KR20190097021A

KR20190097021A - 테모졸로마이드 및 중간체의 제조 공정

Info

Publication number: KR20190097021A
Application number: KR1020197017118A
Authority: KR
Inventors: 오가리 파체코; 빈첸초 데 시오; 무릴로 마쏘니; 레안드로 카마르고
Original assignee: 크리스탈리아 프로듀토스 퀴미코스 파르마세우티코스 엘티디에이
Priority date: 2016-12-20
Filing date: 2017-12-19
Publication date: 2019-08-20
Also published as: US20200190088A1; BR102016029945A2; IL267491A; KR102550770B1; CN110177792A; EP3559001A4; EP3559001A1; IL267491B; ES2919330T3; US10865209B2; MX2019007198A; CN110177792B; WO2018112589A1; EP3559001B1

Abstract

본 발명은 N-메틸카르바모일이미다졸을 사용하여 테모졸로마이드 및 카르바모일-AICA 중간체를 양호한 전체 수율 및 고순도로 효율적이고 공업적으로 유리하게 제조하는 공정에 관한 것이다.

Description

테모졸로마이드 및 중간체의 제조 공정

본 발명은 N-메틸카르바모일이미다졸을 사용하여 테모졸로마이드 및 카르바모일-AICA 중간체를 제조하는 공정에 관한 것이다.

8-카르바모일-3-메틸이미다조[5,1-d]-1,2,3,5-테트라진-4(3H)-원으로 화학적으로 알려진 테모졸로마이드는 구조식 I로 표시된다.

테모졸로마이드는 항종양 활성을 나타내는 약물이며, 특허 US5260291에 처음 기술되었다. 이 문헌은 하기 반응식 1에 도시된 바와 같이, 산성 매질에서 아질산나트륨으로 5-아미노이미다졸-4-카르복사미드(AICA)를 디아조화하는 것을 포함하여, 중간체 디아조늄 염을 얻고, 그 다음 메틸 이소시아네이트로 처리하여 테모졸로마이드를 얻는 공정을 기술한다.

반응식 1

이러한 공정은 다음과 같은 단점을 갖는다: i) 폭발 가능성이 있는 디아조 (5-디아조-1H-이미다졸-4-카르복사미드) 중간체의 합성; (ii) 폭발성 화합물인 메틸 이소시아네이트의 사용은 공기와의 혼합에서 매우 강한 독성이 있으며, 따라서 특히 산업적 규모로는 매우 위험한 취급; 및 iii) 매우 긴 시간이 소모되는 축합반응 (약 20 일).

US6844434는 하기 반응식에 도시된 바와 같이, AICA 히드로클로라이드 염과 4-니트로페닐 클로로포메이트의 반응을 포함하여, 4-니트로페닐 에스테르 중간체를 제공하고, 이어서 메틸 히드라진과 반응하여 히드라진 중간체를 수득하고, 그 다음 테모졸로마이드로 고리화하는 테모졸로마이드 제조 공정을 기술한다.

반응식 2

이러한 방법은 메틸 이소시아네이트를 사용하지 않으나, 잠재적으로 발암성 화합물인 메틸히드라진이 사용되고, 쉽게 가수분해될 수 있는 클로로포메이트는 저 수율 반응의 원인이 될 수 있다.

국제 출원 WO2008038031는 히드라진 중간체 형성 없이, 과잉 금속 할라이드, 예컨대 브롬화 리튬 또는 염화물, 산과 아질산 공급원의 존재하에서, 카르바모일-AICA 중간체의 디아조화 및 고리화를 갖는 테모졸로마이드 제조방법을 기술한다. 이 문헌에 따르면, 카르바모일-AICA는 J. Org. Chem. 1997, 62, 7288-7294에 기술된 바와 같이, 4-니트로페닐 에스테르 중간체를 경유하여 AICA 히드로클로라이드 염으로부터 제조될 수 있다. 전체 공정은 하기 반응식 3에 도시된다.

테모졸로마이드는 디클로로메탄과 같은 다량의 용매를 필요로 하는 연속 액체-액체 추출기를 사용하는 역류 추출법에 의해 산 용액으로부터 분리된다. 이는 다량의 금속 할로겐화물, 특별한 장치(추출기) 및 다량의 디클로로메탄을 사용함으로써,일반적으로 공정이 비싸고, 비경쟁적이고, 산업적 및 환경적 관점에서 실시하기 어렵다.

반응식 3

US8232392 특허는 하기 반응식 4에 따라, 2 단계로 테모졸로마이드를 합성하는 공정을 기술한다.

