자 바이러스의 성장을 저해한다.

발록사비르 마르복실은 여러 임상 시험에서 테스트되었다. 그러나, 주어진 임상 시험의 결과는 제약 화합물에 대한 임의의 환자의 반응으로 단순히 이전될 수 없는 것으로 일반적으로 공지되어 있다. 보다 구체적으로, 임상 시험의 결과에 유의하게 영향을 미칠 수 있는 여러 인자, 예컨대 환자 집단 (예를 들어 성인, 소아, 노인, 민족성) 및 투약 레지멘이 있다.

예를 들어, 성인에 대한 임상 시험의 결과는 소아 환자로 이전될 수 없는 것으로 공지되어 있다. 성인에 대한 적합한 용량이 공지되어 있더라도 원하는 치료 효과를 생성하고 부작용이 발생하지 않는 용량을 찾기 위해서는 미성년자에 대해 별도로 결정해야 한다. 어린 유기체는 성인과 매우 상이하게 약물을 프로세싱하기 때문에 미성년자에게 특히 적합한 용량을 찾는 것이 매우 중요하다. 예를 들어, 신생아는 간 및 신장이 아직 성숙하지 않았기 때문에 약물을 오직 천천히 분해한다. 다른 한편으로는, 2세 이상의 아동은 더 빠른 신진대사를 갖고, 이들의 신체는 때때로 성분을 더 신속하게 배설한다. 더욱이, 성인에서 일반적으로 무해한 의약이 아동에게 위험할 수 있다. 예를 들어, 통증 또는 열을 앓고 있는 성인이 일반적으로 사용하는 화합물 아세틸살리실산 (ASS)은 아동에서 생명을 위협하는 라이 증후군을 촉발할 수 있으며, 이는 뇌 및 간을 심각하게 손상시킬 수 있다. 따라서, 성인에 대한 임상 시험은 주어진 화합물이 미성년자에서 사용될 수 있는지 여부를 결정하는데 사용될 수 없으며, 미성년자, 아동 및 신생아에서 의약의 적합한 용량을 찾는 데에는 더욱 그렇다.

실제로, 발록사비르의 경구 청소율 (CL/F)은 체중의 영향을 받았다. 체중이 낮을수록 CL/F가 높아진다. 이 관계는 나이가 들수록 CL/F가 증가함을 시사한다. 일본인 소아 시험 (1618T0822)에 기초하여 집단 약동학 (PK) 분석에서, CL/F 관계는 하기와 같이 정의되었다: CL/F=3.05*(체중/24.3)^0.632. 체중의 유사한 영향이 발록사비르 겉보기 분포 부피에서 관찰되었다. 유사하게, 더 낮은 체중을 갖는 환자에서 더 낮은 중앙 분포 부피가 관찰되었다 (Vc=105*(체중/24.3)^1.03). 발록사비르의 PK에 대한 체중의 이러한 영향으로 인해, 혈장 농도-시간 곡선 아래 총 면적 (AUC) 및 투약 72시간 후 혈장 농도 (C₇₂) 둘 다의 측면에서 성인의 약물 노출과 매치하는 소아 환자에서 최적 약물 노출을 수득하기 위해 성인에서 사용되는 용량을 단순히 외삽할 수 없다.

일본에서 6개월 내지 12세 연령의 소아 환자에서 발록사비르 마르복실을 테스트하기 위한 2건의 III상 임상 시험이 수행되었다 (연구 1618T0822 및 1705T0833). 이들 연구의 모든 참가자는 아시아인 혈통 (일본인)을 가졌고, 가장 높은 투여된 투여량은 40 mg이었다. 제1 연구 1618T0822 (T0822라고도 함)에서 10mg 및 20mg의 정제가 사용되었다. 환자는 하기와 같이 체중당 투약받았다: ≥ 40 kg: 40 mg 용량 (n=8), 20 kg - 40 kg: 20 mg 용량 (n=66), 10 kg - 20 kg: 10 mg 용량 (n=31), 5 kg- < 10 kg: 5 mg (n=2). 일본 환자에서의 제2 소아 연구 1705T0833 (T0833라고도 함)에서, 발록사비르 마르복실 2% 과립이 20 kg 미만의 체중 및 12세 미만의 소아 대상체에게 투여되었다. 0 내지 6세의 환자 33명이 이 연구에 포함되었다. 6명은 1세 미만이고, 13명은 1 내지 3세이고, 14명은 3세 이상이었다. 12명의 대상체는 10 kg 미만의 체중을 가졌고, 21명은 20 kg 미만의 체중을 가졌다.

민족적 차이가 새로운 영역에서 약제의 안전성, 효능, 투여량 및 용량 레지멘에 영향을 미칠 수 있다는 우려로 인해 외국 임상 데이터에 의존하려는 의향이 제한되었다. 실제로, 상이한 민족성을 갖는 사람들의 대사의 다양성은 약물 약동학의 민족간 변동성과 연관된 것으로 공지되어 있다 (Kim, The Journal of Clinical Pharmacology 44.10 (2004): 1083-1105). 또한 이러한 민족간 변동성은 특히 아시아인 (예컨대 일본인) 및 백인 (예를 들어 코카시안) 사이에 존재하며, 주어진 약물의 효능 및 독성의 차이를 유발할 수 있음이 공지되어 있다 (Kim, The Journal of Clinical Pharmacology 44.10 (2004): 1083-1105). ICH (International Council for Harmonisation of Technical Requirements for Pharmaceuticals for Human Use) 가이드라인 E5(R1)은 윤리 인자 및 다지역 임상 시험의 이들의 포함을 정의하였다 (1998년 3월 11일 수정을 포함하여 1998년 2월 5일의 IHC 가이드라인 E5(R1) 참조). 예를 들어, ICH 가이드라인 E5는 특정 혈통을 갖는 환자에 대해 수득된 임상 데이터를 단순히 상이한 혈통을 갖는 환자로 이전될 수 없음을 분명히 한다. 그 이유는 여러 의학 화합물이 민족적 인자에 민감하기 때문이며, 이는 민족적 인자 (예컨대 유전적 다형성)가 화합물의 안전성, 효능 또는 용량 반응에 상당한 영향을 미친다는 것을 의미한다. 민족적 혈통이 약물에 대한 반응에 상당한 영향을 미친 여러 예가 있다 (Bjornsson, The Journal of Clinical Pharmacology 43.9 (2003): 943-967). 실제로, 약동학의 민족간 변동성은 의학적 치료를 받는 상이한 민족적 출신의 대상체에서 예기치 않은 결과, 예컨대 치료 실패, 유해 효과 및 독성을 유발할 수 있다 (Kim, The Journal of Clinical Pharmacology 44.10 (2004): 1083-1105). 예를 들어, 아프리카인 집단에서 흔한 효소 UGT2B10의 특정 스플라이싱 다형성이 약물 노출을 크게 증가시킬 수 있다는 것이 관련 기술분야에 공지되어 있다 (Fowler, Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 352.2 (2015): 358-367). 이 UGT2B10 스플라이스 부위 돌연변이는 코카시안에서 거의 나타나지 않는다 (Fowler, Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 352.2 (2015): 358-367). 유사하게, 베바시주맙을 사용한 위암 치료에 대한 임상 연구는 효능 결과의 지역적 차이를 나타내었다 (Ohtsu, J Clin Oncol 29.30 (2011): 3968-3976).

인플루엔자의 치료에서, 적절한 투여량의 항인플루엔자 약물을 사용하는 것이 매우 중요하다. 예를 들어, 너무 낮은 투여량은 치료-내성 바이러스 (예를 들어 I38 아미노산 치환을 갖는 바이러스)의 발생을 유발할 수 있다. 너무 낮은 투여량은 바이러스 역가의 반동 또는 이중-피크 열을 추가로 유발할 수 있다. 따라서, 인플루엔자의 치료에서, 과용량을 피함으로써 빠른 치료 반응을 수득하기 위해 필요한 만큼 높은 용량의 항인플루엔자 약물을 사용하는 것이 매우 중요하다.

상기 기재된 바와 같이, 발록사비르 마르복실은 성인에서의 다양한 임상 연구 뿐만 아니라 아시아인 소아 환자에서의 소수의 임상 연구에서 테스트되었다. 그러나, 또한 상기 설명된 바와 같이, 이들 데이터는 단순히 비-아시아인 소아 환자로 이전될 수 없다. 추가로, 또한 상기 설명된 바와 같이, 인플루엔자의 치료에서 정확한 용량의 사용이 매우 중요하다.

그러므로, 본 발명의 기초가 되는 기술적 과제는 소아 환자를 위한 발록사비르 마르복실의 개선된 투여량의 제공이다.

기술적 과제는 청구범위에서 특징화된 바와 같은 실시양태의 제공에 의해 해결된다.

따라서, 본 발명은 인플루엔자 바이러스 감염을 치료하는 방법에 관한 것이며, 여기서 상기 방법은 유효량의 화합물을 인플루엔자 바이러스 감염을 갖는 환자에게 투여하는 것을 포함하며, 여기서 화합물은 하기 화학식 I 및 II 중 하나를 갖거나:

또는 그의 제약상 허용되는 염이고,

여기서 하기 투여량이 사용된다:

(i) 1세 미만인 환자에서:

(a) 환자가 4주 미만인 경우, 유효량은 0.8-1.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 1 mg/kg 체중임;

(b) 환자가 4주 이상 3개월 미만인 경우, 유효량은 0.8-1.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 1 mg/kg 체중임;

(c) 환자가 3개월 이상 12개월 미만인 경우, 유효량은 1.8-2.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 2 mg/kg 체중임;

(ii) 1세 이상 12세 미만인 환자에서:

(a) 환자가 20 kg 미만의 체중을 갖는 경우, 유효량은 1.8-2.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 2 mg/kg 체중임; 또는

(b) 환자가 20 kg 이상의 체중을 갖는 경우, 유효량은 35-45 mg, 바람직하게는 약 40 mg임.

상기 언급된 바와 같이, 인플루엔자의 치료에서, 너무 낮은 투여량은 치료-내성 바이러스 (예를 들어 I38 아미노산 치환을 갖는 바이러스)의 발생에 영향을 미칠 수 있으며, 추가로 바이러스 역가의 반동 및 이중-피크 열을 유발할 수 있다. 본 발명의 투여량은 바람직하게는 선행 기술의 소아 발록사비르 마르복실 투여량과 비교하여 치료-내성 바이러스 (예를 들어 I38 아미노산 치환을 갖는 바이러스)의 발생을 감소시킨다. 또한, 본 발명의 투여량은 바람직하게는 선행 기술의 소아 발록사비르 마르복실 투여량과 비교하여 바이러스 반동의 발생을 감소시킨다. 본원에서 사용된 바와 같은 용어 "바이러스 반동"은 하기를 의미한다: 화합물의 투여 후 관찰된 시점에 대해, 특정 시점에서의 인플루엔자 바이러스 역가 [log10(TCID50/mL)]는 0.6이거나 또는 직전 시점보다 0.6 더 크다. 더욱이, 본 발명의 투여량은 바람직하게는 선행 기술의 소아 발록사비르 마르복실 투여량과 비교하여 이중-피크 열의 발생을 감소시킨다. 본 발명의 투여량은 선행 기술의 소아 발록사비르 마르복실 투여량과 비교하여 인플루엔자 질병의 경감 및/또는 열 해소까지의 시간을 추가로 단축할 수 있다.

첨부된 실시예에 나타낸 바와 같이, 발록사비르 (24시간) 및 오셀타미비르 (76시간) 사이에 바이러스 배출 중단까지의 중앙값 시간의 분명한 차이가 있었다. 이들 데이터는 오셀타미비르-치료된 환자에서 약 3일과 비교하여 발록사비르-치료된 환자가 약 1일의 중앙값 시간 후에 더 이상 감염성이 없음을 나타낸다. 따라서, 본 발명의 투여량은 유리하게는 인플루엔자의 전파를 감소시킨다. 보다 구체적으로, 본 발명의 투여량은 바람직하게는 오셀타미비르를 투여받은 환자와 비교하여 본 발명의 투여량을 투여받은 환자의 인플루엔자 바이러스의 전파를 감소시킨다. 환자는 신생아 또는 그 이상의 연령이지만 12세 미만, 예를 들어, 1세 이상 12세 미만인 소아 환자이다.

상기 논의된 바와 같이, 인플루엔자의 치료에서 과용량을 피함으로써 치료-내성 바이러스 또는 바이러스 반동의 발생을 예방하기 위해 필요한 만큼 높은 항인플루엔자 약물의 적절한 용량을 사용하는 것이 매우 중요하다. 원하는 환자 그룹에 대한 약물의 적합한 용량을 예측하는 것은 약물이 과용량을 피하면서 원하는 치료 효과를 수득하기에 충분한 용량으로 환자에게 투여되는 것을 보장하기 위한 중요한 척도이다. 이러한 예측은 적합한 서술적 또는 기계론적 모델을 사용함으로써 인 실리코로 수행될 수 있다. 물론, 모델링 기술은 주어진 환자가 테스트된 약물에 대해 원하는 반응을 보인다는 완전한 확실성을 제공하지 않는다. 그러나, 이는 모든 임상 테스트에 동일하게 적용된다. 약물의 효과를 테스트하는 생화학적 또는 세포-기반 검정 뿐만 아니라 동물 실험 또는 심지어 환자를 대상으로 하는 임상 시험으로부터의 유리한 결과는 약물이 후속적으로 치료되는 환자에서 원하는 치료 효과를 나타낼 확률을 증가시킬 수 있을 뿐이다. 예를 들어, 초기 단계 연구는 일반적으로 작은 샘플 크기를 갖거나, 알려지지 않은 이유로 편향될 수 있으며, 이는 문제가 되는 약물의 생리학적 효과의 잘못된 평가로 이어질 수 있다. 의약이 어떠한 원치않는 부작용을 유발하지 않으면서 의도된 환자 그룹에서 원하는 치료 효과를 (항상) 보여줄 것이라는 것을 절대적으로 증명하는 것은 거의 불가능하다. 언급된 바와 같이, 약물의 생리학적 효과를 검증하기 위한 모든 가능한 방법은 약물이 나중에 치료되는 환자에서 이러한 특정 생리학적 효과를 유발할 가능성을 증가시킬 수 있을 뿐이다. 상기 설명된 바와 같이, 인 실리코 모델링에 의해 약물의 적합한 용량을 예측하는 것은 이들 모델 중 하나이며, 이는 새로운 환자 그룹에 대한 적합한 용량을 확립하는데 특히 유용하다.

본 발명의 맥락에서, 소아 환자 (바람직하게는 비-아시아인 소아 환자)에서 발록사비르 마르복실의 적합한 용량을 예측하기 위한 포괄적인 모델 시뮬레이션이 수행되었다. 시뮬레이션에 사용된 모델은 일본인 소아 환자에서 수행된 이전 연구를 고려하여 개발되었다. 이 모델은 연구된 집단에서 환자의 인구통계학 특징 및 약물 PK 특징 둘 다를 통합시킨다. 그 후, 다양한 투약 레지멘 후 발록사비르 혈장 농도는 환자 특징, 예컨대 연령 또는 체중에 기초하여 소아 환자에서 시뮬레이션될 수 있다. 결과적으로, 이 모델은 유리하게는 소아 환자, 바람직하게는 비-아시아인 (예컨대 백인) 소아 환자에서 발록사비르 마르복실의 적합한 용량에 대한 기초를 제공하며, 이는 모든 가능성에서 잠재적인 부작용을 피함으로써 인플루엔자의 치료에서 성인 환자에서의 노출에 필적하는 발록사비르 혈장 노출 및 적절한 약리학적 효과를 보장한다.

보다 구체적으로, 본 발명의 맥락에서 비-아시아인 (예를 들어 백인, 예컨대 코카시안) 소아 환자에 대한 적합한 용량은 모델링 및 시뮬레이션 접근법을 사용하여 결정되었다. 일본인 소아 환자에서 개발된 모델에 기초하여, 비-아시아인 (예를 들어 백인, 예컨대 코카시안) 소아 집단에서 발록사비르 (S-033447)의 혈장 농도 약동학은 상이한 투약 레지멘에 대해 시뮬레이션되었다. 보다 구체적으로, 일본에서 소아 환자를 대상으로 하는 III상 연구 (1618T0822)에서 수득된 미공개 약동학 데이터를 사용함으로써 일본인 소아 집단에서 집단 약동학적 분석을 수행한 후; 여러 상이한 투약 레지멘 후 비-아시아인 소아 약물 노출을 시뮬레이션하고 최상의 성인 노출과 매치하는 것을 선택함으로써 비-아시아인 소아 환자에 대한 발록사비르 마르복실의 적합한 용량을 수득하였다. 특히, 소아 약물 노출의 시뮬레이션은 하기 기재된 바와 같이 수행되었다:

1세 미만인 비-아시아인 소아 환자에 대해, < 2세 영아 (총 26,000명의 환자)에 대해 각 연령 (개월) 별로 1,000명의 환자에 대해 시뮬레이션을 수행하였다. 그러므로, 1000명의 환자의 여러 세트가 수행되었다. 예를 들어, 0 내지 1개월 1000명, 1 내지 2개월 1000명 …, 총 26000명의 시뮬레이션 (즉, 26 x 1000). 1 내지 12세인 환자에 대해, 10- 내지 60-kg 소아 환자에 대해 5-kg 체중마다 1,000명의 환자 (총 26,000명의 환자)에 대해 비-아시아인 소아 약물 노출의 시뮬레이션을 수행하였다.

두 경우 모두, 다양한 투약 레지멘은 혈장 농도-시간 곡선 아래 면적 (AUC), 최대 혈장 농도 (C_max), 투약 24시간 후 혈장 농도 (C₂₄; 허용가능한 시간 창: 20 내지 28시간), 및 투약 72시간 후 혈장 농도 (C₇₂)의 관점에서 성인 약물 노출과 매치하는 이들의 능력과 관련하여 평가되었다. 최적 용량 및 적절한 연령 및 체중 컷오프는 40 mg 발록사비르 마르복실을 투여받은 환자 (체중 < 80 kg) 및 80 mg 발록사비르 마르복실을 투여받은 환자 (체중 ≥ 80 kg)에 대한 III상 연구 (1601T0831)에서 수득된 것, 소아 III상 연구 (1618T0822)에서 수득된 것, 및 80 mg 발록사비르 마르복실을 투여받은 환자에 대한 I상 철저한 수정 QT 간격 (QTc) 연구 (1527T0816)에서 수득된 것과 시뮬레이션된 약물 노출을 비교한 것에 기초하였다.

1세 미만인 환자와 관련하여, 시뮬레이션은 총 (AUC) 및 지속적인 (C₇₂) 약물 노출 둘 다의 관점에서 성인과 매치하는 최적 노출이 3개월 이상의 영아에서 2 mg/kg, 및 더 어린 영아 (4주-3개월) 뿐만 아니라 신생아 (0-4주)에서 1 mg/kg으로 달성되었음을 나타내었다. 따라서, 1세 미만인 환자에서, 발록사비르 마르복실은 III상 및 일본인 소아 III상 연구에서 성인에게 40 mg 또는 80 mg 발록사비르 마르복실 (환자의 체중에 기초하여)의 투여로부터 생성된 것과 유사한 발록사비르 (S-033447) 노출을 수득하기 위해 환자가 인플루엔자 바이러스 감염을 갖는 것으로 진단되는 시점에 기록된 영아의 연령에 따라 투여될 수 있다 (즉, 2 mg/kg ≥ 3개월, 1 mg/kg < 3개월).

1 내지 12세인 환자와 관련하여, 시뮬레이션은 총 (AUC) 및 지속적인 (C₇₂) 약물 노출 둘 다의 관점에서 성인과 매치하는 최적 노출이 20 kg 미만 체중의 아동에서 2 mg/kg 및 ≥ 20 kg 체중의 아동에서 40 mg의 균일 투약으로 달성되었음을 나타내었다. 따라서, 1 내지 12세인 환자에서, 발록사비르 마르복실은 III상 및 일본인 소아 III상 연구에서 성인에게 40 mg 또는 80 mg 발록사비르 마르복실 (체중에 기초하여)의 투여로부터 생성된 것과 유사한 발록사비르 (S-033447) 노출을 수득하기 위해 환자가 인플루엔자 바이러스 감염을 갖는 것으로 진단되는 시점에 기록된 체중에 기초하여 투여될 수 있다 (즉, < 20 kg 체중의 환자의 경우 2 mg/kg 또는 ≥ 20 kg 체중의 환자의 경우 40 mg)

상기 설명된 바와 같이, 발록사비르 마르복실 및 아시아인 소아 환자를 대상으로 수행된 임상 연구는 단순히 비-아시아인 (예를 들어 백인, 예컨대 코카시안) 소아 환자로 이전될 수 없다. 따라서, 12세 미만의 아동에게 최적 용량을 제공하기 위해 (그리고 이들 어린 환자가 인플루엔자 바이러스 감염으로부터 회복할 가능성을 개선하기 위해) 비-아시아인 (예를 들어 백인) 소아 환자에 대한 개선된 투여량 스케쥴이 본 발명에 따라 개발되었다. 따라서, 본 발명에 따라, 치료될 환자는 인종 명명 비-아시아인, 예를 들어 "백인"을 가질 수 있다. 그러므로, 본 발명은 환자가 백인인 본원에 제공된 방법에 관한 것이다. 용어 "백인"은 유럽, 중동 또는 북아프리카의 원주민 중 임의의 것에서 기원한 사람을 지칭한다 (예를 들어, 문헌 [US Food and Drug Administration. "Collection of Race and Ethnicity Data in Clinical Trials Guidance for Industry and Food and Drug Administration Staff." Issued on October 26 (2016)] 참조). 예를 들어, 백인 소아 환자는 코카시안일 수 있다.

상기 기재된 바와 같이, ICH 가이드라인은 특정 혈통을 갖는 환자에 대해 수득된 임상 데이터를 단순히 상이한 혈통을 갖는 환자로 이전될 수 없음을 분명히 한다. ICH 가이드라인에 따라, 한 지역 (예컨대 일본)에서 수행된 임상 시험은 또 다른 지역 (예컨대 유럽 또는 미국)으로 이전될 수 없다. 예를 들어, ICH 지역과 가장 관련이 있는 3가지 주요 인종 그룹 (아시아인, 흑인 및 코카시안)에서 약동학 평가는 ICH 지역에서 약품 등록에 중요하다. 발록사비르 마르복실과 관련하여, 일본에서 소아 환자를 대상으로 한 임상 시험이 수행되었다. 본 발명은 비-아시아인 (예를 들어 백인, 예컨대 코카시안) 소아 환자에 대한 최적 발록사비르 마르복실 용량의 발견에 기초한다. 따라서, 본 발명에 따라 환자는 바람직하게는 비-아시아인 혈통을 갖고 아시아에 거주하지 않는다. 그러므로, 본 발명에서 환자는 아시아인 민족성을 갖지 않을 수 있다. 용어 "아시아인"은 예를 들어, 캄보디아, 중국, 인도, 일본, 한국, 말레이시아, 파키스탄, 필리핀 제도, 태국 및 베트남을 포함한 극동, 동남 아시아 또는 인도 아대륙의 원주민 중 임의의 것에서 기원한 사람을 지칭한다 (예를 들어, 문헌 [US Food and Drug Administration. "Collection of Race and Ethnicity Data in Clinical Trials Guidance for Industry and Food and Drug Administration Staff." Issued on October 26 (2016)] 참조). 예를 들어, 환자는 일본인이 아닐 수 있다.

