KR20190129069A - 적어도 플루디옥소닐 및 아우레오바시디움 풀루란스 균주들을 함유하는 혼합물을 함유하는 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 하나 이상의 화학적 살균제를 함유하는 조성물에 관한 것이다. 상기 하나 이상의 화학적 살균제에 대해 추가로 적어도 아우레오바시디움 풀루란스 균주들 DSM 14940 및 DSM 14941을 함유하는 혼합물이 함유되어 있고, 이때 상기 하나 이상의 화학적 살균제 및 상기 아우레오바시디움 풀루란스 균주들의 혼합물은 상기 조성물 내에서 상승 작용하는 양으로 존재하고, 이때 상기 하나 이상의 화학적 살균제는 플루디옥소닐 또는 플루디옥소닐과 하나 이상의 제2 화학적 살균제를 함유하는 조합물로부터 선택되었다. 본 발명은 또한, 상기 조성물의 용도 및 균질 병원균에 의해 야기된 하나 이상의 식물병의 확산을 예방하기 위한, 또는 감소시키기 위한 방법에 관한 것이다.

Description

적어도 플루디옥소닐 및 아우레오바시디움 풀루란스 균주들을 함유하는 혼합물을 함유하는 조성물
본 발명은 하나 이상의 화학적 살균제를 함유하는 조성물 및 상기 조성물의 용도, 그리고 균질 병원균에 의해 야기된 하나 이상의 식물병의 확산을 예방하기 위한, 또는 감소시키기 위한 방법에 관한 것이다.
농업에서 수확량을 최대한 극대화할 수 있기 위해, 농산물들을 해충 피해로부터 최대한 보호하는 것이 요구된다. 이는 모든 농작물들에서, 특히 과일- 및 채소 재배에서 매우 중요하며, 병원균들에 의한 감염으로부터 재배 식물들을 보호하기 위해서는, 식물 병원성 감염을 방지하거나, 또는 상기 식물 병원성 감염의 확산을 감소시킬 목적으로, 이와 같은 재배 식물들에 화학적 살균제를 분사하거나, 또는 이와 같은 재배 식물들을 화학적 살균제에 의해 처리하는 것이 일반적이다. 상기 유형의 화학적 살균제들은 통상적으로 매우 폭넓은 적용 스펙트럼을 갖고, 개별 병원균들에 대해 특수하게 작용하지 않음으로써, 결과적으로 상기 화학적 살균제들은 매우 폭넓게 사용된다. 항생 물질에 의해 알려진 바와 유사하게, 병원균들은 시간의 흐름에 따라 살균 작용하는 상기 유형의 화학 물질들에 대해 저항력 또는 감소한 감도를 발전시키고, 병원균들에 의한 감염을 관리 또는 예방하기 위해 사용된 화학적 살균제들의 효과는 병원성 물질들이 살포제에 대해 저항력을 가질 때까지 점차 작아짐으로써, 새로운 물질이 탐색되어야만 한다.
상기 화학적 살균제들은, 시간의 흐름에 따라 상기 화학적 살균제들에 대해 저항력 또는 감소한 감도가 발전한다는 문제 이외에, 처리될 식물들 상으로 제공된 이후에 이와 같은 화학적 살균제들이 적어도 부분적으로 바닥에 도달함으로써, 오염이 야기될 수 있다는 문제를 갖고, 상기 오염 이외에, 이와 같은 경우에 그 관리 또는 예방이 전혀 예상되지 않았던 또 다른 미생물도 마찬가지로 이와 같은 화학적 살균제들에 대해 저항력을 갖게 될 수 있다는 문제를 갖는다. 이와 같은 방식으로, 표적 생물(병원균)뿐만 아니라, 비 표적 생물도 저항력을 갖게 될 수 있다는 바람직하지 않은 효과가 발생하는데, 각각의 화학적 살균제의 사용에 의한 상기 비 표적 생물의 처리는 본래 예상되지 않았다. 이는, 이와 같은 비 표적 생물이 자체로 완전히 인지되지 않은 채 저항력 또는 감소한 감도를 형성하고, 그런 다음 필요한 경우에 기존의 화학적 살균제들에 의해서 처리될 수 없거나, 또는 처리가 의도적으로 이루어지지 않는 결과를 가져올 수 있다.
그 결과 상기 방식으로 처리된 식물들, 과일 또는 채소는 가축 및 인간의 먹이사슬에 도달하고, 살균제들에 의한 알려지지 않은 오염으로 인해, 예를 들어 2차 저항력이 형성됨으로써 큰 피해를 야기할 수 있다.
그 밖에 화학적 살균제 사용에 대한 여론이 점차 부정적으로 형성되는데, 그 이유는 화학적 살균제의 과도한 사용 결과 및 작용 방식과 관련하여 점차 커지는 인간의 지식으로 인해 사람들이 화학적 살균제 사용을 거부하고 최대한 억제하고자 하기 때문이며, 이는 대안에 대한 탐색을 요구하게 만든다.
이미 근래에는 화학적 살균제의 사용 이외에, 생물학적 살균제를 이용하는 것이 알려져 있는데, 생물학적 살균제들은, 병원균들이 이와 같은 생물학적 살균제들에 대해 저항력을 형성할 수 없다는 장점이 있다. 생물 농약의 효과가 각각의 화학적 살균제와 동일시될 수 있는지, 그리고 어느 정도까지 동일시될 수 있는지는 사용된 특수한 생물학적 제제 또는 생물학적 혼합물에 달려 있고, 그리고 효과가 달성되어야 하는 특수한 병원균에 달려 있음으로써, 결과적으로 각각의 경우에 대해 다수의 테스트 및 검사가 요구된다.
DE 699 19 762 T2호로부터 농작물들의 식물 병원성 질병을 퇴치하기 위한 살균성 조성물들이 공지되었는데, 상기 살균성 조성물들에서는 살균 작용하는 2개의 물질의 조합물이 사용됨으로써, 이와 같은 방식으로 상승 방식의 살균 효과가 달성되었고, 그럼으로써 사용된 살균성 물질들의 총량이 감소할 수 있었다.
계속해서 EP 0 930 824 B1호로부터, 실질적으로 왕호장근(Reynoutria sachalinensis)의 식물 제품 및 질소 비료로 구성된 혼합물이 공지되어 있고, 상기 혼합물은 식물 병원균에 의한 감염을 예방하기 위해, 그리고 식물 병원균을 퇴치하기 위해 사용될 수 있다. 이와 같은 혼합물에서도 제공된 활성 물질들의 총량이 감소해야 한다.
WO 99/62341로부터 마침내, 식물병을 생물학적으로 처리해야 하는 상응하는 조성물들과 마찬가지로 보호성 및 치료성 조성물이 공지되어 있고, 이때 상기 조성물들은 특히 수확 이후의 사용을 위해 고려된다. 이 경우, 상기 유형의 조성물은 제독 작용하는 하나 이상의 미생물 및 예를 들어 효소와 같은 특히 생물학적인 항진균제를 함유한다.
마침내 R. Castoria 등(Postharvest Biology and Technology 22, 7쪽 내지 17쪽, 2001)은 수확 이후에 농작물들을 감염시키는 병원성 물질들의 제독제로서 아우레오바시디움 풀루란스(LS-30)의 효과를 기술하는데, 여기서 아우레오바시디움 풀루란스가 다양한 식물들에서 보트리티스 시네레아, 페니실리움 엑스판숨, 리조푸스 스톨로니퍼 및 아스페르질루스 니게르에 대해 상당한 제독 효과를 나타낸다는 사실이 확인되었다. 이와 같은 방식으로 무엇보다 사과에 난 상처들이 아우레오바시디움 풀루란스(LS-30)에 의해 처리되었고, 비교를 위해 상처들이 단지 물에 의해 처리되었다. 이와 같은 결과들은, 아우레오바시디움 풀루란스가 부패 사과의 균질 병원균에 대해 우수한 제독 효과를 갖는다는 사실을 보여준다.
WO 2008/114304는 포도송이에서 보트리티스 시네레아를 퇴치하기 위한 프로피온산 칼슘 및 대두유를 포함한 프로피온산 칼슘의 보조제와 함께, 또는 프로사이미돈의 살균제와 함께 아우레오바시디움 풀루란스 균주들의 사용을 기술한다. 그러나 개별 아우레오바시디움 풀루란스 균주들로 이루어진 조합물 뿐만 아니라, 아우레오바시디움 풀루란스 균주와 플루디옥소닐의 살균제로 이루어진 조합물 또는 아우레오바시디움 풀루란스 균주와 사이프로디닐, 플루디옥소닐의 혼합물로 이루어진 조합물도 검사되지 않았다.
