KR20210070699A - Cognitive improvable Oggo obtained from fermented and extracted mixture of Red ginseng, Polygala tenuifolia, Poliacocos, and Rehmanneh Glutinosa - Google Patents

Cognitive improvable Oggo obtained from fermented and extracted mixture of Red ginseng, Polygala tenuifolia, Poliacocos, and Rehmanneh Glutinosa Download PDF

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Abstract

The present invention relates to a composition for improving cognitive function or memory ability, comprising, as an active ingredient, a fermented mixture of red ginseng, Polygala tenuifolia, Stachys sieboldii, morel and Wolfiporia extensa. Since the fermented mixture of red ginseng, Polygala tenuifolia, morel, Stachys sieboldii and Wolfiporia extensa has an excellent effect of inhibiting the activity of acetylcholinease, which inhibits neurotransmission by destroying acetylcholine and an excellent recovery ability for memory and cognitive ability for the scopolamine-induced memory-impaired animal model, the composition can be used for the prevention or treatment of degenerative cranial nerve diseases such as Alzheimer's dementia, and used as a health functional food composition for alleviating reduced memory, and improving or enhancing learning ability and cognitive function.

Description

홍삼, 원지, 복령, 모렐 및 초석잠의 혼합발효물로부터 얻어지는 인지능 개선용 옥고 {Cognitive improvable Oggo obtained from fermented and extracted mixture of Red ginseng, Polygala tenuifolia, Poliacocos, and Rehmanneh Glutinosa}Cognitive improvable Oggo obtained from fermented and extracted mixture of Red ginseng, Polygala tenuifolia, Poliacocos, and Rehmanneh Glutinosa}

본 발명은 홍삼, 원지, 복령, 모렐 및 초석잠의 혼합발효물을 유효성분으로 함유하는 인지능 개선용 옥고에 관한 것이다.The present invention relates to an okgo for improving cognitive ability containing a mixed fermented product of red ginseng, raw ginseng, bokryeong, morel and choseokjam as an active ingredient.

의학 기술의 발달과 생활수준의 향상으로 한국인의 평균수명은 지난 반세기 동안 1.5배 가까이 연장되었으며, 이로 인하여 전체인구에 대한 노인 인구의 비율이 급속하게 증가되었다. 통계청이 발표한 2005년 자료에 의하면, 현재 우리나라 사람의 평균수명은 78.5세이고 2000년도에 이미 65세 이상의 인구 비율이 약 7%에 달하는 등 급속하게 노령화 사회로 진입하고 있음을 알 수 있다. 또한, 우리나라는 2018년에 이미 고령사회로 진입하여, 2026년에는 노인 인구의 비율이 20% 이상인 초고령화 사회에 진입할 것으로 예측되고 있다. 그리고 2004년에 12.1%이었던 노년 부양비(65세 이상 인구수/15~64세 인구수)는 2020년에는 21.3%, 2030년에는 35.7%로 높아질 전망이다. 2004년에 생산 가능인구 8.2명당 노인 1명을 부양했다면, 2010년에는 6.8명당 노인 1명, 2020년에는 4.7명당 노인 1명, 2030년에는 2.8명당 노인 1명을 부양하는 셈이 된다. 이는 국가적으로 경제 성장 저하, 국가경쟁력 감소 및 세대간 갈등 심화로 인한 사회적 부담의 가능성이 커지는 것을 의미한다.With the development of medical technology and the improvement of living standards, the average life expectancy of Koreans has been extended by 1.5 times over the past half century, which has resulted in a rapid increase in the proportion of the elderly population to the total population. According to the 2005 data released by the National Statistical Office, the average life expectancy of Koreans is 78.5 years old, and in 2000, the proportion of the population over 65 years old reached about 7%, indicating that Korea is rapidly entering an aging society. In addition, Korea has already entered an aged society in 2018, and it is predicted that by 2026, it will enter a super-aged society in which the proportion of the elderly population is more than 20%. In addition, the old-age dependency ratio (the number of people aged 65 and over/the number of people aged 15 to 64), which was 12.1% in 2004, is expected to rise to 21.3% in 2020 and 35.7% in 2030. If one elderly person was supported for every 8.2 working-age population in 2004, this would be equivalent to supporting one senior for every 6.8 people in 2010, one senior for every 4.7 people in 2020, and one senior for every 2.8 people in 2030. This means that the possibility of social burden due to a decrease in national economic growth, a decrease in national competitiveness, and an intensification of intergenerational conflict is increasing.

이러한 사회적 전망과 현실을 반영하듯 최근에는 노인들에게 많이 발생하는 질환에 관심이 집중되고 있다. 특히, 치매(dementia)는 고령일수록 발병률이 높아 75~84세의 노인의 경우 발병률이 약 20%, 85세 이상의 노인에게는 약 50% 정도인 것으로 알려져 있고, 질병의 특성상 타인의 보살핌에 절대적으로 의존하여야 하므로 중대한 사회적 관심사로 떠오르고 있다. 또한, 치매로 인한 경제적 손실액이 매우 커지고 있으며, 근로 손실 등의 제반 사항을 모두 고려할 때 우리나라의 경우 치매 치료로 인한 사회적 비용은 3조 4000억~4조 4000억 원으로 추산되고 있다. 미국의 경우, 치매 치료로 인한 손실 비용이 매년 약 1000~1200억 달러에 달하는 것으로 추정된다. 즉, 사회가 점차 고령화되면서 노인성 치매는 21세기 인류가 해결해야 할 최대의 보건문제로 등장하고 있다. 이에 따라, 치매와 우울증을 비롯한 인지능장애의 예방 및 치료가 가능한 기능성 물질과 식품 등의 개발에 대한 요구가 커지고 있는 실정이다.As if reflecting these social prospects and realities, recently, attention has been focused on diseases that occur a lot in the elderly. In particular, it is known that the incidence rate of dementia increases with age, and the incidence rate is about 20% for the elderly aged 75 to 84 and about 50% for the elderly over 85 years of age. Due to the nature of the disease, it is absolutely dependent on the care of others. Therefore, it is emerging as a major social concern. In addition, the amount of economic loss due to dementia is very large, and considering all matters such as labor loss, the social cost of dementia treatment in Korea is estimated to be 3.4 trillion to 4.4 trillion won. In the United States, it is estimated that the cost of treatment for dementia is between $100 billion and $120 billion annually. In other words, as society is gradually aging, senile dementia is emerging as the biggest health problem to be solved by mankind in the 21st century. Accordingly, there is a growing demand for the development of functional substances and foods capable of preventing and treating cognitive disorders including dementia and depression.

노인성 치매로부터 유발되는 기억력 및 학습능력의 상실 등 인지 기능 장애는 대뇌 기저부의 아세틸콜린(Acethylcholine)성 신경세포의 손상에서 비롯된다는 연구결과에 의해, 무스카린성 아세틸콜린 수용체(muscarine acetylcholine receptor)에 대한 효능제(agonist), 아세틸콜린 생성촉진제, 아세틸콜린 분해효소(Acetylcholinesterase, AChE) 저해제 등 여러 가지 작용기전에 따라 아세틸콜린성 신경세포의 기능을 강화시켜줄 수 있는 약물들이 개발되어 왔다. Cognitive dysfunction, such as loss of memory and learning ability caused by senile dementia, is caused by damage to acetylcholine neurons at the base of the brain. Drugs that can enhance the function of acetylcholinergic neurons have been developed according to various mechanisms of action, such as agonists, acetylcholine production promoters, and acetylcholinesterase (AChE) inhibitors.

