KR20210133890A

KR20210133890A - 복합 한약재 추출물을 유효성분으로 포함하는 파킨슨병 예방, 치료, 또는 개선용 조성물

Info

Publication number: KR20210133890A
Application number: KR1020210055486A
Authority: KR
Inventors: 김세윤; 유인식; 이진혁
Original assignee: 우보한의연구소(주)
Priority date: 2020-04-29
Filing date: 2021-04-29
Publication date: 2021-11-08

Abstract

본 발명은 복합 한약재 추출물을 유효성분으로 포함하는 파킨슨병 예방, 치료, 또는 개선용 조성물에 관한 것으로서, 본 발명에 따른 복합 한약재 추출물은 귀두자, 나염초, 낙상홍, 낭미초, 녹리, 및 백룡수를 포함하여, 한약재의 독성을 줄이면서도 신경세포를 보호하고 파킨슨병 모델에서 운동 회복 능력 강화 등의 효과를 나타내는 바, 파킨슨병의 예방 또는 치료에 유용하게 이용할 수 있을 것으로 기대된다.

Description

복합 한약재 추출물을 유효성분으로 포함하는 파킨슨병 예방, 치료, 또는 개선용 조성물 {A composition for preventing, treating, or improving Parkinson's disease comprising complex medicinal herb extract as an effective ingredient}

본 발명은 복합 한약재 추출물을 유효성분으로 포함하는 파킨슨병 예방, 치료, 또는 개선용 조성물 및 복합 한약재 추출물의 제조방법에 관한 것이다.

파킨슨병(Parkinson's disease)은 안정떨림, 경직, 운동완만 및 자세 불안정이 특징적으로 나타나는 신경계의 만성 진행성 퇴행성 질환으로 뇌의 흑질(Substantia Nigra pars compacta: SNc)에 분포하는 도파민의 신경세포가 점차 소실되는 신경병리학적인 특징을 나타낸다.

파킨슨병의 감소된 도파민의 양을 증가시키기 위한 대증요법제로서 L-Dopa가 현재 일반적으로 사용되고 있다. L-Dopa는 사용 후, 파킨슨병의 진행을 더디게 하고 임상증상의 경감을 보이지만, 장기간 복용 시 불수의적인 운동, 구토 등의 부작용이 따른다. 그 외에도, 파킨슨병을 치료하기 위하여 사용되고 있는 치료제로는 FDA 허가된 도파민 작용제(Dopamine Agonists), 카테콜-0-메틸트랜스퍼레이즈(catechol-Omethyltransferase inhibitor, COMT inhibitor), 모노아민 산화효소 B(monoamine oxidase B, MAO-B inhibitors), 항-콜린작용제(Anti-cholinergics) 등이 있다.

지금까지, 파킨슨병의 대증요법제로 사용되고 있는 도파민 전구체인 L-Dopa는 도파민 신경의 손실을 막지는 못하며, 장기적인 사용으로 인한 부작용으로, 말기 파킨슨병의 대증요법제로서 그 효용에 한계가 있다. 이러한 부작용으로 인하여 L-Dopa의 대체 치료제인 프라미펙솔(Pramipexole)도 한동안 사용되었으나, 장기간의 사용 시에는 L-Dopa로 다시 치료를 해야한다는 연구보고를 통해, 아직 L-Dopa에 대한 확실한 대체제는 나오지 않은 실정이다.

한편, 한의학에서 주로 사용하는 한약재들은 발병 원인 및 증상이 복합적으로 나타나는 만성 및 난치성 질환의 예방 및 치료에 있어서 멀티 타겟 기전에 의해 보다 근본적인 치료제로 주목받고 있다.

이에, 이러한 퇴행성 뇌질환을 치료할 뿐만 아니라 예방할 수 있고, 다양한 부작용을 최소화할 수 있는 한약재를 원료로 하는 복합 한약재 추출물에 대한 연구가 필요한 실정이다.

대한민국 등록특허 제10-1610459호

본 발명자들은 한약재의 독성을 줄이면서도 파킨슨병에 대해 우수한 예방 또는 치료 효과를 나타낼 수 있는 복합 한약재 추출물을 제조하였는 바, 이에 기초하여 본 발명을 완성하였다.

이에, 본 발명의 목적은 귀두자, 나염초, 낙상홍, 낭미초, 녹리, 및 백룡수를 포함하는 복합 한약재의 추출물을 유효성분으로 포함하는, 파킨슨병 예방, 치료, 또는 개선용 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 귀두자, 나염초, 낙상홍, 낭미초, 녹리, 및 백룡수를 포함하는 복합 한약재의 추출물을 제조하는 방법을 제공하는 것이다.

그러나, 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 본 발명이 속하는 기술 분야의 통상의 지식을 가진 자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.

상기와 같은 목적을 달성하기 위해 본 발명은 귀두자, 나염초, 낙상홍, 낭미초, 녹리, 및 백룡수를 포함하는 복합 한약재의 추출물을 유효성분으로 포함하는, 파킨슨병 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 귀두자, 나염초, 낙상홍, 낭미초, 녹리, 및 백룡수를 포함하는 복합 한약재의 추출물을 유효성분으로 포함하는, 파킨슨병 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.

본 발명의 일 구현예로서, 상기 식품 조성물은 건강기능식품 조성물일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

본 발명의 다른 구현예로서, 상기 복합 한약재의 추출물은 신경 세포를 보호할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

본 발명의 또 다른 구현예로서, 상기 복합 한약재의 추출물은 운동 회복 능력을 강화시킬 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

본 발명의 또 다른 구현예로서, 상기 복합 한약재의 추출물은 개체의 체중에 대하여 하루에 10 mg/kg 내지 500 mg/kg의 용량으로 투여될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

본 발명의 또 다른 구현예로서, 상기 투여는 경구 투여 또는 복강 투여일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

본 발명의 또 다른 구현예로서, 상기 추출물은 물, C₁내지 C₄의 저급알코올, n-헥산, 에틸아세테이트, 아세톤, 아세토니트릴, 부틸아세테이트, 1,3-부틸렌 글리콜, 메틸렌클로라이드, 및 이들의 혼합용매로 구성된 군으로부터 선택된 하나의 용매로 추출될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

또한, 본 발명은 (a) 귀두자, 나염초, 낙상홍, 낭미초, 녹리, 및 백룡수를 포함하는 복합 한약재를 혼합하는 단계; 및

(b) 상기 혼합된 복합 한약재에 추출용매를 첨가하여 복합 한약재 추출물을 추출하는 단계를 포함하는, 복합 한약재 추출물의 제조방법으로서,

상기 복합 한약재 추출물은 파킨슨병 예방 또는 치료 활성을 가지는 것을 특징으로 하는, 제조방법을 제공한다.