그러므로, 환자는 아시아인 (예를 들어 일본인) 민족성을 갖지 않고 아시아 (예를 들어 일본)에 거주하지 않는 것이 바람직하다. 상기 언급된 바와 같이, 발록사비르 마르복실에 대한 임상 시험이 일본인 소아 환자를 대상으로 수행되었다 (연구 1618T0822 및 1705T0833). 그러나, 이들 연구에서, 최대 1 mg/kg 체중의 발록사비르 마르복실의 효능이 6개월 내지 < 12세의 환자에서 사용되었다. 그러므로, 이들 일본 임상 시험은 본원에 제공된 투여량과 유의하게 상이하며, 이는 본 발명의 맥락에서 환자가 6개월 미만일 수 있고/거나 2 mg/kg 체중의 발록사비르 마르복실을 투여받을 수 있기 때문이다. 또한, 상기 설명된 바와 같이, 임상 시험의 결과는 한 민족성으로부터 또 다른 민족성으로 직접 이전될 수 없다. 따라서, 일본에서 아시아인 소아 환자를 대상으로 수행된 임상 시험 (연구 1618T0822 및 1705T0833)은 비-아시아인 (예를 들어 백인, 예컨대 코카시안) 소아 환자로 직접 이전될 수 없다. 상기 언급된 바와 같이, 본 발명에 제공된 투여량은 비-아시아인 (예를 들어 백인, 예컨대 코카시안) 소아 환자에 최적화된 투여량이다. 따라서, 본 발명에서, 소아 환자는 백인, 예를 들어 코카시안인 것이 바람직하다. 유럽인 및 "백인" 미국인은 일반적으로 "코카시안"으로 지칭된다 (Bjornsson, The Journal of Clinical Pharmacology 43.9 (2003): 943-967). 그러므로, 본 발명에 따라 환자는 코카시안 (즉, 유럽인 또는 "백인" 미국인) 혈통을 가질 수 있고 유럽 또는 북아메리카 (예를 들어 미국)에 거주할 수 있다.

발록사비르 마르복실은 대부분 정제 형태로 투여된다. 그러나, 정제는 일반적으로 소아 환자에서 허용가능성이 낮아, 부적절한 약물 섭취, 약물의 쪼개짐 또는 효과가 나타나기 전에 약품을 구토함을 유발하는 단점을 갖는다. 또한, 신생아 및 어린 아동은 종종 정제를 삼킬 수 없다. 또한 원위치에 비위관를 갖는 환자 (예를 들어, 삽관된 환자)는 정제를 삼킬 수 없다. 따라서, 본 발명의 맥락에서 화합물은 과립의 현탁액 형태로 투여될 수 있다. 특히 환자가 1세 미만인 경우 (즉, 상기 (i) 하에 정의된 바와 같은 환자), 또는 환자가 1세 이상이고 20 kg 미만의 체중을 갖는 경우 (즉, 상기 (ii)(a) 하에 정의된 바와 같은 환자), 화합물은 과립의 현탁액 형태로 투여될 수 있다. 예를 들어, PCT/JP2019/017146에 기재된 바와 같은 과립이 사용될 수 있다. 이러한 과립 (특히 2% 발록사비르 마르복실, 즉 S-033188, 과립)은 20 mg 발록사비르 마르복실 (S-033188) 정제와 생물학적 동등성을 갖는 것으로 나타났다 (임상 연구 보고서, 연구 번호 1703T081G, 시오노기 앤드 캄파니, 리미티드; 2018). 따라서, 본 발명에서 과립은 바람직하게는 2% 발록사비르 마르복실 (즉, S-033188) 과립이다.

20 kg 미만 체중의 일본인 소아 환자를 대상으로 한 임상 시험 (1705T0833)에서 과립이 투여 형태로 사용되었다. 시오노기가 일본 시장을 위해 개발한 최종 과립 제품 구성은 사셰에 포장된 과립으로 이루어진다. 과립은 대상체의 입에 직접 투여하기 위한 것이다. 본 발명의 맥락에서 과립은 바람직하게는 재현탁되고 (예를 들어 병에), 특정 부피가 경구로 (예를 들어 시린지에 의해) 제공된다. 특히, 본 발명에서 사용되는 과립은 물로 재구성될 수 있다. 예를 들어, 본 발명에서 사용되는 화합물 (명목) 40 mg을 함유하는 2 g의 과립은 20 mL 물로 재구성될 수 있으며, 이는 밀리리터 (mL)당 2 mg의 화합물의 최종 농도에 상응한다. 이들 재현탁된 과립은 유리하게는 아동, 심지어 어린 아동 (영아) 및 비위관을 갖는 환자에게 투여될 수 있다.

경구 현탁액을 위한 과립은 표 1에 나타낸 바와 같은 조성을 가질 수 있다.

표 1: 경구 현탁액을 위한 발록사비르 마르복실 과립의 성분 및 조성

^a 정제수는 제조 과정 동안 제거된다.

^b 과충전, 예를 들어 0.13 g의 과립을 적용하여 재구성 후 표적화된 최대 추출가능한 부피 20 mL를 수득하고; 충전 중량은 벌크 과립에 대한 검정 값에 기초하여 조정될 수 있다.

발록사비르 마르복실을 사용한 성인 임상 연구에서 쓴맛이 보고되었으며, 쓴맛을 차폐하고 기호성을 보장하기 위해 여러 부형제, 예컨대 염화나트륨, 수크랄로스 및 딸기 향미가 제형에 포함되었다. 그러므로, 본 발명에 제공된 과립은 경구 현탁액의 형태로 투여되고 활성 화합물의 쓴맛이 차폐되는 장점을 갖는다. 따라서, 이들 과립은 소아 환자에서 화합물의 수용도를 개선하며, 이는 치료 효과의 달성에 기여한다. 실제로, 소아 일본 환자에게 발록사비르 마르복실이 투여된 임상 시험 (즉, 연구 1618T0822 및 1705T0833)에서, 가장 흔한 유해 사건은 구토였다. 조사관은 구토가 연구 약물과 관련이 없다고 고려하였지만, 투여 형태에 의해 유도되는 구토를 감소시키거나 피하는 것은 치료 이점을 제공할 수 있다. 또한, 경구 현탁액은 체중-기반 투약을 보다 정밀하게 구현하기 위해 유연성을 제공한다.

투약 장치로서 경구 투약 시린지 또는 경구 투약 컵 (둘 다 부피측정)을 사용하여, 본 발명에서 사용되는 화합물 (예를 들어 발록사비르 마르복실)의 권장 용량을 전달하기에 충분한 정도의 정확성을 제공할 수 있다. 예를 들어, 영아에서 사용될 수 있는 3 mL 경구 투약 시린지는 전형적으로 정확한 용량을 전달하는데 적절한 1/10 밀리리터의 부피측정 경계를 포함한다. 대안적으로, 10 mL 경구 투약 시린지가 사용될 수 있다.

사용될 수 있는 투여량에 대한 예는 하기 표 2에 나타낸다.

표 2. 연령/체중 의존적 투약에 대한 예

상기 표 2에 표시된 투약은 단지 예일 뿐이다. 예를 들어, 상기 항목 (i) 하에 본 발명의 방법에 정의된 바와 같은 환자 (즉, 1세 미만인 환자)의 투여량은 이들의 연령에 따라 수행된다 (예를 들어, 3개월 미만인 환자의 경우 1 mg/kg; 및 3개월 이상 12개월 미만인 환자의 경우 2 mg/kg). 예를 들어, 3개월 미만이고 6 kg의 체중을 갖는 아동은 약 1 mg/kg의 화합물을 투여받을 것이다.

상기 기재된 바와 같이, 본 발명에서 사용되는 화합물은 과립의 현탁액 형태로 투여될 수 있다. 경구 현탁액을 위한 이러한 과립은 원하는 용량을 제공하기 위해 물로 재구성될 수 있다. 그러나, 본 발명에 따라 1세 이상이고 20 kg 이상의 체중을 갖는 환자 (즉, 상기 항목 (ii)(b)에 정의된 바와 같은 환자)는 화합물의 40 mg 균일 용량을 투여받는다. 이러한 40 mg 용량은 바람직하게는 정제 형태로 투여된다. 예를 들어, 40 mg 용량은 필름코팅정 형태로 투여될 수 있다.

그러나, 본 발명은 본원에서 사용되는 화합물의 임의의 특정 투여 경로에 제한되지 않는다. 주치의가 유용하거나 필요하다고 생각하는 모든 가능한 투여 경로는 본 발명의 범위 내에 있다. 예를 들어, 화합물은 경구, 직장, 비강, 국소, 피내, 에어로졸로서, 질, 또는 비경구, 예컨대 근육내, 정맥내, 피하, 동맥내 또는 심장내로 투여될 수 있다. 화합물이 경구로 투여되는 것이 바람직하다. 경구 투여를 위한 투여 형태는 코팅정 및 비코팅정, 연질 젤라틴 캡슐, 경질 젤라틴 캡슐, 로젠지, 트로키, 용액, 에멀젼, 현탁액, 시럽, 엘릭시르, 재구성을 위한 분말 및 과립, 분산가능한 분말 및 과립, 약용 검, 츄잉 정제 및 발포성 정제를 포함한다. 비경구 투여를 위한 투여 형태는 용액, 에멀젼, 현탁액, 분산액 및 재구성을 위한 분말 및 과립을 포함한다. 직장 및 질 투여를 위한 투여 형태는 좌제 및 오뷸제를 포함한다. 비강 투여를 위한 투여 형태는 흡입 및 취입을 통해, 예를 들어 계량 흡입기에 의해 투여될 수 있다. 국소 투여를 위한 투여 형태는 크림, 겔, 연고, 고약, 패치 및 경피 전달 시스템을 포함한다. 그러나, 본 발명에서 화합물이 경구로 투여되는 것이 바람직하다. 본 발명에서 화합물은 단일 용량으로서 제공되는 것으로 구상된다.

상기 나타낸 바와 같이, 특히 상기 (i) 및 (ii)(a) 하에 정의된 바와 같은 환자의 경우, 본 발명에서 사용되는 화합물은 현탁액을 위한 과립의 형태이고, 단일 경구 용량으로서, 또는 비위관을 통해 투여되는 단일 용량으로서 투여되는 것이 바람직하다. 예를 들어, 상기 기재된 바와 같은 발록사비르 마르복실을 포함하는 과립은 물로 재구성되어 현탁액에 원하는 용량을 제공할 수 있다. 환자가 ≥ 1세 및 < 12세이고 20 kg 이상의 체중을 갖는 경우 (즉, 상기 (ii)(b)에 정의된 바와 같은 환자), 본원에서 사용되는 화합물의 유효량은 35-45 mg, 바람직하게는 약 40 mg이다. 이들 환자의 경우, 단일 경구 용량으로서 2개의 20 mg 정제 또는 1개의 40 mg 정제의 투여가 바람직하다.

아동은 일반적으로 약 3 내지 8세, 대부분 5 내지 6세의 연령에서 20 kg에 도달한다. 따라서, 본 발명의 맥락에서 상기 (ii)(a)에 정의된 바와 같은 환자 (즉, ≥1세 및 <12세이고 <20 kg의 체중을 갖는 환자)는 1 내지 8세, 예를 들어 1 내지 6세의 연령을 가질 수 있다. 예를 들어, 상기 (ii)(a) 하에 정의된 바와 같은 환자는 1세 이상 5세 미만일 수 있다. 1세 아동은 일반적으로 7 내지 13 kg의 체중을 갖는다. 따라서, (ii)(a)에 정의된 바와 같은 환자는 약 7 kg 이상, 예를 들어 약 11 kg 이상의 체중을 가질 수 있다.

본 발명에서 상기 (ii)(b) 하에 정의된 바와 같은 환자 (즉, ≥1세 및 <12세이고 ≥20 kg의 체중을 갖는 환자)는 5세 이상 12세 미만일 수 있다. 추가로 또는 대안적으로, 상기 (ii)(b) 하에 정의된 바와 같은 환자는 40 kg 미만인 체중을 가질 수 있다. 본 발명에 따라 1세 이상 12세 미만이고 20 kg 이상의 체중을 갖는 환자는 35-45 mg, 바람직하게는 약 40 mg인 본 발명에서 사용되는 화합물의 유효량으로 투여된다. 화합물은 1 mg/kg 체중 초과 (예를 들어 1.5-2 mg/kg 체중)의 양으로 이 환자에게 투여되는 것이 바람직하다.

본 발명에 따라 소아 환자, 특히 비-아시아인 (예를 들어 백인, 예컨대 코카시안) 소아 환자에 대한 발록사비르 마르복실의 최적 용량을 찾기 위해 포괄적인 시뮬레이션이 수행되었다. 이 시뮬레이션은 특히 25 kg 미만의 체중을 갖는 소아에서 투약 후 최대 72시간까지의 약물 수준 뿐만 아니라 총 약물 노출 둘 다의 관점에서 본 발명의 레지멘이 성인 약물 노출과 최적으로 매치함을 보여준다. 따라서, 상기 항목 (ii)(b)에 정의된 바와 같은 환자 (즉, 20 kg 이상의 체중을 갖는 환자)는 바람직하게는 25 kg 미만인 체중을 갖는다.

본 발명에서 환자는 인플루엔자 바이러스 감염을 제외하고는 건강할 수 있다. 인플루엔자 바이러스는 바이러스 산성 중합효소 (PA) 유전자, 바이러스 염기성 중합효소 1 (PB1) 유전자, 및 바이러스 염기성 중합효소 2 (PB2) 유전자로부터 선택된 유전자 중 적어도 하나에 치환을 갖지 않을 수 있다. 예를 들어, 인플루엔자 바이러스는 이들 모든 유전자에 치환을 갖지 않을 수 있다. 본 발명의 바람직한 측면에서, 인플루엔자 바이러스 균주는 바이러스 산성 중합효소 (PA) 단백질에 I38X 돌연변이, 예컨대 I38T 돌연변이를 보유하지 않는다. I38T 돌연변이는 일반적으로 관련 기술분야에 공지되어 있으며, 예를 들어 문헌 [Omoto, Scientific reports 8.1 (2018): 9633]에 기재되어 있다. 그러므로, 인플루엔자 바이러스 균주는 바이러스 산성 중합효소 (PA) 단백질에 I38T 돌연변이를 보유하지 않는 것이 바람직하다. I38T 치환은 일부 돌연변이된 인플루엔자 A 균주의 바이러스 산성 중합효소 (PA) 단백질의 돌연변이이다. I38T 돌연변이를 갖는 인플루엔자 A 바이러스의 PA 단백질의 서열은 서열식별번호: 1에 표시된다. 그러므로, 본 발명의 바람직한 측면에서 인플루엔자 바이러스 균주는 서열식별번호: 1의 서열을 갖는 PA 단백질을 포함하지 않는다. 인플루엔자 바이러스 균주는 서열식별번호(SEQ ID NO): 1의 서열과 적어도 80%, 바람직하게는 적어도 90%, 보다 바람직하게는 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 서열 동일성을 갖는 서열을 갖고 서열식별번호: 1의 위치 I38에 상응하는 위치에 치환 (예를 들어 I의 T로의 치환)을 포함하는 PA 단백질을 포함하지 않는 것이 또한 바람직하다. I38T 돌연변이를 포함하는 인플루엔자 A 바이러스의 PA 단백질의 분획은 서열식별번호: 2에 표시된다. 그러므로, 본 발명의 바람직한 측면에서 인플루엔자 바이러스 균주는 서열식별번호: 2에 표시낸 바와 같은 서열을 포함하는 PA 단백질을 포함하지 않는다.

본 발명의 한 측면에서 인플루엔자 바이러스가 검출될 수 있는 경우 인플루엔자 바이러스 감염이 존재한다. 인플루엔자 바이러스는 PCR을 통해 검출될 수 있다. 추가로 또는 대안적으로 인플루엔자 바이러스는 인플루엔자 테스트 키트를 사용함으로써 검출될 수 있다. 호흡기 분비물에서 바이러스 항원의 면역학적 검출에 기초하여 신속한 인플루엔자 진단 테스트 (RIDT)는 포인트 오브 케어 (현장) 테스트에 30분 이내에 이용가능한 결과를 제공한다. 그러므로, RIDT는 인플루엔자 바이러스를 검출하는데 사용될 수 있다. RIDT는 인플루엔자 A 또는 B 바이러스 핵단백질 항원의 존재를 식별하고 그 결과를 적성적 방식 (양성 대 음성)으로 표시할 수 있다 (Ali T, Clin Infect Dis. 2004 Mar 1;38(5):760-2). RIDT 검정은 ELISA 기반 검정이며, 이는 PCR보다 정확도는 더 낮지만, 더 저렴하고 더 빠르다는 장점을 갖는다.

인플루엔자 바이러스 감염은 로슈 코바스(cobas)® 리앗(Liat)® 포인트 오브 케어 (POC) 중합효소 연쇄 반응 (PCR) 시스템을 사용함으로써 추가로 검출될 수 있다 (Chen, Eur J Microbiol Immunol (Bp). 2015;5(4):236-245). 코바스® 리앗® 시스템은 인플루엔자 A 또는 B 비인두 면봉 표본의 신속하고 정확한 진단을 가능하게 한다. 시스템은 코바스® 리앗® 분석기 및 코바스® 인플루엔자 A/B 검정을 포함한다. 인플루엔자 바이러스의 검출은 또한 PCR-기반 분자 테스트 (Prodesse ProFlu+ assay, Chen, Eur J Microbiol Immunol (Bp). 2015;5(4):236-245) 또는 엘리어(Alere) i 인플루엔자 A & B 래피드 PCR 시스템 (Merckx, Ann Intern Med. 2017;167(6):394-409)을 사용함으로써 수행될 수 있다.

인플루엔자 바이러스 감염은 또한 배양 세포주에 임상 표본의 접종을 포함하는 바이러스 배양 기술에 의해 검출될 수 있다. 이 방법을 사용함으로써, 접종 3일 이내에 양성 배양물의 90% 이상이 검출될 수 있다 (Newton, Journal of clinical microbiology 40.11 (2002): 4353-4356). 인플루엔자 바이러스 감염은 또한 분자 진단 테스트를 통해 검출될 수 있으며, 이는 세포 배양보다 더 큰 민감도를 달성하기 위해 임상 표본에서 바이러스 핵산의 검출을 사용하고 또한 생존력을 상실한 샘플에서 바이러스의 검출을 허용한다.

상기 나타낸 바와 같이, 인플루엔자 바이러스 감염은 중합효소 연쇄 반응 (PCR) 검정을 통해 검출될 수 있으며, 이는 바이러스의 신속한 서브타이핑에 추가하여 정성적 및 정량적 평가 둘 다를 허용한다. 인플루엔자 바이러스의 PCR 검출 및 정량화는 일반적으로 관련 기술분야에 공지되어 있다. 예를 들어, 인플루엔자 매트릭스 유전자의 실시간 역전사 PCR (RT-PCR) 증폭은 인플루엔자 RNA의 존재 또는 부재, 또는 양을 결정하는 방법으로 사용될 수 있다. 인플루엔자 바이러스 RNA 추출 및 정제는 일상적인 기술이고, 예를 들어 MagNA 퓨어 LC 1.0 또는 2.0 단리 스테이션 (로슈 어플라이드 사이언스(Roche Applied Science), 제품 # 05197686001)을 사용함으로써 수행될 수 있다. 테스트를 수행하기 위해, 제조업체의 지침 (로슈 어플라이드 사이언스)에 따라 MagNA 퓨어 LC 단리 스테이션 및 MagNA 퓨어 LC 핵산 추출 키트를 사용하여 면봉 표본 분취액으로부터 핵산을 추출한다. 역전사 및 증폭 반응은 태크만(Taqman) 패스트 바이러스 마스터믹스를 사용하여 설정될 수 있다. 임상 분석 동안, 공지된 바이러스 입자/ml를 사용한 4 포인트 (낮음, 중간 및 높음) 인플루엔자 A 및 B 표준 곡선이 대조군으로 사용될 수 있고, 모든 실행에 동반할 수 있다. 단리로부터 실시간 검출에 이르는 전체 프로세스를 모니터링하기 위해, 범용 내부 대조군인 포신 디스템퍼 바이러스 (PDV)가 각 단리물에 첨가될 수 있다. 또한, 모든 단리에서 오염을 모니터링하기 위해, 만들어진 모든 PCR 믹스에 대해 무증폭 대조군 (NAC)이 포함될 수 있다. 양성 대조군은 명시된 작용 한계 사이에 있는 양성 신호를 제공해야 한다. 양성 대조군의 값이 작용 한계를 벗어나는 경우, 동일한 PCR 믹스로 테스트된 모든 샘플을 재테스트할 필요가 있다. 음성 대조군이 인플루엔자에 대한 양성 신호를 제공하는 경우, 동일한 PCR 믹스를 사용한 모든 샘플 실행을 재테스트할 필요가 있다. 인플루엔자 RT-PCR 검정의 출력은 사이클 임계값 또는 Ct 값으로 공지된 것이고, 각 테스트에 대해 Ct 값이 기록된다. Ct 값은 샘플과 공동으로 실행된 표준 곡선을 사용하여 정량적 바이러스 입자/ml 값으로 전환된다.

인플루엔자 A 양성 대상체의 경우, 인플루엔자 A 서브타입 PCR 검정이 또한 수행될 수 있다. 보다 구체적으로, 인플루엔자 A 양성 대상체의 경우, 실시간 RT-PCR 검정을 사용하여 대상체의 면봉 샘플로부터 직접 서브타이핑이 수행될 수 있다. RNA는 로슈 MagNA 퓨어 총 핵산 키트를 사용하여 상기 기재된 바와 같이 임상 단리물로부터 단리될 수 있고, 인플루엔자 A-서브타입 특이적 프라이머와 함께 1-단계 RT-PCR을 사용하여 증폭될 수 있다. 적합한 프라이머 서열을 포함하는 특정 인플루엔자 바이러스 서브타입의 검출을 위한 추가 방법은 일반적으로 관련 기술분야에 공지되어 있고, 예를 들어 2017년 7월호 "인플루엔자 바이러스의 분자 검출에 대한 WHO 정보"에 기재되어 있다.

혈청학적 테스트, 예컨대 보체 고정 및 혈구응집 억제는 인플루엔자 바이러스 감염의 진단을 후향적으로 확립하는데 사용될 수 있다. 개체는 이전에 인플루엔자 바이러스에 감염되었을 수 있기 때문에, 급성 혈청 표본 및 28일 후에 수득된 회복기 혈청 표본으로 이루어진 쌍체 혈청 표본이 테스트에 사용될 수 있다.

대부분의 인플루엔자 사례는 양립가능한 임상 증상 및 계절 역학에 기초하여 진단된다. 그러므로, 인플루엔자의 적어도 하나의 증상의 존재는 또한 인플루엔자 바이러스 감염이 존재함을 나타낸다. 따라서, 본 발명에 따라 환자는 인플루엔자 바이러스 감염을 갖는 것으로 진단될 수 있다:

(i) 38℃ 이상의 열 (고막 체온); 및 적어도 하나의 호흡기 증상, 바람직하게는 기침 및/또는 비충혈의 존재로 인해; 및/또는

(ii) 인플루엔자 테스트 키트를 사용함으로써.

인플루엔자 바이러스는 열, 기침, 피로, 두통 및 근육 통증의 갑작스러운 발병을 특징으로 하는 호흡기관의 급성 열성 감염을 유발한다. 인플루엔자 질환의 주요 임상 증상은 본질적으로 성인 및 아동 사이에서 공통적이며, 신속한 발병 열 및 기침, 일반적으로 바이러스 복제의 직접적인 결과로 간주되는 증상 및 바이러스 복제에 대한 숙주 면역 반응 (특히 선천적)을 특징으로 한다. 독감의 주요 증상 외에도, 위장 증상, 예컨대 구토 및/또는 설사 (Minodier, Virology journal 12.1 (2015): 215)는 성인, 및 아동, 특히 <5세의 아동보다 영아 및 어린 아동에서 더 흔할 수 있고, 성인보다 더 높은 최대 체온 및 더 높은 입원율을 가질 수 있다 (Paules and Subbarao, 2017, Rotrosen and Neuzil, 2017). 예를 들어, 어린 아동은 일반적으로 39.5℃ 이상의 체온을 갖고, 열성 경련 (발작)을 가질 수 있다.

