KR20190022455A - 생물학적 조직 유착을 방지하는 방법 - Google Patents

생물학적 조직 유착을 방지하는 방법 Download PDF

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KR20190022455A
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가부시끼가이샤 쓰리디 매트릭스
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Abstract

본 명세서에서는 생물학적 조직 유착을 경감시키는 방법 및 재료에 대해서 기재한다. 생물학적 조직에 대한 유착을 경감시키는 하나의 방법은 생물학적 조직에 유효량의 자기조립 펩티드 용액을 투여하는 단계를 포함하고, 상기 자기 조립 펩티드의 길이는 약 7개의 아미노산∼32개의 아미노산이고, 상기 자기 조립 펩티드 용액은 생리학적 조건하에서 하이드로겔을 형성한다.

Description

생물학적 조직 유착을 방지하는 방법
본 개시는 의학 용도, 연구 용도 및 공업 용도에 있어서 사용될 수 있는 재료 및 방법에 관한 것이다. 보다 상세하게는, 본 개시는, 예를 들면 생물학적 조직 유착을 방지 또는 경감시킴으로써 항유착을 촉진시키기 위해 사용될 수 있는 재료 및 방법에 관한 것이다.
수술 후의 조직 유착은 신경외과 수술, 흉부 수술, 비뇨기과, 산과, 부인과, 소화기관 수술 및 정형외과 수술에서의 치료와 같은 다양한 치료와 관련하여 발생한다. 유착은 일반적으로 생리학적 및 생물학적 수복 반응과 관련되어 있다. 유착의 성질은 상이한 조직 간에서 다를 수 있지만, 이러한 유착을 완전히 방지하는 것은 어렵다고 생각된다.
현재, 히알루론산 나트륨, 카르복시메틸 셀룰로오스, 산화 재생 셀룰로오스 및 팽창 폴리테트라플루오로에틸렌(ePTFE)은 항유착성 재료로서 임상적으로 사용되고 있다. 그러나, 이들 재료는 한정된 유효성 및/또는 부작용을 가질 수 있고, 및/또는 사용하기 어렵다. 예를 들면, 이러한 재료는 통상적으로 시트 형태로 제공되어, 적용 부위에 고정시키기 곤란할 수 있다. 또한, 이들은 내시경 수술 시에는 사용이 곤란할 수 있어서, 출혈 부위에 반드시 효과적으로 적용된다고 할 수 없다.
따라서, 생물학적 조직 유착을 방지 또는 경감시키기 위한 개선된 치료법에 대한 필요성이 여전히 남아있다.
본 발명은 적어도 부분적으로 소정의 양친매성 펩티드 용액이 놀랍게도 또한 유리하게 생물학적 조직 유착을 방지 또는 경감시키기 위해 사용될 수 있다는 발견에 의거한다.
다양한 양태에 있어서, 본 발명은 생물학적 조직에의 유착을 경감시키는 방법을 제공하고, 상기 방법은 생물학적 조직에 유효량의 자기 조립 펩티드 용액을 투여하는 단계를 포함하고, 상기 자기 조립 펩티드의 길이는 약 7개의 아미노산∼32개의 아미노산이고 또한 상기 자기 조립 펩티드 용액은 생리학적 조건하에서 하이드로겔을 형성하고, 상기 하이드로겔은 생물학적 조직에의 유착을 경감시킨다.
다양한 양태에 있어서, 본 발명은 생물학적 조직 간의 유착을 경감시키는 방법으로 제공하고, 상기 방법은 수술 부위에서의 생물학적 조직에 유효량의 자기 조립 펩티드 용액을 투여하는 단계를 포함하고, 상기 자기 조립 펩티드의 길이는 약 7개의 아미노산∼32개의 아미노산이고 또한 상기 자기 조립 펩티드 용액은 생리학적 조건하에서 하이드로겔을 형성하고, 상기 하이드로겔은 수술 부위에서의 생물학적 조직에의 다른 생물학적 조직의 유착을 경감시킨다.
다양한 양태에 있어서, 본 발명은 생물학적 조직에의 유착을 경감시키기 위한 유효량의 자기 조립 펩티드 용액의 용도를 제공하고, 상기 자기 조립 펩티드의 길이는 약 7개의 아미노산∼32개의 아미노산이고 또한 상기 자기 조립 펩티드 용액은 생리학적 조건하에서 하이드로겔을 형성하고, 상기 하이드로겔은 생물학적 조직에의 유착을 경감시킨다.
다양한 양태에 있어서, 본 발명은 생물학적 조직에의 유착을 경감시키기 위한 유효량의 자기 조립 펩티드 용액의 용도를 제공하고, 상기 자기 조립 펩티드의 길이는 약 7개의 아미노산∼32개의 아미노산이고 또한 상기 자기 조립 펩티드 용액은 생리학적 조건하에서 하이드로겔을 형성하고, 상기 하이드로겔은 수술 부위에서의 생물학적 조직에의 다른 생물학적 조직의 유착을 경감시킨다.
다양한 양태에 있어서, 본 발명은 타겟 영역에 전달 장치를 도입하는 단계; 항유착이 소망되는 타겟 영역에 상기 전달 장치의 단부를 위치시키는 단계; 항유착을 촉진시키기 위해서, 타겟 영역의 생리학적 조건하에서 하이드로겔을 형성하도록 유효량 및 유효 농도로 약 7개의 아미노산∼32개의 아미노산을 포함하는 자기 조립 펩티드를 포함하는 용액을 상기 전달 장치를 통해서 투여하는 단계; 및 상기 타겟 영역으로부터 상기 전달 장치를 제거하는 단계를 포함하는 항유착 촉진 방법을 제공한다.
다양한 양태에 있어서, 본 발명은 항유착을 촉진시키기 위해서, 생리학적 조건하에서 하이드로젤을 형성하는데 사용되는 유효량 및 유효 농도로 약 7개의 아미노산∼32개의 아미노산을 포함하는 자기 조립 펩티드를 포함하는 조성물을 제공한다.
다양한 양태에 있어서, 본 발명은 항유착을 촉진시키기 위해서, 생리학적 조건하에서 하이드로겔을 형성하도록 유효량으로 약 7개의 아미노산∼32개의 아미노산을 포함하는 자기 조립 펩티드, 및 상기 자기 조립 펩티드를 타겟 영역에 투여하기 위한 지시를 포함하는 항유착 촉진용 키트를 제공한다.
다양한 양태에 있어서, 본 발명은 심외막 절제와 관련된 타겟 영역에 전달 장치를 도입하는 단계, 항유착이 소망되는 타겟 영역에 전달 장치의 단부를 위치시키는 단계; 항유착을 촉진시키기 위해서, 타겟 영역의 생리학적 조건하에서 하이드로겔을 형성하도록 타겟 영역에 유효 농도 및 유효량으로 약 7개의 아미노산∼약 32개의 아미노산을 포함하는 자기 조립 펩티드를 포함하는 용액을 상기 전달 장치를 통해 투여하는 단계, 및 상기 타겟 영역으로부터 상기 전달 장치를 제거하는 단계를 포함하는, 심외막 절제에 있어서의 항유착 촉진 방법을 제공한다.
다양한 양태에 있어서, 본 발명은 항유착을 촉진시키기 위해서, 생리학적 조건하에서 하이드로겔을 형성하도록 유효량으로 약 7개의 아미노산∼약 32개의 아미노산을 포함하는 자기 조립 펩티드, 및 심외막 절제와 관련된 타겟 영역에 상기 자기 조립 펩티드를 투여하기 위한 지시를 포함하는 심외막 절제에 있어서의 항유착 촉진용 키트를 제공한다.
다양한 양태에 있어서, 본 발명은 항유착을 촉진시키기 위해서, 생리학적 조건하에서 심외막 절제와 관련된 타겟 영역에 하이드로겔을 형성하도록 유효량 및 유효 농도로 약 7개의 아미노산∼약 32개의 아미노산을 포함하는 자기 조립 펩티드를 포함하는 용액을 제공하는 단계; 및 상기 타겟 영역에 위치된 전달 장치를 통한 상기 용액의 도입에 의해 타겟 영역에 상기 용액을 투여하기 위한 지시를 제공하는 단계를 포함하는 심외막 절제에 있어서의 항유착의 촉진을 촉진시키는 방법을 제공한다.
다양한 양태에 있어서, 본 발명은 본질적으로 복수의 자기 조립 펩티드로 이루어지는 거시적 스카폴드(macroscopic scaffold)를 제공하고, 각각의 상기 자기 조립 펩티드는 항유착을 촉진시키도록 심외막 절제와 관련된 타겟 영역 내에 위치될 수 있는 약 7개의 아미노산∼약 32개의 아미노산을 유효량으로 포함한다.
당업자에게 이해되는 바와 같이, 상기 양태 중 어느 것도 하기의 임의의 하나 이상의 특징과 조합될 수 있다.
다양한 실시형태에 있어서, 상기 생물학적 조직은 심외막을 포함한다.
다양한 실시형태에 있어서, 상기 생물학적 조직은 절제, 바람직하게는 심실성 빈맥 절제가 실시된 심외막을 포함한다.
다양한 실시형태에 있어서, 상기 자기 조립 펩티드는 소수성 아미노산과 친수성 아미노산이 교대로 있는 약 12개∼약 16개의 아미노산을 포함한다.
다양한 실시형태에 있어서, 자기 조립 펩티드는 RADA, IEIK, TTTT, ATAT, TVTV, ASAS, SSSS, VVVTTTT, 및 그들의 조합에서 선택되는 서열을 포함한다.
다양한 실시형태에 있어서, 상기 자기 조립 펩티드는 (RADA)4, (IEIK)3I 및 (KLDL)3에서 선택되는 서열을 포함한다.
다양한 실시형태에 있어서, 상기 자기 조립 펩티드는 상기 용액의 약 0.1∼약 10w/v%이거나 또는 상기 용액의 약 0.1∼약 3.5w/v%이다.
다양한 실시형태에 있어서, 상기 자기 조립 펩티드는 상기 용액의 약 1, 약 2.5, 또는 약 3w/v%이다.
다양한 실시형태에 있어서, 상기 유효량이 타겟 영역 1㎠당 약 0.1mL∼약 5mL이다.
다양한 실시형태에 있어서, 상기 유효량이 타겟 영역 1㎠당 1mL이다.
다양한 실시형태에 있어서, 상기 하이드로겔은 상기 자기 조립 펩티드 용액을 타겟 영역에 투여하기 전에 형성된다.
다양한 실시형태에 있어서, 상기 하이드로겔은 상기 자기 조립 펩티드 용액을 타겟 영역에 투여한 후에 형성된다.
다양한 실시형태에 있어서, 상기 용액은 생물학적 활성제를 더 포함한다.
다양한 실시형태에 있어서, 상기 용액은 세포 및/또는 약제를 실질적으로 포함하지 않는다.
다양한 실시형태에 있어서, 상기 자기 조립 펩티드 용액은 생체내(in vivo) 투여된다.
다양한 실시형태에 있어서, 상기 생물학적 조직이 인간 조직이다
다양한 실시형태에 있어서, 상기 용액은 수용액이고, 상기 수용액 중의 펩티드의 농도는 약 0.1중량/체적(w/v)%∼약 3w/v%이다.
다양한 실시형태에 있어서, 상기 방법은 타겟 영역에 전달 장치를 도입하기 전 및/또는 타겟 영역으로부터 전달 장치를 제거한 후에 타겟 영역을 가시화하는 단계를 더 포함한다.
다양한 실시형태에 있어서, 상기 방법은 전달 장치를 제거한 후에 타겟 영역을 모니터링하는 단계를 더 포함한다.
다양한 실시형태에 있어서, 상기 방법은 자기 조립 펩티드를 포함하는 용액을 조제하는 단계를 더 포함한다.
다양한 실시형태에 있어서, 상기 타겟 부위는 심외막 절제에의 카테터 어프로치(catheter proach)에 관련된 것이다.
다양한 실시형태에 있어서, 상기 타겟 부위는 수술 부위이다.
다양한 실시형태에 있어서, 상기 하이드로겔은 복강내 유착 형성을 치료, 방지 및/또는 경감시킨다.
다양한 실시형태에 있어서, 상기 생물학적 조직은 복강내, 맹장, 장, 우선적으로는 대장 및/또는 결장을 포함한다.
다양한 실시형태에 있어서, 상기 하이드로겔은 골반 유착 형성을 치료, 방지 및/또는 경감시킨다.
다양한 실시형태에 있어서, 상기 하이드로겔은 산과 또는 부인과 수술에 있어서의 유착 형성을 치료, 방지 및/또는 경감시킨다.
다양한 실시형태에 있어서, 산과 또는 부인과 수술은 제왕절개 분만, 복식 자궁 적출술, 우선적으로는 근종 적출술, 난소 낭선종 절제술, 또는 침습성 부인병적 악성 종양에 대한 외과 수술을 포함한다.
다양한 실시형태에 있어서, 유착 형성의 치료, 방지 및/또는 경감은 소장장해, 불임, 만성동통, 및 성교동통을 치료, 방지 및/또는 경감시킨다.
본 기술의 이들 이점 및 그외 이점은 이하의 설명을 참조했을 때 명백해질 것이다.
본 발명은 적어도 부분적으로 소정의 양친매성 펩티드 용액이 놀랍게도 또한 유리하게 생물학적 조직 유착을 경감시키는데 사용될 수 있다는 발견에 근거하는 것이다.
대략적으로, 본 방법 및 재료는 생물학적 조직 유착을 방지 또는 경감시키기 위해서 하이드로겔 배리어를 사용할 수 있다. 경감은 부분적이어도 좋고 또는 완전해도 좋다. 재료 및 방법은 미리 정해진 또는 소망의 타겟 영역에의 자기 조립 펩티드, 또는 자기 조립 펩티드를 포함하는 용액, 또는 자기 조립 펩티드를 포함하는 조성물을 투여, 적용 또는 주사를 포함할 수 있고, 이것에 의해 생물학적 조직의 유착을 방지 또는 경감시킬 수 있다.