마침내 BIOFA(社)의 홈페이지[http://www.biofa-profi.de/de/b/blossomprotecttm.html?file=files/content/Produkte/BlossomProtectTM/blossomprotect produkthandbuch 2012.pd]에서 이미 사이프로디닐과 아우레오바시디움 풀루란스 DSM 14940 및 DSM 14941로 이루어진 조합물이 권고되었다. 그러나 이와 같은 문서에 마찬가지로 포함된 혼화성 목록으로부터 다수의 화학적 살균제가 공지되는데, 상기 화학적 살균제들은 아우레오바시디움 풀루란스 DSM 14940 및 DSM 14941을 함유하는 Blossom Protect™ 또는 Boni Protect™ 제품과의 자체 비 혼화성으로 인해 이와 같은 문서에 기술되는 조성물들 내에서 사용에 이르지 못한다.
이와 같은 인식에도 불구하고 계속해서, 화학적 살균제의 사용량을 현저히 감소시킬 수 있고, 더 나아가 개별 물질, 말하자면 하나 이상의 화학적 살균제 및 생물학적 활성 물질의 사용에 대해 현저히 향상된 효과를 달성할 수 있는 또 다른 작용성 살균제들 또는 살균성 혼합물들을 제공해야 할 필요성이 제기된다.
이와 같은 과제를 해결하기 위해, 본 발명에 따른 조성물은 실질적으로, 하나 이상의 화학적 살균제에 대해 추가로 적어도 아우레오바시디움 풀루란스 균주들 DSM 14940 및 DSM 14941을 함유하는 혼합물이 함유되어 있고, 이때 상기 하나 이상의 화학적 살균제 및 상기 아우레오바시디움 풀루란스 균주들의 혼합물은 상기 조성물 내에서 상승 작용하는 양으로 존재하고, 상기 하나 이상의 화학적 살균제는 플루디옥소닐 또는 플루디옥소닐과 하나 이상의 제2 화학적 살균제를 함유하는 조합물로부터 선택되는 것을 특징으로 한다. 상기 조성물이 하나 이상의 화학적 살균제에 대해 추가로 적어도 아우레오바시디움 풀루란스 균주들 DSM 14940 및 DSM 14941을 함유하는 혼합물을 상승 작용하는 양으로 함유함으로써, 개별 물질들이 단독으로 사용되거나, 또는 별도로 사용되는 경우보다 향상된 살균 효과를 달성하는 것이 가능하다. 마침내 상기 유형의 접근 방식에 의해, 플루디옥소닐 또는 플루디옥소닐과 하나 이상의 제2 화학적 살균제를 함유하는 조합물로 구성된 화학적 살균제들에 대해 저항력을 제거하거나, 또는 억제하는 것이 가능한데, 상기 저항력은 이미 상기 화학적 살균제들의 단독 사용에서 관찰되며, 이와 같은 방식으로 살균제들의 작용 방식을 놀라울 정도로 재차 현저히 향상시키는 것이 가능하다. 조성물 내 화학적 살균제들 중 하나 이상의 화학적 살균제에 대해 적어도 저항력 또는 더 낮은 감도를 갖는 균질 병원균들을 예방하는 경우에 상기 조성물이 특히 효과적이다. 여기서 특히 "효과적이다"는 표현은, 개별 물질들에 대한 상기 조성물의 시너지 팩터(synergism factor)가 1.1보다 크다는 사실을 의미한다.
"조성물"이라는 용어는, 모든 개별 물질들, 말하자면 하나 이상의 화학적 살균제 및 2개의 아우레오바시디움 풀루란스 균주 DSM 14940 및 DSM 14941을 함유하고, 식물들에 직접 제공되는 완성된 용액 또는 현탁액으로 이해된다. 일반적으로 조성물들로는, 통상적으로 식물들에 제공되기 이전에 혼합되는, 탱크 믹스(tank mix)로도 언급되는 수성 용액들 또는 현탁액들이 고려된다. 이 경우, 개별 물질들 또는 개별 성분들은 농축된 액체 또는 고체의 형태로 물과 탱크 내에서 혼합되고, 용해되거나, 또는 현탁된다. 이 경우, 상기 개별 물질들 또는 개별 성분들이 개별적으로, 혹은 하나 이상의 화학적 살균제와 2개의 아우레오바시디움 풀루란스 균주 DSM 14940 및 DSM 14941로 구성된 농축된 프리믹스(premix)로 상기 탱크 내로 제공되어, 물과 혼합되고, 용해되거나, 또는 현탁되는지는 중요하지 않다. 이 경우, 물과 상기 개별 물질들 또는 개별 성분들, 혹은 상기 프리믹스가 상기 탱크 내로 제공되는 순서는 중요하지 않다. 이 경우, 조성물 내에서 효과적인 농도를 달성하기 위해, 상기 개별 물질들 또는 개별 성분들, 혹은 상기 농축된 프리믹스는 예를 들어 1:10, 1:100, 1:1000 또는 1:10000의 팩터만큼 탱크 내에서 희석된다. 놀랍게도 본 출원서에 따른 조성물들에 의해, 플루디옥소닐 또는 플루디옥소닐 및 사이프로디닐과 2개의 아우레오바시디움 풀루란스 균주 DSM 14940 및 DSM 14941의 혼합물을 제조하는 것이 가능해졌는데, 이와 같은 균주들 또는 이와 같은 화학적 살균제들을 함유하는 공지된 제품들이 이론적으로 비 혼화성을 갖는 것으로 기술되었더라도 그렇다([http://www.biofa-profi.de/de/b/blossomprotecttm.html?file=files/content/Produkte/BlossomProtectTM/blossomprotect produkthandbuch 2012.pd]의 첨부물로서 혼화성 목록 참조).
"화학적 살균제"의 용어는 화학적, 살균성 활성 물질로 이해되는데, 특히 사이프로디닐(CAS-Nr. 121552-61-2), 플루디옥소닐(CAS-Nr. 131341-86-1), 펜헥사미드(CAS-Nr. 126833-17-8), 펜피라자민(CAS-Nr. 473798-59-3), 피리메탄일(CAS-Nr. 53112-28-0), 바람직하게 사이프로디닐 및 플루디옥소닐로 이해되며, 이때 적어도 플루디옥소닐은 하나 이상의 화학적 살균제로서 반드시 조성물 내에 함유되어 있다.
본 출원서에서 "균질 병원균"은, 자신의 숙주 내에 질병을 야기하는 미생물로 이해된다. 이 경우, 균질 병원균들은 바람직하게 네오파브레이아 속(屬), 특히 페지쿨라 말리코르티시스(DSMZ 62715) 및 보트리티스 속, 특히 보트리티스 시네레아의 미생물들이고, 상기 미생물들은 과일-, 과실주- 및 채소 작물들에서, 특히 사과, 포도송이, 딸기 그리고 주키니 및 매로우와 같은 조롱박에서 질병을 야기한다.
특히 우수한 상승효과는, 조성물 내에 상기 하나 이상의 화학적 살균제 및 적어도 상기 아우레오바시디움 풀루란스 균주들 DSM 14940 및 DSM 14941을 함유하는 혼합물을 상승 작용하는 양으로 함유함으로써 달성된다. 놀랍게도, 적어도 플루디옥소닐을 함유하는 화학적 살균제와 서로 다른 2개 이상의 아우레오바시디움 풀루란스 균주, 말하자면 DSM 14940 및 DSM 14941을 함유하는 혼합물의 사용 또는 적용이 상기 2개의 아우레오바시디움 풀루란스 균주 중 단 하나의 아우레오바시디움 풀루란스 균주와 상기 화학적 살균제의 적용과 다르게, 현저히 향상된, 특히 상승효과를 나타낸다는 사실이 드러났다. 이 경우, 상기 2개의 아우레오바시디움 풀루란스 균주 DSM 14940 및 DSM 14941의 상호 간 세포량 비율은 2:1 내지 1:2, 특히 1:1로 선택됨으로써, 결과적으로 상응하는 혼합물도 간단하게 제조될 수 있다.