실제로 현재 각국에서 사용되고 있는 알츠하이머병 치료제는 아세틸콜린 분해효소 억제제가 대부분이며, 타크린(tacrine)과 도네페질(donepezil) 등도 이에 속한다. 이 밖에도 리바스티그민(rivastigmin), 갈라타민(galatamine) 등이 사용되고 있다.In fact, most Alzheimer's disease drugs currently used in countries are acetylcholinesterase inhibitors, and tacrine and donepezil are also included. In addition, rivastigmin and galatamine are used.

현재 퇴행성 뇌신경 질환으로서의 인지능 또는 기억능력 저하 현상의 개선을 위한 더욱 효과적인 제제(건강기능성 식품 소재 포함)의 개발에 대한 관심이 어느 때보다 높은 시기이다. 결국 치매 발병에 대한 뇌신경 세포의 기작을 대상으로 새로운 다중 기능성 효과(multi-functional effect)를 갖는 소재의 개발을 위한 연구가 필요한 실정이다.At present, interest in the development of more effective agents (including health functional food ingredients) for the improvement of cognitive or memory deterioration as a degenerative cranial nerve disease is higher than ever. Ultimately, there is a need for research on the development of materials with novel multi-functional effects targeting the mechanisms of cranial nerve cells for the onset of dementia.

한편, 인삼은 일반적으로 가공방법에 따라 백삼과 홍삼으로 구별되며 백삼은 밭에서 채굴한 가공되지 아니한 인삼 즉, 수삼 그대로 건조한 것이고 홍삼은 수삼과 건삼을 증숙하여 건조 가공한 것으로 제조과정 중에서 사포닌 변형과 아미노산 변화 그리고 갈변화 등의 여러 화학적인 변화가 수반된다. 특히 홍삼의 제조과정에서 발생되는 열에 의해 인삼에는 존재하지 않는 홍삼만의 특유 성분인 진세노사이드 Rg2, Rg3, Rhl, Rh2 등의 새로운 성분이 생성되며, 이러한 홍삼 특유 성분인 진세노사이드들은 암예방 작용, 암세포 성장억제 작용, 혈압 강하작용, 뇌신경세포 보호 및 학습능력 개선작용, 항혈전 작용, 항산화 작용 등에 관여하는 것으로 알려져 있다.On the other hand, ginseng is generally divided into white ginseng and red ginseng according to the processing method. White ginseng is unprocessed ginseng mined in the field, that is, fresh ginseng is dried as it is, and red ginseng is dried and processed by steaming fresh ginseng and dried ginseng. Numerous chemical changes such as amino acid changes and browning are involved. In particular, the heat generated during the manufacturing process of red ginseng creates new ingredients such as ginsenosides Rg2, Rg3, Rhl, and Rh2, which are unique ingredients of red ginseng that do not exist in ginseng. It is known to be involved in action, cancer cell growth inhibitory action, blood pressure lowering action, brain nerve cell protection and learning ability improvement action, antithrombotic action, and antioxidant action.

원지(polygalatenuifolia willd)는 쥐손이풀목 원지과의 여러해살이 풀로써 뿌리를 말려서 사용한다. 맵고 쓴맛과 함께 따뜻한 성질을 가지고 있다. 거담 및 진정, 최면 작용을 가지고 있는 것으로 알려져 있으며, 건망증, 신경쇠약(neurasthenia), 심계 항진 그리고 불면증 등에 널리 처방되고 있다. 이러한 원지의 효능은 다방면으로 연구가 진행되었으며, 중추신경계에 대한 신경보호효과, 학습능력 개선효과, 항스트레스 효과 및 항우울효과 등이 보고되어 있다.Polygalatenuifolia willd is a perennial grass of the order Asteraceae, which is used by drying the roots. It has a warm property with a spicy and bitter taste. It is known to have expectorant, sedative, and hypnotic effects, and is widely prescribed for forgetfulness, neurasthenia, palpitations and insomnia. The efficacy of this base paper has been studied in various fields, and neuroprotective effects on the central nervous system, learning ability improvement effects, anti-stress effects, and antidepressant effects have been reported.

복령은 상록교목소나무의 뿌리에서 기생하는 구멍쟁이버섯과 식물의 곰팡이 덩어리이다. 우리나라 전국 각지의 산에서 자라는 소나무 뿌리에 기생하고 있으며, 중국의 안휘, 운남 등지에 분포한다. 구멍쟁이버섯에서 항상 보이는 것은 균핵으로서 대부분은 불규칙한 괴상, 구형, 편평형, 장원형, 장타원형이며 크기가 다른 여러 종류가 있다. 내부의 색깔에 따라 백복령, 적복령으로 나누며 소나무 뿌리를 가운데 두고 형성된 것을 복신이라 한다. 통상적으로 적복령은 이습, 백복령은 건비, 복신은 안신하는 것으로 알려져 있으나 최근에는 적복령과 백복령을 나누지 않고 모두 복령이라 한다. 복령은 이뇨작용 및 혈당 저하, 소화기에 대한 이완작용이 있다.Bokryeong is a fungus mass of the fungus and plant parasitic on the root of an evergreen arboreal pine tree. It is parasitic on the roots of pine trees growing in the mountains of Korea, and is distributed in Anhui and Yunnan, China. The sclerotia that are always seen in the oyster mushroom are mostly irregular mass, spherical, flat, oval, and long oval, and there are several types of different sizes. According to the color of the interior, it is divided into Baekbok-ryeong and Jeokbok-ryeong. In general, it is known that Jeokbokryeong is Yi-seup, Baekbokryeong is Geonbi, and Bokshin is not believed, but recently, Jeokbokryeong and Baekbokryeong are not divided and all are called Bokryeong. Bokryeong has a diuretic effect, lowering blood sugar, and relaxing effect on the digestive system.

한편, 한국등록특허 제10-1304707호에는 '인삼을 유효성분으로 함유하는 인지 기능 개선 조성물'에 대해 개시하고 있으며, 한국공개특허 제10-2017-0054157호에는 '인삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 인지기능 개선용 조성물 및 이의 제조 방법'에 대해 개시하고 있다. On the other hand, Korean Patent No. 10-1304707 discloses 'a composition for improving cognitive function containing ginseng as an active ingredient', and Korean Patent Publication No. 10-2017-0054157 discloses 'a composition containing ginseng extract as an active ingredient'. A composition for improving cognitive function and a method for preparing the same are disclosed.

하지만, 본 발명의 '홍삼, 원지, 모렐, 초석잠 및 복령의 “혼합 발효물”을 유효성분으로 하는 인지기능 또는 우울증 개선용 조성물'에 대해서는 개시된 바가 없다. 또한, 인지기능 효과에 대한 구체적 실험방법(동물실험)이 적절하게 설명되지 않았다.However, there is no disclosure about the 'composition for improving cognitive function or depression using the "mixed fermented product" of red ginseng, raw ginseng, morel, choseokjam and bokryeong as an active ingredient of the present invention. In addition, the specific experimental method (animal test) for the effect of cognitive function was not adequately explained.

본 발명에서는 원지, 모렐, 초석잠 및 복령를 홍삼과 함께 복합균주로 발효하는 기술을 적용하였다. 또한 얻어진 발효추출물의 항산화 효과를 측정·비교하였으며, 인지기능 개선 효과를 마우스 미로실험으로 확인하였다. In the present invention, the technology of fermenting raw paper, morel, choseokjam and bokryeong together with red ginseng as a complex strain was applied. In addition, the antioxidant effect of the obtained fermented extract was measured and compared, and the cognitive function improvement effect was confirmed by a mouse maze experiment.