예를 들면, 다양한 양태 및 실시형태에 있어서, 본 발명은 생물학적 조직에의 유착을 경감시키는 방법 및 재료를 제공한다. 본 방법은 유효량의 자기 조립 펩티드 용액을 생물학적 조직에 투여하는 단계를 포함하고, 상기 자기 조립 펩티드의 길이는 약 7개의 아미노산∼32개의 아미노산이고 또한 상기 자기 조립 펩티드 용액은 생리학적 조건하에서 하이드로겔을 형성한다. 소정의 실시형태에 있어서, 유착은 2개의 생물학적 조직 간의 유착이다. 다른 소정의 실시형태에 있어서, 상기 생물학적 조직은 심외막을 포함할 수 있다. 또 다른 소정의 실시형태에 있어서는, 상기 생물학적 조직은 절제가 실시된 심외막을 포함할 수 있다. 또 다른 소정의 실시형태에 있어서는, 상기 생물학적 조직은 심실성 빈맥 절제가 실시된 심외막을 포함할 수 있다.
자기 조립 펩티드를 포함하는 용액을 투여함으로써, 하이드로겔 배리어가 형성될 수 있다. 하이드로겔 배리어는 타겟 영역에 형성되어 항유착을 촉진시킬 수 있다. 본 개시의 자기 조직화 펩티드 또는 자기 조립 펩티드는 미리 정해진 또는 소망의 타겟에의 자기 조직화 펩티드 또는 자기 조립 펩티드의 적용을 포함할 수 있다. 자기 조직화 펩티드 또는 자기 조립 펩티드는 펩티드 용액, 하이드로겔, 막 또는 다른 형태의 형태로 타겟 부위에 적용 또는 도입될 수 있다. 타겟 부위는 특정한 치료를 필요로 하는 피험체의 미리 정해진 영역일 수 있다. 일부 실시형태에 있어서, 타겟 부위는 내시경 수술 부위와 같은 수술 부위와 관련될 수 있다. 다른 실시형태에 있어서, 타겟 부위는 출혈 부위이어도 좋다
이하에, 본 발명의 다양한 특징에 대해서 상세하게 설명한다.
본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "피험체"는 인간 및 비인간 동물, 예를 들면 척추동물, 대동물 및 영장류를 포함하는 것이다. 소정의 실시형태에 있어서, 피험체는 포유동물 피험체이며, 특정한 실시형태에 있어서는, 피험체는 인간 피험체이다. 인간에 대한 적용은 명확히 예측되지만, 예를 들면 비인간 동물에 대한 수의학적 적영도 본 명세서에 있어서 예상된다. 본 발명의 용어 "비인간 동물"은 모든 척추동물, 예를 들면, 비포유류 동물(예를 들면, 새, 예를 들면 닭; 양서류; 파충류) 및 비인간 영장류, 가축, 및 농업상 유용한 동물, 예를 들면 양, 개, 고양이, 소, 돼지, 래트 등과 같은 포유 동물을 포함한다.
용어 "자기 조립 펩티드"는 자기 조립 모티프를 포함하는 펩티드를 가리킬 수 있다. 자기 조립 펩티드는, 이들에 한정되는 것은 아니지만, 거시적인 막 또는 나노구조를 포함하는 구조 내에 자기 조립이 가능한 펩티드이다. 예를 들면, 자기 조립 펩티드는 β-시트 구조를 유도하기 위한 특정 조건의 존재하에서 수용액 중에서 β-시트 구조를 나타낼 수 있다. 이들 특정 조건은 자기 조립 펩티드 용액의 pH를 조정하는 것을 포함할 수 있다. 상기 조정은 자기 조립 펩티드 용액의 pH 증가 또는 감소일 수 있다. pH의 증가는 생리학적인 pH로의 pH의 증가일 수 있다. 또한, 특정 조건은 1가 양이온과 같은 양이온을 자기 조립 펩티드 용액에 첨가하는 것도 포함할 수 있다. 특정 조건은 췌장에 관련된 조건을 포함할 수 있다. 자기 조립 펩티드는 조성물, 펩티드 용액, 펩티드 분말, 하이드로겔, 또는 스카폴드의 일부라고 칭해지거나 또는 그 일원일 수 있다. 자기 조립 펩티드는 펩티드 용액, 조성물, 하이드로겔, 막, 스카폴드, 또는 다른 형태의 형태로 타겟 영역에 투여될 수 있다.
자기 조직화 또는 자기 조립시, 펩티드는 나노섬유를 형성할 수 있다. 자기 조직화 또는 자기 조립은 용액 중에서의 펩티드의 겔화를 일으킬 수 있다. 겔화는 하이드로겔을 제공 또는 형성할 수 있다. 펩티드는 생리학적 pH 레벨하에서 용액 중에서 자발적으로 β-시트를 형성할 수 있다. 펩티드는 생리학적 조건하 및/또는 양이온의 존재하에서 용액 중에서 자발적으로 β-시트를 형성할 수 있다.
용어 "하이드로겔"은 폴리머, 및 높은 비율, 예를 들면 적어도 90%의 물로 구성되는 재료를 가리킬 수 있다
자기 조립 펩티드는 양친매성 자기 조립 펩티드일 수 있다. "양친매성"이란, 펩티드가 소수성 부분과 친수성 부분을 포함하는 것을 의미한다. 일부 실시형태에 있어서는, 양친매성 펩티드는 교대로 소수성 아미노산과 친수성 아미노산을 포함하거나, 또는 교대로 소수성 아미노산과 친수성 아미노산으로 본질적으로 이루어지거나, 또는 교대로 소수성 아미노산과 친수성 아미노산으로 이루어질 수 있다. 교대로란, 소수성 아미노산과 친수성 아미노산이 교대로 있는 일련의 3개 이상의 아미노산을 포함하는 것을 의미하고, 또한 소수성 아미노산과 친수성 아미노산이 교대로 있는 펩티드 서열 중에는 각각의 모든 아미노산이 포함될 필요는 없다. 소정의 실시형태에 있어서는, 펩티드는 양친매성인 제 1 부분과, 양친매성이 아닌 제 2 부분을 포함할 수 있다.
"펩티드" 또는 "자기 조립 올리고펩티드"라고도 본 명세서에서 칭해지는 자기 조립 펩티드는 자기 조립 펩티드 용액, 조성물, 하이드로겔, 막, 스카폴드, 또는 다른 형태의 형태로 미리 정해진 또는 소망의 타겟 영역에 투여될 수 있다. 하이드로겔은 본 개시 전반에 걸쳐서 막 또는 스카폴드라고도 칭해질 수도 있다.
미리 정해진 또는 소망의 타겟 영역은 생물학적 조직일 수 있다. 미리 정해진 또는 소망의 타겟 영역은 외과 수술의 위치 또는 그 부근이어도 좋다. 미리 정해진 또는 소망의 타겟 영역은 외과 수술을 받았을 가능성이 있는 부위 또는 그외 영역,또는 의도하지 않은 또는 의도한 외상에 근거해서 설정될 수 있다. 일부 실시형태에 있어서는, 타겟 부위는 심외막일 수 있다. 일부 다른 실시형태에 있어서는, 타겟 부위는 절제가 실시된 심외막일 수 있다. 또 다른 일부 실시형태에 있어서는, 타겟 부위는 심실성 빈맥 절제가 실시된 심외막일 수 있다. 다양한 실시형태에 있어서, 타겟 부위는 복강내, 맹장, 장, 우선적으로 대장, 및/또는 결장을 포함한다. 다양한 실시형태에 있어서, 타겟 부위는 제왕절개 분만, 복식 자궁 적출, 우선적으로는 근종 적출, 난소 낭선종 절제, 또는 침습성 부인병적 악성 종양에 대한 외과 수술을 실시하는 생물학적 조직을 포함한다.
자기 조립 펩티드 용액은 수성 자기 조립 펩티드 용액이어도 좋다. 자기 조립 펩티드는 실질적으로 무세포이거나 또는 세포를 포함하지 않는 용액 중에 투여, 적용 또는 주사될 수 있다. 소정의 실시형태에 있어서, 자기 조립 펩티드는 무세포 또는 세포를 포함하지 않는 용액 중에 투여, 적용 또는 주사될 수 있다.
또한, 자기 조립 펩티드는 실질적으로 무약제이거나 또는 약제를 포함하지 않는 용액 중에 투여, 적용 또는 주사될 수도 있다. 소정의 실시형태에 있어서는, 자기 조립 펩티드는 무약제이거나 또는 약제를 포함하지 않는 용액 중에 투여, 적용또는 주사할 수 있다. 소정의 다른 실시형태에 있어서는, 자기 조립 펩티드는 실질적으로 무세포이고 실질적으로 무약제인 용액 중에 투여, 적용 또는 주사될 수 있다. 또 다른 소정의 다른 실시형태에 있어서는, 자기 조립 펩티드는 무세포이고 무약제인 용액 중에 투여, 적용 또는 주사될 수 있다.
자기 조립 펩티드 용액은 자기 조립 펩티드를 포함하거나, 자기 조립 펩티드로 이루어지거나, 또는 자기 조립 펩티드로 본질적으로 구성되어 있어도 좋다. 자기 조립 펩티드는 수식 형태 또는 비수식 형태이어도 좋다. 수식됨으로써, 자기 조립 펩티드가 그 자체만이 용액 중에 제공되면, 자기 조립을 할 수 없는 1개 이상의 아미노산을 포함하는 하나 이상의 도메인을 갖는다는 것을 의미한다. 비수식됨으로써, 자기 조립 펩티드가 펩티드의 자기 조립을 제공하는 것 이외에, 다른 어떠한 도메인도 갖지 않을 수 있다는 것을 의미한다. 즉, 비수식된 펩티드는 β-시트 내에 자기 조립할 수 있는 교대로 있는 소수성 및 친수성 아미노산, 또는 하이드로겔과 같은 거시적 구조로 이루어진다.
자기 조립 펩티드는 적어도 약 7개의 아미노산, 약 7∼32개의 아미노산, 또는 약 12∼16개의 아미노산일 수 있다. 본 개시에 의하면, 적어도 약 7개의 아미노산을 포함하지 않고, 적어도 약 7개의 아미노산으로 이루어지지 않고, 또는 적어도 약 7개의 아미노산으로 본질적으로 구성되지 않은 다른 펩티드가 고려될 수 있다. 자기 조립 펩티드는 약 6개∼약 200개의 아미노산 잔기로 구성될 수 있다. 소정의 실시형태에 있어서, 약 8개∼약 32개의 잔기가 자기 조립 펩티드에 사용될 수 있지만, 다른 실시형태에 있어서의 자기 조립 펩티드는 약 7개∼약 17개의 잔기를 가질 수 있다. 소정의 다른 실시예에 있어서, 자기 조립 펩티드는 적어도 8개의 아미노산, 적어도 약 12개의 아미노산, 또는 적어도 약 16개의 아미노산의 펩티드이어도 좋다.
재료 및 방법은 자기 조립 펩티드를 미리 정해진 또는 소망의 타겟에 투여하는 단계를 포함할 수 있다. 상기 펩티드는 하이드로겔로서 투여되어도 좋고, 또는 투여시에 하이드로겔을 형성해도 좋다. 하이드로겔은 수중에 분산된 콜로이드상 겔을 가르킬 수 있는 용어이다. 또한, 하이드로겔은 본 개시의 전체를 통해 막 또는 스카폴드라고도 칭해질 수도 있다. 또한, 본 시스템 및 방법은 미리 정해진 또는 소망의 타겟에 자기 조립 펩티드를 수용성 펩티드 용액과 같은 용액으로 적용하는 단계를 포함할 수 있다.
용어 "투여"는, 한정하는 것은 아니지만, 자기 조립 펩티드를, 한정하는 것은 아니지만, 추가 성분 없이 또는 추가 성분과 함께 수용액과 같은 용액으로, 또는 조성물, 하이드로겔 또는 스카폴드로 포함하는 하나 이상의 다양한 형태로 적용, 도입 도는 주사하는 것을 포함하는 것이다.
이 방법은 전달 장치를 피험체의 미리 정해진 또는 소망의 타겟 영역에 또는 그 근방에 도입하는 단계를 포함할 수 있다. 본 방법은 시린지, 튜브, 피펫, 카테터, 카테터 시린지, 또는 기타 바늘계 장치 중 적어도 하나를 포함하는 전달 장치를 피험체의 미리 정해진 또는 소망의 타겟 영역에 도입하는 단계를 포함할 수 있다. 자기 조립 펩티드는 시린지, 튜브, 피펫, 카테터, 카테터 시린지, 또는 기타 바늘계 장치를 통해 피험체의 미리 정해진 또는 소망의 타겟 영역에 투여될 수 있다. 시린지 바늘의 게이지는 시린지로부터 타겟 영역으로 조성물, 용액, 하이드로겔 또는 액체의 충분한 흐름을 제공하도록 선택될 수 있다. 이것은 투여되는 조성물, 펩티드 용액, 또는 하이드로겔 중의 자기 조립 펩티드의 양, 조성물 또는 하이드로겔 중의 펩티드 용액의 농도, 및 펩티드 용액, 조성물 또는 하이드로겔의 점도 중 적어도 하나에 대한 일부 실시형태에 의거할 수 있다. 전달 장치는 종래의 장치이어도 좋고, 또는 특정한 타겟 영역에 도달하고, 특정한 투여 계획을 달성하고, 특정한 타겟 체적, 양 또는 농도를 전달하고, 또한 타겟 영역에 정확히 전달하는 것 중 적어도 하나를 달성하도록 설계되어도 좋다.
