KR20210138656A - 모발 성장을 위한 생분해성 스캐폴드 및 이의 사용 방법 - Google Patents

모발 성장을 위한 생분해성 스캐폴드 및 이의 사용 방법 Download PDF

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KR20210138656A
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reservoir
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KR1020217032462A
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알렉세이 브이 터스킥
안토넬라 핀토
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샌포드 번햄 프레비즈 메디컬 디스커버리 인스티튜트
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Abstract

세포 저장소, 하나 이상의 생분해성 중합체로 작제된 세포 저장소에 부착된 가이드 및 모낭형성 세포 집단을 포함하는 세포 스캐폴드가 본원에 개시된다. 상기 세포 스캐폴드는 모발을 성장시키는 데 유용하다.

Description

모발 성장을 위한 생분해성 스캐폴드 및 이의 사용 방법
관련 출원에 대한 상호 참조
본 출원은 2019년 3월 14일에 출원된 미국 가특허출원 제62/818,584호에 대한 우선권 혜택을 주장한다. 우선권은 35 U.S.C. §119에 따라 주장된다. 상기 명시한 특허출원은 본원에 완전히 기재된 것처럼 참조로 포함된다.
모낭형성 세포(folliculogenic-cell) 관련 요법은 탈모 및/또는 탈모증, 외배엽 이형성증, 연주모증, 니트레토 증후군(Netherton syndrome), 멘케스병 및 유전성 수포성 표피박리증을 포함하는 수많은 질환의 치료에 이점을 제공할 수 있다. 탈모는 자존감 감소, 정서적 고통, 2차적 이환율, 우울 삽화 및 삶의 질 저하와 관련된다.
그러나, 모낭형성 세포의 교체는 세포의 제어 및 지시를 필요로 한다. 또한, iPSC와 같은 줄기 세포로부터 진피 유두 세포를 유도하는 것은 도전 과제가 되어 왔다. 따라서, 모낭형성 세포의 이식 및 성장의 효과적인 제어에 대한 요구가 여전히 남아있다. 또한 모낭형성 세포를 이식하기 위한 개선된 접근법이 요구된다.
요약
본 개시내용은 본원에서 확인된 요구들 중 하나 이상을 충족하거나 다른 혜택을 제공하거나 적어도 대중에게 유용한 선택을 제공하는 것을 목표로 한다. 소정 실시양태는 세포 저장소 내에 하나 이상의 모낭형성 세포를 함유하고 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 가이드를 추가로 포함하는 세포 스캐폴드를 제공하며, 여기서 상기 가이드는 상기 저장소에 부착되어 있다. 이식 후, 스캐폴드는 하나 이상의 모낭형성 세포를 배향하고/하거나 기능성 모낭으로의 이의 발달을 촉진하는 기능을 할 수 있다. 저장소와 부착된 가이드의 조합은 이전의 접근법에 비해서 개선된 효능을 제공할 수 있다.
일부 실시양태에서, 세포 저장소, 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드; 및 하나 이상의 모낭형성 세포를 포함하는 세포 스캐폴드가 본원에 개시된다. 세포 스캐폴드는 인간 환자에서 피부 아래에 이식될 수 있도록 구성될 수 있다. 일부 측면에서, 세포 스캐폴드는 세포 저장소와 그로부터 연장되는 가이드를 포함한다. 세포 스캐폴드는, 이식될 때 세포 저장소는 피부 아래에 있는 반면 그로부터 연장되는 가이드는 피부 외부로 연장되도록 구성될 수 있다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 세포 스캐폴드는 세포 저장소와 접촉하는 하나 이상의 모낭형성 세포를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 세포 스캐폴드는 구형, 타원형, 원통형, 관형 또는 버키볼 모양인 세포 저장소를 포함한다. 일부 측면에서, 세포 저장소는 하나 이상의 모낭형성 세포를 둘러싸거나 수용하도록 구성된다. 이러한 방식으로, 이러한 모낭형성 세포는 세포 저장소의 내부 및 환자의 피부 아래의 위치 내에 상당히 함유될 수 있다. 일부 측면에서, 세포 저장소는 일반적으로 구형의 중심 쉘로부터 연장되는 하나 이상의 앵커 또는 미늘을 포함한다. 이러한 앵커 또는 미늘은 환자의 피부 아래의 안전한 위치에 모낭형성 세포를 추가로 수용하고 고정할 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 개시된 세포 스캐폴드는 폴리(글리콜산)(PGA), 폴리(락트산-코-글리콜산)(PLGA), 폴리(락트산)(PLA), 폴리카프로락톤(PCL), 폴리에틸렌 글리콜, 폴리(부틸렌 석시네이트)(PBS), 폴리포스파젠, 폴리무수물, 폴리포스포에스테르, 폴리우레탄, 폴리카보네이트 및 이들의 조합을 포함하는 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 세포 스캐폴드는 폴리카프로락톤(PCL)을 포함하는 하나 이상의 생분해성 중합체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 세포 스캐폴드는 하나 이상의 제2 생분해성 중합체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 세포 스캐폴드는 폴리(글리콜산)(PGA), 폴리(락트산-코-글리콜산)(PLGA), 폴리(락트산)(PLA), 폴리카프로락톤(PCL), 폴리에틸렌 글리콜, 폴리(부틸렌 석시네이트)(PBS), 폴리포스파젠, 폴리무수물, 폴리포스포에스테르, 폴리우레탄, 폴리카보네이트 및 이들의 조합을 포함하는 하나 이상의 제2 생분해성 중합체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 세포 스캐폴드는 폴리카프로락톤(PCL)을 포함하는 하나 이상의 제2 생분해성 중합체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 세포 스캐폴드는 동일한 하나 이상의 제1 생분해성 중합체와 하나 이상의 제2 생분해성 중합체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 세포 스캐폴드는 상이한 하나 이상의 제1 생분해성 중합체와 하나 이상의 제2 생분해성 중합체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 세포 스캐폴드는 하나 이상의 제2 생분해성 중합체보다 더 느린 분해 속도를 갖는 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 세포 스캐폴드는 자성 재료로 유도체화된 세포 저장소를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 세포 스캐폴드는 자성 재료로 유도체화된 가이드를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 세포 스캐폴드는 직경이 50 내지 500 ㎛인 세포 저장소를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 세포 스캐폴드는 직경이 250 내지 400 ㎛인, 예컨대 직경이 250 내지 350 ㎛ 또는 직경이 300 내지 400 ㎛인 세포 저장소를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 세포 스캐폴드는 직경이 약 300 ㎛인 세포 저장소를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 세포 스캐폴드는 직경이 약 200 ㎛인 세포 저장소를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 세포 스캐폴드는 중공 가이드를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 세포 스캐폴드는 고체 가이드를 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 개시된 세포 스캐폴드는 하나 이상의 모낭형성 세포를 포함하고, 하나 이상의 모낭형성 세포는 줄기 세포이다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 세포 스캐폴드는 배아 줄기 세포 및 유도 만능 줄기 세포(induced pluripotent stem cell: iPSC)로 이루어진 군으로부터 선택된 줄기 세포를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 세포 스캐폴드는 섬유아세포, 신장 상피 세포 및 혈액 세포로 이루어진 군으로부터 선택된 공급원으로부터 생성된 유도 만능 줄기 세포(iPSC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 세포 스캐폴드는 하나 이상의 모낭형성 세포를 포함하고, 하나 이상의 모낭형성 세포는 진피 유두, 상피 줄기 세포 또는 이들의 조합이다.
일부 실시양태에서, 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하고, 상기 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하는 것인 단계 및 세포 스캐폴드를 진피 조직으로 이식하는 단계를 포함하는, 모낭의 성장 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 모낭의 성장 방법은 세포 스캐폴드를 이식하기 전에 진피 조직을 바늘로 천공시키는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 모낭의 성장 방법은 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하는 것을 포함하고, 로딩은 하나 이상의 모낭형성 세포 및 세포 스캐폴드를 다수의 마이크로웰을 포함하는 마이크로웰 플레이트의 마이크로웰 내에 배치하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 모낭의 성장 방법은 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하는 것을 포함하고, 로딩은 하나 이상의 모낭형성 세포 및 세포 스캐폴드를 다수의 마이크로웰을 포함하는 마이크로웰 플레이트의 마이크로웰 내에 배치하는 것을 포함하고, 여기서 마이크로웰 플레이트의 각 마이크로웰은 하나 이상의 모낭형성 세포 및 세포 스캐폴드를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 모낭의 성장 방법은 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하는 것을 포함하고, 로딩은 하나 이상의 모낭형성 세포 및 세포 스캐폴드를 다수의 마이크로웰을 포함하는 마이크로웰 플레이트의 마이크로웰 내에 배치하는 것을 포함하고, 세포 스캐폴드는 마이크로웰에서 세포 저장소가 마이크로웰의 바닥에 더 가깝고 가이드가 마이크로웰의 개구부에 더 가깝도록 배향된다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 모낭의 성장 방법은 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하는 것을 포함하고, 로딩은 하나 이상의 모낭형성 세포 및 세포 스캐폴드를 다수의 마이크로웰을 포함하는 마이크로웰 플레이트의 마이크로웰 내에 배치하는 것을 포함하고, 하나 이상의 모낭 형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하는 것은 수동으로 수행된다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 모낭의 성장 방법은 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하는 것을 포함하고, 로딩은 하나 이상의 모낭형성 세포 및 세포 스캐폴드를 다수의 마이크로웰을 포함하는 마이크로웰 플레이트의 마이크로웰 내에 배치하는 것을 포함하고, 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하는 것은 로봇으로 수행된다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 모낭의 성장 방법은 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하는 것을 포함하고, 세포 저장소, 가이드, 또는 세포 저장소와 가이드 둘 다는 자성 재료로 유도체화된다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 모낭의 성장 방법은 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하는 것을 포함하고, 로딩은 자기장을 세포 스캐폴드에 인가하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 모낭의 성장 방법은 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하고, 상기 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하는 것인 단계 및 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식하는 단계를 포함하고, 여기서 상기 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식하는 단계는 자기장을 세포 스캐폴드에 인가하는 것을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하고, 상기 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하는 것인 단계 및 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식하는 단계를 포함하는 모낭의 성장 방법으로서, 상기 하나 이상의 모낭형성 세포는 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식하는 단계에서 줄기 세포인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하고, 상기 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하는 것인 단계 및 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식하는 단계를 포함하고, 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식한 후, 진피 조직을 붕대로 덮는 단계를 추가로 포함하는 모낭의 성장 방법이 본원에 개시된다.
