KR20190045686A - multi-well magnetic bead pipettor for nucleic acids purification by using magnetic nanoparticle - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 자성입자를 이용한 핵산 정제용 멀티-웰 자성입자 파이펫터에 관한 것이다. The present invention relates to a multi-well magnetic particle pipettor for purifying nucleic acid using magnetic particles.
자성입자를 이용한 시료의 정제의 목적은 다량의 시료를 효율적인 고속 처리 (high throughput)방법에 있으며, 핵산 및 단백질 정제, 시료 농축 및 검출등 다양한 분야에 많이 이용되고 있다. 대부분의 자성입자를 이용한 핵산 정제에서 적은 수량의 시료에 대해서는 Thermo fisher사의 DynaMag™-2 Magnet과 Qiagne 사의 12-Tube Magnet과 같은 magnetic stand 형태의 제품으을 이용하여 핵산정제를 수행하고 있으며, 대량의 시료에 대해서는 Thermo fisher사의 MagMAX™ Express Particle Processor 장비, KingFisher Purification System 자동화 장비, 또는 Promega 사의 maxwell® 16 series, Biomek® FX series등과 같은 고가의 자동화 장비를 이용한 정제 방법 등을 제공하고 있다. The purpose of purifying a sample using magnetic particles is to use a large amount of samples in an efficient high throughput method, and is widely used in various fields such as nucleic acid and protein purification, sample concentration and detection. In the case of nucleic acid purification using most magnetic particles, nucleic acid purification is performed using a magnetic stand type product such as DynaMag ™ -2 Magnet of Thermo fisher and 12-tube magnet of Qiagne for a small quantity of samples. Including Thermo fisher's MagMAX ™ Express Particle Processor equipment, KingFisher Purification System automation equipment, and refining methods using expensive automation equipment such as Promega's maxwell® 16 series and Biomek® FX series.
한편, 대한민국 등록특허 제10-1655233호 (발명의명칭: 멀티 타입의 자성 입자 분리 스탠드)에서 개시하고 있는 자성입자 분리장치의 경우, 고속 처리 (high throughput)방법으로 핵산 및 단백질 정제작업에 제한이 있다. 이와 같이 현재 개발된 자성입자 분리장치는 대부분 스탠드 형태로 제공되고 있어 대량 처리에 한계를 가지며, 자동화 장비를 이용한 분리장치는 가격적인 부담뿐만 아니라, 현장진단과 같이 운반이 용이하고 비전력(非電力) 상태의 핵산 검출이 요구되어 부피, 무게 및 전력공급과 같은 제약을 가진다. On the other hand, in the case of the magnetic particle separation apparatus disclosed in Korean Patent No. 10-1655233 (entitled "Multi-type magnetic particle separation stand"), there is a limitation in the nucleic acid and protein purification operations by a high throughput method have. Since the presently developed magnetic particle separating apparatus is provided in a stand type in most cases, it is limited in mass processing, and the separating apparatus using the automatic equipment is not only costly but also easy to carry, such as field diagnosis, ) Nucleic acid detection is required and has such limitations as volume, weight and power supply.
본 명세서 전체에 걸쳐 다수의 논문 및 특허문헌이 참조되고 그 인용이 표시되어 있다. 인용된 논문 및 특허문헌의 개시 내용은 그 전체로서 본 명세서에 참조로 삽입되어 본 발명이 속하는 기술 분야의 수준 및 본 발명의 내용이 보다 명확하게 설명된다.Numerous papers and patent documents are referenced and cited throughout this specification. The disclosures of the cited papers and patent documents are incorporated herein by reference in their entirety to better understand the state of the art to which the present invention pertains and the content of the present invention.
본 발명자들은 종래의 자성입자 분리 과정에 대량처리공정에 대한 한계를 개선하고자 예의 연구 노력하였다. 그 결과, 본 발명자들은 8 채널에서 96채널을 가지는 파이펫 성입자 분리 장치인 멀티 웰 (multi well) 자성입자 파이펫터(multi well magnetic bead pipettor)을 개발하여 본 발명을 완성하게 되었다. The present inventors have made extensive efforts to improve the limitations of the conventional magnetic particle separation process. As a result, the inventors of the present invention have developed a multi well magnetic particle pipettor, which is a pipetting particle separating apparatus having eight channels and 96 channels, thereby completing the present invention.
따라서, 본 발명의 목적은 멀티웰 자성입자 파이펫터(multi-well magnetic bead pipettor)를 제공하는 데 있다.Accordingly, it is an object of the present invention to provide a multi-well magnetic bead pipettor.
본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 발명의 상세한 설명, 청구범위 및 도면에 의해 보다 명확하게 된다.Other objects and advantages of the present invention will become more apparent from the following detailed description of the invention, claims and drawings.
본 발명의 일 양태에 따르면, 본 발명은 다음의 구성을 포함하며, 자성입자(magnetic bead)를 이용하여 멀티웰(multi-well) 플레이트로부터 핵산 또는 단백질을 추출하는 멀티웰 자성입자 파이펫터(multi-well magnetic bead pipettor)를 제공한다:According to one aspect of the present invention, the present invention provides a multi-well magnetic particle pipettor (multi) for extracting a nucleic acid or protein from a multi-well plate using magnetic beads, -well magnetic bead pipettor:
(a)
상판(300)과 결합가능하고, 하판 조작 스위치 (120) 및 하판 조작 스프링(130)을 포함하며, 상기 하판 조작 스위치 (120) 및 하판 조작 스프링을 이용하여 하판(200)의 상하이동을 조작하는 손잡이 부분(H);(a)