생물학적 조직 유착을 경감시키는 방법은 전달 장치를 피험체에 도입하는 단계, 및 전달 장치의 단부를 수술 부위의 일부와 같은 미리 정해진 또는 타겟 영역에 위치시키는 단계를 포함할 수 있다. 자기 조립 펩티드는 적어도 소망되는 타겟 영역에 전달 장치를 통해서 투여될 수 있다. 전달 장치의 사용은 펩티드의 더욱 선택적인 투여를 제공하여 타겟 영역에의 보다 정확한 전달을 제공할 수 있다. 펩티드의 선택적 투여는 펩티드 용액, 조성물 또는 하이드로겔의 증대되고 보다 타겟화된 전달을 가능하게 하여, 정확한 방식으로 소망의 위치에 성공적으로 위치되게 할 수 있다. 선택적 투여는 다른 전달 장치를 사용하는 것 이상의 치료의 위치 결정 및 유효성을 현저하게 개선시키는, 증대되고 타겟화된 전달을 제공할 수 있다. 본 개시의 시스템, 방법, 및 키트에 있어서 사용될 수 있는 전달 장치는 시린지, 튜브, 바늘, 피펫, 시린지 카테터, 기타 바늘계 장치, 또는 카테터를 포함할 수 있다.
카테터와 같은 전달 장치의 사용은 카테터를 위치로 안내하기 위해서 사용되는 가이드와이어, 또는 카테터의 적절한 배치, 및 타겟 영역 및/또는 타겟 영역으로의 경로의 가시화를 가능하게 할 수 있는 내시경과 같은 부수되는 장치의 사용을 포함할 수 있다. 내시경은 피험체의 신체의 화상을 관찰할 수 있게 하는 광 및 카메라 또는 다른 가시화 장치 중 적어도 하나를 포함할 수 있는 튜브일 수 있다. 가이드와이어 또는 내시경은, 예를 들면 피부의 절개부를 통해서 피검체 내에 도입될 수 있다. 내시경은 전달 장치를 타겟 영역에 도입하기 전에 타겟 영역에 도입될 수 있다
시린지, 튜브, 바늘, 피펫, 시린지 카테터, 기타 바늘계 장치, 카테터 또는 내시경과 같은 전달 장치의 사용은 시린지, 튜브, 바늘, 피펫, 시린지 카테터, 기타 바늘계 장치, 카테터 또는 내시경의 적어도 일부가 개구부에 들어가서 펩티드, 펩티드 용액, 조성물 또는 하이드로겔을 타겟 영역에 투여할 수 있도록, 안쪽에 타겟 영역이 존재하는 개구부의 직경 또는 사이즈를 결정하는 것이 요구될 수 있다.
소정의 실시형태에 있어서는, 하이드로겔은 시험관내(in vitro)에서 형성될 수 있고, 또한 생체내에서 소망의 위치에 투여될 수 있다. 소정의 실시예에서는, 상기 위치는 타겟 영역이어도 좋다. 다른 실시예에서는, 상기 위치는 타겟 영역의 상류, 하류, 또는 실질적으로 타겟 영역 부근이어도 좋다. 소망되는 영역으로의 하이드로겔의 이동을 가능하게 하는 것이 소망될 수 있다. 대안적으로는, 다른 처치에 의해 소망하는 영역에 하이드로겔을 위치시킬 수 있다. 소망의 위치 또는 타겟 영역은 피험체에 있어서 항유착을 제공 또는 촉진하는, 예를 들면 생물학적 조직의 유착을 방지 또는 경감하는 것이 소망되는 영역의 적어도 일부일 수 있다.
본 개시의 소정의 양태에 있어서, 하이드로겔은 생체내에서 형성될 수 있다. 수용액 등의 자기 조립 펩티드를 포함하는 용액은 피험체의 생체내의 위치 또는 영역에 삽입되어, 피험체에 있어서 항유착을 제공 또는 촉진하는, 예를 들면 생물학적 조직의 유착을 방지 또는 경감시킬 수 있다. 소정의 실시예에서는, 하이드로겔은 1개소의 생체내에서 형성될 수 있어서, 하이드로겔을 피험체에 있어서 항유착을 제공 또는 촉진하는, 예를 들면 생물학적 조직의 유착을 방지 또는 경감시키는 것이 소망되는 영역으로 이동시키는 것이 가능할 수 있다. 대안적으로, 다른 처치가 피험체에 있어서 항유착을 제공 또는 촉진하는, 예를 들면 생물학적 조직의 유착을 방지 또는 경감시키는 것이 소망되는 영역에 하이드로겔을 배치할 수 있다. 본 개시의 펩티드는 분말, 용액, 겔 등의 형태이어도 좋다. 용액의 pH 및 염 농도의 변화에 대응하여 자기 조립 펩티드가 겔화되기 때문에, 적용 또는 투여 중에 피험체와 접촉하면 겔화되는 액체로서 분산될 수 있다.
소정의 환경에서는, 펩티드 용액은 약한 하이드로겔일 수 있고, 그 결과 본 명세서에 기재된 바와 같이 전달 장치를 통해서 투여될 수 있다.
일부 실시형태에 의하면, 자기 조립 펩티드는 소수성 아미노산과 친수성 아미노산이 교대로 있는 양친매성이어도 좋다.
하나 이상의 실시형태에 의하면, 피험체는 피험체에 있어서의 항유착을 제공하거나 또는 촉진하는, 예를 들면 생물학적 조직의 유착을 방지 또는 경감시킬 필요성을 결정하기 위해서 평가될 수 있다. 평가가 완료되면, 피험체에 투여하기 위한 펩티드 용액을 조제할 수 있다
일부 실시형태에 있어서, 생물학적 활성제가 본 개시의 재료 및 방법과 함께 사용될 수 있다. 생물학적 활성제는 일부 활성, 규제, 변조, 또는 피험체 또는 실험실 세팅 내의 상태 또는 다른 활성의 조정을 부여할 수 있는 펩티드, DNA 서열, 화학 화합물, 무기 또는 유기 화합물을 포함하는 화합물을 포함할 수 있다. 생물학적 활성제는 다른 성분과 상호작용하여 이러한 활성을 제공할 수 있다. 생물학적 활성제는 본 명세서의 일부 실시형태를 따르면 약제라고 칭하는 경우도 있다. 소정의 실시형태에 있어서는, 하나 이상의 생물학적 활성제를 펩티드계의 외부로 서서히 방출될 수 있다. 예를 들면, 하나 이상의 생물학적 활성제는 하이드로겔로부터 서서히 방출될 수 있다. 시험관내 및 생체내 시험 모두가 이러한 생물학적 활성제의 점진적인 방출을 실증했다. 생물학적 활성제는 피험체에 투여되기 전에 펩티드 용액에 첨가되어도 좋고, 또는 상기 용액과는 별개로 피험체에 투여되어도 좋다. 하나 이상의 생물학적 활성제는 계 내에서 캡슐화되어도 좋고, 예를 들면 하이드로겔, 용액 또는 나노섬유 중에 캡슐화되어도 좋다.
자기 조립 펩티드는 생리학적 pH 및/또는 양이온, 예를 들면 1가 양이온의 존재하 또는 수술 부위에 적용 가능한 다른 조건하에서 수용액 중에 β-시트 구조를 나타낼 수 있다.
펩티드는 일반적으로 생리학적 조건, 생리학적 pH 또는 생리학적 레벨의 염에 노출되었을 때, 수용액 중에서 안정하여, 대형의 거시적인 구조체, 스카폴드 또는 매트릭스 내에 자기 조립할 수 있다. 하이드로겔이 일단 형성되면, 그것은 분해할 수 없거나, 또는 경시 후에 분해 또는 생분해할 수 있다. 분해 속도는 아미노산 서열 및 그 주위의 조건 중 적어도 하나에 대해 적어도 부분적으로 의거할 수 있다.
"거시적"이란, 10배 이하의 배율하에서 가시화하기에 충분한 치수를 갖는 것을 의미한다. 바람직한 실시형태에 있어서는, 거시적 구조는 육안으로 볼 수 있다. 거시적 구조는 투명해도 좋고, 또한 2차원 또는 3차원이어도 좋다. 일반적으로, 각각의 치수는 사이즈가 적어도 10㎛이다. 소정의 실시형태에 있어서는, 적어도 2차원은 사이즈가 적어도 100㎛ 또는 적어도 1000㎛이다. 적어도 2차원은 사이즈가 적어도 1∼10mm이며, 사이즈가 10∼100mm 등인 경우가 많다. 소정의 실시형태에 있어서는, 필라멘트의 사이즈는 약 10나노미터(nm)∼약 20nm일 수 있다. 필라멘트 간 거리는 약 50nm∼약 80nm이어도 좋다. 본 개시의 자기 조립 펩티드는 약 5nm의 길이를 가질 수 있다. 본 개시의 자기 조립 펩티드는 약 10nm∼약 20nm의 범위 내의 나노섬유 직경을 가질 수 있고, 또한 평균 구멍사이즈는 약 5nm∼약 200nm의 범위 내이다. 소정의 실시형태에 있어서는, 나노섬유 직경, 구멍 사이즈 및 나노섬유 밀도는 사용되는 펩티드 용액의 농도 및 펩티드 용액의 체적과 같은 사용되는 펩티드 용액의 양 중 적어도 하나에 의해 제어될 수 있다. 이와 같이, 항유착을 충분히 제공하기 위한 소망의 나노섬유 직경, 구멍 사이즈 및 밀도 중 적어도 하나를 제공하도록 용액 중의 펩티드의 특정 농도 및 펩티드 용액의 특정한 양 중 적어도 하나가 선택될 수 있다.
"생리학적 조건"은 인공적인 실험실 조건과는 대조적일 수 있는 특정 생물, 세포계 또는 피험체에 대해서 자연적으로 발생할 수 있다. 상기 조건은 하나 이상의 특정한 특성 또는 특성의 하나 이상의 범위와 같은 하나 이상의 특성을 포함할 수 있다. 예를 들면, 생리학적 조건으로는 온도 또는 온도 범위, pH 또는 pH의 범위, 압력 또는 압력 범위, 및 특정 화합물, 염 및 기타 성분의 하나 이상의 농도를 들 수 있다. 예를 들면, 일부 실시예에 있어서는, 생리학적 조건은 약 20∼약 40℃의 범위 내의 온도를 포함할 수 있다. 일부 실시예에 있어서는, 대기압은 약 1atm이어도 좋다. pH는 생리학적 pH의 범위 내이어도 좋다. 예를 들면, pH는 약 6∼약 8의 범위 내이어도 좋다. 생리학적 조건은 막 또는 하이드로겔 형성을 유도할 수 있는 1가의 금속 양이온과 같은 양이온을 포함할 수 있다. 이들은 염화나트륨(NaCl)을 포함할 수 있다. 또한, 생리학적 조건은 약 1mM∼약 20mM의 글루코오스 농도, 수크로오스 농도 또는 다른 당 농도를 포함할 수 있다.
펩티드는 상보적이고 또한 구조적으로 호환 가능해도 좋다. 상보적이란, 그들의 친수성 측쇄 사이에 형성하는 이온화 쌍 및/또는 수소결합을 통해서 상호작용하는 펩티드의 능력을 가리키고, 또한 구조적으로 호환 가능하다는 것은 그들의 펩티드 백본 간의 일정 거리를 유지하는 상보적 펩티드의 능력을 가리킨다. 이들 특성을 갖는 펩티드는 분자 간 상호작용에 관여하여, 2차 구조 레벨에서 β-시트를 형성 및 안정화시키고, 3차 구조 레벨에서 필라멘트를 인터위브(interweave)시킨다.
상술한 특성을 특징으로 하는 펩티드의 균일 및 불균일 혼합물의 양방은 안정한 거시적 막, 필라멘트 및 하이드로겔을 형성할 수 있다. 자기상보적 및 자기호환 가능한 펩티드는 균일 혼합물 중에서 막, 필라멘트 및 하이드로겔을 형성할 수 있다. 또한, 균일 용액 중에 막, 필라멘트 및 하이드로겔을 형성할 수 없고, 서로 상보적 및/또는 구조적으로 호환 가능한 것을 포함하는 불균일 펩티드도 거시적인 막, 필라멘트, 및 하이드로겔 내에서 자기 조립할 수 있다.
막, 필라멘트, 및 하이드로겔은 비세포독성일 수 있다. 본 개시의 하이드로겔은 피험체에 있어서 소화되어 대사될 수 있다. 하이드로겔은 30일 이내에 생분해될 수 있다. 이들은 단순한 조성을 갖고, 투과성이고, 또한 대량에 제조하는 것이 용이하며 비교적 저렴하다. 또한, 막 및 필라멘트, 하이드로겔 또는 스카폴드는 멸균 조건에서 제조 및 보관될 수 있다. 막 형성을 위한 최적 길이는 아미노산 조성, 용액 상태 및 타겟 부위의 조건 중 적어도 하나에 의해 달라질 수 있다.
자기 조립 또는 양친매성 펩티드의 아미노산은 d-아미노산, l-아미노산, 또는 그 조합에서 선택될 수 있다. 소수성 아미노산은 Ala, Val, Ile, Met, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr 및 Gly를 포함할 수 있다. 친수성 아미노산은 염기성 아미노산, 예를 들면 Lys, Arg, His, Orn; 산성 아미노산, 예를 들면 Glu, Asp, 또는 수소결합을 형성하는 아미노산, 예를 들면 Asn, Gln일 수 있다. 산성 및 염기성 아미노산은 펩티드 상에 클러스터링될 수 있다. 말단 잔기의 카르복실기 및 아미노기는 보호되어 있어도 또는 보호되어 있지 않아도 좋다. 막 또는 하이드로겔은 자기상보적 펩티드 또는 자기호환 가능한 펩티드의 균일 혼합물 중에서, 또는 서로 상보적이고 구조적으로 호환 가능한 펩티드의 불균일 혼합물 중에서 형성될 수 있다. 상기의 기준에 부합하는 펩티드는 본 명세서에 기재된 적절한 조건하에서 거시적인 막 내에 자기 조립할 수 있다
펩티드는 RADA, IEIK, TTTT, ATAT, TVTV, ASAS, SSSS, VVVTTTT, 및 이들의 조합으로 이루어지는 군에서 선택되는 서열로 본질적으로 구성되어도 좋고 또는 포함해도 좋다. 다른 펩티드 서열도 본 개시의 범위 내에서 고려된다. 소정의 실시형태에 있어서, 펩티드는 아르기닌, 알라닌 및 아스파르트산의 반복 서열로 본질적으로 구성되거나 또는 포함해도 좋다.