본 발명의 일 구현예로서, 상기 (b) 단계에서 추출은 10 ℃ 내지 40 ℃에서 60 시간 내지 84 시간 동안 이루어질 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

또한, 본 발명은 귀두자, 나염초, 낙상홍, 낭미초, 녹리, 및 백룡수를 포함하는 복합 한약재의 추출물을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 파킨슨병의 예방 또는 치료 방법을 제공한다.

또한, 본 발명은 귀두자, 나염초, 낙상홍, 낭미초, 녹리, 및 백룡수를 포함하는 복합 한약재의 추출물을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물의 파킨슨병 예방 또는 치료 용도를 제공한다.

또한, 본 발명은 귀두자, 나염초, 낙상홍, 낭미초, 녹리, 및 백룡수를 포함하는 복합 한약재의 추출물의, 파킨슨병 치료용 약제의 제조를 위한 용도를 제공한다.

본 발명에 따른 복합 한약재 추출물은 귀두자, 나염초, 낙상홍, 낭미초, 녹리, 및 백룡수를 포함하여, 한약재의 독성을 줄이면서도 신경세포를 보호하고 파킨슨병 모델에서 운동 회복 능력 강화 등의 효과를 나타내는 바, 파킨슨병의 예방 또는 치료에 유용하게 이용할 수 있을 것으로 기대된다.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 복합 한약재 추출물 처리 시 SH-SY5Y 세포에서의 독성 검사 결과를 나타낸 그래프이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 복합 한약재 추출물 처리 시 SH-SY5Y 세포에서 6-OHDA에 의해 유도된 세포독성에 대한 보호 효과를 나타낸 그래프이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 복합 한약재 추출물 투여 마우스에 대한 체중 변화를 나타낸 그래프이다.
도 4 및 도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 복합 한약재 추출물 투여 마우스에 대한 폴 테스트(Pole test) 결과 그래프이다.
도 6은 본 발명의 일 실시예에 따른 복합 한약재 추출물 투여 마우스에 대한 로타 로드 실험(Rota rod test) 결과 그래프이다.

본 발명자들은 귀두자, 나염초, 낙상홍, 낭미초, 녹리, 및 백룡수를 포함하는 복합 한약재의 추출물을 제조하고, 파킨슨병에 대한 상기 복합 한약재 추출물의 효과를 확인하였다.

본 발명의 일 실험예에서는 본 발명에 따른 복합 한약재 추출물이 사람 신경모세포종 SH-SY5Y 세포주에 대한 독성을 나타내지 않고, 6-OHDA에 의해 유도된 세포독성에 대해 보호 효과를 나타내는 것을 확인하였다(실험예 1 참조).

본 발명의 다른 실험예에서는 본 발명에 따른 복합 한약재 추출물이 MPTP로 유도된 파킨슨병 동물 모델에서 운동 회복 능력을 강화시키는 것을 확인하였다(실험예 2 참조).

이에, 본 발명은 귀두자, 나염초, 낙상홍, 낭미초, 녹리, 및 백룡수를 포함하는 복합 한약재의 추출물을 유효성분으로 포함하는, 파킨슨병 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

본 발명에 있어서, “파킨슨병”은 중뇌의 흑질에서 신경 전달 물질 중 운동에 꼭 필요한 도파민을 분비하는 신경세포의 소실로 인해 발생하는 신경계의 만성 진행성 퇴행성 질환으로서, 서동증(운동 느림), 안정시 떨림, 근육 강직, 자세 불안정 등의 증상이 발생한다.

본 발명에 있어서, “귀두자”는 참나무과 식물로 풍류과(Lithocarpus pachylepis A. Camus)라고도 불리며, 인도와 티벳, 신강에서 자생하는데 열매가 3년에 한 번만 열리는 특징이 있고, 양이 적으며 우리나라 상수리나무의 도토리깍지 속에 큰 열매가 들어있는 모습을 하고 있다. 귀두자는 혈액순환 촉진 작용, 혈압을 낮추는 작용, 혈액 정화 작용을 하는 것으로 알려져 있으며, 동맥경화, 성기능 쇠퇴, 여성 빈혈, 고혈압, 관절동통 등을 다스리는 데에 이용된다.

본 발명에 있어서, “나염초”는 콩자개덩굴(Lemmaphyllum microphyllum C. Presl)의 지상부로 량혈(凉血)작용이 있어서 각혈(血), 토혈(吐血), 코피, 소변출혈을 그치게 하고, 청폐(淸肺)작용이 있어서 폐농양(肺膿瘍), 해수(咳嗽) 등에 효능이 있는 약재로 알려져 있다.

본 발명에 있어서, “낙상홍”은 감탕나무과 감탕나무속에 속하는 나무로, 학명은 Ilex serrata var. sieboldii이고, 뿌리, 껍질과 잎을 약용으로 사용하며 열(熱)을 내리고 염증(炎症)을 방지하며 외상(外傷)으로 인한 출혈(出血), 피부궤양에 효능이 있는 약재로 알려져 있다.

본 발명에 있어서, “낭미초”는 수크령(Pennisetum alopecuroides (L.) Sprengel)의 전초를 의미하며, 벼가 한창 여물어 갈 때, 농촌 들녘 길가에서 아주 흔하게 관찰되는 화본형(禾本型) 여러해살이풀이다. 낭미초는 눈을 밝게 하고 散血(산혈)의 효능이 있는 것으로 알려져 있고, 眼目赤痛(안목적통-결막염)을 치료한다.

