KR20210143354A - Method for Preparing Fermented Porcine Blood and a Feed Composition for poultry Using the Same - Google Patents

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KR20210143354A
KR20210143354A KR1020200059554A KR20200059554A KR20210143354A KR 20210143354 A KR20210143354 A KR 20210143354A KR 1020200059554 A KR1020200059554 A KR 1020200059554A KR 20200059554 A KR20200059554 A KR 20200059554A KR 20210143354 A KR20210143354 A KR 20210143354A
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김진경
박음미
김원주
신은철
김영우
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주식회사 삼다
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Abstract

According to the present invention, disclosed are a method for producing a pig blood fermented product having an egg laying increasing effect and a body weight increasing effect of poultry, and a poultry feed composition using the fermented product.

Description

양돈 혈액 발효물의 제조 방법과 그 발효물을 이용한 양계 사료 조성물{Method for Preparing Fermented Porcine Blood and a Feed Composition for poultry Using the Same}Method for Preparing Fermented Porcine Blood and a Feed Composition for poultry Using the Same

본 발명은 양돈 혈액 발효물의 제조 방법과 그 발효물을 이용한 양계 사료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a method for producing a fermented pig blood product and to a poultry feed composition using the fermented product.

국민생활의 향상과 소득 증대로 인해 육류 소비의 증가와 함께 국내 소와 돼지의 도축 두수 또한 증가하고 있다. 2000년대 초까지만 해도 선지를 입찰에 붙여 판매할 정도로 혈액 부산물은 인기가 많았으나, 식문화가 바뀌면서 이 중 절반 가량의 혈액은 재활용되지 못하고 폐기 처리되고 있다. The number of domestic cattle and pigs slaughtered is also increasing along with the increase in meat consumption due to the improvement of people's living standards and increase in income. Until the early 2000s, blood by-products were so popular that they were sold by bidding on seonji, but as food culture has changed, about half of the blood is not recycled and is being disposed of.

혈액은 대부분 단백질성 유기물질로 이루어져 있으며, 급속히 부패하여 악취를 발생시키는데, 일반적으로 동물 혈액 1톤을 처리하기 위해서는 상수 5톤이 요구되는 등 2015년 기준 t당 처리 비용이 41만원으로서, 국내에서 연간 약 250억이 처리 비용이 소요되고 있는 것으로 보고되고 있다.Blood is mostly composed of proteinaceous organic substances, and it decays rapidly and produces odor. In general, 5 tons of water is required to process 1 ton of animal blood. It is reported that about 25 billion of the processing cost is required per year.

따라서 도축 혈액을 위생적으로 수거, 분류하여 재활용할 수 있다면 폐수 처리 비용을 경감할 수 있고 환경 오염 또한 줄일 수 있어 바람직하다고 할 수 있다. 특히 2013년부터 런던 협약의 발효로 도축 혈액의 해양투기가 금지되었기 때문에 재활용 기술이 더욱 요구된다고 할 수 있다. Therefore, if slaughter blood can be collected, sorted and recycled hygienically, it is desirable to reduce wastewater treatment costs and reduce environmental pollution. In particular, it can be said that recycling technology is more demanded because dumping of slaughter blood at sea has been banned since the London Convention came into force in 2013.

명칭이 "동물 혈액을 이용한 액비의 제조방법"인 한국 등록특허 제1012648760000호, 명칭이 "가축 혈액을 이용한 아미노산 및 이를 이용한 유기질 비료의 제조방법"인 한국 등록특허 제1011003290000호 등에서 확인되는 바와 같이 최근 도축 혈액을 사료나 비료로 재활용하기 위한 연구가 진행되어 왔다. As confirmed in Korean Patent No. 1012648760000, which is titled "Method for manufacturing liquid fertilizer using animal blood," and Korean Patent No. 1011003290000, whose title is "Manufacturing method of amino acid and organic fertilizer using livestock blood," Research has been conducted to recycle slaughter blood as feed or fertilizer.

본 발명은 양돈 도축 혈액 발효물의 양계 사료로서의 재활용 기술 등을 개시한다.The present invention discloses a recycling technique and the like of fermented pig slaughter blood as poultry feed.

본 발명의 목적은 양돈 혈액 발효물의 제조 방법과 그 발효물을 이용한 양계 사료 조성물을 제공하는 데 있다.An object of the present invention is to provide a method for producing a fermented pig blood product and a poultry feed composition using the fermented product.

본 발명의 다른 목적이나 구체적인 목적은 이하에서 제시될 것이다.Other objects or specific objects of the present invention will be set forth below.

일 측면에 있어서, 본 발명은 양돈 혈액 발효물의 제조 방법에 관한 것이다.In one aspect, the present invention relates to a method for preparing a fermented pig blood.

본 발명의 제조 방법은 (a) 양돈 혈액을 준비하는 단계, 및 (b) 양돈 혈액에 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 아질리스 (Lactobacillus agilis), 락토바실러스 알리멘타리우스(Lactobacillus alimentarius), 락토바실러스 퍼멘툼(Latobacillus fermentum) 또는 락토바실러스 퍼멘툼과 사카로마이세스 세레비시애(Saccharomyces cerevisiae)의 혼합 균주를 접종하고 배양하여 발효시키는 단계를 포함함을 특징으로 한다.The manufacturing method of the present invention comprises the steps of (a) preparing pig blood, and (b) in pig blood Lactobacillus plantarum , Lactobacillus agilis ), Lactobacillus alimentarius ), Lactobacillus fermentum ( Latobacillus fermentum ) Or Lactobacillus fermentum and Saccharomyces cerevisiae ( Saccharomyces cerevisiae ) It is characterized by including the step of inoculating and culturing a mixed strain of fermentation.