The lower
(b)
손잡이 부분(H) 및 하판 (200)의 상부와 결합가능한 상판 (300);(b)
An
(c)
상판 (300)의 하부 및 자성체 고정봉(400)의 상부와 결합가능한 하판 (200); 및(c)
A
(d) 하판의 하부와 결합가능하고, (i) 복수 개의 자성체(100), 및 (ii) 상기 자성체(100)가 결합되는 복수 개의 자성체 고정봉(500) 을 포함하는 파이펫 팁 부분(I); (d) (I) comprising a plurality of magnetic immobilizing rods (500) which are (i) a plurality of magnetic bodies (100) and (ii) the magnetic bodies (100) are combined;
을 포함하는 피펫(pipette) 형태의 자성입자 분리장치로서,A magnetic particle separator in the form of a pipette,
상기 자성체 고정봉(500)은 하단에 튜브 홈 마찰부(520)를 포함하고, 상기 튜브 홈 마찰부(520)에는 8-스트립 PCR 튜브(8-strip PCR tube) 또는 96 웰 PCR 플레이트 (96-well PCR plate)가 부착 및 탈착 가능하다. The magnetic immobilizing
본 발명은 손잡이부분(H), 상판(300), 하판(200) 파이펫 팁부분(I)로 이루어진 파이펫 형태의 자성입자 분리장치이다. 본 발명에서 손잡이 부분(H)은 상판(300)과 결합되며, 손잡이 내부의 하판조작 스프링(130)과 연동되는 하판조작 스위치(120)를 이용하여 하판을 상하로 움직일 수 있으며, 이에 따라 파이펫 팁 부분(I)의 자성체 고정봉(500) 하부에 위치하는 튜브홀 마찰부(520)와 마찰력에 의해 결합된 PCR 튜브 및 플레이트를 분리시킬 수 있도록 고안되었다. 자성체 고정봉의 튜브홀 마찰부 자성체 고정홈(510)에 자성체(100)가 결합된다. PCR 튜브 및 플레이트를 장착 후 자성입자와 결합되도록 하여, PCR 튜브 및 플레이트 외벽에 자성입자가 결합되며, 하판 조작 스위치를 이용하여 PCR 튜브 및 플레이트가 탈착될 경우 외벽에 붙어있던 자성입자는 분리된다. 본 발병은 자성입자의 부착 및 분리를 이용한 파이펫 형태의 자성입자 분리장치로서, 자성입자(magnetic bead)를 이용하여 멀티웰(multi-well) 플레이트로부터 핵산 또는 단백질을 추출하는 멀티웰 자성입자 파이펫터(multi-well magnetic bead pipettor)를 제공한다.The present invention is a pipette type magnetic particle separating device comprising a handle portion (H), an upper plate (300), and a lower plate (200) pipet tip portion (I). In the present invention, the handle portion H is coupled to the
본 발명자들은 종래의 자성입자 분리 과정에 대량처리공정에 대한 한계를 개선하고자 예의 연구 노력한 결과, 본 발명자들은 8개에서96개의 유도자석 고정부를 가지는 피펫형태의 자성입자 분리 장치인 멀티 웰 (multi-well) 자성입자 파이펫터(multi- well magnetic bead pipettor)을 개발하였다. The inventors of the present invention have made extensive efforts to improve the limitations of the conventional magnetic particle separation process, and as a result, the inventors of the present invention have found that a magnetic particle separator of a pipette type having 8 to 96 induction magnet fixing portions, multi -well) developed a multi-well magnetic bead pipettor.
이하, 본 발명의 구성에 대하여 상세히 설명한다:Hereinafter, the configuration of the present invention will be described in detail.
구성 (a): 손잡이 부분(H)Configuration (a): Handle portion (H)
손잡이 부분(H)은 막대 형상으로서 예컨대 원기둥 또는 사각기둥 형상일 수 있으며, 이에 한정되는 것은 아니다. The handle portion H may have a rod shape, for example, in the shape of a cylinder or a square column, but is not limited thereto.
상기 손잡이 부분(H)은 상판(300)과 결합가능하다. 손잡이 부분은 구체적으로 지지관(110), 하판 조작 스위치(120), 하판 조작 스프링(130) 및 지지관 고정부(140)로 구성된다(도 1. 참조) 손잡이 부분은 지지관 고정부(140)를 통하여 상판에 고정될 수 있으며, 지지관 고정부(140)는 고정나사 (T1)로 상판에 고정된다(도 3 참조). 상기 하판 조작 스위치 (120) 및 하판 조작 스프링을 이용하여 하판(200)의 상하이동을 조작한다.The handle portion (H) is engageable with the top plate (300). The handle portion includes a support pipe 110, a lower
고정캡(1)은 하판 조작 스위치 고정 캡이고, 플라스틱, 철재, 스테인리스, 알루미늄 등의 재질로 이루어질 수 있다.The
손잡이 부분에서 지지관(100)의 재질은 플라스틱, 철재, 스테인리스, 알루미늄일 수 있고, 바람직하게는 알루미늄 재질로 이루어지는 것일 수 있다. In the handle portion, the
구성 (b): 상판(300)Configuration (b): The
상판(300)은 손잡이 부분(H) 및 하판을 고정 및 연결하는 지지체 역할을 한다. 상판에는 상술한 지지관 고정부(140) 및 고정나사 (T1)가 결합될 수 있도록 고정나사 (T1) 결합 홈(t1)이 형성되어 있으며, 하판이 결합될 수 있도록 고정나사 (T2) 결합 홈(t2/220)이 형성되어 있다(도 3 및 도 5 참조).The
본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 상판(300) 및 하판(200)은 평행하게 구비되는 것을 특징으로 하며, 상판은 손잡이 부분(H)의 하부 및 하판 (200)의 상부와 결합가능하다.According to an embodiment of the present invention, the
한편, 상판에는 상판과 하판이 결합될 수 있도록 고정나사 (T2) 결합 홈(t2/220)이 형성되어 있다(도 3 및 도 5 참조).On the other hand, the upper plate is formed with a fitting groove (t2 / 220) for fixing the upper plate and the lower plate (see FIGS. 3 and 5).
본 발명의 멀티웰 자성입자 파이펫터는 상기 구성 이외에, 상판(300)과 하판(200) 사이에 위치하고, 상기 하판에 부착가능하며, 복수 개의 자성체 고정봉이 배열 및 결합되는 파이펫 팁 고정판 (400)을 추가적으로 포함할 수 있다. 파이펫 팁 고정판 (400)은 고정나사 (T3)를 통하여 하판에 고정될 수 있다(도 5 참조). 파이펫 팁 고정판에는 고정나사 (T3)를 통하여 자성체를 결합시킬 수 있는 파이펫 팁 고정 홈(410)이 형성되어 있다(도 5a 참조). The multi-well magnetic particle pipettor according to the present invention may include a pipet
본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 파이펫 팁 고정판 (400)은 상판에 장착된 막대자석(3)에 자기적으로 탈부착가능하다According to an embodiment of the present invention, the pipet
본 발명에서 상판은 전체적으로 플레이트 형상이지만, 2열의 PCR 튜브가 결합되는 파이펫터인 경우, 도 1에서와 같이 H 형상으로 제작될 수 있다.In the present invention, the upper plate is generally plate-shaped, but in the case of a pipettor in which two rows of PCR tubes are coupled, the upper plate may be formed into an H-shape as shown in FIG.