일부 실시양태에서, 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하고, 상기 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하는 것인 단계 및 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식하는 단계를 포함하는 모낭의 성장 방법으로서, 상기 하나 이상의 모낭형성 세포는 세포 저장소와 접촉하고 있는 것인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하고, 상기 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하는 것인 단계 및 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식하는 단계를 포함하는 모낭의 성장 방법으로서, 상기 세포 저장소는 구형, 타원형, 원통형, 관형 또는 버키볼 모양인 방법이 본원에 개시된다. 세포 저장소는 다공성 외부 및 중공 또는 다공성 내부를 가질 수 있다. 일부 실시양태에서, 세포 저장소는 중공이다. 일부 실시양태에서, 세포 저장소는 다공성 내부를 갖는다. 예를 들어, 구형, 원통형 또는 타원형 세포 저장소는 중공 내부 또는 다공성 내부를 가질 수 있다. 다공성 내부를 갖는 세포 저장소는 90%, 95%, 97%, 98%, 99% 또는 99.5% 이상의 다공성 정도를 가질 수 있다. 다공성 정도는 100%에서 p를 뺀 것으로서 결정되며, 여기서 p는 세포 저장소와 모양, 크기 및 조성이 동일한 비다공성 고체 물체의 질량의 백분율이다(따라서, 99% 다공도를 갖는 저장소는 세포 저장소와 모양, 크기 및 조성이 동일한 비다공성 고체 물체의 질량의 1%를 갖는다). 일부 실시양태에서, 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하고, 상기 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하는 것인 단계 및 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식하는 단계를 포함하는 모낭의 성장 방법으로서, 상기 하나 이상의 제1 생분해성 중합체는 폴리(글리콜산)(PGA), 폴리(락트산-코-글리콜산)(PLGA), 폴리(락트산)(PLA), 폴리카프로락톤(PCL), 폴리에틸렌 글리콜, 폴리(부틸렌 석시네이트)(PBS), 폴리포스파젠, 폴리무수물, 폴리포스포에스테르, 폴리우레탄, 폴리카보네이트 및 이들의 조합을 포함하는 것인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하고, 상기 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하는 것인 단계 및 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식하는 단계를 포함하는 모낭의 성장 방법으로서, 상기 하나 이상의 제1 생분해성 중합체는 폴리카프로락톤(PCL)을 포함하는 것인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하고, 상기 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하는 것인 단계 및 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식하는 단계를 포함하는 모낭의 성장 방법으로서, 상기 세포 저장소는 하나 이상의 제2 생분해성 중합체를 포함하는 것인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하고, 상기 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하는 것인 단계 및 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식하는 단계를 포함하는 모낭의 성장 방법으로서, 상기 세포 저장소는 폴리(글리콜산)(PGA), 폴리(락트산-코-글리콜산)(PLGA), 폴리(락트산)(PLA), 폴리카프로락톤(PCL), 폴리에틸렌 글리콜, 폴리(부틸렌 석시네이트)(PBS), 폴리포스파젠, 폴리무수물, 폴리포스포에스테르, 폴리우레탄, 폴리카보네이트 및 이들의 조합을 포함하는 하나 이상의 제2 생분해성 중합체를 포함하는 것인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하고, 상기 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하는 것인 단계 및 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식하는 단계를 포함하는 모낭의 성장 방법으로서, 상기 세포 저장소는 폴리카프로락톤(PCL)을 포함하는 하나 이상의 제2 생분해성 중합체를 포함하는 것인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하고, 상기 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하는 것인 단계 및 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식하는 단계를 포함하는 모낭의 성장 방법으로서, 상기 세포 저장소는 하나 이상의 제2 생분해성 중합체를 포함하고, 하나 이상의 제1 생분해성 중합체와 하나 이상의 제2 생분해성 중합체가 동일한 것인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하고, 상기 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하는 것인 단계 및 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식하는 단계를 포함하는 모낭의 성장 방법으로서, 상기 세포 저장소는 하나 이상의 제2 생분해성 중합체를 포함하고, 하나 이상의 제1 생분해성 중합체와 하나 이상의 제2 생분해성 중합체는 상이한 것인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하고, 상기 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하는 것인 단계 및 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식하는 단계를 포함하는 모낭의 성장 방법으로서, 상기 세포 저장소는 하나 이상의 제2 생분해성 중합체를 포함하고, 하나 이상의 제1 생분해성 중합체가 하나 이상의 제2 생분해성 중합체보다 느린 분해 속도를 갖는 것인 방법이 본원에서 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하고, 상기 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하는 것인 단계 및 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식하는 단계를 포함하는 모낭의 성장 방법으로서, 상기 세포 저장소는 자성 재료로 유도체화되는 것인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하고, 상기 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하는 것인 단계 및 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식하는 단계를 포함하는 모낭의 성장 방법으로서, 가이드가 자성 재료로 유도체화되는 것인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하고, 상기 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하는 것인 단계 및 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식하는 단계를 포함하는 모낭의 성장 방법으로서, 상기 세포 저장소는 직경이 50 내지 500 ㎛인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하고, 상기 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하는 것인 단계 및 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식하는 단계를 포함하는 모낭의 성장 방법으로서, 상기 세포 저장소는 직경이 약 200 ㎛인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하고, 상기 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하는 것인 단계 및 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식하는 단계를 포함하는 모낭의 성장 방법으로서, 상기 가이드가 중공인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하고, 상기 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하는 것인 단계 및 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식하는 단계를 포함하는 모낭의 성장 방법으로서, 상기 가이드가 고체인 방법이 본원에 개시된다.
일부 실시양태에서, 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하고, 상기 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하는 것인 단계 및 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식하는 단계를 포함하는 모낭의 성장 방법으로서, 상기 하나 이상의 모낭형성 세포가 줄기 세포인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하고, 상기 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하는 것인 단계 및 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식하는 단계를 포함하는 모낭의 성장 방법으로서, 상기 하나 이상의 모낭형성 세포는 배아 줄기 세포 및 유도 만능 줄기 세포(iPSC)로 이루어진 군으로부터 선택된 줄기 세포인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하고, 상기 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하는 것인 단계 및 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식하는 단계를 포함하는 모낭의 성장 방법으로서, 상기 하나 이상의 모낭형성 세포는 배아 줄기 세포 및 유도 만능 줄기 세포(iPSC)로 이루어진 군으로부터 선택된 줄기 세포이고, 상기 유도 만능 줄기 세포(iPSC)는 섬유아세포, 신장 상피 세포 및 혈액 세포로 이루어진 군으로부터 선택된 공급원으로부터 생성되는 것인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하고, 상기 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하는 것인 단계 및 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식하는 단계를 포함하는 모낭의 성장 방법으로서, 상기 하나 이상의 모낭형성 세포는 진피 유두, 상피 줄기 세포 또는 이들의 조합인 방법이 본원에 개시된다.
일부 실시양태에서, 하나의 세포 스캐폴드를 마이크로웰 플레이트의 각 마이크로웰 내에 로딩하고, 상기 마이크로웰 플레이트는 복수의 마이크로웰을 포함하고, 각 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하는 것인 단계 및 하나 이상의 모낭형성 세포를 마이크로웰 플레이트의 복수의 마이크로웰 위에 분배하는 단계; 및 마이크로웰 플레이트를 항온배양하는 단계를 포함하는, 모낭형성 세포의 배양 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 마이크로웰 플레이트는 하나 이상의 모낭형성 세포가 마이크로웰 플레이트의 복수의 마이크로웰 위에 분배된 후 원심분리된다. 이러한 단계는 모낭형성 세포가 세포 저장소와 접촉되는 것을 촉진하고/하거나 세포 저장소 내로의 모낭형성 세포의 진입을 촉진할 수 있다. 일부 실시양태에서, 하나의 세포 스캐폴드를 마이크로웰 플레이트의 각 마이크로웰 내에 로딩하고, 상기 마이크로웰 플레이트는 복수의 마이크로웰을 포함하고, 각 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하는 것인 단계 및 하나 이상의 모낭형성 세포를 마이크로웰 플레이트의 복수의 마이크로웰 위에 분배하고, 상기 하나 이상의 모낭형성 세포는 상기 세포 저장소와 접촉하고 있는 것인 단계를 포함하는, 모낭형성 세포의 배양 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 복수의 마이크로웰은 원추형 또는 U자 모양이다. 