본 발명에 있어서, “녹리”는 콩배나무(Pyrus calleryana var. fauriei)의 열매로서, 이질과 식물성 약재로 인한 중독에 효과가 있는 것으로 알려져 있다.

본 발명에 있어서, “백룡수”는 박쥐나무과의 갈잎떨기나무 박쥐나무(Alangium platanifolium var. trilobum)의 뿌리로, 풍습(風濕)으로 인해 사지가 아픈 것과 사지마비(四肢麻痺)와 타박상(打撲傷)에 효과가 있는 약재로 알려져 있다.

본 발명에 있어서, “한약재”는 한약으로 사용하기 위해 간단한 선별세척, 절단, 건조, 포장 등 가공 혹은 제조과정을 거친 원료 약재를 의미한다.

본 발명에 있어서, 복합 한약재는 여러 가지 종류의 한약재를 혼합한 것으로서, 귀두자, 나염초, 낙상홍, 낭미초, 녹리, 및 백룡수가 각각 일정한 중량비로 포함될 수 있으며, 상기 복합 한약재에 포함되는 귀두자 : 나염초 : 낙상홍 : 낭미초 : 녹리 : 백룡수의 중량비는 1 : 0.2 내지 5 : 0.2 내지 5 : 0.2 내지 5 : 0.2 내지 5 : 0.2 내지 5, 1 : 0.2 내지 3 : 0.2 내지 3 : 0.2 내지 3 : 0.2 내지 3 : 0.2 내지 3, 1 : 0.2 내지 1 : 0.2 내지 1 : 0.2 내지 1 : 0.2 내지 1 : 0.2 내지 1, 1 : 0.5 내지 1 : 0.5 내지 1 : 0.5 내지 1 : 0.5 내지 1 : 0.5 내지 1, 1 : 1 내지 3 : 1 내지 3 : 1 내지 3 : 1 내지 3 : 1 내지 3, 또는 1 : 1 : 1 : 1 : 1 : 1일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

본 발명의 일 제조예에 따르면 상기 복합 한약재 100 중량%를 기준으로 귀두자, 나염초, 낙상홍, 낭미초, 녹리, 및 백룡수를 각각 0.1 중량% 내지 16 중량%, 0.1 중량% 내지 12 중량%, 0.1 중량% 내지 8 중량%, 0.1 중량% 내지 4 중량%, 0.1 중량% 내지 1 중량%, 1 중량% 내지 16 중량%, 1 중량% 내지 12 중량%, 1 중량% 내지 8 중량%, 1 중량% 내지 4 중량%, 4 중량% 내지 16 중량%, 4 중량% 내지 12 중량%, 4 중량% 내지 8 중량%, 8 중량% 내지 16 중량%, 8 중량% 내지 12 중량%, 또는 12 중량% 내지 16 중량%씩 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

상기 복합 한약재에는 당업계에서 통상적으로 사용되는 한약재 종류가 추가로 더 포함될 수 있으며, 이의 종류 및 중량비에는 제한이 없다.

본 발명에 있어서, “추출물”은 상기 귀두자, 나염초, 낙상홍, 낭미초, 녹리, 및 백룡수를 포함하는 복합 한약재의 추출처리에 의하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다.

본 발명의 상기 귀두자, 나염초, 낙상홍, 낭미초, 녹리, 및 백룡수를 포함하는 복합 한약재의 추출물에 있어서, 상기 복합 한약재를 추출하는 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출 방법의 비제한적인 예로는, 열수 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 환류 추출법 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 수행되거나 2 종 이상의 방법을 병용하여 수행될 수 있다.

본 발명에서 상기 귀두자, 나염초, 낙상홍, 낭미초, 녹리, 및 백룡수를 포함하는 복합 한약재를 추출하는 데에 사용되는 추출 용매의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 천연물로부터 추출물을 추출하는 당업계에 공지된 통상적인 방법에 따라, 즉, 통상적인 온도, 압력의 조건 하에서 통상적인 용매를 사용하여 추출할 수 있다. 예컨대, 본 발명에 있어서 상기 복합 한약재 추출물은 물, C₁내지 C₄의 저급알코올, n-헥산, 에틸아세테이트, 아세톤, 아세토니트릴, 부틸아세테이트, 1,3-부틸렌 글리콜, 메틸렌클로라이드, 및 이들의 혼합용매로 구성된 군으로부터 선택된 하나의 용매로 추출될 수 있으며, 본 발명의 일 실시예에 따르면 에탄올을 용매로 사용하여 추출할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

본 발명에 있어서, 상기 추출용매가 에탄올일 경우, 에탄올의 농도는 10 % 내지 100 %, 10 % 내지 90 %, 10 % 내지 80 %, 10 % 내지 70 %, 10 % 내지 60 %, 10 % 내지 50 %, 10 % 내지 40 %, 20 % 내지 100 %, 20 % 내지 90 %, 20 % 내지 80 %, 20 % 내지 70 %, 20 % 내지 60 %, 20 % 내지 50 %, 20 % 내지 40 %, 또는 30 %일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