본 발명의 방법에서, 양돈 혈액은 주 성분이 단백질이기 때문에 혈액의 보관시 혈액의 응고를 방지하고 발효를 원활하게 하기 위하여 혈액 응고 방지제가 첨가된 혈액일 수 있다. 혈액 응고 방지제는, 구연산나트륨, ACD(acid citrate dextrose), CPD(citrate phosphate dextrose), CPDA-1(CPD adenine-1) 등 당업계에 공지되어 있는 임의의 것을 사용할 수 있으며, 2~15%(v/v) 범위로 첨가되어 사용될 수 있다. In the method of the present invention, pig blood may be blood to which an anticoagulant is added to prevent blood clotting and facilitate fermentation when the blood is stored because the main component is protein. Anticoagulant, sodium citrate, ACD (acid citrate dextrose), CPD (citrate phosphate dextrose), CPDA-1 (CPD adenine-1), any known in the art may be used, and 2 to 15% ( v/v) may be added and used.

또 본 발명의 방법에서, 상기 양돈 혈액은 발효 전 단백가수분해효소로 가수분해되는 것이 바람직하다. 이러한 가수분해는 혈액의 응고를 방지하고 발효를 원활하게 하기 위한 것으로 임의의 단백가수분해효소를 사용하여 그 최적의 활성 조건에서 충분한 시간 동안 수행될 수 있다. 사용될 수 있는 단백가수분해효소로는 펩신, 트립신, 파파인, 브로멜라인(bromelain), 뉴트라제(Neutrase™), 프로타멕스(Protamex™), 알칼레이즈(Alcalase™), 프로비아(Provia™) 등을 들 수 있고, 해당 효소 활성의 최적의 온도 조건은 예컨대 펩신 37℃, 트립신 25℃, 프로멜라인 45℃, 뉴트라제와 프로타멕스 50℃, 알칼레이즈 60℃ 일 수 있으며, 가수분해시간은 24~72 시간 범위일 수 있다. 상기 가수분해효소는 통상 양돈 혈액의 1~3%(w/v)의 범위로 첨가되어 사용될 것이다. In addition, in the method of the present invention, the pig blood is preferably hydrolyzed with a proteolytic enzyme before fermentation. This hydrolysis is to prevent blood clotting and facilitate fermentation, and can be performed for a sufficient time under optimal active conditions using any proteolytic enzyme. Proteases that can be used include pepsin, trypsin, papain, bromelain, Neutrase™, Protamex™, Alcalase™, Provia™. and the like, and the optimum temperature conditions for the enzyme activity may be, for example, pepsin 37° C., trypsin 25° C., promeline 45° C., neutrase and protamex 50° C., alkaliase 60° C., and hydrolysis The time may range from 24-72 hours. The hydrolase will usually be added in the range of 1 to 3% (w/v) of pig blood.

또 본 발명의 방법에서, 양돈 혈액이나 양돈 혈액이 가수분해될 경우에는 그 가수분해물에 발효를 원활하게 하기 위한 탄소원이 첨가될 수 있다. 탄소원은 당업계에 공지된 임의의 탄소원이 사용될 수 있는데 예컨대 올리고당, 유당, 포도당, 과당, 설탕, 당밀, 덱스트로스 등이 사용될 수 있다. 발효 시간, 발효 정도 등을 고려하여 상기 가수분해물의 0.1%(w/v) 내지 10%(w/v) 범위에서 첨가될 수 있다. In addition, in the method of the present invention, when pig blood or pig blood is hydrolyzed, a carbon source for facilitating fermentation may be added to the hydrolyzate. As the carbon source, any carbon source known in the art may be used, for example, oligosaccharide, lactose, glucose, fructose, sugar, molasses, dextrose, and the like may be used. It may be added in the range of 0.1% (w/v) to 10% (w/v) of the hydrolyzate in consideration of the fermentation time, the degree of fermentation, and the like.

또 발명의 방법에서, 발효 온도는 15℃ 내지 45℃ 범위일 수 있다. 발효 속도를 고려할 때 30℃ 이상인 것이 바람직하다. Also in the method of the invention, the fermentation temperature may be in the range of 15°C to 45°C. Considering the fermentation rate, it is preferably 30° C. or higher.

또 발명의 방법에서, 발효 기간 즉 접종 후 발효 균주의 배양 기간은 3일 이상인 것이 바람직하다. 그것은 아래의 실시예가 보여주듯이, 발효 기간이 3일 이상일 경우 발효 균주의 안정기 상태에 도달하며, pH가 4.0으로서 일정하게 유지되기 때문이다. 혈액 시료는 주 성분이 단백질이기 때문에 상온에서 1~2일 방치되더라도 빠르게 부패하지만 pH 4.0일 경우 실온에서의 12개월 정도의 장기 보관이 가능한 장점을 가진다. Further, in the method of the present invention, the fermentation period, that is, the culture period of the fermented strain after inoculation, is preferably 3 days or more. This is because, as the examples below show, when the fermentation period is 3 days or more, a stable state of the fermentation strain is reached, and the pH is kept constant as 4.0. Since the main component of blood samples is protein, they decay quickly even if left at room temperature for 1 to 2 days, but at pH 4.0, they can be stored for a long time at room temperature for about 12 months.