구성 (c): 하판(200)Configuration (c):
하판(200)은 파이펫 팁 부분(I)을 고정하는 부분으로서, 상판 (300)의 하부, 및 파이펫 팁 부분(I) 중 자성체 고정봉(500)의 상부와 결합가능하다. The
본 발명의 일 구현예에 따르면, 하판(200)은 자성체 고정봉(500)이 결합할 수 있도록 자성체 고정봉 통과 홈(210)이 형성된다. 자성체 고정봉(500)은 고정나사 (T3)를 통하여 하판에 직접적으로 결합될 수 있다.According to an embodiment of the present invention, the
본 발명의 다른 구현예에 따르면, 하판(200)은 파이펫 팁 고정판 (400)을 이용하여 자성체 고정봉(500)과 결합될 수 있다. 이 경우, 자성체 고정봉(500)에는 고정나사 (T3)가 결합될 수 있도록 고정나사 (T3) 결합 홈(t3)이 형성되어 있다. 파이펫 팁 고정판 (400)에 자성체 고정봉(500)이 결합된 상태로, 자성체 고정봉 통과 홈(210)을 통하여 하판에 장착된다(도 5 참조).According to another embodiment of the present invention, the
구성 (d): 파이펫 팁 부분(I)Configuration (d): Pipe tip portion (I)
파이펫 팁 부분(I)은 (i) 복수 개의 자성체(100), 및 (ii) 상기 자성체(100)가 결합되는 복수 개의 자성체 고정봉(500)을 포함한다. The pipette tip portion I includes (i) a plurality of
본 발명에서 자성체(100)는 복수 개일 수 있으며, 예컨대, 8개 내지 100개 또는 8개 내지 96개 일 수 있다. 본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 자성체(100)는 유도자석이다. In the present invention, the number of the
본 발명에서 자성체 고정봉(500)은 복수 개일 수 있다. 본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 자성체 고정봉(500)의 개수는 8개 (1열) 내지 96개 (12열); 또는 12개(1행) 내지 96개 (8 행)이다. 예컨대, 자성체 고정봉의 개수를 1열만을 장착하여 8개의 자성입자 분리에 유도될 수 있으며; 2개 열을 장착하여 16개의 자성입자 분리장치에 유도될 수 있으며; 1개 행의 자성체 고정봉을 장착하여 12개의 자성입자 분리 장치에 유도될 수 있으며; 2개 행의 자성체 고정봉을 장착하여 24개의 자성입자 분리 장치에 유도될 수 있어; 1개부터 96개의 자성체 고정봉의 개수에 따라 변형이 가능하다.In the present invention, the number of the magnetic
본 발명에서 자성체(100) 및 자성체 고정봉(500)은 기둥 형상으로서, 원기둥 또는 다각형 기둥형상일 수 있다. 자성체 고정봉(500)의 하단에는 자성체가 결합 가능한 자성체 고정 홈(510)이 형성되어 있다.In the present invention, the
한편, 자성체 고정봉(500)의 하단은 PCR 튜브가 끼움 결합될 수 있도록 튜브 홀 마찰부(520)가 형성되어 있으며, 자성체 고정봉 상단부 보다 작은 직경으로 이루어져 있다. 본 발명에서 자성체 고정봉(500) 하단의 튜브홀 마찰부(520)는 8-스트립 또는 12-스트립 PCR튜브(8 strip or 12 strip PCR tube)나 96웰 PCR 플레이트 (96 well PCR plate)와 마찰력에 의해 부착(끼움결합)되도록 고안되었다. 자성체 고정봉(500) 하단의 튜브홀 마찰부(520)는 금형가공에 의해 제작되며, 8-스트립/12-스트립 PCR튜브의 내부, 또는 96웰/튜브 플레이트의 웰/튜브 내부와 끼움 결합된다.The lower end of the magnetic immobilizing
본 발명에서 마그네틱 파이펫터의 파이펫 팁 부분(I)의 자성체 고정봉의 길이, 형태 크기, 개수는 한정되지 않으며, 정제 시료의 용기 형태와 정제 방식에 따라 달리 고안하여 사용될 수 있다.In the present invention, the length, form size, and number of the magnetic substance fixing rods of the pipette tip portion (I) of the magnetic pipettor are not limited and can be designed and used depending on the container type and purification method of the purified sample.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 8-스트립 또는 12-스트립 PCR튜브(8 strip or 12 strip PCR tube)를 이용하여 다량의 시료에 대해 핵산을 추출할 수 있도록 하기 위하여, 하판(200)에 8개 또는 12개 기둥형태의 자성체 고정봉(500)을 2열 형태로 결합하였으며, 자성체 고정봉에는 자성체(100)가 결합되는 자성체 고정 홈(510)을 두어 자성체와 결합시켰다(도 5 참조).According to an embodiment of the present invention, in order to extract a nucleic acid from a large amount of sample using an 8-strip or 12-strip PCR tube, The magnetic substance fixing rods are combined with the magnetic substance by the magnetic
본 발명의 다른 구현예에 따르면, 기존 96웰 (96- well) 형태의 플레이트에서 다량의 시료에 대해 핵산을 추출할 수 있도록 하기 위하여, 상판 (300)에 96개 기둥형태의 자성체 고정봉(500)을 8행 12열 형태로 결합하였으며, 자성체 고정봉에는 자성체(100)가 결합되는 자성체 고정 홈(510)을 두어 자성체와 결합시켰다.According to another embodiment of the present invention, in order to be able to extract nucleic acid from a large amount of sample in a 96-well plate, a
특히, 시료의 정제 과정에서 자성체와 자성입자가 흡착및 탈착 할 수 있도록하기 위하여 96웰 PCR 플레이트를 자성체 고정봉에 장착 및 탈착할 수 있도록 고안되었다. 이에 자성체 고정봉에 있는 튜브 홀 마찰부(520)의 마찰력을 이용하여 96웰 PCR 플레이트가 하판의 아래에 장착될 수 있게 고안되었으며, 하판조작 스위치(120)을 이용하여 하판(200)을 아래로 밀어내어 96웰 PCR 플레이트를 탈착시킬 수 있다(도 11 참조). 즉, 본 발명의 파이펫터는 상기 하판 조작 스위치를 이용하여, 8-스트립 PCR 튜브 (8-strip PCR tube) 또는 96 웰 PCR 플레이트 (96-well PCR plate)를 탈착할 수 있다.In particular, a 96-well PCR plate was designed to be able to mount and detach a 96-well PCR plate to a magnetic fixation rod so that magnetic material and magnetic particles can be adsorbed and desorbed during the purification of the sample. The 96-well PCR plate is designed to be mounted under the lower plate using the frictional force of the tube
본 발명의 멀티 웰 자성입자의 파이펫터에서 시료의 개수와 핵산 및 단백질의 정제 방식에 따라, 96웰 형태의 경우 자성체 고정봉(500)의 배열이 다음과 같이 세분화 될 수 있다.According to the number of samples and the method of purifying the nucleic acid and the protein in the multi-well magnetic particle of the present invention, the arrangement of the magnetic immobilizing
8열 x 1행 = 8개 자성체 고정봉, 8 rows x 1 row = 8 magnetic fixing rods,
8열 x 2행 = 16개 자성체 고정봉,8 columns x 2 rows = 16 magnetic fixing rods,
8열 x 3행 = 24개 자성체 고정봉,8 rows x 3 rows = 24 magnetic fixing rods,
8열 x 4행 = 32개 자성체 고정봉,8 rows x 4 rows = 32 magnetic fixing rods,
…...