상기 제조된 추출물은 이후 여과하거나 농축 또는 건조과정을 수행하여 용매를 제거할 수 있으며, 여과, 농축 및 건조를 모두 수행할 수 있다. 예컨대, 여과는 여과지를 이용하거나 감압여과기를 이용할 수 있으며, 농축은 감압 농축기, 건조는 동결건조법 등을 수행할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명에서 “예방”이란 파킨슨병의 발병을 억제하거나 지연시키는 모든 행위를 의미하고, “치료”란 본 발명에 따른 약학적 조성물의 투여에 의해 파킨슨병과 그에 따른 대사 이상 증세가 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미하며, “개선”이란 본 발명에 따른 조성물의 투여에 의해 파킨슨병과 관련된 파라미터, 예를 들면 증상의 정도를 감소시키는 모든 행위를 의미한다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다. 상기 부형제는 예를 들어, 희석제, 결합제, 붕해제, 활택제, 흡착제, 보습제, 필름-코팅 물질, 및 제어방출첨가제로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상일 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 서방형 과립제, 장용과립제, 액제, 점안제, 엘실릭제, 유제, 현탁액제, 주정제, 트로키제, 방향수제, 리모나아데제, 정제, 서방형정제, 장용정제, 설하정, 경질캅셀제, 연질캅셀제, 서방캅셀제, 장용캅셀제, 환제, 틴크제, 연조엑스제, 건조엑스제, 유동엑스제, 주사제, 캡슐제, 관류액, 경고제, 로션제, 파스타제, 분무제, 흡입제, 패취제, 멸균주사용액, 또는에어로졸 등의 외용제 등의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으며, 상기 외용제는 크림, 젤, 패치, 분무제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 또는 카타플라스마제 등의 제형을 가질 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 올리고당, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.

제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다.

본 발명에 따른 정제, 산제, 과립제, 캡슐제, 환제, 트로키제의 첨가제로 옥수수전분, 감자전분, 밀전분, 유당, 백당, 포도당, 과당, 디-만니톨, 침강탄산칼슘, 합성규산알루미늄, 인산일수소칼슘, 황산칼슘, 염화나트륨, 탄산수소나트륨, 정제 라놀린, 미결정셀룰로오스, 덱스트린, 알긴산나트륨, 메칠셀룰로오스, 카르복시메칠셀룰로오스나트륨, 카올린, 요소, 콜로이드성실리카겔, 히드록시프로필스타치, 히드록시프로필메칠셀룰로오스(HPMC), HPMC 1928, HPMC 2208, HPMC 2906, HPMC 2910, 프로필렌글리콜, 카제인, 젖산칼슘, 프리모젤 등 부형제; 젤라틴, 아라비아고무, 에탄올, 한천가루, 초산프탈산셀룰로오스, 카르복시메칠셀룰로오스, 카르복시메칠셀룰로오스칼슘, 포도당, 정제수, 카제인나트륨, 글리세린, 스테아린산, 카르복시메칠셀룰로오스나트륨, 메칠셀룰로오스나트륨, 메칠셀룰로오스, 미결정셀룰로오스, 덱스트린, 히드록시셀룰로오스, 히드록시프로필스타치, 히드록시메칠셀룰로오스, 정제쉘락, 전분호, 히드록시프로필셀룰로오스, 히드록시프로필메칠셀룰로오스, 폴리비닐알코올, 폴리비닐피롤리돈 등의 결합제가 사용될 수 있으며, 히드록시프로필메칠셀룰로오스, 옥수수전분, 한천가루, 메칠셀룰로오스, 벤토나이트, 히드록시프로필스타치, 카르복시메칠셀룰로오스나트륨, 알긴산나트륨, 카르복시메칠셀룰로오스칼슘, 구연산칼슘, 라우릴황산나트륨, 무수규산, 1-히드록시프로필셀룰로오스, 덱스트란, 이온교환수지, 초산폴리비닐, 포름알데히드처리 카제인 및 젤라틴, 알긴산, 아밀로오스, 구아르고무(Guar gum), 중조, 폴리비닐피롤리돈, 인산칼슘, 겔화전분, 아라비아고무, 아밀로펙틴, 펙틴, 폴리인산나트륨, 에칠셀룰로오스, 백당, 규산마그네슘알루미늄, 디-소르비톨액, 경질무수규산 등 붕해제; 스테아린산칼슘, 스테아린산마그네슘, 스테아린산, 수소화식물유(Hydrogenated vegetable oil), 탈크, 석송자, 카올린, 바셀린, 스테아린산나트륨, 카카오지, 살리실산나트륨, 살리실산마그네슘, 폴리에칠렌글리콜(PEG) 4000, PEG 6000, 유동파라핀, 수소첨가대두유(Lubri wax), 스테아린산알루미늄, 스테아린산아연, 라우릴황산나트륨, 산화마그네슘, 마크로골(Macrogol), 합성규산알루미늄, 무수규산, 고급지방산, 고급알코올, 실리콘유, 파라핀유, 폴리에칠렌글리콜지방산에테르, 전분, 염화나트륨, 초산나트륨, 올레인산나트륨, dl-로이신, 경질무수규산 등의 활택제가 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 액제의 첨가제로는 물, 묽은 염산, 묽은 황산, 구연산나트륨, 모노스테아린산슈크로스류, 폴리옥시에칠렌소르비톨지방산에스텔류(트윈에스텔), 폴리옥시에칠렌모노알킬에텔류, 라놀린에텔류, 라놀린에스텔류, 초산, 염산, 암모니아수, 탄산암모늄, 수산화칼륨, 수산화나트륨, 프롤아민, 폴리비닐피롤리돈, 에칠셀룰로오스, 카르복시메칠셀룰로오스나트륨 등이 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 시럽제에는 백당의 용액, 다른 당류 혹은 감미제 등이 사용될 수 있으며, 필요에 따라 방향제, 착색제, 보존제, 안정제, 현탁화제, 유화제, 점조제 등이 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 유제에는 정제수가 사용될 수 있으며, 필요에 따라 유화제, 보존제, 안정제, 방향제 등이 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 현탁제에는 아카시아, 트라가칸타, 메칠셀룰로오스, 카르복시메칠셀룰로오스, 카르복시메칠셀룰로오스나트륨, 미결정셀룰로오스, 알긴산나트륨, 히드록시프로필메칠셀룰로오스(HPMC), HPMC 1828, HPMC 2906, HPMC 2910 등 현탁화제가 사용될 수 있으며, 필요에 따라 계면활성제, 보존제, 안정제, 착색제, 방향제가 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 주사제에는 주사용 증류수, 0.9% 염화나트륨주사액, 링겔주사액, 덱스트로스주사액, 덱스트로스+염화나트륨주사액, 피이지(PEG), 락테이티드 링겔주사액, 에탄올, 프로필렌글리콜, 비휘발성유-참기름, 면실유, 낙화생유, 콩기름, 옥수수기름, 올레인산에칠, 미리스트산 이소프로필, 안식향산벤젠과 같은 용제; 안식향산나트륨, 살리실산나트륨, 초산나트륨, 요소, 우레탄, 모노에칠아세트아마이드, 부타졸리딘, 프로필렌글리콜, 트윈류, 니정틴산아미드, 헥사민, 디메칠아세트아마이드와 같은 용해보조제; 약산 및 그 염(초산과 초산나트륨), 약염기 및 그 염(암모니아 및 초산암모니움), 유기화합물, 단백질, 알부민, 펩 톤, 검류와 같은 완충제; 염화나트륨과 같은 등장화제; 중아황산나트륨(NaHSO₃) 이산화탄소가스, 메타중아황산나트륨(Na₂S₂O₅), 아황산나트륨(Na₂SO₃), 질소가스(N₂), 에칠렌디아민테트라초산과 같은 안정제; 소디움비설파이드 0.1%, 소디움포름알데히드 설폭실레이트, 치오우레아, 에칠렌디아민테트라초산디나트륨, 아세톤소디움비설파이트와 같은 황산화제; 벤질알코올, 클로로부탄올, 염산프로카인, 포도당, 글루콘산칼슘과 같은 무통화제; 시엠시나트륨, 알긴산나트륨, 트윈 80, 모노스테아린산알루미늄과 같은 현탁화제를 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 좌제에는 카카오지, 라놀린, 위텝솔, 폴리에틸렌글리콜, 글리세로젤라틴, 메칠셀룰로오스, 카르복시메칠셀룰로오스, 스테아린산과 올레인산의 혼합물, 수바날(Subanal), 면실유, 낙화생유, 야자유, 카카오버터+콜레스테롤, 레시틴, 라네트왁스, 모노스테아린산글리세롤, 트윈 또는 스판, 임하우젠(Imhausen), 모놀렌(모노스테아린산프로필렌글리콜), 글리세린, 아뎁스솔리두스(Adeps solidus), 부티룸 태고-G(Buytyrum Tego-G), 세베스파마 16(Cebes Pharma 16), 헥사라이드베이스 95, 코토마(Cotomar), 히드록코테 SP, S-70-XXA, S-70-XX75(S-70-XX95), 히드록코테(Hydrokote) 25, 히드록코테 711, 이드로포스탈(Idropostal), 마사에스트라리움(Massa estrarium, A, AS, B, C, D, E, I, T), 마사-MF, 마수폴, 마수폴-15, 네오수포스탈-엔, 파라마운드-B, 수포시로(OSI, OSIX, A, B, C, D, H, L), 좌제기제 IV 타입(AB, B, A, BC, BBG, E, BGF, C, D, 299), 수포스탈(N, Es), 웨코비(W, R, S, M ,Fs), 테제스터 트리글리세라이드 기제(TG-95, MA, 57)와 같은 기제가 사용될 수 있다.