본 개시의 펩티드는 아르기닌, 알라닌, 아스파르트산 및 알라닌(Arg-Ala-Asp-Ala(RADA)의 반복 서열을 갖는 펩티드를 포함할 수 있고, 이러한 펩티드 서열은 (RADA)p로 표시될 수 있고, 여기에서 p=2∼50이다.
다른 펩티드 서열은 이소류신, 글루탐산, 이소류신 및 라이신의 반복 서열(Ile-Glu-Ile-Lys(IEIK))을 갖는 자기 조립 펩티드로 표시될 수 있고, 이러한 펩티드 서열은 (IEIK)p로 표시되고, 여기서 p=2∼50이다. 다른 펩티드 서열은 이소류신, 글루탐산의, 이소류신 및 라이신의 반복 서열(Ile-Glu-Ile-Lys(IEIK))을 갖는 자기 조립 펩티드로 표시될 수 있고, 이러한 펩티드 서열은 (IEIK)pI로 표시되고, 여기에서 p=2∼50이다.
다른 펩티드 서열은 라이신, 류신, 아스파르트산 및 류신(Lys-Leu-Asp-Leu(KLDL))의 반복 서열을 갖는 자기 조립 펩티드로 표시될 수 있고, 이러한 펩티드 서열은 (KLDL)p로 표시되고, 여기에서 p=2∼50이다. 다른 펩티드 서열은 라이신, 류신 및 아스파르트산의 반복 서열(Lys-Leu-Asp(KLD))을 갖는 자기 조립 펩티드로 표시될 수 있고, 이러한 펩티드 서열은 (KLD)p로 표시되고, 여기에서 p=2∼50이다. 본 발명에 따른 자기 조립 펩티드의 구체예로서는 서열 Arg-Ala-Asp-Ala-Arg-Ala-Asp-Ala-Arg-Ala-Asp-Ala-Arg-Ala-Asp-la(RADA)4를 갖는 자기 조립 펩티드 RADA16, 서열 Ile-Glu-Ile-Lys-Ile-Glu-Ile-Lys-Ile-Glu-Ile-Lys-Ile(IEIK)3I를 갖는 자기 조립 펩티드 IEIK13, Ile-Glu-Ile-Lys-Ile-Glu-Ile-Lys-Ile-Glu-Ile-Lys-Ile-Glu-Ile-Lys-Ile(IEIK)4I를 갖는 자기 조립 펩티드 IEKI17, 또는 서열 Lys-Leu-Asp-Leu-Lys-Leu-Asp-Leu-Lys-Leu-Asp-Leu(KLDL)3을 갖는 자기 조립 펩티드 KLDL12가 있을 수 있다.
양친매성 서열, 길이, 상보적 및 구조적 호환성의 기준은 펩티드의 불균일 혼합물에 적용된다. 예를 들면, 2개의 다른 펩티드를 사용하여 막을 형성할 수 있다: 펩티드 A인 Val-Arg-Val-Arg-Val-Asp-Val-Asp-Val-Arg-Val-Arg-Val-Asp-Val-Asp(VRVRVDVDVRVRVDVD)는 친수성 잔기로서 Arg 및 Asp를 갖고, 펩티드 B인 Ala-Asp-Ala-Asp-Ala-Lys-Ala-Lys-Ala-Asp-Ala-Asp-Ala-Lys-Ala-Lys(ADADAKAKADADAKAK)는 Lys 및 Asp를 갖는다. 펩티드 A 및 B는 상보적이며; A 상의 Arg는 B 상의 Asp와 이온화 쌍을 형성할 수 있고, A 상의 Asp는 B 상의 Lys와 이온화 쌍을 형성할 수 있다. 따라서, 펩티드 A 및 B의 불균일 혼합물에서 막을 형성하기 쉽지만, 막은 펩티드 A 또는 B 중 어느 하나로 균일하게 구성될 것이다.
또한, 막 및 하이드로겔은 펩티드의 불균일 혼합물로 형성될 수 있고, 그들이 서로 상보적이고 또한 서로 구조적으로 호환 가능할 경우에는 그들 각각의 단독은 막을 형성하지 않는다. 예를 들면 (Lys-Ala-Lys-Ala)4(KAKA)4와 (Glu-Ala-Glu-Ala)4(EAEA)4의 혼합물 또는 (Lys-Ala-Lys-Ala)4(KAKA)4와 (Ala-Asp-Ala-Asp)4(ADAD)4의 혼합물은 막을 형성하는 것으로 기대되지만, 상보성이 부족하기 때문에, 이들 펩티드 중 어느 것도 단독으로는 막을 형성할 수 없다.
완전히 상보적이지 않거나 또는 구조적으로 호환 가능하지 않는 펩티드는 핵산의 하이브리다이제이션에 있어서의 미스매칭된 염기쌍과 유사한 미스매치를 포함한다고 생각될 수 있다. 미스매칭된 쌍의 파괴력이 전체적인 펩티드간 상호작용의 안정성에 의해 지배되는 경우에는, 미스매치를 포함하는 펩티드는 막을 형성할 수 있다. 관능적으로는, 이러한 펩티드는 상보적 또는 구조적으로 호환 가능하다고 생각될 수도 있다. 예를 들면, 미스매칭된 아미노산 쌍이 각 측에 수개의 완전히 매칭된 쌍에 의해 둘러싸여진 경우에는 용인될 수 있다.
본 명세서에 개시된 펩티드 서열의 각각은 열거된 아미노산 서열을 포함하고, 열거된 아미노산 서열로 본질적으로 이루어지고, 또한 열거된 아미노산 서열로 이루어지는 펩티드를 제공할 수 있다.
본 개시는 본 명세서에 열거된 펩티드를 포함하거나, 본 명세서에 열거되는 펩티드로 본질적으로 이루어지거나, 또는 본 명세서에 열거되는 펩티드로 이루어지는 용액, 하이드로겔 및 스카폴드에 대한 재료, 방법 및 키트를 제공한다.
1중량/체적(w/v)% 수용액(물) 및 2.5w/v%의 (RADA))4는 3-D Matrix Co, Ltd.에 의한 제품 PuraMatrix™ 펩티드 하이드로겔로서 입수가능하다.
소정의 펩티드는 세포 부착 리간드 RGD(아르기닌-글리신-아스파르트산)과 동일한 서열을 포함할 수 있다. 시험관내 세포 성장을 지지하기 위한 이들 펩티드의 적합성을 호모폴리머 시트인 Ala-Glu-Ala-Glu-Ala-Lys-Ala-Lys-Ala-Glu-Ala-Glu-Ala-Lys-Ala-Lys(AEAEAKAKAEAEAKAK(EAK16)), RAD16, RADA16, 및 헤테로폴리머인 RAD16 및 EAK16에 다양한 배양된 1차의 형질전환 세포를 도입함으로써 시험했다. RAD계 펩티드는 RGD와의 그 서열의 유사성 때문에 특히 흥미로울 수 있다. RAD 서열은 세포외 매트릭스 단백질인 테나신에 존재하는 고친화성 리간드이고, 인테그린 수용체에 의해 인식된다. 본 명세서에 개시된 EAK16 펩티드 및 다른 펩티드는 효모 단백질인 주오틴의 영역으로부터 유도되었다.
균일 또는 불균일 혼합물 중에서 막, 하이드로겔 또는 스카폴드를 형성할 수 있는 펩티드의 리스트를 표 1에 열거한다.
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임의의 특정 이론에 의해 제한되는 것을 기대하는 것은 아니지만, 펩티드의 자기 조립은 펩티드를 구성하는 아미노산에 의한 펩티드 분자간의 수소결합 및 소수성 결합에 기인될 수 있다고 생각된다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "유효량" 또는 "치료 유효량"이란, 피험체에 있어서의 생물학적 조직 유착을 방지 또는 경감시키는데 유효한 펩티드, 펩티드 용액 또는 하이드로겔의 양을 가리킨다. 소정의 실시형태에 있어서, 이러한 "유효량" 또는 "치료 유효량"은 이러한 치료의 부재하에서 예상되는 것을 넘어서는 신체 이상을 가진 피험체를 치료함에 있어서, 또는 치유, 완화, 경감 또는 개선함에 있어서 피험체에게 단일 투여 또는 다중 투여(적용 또는 주사)시에 유효한 펩티드, 펩티드 용액 또는 하이드로겔의 양을 가리킬 수 있다. 이것은 펩티드 용액 또는 하이드로겔 중의 펩티드의 특정 농도 또는 농도 범위, 및 추가적으로 또는 대안적으로 펩티드 용액 또는 하이드로겔의 특정 체적 또는 체적 범위를 포함할 수 있다. 용이하게 하는 방법은 유효량 및 유효 농도 중 적어도 하나를 조제하기 위한 지시를 제공하는 것을 포함할 수 있다.
RADA16과 같은 본 개시의 자기 조립 펩티드는 별개의 생리학적 또는 생물학적 활성 모티프 또는 서열이 결핍된 펩티드 서열일 수 있으므로, 내인성 세포 기능을 손상시키지 않을 수 있다. 생리학적 활성 모티프는 전사와 같은 다수의 세포내 현상을 제어할 수 있고, 생리학적 활성 모티프의 존재는 모티프를 인식하는 효소에 의해 세포질내 단백질 또는 세포 표면 단백질의 인산화를 초래할 수 있다. 펩티드 조직 항유착제 중에 생리활성 모티프가 존재할 경우, 다양한 기능을 갖는 단백질의 전사를 활성화 또는 억제할 수 있다. 본 개시의 자기 조립 펩티드는 이러한 생리학적 활성 모티프가 부족할 수 있으므로, 이러한 리스크는 수반하지 않는다.
막 형성을 위한 최적의 길이는 아미노산 조성에 따라 다를 수 있다. 본 개시의 펩티드에 의해 고려되는 안정화 팩터는 상보적 펩티드가 펩티드 백본 간에 일정 거리를 유지한다는 것이다. 페어링(pairing) 시에 일정 거리를 유지할 수 있는 펩티드는 본 명세서에서는 구조적으로 호환 가능하다는 것을 가리킨다. 펩티드 간 거리는 각 이온화 쌍 또는 수소결합 쌍에 대해서 쌍 내의 각각의 아미노산의 측쇄 상의 비분기 원자의 수를 합함으로써 계산할 수 있다. 예를 들면, 라이신은 그 측쇄에 비분기 원자를 5개 갖고, 글루탐산은 4개 갖는다.
투여되는(예를 들면, 적용 또는 주사되는) 용량, 예를 들면 체적 또는 농도는 펩티드의 형태(예를 들면, 펩티드 용액, 하이드로겔, 또는 동결 건조 형태와 같은 건조된 형태) 및 사용되는 투여 경로에 따라 다를 수 있다. 정확한 처방, 투여 경로, 체적, 및 농도는 피험체의 상태를 고려하고, 또한 펩티드 용액, 하이드로겔 또는 다른 형태의 펩티드가 투여될 특정 타겟 영역 또는 위치를 고려해서 선택될 수 있다, 본 명세서에 열거된 용량보다 낮은 용량 또는 높은 용량을 사용 또는 필요로 해도 좋다. 임의의 특정한 피험체를 위한 구체적 투여 및 치료 계획은 사용되는 특정 펩티드 또는 펩티드들, 치료되어질 영역의 치수, 소망의 타겟 영역에 위치될 수 있는 얻어지는 하이드로겔의 소망의 두께, 및 치료 기간을 포함할 수 있는 다양한 팩터에 의존할 수 있다. 구체적 투약량 및 치료 계획에 영향을 미칠 수 있는 다른 팩터로는 연령, 체중, 일반적 건강 상태, 성별, 투여 시간, 분해 속도, 질환의 중증도 및 경과, 상태 또는 증상, 및 치료하는 의사의 판단을 들 수 있다. 소정의 실시형태에 있어서, 펩티드 용액은 단일 용량으로 투여될 수 있다. 다른 실시형태에 있어서는, 펩티드 용액은 하나를 초과하는 용량으로 또는 복수 용량으로 투여되어도 좋다. 펩티드 용액은 적어도 2회 용량으로 투여될 수 있다.
펩티드 용액의 유효량 및 유효 농도는 항유착을 적어도 부분적으로 제공 또는 촉진하는, 예를 들면 생물학적 조직의 유착을 방지 또는 경감하도록 선택될 수 있다. 일부 실시형태에 있어서, 유효량 및 유효 농도 중 적어도 하나는 타겟 영역의 치수 또는 직경에 일부 의거할 수 있다. 다른 실시형태에 있어서, 유효량 및 유효 농도 중 적어도 하나는 타겟 영역에 또는 그 근방에 하나 이상의 유체의 유속에 일부 의거한다.
유효량은 체적 약 0.1mL∼약 100mL의 펩티드 용액을 포함할 수 있다. 유효량은 체적 약 0.1mL∼약 10mL의 펩티드 용액을 포함할 수 있다. 소정의 실시형태에 있어서, 유효량은 약 0.5mL이어도 좋다. 다른 실시형태에 있어서, 유효량은 약 1.0mL이어도 좋다. 또 다른 실시형태에 있어서, 유효량은 약 1.5mL이어도 좋다. 또 다른 실시형태에 있어서, 유효량은 약 2.0mL이어도 좋다. 일부 다른 실시형태에 있어서, 유효량은 약 3.0mL이어도 좋다.
소정의 실시형태에 있어서는, 유효량은 타겟 영역 1㎠당 약 0.1mL∼약 5mL이어도 좋다. 소정의 실시형태에 있어서는, 유효량은 약 1mL/1㎠ 타겟 영역이어도 좋다. 이 유효량은 본 개시의 펩티드 용액의 2.5중량/체적%와 같은 농도와 관련하여 사용될 수 있다.
유효 농도는, 본 명세서로 설명된 바와 같이, 항유착을 제공 또는 촉진, 예를 들면 생물학적 조직 유착을 방지 또는 경감시킬 수 있는 양일 수 있다. 타겟 부위에 또는 그 근방의 각종 특성은 타겟 영역의 치수 또는 직경, 및 상기 타겟 영역에 또는 그 근방의 하나 이상의 유체의 유속 중 적어도 하나를 포함하는 유효 농도의 선택 또는 결정에 기여할 수 있다.