반응식 4

제1 단계는 디이소프로필에틸아민(DIPEA) 및 아세토니트릴(ACN)의 존재하에 N-숙신이미딜-N'-메틸 카르바메이트와 AICA 염기 반응으로부터 카르바모일-AICA 중간체를 제조하는 것을 포함한다.

제2 단계에서, 테모졸로마이드는 J. Org. Chem. 62, 7288-7294(1997)에 기재된 방법에 따라 제조된다. 카르바모일-AICA가 테모졸로마이드로 변형되는 것은 아질산나트륨과 타르타르산 존재하에서 카르바모일-AICA 디아조화를 통해 일어난다. 이 반응이 끝나면, 약 50:50의 테모졸로마이드와 아자히포크산틴 부산물의 혼합물이 얻어진다. 테모졸로마이드는 흡착성 중합체 수지로 채워진 XAD 1600 크로마토그래피 칼럼을 통해 정제된다.

DIPEA 염기와, 흡입에 의해 매우 가연성 및 독성이 있기 때문에 위험한 것으로 여겨지는 화합물의 사용, 및 카르바모일-AICA를 형성하기 위한 약 16 시간의 반응 시간은 이러한 공정을 산업에서 불리하게 한다.

국제 출원 WO2010140168은 또한 하기 반응식 5에 따른 2 단계의 테모졸로마이드 합성을 기술하고 있지만, 카르바모일-AICA는 메탄올과 같은 알콜성 용매내의 산의 존재하에서, 반응을 완료하는데 약 18 시간이 소요되는 느린 공정으로, 우레아 화합물, 1-메틸-3-카르바모일이미노메틸 우레아와의 아미노 시아노아세트아미드 축합 반응으로부터 제조된다.

반응식 5

분명히, 테모졸로마이드 및 테모졸로마이드 제조에서 중요한 중간체인 카르바모일-AICA의 제조를 위한 보다 안전하고 보다 효율적이고 산업적으로 유리한 방법을 개발할 필요가 있다.

본 발명은 메틸 이소시아네이트, 메틸히드라진 및 DIPEA와 같은 위험한 시약의 사용을 회피하면서, 테모졸로마이드 및 카르바모일-AICA 중간체를 우수한 전체 수율 및 고순도로 제조하기 위한, 산업적으로 실시 가능하고 유리한 개량된 공정을 제공함으로써, 기술의 요구사항을 충족시킨다.

본 발명은 하기 반응식 6에 따라 테모졸로마이드를 제조하는 방법에 관한 것이다.

반응식 6

상기 방법은 하기 단계를 포함한다:

(a) AICA 염기를 N-메틸카르바모일이미다졸과 반응시켜 카르바모일-AICA를 제공하는 단계;

(b) 산의 존재하에 카르바모일-AICA를 알칼리 또는 알칼리성 토류 금속 아질산염과 반응시켜 테모졸로마이드를 제공하는 단계.

본 발명의 공정에 따라, 카르바모일-AICA 중간체는 N-메틸카르바모일이미다졸과의 AICA 염기 반응으로부터 제조된다. 이 반응은 아프로틱 극성 유기 용매에서 수행된다. 바람직하게는, 용매는 아세토니트릴 또는 테트라히드로푸란, 보다 바람직하게는 아세토니트릴이다. 이렇게 얻어진 카르바모일-AICA는 알칼리 또는 알칼리성 토류 금속 아질산염 및 산의 존재하에서, 테모졸로마이드를 얻기 위해 연속적으로 디아조화 및 고리화를 거친다. 바람직하게는, 알칼리성 금속 아질산염은 아질산나트륨이고, 산은 타르타르산이다. 테모졸로마이드는 이후의 결정화로 정제된다. 바람직하게는, 테모졸로마이드는 흡착성 중합체 수지로 채워진 크로마토그래피 칼럼을 통해 정제되고, 이어서 결정화된다.

카르바모일-AICA 제조에 사용되는 N-메틸카르바모일이미다졸 화합물은 상업적으로 구입되거나 아세토니트릴 및 디메틸포름아미드로 이루어진 용매 혼합물의 존재하에서 메틸아민 히드로클로라이드와 카르보닐디이미다졸의 반응으로부터 제조될 수 있다.