8열 x 11행 = 88개 자성체 고정봉,8 rows x 11 rows = 88 magnetic fixed rods,
8열 x 12행 = 96개 자성체 고정봉.8 rows x 12 rows = 96 magnetic fixation rods.
또는or
12열 x 1행 = 12개 자성체 고정봉,12 rows x 1 row = 12 magnetic fixation rods,
12열 x 2행 = 24개 자성체 고정봉,12 columns x 2 rows = 24 magnetic fixation rods,
12열 x 3행 = 36개 자성체 고정봉,12 rows x 3 rows = 36 magnetic fixing rods,
12열 x 4행 = 48개 자성체 고정봉,12 rows x 4 rows = 48 magnetic fixing rods,
......
12열 x 7행 = 84개 자성체 고정봉,12 columns x 7 rows = 84 magnetic fixing rods,
12열 x 8행 = 96개 자성체 고정봉.12 columns x 8 rows = 96 magnetic fixing rods.
96웰 형태의 경우 자성체 고정봉의 배열 및 형태는 상기와 같이 배열될 수 있고, 자성체와 자성입자 결합을 8-스트립 PCR 튜브, 12-스트립 PCR 튜브, 96 웰 PCR 플레이트를 이용하여 직접 결합을 못하게 마스킹(masking) 하고있으나, 금형을 이용하여 여러 형태로 마스킹 튜브를 제작할 경우 자성체 고정봉의 크기, 길이 배열형태가 96웰 형태에 한정되지 않는다.In the case of the 96 well format, the arrangement and shape of the magnetic immobilizing rods can be arranged as described above, and the magnetic body and the magnetic particle binding can be masked directly by using 8-strip PCR tubes, 12-strip PCR tubes, However, when the masking tube is manufactured in various shapes using a mold, the size and length arrangement of the magnetic substance fixing rods are not limited to the shape of 96 wells.
자성체 고정봉의 배열을 결정하는 파이펫 팁 부분(I)은, (i) 상판에 장착된 “막대자석(3)”과 (ii) 자성체 고정 봉(500)을 하판(200) 또는 파이펫 팁 고정 판(400)에 고정하는 “고정나사 (T3)”가 자기적으로 부착 및 탈착 가능하도록 제작될 수 있다(도 4 및 도 5 참조). 즉, 상기 파이펫 팁 부분(I)은 상판(300)에 장착된 막대자석의 자기력에 의해 상판에 탈착 및 부착이 가능하다(I) the "
본 발명에 따른 도 10의 자성입자 파이펫터는 96개의 자성체 고정봉(500)에 자성체(100)를 장착시킨 멀티 피펫 형태의 자성입자 분리장치로, 96 웰 플레이트에 접합할 수 있는 튜브 홀 마찰부(520)를 포함하고 있으며, 플레이트를 탈착할 수 있는 하판(200), 하판을 움직이는 스위치(120), 스위치 복원 스프링 (130), 스위치와 스프링을 지지하는 지지관 (110), 지지관과 상판을 고정하는 지지관 고정부(140)와 고정나사 (T1, T2)으로 이루어진 파이펫 형태의 자성입자 분리장치이다. 지지관 고정부는 링(ring) 형상으로서, 고정나사홈(t1)이 형성되어 있다. 도 10의 자성입자 파이펫터 구성의 기본적인 결합관계는 도 3의 파이펫터와 동일하다.10 is a multi-pipette magnetic particle separator in which a
본 발명에서 멀티 웰 자성입자 파이펫터의 구성부분인 손잡이부분(H), 상판(300), 하판(200) 및 파이펫 팁부분(I)의 재질은 플라스틱, 금속 (예컨대 철재, 스테인리스, 알루미늄 등)일 수 있고, 바람직하게는 알루미늄 재질로 이루어지는 것일 수 있다. In the present invention, the material of the handle portion H, the
본 발명의 특징 및 이점을 요약하면 다음과 같다:The features and advantages of the present invention are summarized as follows:
(a) 본 발명은 핵산 또는 단백질을 추출하는 멀티웰 자성입자 파이펫터(multi-well magnetic bead pipettor)에 관한 것이다.(a) The present invention relates to a multi-well magnetic bead pipettor for extracting a nucleic acid or a protein.
(b) 본 발명의 파이펫터는 멀티웰 플레이트(예컨대, 96 웰 플레이트) 및 자성입자와 간접적으로 결합하는 복수 개의 자성체/자성체 고정봉을 이용하여 시료로부터 핵산 또는 단백질을 분리하는 장치이다.(b) The pipettor of the present invention is a device for separating a nucleic acid or protein from a sample using a multi-well plate (for example, a 96-well plate) and a plurality of magnetic / magnetic immobilizing rods indirectly bonding with magnetic particles.
(c) 본 발명의 장치는 기존 고가의 장비 및 기기를 대체하여 대량 시료에서 핵산 정제 및 분석에 매우 용이하게 수행 할 수 있을 뿐만 아니라, 다양한 시료의 형태에 따라서 조성변경이 용이하고 공간 및 전력적 한계가 있는 현장진단용에 효율적으로 이용될 수 있다.(c) The apparatus of the present invention can replace the existing expensive equipment and equipment, and can be easily performed in nucleic acid purification and analysis in a large amount of samples. In addition, it is easy to change the composition according to various sample forms, And can be efficiently used for field diagnosis.
도 1은 본 발명의 멀티 웰 (multi-well) 자성입자 파이펫터(multi-well magnetic bead pipettor)중 16 채널 (16-channel) 형태의 완성도 이다.
도 2는 본 발명의 멀티 웰 (multi-well) 자성입자 파이펫터(multi-well magnetic bead pipettor)의 구성도 이다.
도 3은 본 발명의 멀티 웰 (multi-well) 자성입자 파이펫터(multi-well magnetic bead pipettor)의 개괄 분해도면 이다.
도 4는 본 발명의 멀티 웰 (multi-well) 자성입자 파이펫터(multi-well magnetic bead pipettor) 상판(300)의 상세 분해도면이다. 본 발명의 멀티 웰 자성입자의 파이펫터에서 자성체 고정봉의 배열 형태를 결정하는 파이펫 팁 부분(I)은, (i) 상판에 장착된 “막대자석(3)”과 (ii) 자성체 고정 봉(500)을 파이펫 팁 고정 판(400)에 고정하는 “고정나사 (T3)”가 자기적으로 부착 및 탈착 가능하도록 제작될 수 있다(도 4 및 도 5 참조). 파이펫 팁 고정 판(400)은 파이펫 팁 결합 홈(320)에 결합될 수 있다. 이 때, 파이펫 팁 고정 판(400)에 결합된 고정나사 (T3)와 상판의 막대자석이 자기적으로 탈착된다.
도 5(a)는 본 발명의 멀티 웰 (multi-well) 자성입자 파이펫터(multi-well magnetic bead pipettor) 파이펫 팁부분 (I)의 상세 분해도면이며, 도5(b)는 파이펫 팁부분 (I)부분과 하판(200)과의 조립도 이다.