경구 투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다.

경구 투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에 있어서, "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효용량 수준은 환자 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 본 발명이 속하는 기술분야에 통상의 기술자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 개체에게 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구 복용, 피하 주사, 복강 투여, 정맥 주사, 근육 주사, 척수 주위 공간(경막내) 주사, 설하 투여, 볼점막 투여, 직장 내 삽입, 질 내 삽입, 안구 투여, 귀 투여, 비강 투여, 흡입, 입 또는 코를 통한 분무, 피부 투여, 경피 투여 등에 따라 투여될 수 있으며, 본 발명의 일 실시예 또는 실험예에 따르면 경구 투여 또는 복강 투여로 투여될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

본 발명의 약학적 조성물은 치료할 질환, 투여 경로, 환자의 연령, 성별, 체중 및 질환의 중등도 등의 여러 관련 인자와 함께 활성성분인 약물의 종류에 따라 결정된다.

본 발명의 약학적 조성물에 있어서, 상기 귀두자, 나염초, 낙상홍, 낭미초, 녹리, 및 백룡수를 포함하는 복합 한약재의 추출물은 개체의 체중에 대하여 하루에 10 mg/kg 내지 500 mg/kg, 10 mg/kg 내지 400 mg/kg, 10 mg/kg 내지 300 mg/kg, 10 mg/kg 내지 200 mg/kg, 10 mg/kg 내지 100 mg/kg, 50 mg/kg 내지 100 mg/kg, 50 mg/kg 내지 150 mg/kg, 50 mg/kg 내지 200 mg/kg, 50 mg/kg 내지 300 mg/kg, 100 mg/kg 내지 300 mg/kg, 100 mg/kg 내지 200 mg/kg, 150 mg/kg 내지 200 mg/kg, 150 mg/kg 내지 250 mg/kg, 150 mg/kg 내지 300 mg/kg, 200 mg/kg 내지 300 mg/kg, 250 mg/kg 내지 300 mg/kg, 또는 250 mg/kg 내지 350 mg/kg의 용량으로 경구 투여될 수 있으며, 상기와 같은 함량으로 이용함으로써, 조성물의 독성을 최대한 줄이면서 파킨슨병의 예방 또는 치료 효과를 증대시킬 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

본 발명에 있어서 “개체”란 질병의 치료를 필요로 하는 대상을 의미하고, 보다 구체적으로는 인간 또는 비-인간인 영장류, 생쥐 (mouse), 쥐 (rat), 개, 고양이, 말, 및 소 등의 포유류를 의미한다.

본 발명에 있어서 “투여”란 임의의 적절한 방법으로 개체에게 소정의 본 발명의 조성물을 제공하는 것을 의미한다.

본 발명의 다른 양태로서, 본 발명은 귀두자, 나염초, 낙상홍, 낭미초, 녹리, 및 백룡수를 포함하는 복합 한약재의 추출물을 유효성분으로 포함하는, 파킨슨병 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.