일부 실시양태에서, 하나의 세포 스캐폴드를 마이크로웰 플레이트의 각 마이크로웰 내에 로딩하는 단계를 포함하는 모낭형성 세포의 배양 방법으로서, 상기 마이크로웰 플레이트는 복수의 마이크로웰을 포함하고, 각 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하고, 상기 세포 저장소는 구형, 타원형, 원통형, 관형 또는 버키볼 모양의 것인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나의 세포 스캐폴드를 마이크로웰 플레이트의 각 마이크로웰 내에 로딩하는 단계를 포함하는 모낭형성 세포의 배양 방법으로서, 상기 마이크로웰 플레이트는 복수의 마이크로웰을 포함하고, 각 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하고, 하나 이상의 제1 생분해성 중합체는 폴리(글리콜산)(PGA), 폴리(락트산-코-글리콜산)(PLGA), 폴리(락트산)(PLA), 폴리카프로락톤(PCL), 폴리에틸렌 글리콜, 폴리(부틸렌 석시네이트)(PBS), 폴리포스파젠, 폴리무수물, 폴리포스포에스테르, 폴리우레탄, 폴리카보네이트 및 이들의 조합을 포함하는 것인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나의 세포 스캐폴드를 마이크로웰 플레이트의 각 마이크로웰 내에 로딩하는 단계를 포함하는 모낭형성 세포의 배양 방법으로서, 상기 마이크로웰 플레이트는 복수의 마이크로웰을 포함하고, 각 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하고, 하나 이상의 제1 생분해성 중합체는 폴리카프로락톤(PCL)을 포함하는 것인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나의 세포 스캐폴드를 마이크로웰 플레이트의 각 마이크로웰 내에 로딩하는 단계를 포함하는 모낭형성 세포의 배양 방법으로서, 상기 마이크로웰 플레이트는 복수의 마이크로웰을 포함하고, 각 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하고 하나 이상의 제2 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하는 것인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나의 세포 스캐폴드를 마이크로웰 플레이트의 각 마이크로웰 내에 로딩하는 단계를 포함하는 모낭형성 세포의 배양 방법으로서, 상기 마이크로웰 플레이트는 복수의 마이크로웰을 포함하고, 각 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하고 하나 이상의 제2 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하고, 하나 이상의 제2 생분해성 중합체는 폴리(글리콜산)(PGA), 폴리(락트산-코-글리콜산)(PLGA), 폴리(락트산)(PLA), 폴리카프로락톤(PCL), 폴리에틸렌 글리콜, 폴리(부틸렌 석시네이트)(PBS), 폴리포스파젠, 폴리무수물, 폴리포스포에스테르, 폴리우레탄, 폴리카보네이트 및 이들의 조합을 포함하는 것인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나의 세포 스캐폴드를 마이크로웰 플레이트의 각 마이크로웰 내에 로딩하는 단계를 포함하는 모낭형성 세포의 배양 방법으로서, 상기 마이크로웰 플레이트는 복수의 마이크로웰을 포함하고, 각 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하고 하나 이상의 제2 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하고, 하나 이상의 제2 생분해성 중합체는 폴리카프로락톤(PCL)을 포함하는 것인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나의 세포 스캐폴드를 마이크로웰 플레이트의 각 마이크로웰 내에 로딩하는 단계를 포함하는 모낭형성 세포의 배양 방법으로서, 상기 마이크로웰 플레이트는 복수의 마이크로웰을 포함하고, 각 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하고 하나 이상의 제2 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하고, 하나 이상의 제1 생분해성 중합체 및 하나 이상의 제2 생분해성 중합체는 동일한 것인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나의 세포 스캐폴드를 마이크로웰 플레이트의 각 마이크로웰 내에 로딩하는 단계를 포함하는 모낭형성 세포의 배양 방법으로서, 상기 마이크로웰 플레이트는 복수의 마이크로웰을 포함하고, 각 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하고 하나 이상의 제2 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하고, 하나 이상의 제1 생분해성 중합체 및 하나 이상의 제2 생분해성 중합체는 상이한 것인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나의 세포 스캐폴드를 마이크로웰 플레이트의 각 마이크로웰 내에 로딩하는 단계를 포함하는 모낭형성 세포의 배양 방법으로서, 상기 마이크로웰 플레이트는 복수의 마이크로웰을 포함하고, 각 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하고 하나 이상의 제2 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하고, 하나 이상의 제1 생분해성 중합체는 하나 이상의 제2 생분해성 중합체보다 느린 분해 속도를 갖는 것인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나의 세포 스캐폴드를 마이크로웰 플레이트의 각 마이크로웰 내에 로딩하는 단계를 포함하는 모낭형성 세포의 배양 방법으로서, 상기 마이크로웰 플레이트는 복수의 마이크로웰을 포함하고, 각 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하고, 세포 저장소는 자성 재료로 유도체화되는 것인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나의 세포 스캐폴드를 마이크로웰 플레이트의 각 마이크로웰 내에 로딩하는 단계를 포함하는 모낭형성 세포의 배양 방법으로서, 상기 마이크로웰 플레이트는 복수의 마이크로웰을 포함하고, 각 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하고, 상기 가이드는 자성 재료로 유도체화되는 것인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나의 세포 스캐폴드를 마이크로웰 플레이트의 각 마이크로웰 내에 로딩하는 단계를 포함하는 모낭형성 세포의 배양 방법으로서, 상기 마이크로웰 플레이트는 복수의 마이크로웰을 포함하고, 각 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하고, 상기 세포 저장소는 직경이 50 내지 500 ㎛인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나의 세포 스캐폴드를 마이크로웰 플레이트의 각 마이크로웰 내에 로딩하는 단계를 포함하는 모낭형성 세포의 배양 방법으로서, 상기 마이크로웰 플레이트는 복수의 마이크로웰을 포함하고, 각 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하고, 상기 세포 저장소는 직경이 약 200 ㎛인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나의 세포 스캐폴드를 마이크로웰 플레이트의 각 마이크로웰 내에 로딩하는 단계를 포함하는 모낭형성 세포의 배양 방법으로서, 상기 마이크로웰 플레이트는 복수의 마이크로웰을 포함하고, 각 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하고, 상기 가이드는 중공인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나의 세포 스캐폴드를 마이크로웰 플레이트의 각 마이크로웰 내에 로딩하는 단계를 포함하는 모낭형성 세포의 배양 방법으로서, 상기 마이크로웰 플레이트는 복수의 마이크로웰을 포함하고, 각 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하고, 상기 가이드는 고체인 방법이 본원에 개시된다.
일부 실시양태에서, 하나의 세포 스캐폴드를 마이크로웰 플레이트의 각 마이크로웰 내에 로딩하는 단계를 포함하는 모낭형성 세포의 배양 방법으로서, 상기 마이크로웰 플레이트는 복수의 마이크로웰을 포함하고, 각 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하고, 하나 이상의 모낭형성 세포는 줄기 세포인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나의 세포 스캐폴드를 마이크로웰 플레이트의 각 마이크로웰 내에 로딩하는 단계를 포함하는 모낭형성 세포의 배양 방법으로서, 상기 마이크로웰 플레이트는 복수의 마이크로웰을 포함하고, 각 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하고, 하나 이상의 모낭형성 세포는 줄기 세포이고, 줄기 세포는 배아 줄기 세포 및 유도 만능 줄기 세포(iPSC)로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나의 세포 스캐폴드를 마이크로웰 플레이트의 각 마이크로웰 내에 로딩하는 단계를 포함하는 모낭형성 세포의 배양 방법으로서, 상기 마이크로웰 플레이트는 복수의 마이크로웰을 포함하고, 각 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하고, 하나 이상의 모낭형성 세포는 줄기 세포이고, 줄기 세포는 배아 줄기 세포 및 유도 만능 줄기 세포(iPSC)로 이루어진 군으로부터 선택되고, 유도 만능 줄기 세포(iPSC)는 섬유아세포, 신장 상피 세포 및 혈액 세포로 이루어진 군으로부터 선택된 공급원으로부터 생성되는 것인 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 하나의 세포 스캐폴드를 마이크로웰 플레이트의 각 마이크로웰 내에 로딩하는 단계를 포함하는 모낭형성 세포의 배양 방법으로서, 상기 마이크로웰 플레이트는 복수의 마이크로웰을 포함하고, 각 세포 스캐폴드는 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하고, 하나 이상의 모낭형성 세포는 진피 유두, 상피 줄기 세포 또는 이들의 조합인 방법이 본원에 개시된다.
일부 실시양태에서, 2광자 중합을 이용하여 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하는 세포 스캐폴드를 생성하는 단계를 포함하는, 세포 스캐폴드의 생성 방법이 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 컴퓨터 축 리소그래피(computed axial lithography)와 같은 용적측정 기술을 이용하여 세포 저장소 및 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드를 포함하는 세포 스캐폴드를 생성하는 단계를 포함하는, 세포 스캐폴드의 생성 방법이 본원에 개시된다.
일부 실시양태에서, 본원에 개시된 세포 스캐폴드는 요법에서, 예를 들어 치료를 필요로 하는 대상체의 탈모, 및/또는 탈모증, 외배엽 이형성증, 연주모증, 니트레토 증후군, 멘케스병 또는 유전성 수포성 표피박리증으로부터 선택된 병태의 치료에서 사용하기 위한 것이다. 이러한 치료는 본원에 기재된 모낭의 성장 방법의 단계들을 포함할 수 있다.
본 특허출원은 컬러로 작성된 적어도 하나의 도면을 포함한다. 이러한 컬러 도면(들)이 있는 특허 또는 특허출원은 요청 및 필요한 수수료 지불시 기관에서 제공할 것이다.
본원에 개시된 조성물 및 방법의 신규한 특징은 첨부된 청구범위에 구체적으로 기재되어 있다. 개시된 스캐폴드 및 방법의 원리가 사용되는 예시적인 실시양태를 기재하는 다음의 상세한 설명 및 첨부된 도면을 참조함으로써 스캐폴드 및 이의 사용 방법의 특징 및 이점의 더 나은 이해를 얻을 것이다:
도 1은 롤리업(Lolli-up) 마이크로-스캐폴드 작용 메커니즘을 나타낸다. 도 1A는 피부 내부의 의도된 위치를 나타내는 빈 롤리업과 피부의 표피를 관통하는 가이드에 대한 예술가의 해석을 도시한다. 도 1B는 피부에 이식된 상피 세포와 진피 유두 세포가 사전 로딩된 롤리업과 피부의 표피를 관통하는 가이드에 대한 예술가의 해석을 도시한다. 도 1C는 발생기 모낭과 피부의 표피를 관통하는 형성된 진피 유두 캡슐(자홍색)과 상피 세포(파란색)가 사전 로딩된 분해되는 롤리업(파선)에 대한 예술가의 해석을 도시한다. 도 1D는 실제 PCL 롤리업의 실제 전자현미경 이미지를 도시한다. 축척 막대 500 μM.
도 2A 내지 도 2C는 롤리업 로딩을 위한 맞춤형 플레이트를 생성하기 위한 생체공학적 도구를 나타낸다. 도 2A는 네거티브 고체 스탬프를 도시하고; 도 2B는 포지티브 실리콘 몰드를 도시하고; 도 2C는 아가로스 마이크로웰 접시를 도시한다.
도 3A 및 도 3B는 롤리업 로딩을 위한 맞춤형 플레이트를 생성하기 위한 생체공학적 도구의 추가 도면을 나타낸다. 도 3A는 전체 플레이트의 도면을 나타내고; 도 3B는 웰 내에 분배된 개별 롤리업 스캐폴드를 나타내는 플레이트의 중앙의 스테레오 이미지를 나타낸다.
도 4는 인간 유도 만능 줄기 세포(iPSC) 유래의 진피 유두 세포 및 마우스 E18.5 배아 상피 세포로의 롤리업 로딩을 나타낸다. 진피 유두 및 각질형성세포를 로딩한 후 0일, 1일 및 3일차에서의 개별 롤리업 스캐폴드의 입체현미경 이미지.
도 5는 인간 유도 만능 줄기 세포 유래의 진피 유두 세포(iPSC-DP) + 마우스 E18.5 상피 세포가 로딩된 롤리업 스캐폴드를 이식한 후 경피 모발 성장의 예를 나타낸다. 마이크로-스캐폴드에서 조작된 모낭형성 세포의 이식 후 28일, 40일 및 50일차에 누드 마우스에서 관찰된 모간의 확대 사진. 모간의 검은색은 C57BL6 상피 세포 제제에 존재하는 멜라닌세포가 기여한 것이다.
도 6은 개선된 롤리업 단위 디자인의 예를 나타낸다. 도시된 디자인은 생분해 시간, 기계적 특성 및 감소된 독성에 최적화된 재료를 갖는다.
본 명세서는 본 개시내용의 예시적인 실시양태 및 적용례를 설명한다. 그러나, 본 개시내용은 이러한 예시적인 실시양태 및 적용례에 한정되지 않거나, 예시적인 실시양태 및 적용례가 동작하는 방식이나 이것이 본원에서 설명되는 방식에 한정되지 않는다.
본원에 제공된 스캐폴드 및 사용 방법의 실시양태는 대상체에서 모발 성장을 유도하는 것에 관한 것이다. 일부 실시양태에서, 모낭형성 세포의 집단이 생성되고 세포 스캐폴드와 조합될 수 있으며, 이는 이어서 대상체에 피하로 이식되어 모발을 생성할 수 있다. 유리하게도, 모낭형성 세포의 각 집단은 증폭되어 각 세포 스캐폴드에 대한 막대한 양의 세포 집단을 제공할 수 있다. 모낭형성 세포와 세포 스캐폴드의 조합은 피부 질환을 갖는 대상체 뿐만 아니라 화상, 흉터 및/또는 탈모를 갖는 대상체를 치료하는 데 사용될 수 있다.