한국등록특허공보 제10-1304707호 (2013.09.06 공고)Korea Patent Publication No. 10-1304707 (2013.09.06 Announcement) 한국공개특허공보 제10-2017-0054157호 (2017.05.17 공개)Korean Patent Publication No. 10-2017-0054157 (published on May 17, 2017)

본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명에서는 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 부크네리(Lactobacillus buchneri) 및 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rharmnosus) 균주를 조합하여 홍삼, 원지, 모렐, 초석잠 및 복령의 혼합물을 발효하였을 때, 상기 3종의 균주를 각각 사용한 경우와 비교하여 아세틸콜린분해효소(acetylchol,nesterase)의 활성 저해효과가 우수할 뿐만 아니라, 스코폴라민 유도로 인해 저하된 마우스 모델의 인지기능 및 기억력에 대하여 현저한 회복 능력을 나타내는 것을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다. The present invention has been derived by the above requirements, and in the present invention, Lactobacillus plantarum , Lactobacillus buchneri , and Lactobacillus rharmnosus strains are combined to produce red ginseng, raw paper, When a mixture of Morel, Choseokjam and Bokryeong was fermented, compared to the case of using the above three strains respectively, the inhibitory effect of acetylcholine degrading enzyme (acetylchol, nesterase) was excellent, and due to scopolamine induction, The present invention was completed by confirming that the reduced mouse model exhibited remarkable recovery ability for cognitive function and memory.

상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 홍삼, 원지, 모렐, 초석잠 및 복령의 혼합 발효추출물을 유효성분으로 하는 인지기능 또는 기억능력 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.In order to solve the above problems, the present invention provides a health functional food composition for improving cognitive function or memory ability using a mixed fermented extract of red ginseng, raw paper, morel, choseokjam and bokryeong as an active ingredient.

또한, 본 발명은 홍삼, 원지, 모렐, 초석잠 및 복령의 혼합 발효물을 유효성분으로 함유하는 퇴행성 뇌신경 질환과 우울증의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating degenerative cranial nerve disease and depression containing a mixed fermented product of red ginseng, raw ginseng, morel, choseokjam and bokryeong as an active ingredient.

본 발명의 홍삼, 원지, 모렐, 초석잠 및 복령의 혼합 발효추출물은 아세틸콜린을 파괴하여 신경전달을 억제하는 아세틸콜린 분해효소의 활성을 저해하는 효과가 우수하고, 스코폴라민으로 유도된 기억력 손상 마우스의 기억력 및 인지능력에 대한 회복 능력이 우수하므로, 알츠하이머성 치매 등의 퇴행성 뇌신경 질환의 예방 또는 치료에 유용하게 사용될 가능성이 높다. 또한 저하된 기억력, 학습능력 및 인지기능을 개선 또는 증진시키는 건강기능식품 조성물로 활용될 수 있다.The mixed fermented extract of red ginseng, Wonji, Morel, Choseokjam and Bokryeong of the present invention has an excellent effect of inhibiting the activity of acetylcholine degrading enzyme, which inhibits neurotransmission by destroying acetylcholine, and scopolamine-induced memory impairment. Since the mouse has excellent recovery ability for memory and cognitive ability, it is highly likely to be usefully used for the prevention or treatment of degenerative cranial nerve diseases such as Alzheimer's dementia. In addition, it can be used as a health functional food composition for improving or enhancing the reduced memory, learning ability and cognitive function.

도 1은 다양한 시료를 인간 신경모세포종 세포주인 SH-SY5Y 세포에 처리한 후 세포 생존율을 확인한 결과이다. con은 아무것도 처리하지 않은 대조군이며, scop는 기억력 손상 유도를 위해 스코폴라민(scopolamine)을 처리한 군이며, S1은 홍삼 분말을 처리한 군이며; S2는 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum) WIKIM 18 균주를 이용하여 제조된 홍삼, 원지, 모렐, 초석잠 및 복령의 혼합 발효물을 처리한 군이며; S3은 락토바실러스 부크네리(Lactobacillus buchneri) 균주를 이용하여 제조된 홍삼, 원지, 모렐, 초석잠 및 복령의 혼합 발효물을 처리한 군이며; S4는 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rharmnosus) 균주를 이용하여 제조된 홍삼, 원지, 모렐, 초석잠 및 복령의 혼합 발효물을 처리한 군이며; S5는 락토바실러스 플랜타룸 WIKIM 18, 락토바실러스 부크네리 및 락토바실러스 람노서스 균주의 조합을 이용하여 제조된 홍삼, 원지, 모렐, 초석잠 및 복령의 혼합 발효물을 처리한 군을 의미한다. ***는 스코폴라민(scopolamine)을 처리한 군에 비해 세포 증식 효과가 통계적으로 유의하다는 것을 의미하며 p값이 0.001 미만인 것을 의미한다.
도 2는 다양한 시료를 SH-SY5Y 세포에 처리한 후 아세틸콜린 분해효소(acetylcholnesterase)의 활성 저해효과를 확인한 결과이다. ***는 스코폴라민(scopolamine)을 처리한 군에 비해 아세틸콜린 분해효소의 활성 저해효과가 통계적으로 유의하다는 것을 의미하며 p값이 0.001 미만인 것을 의미한다.
도 3은 다양한 시료를 마우스 모델에 1일 2회씩 7일 동안 경구투여하고, 5일 동안 수중미로 학습 후 14일째에 스코폴라민을 처리하여 단기기억력이 손상된 마우스가 플랫폼(platform)을 찾아가는 이동동선을 확인한 결과이다.
도 4는 다양한 시료를 마우스 모델에 1일 2회씩 7일 동안 경구투여하고, 5일 동안 수중미로 학습 후 14일째에 스코폴라민을 처리하여 단기기억력이 손상된 마우스가 플랫폼을 찾아가는데 머무는 시간(latency time)을 측정한 결과이다. ***는 스코폴라민(scopolamine)을 처리한 군에 비해 단기기억력 손상의 회복능력이 통계적으로 유의하다는 것을 의미하며 p값이 0.001 미만인 것을 의미한다.
도 5는 다양한 시료를 마우스 모델에 1일 2회씩 7일 동안 경구투여하고, 5일 동안 수중미로 학습 후 21일째에 스코폴라민을 처리하여 장기기억력이 손상된 마우스가 플랫폼(platform)을 찾아가는 이동동선을 확인한 결과이다.
도 6은 다양한 시료를 마우스 모델에 1일 2회씩 7일 동안 경구투여하고, 5일 동안 수중미로 학습 후 21일째에 스코폴라민을 처리하여 장기기억력이 손상된 마우스가 플랫폼을 찾아가는데 머무는 시간을 측정한 결과이다. ***는 스코폴라민(scopolamine)을 처리한 군에 비해 장기기억력 감퇴의 회복능력이 통계적으로 유의하다는 것을 의미하며 p값이 0.001 미만인 것을 의미한다.
1 is a result of confirming the cell viability after processing various samples in SH-SY5Y cells, a human neuroblastoma cell line. con is the untreated control group, scop is the group treated with scopolamine to induce memory impairment, and S1 is the group treated with red ginseng powder; S2 is Lactobacillus plantarum ( Lactobacillus plantarum ) WIKIM 18 is a group treated with a mixed fermented product of red ginseng, Wonji, Morel, Choseokjam and Bokryeong prepared using the strain; S3 is Lactobacillus buchneri ( Lactobacillus buchneri ) is a group treated with a mixed fermented product of red ginseng, Wonji, Morel, Choseokjam and Bokryeong prepared using a strain; S4 is Lactobacillus rhamnosus ( Lactobacillus rharmnosus ) Red ginseng prepared using a strain, Wonji, Morel, Choseokjam, and a group treated with a mixed fermented product of Bokryeong; S5 is Lactobacillus plantarum WIKIM 18, Lactobacillus bukneri and Lactobacillus rhamnosus strains prepared using a combination of red ginseng, raw paper, Morel, Choseokjam and bokryeong means a group treated with a mixed fermented product. *** means that the cell proliferation effect is statistically significant compared to the group treated with scopolamine, and the p value is less than 0.001.
Figure 2 is the result of confirming the activity inhibitory effect of acetylcholine degrading enzyme (acetylcholnesterase) after treating various samples to SH-SY5Y cells. *** means that the inhibitory effect of acetylcholinease activity is statistically significant compared to the group treated with scopolamine, and the p value is less than 0.001.
Figure 3 shows the movement of a mouse with impaired short-term memory by oral administration of various samples to a mouse model twice a day for 7 days, and treatment with scopolamine on the 14th day after learning the water maze for 5 days. is the result of checking
4 shows a mouse model with various samples orally administered twice a day for 7 days, and treated with scopolamine on the 14th day after learning the water maze for 5 days. The latency time for mice with impaired short-term memory to find the platform. ) is the measurement result. *** means that the recovery ability of short-term memory impairment is statistically significant compared to the group treated with scopolamine, and the p value is less than 0.001.
Figure 5 is a movement movement of mice with impaired long-term memory by oral administration of various samples to a mouse model twice a day for 7 days, and scopolamine treatment on the 21st day after learning the water maze for 5 days is the result of checking
6 is a mouse model by oral administration of various samples twice a day for 7 days, and after learning the water maze for 5 days, treated with scopolamine on the 21st day to measure the length of time the mouse with impaired long-term memory stays to find the platform. It is the result. *** means that the recovery ability of long-term memory loss is statistically significant compared to the group treated with scopolamine, and the p value is less than 0.001.