본 발명의 한 측면에서 특색 둘 다가 적용되는 경우, 즉 인플루엔자 바이러스가 검출될 수 있고, 인플루엔자 바이러스 감염의 적어도 하나의 증상이 존재하는 경우, 인플루엔자 바이러스 감염이 존재한다. 인플루엔자 바이러스 감염의 상기 적어도 하나의 증상은 열, 기침, 피로, 두통 및 근육 통증의 갑작스러운 발병일 수 있다. 증상은 오한, 인후통 및/또는 비충혈을 추가로 포함할 수 있다. 증상은 또한 위장 증상을 포함할 수 있다. 인플루엔자의 진단은 또한 인플루엔자 증상의 발병으로부터 24시간 이내에 체온이 38℃ 내지 40℃에 도달하는지 여부를 테스트하는 것을 포함할 수 있다 (Wright, Fields Virology. 5th ed. (2). Wolters Kluwer Health/Lippincott Williams & Wilkins; 2007. P. 1691-1740; Monto, Arch Intern Med. 2000;160:3243-3247).

추가로 또는 대안적으로, 인플루엔자의 진단은 하기 모두에 의해 확인될 수 있다:

(a) 투약전 검사에서 또는 해열제를 복용한 경우 해열제 투약 후 >4시간에 열 ≥38℃ (겨드랑이).

(b) 중등도 이상의 중증도를 갖는 인플루엔자와 연관된 하기 일반적인 전신 증상 중 적어도 하나:

(b)-1 두통;

(b)-2 열감 또는 오한;

(b)-3 근육 또는 관절 통증;

(b)-4 피로.

(c) 중등도 이상의 중증도를 갖는 인플루엔자와 연관된 하기 호흡기 증상 중 적어도 하나:

(c)-1 기침;

(c)-2 인후통;

(c)-3 비충혈.

(c)-4 POC PCR 테스트에 의해 확인된 인플루엔자 A 또는 B 감염.

3가지 유형의 인플루엔자 바이러스: A, B 및 C가 있다. 유형 A 및 B는 거의 매년 인플루엔자 질병의 광범위한 발병을 유발한다. 인플루엔자 C는 사망률이 거의 또는 전혀 없는 산발성, 종종 무증상 감염과 연관되고, 따라서 공중 보건 문제가 아니다. 본 발명에 따라 인플루엔자 바이러스는 인플루엔자 A 바이러스 또는 인플루엔자 B 바이러스일 수 있다. 예를 들어, 인플루엔자 바이러스는 유형 A 인플루엔자 바이러스일 수 있다. 그러나, 인플루엔자 바이러스 감염은 또한 인플루엔자 A 바이러스 뿐만 아니라 인플루엔자 B 바이러스를 포함하는 혼합 감염일 수 있다.

본원에 제공된 수단 및 방법은 인플루엔자 바이러스 균주가 본 발명에서 사용되는 화합물에 대한 내성을 갖지 않는 경우 특히 유리하다. 그러나, 인플루엔자 바이러스 균주는 다른 항바이러스 약물 (예컨대 페라미비르, 라니나미비르, 오셀타미비르, 자나미비르, 리만타딘, 우미페노비르 또는 아만타딘)에 대한 내성을 가질 수 있다. 주어진 바이러스가 하나 이상의 약물에 대한 내성을 갖는지 여부를 결정하기 위한 테스트는 일반적으로 관련 기술분야에 공지되어 있고, 예를 들어, 표현형 내성 검정 및 NA-Star 검정을 포함하며, 이들은 둘 다 하기 기재되어 있다.

표현형 내성 검정은 하기 기재된 바와 같이 수행될 수 있다: 표현형 내성 검정 (스팟/초점 감소 검정)은 멀티-웰 미세역가 플레이트에서 고전적인 바이러스 배양 및 자동화된 영상화를 사용한 바이러스-특이적 면역염색, 바이오스팟(Biospot) 분석 소프트웨어가 장착된 CTL 이뮤노스팟(Immunospot) UV 분석기를 사용한 감염된 세포의 검출을 조합하는 민감한 바이로스팟(Virospot) 검출 기술을 사용함으로써 수행될 수 있다. 바이로스팟 기술 플랫폼은 IC₅₀/IC₉₀을 측정하는 항바이러스 약물에 대한 바이러스 단리물의 민감도를 결정한다. 간단히 말해서, 방법은 약물 농도 범위의 존재 하에 96-웰 플레이트의 MDCK 세포 단층에 감염성 바이러스의 접종에 기초한다. 인큐베이션 후 세포를 고정하고, 바이러스-특이적 항체로 면역염색한 후, 트루블루(TrueBlue) 기질 및 UV 분석기를 사용한 영상 캡처를 수행한다.

NA-Star 검정은 뉴라미니다제 억제제 (예컨대, 예를 들어 오셀타미비르)에 대한 표현형 내성을 결정하는데 특히 유용하며, 하기와 같이 수행될 수 있다: 이 검정은 뉴라미니다제 효소 활성의 고도로 민감한 검출을 위해 화학발광성 기질을 사용한다. 뉴라미니다제 활성은 판독기를 사용함으로써 정량화되는 발광성 화합물을 생성한다. 바이러스 뉴라미니다제 활성은 뉴라미니다제 억제제의 연속 희석액의 존재 하에 결정된다. 뉴라미니다제 억제제에 대한 민감도는 IC₅₀/IC₉₀ 값으로 표현된다.

본 발명의 바람직한 측면에서 화합물은 증상 발병 시점으로부터 96시간 이내에, 바람직하게는 증상 발병 시점으로부터 48시간 이내에 투여된다. 예를 들어, 상기 항목 (i) 하에 정의된 바와 같은 환자 (즉, <1세의 환자)에서 화합물은 증상 발병 시점으로부터 96시간 이내에 투여될 수 있다. 상기 항목 (ii) 하에 정의된 바와 같은 환자 (즉, 1세 내지 <12세인 환자)에서 화합물은 증상 발병 시점으로부터 48시간 이내에 투여될 수 있다. 증상 발병은 적어도 하나의 전신 증상 및/또는 적어도 하나의 호흡기 증상의 발병 시점일 수 있다. 상기 적어도 하나의 전신 증상은 두통, 열감, 오한, 근육 통증, 관절 통증 및 피로로부터 선택된 적어도 하나의 증상일 수 있다. 상기 증상(들)은 환자, 부모 또는 간병인에 의해 인지될 수 있다. 상기 적어도 하나의 호흡기 증상은 기침, 인후통 및 비충혈로부터 선택된 적어도 하나의 증상일 수 있다. 바람직하게는, 상기 시점으로부터 24시간 이내에 체온이 38℃ 내지 40℃ 이상에 도달함을 검증함으로써 인플루엔자 증상의 발병 시점을 확인한다.

본 발명에서 사용되는 화합물의 투여 후, 화학식 (II)의 화합물의 혈장 농도는 T0831 연구에서 40 mg의 용량에서 비-아시아인 성인 환자 집단에서 달성된 것과 유사한 노출, 즉 AUC=3371 ng.h/mL, C_max= 56.9 ng/ml 및 C₂₄=33.1 ng/mL을 유발할 수 있다. 본 발명에서 사용되는 화합물의 투여는 바람직하게는 화합물이 투여되지 않은 비치료된 환자와 비교하여 치료된 환자의 인플루엔자 바이러스 감염으로부터의 가속화된 회복을 유발한다. 또는, 달리 말하면, 바람직하게는 본 발명에서 사용되는 화합물이 투여된 치료된 환자는 화합물이 투여되지 않은 비치료된 환자와 비교하여 회복까지의 감소된 시간을 갖는다. 본원에서 용어 "비치료된 환자"는 상기 환자가 본 발명에서 사용되는 화합물을 투여받지 않은, 즉 화학식 (I) 또는 (II)를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여받지 않은 것을 의미한다. 그러나, 상기 "비치료된 환자"는 또 다른 의약, 예를 들어 또 다른 항바이러스 약물을 투여받았을 수 있거나 투여받지 않았을 수 있다. 예를 들어, 본 발명에서 비치료된 환자는 오셀타미비르를 투여받았을 수 있다. 한 예에서 본 발명에서 사용되는 화합물을 투여받는 환자는 1세 이상 12세 미만이고, 비치료된 환자는 오셀타미비르를 투여받았다. 오셀타미비르의 치료 레지멘은 일반적으로 관련 기술분야에 공지되어 있다. 예를 들어, 오셀타미비르는 5일 동안 1일 2회 투여될 수 있다. 오셀타미비르에 대한 적절한 용량은 체중에 기초하며, 일반적으로 관련 기술분야에 공지되어 있다. 본원에서 사용되는 화합물은 오셀타미비르 투여와 비교하여 더 나은 치료 효과를 유발하는 것이 본 발명에서 바람직하다.

화합물이 투여된 치료된 환자는 바람직하게는 화합물이 투여되지 않은 비치료된 환자와 비교하여 감소된 바이러스학적 활성을 갖는다. 예를 들어, 기준선으로부터 바이러스 역가의 변화가 적어도 -4.20 log₁₀ (TCID₅₀/mL)이고/거나, 기준선으로부터 바이러스 RNA 양의 변화가 2일차 (즉, 0일차에 투여되는 본원에서 사용되는 화합물의 투여 2일 후)에 적어도 -1.75 log₁₀ (바이러스 입자/mL)인 것이 바람직하다.

예를 들어, 바이러스학적 활성은 본 발명에서 사용되는 화합물의 투여 후 86시간 이내에 치료된 환자에서 감소될 수 있고, 적어도 21.5시간 동안 감소된 상태를 유지할 수 있다. 바이러스학적 활성의 측정은 일반적으로 관련 기술분야에 공지되어 있다. 예를 들어, 바이러스학적 활성은 하기에 의해 측정될 수 있다:

(a) 바이러스 배출 중단까지의 시간의 결정;

(b) 인플루엔자 바이러스 역가의 결정; 및/또는

(c) 바이러스 RNA 양의 결정.

이와 관련하여, 인플루엔자 바이러스 배출의 지속기간은 증상 발병 후 배출 중단까지의 시간으로 측정될 수 있다. 바이러스 RNA 양은 역전사효소-중합효소 연쇄 반응 (RT-PCR)을 사용함으로써 측정될 수 있다. 바이러스 역가는 하기 방식으로 측정될 수 있다.

(1) 평평한-바닥 96-웰 마이크로플레이트에 시딩된 MDCK-SIAT1 세포를 5% CO₂ 인큐베이터에서 37±1℃에서 1일 동안 배양한다.

(2) 표준 균주 (예를 들어 인플루엔자 바이러스 AH3N2, A/Victoria/361/2011, 저장 조건: -80℃, 기원: 국립 감염병 연구소), 샘플 (환자로부터 수집되고 극저온 냉동고에 저장됨), 및 세포 대조군을 위한 배지를 10배 연속 희석 방법에 의해 101 내지 107배 희석한다.

(3) 시트 형태로 존재하는 세포를 도립 현미경 하에 확인한 후, 배지를 제거하고, 새로운 배지를 100 μL/웰로 첨가한다.

(4) 배지를 제거한다.

(5) 상기 (2)에서 제조된 샘플 (101 내지 107) 각각을 샘플당 4개의 웰을 사용하여 100 μL/웰로 접종한다.

(6) 원심분리 흡착을 실온에서 1000 rpm에서 30분 동안 수행한다.

(7) 원심분리 후, 배지를 제거하고, 세포를 새로운 배지로 1회 세척한다.

(8) 새로운 배지를 100 μL/웰로 첨가한다.

(9) 인큐베이션을 5% CO₂ 인큐베이터에서 33±1℃에서 3일 동안 수행한다.

(10) 인큐베이션 후, 세포병변 효과 (CPE)를 도립 현미경 하에 평가한다.

본 발명에서 사용되는 화합물은 화합물이 투여되지 않은 비치료된 환자와 비교하여 인플루엔자 징후 및 증상의 경감까지의 시간 (TASS)을 적어도 6시간만큼, 바람직하게는 적어도 약 12시간만큼 (예를 들어 약 24시간 이상 만큼) 감소시키는 것이 바람직하다. 보다 구체적으로, 화합물은 바람직하게는 이들의 각각의 위약에 비해 (또는 비치료된 환자에 비해) TASS를 적어도 6시간만큼, 바람직하게는 적어도 약 12시간만큼 (예를 들어 약 24시간 이상 만큼) 감소시킨다. 이에 따라, 인플루엔자 바이러스 감염의 진단으로부터 회복까지의 시간은 화합물이 투여되지 않은 비치료된 환자와 비교하여 화합물이 투여된 치료된 환자에서 감소되는 것이 바람직하다. 이와 관련하여 환자는 하기 회복 기준 중 적어도 하나가 충족되고 적어도 21.5시간 동안 충족된 상태로 유지될 때 회복된 것으로 분류될 수 있다:

(a) 무열성 상태 (고막 체온 ≤ 37.2℃)로의 복귀;

(b) 캐나다 급성 호흡기 질병 및 독감 척도 (CARIFS)의 항목 14 및 15에 명시된 바와 같은 기침 및 코 증상에 대해 0 (문제 없음) 또는 1 (사소한 문제)의 스코어, 바람직하게는 (CARIFS)에 명시된 모든 18개 증상에 대해 0 (문제 없음) 또는 1 (사소한 문제)의 스코어;

(c) 바이러스 배출의 중단; 및/또는

(d) 정상적인 건강 및 활동으로의 복귀.

캐나다 급성 호흡기 질병 및 독감 척도 (CARIFS)는 본 발명에서 사용되는 화합물 (예를 들어 발록사비르 마르복실)의 치료 이점을 식별하는데 사용될 수 있다. CARIFS는 일반적으로 관련 기술분야에 공지되어 있고 도 9에 표시되어 있다. CARIFS는 각각 4-포인트 리커트(Likert) 반응을 갖는 18개의 질문으로 구성된 신뢰할 수 있는 설문지이다. CARIFS 설문지는 환자, 부모, 간병인 및/또는 의사에 의해 완료될 수 있고, 3종의 도메인을 커버한다: 증상 (예를 들어, 기침), 기능 (예를 들어, 놀이), 및 부모의 영향 (예를 들어, 집착). CARIFS는 항목의 합계로서 계산되고, 질병의 지속기간을 측정한다.

환자가 데이케어 또는 학교로 복귀할 수 있고/거나 인플루엔자 바이러스 감염이 발생하기 전에 수행된 바와 동일한 방식으로 정상적인 일상 활동을 재개할 수 있는 경우 정상적인 건강 및 활동으로의 복귀가 달성될 수 있다.

본 발명에서 사용되는 화합물의 투여는 인플루엔자-관련 합병증의 발생을 예방할 수 있다. 상기 인플루엔자-관련 합병증은 방사선학적으로 확인된 폐렴, 기관지염, 부비동염, 중이염, 뇌염/뇌병증, 열성 경련 및 근염으로 이루어진 군으로부터 선택된 합병증 중 적어도 하나일 수 있다. 일반적으로 초기 급성 바이러스 질병과 후속적이거나 부분적으로 중복되는, 아동에서의 인플루엔자의 가장 흔한 합병증은 중이염, 폐렴 (1차 인플루엔자 바이러스성 및 2차 박테리아성 폐렴), 호흡기 실패, 및 경련 (Mistry, Pediatrics 134.3 (2014): e684-e690)이다. 이들 가장 흔한 합병증은 바람직하게는 본 발명에서 사용되는 화합물로 치료되는 환자에서 예방된다. 인플루엔자 바이러스 감염으로 인한 환자의 사망은 화합물의 투여에 의해 예방되는 것으로 추가로 구상된다. 일반적으로, 인플루엔자 감염된 사람은 인플루엔자 감염 자체로 사망하는 것이 아니라 박테리아 중복감염의 발병으로 인해 사망한다. 본원에서 용어 "인플루엔자 바이러스 감염에 의해 유발되는 (환자의) 사망"은 또한 인플루엔자 감염된 사람에서 발생된 박테리아 중복감염에 의해 유발되는 사망을 포함한다.

본 발명의 맥락에서 항생제의 요구는 화합물의 투여에 의해 예방되는 것으로 추가로 구상된다. 일반적으로, 박테리아 중복감염은 항생제의 요구를 유발한다. 그러므로, 본 발명에 따라, 치료된 환자에서 박테리아 중복감염이 예방될 수 있다. 일반적으로 항생제의 요구를 유발하는 또 다른 상태는 천식 발작이다. 본 발명에서 사용되는 화합물의 투여는 또한 치료된 환자의 입원을 예방할 수 있다.

본원에서 상기 및 하기 상세히 기술된 바와 같이, 본 발명에서 사용되는 화합물은 화학식 (I), (II)를 가질 수 있거나, 화학식 (I) 또는 (II)의 화합물의 제약상 허용되는 염일 수 있다. 본 발명의 바람직한 측면에서 화합물은 화학식 (I)을 갖는다. 본 발명에 따라 사용되는 화합물은 다른 항인플루엔자 약물과 조합될 수 있다. 현재 인플루엔자의 예방 및 치료를 위해 EU에서 승인된 4종의 항바이러스 약물은 M2 이온-채널 억제제 아만타딘 및 NAI 오셀타미비르 포스페이트, 자나미비르 및 페라미비르이다. 제2 M2 억제제인 리만타딘은 체코, 프랑스 및 폴란드에서 판매 허가를 받았지만 이들 국가에서는 판매되지 않는다. 따라서, 본 발명에서 사용되는 화합물은 아만타딘, 오셀타미비르 포스페이트, 자나미비르, 페라미비르 및/또는 리만타딘과의 공동-요법으로 투여될 수 있다. 뉴라미니다제 억제제 (NAI)는 인플루엔자 감염 치료의 핵심이다. 따라서, 본 발명에서 사용되는 화합물이 공동-요법으로 투여되는 경우, 이는 바람직하게는 오셀타미비르 포스페이트 또는 자나미비르와 조합된다. 오셀타미비르 포스페이트 및 자나미비르 둘 다는 5일 동안 1일 2회 투여된다.

본 발명에서 치료될 환자는 바람직하게는 인플루엔자 바이러스 감염 이외에 건강하다. 환자는 본 발명에서 사용되는 화합물 이외의 어떠한 의약으로도 치료되지 않는 것이 바람직하다. 예를 들어, 환자는 조사용 요법, 전신 항바이러스 약물 (예를 들어 페라미비르, 라니나미비르, 오셀타미비르, 자나미비르, 리만타딘, 우미페노비르 또는 아만타딘), 면역저해제, 코르티코스테로이드, 항진균 약물, 또는 눈, 코 또는 귀에 투여되거나 흡입에 의해 투여되는 약물로 치료되지 않는 것이 바람직하다. 그러나, 인플루엔자 증상, 예컨대 열 및 두통이 너무 중증이어서 (예를 들어 환자 및/또는 간병인의 견해로) 환자가 통증 치료를 필요로 하는 경우, 본 발명의 맥락에서 사용되는 화합물은 아세트아미노펜 (즉, 파라세타몰)과 조합될 수 있다. 아세트아미노펜은 소아 환자의 연령 및 체중에 적절한 용량으로 투여될 수 있다.

본 발명의 한 측면에서 환자는 하기 배제 기준 중 하나를 충족하지 않는다:

(i) 입원을 요구하는 경우 (예를 들어 인플루엔자의 중증 증상, 인플루엔자의 합병증 또는 유의한 동반질환으로 인해);

(ii) 전신 항바이러스 요법을 요구하는 공동 감염을 갖는 경우;

(iii) 조산아 (< 37주 임신에 출생) 및/또는 스크리닝 시 < 2.5 kg 체중인 경우;

(iv) 스테로이드 또는 다른 면역저해제 요법과의 동반 치료를 수득하는 경우;

(v) HIV 감염 또는 또 다른 면역저해성 장애를 갖는 경우;

(vi) 비제어된 신장, 혈관, 신경계, 또는 대사성 질환 (예를 들어, 당뇨병, 갑상선 장애, 부신 질환), 간염, 간경변 또는 폐 질환을 갖거나 공지된 만성 신부전을 갖는 환자;

(vii) 임의의 부위에 활성 암을 갖는 경우;

(viii) 장기 이식 이력을 갖는 경우;

(ix) 본 발명의 화합물 또는 아세트아미노펜 (파라세타몰로도 공지됨)에 대한 공지된 알레르기를 갖는 경우; 및

(x) 초경 (즉, 가임 가능성)을 시작한 여성인 경우.

용어 "인플루엔자 바이러스 감염" 또는 그의 변형의 의미는 일반적으로 관련 기술분야에 공지되어 있으며, 인플루엔자 바이러스에 의해 유발되는 질환을 지칭한다. 보다 구체적으로, 인플루엔자 바이러스 감염은 오르토믹소바이러스과의 바이러스에 의해 유발되는 급성 호흡기 감염성 질환이다. 2가지 형태, 인플루엔자 A 바이러스 및 인플루엔자 B 바이러스가 주로 인간을 감염시키고 인간에서 질환을 유발하는 것으로 공지되어 있다. 인플루엔자 바이러스는 분절된, 음성-센스, 단일-가닥, 지질 캡슐화된 리보핵산 (RNA) 게놈을 갖고; 크기는 80 내지 100 nm 범위이다. 서브타입은 바이러스 지질 코트에 존재하는 헤마글루티닌 (HA) 및 뉴라미니다제 (NA) 당단백질에 따라 정의된다. 인플루엔자 바이러스는 세포막의 시알산-함유 수용체에 대한 바이러스 HA의 부착, 이어서 바이러스의 산성 엔도솜으로의 내재화에 의해 호흡기 상피 세포에 진입한다. 엔도솜의 산성 환경에서, HA는 융합 펩티드를 해방하고 바이러스 외피와 엔도솜 막의 융합을 초래하는 형태적 변화를 겪는다. 동시에, 매트릭스-2 (M2) 단백질은 수소 이온이 엔도솜으로부터 비리온에 진입하는 것을 허용하는 이온 채널로서 작용한다. 이는 바이러스 유전자 세그먼트가 비리온을 떠나 세포질에 진입하는 것을 허용하며, 이 과정은 탈코팅으로 공지되어 있다. 바이러스 유전자 세그먼트는 핵으로 수송되며, 여기서 단백질 중합효소 염기성 단백질 1 (PB1), 중합효소 염기성 단백질 2 (PB2), 및 중합효소 산성 단백질 (PA)로 구성된 바이러스 중합효소 복합체는 +-센스 메신저 RNA (mRNA)의 합성, 뿐만 아니라 +-센스 전장 상보적 RNA를 통해 자손 게놈 RNA로 작용할 음성-센스 전장 카피의 합성을 지시한다. 중합효소 단백질은 또한 숙주 세포 단백질 합성을 방해하는 역할을 한다. 자손 비리온의 어셈블리는 원형질막에서 발생하고, 바이러스 NA 단백질은 표면 시알산의 절단에 의해 세포 표면으로부터 바이러스를 방출하는 역할을 한다.

본 발명에서 사용되는 "화합물"은 하기 화학식 I 및 II 중 하나를 갖는 화합물:

또는 그의 제약상 허용되는 염 (즉, 화학식 (I) 또는 (II)를 갖는 화합물)이다. 본 발명에서 사용되는 화합물은 또한 본원에서 "화합물", "사용하기 위한 화합물", "(본원에서/본 발명에서) 사용되는 화합물" 또는 "본 발명의 화합물"로 지칭된다.

본 발명에서 사용되는 화합물은 바이러스 mRNA 전사를 위한 프라이머로 사용되는 숙주 세포 mRNA로부터 5' cap 구조를 절단하는데 사용되는 인플루엔자 중합효소의 PA 서브유닛의 'cap-탈취' 기능을 억제하는 선택적 cap-의존적 엔도뉴클레아제 (CEN) 억제제로 작용한다. 본원에서 사용된 바와 같은 화합물은 이러한 필수 기능을 억제함으로써 인플루엔자 바이러스의 복제를 저해한다.

