KR20210094574A - 포도 추출물과 블루베리 추출물의 특정 혼합물을 포함하는 조성물의 단일 용량 용도 - Google Patents

포도 추출물과 블루베리 추출물의 특정 혼합물을 포함하는 조성물의 단일 용량 용도 Download PDF

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Abstract

본 발명은 비티스 비니훼라 및 바키니움 안구스티폴리움으로부터 얻은 분자의 적어도 하나의 혼합물을 포함하는 조성물의 용도에 관한 것으로서, 상기 혼합물은 인지 기능을 개선시키거나 유지하기 위해 인간 또는 동물에서 단일 용량으로서 다음을 포함한다: - 적어도 1%의 카테킨 및/또는 에피카테킨(백분율은 혼합물의 총 중량에 대한 중량으로 주어짐), - 적어도 5 ppm(혼합물의 백만분율)의 페룰산, 및 - 적어도 200 ppm의 레스베라트롤.

Description

포도 추출물과 블루베리 추출물의 특정 혼합물을 포함하는 조성물의 단일 용량 용도
본 발명은 인간 및 동물에서 인지 기능에 대한 신속하고 즉각적인 효과를 위한 특정 분자 혼합물의 단일-용량 용도에 관한 것이다.
점점 더 많은 건강한 성인, 특히 대학생은 인지 수행을 개선시키는 해결책을 찾고 있다. 이러한 탐구는 각성제(pharmaceutical stimulant)의 부적절하고 때로는 위험한 사용의 증가로 이어진다. 추가적으로, 수 주 동안 지속되는 장기 투약의 맥락에서 사용하기 위한 기존 시판 영양상의 해결책은 제한적이고 비용이 많이 드는 것으로 보일 수 있다.
따라서, 특히 단일 투약 후 효과적인 식품 보충제의 형태로 인지 수행을 개선시키는 안전하고 비의약적이며, 천연의 비-제한적인 해결책에 대한 공중 보건 관심으로부터 생긴 필요성이 존재한다. 또한 용량이 소량의 천연 활성 성분에 따르고 원하는 효과 직전에, 예를 들어 검사 유형의 테스트 직전에 복용하는 단일 용량인 것도 중요하다.
이러한 필요성을 충족시키는 것이 본 발명의 목적이다. 이를 위해, 본 발명은 비티스 비니훼라(Vitis vinifera; 흑자색 포도) 및 바키니움 안구스티폴리움(Vaccinium angustifolium; 로우스위트블루베리)으로부터 얻은 분자의 혼합물을 포함하는 조성물의 용도에 관한 것이다.
비티스 비니훼라 및 바키니움 안구스티폴리움으로부터 얻은, 특히 플라보노이드가 풍부한 분자의 혼합물은 특히 출원 FR1560263에서 이미 알려져 있으며, 상기 출원은 장기 섭취 동안 인간의 인지 기능에 대한 상기 혼합물의 효과를 기재한다. 유사하게, 플라보노이드가 풍부한 포도 및 블루베리/빌베리 추출물의 기여는 마우스, 개에서 수 주 동안, 그리고 인간에서 수 개월 동안 장기로 투여될 때 기억에 대한 효능을 나타내었다.
그러나, 플라보노이드는 장기적으로 복용할 때 인지에 대하여 관심이 있는 것일 수 있지만, 단일 용량으로 복용될 때 플라보노이드는 반드시 효과를 나타내는 것이 아니며, 플라보노이드 활성은 고려되는 플라보노이드의 유형에 따라서, 그리고 용량(종종 매우 많음) 및 관련된 인간의 연령에 따라서 매우 변동적이다. 따라서, 단기 투여(단일 용량)에서 코코아 음료로 수행된 2가지 임상 연구는 고용량의 코코아 플라바놀(520, 773 및 994㎎)의 유익한 효과를 나타낸 반면, 46㎎의 플라바놀을 제공한 대조군은 효과를 나타내지 않았다(Field DT, Williams CM, Butler LT. Consumption of cocoa flavanols results in an acute improvement in visual and cognitive functions. Physiol Behav. 2011 Jun 1;103(3-4):255-60; Scholey AB, French SJ, Morris PJ, Kennedy DO, Milne AL, Haskell CF. Consumption of cocoa flavanols results in acute improvements in mood and cognitive performance during sustained mental effort. J Psychopharmacol. 2010 Oct;24(10):1505-14).
또한 코코아 플라보노이드의 단기 섭취와 관련된 파세(Pase)외 다수에 의한 또 다른 연구(Pase MP, Scholey AB, Pipingas A, Kras M, Nolidin K, Gibbs A, Wesnes K, Stough C. Cocoa polyphenols enhance positive mood states but not cognitive performance: a randomized, placebo-controlled trial. J Psychopharmacol. 2013 May;27(5):451-8)는 인지 기능에서 개선을 나타내지 않는다. 마찬가지로, 2012년 와이트먼(Wightman) 외 다수(Wightman EL, Haskell CF, Forster JS, Veasey RC, Kennedy DO. Epigallocatechin gallate, cerebral blood flow parameters, cognitive performance and mood in healthy humans: a double-blind, placebo-controlled, crossover investigation. Hum Psychopharmacol. 2012 Mar;27(2):177-86)는 135㎎ 및 270㎎의 플라보노이드의 용량에서 단기 녹차 추출물 섭취의 인지에 대한 효과를 연구하였으며, 어떠한 중요한 결과도 보고되지 않았다. 마지막으로, 2가지 무작위 대조(위약) 이중맹검 연구인, 헨릭슨(Henrickson) 및 마테스(Mattes)(Hendrickson SJ, Mattes RD. No acute effects of grape juice on appetite, implicit memory and mood. Food Nutr Res. 2008;52) 및 하스켈 램지(Haskell Ramsay)외 다수(Haskell-Ramsay CF, Stuart RC, Okello EJ, Watson AW. Cognitive and mood improvements following acute supplementation with purple grape juice in healthy young adults. Eur J Nutr. 2017 Dec;56(8):2621-2631)는 포도 주스(비티스 라브루스카(Vitis Labrusca)) 섭취가 각각 평균 21세 및 26세의 청년에서 인지(일화적 기억, 작업 기억, 주의력)에 미치는 급성 효과를 연구하였다. 첫 번째 연구에서는 138㎎의 안토시아닌과 1504㎎의 폴리페놀을 제공하는 230㎖의 포도 주스를 섭취한 반면, 두 번째 연구에서는 580㎎의 안토시아닌과 2100㎎의 폴리페놀을 포함하는 600㎖의 포도 주스를 각각의 지원자에게 공급하였다. 이들 연구 둘 다 기억에 미치는 어떠한 효과를 보여주지 못했다.
또한, 장기 섭취시 인지에 대하여 효과를 나타내는 조성물이 또한 단일 용량으로 인지 수행에 대해 효과를 나타내는 것은 매우 놀라운 것이다. 이는 특히 비티스 비니훼라 및 바키니움 안구스티폴리움으로부터 얻은 분자의 적어도 하나의 혼합물을 포함하는 조성물의 사용을 목표로 하는 본 발명의 목적이며, 상기 혼합물은 인지 기능을 개선시키거나 유지하기 위해 건강한 인간 또는 건강한 동물에서 단일 용량으로서 다음을 포함한다:
- 적어도 1%의 카테킨 및/또는 에피카테킨(백분율은 혼합물의 총 중량에 대한 중량으로 주어짐),
- 적어도 5 ppm(혼합물의 백만분율)의 페룰산, 및
- 적어도 200 ppm의 레스베라트롤.
유리하게는, 이와 같은 조성물의 단일 용량은 저용량 및 천연 제품으로 5시간 미만 내에 신속하게 인지 수행의 유지 또는 개선을 얻을 수 있게 한다.
다른 특징 및 이점은 첨부된 도면을 참조하여, 다음의 본 발명의 상세한 설명으로부터 나타날 것이다:
- 도 1은 본 발명에 따른 효과를 평가하기 위해 수행한 임상 연구의 계획을 나타내는 도면.