또 발명의 방법에서, 아래의 실시예를 참조할 때, 가수분해한 양돈 혈액 사용하고 혼합 균주 사용하며, 탄소원은 설탕 6% 사용하고, 발효 온도는 30℃로 하여 6일 동안 발효하는 것이 바람직하다. 이렇게 얻어진 양돈 혈액 발효물은 pH가 4.0으로 장기 보관이 가능할 뿐만 아니라, 성분 분석 결과 납, 수은 등의 중금속이 검출되지 않고 항생제 등도 전혀 검출되지 않아 농림축산식품부고시 「사료 등의 기준 및 규격」에 적합한 것으로 나타났다.Also, in the method of the invention, when referring to the examples below, it is preferable to use hydrolyzed pig blood and use a mixed strain, use 6% sugar as the carbon source, and ferment for 6 days at a fermentation temperature of 30 ° C. . The fermented pig blood obtained in this way has a pH of 4.0 and can be stored for a long time, and as a result of the component analysis, no heavy metals such as lead and mercury and no antibiotics are detected. appeared to be suitable.

다른 측면에 있어서, 본 발명은 전술한 바의 제조 방법에 의하여 얻어진 양돈 혈액 발효물에 관한 것이다. 이 발효물은 후술하는 바와 같이 양계의 산란 증진 효과 및 양계의 체중 증가 효과를 가져 양계 사료의 첨가제로서 유용하게 사용될 수 있다. In another aspect, the present invention relates to a fermented pig blood obtained by the method as described above. This fermented product can be usefully used as an additive in poultry feed because it has an effect of enhancing egg laying of poultry and increasing the weight of poultry, as will be described later.

본 발명의 양돈 혈액 발효물은 발효 원액 자체, 또는 그 발효 원액을 동결건조, 감압농축, 진공건조, 분무건조, 열풍건조 등에 의하여 농축된 액상 또는 분말상의 형태로 이용될 수 있다. 발효물 중 원하는 유용성분을 농축하여 이용할 경우에는 발효물을 추출한 추출물 형태로 이용할 수도 있다. 추출물은 상기 발효물(발효 원액 또는 농축물)을 물, 메탄올, 에탄올, 부탄올 등의 탄소수 1 내지 4의 저급 알콜, 메틸렌클로라이드, 에틸렌, 아세톤, 헥산, 에테르, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, N,N-디메틸포름아미드(DMF), 디메틸설폭사이드(DMSO), 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 또는 이들의 혼합 용매를 사용하여 침출하여 얻어진 추출물, 이산화탄소, 펜탄 등 초임계 추출용매를 사용하여 얻어진 추출물 또는 그 추출물을 분획하여 얻어진 분획물을 의미하며, 추출 방법은 추출물질의 극성, 추출 정도, 보존 정도를 고려하여 냉침, 환류, 가온, 초음파 방사, 초임계 추출 등 임의의 방식을 적용할 수 있다. 추출물도 조추출액 자체, 또는 조추출액이 동결건조, 감압농축, 진공건조, 분무건조, 열풍건조 등에 의하여 농축된 액상 또는 분말상의 형태로 이용될 수 있다. The fermented pig blood of the present invention can be used in the form of a liquid or powder form of the fermentation stock itself, or the fermentation stock solution concentrated by freeze drying, vacuum concentration, vacuum drying, spray drying, hot air drying, or the like. In the case of concentrating desired useful components in the fermented product, it may be used in the form of an extract extracted from the fermented product. The extract is the fermented product (fermented stock solution or concentrate), water, methanol, ethanol, lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms such as butanol, methylene chloride, ethylene, acetone, hexane, ether, chloroform, ethyl acetate, butyl acetate, N ,N-dimethylformamide (DMF), dimethyl sulfoxide (DMSO), 1,3-butylene glycol, propylene glycol, or an extract obtained by leaching using a mixed solvent thereof, using a supercritical extraction solvent such as carbon dioxide or pentane refers to the extract obtained by the process or the fraction obtained by fractionating the extract, and the extraction method can be applied by any method such as chilling, reflux, heating, ultrasonic radiation, or supercritical extraction in consideration of the polarity of the extract, the degree of extraction, and the degree of preservation. have. The extract may also be used in a liquid or powder form in which the crude extract itself or the crude extract is concentrated by freeze drying, vacuum concentration, vacuum drying, spray drying, hot air drying, and the like.

또 다른 측면에 있어서, 본 발명은 전술한 바의 양돈 혈액 발효물을 유효성분으로 포함하는 산란 증진용 양계 사료 조성물 또는 체중 증가용 사료 조성물에 관한 것이다. In another aspect, the present invention relates to a feed composition for oviposition enhancement or a feed composition for weight gain comprising the fermented pig blood as described above as an active ingredient.

아래의 실시예는 양돈 혈액 발효물이 사료에 첨가되어 양계에 급여될 경우 산란 증진 효과, 구체적으로 산란 중량의 증가 효과와 산란률의 증가 효과를 나타내며, 또한 체중 증가 효과를 나타낸다. 이러한 효과를 양계 축산 농가의 경제적 이득으로 바로 연결될 수 있는 효과이다. The following examples show the effect of increasing the spawning effect, specifically, the effect of increasing the laying weight and the laying rate, when the fermented pig blood is added to the feed and fed to the poultry, and also shows the effect of increasing the weight. This effect can be directly connected to the economic benefits of poultry livestock farms.

본 발명의 사료 조성물에서, 양돈 혈액 발효물은 사료 조성물 전체 중량을 기준으로 할 때 의도한 산란 증진 효과와 체중 증가 효과를 고려하여 0.1 중량% 내지 10 중량% 범위로 포함될 수 있다. 아래의 실시예는 양돈 혈액 발효물 1 중량%로 사료에 첨가되어 양계에 3개월 동안 급여될 경우 체중 증가의 효과가 비교적 빠른 편이어서 12개월 이상 장기 급여시에는 과도한 체중 증가가 예상되고 그에 따라 질병 감수성이 높아질 것으로 예상되므로, 장기 급여시에는 양돈 혈액 발효물을 0.5 중량%로 사료 조성물에 첨가하는 것을 고려할 수 있다. In the feed composition of the present invention, the fermented pig blood may be included in the range of 0.1 wt% to 10 wt% in consideration of the intended egg-laying enhancement effect and weight gain effect based on the total weight of the feed composition. In the example below, when 1% by weight of fermented pig blood is added to the feed and fed to poultry for 3 months, the effect of weight gain is relatively fast. Since sensitivity is expected to increase, it may be considered to add 0.5% by weight of fermented pig blood to the feed composition during long-term feeding.