소정 정의
본 명세서에서 사용된 용어는 단지 특정 경우를 설명하기 위한 것으로, 한정하려는 의도가 아니다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 단수 형태("a", "an" 및 "the")는, 문맥이 명백하게 달리 나타내지 않는 한, 복수 형태도 포함하는 것으로 의도된다. 또한, 용어 "포함하는(including)", "포함하다(includes)", "갖는(having)", "갖다(has)", "와 함께(with)" 또는 이들의 변형어가 상세한 설명 및/또는 청구범위에서 사용되는 정도까지, 이러한 용어들은 용어 "포함하는(comprising)"과 유사한 방식으로 포괄적인 것으로 의도된다. 용어 "또는"은, 문맥이 달리 지시하지 않는 한, 포괄적인 의미로, 즉 "및/또는"과 동등하게 사용된다. 본 명세서의 섹션 구분은 독자의 편의를 위해서만 제공되며 논의된 요소들의 임의의 조합을 한정하지 않는다.
달리 정의되지 않는 한, 본원에서 사용되는 모든 기술 용어 및 과학 용어는 본 개시내용이 속하는 기술 분야의 숙련가에 의해 통상적으로 이해되는 바와 동일한 의미를 갖는다. 본원에 기재된 것과 유사하거나 동등한 방법 및 재료가 본 개시내용의 실시 또는 시험에 사용될 수 있지만, 적합한 방법 및 재료가 하기에 설명된다. 본원에 인용된 모든 참고문헌은 완전히 기재된 것처럼 그 전체가 참고로 포함된다. 참고로 포함된 자료와 본원에 제공된 명시적으로 설명된 내용 간에 임의의 모순 또는 상충이 있는 경우, 명시적으로 설명된 내용이 우선한다. 문헌[Singleton et al., Dictionary of Microbiology and Molecular Biology 3rd ed., J. Wiley & Sons (New York, NY 2001); March, Advanced Organic Chemistry Reactions, Mechanisms and Structure 5th ed., J. Wiley & Sons (New York, NY 2001); and Sambrook and Russel, Molecular Cloning: A Laboratory Manual 3rd ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press (Cold Spring Harbor, NY 2001)]은 본 출원에서 사용되는 많은 용어에 대한 일반적인 지침을 당업자에게 제공한다.
용어 "약" 또는 "대략"은 당업자에 의해 측정된 특정 값에 대한 허용가능한 오차 범위 내에 있다는 것을 의미하고, 이것은 부분적으로 상기 값이 어떻게 측정되거나 결정되는 지, 예를 들어 측정 시스템의 한계에 의존할 것이다. 예를 들어 "약"은 소정의 값에서 관행에 따라 1 이내 또는 1 초과의 표준 편차를 의미할 수 있다. 특정 값이 본 출원 및 청구범위에 기재되어 있는 경우, 달리 언급되지 않은 한, 용어 "약"은 특정 값에 대한 허용가능한 오차 범위를 의미하는 것으로 추정되어야 한다.
치환기의 수를 나타낼 때, 용어 "하나 이상"은 1개의 치환기부터 최대 가능한 수의 치환까지의 범위, 예를 들어 치환기에 의한 1개의 수소의 대체부터 모든 수소의 대체까지의 범위를 지칭한다.
용어 "임의적" 또는 "임의로"는 사건 또는 상황과 관련하여, 이후에 기재된 사건 또는 상황이 일어날 수 있으나 반드시 일어나는 것은 아님을 의미하고, 설명이 상기 사건 또는 상황이 일어난 경우 및 일어나지 않은 경우를 포함하는 것을 의미한다. 용어 "임의적" 또는 "임의로"는 요소와 관련하여, 이후에 기재된 요소가 존재할 수 있지만 반드시 존재할 필요는 없다는 것을 의미하고, 설명은 요소가 존재하는 실시양태 및 요소가 존재하지 않는 실시양태를 포함한다는 것을 의미한다.
본원에서 사용되는 용어 "모낭형성 세포"는 일반적으로 모낭을 성장시키는 기능을 하는 세포 집단을 지칭한다.
본원에서 사용되는 용어 "진피 유두 세포"는 일반적으로 모낭 형성 및 모발 성장 주기를 조절하는 중간엽 세포의 독특한 집단을 지칭한다. 발달 동안, 대부분의 진피 유두(DP) 세포는 중배엽으로부터 유래되지만, 두부의 모발의 기능적으로 동등한 DP 세포는 신경능선(Neural Crest: NC)으로부터 기인할 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "세포 스캐폴드"는 세포를 함유할 수 있는 고체 재료(예를 들어, 중합체)를 포함하는 구조를 지칭하며, 여기서 "고체"는 물질 상태의 의미로, 예를 들어 액체와 반대의 의미로 사용된다; 스캐폴드는 본원의 다른 곳에서 논의되는 바와 같이 다공성일 수 있다. 하이드로겔, 예를 들어 콜라겐 또는 아가로스 하이드로겔은 고체로 간주되지 않으며 세포 스캐폴드의 고체 재료로서 적격하지 않다. 고체 재료는 본원의 다른 곳에서 상세히 설명된 바와 같이 생분해성 중합체일 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "부착된" 및 이의 문법적 변형어는 제1 요소가 제2 요소에 접착, 연결 또는 결합되는 것을 나타낸다. 단순한 접촉은 더 이상 부착을 구성하지 않는다.
본원에서 사용되는 용어 "투여하다", "투여하는", "투여" 등은 스캐폴드 또는 조성물을 원하는 생물학적 작용 부위로 전달하는 것을 지칭한다. 적절한 전달 방법은 비경구 경로(피하(s.c.), 복강내(i.p.) 및 국소(top.) 투여를 포함)를 포함하지만 이에 한정되지 않는다. 당업자는 본원에 기재된 스캐폴드 및 방법과 함께 사용될 수 있는 투여 기술에 익숙하다. 일부 실시양태에서, 스캐폴드는 피하 투여된다.
본원에서 사용되는 용어 "공동투여" 등은 단일 환자에 대한 선택된 치료제들의 투여를 포괄하는 것을 의미하고, 치료제들이 동일하거나 상이한 투여 경로에 의해 동일하거나 상이한 조성으로 동일하거나 상이한 시간에 투여되는 처리 용법(regimen)을 포함하도록 의도된다.
본원에서 사용되는 용어 "유효량" 또는 "치료적 유효량"은 치료중인 질환 또는 병태의 하나 이상의 증상을 어느 정도 완화할 수 있는 투여되는 제제 또는 조성물의 충분한 양을 지칭한다; 예를 들어, 질환의 하나 이상의 징후, 증상 또는 원인의 감소 및/또는 완화, 또는 생물학적 시스템의 임의의 다른 원하는 변경. 예를 들어, 치료적 사용을 위한 "유효량"은 하나 이상의 질환 증상에서 임상적으로 유의한 감소를 제공하는 제제의 양일 수 있다. 적절한 "유효"량은 개별 사례에서 용량 상승 연구와 같은 기술을 사용하여 결정할 수 있다.
용어 "대상체" 또는 "환자"는 포유동물을 포함한다. 포유동물의 예는 포유동물 부류의 임의의 구성원: 인간, 비-인간 영장류, 예컨대 침팬지 및 기타 유인원 및 원숭이 종; 농장 동물, 예컨대 소, 말, 양, 염소, 돼지; 가축, 예컨대 토끼, 개 및 고양이; 설치류, 예컨대 래트, 마우스 및 기니피그를 포함하는 실험실 동물 등을 포함하지만 이에 한정되지 않는다. 한 측면에서, 포유동물은 인간이다. 본원에서 사용되는 용어 "동물"은 인간 및 비-인간 동물을 포함한다. 일 실시양태에서, "비-인간 동물"은 포유동물, 예를 들어 설치류, 예컨대 래트 또는 마우스이다.
본원에서 사용되는 용어 "치료하다", "치료하는" 또는 "치료"는 예방적으로 및/또는 치료적으로, 질환 또는 병태의 적어도 하나의 증상을 경감, 약화 또는 개선하거나, 추가 증상을 예방하거나, 질환 또는 병태를 억제하거나, 예를 들어 질환 또는 병태의 발달을 정지시키거나, 질환 또는 병태를 완화하거나, 질환 또는 병태의 퇴행을 야기하거나, 질환 또는 병태에 의해 야기된 병태를 완화하거나, 질환 또는 병태의 증상을 중지시키는 것을 포함한다.
질환 상태의 "예방하는" 또는 "예방"이라는 용어는 질환 상태에 노출되거나 질환 상태에 걸리기 쉬울 수 있지만, 질환 상태의 증상을 아직 경험하지 않거나 나타내지 않는 대상체에서 질환 상태의 임상 증상이 발달하지 않도록 하는 것을 의미한다.
용어 "약학적으로 허용되는"은 일반적으로 안전하고, 비독성이며, 생물학적으로 또는 그 밖에 바람직하지 않은 것이 아니고 수의학 및 인간의 약학적 사용을 위해 허용되는 약학적 조성물을 제조하는 데 유용한 물질의 속성을 의미한다. "약학적으로 허용되는"은 화합물의 생물학적 활성 또는 특성을 저해하지 않고 비교적 비독성인 담체 또는 희석제와 같은 물질을 지칭할 수 있고, 예를 들어, 물질은 바람직하지 않은 생물학적 효과를 유발하지 않거나 조성물에 함유된 임의의 성분과 유해한 방식으로 상호작용하지 않으면서 개체에게 투여될 수 있다.
세포 이식 및 모발 성장을 용이하게 하기 위한 생분해성 마이크로스캐폴드
세포 저장소(버키볼 모양의 저장소 및 임의의 다른 구형 구조를 포함) 및 세포 저장소에 부착된 생분해성 가이드를 포함하는, 생분해성일 수 있는 세포 스캐폴드가 본원에 개시된다. 일부 실시양태에서, 세포 저장소 또는 가이드는 핸들링 및 조작을 용이하게 하기 위해 자성 재료로 유도체화된다. 일부 실시양태에서, 세포 저장소 및 가이드 스캐폴드(본원에서 "롤리-업" 또는 "롤리업"으로 지칭됨)는 모낭형성 세포의 피부로의 이식을 용이하게 하는 역할을 한다. 본원에 개시된 롤리업은 이식 준비가 되고 단일 또는 다수의 세포 유형이 로딩된다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 롤리업에는 모낭형성 세포가 로딩되고, 모낭형성 세포는 진피 유두, 상피 세포 또는 이들의 조합을 임의의 소정의 비율로 포함할 수 있다. 멜라닌세포, 내피 세포 또는 신경/뉴런 세포와 같은 추가 세포 유형이 작제물이 첨가될 수 있다. 본원에 개시된 방법 중 일부에서, 세포 스캐폴드는 세포가 사전 로딩되고 이어서 피부에 이식된다. 일부 실시양태에서, 스캐폴드의 세포 저장소는 진피에 위치하는 반면, 가이드는 표피의 두께를 관통한다. 가이드는 모간의 피부 관통 및 보다 구체적으로 피부의 표피 관통을 용이하게 하는 역할을 할 수 있다. 추가로, 일부 실시양태에서, 가이드는 모간의 피부 관통을 가능하게 하기 위해 표피에서 일시적인 개구부를 유지할 수 있다.