본 발명에서 사용되는 화합물은 계절성 (예를 들어 A/H1N1, A/H3N2, 및 B) 및 고병원성 조류 (예를 들어 A/H5N1, A/H7N9) 인플루엔자 바이러스에 대해 광범위한 스펙트럼의 활성을 가지며, 다른 일반적인 항인플루엔자 약물, 예컨대 오셀타미비르, 자나미비르 또는 페라미비르와 비교하여 보다 강력한 항바이러스 활성 (하반부 최대 억제 농도 [IC₅₀])을 갖는다. 단일 용량 투여로 효능있는 화합물의 능력은 뉴라미니다제 억제제 (NAI)와 비교하여 치료를 단순화하고 환자 순응도를 개선한다. 바람직하게는, 화합물은 (I) 또는 (II), 가장 바람직하게는 (I)의 화학식을 갖는다. 화학식 (I)의 화합물은 또한 하기와 같이 표시될 수 있다:

이 화합물 (즉, 화학식 (I)의 화합물)은 C₂₇H₂₃F₂N₃O₇S의 분자식을 갖는다. 이 화합물은 발록사비르 마르복실로 공지된 전구약물이다. 발록사비르 마르복실은 관련 기술분야에 공지되어 있으며, 예를 들어 문헌 [Noshi, Antiviral research 160 (2018): 109-117]에 기재되어 있다.

발록사비르 마르복실 (즉, 화학식 (I)의 화합물)은 신규 작용 메커니즘을 갖는 항인플루엔자 바이러스 약물이다. 이는 시오노기 앤드 캄파니, 리미티드 및 에프. 호르만-라 로슈, 리미티드 (F. Hoffman-La Roche, Ltd.)에 의해 발견되어 개발 중이다. 발록사비르 마르복실 (S-033188)은 전구약물이며, 대사 (가수분해)를 통해 활성 형태 발록사비르 (S-033447)로 전환된다. 활성 형태는 본원에서 화학식 (II)로 표시된다. 활성 형태 발록사비르 (S-033447)는 인플루엔자 바이러스의 복제에 필요한 cap-의존적 엔도뉴클레아제 (CEN) 활성을 선택적으로 억제한다 (Omoto, Sci Rep. 2018; 8(1):9633). 계절성 인플루엔자 바이러스에 대한 광범위한 활성 스펙트럼 및 인플루엔자 증상을 경감시키는 효과는 비임상 효능 연구, 및 2상 개념 증명 및 용량-결정 연구, 달리 건강한 환자에서 3상 이중-맹검 연구 (Portsmouth S, Kawaguchi K, Arai M, Tsuchiya K, Uehara T. Cap-dependent endonuclease inhibitor baloxavir marboxil (S-033188) for the treatment of influenza: results from a phase 3, randomized, double-blind, placebo- and active-controlled study in otherwise healthy adolescents and adults with seasonal influenza. Abstract LB-2. Oral presentation at ID Week 2017, October 4-8 2017, San Diego, CA, USA.), 및 달리 건강한 소아 환자에서 3상 공개-라벨 연구를 포함한 인플루엔자를 갖는 환자에서 임상 연구에 나타내었다.

화학식 (II)에 나타낸 바와 같은 화합물은 발록사비르 마르복실 (즉, 화학식 (I)의 전구약물)의 활성 형태이다. 화학식 (I)의 화합물은 또한 하기와 같이 표시될 수 있다:

화학식 (II)의 화합물은 발록사비르 또는 발록사비르 산으로도 공지되어 있다. 발록사비르 산은 관련 기술분야에 공지되어 있으며, 예를 들어 문헌 [Noshi, Antiviral research 160 (2018): 109-117]에 기재되어 있다.

본 발명에서 사용되는 화합물의 제약상 허용되는 염은 예를 들어, 알칼리 금속 (예를 들어, 리튬, 나트륨, 칼륨 등), 알칼리 토금속 (예를 들어, 칼슘, 바륨 등), 마그네슘, 전이 금속 (예를 들어, 아연, 철 등), 암모니아, 유기 염기 (예를 들어, 트리메틸아민, 트리에틸아민, 디시클로헥실아민, 에탄올아민, 디에탄올아민, 트리에탄올아민, 메글루민, 에틸렌디아민, 피리딘, 피콜린, 퀴놀린 등) 또는 아미노산과의 염, 또는 무기산 (예를 들어, 염산, 황산, 질산, 탄산, 브로민화수소산, 인산, 아이오딘화수소산 등) 또는 유기산 (예를 들어, 포름산, 아세트산, 프로피온산, 트리플루오로아세트산, 시트르산, 락트산, 타르타르산, 옥살산, 말레산, 푸마르산, 만델산, 글루타르산, 말산, 벤조산, 프탈산, 아스코르브산, 벤젠술폰산, p-톨루엔술폰산, 메탄술폰산, 에탄술폰산 등)과의 염을 포함한다. 특히, 나트륨, 칼륨, 칼슘, 마그네슘, 철 등과의 염이 포함된다. 이들 염은 일반적인 방법에 의해 형성될 수 있다.

본 발명의 화합물의 제조는 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다. 예를 들어, 본 발명의 화합물은 WO 2016/175224A1로 공개된 특허 출원 PCT/JP2016/063139에 기재된 방법으로 제조될 수 있다.

상기 언급된 바와 같이, 본 발명에 따라, 인플루엔자 바이러스 균주는 서열식별번호: 1의 서열과 적어도 80%, 바람직하게는 적어도 90%, 보다 바람직하게는 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 서열 동일성을 갖는 서열을 갖고 서열식별번호: 1의 위치 I38에 상응하는 위치에 치환 (예를 들어 I의 T로의 치환)을 포함하는 PA 단백질을 포함하지 않는 것이 바람직하다. 특히, 2개의 바이러스 PA 단백질 사이의 동일성 정도를 평가하기 위해 바이러스 PA 단백질의 2개의 서열의 FASTA 서열이 생성 및 정렬될 수 있다. 2개의 서열의 퍼센트 동일성을 결정하기 위해, 서열은 최적 비교 목적을 위해 정렬된다 (예를 들어, 최적 정렬을 위해 제1 및 제2 아미노산 서열 중 하나 또는 둘 다에 갭이 도입될 수 있고, 비교 목적을 위해 비-상동성 서열이 무시될 수 있음). 2개의 서열 간의 퍼센트 동일성은 2개의 서열의 최적 정렬을 위해 도입될 필요가 있는 갭의 수 및 각 갭의 길이를 고려하여 서열에 의해 공유되는 동일한 위치의 수의 함수이다. 2개의 폴리펩티드/아미노산 서열 간의 퍼센트 동일성은 예를 들어, 공개적으로 이용가능한 컴퓨터 소프트웨어, 예컨대 스미스 워터만(Smith Waterman) 정렬 (Smith, T. F. 및 M. S. Waterman (1981) J Mol Biol 147:195-7); 문헌 [GeneMatcher Plus™, Schwarz and Dayhof (1979), Atlas of Protein Sequence and Structure, Dayhof, M.O., Ed, pp 353-358]에 포함된 바와 같은 "베스트핏(BestFit)" (Smith and Waterman, Advances in Applied Mathematics, 482 489 (1981)); BLAST 프로그램 (기본 국소 정렬 검색 도구; (Altschul, S. F., W. Gish, et al. (1990) J Mol Biol 215: 403-10), BLAST-2, BLAST-P, BLAST-N, BLAST-X, WU-BLAST- 2, ALIGN, ALIGN-2, CLUSTAL, 또는 Megalign (DNASTAR) 소프트웨어를 사용하여 통상의 기술자에게 공지된 다양한 방식으로 결정된다. 또한, 관련 기술분야의 통상의 기술자는 비교될 서열의 길이에 걸쳐 최대 정렬을 달성하는데 필요한 임의의 알고리즘을 포함하여 정렬을 측정하기 위한 적절한 파라미터를 결정할 수 있다. 바람직하게는, 바이러스 PA 단백질 서열은 이들의 전체 길이에 걸쳐 비교된다. 본 발명의 목적을 위해, 서열의 비교 및 2개의 서열 간의 퍼센트 동일성의 결정은 블로섬(Blossum) 62 스코어링 행렬 (12의 갭 페널티, 4의 갭 연장 페널티, 및 5의 프레임시프트 갭 페널티)를 사용하여 성취될 수 있다.

상기 기재된 바와 같이, 본 발명은 특히 이들 소아 환자에게 최적화된 투여량을 제공함으로써 12세 미만인 환자의 인플루엔자 바이러스 감염을 치료하기 위한 수단 및 방법을 제공한다. 이에 따라, 본 발명은 또한 하기 측면에 관한 것이다. 상기 및 하기 설명된 모든 설명, 정의 및 바람직한 측면은 또한 필요한 부분만 약간 수정하여, 하기 기재된 본 발명의 측면에 관한 것이다.

본 발명은 또한 인플루엔자 바이러스 감염을 치료하는데 사용하기 위한 화합물에 관한 것이며, 여기서 화합물은 화학식 (I) 및 (II) 중 하나를 갖거나 또는 그의 제약상 허용되는 염이며, 여기서 하기 투여량이 사용된다:

(i) 1세 미만인 환자에서:

(a) 환자가 4주 미만인 경우, 유효량은 0.8-1.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 1 mg/kg 체중임;

(b) 환자가 4주 이상 3개월 미만인 경우, 유효량은 0.8-1.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 1 mg/kg 체중임;

(c) 환자가 3개월 이상 12개월 미만인 경우, 유효량은 1.8-2.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 2 mg/kg 체중임;

(ii) 1세 이상 12세 미만인 환자에서:

(a) 환자가 20 kg 미만의 체중을 갖는 경우, 유효량은 1.8-2.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 2 mg/kg 체중임; 또는

(b) 환자가 20 kg 이상의 체중을 갖는 경우, 유효량은 35-45 mg, 바람직하게는 약 40 mg임.

본 발명은 추가로 인플루엔자 바이러스 감염을 치료하는데 사용하기 위한 제약 조성물에 관한 것이며, 여기서 제약 조성물은 화학식 (I) 및 (II) 중 하나를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하고, 임의로 제약상 허용되는 담체를 포함하며, 여기서 하기 투여량이 사용된다:

(i) 1세 미만인 환자에서:

(a) 환자가 4주 미만인 경우, 유효량은 0.8-1.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 1 mg/kg 체중임;

(b) 환자가 4주 이상 3개월 미만인 경우, 유효량은 0.8-1.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 1 mg/kg 체중임;

(c) 환자가 3개월 이상 12개월 미만인 경우, 유효량은 1.8-2.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 2 mg/kg 체중임;

(ii) 1세 이상 12세 미만인 환자에서:

(a) 환자가 20 kg 미만의 체중을 갖는 경우, 유효량은 1.8-2.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 2 mg/kg 체중임; 또는

(b) 환자가 20 kg 이상의 체중을 갖는 경우, 유효량은 35-45 mg, 바람직하게는 약 40 mg임.

또한, 본 발명은 화학식 (I) 및 (II) 중 하나를 갖거나 또는 그의 제약상 허용되는 염인 화합물을 포함하는 제약 제형을 위한 패키지 삽입물 또는 패키지의 투여량 지침을 읽는 단계; 및 유효량의 화합물을 인플루엔자-감염된 환자에게 투여하는 단계를 포함하는 인플루엔자를 치료하는 방법을 포함하며, 여기서 하기 투여량이 사용된다:

(i) 1세 미만인 환자에서:

(a) 환자가 4주 미만인 경우, 유효량은 0.8-1.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 1 mg/kg 체중임;

(b) 환자가 4주 이상 3개월 미만인 경우, 유효량은 0.8-1.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 1 mg/kg 체중임;

(c) 환자가 3개월 이상 12개월 미만인 경우, 유효량은 1.8-2.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 2 mg/kg 체중임;

(ii) 1세 이상 12세 미만인 환자에서:

(a) 환자가 20 kg 미만의 체중을 갖는 경우, 유효량은 1.8-2.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 2 mg/kg 체중임; 또는

(b) 환자가 20 kg 이상의 체중을 갖는 경우, 유효량은 35-45 mg, 바람직하게는 약 40 mg임.

본 발명은 또한 인플루엔자-감염된 환자를 치료하기 위한 의약의 제조를 위한 화학식 (I) 및 (II) 중 하나를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도에 관한 것이며, 여기서 하기 투여량이 사용된다:

(i) 1세 미만인 환자에서:

(a) 환자가 4주 미만인 경우, 유효량은 0.8-1.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 1 mg/kg 체중임;

(b) 환자가 4주 이상 3개월 미만인 경우, 유효량은 0.8-1.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 1 mg/kg 체중임;

(c) 환자가 3개월 이상 12개월 미만인 경우, 유효량은 1.8-2.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 2 mg/kg 체중임;

(ii) 1세 이상 12세 미만인 환자에서:

(a) 환자가 20 kg 미만의 체중을 갖는 경우, 유효량은 1.8-2.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 2 mg/kg 체중임; 또는

(b) 환자가 20 kg 이상의 체중을 갖는 경우, 유효량은 35-45 mg, 바람직하게는 약 40 mg임.

또한, 본 발명은 화학식 (I) 및 (II) 중 하나를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는 제약 제형을 포함하고, 유효량의 화합물을 인플루엔자-감염된 환자에게 투여하는 것에 대한 투여량 지침을 추가로 포함하는 패키지를 제공하며, 여기서 하기 투여량이 사용된다:

(i) 1세 미만인 환자에서:

(a) 환자가 4주 미만인 경우, 유효량은 0.8-1.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 1 mg/kg 체중임;

(b) 환자가 4주 이상 3개월 미만인 경우, 유효량은 0.8-1.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 1 mg/kg 체중임;

(c) 환자가 3개월 이상 12개월 미만인 경우, 유효량은 1.8-2.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 2 mg/kg 체중임;

(ii) 1세 이상 12세 미만인 환자에서:

(a) 환자가 20 kg 미만의 체중을 갖는 경우, 유효량은 1.8-2.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 2 mg/kg 체중임; 또는

(b) 환자가 20 kg 이상의 체중을 갖는 경우, 유효량은 35-45 mg, 바람직하게는 약 40 mg임.

상기 언급된 바와 같이, 본 발명의 한 측면은 화학식 (I) 및 (II) 중 하나를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하고 임의로 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물에 관한 것이다. 제약 조성물은 공지된 방법에 의해 제약상 허용되는 담체와 함께 제형화될 수 있다. 예를 들어, 조성물은 성분들을 제약상 허용되는 담체 또는 매질, 구체적으로 멸균수 또는 생리식염수, 식물성 오일, 유화제, 현탁화제, 계면활성제, 안정화제, 향미제, 부형제, 비히클, 보존제, 결합제 등과 적절하게 조합하고, 일반적으로 허용되는 제약 구현에 의해 요구되는 단위 용량 및 형태로 이들을 혼합함으로써 제형화될 수 있다. 담체의 구체적인 예는 경질 무수 규산, 락토스, 결정질 셀룰로스, 만니톨, 전분, 카르멜로스 칼슘, 카르멜로스 나트륨, 히드록시프로필 셀룰로스, 히드록시프로필 메틸셀룰로스, 폴리비닐아세탈 디에틸아미노아세테이트, 폴리비닐피롤리돈, 젤라틴, 중간쇄 트리글리세리드, 폴리옥시에틸렌 경화성 피마자유 60, 사카로스, 카르복시메틸 셀룰로스, 옥수수 전분, 무기 염 등을 포함한다. 이러한 제형에서 활성 성분의 함량은 요구되는 범위 내에서 적절한 용량이 수득될 수 있도록 조정된다.

제약 조성물은 임의로 하나 이상의 제약상 허용되는 부형제, 예컨대 담체, 희석제, 충전제, 붕해제, 윤활제, 결합제, 착색제, 안료, 안정화제, 보존제, 항산화제, 또는 용해도 향상제를 포함할 수 있다. 또한, 제약 조성물은 하나 이상의 용해도 향상제, 예컨대, 예를 들어, 약 200 내지 약 5,000 Da 범위의 분자량을 갖는 폴리(에틸렌 글리콜)을 포함하는 폴리(에틸렌 글리콜), 에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 비이온성 계면활성제, 틸록사폴, 폴리소르베이트 80, 마크로골-15-히드록시스테아레이트, 인지질, 레시틴, 디미리스토일 포스파티딜콜린, 디팔미토일 포스파티딜콜린, 디스테아로일 포스파티딜콜린, 시클로덱스트린, 히드록시에틸-β-시클로덱스트린, 히드록시프로필-β-시클로덱스트린, 히드록시에틸-γ-시클로덱스트린, 히드록시프로필-γ-시클로덱스트린, 디히드록시프로필-β-시클로덱스트린, 글루코실-α-시클로덱스트린, 글루코실-β-시클로덱스트린, 디글루코실-β-시클로덱스트린, 말토실-α-시클로덱스트린, 말토실-β-시클로덱스트린, 말토실-γ-시클로덱스트린, 말토트리오실-β-시클로덱스트린, 말토트리오실-γ-시클로덱스트린, 디말토실-β-시클로덱스트린, 메틸-β-시클로덱스트린, 카르복시알킬 티오에테르, 히드록시프로필 메틸셀룰로스, 히드록시프로필셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 비닐 아세테이트 공중합체, 비닐 피롤리돈, 나트륨 라우릴 술페이트, 디옥틸 나트륨 술포숙시네이트, 또는 이들의 임의의 조합을 포함할 수 있다.

제약 조성물은 본원에 기재된 수단 및 방법으로 제한되지 않는다. 통상의 기술자는 적합한 조성물을 구축하기 위해 관련 기술분야에서 이용가능한 그의 지식을 사용할 수 있다. 구체적으로, 제약 조성물은 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 기술, 예컨대 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences, 20^th Edition]에 공개된 기술에 의해 제형화될 수 있다.

본원에서 상기 및 하기 인용된 모든 문서의 내용은 그 전문이 참조로 포함된다.

본 발명은 하기 비제한적인 도면 및 실시예를 참조하여 추가로 설명된다.

도면은 하기를 나타낸다:

도 1: 소아 (비-아시아인, 연령 1-12세)에서 3종의 상이한 투약 레지멘에 대한 시뮬레이션된 총 약물 노출. 박스플롯의 하단 및 상단은 25번째 및 75번째 백분위수를 나타내고; 박스에서 중간 라인은 50번째 백분위수를 나타내고; 하부 및 상부 수염은 10번째 및 90번째 백분위수를 나타낸다. 참고: 레지멘 2의 시뮬레이션을 용이하게 하기 위해, 체중-기반 투약이 균일 투약으로 전환되는 체중은 26.6 kg이었다.

도 2: 소아 (비-아시아인, 연령 1-12세)에서 3종의 상이한 투약 레지멘에 대한 시뮬레이션된 피크 약물 노출. 박스플롯의 하단 및 상단은 25번째 및 75번째 백분위수를 나타내고; 박스에서 중간 라인은 50번째 백분위수를 나타내고; 하부 및 상부 수염은 10번째 및 90번째 백분위수를 나타낸다. 참고: 레지멘 2의 시뮬레이션을 용이하게 하기 위해, 체중-기반 투약이 균일 투약으로 전환되는 체중은 26.6 kg이었다.

도 3: 소아 (비-아시아인, 연령: 1-12세)에서 3종의 상이한 투약 레지멘에 대한 투여 후 24시간에 시뮬레이션된 약물 노출. 박스플롯의 하단 및 상단은 25번째 및 75번째 백분위수를 나타내고; 박스에서 중간 라인은 50번째 백분위수를 나타내고; 하부 및 상부 수염은 10번째 및 90번째 백분위수를 나타낸다. 참고: 요법 2의 시뮬레이션을 용이하게 하기 위해, 체중-기반 투약이 균일 투약으로 전환되는 체중은 26.6 kg이었다.

도 4: 소아 (비-아시아인, 연령: 1-12세)에서 3종의 상이한 투약 레지멘에 대한 투약 후 72시간에 시뮬레이션된 약물 노출. 박스플롯의 하단 및 상단은 25번째 및 75번째 백분위수를 나타내고; 박스에서 중간 라인은 50번째 백분위수를 나타내고; 하부 및 상부 수염은 10번째 및 90번째 백분위수를 나타낸다. 참고: 요법 2의 시뮬레이션을 용이하게 하기 위해, 체중-기반 투약이 균일 투약으로 전환되는 체중은 26.6 kg이었다.

도 5: 소아 (비-아시아인, 연령: < 1세)에서 3종의 상이한 투약 레지멘에 대한 시뮬레이션된 총 약물 노출. 박스플롯의 하단 및 상단은 25번째 및 75번째 백분위수를 나타내고; 박스에서 중간 라인은 50번째 백분위수를 나타내고; 하부 및 상부 수염은 10번째 및 90번째 백분위수를 나타낸다. 모서리가 둥근 회색 박스는 이 모델에서 성인 노출과 거의 동일한 매치를 나타낸다.

도 6: 소아 (비-아시아인, 연령: < 1세)에서 3종의 상이한 투약 레지멘에 대한 시뮬레이션된 피크 약물 노출. 박스플롯의 하단 및 상단은 25번째 및 75번째 백분위수를 나타내고; 박스에서 중간 라인은 50번째 백분위수를 나타내고; 하부 및 상부 수염은 10번째 및 90번째 백분위수를 나타낸다.

도 7: 소아 (비-아시아인, 연령: < 1세)에서 3종의 상이한 투약 레지멘에 대한 투약 후 24시간에 시뮬레이션된 약물 노출. 박스플롯의 하단 및 상단은 25번째 및 75번째 백분위수를 나타내고; 박스에서 중간 라인은 50번째 백분위수를 나타내고; 하부 및 상부 수염은 10번째 및 90번째 백분위수를 나타낸다.

도 8: 소아 (비-아시아인, 연령: < 1세)에서 3종의 상이한 투약 레지멘에 대한 투약 후 72시간에 시뮬레이션된 약물 노출. 박스플롯의 하단 및 상단은 25번째 및 75번째 백분위수를 나타내고; 박스에서 중간 라인은 50번째 백분위수를 나타내고; 하부 및 상부 수염은 10번째 및 90번째 백분위수를 나타낸다.

도 9: 캐나다 급성 호흡기 질병 및 독감 척도 (CARIFS) 설문지.

도 10: 실시예 6의 화합물 I의 결정의 분말 X선 회절 패턴.

실시예는 본 발명을 예시한다.

실시예 1: 소아 용량의 시뮬레이션의 재료 및 방법

1. 집단 약동학 (PK) 분석

일본인 소아 환자 연구 정보를 사용하여 집단 PK 분석을 수행하였다.

1.1 배경 데이터

대상체에 대해 이용가능한 하기 배경 데이터를 요약하고, 공변량 후보로 사용하였다: 범주형 데이터로서 연령 (년 및 주), 체중, 체질량 지수 (BMI), 아스파르테이트 아미노트랜스퍼라제 (AST), 알라닌 아미노트랜스퍼라제 (ALT), 총 빌리루빈 (Tbil), 추정된 사구체 여과율 (eGFR), 및 연속 데이터로서 기준선에서의 크레아티닌 청소율 (CLcr), 및 성별 (남성, 여성), 인종 ("아시아인", "비-아시아인", 여기서 "비-아시아인" 그룹은 예를 들어, 백인, 예컨대 코카시안 환자를 반영함), 건강 상태 (달리 건강한 인플루엔자를 갖는 환자, 또는 인플루엔자를 갖지 않는 환자) 및 식품 상태 (음식물 섭취 ≥ 4시간 전 및 ≥ 4시간 후 투약 [공복], 음식물 섭취 2 내지 4시간 전 또는 2 내지 4시간 후 이내에 투약 [중간], 또는 음식물 섭취 < 2시간 전 또는 < 2시간 후 투약 [식후]). 투약 첫날 전에 또는 당일에 또는 이 값이 이용가능하지 않은 경우 스크리닝 시 관찰로부터 기준선에서의 배경 데이터를 수득하였다. eGFR을 슈바르츠 공식에 의해 계산하였다 (Schwartz, Pediatric Clinics of North America. 1987; 34: 571-90). 소아에 대한 CLcr을 eGFR 및 체표면적 (BSA)으로부터 계산하였다. 모스텔라(Mostellar)에 의해 보고된 하기 방정식을 사용하여 BSA를 계산하였다 (Mosteller, N Eng J Med. 1987;317:1098).