본 명세서 및 청구 범위에 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정해서 해석되어서는 안되며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다.The terms or words used in the present specification and claims are not to be construed as limited in their ordinary or dictionary meanings, and that the inventor may appropriately define the concepts of the terms in order to best describe his invention. Based on the principle, it should be interpreted as meaning and concept consistent with the technical idea of the present invention.

따라서 본 명세서에 기재된 실시예, 참조예 및 도면에 기술된 사항은 본 발명의 가장 바람직한 일 예에 불과할 뿐이고 본 발명의 기술적 사상을 모두 대변하는 것은 아니므로, 본 출원시점에 있어서 이들을 대체할 수 있는 다양한 균등물과 변형예들이 있을 수 있음을 이해하여야 한다.Therefore, the matters described in the embodiments, reference examples and drawings described in this specification are only the most preferred examples of the present invention and do not represent all of the technical spirit of the present invention, so they can be substituted at the time of the present application. It should be understood that various equivalents and modifications may be made.

본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 홍삼, 원지, 모렐, 초석잠 및 복령의 혼합 발효물을 유효성분으로 함유하는 인지기능 또는 기억능력 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.In order to achieve the object of the present invention, the present invention provides a health functional food composition for improving cognitive function or memory ability containing a mixed fermented product of red ginseng, raw paper, morel, choseokjam and bokryeong as an active ingredient.

본 발명의 건강기능식품 조성물에서, 상기 홍삼, 원지, 모렐, 초석잠 및 복령의 혼합은 1~10:1~10:1~10:1~10의 중량비로 이루어진 것일 수 있으며, 바람직하게는 1~9:1~5:1~4:1~4의 중량비로 이루어진 것일 수 있으며, 더 바람직하게는 6:1:1:1:1의 중량비로 이루어진 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.In the health functional food composition of the present invention, the mixture of red ginseng, raw paper, morel, choseokjam and bokryeong may consist of a weight ratio of 1 to 10:1 to 10:1 to 10:1 to 10, preferably 1 It may be composed of a weight ratio of ~9:1 to 5:1 to 4:1 to 4, and more preferably, may be composed of a weight ratio of 6:1:1:1:1, but is not limited thereto.

또한, 상기 발효물은 홍삼, 원지, 모렐, 초석잠 및 복령의 혼합물에 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 부크네리(Lactobacillus buchneri) 및 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rharmnosus)를 접종하여 제조되는 것일 수 있으며, 바람직하게는 바람직하게는 락토바실러스 플랜타룸, 락토바실러스 부크네리 및 락토바실러스 람노서스를 1~10:1~10:1~10의 중량비로 혼합한 혼합물을 접종하여 제조되는 것일 수 있으며, 더 바람직하게는 락토바실러스 플랜타룸, 락토바실러스 부크네리 및 락토바실러스 람노서스를 4:3:3의 중량비로 혼합한 혼합물을 접종하여 제조되는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. In addition, the fermented product is Lactobacillus plantarum ( Lactobacillus plantarum ), Lactobacillus buchneri ( Lactobacillus buchneri ) and Lactobacillus rharmnosus ( Lactobacillus rharmnosus ) is prepared by inoculating a mixture of red ginseng, raw paper, morel, choseokjam and bokryeong It may be one, preferably Lactobacillus plantarum, Lactobacillus bukneri and Lactobacillus rhamnosus in a weight ratio of 1 to 10:1 to 10:1 to 10 It may be prepared by inoculating a mixture of 10 , More preferably, Lactobacillus plan tarum, Lactobacillus bukneri and Lactobacillus rhamnosus may be prepared by inoculating a mixture in a weight ratio of 4:3:3, but is not limited thereto.

또한, 상기 발효물은 유효성분 이외에 과실액 및 벌꿀을 추가로 포함할 수 있으며, 이에 제한되지 않는다. 상기 과실액은 유자, 레몬 및 귤을 착즙하고 농축하여 제조할 수 있으며, 노니, 레스베라트롤 등도 활용할 수 있다.In addition, the fermented product may further include fruit juice and honey in addition to the active ingredient, but is not limited thereto. The fruit liquid may be prepared by squeezing and concentrating citron, lemon and tangerine, and noni, resveratrol, and the like may also be used.

본 발명의 인지기능 및 우울증 또는 기억능력 개선용 건강기능식품 조성물은 분말, 과립, 환, 정제, 캡슐, 캔디, 시럽 및 음료 중에서 선택된 어느 하나의 제형으로 제조될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. The health functional food composition for improving cognitive function and depression or memory ability of the present invention may be prepared in any one formulation selected from powder, granule, pill, tablet, capsule, candy, syrup and beverage, but is not limited thereto.

상기 건강기능식품 조성물은 우울증과 인지기능 또는 기억능력을 개선 시키기 위해 섭취할 수 있는 것이면 특별히 제한되지 않는다.The health functional food composition is not particularly limited as long as it can be ingested to improve depression and cognitive function or memory ability.