일부 실시양태에서, 상단에 가이드를 갖고 하단에 세포 저장소를 갖는 롤리업 스캐폴드의 수직 위치결정을 가능하게 하는 마이크로웰(이는 맞춤 제작될 수 있다) 내로 스캐폴드를 침착시킴으로써 본원에 개시된 롤리업 스캐폴드에 세포가 로딩된다. 일부 실시양태에서, 단일 세포 현탁액을 롤리업 스캐폴드를 함유하는 마이크로웰에 첨가하고 이어서 마이크로웰을 포함하는 플레이트 또는 매니폴드를 회전시켜 웰의 바닥 및 스캐폴드 내부에서 세포를 수집한다. 일부 실시양태에서, 다수의 롤리업의 병렬 로딩은 예를 들어 맞춤-프린팅될 수 있는 아가로스 멀티웰 접시를 사용함으로써 달성된다. 다수의 롤리업을 병렬로 로딩하는 시스템 및 방법은 자동화될 수 있으며 로봇 장치에 의해 쉽게 조작될 수 있다. 일부 측면에서, 다수의 롤리업은 하나 이상의 교차 부재에 의해 서로 연결되어 추가의 지원을 제공할 수 있다. 교차 부재는 생분해성일 수 있다. 일부 측면에서, 상호 연결된 롤리업의 어레이가 제조된다. 일부 측면에서, 롤리업은 피부의 외표면에 대해 비스듬히 위치되고 이로써 새로운 모낭은 궁극적으로 피부의 표면에 대해 비스듬히 지향되어 더욱 자연스런 모습을 제공할 수 있다.
소정 실시양태에서, 본 개시내용의 방법은 세포 저장소 및 가이드 및 하나 이상의 모낭형성 세포를 포함하는 스캐폴드를 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 방법은 예를 들어 모발 성장을 포함하는 요법을 제공한다. 투여는 대상체 피부의 임의의 위치, 예를 들어 두피, 얼굴, 윗입술, 턱, 눈썹, 속눈썹, 팔, 다리, 등, 몸통, 손, 발 및 복부와 같은 대상체 피부의 위치에 대해 이루어질 수 있다. 일부 실시양태에서, 대상체의 피부의 위치는 흉터 조직을 포함한다. 일부 실시양태에서, 대상체는 탈모증을 갖는다. 일부 실시양태에서, 대상체는 인간과 같은 포유동물이다.
일부 실시양태에서, 스캐폴드는 약 1주 내지 약 2주, 약 2주 내지 약 3주, 약 3주 내지 약 4주, 약 4주 내지 약 5주, 약 6주 내지 약 7주, 약 7주 내지 약 8주, 약 8주 내지 약 9주, 약 9주 내지 약 10주, 약 10주 내지 약 11주, 약 11주 내지 약 12주, 약 12주 내지 약 24주, 약 24주 내지 약 48주, 약 48주 또는 약 52주 또는 그 이상의 기간에 걸쳐 투여된다. 일부 실시양태에서, 조성물은 적어도 1주, 적어도 2주, 적어도 3주, 적어도 4주, 적어도 6주, 적어도 7주, 적어도 8주, 적어도 9주, 적어도 10주, 11, 적어도 12주, 적어도 24주, 적어도 48주 또는 적어도 52주 또는 그 이상의 기간에 걸쳐 투여된다. 일부 실시양태에서, 스캐폴드는 1일 1회, 1일 2회, 주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회(또는 월 1회), 8주마다 1회(또는 2개월마다 1회), 12주마다 1회(또는 3개월마다 1회) 또는 24주마다 1회(6개월마다 1회) 투여된다.
일부 실시양태에서, 본원에 개시된 세포 스캐폴드는 2광자 중합을 통해 생성된다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 세포 스캐폴드는 컴퓨터 축 리소그래피를 포함하는 상이한 용적측정 기술을 사용하여 생성된다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 세포 스캐폴드는 문헌[Kelly et al., Volumetric additive manufacturing via tomographic reconstruction, SCIENCE 363(6431): 1075-1079 (2019)]에 논의된 방법을 포함하는 컴퓨터 축 리소그래피를 사용하여 생성된다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 방법은 각각의 개별 롤리업 스캐폴드 사이의 간격이 정상 피부의 모낭 사이의 간격과 대략 동일하도록 다수의 롤리업 스캐폴드를 피부의 다수 부위에서 동시에 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 이러한 방식으로 투여된 롤리업 스캐폴드로부터 성장한 모발은 자연스러우면서 미용적으로 매력적인 모습을 갖는다. 일부 실시양태에서, 적어도 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 또는 100개의 개별 롤리업 스캐폴드가 투여된다. 일부 실시양태에서, 적어도 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290 또는 300개의 개별 롤리업 스캐폴드가 투여된다. 일부 실시양태에서, 적어도 325, 350, 375, 400, 425, 450, 475, 500, 525, 550, 575, 600, 625, 650, 675, 700, 725, 750, 775, 800, 825, 850, 875, 900, 925, 950, 975 또는 1000개의 개별 롤리업 스캐폴드가 투여된다. 일부 실시양태에서, 적어도 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 1600, 1700, 1800, 1900, 2000, 2100, 2200, 2300, 2400, 2500, 2600, 2700, 2800, 2900, 3000, 3100, 3200, 3300, 3400, 3500, 3600, 3700, 3800, 3900, 4000, 4100, 4200, 4300, 4400, 4500, 4600, 4700, 4800, 4900 또는 5000개의 개별 롤리업 스캐폴드가 투여된다. 일부 실시양태에서, 각각의 개별 롤리업 스캐폴드는 다른 개별 롤리업 스캐폴드에 부착되지 않는다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 개별 롤리업 스캐폴드는 하나 이상의 추가적인 개별 롤리업 스캐폴드에 부착된다. 일부 실시양태에서, 개별 롤리업 스캐폴드는 하나의 다른 롤리업 스캐폴드에 부착된다. 일부 실시양태에서, 개별 롤리업 스캐폴드는 2개의 다른 롤리업 스캐폴드에 부착된다. 일부 실시양태에서, 개별 롤리업 스캐폴드는 3개의 다른 롤리업 스캐폴드에 부착된다. 일부 실시양태에서, 개별 롤리업 스캐폴드는 4개의 다른 롤리업 스캐폴드에 부착된다. 일부 실시양태에서, 개별 롤리업 스캐폴드는 4개의 다른 롤리업 스캐폴드에 부착되고 복수의 롤리업 스캐폴드는 격자 패턴을 형성한다. 일부 실시양태에서, 개별 롤리업 스캐폴드는 4개의 다른 롤리업 스캐폴드에 부착되고 복수의 롤리업 스캐폴드는 롤리업 스캐폴드의 어레이를 형성한다.
일부 실시양태에서, 본원에 개시된 롤리업 스캐폴드는 가이드가 대상체의 피부와 90° 각도를 형성하도록 대상체에게 투여된다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 롤리업 스캐폴드는 가이드가 대상체의 피부와 80° 각도를 형성하도록 대상체에게 투여된다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 롤리업 스캐폴드는 가이드가 대상체의 피부와 70° 각도를 형성하도록 대상체에게 투여된다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 롤리업 스캐폴드는 가이드가 대상체의 피부와 60° 각도를 형성하도록 대상체에게 투여된다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 롤리업 스캐폴드는 가이드가 대상체의 피부와 60° 미만, 50° 미만, 40° 미만, 30° 미만, 30° 미만, 20°미만 또는 10° 미만인 각도를 형성하도록 대상체에게 투여된다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 롤리업 스캐폴드는 가이드를 이탈하는 모발이 대상체의 피부와 자연 발생 각도를 생성하도록 대상에게 투여된다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 롤리업 스캐폴드는 가이드를 이탈하는 모발이 대상체의 피부에서 롤리업 스캐폴드에 인접한 천연 모발의 각도와 일치하도록 대상체에게 투여된다.
일부 실시양태에서, 본원에 개시된 롤리업 스캐폴드는 세포 저장소 및 가이드 및 하나 이상의 모낭형성 세포를 포함하고, 가이드는 세포 저장소 내로 연장된다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 롤리업 스캐폴드는 세포 저장소 및 가이드 및 하나 이상의 모낭형성 세포를 포함하고, 가이드는 세포 저장소 내로 연장되지 않는다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 롤리업 스캐폴드는 세포 저장소 및 가이드 및 하나 이상의 모낭형성 세포를 포함하고, 가이드는 구부릴 수 있다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 롤리업 스캐폴드는 세포 저장소 및 가이드 및 하나 이상의 모낭형성 세포를 포함하고, 가이드는 균열에 내성이 있다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 롤리업 스캐폴드는 세포 저장소 및 가이드 및 하나 이상의 모낭형성 세포를 포함하고, 롤리업 스캐폴드는 가이드가 대상체의 피부를 통해 연장되고 세포 저장소가 대상체의 피부 아래에 완전히 고정되도록 대상체에게 투여된다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 롤리업 스캐폴드는 세포 저장소 및 가이드 및 하나 이상의 모낭형성 세포를 포함하고, 롤리업 스캐폴드는 가이드의 적어도 일부분이 대상체의 피부를 통해 외부로 연장되고 세포 저장소가 대상체의 피부 아래에 완전히 고정되도록 대상체에 투여된다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 롤리업 스캐폴드는 세포 저장소 및 가이드 및 하나 이상의 모낭형성 세포를 포함하고, 롤리업 스캐폴드는 모든 가이드가 대상체의 피부를 통해 외부로 연장되고 세포 저장소가 대상체의 피부 아래에 완전히 고정되도록 대상체에게 투여된다.