BSA (㎡) = [신장 (cm) × 체중 (kg)/3600]^1/2

하기 방정식을 사용하여 eGFR 및 CLcr을 계산하였다.

1.2 기본 모델

발록사비르 (S-033447)의 혈장 농도를 설명하기 위해 1차 흡수 및 지체 시간을 갖는 2-구획 모델을 초기에 테스트하였으며, 이는 소아 환자에서 데이터를 설명하기 위해 이전에 선택된 동일한 구조적 모델이기 때문이다 (이시바시(Ishibashi) T. S-033188의 집단 약동학 (소아 환자). 연구 보고서 (최종, 연구 번호: S-033188-CB-273-N). 시오노기 앤드 캄파니, 리미티드; 2017). 2-구획 모델은 하기 파라미터를 포함한다: 겉보기 총 청소율 (CL/F), 중앙 및 말초 구획의 겉보기 부피 (Vc/F 및 Vp/F), 겉보기 구획간 청소율 (Q/F), 1차 흡수 속도 (Ka), 및 흡수 지체 시간 (ALAG). 제형 간의 전신 노출의 차이는 상대 생체이용률 (F)의 차이로서 모델에 혼입되었다. F는 시판 예정인 20-mg 정제의 경우 1 및 시판 예정인 10-mg 정제의 경우 0.88이다 (건강한 성인에서 S-033188 10-mg 및 20-mg 정제의 생물학적 동등성 및 약동학에 대한 식품의 효과를 평가하기 위한 1상 연구. 임상 연구 보고서 (연구 번호 1622T081F). 시오노기 앤드 캄파니, 리미티드; 2017). F는 2% 과립 및 20-mg 정제가 생물학적으로 동등하기 때문에 이 연구에서 2% 과립의 경우 1로 설정되었다 (연구 번호 1703T081G) (S-033188 20-mg 정제 및 S-033188 과립 2%의 생물학적 동등성을 평가하기 위한 1상 연구. 임상 연구 보고서 (연구 번호 1703T081G). 시오노기 앤드 캄파니, 리미티드; 2018).

개별 모델 파라미터는 방정식 (1)에 기재된 바와 같이 로그-정규 분포 및 지수 오차 모델을 따르는 것으로 가정되는 특정 PK 파라미터에 대한 고정된 효과 파라미터 (PKP) 및 개체간 변동성 (IIV)에 기초하여 추정되었다:

PKP_i = PKP × exp (η_PKP,i) (1)

여기서, PKP_i는 PK 파라미터의 i-번째 개체 값을 나타내고, PKP는 집단 PK 파라미터의 전형적인 값을 나타내고, η_PKP,i는 i-번째 개체 및 전형적인 PK 파라미터 사이의 차이를 나타낸다. η_PKP는 IIV 파라미터의 확률 변수이며 평균이 0이고 분산이 ω_PKP ²인 정규 분포이다.

모델 빌딩 후, 무작위 IIV 파라미터 쌍 사이의 공분산은 η_PKP,i를 상이한 PK 파라미터로 플로팅함으로써 그래픽으로 검사하였으며, 공분산은 관찰된 상관관계를 설명하기 위해 적절하게 추가될 수 있다. IIV의 공분산 포함에 관한 결정은 섹션 1.5에 기재된 바와 같이 생성된 모델의 수치적 안정성 또는 적합도 (GOF) 플롯에 기초하였다.

각 η_PKP (sh_η_PKP)의 수축은 NONMEM에서 산출되었다.

가법 오차 모델, 비례 오차 모델 및/또는 조합 오차 모델 (가법 오차 + 비례 오차 모델)은 개체내 (잔차) 변동성으로 테스트되었다. 가법 오차 모델, 비례 오차 모델 및 조합 오차 모델은 하기 방정식으로 주어진다.

C_ij = C_ij (pred) + ε_1,ij : 가법 오차 모델 (2)

C_ij = C_ij (pred) × (1 + ε_1,ij) : 비례 오차 모델 (3)

C_ij = C_ij (pred) × (1 + ε_1,ij) + ε_2,ij : 조합 오차 모델 (4)

여기서, C_ij는 i-번째 개체에서 관찰된 j-번째 농도를 나타내고, C_ij (pred)는 i-번째 개체 PK 파라미터로부터 예측된 j-번째 농도를 나타내고, ε (ε_1,ij, ε_2,ij)은 i-번째 개체에서 j-번째 관찰된 및 예측된 농도 사이의 차이를 나타낸다. ε (ε_1,ij, ε_2,ij)은 집단 평균으로부터의 개체내 변동성 파라미터의 확률 변수이며 평균이 0이고 분산이 σ² (σ₁ ², σ₂ ²)인 정규 분포이다.

ε (sh_ε)의 수축은 NONMEM에서 산출되었다.

개체내 변동성에 대한 오차 모델은 섹션 1.5에 기재된 진단 플롯 및/또는 χ² 테스트에 기초한 0.05 (p < 0.05)의 통계적 유의성 수준에서 목적 함수 값 (OBJ)의 값에 의해 선택되었으며, 즉, 1 자유도에 대한 -3.84 미만의 OBJ (ΔOBJ)의 차이는 통계적으로 유의한 모델 개선을 나타낸다.

오차 모델을 갖는 기본 모델의 구조는 시간 경과에 따른 관찰의 특징적인 형상을 가장 잘 반영하도록 필요에 따라 확장되었다. IIV를 적절하게 추정할 수 없을 때, 그의 IIV 항의 제거를 고려하였다.

1.3 공변량 모델

개체내 변동성에 대한 오차 모델의 선택으로 기본 모델을 빌딩한 후, 배경 데이터의 영향을 평가하여 공변량 모델을 빌딩하였다. 공변량 모델을 공변량에 대한 스크리닝, 정방향 선택, 및 단계적 역방향 결실의 조합에 의해 구축하였다. χ² 테스트에 기초한 0.05의 유의성 수준 (p < 0.05)을 스크리닝에 사용하였다 (ΔOBJ는 1 자유도에 대해 -3.84 미만임). 전체 모델을 구축하기 위해 χ² 테스트에 기초한 0.05의 유의성 수준으로 정방향 선택에서 스크리닝 시 유의한 공변량을 테스트하였다 (ΔOBJ는 1 자유도에 대해 -3.84 미만이다). χ² 테스트에 기초한 0.01의 유의성 수준을 단계적 역방향 결실에 사용하여 최종 모델을 구축하였다 (ΔOBJ는 1 자유도에 대해 6.63 초과임).

제1 공변량 평가로서, 체중은 소아에서 가장 유의한 공변량으로 고려되기 때문에 체중을 CL/F 및 Vc/F에 대해 테스트하였다. 체중을 다른 PK 파라미터 (예를 들어, Vp/F, Q/F 등)에 대한 공변량으로 테스트하였다.

체중의 경우, 방정식 (5)에 나타낸 바와 같은 검정력 모델을 사용하였다.

PKP = θ₁ × (COV/COV의 중앙값)^θ2 (5)

여기서, COV는 공변량의 값이고, θ₁, θ2는 방정식에서 추정되는 모델 파라미터의 전형적인 값이다. CL/F 및 Q/F에 대해 0.75 및 Vc/F 및 Vp/F에 대해 1의 전형적인 알로메트릭 지수 (Holford, Clin. Pharmacokinet. 1996; 30: 329-32; Anderson, Annu Rev Pharmacol Toxicol. 2008; 48: 303-32)를 청소율 및 분포 부피에 대한 체중의 효과에 대한 θ₂에 대해 테스트하였다. 또한, 발록사비르 (S-033447)에 대한 이전 소아 집단 PK 모델에서 추정된 CL/F 및 Q/F에 대한 0.632 및 Vc/F 및 Vp/F에 대한 1.03의 지수 (이시바시 T. S-033188의 집단 약동학 (소아 환자). 연구 보고서 (최종, 연구 번호: S-033188-CB-273-N). 시오노기 앤드 캄파니, 리미티드; 2017; 공개 (Koshimichi, Journal of Pharmaceutical Sciences (2019) 1-6, https://doi.org/10.1016/j.xphs.2019.04.010)를 청소율 및 분포 부피에 대한 체중의 효과에 대한 θ₂에 대해 테스트하였다.

체중 이외에, 연령 (주), BMI, 성별, AST, ALT, Tbil, eGFR, CLcr, 및 건강 상태를 CL/F에 대한 공변량으로 테스트하고; 연령 (주), BMI, 성별, 및 건강 상태를 Vc/F에 대한 공변량으로 테스트하고; 연령 (주), 성별, 건강 상태 및 식품 상태를 Ka에 대한 공변량으로 테스트하고; 식품 상태를 F에 대한 공변량으로 테스트하였다. 배경 데이터를 다른 PK 파라미터 (예를 들어, Vp/F, Q/F 등)에 대한 공변량으로 테스트하였다.

공변량 모델을 빌딩하기 전에, 기본 모델에 기초하여 공변량의 육안 검사를 위해 공변량 및 PK 파라미터 사이의 관계에 대한 플롯을 생성하였다.

연속 공변량의 경우, 방정식 (6)에 나타낸 바와 같은 검정력 모델을 사용하였다.

PKP = θ₁ × (COV/COV의 중앙값)^θ2 (6)

여기서, COV는 공변량의 값이고, θ₁, θ₂는 방정식에서 추정되는 모델 파라미터의 전형적인 값이다.

2진법 및 범주형 공변량의 경우, 방정식 (7)에 나타낸 바와 같은 승법 모델을 사용하였다.

PKP = θ_CAT=0 × (θ_{CAT_i})^CAT_i (7)

여기서, CAT_i는 0 또는 1의 값이 할당된 일련의 표시 변수 (CAT_1, CAT_2, …, CAT_n은 CAT의 n 수준을 나타냄; 예를 들어, 남성의 경우 CAT_1 = 0 및 여성의 경우 CAT_1 = 1)이고, θ_CAT=0은 개별 범주형 공변량 지수 변수가 0일 때 추정되는 모델 파라미터의 전형적인 값이고, θ_{CAT_i}는 CAT_i가 1일 때 범주형 공변량 지수 변수에 대해 추정되는 모델 파라미터의 i-번째 상대 영향이다.

최종 모델을 빌딩한 후, < 2세 연령의 더 어린 아동에 대한 시뮬레이션 목적을 위해, S자형 쌍곡선 모델을 모델 (시뮬레이션 모델)에 혼입하여 CL/F의 성숙을 설명하였다. 성숙 인자 (MF)는 방정식 (8)에서 설명되며, CL/F에 MF를 곱한다.

MF = PMA^γ/(PMA^γ + TM₅₀ ^γ) (8)

여기서, PMA는 월경후 연령 (주)이고, TM₅₀은 성숙 반감기 (주)이고, γ는 힐(hill) 계수이다. PMA는 모든 환자가 만삭 분만이라고 가정하고 40 + 연령 (주)로서 계산되었다. 발록사비르 (S-033447)에 대한 TM₅₀ 및 γ의 값을 데이터로부터 추정하였다. 또한, 우리딘 디포스페이트 글루쿠로노실 트랜스퍼라제 (UGT)에 의해 대사되는 모르핀에 대한 TM₅₀ = 54.2주 및 γ = 3.92의 값 (Anderson, Paediatr Anaesth. 2011; 21: 222-37)을 테스트하였다. 가장 작은 OBJ를 갖는 모델을 시뮬레이션 모델로서 선택하였다.

특정 환자 범주와 관련하여 전형적인 파라미터 추정치의 해석을 용이하게 하기 위해 공변량 플롯에서 관찰된 추세에 기초하여 연속 공변량에 대해 대안적인 표현을 고려할 수 있고, 범주형 공변량에 대해 대안적인 표현을 고려할 수 있다.

고도로 상관관계가 있는 공변량은 공변량 효과의 추정에서 혼란을 피하기 위해 별도의 모델에서 테스트될 수 있다.

공변량은 그의 포함에 대한 강한 약리학적 또는 생리학적 근거가 있는 경우 상기 기준을 충족하지 않음에도 불구하고 최종 모델에서 유지될 수 있다.

1.4 파라미터 추정

NONMEM에 의해 혈장 발록사비르 (S-033447) 농도 데이터에 대해 집단 PK 파라미터를 추정하였다. 상호작용이 있는 1차 조건부 추정 방법 (FOCE-I)을 분석에 사용하였다.

1.5 모델 평가

PK 파라미터의 포인트 추정치 및 이들의 상대 표준 오차를 사용함으로써 기본 및 최종 모델을 평가하였다. 또한, 모델 진단을 위해 참조 라인 (동일성, 제로 라인 등)이 있는 하기 GOF 플롯을 생성하였다.

● 동일선 및 추세선이 있는 선형 및 로그 척도 둘 다에서 관찰된 농도 (OBS) 대 집단 예측된 농도 (PRED)

● 동일선 및 추세선이 있는 선형 및 로그 척도 둘 다에서 OBS 대 베이지안-예측된 개별 농도 (IPRED)

● 조건부 가중 잔차 (CWRES) 또는 상호작용 포함 조건부 가중 잔차 (CWRESI) 대 제로 라인 및 추세선이 있는 PRED

● |개별 가중 잔차 (IWRES)| 대 추세선이 있는 IPRED

● CWRES 또는 CWRESI 대 참조 용량 후 시간 (TARD)

● CWRES 또는 CWRESI 및 IWRES의 히스토그램 (임의로 QQ 플롯)

● 파라미터 (오직 기본 모델) 및 ETA 대 잠재적 공변량의 경험적 베이지안 추정치 (EBE)의 플롯

● ETA의 EBE의 산점도 행렬 (오직 최종 모델)

● ETA의 EBE의 분포 (예를 들어, 히스토그램) (오직 최종 모델)

● OBS, IPRED 및 PRED 농도 대 대표 대상체 (2차 임의의 주어진 대상체)에 대한 개체에 의한 중첩된 시간 (오직 최종 모델)

PRED, IPRED, CWRES, CWRESI 및 IWRES는 NONMEM에서 예약된 용어이다.

최종 모델은 하기 기준을 충족해야 한다:

● "최소화 성공" 구문은 NONMEM에 의해 표시된다.

● NONMEM에 의한 경고 메시지 없이 공분산 단계가 완료된다.

● 유효 자릿수의 숫자는 모든 추정된 θ에 대해 ≥ 3이다.

● θ의 최종 추정치는 경계에 가깝지 않다.

● GOF 플롯은 설명되지 않는 추세를 나타내지 않는다.

이들 기준을 충족하지 않은 최종 모델은 모델링 전략 및 연구 목표를 조심스럽게 고려한 후에만 허용될 수 있다.

최종 모델의 예측 성능을 예측-수정된 시각적 예측 검사 (pcVPC) (Bergstand, AAPS J. 2011; 13: 143-51)에 의해 평가하고, 90% 예측 구간 (PI) 외부의 관찰 백분율을 계산하였다. pcVPC에 추가하여, 최종 모델을 또한 부트스트래핑 기술에 의해 평가하였다 (Ette, Journal of clinical pharmacology. 1997, 37 (6): 486-95). 적어도 200번의 부트스트랩 복제를 수행하였으며, 연관된 평균 파라미터 추정치 및 이들의 상응하는 95% 신뢰 구간 (CI)은 복제로부터 유래되었다.

1.6 개별 사후 약동학적 파라미터

발록사비르 (S-033447)의 개별 전신 노출, 예컨대 발록사비르 마르복실 (S-033188)의 단일 용량 후 C_max, 시간 0에서 무한대까지의 혈장 농도-시간 곡선 아래 면적 (AUC_0-inf), 및 C₂₄는 최종 모델의 경험적 베이지안 추정과 함께 개별 사후 PK 파라미터를 사용하여 계산되었다. 또한, 이들 노출은 시뮬레이션 모델의 경험적 베이지안 추정과 함께 개별 사후 PK 파라미터를 사용하여 계산되었다. 노출 메트릭스를 계산하는데 필요한 공식은 모델 구조에 의존한다.

1.7 몬테-카를로 시뮬레이션

체중 및 PK 파라미터 (C_max, AUC_0-inf, 및 C₂₄) 간의 관계를 평가하기 위해 최종 모델과 함께 몬테-카를로 시뮬레이션을 사용하였다. 체중에 대한 균일한 분포로서 가정되는 최종 모델에 기초하여 체중 (10 내지 < 60 kg)을 시뮬레이션함으로써 5 kg당 1000명의 가상 소아 환자를 생성하였다.

또한, 연령 (0개월 내지 < 2세) 및 PK 파라미터 (C_max, AUC_0-inf, 및 C₂₄) 간의 관계를 평가하기 위해 시뮬레이션 모델과 함께 몬테-카를로 시뮬레이션을 사용하였다. 시뮬레이션 모델에 기초하여 연령을 시뮬레이션함으로써 월령당 1000명의 가상 소아 환자를 생성하였다. 일본인 소아에 대한 연령 및 체중 간의 관계는 일본 후생노동성에 의한 데이터베이스에 따랐다 (일본 후생노동성. Research for growth of babies (2010). URL: http://www.e-stat.go.jp/SG1/estat/Xlsdl.do?sinfid=000012673573). 가상 소아 환자를 생성하기 위해, 체중 및 기하 평균에 대해 로그-정규 분포를 가정하고, 각 개월에 대해 그의 분산 계수를 설정하고 (표 3), 성별에 대해 1:1 비율을 가정하였다. MF는 모든 소아 환자가 만삭 분만이고 이들의 연령이 연령 범위의 중간이라고 가정하여 방정식 8에 의해 각 개월에 대해 계산되었다. 예를 들어, 6개월 소아 환자의 PMA는 40주 + 6.5개월 = 68.2주이다.

표 3: 출생 내지 < 2세 소아에 대한 연령 및 체중 간의 관계

2. 소프트웨어

WinNonlin (버전 6.2.1)을 사용함으로써 PK 계산을 수행하였다. SAS (버전 9.2)를 통계적 분석에 사용하였다. R (버전 3.0.2)을 PK/PD 분석에 사용하였다. NONMEM (버전 7.3), 인텔 비주얼 포트란 컴파일러(Intel Visual FORTRAN Compiler) (버전 2010), 및 펄-스픽스-NONMEM(Perl-speaks-NONMEM) (버전 4.2)을 집단 PK 분석에 사용하였다.

실시예 2: 집단 약동학적 파라미터

달리 건강한 일본 및 비-일본 인플루엔자 환자 (성인 및 청소년) 둘 다에서 발록사비르 PK를 설명하기 위해 집단 PK 모델을 개발하였다 (T0821 및 T0831). 약물 노출 및 다양한 공변량 간의 관계를 탐색하였다. 집단 PK 모델 파라미터는 표 4에 요약되어 있다. 마찬가지로, ≥ 6개월 내지 < 12세의 일본인 달리 건강한 환자에서 발록사비르의 집단 PK를 설명하기 위해 소아 집단 PK 모델을 개발하였다 (연구 T0822, 1618T0822라고도 함; 및 연구 T0833, 1705T0833이라고도 함). 소아에서 집단 PK 모델 파라미터는 표 5에 요약되어 있다.

표 4 : 성인에서 집단 약동학적 파라미터 (보고서 S-033188-CB-272-N)

CL/F (L/hr) = 5.40 × (체중/64.8) ^1.04 ×1.72 비-아시아인 × (ALT/17) ^-0.115, 여기서 비-아시아인의 경우 비-아시아인 = 1 및 아시아인의 경우 비-아시아인 = 0

Vc/F (L) = 333 × (체중/64.8) ^1.76 × 1.36 비-아시아인

Q/F (L/hr) = 6.27 × (체중/64.8) ^0.473

Vp/F (L) = 212 × (체중/64.8) ^0.642

Ka (hr^-1) = 1.10 × 0.613 성별, 여기서 여성의 경우 성별 = 1 및 남성의 경우 성별 = 0

생체이용률에 대한 식품의 효과 = 0.869 ^식후 (여기서, 음식물 섭취 전 또는 후 < 2시간 투약 시 식후 = 1 및 음식물 섭취 전 또는 후 ≥ 2시간 투약 시 식후 = 0)

약어: ALAG, 흡수 지체 시간; CL/F, 겉보기 총 청소율; Ka, 1차 흡수 속도; Q/F, 겉보기 구획간 청소율; Vc/F, 중앙 구획의 겉보기 부피; Vp/F, 말초 구획의 겉보기 부피.

표 5: 일본인 소아에서 집단 약동학적 파라미터 - 연구 T0822 (1618T0822) 및 T0833 (1705T0833)

CL/F (L/hr) = 2.72 × (체중/20.7) ^0.77

Vc/F (L) = 117 ×(체중/20.7) ^1.07

Q/F (L/hr) = 1.06 × (체중/20.7) ^0.77

Vp/F (L) = 67.1 ×(체중/20.7) ^1.07

10-mg 정제의 경우 상대 생체이용률 = 0.88 (고정된)

약어: ALAG, 흡수 지체 시간; CL/F, 겉보기 총 청소율; Ka, 1차 흡수 속도; Q/F,겉보기 구획간 청소율; Vc/F, 중앙 구획의 겉보기 부피;Vp/F, 말초 구획의 겉보기 부피.

발록사비르 PK는 성인 및 소아 둘 다에서 용량과 관련하여 선형인 것으로 밝혀졌다. PK는 지체-시간을 갖는 1차 흡수 및 중앙 구획으로부터의 1차 제거를 갖는 2-구획 모델을 사용하여 잘 설명된 것으로 밝혀졌다. 성인에서, 발록사비르는 5.4 L/hr의 낮은 경구 청소율을 나타내었다 (일본인). 체중 및 인종 (아시아인 대 비-아시아인)은 둘 다 CL/F에 대한 유의한 공변량인 것으로 밝혀졌다. 동일한 체중에서, CL/F는 비일본인에서 평균 1.7배 더 높았다. 흥미롭게도, 부피 (V/F)에서 유사하지만 약간 더 낮은 민족적 효과가 나타났으며, 이는 공변량이 절대 생체이용률 (F)의 차이만을 반영하지 않을 수 있음을 시사한다. 일본인 소아에서, 체중은 청소율 및 부피 둘 다에서 유의한 공변량이었다. 24 kg 체중의 일본인 아동의 경우 집단 중앙값 경구 청소율은 약 3 L/h였다. 경구 약물 청소율 및 구획간 청소율은 0.632의 알로메트릭 지수를 사용하여 체중으로 환산된 반면, 중앙 및 말초 부피 항은 둘 다 1에 접근하는 이들의 전형적인 지수로 환산되었다. 이들 알로메트릭 관계에 기초하여, 체중-조정된 경구 약물 청소율 (L/hr/kg)은 체중이 증가함에 따라 감소하고, 70 kg의 성인과 비교하여 10-kg 아동에서 약 2배 더 낮을 것으로 추정될 수 있다. 더욱이, 분포 부피는 체중에 대략 비례하여 환산되기 때문에 (즉, kg 기준으로 대략 일정함), 처분 반감기는 체중이 증가함에 따라 증가한다.