- 도 2는 처리별로 그룹화하여(P: 위약, V: 베룸(Verum)), 배터리 반복(B2 내지 B6) 동안 B1과 비교하여 성능의 변화를 예시하는 그래프. 마이너스 3 뺄셈 테스트에 대한 "순" 점수(정답-오답)의 변화는 A에 도시되어 있다. 이러한 동일한 테스트에 있어서, 정반응의 % 변동(B) 및 블록당 반응 수(C)가 도시되어 있다. 신속한 시각 정보 처리 테스트에 대한 정반응 결과는 D에 도시되어 있다. p-값은 대응표본 t-검정의 것이다. 수직 막대는 표준 편차를 나타낸다.
-도 3은 STS + SSS + RVIP 테스트에 대한 정답의 종합 Z-점수를 예시하는 그래프, 즉 처리별로 그룹화하고(위약, 본 발명) B1과 비교하여 누적 정답 수의 백분율 변동을 나타내는 데이터(A). 배터리 분석을 대응표본 t-검정으로 수행하였다. 수직 막대는 표준 편차를 나타낸다. 처리(위약, 본 발명) 내의 변화를 다중 비교에 의해 평가하며 결과는 표 B에서 확인된다.
- 도 4는 흐름(허혈 60초 후)에 의해 매개되는 상완 동맥의 확장 피크에 대한 치료 효과의 결과를 나타내는 도면. 대응표본 t-검정 위약 대 본 발명, 차이 없음.
정의
본 발명의 의미 내에서, "동물"은 본 발명에 따른 조성물을 수용할 수 있는 임의의 동물, 예를 들어 비제한적으로 애완동물, 가금류, 돼지, 반추동물, 염소, 또는 심지어 마우스를 의미한다.
본 발명의 의미 내에서, "안토시아니딘"은 어글리콘 또는 글리코실화 형태(즉, 당을 보유함)의 안토시안, 안토시아닌 또는 안토시아노사이드를 모두 의미한다. 따라서, 본 출원 및 본 발명의 의미 내에서, 용어 "안토시아니딘", "안토시안", "안토시아닌" 및 "안토시아노사이드"는 동등하다.
본 발명의 의미 내에서, "적어도 X%의 카테킨 및/또는 에피카테킨"은 혼합물에 에피카테킨이 없으면 적어도 X%의 카테킨을 의미하거나, 혼합물에 카테킨이 없으면 적어도 X%의 에피카테킨을 의미하거나, 혼합물에 카테킨과 에피카테킨이 둘 다 존재하면 적어도 X%의 카테킨과 에피카테킨의 혼합물을 의미한다. 바람직하게는, 이는 적어도 X%의 카테킨과 에피카테킨의 혼합물을 의미한다.
본 발명의 의미 내에서, "바키니움 안구스티폴리움의 추출물"은 바키니움 안구스티폴리움으로부터 얻은 적어도 하나의 분자, 바람직하게는 분자 집합을 의미한다. 원료는 잎 및/또는 열매일 수 있고; 바람직하게는 원료는 식물의 모든 잎과 열매이다.
본 발명의 의미 내에서, "비티스 비니훼라 추출물"은 비티스 비니훼라로부터 얻은 적어도 하나의 분자, 바람직하게는 분자 집합을 의미한다. 원료는 잎 및/또는 열매 및/또는 종자 및/또는 껍질(skin), 목질부(xylem)일 수 있고; 바람직하게는 원료는 식물의 지상부, 즉 모든 잎, 열매, 껍질(즉, 껍질), 종자 및 목질부, 더욱더 바람직하게는 껍질(껍질) 및 종자이다. 레스베라트롤이 풍부할 수 있는 껍질, 및 플라바놀 단량체, 프로시아니딘 올리고머 및 프로안토시아니딘이 풍부할 수 있는 종자의 조합은 본 발명에 특히 유리할 수 있다.
본 발명의 의미 내에서, "비티스 비니훼라 및 바키니움 안구스티폴리움의 혼합물로부터 얻은 추출물"은 비티스 비니훼라 및 바키니움 안구스티폴리움의 혼합물로부터 얻은 분자 집합을 의미한다. 비티스 비니훼라의 원료는 잎 및/또는 열매 및/또는 종자 및/또는 목질부일 수 있고; 바람직하게는 비티스 비니훼라의 원료는 식물의 지상부, 즉 모든 잎, 열매, 껍질(껍질), 종자 및 목질부, 더 바람직하게는 껍질(껍질) 및 종자이다. 바키니움 안구스티폴리움의 원료는 잎 및/또는 열매일 수 있고; 바람직하게는 바키니움 안구스티폴리움의 원료는 식물의 모든 잎 및 열매이다.
본 발명의 의미 내에서, 용어 "플라바놀 중합체"는 10 초과의 중합도를 나타내는 플라바놀을 의미한다.
본 발명의 의미 내에서, 용어 "ppm"은 혼합물에서 백만분율(㎎/㎏)을 의미한다. 달리 나타내지 않는 한, ppm은 혼합물의 총 중량에 대한 중량을 말한다.
본 발명의 의미 내에서, "단일 용량"은 한 번에 복용되는 하나 이상의 섭취 단위의 섭취를 의미한다.
본 발명의 의미 내에서, "건강한"은 병리, 특히 신경 병리에 의해 영향을 받지 않지만, 비-병리 상태인 피곤하고/거나 스트레스를 받을 수 있는 인간 또는 동물을 의미한다.
발명의 상세한 설명
따라서, 본 발명은 비티스 비니훼라 및 바키니움 안구스티폴리움으로부터 얻은 분자의 적어도 하나의 혼합물을 포함하는 조성물의 용도에 관한 것으로서, 상기 혼합물은 인지 기능을 개선시키거나 유지하기 위해 건강한 인간 또는 건강한 동물에서 단일 용량으로서,
- 적어도 1%, 바람직하게는 적어도 5%, 더욱더 바람직하게는 5% 내지 50%, 특히 7% 내지 35%의 카테킨 및/또는 에피카테킨(백분율은 혼합물의 총 중량에 대한 중량으로 주어짐),
- 적어도 5 ppm, 바람직하게는 적어도 10 ppm, 더욱더 바람직하게는 5 ppm 내지 300 ppm, 특히 10 ppm 내지 100 ppm(혼합물의 백만분율)의 페룰산, 및
- 적어도 200 ppm, 바람직하게는 적어도 300 ppm, 더욱더 바람직하게는 적어도 400 ppm, 더욱더 바람직하게는 300 ppm 내지 6000 ppm, 특히 400 내지 6000 ppm의 레스베라트롤
을 포함한다.
조성물은 또한 아픈 인간 또는 아픈 동물, 구체적으로, 예를 들어 감기와 같이 인지 수행에 영향을 줄 수 있는 질환을 앓고 있는 인간 또는 동물의 급성 치료를 위한 신속한 효과를 위해 단일 용량으로 사용될 수 있다. 따라서, 본 발명은 또한 비티스 비니훼라 및 바키니움 안구스티폴리움으로부터 얻은 분자의 적어도 하나의 혼합물을 포함하는 조성물에 관한 것으로서, 상기 혼합물은 아픈 인간 또는 아픈 동물의 인지 기능을 개선시키거나 유지하기 위해 반복하지 않고 1회 복용되는 단일 용량으로서 이를 사용하기 위해
- 적어도 1%, 바람직하게는 적어도 5%, 더욱더 바람직하게는 5% 내지 50%, 특히 7% 내지 35%의 카테킨 및/또는 에피카테킨(백분율은 혼합물의 총 중량에 대한 중량으로 주어짐),
- 적어도 5 ppm, 바람직하게는 적어도 10 ppm, 더욱더 바람직하게는 5 ppm 내지 300 ppm, 특히 10 ppm 내지 100 ppm(혼합물의 백만분율)의 페룰산, 및
- 적어도 200 ppm, 바람직하게는 적어도 300 ppm, 더욱더 바람직하게는 적어도 400 ppm, 더욱더 바람직하게는 300 ppm 내지 6000 ppm, 특히 400 내지 6000 ppm의 레스베라트롤
을 포함한다. 이러한 사용은 원하는 효과 5시간 미만 전에 단일 용량을 수행하는 것이다.