도면 설명
도 1A 내지 도 1C는 일 실시양태에 따른 롤리업 마이크로-스캐폴드 제안된 작용 메커니즘을 나타내는 예시적인 개략도이다. 보다 구체적으로, 도 1A는 피부 내부의 의도된 위치를 나타내는 빈 롤리업과 그로부터 연장되어 피부의 표피를 관통하는 가이드의 개략도를 예시한다. 도 1B는 상피 세포와 진피 유두 세포가 사전 로딩되어 피부에 이식된 롤리업과 그로부터 연장되어 피부의 표피를 관통하는 가이드를 나타내는 개략도이다. 도 1C는 발생기 모낭과 피부의 표피를 관통하는 형성된 진피 유두 캡슐(자홍색)과 상피 세포(파란색)가 사전 로딩된 분해되는 롤리업(파선)을 나타내는 개략도이다. 도 1D는 예시적인 PCL 롤리업의 전자현미경 이미지이다. 축척 막대 500 μM.
도 2는 일 실시양태에 따른 롤리업 로딩을 위한 맞춤형 플레이트를 생성하기 위한 생체공학적 도구를 나타낸다. (A) 네거티브 고체 스탬프, (B) 포지티브 실리콘 몰드. (C) 아가로스 마이크로웰 접시.
도 3은 일 실시양태에 따른 롤리업 로딩을 위한 맞춤형 플레이트를 생성하기 위한 생체공학적 도구를 나타낸다. 각 절제면에 개별적으로 배치된 롤리업 스캐폴드를 보유하는 아가로스 마이크로웰. (A) 전체 플레이트의 도면, (B) 웰에 분배된 개별 롤리업 스캐폴드를 나타내는 플레이트의 중앙의 스테레오 이미지.
도 4는 일 실시양태에 따른 인간 iPSC 유래의 진피 유두 세포 및 마우스 E18.5 배아 상피 세포로의 롤리업 로딩을 나타낸다. 진피 유두 및 각질형성세포를 로딩한 후 0(영)일, 1(일)일 및 3(삼)일차에서의 개별 롤리업 스캐폴드의 입체현미경 이미지. 3일차 이미지에서 모간을 따른 세포 이동이 있음을 주목한다. 0일 및 1일차에 마이크로웰 내부에서 촬영되었다. 3일차 이미지는 누드 마우스에 이식하기 전에 마이크로웰로부터 채취되어 페트리 접시의 바닥에 배치된 작제물로 촬영되었다. 가이드를 따라 버키볼로부터 멀리 이동하는 세포를 주목한다(3일차, 빨간색 화살표). 이미지는 입체현미경을 사용하여 촬영되었다. 축척 막대: 100 μM.
도 5는 일 실시양태에 따른 인간 iPSC-DP + 마우스 E18.5 상피 세포가 로딩된 롤리업 스캐폴드를 이식한 후 경피 모발 성장의 예를 나타낸다. 마이크로-스캐폴드에서 조작된 모낭형성 세포의 이식 후 28일, 40일 및 50일차에 누드 마우스에서 관찰된 모간의 확대 이미지. 모간의 검은색은 C57BL6 상피 세포 제제에 존재하는 멜라닌세포가 기여한 것이다.
도 6은 롤리업 마이크로-스캐폴드의 다른 예시적인 실시양태를 도시한다. 도시된 바와 같이, 롤리업(600)은 세포 저장소(601) 및 가이드(603)를 포함할 수 있다. 세포 저장소(601)는 실질적으로 구형일 수 있고 세포 저장소(601) 내에 모낭형성 세포를 수용하도록 구성될 수 있다. 세포 저장소(601)는 다공성일 수 있고, 이로써 모낭형성 세포는 세포 저장소(601) 내에 상당히 포함될 수 있지만, 시간 경과에 따라 세포 저장소(601)의 외부로 이동할 수도 있다. 세포 저장소(601)는 시간 경과에 따라 생분해될 수 있다. 가이드(603)는 세포 저장소(601)에 부착될 수 있거나 롤리업(600)을 포함하는 단일형 구조의 일부일 수 있다. 도 6에 도시된 바와 같이, 가이드(603)의 적어도 일부분은 세포 저장소(601) 내로 연장될 수 있다. 일부 측면에서, 가이드(603)는 세포 저장소(601)의 길이를 통해 연장될 수 있다. 일부 측면에서, 가이드(603)는 세포 저장소(601)의 상단 및 하단에 고정될 수 있다. 세포 저장소(601)를 통해 가이드(603)를 연장하는 것은 롤리업(600)의 구조적 무결성을 개선할 수 있다.
롤리업(600)은 롤리업(600)이 환자에게 이식될 때 가이드(603)가 피부를 통해 연장되도록 구성될 수 있다. 일부 측면에서, 가이드(603)는 중공이 아니라 고체 부재 또는 스레드(thread)이다. 이러한 방식으로, 가이드(603)가 피부를 통해 연장되는 동안, 피부는 실질적으로 가이드(603)를 둘러싸고 이로써 피부는 환자의 체내로의 유해 물질의 침입을 방지하는 이의 천연 능력을 유지한다. 일부 측면에서, 가이드(603)는 나일론 스레드를 포함한다. 일부 측면에서, 가이드는 생분해성 물질로 제조되고 이로써 이는 시간 경과에 따라 분해된다. 가이드(603)는 폴리카프로락톤(PCL)과 같은 생분해성 폴리에스테르로 제조된다. 일반적으로, 가이드(603)는 세포를 위쪽을 향해 안내하도록 구성된다. 일부 측면에서, 롤리업(600)의 이식 후에, 하나 이상의 모간이 해당 피부-가이드(603) 계면에서 합체될 수 있다.
바람직한 실시양태가 본원에 제시되고 설명되었지만, 당업자는 이러한 실시양태가 단지 예시로서 제공된다는 것을 이해할 것이다. 본원에 설명된 실시양태에 대한 다양한 대안이 본원에 설명된 조성물 및 방법을 실시하는 데 이용될 수 있음을 이해해야 한다.
실시예
하기의 실시예는 청구된 발명을 더 잘 예시하기 위해 제공되며 본 발명의 범위를 한정하는 것으로 해석되지 않아야 한다. 구체적 재료가 언급되는 정도까지, 이는 단지 예시하기 위한 것이고 본 발명을 한정하려는 의도가 아니다. 당업자는 발명의 능력을 발휘하지 않고 본 발명의 범위를 벗어나지 않으면서 동등한 수단 또는 반응물을 개발할 수 있다.
실시예 1A. 롤리업 원리 및 제조
롤리업 마이크로스캐폴드는 모낭형성 세포를 피부로 이식하는 것을 제어하도록 설계하였다. 롤리업은 가이드(샤프트)에 연결된 버키볼로 구성된다. 버키볼은 소정의 수의 세포를 수용하며 가이드/샤프트를 핸들링함으로써 쉽게 조작된다. 세포 및 전체 롤리업 스캐폴드의 핸들링을 용이하게 하는 것 외에도, 가이드/샤프트는 모발 성장 및 모발 순환 동안 발생기 모간이 관통하여 체류도록 피부의 표피 내에 공간을 유지하는 역할을 한다. 마지막으로, 롤리업은 또한 피부 내부의 모낭의 초기 위치 및 모발 성장의 방향을 설정한다. 롤리업은 높은 세포 밀도(버키볼 내부)를 달성하는 능력과 기계적 안정성 및 방향성을 겸비하고 있다. 게다가, 롤리업 마이크로스캐폴드에 유도 만능 줄기 세포(iPSC) 유래의 진피 유두(DP) 세포 및 상피 세포(iPSC 유래의 상피 세포를 포함)를 로딩하는 것은 이식 시 진피 세포와 표피 세포 사이의 혼선(crosstalk)을 향상시킨다.
스캐폴드는, 도 1에 도시된 바와 같이, 3D-모낭 단위의 마우스(및 인간) 피부로의 이식을 용이하게 하고 피부를 통한 모발 성장을 유도하여 모낭 형성의 생물학적 사건을 모방하는 중요한 도구를 제공한다. 버키볼 직경은 50 내지 500μM의 범위일 수 있고 가이드 길이는 1 내지 5 mm의 범위일 수 있다. 롤리업 마이크로스캐폴드는 봉합사 및 스티치에 사용되는 동일한 물질인 폴리카프로락톤(PCL)을 사용하는 2광자 중합을 사용하여 설계하였다. 인간에서 익히 연구된 생분해 동역학 및 안전성 프로파일을 갖는 다른 중합체를 사용할 수 있다. 버키볼 및 가이드는 상이한 분해 속도를 갖는 상이한 중합체로 제조할 수 있다.
실시예 1B. 아가로스 마이크로웰 접시의 제조
고체 스탬프는 30 mm 원 상의 9x9 웰에 맞도록 설계하였다. Sylgard 184 실리콘 엘라스토머 및 경화제(Sigma-Aldrich/Merck KGaA(독일 다름슈타트)로부터 구입)를 수령한 그대로 사용하여 스탬프의 실리콘 포지티브를 생성하였다. 그 다음, 이 포지티브를 아가로스 몰드를 위해 사용하였다. 분자생물학 등급의 물 중의 2% 아가로스(A9539-500G, Sigma-Aldrich/Merck KGaA, 독일 다름슈타트) 용액을 재료가 완전히 용해될 때까지 마이크로웨이브를 사용하여 가열하였다. 그 다음, 액체 아가로스를 35mm 배양 접시에 부었다. 실리콘 네거티브를 아가로스 용액 위에 거꾸로 뒤집어 배치하였다. 10분 후, 스탬프를 아가로스로부터 제거할 수 있었다. 그 결과는, 도 2에 도시된 바와 같이, 63개의 V자 모양 마이크로웰을 갖는 배양 접시이다. 마이크로-성형된 아가로스 배양 접시를 항온배양기로 전이시키고 세포 배지와 밤새 평형화시켰다.
실시예 1C. 아가로스 마이크로웰 내로의 롤리업 스캐폴드 분배
마이크로웰당 단일 스캐폴드의 존재를 보장하고 구조 내로 회전타원체 형성을 허용하기 위해, 롤리업을 각 마이크로웰로 수동으로 전이시켰다. 도 3에 도시된 바와 같이, 볼 부분이 하단에 오고 봉이 절제면의 상단을 향하게 롤리업이 정확히 배치되도록 제어하기 위해, 입체현미경 하에 전이를 수행하였다.