도 6는 본 발명의 멀티 웰 (multi-well) 자성입자 파이펫터(multi-well magnetic bead pipettor)중 16 채널 (16-channel) 형태의 자성입자 파이펫터에 8-스트립 PCR 튜브를 장착[도 6(a)] 및 탈착[도 6(b)]을 나타낸 모식도이다.
도 7은 본 발명의 멀티 웰 (multi-well) 자성입자 파이펫터(multi-well magnetic bead pipettor)중 16 채널 (16-channel) 형태 자성입자 파이펫터를 이용하여 96 딥 웰 플레이트 (96-deep well plate) 상에서 16가지의 시료를 정제하는 모식도를 나타낸 것이다.
도 8은 본 발명의 16 채널 (16-channel) 형태 자성입자 파이펫터를 이용하여 96 딥 웰 플레이트 (96-deep well plate) 상에서 PCR 산물을 정제한 결과를 나타낸 것이다.
도 9는 본 발명의 16 채널 (16-channel) 형태 자성입자 파이펫터를 이용하여 96 딥 웰 플레이트 (96-deep well plate) 상에서 박테리아 게놈 DNA (bacterial genomic DNA)을 정제한 결과를 나타낸 것이다.
도 10은 본 발명의 멀티 웰 (multi-well) 자성입자 파이펫터(multi-well magnetic bead pipettor)중 96 채널 (96-channel) 형태의 자성입자 파이펫터 완성도 이다.
도 11은 본 발명의 96 채널 (96-channel) 형태의 자성입자 파이펫터 96웰 PCR 플레이트와 장착 및 탈착된 모식도 이다.
도 12는 본 발명의 96 채널 (96-channel) 형태의 자성입자 파이펫터를 이용한 PCR 산물 정제과정에 대한 모식도 이다.
도 13은 PCR 산물 정제 결과에 대한 실시예를 나타낸 것이다.Figure 1 is a 16-channel perfection of a multi-well magnetic bead pipettor of the present invention.
FIG. 2 is a block diagram of a multi-well magnetic particle pipettor according to the present invention.
FIG. 3 is a schematic exploded view of a multi-well magnetic bead pipettor of the present invention.
4 is a detailed exploded view of a multi-well magnetic bead pipettor
FIG. 5 (a) is a detailed exploded view of a multi-well magnetic bead pipettor pipet tip portion I of the present invention, and FIG. 5 (b) (I) portion and a lower plate (200).
FIG. 6 shows an 8-strip PCR tube mounted on a 16-channel magnetic particle pipettor of a multi-well magnetic bead pipettor of the present invention (FIG. 6 (a) and desorption (Fig. 6 (b)).
FIG. 7 is a graph showing the results of a 96-deep well plate using 16-channel type magnetic particle pipetters of a multi-well magnetic bead pipettor of the present invention. plate for the purification of 16 samples.
FIG. 8 shows the results of purification of the PCR product on a 96-deep well plate using a 16-channel type magnetic particle pipettor of the present invention.
FIG. 9 shows the results of purification of bacterial genomic DNA on a 96-deep well plate using a 16-channel type magnetic particle pipettor of the present invention.
FIG. 10 is a 96-channel 96-channel magnetic particle pipetting perfomance of a multi-well magnetic bead pipettor of the present invention.
FIG. 11 is a schematic diagram of a 96-channel magnetic particle pipettor 96-well PCR plate of the present invention mounted and dismounted. FIG.
12 is a schematic diagram of a PCR product purification process using a 96-channel magnetic particle pipettor of the present invention.
13 shows an example of the result of PCR product purification.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명하다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. It is to be understood by those skilled in the art that these embodiments are for further illustrating the present invention and that the scope of the present invention is not limited by these embodiments in accordance with the gist of the present invention.
실시예Example
[도 1] 및 [도 2]는 본 발명의 실시예에 따른 멀티 웰 (multi-well) 자성입자 파이펫터 완성도와 구성도이고, [도 3]은 본 발명의 멀티 웰 (multi-well) 자성입자 파이펫터의 총괄적인 분해도를 나타낸다. [Figure 1] and [Figure 2] are diagrams illustrating the completeness and configuration of a multi-well magnetic particle pipettor according to an embodiment of the present invention, and Figure 3 is a diagram showing a multi- This shows the overall decomposition of the particle pipettor.
도 1, 2 및 3을 참조하면, 본 발명의 멀티 웰 자성입자 분리 피펫은 멀티웰 플레이트에서 다량의 시료에 대해 핵산을 추출을 목적으로, 상판 (300)에 8개에서96개 의 기둥형태의 자성체 고정봉(500)을 8행 X 12열 형태로 결합하였으며, 자성체 고정봉에는 자성체(100)가 결합되는 자성체 고정 홈(510)을 두어 자성체와 결합시켜 두었다. 자성체 고정봉은 원통형의 알루미늄 재질이며, 자성체는 상용화 된2∮x6mm의 원통형 네오디움 자석 [구입처 : 대화공단 대전자석]을 사용하였다.Referring to FIGS. 1, 2 and 3, the multiwell magnetic particle separation pipette of the present invention has a configuration in which eight to 96 pillar-shaped pellets are formed on a
시료의 정제 과정에서 자성체와 자성입자가 수시로 흡착 탈착 되도록 하기 위하여 자성체(100)과 자성입자가 직접적으로 결합하지 못하도록 하기 위하여 파이펫터의 형태에 따라 8-스트립 PCR 튜브 (8-strip PCR tube) 또는96웰 PCR 플레이트를 이용하였으며, PCR 튜브 또는 PCR 플레이트와 결합된 형태에서 자성입자와 결합되도록 고안되었다. 멀티웰 자성입차 파이펫터와 플레이트의 부착은 추가적인 고정장치 없이 자성체 고정봉(500)을 튜브 내부에 맞게 가공한 부분인 튜브홀 마찰부(520) 부위와 마찰력에 의해 결합되는 형태로 고안되었다. An 8-strip PCR tube or an 8-strip PCR tube may be used depending on the type of the pipettor so that the
플레이트의 탈착은 하판조작 스위치(120)와 스위치 복원 스프링(130)을 이용하여 하판(200)을 아래로 밀어내어 튜브홀 마찰부(520)에 결합된 PCR 튜브 또는 PCR 플레이트를 분리시키는 과정으로 이루어진다. 즉 96웰 PCR 플레이트를 해리시키면 자성체와 자성입자가 분리되는 형태의 멀티 피펫 형태이다. The detaching of the plate is performed by pushing down the
멀티 웰 자성입자의 파이펫터에서 자성체 고정봉의 형태를 결정하는 파이펫 팁 부분(I)은 상판에 결합된 막대자석 (3)과 자성체 고정 봉(500)을 파이펫 팁 고정 판(400)에 고정하는 고정나사 (T3)와 자기적으로 부착 및 탈착 가능하도록 제작되는 것을 특징으로 하며, 상판의 분해도와 파이펫 팁부분의 분해도를 [도 4]와 [도 5]에 나타내었다. The piezot tip portion I for determining the shape of the magnetic substance fixing rod in the multi-well magnetic particle pipettor is formed by fixing the
[도 6]은 멀티 웰 자성입자의 파이펫터중 16 채널 (16-channel)형태의 자성입자 파이펫터 형태의 대표도를 나타내며, 8 열 PCR 튜브와 장착 및 탈착 형태를 나타낸 도면이다. FIG. 6 is a representative view of a 16-channel type magnetic particle pipetter in a multi-well magnetic particle pipettor, and shows an 8 column PCR tube and a mounting and desorption type.