본 발명에 따른 유용한 조성물의 분자의 혼합물은 또한 바람직하게는, 적어도 1%의 카테킨 및/또는 에피카테킨, 적어도 5 ppm의 페룰산 및 적어도 200 ppm의 레스베라트롤에 추가적으로
- 적어도 50 ppm의 퀘르세틴 및/또는 퀘르세틴 글라이코사이드, 바람직하게는 적어도 70 ppm, 특히 50 ppm 내지 10,000 ppm의 퀘르세틴 및/또는 글라이코사이드, 및/또는
- 적어도 500 ppm, 바람직하게는 적어도 600 ppm, 더욱더 바람직하게는 적어도 700 ppm, 더욱더 바람직하게는 600 ppm 내지 5000 ppm의 안토시아니딘
을 포함한다.
바람직하게는, 말비딘 3 글루코사이드가 주요 안토시아니딘이다. 바람직하게는, 이는 혼합물에 적어도 300 ppm의 농도로 존재한다.
제1 실시형태에 따르면, 분자의 혼합물은 비티스 비니훼라의 추출물 및 바키니움 안구스티폴리움의 추출물로 이루어진 혼합물이다.
제2 실시형태에 따르면, 분자의 혼합물은 비티스 비니훼라 및 바키니움 안구스티폴리움의 혼합물로부터 얻은 추출물로 이루어진 혼합물이다.
제3 실시형태에 따르면, 분자의 혼합물은
- 비티스 비니훼라의 추출물 및/또는 바키니움 안구스티폴리움의 추출물, 및
- 비티스 비니훼라 및 바키니움 안구스티폴리움의 혼합물로부터 얻은 추출물
로 이루어진 혼합물이다.
바람직하게는, 본 발명에 따른 유용한 조성물에 존재하는 비티스 비니훼라 추출물은 플라바놀 중합체의 함량이 추출물 중 폴리페놀 총 중량의 0.5 중량% 미만, 더욱더 바람직하게는 함량이 0.1 중량% 미만인 추출물이다. 본 발명에 따르면, 플라바놀 중합체는, 소장에서 매우 신속하게 흡수된 다음 메틸화, 황화 및 글루쿠로니드화 유도체로 대사되는 플라바놀 단량체와 달리, 생체이용률이 매우 낮다. 이러한 중합체의 적은 존재는 특히 효능 및 생체이용률에 사용되는 포도 추출물의 품질 기준이다.
본 발명에 따른 추출물은,
- 혼합물의 총 중량에 대해 중량으로 적어도 1%, 바람직하게는 적어도 5%, 더욱더 바람직하게는 5% 내지 50%, 특히 7% 내지 35%의 카테킨 및/또는 에피카테킨,
- 적어도 5 ppm, 바람직하게는 적어도 10 ppm, 더욱더 바람직하게는 5 ppm 내지 300 ppm, 특히 10 ppm 내지 100 ppm의 페룰산, 및
- 적어도 200 ppm, 바람직하게는 적어도 300 ppm, 더욱더 바람직하게는 적어도 400 ppm, 더욱더 바람직하게는 300 ppm 내지 6000 ppm, 특히 400 내지 6000 ppm의 레스베라트롤,
- 선택적으로, 적어도 50 ppm의 퀘르세틴 및/또는 퀘르세틴 글라이코사이드, 바람직하게는 적어도 70 ppm, 특히 50 ppm 내지 10,000 ppm의 퀘르세틴 및/또는 글라이코사이드,
- 선택적으로, 적어도 500 ppm, 바람직하게는 적어도 600 ppm, 더욱더 바람직하게는 적어도 700 ppm, 더욱더 바람직하게는 600 ppm 내지 5000 ppm의 안토시아니딘
을 포함하는 혼합물을 얻을 수 있게 하는 임의의 방법에 의해 얻을 수 있다.
바람직하게는, 말비딘 3 글루코사이드는 농도가 적어도 300 ppm인 주요 안토시아니딘이다. 바람직하게는, 안토시아니딘은 적어도 20%, 더 바람직하게는 적어도 25%의 말비딘 3 글루코사이드(중량%)를 포함한다.
특히 적합한 방법은 다음 단계를 포함하는 방법이다:
- 비티스 비니훼라의 추출물을 얻는 단계:
* 비티스 비니훼라, 바람직하게는 비티스 비니훼라의 모든 잎, 열매, 껍질, 종자 및 목질부의 물 및/또는 에탄올 추출을 수행하는 단계; 사용되는 용매의 양(30% v/v 내지 96% V/V)은 사용되는 재료의 질량의 2 내지 10배이다. 추출 기간은 30분 내지 24시간일 수 있고 추출 온도는 20℃ 내지 80℃이다. 사용되는 원료는 건조, 신선 또는 냉동, 전체 또는 분쇄된 것일 수 있다;
* 예를 들어 원심 분리에 의해 또는 압착 및 여과에 의해 고체 물질로부터 물 및/또는 에탄올 용액을 분리하는 단계;
* 바람직하게는 60℃ 미만 및 100 mbar 미만의 압력에서 진공 증발에 의해 에탄올을 증발시키는 단계;
* 프로안토시아나이드 단량체 및 올리고머(중합도가 2 내지 10(양 종말점 포함함)임)를 우선적으로 선택하고 플라바놀 중합체(데카머를 초과함)를 제거하기 위해 미리 탈용매화된 추출물의 막 분리를 수행하여, 플라바놀 중합체의 함량이 추출물 중 폴리페놀의 총 중량에 대해 0.5 중량% 미만, 더 바람직하게는 0.1 중량% 미만임을 특징으로 하는 추출물을 얻는 단계. 컷오프 임계값이 15,000 달톤 미만, 더 바람직하게는 3000 달톤 미만인 여과막을 사용하여 이 단계를 수행할 수 있다;
- 바키니움 안구스티폴리움의 추출물을 얻는 단계:
* 바키니움 안구스티폴리움, 바람직하게는 바키니움 안구스티폴리움의 모든 잎 및 열매의 물 및/또는 에탄올 추출을 수행하는 단계; 사용되는 용매의 양(30% v/v 내지 96% V/V)은 사용되는 재료의 질량의 2 내지 10배이다. 추출 기간은 30분 내지 24시간일 수 있고 추출 온도는 20℃ 내지 80℃이다. 사용되는 원료는 건조, 신선 또는 냉동된 것일 수 있다;
* 원심 분리에 의해 또는 압착 및 여과에 의해 고체 물질로부터 물 및/또는 에탄올 용액을 분리하는 단계;
* 바람직하게는 60℃ 미만 및 100 mbar 미만의 압력에서 진공 증발에 의해 에탄올을 증발시키는 단계;
* 말토덱스트린과 같은 지지체를 이용하거나 이용하지 않고 분무, 진공 오븐 또는 동결건조에 의해 추출물을 건조시키는 단계;
- 건조 단계 전 또는 후에 비티스 비니훼라 및 바키니움 안구스티폴리움의 추출물을 혼합하는 단계.
일 변형에 따르면, 방법은 다음 단계를 구현하는 것으로 이루어진다:
- 비티스 비니훼라 및 바키니움 안구스티폴리움을 혼합하여 바키니움 안구스티폴리움, 바람직하게는 바키니움 안구스티폴리움의 모든 잎 및 열매의 물 및/또는 에탄올 추출을 수행하는 단계; 사용되는 용매의 양(30% v/v 내지 96% V/V)은 사용되는 재료의 질량의 2 내지 10배이다. 추출 기간은 30분 내지 24시간일 수 있고 추출 온도는 20℃ 내지 80℃이다. 사용되는 원료는 건조, 신선 또는 냉동된 것일 수 있다;
- 원심 분리에 의해 또는 압착 및 여과에 의해 고체 마르(marc)로부터 물 및/또는 에탄올 용액을 분리하는 단계;
- 바람직하게는 60℃ 미만 및 100 mbar 미만의 압력에서 진공 증발에 의해 에탄올을 증발시키는 단계;
- 말토덱스트린과 같은 지지체를 이용하거나 이용하지 않고 분무 또는 승화에 의해 추출물을 건조시키는 단계.