본 발명의 건강기능식품 조성물을 식품첨가물로 사용하는 경우, 상기 건강기능식품 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분은 그의 사용 목적(예방 또는 개선)에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시 본 발명의 건강기능식품 조성물은 원료에 대하여 15 중량부 이하, 바람직하게는 10 중량부 이하의 양으로 첨가된다. 그러나 건강을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로 사용될 수 있다.When the health functional food composition of the present invention is used as a food additive, the health functional food composition may be added as it is or used together with other foods or food ingredients, and may be appropriately used according to a conventional method. The active ingredient may be used appropriately depending on the purpose of its use (prevention or improvement). In general, in the production of food or beverage, the health functional food composition of the present invention is added in an amount of 15 parts by weight or less, preferably 10 parts by weight or less, based on the raw material. However, in the case of long-term intake for health purposes, the amount may be less than the above range, and since there is no problem in terms of safety, the active ingredient may be used in an amount above the above range.

상기 건강기능식품의 종류에 특별한 제한은 없다. 상기 건강기능식품 조성물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.There is no particular limitation on the type of the health functional food. Examples of foods to which the health functional food composition can be added include sausage, bread, chocolate, candy, snacks, confectionery, pizza, ramen, other noodles, dairy products including ice cream, various soups, beverages, alcoholic beverages and vitamin complexes etc., and includes all health foods in the ordinary sense.

또한, 본 발명의 건강기능식품 조성물은 식품, 특히 기능성 식품으로 제조될 수 있다. 본 발명의 기능성 식품은 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분을 포함하며, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소 및 조미제를 포함한다. 예컨대, 드링크제로 제조되는 경우에는 유효성분 이외에 천연 탄수화물 또는 향미제를 추가 성분으로서 포함시킬 수 있다. 상기 천연 탄수화물은 모노사카라이드(예컨대, 글루코오스, 프럭토오스 등),디사카라이드(예컨대, 말토스, 수크로오스 등), 올리고당, 폴리사카라이드(예컨대, 덱스트린, 시클로덱스트린 등), 또는 당알코올(예컨대, 자일리톨, 소르비톨, 에리쓰리톨 등)인 것이 바람직하다. 상기 향미제는 천연 향미제(예컨대, 타우마틴, 스테비아 추출물 등)와 합성 향미제(예컨대, 사카린, 아스파르탐 등)를 이용할 수 있다.In addition, the health functional food composition of the present invention may be prepared as a food, particularly a functional food. The functional food of the present invention includes ingredients commonly added during food production, for example, proteins, carbohydrates, fats, nutrients and seasonings. For example, when manufactured as a drink, natural carbohydrates or flavoring agents may be included as additional ingredients in addition to the active ingredient. The natural carbohydrates include monosaccharides (eg, glucose, fructose, etc.), disaccharides (eg, maltose, sucrose, etc.), oligosaccharides, polysaccharides (eg, dextrin, cyclodextrin, etc.), or sugar alcohols ( For example, xylitol, sorbitol, erythritol, etc.) is preferable. As the flavoring agent, natural flavoring agents (eg, taumatine, stevia extract, etc.) and synthetic flavoring agents (eg, saccharin, aspartame, etc.) may be used.

상기 건강기능식품 조성물 이외에 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 더 함유할 수 있다. 이러한 상기 첨가되는 성분의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 건강기능식품 조성물 100 중량부에 대하여, 0.01 내지 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.In addition to the health functional food composition, various nutrients, vitamins, electrolytes, flavoring agents, coloring agents, pectic acid and its salts, alginic acid and its salts, organic acids, protective colloidal thickeners, pH adjusters, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohol, carbonic acid It may further contain a carbonation agent and the like used in beverages. The ratio of these added ingredients is not very important, but is generally selected in the range of 0.01 to 0.1 parts by weight based on 100 parts by weight of the health functional food composition of the present invention.

또한, 본 발명은 홍삼, 원지, 모렐, 초석잠 및 복령의 혼합 발효물을 유효성분으로 함유하는 퇴행성 뇌신경 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of degenerative cranial nerve disease containing a mixed fermented product of red ginseng, raw ginseng, morel, choseokjam and bokryeong as an active ingredient.

본 발명의 퇴행성 뇌신경 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물에서, 인지기능 또는 기억능력의 퇴화로 인해 중추신경계의 신경세포에 퇴행성 변화가 유발되는 질환은 퇴행성 뇌신경 질환으로, 대표적인 퇴행성 뇌신경 질환에는 알츠하이머성 치매(Alzheimer's disease), 진행성 핵상마비(Progressive supranuclear palsy), 선조체-흑질 퇴행증(Striatonigral degeneration), 헌팅톤병(Huntington's disease), 근위축성 측색 경화증(Amyotrophic lateral sclerosis: ALS), 피질-기저핵 퇴행증(Cortico-basal ganlionic degeneration), 미만성루이소체질환(Diffuse Lewy body disease), 파킨슨-ALS-치매 복합증(Parkinson-ALS-dementia complex of Guam) 또는 피크병(Pick's disease)이 있으나, 이에 제한되지 않는다.In the pharmaceutical composition for preventing or treating degenerative cranial nerve disease of the present invention, a disease in which degenerative changes are induced in nerve cells of the central nervous system due to deterioration of cognitive function or memory ability is a degenerative cranial nerve disease, and a representative degenerative cranial nerve disease includes Alzheimer's dementia (Alzheimer's disease), progressive supranuclear palsy, striatonigral degeneration, Huntington's disease, amyotrophic lateral sclerosis (ALS), cortico-basal nuclear degeneration -basal ganlionic degeneration, diffuse Lewy body disease, Parkinson-ALS-dementia complex of Guam, or Pick's disease.

본 발명의 약학 조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 또는 희석제를 더 포함할 수도 있다.The pharmaceutical composition of the present invention may further include an appropriate carrier, excipient or diluent commonly used in the preparation of pharmaceutical compositions.

본 발명에 따른 조성물의 약학적 투여 형태는 단독으로 또는 타 약학적 활성 화합물과 결합뿐만 아니라 적당한 집합으로 사용될 수 있다.The pharmaceutical dosage form of the composition according to the present invention may be used alone or in combination with other pharmaceutically active compounds, as well as in any suitable group.

본 발명에 따른 약학 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구용 제형, 외용제, 좌제 또는 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 본 발명의 약학 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토스, 텍스트로스 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로스, 메틸 셀룰로스, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조 혼합물을 들 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 약학 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트, 수크로스 또는 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위탭솔, 마크로골, 트윈 61, 카카오지, 라우진지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.The pharmaceutical composition according to the present invention may be formulated in the form of powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols, etc., external preparations, suppositories, or sterile injection solutions according to conventional methods, respectively. can Carriers, excipients and diluents that may be included in the pharmaceutical composition of the present invention include lactose, dextrose sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, acacia gum, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, cellulose, methyl cellulose, microcrystalline cellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, and a mixture of methylhydroxybenzo. Solid preparations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, capsules, etc., and these solid preparations include at least one excipient in the pharmaceutical composition, for example, starch, calcium carbonate, sucrose or lactose, gelatin, etc. is prepared by mixing In addition to simple excipients, lubricants such as magnesium stearate and talc are also used. Liquid formulations for oral use include suspensions, internal solutions, emulsions, syrups, etc. In addition to water and liquid paraffin, which are commonly used simple diluents, various excipients such as wetting agents, suspensions, emulsions, freeze-dried formulations, and preservatives etc. may be included. Formulations for parenteral administration include sterile aqueous solutions, non-aqueous solutions, suspensions, emulsions, freeze-dried preparations, and suppositories. Non-aqueous solvents and suspending agents include propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oils such as olive oil, and injectable esters such as ethyl oleate. As the base of the suppository, Witabsol, Macrogol, Tween 61, cacao butter, laugin oil, glycerogelatin, and the like can be used.