실시예 3: 비-아시아인 (예를 들어 백인) 소아 환자에 대한 용량 찾기

단일 경구 용량 투여가 인플루엔자 증상의 신속하고 지속적인 완화를 제공하는 것으로 확인된 성인 및 청소년 2/3상 연구 뿐만 아니라 3상 일본인 소아 연구에 의해 뒷받침되는 바와 같이 단일 용량 투여가 사용될 것이다.

2개의 비-아시아인 소아 환자 그룹 (환자 그룹 1: 출생 내지 <1세, 및 환자 그룹 2: 1세 내지 <12세)에 대한 최적 용량을 시뮬레이션하였다. 성인 C_max를 초과하지 않으면서 총 약물 노출 (AUC_inf), C₂₄ 및 C₇₂의 관점에서 성인 노출과 매치하도록 최적 용량을 시뮬레이션하였다. 일본인 2상, 글로벌 3상 연구 및 일본인 소아 연구에서, 발록사비르 마르복실은 투여 후 24시간 이내에 바이러스 역가의 일관되고 상당한 강하를 나타내었다. 이는 급성 바이러스 사멸에 대한 1차 PK 메트릭스로서 C₂₄의 선택 및 성인에 대한 노출-매치를 알리기 위해 이 메트릭스의 사용을 뒷받침한다. 그러나, 24시간을 초과하는 적절한 수준의 약물 노출이 바이러스 복제의 억제를 지속하는 역할을 할 수 있기 때문에, 모델 시뮬레이션은 또한 선택된 용량이 전체 약물 노출 (예를 들어, AUC_inf 및 C₇₂)의 관점에서 성인 노출과 적절하게 매치하도록 보장하였다. 바이러스 반동 및 시간 경과에 따른 더 적은 지속적인 약물 노출 (성인에 비해 더 짧은 T1/2) 사이의 연관성은 이 포인트에서 배제되지 않을 수 있다.

비일본인 소아 대상체에서 기대된 약물 노출의 시뮬레이션은 하기 2가지 최적화를 사용하여 일본 집단 PK 모델 (섹션 1.2, 표 5)로부터 수득되었다:

(1) 일본인 소아 환자에서 수득된 처분 파라미터 CL/F 및 Vc/F를 각각 1.72 및 1.36에 의해 환산하여, 글로벌 성인 집단 PK 모델로부터 추정된 바와 같이 이들 파라미터에서 기대된 민족적 효과를 설명하였다 (섹션 1.2, 표 4). 발록사비르 마르복실의 약동학에서 민족적 효과를 설명하기 위한 인자 1.72 및 1.36의 보다 상세한 설명은 문헌 [Koshimichi, Hiroki, et al. "Population Pharmacokinetic and Exposure-Response Analyses of Baloxavir Marboxil in Adults and Adolescents Including Patients With Influenza." Journal of pharmaceutical sciences (2018)]에서 찾을 수 있다.

(2) 문헌-기반 성숙 인자 (MF)는 개체발생을 모방하고 신생아 및 영아에서 보존적 용량을 선택하기 위한 시도에서 CL/F 파라미터를 감소시키는데 사용되었다. MF는 MF = PMAγ / (PMAγ + TM50γ)로 표현되었으며, 여기서 PMA는 월경후 연령 (주)이고, TM50은 50% 성숙까지의 성숙 반감기 (54.2주)이고, γ는 힐 계수 (3.92)이다. 성숙 인자 (MF)는 예를 들어 문헌 [Anderson, Paediatr Anaesth. 2011; 21: 222-37]에 기재되어 있다.

모델-기반 시뮬레이션 (민족적 효과 뿐만 아니라 체중을 고려)은 최대 20 kg까지 2 mg/kg 및 20 kg 초과에서 40 mg의 레지멘이 AUC_inf, C₂₄ 및 C₇₂의 관점에서 성인 약물 노출을 적절하게 모방할 것으로 예상될 수 있고, 연구 CP40559 (연구 1) 및 CP40563 (연구 2)을 위해 3개월 초과의 소아에서 선택되었음을 나타내었다. 더욱이, 시뮬레이션은 이 레지멘이 달성된 현재 노출 상한 미만의 C_max를 함유할 수 있고 지금까지 인간에서 안전한 것으로 확인되었음을 확인한다. 전체 약물 청소율을 약간 감소시키기 위해 불완전한 효소 성숙을 완전히 배제할 수 없는 더 어린 영아 (< 3개월)의 경우, 시뮬레이션은 성인과 약물 노출을 적절한 매치시키기 위해 1 mg/kg의 발록사비르 마르복실 투약이 충분하다는 것을 뒷받침한다.

비-아시아인 (예를 들어 백인, 예컨대 코카시안) 소아 환자에 대한 최적 용량을 유발한 시뮬레이션에 대한 추가 세부사항은 하기 실시예 4 및 5에서 제공된다.

실시예 4: 비-아시아인 소아 환자 (1-12세)에 대한 최적 용량에 대한 시뮬레이션

탐색된 3종의 투약 레지멘은 환자 중량에 기초하였다:

(1) 1 mg/kg < 40 kg, 40 mg 균일 ≥ 40 kg (이전에 제안된 레지멘),

(2) 1.5 mg/kg < 25 kg, 40 mg 균일 ≥ 25 kg, 및

(3) 2.0 mg/kg < 20 kg, 40 mg 균일 ≥ 20 kg.

참고로, 각 레지멘은 체중 (BW)-기반 투약이 중단될 체중에 맞춰 조정되며, 이에 의해 40 mg (성인 참조 용량)을 초과하는 위험을 관리한다. 총 약물 노출 (AUC_0-inf), 피크 약물 노출 (C_max), 및 투약 후 24시간 및 72시간에서의 약물 농도의 관점에서 다양한 BW 그룹에 대한 예상된 소아 약물 노출은 각각 도 1, 도 2, 도 3 및 도 4에 도시되어 있다. 효능에 대한 성인 참조 노출 분포는 전 세계적으로 성인에 대해 표시되며, 코카시안 및 아시아인에 대해 분리된다. 아시아인에서 철저한 QT (TQT) 연구는 지금까지 인간에서 달성된 현재 안전한 노출 상한을 제공한다. 이와 관련하여, Q 및 T는 심전도에서 2개의 피크이며, 2개의 피크 사이의 거리가 임상 연구 동안 변화하면 약물의 심장 책임을 나타낼 수 있다. 달리 말하면 "TQT"는 심장에 대해 조사된 약물의 부작용을 측정한다 (예를 들어, 문헌 [Grenier, Drug, healthcare and patient safety 10 (2018): 27] 참조).

이전 연구에 나타낸 바와 같이, 발록사비르의 경구 약물 청소율은 아시아인 소아에서 BW에 대한 0.632의 지수로 알로메트릭적으로 조정되는 것을 특징으로 한다. 이 관계에 기초하여, BW-조정된 경구 약물 청소율 (L/hr/kg)은 70 kg의 성인에 비교하여 10-kg 아동에서 약 2배 더 낮은 것으로 추정되었다. 이들 계산과 일치하여, 본원에 제공된 시뮬레이션은 특히 BW 25 kg 미만의 소아에서 투약 후 최대 72시간까지의 약물 수준 (도 4) 뿐만 아니라 총 약물 노출 (도 1) 둘 다의 관점에서 레지멘 3 (즉, 상기 표시된 레지멘 (3))이 성인 노출과 최적으로 매치함을 확인한다. 아동에서 더 높은 약물 청소율 및 따라서 더 빠른 처분에 비추어, BW당 더 높은 용량 (성인과 비교하여)은 또한 성인에서 보여지는 바와 유사한 수준으로 투약 후 적어도 72시간까지 약물 노출을 지속할 수 있다. 그러나, AUC_0-inf 및 C72에 대한 레지멘 3의 개선된 노출 매칭 (레지멘 1에 비해)이 약 2배 (레지멘 1에 비해)의 C_max (도 2) 및 C₂₄ (도 3)의 증가를 희생하면서 온다는 것은 도 4로부터 이해될 수 있다. 그럼에도 불구하고, 평균 피크 약물 수준은 성인 철저한 QT (TQT) 연구에서 측정된 수준 미만으로 유지될 것이다.

최적 레지멘은 이용가능한 데이터에 기초하여 가장 높은 이익-위험 프로파일을 제시해야 하며, 그러므로 저하된 효능 및 안전성의 위험 간의 균형을 유지해야 한다. 발록사비르 마르복실의 단일 용량은 성인 및 아시아인 소아 둘 다에서 내약성이 우수하였으며, 광범위한 용량 범위에서 바이러스 역가의 상당하고 일관된 감소가 관찰되며, 이는 광범위한 치료 창을 나타낸다. 이 광범위한 창에 따라, 약물 노출 및 유해 사건 발생 사이에 분명한 관계가 발견되지 않았다. 더욱이, 발록사비르가 TQT 연구에서 내약성이 우수하였기 때문에 (지금까지 인간에서 달성된 가장 높은 피크 및 총 약물 노출), 이 연구의 노출 데이터를 인간에서 안전한 노출 상한의 최상의 추정치로서 고려하는 것이 합리적으로 보인다.

최근에 완료된 연구에서, 20 kg 미만의 체중을 갖는 아시아인 소아에서 1 mg/kg의 발록사비르 마르복실을 사용하였다. 본 발명자들의 시뮬레이션은 레지멘 2 또는 3 (즉, 상기 명시된 레지멘 (2) 또는 (3))을 사용하여 총 (AUC_0-inf) 및 지속적인 (C₇₂) 약물 노출 둘 다의 관점에서 성인에 대한 보다 적절한 노출 매칭이 달성될 수 있음을 뒷받침한다. 그러나, 레지멘 3은 레지멘 2보다 성인 노출을 더 잘 모방하는 반면, 레지멘 둘 다는 성인에서 안전한 것으로 나타난 신뢰할 수 있는 기준 내에서 충분한 신뢰로 노출을 함유할 수 있다.

참고로, 본 발명자들의 시뮬레이션 외에도, 최근에 완료된 아시아인 소아 연구 1602T0833 (20 kg 미만의 체중을 갖는 소아 등록)에서 이용가능한 희소 PK 데이터는 약 100 ng/mL (1 mg/kg)의 평균에서 변동하기 위해 투약 후 잠시 약물 농도를 확인한다. PK는 용량에 따라 선형인 것으로 공지되어 있기 때문에, 2 mg/kg의 용량은 노출을 2배만큼 증가시킬 것으로 예상될 수 있다. 따라서, 레지멘 3 (즉, 상기 명시된 레지멘 (3))을 제안하는 것이 합리적으로 보인다: 최대 20 kg의 체중을 갖는 환자의 경우 2 mg/kg (및 20 kg 초과의 체중을 갖는 환자의 경우 40 mg 균일).

실시예 5: 비-아시아인 소아 환자 (0-1세)에 대한 최적 용량에 대한 시뮬레이션

탐색된 3종의 투약 레지멘은 하기와 같았다:

(1) 1 mg/kg (이전에 제안된 레지멘),

(2) 1.5 mg/kg, 및

(3) 2.0 mg/kg.

AUC_0-inf, C_max, C₂₄ 및 C₇₂의 관점에서 소아 약물 노출 분포의 시뮬레이션은 각각 도 5, 도 6, 도 7 및 도 8에 도시되어 있다.

1-12세 아동에 대한 시뮬레이션과 일치하여, 레지멘 3 (즉, 상기 명시된 레지멘 (3))은 적어도 3개월 이상의 영아의 경우 총 약물 노출 (AUC_0-inf) 및 C₇₂의 관점에서 성인 노출과 가장 최적으로 매치한다. 불완전한 효소 성숙이 전체 약물 청소율을 약간 감소시킬 수 있는 더 어린 영아 (< 3개월)의 경우, 시뮬레이션은 1 mg/kg의 발록사비르 마르복실 투약이 성인과 AUC_0-inf의 적절한 매칭에 충분하다는 것을 뒷받침한다. 3개월 초과의 영아에서, 레지멘 3을 사용한 AUC_0-inf의 전반적인 증가는 또한 C₇₂의 관점에서 성인에 대한 약물 노출의 매칭을 개선할 것으로 예상되지만 (도 8), 레지멘 1과 비교하여 C_max의 관점에서 대략 2배 증가한다 (도 6). 참고로, 발록사비르는 낮은 경구 약물 청소율을 갖기 때문에, 입증된 연령-독립적 절대 생체이용률 (1 mg/kg에서 아시아인 환자에서 보여지는 성인 및 아동에서 유사한 C_max) 외에도, C_max 예측은 연령-그룹에 걸쳐 상당히 높은 신뢰로 이루어질 수 있다 (또한 분포 부피가 BW에 비례하는 것으로 입증된 것을 참고).

종합하면, 이들 시뮬레이션은 2 mg/kg의 레지멘으로 3개월 이상의 영아에 대한 이익-위험 평가를 개선하는 능력을 뒷받침하는 반면, 1 mg/kg의 감소된 용량은 더 어린 영아 (4주-3개월) 뿐만 아니라 신생아 (0-4주)에 충분한 것으로 고려된다.

실시예 6: 본 발명의 화합물을 포함하는 과립의 제조

A. 과립 조성물의 제조

화합물 II는 예를 들어 국제 공개 번호 WO 2016/175224에 개시된 방법에 의해 생산될 수 있다.

화합물 I의 제조 방법

탄산칼륨 (1483.4 mg, 10.7 mmol), 아이오딘화칼륨 (549.5 mg, 3.3 mmol), 테트라히드로푸란 (33.1 g), N,N-디메틸아세트아미드 (3.8 g) 및 물 (80.3 mg)을 화합물 II (4.0 g, 8.3 mmol)에 첨가한 후 교반하였다. 생성된 혼합물을 60℃로 가열하고, 여기에 클로로메틸 메틸 카르보네이트 (1758.9 mg, 14.2 mmol)를 첨가하였다. 생성물을 60℃에서 9시간 동안 교반한 후, 20℃로 냉각하였다. 여기에 아세트산 (822.0 mg), 2-프로판올 (3.1 g) 및 물 (20.0 g)을 첨가하고, 생성물을 테트라히드로푸란 (1.8 g, 8.9 g)으로 2회 추출하였다. 용매를 약 32 g의 액체 중량으로 진공 농축을 통해 증류 제거하였다. 생성물을 45℃로 가열하고, 여기에 2-프로판올 (1.6 g)을 첨가하고, 생성물을 20℃로 냉각하였다. 아세트산나트륨 (339.0 mg) 및 물 (46.0 g)로부터 제조된 아세트산나트륨 수용액을 여기에 첨가한 후, 5℃로 냉각하였다. 생성물을 5℃에서 3시간 동안 교반한 후, 엷은 황색 침전물을 여과하였다. 이렇게 수득된 고체를 2-프로판올 (4.7 g) 및 물 (6.0 g)의 혼합물로 세척한 후, 고체를 다시 2-프로판올 (6.3 g)로 세척하였다. 이렇게 수득된 엷은 황색 고체에, 디메틸 술폭시드 (30.9 g)를 첨가한 후 교반하였다. 생성물을 60℃로 가열하고, 여기에 디메틸 술폭시드 (2.2 g) 및 물 (4.8 g)의 혼합물을 첨가하였다. 여기에 디메틸 술폭시드 (19.9 g) 및 물 (28.4 g)의 혼합물을 추가로 첨가한 후 20℃로 냉각하였다. 생성물을 20℃에서 3시간 동안 교반한 후, 생성된 백색 침전물을 여과하였다. 이렇게 수득된 고체를 디메틸 술폭시드 (8.0 g) 및 물 (4.8 g)의 혼합물로 세척하고, 고체를 다시 물 (12.0 g)로 세척하였다. 이렇게 수득된 고체를 건조하여 화합물 I (4.21 g)을 백색 결정으로서 얻었다.

¹H-NMR (DMSO-D6) δ: 2.91-2.98 (1H, m), 3.24-3.31 (1H, m), 3.44 (1H, t, J = 10.4 Hz), 3.69 (1H, dd, J = 11.5, 2.8 Hz), 3.73 (3H, s), 4.00 (1H, dd, J = 10.8, 2.9 Hz), 4.06 (1H, d, J = 14.3 Hz), 4.40 (1H, d, J = 11.8 Hz), 4.45 (1H, dd, J = 9.9, 2.9 Hz), 5.42 (1H, dd, J = 14.4, 1.8 Hz), 5.67 (1H, d, J = 6.5 Hz), 5.72-5.75 (3H, m), 6.83-6.87 (1H, m), 7.01 (1H, d, J = 6.9 Hz), 7.09 (1H, dd, J = 8.0, 1.1 Hz), 7.14-7.18 (1H, m), 7.23 (1H, d, J = 7.8 Hz), 7.37-7.44 (2H, m)

분말 X선 회절: 2θ (°): 특징적인 피크는 8.6°±0.2°, 14.1°±0.2°, 17.4°±0.2°, 20.0°±0.2°, 24.0°±0.2°, 26.3°±0.2°, 29.6°±0.2° 및 35.4°±0.2°에 존재한다.

화합물 I의 결정의 분말 X선 회절 패턴은 도 10에 표시되어 있다.

(1) 안정화제에 대한 연구

안정화제를 연구하기 위해, 표 7 내지 9 각각에 나타낸 안정화제 및 화학식 (I)로 나타내어지는 화합물을 습식-과립화하였으며, 관련 성분인 화학식 (II)로 나타내어지는 화합물의 증가량을 생산된 과립의 일시적 안정성 테스트 후 평가하였다. 표 6에 나타낸 제형을 갖는 제제를 교반 과립화 방법에 의해 생산하였다.

[표 6]

(제제를 제조하는 방법)

표 6에 나타낸 화학식 (I)로 나타내어지는 화합물, 정제된 백색 당, 분말화된 수소화 말토스 전분 시럽 (말티톨), 안정화제 및 히드록시프로필 셀룰로스를 고속 믹서 (FS-GS SJT 10 고속 믹서, 푸카에 파워텍 캄파니, 리미티드(Fukae Powtec Co., Ltd.))를 사용하여 혼합하고, 물을 혼합물에 첨가한 후 교반 과립화하였다. 그 후, 과립화 생성물을 파워 밀 (모델 P-3S, 쇼와 카가쿠키카이 캄파니, 리미티드(Showa Kagakukikai Co., Ltd.))에서 크기 선택에 적용하고, 생성물을 유동층 조립기 (WSG2&5 유동층 건조기 조립기, 오카와라 엠에프지. 캄파니, 리미티드(Okawara Mfg. Co., Ltd.))에서 65 내지 70℃에서 건조시켰다. 건조 후, 파워 밀 (모델 P-3S, 쇼와 카가쿠키카이 캄파니, 리미티드)에서 크기 선택에 의해 과립을 수득하였다. 고속 믹서에서의 과립화 조건은 하기와 같았다:

(과립화 조건)

- 조립기: FS-GS SJT 10 고속 믹서

- 교반기의 회전 속도: 250 rpm

- 초퍼의 회전 속도: 2500 rpm

- 용액 주입 가속도: 21 ± 2 g/min

- 수분: 4 내지 6.5 중량%

- 매싱 시간: 1 min ± 5 sec

(제제의 일시적 안정성 테스트)

생산된 제제를 60℃에서 2주 동안 저장하고, 관련 성분인 화학식 (II)로 나타내어지는 화합물의 증가량을 측정하였다.

(안정화제)

표 7 내지 9에 나타낸 바와 같이, 염화나트륨 (칸토 케미칼 캄파니, 인크.(Kanto Chemical Co., Inc.)), 염화칼륨 (와코 퓨어 케미칼 인더스트리즈, 리미티드(Wako Pure Chemical Industries, Ltd.)), 아스코르브산 (나칼라이 테스크, 인크.(Nacalai Tesque, Inc.)), 푸마르산 (머크사(Merck KGaA)), 중간쇄 지방산 트리글리세리드 미글리올 (미츠바 트레이딩 캄파니, 리미티드(Mitsuba Trading Co., Ltd.)), 트리에틸 시트레이트 (머크사), 아질산나트륨 (나칼라이 테스크, 인크.), 글리세린 (칸토 케미칼 캄파니, 인크.), 및 비타민 E (머크사)를 안정화제로서 사용하였다.

[표 7]

[표 8]

[표 9]

(화학식 (II)로 나타내어지는 화합물을 측정하는 방법)

화학식 (II)로 나타내어지는 화합물의 양을 하기 방법 및 조건을 사용하여 액체 크로마토그래피에 의해 측정하였다:

- 검출기: 자외선 흡수계 (측정 파장: 260 nm)

- 칼럼: XBridge C18, 3.5 μm, 3.0 x 150 mm

- 칼럼 온도: 대략 35℃의 일정한 온도

- 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산/0.2 mM EDTA 용액, 이동상 B: 아세토니트릴

- 이동상의 전달: 이동상 A 및 이동상 B 간의 혼합 비율이 표 10에 나타낸 바와 같이 변화하여 농도 구배를 제어함.

[표 10]

- 유속: 약 0.6 mL/min

- 주입 양: 5 μL

- 샘플 냉각기 온도: 약 5℃

- 오토인젝터용 세척 용액: 아세토니트릴/메탄올 혼합물 (1:3)

- 면적 측정 범위: 샘플 용액 주입 후 50분

- 화학식 (II)로 나타내어지는 화합물의 양을 계산하기 위한 방정식:

화학식 (II)로 나타내어지는 화합물의 양 (%) = (ATII / ΣA_T) × 100

ATII: 샘플 용액 중 화학식 (II)로 나타내어지는 화합물의 피크 면적

ΣA_T: 샘플 용액의 피크 면적의 합계 (블랭크 및 시스템 피크 배제)

(결과)

실시예 7-1 내지 7-6 및 비교예 7-1 내지 7-4의 제제의 일시적 안정성 테스트에서 화학식 (II)로 나타내어지는 화합물의 증가량 (%)은 표 11 내지 13에 나타낸다. 그 결과, 실시예 7-1 내지 7-6의 과립 중 화학식 (II)로 나타내어지는 화합물의 증가량 (%)은 비교예 7-4의 안정화제를 함유하지 않은 과립보다 더 낮았다. 특히, 실시예 7-1의 염화나트륨, 실시예 7-3의 아스코르브산, 실시예 7-4의 푸마르산 및 실시예 7-5의 중간쇄 지방산 트리글리세리드 미글리올을 함유하는 과립 중 화학식 (II)로 나타내어지는 화합물의 증가량은 비교예 7-4의 안정화제를 함유하지 않은 과립보다 훨씬 더 작았다.

[표 11]

[표 12]

[표 13]

(2) 부형제에 대한 연구

부형제를 연구하기 위해, 표 14 내지 16 각각에 나타낸 부형제 및 화학식 (I)로 나타내어지는 화합물을 습식-과립화하였으며, 관련 성분인 화학식 (II)로 나타내어지는 화합물의 증가량을 생산된 과립의 일시적 안정성 테스트 후 평가하였다.

(제제를 생산하는 방법)

표 14 내지 16 각각에 나타낸 부형제 및 화학식 (I)로 나타내어지는 화합물을 1:1의 비율로 백에서 혼합한 후, 혼합물을 30-메쉬 체 (와이어 직경: 0.22 mm)를 통해 체질하였다. 체질된 혼합된 분말을 막자사발에서 혼합한 후, 과립화 중 수분이 원료 투입량을 기준으로 약 5 중량%가 되도록 정제수를 서서히 첨가하고, 생성물을 막자를 사용하여 반죽하였다. 16-메쉬 와이어 (와이어 직경: 0.55 mm)를 통해 손으로 압박하면서 반죽된 생성물을 습식 크기 선택에 적용하였다. 크기 선택 후 과립화 생성물을 통풍 건조기에서 건조시키고, 20-메쉬 와이어 (와이어 직경: 0.40 mm)를 통해 손으로 압박하면서 과립을 제조하였다.

(제제의 일시적 안정성 테스트)

생산된 제제를 60℃에서 2주 동안 저장하고, 관련 성분인 화학식 (II)로 나타내어지는 화합물의 증가량을 측정하였다.