방법의 변형이 무엇이든, 건조 단계 전에, 방법은 다음 단계를 포함할 수 있다:
- 혼합 또는 혼합하지 않은 추출물의 용액을 수지에 로딩하는 단계,
- 수지를 물로 헹구는 단계,
- 물/에탄올 용리액을 수지에 적용하는 단계,
- 정제된 용출액을 회수하는 단계,
- 상기 용출액으로부터 에탄올을 증발시키는 단계,
- 상기 용출액을 농축시키는 단계,
- 상기 정제된 수성 추출물을 건조시키는 단계.
본 발명에 따른 조성물은 오로지 분자의 혼합물, 즉 추출물만으로 이루어질 수 있거나, 다른 성분을 포함할 수 있다. 바람직하게는, 분자의 혼합물에 추가적으로, 본 발명에 따른 조성물은 다른 성분, 구체적으로 부형제 또는 코팅제, 예컨대 말토덱스트린, 미세결정질 셀룰로스, 사이클로덱스트린, 전분, 가용성 또는 불용성 섬유를 포함한다.
조성물은 영양상 적용에 적합한 임의의 형태, 바람직하게는 분말 형태일 수 있다.
조성물은 또 다른 조성물, 구체적으로 인간 또는 동물을 위한 정제, 캡슐, 젤라틴 캡슐, 분말, 용액, 마이크로캡슐, 현탁액, 에멀젼, 식품보충제, 음료 및 식품으로부터 선택되는 형태로 제공되는 영양 조성물에 통합될 수 있다.
조성물은 바람직하게는 인간용으로 의도된 비-치료적 영양 조성물, 예를 들어 식품보충제, 바, 유제품, 삼키거나 재수화되는 분말, 젤, 잼, 사탕, 탄산 또는 비-탄산 음료, 재수화될 건조 음료, 콩포트이다.
조성물은 또한 동물용으로 의도된 영양 조성물일 수 있다.
조성물은 또한 동물용으로 의도된 비-치료적 영양 조성물, 예를 들어 건조 식품, 예컨대 키블(kibble)(압출, 동시압출 또는 냉동건조됨), 간식, 스낵, 습식 또는 반습식 식품, 예컨대 소스 중 조각 음식(morsel), 젤리 중 조각 음식, 음료 또는 심지어 식품보충제일 수 있다. 바람직하게는, 본 발명에 따른 조성물은 건조 식품, 예컨대 키블에 통합된다.
유리하게는, 본 발명에 따른 조성물은 동물용으로 의도된 경우, 조성물, 구체적으로 영양 조성물에 포함물로서, 즉 이를 조성물의 양에 첨가함으로써, 예를 들어 함침 또는 혼합에 의해, 또는 코팅에 의해, 즉 이를 조성물의 표면에 분무 또는 살포에 의해 적용함으로써, 예를 들어 이를 적어도 하나의 성분, 예컨대 적어도 하나의 기호성 향상제와 미리 혼합함으로써 통합될 수 있다.
이는 아마도 약학 조성물, 약제 또는 수의학 제품일 수 있다.
본 발명에 따른 조성물에 존재하는 혼합물에 특이적인 비티스 비니훼라의 분자 및 바키니움 안구스티폴리움의 분자의 존재는 인지 기능의 유지 또는 개선에 상승 효과를 가능하게 한다.
따라서, 본 발명의 구체적인 목적은 인지 기능을 개선시키거나 유지하기 위해 건강한 인간 또는 동물에서 단일 용량으로서 사용하기 위한, 상기 기재된 바와 같은 조성물(이의 변이체에 관계없음)이다.
단일 용량은 원하는 효과 전 5시간 미만, 바람직하게는 원하는 효과 전 3시간 미만 내에 섭취된다. 이러한 단일 용량은 반복하지 않고 한 번에 1회 섭취될 수 있다.
바람직하게는, 본 발명은 인지 기능을 개선시키거나 유지하기 위한, 즉 특히 기억 및/또는 집행 기능 및/또는 주의력 및/또는 집중 및/또는 학습 및/또는 융통성 및/또는 기획 및/또는 경계를 개선시키거나 유지하기 위한 단일 용량으로서의 용도에 관한 것이다.
특히, 본 발명에 따른 조성물은 인간에서 지속적인 인지 능력을 필요로 하는 검사 또는 테스트에서 자신의 수행을 개선시키거나 유지하는 데 사용될 수 있다.
인간에서 단일 용량으로 복용되는 본 발명에 따른 조성물은 연령이 바람직하게는 10세 초과, 더욱더 바람직하게는 15세 초과, 더욱더 바람직하게는 18세 초과인 사람의 인지 기능을 유지하거나 개선시키는 데 특히 유용하고 효과적이다. 이는 대학생 및 활동적인 성인을 포함할 수 있다.
동물에서 단일 용량으로 복용되는 본 발명에 따른 조성물은 개, 고양이 또는 말의 인지 기능을 유지하거나 개선시키는 데 특히 유용하고 효과적이다.
바람직하게는, 본 발명에 따른 조성물은 인간 또는 동물에게 다음을 제공할 수 있도록 하는 양으로 사용된다:
- 체중 ㎏당 적어도 100 ㎍, 바람직하게는 체중 ㎏당 500 ㎍, 더욱더 바람직하게는 체중 ㎏당 1㎎의 카테킨 및/또는 에피카테킨, 및
- 체중 ㎏당 바람직하게는 적어도 0.05㎍, 바람직하게는 체중 ㎏당 0.25㎍, 더욱더 바람직하게는 체중 ㎏당 0.5㎍의 페룰산, 및
- 체중 ㎏당 바람직하게는 적어도 10㎍, 바람직하게는 체중 ㎏당 50㎍, 더욱더 바람직하게는 체중 ㎏당 100㎍의 레스베라트롤, 및
- 선택적으로 체중 ㎏당 적어도 0.2㎍, 바람직하게는 체중 ㎏당 1㎍, 더욱더 바람직하게는 체중 ㎏당 2㎍의 퀘르세틴 및/또는 퀘르세틴 글라이코사이드, 및
- 선택적으로 체중 ㎏당 적어도 1㎍, 바람직하게는 체중 ㎏당 적어도 5㎍, 더욱더 바람직하게는 체중 ㎏당 적어도 10㎍의 안토시아니딘.
이제 본 출원의 주제인 조성물의 인지 기능에 대한 단일 및 신속한 투약의 상승 효과를 입증하는 실시예 및 테스트 결과를 통해 본 발명을 예시한다.
실시예
실시예 1: 본 발명에 따른 조성물
하기 기재된 바와 같은 방법을 실행함으로써 본 발명에 따른 혼합물의 이러한 제1 예를 얻는다.
사용된 원료는 다음과 같다:
- 와인 산업의 부산물인, 비티스 비니훼라의 열매의 껍질 및 종자(씨),
- 바키니움 안구스티폴리움의 냉동 베리.
바키니움 안구스티폴리움의 냉동 베리 400g을 분쇄하고 HCl 함량이 0.1 중량%인 80% (V/V) 에탄올 2000㎖의 용액과 혼합한다. 혼합물을 실온(20℃)에서 24시간 동안 보관한다. 그 다음 에탄올 용액을 여과에 의해 과육으로부터 분리하고, 20% 건물량으로 회전 증발기를 이용하여 진공 하에서 농축시킨다. 이 추출물의 일부는 테스트를 위해 보관하고; 나머지 부분은 비티스 비니훼라의 추출물과 혼합하기 위해 보관한다.