본 발명의 또 다른 양태에 따르면, 하기 반응식 7에 따라 테모졸로마이드를 제조하는 방법이 제공된다:

반응식 7

상기 방법은 하기 단계를 포함한다 :

(a) 아세토니트릴과 디메틸포름아미드의 혼합물 중에서 카르보닐디이미다졸을 메틸아민 히드로클로라이드와 반응시켜 N-메틸카르바모일이미다졸을 수득하는 단계;

(b) 아프로틱 극성 유기 용매 중에서 AICA 염기를 N-메틸카르바모일이미다졸과 반응시켜 카르바모일-AICA를 제공하는 단계;

(c) 타르타르산 용액의 존재하에서 고체 형태의 반응 매체에 첨가된 아질산나트륨과 카르바모일-AICA를 반응시키고, 반응 종결시 반응 혼합물을 60℃로 가열하고 여과하여, 테모졸로마이드와 아자히포산틴을 60:40의 비율로 제공하는 단계;

(d) 테모졸로마이드 용액을 제공하기 위해

칼럼의 말단에 연결된 탄소 캡슐을 함유하는 흡착성 중합체 수지로 채워진 크로마토그래피 칼럼을 통해 테모졸로마이드를 정제하여, 정화된 테모졸로마이드 용액 및 그 이후의 결정화를 제공하는 단계.

본 발명의 다른 양태에 따르면, 아프로틱 극성 유기 용매 중에서, AICA 염기와 N-메틸카르바모일이미다졸 사이의 반응을 포함하는 카르바모일-AICA 중요 중간체를 제조하는 공정이 제공된다. 바람직하게는, 용매는 아세토니트릴 또는 테트라히드로푸란, 보다 바람직하게는 아세토니트릴이다.

테모졸로마이드 및 카르바모일-AICA는 양호한 전체 수율 및 고순도로 얻어진다. 테모졸로마이드는 99.98% 이상의 순도로, 그리고 카르바모일-AICA 99.20%의 순도로 수득된다(둘 다 HPLC에 의함).

다음은 본 발명을 설명하기 위해 본 명세서 첨부된 도면을 설명한다.
도 1 : 테모졸로마이드 일수화물에 대한 PDRX.
도 2 : 테모졸로마이드 일수화물에 대한 IR (KBr).
도 3 : 테모졸로마이드 형태 II에 대한 PDRX.
도 4 : 테모졸로마이드 형태 III에 대한 IR (KBr).

본 발명은 상기 반응식 6에 나타낸 바와 같이, 효율적이고 산업적으로 유리한 테모졸로마이드의 제조 방법에 관한 것이다.

상기 방법은 하기 단계를 포함한다:

상기 공정은 카르바모일-AICA 중요 중간체를 제공하기 위해 AICA 염기와 N-메틸카르바모일이미다졸의 반응으로부 시작한다. 이 반응은 아프로틱 극성 유기 용매, 바람직하게는 아세토니트릴 또는 테트라히드로푸란에서, 보다 바람직하게는 아세토니트릴에서 수행된다. 이 반응은 55℃와 60℃ 사이의 온도에서 약 3 내지 6 시간 동안 일어난다. 이어서, 반응 혼합물은 0℃ 내지 5℃로 냉각되고, 2 시간 후, 여과에 의해 카르바모일-AICA 결정체가 분리된다.

본 발명에 따라, N-메틸카르바모일이미다졸과 AICA 염기 사이의 반응으로부터 제조된 카르바모일-AICA는 DIPEA 염기의 첨가를 필요로 하지 않는다. 그러나, 원위치에 형성된 이미다졸은 반응 시간이 약 16 시간인 EP2151442의 실시 예 1에 기재된 공정과 비교하여, 원하는 생성물을 향해 반응을 보다 안전하고 신속하게 진행시키는 염기로서 작용한다.

테오졸로마이드로의 카르바모일-AICA 전환은 문헌 J. Org. Chem. 62, 7288-7294 (1997)에 기재된 방법에 따라 수행될 수 있다. 이 경우, 카르바모일-AICA 디아조화 및 고리화 반응은 0℃에서 아질산나트륨과 타르타르산의 수용액의 존재하에서 수행된다. 반응 종료시, 테모졸로마이드 및 아자히포크산틴이라 불리는 부산물을 포함하는 혼합물이 대략 50:50의 비율로 얻어진다.

바람직하게는, 본 발명의 공정에 따라, 카르바모일-AICA의 테모졸로마이드로의 전환 반응은 알칼리 또는 알칼리성 토류 금속 아질산염 및 산의 존재하에서 하기 반응식 8에 따라 수행되는데, 상기 반응식 8은 선행 기술과 관련하여 개선점을 포함한다. 바람직하게는, 알칼리성 금속 아질산염은 아질산나트륨이고, 산은 타르타르산이다.

카르바모일-AICA 수용액에 고체 형태의 아질산나트륨이 첨가되고, 반응 매체 온도는 0℃로 유지된다. 이어서, 타르타르산 용액이 발열 반응을 피하기 위해 반응 매체에 서서히 첨가되고, 이는 분해 생성물 형성을 가져온다. 반응 혼합물을 0℃에서 2 시간 동안 교반한 후, 실온에서 2 시간 더 교반한다. 연속적인 카르바모일-AICA 디아조화 및 고리화 후, 반응 혼합물은 60℃ 내지 65℃, 바람직하게는 60℃의 온도로 가열되고, 수득한 현탁액은 바람직하게는 부흐너 깔때기를 통해 여과되고, 이는 테모졸로마이드 및 부산물인 아카히포크산틴을 60:40의 비율로 함유하는 용액을 제공한다.

