KR20200085070A - 천연물을 유효성분으로 포함하는 악액질 예방, 개선 또는 치료용 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 천연물을 유효성분으로 포함하는 악액질 예방, 치료 또는 개선용 조성물에 관한 것으로, 근육 및 근력을 개선하고, 혈액 및 근육 내의 염증성 사이토카인을 억제하며 식욕 감소, 체중 감소를 억제하는 등 근감소를 방지할 수 있으므로, 악액질의 예방, 개선 또는 치료 용도로 유용하게 사용될 수 있다.

Description

천연물을 유효성분으로 포함하는 악액질 예방, 개선 또는 치료용 조성물{Composition for preventing, improving or treating cachexia comprising natural product as effective component}

본 발명은 천연물을 유효성분으로 포함하는 악액질 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.

악액질은(cachexia)는 소모성 질환이나 노화에 동반되는 근감소, 식욕감소, 지방조직 감소를 의미하며 이중 가장 핵심적인 요소는 근감소이다.

근감소는 호르몬 불균형, 심한 부상, 패혈증, 암 및 노화로 인한 여러 가지 이화 상태(catabolic condition)에서 발생하는 근육세포와 근조직의 크기 및 질량적 손실을 의미한다. 근감소는 근육의 손실을 유발하여 근육 약화 및 피로감을 유발하고 합병증을 악화시킨다. 근감소는 크레아틴 키나아제(Creatine kinase: CK), 근전도검사, 근육생검, 분자생물학적 유전자검사, 세포유전학적 검사 등을 통해 진단이 이루어진다. 현재 근감소를 치료하기 위한 방법으로써, 물리치료가 일반적으로 수행되며, 합병증, 기형 및 기능 장애 예방을 위한 작업치료, 호흡치료 및 지지요법(supportive therapy)등이 병행되고 있다.

다만, 근감소의 병인기전은 아직까지 명확히 규명되지 않았으며, 현재까지 근감소 발병의 주 원인으로 보고된 것으로써, TNF-alpha등의 염증성 사이토카인에 의한 프로테아좀-유비퀴틴 활성화에 따른 근단백질 분해 촉진, 산화물질 증가에 의한 근세포 손상, 스트레스 단백질 발현 감소로 인한 근단백질 생성 및 재생 감소 등이 알려져 있음. 현재의 치료는 대증요법으로써의 한계를 갖는다는 점에서, 악액질의 근감소에 대한 치료제 개발이 절실한 상황이다.

한편, 암이란 특정 세포가 분화 과정 중 어느 단계에서 무한으로 생장하여 정상 조직들을 침범 및 파괴하는 질환으로, 암에 관하여 많은 연구가 진행되고 있으나 아직 그 발생 원인은 정확하게 밝혀지지 않고 있다. 다만 암의 발생은 여러 가지 화학적 발암 물질, 종양 유발 바이러스 또는 다량의 방사선에 노출된 후 암 유전자의 활성화와 암 억제 유전자의 기능소실에 의해 시작되는 것으로 알려져 있다.

현재까지 암 환자를 대상으로 한 치료 방법에는 외과 수술(Operation), 화학 요법(Chemotherapy), 방사선 요법(Radiotherapy), 호르몬 요법 및 면역 요법 등이 있다. 이 중에서 호르몬 요법과 면역 요법은 치료 효과 및 인체에 대한 안전성이 아직 확립되지 않아 임상에서 널리 이용되지 못하고 있다. 외과 수술은 병소(즉, 암)를 제거하는 치료 방법으로서 초기 암의 경우에는 외과 수술만으로도 완치가 가능하지만, 중기 이후 암의 경우에는 외과 수술을 이용하는 것 자체가 불가능하다는 단점이 있다. 한편, 화학 요법이나 방사선 치료 또는 이의 병행 치료는 공통적으로 유리 라디칼을 생성시켜 표적 암세포를 제거하는 것이지만, 이들은 특이성이 낮기 때문에 조혈 세포나 면역 세포 등 빠르게 분열 및 증식하는 특성을 가진 정상 세포도 손상시킨다. 따라서 구토증세, 식욕감퇴, 구내염, 설사, 변비, 발열, 감염증, 백혈구감소증, 혈소판 감소증, 빈혈, 복통, 신장 독성, 간 독성, 심장 독성, 말초신경 독성, 중추신경 독성, 근육 통증, 뼈 통증, 골수 억제 등의 부작용을 유발한다.