비티스 비니훼라의 껍질 및 종자 500g을 40℃에서 5시간 동안 HCl 함량이 0.1 중량%인 80% (V/V) 에탄올 2500 ㎖와 혼합한다. 그 다음 에탄올 용액을 여과에 의해 과육으로부터 분리한다. 그 다음 60 mbar 하의 50℃의 온도에서 회전 증발기를 이용하여 진공 하에서 에탄올을 제거한다. 그 다음 수용액을 희석하여 건물량이 5%이도록 하고 5000 달톤 막을 통해 여과한다. 그 다음 얻은 투과액을 1 BV/시간으로 수지 컬럼(C18)에 로딩한다. 그 다음 수지를 2 BV/시간으로 3 BV의 증류수로 1회 헹구고, 그 다음 1 BV/시간으로 5 BV의 80% (V/V) 에탄올 용액으로 용리한다.
추출된 용액의 일부를 테스트 및 특성화를 위해 보관한다(표 1a).
형광 검출기가 있는 초고성능 액체 크로마토그래피에 의해 이 표에 제시된 폴리페놀을 측정하였다.
[표 1a]
Figure pct00001
그 다음 나머지 부분을 바키니움 안구스티폴리움의 추출물과 혼합하여 본 발명에 따른 혼합물을 형성하고, 고형분 함량이 30%인 용액을 얻을 때까지 말토덱스트린을 혼합물에 첨가한다.
그 다음 용액을 160℃의 입구 온도로 분무 건조시킨다.
얻은 생성물은 표 1b에 제시된 폴리페놀을 포함하는 연보라색 분말이다. 질량/질량 초고성능 액체 크로마토그래피(UPLC-MS/MS)에 의해 이 표에 제시된 폴리페놀을 측정하였다.
[표 1b]
Figure pct00002
실시예 2: 본 발명에 따른 조성물
하기 기재된 바와 같은 방법을 실행함으로써 본 발명에 따른 혼합물의 이러한 제2 예를 얻는다.
사용된 원료는 다음과 같다:
- 비티스 비니훼라의 종자 및 껍질,
- 바키니움 안구스티폴리움의 베리.
냉동된 바키니움 안구스티폴리움 마르 1000g을 분쇄하고 HCl 함량이 0.1 중량%인 60% (V/V) 에탄올 5000㎖의 용액과 혼합한다. 혼합물을 실온(20℃)에서 24시간 동안 보관한다. 그 다음 에탄올 용액을 여과에 의해 과육으로부터 분리하고, 20% 건물량으로 회전 증발기를 이용하여 진공 하에서 농축시킨다.
선택된 비티스 비니훼라 껍질 및 종자 400g을 60℃에서 5시간 동안 80% (V/V) 에탄올 1500 ㎖와 혼합한다. 그 다음 에탄올 용액을 여과에 의해 과육으로부터 분리한다. 그 다음 60 mbar 하의 50℃의 온도에서 회전 증발기를 이용하여 진공 하에서 에탄올을 제거한다. 그 다음 수용액을 희석하여 건물량이 5%이도록 하고 5000 달톤 막을 통해 여과한다. 그 다음 얻은 투과액을 1 BV/시간으로 수지 컬럼(C18)에 로딩한다. 그 다음 수지를 2 BV/시간으로 3 BV의 증류수로 1회 헹구고, 그 다음 1 BV/시간으로 5 BV의 80% (V/V) 에탄올 용액으로 용리한다.
추출된 용액의 일부를 테스트 및 특성화를 위해 보관한다(표 2a).
[표 2a]
Figure pct00003
얻은 생성물은 표 2b에 제시된 폴리페놀을 포함하는 연보라색 분말이다. 초고성능 액체 크로마토그래피(UPLC-MS/MS)에 의해 이 표에 제시된 폴리페놀을 측정하였다.
[표 2b]
Figure pct00004
실시예 3: 인간용으로 의도된 부형제를 포함하는 본 발명에 따른 조성물
실시예 1의 조성물 19.980㎏을 콜로이달 실리카 0.020㎏과 혼합한다. 당업자에게 알려진 통상적인 조건 하에서 성분을 혼합함으로써 조성물을 얻는다. 자체가 판지 상자에 포장된 PET 백에 조성물을 포장한다.
Figure pct00005
실시예 4: 인간용으로 의도된 본 발명에 따른 영양 조성물
사용된 원료는 다음과 같다:
- 와인을 만드는 데 사용되는 비티스 비니훼라의 신선한 포도,
- 바키니움 안구스티폴리움의 냉동 베리.
바키니움 안구스티폴리움의 냉동된 베리 7.2g을 분쇄한 다음 압착하였다. 주스를 고체 분획(1.8g)으로부터 분리한다. 고체 분획을 HCl 함량이 0.1 중량%인 80% (V/V) 에탄올 35㎖의 용액과 혼합한다. 혼합물을 실온(20℃)에서 24시간 동안 보관한다. 그 다음 에탄올 용액을 여과에 의해 과육에으로부터 분리하고, 20% 건물량으로 회전 증발기를 이용하여 진공 하에서 농축시킨다. 그 다음 추추액을 말토덱스트린 지지체 상에서 진공 하에 건조시킨다. 그 다음 분말 형태의 추출물 180㎎을 수확하여 비티스 비니훼라의 추출물과 혼합한다.
신선한 포도 300g을 압착하고, 주스를 비티스 비니훼라의 껍질 및 종자로 이루어진 고형물(71g)로부터 분리한다. 고형물을 40℃에서 5시간 동안 HCl 함량이 0.1 중량%인 80% (V/V) 에탄올 1000㎖와 혼합한다. 그 다음 에탄올 용액을 여과에 의해 과육으로부터 분리한다. 그 다음 60 mbar 하의 50℃의 온도에서 회전 증발기를 이용하여 진공 하에서 에탄올을 제거한다. 그 다음 수용액을 희석하여 건물량이 5%이도록 하고 5000 달톤 막을 통해 여과한다. 그 다음 얻은 투과액을 1 BV/시간으로 수지 컬럼(C18)에 로딩한다. 그 다음 수지를 2 BV/시간으로 3 BV의 증류수로 1회 헹구고, 그 다음 1 BV/시간으로 5 BV의 80% (V/V) 에탄올 용액으로 용리한다. 그 다음 60 mbar 하의 50℃의 온도에서 회전 증발기를 이용하여 하이드로알코올 용액(hydroalcoholic solution)을 증발시키고, 그 다음 얻은 추출물을 진공 하에서 건조시킨다. 그 다음 건조한 비티스 비니훼라 추출물 420㎎을 회수하고, 그 다음 바키니움 안구스티폴리움 추출물 180㎎을 혼합하여 본 발명에 따른 생성물 600㎎을 구성한다.
본 발명에 따른 생성물을 젤라틴 캡슐 형태로 투여한다. 각각의 젤라틴 캡슐은 옥수수 말토덱스트린 150㎎이 보충된 본 발명에 따른 생성물 300㎎으로 구성된, 총 450㎎의 분말을 포함한다.
권장 일일 제품량은 600㎎, 또는 젤라틴 캡슐 2개이다.
Figure pct00006
실시예 5: 인간용으로 의도된 본 발명에 따른 영양 조성물
실시예 5는
- 실시예 1의 조성물: 300 m
- 비타민 C: 80㎎
- 말토덱스트린: 20㎎
으로 이루어진 400㎎의 젤라틴 캡슐이다.
당업자에게 알려진 통상적인 조건 하에서 성분을 혼합함으로써 조성물을 얻고, 또한 통상적인 조건 하에서 젤라틴 캡슐에 넣는다.
권장량은 하루에 1 내지 2개의 젤라틴 캡슐이다.
실시예 6: 동물용으로 의도된 본 발명에 따른 영양 조성물
실시예 2의 본 발명에 따른 조성물을 AFCO 표준을 따르고 동물 사료, 지방, 섬유질, 곡류 및 방부제 및 항산화제를 포함하는 압출된 건식 개 사료에 첨가하였다.
여러 실시형태에 따라, 특히 코팅 및 내포에 의해 키블에 대한 조성물의 첨가를 수행하였다.