반응식 8

놀랍게도, 본 발명에 따라, 디아조화 및 고리화 후, 60℃ 내지 65℃의 온도 상승은 다음의 측면에서 유리하다: i) 현탁액 여과; ii) 일시적 중간물의 아자히포크산틴으로의 전환; iii) 테마졸로마이드 대 아자히포크산틴의 비율이 50:50에서 60:40으로의 증가; iv) 테모졸로마이드와 아자히포크산틴의 효과적인 분리를 통한 테모졸로마이드의 크로마토그래피 정제; v) 전체 테모졸로마이드 수율.

따라서, 본 발명의 공정은 테모졸로마이드의 정제 및 후속의 결정화를 추가로 포함한다. 바람직하게는, 테모졸로마이드는 흡착성 중합체 수지로 채워진 크로마토그래피 칼럼을 통해 정제되고, 이어서 결정화된다.

테모졸로마이드 60% 및 아자히포크산틴 40%를 함유하는 용액은 무기산, 예컨대 염산, 황산 등, 바람직하게는 염산으로 pH 2-3으로 산성화된다. 생성된 테모졸로마이드의 산성 용액은 산성화된 물과 에탄올의 혼합물을 함유하는 이동상 용리(elution)하에서, 흡착성 중합체 수지로 충전 된 크로마토그래피 칼럼을 통해 정제된다. 수득된 용리액은 크로마토그래피 칼럼의 말단에 연결된 탄소 캡슐을 통해 여과되고, 순도 90% (HPLC 분석) 이상의 순도를 갖는 정화된 테모졸로마이드 용액을 제공하고, 이어서 결정화되어 HPLC에 의해 99.98% 이상의 고순도를 달성한다.

흡착성 중합체 수지의 예로는 Rohm and Haas의 앰버라이트 XAD 1600 및 XAD 1180; 및 미츠비시 HP20L, HP 2055 및 SP825가 있다.

본 발명의 공정의 단계 (a)에서 사용되는 N-메틸카르바모일이미다졸 화합물은 상업적으로 구입하거나 J. Org. Chem. 2012, 77 (22), 10362-10368]에 기재된 방법에 따라, 아세토니트릴과 디메틸포름아미드로 이루어진 용매 혼합물의 존재하에서 메틸아민 히드로클로라이드와 카르보닐디이미다졸의 반응으로부터 제조될 수 있다. 그러나, 테모졸로마이드 또는 카르바모일-AICA 중간체 제조에서의 그 용도 또는 사용은 현재까지 당해 기술 분야에 기재되어 있지 않다.

N-메틸카르바모일이미다졸은 본 발명에서 입증된 바와 같이, 안정적인 결정성 고체이고, 낮은 독성을 가지며, 비-폭발성이고, 쉽게 보관되고, 싸고, AICA 염기와 매우 효과적으로 반응하여, 테모졸로마이 제조에 중요한 중간체인 카르바모일-AICA를 제공할 수있는 이점이 있다.

본 발명의 다른 양태에 따르면, 하기 단계를 포함하는 테모졸로마이드의 제조 공정이 제공된다:

(d) 칼럼의 말단에 연결된 탄소 캡슐을 함유하는 흡착성 중합체 수지로 채워진 크로마토그래피 칼럼을 통해 테모졸로마이드를 정제하여, 정화된 테모졸로마이드 용액 및 그 이후의 결정화를 제공하는 단계.

상기 공정은 아세토니트릴과 디메틸포름아미드의 혼합물 중에서, 카르보닐디 이미다졸과 메틸아민 히드로클로라이드 사이의 반응을 3:1의 부피/부피비로 실온에서 2 시간 동안 진행시킴으로써 시작된다. 이어서, 생성된 용액은 아세토니트릴 용매를 제거하기 위해 농축된다. 또한, N-메틸카르바모일이미다졸은 메탄올과 3% 디클로로메탄의 혼합물에서의 용리하에서 실리카 칼럼 크로마토그래피로 정제된다. 정제된 생성물을 갖는 분획은 농축되어 잔류물을 수득하고, 수득된 고체는 건조된다.