암 환자 및 암 발생률의 지속적인 증가와 더불어 항암치료 과정에서 발생하는 부작용 또한 하나의 의학적 문제로 제기되고 있다. 최근 항암치료에 따른 부작용, 후유증 또는 합병증에 대한 약물 연구가 임상적으로 더욱 중요하게 취급되고 있는데, 이는 환자에 대한 삶의 질과 밀접하게 관련되기 때문이다. 따라서, 항암치료에 따른 부작용에서 유래되는 악액질(cachexia)과 같은 질환을 치료하기 위하여 인체에 안전한 천연소재를 이용한 물질의 개발이 요구되고 있다.

이에 본 발명자는 악액질 및 근감소를 효과적으로 개선할 수 있는 치료제를 발굴하기 위한 연구를 수행하여 본 발명을 완성하였다.

대한민국 특허공개 제10-2010-0123300호

본 발명의 하나의 목적은 황기 및 작약을 포함하는 악액질(cachexia) 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 황기 및 작약을 포함하는 악액질 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 황기 및 작약을 유효성분으로 포함하는 근감소 방지 및 근질량 증가용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 황기 및 작약을 유효성분으로 포함하는 근감소 방지 및 근질량 증가용 식품 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 일 양상은 황기 및 작약을 포함하는 악액질(cachexia) 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

황기 및 작약은 근육 및 근력을 개선하고, 혈액 및 근육 내의 염증성 사이토카인을 억제하며, 식욕 감소, 체중 감소를 억제하여 근감소를 방지할 수 있으므로, 악액질의 예방 또는 치료 용도로 유용하게 사용될 수 있다.

본 발명에서 사용되는 황기는 황기(Astragalus membranaceus Bunge) 또는 몽골황기(蒙古黃)(Astragalus membranaceus Bunge var. mongholicus Hsiao)(콩과 Leguminosae)의 뿌리 또는 이의 주피를 제거한 것일 수 있다. 한편, 본 발명에서 사용되는 작약은 작약(Paeonia lactiflora Pallas) 또는 기타동속근연식물(작약과 Paeoniaceae)의 뿌리, 또는 적작약(Paeonia lactiflora Pall.) 혹은 천작약(Paeonia veitchii Lynch)(미나리아제비과 Ranunclaceae)의 뿌리인 것일 수 있다.

본 발명에서 사용되는 용어, "악액질"은 근육세포와 근조직의 크기 및 질량적 손실을 말하며, 이러한 악액질은 노화, 암과 같은 중증질병, 신경손상 등으로 인해 오랫동안 움직일 수 없는 상태에 처하거나, 영양공급장애 등 다양한 원인에 의하여 유발되는 것일 수 있다.

본 발명의 일 구체예에 따르면, 상기 황기 및 작약은 증류수, C₁ 내지 C₄의 저급 알코올, 헥산, 에틸아세테이트, 클로로포름, 디에틸에테르, 디클로로메탄, 아세톤 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 용매로 추출된 것일 수 있다.