조성물의 특히 신뢰할 만한, 특히 상승효과는, 상기 아우레오바시디움 풀루란스 균주들 DSM 14940 및 DSM 14941이 각각 1×105 내지 1×108 세포/㎖ 조성물, 바람직하게 1×106 내지 2×107 세포/㎖ 조성물, 바람직하게 1.67×106 내지 3.33×106 세포/㎖ 조성물, 특히 바람직하게 2.5×106 세포/㎖ 조성물의 농도로 존재하는 경우에 달성된다. 상기 아우레오바시디움 풀루란스 균주들 DSM 14940 및 DSM 14941이 각각 1×105 내지 1×108 세포/㎖ 조성물, 바람직하게 1×106 내지 2×107 세포/㎖ 조성물, 바람직하게 1.67×106 내지 3.33×106 세포/㎖ 조성물, 특히 바람직하게 2.5×106 세포/㎖ 조성물의 농도로 함유되어 있음으로써, 이와 같은 조성물의 적용시, 네오파브레이아 속, 특히 페지쿨라 말리코르티시스(DSMZ 62715) 및 보트리티스 속, 특히 보트리티스 시네레아, 모닐리니아 속, 페니실리움 속, 콜레토트리쿰 속의 그룹으로부터 선택된 다양한 균질 병원균들에 의해 야기된 부패를 무엇보다 안전하고 신뢰할 만하게 억제하는 것이 가능한데, 특히 농작물의 외부 상처들에 의해 야기된 부패 자국의 확대를 억제하는 것이 가능하다.
본 발명의 하나의 개선예에 따르면, 조성물은, 화학적 살균제가 플루디옥소닐(CAS-Nr. 131341-86-1) 및 사이프로디닐(CAS-Nr. 121552-61-2), 펜헥사미드(CAS-Nr. 126833-17-8), 펜피라자민(CAS-Nr. 473798-59-3) 및 피리메탄일(CAS-Nr. 53112-28-0)의 그룹으로부터 선택된 하나 이상의 제2 화학적 살균제로부터 선택되도록 형성되어 있다.
플루디옥소닐과 사이프로디닐로 이루어진 조합물이 특히 바람직하고, 특히 사이프로디닐 또는 플루디옥소닐은 이미 현재 균질 병원균들에 대해 현저히 제한된 효과를 나타내는데, 그 이유는 이와 같은 균질 병원균들이 이미 이와 같은 2개의 활성 물질에 대해 저항력을 발전시키기 때문이다. 놀랍게도, 상기 화학적 살균제들 플루디옥소닐과 사이프로디닐의 조합물이 본 발명에 따른 조성물 내에 함유되어 있는 경우, 상기 저항력이 억제될 수 있고, 상기 조성물 내에 낮은 농도로 함유되어 있더라도, 상기 물질들이 균질 병원균들에 대해 완전한 효과를 발전시킬 수 있다는 사실이 확인될 수 있었다.
본 발명의 하나의 개선예에 따르면, 조성물은, 상승 작용하는 양으로서 사이프로디닐은 0.00375g/l 조성물 내지 5g/l 조성물, 바람직하게 0.02g/l 조성물 내지 1.0g/l 조성물, 특히 0.1875g/l 조성물 내지 0.375g/l 조성물의 농도로 함유되어 있고, 플루디옥소닐은 0.0025g/l 조성물 내지 5g/l 조성물, 바람직하게 0.01g/l 조성물 내지 1.0g/l 조성물, 특히 0.125g/l 조성물 내지 0.25g/l 조성물의 농도로 함유되어 있도록 형성되어 있다. 화학적 살균제들의 사용량은 무엇보다, 균질 병원균들이 상기 하나 이상의 화학적 살균제에 대해 이미 저항력 또는 감소한 감도를 갖는지 여부에 달려 있다. 상기 화학적 살균제들 사이프로디닐 또는 플루디옥소닐이 조성물 내에 제시된 양으로 함유되어 있는 경우, 상기 화학적 살균제들은 낮은 함유량에도 불구하고 균질 병원균들에 대해 효과를 완전히 발휘할 수 있고, 놀랍게도 상기 균질 병원균들에 의해 아우레오바시디움 풀루란스 균주들 DSM 14940 및 DSM 14941과 조합된 이와 같은 공지된 화학적 살균제들에 대해 저항력 또는 감도가 전혀 나타나지 않거나, 또는 감소한 저항력 또는 감도가 나타난다. 그 밖에, 아우레오바시디움 풀루란스 균주들 DSM 14940 및 DSM 14941로 이루어진 혼합물을 함유하는 본 발명에 따른 조성물은 상승효과를 나타냄으로써, 결과적으로 마찬가지로 우수한 효과를 달성하기 위해 필요한 각각의 개별 물질들 또는 개별 성분들의 사용량의 총합보다 현저히 적은 사용량으로도 충분하다.
이 경우에 "상승효과"는, a) 하나 이상의 화학적 살균제의 단독 사용 또는 b) 2개의 아우레오바시디움 풀루란스 균주 DSM 14940 및 DSM 14941의 혼합물의 단독 사용 또는 c) 2개의 아우레오바시디움 풀루란스 균주 중 단 하나의 아우레오바시디움 풀루란스 균주 DSM 14940 또는 DSM 14941과 함께 하나 이상의 화학적 살균제의 사용과 비교해서, 하나 이상의 화학적 살균제와 2개의 아우레오바시디움 풀루란스 균주 DSM 14940 및 DSM 14941의 혼합물의 조합물의 살균 효과의 가산 이상의 증가로 이해된다. 화학적 살균제들과 조합된 아우레오바시디움 풀루란스 균주들 DSM 14940 및 DSM 14941 각각의 사용, 혹은 화학적 살균제들과 조합된 기존 아우레오바시디움 풀루란스 균주들(AP 241 및 AP 298) 상호 간의 혼합물 또는 기존 아우레오바시디움 풀루란스 균주들(AP 241 및 AP 298)과 2개의 아우레오바시디움 풀루란스 균주 DSM 14940 및 DSM 14941 중 하나의 아우레오바시디움 풀루란스 균주의 혼합물의 사용도 마찬가지로 놀랍게도 상승효과를 전혀 나타내지 않았다. 상승효과의 수학적 계산을 위해, Colby 등 저(Weeds 15, 20쪽 내지 22쪽, 1967)에서와 같이 조작되고, 이때 1보다 큰 시너지 팩터가 상승효과의 존재를 확인시켜주는 것으로 간주된다.
최대 효과는, 본 발명에 따른 조성물이 실질적으로, 사이프로디닐과 플루디옥소닐이 조성물 내에 2:1 내지 1:2, 바람직하게 2:1 내지 1:1, 특히 1.5:1의 중량비로 존재하는 것을 특징으로 함으로써 달성될 수 있었다. 상기 조성물 내에 2개의 생물학적 살균제(=아우레오바시디움 풀루란스 균주들 DSM 14940 및 DSM 14941) 이외에 2개의 화학적 살균제가 사용됨으로써, 균질 병원균들에 대해 단지 광대역 효과만이 달성될 뿐만 아니라, 놀랍게도 개별 물질들의 사용량이 대폭 감소할 수 있었다는 사실이 확인됨으로써, 결과적으로 전체 성분들의 상승효과가 입증된다.
본 발명은 계속해서, 균질 병원균들에 의해 야기된 식물병의 확산을 예방하기 위해, 그리고/또는 감소시키기 위해 사용되는, 본 발명에 따른 조성물의 용도를 목표로 한다.
상기 유형의 용도에 의해, 해당 농작물에 대해 식물병의 발생 및/또는 확산을 감소시키거나, 또는 완전히 정지시키는 것이 가능하며, 그럼으로써 수확물의 더 긴 숙성 시간이 보장될 수 있고, 특히 균질 병원균들의 확산이 억제될 수 있다.
특히 바람직하게 상기 조성물은, 네오파브레이아 속, 특히 네오파브레이아 말리코르티시스 또는 페지쿨라 말리코르티시스, 보트리티스 속, 특히 보트리티스 시네레아, 모닐리니아 속, 페니실리움 속, 콜레토트리쿰 속의 그룹으로부터 선택된 균질 병원균들에 의해 야기되는 식물병에 적용된다. 이와 같은 균질 병원균들, 특히 네오파브레이아 말리코르티시스 및 보트리티스 시네레아의 경우, 최상의 결과들이 달성될 수 있고, 특히 해당 식물들에서 식물병의 확산이 거의 완전히 억제될 수 있으며, 식물병의 발생에 대해 우수한 예방도 이루어질 수 있다.
최대의 상승효과는, 본 발명의 하나의 개선예에 상응하는 것처럼, 조성물이, 아우레오바시디움 풀루란스 균주들 DSM 14940 및 DSM 14941이 각각 1×106 내지 2×107 세포/㎖ 조성물, 바람직하게 1.67×106 내지 3.33×106 세포/㎖ 조성물, 특히 바람직하게 2.5×106 세포/㎖ 조성물의 세포량 비율로 함유되어 있고, 화학적 살균제들 플루디옥소닐 및 사이프로디닐이 플루디옥소닐에 대해 바람직하게 0.0025g/l 조성물 내지 1.0g/l 조성물, 특히 0.125g/l 조성물 내지 0.25g/l 조성물의 농도로 함유되어 있거나, 또는 사이프로디닐에 대해 0.00375g/l 조성물 내지 1.0g/l 조성물, 특히 0.1875g/l 조성물 내지 0.375g/l 조성물의 농도로 함유되어 있도록 형성되는 경우에 달성된다. 상기 유형의 조성물에 의해 1.5까지 이르는 시너지 팩터가 달성될 수 있다.