상기 공정의 제2 단계에서, AICA 염기는 아프로틱 극성 유기 용매 중에서 N-메틸카르바모일이미다졸과 반응하여, 카르바모일-AICA 중요 중간체를 제공한다. 바람직하게는, 용매는 아세토니트릴 또는 테트라히드로푸란, 보다 바람직하게는 아세토니트릴이다. 이 반응은 55℃와 60℃ 사이의 온도에서 약 3 내지 6 시간 동안 일어난다. 이어서, 반응 혼합물을 0℃ 내지 5℃로 냉각시키고, 2 시간 후, 여과에 의해 카르바모일-AICA 결정체를 분리시킨다.

테모졸로마이드로의 카르바모일-AICA 전환(디아조화 및 고리화) 및 크로마토그래피 칼럼에 의한 정제의 단계들이 상기 반응식 8에 기재된 바와 같이 수행된다.

카르바모일-AICA 수용액에 고체 형태의 아질산나트륨을 첨가하고, 반응 매체의 온도를 0℃로 유지한다. 이어서, 분해 생성물 형성을 야기할 수 있는 발열 반응을 피하기 위해, 타르타르산 용액이 반응 매체에 서서히 첨가된다. 반응 혼합물을 0℃에서 2 시간 동안 교반한 후, 실온에서 2 시간 더 교반하였다. 카르바모일-AICA의 연속적인 디아조화 및 고리화 후, 반응 혼합물을 60℃ 내지 65℃, 바람직하게는 60℃의 온도로 가열하고, 수득한 현탁액을 바람직하게는 부흐너 깔대기를 통해 여과하여, 테모졸로마이드와 부산물 아자히포크산틴을 60:40 비율로 함유하는 용액을 제공한다.

상기 크로마토그래피 후 정화된 테모졸로마이드 용액은 테모졸로마이드의 이론 중량 대비 30 내지 40 부피로 60℃ 및 25mbar에서 농축되어 현탁액을 제공하고, 이는 5 내지 10℃로 냉각되고, 2 시간 동안 교반하에 유지되고, 여과된다. 수집된 고체를 세척하고 건조시킨다. 이러한 조건하에서 얻어진 테모졸로마이드의 결정 형태는 일수화물이며, 도 1 및 도 2에 각각 도시된 그래프에 따른 X-선 회절 패턴(XRD) 및 적외선 스펙트럼(IR)을 특징으로 한다. 반응 조건은 실시 예 4에 상세히 기술된다.

대안적으로, 상기 크로마토그래피 후에, 정화된 테모졸로마이드 용액은 테모졸로마이드의 이론 중량 대비 약 5 부피까지 60℃ 및 25mbar에서 농축되어 현탁액을 제공하고, 이는 15 부피의 아세톤 혼합된다. 혼합물을 1 시간 동안 환류시키고, 수득된 현탁액을 5℃로 냉각시키고, 2 시간 동안 교반하에 유지시키고, 여과한다. 수집된 고체를 세척하고 건조시킨다. 이러한 조건하에서 얻어진 테모졸로마이드의 결정 형태는 도 3 및 도 4에 각각 도시된 그래프에 따른 X 선 회절 패턴(XRD) 및 적외선 스펙트럼(IR)으로 특징 지워지는 형태 III이다. 반응 조건은 실시 예 5에 상세히 기술된다.

또한, 본 발명의 공정에 따라 제조된 테모졸로마이드 일수화물은 테모졸로마이드 형태 III으로 전환될 수 있다(실시 예 6 및 7). 물과 아세톤의 1:3 비율(부피/부피)의 혼합물 중에서의 테모졸로마이드 일수화물의 현탁액을 60℃로 가열하고, 0.5 시간 동안 교반한다. 유사-용액을 실온에서 1 시간 동안 냉각시킨 다음, 0℃ 내지 5℃로 냉각시키고, 여과한다. 수집된 고체를 세척 및 건조하여, 테모졸로마이드 형태 III을 제공한다.

본 발명의 다른 양태에서, 아프로틱 극성 유기 용매, 예컨대 아세토니트릴 또는 테트라히드로푸란 중에서, AICA 염기와 N-메틸카르바모일이미다졸 반응을 포함하는 카르바모일-AICA 중요 중간체의 제조 공정이 제공된다. 바람직하게는, 용매는 아세토니트릴이다.

본 발명의 공정은 정제된 테모졸로마이드 및 카르바모일-AICA 중요 중간체를 고수율 및 고순도로 수득하기 위한 간단하며 경제적이며 탄탄하며 산업적으로 유리한 합성 방법을 제공함으로써 최첨단 문제를 극복한다.

하기 실시 예는 단지 예시적인 것이며 청구된 공정을 보다 잘 이해하기 위해 사용되어야 하지만, 본 발명의 범위를 제한하기 위해 사용되어서는 안된다.