본 발명의 사료 조성물은 그 유효성분 이외에 양계의 성장에 필요한 사료의 통상적인 성분들을 포함하여 제조될 수 있다. 그러한 성분들로서는 양계의 성장에 도움이 되는 성분, 예컨대 전분 함유 물질, 단백질 함유 물질, 지방 함유 물질, 비타민 함유 물질, 무기질 함유 물질 등을 말한다.The feed composition of the present invention may be prepared by including common ingredients of feed necessary for the growth of poultry in addition to the active ingredient. Such ingredients refer to ingredients that are helpful for the growth of poultry, such as starch-containing substances, protein-containing substances, fat-containing substances, vitamin-containing substances, mineral-containing substances, and the like.

상기 전분 함유 물질은 일반적으로 옥수수, 콩, 밀, 수수, 보리, 귀리 등으로부터 얻어질 수 있다. 적합한 전분 함유 물질로서는 옥수수 분쇄물/분말, 귀리 분쇄물/분말, 콩 분쇄물/분말, 밀 분쇄물/분말 등을 들 수 있다. 바람직한 적합한 전분 함유 물질은 귀리 분말/분쇄물, 옥수수 분말/분쇄물, 밀 분말/분쇄물, 콩 분말/분쇄물 등이다. The starch-containing material may generally be obtained from corn, soybean, wheat, sorghum, barley, oats, and the like. Suitable starch-containing materials include corn grind/powder, oat grind/powder, soy grind/powder, wheat grind/powder and the like. Preferred suitable starch-containing materials are oat flour/grind, corn flour/grind, wheat flour/grind, soy flour/grind and the like.

상기 전분 함유 물질은 양계의 성장에 도움이 될 수 있다면, 본 발명의 사료 조성물에 포함되는 그것의 함량은 특정 범위로 제한되지 않는다. 일반적으로 전분 함유 물질은 약 30 내지 약 80 중량 %, 바람직하게는 약 40 내지 약 70 중량 %, 가장 바람직하게는 50 내지 70 중량 %의 범위로 본 발명의 사료 조성물에 포함될 수 있다.If the starch-containing material can help the growth of poultry, its content included in the feed composition of the present invention is not limited to a specific range. In general, the starch-containing material may be included in the feed composition of the present invention in the range of about 30 to about 80% by weight, preferably about 40 to about 70% by weight, and most preferably 50 to 70% by weight.

단백질 함유 물질은 통상 어분, 콩 분말 등과 같은 단백질 함유 물질이 사용되고 있는데, 다른 것들로서는 콩 단백질 농축물, 혈분, 혈장 단백질, 탈지유 건체물, 유(乳) 단백질 농축물, 옥수수 글루텐(Gluten) 분말, 밀 글루텐 분말, 이스트, 해바라기씨 분말 등을 들 수 있다. 바람직한 단백질 함유 물질은 어분, 혈분, 혈장 단백질, 콩 분말 등이다. As the protein-containing material, protein-containing materials such as fish meal, soybean powder, etc. are usually used, and others include soy protein concentrate, blood meal, plasma protein, dried skim milk, milk protein concentrate, corn gluten powder, Wheat gluten powder, yeast, sunflower seed powder, etc. are mentioned. Preferred protein-containing substances are fish meal, blood meal, plasma protein, soy flour and the like.

단백질 함유 물질도 가축 또는 양식 어류의 성장을 도움이 될 수 있는 한, 본 발명의 사료 조성물에 포함되는 그것의 함량은 중요하지 않다. 일반적으로, 단백질 함유 물질은 약 10 내지 약 50 중량 %, 바람직하게는 약 15 내지 약 40 중량 %, 가장 바람직하게는 18 내지 30 중량 %의 범위로 본 발명의 사료 조성물에 포함될 수 있다.As long as the protein-containing material can also help the growth of livestock or farmed fish, its content included in the feed composition of the present invention is not important. In general, the protein-containing material may be included in the feed composition of the present invention in the range of from about 10 to about 50% by weight, preferably from about 15 to about 40% by weight, and most preferably from 18 to 30% by weight.

본 발명의 사료 조성물에는 지방 함유 물질도 포함될 수 있다. 적합한 지방 함유 물질로서는 라드(Lard), 우지, 콩기름, 레시틴, 코코넛유 등을 포함하나 이에 한정되지는 않는다. 바람직한 지방 함유 물질은 콩기름, 코코넛유 및 라드 등이다.The feed composition of the present invention may also contain a fat-containing material. Suitable fat-containing substances include, but are not limited to, lard, tallow, soybean oil, lecithin, coconut oil, and the like. Preferred fat-containing substances are soybean oil, coconut oil and lard.

지방 함유 물질도 가축 또는 양식 어류의 성장에 도움이 될 수 있는 본 발명의 사료 조성물에 포함되는 그것의 함량은 중요하지 않다. 지방 함유 물질은 일반적으로 약 2 내지 약 20 중량 %, 바람직하게는 약 4 내지 약 15 중량 %, 가장 바람직하게는 6 내지 12 중량 %의 범위로 본 발명의 사료 조성물에 존재할 수 있다.The content of the fat-containing material included in the feed composition of the present invention, which can also help the growth of livestock or farmed fish, is not important. Fat-containing substances may generally be present in the feed composition of the present invention in the range of from about 2 to about 20% by weight, preferably from about 4 to about 15% by weight, and most preferably from 6 to 12% by weight.