본 발명의 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다를 수 있으며, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나, 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 홍삼, 원지, 모렐, 초석잠 및 복령의 혼합 발효물은 1일 기준으로 0.1 내지 100㎎/kg으로, 바람직하게는 10 내지 100㎎/kg으로 투여하는 것이 좋다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.A preferred dosage of the composition of the present invention may vary depending on the patient's condition and weight, the degree of disease, drug form, administration route and period, and may be appropriately selected by those skilled in the art. However, for a desirable effect, the mixed fermented product of red ginseng, raw ginseng, morel, choseokjam and bokryeong of the present invention is administered at 0.1 to 100 mg/kg, preferably 10 to 100 mg/kg, per day. good. Administration may be administered once a day, or may be administered in several divided doses. The above dosage does not limit the scope of the present invention in any way.

본 발명의 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하 주사에 의해 투여될 수 있다.The composition of the present invention may be administered to mammals such as rats, mice, livestock, and humans by various routes. Any mode of administration can be envisaged, for example, by oral, rectal or intravenous, intramuscular, subcutaneous injection.

이하, 본 발명의 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, an embodiment of the present invention will be described in detail. However, the following examples are merely illustrative of the present invention, and the content of the present invention is not limited to the following examples.

제조예 1. 홍삼, 원지, 모렐, 초석잠 및 복령 혼합 발효물 제조Preparation Example 1. Preparation of mixed fermented product of red ginseng, raw paper, morel, choseokjam and bokryeong

분말 형태인 고려홍삼(대한민국산, 건조 4~6년근), 원지, 모렐, 초석잠 및 복령을 6:1:1:1:1의 중량비로 혼합한 혼합물에 정제수를 첨가하고 고압가열 살균하였다. Purified water was added to a mixture of powdered Korean red ginseng (from Korea, dried 4 to 6 years old), raw paper, morel, choseokjam, and bokryeong in a weight ratio of 6:1:1:1:1, followed by high-pressure sterilization.

발효균주로서 락토바실러스 플랜타룸 위킴 18(Lactobacillus plantarum WIKIM 18, KFCC 11588P, 세계김치연구소), 락토바실러스 부크네리(Lactobacillus buchneri, KCCM 40982, ATCC 4005, DSM 20057) 및 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rharmnosus, KCCM 32405, ATCC 7469, DSM 20021) 균주를 세계김치연구소 및 한국미생물보존센터로부터 분양받았다. MRS 액체배지에 각각 배양하여 원심분리한 후 상등액을 제거하고 펠렛을 동결건조하였다. Lactobacillus plan tarum wikim 18 as a fermentation strain (Lactobacillus plantarum WIKIM 18, KFCC 11588P, World Kimchi Research Institute), Lactobacillus Buk Neri (Lactobacillus buchneri, KCCM 40982, ATCC 4005, DSM 20057) and Lactobacillus ramno suspension (Lactobacillus rharmnosus, KCCM 32405, ATCC 7469, DSM 20021) strains were distributed from the World Institute of Kimchi and the Korea Microorganism Conservation Center. After culturing each in MRS broth and centrifuging, the supernatant was removed and the pellet was freeze-dried.

상기 3종의 발효 균주 분말을 4:3:3의 중량비로 혼합한 후 상기 살균한 홍삼, 원지, 모렐, 초석잠 및 복령의 혼합물 100 중량부에 대하여 1 중량부를 접종하여 30℃에서 2일간 배양하였다. 최종적으로, 홍삼, 원지, 모렐, 초석잠 및 복령의 혼합 발효물을 수득하고 동결건조하여 분말화하였다. 비교 대조군으로서, 하기 표 1에 개시한 바와 같이 각 시료들을 준비하였고, 원재료를 대상으로 3종의 발효 균주를 단독으로 사용하여 각 발효물(S2 내지 S4)을 제조하였으며, 동결건조하여 분말화하였다. After mixing the three types of fermented strain powder in a weight ratio of 4:3:3, 1 part by weight was inoculated with respect to 100 parts by weight of the sterilized mixture of red ginseng, raw paper, morel, choseokjam and bokryeong, and cultured at 30°C for 2 days. did. Finally, a mixed fermented product of red ginseng, Wonji, Morel, Choseokjam and Bokryeong was obtained and lyophilized to powder. As a comparative control, each sample was prepared as shown in Table 1 below, and each fermented product (S2 to S4) was prepared by using only three fermentation strains as a raw material, and lyophilized to powder. .

상기 동결건조한 시료 분말(이하 'S1, S2, S3, S4 또는 S5'라 칭함) 30㎎에 1㎖의 DMSO(dimethyl sulfoxide)를 각각 첨가하여 충분히 용해시켰다. DMSO에 용해된 각 시료를 원심분리하여 상등액을 취한 후 0.25μm의 필터로 여과 후 저장용액(30㎎/㎖)을 제조하였으며, 하기 실시예에 사용하였다.To 30 mg of the freeze-dried sample powder (hereinafter referred to as 'S1, S2, S3, S4, or S5'), 1 ml of DMSO (dimethyl sulfoxide) was added to each and sufficiently dissolved. Each sample dissolved in DMSO was centrifuged to obtain a supernatant, filtered through a 0.25 μm filter, and then a stock solution (30 mg/ml) was prepared and used in the following examples.

Figure pat00001
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실시예 1. MTT 분석에 의한 세포 생존율 측정Example 1. Measurement of cell viability by MTT assay

상기 제조예 1에서 제조한 시료들을 대상으로 MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2yl)-2,5-diphenyl-2Htetrazolium bromide) 분석을 통해 스코폴라민(scopolamine) 처리에 따른 신경세포에 대한 보호 효과를 확인하였다. 뇌신경질환을 유발하는 스코폴라민(scopolamine)을 처리한 인간 신경모세포종 세포주인 SH-SY5Y 세포에 상기 제조예 1에서 제조한 다양한 시료들을 처리하였다. 그 결과, 도 1에 개시한 바와 같이 스코폴라민 처리로 인해 세포 생존율이 감소한 반면, 본 발명의 시료 S4를 제외한 다른 시료들을 처리한 경우에는 대조군(Con)과 유사한 세포 생존율을 나타내었으며, 특히 락토바실러스 플랜타룸 WIKIM 18, 락토바실러스 부크네리 및 락토바실러스 람노서스 균주의 조합물을 접종하여 제조한 홍삼, 원지, 모렐, 초석잠 및 복령의 혼합 발효물(S5)이 상기 3종의 균주를 단독으로 사용하여 제조한 홍삼, 원지, 모렐, 초석잠 및 복령의 혼합 발효물(S2 내지 S4)에 비해 세포 생존율을 현저하게 증가시키는 결과로부터 신경세포 보호효과가 우수한 것을 확인할 수 있었다. (도1.MTT분석에 의한 세포생존율 측정결과)For the samples prepared in Preparation Example 1, MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2yl)-2,5-diphenyl-2Htetrazolium bromide) analysis on nerve cells according to scopolamine treatment The protective effect was confirmed. Various samples prepared in Preparation Example 1 were treated in SH-SY5Y cells, a human neuroblastoma cell line, treated with scopolamine, which induces cranial nerve disease. As a result, while the cell viability decreased due to the scopolamine treatment as shown in FIG. 1, when other samples except for sample S4 of the present invention were treated, the cell viability was similar to that of the control (Con), and in particular, lacto Bacillus plantarum WIKIM 18, Lactobacillus bukneri and a mixed fermented product (S5) of red ginseng, raw paper, Morel, Choseokjam and Bokryeong prepared by inoculating a combination of Lactobacillus bukneri and Lactobacillus rhamnosus strains are the above three strains alone. It was confirmed that the neuroprotective effect was excellent from the result of remarkably increasing the cell viability compared to the mixed fermented products (S2 to S4) of red ginseng, raw paper, morel, choseokjam and bokryeong. (Figure 1. Measurement result of cell viability by MTT analysis)