[도 7]은 16 채널 (16-channel)형태의 자성입자 파이펫터를 이용하여 96 딥 웰 플레이트 (96-deep well plate)상에서 PCR 산물 정제과정에 대한 모식도이다. 자세하게는 16 채널 (16-channel) 자성입자 파이펫터의 파이펫 팁 위치는, 96웰 플레이트 상의 12열 중에서 1열과 7열에 위치하는 것을 이상적으로 하며, 이를 이용한 핵산의 정제과정을 상술하면 다음과 같다.[Figure 7] is a schematic diagram of a PCR product purification process on a 96-deep well plate using a 16-channel magnetic particle pipettor. In detail, the position of the pipet tip of the 16-channel magnetic particle pipettor is ideally located in
우선적으로 96 딥 웰 플레이트의 용액 아래와 같이 구성한다.Firstly, the solution of 96 deep-well plate is constructed as follows.
1열 및 7열 : 결합 버퍼 (binding buffer, B)
2열 및 8열 : 세척 버퍼 1번 (washing buffer, W1)
3열 및 9열: 세척 버퍼 2번 (washing buffer, W2)
4열 및 10열 : 세척 버퍼 3번 (washing buffer, W3)
5열 및 11열 : 용출 버퍼(elution buffer, E)Columns 5 and 11: elution buffer (E)
6열 및 12열: Blank
상기와 같이 96 딥 웰 플레이트에 용액을 준비한 후 핵산을 정제하는 과정은 다음과 같다: The procedure for purifying the nucleic acid after preparing the solution in the 96-well plate as described above is as follows:
1. 1열에 증폭된 PCR 산물과 자성입자를 혼합 하여 자성 입자에 핵산을 결합 시키는 단계1. Binding nucleic acid to magnetic particles by mixing PCR product amplified in
2. 16 채널 (16-channel)형태의 자성입자 파이펫터에 8-스트립 PCR 튜브를 장착 후 파이펫 팁 부분이 1열과 7열에 놓이게 하여 자성입자를 부착하는 단계2. Step of attaching magnetic particles by mounting 8-strip PCR tubes on a 16-channel magnetic particle pipettor, placing the pipet tip portions on
3. 자성입자 파이펫터에 부착된 자성입자를 2열 및 8열로 옮긴 다음 파이펫터의 하판 분리 스위치를 이용하여 8-스트립 PCR 튜브를 분리 시켜 자성입자가 2열 및 8열에 존재하는 세척 버퍼 1(washing bffer1) 용액에 분산 시키는 단계 (1분간 방치)3. The magnetic particles attached to the magnetic particle pipettor were transferred to
4. 세척버퍼 1에 분산된 자성입자를 자성입자 파이펫터를 8-스트립 PCR 튜브에 다시 장착하여 자성입자를 팁 부분에 모으는 단계 (1분간 방치)4. The magnetic particles dispersed in the
5. 4번 과정에서 모인 자성입자는 파이펫터 팁을 3열과 9열로 이동시킨 후, 3번 과정과 같이 세척버퍼 2에 분산 및 4번 과정에서와 같이 모으는 단계 5. The magnetic particles collected in
6. 5번 과정에서 모인 자성입자는 파이펫터 팁을 4열과 10열로 이동시킨 후, 3번 과정과 같이 세척버퍼 2에 분산 및 4번 과정에서와 같이 모으는 단계 6. The magnetic particles collected in step 5 are moved to the fourth and tenth rows of the pipettor tip, dispersed in the
7. 6번 과정에서 모인 자성입자를 상온에서 5분간 두어 용액을 증발시키는 단계7. Step of evaporating the solution by placing the magnetic particles collected at the
8. 7번과정에서 파이펫터에 부착된 말려진 자성입자를 5열과 10열로 옮겨 8-스트립 PCR 튜브를 분리시켜 용출 버퍼에 분산시켜 5분간 방치 후 다시 자성입자만 모으는 단계8. In step 7, the dried magnetic particles attached to the pipettor are transferred to columns 5 and 10, the 8-strip PCR tubes are separated, dispersed in the elution buffer, left for 5 minutes,
로 구성될 수 있다.≪ / RTI >
상기 과정을 이용한 PCR 산물을 정제하기 위하여 (주)바이오팩트사의 HiGene™ PCR Purification Kit(Magnetic Bead Type) 를 이용하여 [도 7]에서 도식화 한 바와 같이 PCR 산물을 정제 수행하였다. PCR 산물을 정제를 수행하기 위하여, 대장균 균주인 DH5α 균주로 부터 미생물 동정에 이용되는 16S ribosomal DNA(16S rDNA) 증폭용 프라이머 (primer) 인 27F ( 5' - agagtttgatcctggctcag - 3') 프라이머 와 1492R ( 5' - tacggytaccttgttacgactt - 3') 프라이머를 이용하여 1275 bp의 PCR 산물을 얻었으며, (주)바이오팩트사의 HiGene™ PCR Purification Kit(Magnetic Bead Type)의 용액을 96 딥-웰 플레이트에 다음과 같이 분주하였다. In order to purify the PCR product using the above procedure, the PCR product was purified using the HiGene (TM) PCR Purification Kit (Magnetic Bead Type) manufactured by Biofact Co., Ltd. as shown in FIG. (5 '- agagtttgatcctggctcag - 3') primer, which is a primer for 16S ribosomal DNA (16S rDNA) amplification, used for identification of microorganisms from E. coli strain DH5α, and 1492R '-tacggytaccttgttacgactt-3') primer to obtain a 1275 bp PCR product. A solution of HiGene ™ PCR Purification Kit (Magnetic Bead Type) from Biofact Co., Ltd. was dispensed into a 96-well plate as follows .