실시 예 1

N-메틸카르바모일이미다졸 의 제조

카보닐디이미다졸 7.17g, 메틸아민 히드로클로라이드 2.70g, 아세토니트릴(ACN) 24ml 및 디메틸포름아미드(DMF) 8ml를 실온에서 2 시간 동안 교반하에 유지시켰다. 2 시간 후, 수득된 투명한 황색 용액을 40℃에서 감압하에 농축시켜 ACN을 제거하였다. 생성된 오일을 메탄올 및 디클로로메탄 3%의 혼합물 중에서 실리카 칼럼을 통해 정제하고, 정제된 생성물을 함유하는 분획을 30℃에서 진공하에 잔류물로 농축시켜 4.1g의 N-메틸카르바모일이미다졸을 백색 고체로서 수득하였다 (75% 수율). 융점 = 113-115 °C; ¹H RMN (400 MHz, CDCl₃) δ 8,14 (brs, 1H), 7,38 (t, 1H), 7,12 (brs, 1H), 6,95 (s, 1H), 3,23 (d, 3H); ¹³C RMN (100 MHz, CDCl₃) δ 150,1, 137,1, 131,4, 117,2 e 28,2.

실시 예 2

카르바모일 - AICA의 제조

아세토니트릴 100mL 중의 20.0g AICA 염기의 현탁액에, 55 내지 60℃로 가열하고, N-메틸카르바모일이미다졸 30g을 첨가하였다. 반응 혼합물을 55 내지 60℃에서 6 시간 동안 유지시킨 다음, 0 내지 5℃로 냉각시켰다. 2 시간 후, 생성된 현탁액을 여과하고 예냉된 물로 세척하였다. 수득된 결정을 50℃에서 6 시간 동안 진공하에서 건조시켜, 카르바모일-AICA 23.0g을 백색 고체로서 수득하였다(수율 80% 및 HPLC 순도 99.2%). ¹H RMN (500 MHz, DMSO): δ 2,84 (d, 3H); 2,50-2,52 (DMSO); 3,35 (H₂O); 6,38 (s, 2H); 6,85 (d, 2H); 7,61 (s, 2H); 8,42 (s, 2H). ¹³C (RMN, 125 MHz, DMSO) δ 26,9; 39,2-40,5 (DMSO); 111,6; 126,5; 143,8; 151,1; 166,7; IR (ATR, cm^-1): v_max 3458; 3404; 3348; 3319; 3130; 3068; 2949; 1714; 1645; 1595; 1556; 1530; 1503; 1460; 1452; 1420; 1298; 1248; 1221; 1173; 1076; 955; 827; 745; 698; MS (ESI) 계산된 [C₆H₉N₅O₂ + Na]⁺ = m/z 206,0648; 실측치 m/z = 206,0645.

실시 예 3

카르바모일-AICA의 제조

6 mL의 테트라히드로푸란 중의 1.0g AICA 염기의 현탁액에, 55 내지 60℃로 가열하고, 1.5g의 N-메틸카르바모일이미다졸을 첨가하였다. 반응 혼합물을 55-60℃에서 6 시간 동안 유지시킨 다음, 0-5℃로 냉각시켰다. 2 시간 후, 생성된 현탁액을 여과하고, 예냉된 물로 세척하였다. 수득된 결정을 50℃에서 6 시간 동안 진공하에서 건조시켜 백색 고체로서 카르바모일-AICA 0.8g을 수득 하였다(수율 65% 및 HPLC 순도 95.0%).

실시 예 4

테모졸로마이드 일수화물의 제조

500 mL의 물과 40 g의 카르바모일-AICA를 2 리터 반응기에 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고 아질산나트륨 15.8g을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 20 분 동안 교반한 다음, 타르타르산 용액(물 100 mL 중 34 g)을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 2 시간 동안 교반한 후, 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 온도를 60℃로 조절하고, 현탁액을 여과하고, 잔류물을 뜨거운 물로 세척하였다. 테모졸로마이드 60% 및 아자히포크산틴 40%을 함유하는 여과액을 pH 2-3으로 산성화시키고, 산성화된 수용액과 에탄올과 함께 수지를 통해 용리시켰다. 용리액은 칼럼 배출구에 연결된 탄소 필터를 통해 정화되어, 90% 이상의 순도(HPLC)를 갖는 테모졸로마이드 용액을 수득하였다. 수득된 용액을 테모졸로마이드의 이론 중량에 대비 30 내지 40 부피로 60℃ 및 25mbar에서 농축시켜, 미세 결정체를 갖는 현탁액을 수득하였다. 그 다음, 현탁액을 5 내지 10℃로 냉각시키고, 2 시간 동안 교반하였고, 부흐너 깔때기를 통해 여과하였다. 잔류물을 산성화된 물로 세척하고, 수집된 결정체를 50℃에서 4 시간 동안 진공하에서 건조시켜, 20 g의 테모졸로마이드 일수화물을 99.9% 순도(HPLC)의 백색 고체로서 수득하였다(47% 수율). DRXP (2θ): 9,385, 11,863; 14,676; 16,826; 18,406; 18,565; 20,322; 28,232 ± 0,2°(도 1). IV (cm^-1) 3421; 3348; 1739; 1670; 1598; 1562; e 1408 (도 2).