본 발명의 사료 조성물은 또한 수용성·지용성 비타민과 무기물을 포함할 수 있다. 적합한 비타민으로서는 비타민 A, 비타민 D, 비타민 E, 비타민 K, 리보플라빈, 판토텐산(Pantothenic Acid), 나이아신, 비타민 B12, 엽산, 비오틴, 비타민 C 등을 들 수 있다. 적합한 무기물로서는 구리, 아연, 요오드, 셀렌, 망간, 철, 코발트, 등을 들 수 있다. The feed composition of the present invention may also include water-soluble and fat-soluble vitamins and minerals. Suitable vitamins include vitamin A, vitamin D, vitamin E, vitamin K, riboflavin, pantothenic acid, niacin, vitamin B12, folic acid, biotin, vitamin C, and the like. Suitable inorganic substances include copper, zinc, iodine, selenium, manganese, iron, cobalt, and the like.

일반적으로, 비타민이나 무기질이 본 발명의 사료 조성물에 포함될 경우에 그 본 발명의 사료 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 약 0.0001 내지 약 5 중량 %로 포함될 것이다.In general, when vitamins or minerals are included in the feed composition of the present invention, it will be included in an amount of about 0.0001 to about 5% by weight based on the total weight of the feed composition of the present invention.

또 다른 측면에 있어서, 본 발명은 전술한 바의 양돈 혈액 발효물을 양계에 급여하는 단계를 포함하는 양계의 산란 증진 방법 또는 양계의 체중 증가 방법에 관한 것이다.In another aspect, the present invention relates to a method for enhancing egg laying of poultry or a method for increasing weight of poultry, comprising feeding the poultry fermented swine blood as described above.

본 발명의 방법에서 양돈 혈액 발효물의 급여는 양돈 혈액 발효물을 사료에 첨가하거나 음용수에 첨가하여 이루어질 수 있다. Feeding of the fermented pig blood in the method of the present invention may be made by adding the fermented pig blood to feed or to drinking water.

전술한 바와 같이, 본 발명의 목적은 양돈 혈액 발효물의 제조 방법과 그 발효물을 이용한 양계 사료 조성물을 제공할 수 있다. 본 발명의 양돈 혈액 발효물은 양계에 급여될 경우 산란 증진 효과와 체중 증가 효과를 가진다.As described above, it is an object of the present invention to provide a method for producing a fermented pig blood and a poultry feed composition using the fermented product. When fed to poultry, the fermented pig blood of the present invention has an effect of increasing egg production and weight gain.

도 1과 도 2는 각각 가수분해한 혈액 시료와 가수분해하지 않은 혈액 시료에서 발효 균주의 생장 특성을 나타낸 것이다.
도 3은 탄소원의 첨가량을 달리한 혼합 균주의 생장 특성을 나타낸 것이다.
도 4는 발효 온도를 달리한 혼합 균주의 생장 특성을 나타낸 것이다.
1 and 2 show the growth characteristics of fermented strains in a hydrolyzed blood sample and a non-hydrolyzed blood sample, respectively.
Figure 3 shows the growth characteristics of the mixed strain with different amounts of carbon source added.
Figure 4 shows the growth characteristics of the mixed strain with different fermentation temperatures.

이하 본 발명을 실시예를 참조하여 설명한다. 그러나 본 발명의 범위가 이러한 실시예에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described with reference to Examples. However, the scope of the present invention is not limited to these examples.

<실시예> 양돈 혈액 발효물의 제조 및 그 발효물의 양계용 사료 첨가제로서의 효과 실험<Example> Production of fermented pig blood and the effect test of the fermented product as a feed additive for poultry

1. 양돈 혈액 발효물의 제조1. Preparation of fermented pig blood

양돈 혈액 시료는 제주도 소재 도축장에서 구입하였고, 이 혈액 시료에 혈액 응고 방지제인 4% 구연산나트륨 용액 10%(v/v)를 첨가하여 실험 전까지 냉동 보관하였다.Pig blood samples were purchased from a slaughterhouse in Jeju Island, and 10% (v/v) of 4% sodium citrate solution, a blood clotting agent, was added to the blood samples and stored frozen until the experiment.

냉동 보관한 혈액 시료를 상온에서 해동시키고 여기에 단백가수분해효소 프로비아(Provia™, Novozyme, Co.) 1%(w/v) 첨가하여 효소의 최적 활성 조건인 55℃에 3시간 가수분해를 수행하였다. The frozen blood sample was thawed at room temperature, 1% (w/v) of the protease Provia™, Novozyme, Co., was added thereto, and hydrolysis was performed at 55°C, the optimal activity condition for the enzyme, for 3 hours. did.