본 발명에 따른 조성물에 포함되는 추출물은 하기와 같이 수득될 수 있다. 황기 및 작약을 물로 세척하여 이물질을 제거한 후 그늘에서 건조하고, 황기 및 작약에 각각 적당한 양의 용매를 첨가하여 완전히 침지되도록 하며, 이때, 황기 및 작약은 건조된 상태 그대로 사용하거나 분쇄하여 분말 형태로 사용할 수 있다. 황기 및 작약은 각각 통상의 추출용매를 이용하여 추출할 수 있으며, 바람직하게는, (a) 탄소수 1~4의 무수 또는 함수 저급 알코올(예: 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 노말-프로판올, 이소-프로판올 및 노말-부탄올 등), (b) 상기 저급 알코올과 물과의 혼합용매, (c) 아세톤, (d) 에틸 아세테이트, (e) 클로로포름, (f) 1,3-부틸렌글리콜, (g) 헥산, (h) 디에틸에테르, (i) 부틸아세테이트 (j) 클로로포름-메탄올 또는 (k) 물을 이용하여 추출할 수 있고, 바람직하게는 30%(v/v) 에탄올로 추출할 수 있다. 추출시 실온에서 함침하거나 가온할 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 허용되는 담체를 포함할 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물에 포함되는 약학적으로 허용되는 담체는 약제의 제조에 통상적으로 이용되는 것으로써, 락토오스, 덱스트로스, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산칼슘, 미세결정성 셀룰로오스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로오스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로오스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 약학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다. 적합한 약학적으로 허용되는 담체 및 제제는 Remington's Pharmaceutical Sciences (22th ed., 2013)에 상세히 기재되어 있다.

본 발명의 일 구체예에 따른 약학적 조성물은 하나 이상의 악액질의 예방 또는 치료에 활성을 나타내는 물질과 함께 투여될 수 있다.

또한, 본 발명의 일 구체예에 따른 약학적 조성물은 악액질의 치료를 위하여 단독으로, 또는 시술, 호르몬 치료, 약물치료 및/또는 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용될 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 그 제형의 제제화에 필요하고 적절한 각종 기제 및/또는 첨가물을 포함할 수 있으며, 그 효과를 떨어트리지 않는 범위 내에서 비이온 계면활성제, 실리콘 폴리머, 체질안료, 향료, 방부제, 살균제, 산화 안정화제, 유기 용매, 이온성 또는 비이온성 증점제, 유연화제, 산화방지제, 자유 라디칼 파괴제, 불투명화제, 안정화제, 에몰리언트(emollient), 실리콘, α-히드록시산, 소포제, 보습제, 비타민, 곤충 기피제, 향료, 보존제, 계면활성제, 소염제, 물질 P 길항제, 충전제, 중합체, 추진제, 염기성화 또는 산성화제, 또는 착색제 등 공지의 화합물을 더 포함하여 제조될 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물의 투여량은 성인 기준으로 0.001~1000㎎/kg일 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 경구 또는 비경구 투여할 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 경구 투여 시 다양한 제형으로 투여될 수 있는데, 환제, 분말제, 과립제, 정제 또는 캡슐제 등의 고형제제 형태로 투여될 수 있으며, 여러 가지 부형제, 예를 들어, 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등을 더 포함할 수 있다. 구체적으로, 본 발명의 조성물을 분말, 과립, 정제 또는 캅셀 형태로 제형화 할 경우, 이의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다. 상기 담체, 부형제 및 희석제로는 예를 들어, 락토오스, 덱스트로스, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알기네이트, 젤라틴, 인산칼슘, 규산칼슘, 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및/또는 광물유가 사용될 수 있으나 이에 한정되지 않는다. 또한, 제제화에 일반적으로 사용되는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 포함하여 조제될 수 있으며, 상기 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트 또는 탈크 같은 윤활제를 더 포함할 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 비경구 투여시 다양한 제형으로 투여될 수 있는데, 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드, 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들어, 습윤제 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 구체적으로, 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제 및 동결건조제제가 포함될 수 있다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜(Propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 또한, 치료제의 효능 증진을 위해 칼슘이나 비타민 D3를 첨가할 수 있다.

이러한 조성물은 단위-용량(1회분) 또는 다중-용량(수 회분) 용기, 예를 들어, 밀봉된 앰풀 및 바이알에 제시될 수 있고, 사용 직전에 멸균성 액상 담체, 예를 들어, 주사용 수의 부가만을 요구하는 동결-건조 조건하에 저장할 수 있다. 즉석의 사용제 및 현탁제는 멸균성 산제, 과립제 및 정제로부터 제조할 수 있다.