본 발명에 따른 특히 바람직한 용도는, 균질 병원균들, 특히 보트리티스 시네레아 및 네오파브레이아 말리코르티시스(페지쿨라 말리코르티시스)가 하나 이상의 화학적 살균제, 말하자면 플루디옥소닐에 대해 저항력 및/또는 감소한 감도를 갖는 것을 특징으로 한다. 상기 균질 병원균들이 상기 하나 이상의 화학적 살균제에 대해 저항력 또는 감소한 감도를 갖는 경우, 본 발명에 따른 조성물이 사용될 수 있는데, 그 이유는 상기 균질 병원균들이 사용된 조성물에 대해 민감하고, 상기 병원균들이 성공적으로 무해해지기 때문이다. 이 경우, 놀랍게도 특히, 그에 대한 저항력이 확실하게 형성된 화학적 살균제도 사용될 수 있었다. 이러한 사실은, 상기 병원균들이 저항력을 유지하기 위해 에너지를 사용해야 하는데, 아우레오바시디움 풀루란스 균주들 DSM 14940 및 DSM 14941의 사용 및 상기 균주들의 제독 효과에 의해 상기 병원균들은 상기 에너지를 먹이 경쟁자로서 제공할 수 없고, 이와 같은 방식으로 상기 하나 이상의 화학적 살균제가 다시 무제한으로 작용할 수 있음으로써 뒷받침된다.
이 경우, 바람직하게 상기 하나 이상의 화학적 살균제 및 적어도 아우레오바시디움 풀루란스 균주들 DSM 14940 및 DSM 14941을 함유하는 혼합물은 상승 작용하는 양으로 사용된다. 상기 유형의 사용에 의해, 살균 효과가 감소하지 않으면서, 살균성 물질들, 말하자면 생물학적 살균 물질들뿐만 아니라 화학적 살균 물질들의 사용량이 개별 물질들과 비교해서 현저히 감소할 수 있다. 이와 같은 방식으로 한편으로, 플루디옥소닐과 같은 무해하지 않은 화학적 살균제들에 의한 환경 파괴를 현저히 줄일 수 있고, 그 밖에 농작물의 안전하고 신뢰할 만한 보호를 달성할 수 있는데, 특히 네오파브레이아 말리코르티시스, 보트리티스 시네레아, 모닐리니아 속, 페니실리움 속, 콜레토트리쿰 속과 같은 균질 병원균들에 대해 보호를 달성할 수 있다.
이 경우, 상기 하나 이상의 화학적 살균제는 플루디옥소닐과 사이프로디닐, 펜헥사미드, 펜피라자민 및 피리메탄일의 그룹으로부터 선택된 하나 이상의 제2 화학적 살균제로부터 선택되거나, 또는 2:1 내지 1:2, 바람직하게 2:1 내지 1:1, 특히 1.5:1의 중량비의 사이프로디닐과 플루디옥소닐의 혼합물로부터 선택된다. 상기 화학적 살균제가 2:1 내지 1:2, 특히 1.5:1의 중량비의 사이프로디닐과 플루디옥소닐의 혼합물로서 사용됨으로써, 다수의 균질 병원균에 대해 특히 폭넓은 보호가 달성될 수 있다.
이 경우, 아우레오바시디움 풀루란스 균주들 DSM 14940 및 DSM 14941이 2:1 내지 1:2, 바람직하게 1:1의 세포량 비율로 사용되는 경우, 화학적 살균제들의 사용량은 더욱더 감소할 수 있다. 상기 세포량 비율은 특히 사용된 세포 수를 기준으로 한다.
마침내 본 발명은 균질 병원균에 의해 야기된 하나 이상의 식물병의 확산을 예방하기 위한, 또는 감소시키기 위한 방법에 관한 것이며, 상기 방법은 실질적으로,
a) 플루디옥소닐 또는 플루디옥소닐과 하나 이상의 제2 화학적 살균제를 함유하는 조합물로부터 선택된 하나 이상의 화학적 살균제 및
b) 적어도 아우레오바시디움 풀루란스 균주들 DSM 14940 및 DSM 14941을 함유하는 혼합물이
공동으로 한 번 이상 재배 식물상으로 제공되고, 이때 a) 및 b)는 상승 작용하는 양으로 상기 재배 식물상으로, 특히 분사, 분무 또는 살수 공정에 의해 제공되는 것을 특징으로 한다.
상기 유형의 방법에 의해, 균질 병원균들, 상기 균질 병원균들의 서식지 또는 균질 병원균에 의해 감염되지 않아야 할 과일-, 과실주- 및 채소 작물들, 특히 사과, 포도송이, 딸기 그리고 주키니 및 매로우와 같은 조롱박을 플루디옥소닐 또는 플루디옥소닐과 하나 이상의 제2 화학적 살균제를 함유하는 조합물로부터 선택된 하나 이상의 화학적 살균제 및 2개의 아우레오바시디움 풀루란스 균주 DSM 14940 및 DSM 14941의 제공에 의해 무해하게 만드는 것이 가능하다. 바람직하게 상기 방법은, 조성물이 분사, 분무 또는 살수 공정에 의해 제공되도록 실시된다. 상기 유형의 방법에 의해, 소량의 화학적 살균제들 및 생물학적 살균제들의 사용에도 불구하고 처리될 식물들, 과일- 또는 채소류, 특히 사과 상으로, 네오파브레이아 속, 보트리티스 속, 모닐리니아 속, 페니실리움 속, 콜레토트리쿰 속, 특히 네오파브레이아 말리코르티시스(페지쿨라 말리코르티시스) 및 보트리티스 시네레아와 같은 균질 병원균들을 안전하고 신뢰할 만하게 제거하거나, 상기 균질 병원균들의 확산을 감소시키는 활성 조성물을 제공하는 것이 가능하다. 상승효과의 발생에서 중요한 것은, 성분들 a) 및 b)가 공동으로, 그리고 동시에 재배 식물상에 존재한다는 사실이다. 이와 같은 성분들이 상기 재배 식물상에 동시에 존재하거나, 또는 작용하는 경우에 한해, 성분 a) 및 b)를 서로 분리해서 제공하거나, 또는 성분 b)의 2개의 아우레오바시디움 풀루란스 균주 DSM 14940과 DSM 14941도 서로 분리해서 제공하는 것이 이론상으로 가능하다. a) 및 b) 또는 개별 아우레오바시디움 풀루란스 균주들 DSM 14940 및 DSM 14941을 별도의 탱크 믹스 내에서 목표한 양 또는 농도로 설정하고, 목표한 헥타르(ha)당 제공량에 상응하게 동시에 또는 짧은 시간차로 연속적으로 재배 식물상으로 제공하는 것이 가능하다. 그러나 간소화를 위해, 그리고 무엇보다 이와 같은 경우에 조성물의 성분들이 공동으로 존재하는 상황이 보장될 수 있기 때문에, 그리고 비용적인 이유들에서도, 성분들 a) 및 b)의 공동 제공이 바람직한데, 다시 말해 성분들 a) 및 b)는 동일한 탱크 믹스 또는 조성물 내에 존재한다.
이 경우, 바람직하게 상기 방법은, a) 및 b)가 공동으로 조성물 내에서 혼합되고, 용해되거나, 또는 현탁되도록, 그리고 상기 조성물이 재배 식물상으로 제공되도록 실시된다. 상기 유형의 방법 실시에 의해 처리될 재배 식물상으로 직접 제공될 수 있는 사용 준비가 완료된 용액, 현탁액 또는 혼합물을 직접 제조하는 것이 가능하다.