실시예 2. DPPH 실험에 의한 항산화 효능 측정Example 2. Measurement of Antioxidant Efficacy by DPPH Experiment

인간을 포함한 생물은 호흡과정을 통하여 에너지를 얻고 신진대사 과정에서 흡이된 산소의 2%를 자유라디칼의 활성산소로 변환시킨다. 생체내에는 이들 활성산소의 방어기구로서 항산화효소(물질)이 존재하며 스스로 보호하는 메카니즘이 작용한다. Living things, including humans, obtain energy through respiration and convert 2% of absorbed oxygen into free radical free radicals during metabolism. In the living body, antioxidant enzymes (substances) exist as a defense mechanism against these free radicals, and a mechanism for self-protection works.

자유라디칼 물질 DPPH (2.2-diphenyl-1-picrylhydrazyl)을 이용하여 라디칼이 감소하는 정도를 분광광도계로 측정할 수 있으며, 간접적으로 재료의 항산화활성을 측정하여 항산화 효능을 결정할 수 있다. By using the free radical substance DPPH (2.2-diphenyl-1-picrylhydrazyl), the degree of radical reduction can be measured with a spectrophotometer, and the antioxidant efficacy can be determined by indirectly measuring the antioxidant activity of the material.

발효홍삼추출물과 원지, 복령, 모렐, 초석잠의 6:1:1:1:1의 용액을 기본으로 하여, 농도별로 준비하였다. DPPH용액(0.5mM,0.1972g/L)을 만들고, 에탄올과 1:1혼합하여 사용하였다. 시료 600μL와 DPPH 0.5mM,600μL을 혼합한다. 20-30분 암소에서 반응후, 96well plate에 200μL 분주한다. 517 nm에서 흡광도 측정하고, 시료농도와 흡광도의 비교 그래프를 얻었다.Based on fermented red ginseng extract and 6:1:1:1:1 solution of Wonji, Bokryeong, Morel, and Choseokjam, each concentration was prepared. A DPPH solution (0.5 mM, 0.1972 g/L) was prepared, and 1:1 mixed with ethanol was used. Mix 600 µL of sample and 0.5 mM,600 µL of DPPH. After reaction in the dark for 20-30 minutes, dispense 200 μL to 96 well plate. Absorbance was measured at 517 nm, and a comparative graph of sample concentration and absorbance was obtained.

Figure pat00002
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발효홍삼추출물과 원지,복령, 모렐, 초석잠을 6:1:1:1:1로 혼합한 용액에 대하여 얻어진 DPPH항산화 실험 결과를 도 1에 보였다. Fig. 1 shows the results of the DPPH antioxidant experiment obtained for a solution in which the fermented red ginseng extract and Wonji, Bokryeong, Morel, and Choseokjam were mixed in a ratio of 6:1:1:1:1.

도 1에서 t1의 값이 20.0으로 얻어졌으며, 이는 통상 IC50에 준하는 값으로서 항산화효과가 큰 것으로 해석된다.The value of t1 in FIG. 1 was obtained as 20.0, which is usually equivalent to IC 50 , which is interpreted as having a large antioxidant effect.

실시예 3. 아세틸콜린분해효소의 활성 저해효과 측정Example 3. Measurement of the inhibitory effect on the activity of acetylcholinesterase

아세틸콜린분해효소(acetylcholinesterase)는 아세틸콜린(acetylcholine)을 파괴하여 신경전달을 억제하는 효소로 알려져 있다. 따라서 뇌신경질환을 유발하는 스코폴라민(scopolamine)을 처리한 인간 신경모세포종 세포주인 SH-SY5Y 세포에 상기 제조예 1에서 제조한 다양한 시료들을 처리한 후, ELISA 키트(CUSABIO)를 이용하여 아세틸콜린분해효소의 활성 저해효과를 확인하였다. 그 결과, 도 2에 개시한 바와 같이 스코폴라민 처리로 인해 아세틸콜린분해효소의 생성이 급격하게 증가하였으나, 본 발명의 시료들을 처리하였을 때에는 아세틸콜린분해효소의 생성이 감소하였으며, 특히 락토바실러스 플랜타룸 WIKIM 18, 락토바실러스 부크네리 및 락토바실러스 람노서스 균주의 조합물을 접종하여 제조한 홍삼, 원지, 모렐, 초석잠 및 복령의 혼합 발효물(S5)이 상기 3종의 균주를 단독으로 사용하여 제조한 홍삼, 원지, 모렐, 초석잠 및 복령의 혼합 발효물(S2 내지 S4) 보다 아세틸콜린분해효소의 생성을 현저하게 감소시킨다는 것을 확인할 수 있었다.Acetylcholinesterase is known as an enzyme that inhibits neurotransmission by destroying acetylcholine. Therefore, after processing the various samples prepared in Preparation Example 1 in SH-SY5Y cells, a human neuroblastoma cell line treated with scopolamine, which induces cranial nerve disease, acetylcholine degradation using an ELISA kit (CUSABIO) The inhibitory effect on the activity of the enzyme was confirmed. As a result, as shown in FIG. 2, the production of acetylcholinease was rapidly increased due to scopolamine treatment, but when the samples of the present invention were treated, the production of acetylcholinease was reduced, especially Lactobacillus plan. The mixed fermented product (S5) of red ginseng, Wonji, Morel, Choseokjam and Bokryeong prepared by inoculating a combination of Tarum WIKIM 18, Lactobacillus bukneri, and Lactobacillus rhamnosus strains was obtained by using the above three strains alone. It was confirmed that the production of acetylcholinease was significantly reduced compared to the mixed fermented products (S2 to S4) of the prepared red ginseng, raw paper, morel, choseokjam and bokryeong.

실시예 4. 모리스 수중 미로 시험을 통한 공간기억능력 회복 효과Example 4. Spatial memory recovery effect through the Morris water maze test