유효 농도는 약 0.1중량/체적(w/v)%∼약 10w/v%의 범위 내의 용액 중에서의 펩티드 농도를 포함할 수 있다. 유효 농도는 용액 중의 펩티드 농도를 약 0.1w/v%∼약 3.5w/v%의 범위 내에서 포함할 수 있다. 소정의 실시형태에 있어서, 유효 농도는 약 1w/v%이어도 좋다. 다른 실시형태에 있어서, 유효 농도는 약 2.5w/v%이어도 좋다. 또 다른 실시형태에 있어서, 유효 농도는 약 3.0w/v%이어도 좋다
소정의 실시형태에 있어서, 보다 높은 농도의 펩티드를 갖는 펩티드 용액은 고정되는 능력을 갖는 더욱 효과적인 하이드로겔을 제공할 수 있어서, 항유착을 효과적으로 제공 또는 촉진, 예를 들면 생화학적 조직 유착을 방지 또는 경감시킬 수 있다. 펩티드 용액을 전달하기 위해서, 펩티드 용액의 농도가 더욱 높아지면 지나치게 점성이 있게 되어서, 그 용액을 효과적이고 선택적으로 투여를 할 수 없게 된다. 충분히 높은 농도가 선택되지 않으면, 하이드로겔은 소망한 기간 동안 타겟 영역에서 유효하지 않을 가능성이 있다.
유효 농도는 특정한 직경 또는 게이지 카테터 또는 바늘을 사용하는 주사 또는 다른 수단에 의해 투여될 수 있는 용액을 제공하도록 선택될 수 있다.
본 개시의 방법은 본 명세서에 기재되어 있는 바와 같은 치료상 유효량의 펩티드, 조성물, 펩티드 용액, 막, 필라멘트, 및 하이드로겔의 단일 투여뿐만 아니라 다수의 투여를 고려한다. 본 명세서에 기재된 펩티드는 피험체의 상태의 성질, 심각성 및 정도에 따라서 규칙적인 간격으로 투여될 수 있다. 일부 실시형태에 있어서, 펩티드, 조성물, 펩티드 용액, 막, 필라멘트, 또는 하이드로겔은 단일 투여로 투여될 수 있다. 일부 실시형태에 있어서, 본 명세서에 기재된 펩티드, 조성물, 펩티드 용액 또는 하이드로겔은 복수회 투여로 투여된다. 일부 실시형태에 있어서, 치료상 유효량의 펩티드, 조성물, 펩티드 용액, 막, 필라멘트, 또는 하이드로겔이 규칙적인 간격으로 주기적으로 투여될 수 있다. 선택되는 규칙적인 간격은 투여되는 용액의 초기 펩티드 농도, 투여량 및 형성된 하이드로겔의 분해 속도 중 어느 하나 이상에 의거될 수 있다. 예를 들면, 초기 투여 후, 후속 투여가, 예를 들면 1주, 2주, 4주, 6주, 또는 8주 후에 발생할 수 있다. 후속 투여는 최초의 투여와 같은 농도의 펩티드 및 체적을 갖는 용액의 투여를 포함할 수 있고, 또는 더 적거나 큰 농도의 펩티드 및 체적의 용액의 투여를 포함할 수 있다. 펩티드 용액의 적절한 후속 투여의 선택은 타겟 영역 및 타겟 영역을 둘러싸는 영역을 촬상하는 것, 및 피험체의 상태에 근거한 필요성을 확인하는 것에 의거할 수 있다. 미리 정해진 간격은 각 후속 투여에 대해서 동일해도 좋고, 또는 달라도 좋다. 일부 실시형태에 있어서, 펩티드, 펩티드 용액 또는 하이드로겔은 피험체의 수명에 걸쳐 피험체에게 적어도 부분적인 항유착, 예를 들면 생물학적 조직 유착의 방지 또는 경감을 유지하도록 미리 정해진 간격으로 만성적으로 투여될 수 있다. 미리 정해진 간격은 각 후속 투여에 대해서 동일해도 좋고, 또는 달라도 좋다. 이것은, 이전의 투여로부터 형성된 하이드로겔이 부분적으로 또는 완전히 붕괴 또는 분해되었는 지의 여부에 따라 다를 수 있다. 후속 투여는 초기 투여와 같은 펩티드의 농도 및 체적을 갖는 용액을 투여하는 것을 포함할 수 있고, 또는 보다 적은 또는 큰 펩티드의 농도 및 체적의 용액을 투여하는 것을 포함할 수 있다. 펩티드 용액의 적절한 후속 투여의 선택은 타겟 영역 및 타겟 영역을 둘러싸는 영역을 촬상하는 것, 및 피험체의 상태에 근거한 필요성을 확인하는 것에 의거될 수 있다.
펩티드는 화학적으로 합성될 수 있고, 또는 천연 및 재조합형 원료로부터 정제될 수 있다. 화학적으로 합성된 펩티드를 사용함으로써, 펩티드 용액에 대해 다른 동물의 세포외 매트릭스 유래의 미동정 성분과 같은 미동정 성분을 결핍시킬 수 있다. 따라서, 이 특성은 종래의 조직 유래의 생체재료와 비교해서 바이러스 감염의 리스크를 포함한 감염의 염려를 배제할 수 있다. 이것은 소해면상뇌증(BSE)과 같은 감염증을 포함한 감염의 염려를 배제하여, 의료용으로서 안정성이 높은 펩티드로 할 수 있다.
펩티드의 초기 농도는 형성된 막, 하이드로겔 또는 스카폴드의 사이즈 및 두께에 있어서 팩터일 수 있다. 일반적으로, 펩티드 농도가 높을수록 막 또는 하이드로겔 형성의 정도가 높아진다. 보다 높은 초기 펩티드 농도(약 10mg/ml)(약 1.0w/v%)에서 형성된 하이드로겔 또는 스카폴드는 보다 두꺼워질 수 있고, 따라서 보다 강해질 수 있다.
막, 하이드로겔 또는 스카폴드의 형성은 수분 정도로 매우 빠를 수 있다. 막 또는 하이드로겔의 형성은 비가역적일 수 있다. 소정의 실시형태에 있어서는, 그 형성은 가역적일 수 있고, 다른 실시형태에 있어서는, 그 형성은 비가역적일 수 있다. 하이드로겔은 타겟 영역에의 투여시 즉각적으로 형성할 수 있다. 하이드로겔의 형성은 투여 약 1∼2분 이내에 일어날 수 있다. 다른 실시예에 있어서는, 하이드로겔의 형성은 투여 약 3∼4분 이내에 일어날 수 있다. 소정의 실시형태에 있어서, 하이드로겔을 형성하는데 걸리는 시간은 펩티드 용액의 농도, 적용되는 펩티드 용액의 체적, 및 적용 또는 주사 영역의 조건(예를 들면, 적용 영역의 1가 금속 양이온의 농도, 영역의 pH, 및 영역 또는 그 근방에서의 하나 이상의 유체의 존재) 중 하나 이상에 부분적으로 의거할 수 있다. 이 방법은 pH 12 이하 및 온도에 의해 영향을 받지 않을 수 있다. 막 또는 하이드로겔은 1∼99℃의 범위 내의 온도에서 형성될 수 있다.
하이드로겔은 본 개시의 방법 및 키트를 사용해서 소망의 효과를 제공하는데 충분한 기간 동안 타겟 영역에서 제 위치에 유지될 수 있다. 본 개시의 방법 및 키트를 사용하는 소망의 효과는 수술 부위 또는 그 부근에서의 외과 처치가 행해진 영역을 치료하는 것, 또는 상기 영역의 치유를 보조하는 것일 수 있다. 예를 들면, 본 개시의 방법 및 키트를 사용하는 소망의 효과는 내시경 수술이 행해진 영역을 치료하는 것, 또는 상기 영역의 치유를 보조하는 것일 수 있다.
막 또는 하이드로겔이 소망의 영역에 잔류할 수 있는 시간은 약 10분간일 수 있다. 소정 실시예에서는, 약 35분간 소망의 영역에 잔류할 수 있다. 소정의 다른 실시예에 있어서는, 1일 이상, 1주 이상까지 소망의 영역에 잔류할 수 있다. 다른 실시예에 있어서, 소망의 영역에 30일 이상까지 잔류할 수 있다. 소망의 영역에 무기한으로 잔류할 수 있다. 다른 실시예에서는, 자연 분해되거나 또는 의도적으로 제거될 때까지, 장기간 동안 소망의 영역에 잔류할 수 있다. 하이드로겔이 경시에 따라 자연적으로 분해될 경우, 동일한 또는 다른 위치에의 하이드로겔의 추후 적용 또는 주입이 행해질 수 있다.
소정의 실시형태에 있어서는, 자기 조립 펩티드는 자기 조립 펩티드의 증강된 유효성을 제공할 수 있거나, 또는 다른 작용, 치료, 요법, 또는 피험체의 하나 이상의 성분과의 상호작용을 제공할 수 있는 하나 이상의 성분을 사용해서 제조될 수 있다. 예를 들면, 하나 이상의 생물학적 또는 생리학적 활성 아미노산 서열 또는 모티프를 포함하는 추가의 펩티드가 자기 조립 펩티드와 함께 성분의 하나로서 포함될 수 있다. 다른 성분은 피험체에 다소의 이익을 제공할 수 있는 약제 또는 다른 치료와 같은 생물학적으로 활성인 화합물을 포함할 수 있다. 예를 들면, 암치료 약제 또는 항암제는 자기 조립 펩티드와 함께 투여되어도 좋고, 또는 개별적으로 투여되어도 좋다
펩티드, 펩티드 용액 또는 하이드로겔은 피험체를 치료하기 위해서 또는 용혈, 염증 및 감염을 방지하기 위해서 소분자 약제를 포함할 수 있다. 소분자 약제는 글루코오스, 사카로오스, 정제 사카로오스, 락토오스, 말토오스, 트레할로오스, 덱스트란, 요오드, 라이소자임 염화물, 디메틸이소프로필아줄렌, 트레티노인, 토코페릴, 포비돈 요오드, 알프로스타딜 알파덱스, 아니스 알콜, 이소아밀 살리실레이트, α,α-디메틸페닐에틸알콜, 박다놀, 헬리오날, 술파진 은, 부클라데신 나트륨, 알프로스타딜 알파덱스, 겐타마이신 술페이트, 테트라사이클린 하이드로클로라이드, 푸시드산 나트륨, 무피로신 칼슘 하이드레이트, 및 이소아밀 벤조에이트로 이루어지는 군으로부터 선택할 수 있다. 다른 소분자 약제도 고려될 수 있다. 단백질계 약제는 투여될 성분으로서 포함되어도 좋고, 에리스로포이에틴, 조직형 플라스미노겐 활성화제, 합성 헤모글로빈 및 인슐린을 포함할 수 있다.
펩티드 용액이 하이드로겔로 신속히 또는 즉시 형성되는 것을 방지하기 위해서 임의의 성분이 포함될 수 있다. 이것은 타겟 영역으로의 펩티드 용액의 방출 시간을 제어시켜서 소망의 미리 정해진 시간에 걸쳐 하이드로겔을 형성하도록 경시 분해될 수 있는 캡슐화된 전달 시스템을 포함할 수 있다. 생분해성의 생체적합성 폴리머, 예를 들면 에틸렌비닐아세테이트, 폴리무수물, 폴리글리콜산, 콜라겐, 폴리오르토에스테르 및 폴리락트산을 사용할 수 있다.
일부 실시형태에 있어서는, 조직 항유착 효과를 저하시키는 일없이 저장성(低張性)으로부터 등장성으로의 용액의 삼투압을 향상시키기 위해서, 자기 조립 펩티드 용액에 당을 첨가함으로써, 생체 안전성을 높일 수 있다. 소정의 실시예에서는 당은 수크로오스 또는 글루코오스일 수 있다.
본 명세서에 기재된 성분은 모두 펩티드 용액 중에 포함되어도 좋고, 또는 펩티드 용액과는 별도로 투여되어도 좋다. 또한, 본 명세서에 제공되는 방법 및 용이화 방법 모두는 하나 이상의 관계자에 의해 행해질 수 있다.
본 개시의 펩티드, 펩티드 용액 또는 하이드로겔은 키트로 제공될 수 있다. 이 키트에는 피험체의 타겟 영역에 용액을 투여하기 위한 지시도 제공될 수 있다. 펩티드 용액은 생체 조직에의 유착을 적어도 부분적으로 경감하기 위해 하이드로겔을 형성하도록 유효량 및 유효 농도로 적어도 약 7개의 아미노산을 포함하는 자기 조립 펩티드를 포함할 수 있다. 펩티드 용액은 생체 조직에의 유착을 적어도 부분적으로 경감하기 위해 하이드로겔을 형성하도록 유효량 및 유효 농도로 약 7개의 아미노산∼약 32개의 아미노산을 포함하는 자기 조립 펩티드를 포함할 수 있다. 상기 용액을 투여하기 위한 지시는 본 명세서에 제공된 펩티드, 펩티드 용액 또는 하이드로겔을, 예를 들면 본 명세서 중에 기재된 투여 경로에 의해 용량, 체적 또는 농도, 또는 투여 스케줄로 투여하는 방법을 포함할 수 있다. 펩티드는 양친매성이어도 좋고, 또한 펩티드의 적어도 일부는 소수성 아미노산과 친수성 아미노산이 교대로 있어도 좋다.
또한, 키트는 정보 자료를 포함할 수 있다. 정보 자료는 본 명세서에 기재된 방법에 관련된 설명적 자료, 교육적 자료, 마케팅 자료 또는 기타 자료일 수 있다. 일 실시형태에 있어서, 정보 자료는 본 명세서에 개시된 펩티드, 펩티드 용액 또는 하이드로겔의 제조에 관한 정보, 상기 펩티드, 조성물, 펩티드 용액 또는 하이드로겔의 물리적 특성, 농도, 체적, 사이즈, 치수, 유효 기한, 및 배치 또는 생산 부위를 포함할 수 있다.
또한, 키트는 필요에 따라 소망한 영역에 펩티드 또는 펩티드 용액을 투여할 수 있게 하는 장치 또는 재료를 포함할 수도 있다. 예를 들면, 키트에는 시린지, 피펫, 카테터 또는 다른 바늘계 장치가 포함될 수 있다. 추가적으로 또는 대안적으로, 키트는 타겟 영역에의 펩티드 용액의 선택적 투여를 제공하기 위해서, 가이드 와이어, 내시경, 또는 다른 부수되는 기기를 포함할 수 있다.