(부형제)

표 14 내지 16에 나타낸 바와 같이, 정제된 백색 당 (머크사), 수소화 말토스 전분 시럽 (말티톨, 로케트(ROQUETTE)), D-만니톨 (로케트), 락토스 수화물 (DMV-폰테라 엑서피언츠 게엠베하 앤드 코. 카게(DMV-Fonterra Excipients GmbH & Co. KG)), 소르비톨 (머크사), 에리트리톨 (로케트), 크실리톨 (로케트), 및 이소말트 (베네오-팔라티니트 게엠베하(Beneo-Palatinit GmbH)))를 부형제로서 사용하였다.

[표 14]

[표 15]

[표 16]

(결과)

실시예 7-7 내지 7-9 및 참조예 7-1 내지 7-5의 제제의 일시적 안정성 테스트에서 화학식 (II)로 나타내어지는 화합물의 증가량 (%), 및 각 부형제의 융점은 표 17 내지 19에 나타낸다. 그 결과, 실시예 7-7 내지 7-9의 과립 중 화학식 (II)로 나타내어지는 화합물의 증가량 (%)은 참조예 7-1, 7-2 및 7-5의 과립보다 약간 더 낮았다. 참조예 7-3 및 7-4의 과립 중 화학식 (II)로 나타내어지는 화합물의 증가량 (%)은 실시예 7-7 내지 7-9의 과립과 거의 동일한 반면, 실시예 7-7 내지 7-9와 비교하여 융점이 더 낮았으며, 그러므로 점착 가능성이 있었다. 따라서, 정제된 백색 당, 수소화 말토스 전분 시럽 (말티톨) 및 D-만니톨이 부형제로서 바람직하다고 간주하였다.

[표 17]

[표 18]

[표 19]

(3) 부형제의 조합에 대한 연구

정제된 백색 당, 수소화 말토스 전분 시럽 (말티톨) 및 D-만니톨을 바람직한 부형제로서 선택하였으나, 이들 부형제의 조합을 연구하기 위해, 표 20 및 21 각각에 나타낸 부형제의 조합 및 화학식 (I)로 나타내어지는 화합물을 습식-과립화하였으며, 생산된 과립을 (a) 관련 성분인 화학식 (II)로 나타내어지는 화합물의 증가량, (b) 물에서의 현탁성, (c) 용기 부착성, (d) 미세 과립 수율, 및 (e) 벌크 밀도에 대해 평가하였다. 표 20 및 21 각각에 나타낸 제형을 갖는 제제를 교반 과립화 방법에 의해 생산하였다.

[표 20]

[표 21]

(제제를 생산하는 방법)

표 20 및 21 각각에 나타낸 화학식 (I)로 나타내어지는 화합물, 부형제 및 폴리비닐 피롤리돈을 고속 믹서 (LFS-GS-2J 고속 믹서, 푸카에 파워텍 캄파니, 리미티드)를 사용하여 혼합하고, 물을 혼합물에 첨가한 후 교반 과립화하였다. 그 후, 과립화 생성물을 파워 밀 (모델 P-3S, 쇼와 카가쿠키카이 캄파니, 리미티드)에서 크기 선택에 적용하고, 생성물을 유동층 조립기 (MP-01 유동층 건조기 조립기, 파워렉스 코퍼레이션(Powrex Corp.))에서 65 내지 70℃에서 건조시켰다. 건조 후, 파워 밀 (모델 P-3S, 쇼와 카가쿠키카이 캄파니, 리미티드)에서 크기 선택에 의해 과립을 수득하였다. 고속 믹서에서의 과립화 조건은 하기와 같았다:

(과립화 조건)

- 조립기: LFS-GS-2J 고속 믹서

- 교반기의 회전 속도: 333 rpm

- 초퍼의 회전 속도: 2500 rpm

- 용액 주입 가속도: 20 ± 3.5 g/min

- 수분: 3 내지 7.5 중량%

- 매싱 시간: 1 내지 2 min ± 5 sec

(물에서의 제제의 현탁성 테스트)

9.5 mL의 물을 약 1 g의 본 제제에 첨가하였을 때 시각적으로 균일한 현탁액을 제조하는데 요구되는 뒤집기 혼합 횟수를 기록하였다.

(제제의 용기 부착성)

본 제제의 생산에서, 과립화 후 교반 조립기의 내부 벽에 부착하는 과립화 생성물의 양을 시각적으로 확인하였다. 긁어낸 후의 부착의 존재 또는 부재를 용기 부착성에 대한 지표로서 평가하였다.

(제제의 미세 과립 수율 측정)

100 g의 본 제제를 번호 30 및 140 체를 통해 체질하고, 체질된 과립의 총양에 대한 번호 30 체를 통해 통과하고 번호 40 체 위에 남아있는 과립의 양의 비율을 계산하였다.

(제제의 벌크 밀도 측정)

본 제제를 용기 (수용력: 100 mL)에 넘칠 때까지 주입하고, 용기의 상부 표면으로부터 과량을 제거하기 위해 제제를 조심스럽게 평준화하였다. 미리 무게를 잰 용기 중량으로부터 용기 내 제제 중량의 값을 수득하고, 벌크 밀도를 하기 방정식에 따라 결정하였다:

벌크 밀도 = 용기 내 제제 중량 / 100

(부형제)

표 20 및 21에 나타낸 바와 같이, 정제된 백색 당 (머크사), 수소화 말토스 전분 시럽 (말티톨, 로케트), 및 D-만니톨 (로케트)을 부형제로서 조합하여 사용하였다.

(결과)

실시예 7-10 내지 7-12 및 비교예 7-5 및 7-6의 제제의 물에서의 현탁성, 용기 부착성, 미세 과립 수율 및 벌크 밀도는 표 22 및 23에 나타낸다. 그 결과, 부형제로서 수소화 말토스 전분 시럽 (말티톨) 및 D-만니톨의 혼합물을 함유하는 실시예 7-10 내지 7-12의 제제는 물에서의 우수한 현탁성, 용기에 대한 작은 부착성, 및 0.5 g/mL 이상의 벌크 밀도를 가졌다. 특히, 실시예 7-10 및 7-11에서, 미세 과립 수율은 또한 90% 이상만큼 높았다. 다른 한편으로는, 부형제로서 정제된 백색 당 및 수소화 말토스 전분 시럽 (말티톨) 또는 정제된 백색 당 및 D-만니톨의 혼합물을 함유하는 비교예 7-5 및 7-6의 제제는 실시예보다 물에서의 현탁성이 열등하였고, 또한 큰 용기 부착성을 가졌다. 특히, 비교예 7-6에서, 미세 과립 수율은 또한 낮았다.

[표 22]

[표 23]

(4) 결합제에 대한 연구

결합제를 연구하기 위해, 표 24에 나타낸 결합제 및 화학식 (I)로 나타내어지는 화합물을 습식-과립화하였으며, 생산된 제제를 (a) 일시적 안정성 테스트 후 관련 성분인 화학식 (II)로 나타내어지는 화합물의 증가량 및 (b) 벌크 밀도에 대해 평가하였다. 표 24에 나타낸 제형을 갖는 제제를 교반 과립화 방법에 의해 생산하였다. 폴리비닐 피롤리돈 K25 (BASF) 및 히드록시프로필 셀룰로스 SL (신에츠 케미칼 캄파니, 리미티드(Shin-Etsu Chemical Co., Ltd.))을 결합제로서 사용하였다.

[표 24]

(제제를 생산하는 방법)

표 24에 나타낸 화학식 (I)로 나타내어지는 화합물, 정제된 백색 당, 수소화 말토스 전분 시럽 (말티톨), 및 결합제로서 히드록시프로필 셀룰로스 SL (니폰 소다 캄파니, 리미티드(Nippon Soda Co., Ltd.)) 또는 폴리비닐 피롤리돈 K25를 고속 믹서 (LFS-GS-2J 고속 믹서, 푸카에 파워텍 캄파니, 리미티드)를 사용하여 혼합하고, 물을 혼합물에 첨가한 후 교반 과립화하였다. 그 후, 과립화 생성물을 파워 밀 (모델 P-3S, 쇼와 카가쿠키카이 캄파니, 리미티드)에서 크기 선택에 적용하고, 생성물을 유동층 조립기 (MP-01 유동층 건조기 조립기, 파워렉스 코퍼레이션)에서 65 내지 70℃에서 건조시켰다. 건조 후, 파워 밀 (모델 P-3S, 쇼와 카가쿠키카이 캄파니, 리미티드)에서 크기 선택에 의해 과립을 수득하였다. 고속 믹서에서의 과립화 조건은 하기와 같았다:

(과립화 조건)

- 조립기: LFS-GS-2J 고속 믹서

- 교반기의 회전 속도: 333 rpm

- 초퍼의 회전 속도: 2500 rpm

- 용액 주입 가속도: 20 ± 3.5 g/min

- 수분: 3 내지 7.5 중량%

- 매싱 시간: 1 내지 2 min ± 5 sec

(제제의 일시적 안정성 테스트)

생산된 제제를 60℃에서 2주 동안 저장하고, 관련 성분인 화학식 (II)로 나타내어지는 화합물의 증가량을 측정하였다.

(제제의 벌크 밀도 측정)

본 제제를 용기 (수용력: 100 mL)에 넘칠 때까지 주입하고, 용기의 상부 표면으로부터 과량을 제거하기 위해 제제를 조심스럽게 평준화하였다. 미리 무게를 잰 용기 중량으로부터 용기 내 제제 중량의 값을 수득하고, 벌크 밀도를 하기 방정식에 따라 결정하였다:

벌크 밀도 = 용기 내 제제 중량 / 100

(결과)

실시예 7-13 및 7-14 및 참조예 7-6의 제제의 일시적 안정성 테스트에서 화학식 (II)로 나타내어지는 화합물의 증가량 (%), 및 벌크 밀도는 표 25에 나타낸다. 그 결과, 폴리비닐 피롤리돈을 함유하는 실시예 7-12 및 7-13의 제제 중 화학식 (II)로 나타내어지는 화합물의 증가량 (%)은 히드록시프로필 셀룰로스를 함유하는 참조예 7-6의 제제보다 더 낮았다. 폴리비닐 피롤리돈의 양이 1 중량%인 실시예 7-12의 제제에서 일시적 안정성 테스트에서의 화학식 (II)로 나타내어지는 화합물의 증가량 (%) 및 벌크 밀도는 폴리비닐 피롤리돈의 양이 3 중량%인 실시예 7-13의 제제보다 더 낮았다.

[표 25]

(5) 유동화제에 대한 연구

유동화제를 연구하기 위해, (a) 제제의 일시적인 저장 후 관련 성분의 양 및 (b) 제제 간의 점착성을 평가하였다. 표 26 및 27 각각에 나타낸 제형을 갖는 제제를 교반 과립화 방법에 의해 생산하였다. 1% 및 3% 경질 무수 규산 (카보실(Cab-o-sil), 캐보트 코포레이션(Cabot Corp.)), 1% 및 3% 수화 이산화규소 (RxCIPIENTS) 및 1% 및 3% 소듐 스테아릴 푸마레이트 (PRUV, JRS 파마(JRS Pharma))를 유동화제로서 사용하였다.

[표 26]

[표 27]

(제제를 생산하는 방법)

표 26 및 27 각각에 나타낸 화학식 (I)로 나타내어지는 화합물, 수소화 말토스 전분 시럽 (말티톨), D-만니톨, 폴리비닐 피롤리돈 K25, 수크랄로스, 유동화제 (경질 무수 규산, 수화 이산화규소, 및 소듐 스테아릴 푸마레이트 중 임의의 것) 및 딸기 향미를 고속 믹서 (LFS-GS-2J 고속 믹서, 푸카에 파워텍 캄파니, 리미티드)를 사용하여 혼합하고, 물을 혼합물에 첨가한 후 교반 과립화하였다. 그 후, 과립화 생성물을 파워 밀 (모델 P-3S, 쇼와 카가쿠키카이 캄파니, 리미티드)에서 크기 선택에 적용하고, 생성물을 유동층 조립기 (MP-01 유동층 건조기 조립기, 파워렉스 코퍼레이션)에서 65 내지 70℃에서 건조시켰다. 건조 후, 파워 밀 (모델 P-3S, 쇼와 카가쿠키카이 캄파니, 리미티드)에서 크기 선택에 의해 과립을 수득하였다. 고속 믹서에서의 과립화 조건은 하기와 같았다:

(과립화 조건)

- 조립기: LFS-GS-2J 고속 믹서

- 교반기의 회전 속도: 333 rpm

- 초퍼의 회전 속도: 2500 rpm

- 용액 주입 가속도: 20 ± 3.5 g/min

- 수분: 3 내지 7.5 중량%

- 매싱 시간: 1 내지 2 min ± 5 sec

(제제의 일시적 안정성 테스트)

생산된 본 제제를 60℃에서 2주 동안 저장하고, 관련 성분인 화학식 (II)로 나타내어지는 화합물의 증가량을 측정하였다.

(제제의 점착성 테스트)

1 g의 제제를 4 mL 갈색 병에 충전하고, 하기와 같이 평가하였다: 양호 (원으로 표시), 병을 3회 뒤집었을 때 바닥에 존재하는 제제가 유동화됨; 적정 (삼각형으로 표시), 병을 3회 뒤집었을 때 상부에 존재하는 제제가 유동화됨; 및 불량 (x-마크로 표시), 병을 3회 뒤집었을 때 제제가 유동화되지 않았음.

(결과)

실시예 7-15 내지 7-18 및 비교예 7-7 및 7-8의 제제의 일시적 안정성 테스트에서 화학식 (II)로 나타내어지는 화합물의 증가량 (%), 및 제제 간의 점착성은 표 28 및 29에 나타낸다. 그 결과, 실시예 7-15 내지 7-18의 제제 중 화학식 (II)로 나타내어지는 화합물의 증가량 (%)은 소듐 스테아릴 푸마레이트를 함유하는 비교예 7-7 및 7-8의 제제와 거의 동일하였고, 심지어 유동화제의 양이 변화되었을 때도 거의 동일하였다.

한편, 실시예 7-15 내지 7-18 및 비교예 7-7 및 7-8의 제제의 점착성을 연구한 결과, 실시예 7-15 내지 7-18의 제제는 비교예 7-7 및 7-8의 제제보다 더 작은 점착성을 가졌다.

[표 28]

[표 29]

(6) 현탁화제에 대한 연구

현탁화제를 연구하기 위해, 물에서의 제제의 현탁성을 평가하였다. 표 30에 나타낸 제형을 갖는 본 제제를 교반 과립화 방법에 의해 생산하였다. 히프로멜로스 (TC-5, 신에츠 케미칼 캄파니, 리미티드), 히드록시프로필 셀룰로스 (HPC-L, 니폰 소다 캄파니, 리미티드), 및 메틸 셀룰로스 (SM-4, 신에츠 케미칼 캄파니, 리미티드)를 현탁화제로서 사용하였다.

[표 30]

(제제를 생산하는 방법)

표 30에 나타낸 화학식 (I)로 나타내어지는 화합물, D-만니톨, 수소화 말토스 전분 시럽 (말티톨), 염화나트륨 및 폴리비닐 피롤리돈 K25를 수직형 조립기 (모델 VG-50, 파워렉스 코퍼레이션)를 사용하여 혼합하고, 물을 혼합물에 첨가한 후 교반 과립화하였다. 그 후, 과립화 생성물을 파워 밀 (모델 P-3S, 쇼와 카가쿠키카이 캄파니, 리미티드)에서 크기 선택에 적용하고, 생성물을 유동층 조립기 (GPGC-15&30 유동층 건조기 조립기, 파워렉스 코퍼레이션)에서 65 내지 70℃에서 건조시켰다. 건조 후, 파워 밀 (모델 P-3S, 쇼와 카가쿠키카이 캄파니, 리미티드)에서 크기 선택을 수행하였다. 크기 선택 후 과립화 생성물을, V-자형 믹서 (130 L V 유형 블렌더, 토쿠주 코포레이션(Tokuju Corp.) 제조)를 사용하여 수크랄로스, 현탁화제 (히프로멜로스, 히드록시프로필 셀룰로스, 및 메틸 셀룰로스 중 임의의 것), 경질 무수 규산 및 딸기 향미와 혼합하여 과립을 수득하였다.

(과립화 조건)

- 조립기: 수직형 조립기 VG-50

- 교반기의 회전 속도: 200 rpm

- 초퍼의 회전 속도: 2500 rpm

- 용액 주입 가속도: 105 ± 3 g/min

- 수분: 4.5 내지 7.5 중량%

- 매싱 시간: 1 내지 3 min ± 5 sec

(물에서의 제제의 현탁성 테스트)

1 g의 본 제제를 9.5 mL의 물을 함유하는 마개가 있는 용기에 첨가하고, 마개가 있는 용기를 왕복 40회 뒤집은 직후, 용기의 상부 및 하부로부터 액체를 수집하였다. 용기 뒤집기 완료 후, 용기를 실온에서 10분 동안 방치하고, 용기의 중앙부로부터 액체를 수집하였다. 수집된 액체 중 화학식 (I)로 나타내어지는 화합물의 농도를 측정하였다.

(화학식 (I)로 나타내어지는 화합물을 측정하는 방법)

화학식 (I)로 나타내어지는 화합물의 양을 하기 방법 및 조건을 사용하여 액체 크로마토그래피에 의해 측정하였다:

- 검출기: 자외선 흡수계 (측정 파장: 260 nm)

- 칼럼: 어큐티(ACQUITY) UPLC BEH C18 1.7 μm, 2.1 × 50 mm (워터스 코포레이션(Waters Corp.))

- 칼럼 온도: 대략 35℃의 일정한 온도

- 이동상 A: 0.1% 트리플루오로아세트산/0.2 mM EDTA 용액, 이동상 B: 아세토니트릴

- 이동상의 전달: 이동상 A 및 이동상 B 간의 혼합 비율이 표 31에 나타낸 바와 같이 변화하여 농도 구배를 제어함.

[표 31]

- 유속: 약 0.6 mL/min

- 주입 양: 4 μL

- 샘플 냉각기 온도: 약 5℃

- 오토인젝터용 세척 용액: 아세토니트릴

- 면적 측정 범위: 샘플 용액 주입 후 8분

- 화학식 (I)로 나타내어지는 화합물의 양을 계산하기 위한 방정식:

화학식 (I)로 나타내어지는 화합물의 양 (%) = MS / C ×A_T / A_S × 100

MS: 칭량된 양 (mg)

C: 제제 중 라벨링된 양 (mg/mL)

A_S: 표준 용액으로부터 수득된 피크 면적

A_T: 샘플 용액으로부터 수득된 피크 면적

(물에서의 현탁성의 평가)

제제의 현탁성을 하기 방정식에 따라 평가하였다:

용기 뒤집기 10분 후 용기의 중앙 위치에서 현탁액 중 화학식 (I)로 나타내어지는 화합물의 양의 비율 (%) = (용기 뒤집기 10분 후 용기의 중앙 위치에서 현탁액 중 화학식 (I)로 나타내어지는 화합물의 농도 / 용기 뒤집기 직후 용기의 중앙 위치에서 현탁액 중 화학식 (I)로 나타내어지는 화합물의 농도) × 100 (%)

(결과)

실시예 7-19, 참조예 7-7 및 7-8 및 비교예 7-9의 물에서의 제제의 현탁성은 표 32에 나타낸다. 그 결과, 실시예 7-19 및 참조예 7-7 및 7-8의 현탁액 중 화학식 (I)로 나타내어지는 화합물의 양의 비율은 현탁화제를 함유하지 않은 비교예 7-9의 현탁액보다 더 높았다. 특히, 히프로멜로스를 함유하는 실시예 7-19의 제제는 현탁액 중 화학식 (I)로 나타내어지는 화합물의 양의 높은 비율을 가졌고, 물에서의 양호한 현탁성을 가졌다.

[표 32]

(7) 윤활제에 대한 연구

윤활제를 연구하기 위해, 안식각을 제제의 유동성에 대한 지표로서 평가하였다. 표 33에 나타낸 제형을 갖는 제제를 교반 과립화 방법에 의해 생산하였다. 활석 (머크사, LUB)을 윤활제로서 사용하였다.

[표 33]

(제제를 생산하는 방법)

표 33에 나타낸 화학식 (I)로 나타내어지는 화합물, D-만니톨, 수소화 말토스 전분 시럽 (말티톨), 염화나트륨, 폴리비닐 피롤리돈 K25, 및 히프로멜로스를, 수직형 조립기 (모델 FM-VG50, 파워렉스 코퍼레이션)를 사용하여 혼합하고, 물을 혼합물에 첨가한 후 교반 과립화하였다. 그 후, 과립화 생성물을 파워 밀 (모델 P-3S, 쇼와 카가쿠키카이 캄파니, 리미티드)에서 크기 선택에 적용하고, 생성물을 유동층 조립기 (GPGC-15&30 유동층 건조기 조립기, 파워렉스 코퍼레이션)에서 65 내지 70℃에서 건조시켰다. 건조 후, 파워 밀 (모델 P-3S, 쇼와 카가쿠키카이 캄파니, 리미티드)에서 크기 선택을 수행하였다. 크기 선택 후 과립화 생성물을, V-자형 믹서 (130 L V 유형 블렌더, 토쿠주 코포레이션)를 사용하여 활석, 수크랄로스, 경질 무수 규산 및 딸기 향미와 혼합하여 과립을 수득하였다.

(과립화 조건)

- 조립기: 수직형 조립기 VG-50

- 교반기의 회전 속도: 200 rpm

- 초퍼의 회전 속도: 2500 rpm

- 용액 주입 가속도: 105 ± 3 g/min

- 수분: 4.5 내지 7.5 중량%

- 매싱 시간: 1 내지 3 min ± 5 sec

(제제의 안식각의 측정)

생산된 제제의 안식각을 하기 조건 하에 분말 테스터 (호소카와 마이크론 그룹(Hosokawa Micron Group))를 사용하여 측정하였다:

작동 시간: 170 sec, 감속: 10 sec, 진폭: 1.5 mm

(결과)

실시예 7-20 및 비교예 7-10의 제제의 안식각은 표 34에 나타낸다. 그 결과, 활석을 함유하는 실시예 7-20의 제제는 활석을 함유하지 않은 비교예 7-10의 제제보다 더 작은 안식각을 가졌으며, 이는 제제의 유동성이 활석 함유에 의해 향상될 수 있음을 입증한다.

[표 34]

(8) 방출률의 측정

표 33에 나타낸 실시예 7-20의 제제를 60℃에서 2주 동안 및 40℃ 및 75% 상대 습도에서 2주 동안 저장하고, 화학식 (I)로 나타내어지는 화합물의 방출률을 측정하였다.

(제제의 용해 특성 테스트)

생산된 제제를 60℃에서 2주 동안 및 40℃ 및 75% 상대 습도에서 2주 동안 저장하고, 화학식 (I)로 나타내어지는 화합물의 방출률을 일본 약전에 기재된 용해 테스트의 제2 방법 (패들법)에 의해 측정하였다. 용해 테스트 방법에 사용된 유체는 용해 테스트 제2 유체 (1% Tween 20 함유)였고, 패들의 회전 속도를 50 rpm으로 설정하였다.

(결과)

도 2에 나타낸 바와 같이, 60℃에서 2주 동안 저장 후 및 40℃ 및 75% 상대 습도에서 2주 동안 저장 후 실시예 7-20의 제제로부터의 방출률은 제조 직후 제제로부터의 방출률과 거의 차이가 없었다.

(9) 상이한 조성비를 갖는 제제

표 34에 나타낸 실시예 7-21을 교반 과립화 방법에 의해 실시예 7-20과 동일한 방법으로 제조하였다.