본 발명의 일 구체예에 따르면, 상기 악액질은 근감소, 노화, 비만, 스테로이드제 장기투여 및 우주비행으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나에 의하여 발생할 수 있다.

본 발명의 일 구체예에 따르면, 상기 악액질은 암성 악액질일 수 있다.

본 발명의 일 구체예에 따른 황기 및 작약을 포함하는 조성물은 종양의 크기에는 영향을 주지 않으면서, 식욕, 체중 및 근육량의 증가 등의 효과를 나타내므로, 특히, 암성 악액질의 예방 또는 치료에 유용하게 활용될 수 있다.

본 발명의 일 구체예에 따르면, 상기 황기 추출물 및 상기 작약 추출물의 중량비는 2:1 내지 1:2일 수 있다.

황기 및 작약은 2:1 내지 1:2의 중량비로 혼합되어 사용될 때, 암성 악액질과 같은 악액질의 예방 또는 치료 효과가 우수하며, 특히, 1:1의 중량비로 혼합될 때, 암성 악액질의 예방 또는 치료 효과가 가장 우수하다.

본 발명의 다른 양상은 황기 및 작약을 포함하는 악액질(cachexia) 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.

본 발명의 조성물이 식품 조성물로 제조되는 경우, 유효성분으로써 황기 및 작약 외에, 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분을 포함할 수 있으며, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소, 조미제 및 향미제를 포함할 수 있다. 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스, 올리고당 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 사이클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜일 수 있다. 향미제로서 천연 향미제[타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등)] 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 사용할 수 있다.

예를 들어, 본 발명의 식품 조성물이 드링크제로 제조되는 경우에는 본 발명의 황기 및 작약 외에 구연산, 액상과당, 설탕, 포도당, 초산, 사과산, 과즙, 두충 추출액, 대추 추출액 및/또는 감초 추출액 등이 추가로 포함될 수 있다.

또한, 본 발명의 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다.

이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있으며, 이러한 첨가제의 비율은 본 발명의 식품 조성물 100 중량부 당 0 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 또 다른 양상은 황기 및 작약을 유효성분으로 포함하는 근감소 방지 및 근질량 증가용 약학적 조성물을 제공한다.

본 발명의 또 다른 양상은 황기 및 작약을 유효성분으로 포함하는 근감소 방지 및 근질량 증가용 식품 조성물을 제공한다.

본 발명의 황기 및 작약은 식욕 감소, 체중 감소를 억제할 수 있으므로, 근감소를 방지 및 근질량 증가 용도로 유용하게 활용할 수 있다.

전술한 내용과 중복되는 내용은 본 명세서의 과도한 복잡성을 피하기 위하여, 그 기재를 생략한다.

천연물을 유효성분으로 포함하는 악액질 예방, 치료 또는 개선용 조성물에 따르면, 근육 및 근력을 개선하고, 혈액 및 근육 내의 염증성 사이토카인을 억제하며 식욕 감소, 체중 감소를 억제하는 등 근감소를 방지할 수 있으므로, 악액질의 예방, 개선 또는 치료 용도로 유용하게 사용될 수 있다.