키트는 펩티드 용액, 하이드로겔 또는 스카폴드의 위치 결정을 도울 수 있는 성분과 같은 기타 성분 또는 구성 요소를 추가적으로 또는 대안적으로 포함할 수 있다. 충분한 양 또는 체적의 펩티드 용액을, 키트와 함께 제공되어도 또는 제공되지 않아도 좋은 수크로오스 용액과 결합시키기 위한 지시가 키트에 제공될 수 있다. 유효 농도의 용액을 타겟 영역에 투여하기 위해 펩티드 용액을 희석하는 것에 대한 지시가 제공될 수 있다. 이 지시는 희석제 또는 용제로 펩티드 용액을 희석하는 것을 설명할 수 있다. 희석제 또는 용제는 물이어도 좋다. 또한, 타겟 영역에 대한 용액의 유효 농도 및 용액의 유효량 중 적어도 하나를 결정하기 위한 지시가 더 제공될 수 있다. 이것은 본 명세서에서 검토되는 각종의 파라미터에 의거할 수 있고, 또한 타겟 영역에서의 병소 또는 상처의 직경을 포함할 수 있다.
펩티드, 펩티드 용액 또는 하이드로겔 이외에 다른 성분 또는 구성 요소가 동일 또는 다른 조성 또는 용기로 키트에 포함될 수 있다. 상기 하나 이상의 성분은 자기 조립 펩티드의 증강된 유효성을 제공할 수 있거나, 또는 다른 작용, 치료, 요법, 또는 피험체의 하나 이상의 성분과의 상호작용을 제공할 수 있는 성분을 포함할 수 있다. 예를 들면, 하나 이상의 생물학적 활성 또는 생리학적 활성의 서열 또는 모티프를 포함하는 추가의 펩티드가 자기 조립 펩티드와 함께 성분 중 하나로서 포함될 수 있다. 다른 성분은 피험체에 다소의 이익을 제공할 수 있는 약제 또는 다른 치료와 같은 생물학적 활성 화합물을 포함할 수 있다. 예를 들면, 암치료 약제 또는 항암제는 자기 조립 펩티드와 함께 투여되어도 좋고, 또는 개별적으로 투여되어도 좋다. 펩티드, 펩티드 용액 또는 하이드로겔은, 본 명세서에 개시된 바와 같이, 피험체를 치료하기 위해서 또는 용혈, 염증 및 감염을 방지하기 위해서 소분자 약제를 포함할 수 있다. 수크로오스 용액과 같은 당 용액을 키트와 함께 제공할 수 있다. 수크로오스 용액은 20% 수크로오스 용액이어도 좋다.
또한, 본 명세서에 개시된 다른 성분도 키트에 포함될 수 있다.
일부 실시형태에 있어서는, 키트의 성분은, 예를 들면 고무 또는 실리콘 마개(예를 들면, 폴리부타디엔 또는 폴리이소프렌 마개)를 가진 밀폐 바이알에 보존된다. 일부 실시형태에 있어서, 키트의 성분은 불활성 조건하(예를 들면, 질소 또는 아르곤과 같은 다른 불활성 가스하)에 보존된다. 일부 실시형태에 있어서, 키트의 성분은 무수 조건하(예를 들면, 건조제)에 보존된다. 일부 실시형태에 있어서, 키트의 성분은 앰버 바이알과 같은 차광 용기에 보존된다.
키트의 일부로서 또는 키트와는 별도로서 시린지 또는 피펫을 본 명세서에 개시된 바와 같은 펩티드, 펩티드 용액 또는 하이드로겔로 미리 충전할 수 있다. 다른 장치를 사용 또는 사용하지 않고 자기 조립 펩티드 용액을 시린지 또는 피펫에 공급하도록 유저에게 지시하는 방법, 또는 다른 장치를 사용하거나 또는 사용하지 않고 시린지 또는 피펫을 통해서 타겟 영역에 투여하는 방법이 제공된다. 다른 장치로서는, 예를 들면 가이드와이어를 구비한 또는 구비하지 않은 카테터를 들 수 있다.
본 개시의 일부 실시형태에 있어서, 자기 조립 펩티드는 체액 누설을 억제하기 위해서, 스텐트 또는 카테터와 같은 장치 또는 기구 상의 코팅으로서 사용될 수 있다. 또한, 자기 조립 펩티드는 거즈 또는 붕대와 같은 지지체, 또는 라이닝에 포함되거나 또는 고정되어, 피험체에게 치료 효과를 제공할 수 있거나 또는 타겟 영역 내에 적용될 수 있다. 또한, 자기 조립 펩티드는 스폰지에 침지시켜 사용될 수도 있다.
또한, 막은 세포단층을 배양하기 위해서 유용할 수 있다. 세포는 불균일한 대전된 표면에 유착하는 것을 선호한다. 단백질성 막의 대전된 잔기 및 배좌는 세포 유착 및 이동을 촉진한다. 섬유아세포 성장 팩터와 같은 성장 팩터의 펩티드막에의 첨가는 결합, 세포 증식 및 신경돌기 성장을 더욱 개선시킬 수 있다.
펩티드 용액은 산성 pH에서 액체이어도 좋지만, 펩티드는 용액의 pH 레벨을 중성 또는 생리학적 pH 레벨로 조절하면 자기 조직화 또는 자기 조립을 할 수 있다. 이 용액은 수성 또는 비수성이어도 좋다.
이하의 실시예는 예시이며 한정적인 것이 아니다. 본 기술의 다수의 변형은 본 개시의 검토시 당업자에게 있어서 명백해질 것이다. 따라서, 본 기술의 범위는, 실시예를 참조해서 결정되는 것이 아니라, 그 대신에 첨부한 청구범위 및 그 등가물의 전체 범위와 함께 참조해서 결정되어야만 한다.
실시예
본 발명에 따른 자기 조립 펩티드 용액을 이용한 항유착 방법은 토끼의 맹장의 측벽 모델에서 평가되었으며, 이것은 복강내 유착 형성, 보다 일반적으로는 항유착 용량을 평가하기 위해서 사용된다.
본 실시예에 있어서 사용된 자기 조립 펩티드 용액은 시판의 RADA16 펩티드의 2.5% 용액인 PURASTAT®(3d Matrix, Inc.)이었다. 시험계는 토끼였고, 이하와 같다.
종: 토끼(Oryctolagus cuniculus)
종류: 뉴질랜드화이트
공급원: USDA 인가된 공급자
성별: 암컷, 미경산 및 비임신
체중 범위: 선정시 4.0∼6.0kg
연령: 이 시험을 위한 특정한 연령은 규정되지 않음
적응 기간: 최소 5일
동물 개체수: 21마리(+4마리 예비)
식별 방법: 귀표
토끼는 수술 후 유착의 감소를 평가하기 위한 다수의 문헌 참조에 있어서 적절한 모델이다. 토끼는 측벽의 결함 및 이식된 아티클의 사이즈를 수용하기에 물리적으로 충분히 큰 가장 낮은 감각성 종을 나타낸다. 동물 개체수는 해석 가능한 결과를 얻을 수 있는 최소의 수를 나타낸다. 관리, 하우징 및 환경 조건은 "실험 동물의 관리 및 사용을 위한 가이드"에 근거한 NAMSA 표준 조작 순서에 따랐다. 수술 후 유착 형성에 대한 토끼 모델의 복잡성을 모방할 수 있는 이용 가능한 인증된 시험관내 에세이 또는 컴퓨터 시뮬레이트된 모델은 존재하지 않는다.
방법.
수술 전 처치: 상기 제 1 수술일 전 2일 이내에 동물을 칭량하고, 무게에 따라 랜덤하게 표 2에 나타낸 바와 같이 치료군으로 할당했다.
Figure pct00006
수술일에, 각각의 동물을 0.05mg/kg의 진통제 부프레노르핀을 피하 주사하고, 펜타닐 패치(진통제; 25μg/hr)를 귀에 첩부했다. 각각의 동물에게 케타민 하이드로클로라이드와 크실라진의 조합(34mg/kg+5mg/kg)을 근육내 주사하고, 일반적인 마취제를 0.6mL/kg 투약했다. 각막이 건조해지는 것을 방지하기 위해서 동물의 양 눈에 동물용 안연고제를 도포했다. 각각의 동물에 예방 용량의 엔로플록사신(항생제)을 5.0mg/kg으로 피하 투여했다. 각각의 동물은 복부 상에 털이 없도록 제모했다. 복부를 살균 비누로 세정하고, 70% 이소프로필알콜로 닦아냈다. 수술 부위에 포비돈 요오드와 같은 소독약을 바르고, 동물을 멸균천으로 덮었다. 각각의 동물을 지속적인 전신마취를 위해서 이소풀루란 흡입 마취 하에 두었다. 각각의 동물의 바이탈 사인(체온, 심박수, SPO2)은 처치 중에 모니터링했다.
수술 순서.
꼬리에서 검상돌기로 약 6cm를 시작으로 전면 복부의 중심선을 따라 약 12cm의 길이의 피부 절개를 행했다. 복벽은 백선을 따라 절개함으로써 개방했다. 전체 맹장을 노출시키고 살균된 건조 거즈 스펀지로 전체 장막 표면을 점상 출혈이 달성될 때까지 와이핑함으로써 찰과상을 입혔다. 맹장벽의 완전성이 손상되었을 경우에는 동물을 안락사시키고 교체했다. 맹장을 복부 내에 재배치했다. 복부 측벽에 걸쳐서 복막에 측정시 약 2×4.5cm의 양방 결함이 형성되었다. 상기 결함은 중심 절개에 대하여 측면으로 약 4cm, 꼬리에서 검상돌기로 약 7∼9cm 형성되었다. 약 2×4.5cm의 복막의 윈도우를 예적박리를 이용하여 절제하고, 이 영역을 출혈이 일어나도록 메스 칼날로 긁어서 근육을 파괴했다. 바람직한 출혈보다 출혈이 적으면, 결함 영역을 가로지르고 있는 작은 혈관을 절개함으로써 추가 출혈이 유발될 수 있다. 측벽 결함 부위의 대표적인 사진을 촬상했다. 시험 동물에 대해서는 측벽 결함 부위를 커버하여 코팅하도록 시험물을 복막벽에 도포했다. 음성의 대조군에 대해서는 결함 부위를 미처리한 채 남겼다. 측벽 및 맹장을 통상의 위치로 복귀시키고, 복벽을 적당한 흡수봉합사를 사용해서 간단한 연속 봉합 패턴으로 봉합했다. 피하조직은 같은 봉합사 타입을 사용하고 간단한 연속 봉합 패턴으로 봉합했다. 피부를 4-0 비흡수성 봉합사, 스테인리스강 운드 클립(stainless steel wound clip) 또는 이들 재료의 조합으로 봉합했다. 수술일은 0일이었다.
수술 후 관찰.
동물을 회복 영역으로 이동시키고, 열원 상에 두었다. 동물이 마취제로부터의 회복되는 것을 모니터링했다. 흉골 행와위가 달성되는 즉시, 각각의 동물에게 엘리자베스 칼라를 장착해서 케이지로 북귀시켰다. 부프레노르핀(SQ, 0.05mg/kg)을 초기 투여 후 약 6시간 후에 투여했다. 엔로플록사신(IM, 5.0mg/kg)을 수술일의 저녁에 투여한 다음, 수술 후 최초의 2일간 1일 2회 투여했다.
수술 후 14(+1)일 후, 동물을 칭량하고, 펜토바르비탈 나트륨계의 안락사 용액을 정맥내 주사함으로써 안락사시켰다. 복막강을 개방하고, 내장은 스탭 수의사에 의해 검사했다. 그레이딩의 일관성을 유지하기 위해서, 동일한 수의사가 모든 평가를 실시했다. 각각의 동물의 결함 부위를 촬상했다. 각각의 부위는 유착 형성에 대해서 검사했다. 유착은 표 3 및 표 4에 나타낸 기준에 따라 정도 및 강도에 대해서 등급을 매겼다.
Figure pct00007
Figure pct00008
유착의 일반적인 위치와 유착에 관여한 조직 또는 기관을 확인했다. 복부 절개에 대한 유착을 확인하고 기재했고, 복강 내에 존재하는 임의의 다른 유착도 존재하지만, 그들은 스코어링하지 않았다.
스코어링 후, 상처 및 맹장을 적출하고, 10% 중성 완충 포르말린(NBF) 중에 두었다. 조직에 동물 번호, 상처 식별, 종료일을 라벨링했다. 연구 감독자가 지시하지 않는 한, 현미경 평가는 실시하지 않았다.
평가 및 통계적 분석.
유착 정도 및 강도에 대한 평균 스코어 및 유착의 발생률을 계산했다. 전체 유착 스코어(각각의 결함의 정도+강도)는 맹장 측벽 모델의 각각의 동물에 대해서 계산했다. 유착 정도에 대한 스코어, 유착 강도에 대한 스코어, 및 전체 유착 스코어를 통계적으로 비교했다. 평균 및 표준 편차를 각 파라미터에 대해 계산했다. 기술 통계 및 군 비교 데이터는 유효화된 통계적 프로그램을 사용해서 달성되었다. 정규성 및 등분산에 관한 데이터를 스크리닝한 후, 적당한 파라미터 검정 또는 비파라미터 검정을 실시했다. 등분산을 갖는 정규 분포된 데이터를 파라미터로 간주하고, 비쌍체 t-검정을 사용해서 비교했다. 데이터가 비파라미터일 경우, 비등분산의 2샘플 t-검정(웰치 검정)을 행했다. 계산에 의한 0.05 미만의 확률(p)은 통계학적으로 유의한 것이어서, 적당한 사후검증이 실행되었다고 간주되었다. 체중에 대해서는 평균 및 표준 편차를 각 치료군에 대해서 계산했다.
결론.
결과를 하기 표 5 및 표 6에 나타낸다. 맹장 측벽 모델에 있어서, 9/10부위(총 5마리)가 수술 대조군에서 유착이 형성되었고(표 5 참조), 자기 조립 펩티드 용액 처리시에는 4/16부위(총 8마리)만이 유착을 형성했다(표 6 참조). 예비 통계 계산은 대조군과 PuraStat 처리된 동물 간에서 유의차(p값=.00126; p<.05에서는 결과가 유의함)를 나타냈다. 결론적으로, 자기 조립 펩티드 용액은 토끼의 맹장 측벽 모델에 있어서 항유착성을 나타냈다.