본 발명에 있어서, 상기 식품 조성물은 건강기능식품 조성물일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

상기 복합 한약재 추출물을 식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 복합 한약재 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효성분의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시 본 발명의 복합 한약재 추출물은 원료에 대하여 15 중량% 이하, 또는 10 중량% 이하의 양으로 첨가될 수 있다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.

상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함한다.

본 발명에 따른 건강음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당 및 과당과 같은 모노사카라이드, 말토오스 및 수크로오스와 같은 디사카라이드, 덱스트린 및 시클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 및 자일리톨, 소르비톨 및 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 mL당 일반적으로 약 0.01-0.20 g, 또는 약 0.04-0.10 g 이다.

상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0.01-0.20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.

본 발명의 또 다른 양태로서, 본 발명은 (a) 귀두자, 나염초, 낙상홍, 낭미초, 녹리, 및 백룡수를 포함하는 복합 한약재를 혼합하는 단계; 및

본 발명에 있어서, 상기 (b) 단계에서 추출은 10 ℃ 내지 40 ℃, 10 ℃ 내지 35 ℃, 10 ℃ 내지 30 ℃, 10 ℃ 내지 27 ℃, 15 ℃ 내지 40 ℃, 15 ℃ 내지 35 ℃, 15 ℃ 내지 30 ℃, 15 ℃ 내지 27 ℃, 20 ℃ 내지 40 ℃, 20 ℃ 내지 35 ℃, 20 ℃ 내지 30 ℃, 20 ℃ 내지 27 ℃, 또는 상온(25 ℃)의 온도에서 60 시간 내지 84 시간, 60 시간 내지 80 시간, 60 시간 내지 76 시간, 64 시간 내지 84 시간, 64 시간 내지 80 시간, 64 시간 내지 76 시간, 70 시간 내지 84 시간, 70 시간 내지 80 시간, 70 시간 내지 76 시간, 또는 72 시간 동안 가열하여 추출할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 상기 추출온도가 10 ℃ 미만일 경우 추출시간이 지연되어 효율이 떨어지거나, 한약재의 추출이 제대로 이루어지지 않을 수 있는 문제점이 있으며, 상기 추출온도가 40 ℃를 초과할 경우에는 고온으로 인하여 약재성분에 변형이 생길 수 있는 문제점이 있다. 또한, 상기 추출시간이 60 시간 미만일 경우 한약재의 추출이 제대로 이루어지지 못하여 추출물의 약학적 기능이 저하될 수 있는 문제점이 발생할 수 있으며, 상기 추출시간이 84 시간을 초과할 경우에는 시간대비 얻을 수 있는 추출액의 양이 떨어져 비효율적인 단점이 있다.

본 발명에 있어서, 상기 복합 한약재 추출물의 제조방법은 상기 (a) 단계 이전에 각각의 한약재를 전처리하는 단계를 더 포함할 수 있다.

상기 전처리하는 단계는 귀두자, 나염초, 낙상홍, 낭미초, 녹리, 및 백룡수를 회전식 볶음장치에서 볶아서 수행하는 단계를 포함할 수 있으며, 상기 회전식 볶음장치에 넣기 전에 건조한 후 분쇄하는 단계를 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 상기와 같이 전처리하는 경우, 한약재의 떫은 맛과 진한 향을 완화시켜 복합 한약재 추출물 섭취시의 거부감을 줄일 수 있다.

한편, 본 발명에서 “포함하는” 이라는 용어가 사용될 때, 이는 다른 요소 또는 단계를 배제시키지 않는다.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예 및 실험예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예 및 실험예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 하기 실시예 및 실험예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.

[제조예]

본 발명의 복합 한약재 추출물은 귀두자, 나염초, 낙상홍, 낭미초, 녹리, 및 백룡수를 동량으로(1 : 1 : 1 : 1 : 1 : 1의 중량비로) 혼합하고, 30 % 에탄올로 상온(25 ℃)에서 72 시간 동안 추출하여 제조하였다.

[실시예]

본 발명에 따른 복합 한약재 추출물의 파킨슨병에 대한 치료 효과를 확인하기 위해, 행동실험에 많이 이용되는 실험동물 종으로서 풍부한 기초자료가 축적되어 시험결과의 해석에 이용할 수 있는 ICR 마우스를 오리엔트로부터 공급받아 사용하였다.

마우스는 입수 시 5주령의 수컷 마우스 42마리의 외관을 육안으로 검사한 후 시험을 실시하는 동시에 7일간 순화하면서 일반증상을 관찰하였으며, 시험물질은 마우스가 6주령일 때 투여를 개시하였다.

마우스의 사육 조건은 다음과 같다:

1) 온습도 범위: 온도 22 ± 1℃, 상대습도 55 ± 5%

2) 환기횟수: 10-20회/시간 (전외기 공조방식)

3) 명암 주기: 형광등조명 12 시간/일 (08:00 점등~ 20:00 소등)

4) 조도: 150~300 Lux

5) 사육상자의 크기: 폴리카보네이트 사육상자(170W x 235L x 125H mm)에 동물을 수용하여 사육한다.

6) 사육상자 당 동물 수: 검역기간 투여기간 동안 4마리 이하씩 사육하였다.

7) 물: 음용 멸균수

8) 사료

-종류: 실험동물용 고형사료

-생산지: ㈜ 수퍼 퍼드

-공급원: 중앙 실험 동물

-급여 방법: 자유섭취

본 발명에 따른 복합 한약재 추출물의 투여용량은 선행 연구를 바탕으로 정하였으며, 시험군의 구성은 하기 표 1과 같다.