도 1은 C57BL/6 마우스 모델에서 황기 추출물 및/또는 작약 추출물의 투여에 따른 마우스의 식이량을 나타낸 그래프이다(그래프에서, 대조군 대비, ^* p<0.05; ^** p<0.01; 및 ^*** p<0.001을 나타내고, 정상군 대비, ^# p<0.05; ^## p<0.01; 및 ^### p<0.001 를 나타내며, B1은 황기 추출물을, C4는 작약 추출물을 나타냄).
도 2는 C57BL/6 마우스 모델에서 황기 추출물 및/또는 작약 추출물의 투여에 따른 마우스의 종양 제외 체중을 나타낸 그래프이다.
도 3은 C57BL/6 마우스 모델에서 황기 추출물 및/또는 작약 추출물의 투여에 따른 마우스의 종양 무게를 나타낸 그래프이다.
도 4는 C57BL/6 마우스 모델에서 황기 추출물 및/또는 작약 추출물의 투여에 따른 마우스의 혈청 내 염증성 사이토카인인 TNF-α의 수준을 나타낸 그래프이다.
도 5는 C57BL/6 마우스 모델에서 황기 추출물 및/또는 작약 추출물의 투여에 따른 마우스의 grip strength를 나타낸 그래프이다.
도 6은 C57BL/6 마우스 모델에서 황기 추출물 및/또는 작약 추출물의 투여에 따른 마우스의 근육중량을 나타낸 그래프이다.
도 7은 C57BL/6 마우스 모델에서 황기 추출물 및/또는 작약 추출물의 투여에 따른 마우스의 대퇴부 근육 내 염증성 사이토카인인 TNF-α의 수준을 나타낸 그래프이다.
도 8은 BalB/c 마우스 모델에서 황기 추출물 및/또는 작약 추출물의 투여에 따른 마우스의 종양 제외 체중을 나타낸 그래프이다.
도 9는 BalB/c 마우스 모델에서 황기 추출물 및/또는 작약 추출물의 투여에 따른 마우스의 심장 중량을 나타낸 그래프이다.
도 10은 BalB/c 마우스 모델에서 황기 추출물 및/또는 작약 추출물의 투여에 따른 마우스의 신장 중량을 나타낸 그래프이다.
도 11은 BalB/c 마우스 모델에서 황기 추출물 및/또는 작약 추출물의 투여에 따른 마우스의 간 중량을 나타낸 그래프이다.

이하 본 발명을 하나 이상의 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.

실시예 1. 천연물 추출물 제조

미세하게 분말화한 황기 또는 작약 400g 및 30%(v/v) 에탄올 4L를 반응조에 넣고 상온에서 48시간 동안 교반하면서 추출하였다. 각 추출물을 5㎛ filter로 감압여과하고, 40℃ 이하에서 농축하여 에탄올을 제거한 후, 10 내지 20 brix로 조정하였다. 농축된 추출물을 동결건조시킨 다음 믹서기로 갈아 균질화하여 황기 추출물 및 작약 추출물을 제조하였으며, 수율은 표 1과 같다.

천연물	건조 중량	수율
황기	25.6g	6.40%
작약	32.8g	8.20%

이후의 실시예에서는 황기 추출물 및 작약 추출물을 각각 1:0, 0:1, 1:1, 1:2 및 2:1의 중량비로 혼합하여 사용하였다.

실시예 2. C57BL/6 마우스 모델에서 천연물 추출물의 악액질 개선 효과 확인

2-1. 동물모델 준비

실험동물은 4주령의 암컷 C57BL/6 마우스(15 내지 18g)를 사용하였으며, 중앙실험동물(주)에서 공급받아 실험동물 사육장에서 1주일 동안 적응시킨 후 실험에 사용하였다. 실험 기간 중 고형사료와 물을 자유로이 섭취할 수 있도록 하였으며, 사육실의 온도는 22±2℃, 상대습도는 60±5% 및 명암은 12시간 주기를 유지하였다.

마우스를 각 그룹당 10마리씩 정상군(normal), 대조군(control) 및 실험군으로 나누고, 정상군을 제외한 나머지 그룹에는 마우스 대장암 세포인 MC38 Cell을 1×10⁶ cell/mouse로 마우스의 옆구리에 주사하고, 약 2주 동안 대장암을 유발함으로써, 암성 악액질을 유도하였다. 악액질을 유도한 후, 정상군과 대조군 그룹에는 증류수를 경구 투여하였고, 실험군에는 실시예 1에서 제조한 추출물(100㎎/㎏)을 각각 10일 동안 경구 투여하였다. 양성대조군에는 기존 약물인 Megace(megestrol acetate)를 125㎎/㎏ 용량으로 경구 투여하였다.