대조군의 맹장 측벽 모델에서의 유착

동물
번호
대조구
/ 시험물
시험물
(L/R)의 체적
(mL)

결함 부위에서의 유착(L/R)
유착 정도 스코어(L/R)
유착 강도 스코어(L/R)
추가 유착(맹장과..)
시험물의 존재
절개부 치유
추가 코멘트

17490

대조구

해당
사항
없음
맹장 및 소장/맹장
1&1/4
2&1/2
절개부, 장막, 맹장
노코멘트
치유됨
외식시, 맹장의 유착부가 좌측 결함 부위에 유착되게 됨

17486

대조구
맹장/맹장
4/2
2/2
절개부, 맹장, 장막, 대장
노코멘트
치유됨

17476

대조구
비찰과 맹장 & 찰과 맹장/맹장 & 대장

2&2/
2&1
1&2/2&2
절개부, 장막, 맹장, 소장, 복부지방
노코멘트
치유됨

17477

대조구
없음/소장
0/3
0/2
측벽(결함 없음), 절개부, 소장, 장막, 맹장, 대장(자궁에서 절개부)
노코멘트
치유됨

17472



대조구
맹장/맹장(X2)
4/1&1
2/2&2
절개부, 맹장, 대장
노코멘트
치유됨
비촬과 맹장과 우측벽 결함

자기 조립 펩티드 용액 치료군의 맹장 측벽 모델에서의 유착

동물
번호
대조구
/ 시험물
시험물
(L/R)의 체적
(mL)

결함 부위에서의 유착(L/R)
유착 정도 스코어(L/R)
유착 강도 스코어(L/R)
추가 유착(맹장과..)
시험물의 존재
절개부 치유
추가 코멘트