실시 예 5

테모졸로마이드 III 형의 제조

250 mL의 물 및 20 g의 카르바모일-AICA를 교반(250 rpm)하에서 2 L 반응기에 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 아질산나트륨 7.92g을 반응 혼합물에 첨가하고, 20 분 동안 교반하였다. 타르타르산 용액(50 mL 중 17 g)을 반응 혼합물에 서서히 첨가하고, 0℃에서 2 시간 동안 교반한 후, 실온에서 2 시간 더 교반하였다. 온도를 60℃로 상승시키고, 현탁액을 부흐너 깔때기를 통해 여과하고, 잔류물을 뜨거운 물로 세척하였다. 테모졸로마이드 60% 및 아자히포크산틴 40%를 함유하는 여액을 18.5% HCl로 pH 2.2로 산성화시키고, 산성화된 물과 에탄올의 용액과 함께 1.2 BV/hr의 유동으로 앰버라이트 XAD 1600 수지를 통해 용리시켰다. 용리액은 칼럼 배출구에 연결된 탄소 필터를 통해 정화되어, 90% 이상의 순도(HPLC)를 갖는 테모졸로마이드 용액을 수득하였다. 수득된 용액을 이론적인 테모졸로마이드 중량 대비 5 부피로 60℃ 및 25 mbar에서 농축시켜 현탁액을 수득하였다. 15 부피의 아세톤을 현탁액에 첨가하고, 혼합물을 가열 환류시켰다. 1 시간 후, 현탁액을 5℃로 냉각시키고, 2 시간 동안 교반하고, 여과하였다. 잔류물을 산성화된 수용액과 아세톤(1:3)으로 2 회 세척하고, 생성된 고체를 50℃에서 4 시간 동안 진공 건조시켜, 99.99% 순도(HPLC)의 테모졸로마이드 형태 III을 수득하였다(38% 수율). DRXP (2θ) : 5.509; 10.909; 13.308; 14.725; 16.325; 16.836; 18.033; 19.122; 19.582; 20.725; 21.560; 23.806; 25.235; 26.480; 28.765; 29.843 ± 0.2 °(도 3). IR (cm^-1) : 3417; 3385; 1757; 1730; 1676; 1598; 1568 e 1402 (도 4).

실시 예 6

테모졸로마이드 형태 III의 제조

2 L 반응기에서, 244 ml의 아세톤(15 부피)와 82 ml의 물(5 부피)을, 실온에서 16.4 g의 테모졸로마이드 일수화물에 첨가하였다. 현탁액을 60℃로 가열하고 30 분 동안 교반하였다. 생성된 현탁액(유사-용액)을 1 시간 동안 실온으로 냉각시킨 다음, 0 내지 5℃에서 1 시간 동안 냉각시켰다. 2 시간 후, 현탁액을 여과하고, 수집된 고체를 50 mL의 아세톤으로 2 회 세척하고, 45℃ 및 25 mbar에서 5 시간 동안 건조시켜, 12.7 g의 테모졸로마이드 형태 III을 수득하였다(77.0% 수율, 99.99% 순도). RDXP (2θ) : 5.475; 10.883; 13.278; 14.706; 16.285; 16.813; 18.010; 19.101; 19.549; 20.705; 21.533; 23.775; 25.227; 26.462; 28.754; 29.815 ± 0.2 °. IR (cm^-1) : 3417, 3385, 1757, 1730, 1676, 1598, 1568, 1402.

실시 예 7

테모졸로마이드 형태 III의 제조

100 mL 반응기에서, 18 mL의 아세톤(9 부피) 및 6 mL의 물(3 부피)을, 실온에서 2.0 g의 테모졸로마이드 일수화물에 첨가하였다. 현탁액을 60℃로 가열하고, 30 분 동안 교반하에 유지시켰다. 생성된 현탁액(유사-용액)을 실온으로 1 시간 동안 냉각시킨 다음, 0-5℃로 1 시간 동안 냉각시켰다. 2 시간 후, 현탁액을 여과하고, 잔류물을 2 mL의 아세톤으로 2 회 세척하였다. 고체를 45℃ 및 25 mbar에서 5 시간 동안 건조시켜, 1.64 g의 테모졸로마이드 형태 III을 수득하였다(82.0% 수율, 99.99% 순도) DRXP (2θ) : 5.512; 10.923; 13.323; 14.739; 16.328; 16.848; 18.048; 19.128; 19.585; 20.727; 21.569; 23.812; 25.254; 26.491; 28.779; 29.849 ± 0.2 °. IR (cm^-1) : 3417, 3385, 1757, 1730, 1676, 1598, 1568 및 1402.