본 발명에 따른 조성물을 액체 D'테크(D'Tech) 가금류 기호성 향상제(SPF, 프랑스 엘븐 소재)에 첨가함으로써 코팅 테스트를 수행하였다. 가금류 지방(키블의 중량에 대해 6%)의 제1 층을 키블 상의 코팅제로서 첨가한 후, 기호성 향상제(키블의 중량에 대해 1%, 2% 또는 3%) 및 본 발명에 따른 조성물(0.02%, 0.04% 또는 0.1%, %는 키블의 중량에 대한 것임) 사이에 혼합물 층을 첨가하였다.
압출 전에 원료(또한 프리믹스라고도 함)에 본 발명에 따른 조성물(0.02%, 0.04% 또는 0.1%, %는 키블의 중량에 대한 것임)을 첨가함으로써 내포 테스트를 수행하였다.
인지 기능 및 혈관내피 기능에 대한 본 발명에 따른 조성물의 단일-용량 효과의 평가
연령이 18 내지 25세인 30명의 건강한 학생 지원자에 대하여 단일 센터, 교차, 이중맹검, 위약-대조 임상 연구를 수행하였다.
연구 중인 제품의 조성은 실시예 4의 것이다.
이 연구의 목적은, 한편으로는 검증된 컴퓨터 배터리(콤파스(COMPASS))를 사용하여 수행된 테스트에 의해 측정되는 인지 기능(작업 기억 및 주의력), 및 한편으로는 유동-매개 팽창(FMD)을 측정함으로써 평가되는 혈관내피 기능에 대한 본 발명에 따른 제품의 단일-용량 효과에 초점을 맞추었다.
실제로, 조성물의 인지 기능에 대한 효능의 알려진 주요 작용 메커니즘은 혈관내피 기능의 개선, 보다 특히 산화질소(NO)의 가용성의 증가와 관련이 있는 것으로 알려져 있다. 내피 세포에 의한 NO 합성을 증가시킴으로써, 또는 NO 분해를 제한함으로써(효소, 반응성 산화 종). NO는 대뇌 혈류를 증가시키고 결과적으로 신경세포 활성화 동안 국소 혈관확장에서 주요 역할을 한다. 혈관내피 기능을 평가하는 간단한 비침습적인 방법은 일시적 허혈에 대한 반응으로 유동-매개 상완 동맥(FMD)의 직경 확장을 측정하는 것으로 이루어진다.
실시예 4의 조성물을 2개 젤라틴 캡슐(300㎎/캡슐, 즉 600㎎/용량)의 단일 경구 용량으로 투여하였다. 위약은 말토덱스트린만을 포함(폴리페놀 없음)하는 유사한 모양의 캡슐이었다. 연구 계획은 도 1에 나타내어져 있다.
대상체는 다음 지침을 준수해야 하였다:
- 연구 기간 동안: 특히 음식, 수면, 신체 및 지적 활동과 관련하여 습관을 변형하지 말 것; 식품 보충제를 섭취하지 말 것; 담배를 피우거나 마약을 섭취하지 말 것; 매일 수면 시간 기록을 작성할 것.
- 각각의 평가 방문(V1 및 V2) 이전 24시간 동안: 테스트 이전 24시간 동안 폴리페놀의 섭취를 조정할 수 있도록 식이 제한을 준수하고, 식이 추적 기록을 작성할 것.
- 평가 방문 전날 2시간을 초과하는 격렬한 신체 활동을 실시하지 말 것.
- 평가 방문 전 12시간 동안 금식할 것.
- 평가 방문시 식이 조사 및 수면 추적 기록을 가져올 것.
인지 평가
포함 및 제외 기준을 확인한 후, 대상체는 연구에 참여하고 콤파스 소프트웨어(노섬브리아 유니버시티, 영국 뉴캐슬 소재)의 모듈을 사용하여 이 연구에 대해 설정된 컴퓨터 인지 평가 배터리에 대한 교육 과정을 받았다. 이 배터리의 목적은 학교/대학교 시험의 조건을 모델링하는 것이었다. 이를 위해, 길고 인지적으로 까다로운 일련의 컴퓨터화한 테스트를 사용하였다. 이는 각각 연속적인 3 뺄샘(STS) 2분, 연속적인 7 뺄셈(SSS) 2분, 신속한 시각 정보 처리(rapid visual information processing; RVIP) 5분 및 시각 아날로그 척도(수행, 불안, 수행, 피로)에 의한 주관적 평가 2분을 포함하는 일련의 6가지의 배터리로 이루어졌다. 목표 및 작업 흐름에 대한 상세한 내용은 하기 열거되어 있다:
연속적인 3 뺄셈(STS):
이 작업은 대상체의 주의력과 작업 기억을 테스트하였다. 이는 참가자에게 컴퓨터 키보드를 사용하여 답을 작성하여 가능한 한 빠르게 그리고 가능한 한 정확하게 -3씩 뺄셈을 수행하도록 요청하는 것으로 이루어진다. 처음에 800에서 999 사이의 무작위로 그려진 숫자가 스크린에 표시된다. 일단 참가자가 첫 번째 항목을 입력하면 이 숫자는 사라진다. 오답이 주어진 경우, 참가자가 제공한 마지막 답변을 기준으로 다음 정답이 자동으로 결정될 것이다. 작업은 2분 동안 지속된다.
연속적인 7 뺄셈(SSS):
이 작업은 또한 대상체의 주의력과 작업 기억을 평가하였다. 이 작업의 운용은 STS와 동일하지만, 참가자에게 7씩 뺄셈을 수행하도록 요청한다는 차이점이 있다. 이 작업도 또한 2분 동안 지속된다.
신속한 시각 정보 처리(RVIP) 작업:
이 작업은 참가자의 주의집중 시간을 측정하는 것을 목표로 하였다. 테스트 전체에 걸쳐, 스크린에 숫자가 하나씩 나타났다(100개/분). 참가자에게 3개의 연속적인 짝수 또는 홀수의 발생을 감지하고 순서를 감지할 때 가능한 한 빠르게 키보드의 스페이스바를 누를 것을 요청하였다. 작업은 5분 동안 지속된다.
인지 요구가 높은 이 배터리의 총 지속기간은 66분이었으며: 이 66분 동안, 대상체는 STS, SSS, RVIP를 포함하는 배터리를 연속적으로 6번 반복하여 수행한 다음, 주관적인 평가를 수행한다. 각각의 배터리는 11분 동안 지속된다.
혈관내피 기능 평가
FMD 측정 절차
대상체의 준비:
연구 참가자들은 12시간 동안 금식하였고 지시사항에 따랐음을 선언하였다. 각각의 참가자에 대해, 2번의 방문 동안 동시에 FMD 측정을 수행하였다.
장비:
10 ㎒에서 초음파 기계(빈노(VINNO) TM E10) 및 선형 프로브(빈노 TM F4-42L)를 이용하여 전용실에서 동일한 작업자가 기록을 수행하였다.
이미지 획득:
임상 연구 기술자가 대상체를 FMD 검사실로 안내한 다음, 대상체를 의료 검사용 침대에 눕히고 적어도 15분 동안 등을 대고 편안하게 누워 휴식을 취하게 하였다. 혈압을 측정한 후, 오른쪽 팔을 고정시켰다. 혈압측정띠를 손목 위 팔뚝에 두었다. 프로브의 방향을 변경하지 않고 상완 동맥(최대 직경)의 선명한 이미지를 얻기 위해 팔꿈치의 주름 바로 위에서 대상체의 팔 상의 고정 시스템에 의해 기록 프로브를 배치하고 고정시켰다.
유동-매개 팽창: FMD
동맥의 세로 이미지를 2분 동안 기록하였다(초음파 기계에 의한 기록 가능 시간의 제한으로 인해 4개의 연속적인 30초 시퀀스로 분할됨). 그 다음 일시적 허혈 단계를 유도하기 위해, 작업자는 230 mmHg의 수축기 혈압 위로 6분 동안 혈압측정띠를 부풀렸다. 상기 혈압측정띠 압축을 해제한 직후, 동맥 이미지를 2분 동안 다시 기록하였다(4개의 연속적인 30초 시퀀스로 분할됨).