이 경우, 특히 우수한 결과들은, 상기 방법이, 사용당 각각 1×1011 내지 1×1014 세포/ha, 바람직하게 1×1012 내지 2×1013 세포/ha 조성물, 바람직하게 1.67×1012 내지 3.33×1012 세포/ha 조성물, 특히 바람직하게 2.5×1012 세포/ha의 개별 아우레오바시디움 풀루란스 균주들 DSM 14940 및 DSM 14941이 제공되도록 실시되는 경우에 달성될 수 있다. 상기 유형의 세포 수의 아우레오바시디움 풀루란스 균주들 DSM 14940 및 DSM 14941을 제공함으로써, 균질 병원균들에 의해 야기된 식물병의 확산의 효과적인 예방 또는 확실한 감소가 달성될 수 있었다. 동일한 방식으로, 본 발명의 하나의 개선예에 상응하는 것처럼, 상기 방법이, 화학적 살균제로서 플루디옥소닐이 사용되고, 이때 특히 2.5g/ha 내지 5000g/ha, 바람직하게 10g/ha 내지 1000g/ha, 특히 125g/ha 내지 250g/ha가 제공되거나, 또는 플루디옥소닐과 사이프로디닐의 혼합물이 사용되고, 이때 특히 3.75g 사이프로디닐/ha 내지 5000g 사이프로디닐/ha, 바람직하게 20g/ha 내지 1000g/ha, 특히 187.5g/ha 내지 375g/ha가 제공되도록 실시되는 경우에 균질 병원균들에 의해 야기된 식물병의 확산의 효과적인 예방 또는 확실한 감소가 달성될 수 있었다.
상기 방법이, 하나 이상의 화학적 살균제 및 적어도 2개의 아우레오바시디움 풀루란스 균주 DSM 14940 및 DSM 14941, 특히 위에 정의된 조성물의 한 번 이상의 제공이 재배 식물의 개화 단계 동안에 이루어지도록 실시되는 경우에 특히 효과적이다. 재배 식물의 개화 단계 동안에 상기 조성물이 제공됨으로써 균질 병원균들에 의해 야기된 식물병의 확산의 특히 효과적인 예방 또는 감소가 가능하다. 상기 재배 식물의 개화 단계를 정의하기 위해, 국제적으로 상용되는 발전 단계들의 BBCH-코드가 이용되고, 이때 포도 나무의 개화 단계들은 BBCH-코드 53, 55, 57 및 60-69(Lorenz 등 저, 포도 나무의 생물 계절학적 발전 단계들, 포도 재배학 포도주학 자연과학 49, 66-70, 1994)에 상응하고, 딸기의 개화 단계들은 BBCH-코드의 55-59, 60, 61, 65 및 67(Meier 등 저, 이과, 핵과, 커런트 및 딸기의 생물 계절학적 발전 단계들 신문 독일 식물 보호 46, 141-153, 1994)에 상응한다. 개화 단계 동안에, 또는 개화 단계 동안과 후속하는 발전 단계들, 말하자면 과실 발육 단계 및 과실 성숙 단계에서 성분들 a) 및 b)의 여러 번의 동시 제공은 상승효과를 더욱 증가시킬 수 있다.
본 발명은 다음에서 실시예들에 의해 더 상세하게 설명된다.
예시 1: 균질 식물 병원균들을 퇴치하기 위한 아우레오바시디움 풀루란스 균주들 및 화학적 살균제들
균질 식물 병원균들 보트리티스 및 네오파브레이아에 대한 (개별적으로 또는 조합 상태에서) 화학적 살균제들 사이프로디닐 및 플루디옥소닐과 함께 (개별적으로 또는 조합 상태에서) 아우레오바시디움 풀루란스 균주들 AP241(DSM 32467), AP268(DSM 32468), DSM 14940 및 DSM 14941의 효과는 사과 검사에서 결정되었다. 처리당 동일한 숙도 및 크기를 갖는 동일한 종류의 12개의 처리되지 않은 사과가 사용되었다. 검사 이전에 상기 사과들은 3분 동안 70%의 에탄올 내에서 표면 살균되었고 층류상자(laminar flow box)에서 건조되었다. 사과당 줄기와 받침 사이의 적도면 내에서 살균한 피펫 팁(pipette tip)에 의해 5㎜의 지름을 갖는 4개의 상처가 동일한 간격으로 제공되었다. 4개의 인공 상처의 형성 직후에 사과당 각각 10㎕의 서로 다른 검사 용액들(조성물들)이 제공되었다. 후속하여 상기 사과들은 숙성되었다. 상기 상처들 주변으로 부패 부위가 형성되었고, 상기 부패 부위의 지름은 병원균 감염의 확산의 척도를 나타낸다. 평가를 위해, 부패 부위 지름으로부터 각각 0.5㎝의 홈 지름이 감산되었다.
사과당 4개의 상처 중 각각 하나의 상처에 제공된 4개의 검사 용액은:
1. 병원균(음성 대조 검체)
2. 병원균 및 아우레오바시디움 풀루란스(각각 또는 조합물)
3. 병원균 및 화학적 살균제(각각 또는 조합물)
4. 병원균 및 아우레오바시디움 풀루란스(각각 또는 조합물) 및 화학적 살균제(각각 또는 조합물)이다.
숙성 종료시 측정된 부패 부위 지름들로부터 검사 용액 2 내지 4에 대해 병원균 억제의 효율이 산출되었다. 이와 같은 효율은 각각의 음성 대조 검체에 대한 부패 부위 지름의 백분율 제거에 상응한다. 예를 들어 검사 용액 1의 부패 부위 지름이 5㎝이고 검사 용액 2, 3 또는 4의 부패 부위 지름이 각각 1㎝이면, 검사 용액 2 내지 4의 효율은 각각 80%이다. 상기 음성 대조 검체의 효율은 정의상 영이다.
검사 용액 2 및 3에서 개별 성분들의 효율들(WG)로부터 Colby-화학식(S.R. Colby "Calculating synergistic and antagonistic responses of herbicide combinations", Weeds 15, 20쪽 내지 22쪽, 1967)에 따라 아우레오바시디움 및 화학적 살균제로 이루어진 조합물(검사 용액 4)의 효과의 기댓값(E)이 다음 화학식에 따라 계산되었다.
E = WG X ＋ (WG Y/100)×(100 － WG X)
E ... 기댓값
WG X ... 개별 성분 X의 효율
WG Y ... 개별 성분 Y의 효율
아우레오바시디움 풀루란스 균주들 및 화학적 살균제의 조합물(검사 용액 4)의 측정된 효율이 산출된 기댓값(E)보다 크면, 상승효과가 언급된다(개별 성분들은 가산 이상으로 서로 보강함). 시너지 팩터는 상승효과의 척도이고 물질들 또는 성분들의 조합물(검사 용액 4)의 효율과 산출된 기댓값(E)의 비율로서 계산되었다. 시너지 팩터가 1.1보다 크거나 같으면, 상기 조합물의 효과가 개별 성분들의 효과와 비교해서 상승효과를 갖는다. 본 문서에서 "상승 작용" 또는 "상승 작용하는" 또는 "상승효과" 등이 언급되면, 이는 항상 조합물의 개별 성분들과 비교해서 1.1보다 크거나 같은 시너지 팩터를 갖는 조합물들과 관계된다. 검사 용액 1 내지 4에 기초한 실험 설계당 12개의 모형(12개의 사과)이 검사되었다.
검사된 균질 식물 병원균들:
보트리티스 속:
보트리티스 시네레아 Bc97(DSM 32469)
이와 같은 균주는 화학적 살균제들 스트로빌루린, 보스칼리드 및 사이프로디닐에 대해 저항력을 갖고 플루디옥소닐에 대해 감소한 감도를 갖는다.
보트리티스 시네레아 12/4(DSM 32486)
이와 같은 균주는 화학적 살균제들에 대해 공지된 감소한 감도 또는 저항력을 전혀 갖지 않는다.
네오파브레이아 속: 페지쿨라 말리코르티시스 160622(DSM 62715)
병원균 용액들:
병원균 용액들을 제조하기 위해 병원균에 의해 20℃에서 성장한 ME-영양 한천 판들(ME-한천: 1000㎖의 증류수 상에서 30g의 맥아추출물, 15g의 한천, 5g의 펩톤)로부터 대략 1-2㎝×2㎝ 면적의 분생자가 제거되었고, 다운서(Douncer)에 의해 10㎖의 물 내에 현탁되었다. 그런 다음 분생자 농도가 토마상자(Thoma chamber) 내에서 현미경에 의해 계산되어 물에 의해 목표한 농도로 설정되었다.