Claims

다음의 단계를 포함하는 테모졸로마이드의 제조 공정:
(a) AICA 염기를 N-메틸카르바모일이미다졸과 반응시켜 카르바모일-AICA를 제공하는 단계;
(b) 산의 존재하에 카르바모일-AICA를 알칼리 또는 알칼리성 토류 금속 아질산염과 반응시켜 테모졸로마이드를 제공하는 단계.
제 1 항에 있어서, 상기 단계 (a)는 아프로틱 극성 유기 용매 중에서 수행되는 공정.
제 2 항에 있어서, 상기 용매는 아세토니트릴 또는 테트라히드로푸란인 공정.
제 3 항에 있어서, 상기 용매는 아세토니트릴인 공정.
제 1 항에 있어서, 상기 단계 (b)에서의 상기 알칼리성 금속 아질산염은 고체 형태로 반응 매체에 첨가된 아질산나트륨인 공정.
제 1 항에 있어서, 상기 단계 (b)에서의 상기 산은 타르타르산인 공정.
제 1 항에 있어서, 테모졸로마이드의 정제 및 그 이후의 결정화를 추가로 포함하는 공정.
제 1 항에 있어서, 상기 단계 (a)에서의 상기 N-메틸카르바모일이미다졸은 아세토니트릴 및 디메틸포름아미드의 혼합물 중에서 카르보닐디이미다졸과 메틸아민 히드로클로라이드의 반응으로부터 제조되는 것인 공정.
다음의 단계를 포함하는 테모졸로마이드의 제조 공정:
(a) 아세토니트릴과 디메틸포름아미드의 혼합물 중에서 카르보닐디이미다졸을 메틸아민 히드로클로라이드와 반응시켜 N-메틸카르바모일이미다졸을 수득하는 단계;
(b) 아프로틱 극성 유기 용매 중에서 AICA 염기를 N-메틸카르바모일이미다졸과 반응시켜 카르바모일-AICA를 제공하는 단계;
(c) 타르타르산 용액의 존재하에서 카르바모일-AICA를 고체 형태의 반응 매체에 첨가된 아질산나트륨과 반응시키고, 반응 종결시 반응 혼합물을 60℃로 가열하고 여과하여, 테모졸로마이드와 아자히포크산틴을 60:40의 비율로 제공하는 단계;
(d) 칼럼의 말단에 연결된 탄소 캡슐을 함유하는 흡착성 중합체 수지로 채워진 크로마토그래피 칼럼을 통해 테모졸로마이드를 정제하여, 정화된 테모졸로마이드 용액 및 그 이후의 결정화를 제공하는 단계.
제 9 항에 있어서, 상기 단계 (b)에서의 상기 아프로틱 극성 유기 용매는 아세토니트릴 또는 테트라히드로푸란인 공정.
제 10 항에 있어서, 상기 용매는 아세토니트릴인 공정.
제 9 항에 있어서, 상기 단계 (d)에서의 상기 크로마토그래피 후에, 상기 정화된 테모졸로마이드 용액은 테모졸로마이드의 이론 중량에 대해 30 내지 40 부피로 60℃에서 농축되고, 그 후 냉각되어 테모졸로마이드 일수화물의 결정체를 제공하는 공정.
제 9 항에 있어서, 상기 단계 (d)에서의 상기 크로마토그래피 후에, 상기 정화된 테모졸로마이드 용액은 테모졸로마이드의 이론 중량에 대해 약 5 부피까지 60℃에서 농축되고, 15 부피의 아세톤과 혼합되고, 그 후 냉각되어 테모졸로마이드 형태 III의 결정체를 제공하는 공정.
제 12 항에 있어서, 상기 테모졸로마이드 일수화물은 물과 아세톤의 1:3 비율 혼합물 중에서 선택적으로 현탁되고, 60℃로 가열되고, 그 후 냉각되어 테모졸로마이드 형태 III을 제공하는 공정.
아프로틱 극성 유기 용매 중에서, AICA 염기와 N-메틸카르바모일이미다졸 사이의 반응을 포함하는 카르바모일-AICA의 제조 공정.
제 15 항에 있어서, 상기 용매는 아세토니트릴 또는 테트라히드로푸란인 공정.
제 16 항에 있어서, 상기 용매는 아세토니트릴인 공정.