17484

시험물

6/9
없음/없음
0/0
0/0
절개부, 장막, 맹장, 대장
존재
치유됨
간의 표면에 황갈색 막이 부착됨

17485

시험물
6/6
없음/없음
0/0
0/0
절개부, 대장, 소장, 맹장
존재
치유됨
간 및 비장의 표면에 황갈색 막이 부착됨

17482

시험물
3/3
맹장/없음
4/0
2/0
맹장, 소장, 복부지방, 장막
비존재
치유됨
절개부에 소장이 유착됨

17479

시험물
3/3
없음/없음
0/0
0/0
장막, 맹장, 대장
존재
치유됨
간의 표면에 황갈색 막(최소)이 부착됨

17470

시험물
3/3
없음/없음
0/0
0/0
절개부, 장막, 맹장, 대장, 소장
비존재
치유됨

17471
시험물
8.5/5
없음/없음
0/0
0/0
절개부, 소장, 장막, 대장
존재
치유됨

17467
시험물
6/6
없음/맹장
0/1
0/2
절개부, 맹장
존재
치유됨
맹장에 소장이 부착되고;
간 표면에 황갈색 물질이 부착됨

17474
시험물
6/6
맹장/맹장
1/2
2/2
절개부, 맹장, 소장, 대장, 창자간막
존재
치유됨
광범위의 맹장과 맹장의 유착
SEQUENCE LISTING <110> 3-D MATRIX, LTD. <120> Preventing Biological Tissue Adhesion <130> 117146-106 <140> PCT/IB2017/000312 <141> 2017-03-17 <150> US 62/310,121 <151> 2016-03-18 <150> US 62/310,131 <151> 2016-03-18 <160> 85 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 1 Arg Ala Asp Ala 1 <210> 2 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 2 Ile Glu Ile Lys 1 <210> 3 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 3 Thr Thr Thr Thr 1 <210> 4 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 4 Ala Thr Ala Thr 1 <210> 5 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 5 Thr Val Thr Val 1 <210> 6 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 6 Ala Ser Ala Ser 1 <210> 7 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Peptide <400> 7 Ser Ser 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Asp 1 5 10 15 <210> 34 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 34 Asp Ala Arg Ala Asp Ala Arg Ala Asp Ala Arg Ala Asp Ala Arg Ala 1 5 10 15 <210> 35 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 35 Ala Asp Ala Arg Ala Asp Ala Arg Ala Asp Ala Arg Ala Asp Ala Arg 1 5 10 15 <210> 36 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 36 Ala Arg Ala Arg Ala Asp Ala Asp Ala Arg Ala Arg Ala Asp Ala Asp 1 5 10 15 <210> 37 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 37 Ala Arg Ala Asp Ala Lys Ala Glu Ala Arg Ala Asp Ala Lys Ala Glu 1 5 10 15 <210> 38 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 38 Ala Lys Ala Glu Ala Arg Ala Asp Ala Lys Ala Glu Ala Arg Ala Asp 1 5 10 15 <210> 39 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 39 Ala Arg Ala Lys Ala Asp Ala Glu Ala Arg Ala Lys Ala Asp 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Lys Ile Glu Ile Lys Ile Glu Ile Lys Ile Glu Ile Lys 130 135 140 Ile Glu Ile Lys Ile Glu Ile Lys Ile Glu Ile Lys Ile Glu Ile Lys 145 150 155 160 Ile Glu Ile Lys Ile Glu Ile Lys Ile Glu Ile Lys Ile Glu Ile Lys 165 170 175 Ile Glu Ile Lys Ile Glu Ile Lys Ile Glu Ile Lys Ile Glu Ile Lys 180 185 190 Ile Glu Ile Lys Ile Glu Ile Lys 195 200 <210> 71 <211> 201 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic peptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(201) <223> /note="This sequence may encompass 2-50 'Ile Glu Ile Lys' repeating units" <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(201) <223> /note="Variant residues given in the sequence have no preference with respect to those in the annotations for variant positions" <220> <221> VARIANT <222> (9)..(201) <223> /replace=" " <400> 71 Ile Glu Ile Lys Ile Glu Ile Lys Ile Glu Ile Lys Ile Glu Ile Lys 1 5 10 15 Ile Glu Ile Lys Ile Glu Ile Lys Ile Glu Ile Lys Ile Glu Ile Lys 20 25 30 Ile Glu Ile Lys Ile Glu Ile Lys Ile Glu Ile Lys Ile Glu Ile Lys 35 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Asp Leu 165 170 175 Lys Leu Asp Leu Lys Leu Asp Leu Lys Leu Asp Leu Lys Leu Asp Leu 180 185 190 Lys Leu Asp Leu Lys Leu Asp Leu 195 200 <210> 73 <211> 150 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic peptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(150) <223> /note="This sequence may encompass 2-50 'Lys Leu Asp' repeating units" <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(150) <223> /note="Variant residues given in the sequence have no preference with respect to those in the annotations for variant positions" <220> <221> VARIANT <222> (7)..(150) <223> /replace=" " <400> 73 Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys 1 5 10 15 Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu 20 25 30 Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp 35 40 45 Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys 50 55 60 Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu 65 70 75 80 Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp 85 90 95 Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys 100 105 110 Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu 115 120 125 Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp Lys Leu Asp 130 135 140 Lys Leu Asp Lys Leu Asp 145 150 <210> 74 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 74 Lys Leu Asp Leu Lys Leu Asp Leu 1 5 <210> 75 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 75 Lys Leu Asp Leu Lys Leu Asp Leu Lys Leu Asp Leu 1 5 10 <210> 76 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 76 Ala Gly Ala Gly Ala Gly Ala Gly Ala Gly Ala Gly Ala Gly Ala Gly 1 5 10 15 <210> 77 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 77 Leu Ala Leu Ala Leu Ala Leu Ala Leu Ala Leu Ala Leu Ala Leu Ala 1 5 10 15 <210> 78 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 78 Leu Ala Leu 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Sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 85 Ala Gly Ala Leu Ala Gly Ala Leu Ala Gly Ala Leu Ala Gly Ala Leu 1 5 10 15

Claims (40)

  1. 생물학적 조직에 유효량의 자기 조립 펩티드 용액을 투여하는 단계를 포함하는 생물학적 조직에의 유착을 경감시키는 방법으로서,
    상기 자기 조립 펩티드의 길이는 약 7개의 아미노산∼32개의 아미노산이고 또한 상기 자기 조립 펩티드 용액은 생리학적 조건하에서 하이드로겔을 형성하고, 상기 하이드로겔은 생물학적 조직에의 유착을 경감시키는 방법.
  2. 수술 부위에서의 생물학적 조직에 유효량의 자기 조립 펩티드 용액을 투여하는 단계를 포함하는 생물학적 조직 간의 유착을 경감시키는 방법으로서,
    상기 자기 조립 펩티드의 길이는 약 7개의 아미노산∼32개의 아미노산이고 또한 상기 자기 조립 펩티드 용액은 생리학적 조건하에서 하이드로겔을 형성하고, 상기 하이드로겔은 수술 부위에서의 생물학적 조직에의 다른 생물학적 조직의 유착을 경감시키는 방법.
  3. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,
    상기 생물학적 조직은 심외막을 포함하는 방법.
  4. 제 3 항에 있어서,
    상기 생물학적 조직은 절제, 바람직하게는 심실성 빈맥 절제가 실시된 심외막을 포함하는 방법.
  5. 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 자기 조립 펩티드는 소수성 아미노산과 친수성 아미노산이 교대로 있는 약 12개∼약 16개의 아미노산을 포함하는 방법.
  6. 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 자기 조립 펩티드는 RADA, IEIK, TTTT, ATAT, TVTV, ASAS, SSSS, VVVTTTT, 및 이들의 조합에서 선택되는 서열을 포함하는 방법.
  7. 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 자기 조립 펩티드는 (RADA)4, (IEIK)3I 및 (KLDL)3에서 선택되는 서열을 포함하는 방법.
  8. 제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 자기 조립 펩티드는 상기 용액의 약 0.1∼약 10w/v%이거나 또는 상기 용액의 약 0.1∼약 3.5w/v%인 방법.
  9. 제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 자기 조립 펩티드는 상기 용액의 약 1, 약 2.5, 또는 약 3w/v%인 방법.
  10. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 유효량이 타겟 영역 1㎠당 약 0.1mL∼약 5mL인 방법.
  11. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 유효량이 타겟 영역 1㎠당 약 1mL인 방법.
  12. 제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 하이드로겔은 상기 자기 조립 펩티드 용액을 타겟 영역에 투여하기 전에 형성되는 방법.
  13. 제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 하이드로겔은 상기 자기 조립 펩티드 용액을 타겟 영역에 투여한 후에 형성되는 방법.
  14. 제 1 항 내지 제 13 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 용액은 생물학적 활성제를 더 포함하는 방법.
  15. 제 1 항 내지 제 13 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 용액은 세포 및/또는 약제를 실질적으로 포함하지 않는 방법.
  16. 제 1 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 자기 조립 펩티드 용액은 생체내 투여되는 방법.
  17. 제 1 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 생물학적 조직이 인간 조직인 방법.
  18. 생물학적 조직에의 유착을 경감시키기 위한 유효량의 자기 조립 펩티드 용액의 용도에 있어서,
    상기 자기 조립 펩티드의 길이는 약 7개의 아미노산∼32개의 아미노산이고 또한 상기 자기 조립 펩티드 용액은 생리학적 조건하에서 하이드로겔을 형성하고, 상기 하이드로겔은 생물학적 조직에의 유착을 경감시키는 용도.
  19. 생물학적 조직에의 유착을 경감시키기 위한 유효량의 자기 조립 펩티드 용액의 용도에 있어서,
    상기 자기 조립 펩티드의 길이는 약 7개의 아미노산∼32개의 아미노산이고 또한 상기 자기 조립 펩티드 용액은 생리학적 조건하에서 하이드로겔을 형성하고, 상기 하이드로겔은 수술 부위에서의 생물학적 조직에의 다른 생물학적 조직의 유착을 경감시키는 용도.
  20. 제 16 항 또는 제 17 항에 있어서,
    상기 생물학적 조직은 심외막을 포함하는 용도.
  21. 제 16 항 또는 제 17 항에 있어서,
    상기 생물학적 조직은 절제, 바람직하게는 심실성 빈맥 절제가 실시된 심외막을 포함하는 용도.
  22. 제 16 항 내지 제 21 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 자기 조립 펩티드는 소수성 아미노산과 친수성 아미노산이 교대로 있는 약 12개∼약 16개의 아미노산을 포함하는 용도.
  23. 제 16 항 내지 제 21 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 자기 조립 펩티드는 RADA, IEIK, TTTT, ATAT, TVTV, ASAS, SSSS, VVVTTTT, 및 이들의 조합에서 선택되는 서열을 포함하는 용도.
  24. 제 16 항 내지 제 21 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 자기 조립 펩티드는 (RADA)4, (IEIK)3I 및 (KLDL)3에서 선택되는 서열을 포함하는 용도.
  25. 제 16 항 내지 제 24 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 자기 조립 펩티드는 상기 용액의 약 0.1∼약 10w/v%이거나 또는 상기 용액의 약 0.1∼약 3.5w/v%인 용도.
  26. 제 16 항 내지 제 24 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 자기 조립 펩티드는 상기 용액의 약 1, 약 2.5, 또는 약 3w/v%인 용도.
  27. 제 16 항 내지 제 26 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 유효량이 타겟 영역 1㎠당 약 0.1mL∼약 5mL인 용도.
  28. 제 16 항 내지 제 26 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 유효량이 타겟 영역 1㎠당 약 1mL인 용도.
  29. 제 16 항 내지 제 28 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 하이드로겔은 상기 자기 조립 펩티드 용액을 타겟 영역에 투여하기 전에 형성되는 용도.
  30. 제 16 항 내지 제 28 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 하이드로겔은 상기 자기 조립 펩티드 용액을 타겟 영역에 투여한 후에 형성되는 용도.
  31. 제 16 항 내지 제 30 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 용액은 생물학적 활성제를 더 포함하는 용도.
  32. 제 16 항 내지 제 30 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 용액은 세포 및/또는 약제를 실질적으로 포함하지 않는 용도.
  33. 제 16 항 내지 제 32 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 자기 조립 펩티드 용액은 생체내 투여되는 용도.
  34. 제 16 항 내지 제 32 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 생물학적 조직이 인간 조직인 용도.
  35. 제 1 항, 제 2 항, 및 제 5 항 내지 제 17 항 중 어느 한 항, 또는 제 18 항, 제 19 항, 및 제 22 항 내지 제 34 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 하이드로겔은 복강내 유착 형성을 치료, 방지 및/또는 경감시키는 방법 또는 용도.
  36. 제 1 항, 제 2 항, 및 제 5 항 내지 제 17 항 중 어느 한 항, 또는 제 18 항, 제 19 항, 및 제 22 항 내지 제 34 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 생물학적 조직은 복강내, 맹장, 장, 우선적으로는 대장 및/또는 결장을 포함하는 방법 또는 용도.
  37. 제 1 항, 제 2 항, 및 제 5 항 내지 제 17 항 중 어느 한 항, 또는 제 18 항, 제 19 항, 및 제 22 항 내지 제 34 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 하이드로겔은 골반 유착 형성을 치료, 방지 및/또는 경감시키는 방법 또는 용도.
  38. 제 1 항, 제 2 항, 및 제 5 항 내지 제 17 항 중 어느 한 항, 또는 제 18 항, 제 19 항, 및 제 22 항 내지 제 34 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 하이드로겔은 산과 또는 부인과 수술에 있어서의 유착 형성을 치료, 방지 및/또는 경감시키는 방법 또는 용도.
  39. 제 38 항에 있어서,
    상기 산과 또는 부인과 수술은 제왕절개 분만, 복식 자궁 적출술, 우선적으로는 근종 적출술, 난소 낭선종 절제술, 또는 침습성 부인병적 악성 종양에 대한 외과 수술을 포함하는 방법.
  40. 제 37 항 내지 제 39 항 중 어느 한 항에 있어서,
    유착 형성의 치료, 방지 및/또는 경감은 소장장해, 불임, 만성동통, 및 성교동통을 치료, 방지 및/또는 경감시키는 방법.
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