보트리티스
검사 용액 내 분생자의 종료 농도: 2×105 분생자/㎖
2×농축된 병원균 용액 내 분생자 농도: 4×105분생자/㎖
네오파브레이아
검사 용액 내 분생자의 종료 농도: 2×106분생자/㎖
2×농축된 병원균 용액 내 분생자 농도: 2×106분생자/㎖
아우레오바시디움 풀루란스 균주들:
DSM 14940
DSM 14941
AP 241(DSM 32467) 단독의 아우레오바시디움 풀루란스 균주
AP 268(DSM 32468) 단독의 아우레오바시디움 풀루란스 균주
아우레오바시디움 풀루란스 농도들:
아우레오바시디움 풀루란스 균주들 DSM 14940, DSM 14941, AP 241 및 AP 268은 영양 한천판들(YM-한천: 1000㎖의 증류수 상에서 3g의 효모추출물, 3g의 맥아추출물, 5g의 펩톤, 10g의 포도당 및 20g의 한천) 상에서 27℃에서 배양되었고, 세포들은 0.6%의 NaCl 용액에 의해 획득되었다. 효모균들의 농도는 토마 계산실 내에서 현미경에 의해 계산되어 물에 의해 목표한 농도로 설정되었다. 세포 생존율 및 집락 형성 단위의 검사들은, ＞99.9%의 세포들이 생존하고 집락을 형성할 수 있다는 결과를 도출했다. 그에 따라 세포들 특히 세포/㎖의 지표는 집락 형성 단위(KBE) 및 특히 KBU/㎖와 동일한 의미를 갖는다.
2×농축된 아우레오바시디움 용액: 1×107세포/㎖
4×농축된 아우레오바시디움 용액: 2×107세포/㎖
검사 용액(조성물) 내 종료 농도들:
DSM 14940, DSM 14941, AP 241 및 AP 268: 5×106세포/㎖
AP 1: DSM 14940과 DSM 14941의 1:1 혼합물: 2.5×106세포/㎖ DSM 14940 및 2.5×106세포/㎖ DSM 14941
AP 2: DSM 14940과 AP 241의 1:1 혼합물: 2.5×106세포/㎖ DSM 14940 및 2.5×106세포/㎖ AP 241
AP 3: DSM 14940과 AP 268의 1:1 혼합물: 2.5×106세포/㎖ DSM 14940 및 2.5×106세포/㎖ AP 268
AP 4: DSM 14941과 AP 241의 1:1 혼합물: 2.5×106세포/㎖ DSM 14941 및 2.5×106세포/㎖ AP 241
AP 5: DSM 14941과 AP 268의 1:1 혼합물: 2.5×106세포/㎖ DSM 14941 및 2.5×106세포/㎖ AP 268
AP 6: DSM 14940과 DSM 14941의 2:1 혼합물(3.33×106세포/㎖ DSM 14940 및 1.67×106세포/㎖ DSM 14941)
AP 7: DSM 14940과 DSM 14941의 1:2 혼합물(1.67×106세포/㎖ DSM 14940 및 3.33×106세포/㎖ DSM 14941)
화학적 살균제들:
다음의 화학적 살균제들이 표에 제시된 농도로 사용되었다:
상처당 검사 용액들:
Figure pct00002
결과
보트리티스 시네레아 Bc97
검사 시스템: 조나골드 혼셀(Jonagold Honsel) 종의 사과들
숙성 온도: 20℃; 숙성 기간: 6일
병원균: 보트리티스 시네레아 Bc97
아우레오바시디움 풀루란스 균주들: DSM 14940, DSM 14941, AP 241, AP 268
화학적 살균제들: 플루디옥소닐, 사이프로디닐
Figure pct00003
Figure pct00004
Figure pct00005
위에 제시된 표들로부터, 화학적 살균제들 플루디옥소닐 또는 사이프로디닐과 함께, 그리고 플루디옥소닐과 사이프로디닐의 혼합물과 함께 개별 아우레오바시디움 풀루란스 균주들의 사용이 상승효과를 갖지 않는다는 사실을 분명하게 알 수 있다.
Figure pct00006
Figure pct00007
Figure pct00008
위에 제시된 표들로부터, 화학적 살균제들 사이프로디닐 또는 플루디옥소닐과 함께, 그리고 사이프로디닐과 플루디옥소닐의 혼합물과 함께 2개의 아우레오바시디움 균주 DSM 14940 및 DSM 14941의 혼합물들의 사용이 현저한 상승효과를 갖는다는 사실을 분명하게 알 수 있다. 화학적 살균제(들)와 함께 DSM 14940 및 DSM 14941의 조성물들(검사 그룹 4)의 효율은 각각 산출된 기댓값(E)보다 현저히 더 높다. 시너지 팩터는 1.1보다 크거나 같다.
각각 플루디옥소닐과 함께 AP 1 및 AP 6 그룹에서는 거의 전혀 부패 형성이 이루어지지 않았는데(0.08㎝ 또는 0.05㎝의 부패 부위 지름), 이는 본 발명의 조성물들의 매우 우수한 예방 효과를 확인시켜준다. 그룹 AP 1, AP 6 및 AP 7의 나머지 실험들에서는 부패 형성의 현저한 감소가 나타났는데, 이는 본 발명의 조성물들에 의한 진균성 질병의 확산의 감소를 나타낸다.
Figure pct00009
병원균 보트리티스 시네레아 Bc97에 대한 2개의 화학적 살균제 사이프로디닐 및 플루디옥소닐과 AP 1, AP 6 및 AP 7의 혼합물들의 상승효과는 위의 실험들과 유사하게 다양한 농도의 화학적 살균제에 의해서도 확인되었다.
사이프로디닐에 대해서는 모든 농도들, 말하자면 0.02g/l; 0.06g/l; 0.125g/l; 0.375g/l; 0.5g/l 및 1.0g/l 조성물에 대해 상승효과가 확인될 수 있었고(시너지 팩터는 1.1보다 크거나 같음), 이때 0.125g/l 및 0.375g/l의 농도에 대해 각각 최고 시너지 팩터가 결정되었다.
플루디옥소닐에 대해서는 모든 농도들, 말하자면 0.01g/l; 0.05g/l; 0.125g/l; 0.25g/l; 0.5g/l 및 1.0g/l에 대해 상승효과가 확인될 수 있었고(시너지 팩터는 1.1보다 크거나 같음), 이때 0.125g/l 및 0.25g/l의 농도에 대해 각각 최고 시너지 팩터가 결정되었다.
보트리티스 시네레아 12/4
검사 시스템: 조나골드 혼셀 종의 사과들
숙성 온도: 20℃; 숙성 기간: 7일
병원균: 보트리티스 시네레아 12/4(플루디옥소닐 및/또는 사이프로디닐에 대해 감도 또는 저항력이 전혀 없음)
아우레오바시디움: DSM 14940, DSM 14941 및 AP 1
화학적 살균제들: 플루디옥소닐, 사이프로디닐; 위에 제시된 양의 화학적 살균제의 단지 1/50만이 사용되었다.
Figure pct00010
위에 제시된 표들로부터, 단지 화학적 살균제들 사이프로디닐 및 플루디옥소닐과 함께 2개의 아우레오바시디움 균주 DSM 14940 및 DSM 14941의 혼합물(AP 1 그룹)의 사용만이 상승효과를 갖는다는 사실을 분명하게 알 수 있다. 이와 관련하여 검사 그룹 4(아우레오바시디움 균주들의 혼합물+화학적 살균제)의 효율은 산출된 기댓값(E)보다 현저히 더 높다. 시너지 팩터는 1.1보다 크거나 같다. 거의 전혀 부패 형성이 이루어지지 않았는데(0.03㎝의 부패 부위 지름), 이는 본 발명의 조성물의 매우 우수한 예방 효과를 확인시켜준다.
병원균 보트리티스 시네레아 12/4에 대한 2개의 화학적 살균제 사이프로디닐 및 플루디옥소닐과 AP 1, AP 6 및 AP 7의 혼합물들의 상승효과는 위의 실험들과 유사하게 다양한 농도의 화학적 살균제에 의해서도 확인되었다.
사이프로디닐에 대해서는 모든 농도들, 말하자면 0.001g/l; 0.00375g/l; 0.005g/l; 0.01g/l; 0.05g/l; 0.1g/l 및 0.1875g/l 조성물에 대해 상승효과가 확인될 수 있었다(시너지 팩터는 1.1보다 크거나 같음).
플루디옥소닐에 대해서는 모든 농도들, 말하자면 0.001g/l; 0.0025g/l; 0.005g/l; 0.01g/l; 0.05g/l; 0.1g/l 및 0.125g/l 조성물에 대해 상승효과가 확인될 수 있었다(시너지 팩터는 1.1보다 크거나 같음).
화학적 살균제들의 사용량이 병원균 자체, 특히 개별 화학적 살균제들에 대한 상기 병원균의 저항력 또는 감소한 감도에 달려 있기 때문에, DSM 14940과 DSM 14941의 아우레오바시디움 풀루란스 혼합물과 상승 작용하기 위해, 몇몇 병원균들에 대해 화학적 살균제의 더 높거나 더 낮은 사용량으로도 충분하다는 사실에 기초해야 한다.