	군	성별	동물수	동물번호	투여액량	투여방법	투여량
			(마리)		ml/kg/day		mg/kg/day
실시예 1	복합 한약재 추출물 100 + MPTP	Male	7	15~21	10	경구	100(복합한약재 추출물) + 30(MPTP)
실시예 2	복합 한약재 추출물 200 + MPTP	Male	7	22~28	10	경구	200(복합 한약재 추출물) + 30(MPTP)
실시예 3	복합 한약재 추출물 300 + MPTP	Male	7	29~35	10	경구	300(복합 한약재 추출물) + 30(MPTP)
비교예 1	Normal	Male	7	1~7	10	경구	0
비교예 2	MPTP	Male	7	8~14	10	경구	30
비교예 3	L-dopa + MPTP	Male	7	36~42	10	복강	10(L-dopa) + 30(MPTP)

실시예 1

제조예에서 제조된 복합 한약재 추출물 100 + MPTP군으로서, 복합 한약재 추출물 100 mg/kg/day 15일 + MPTP 30 mg/kg/day 5일 투여군

실시예 2

제조예에서 제조된 복합 한약재 추출물 200 + MPTP군으로서, 복합 한약재 추출물 200 mg/kg/day 15일 + MPTP 30 mg/kg/day 5일 투여군

실시예 3

제조예에서 제조된 복합 한약재 추출물 300 + MPTP군으로서, 복합 한약재 추출물 300 mg/kg/day 15일 + MPTP 30 mg/kg/day 5일 투여군

비교예 1

정상군(Normal)으로서, MPTP 미투여군. Saline만 15일 투여군

비교예 2

MPTP(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine)군으로서, MPTP 30 mg/kg/day 5일 투여군

비교예 3

L-dopa + MPTP군으로서, L-dopa 10 mg/kg/day 15일 + MPTP 30 mg/kg/day 5일 투여군

입수 후 순위화한 체중을 바탕으로 군간 체중이 고르게 분포하도록 각 군당 7마리씩 군 분리를 실시하였으며, 개체식별을 위하여 사육상자에 개체별 카드를 부착하고, 동물의 꼬리에 유성 매직을 이용하여 동물 번호를 표시하였다.

[실험예]

실험예 1. 복합 한약재 추출물을 이용한 세포 독성 실험

본 발명의 일 실시예에 따른 복합 한약재 추출물을 대상으로 하기와 같이 사람 신경모세포종 SH-SY5Y 세포주에 대한 독성검사를 수행하였으며, 일반적인 MTT assay 방법을 이용하여 SH-SY5Y 세포의 생존률을 측정하였다.

그 결과, 도 1에 나타낸 바와 같이, SH-SY5Y 세포에서 본 발명의 복합 한약재 추출물은 400 μg/ml의 농도에서도 독성을 나타내지 않았다.

한편, 6-hydroxydopamine (6-OHDA), 1-metyyl-4-phenyl-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP) 와 rotenone은 현재까지 많이 알려져 있는 체내외에서의 파킨슨 모델을 제작하는 3가지 신경독성 물질들이다. 6-OHDA는 도파민 운반체(DAT)에 흡수되여 자유 라디칼을 생성하여 세포 독성을 통해 도파민 신경 세포에 손상을 주게 되어, 파킨슨병과 유사한 특징적인 소견들을 유발하게 된다.

이에, SH-SY5Y 세포에서 본 발명의 복합 한약재 추출물을 농도별로 처리하였을 때 6-OHDA(6-hydroxydopamine)에 의해 유도된 세포독성에 대한 보호 효과를 확인한 결과, 도 2에 나타낸 바와 같이 6-OHDA만을 투여한 음성 대조군과 무처리군에 비교하여 통계적으로 유의한 세포생존율이 관찰되었다.

구체적으로, 6-OHDA를 100 μM의 농도와 복합 한약재 추출물 10, 20, 50, 100, 200, 400 μg/mL의 농도로 24 시간 동안 처리한 결과, 세포 생존력이 대조값(75.39 %)과 비교했을 때 농도별로 각각 77.90 %, 80.93 %, 83.50 %(P<0.05), 85.70 %(P<0.01), 80.00 %, 74.96 %로 대조값보다 증가하는 것을 확인하였다.

이에, 본 발명에 따른 복합 한약재 추출물이 SH-SY5Y 세포에서 6-OHDA 독성에 대해 강한 보호 효과를 가지고 있음을 확인하였으며, 이를 통해 복합 한약재 추출물이 SH-SY5Y 세포에서 6-OHDA에 의해 유도된 세포사멸에 대한 보호 효능을 가져 신경세포를 보호하는 것을 알 수 있었다.

실험예 2. 복합 한약재 추출물을 이용한 파킨슨병 동물 모델에 대한 관찰 및 행동실험

먼저, 시험물질로 상기 제조예에서 제조한 복합 한약재 추출물을 칭량하여 멸균증류수와 섞은 후 볼텍스 믹서를 사용하여 균질하게 혼합함으로써 투여할 시험물질을 제조하였다. 낮은 용량군의 경우에는 최고 용량군을 단계별로 희석하여 조제하였다.

그리고, 파킨슨병 유발물질로서 MPTP를 마우스의 복강에 1ml 주사기를 사용하여 주사하였으며, Saline에 10 mg/ml의 농도로 MPTP를 녹여 제조하여 5일 동안 냉동 보관 후, 마우스 체중에 따라 하루에 30 mg/kg씩 5일간 투여하였다.

그런 다음, 시험물질은 농도를 정확하게 투여할 수 있는 경구투여 및 복강투여를 통해 1일 1회 단회로 15일 동안 투여하였다.

일반 증상 관찰

모든 동물에 대하여 실험기간 동안 1일 1회 이상 증상을 관찰하였다.

체중 측정

모든 동물에 대하여 실험 개시일부터 3~4일에 1회씩 체중을 측정하였으며, 그 결과를 도 3에 나타내었다.

도 3에 나타낸 바와 같이, MPTP로 유도된 파킨슨병 동물 모델에서 복합 한약재 추출물의 투여에 의한 체중 증감은 유의성이 없는 것을 확인하였다.

Pole test

Pole test는 마우스의 머리를 위로 향하게 한 후 표면을 수직의 pole(직경: 8mm, 높이: 55cm) 끝에 두고 마우스가 바닥까지 내려오는 시간을 측정하는 것이다(로코모터 활성 시간(locomotor activity time): 최대 60초). 만약에 마우스가 머리 방향을 아래로 향해 돌리지 못하거나 pole에서 떨어질 경우는 로코모터 활성 시간을 60초(default value)로 인정하였다. Pole test의 결과는 도 4 및 도 5에 나타내었다.