1차 방문(V1)에서 1차 초음파 검사 종료시, 프로브의 위치와 팔꿈치 주름 사이의 거리를 센티미터 규칙으로 측정하여 동일한 대상체에 대해 더 나은 재현성을 위해 후속 측정 동안 동일한 위치에서 상완 동맥의 기록을 수행할 수 있게 하였다.
기록 분석 절차
반자동 혈관벽 검출 시스템이 장착된 "혈관 연구 도구(Vascular Research Tools)" 소프트웨어인 "상완 분석기(Brachial Analyzer)" 모듈을 사용하여 기록을 분석하였다. 모든 분석은 동일한 작업자가 수행하였으며, 상기 작업자는 복용한 제품에 대해 알지 못하였다.
다음 공식에 따라 기준선 값에서 동맥 직경의 증가 백분율로 FMD를 계산하였다: FMD = (최대 직경-기저 직경)/기저 직경 × 100. 압축 전 2분 동안 얻은 값의 평균으로 기저 동맥 직경 값을 계산하였다. 압축 해제 후 측정된 4개 값의 최고 평균값(평균 30초)으로 최대 직경 값을 계산하였다.
통계 분석
인지 테스트 데이터의 분석
B1에서 각각의 테스트에서 반복 측정 ANOVA(rANOVA)를 수행함으로써 점수의 균질성과 임의의 처리/순서 상호작용을 결정하였다.
각각의 테스트 유형에 대해, 배터리의 6회 반복에 걸친 수행에서의 변화는 점수의 변동(B1과 비교하여 정반응 수의 총 변동)에 대한 rANOVA를 수행함으로써 추정하였다.
주의력과 작업 기억을 평가하는 다양한 테스트, 즉 STS, SSS, RVIP에서 얻은 모든 정확한 점수를 고려하여 단일 측정값을 얻기 위해 종합 점수, 또는 "Zi -종합" 점수 방법을 사용하였다. Zi -종합은 각각의 개체 및 각각의 배터리(블록)에 대한 전반적인 인지 성능의 정량화를 가능하게 하였다. 대상체 "i"의 Zi -종합을 얻기 위해, 각각의 테스트의 결과를 집중시키고 감소시켜(Z-점수) Zi STS, Zi SSS 및 Zi RVIP로 표시되는 표준 편차의 함수로서 그룹 평균으로부터의 거리를 얻었다. 그 다음 이러한 정규화 단계로 함께 그룹화될 테스트의 평균(여기서는, Zi 종합[(Zi STS + Zi SSS + Zi RVIP)/3)])을 계산할 수 있게 된다.
FMD 데이터 분석
개별 방문 내 및 방문 간 변동성을 계산함으로써 초음파 재현성을 평가하였다. 평균 및 표준 편차를 계산함으로써 정량적 변수를 기재하였다. 스튜던트 t 검정(Student's t test)(조건에 따른 대응표본 및 독립표본)을 수행함으로써 처리 효과를 평가하였다.
인지 테스트와 관련된 모든 통계 테스트를 R(Jupyter.org 지원)을 사용하여 수행하였다. FMD 데이터에 대한 테스트를 Prism6 소프트웨어(GraphPad)를 사용하여 수행하였다. 이 연구에서 수행한 모든 통계 테스트는 신뢰 구간을 5%로 설정한 양측검정이었다.
결과
인구 특징
ITT 집단 중 26명의 대상체에 대한 초기 특징은 하기 표 5에 제시되어 있다:
Figure pct00007
이러한 ITT 집단 내에서, 4명의 대상체의 FMD 분석 값은 모든 지점에서 해석할 수 없었다. 따라서, 이들 4명의 대상체는 FMD 통계를 위해 ITT 집단에서 제거하고, 따라서 전체 ITT 집단과 유사한 특징을 가지는 26명의 대상체 수를 얻었다(표 6).
Figure pct00008
시간 경과에 따른 점수( STS , SSS , RVIP )의 변화
B1과 비교하여 블록 당 순 점수(정답-오답)의 변동을 통해 테스트 배터리에 대한 인지 수행 변화를 모니터링하였다(도 2A). STS 작업의 반복 동안, 대상체의 STS 점수는 본 발명을 이용하여 B4로부터 현저하게 증가한 반면, 위약을 이용한 경우에는 그렇지 않았다. 결과에 대한 보다 상세한 분석은, 순 성능의 이러한 개선이 실제로 본 발명에 따른 조성물 하에서의 명제 수의 증가(도 2C)와 결부된 테스트 전체에 걸친 정답 수의 유지(도 2B)와 관련되어 있음을 나타내었다. 본 발명을 이용한 처리에 유리해 보일 수 있는 시각적 외관에도 불구하고, SSS 및 RVIP에 대해 유의한 결과는 입증되지 않았다(도 2D).
시간 경과에 따른 "전반적인 성능"의 변화
수행된 주의력 및 작업 기억 테스트(STS, SSS, RVIP)에 대한 정확한 점수의 전반적인 점수를 얻기 위해, Zi -종합 방법을 사용하였다. 정규화한 다음, 상이한 결과의 조합은 전반적인 성능에서의 유의한 차이를 나타내었다(도 3A). 실제로, B4에서 B6으로, 베룸에 따른 점수는 위약보다 현저하게 더 높았다. 추가적으로, 처리 내의 변화를 비교함으로써(본페로니(Bonferroni) 블록 대 블록), 위약에 따른 점수는 현저하게 감소한 한편, 베룸 하에서 전반적인 성능 수준은 B1에서 B6까지 유지되었음을 주목한다(도 3B).
혈관내피 기능 결과
FMD 기록의 품질
개별 방문 내 변동성: 동일한 대상체에 대한 방문의 두 번째 기저 직경과 비교하여 첫 번째 기저 직경을 취함으로써 계산한다. 그 다음 개별값을 평균화하여 1.21±5.2%(52개 값)에서 관찰된 개별 평균 방문 내 변동을 얻는다.
개별 방문 간 변동성: 동일한 대상체에 대한 동일한 V2 측정값과 비교하여 V1의 첫 번째 기저 직경을 취함으로써 계산한다. 그 다음 개별값을 평균화하여 0.51±4.14%(26개 값)에서 관찰된 평균 방문 간 변동을 얻는다.
FMD에 대한 본 발명의 급성 효과
FMD 피크(허혈 후 60초)에 대한 치료 간에 통계적으로 유의한 차이가 관찰되지 않았으며, 이 때 평균이 본 발명 하에서는 5.93%이고 위약 하에서는 5.73%였다(p=0.45). 허혈 후 팽창의 전반적인 크기는 치료에 따라서 유의한 차이가 없었다(도 4).
연구의 결론
건강한 학생(청년)에서 수행한 이 연구는 길고 인지적으로 까다로운 테스트의 배터리 동안 인지 수행의 유지에 대한 본 발명에 따른 조성물을 포함하는 단일-용량 보충제의 영향을 평가할 수 있게 하였다. 놀랍게도, 본 발명에 따른 조성물에 존재하는 폴리페놀의 조합 및 특정 양은 인지에 대한 급성 효과를 얻을 수 있게 한다.
이 연구의 결과는 작업 기억 테스트의 결과가 "정성적"(더 많은 정답) 및 "정량적"(더 많은 시도) 개선을 통해 본 발명으로 개선되었음을 나타낸다. 이와 비교하여, 위액을 섭취한 동일한 대상체는 테스트 배터리의 반복 동안 작업 기억 및 주의력 성능의 감소를 나타내었다. 따라서 본 발명에 따른 조성물의 단일-용량 투여는 장기간의 인지 과제(검사 시뮬레이션) 동안 전반적인 성능의 개선을 가능하게 한다. 흥미롭게도, 인지 기능에 대한 효과는 제품의 섭취 후 대략 2시간 후에 배터리 B4로 최대에 도달하였다.