[표 35]

B. 경구 현탁액의 제조에 최적화된 과립의 제조

경구 현탁액의 제조에 최적화된 과립을 제조하였다. 과립화된 분말을 표준 습식 과립화 공정을 통해 제조하였다. 경구 현탁액을 위한 과립의 상세한 조성은 표 1에 나타내며, 부형제 사용에 대한 근거가 제공된다. 부형제 및 이들의 양은 0 내지 < 18세 연령의 의도된 소아 집단에 적합한 것으로 공지되어 있다. 과립을 물로 용이하게 재구성할 수 있다. 보다 구체적으로, 40 mg의 발록사비르 마르복실 (명목)을 함유하는 2 g 과립을 20 mL 물로 재구성할 수 있으며, 이는 2 mg의 화합물 /mL의 최종 농도에 상응한다.

경구 현탁액을 위한 과립의 상세한 조성은 표 36에 나타낸다.

[표 36]

경구 현탁액을 위한 발록사비르 마르복실 과립의 성분 및 조성

^a 정제수는 제조 과정 동안 제거된다.

^b 과충전, 예를 들어 0.13 g의 과립을 적용하여 재구성 후 표적화된 최대 추출가능한 부피 20 mL를 수득하고; 충전 중량은 벌크 과립에 대한 검정 값에 기초하여 조정될 수 있다.

발록사비르 마르복실을 사용한 성인 임상 연구에서 쓴맛이 보고되었으며, 쓴맛을 차폐하고 기호성을 보장하기 위해 여러 부형제, 예컨대 염화나트륨, 수크랄로스 및 딸기 향미가 제형에 포함되었다. 그러므로, 본 발명에 제공된 과립은 경구 현탁액의 형태로 투여되고 활성 화합물의 쓴맛이 차폐되는 장점을 갖는다. 따라서, 이들 과립은 소아 환자에서 화합물의 수용도를 개선하며, 이는 치료 효과의 달성에 기여한다.

실시예 7: 독감을 갖는 아동에서 1회-용량 발록사비르 마르복실 (조플루자)을 조사한 글로벌 III상 연구

방법:

miniSTONE-2는 2018/19 시즌 동안 주로 미국에서 수행된 달리 건강한 인플루엔자를 갖는 소아 환자에서의 III상, 글로벌 다기관, 무작위, 이중-맹검, 활성-대조 연구였다. 이 연구는 인플루엔자를 갖는 1 내지 12세 미만의 달리 건강한 아동에서 발록사비르 마르복실 (현탁액을 위한 과립 제형)의 1회-용량의 안전성 (1차 목표), 약동학 (PK) 및 효능 (2차 목표)을 평가하였다. 보다 구체적으로, 발록사비르 마르복실의 효과를 오셀타미비르의 효과와 비교하였다. 인플루엔자 감염은 신속한 인플루엔자 진단 테스트에 의해 인플루엔자-유사 증상 (38℃ 이상의 체온, 및 하나 이상의 호흡기 증상)을 나타내는 것으로 확인되었다.

환자들은 2:1로 무작위화되어, 발록사비르 마르복실의 체중-기반 단일 경구 용량 또는 오셀타미비르의 표준 경구 용량 (5일 동안 1일-2회 투약)을 투여받았다. 보다 구체적으로, 연구에 등록된 참가자는 2개의 코호트: 5 내지 12세 미만의 환자 및 1 내지 5세 미만의 환자로 병렬적으로 모집되었다. 코호트 둘 다의 환자는 무작위로 할당되어, 1회-용량의 발록사비르 마르복실 (20kg 미만의 환자의 경우 2mg/kg 또는 20kg 이상의 환자의 경우 40mg) 또는 오셀타미비르를 5일에 걸쳐 1일 2회 (투여 체중에 따라) 투약받았다.

1차 종점은 연구 29일차까지 유해 사건 또는 중증 유해 사건을 갖는 환자의 비율이었다. 2차 종점은 약동학 (PK), 인플루엔자 징후 및 증상의 경감까지의 시간, 및 열을 포함한 증상의 지속기간, 및 바이러스학에 대한 바이러스 역가에 의한 바이러스 배출 중단까지의 시간을 포함한다.

결과 요약:

이 연구는 인플루엔자를 갖는 1 내지 < 12세의 달리 건강한 아동에서 발록사비르 마르복실의 단일 용량의 안전성 (1차 목표), 약동학 및 효능을 조사하였다. 이 연구는 새로운 경구 현탁액으로 제공되는 발록사비르 마르복실 (조플루자)이 1 내지 12세 미만의 달리 건강한 아동에서 독감에 대한 우수한 내약성을 갖고 효과적인 잠재적인 치료임을 나타내었다.

수득된 결과는 하기와 같이 요약될 수 있다.

· 발록사비르는 내약성이 우수하였고, 새로운 안전성 신호가 확인되지 않았다.

o SAE 없음

· 발록사비르 및 오셀타미비르 그룹 간에 인구통계학적 또는 임상적 기준선 특징의 관련 차이가 인지되지 않았다.

o 중앙값 연령 6세; 53% 여성; 85% 코카시안; 발록사비르 및 오셀타미비르 그룹 간에 관련 차이가 관찰되지 않음

· 약동학 데이터

o 초기 '리드 인' PK는 성인 및 청소년과 일치하는 발록사비르 노출을 나타내었다.

· 발록사비르는 인플루엔자 징후 및 증상의 경감까지의 시간 (TASS) 종점에서 오셀타미비르와 비교하여 필적하는 효능을 나타내었다.

o TASS는 기침, 코 증상, 데이케어/학교/정상 활동으로의 복귀 (부모/간호인 설문지로부터) 및 열을 사용한다.

o TASS: 발록사비르 138시간 (CI 116.6, 163.2); 오셀타미비르 150시간 (CI 115.0, 165.7)

o TASS는 탐색적 종점이었고, 통계적 테스트를 거치지 않았다. 거의 동일한 신뢰 구간은 치료 사이에 필적하는 효능을 나타낸다.

· 바이러스 배출 중단까지의 시간의 분명한 차이

o 발록사비르 (24시간) 및 오셀타미비르 (76시간) 사이에 바이러스 배출 중단까지의 중앙값 시간의 분명한 차이가 있었다; 델타 56시간. 이들 데이터는 오셀타미비르-치료된 환자에서 3일과 비교하여 발록사비르-치료된 환자가 1일의 중앙값 시간 후에 더 이상 감염성이 아니라는 것을 계속 시사한다. 이는 인플루엔자의 전방 전파의 감소에 중요할 수 있다.

자세한 결과:

이 연구는 독감을 갖는 1 내지 12세 미만의 아동에서 발록사비르 마르복실 대 활성 비교기 (오셀타미비르)를 평가하였다.

모집된 176명의 소아 환자 중 124명은 ITTi 집단을 형성하였으며 (발록사비르 마르복실, n=81 vs 오셀타미비르, n=43), 이 중 89.7%는 인플루엔자 A 감염을 가졌다 (65.5% H3N2, 24.1% H1N1). 특별한 관심의 SAE, 사망 또는 유해 사건은 관찰되지 않았으며, 발록사비르 마르복실의 안전성 프로파일은 현재까지 임상 연구에서 관찰된 것과 일치하였다. BXM 그룹에서 관찰된 인플루엔자 징후 및 증상의 경감까지의 중앙값 시간 (138시간 [95% CI; 116.6,163.2])은 오셀타미비르 그룹 (150 시간 [95% CI; 115.0,165.7])에 필적하였다. 이전 III상 연구와 일치하게, 발록사비르 마르복실 (24.2시간 [95% CI; 23.5,24.6]) 및 오셀타미비르 (75.8시간 [95% CI; 68.9,97.8]) 사이에 바이러스 배출 중단까지의 중앙값 시간의 분명한 차이가 있었다.

그러므로, III상 miniSTONE-2 연구는 그의 1차 종점을 충족하였으며, 이는 발록사비르 마르복실 (조플루자)이 독감을 갖는 아동에서 내약성이 우수함을 입증한다. 상기 기재된 바와 같이, 연구는 또한 발록사비르 마르복실이 열을 포함한 독감 증상의 지속기간을 감소시키는데 있어 독감을 갖는 아동을 위한 입증된 효과적인 치료인 오셀타미비르에 필적함을 나타내었다.

결론:

발록사비르 마르복실의 단일 경구 용량은 내약성이 우수하였으며, 1 내지 < 12세의 달리 건강한 소아 환자에서 인플루엔자의 치료에 효과적이었다. MINISTONE-2 연구는 새로운 경구 현탁액으로 제공되는 발록사비르 마르복실 (조플루자)이 1 내지 12세 미만의 달리 건강한 아동에서 독감에 대한 내약성이 우수하고 효과적인 잠재적인 치료임을 나타내었다.

본 발명은 하기 뉴클레오티드 및 아미노산 서열에 관한 것이다:

서열식별번호: 1: 인플루엔자 A 바이러스 (A/WSN/1933(H1N1)): 젠뱅크(GenBank): X17336.1, I38T 돌연변이 포함. I38T 돌연변이는 밑줄 및 볼드체 표시되어 있다.

MEDFVRQCFNPMIVELAEKAMKEYGEDLKIETNKFAA T CTHLEVCFMYSDFHFIDEQGESIVVELGDPNALLKHRFEIIEGRDRTIAWTVINSICNTTGAEKPKFLPDLYDYKKNRFIEIGVTRREVHIYYLEKANKIKSEKTHIHIFSFTGEEMATKADYTLDEESRARIKTRLFTIRQEMASRGLWDSFRQSERGEETIEERFEITGTMRKLADQSLPPNFSSLENFRAYVDGFEPNGYIEGKLSQMSKEVNARIEPFLKSTPRPLRLPDGPPCSQRSKFLLMDALKLSIEDPSHEGEGIPLYDAIKCMRTFFGWKEPNVVKPHEKGINPNYLLSWKQVLAELQDIENEEKIPRTKNMKKTSQLKWALGENMAPEKVDFDDCKDVGDLKQYDSDEPELRSLASWIQNEFNKACELTDSSWIELDEIGEDAAPIEHIASMRRNYFTAEVSHCRATEYIMKGVYINTALLNASCAAMDDFQLIPMISKCRTKEGRRKTNLYGFIIKGRSHLRNDTDVVNFVSMEFSLTDPRLEPHKWEKYCVLEVGDMLLRSAIGHVSRPMFLYVRTNGTSKIKMKWGMEMRRCLLQSLQQIESMIEAESSVKEKDMTKEFFENKSETWPVGESPKGVEEGSIGKVCRTLLAKSVFNSLYASPQLEGFSAESRKLLLIVQALRDNLEPGTFDLGGLYEAIEECLINDPWVLLNASWFNSFLTHALR

서열식별번호: 2: 인플루엔자 A 바이러스의 서열 분획 (A/WSN/1933(H1N1)): 젠뱅크: X17336.1, I38T 돌연변이 포함. I38T 돌연변이는 밑줄 및 볼드체 표시되어 있다.

FAA T CTH

SEQUENCE LISTING <110> F. Hoffmann-La Roche AG Shionogi & Co., Ltd. <120> Improved dosage of baloxavir marboxil for pediatric patients <130> AB3294 PCT S3 <160> 2 <170> BiSSAP 1.3.6 <210> 1 <211> 716 <212> PRT <213> Influenza A virus (A/WSN/1933(H1N1)) <220> <223> GenBank: X17336.1, comprising the I38T mutation <400> 1 Met Glu Asp Phe Val Arg Gln Cys Phe Asn Pro Met Ile Val Glu Leu 1 5 10 15 Ala Glu Lys Ala Met Lys Glu Tyr Gly Glu Asp Leu Lys Ile Glu Thr 20 25 30 Asn Lys Phe Ala Ala Thr Cys Thr His Leu Glu Val Cys Phe Met Tyr 35 40 45 Ser Asp Phe His Phe Ile Asp Glu Gln Gly Glu Ser Ile Val Val Glu 50 55 60 Leu Gly Asp Pro Asn Ala Leu Leu Lys His Arg Phe Glu Ile Ile Glu 65 70 75 80 Gly Arg Asp Arg Thr Ile Ala Trp Thr Val Ile Asn Ser Ile Cys Asn 85 90 95 Thr Thr Gly Ala Glu Lys Pro Lys Phe Leu Pro Asp Leu Tyr Asp Tyr 100 105 110 Lys Lys Asn Arg Phe Ile Glu Ile Gly Val Thr Arg Arg Glu Val His 115 120 125 Ile Tyr Tyr Leu Glu Lys Ala Asn Lys Ile Lys Ser Glu Lys Thr His 130 135 140 Ile His Ile Phe Ser Phe Thr Gly Glu Glu Met Ala Thr Lys Ala Asp 145 150 155 160 Tyr Thr Leu Asp Glu Glu Ser Arg Ala Arg Ile Lys Thr Arg Leu Phe 165 170 175 Thr Ile Arg Gln Glu Met Ala Ser Arg Gly Leu Trp Asp Ser Phe Arg 180 185 190 Gln Ser Glu Arg Gly Glu Glu Thr Ile Glu Glu Arg Phe Glu Ile Thr 195 200 205 Gly Thr Met Arg Lys Leu Ala Asp Gln Ser Leu Pro Pro Asn Phe Ser 210 215 220 Ser Leu Glu Asn Phe Arg Ala Tyr Val Asp Gly Phe Glu Pro Asn Gly 225 230 235 240 Tyr Ile Glu Gly Lys Leu Ser Gln Met Ser Lys Glu Val Asn Ala Arg 245 250 255 Ile Glu Pro Phe Leu Lys Ser Thr Pro Arg Pro Leu Arg Leu Pro Asp 260 265 270 Gly Pro Pro Cys Ser Gln Arg Ser Lys Phe Leu Leu Met Asp Ala Leu 275 280 285 Lys Leu Ser Ile Glu Asp Pro Ser His Glu Gly Glu Gly Ile Pro Leu 290 295 300 Tyr Asp Ala Ile Lys Cys Met Arg Thr Phe Phe Gly Trp Lys Glu Pro 305 310 315 320 Asn Val Val Lys Pro His Glu Lys Gly Ile Asn Pro Asn Tyr Leu Leu 325 330 335 Ser Trp Lys Gln Val Leu Ala Glu Leu Gln Asp Ile Glu Asn Glu Glu 340 345 350 Lys Ile Pro Arg Thr Lys Asn Met Lys Lys Thr Ser Gln Leu Lys Trp 355 360 365 Ala Leu Gly Glu Asn Met Ala Pro Glu Lys Val Asp Phe Asp Asp Cys 370 375 380 Lys Asp Val Gly Asp Leu Lys Gln Tyr Asp Ser Asp Glu Pro Glu Leu 385 390 395 400 Arg Ser Leu Ala Ser Trp Ile Gln Asn Glu Phe Asn Lys Ala Cys Glu 405 410 415 Leu Thr Asp Ser Ser Trp Ile Glu Leu Asp Glu Ile Gly Glu Asp Ala 420 425 430 Ala Pro Ile Glu His Ile Ala Ser Met Arg Arg Asn Tyr Phe Thr Ala 435 440 445 Glu Val Ser His Cys Arg Ala Thr Glu Tyr Ile Met Lys Gly Val Tyr 450 455 460 Ile Asn Thr Ala Leu Leu Asn Ala Ser Cys Ala Ala Met Asp Asp Phe 465 470 475 480 Gln Leu Ile Pro Met Ile Ser Lys Cys Arg Thr Lys Glu Gly Arg Arg 485 490 495 Lys Thr Asn Leu Tyr Gly Phe Ile Ile Lys Gly Arg Ser His Leu Arg 500 505 510 Asn Asp Thr Asp Val Val Asn Phe Val Ser Met Glu Phe Ser Leu Thr 515 520 525 Asp Pro Arg Leu Glu Pro His Lys Trp Glu Lys Tyr Cys Val Leu Glu 530 535 540 Val Gly Asp Met Leu Leu Arg Ser Ala Ile Gly His Val Ser Arg Pro 545 550 555 560 Met Phe Leu Tyr Val Arg Thr Asn Gly Thr Ser Lys Ile Lys Met Lys 565 570 575 Trp Gly Met Glu Met Arg Arg Cys Leu Leu Gln Ser Leu Gln Gln Ile 580 585 590 Glu Ser Met Ile Glu Ala Glu Ser Ser Val Lys Glu Lys Asp Met Thr 595 600 605 Lys Glu Phe Phe Glu Asn Lys Ser Glu Thr Trp Pro Val Gly Glu Ser 610 615 620 Pro Lys Gly Val Glu Glu Gly Ser Ile Gly Lys Val Cys Arg Thr Leu 625 630 635 640 Leu Ala Lys Ser Val Phe Asn Ser Leu Tyr Ala Ser Pro Gln Leu Glu 645 650 655 Gly Phe Ser Ala Glu Ser Arg Lys Leu Leu Leu Ile Val Gln Ala Leu 660 665 670 Arg Asp Asn Leu Glu Pro Gly Thr Phe Asp Leu Gly Gly Leu Tyr Glu 675 680 685 Ala Ile Glu Glu Cys Leu Ile Asn Asp Pro Trp Val Leu Leu Asn Ala 690 695 700 Ser Trp Phe Asn Ser Phe Leu Thr His Ala Leu Arg 705 710 715 <210> 2 <211> 7 <212> PRT <213> Influenza A virus (A/WSN/1933(H1N1)) <220> <223> Sequence Fraction GenBank: X17336.1, comprising the I38T mutation <400> 2 Phe Ala Ala Thr Cys Thr His 1 5

Claims (29)

1. 인플루엔자 바이러스 감염을 치료하는 방법으로서, 여기서 상기 방법은 유효량의 화합물을 인플루엔자 바이러스 감염을 갖는 환자에게 투여하는 것을 포함하며, 여기서 화합물은 하기 화학식 I 및 II 중 하나를 갖거나:
   

   

   
   또는 그의 제약상 허용되는 염이고,
   여기서 하기 투여량이 사용되는 것인 방법:
   (i) 1세 미만인 환자에서:
   (a) 환자가 4주 미만인 경우, 유효량은 0.8-1.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 1 mg/kg 체중임;
   (b) 환자가 4주 이상 3개월 미만인 경우, 유효량은 0.8-1.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 1 mg/kg 체중임;
   (c) 환자가 3개월 이상 12개월 미만인 경우, 유효량은 1.8-2.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 2 mg/kg 체중임;
   (ii) 1세 이상 12세 미만인 환자에서:
   (a) 환자가 20 kg 미만의 체중을 갖는 경우, 유효량은 1.8-2.2 mg/kg 체중, 바람직하게는 약 2 mg/kg 체중임; 또는
   (b) 환자가 20 kg 이상의 체중을 갖는 경우, 유효량은 35-45 mg, 바람직하게는 약 40 mg임.
2. 제1항에 있어서, 환자가 백인인 방법.
3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 환자가 아시아인 민족성을 갖지 않는 것인 방법.
4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물이 과립의 현탁액 형태로 투여되는 것인 방법.
5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물이 경구로 투여되는 것인 방법.
6. 제1(ii)(a)항 및 제2항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 환자가 1세 이상 5세 미만인 방법.
7. 제1(ii)(b)항 및 제2항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 환자가 5세 이상 12세 미만인 방법.
8. 제1(ii)(b)항 및 제2항 내지 제5항 및 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 환자가 40 kg 미만인 체중을 갖는 것인 방법.
9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 환자가 인플루엔자 바이러스 감염을 제외하고는 건강한 것인 방법.
10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 환자가 인플루엔자 바이러스 감염을 갖는 것으로 진단되는 것인 방법:
    (a) 38℃ 이상의 열 (고막 체온); 및 적어도 하나의 호흡기 증상, 바람직하게는 기침 및/또는 비충혈의 존재로 인해; 및/또는
    (b) 인플루엔자 테스트 키트를 사용함으로써.
11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 인플루엔자 바이러스가 유형 A 인플루엔자 바이러스인 방법.
12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물이 증상 발병 시점으로부터 96시간 이내에, 바람직하게는 증상 발병 시점으로부터 48시간 이내에 투여되는 것인 방법.
13. 제12항에 있어서, 증상 발병이 적어도 하나의 전신 증상 및/또는 적어도 하나의 호흡기 증상의 발병 시점인 방법.
14. 제13항에 있어서, 적어도 하나의 전신 증상이 두통, 열감, 오한, 근육 통증, 관절 통증 및 피로로부터 선택된 적어도 하나의 증상인 방법.
15. 제13항 또는 제14항에 있어서, 적어도 하나의 호흡기 증상이 기침, 인후통 및 비충혈로부터 선택된 적어도 하나의 증상인 방법.
16. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물이 투여된 치료된 환자가 화합물이 투여되지 않은 비치료된 환자와 비교하여 감소된 바이러스학적 활성을 갖는 것인 방법.
17. 제16항에 있어서, 바이러스학적 활성이 하기에 의해 측정되는 것인 방법:
    (i) 바이러스 배출 중단까지의 시간의 결정;
    (ii) 인플루엔자 바이러스 역가의 결정; 및/또는
    (iii) 바이러스 RNA 양의 결정.
18. 제17(i)항에 있어서, 인플루엔자 바이러스 배출의 지속기간이 증상 발병 후 배출 중단까지의 시간으로서 측정되는 것인 방법.
19. 제17(iii)항에 있어서, 바이러스 RNA 양이 역전사효소-중합효소 연쇄 반응 (RT-PCR)을 사용함으로써 측정되는 것인 방법.
20. 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물이, 화합물이 투여되지 않은 비치료된 환자와 비교하여 인플루엔자 징후 및 증상의 경감까지의 시간 (TASS)을 적어도 6시간만큼, 바람직하게는 적어도 약 12시간만큼 감소시키는 것인 방법.
21. 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 인플루엔자 바이러스 감염의 진단으로부터 회복까지의 시간이 화합물이 투여되지 않은 비치료된 환자와 비교하여 화합물이 투여된 치료된 환자에서 감소되는 것인 방법.
22. 제20항 또는 제21항에 있어서, 하기 회복 기준 중 적어도 하나가 충족되고 적어도 21.5시간 동안 충족된 상태로 유지될 때 환자가 회복된 것인 방법:
    (i) 무열성 상태 (고막 체온 ≤ 37.2℃)로의 복귀;
    (ii) 캐나다 급성 호흡기 질병 및 독감 척도 (CARIFS)의 항목 14 및 15에 명시된 바와 같은 기침 및 코 증상에 대해 0 (문제 없음) 또는 1 (사소한 문제)의 스코어, 바람직하게는 (CARIFS)에 명시된 모든 18개 증상에 대해 0 (문제 없음) 또는 1 (사소한 문제)의 스코어;
    (iii) 바이러스 배출의 중단; 및/또는
    (iv) 정상적인 건강 및 활동으로의 복귀.
23. 제22(iv)항에 있어서, 환자가 데이케어 또는 학교로 복귀할 수 있고/거나 인플루엔자 바이러스 감염이 발생하기 전에 수행된 바와 동일한 방식으로 정상적인 일상 활동을 재개할 수 있는 경우 정상적인 건강 및 활동으로의 복귀가 달성되는 것인 방법.
24. 제16항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 비치료된 환자가 오셀타미비르로 투여된 것인 방법.
25. 제1항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물의 투여가 인플루엔자-관련 합병증의 발생을 예방하는 것인 방법.
26. 제25항에 있어서, 인플루엔자-관련 합병증이 방사선학적으로 확인된 폐렴, 기관지염, 부비동염, 중이염, 뇌염/뇌병증, 열성 경련 및 근염으로 이루어진 군으로부터 선택된 합병증 중 적어도 하나인 방법.
27. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 인플루엔자 바이러스 감염으로 인한 환자의 사망이 화합물의 투여에 의해 예방되는 것인 방법.
28. 제1항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 항생제의 요구가 화합물의 투여에 의해 예방되는 것인 방법.
29. 제1항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물이 화학식 (I)을 갖는 것인 방법.

Images