본 실험에 사용된 동물은 10주령의 체중 평균 26g인 BLAB/C 수컷 마우스를 사용하였으며, 3마리씩 하나의 사육케이스에 넣고 항온(23±2℃) 및 항습(50~55%)이 유지되며, 12시간 간격으로 낮과 밤을 교대시키는 동일한 실험실 환경에서 사육하였으며, 사료와 물은 자율적으로 섭취할 수 있게 공급하였다. 이들 마우스에게 1주일간 환경 적응기간을 거치게 한 후 각 시료를 100mg/kg로 1일 2회 경구투여하고 대조군(con)은 같은 양의 증류수를 경구투여하였다. 그리고 5일간 수중미로 학습 후 플랫폼을 제거하고 마우스들이 플랫폼의 위치를 얼마나 정확히 기억하는지에 따라 공간기억력의 정도를 측정하였으며, 단기기억능력은 수중 미로 학습 후 14일째, 장기기억능력은 21일째에 측정하였다. 기억능력측정 30분 전에 스코폴라민(SCOP, scopolamine) 2mg/kg를 IP(intraperitoneal)로 투여하였다. 그 결과, 도 3 및 도 4에 개시한 바와 같이 아무것도 처리하지 않은 대조군(Con)에 비해 스코폴라민 단독 처리군에서는 기억력 손상으로 인해 마우스가 플랫폼의 위치를 찾기 위해 수많은 방향 전환을 시도할 뿐만 아니라 동선의 길이가 복잡하고 머무름 시간(54초)도 증가하였다. 반면에, 본 발명의 시료(S1~S4) 처리군에서는 방향 전환 횟수 및 동선의 길이가 다소 감소하였으며 머무름 시간도 줄어든 것을 알 수 있었다. 더욱이, 본 발명의 시료들 중에 락토바실러스 플랜타룸 WIKIM 18, 락토바실러스 부크네리 및 락토바실러스 람노서스 균주의 조합물을 이용하여 제조한 홍삼, 원지, 모렐, 초석잠 및 복령의 혼합 발효물(S5)을 경구투여한 경우에, 상기 3종의 균주를 각각 단독으로 사용하여 제조한 경우(S2 내지 S4) 보다 스코폴라민으로 인해 손상된 단기기억능력이 현저하게 회복된 것을 확인할 수 있었다. The animals used in this experiment were 10-week-old BLAB/C male mice with an average body weight of 26 g, and three animals were placed in one breeding case, and constant temperature (23±2° C.) and constant humidity (50-55%) were maintained, They were bred in the same laboratory environment in which the day and night were alternated at 12-hour intervals, and feed and water were provided so that they could ingest them autonomously. After allowing these mice to undergo an environmental adaptation period for one week, each sample was orally administered at 100 mg/kg twice a day, and the control group (con) was orally administered with the same amount of distilled water. After 5 days of underwater maze learning, the platform was removed and the degree of spatial memory was measured according to how accurately the mice remembered the platform location. Short-term memory was measured on the 14th day after learning the underwater maze, and long-term memory on the 21st day. did. 30 minutes before the memory ability measurement, scopolamine (SCOP, scopolamine) 2mg/kg was administered by IP (intraperitoneal). As a result, as shown in FIGS. 3 and 4, in the group treated with scopolamine alone, compared to the control group (Con) that was not treated with anything, the mouse not only attempted numerous direction changes to find the position of the platform, but also caused memory impairment. The length of the copper wire was complicated and the retention time (54 seconds) was increased. On the other hand, in the treatment group of the samples (S1 to S4) of the present invention, the number of direction changes and the length of the copper wire were somewhat reduced, and it was found that the retention time was also reduced. Furthermore, among the samples of the present invention, Lactobacillus plantarum WIKIM 18, Lactobacillus bukneri and a mixed fermented product of red ginseng, raw paper, Morel, Choseokjam and Bokryeong prepared using a combination of Lactobacillus bukneri and Lactobacillus rhamnosus strain (S5) In the case of oral administration, it was confirmed that the short-term memory ability damaged by scopolamine was remarkably recovered compared to the case where each of the three strains was used alone (S2 to S4).

장기기억능력 분석 결과에서도 마찬가지로, 시료들 중에 본 발명의 홍삼, 원지, 모렐, 초석잠 및 복령의 혼합 발효물(S5)을 경구투여한 경우에 스코폴라민으로 인해 손상된 장기기억능력이 현저하게 회복된 것을 알 수 있었다. Similarly, in the long-term memory analysis results, when the mixed fermented product (S5) of red ginseng, Wonji, Morel, Choseokjam and Bokryeong of the present invention was orally administered among the samples, long-term memory ability damaged due to scopolamine was remarkably recovered. was known to have been

이상의 설명은 본 발명의 기술 사상을 예시적으로 설명한 것에 불과한 것으로서, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 다양한 수정 및 변형이 가능할 것이다. The above description is merely illustrative of the technical spirit of the present invention, and various modifications and variations will be possible without departing from the essential characteristics of the present invention by those skilled in the art to which the present invention pertains.

따라서, 본 발명에 개시된 실시 예들은 본 발명의 기술 사상을 한정하기 위한 것이 아니라 설명하기 위한 것이고, 이러한 실시 예에 의하여 본 발명의 기술 사상의 범위가 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 보호 범위는 아래의 청구범위에 의하여 해석되어야 하며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 기술 사상은 본 발명의 권리범위에 포함되는 것으로 해석되어야 할 것이다.Therefore, the embodiments disclosed in the present invention are not intended to limit the technical spirit of the present invention, but to explain, and the scope of the technical spirit of the present invention is not limited by these embodiments. The protection scope of the present invention should be construed by the following claims, and all technical ideas within the scope equivalent thereto should be construed as being included in the scope of the present invention.

Claims (6)

홍삼, 원지, 모렐, 초석잠 및 복령의 혼합 발효물을 유효성분으로 함유하는 인지기능 또는 기억능력 개선용 건강기능식품 조성물.
A health functional food composition for improving cognitive function or memory ability, comprising a mixed fermented product of red ginseng, raw paper, morel, choseokjam and bokryeong as active ingredients
제1항에 있어서,
상기 홍삼, 원지, 모렐, 초석잠 및 복령의 혼합은 1~10:1~10:1~10:1~10의 중량비로 이루어진 것을 특징으로 하는 인지기능 또는 기억능력 개선용 건강기능식품 조성물.
According to claim 1,
A health functional food composition for improving cognitive function or memory ability, characterized in that the red ginseng, raw paper, morel, choseokjam and bokryeong are mixed in a weight ratio of 1-10:1-10:1-10:1-10.
제1항에 있어서,
상기 발효물은 홍삼, 원지, 모렐, 초석잠 및 복령의 혼합물에 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 부크네리(Lactobacillus buchneri) 및 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rharmnosus)를 조합접종하여 제조되는 것을 특징으로 하는 인지기능 또는 기억능력 개선용 건강기능식품 조성물.
According to claim 1,
The fermented product is Lactobacillus plantarum ( Lactobacillus plantarum ), Lactobacillus buchneri ( Lactobacillus buchneri ) and Lactobacillus rharmnosus to a mixture of red ginseng, raw paper, morel, choseokjam and bokryeong prepared by inoculating a combination of Lactobacillus rharmnosus A health functional food composition for improving cognitive function or memory ability, characterized in that.
제1항에 있어서,
상기 조성물은 젤 스틱, 분말, 과립, 환, 정제, 캡슐, 캔디, 시럽 및 음료 중에서 선택된 어느 하나의 제형으로 제조되는 것을 특징으로 하는 인지기능 또는 기억능력 개선용 건강기능식품 조성물.
According to claim 1,
The composition is a health functional food composition for improving cognitive function or memory, characterized in that it is prepared in any one formulation selected from gel sticks, powders, granules, pills, tablets, capsules, candy, syrup and beverages.
홍삼, 원지, 모렐, 초석잠 및 복령의 혼합 발효물을 유효성분으로 함유하는 우울증 및 퇴행성 뇌신경 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
A pharmaceutical composition for the prevention or treatment of depression and degenerative cranial nerve diseases, containing a mixed fermented product of red ginseng, raw ginseng, morel, choseokjam and bokryeong as active ingredients.
제5항에 있어서,
상기 유효성분 이외에 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 우울증 및 퇴행성 뇌신경 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
6. The method of claim 5,
In addition to the active ingredient, a pharmaceutical composition for preventing or treating depression and degenerative cranial nerve disease, characterized in that it further comprises a pharmaceutically acceptable carrier, excipient or diluent.
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