도 4에 나타낸 바와 같이, pole test에서 비교예 1(정상군), 실시예 1 내지 3(각각 복합 한약재 추출물 100, 200, 300 mg/kg/day + MPTP 30 mg/kg/day) 및 비교예 3(L-dopa 10 mg/kg/day + MPTP 30 mg/kg/day 투여군)의 투여 시 마우스의 머리 돌리는 시간은 비교예 1에서 1.63초(P<0.05), 실시예 1에서 2.05초(P<0.05), 실시예 2에서 1.82초(P<0.05), 실시예 3에서 2.0초(P<0.05), 비교예 3에서 1.88초(P<0.05)였으며, 음성대조군인 비교예 2에서 3.17초인 것에 비하여 통계적으로 유의한 것을 확인하였다.

또한, 도 5에 나타낸 바와 같이, 비교예 1, 실시예 1 내지 3 및 비교예 3의 투여 시 마우스가 머리를 돌린 후 수직으로 내려오는 시간은 비교예 1에서 7.22초(P<0.001), 실시예 1에서 10.16초(P<0.05), 실시예 2에서 8.86초(P<0.01), 실시예 3에서 10.74초(P<0.05), 비교예 3에서 9.96초(P<0.05)였으며, 음성대조군에서 13.02초인 것에 비하여 통계적으로 유의한 것을 확인하였다.

Rota rod test

Rota rod 장비(MED associates Inc)를 사용하여 Rota rod test를 실시하였다. MPTP를 5일 투여하고 시험물질로서 본 발명에 따른 복합 한약재 추출물을 15일 투여한 다음, 실험동물을 Rota rod 장비 위에 올려놓고 처음에는 4 rpm 속도에 적응시킨 후, 가속도 테스트(acceleration speed test)로 4-35 rpm으로 서서히 증가시키면서 동물이 원통에서 떨어지는 시간을 측정하였으며, 그 결과는 도 6에 나타내었다.

도 6에 나타낸 바와 같이, Rota rod test에서 비교예 1(정상군), 실시예 1 내지 3(각각 복합 한약재 추출물 100, 200, 300 mg/kg/day + MPTP 30 mg/kg/day) 및 비교예 3(L-dopa 10 mg/kg/day + MPTP 30 mg/kg/day 투여군) 투여 시 원통에서 떨어지는 시간은 비교예 1에서 399.0초(P<0.01), 실시예 1에서 355.42초(P<0.05), 실시예 2에서 388.28초(P<0.01), 실시예 3에서 346.85초(P<0.05), 비교예 3에서 376.71초(P<0.05)였으며, 음성대조군인 비교예 2에서 270.42초인 것에 비하여 통계적으로 유의한 결과를 얻음으로써 운동 회복 능력이 강화되는 것을 확인하였다.

이러한 결과를 통해 MPTP로 유도된 파킨슨병 동물 모델에서 복합 한약재 추출물 투여(100, 200, 300 mg/kg/day)에 의하여 운동 능력이 유의하게 강화되는 것을 확인하였는 바, 본 발명에 따른 복합 한약재 추출물이 파킨슨병에 대해 치료 효능이 있음을 알 수 있었다.

실험예 3. 통계 처리

얻은 자료에 대한 대조군과 시험물질 투여군 간의 비교는 ANOVA One Way test (Dummett test)를 사용하여 군 간의 차이를 검정하였다. 유의성의 인정은 p<0.05로 하며 일반적으로 사용하는 통계 package인 SPSS 23.0을 이용하였다.

전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야 한다.

Claims

귀두자, 나염초, 낙상홍, 낭미초, 녹리, 및 백룡수를 포함하는 복합 한약재의 추출물을 유효성분으로 포함하는, 파킨슨병 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제1항에 있어서,
상기 복합 한약재의 추출물은 신경 세포를 보호하는 것을 특징으로 하는, 파킨슨병 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제1항에 있어서,
상기 복합 한약재의 추출물은 운동 회복 능력을 강화시키는 것을 특징으로 하는, 파킨슨병 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제1항에 있어서,
상기 복합 한약재의 추출물은 개체의 체중에 대하여 하루에 10 mg/kg 내지 500 mg/kg의 용량으로 투여되는 것을 특징으로 하는, 파킨슨병 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제4항에 있어서,
상기 투여는 경구 투여 또는 복강 투여인 것을 특징으로 하는, 파킨슨병 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제1항에 있어서,
상기 추출물은 물, C₁내지 C₄의 저급알코올, n-헥산, 에틸아세테이트, 아세톤, 아세토니트릴, 부틸아세테이트, 1,3-부틸렌 글리콜, 메틸렌클로라이드, 및 이들의 혼합용매로 구성된 군으로부터 선택된 하나의 용매로 추출되는 것을 특징으로 하는, 파킨슨병 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
귀두자, 나염초, 낙상홍, 낭미초, 녹리, 및 백룡수를 포함하는 복합 한약재의 추출물을 유효성분으로 포함하는, 파킨슨병 예방 또는 개선용 식품 조성물.
(a) 귀두자, 나염초, 낙상홍, 낭미초, 녹리, 및 백룡수를 포함하는 복합 한약재를 혼합하는 단계; 및
(b) 상기 혼합된 복합 한약재에 추출용매를 첨가하여 복합 한약재 추출물을 추출하는 단계를 포함하는, 복합 한약재 추출물의 제조방법으로서,
상기 복합 한약재 추출물은 파킨슨병 예방 또는 치료 활성을 가지는 것을 특징으로 하는, 제조방법.
제8항에 있어서,
상기 (b) 단계에서 추출은 10 ℃ 내지 40 ℃에서 60 시간 내지 84 시간 동안 이루어지는 것을 특징으로 하는, 복합 한약재 추출물의 제조방법.