네오파브레이아 속:
검사 시스템: 엘스타 푸크스호프(Elstar Fuchshof) 종의 사과들
숙성 온도: 20℃; 숙성 기간: 16일
병원균: 페지쿨라 말리코르티시스 160622(DSM 62715)
아우레오바시디움: DSM 14940, DSM 14941 및 AP 1(위에 제시된 것과 다르게 여기서 사용된 아우레오바시디움 풀루란스 균주들의 전체 농도는 1×107 세포/㎖)
화학적 살균제들: 플루디옥소닐, 사이프로디닐
Figure pct00011
위에 제시된 표들로부터, 화학적 살균제들 사이프로디닐 및 플루디옥소닐과 함께 2개의 아우레오바시디움 균주 DSM 14940 및 DSM 14941의 사용이 현저한 상승효과를 갖는다는 사실을 분명하게 알 수 있다. 병원균+아우레오바시디움+화학적 살균제(검사 그룹 4)의 효율은 각각 산출된 기댓값(E)보다 현저히 더 높다. 시너지 팩터는 1.1보다 크거나 같다.
계속해서 검사 용액 내 1×107 세포/㎖의 농도로 존재하는 개별 균주들도 화학적 살균제들 사이프로디닐(0.01875%(w/v)=0.1875g 사이프로디닐/l 조성물) 및 플루디옥소닐(0.01250%(w/v)=0.125g 플루디옥소닐/l 조성물) 각각과 함께, 그리고 조합물(0.01875%(w/v) 사이프로디닐; 0.01250%(w/v) 플루디옥소닐)과 함께 검사되었다. 이 경우, 시너지 팩터는 1.0보다 작거나 같았고, 그에 따라 단 하나의 아우레오바시디움 풀루란스 균주와 화학적 살균제들의 사용은 상승효과를 갖지 않는다.
병원균 페지쿨라 말리코르티시스 160622에 대한 AP 1, AP 6 및 AP 7의 혼합물들과 2개의 화학적 살균제 사이프로디닐 및 플루디옥소닐의 상승효과는 위의 실험들과 유사하게 다양한 농도의 화학적 살균제에 의해서도 확인되었다.
사이프로디닐에 대해서는 모든 농도들, 말하자면 0.02g/l; 0.06g/l; 0.125g/l; 0.375g/l; 0.5g/l 및 1.0g/l 조성물에 대해 상승효과가 확인될 수 있었고(시너지 팩터는 1.1보다 크거나 같음), 이때 0.125g/l 및 0.375g/l의 농도에 대해 각각 최고 시너지 팩터가 결정되었다.
플루디옥소닐에 대해서는 모든 농도들, 말하자면 0.01g/l; 0.05g/l; 0.125g/l; 0.25g/l; 0.5g/l 및 1.0g/l에 대해 상승효과가 확인될 수 있었고(시너지 팩터는 1.1보다 크거나 같음), 이때 0.125g/l 및 0.25g/l의 농도에 대해 각각 최고 시너지 팩터가 결정되었다.
예시 2: 실지 실험들
실외 실험들(실지 실험들)에서는 포도(생식용 포도) 및 딸기에서 보트리티스 속, 실질적으로 보트리티스 시네레아를 퇴치할 때, 화학적 활성 물질들 사이프로디닐 및 플루디옥소닐과 함께 아우레오바시디움 풀루란스 DSM 14941 및 DSM 14940의 탱크 스프레이 믹스(조성물)가 병원균에 대한 효율을 상승 방식으로 증가시킬 수 있다는 사실이 확인될 수 있었다.
검사 시스템 A: 생식용 포도(비티스 비니페라)
장소: 이탈리아
기간: 2014년 9월 11일부터 11월 11일까지
탱크 스프레이 믹스의 제공 횟수/방법: 1000l/ha당 5번의 동일한 처리. 탱크 믹스는 분사 공정에 의해 제공되었다. 분사 적용은 각각 포도 나무의 생물 계절학적 발전 단계들의 BBCH-코드(Lorenz 등 저, 포도 나무의 생물 계절학적 발전 단계들, 포도 재배학 포도주학 자연과학 49, 66-70, 1994)에 상응하게 다음 발전 단계들로 이루어졌다:
BBCH 53: <<화서 단계>>(개화) 확실하게 확인 가능
검사 시스템 B: 딸기(프라가리아 아나나싸)
장소: 오스트리아
기간: 2016년 5월 9일부터 6월 10일까지
탱크 믹스의 제공 횟수/방법: 1000l/ha당 6번의 동일한 처리. 탱크 믹스는 분사 공정에 의해 제공되었다.
분사 적용은 각각 딸기의 생물 계절학적 발전 단계들의 BBCH-코드(Meier 등 저, 이과, 핵과, 커런트 및 딸기의 생물 계절학적 발전 단계들 신문 독일 식물 보호 46, 141-153, 1994)에 상응하게 다음 발전 단계들로 이루어졌다:
BBCH 55: 제1 개화 발생은 장미 모양 바닥에서 확인 가능
이 경우, 개별적인 실험 그룹들에서 다음 분사 혼합물이 농작물 상으로 직접 적용되었다:
그룹 1: 처리되지 않은 검체
그룹 2: 사이프로디닐 및 플루디옥소닐에 의해 처리됨; 탱크 믹스 내 농도: 0.1875g/l 사이프로디닐 및 0.125g/l 플루디옥소닐. 그에 따라 헥타르(ha)당 187.5g의 사이프로디닐 및 125g의 플루디옥소닐이 재배 식물상으로 제공되었다.
그룹 3: AP 1에 의해 처리됨; 탱크 믹스 내 아우레오바시디움 풀루란스 농도: 2.5×106 세포/㎖의 DSM 14940 및 2.5×106 세포/㎖의 DSM 14941. 그에 따라 헥타르(ha)당 2.5×1012 세포의 DSM 14940 및 2.5×1012 세포의 DSM 14941이 제공되었다.
그룹 4: 사이프로디닐 및 플루디옥소닐에 의해, 그리고 AP 1에 의해 처리됨; 탱크 믹스(=조성물) 내 농도: 0.1875g/l 사이프로디닐 및 0.125g/l 플루디옥소닐 그리고 2.5×106 세포/㎖의 DSM 14940 및 2.5×106 세포/㎖의 DSM 14941. 그에 따라 헥타르(ha)당 187.5g의 사이프로디닐 및 125g의 플루디옥소닐, 그리고 2.5×1012 세포의 DSM 14940 및 2.5×1012 세포의 DSM 14941이 재배 식물상으로 제공되었다.
Figure pct00012
효율의 계산: 예를 들어 그룹 4에 대해: 효율=[1-(2.30/27.30)]*100
위 표들로부터 AP 1 혼합물과 화학적 살균제들의 공동 사용에 의한 병원균 확산의 상승 방식의 감소를 확실하게 알 수 있다. 시너지 팩터는 각각 1.1보다 크거나 같다.
위 표들과 유사하게 실지 실험들(생식용 포도 및 딸기)에서 다음의 추가 그룹들도 검사되었다:
그룹 5: 사이프로디닐에 의해 처리됨; 탱크 믹스 내 사이프로디닐의 농도: 0.1875g/l; 시용: 1000l/ha
그룹 6: 플루디옥소닐에 의해 처리됨; 탱크 믹스 내 플루디옥소닐의 농도: 0.125g/l; 시용: 1000l/ha
그룹 7: 사이프로디닐에 의해, 그리고 AP 1에 의해 처리됨; 탱크 믹스 내 농도: 0.1875g/l의 사이프로디닐, 그리고 2.5×106 세포/㎖의 DSM 14940 및 2.5×106 세포/㎖의 DSM 14941; 시용: 1000l/ha
그룹 8: 플루디옥소닐에 의해, 그리고 AP 1에 의해 처리됨; 탱크 믹스 내 농도: 0.125g/l의 플루디옥소닐, 그리고 2.5×106 세포/㎖의 DSM 14940 및 2.5×106 세포/㎖의 DSM 14941; 시용: 1000l/ha
그룹 1, 3 및 5 내지 8의 유사한 평가에서 2개의 화학적 살균제 중 단 하나의 화학적 살균제와 함께 AP 1 혼합물의 사용에 대해서도 각각 개별 사용(화학적 살균제 또는 AP 1 혼합물)과 비교해서 상승효과가 결정되었는데, 다시 말해 1.1보다 크거나 같은 시너지 팩터가 달성되었다.