실시예 2. 세포로의 롤리업 로딩
hiPSC를 DP-유사 세포로 분화시키고 단층으로 증대(expansion)시킨 후, hiPSC-DP 세포를 트립신으로 수거하고 원심분리하고 500 ㎕ 중의 1x106개 세포의 밀도로 AmnioMAX II 배지(Gibco, Thermo Fischer Scientific, 미국 매사추세츠주 월섬)에 재현탁하였다. 문헌[Zheng et al, 2005 (Ying Zheng, Xiabing Du, Wei Wang, Marylene Boucher, Satish Parimoo, and Kurt S. Stenn, Organogenesis From Dissociated Cells: Generation of Mature Cycling Hair Follicles From Skin-Derived Cells. J Invest Dermatol 124:867-876, 2005)]에 설명된 바와 같이 마우스 태아(E18.5) 상피 세포(각질형성세포)를 얻었다. 간략히 언급하면, 몸통 피부를 E18.5 C57BL/6 배아로부터 제거하고 Ca2+ 및 Mg2+ 비함유 PBS로 헹구었다. 피부를 0.2% 디스파제와 함께 4℃에서 밤새 항온배양하여 진피로부터 표피가 분리될 수 있도록 하였다. 그 다음, 진피를 37℃에서 60분 동안 0.2% 콜라게나제(Sigma-Aldrich, 미국 세인트 루이스)로 분해시키는 한편, 표피를 37℃에서 10분 동안 0.25% 트립신/EDTA(Sigma-Aldrich, 미국 세인트 루이스)로 분해시켰다. 단일 세포 현탁액을 40 μm 필터를 통해 걸러내고 1200 rpm에서 펠렛화하였다. 1x106 단일 표피 세포를 총 용적 500 μl의 각질형성세포 성장 배지(PromoCell GmbH, 독일 하이델베르크)에 재현탁하고 마우스 1x106 단일 진피 세포를 AmnioMAX II 배지에 재현탁하였다. 8x105 인간 iPSC 유래의 진피 유두 세포 또는 마우스 진피 세포의 단일 세포 현탁액을 8x105 마우스 E18.5 상피 세포와 혼합하고 배지의 최종 용적을 1 ml로 조정하였다. 세포를 배양 접시 내의 마이크로웰 위에 균질하게 분배하였다.
절제부의 바닥에서 세포 혼합물의 적절한 침하를 보장하기 위해, 배양 접시를 500 rpm에서 3분 동안 원심분리하였다. 이때, 동량의 AmnioMAXTM II와 각질형성세포 배양 배지로 제조된 새로운 배지 1ml를 배양 접시에 조심스럽게 첨가하고 이를 37℃에서 최대 3일 동안 항온배양하였다. 인간 iPSC 유래의 진피 유두 세포 및 마우스 E18.5 e3배아 상피 세포로의 롤리업 로딩은 도 4에 도시되어 있다.
실시예 3. 마우스 E18.5 상피 세포와 조합된 인간 iPSC 유래의 DP 세포가 사전 로딩된 롤리업 스캐폴드의 이식
무흉선 누드 마우스는 엔비고(Envigo)(미국 플라센티아 엔비고)로부터 입수하였다. 모든 동물 절차는 실험실 동물의 인도적 관리 및 사용에 관한 PHS 정책과 샌포드 번헴 프리비스 의학적 발견 연구소(Sanford Burnham Prebys Medical Discovery Institute) IACUC 위원회의 승인에 따라 수행하였다.
마우스 E18.5 상피 세포와 조합된 인간 iPSC 유래의 DP 세포가 로딩된 롤리업 스캐폴드 10개를 누드 마우스의 등 피부에 이식하였다. 마취(이소플루오란) 하에, 20-G 안과용 V-랜스(lance)를 사용하여 피부 표면과 거의 평행한 얕은 자창을 만들었다. 스캐폴드를 상처 내부로 수동으로 전이시키고 이를 약 1주일 동안 붕대로 덮어서 치유되도록 하였다. 마취로부터 회복된 후, 마우스를 단일 케이지에 넣고 정상적인 사육 조건 하에 유지시켰다. 주사된 세포를 받은 피부 부위를 50일 동안 사진 카메라로 모니터링하고 이미지화하였다. 모발 성장은 도 5에 도시된 바와 같이 이식 후 28일 및 50일차에 평가하였다.
피부의 원위치 분석으로 새로 생성된 모낭 내에 인간 iPSC-DP가 차지하는 DP 세포의 예상되는 고정적 위치를 입증하였으며, DP 세포는 인간 세포질-특이적 항체를 사용한 면역형광에 의해 인간 기원의 것으로 확인되었다(데이터는 제시하지 않음).
본원에 설명된 실시예 및 실시양태는 단지 예시의 목적을 위한 것이며, 당업자에게 제안된 다양한 변형 또는 변경은 본 출원의 사상과 범위 및 첨부된 청구범위 내에 포함될 것이다.

Claims (91)

  1. (a) 세포 저장소;
    (b) 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드; 및
    (c) 하나 이상의 모낭형성 세포
    를 포함하는 세포 스캐폴드.
  2. 제1항에 있어서, 가이드는 피부 아래에 삽입될 때 가이드의 적어도 일부분이 피부 외부로 연장되도록 구성되는 것인 세포 스캐폴드.
  3. 제1항에 있어서, 하나 이상의 모낭형성 세포는 세포 저장소와 접촉하고 있는 것인 세포 스캐폴드.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 저장소는 구형, 타원형, 원통형, 관형 또는 버키볼 모양인 세포 스캐폴드.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 저장소는 중공 내부를 갖는 것인 세포 스캐폴드.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 저장소는 다공성 내부를 갖는 것인 세포 스캐폴드.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 제1 생분해성 중합체는 폴리(글리콜산)(PGA), 폴리(락트산-코-글리콜산)(PLGA), 폴리(락트산)(PLA), 폴리카프로락톤(PCL), 폴리에틸렌 글리콜, 폴리(부틸렌 석시네이트)(PBS), 폴리포스파젠, 폴리무수물, 폴리포스포에스테르, 폴리우레탄, 폴리카보네이트 및 이들의 조합을 포함하는 것인 세포 스캐폴드.
  8. 제1항 내지 제7중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 제1 생분해성 중합체는 폴리카프로락톤(PCL)을 포함하는 것인 세포 스캐폴드.
  9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 저장소는 하나 이상의 제2 생분해성 중합체를 포함하는 것인 세포 스캐폴드.
  10. 제9항에 있어서, 하나 이상의 제2 생분해성 중합체는 폴리(글리콜산)(PGA), 폴리(락트산-코-글리콜산)(PLGA), 폴리(락트산)(PLA), 폴리카프로락톤(PCL), 폴리에틸렌 글리콜, 폴리(부틸렌 석시네이트)(PBS), 폴리포스파젠, 폴리무수물, 폴리포스포에스테르, 폴리우레탄, 폴리카보네이트 및 이들의 조합을 포함하는 것인 세포 스캐폴드.
  11. 제9항에 있어서, 하나 이상의 제2 생분해성 중합체는 폴리카프로락톤(PCL)을 포함하는 것인 세포 스캐폴드.
  12. 제9항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 제1 생분해성 중합체 및 하나 이상의 제2 생분해성 중합체는 동일한 것인 세포 스캐폴드.
  13. 제9항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 제1 생분해성 중합체 및 하나 이상의 제2 생분해성 중합체는 상이한 것인 세포 스캐폴드.
  14. 제13항에 있어서, 하나 이상의 제1 생분해성 중합체는 하나 이상의 제2 생분해성 중합체보다 느린 분해 속도를 갖는 것인 세포 스캐폴드.
  15. 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 저장소는 자성 재료로 유도체화되는 것인 세포 스캐폴드.
  16. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 가이드는 자성 재료로 유도체화되는 것인 세포 스캐폴드.
  17. 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 저장소는 직경이 50 내지 500 ㎛인 세포 스캐폴드.
  18. 제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 저장소는 직경이 250 내지 400 ㎛(예를 들어, 직경이 250 내지 350 ㎛ 또는 직경이 300 내지 400 ㎛)인 세포 스캐폴드.
  19. 제17항에 있어서, 세포 저장소는 직경이 약 200 ㎛인 세포 스캐폴드.
  20. 제17항에 있어서, 세포 저장소는 직경이 약 300 ㎛인 세포 스캐폴드.
  21. 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 가이드는 중공인 세포 스캐폴드.
  22. 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 가이드는 고체인 세포 스캐폴드.
  23. 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 모낭형성 세포는 줄기 세포인 세포 스캐폴드.
  24. 제23항에 있어서, 줄기 세포는 배아 줄기 세포 및 유도 만능 줄기 세포(iPSC)로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 세포 스캐폴드.
  25. 제24항에 있어서, 유도 만능 줄기 세포(iPSC)는 섬유아세포, 신장 상피 세포 및 혈액 세포로 이루어진 군으로부터 선택된 공급원으로부터 생성되는 것인 세포 스캐폴드.
  26. 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 모낭형성 세포는 진피 유두, 상피 줄기 세포 또는 이들의 조합인 세포 스캐폴드.
  27. (a) 하나 이상의 모낭형성 세포를,
    i. 세포 저장소; 및
    ii. 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드
    를 포함하는 세포 스캐폴드 내에 로딩하는 단계; 및
    (b) 상기 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식하는 단계
    를 포함하는, 모낭의 성장 방법.
  28. 제27항에 있어서, 대상체에게 이식될 때, 가이드의 적어도 일부분은 피부를 통해 외부로 연장되는 것인 방법.
  29. 제27항에 있어서, 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하는 단계는 하나 이상의 모낭형성 세포 및 세포 스캐폴드를 다수의 마이크로웰을 포함하는 마이크로웰 플레이트의 마이크로웰 내에 배치하는 것을 포함하는 방법.
  30. 제29항에 있어서, 마이크로웰은 원추형 또는 U자 모양인 방법.
  31. 제29항 또는 제30항에 있어서, 마이크로웰 플레이트의 각 마이크로웰은 하나 이상의 모낭형성 세포 및 세포 스캐폴드를 포함하는 것인 방법.
  32. 제29항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 스캐폴드는 마이크로웰에서 세포 저장소가 마이크로웰의 바닥에 더 가깝고 가이드가 마이크로웰의 개구부에 더 가깝도록 배향되는 것인 방법.
  33. 제29항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하는 단계는 하나 이상의 모낭형성 세포 및 세포 스캐폴드를 마이크로웰 내에 배치한 후 마이크로웰 플레이트를 원심분리하는 것을 추가로 포함하는 방법.
  34. 제28항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하는 단계는 수동으로 수행되는 것인 방법.
  35. 제28항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하는 단계는 로봇으로 수행되는 것인 방법.
  36. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항의 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식하는 단계를 포함하는 모낭의 성장 방법.
  37. 제27항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 스캐폴드를 이식하기 전에 진피 조직을 바늘로 천공시키는 단계를 추가로 포함하는 방법.
  38. 제27항 내지 제37항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 저장소, 가이드 또는 세포 저장소와 가이드 둘 다는 자성 재료로 유도체화되는 것인 방법.
  39. 제38항에 있어서, 하나 이상의 모낭형성 세포를 세포 스캐폴드 내에 로딩하는 단계는 자기장을 세포 스캐폴드에 인가하는 것을 추가로 포함하는 방법.
  40. 제38항 또는 제39항에 있어서, 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식하는 단계는 자기장을 세포 스캐폴드에 인가하는 것을 추가로 포함하는 방법.