상기 단백가수분해효소를 처리하지 않은 혈액 시료 또는 상기 단백가수분해효소를 처리한 혈액 시료에, 탄소원으로 설탕을 첨가하고 혼합한 후, 여기에 5종의 발효 균주 즉 (i) 락토바실러스 플란타럼 KCTC 21004(Lactobacillus plantarum KCTC 21004) 배양액(2.3×108 cell/ml), (ii) 락토바실러스 아질리스 KCTC 3606(Lactobacillus agilis KCTC 3606) 배양액(3.6×108 cell/ml), (iii) 락토바실러스 알리멘타리우스 KCTC 3593( Lactobacillus alimentarius KCTC 3593) 배양액(2.6×108 cell/ml), (iv) 락토바실러스 퍼멘툼 KACC 15736(Latobacillus fermentum KACC 15736) 배양액(1.5×108 cell/ml), 또는 (v) 락토바실러스 퍼멘툼 KACC 15736 배양액(1.5×108 cell/ml)과 사카로마이세스 세레비시애 KCTC 7083(Saccharomyces cerevisiae KCTC 7083) 배양액(4.5×107 cell/ml)의 1:1 혼합액을 6%(v/v)로 혼합하여 접종하고 50-70rpm 교반하며 배양하여 양돈 혈액 발효물을 제조하였다. 상기에서 유산균 배양액은 MRS Broth 배지에서 준비하였으며, 효모균 배양액은 YM Broth 배지에서 준비하였다. To a blood sample not treated with the proteolytic enzyme or a blood sample treated with the proteolytic enzyme, sugar is added as a carbon source and mixed, and then 5 fermented strains, namely (i) Lactobacillus plantarum KCTC 21004 ( Lactobacillus plantarum KCTC 21004) culture medium (2.3×10 8 cell/ml), (ii) Lactobacillus agilis KCTC 3606 ( Lactobacillus agilis KCTC 3606) culture medium (3.6×10 8 cell/ml), (iii) Lactobacillus Alimentarius KCTC 3593 ( Lactobacillus alimentarius KCTC 3593) culture solution (2.6×10 8 cell/ml), (iv) Lactobacillus fermentum KACC 15736 ( Latobacillus fermentum KACC 15736) culture solution (1.5×10 8 cell/ml), or ( v) Lactobacillus fermentum KACC 15736 culture solution (1.5×10 8 cell/ml) and Saccharomyces cerevisiae KCTC 7083 (Saccharomyces cerevisiae KCTC 7083) culture solution (4.5×10 7 cell/ml) 1:1 mixed solution Inoculated by mixing at 6% (v/v), and cultured with stirring at 50-70rpm to prepare a fermented pig blood. In the above, the lactic acid bacteria culture medium was prepared in MRS Broth medium, and the yeast culture medium was prepared in YM Broth medium.

2. 균수 측정2. Bacteria count measurement

균수는 준비된 배양액 시료를 균질화하여 stock solution으로 하고 이 stock soloution을 멸균한 생리식염수(0.85% NaCl 용액)로 10배씩 희석하여 working solution을 제조하였다. 이를 petri film 배지에 1ml 씩 접종하고 35℃ 인큐베이터에서 48 시간 배양하여 집락 수를 확인하였다.For the number of bacteria, a stock solution was prepared by homogenizing the prepared culture solution, and the stock solution was diluted 10-fold with sterilized physiological saline (0.85% NaCl solution) to prepare a working solution. 1ml of this was inoculated into petri film medium and cultured in an incubator at 35°C for 48 hours to check the number of colonies.

3. 균주 생장 및 발효 특성3. Strains Growth and Fermentation Characteristics

3.1 단백가수분해 유무에 따른 생장 특성3.1 Growth characteristics according to the presence or absence of proteolysis

가수분해한 혈액 시료와 가수분해하지 않은 혈액 시료에서 탄소원인 설탕을 6%(w/v) 사용하고 30℃에서 7일 동안 배양한 결과를 각각 도 1과 도 2에 나타내었다.The results of using 6% (w/v) sugar as a carbon source in the hydrolyzed blood sample and the non-hydrolyzed blood sample and culturing at 30° C. for 7 days are shown in FIGS. 1 and 2, respectively.

가수분해한 혈액 시료의 경우, 도 1에서 확인되는 바와 같이, 모든 발효 균주에서 빠른 생장을 보였고, 혈액 응고 현상도 나타나지 않았다.In the case of the hydrolyzed blood sample, as can be seen in FIG. 1 , all fermented strains exhibited rapid growth, and no blood coagulation was observed.

가수분해하지 않은 혈액 시료의 경우에는, 도 2에서 확인되는 바와 같이 5종의 발효 미생물이 모두 느린 생장을 나타내었으나, 락토바실러스 퍼멘툼 균주와, 락토바실러스 퍼멘툼과 사카로마이세스 세레비시애 혼합 균주는 상대적으로 빠른 생장을 보였다. 배양액도 배양 후 2일째부터 응고하기 시작하여 3일째에는 강하게 응고하였다. In the case of a non-hydrolyzed blood sample, as shown in FIG. 2 , all five fermenting microorganisms exhibited slow growth, but a Lactobacillus fermentum strain and a Lactobacillus fermentum and Saccharomyces cerevisiae mixture were mixed. The strain showed relatively fast growth. The culture medium also started to coagulate from the 2nd day after culturing, and solidified strongly on the 3rd day.

이러한 생장 특성을 고려하여 이후의 생장 특성 조사는 혼합 균주에 대해서 수행하였다.In consideration of these growth characteristics, the subsequent growth characteristics investigation was performed on the mixed strain.

3.2 탄소원에 따른 첨가량에 따른 생장 특성3.2 Growth characteristics according to the amount added according to the carbon source

혈액 시료는 가수분해한 혈액 시료를 사용하였고, 탄소원은 설탕을 1%, 3%, 5%, 7% 또는 10%로 사용하였으며, 배양 온도는 30℃로 하였다. 발효는 혼합 균주를 사용하였다. 5일 동안 배양한 결과를 도 3에 나타내었다.As the blood sample, a hydrolyzed blood sample was used, 1%, 3%, 5%, 7% or 10% of sugar was used as the carbon source, and the incubation temperature was 30°C. For fermentation, a mixed strain was used. The results of culturing for 5 days are shown in FIG. 3 .