그러나, 이러한 동일 조건 하에서, 수반되는 혈관내피 기능의 유의한 변화는 관찰되지 않았다. 따라서, 이러한 효과는 이러한 테스트 작업을 수행하는 데 관여되는 대뇌 구조의 관류 개선과 관련이 없다.
따라서, 인지 기능에 대한 조성물의 단일 용량의 효과 및 신속한 효과에 관한 본 연구의 결과는 예측불가능한 것이었으며 당업자는 FMD에 대한 제품의 효과가 또한 위약과 비교하여 관찰될 수 있을 것임을 예측할 수 있는 것으로 보인다.
실제로:
- 테스트한 플라보노이드의 용량(≥ 174㎎)은 인지 기능에 대한 급성 효과가 선행 기술에서 입증된 가장 작은 용량(코코아 플라보노이드 520㎎)보다 더 낮았다;
- 본 발명에 따른 조성물은 위약과 비교하여 FMD에 대한 유의한 효과를 유도하지 않았다;
- 본 제품에 대한 이전 연구는 단일 투약 후 상당한 항산화 효과가 있다는 가설을 뒷받침하지 않는다;
- 이 제품의 다른 잠재적인 작용 메커니즘(신경발생 및 신경가소성에 대한 작용)은 단지 몇 시간 후에 상당한 생리학적 효과를 초래할 가능성이 없는 긴 과정을 포함한다;
블루베리 또는 포도로 제조된 제품에 대해 수행된 여러 임상 연구는 단일 투약 후 인지 기능에 대한 이들 제품의 어떠한 효과도 보이지 않았다.

Claims (19)

  1. 비티스 비니훼라(Vitis vinifera) 및 바키니움 안구스티폴리움(Vaccinium angustifolium)으로부터 얻은 분자의 혼합물을 포함하는 조성물의 용도로서,
    상기 혼합물은 인지 기능을 개선시키거나 유지하기 위해 건강한 인간 또는 건강한 동물에서 반복하지 않고 1회 섭취되는 단일 용량으로서,
    - 적어도 1%의 카테킨 및/또는 에피카테킨(백분율은 혼합물의 총 중량에 대한 중량으로 주어짐),
    - 적어도 5 ppm(혼합물의 백만분율)의 페룰산, 및
    - 적어도 200 ppm의 레스베라트롤
    을 포함하는, 용도.
  2. 제1항에 있어서, 상기 단일 용량은 원하는 효과 전 3시간 미만 내에 섭취됨을 특징으로 하는 용도.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 기억 및/또는 집행 기능 및/또는 주의력 및/또는 집중 및/또는 학습 및/또는 융통성 및/또는 기획 및/또는 경계를 개선시키거나 유지하기 위한, 용도.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 건강한 인간에서 지속적인 인지 능력을 필요로 하는 검사 또는 테스트에서 자신의 수행을 개선시키거나 유지하기 위한, 용도.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 사용되는 분자의 혼합물은 적어도 5%의 카테킨 및/또는 에피카테킨을 포함하는 분자의 혼합물이고, 백분율은 혼합물의 총 중량에 대한 중량으로 주어지는 것임을 특징으로 하는 용도.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 사용되는 분자의 혼합물은 적어도 10 ppm(혼합물의 백만분율)의 페룰산을 포함하는 분자의 혼합물임을 특징으로 하는 용도.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 사용되는 분자의 혼합물은
    - 비티스 비니훼라의 추출물 및/또는 바키니움 안구스티폴리움의 추출물, 및
    - 비티스 비니훼라 및 바키니움 안구스티폴리움으로부터 얻은 추출물
    로 이루어진 분자의 혼합물임을 특징으로 하는 용도.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 사용되는 분자의 혼합물에 존재하는 비티스 비니훼라의 추출물은 플라바놀 중합체의 함량이 추출물 중 폴리페놀 총 중량의 0.5 중량% 미만임을 특징으로 하는 용도.
  9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 사용되는 분자의 혼합물은 또한
    - 적어도 300 ppm 농도의 말비딘 3 글루코사이드, 및/또는
    - 적어도 50 ppm의 퀘르세틴 및/또는 퀘르세틴 글라이코사이드, 및/또는
    - 적어도 500 ppm의 안토시아니딘
    을 포함하는 분자의 혼합물임을 특징으로 하는 용도.
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 분자의 혼합물을 포함하는 조성물은 인간 또는 동물에게 다음을 제공할 수 있도록 하는 단일 용량으로 복용됨을 특징으로 하는 용도:
    - 체중 ㎏당 적어도 100 ㎍의 카테킨 및/또는 에피카테킨, 및/또는
    - 체중 ㎏당 적어도 0.05㎍의 페룰산, 및/또는
    - 체중 ㎏당 적어도 1㎍의 레스베라트롤.
  11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 분자의 혼합물을 포함하는 조성물은 인간 또는 동물에게 다음을 제공할 수 있도록 하는 단일 용량으로 섭취됨을 특징으로 하는 용도:
    - 체중 ㎏당 적어도 500 ㎍의 카테킨 및/또는 에피카테킨, 및/또는
    - 체중 ㎏당 적어도 0.25㎍의 페룰산, 및/또는
    - 체중 ㎏당 적어도 5㎍의 레스베라트롤.
  12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 분자의 혼합물을 포함하는 조성물은 인간 또는 동물에게 다음을 제공할 수 있도록 하는 단일 용량으로 복용됨을 특징으로 하는 용도:
    - 체중 ㎏당 적어도 1㎎의 카테킨 및/또는 에피카테킨, 및/또는
    - 체중 ㎏당 적어도 0.5㎍의 페룰산, 및/또는
    - 체중 ㎏당 적어도 10㎍의 레스베라트롤.
  13. 제9항에 있어서, 상기 분자의 혼합물을 포함하는 조성물은 인간 또는 동물에게 다음을 제공할 수 있도록 하는 단일 용량으로 복용됨을 특징으로 하는 용도:
    - 체중 ㎏당 적어도 0.2㎍의 퀘르세틴 및/또는
    - 체중 ㎏당 적어도 1㎍의 안토시아니딘.
  14. 제9항에 있어서, 상기 분자의 혼합물을 포함하는 조성물은 인간 또는 동물에게 다음을 제공할 수 있도록 하는 단일 용량으로 복용됨을 특징으로 하는 용도:
    - 체중 ㎏당 적어도 1㎍의 퀘르세틴 및/또는
    - 체중 ㎏당 적어도 5㎍의 안토시아니딘.
  15. 제9항에 있어서, 상기 분자의 혼합물을 포함하는 조성물은 인간 또는 동물에게 다음을 제공할 수 있도록 하는 단일 용량으로 복용됨을 특징으로 하는 용도:
    - 체중 ㎏당 적어도 0.1㎍의 퀘르세틴 및/또는
    - 체중 ㎏당 적어도 10㎍의 안토시아니딘.
  16. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 분자의 혼합물을 포함하는 조성물은 인간 또는 동물을 위한 정제, 캡슐, 젤라틴 캡슐, 분말, 용액, 마이크로캡슐, 현탁액, 에멀젼, 식품보충제, 음료 및 식품으로부터 선택되는 형태임을 특징으로 하는 용도.
  17. 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 연령이 10세 초과인 건강한 인간에서의 용도.
  18. 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 개, 고양이 및 말로부터 선택된 건강한 동물에서의 용도.
  19. 비티스 비니훼라 및 바키니움 안구스티폴리움으로부터 얻은 분자의 혼합물을 포함하는 조성물로서,
    상기 혼합물은 아픈 인간 또는 아픈 동물의 인지 기능을 개선시키거나 유지하기 위해 반복하지 않고 1회 복용되는 단일 용량으로서의 용도를 위해,
    - 적어도 1%의 카테킨 및/또는 에피카테킨(백분율은 혼합물의 총 중량에 대한 중량으로 주어짐),
    - 적어도 5 ppm(혼합물의 백만분율)의 페룰산, 및
    - 적어도 200 ppm의 레스베라트롤
    을 포함하고, 상기 단일 용량은 원하는 효과 5시간 미만 이내에 섭취되는, 조성물.
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