  41. 제27항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 모낭형성 세포는 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식하는 단계에서 줄기 세포인 방법.
  42. 제27항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 스캐폴드를 진피 조직에 이식한 후, 진피 조직을 붕대로 덮는 단계를 추가로 포함하는 방법.
  43. 제27항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 모낭형성 세포는 세포 저장소와 접촉하고 있는 것인 방법.
  44. 제27항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 저장소는 구형, 타원형, 원통형, 관형 또는 버키볼 모양인 방법.
  45. 제27항 내지 제44항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 제1 생분해성 중합체는 폴리(글리콜산)(PGA), 폴리(락트산-코-글리콜산)(PLGA), 폴리(락트산)(PLA), 폴리카프로락톤(PCL), 폴리에틸렌 글리콜, 폴리(부틸렌 석시네이트)(PBS), 폴리포스파젠, 폴리무수물, 폴리포스포에스테르, 폴리우레탄, 폴리카보네이트 및 이들의 조합을 포함하는 것인 방법.
  46. 제27항 내지 제44항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 제1 생분해성 중합체는 폴리카프로락톤(PCL)을 포함하는 것인 방법.
  47. 제27항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 저장소는 하나 이상의 제2 생분해성 중합체를 포함하는 것인 방법.
  48. 제47항에 있어서, 하나 이상의 제2 생분해성 중합체는 폴리(글리콜산)(PGA), 폴리(락트산-코-글리콜산)(PLGA), 폴리(락트산)(PLA), 폴리카프로락톤(PCL), 폴리에틸렌 글리콜, 폴리(부틸렌 석시네이트)(PBS), 폴리포스파젠, 폴리무수물, 폴리포스포에스테르, 폴리우레탄, 폴리카보네이트 및 이들의 조합을 포함하는 것인 방법.
  49. 제48항에 있어서, 하나 이상의 제2 생분해성 중합체는 폴리카프로락톤(PCL)을 포함하는 것인 방법.
  50. 제47항 내지 제49항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 제1 생분해성 중합체 및 하나 이상의 제2 생분해성 중합체는 동일한 것인 방법.
  51. 제47항 내지 제49항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 제1 생분해성 중합체 및 하나 이상의 제2 생분해성 중합체는 상이한 것인 방법.
  52. 제51항에 있어서, 하나 이상의 제1 생분해성 중합체는 하나 이상의 제2 생분해성 중합체보다 느린 분해 속도를 갖는 것인 방법.
  53. 제27항 내지 제52항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 저장소는 자성 재료로 유도체화되는 것인 방법.
  54. 제27항 내지 제53항 중 어느 한 항에 있어서, 가이드는 자성 재료로 유도체화되는 것인 방법.
  55. 제27항 내지 제54항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 저장소는 직경이 50 내지 500 ㎛(예를 들어, 직경이 250 내지 400 ㎛, 직경이 250 내지 350 ㎛ 또는 직경이 300 내지 400 ㎛)인 방법.
  56. 제55항에 있어서, 세포 저장소는 직경이 약 200 ㎛이거나 직경이 약 300 ㎛인 방법.
  57. 제27항 내지 제56항 중 어느 한 항에 있어서, 가이드는 중공인 방법.
  58. 제27항 내지 제56항 중 어느 한 항에 있어서, 가이드는 고체인 방법.
  59. 제27항 내지 제58항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 모낭형성 세포는 줄기 세포인 방법.
  60. 제59항에 있어서, 줄기 세포는 배아 줄기 세포 및 유도 만능 줄기 세포(iPSC)로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
  61. 제60항에 있어서, 유도 만능 줄기 세포(iPSC)는 섬유아세포, 신장 상피 세포 및 혈액 세포로 이루어진 군으로부터 선택된 공급원으로부터 생성되는 것인 방법.
  62. 제27항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 모낭형성 세포는 진피 유두, 상피 줄기 세포 또는 이들의 조합인 방법.
  63. (a) 하나의 세포 스캐폴드를 마이크로웰 플레이트의 각 마이크로웰 내에 로딩하는 단계로서, 상기 마이크로웰 플레이트는 복수의 마이크로웰을 포함하고, 각 세포 스캐폴드는
    i. 세포 저장소; 및
    ii. 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드
    를 포함하는 것인 단계;
    (b) 하나 이상의 모낭형성 세포를 마이크로웰 플레이트의 복수의 마이크로웰 위에 분배하는 단계; 및
    (c) 마이크로웰 플레이트를 항온배양하는 단계
    를 포함하는, 모낭형성 세포의 배양 방법.
  64. 제63항에 있어서, 하나 이상의 모낭형성 세포는 세포 저장소와 접촉하고 있는 것인 방법.
  65. 제63항 또는 제64항에 있어서, 세포 저장소는 구형, 타원형, 원통형, 관형 또는 버키볼 모양인 방법.
  66. 제63항 내지 제65항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 저장소는 중공 내부를 갖는 것인 방법.
  67. 제63항 내지 제65항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 저장소는 다공성 내부를 갖는 것인 방법.
  68. 제63항 내지 제67항 중 어느 한 항에 있어서, 마이크로웰은 원추형 또는 U자 모양인 방법.
  69. 제63항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 모낭형성 세포를 마이크로웰 플레이트의 복수의 마이크로웰 위에 분배한 후 마이크로웰 플레이트를 원심분리하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
  70. 제63항 내지 제69항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 제1 생분해성 중합체는 폴리(글리콜산)(PGA), 폴리(락트산-코-글리콜산)(PLGA), 폴리(락트산)(PLA), 폴리카프로락톤(PCL), 폴리에틸렌 글리콜, 폴리(부틸렌 석시네이트)(PBS), 폴리포스파젠, 폴리무수물, 폴리포스포에스테르, 폴리우레탄, 폴리카보네이트 및 이들의 조합을 포함하는 것인 방법.
  71. 제63항 내지 제70항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 제1 생분해성 중합체는 폴리카프로락톤(PCL)을 포함하는 것인 방법.
  72. 제63항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 저장소는 하나 이상의 제2 생분해성 중합체를 포함하는 것인 방법.
  73. 제72항에 있어서, 하나 이상의 제2 생분해성 중합체는 폴리(글리콜산)(PGA), 폴리(락트산-코-글리콜산)(PLGA), 폴리(락트산)(PLA), 폴리카프로락톤(PCL), 폴리에틸렌 글리콜, 폴리(부틸렌 석시네이트)(PBS), 폴리포스파젠, 폴리무수물, 폴리포스포에스테르, 폴리우레탄, 폴리카보네이트 및 이들의 조합을 포함하는 것인 방법.
  74. 제72항에 있어서, 하나 이상의 제2 생분해성 중합체는 폴리카프로락톤(PCL)을 포함하는 것인 방법.
  75. 제72항 내지 제74항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 제1 생분해성 중합체 및 하나 이상의 제2 생분해성 중합체는 동일한 것인 방법.
  76. 제72항 내지 제74항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 제1 생분해성 중합체 및 하나 이상의 제2 생분해성 중합체는 상이한 것인 방법.
  77. 제72항 내지 제74항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 제1 생분해성 중합체는 하나 이상의 제2 생분해성 중합체보다 느린 분해 속도를 갖는 것인 방법.
  78. 제63항 내지 제77항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 저장소는 자성 재료로 유도체화되는 것인 방법.
  79. 제63항 내지 제78항 중 어느 한 항에 있어서, 가이드는 자성 재료로 유도체화되는 것인 방법.
  80. 제63항 내지 제79항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 저장소는 직경이 50 내지 500 ㎛(예를 들어, 직경이 250 내지 400 ㎛, 직경이 250 내지 350 ㎛ 또는 직경이 300 내지 400 ㎛)인 방법.
  81. 제80항에 있어서, 세포 저장소는 직경이 약 200 ㎛이거나 직경이 약 300 ㎛인 방법.
  82. 제63항 내지 제81항 중 어느 한 항에 있어서, 가이드는 중공인 방법.
  83. 제63항 내지 제81항 중 어느 한 항에 있어서, 가이드는 고체인 방법.
  84. 제63항 내지 제83항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 모낭형성 세포는 줄기 세포인 방법.
  85. 제84항에 있어서, 줄기 세포는 배아 줄기 세포 및 유도 만능 줄기 세포(iPSC)로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
  86. 제85항에 있어서, 유도 만능 줄기 세포(iPSC)는 섬유아세포, 신장 상피 세포 및 혈액 세포로 이루어진 군으로부터 선택된 공급원으로부터 생성되는 것인 방법.
  87. 제63항 내지 제83항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 모낭형성 세포는 진피 유두, 상피 줄기 세포 또는 이들의 조합인 방법.
  88. (a) 2광자 중합을 사용하여
    i. 세포 저장소; 및
    ii. 하나 이상의 제1 생분해성 중합체를 포함하는 세포 저장소에 부착된 가이드
    를 포함하는 세포 스캐폴드를 생성하는 단계를 포함하는, 세포 스캐폴드의 생성 방법.
  89. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 요법에 사용하기 위한 세포 스캐폴드.
  90. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 치료를 필요로 하는 대상체의 탈모, 및/또는 탈모증, 외배엽 이형성증, 연주모증, 니트레토 증후군(Netherton syndrome), 멘케스병 또는 유전성 수포성 표피박리증으로부터 선택된 병태의 치료에 사용하기 위한 세포 스캐폴드.
  91. 제89항 또는 제90항에 있어서, 제27항 내지 제62항 중 어느 한 항의 방법에 사용하기 위한 세포 스캐폴드.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
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WO2024035684A1 (en) * 2022-08-09 2024-02-15 Stemson Therapeutics Corp. Organoids derived from dermal papilla and epithelial stem cells and production and uses thereof

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7597885B2 (en) * 2004-03-26 2009-10-06 Aderans Research Institute, Inc. Tissue engineered biomimetic hair follicle graft
AU2011263652B2 (en) * 2010-06-11 2014-11-20 Takara Bio Europe Ab 3-dimensional scaffolds for improved differentiation of pluripotent stem cells to hepatocytes
WO2012018304A1 (en) * 2010-08-03 2012-02-09 Agency For Science, Technology And Research Microfabricated scaffold structures
US9982238B2 (en) * 2011-02-09 2018-05-29 Organ Technologies, Inc. Method for producing regenerative organ primordium provided with guide for transplantation, composition containing regenerative organ primordium provided with guide for transplantation produced thereby, and method for transplanting regenerative organ primordium provided with guide for transplantation
US9664671B2 (en) * 2012-07-24 2017-05-30 Nissan Chemical Industries, Ltd. Culture medium composition and method of culturing cell or tissue using thereof
AU2013312924A1 (en) * 2012-09-04 2015-03-19 Anthrogenesis Corporation Methods of tissue generation

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