2-2. 식욕, 체중 및 염증에 미치는 효과

실시예 1에서 제조한 천연물 추출물의 악액질 개선 효과를 확인하기 위하여, 실시예 2-1에서 준비한 동물모델의 추출물 투여에 따른 식이량을 조사한 결과, 정상군 대비 대조군에서는 식이량이 유의하게 감소하였고, 천연물 투여군 중에서는 황기:작약(1:1) 투여군 및 황기:작약(1:2) 투여군에서 유의적인 식이량의 증가(도 1)가 관찰되었다.

또한, 추출물 투여 10일 후, 마우스를 부검하고 종양을 적취하여 종양을 제외한 체중과 종양의 무게를 측정한 결과, 정상군과 비교하여 대조군에서는 종양을 제외한 체중이 유의하게 감소하였고, 천연물 투여군 중에서는 황기:작약 (1:1) 투여군에서 유의적인 종양 제외 체중의 증가가 관찰되었다(도 2). 반면, 종양의 무게에 있어서는 대조군과 천연물 투여군 간에 유의적인 차이가 관찰되지 아니하였다(도 3).

한편, 추출물 투여 10일 후, 마우스 심장으로부터 채취한 혈청에서 ELISA Kit(제조사: Thermo Fisher, 제품명: BMS603-2TWO)를 사용하여 염증성 사이토카인인 TNF-α를 분석한 결과, 혈청의 TNF-α 수치가 정상군과 비교하여 대조군에서 증가하였고, 대조군과 비교하여 황기:작약(1:1) 투여군에서는 유의적으로 감소한 것으로 확인되었다(도 4).

2-3. 근력 개선 효과, 근육 손실 및 염증 방지 효과

실시예 1에서 제조한 천연물 추출물의 악액질 개선 효과를 확인하기 위하여, 실시예 2-1에서 준비한 동물모델의 추출물 투여에 따른 마우스의 근력을 측정하였다.

구체적으로, 천연물 추출물을 10일 동안 경구 투여한 후, grip strength 측정기(제조사 BIOSEB, 제품명: BIO-GS3 Grip strength test)를 사용하여 마우스가 철망을 잡고 있을 때 잡아당겨 마우스가 앞발로 철망을 잡고 있는 힘을 측정하여 근력 개선 효과를 분석하였다. 그 결과, 정상군 대비 대조군에서는 grip strength가 현저하게 감소한 반면, 대조군과 대비 황기:작약(1:1) 투여군에서는 grip strength가 유의하게 증가한 것을 확인하여(도 5), 암성 악액질이 유도된 마우스의 근력이 유의미하게 회복되었음을 확인하였다.

또한, 천연물 추출물을 10일 동안 경구 투여한 후, 마우스를 부검하고 종아리 부분에서 비복근(gastrocnemius muscle)을 분리하여 중량을 측정하였다. 그 결과, 정상군 대비 대조군에서는 근육중량이 현저하게 감소하였으나, 천연물 투여에 의하여 근육중량의 감소가 억제되는 것으로 관찰되었다(도 6). 즉, 황기 투여군 및 황기:작약(1:1) 투여에 따른 유의적인 근육손실 방지효과를 확인하였다.

한편, 천연물 추출물을 10일 동안 경구 투여한 후, 마우스로부터 분리한 비복근에서 ELISA Kit(제조사: Thermo Fisher, 제품명: BMS603-2TWO)를 사용하여 염증성 사이토카인인 TNF-α를 분석하였다. 그 결과, 근육에서의 TNF-α 수치가 정상군 대비 대조군에서 증가한 반면, 대조군 대비 황기:작약(1:1) 투여군에서는 TNF-α 수치가 유의적으로 감소한 것을 확인하였다(도 7).

실시예 3. BalB/c 마우스 모델에서 천연물 추출물의 악액질 개선 효과 확인

3-1. 동물모델 준비

실시예 2에 따른 C57BL/6 마우스 모델에서의 결과를 검증하기 위하여, BalB/c 마우스 모델에서 천연물 추출물의 악액질 개선 효과를 확인하기 위한 실험을 수행하였다.