병원균들에 대한 AP 1 혼합물과 2개의 화학적 살균제 사이프로디닐 및 플루디옥소닐의 상승효과는 위 실지 실험들과 유사하게 다양한 농도의 화학적 살균제에 의해서도 확인되었다.
사이프로디닐에 대해서는 모든 시용량, 말하자면 20g/ha; 100g/ha; 187.5g/ha; 375g/ha; 500g/ha 및 1000g/ha에 대해 상승효과가 확인될 수 있었고(시너지 팩터는 1.1보다 크거나 같음), 이때 187.5g/ha 및 375g/ha의 시용에 대해 각각 최고 시너지 팩터가 결정되었다.
플루디옥소닐에 대해서는 모든 시용량, 말하자면 10g/ha; 50g/ha; 125g/ha; 250g/ha; 500g/ha 및 1000g/ha에 대해 상승효과가 확인될 수 있었고(시너지 팩터는 1.1보다 크거나 같음), 이때 125g/ha 및 250g/ha의 시용에 대해 각각 최고 시너지 팩터가 결정되었다.
Figure pct00013

Claims (19)

  1. 하나 이상의 화학적 살균제를 함유하는 조성물에 있어서,
    상기 하나 이상의 화학적 살균제에 대해 추가로 적어도 아우레오바시디움 풀루란스 균주들 DSM 14940 및 DSM 14941을 함유하는 혼합물이 함유되어 있고, 상기 하나 이상의 화학적 살균제 및 상기 아우레오바시디움 풀루란스 균주들의 혼합물은 상기 조성물 내에서 상승 작용하는 양으로 존재하고, 상기 하나 이상의 화학적 살균제는 플루디옥소닐 또는 플루디옥소닐과 하나 이상의 제2 화학적 살균제를 함유하는 조합물로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 조성물
  2. 제1 항에 있어서,
    상기 아우레오바시디움 풀루란스 균주들 DSM 14940 및 DSM 14941은 상기 조성물 내에서 2:1 내지 1:2, 바람직하게 1:1의 세포량 비율로 존재하는 것을 특징으로 하는, 조성물.
  3. 제1 항 또는 제2 항에 있어서,
    상승 작용하는 양으로서 상기 아우레오바시디움 풀루란스 균주들 DSM 14940 및 DSM 14941은 각각 1×105 내지 1×108 세포/㎖ 조성물, 바람직하게 1×106 내지 2×107 세포/㎖ 조성물, 바람직하게 1.67×106 내지 3.33×106 세포/㎖ 조성물, 특히 바람직하게 2.5×106 세포/㎖ 조성물의 농도로 존재하는 것을 특징으로 하는, 조성물.
  4. 제1 항, 제2 항 또는 제3 항에 있어서,
    상기 화학적 살균제는 플루디옥소닐 및 사이프로디닐, 펜헥사미드, 펜피라자민 및 피리메탄일의 그룹으로부터 선택된 하나 이상의 제2 화학적 살균제로부터 선택되거나, 또는 상기 화학적 살균제들 중 2개 이상의 화학적 살균제의 조합물로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 조성물.
  5. 제4 항에 있어서,
    상기 화학적 살균제는 사이프로디닐과 플루디옥소닐의 조합물로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 조성물.
  6. 제5 항에 있어서,
    상승 작용하는 양으로서 사이프로디닐은 0.00375g/l 조성물 내지 5g/l 조성물, 바람직하게 0.02g/l 조성물 내지 1.0g/l 조성물, 특히 0.1875g/l 조성물 내지 0.375g/l 조성물의 농도로 함유되어 있는 것을 특징으로 하는, 조성물.
  7. 제5 항에 있어서,
    상승 작용하는 양으로서 플루디옥소닐은 0.0025g/l 조성물 내지 5g/l 조성물, 바람직하게 0.01g/l 조성물 내지 1.0g/l 조성물, 특히 0.125g/l 조성물 내지 0.25g/l 조성물의 농도로 함유되어 있는 것을 특징으로 하는, 조성물.
  8. 제4 항 내지 제7 항 중 어느 한 항에 있어서,
    사이프로디닐과 플루디옥소닐은 상기 조성물 내에서 2:1 내지 1:2, 바람직하게 2:1 내지 1:1, 특히 1.5:1의 중량비로 존재하는 것을 특징으로 하는, 조성물.
  9. 제4 항 내지 제8 항 중 어느 한 항에 있어서,
    아우레오바시디움 풀루란스 DSM 14940 및 DSM 14941은 각각 1×106 내지 2×107 세포/㎖ 조성물, 특히 1.67×106 내지 3.33×106 세포/㎖ 조성물, 특히 바람직하게 2.5×106 세포/㎖ 조성물의 세포량 비율로 함유되어 있고, 화학적 살균제들 플루디옥소닐 및 사이프로디닐은 플루디옥소닐에 대해 바람직하게 0.0025g/l 조성물 내지 1.0g/l 조성물, 특히 0.125g/l 조성물 내지 0.25g/l 조성물의 농도로 함유되어 있거나, 또는 사이프로디닐에 대해 0.00375g/l 조성물 내지 1.0g/l 조성물, 특히 0.1875g/l 조성물 내지 0.375g/l 조성물의 농도로 함유되어 있는 것을 특징으로 하는, 조성물.
  10. 균질 병원균들에 의해 야기된 식물병의 확산을 예방하기 위한, 또는 감소시키기 위한 제1 항 내지 제9 항 중 어느 한 항에 따른 조성물의 용도.
  11. 제10 항에 있어서,
    상기 균질 병원균들은 네오파브레이아 속(屬) 및 보트리티스 속의 그룹으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 조성물의 용도.
  12. 제10 항 또는 제11 항에 있어서,
    상기 균질 병원균들은 하나 이상의 화학적 살균제에 대해 저항력 및/또는 감소한 감도를 갖는 것을 특징으로 하는, 조성물의 용도.
  13. 균질 병원균에 의해 야기된 하나 이상의 식물병의 확산을 예방하기 위한, 또는 감소시키기 위한 방법에 있어서,
    a) 플루디옥소닐 또는 플루디옥소닐과 하나 이상의 제2 화학적 살균제를 함유하는 조합물로부터 선택된 하나 이상의 화학적 살균제 및
    b) 적어도 아우레오바시디움 풀루란스 균주들 DSM 14940 및 DSM 14941을 함유하는 혼합물을
    공동으로 한 번 이상 재배 식물상으로 제공하고, a) 및 b)를 상승 작용하는 양으로 상기 재배 식물상으로, 특히 분사, 분무 또는 살수 공정에 의해 제공하는 것을 특징으로 하는, 방법.
  14. 제13 항에 있어서,
    a) 및 b)를 공동으로 조성물 내에서 혼합하고, 용해하거나, 또는 현탁하고, 그리고 상기 조성물을 상기 재배 식물상으로 제공하는 것을 특징으로 하는, 방법.
  15. 제13 항 또는 제14 항에 있어서,
    제1 항 내지 제9 항 중 어느 한 항에 따른 조성물을 사용하는 것을 특징으로 하는, 방법.
  16. 제13 항, 제14 항 또는 제15 항에 있어서,
    사용당 상승 작용하는 양으로서 각각 1×1011 내지 1×1014 세포/ha, 바람직하게 1×1012 내지 2×1013 세포/ha 조성물, 바람직하게 1.67×1012 내지 3.33×1012 세포/ha 조성물, 특히 바람직하게 2.5×1012 세포/ha의 아우레오바시디움 풀루란스 균주들 DSM 14940 및 DSM 14941을 제공하는 것을 특징으로 하는, 방법.
  17. 제13 항 내지 제16 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 하나 이상의 화학적 살균제로서 플루디옥소닐을 사용하고, 상승 작용하는 양으로서 특히 2.5g/ha 내지 5000g/ha, 바람직하게 10g/ha 내지 1000g/ha, 특히 125g/ha 내지 250g/ha를 제공하는 것을 특징으로 하는, 방법.
  18. 제13 항 내지 제17 항 중 어느 한 항에 있어서,
    제2 화학적 살균제로서 사이프로디닐을 사용하고, 상승 작용하는 양으로서 특히 3.75g/ha 내지 5000g/ha, 바람직하게 20g/ha 내지 1000g/ha, 특히 187.5g/ha 내지 375g/ha를 제공하는 것을 특징으로 하는, 방법.
  19. 제13 항 내지 제18 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 하나 이상의 화학적 살균제 및 적어도 아우레오바시디움 풀루란스 균주들 DSM 14940 및 DSM 14941을 함유하는 혼합물, 특히 상기 조성물의 한 번 이상의 제공은 재배 식물의 개화 단계 동안에 이루어지는 것을 특징으로 하는, 방법.
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