1열 및 7열 : 250ul 결합 버퍼 (binding buffer)
2열 및 8열 : 700ul 세척 버퍼 1(washing buffer)2 columns and 8 columns: 700ul wash buffer 1 (washing buffer)
3열 및 9열 : 700ul 세척 버퍼 1(washing buffer) - 2열 및 8열과 동일 용액 사용
4열 및 10열 : 700ul 세척 버퍼 2(washing buffer 2) - 100% 에탄올 사용4 rows and 10 columns: 700ul Wash buffer 2 - 100% ethanol use
5열 및 11열 : 50ul 용출 버퍼 (elution buffer)Columns 5 and 11: 50ul elution buffer
6열 및 12열: Blank
[도 8]은 대장균 균주인 DH5α 균주로부터 증폭된 상기 16S rDNA PCR 산물 50ul와 (주)바이오팩트사의 HiGene™ PCR Purification Kit(Magnetic Bead Type)에 포함된 자성입자 20ul를 1열 및 7열에 넣어 결합버퍼와 혼합한 다음, 16 채널 (16-channel)형태의 자성입자 파이펫터를 이용하여 위 과정에서 준비된 96 딥-웰 플레이트상에서 핵산을 정제 후 전기영동한 결과이다. 2열과 3열 또는 8열과 9열에 동일한 세척버퍼를 사용하여 같은 과정을 반복하는 것은 핵산 정제시 순도를 높이는 통상적인 방법이며, 4열과 10열의 세척 버퍼로 100% 에탄올을 사용한 것은 자성입자 표면상에 남아있는 에탄올을 빠르게 증발 시키기 위함이다. Fig. 8 is a graph showing the results obtained by combining 50ul of the 16S rDNA PCR product amplified from E. coli strain DH5α and 20ul of magnetic particles contained in HiGene ™ PCR Purification Kit (Magnetic Bead Type) Buffer, and then purified and electrophoresed on a 96-well plate prepared in the above procedure using a 16-channel magnetic particle pipettor. Repeating the same procedure using the same wash buffer for
상기 과정을 이용한 박테리아 게놈 DNA (bacterial genomic DNA)를 추출하기 위하여 (주)바이오팩트사의 多Bead™ Genomic DNA Pre Kit (Bacterium, cultured cell)를 이용하여 [도 7]에서 도식화 한 바와 같이 키트상의 용액을 96 딥-웰 플레이트에 웰(well) 당 다음과 같이 분주한 후 핵산 정제를 수행하였다. In order to extract the bacterial genomic DNA using the above procedure, a solution of the kit phase (Bacterium, cultured cell) as shown in FIG. 7 was prepared by using the Multi Bead (TM) Genomic DNA Pre Kit Was subjected to nucleic acid purification after being dispensed into a 96-well-well plate as follows per well.
1열 및 7열 : 600 μl 용해 및 결합 버퍼 (lysis and binding buffer) -> 키트상의 MC1(-)버퍼 200 μl, MC2버퍼 200 μl, 이소프로판올 200 μl을 혼합
2열 및 8열 : 700ul 세척 버퍼 1(washing buffer) -> 키트상의 MPW2 버퍼 700 μl
3열 및 9열 : 700 μl 세척 버퍼 1(washing buffer) -> 키트상의 MPW2 버퍼 700 μl
4열 및 10열 : 700 μl 세척 버퍼 2(washing buffer 2) - 100% 에탄올 사용
5열 및 11열 : 100 μl 용출 버퍼 (elution buffer)Columns 5 and 11: 100 μl Elution buffer
[도 9]는 DH5α 균주를 LB 배양액에 16시간 배양 후 배양액 200ul를 용해 및 결합버퍼(lysis and binding buffer)가 있는 1열과 7열에 넣어 버퍼와 혼합한 후 16 채널 (16-channel)형태의 자성입자 파이펫터를 이용하여 박테리아 게놈 DNA를 정제한 다음 전기영동한 결과이다.FIG. 9 shows that DH5α strain was cultured in LB culture medium for 16 hours, and 200 ul of the culture solution was added to the
상기 형태에서는 20개 이하의 소량의 시료로부터 96 딥-웰 플레이트 상에서 멀티웰 자성입자 파이펫터를 이용한 핵산 정제과정을 나타낸 것이다. 본 발명에서는 멀티웰 자성입자 파이펫터는 대량의 시료에서도 핵산 및 단백질 정제에 적용 가능하며, 실예로 [도 10]과 같이 96 채널 (96-channel) 형태의 자성입자 파이펫터를 이용하여 다량의 시료로부터 핵산 및 단백질 정제가 가능하다. 상기 언급한 16채널 (16-channel) 형태의 자성입자 파이펫터의 경우 8-스트립 PCR 튜브 (8-striip PCR tube)를 이용하여 자성입자 파이펫터와 자성입자간의 결합 및 해리를 유도할 수 있는 바와 같이, 96 채널 (96-channel) 형태의 자성입자 파이펫터 또한 96웰 PCR 플레이트를 탈착 및 부착을 이용하여 자성입자와 파이펫터 간의 결합 및 해리를 유도할 수 있다. [도 11]In this embodiment, a nucleic acid purification process using a multi-well magnetic particle pipettor on a 96-well plate with a small amount of 20 or less samples is shown. In the present invention, the multi-well magnetic particle pipettor can be applied to nucleic acid and protein purification even in a large amount of samples. For example, a 96-channel magnetic particle pipettor as shown in FIG. To purify nucleic acids and proteins. In the 16-channel type magnetic particle pipettor described above, the 8-strip PCR tube can be used to induce coupling and dissociation between the magnetic particle pipettor and the magnetic particles. Similarly, 96-channel (96-channel) magnetic particle pipetters can also induce coupling and dissociation between magnetic particles and pipetters using desorption and attachment of 96-well PCR plates. [Figure 11]
다량의 시료로부터 핵산을 정제하기 위하여 다음과 같은 형태의 용액준비가 필요하다.In order to purify the nucleic acid from a large amount of sample, the following type of solution preparation is required.
1 번 플레이트 : 결합 버퍼(binding buffer)Plate # 1: binding buffer
2번 플레이트 : 세척 버퍼1 (washing buffer 1)No. 2 plate: washing buffer 1 (washing buffer 1)
3번 플레이트 : 세척 버퍼2 (washing buffer 2)No. 3 plate:
4번 플레이트 : 세척 버퍼3 (washing buffer 3)No. 4 plate:
5번 플레이트 : 용출 버퍼 (elution buffer)5 plate: elution buffer
[도 12]는 96 채널 (96-channel) 형태의 자성입자 파이펫터를 이용하여 PCR 산물 정제 과정에 대한 모식도이다. 96 채널 (96-channel) 형태의 자성입자 파이펫터를 이용한 PCR 산물 정제를 수행하기 위하여 웰(well) 당 (주)바이오팩트사의 HiGene™ PCR Purification Kit(Magnetic Bead Type)의 버퍼를 다음과 같이 분주하였다.FIG. 12 is a schematic diagram of a PCR product purification process using a 96-channel magnetic particle pipettor. In order to perform PCR product purification using a 96-channel magnetic particle pipettor, a buffer of HiGene (TM) PCR Purification Kit (Magnetic Bead Type) manufactured by Biopharmaceutical Co., Ltd. per well was dispensed in the following manner Respectively.