구체적으로, 마우스를 각 그룹당 10마리씩 정상군(normal), 대조군(control) 및 실험군으로 나누고, 정상군을 제외한 나머지 그룹에는 마우스 대장암 세포인 C26 Cell을 5×10⁵ cell/mouse로 마우스의 옆구리에 주사하고, 약 10일 동안 대장암을 유발함으로써, 암성 악액질을 유도하였다. 악액질을 유도한 후, 정상군과 대조군 그룹에는 증류수를 경구 투여하였고, 실험군에는 실시예 1에서 제조한 추출물(100㎎/㎏)을 각각 10일 동안 경구 투여하였다. 양성대조군에는 기존 약물인 Megace(megestrol acetate)를 125㎎/㎏ 용량으로 경구 투여하였다.

3-2. 체중 및 장기중량 개선 효과

실시예 1에서 제조한 천연물 추출물의 악액질 개선 효과를 확인하기 위하여, 실시예 3-1에서 준비한 동물모델에 천연물 추출물을 10일 동안 경구 투여한 후 마우스를 부검하고 종양을 제외한 체중을 측정한 결과, 정상군 대비 대조군에서는 종양을 제외한 체중이 유의하게 감소하였고, 천연물 투여군 중에서는 황기:작약(1:1) 투여군에서 유의적인 종양 제외 체중의 증가가 관찰되었다(도 8).

천연물 추출물을 10일 동안 경구 투여한 후, 마우스를 부검하고 장기 중량을 측정한 결과, 정상군 대비 대조군에서는 심장중량이 유의적으로 감소한 반면, 천연물 투여군 중에서는 황기:작약(1:1) 투여군(P<0.01)에서 가장 유의적인 심장중량의 증가가 관찰되었다(도 9). 정상군 대비 대조군에서는 신장 중량이 유의적으로 감소한 반면, 천연물 투여군 중에서는 황기:작약(1:1), 황기:작약(1:2) 및 황기:작약(2:1) 투여군(P<0.01)에서 가장 유의적인 신장 중량의 증가가 관찰되었다(도 10). 또한, 정상군 대비 대조군에서는 간 중량이 유의적으로 감소한 반면, 천연물 투여군 중에서는 황기:작약(1:1) 및 황기:작약(2:1) 투여군(P<0.01)에서 가장 유의적인 간 중량의 증가가 관찰되었다(도 11).

이와 같은 결과를 통하여, 황기 및 작약 추출물은 악액질, 특히, 암성 악액질의 예방 또는 치료에 유용하게 활용될 수 있음을 확인하였다.

이제까지 본 발명에 대하여 그 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.

Claims (8)

1. 황기 및 작약을 포함하는 악액질(cachexia) 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
   
2. 제 1 항에 있어서, 상기 황기 및 작약은 증류수, C₁ 내지 C₄의 저급 알코올, 헥산, 에틸아세테이트, 클로로포름, 디에틸에테르, 디클로로메탄, 아세톤 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 용매로 추출되는 것인 악액질 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
   
3. 제 1 항에 있어서, 상기 악액질은 근감소, 노화, 비만, 스테로이드제 장기투여 및 우주비행으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나에 의하여 발생하는 것인 악액질 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
   
4. 제 1 항에 있어서, 상기 악액질은 암성 악액질인 것인 악액질 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
   
5. 제 1 항에 있어서, 상기 황기 및 상기 작약의 중량비는 2:1 내지 1:2인 것인 악액질 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
   
6. 황기 및 작약을 포함하는 악액질(cachexia) 예방 또는 개선용 식품 조성물.
   
7. 황기 및 작약을 유효성분으로 포함하는 근감소 방지 및 근질량 증가용 약학적 조성물.
   
8. 황기 및 작약을 유효성분으로 포함하는 근감소 방지 및 근질량 증가용 식품 조성물.

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