도 3을 참조하여 보면, 당 첨가 농도 1% 처리구에서는 배양 개시 후 1일째까지 생장이 증가하였으나 2일째부터는 생장이 크게 둔화되었으며, 당 첨가농도 3% 처리구에서는 3일째까지 빠른 생장을 나타내었으며, 이후 생장이 또한 크게 둔화되었다. 당 첨가 농도 5% 이상에서는 배양 개시 후 지속적인 생장을 나타내었으며, 4일째까지 빠른 생장을 나타내었다. 따라서 경제적인 발효의 수행을 위해서 당 첨가농도는 5-7% 범위가 적절한 것으로 판단하였다.Referring to FIG. 3 , in the group treated with 1% sugar concentration, growth increased until the 1st day after initiation of culture, but the growth was significantly slowed from the second day, and the group treated with 3% sugar concentration showed rapid growth up to the 3rd day, and then Growth was also significantly slowed. At a sugar concentration of 5% or more, continuous growth was observed after initiation of culture, and rapid growth was exhibited until the 4th day. Therefore, for economical fermentation, the sugar concentration was determined to be in the range of 5-7%.

3.3 발효 온도에 따른 생장 특성3.3 Growth characteristics according to fermentation temperature

혈액 시료는 가수분해한 혈액 시료를 사용하였고, 탄소원은 설탕을 6%로 사용하였으며, 발효 온도는 15℃, 20℃, 30℃ 또는 40℃로 하였다. 발효는 혼합 균주를 사용하였다. 8일 동안 배양한 결과를 도 4에 나타내었다. As the blood sample, a hydrolyzed blood sample was used, 6% sugar was used as the carbon source, and the fermentation temperature was 15°C, 20°C, 30°C or 40°C. For fermentation, a mixed strain was used. The results of culturing for 8 days are shown in FIG. 4 .

도 4를 참조하여 보면, 15℃ 처리구에서는 배양기간 동안 완만하게 생장을 나타내었으며, 배양 종료 시 가장 낮은 생장 특성을 보였다. 20℃ 처리구에서는 완만하게 생장을 보이다가 4일째에 둔화되며 안정기 상태로 나타났다. 30℃ 처리구에서는 상대적으로 빠른 생장을 보이면서, 4일째에는 안정기 에 접어들면서 균수가 108cell/ml의 수준을 나타내었다. 40℃ 처리구에서는 2일째까지 급속한 생장을 나타내어, 108cell/ml의 수준에 도달하였으며, 3일째부터는 안정기 상태임을 나타내었다. 전체적으로 온도가 높아짐에 따라 생장 특성은 증가하는 경향을 나타내었는데, 경제성과 발효속도를 30℃ 이상을 적정 발효 온도로 판단하였다.Referring to FIG. 4 , the 15° C. treatment group showed gentle growth during the incubation period, and showed the lowest growth characteristics at the end of the culture. In the 20 ℃ treatment group, growth was shown slowly, but on the 4th day, it slowed down and appeared to be in a stable state. In the 30℃ treatment group, relatively fast growth was observed, and on the 4th day, the number of bacteria reached a level of 10 8 cells/ml as it entered a stable phase. In the 40 ℃ treatment group, it showed rapid growth until the 2nd day , reaching the level of 10 8 cell/ml, and from the 3rd day it was shown to be in a stable state. Overall, as the temperature increased, the growth characteristics tended to increase. For economic feasibility and fermentation rate, 30℃ or higher was judged as an appropriate fermentation temperature.

3.4 최적의 발효 조건에서의 발효 특성3.4 Fermentation Characteristics under Optimal Fermentation Conditions

상기에서 확인한 최적의 발효 조건, 즉 가수분해한 혈액 시료 사용, 혼합 균주 사용, 탄소원 설탕 6% 사용, 발효 온도 30℃, 총 6일 동안 발효한 양돈 혈액 발효물의 특성을 아래의 표 1에 정리하였다. The optimal fermentation conditions identified above, that is, the use of hydrolyzed blood samples, the use of mixed strains, the use of 6% carbon source sugar, the fermentation temperature of 30° C., and the characteristics of the fermented pig blood fermented for a total of 6 days are summarized in Table 1 below. .

아래의 표 1을 참조하여 보면, 발효 개시 후 3일째에는(10월 27일) 균수, pH, 발효취, 색상 등으로부터 발효 종료 시점에 도달한 것으로 판단되며, 4일째부터 6일째까지는 균수는 다소 증가하며, pH는 4.0으로서 일정하게 유지되어, 생장기보다 안정기 상태로 나타났다. 특히 pH 4.0으로 일정하게 유지되어 실온에서의 12개월 정도의 장기보관이 가능한 것으로 판단되었다. Referring to Table 1 below, on the 3rd day (October 27) after the start of fermentation, it is judged that the fermentation end point has been reached from the number of bacteria, pH, odor, color, etc., and from the 4th to the 6th day, the number of bacteria is somewhat increased, and the pH was kept constant as 4.0, and appeared to be in a more stable state than in the growth phase. In particular, it was determined that the pH was kept constant at 4.0, allowing long-term storage at room temperature for about 12 months.

Figure pat00001
Figure pat00001

또 일반 성분 분석 결과를 표 2에 나타내었다. 표 2를 참조하여 보면, 납, 수은 등의 중금속은 검출되지 않았으며, 항생제 등도 전혀 검출되지 않았다. 이러한 결과는 농림축산식품부고시 「사료 등의 기준 및 규격」에 적합한 것으로 나타났다.In addition, the general component analysis results are shown in Table 2. Referring to Table 2, heavy metals such as lead and mercury were not detected, and antibiotics were not detected at all. These results were found to be suitable for the 「Standards and Specifications for Feed, etc.」 of the Ministry of Agriculture, Food and Rural Affairs.

Figure pat00002
Figure pat00002

4. 양계장 현장 평가4. Poultry Field Assessment

4.1 실험 방법4.1 Experimental method

육계(품종: 한협3호)의 체중 평가는 2018년 11월 1일부터 2019년 3월 2일까지 수행하였다.The weight evaluation of broilers (variety: Hanhyup No. 3) was performed from November 1, 2018 to March 2, 2019.