1번 플레이트 : 250 μl 결합 버퍼 (binding buffer)1 plate: 250 [mu] l binding buffer
2번 플레이트 : 700 μl 세척 버퍼 1(washing buffer)No. 2 plate: 700 μl Wash buffer 1 (washing buffer)
3번 플레이트 : 700 μl 세척 버퍼 1(washing buffer) - 2열 및 8열과 동일 용액 사용Plate No. 3: 700 μl Washing buffer 1 (washing buffer) - Use the same solution as
4번 플레이트 : 700 μl 세척 버퍼 2(washing buffer 2) - 100% 에탄올 사용Plate No. 4: 700 μl Washing buffer 2 - Use 100% ethanol
5번 플레이트 : 50 μl 용출 버퍼 (elution buffer)5 plate: 50 μl Elution buffer
[도 13]은 대장균 균주인 DH5α 균주로부터 증폭된 16S rDNA PCR 산물 50 μl와 (주)바이오팩트사의 HiGene™ PCR Purification Kit(Magnetic Bead Type)에 포함된 자성입자 20 μl를 1번 플레이트에 넣어 결합버퍼와 혼합한 다음, 96 채널 (96-channel)형태의 자성입자 파이펫터를 이용하여 위 과정에서 준비된 96웰 플레이트상에서 핵산을 정제 후 전기영동 결과이다.[Fig. 13] is a graph showing the results obtained when 20 μl of the magnetic particles contained in 50 μl of the 16S rDNA PCR product amplified from the E. coli strain DH5α and the HiGene ™ PCR Purification Kit (Magnetic Bead Type) Buffer, and electrophoresis after purification of the nucleic acid on a 96-well plate prepared in the above procedure using a 96-channel magnetic particle pipettor.
H : 손잡이 부분
I : 파이펫 팁 부분
N : 너트
T1, T2, T3 : 고정나사
t1, t2, t3 : 나사 고정 홈
1 : 하판 조작 스위치 고정 캡
2 : 하판 고정 나사 홈
3 : 막대자석
100 : 자성체
110 : 지지관
120 : 하판 조작 스위치
130 : 하판 조작 스프링
140 : 지지 관 고정부
150 : 지지 관 고정 나사 홈
200 : 하판
210 : 자성체 고정봉 통과 홈
220 : 하판 조작 스위치 결합 홈
300 : 상판
310 : 막대자석 부착 홈
320 : 파이펫 팁 결합 홈
400 : 파이펫 팁 고정 판
410 : 파이펫 팁 고정 홈
500 : 자성체 고정 봉
510 : 자성체 고정홈
520 : 튜브 홀 마찰 부H: Handle portion
I: Pipette tip portion
N: Nut
T1, T2, T3: Set screw
t1, t2, t3: Screw fixing groove
1: Lower plate operation switch fixing cap
2: Lower plate fixing screw groove
3: Bar magnet
100: magnetic substance
110: Support tube
120: Lower plate operation switch
130: Lower plate operating spring
140:
150: Support tube fixing screw groove
200: lower plate
210: magnetic material fixing rod passing groove
220: Lower plate operation switch coupling groove
300: top plate
310: rod magnet attachment groove
320: Pipette tip mating groove
400: pipet tip fixing plate
410: Pipette tip fixing groove
500: magnetic rod
510: magnetic material fixing groove
520: tube hole friction portion
Claims (10)
(a) 상판(300)과 결합가능하고, 하판 조작 스위치 (120) 및 하판 조작 스프링(130)을 포함하며, 상기 하판 조작 스위치 (120) 및 하판 조작 스프링을 이용하여 하판(200)의 상하이동을 조작하는 손잡이 부분(H);
(b) 손잡이 부분(H) 및 하판 (200)의 상부와 결합가능한 상판 (300);
(c) 상판 (300)의 하부 및 자성체 고정봉(400)의 상부와 결합가능한 하판 (200); 및
(d) 하판의 하부와 결합가능하고, (i) 복수 개의 자성체(100), 및 (ii) 상기 자성체(100)가 결합되는 복수 개의 자성체 고정봉(500) 을 포함하는 파이펫 팁 부분(I);
을 포함하는 피펫(pipette) 형태의 자성입자 분리장치로서,
상기 자성체 고정봉(500)은 하단에 튜브 홈 마찰부(520)를 포함하고, 상기 튜브 홈 마찰부(520)에는 8-스트립 PCR 튜브 (8-strip PCR tube) 또는 96 웰 PCR 플레이트 (96-well PCR plate)가 부착 및 탈착 가능하다.
A multi-well magnetic bead pipettor for extracting nucleic acid or protein from a multi-well plate using magnetic beads, comprising:
(a) a lower plate operating switch 120 and a lower plate operating spring 130, which are engageable with the upper plate 300 and are movable up and down by using the lower plate operating switch 120 and the lower plate operating spring, A handle portion H for operating the handle;
(b) an upper plate 300 engageable with the upper portion of the handle portion H and the lower plate 200;
(c) a lower plate 200 engageable with the lower portion of the upper plate 300 and the upper portion of the magnetic substance fixing rods 400; And
(I) comprising a plurality of magnetic immobilizing rods (500) to which the magnetic bodies (100) are coupled, the plurality of magnetic bodies (100) );
A magnetic particle separator in the form of a pipette,
The magnetic immobilizing bar 500 includes a tube groove rubbing part 520 at the lower end and an 8-strip PCR tube or a 96-well PCR plate 96- well PCR plate) can be attached and detached.
The multi-well magnetic particle pipettor according to claim 1, further comprising a pipet tip fixing plate (400) disposed between the upper plate (300) and the lower plate (200) Magnetic particle pyroteater.
3. The magnetic particle pipettor according to claim 2, wherein the pipet tip fixing plate (400) is magnetically detachably attachable to the bar magnet (3) mounted on the upper plate.
The magnetic particle pipettor according to claim 1, wherein the number of the magnetic bodies (100) is 8-100.
The magnetic particle pipettor according to claim 1, wherein the magnetic body (100) is an induction magnet.
The magnetic recording medium according to claim 1, wherein the upper plate (300) and the lower plate (200) are parallel to each other, and a magnetic immobilizing rod passage groove (210) Pipettor.
The method of claim 1, wherein the pipettor is capable of detaching an 8-strip PCR tube or a 96-well PCR plate using the lower plate manipulation switch Magnetic particle pyroteater.
The magnetic particle pipettor according to claim 1, wherein the magnetic substance fixing unit, the upper plate (300), and the lower plate (200) are made of metal or plastic.
The method according to claim 1, wherein the number of the magnetic substance fixing rods (500) is 8 (1 row) to 96 (12 rows); Or 12 (1 row) to 96 (8 rows).
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