산란계(품종: 하이라인브라운, 종류: 갈색종, 갈색란)의 산란율의 평가는 2019년 2월 1일부터 2019년 3월 2일까지 수행하였다.The evaluation of the laying rate of laying hens (variety: high line brown, type: brown species, brown eggs) was performed from February 1, 2019 to March 2, 2019.

사료는 동양사료사(경기, 한국)의 산란용 양계사료와 육계용 양계사료(대조구)와 여기에 상기 최적의 발효 조건에서 얻은 양돈 혈액 발효물의 동결건조 분말 1%(w/w) 첨가한 사료(처리구)를 사용하였다. The feed is a feed added with 1% (w/w) of freeze-dried powder of fermented pig blood obtained under the optimal fermentation conditions of Dongyang Feed (Gyeonggi, Korea) for laying poultry feed and poultry feed for broilers (control). (treatment group) was used.

사료는 실험 기간 동안 자유 급여하였으며, 물은 자동급수기를 이용하여 자유로이 음용할 수 있도록 하였다.Feed was freely supplied during the experiment period, and water was freely drinkable using an automatic drinker.

4.2 실험 결과4.2 Experimental results

육계의 체중 평가 결과를 아래의 표 3에, 산란계의 산란율 등의 평가 결과를 아래의 표 4에 나타내었다.The results of the weight evaluation of broilers are shown in Table 3 below, and the evaluation results such as the laying rate of laying hens are shown in Table 4 below.

표 3을 참조하여 보면, 실험 기간 동안 체중 증가율이 대조구가 6.9%임에 비하여, 처리구는 13.3%로 뚜렷하게 증가하였음을 확인할 수 있다.Referring to Table 3, it can be seen that the weight increase rate during the experiment period was significantly increased to 13.3% in the treated group, compared to 6.9% in the control group.

또 표 4를 참조하여 보면, 실험 기간 동안 산란수와 산란률이 유의적으로 증가하였음을 알 수 있다.Also, referring to Table 4, it can be seen that the number of scattering and the scattering rate significantly increased during the experiment period.

Figure pat00003
Figure pat00003

Figure pat00004
Figure pat00004

Claims (8)

(a) 양돈 혈액을 준비하는 단계, 및
(b) 양돈 혈액에 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 아질리스 (Lactobacillus agilis), 락토바실러스 알리멘타리우스(Lactobacillus alimentarius), 락토바실러스 퍼멘툼(Latobacillus fermentum) 및 락토바실러스 퍼멘툼과 사카로마이세스 세레비시애(Saccharomyces cerevisiae)의 혼합 균주 중에서 선택된 발효 균주를 접종하고 배양하여 발효시키는 단계를 포함하는 양돈 혈액 발효물의 제조 방법.
(a) preparing pig blood, and
(B) in pig blood Lactobacillus plantarum ( Lactobacillus plantarum ), Lactobacillus agilis ( Lactobacillus agilis ), Lactobacillus alimentarius ( Lactobacillus alimentarius ), Lactobacillus fermentum ( Latobacillus fermentum ) and Lactobacillus fermentum ) A method for producing a fermented pig blood, comprising the step of inoculating, culturing, and fermenting a fermented strain selected from among the mixed strains of Saccharomyces cerevisiae.
제1항에 있어서,
상기 양돈 혈액은 혈액 응고 방지제가 첨가된 것이고,
상기 (a) 단계 후 (b) 단계 전에 상기 양돈 혈액을 단백가수분해효소로 가수분해하는 단계가 포함됨으로써, 상기 발효 균주의 접종은 단백가수분해효소로 가수분해된 양돈 혈액에 대해 이루어지는 것을 특징으로 하는 방법.
According to claim 1,
The pig blood is an anticoagulant added,
After the step (a) and before step (b), the step of hydrolyzing the pig blood with a proteolytic enzyme is included, whereby the inoculation of the fermented strain is performed on the swine blood hydrolyzed with the proteolytic enzyme. How to.
제2항에 있어서,
상기 가수분해된 양돈 혈액에는 탄소원이 5 내지 7 중량%로 첨가되고
상기 배양은 30℃ 내지 45℃ 범위에서 이루어지는 것을 특징으로 하는 방법.
3. The method of claim 2,
A carbon source is added to the hydrolyzed pig blood in an amount of 5 to 7% by weight, and
The culturing method, characterized in that made in the range of 30 ℃ to 45 ℃.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항 기재의 방법에 의하여 얻어진 양돈 혈액 발효물.
A fermented pig blood product obtained by the method according to any one of claims 1 to 3.
제4항 기재의 양돈 혈액 발효물을 유효성분으로 포함하는 산란 증진용 양계 사료 조성물.
A poultry feed composition for promoting egg laying comprising the fermented pig blood of claim 4 as an active ingredient.
제4항 기재의 양돈 혈액 발효물을 유효성분으로 포함하는 체중 증가용 양계 사료 조성물.
A poultry feed composition for weight gain comprising the fermented pig blood of claim 4 as an active ingredient.
제5항 기재의 산란 증진용 양계 사료 조성물을 양계에 급여하는 단계를 포함하는 양계의 산란 증진 방법.
A method for promoting egg laying of poultry, comprising the step of feeding poultry with the poultry feed composition for enhancement of spawning according to claim 5.
제6항 기재의 산란 증진용 양계 사료 조성물을 양계에 급여하는 단계를 포함하는 양계의 체중 증가 방법.
[Claim 7] A method for increasing the weight of poultry, comprising feeding the poultry feed composition for enhancing egg production according to claim 6 to the poultry.
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