KR20180001507U - Flounder eggs microinjection mold for manufacturing agarose gel - Google Patents

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김주원
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Abstract

본 고안은 다양한 크기의 넙치 수정란의 미세주입을 효율적으로 수행할 수 있는 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드를 제공한다.The present invention provides a mold for preparing agarose gel for microinjection of flounder embryos capable of efficiently performing microinjection of various sizes of flounder embryos.

Description

넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드{Flounder eggs microinjection mold for manufacturing agarose gel}{Flounder eggs microinjection mold for manufacturing agarose gel}

본 고안은 아가로스 젤 제조용 몰드에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드에 관한 것이다.The present invention relates to a mold for preparing an agarose gel, and more particularly, to a mold for preparing an agarose gel for microinjection of a flounder embryo.

제브라피시 수정란 미세주입(zebrafish egg microinjection)은 국내 및 세계적으로 일반화된 기술로 제브라피시를 실험동물모델로 다루는 실험실에서는 2~3개 정도의 미세주입용 몰드(microinjection mold)를 가지고 있다. 제브라피시는 암/수 성어 개체마다 수정란(egg)의 크기가 다르기 때문에 다양한 크기의 아가로즈 플레이트(agarose plate)를 준비하는 것보다 다양한 크기의 아가로스 젤 제조용 몰드 제조를 위한 돌기(bump)를 가진 하나의 아가로즈 플레이트를 사용하는 것이 실험을 진행하기에 효율적이기 때문이다. 특히 넙치 수정란을 이용한 미세주입(microinjection)의 경우, 미세주입 할 위치가 정해져 있기 때문에 쉽게 위치를 잡을 수 있고 일단 위치를 잡은 후에 쉽게 움직이지 않는 사각 삽입홀 제조를 위한 돌기 형태의 미세주입용 몰드를 사용해야 한다. 따라서 형질전환 물고기 생산을 위한 미세주입에 사용되는 사각형의 돌기를 가진 아가로스 젤 제조용 몰드가 개발되었다(Martina et al., Nature Protocols 1, 1133 - 1139, 2006).Zebrafish egg microinjection is a nationally and globally generalized technique, and has about two or three microinjection molds in laboratories that treat zebrafish as an experimental animal model. Zebrafish has a bump for the manufacture of agarose gel molds of different sizes than preparing agarose plates of varying sizes because the egg size varies for each cancer / This is because the use of one agarose plate is efficient in carrying out the experiment. In particular, in the case of microinjection using a flounder embryo, a mold for microinjection in the form of a protrusion for producing a rectangular insertion hole which can be easily positioned because it has a microinjection position is fixed and does not move easily after positioning Should be used. Thus, molds for preparing agarose gels with square protrusions used for microinjection for transgenic fish production have been developed (Martina et al., Nature Protocols 1, 1133 - 1139, 2006).

그러나 상기 선행기술의 경우, 돌기의 폭이 모두 균일하여 크기가 조금씩 차이가 나는 수정란에 적용시키기에는 비효율적이다. However, in the case of the above-mentioned prior art, it is inefficient to apply to embryos in which the widths of the projections are uniform and the sizes are slightly different.

본 고안의 목적은 다양한 크기의 넙치 수정란의 미세주입을 효율적으로 수행할 수 있는 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드를 제공하는 것이다. 그러나 이러한 과제는 예시적인 것으로서, 이에 의해 본 고안의 범위가 한정되는 것을 아니다.The object of the present invention is to provide a mold for preparing agarose gel for microinjection of flounder embryos capable of efficiently performing microinjection of various sizes of flounder embryos. However, such a problem is illustrative, and thus the scope of the present invention is not limited thereto.

본 고안의 일 관점에 따르면, 투명 소재의 사각형 플레이트; 및 상기 플레이트 상면에 형성된 넙치 수정란 고정용 홀 제조를 위한 길이방향의 둘 이상의 복수의 돌기를 포함하는, 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드에 있어서,상기 복수의 돌기는 좌측에서 우측으로 갈수록 또는 우측에서 좌측으로 갈수록 그 폭이 일정한 비율로 증가하거나 감소하는, 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드가 제공된다. According to one aspect of the present invention, a rectangular plate of transparent material; And a plurality of protrusions in the longitudinal direction for producing a hole for fixing the flounder embryo formed on the upper surface of the plate, wherein the plurality of protrusions are arranged in the order from the left to the right, There is provided a mold for preparing an agarose gel for microinjection of a flounder embryo, the width of which is increased or decreased at a constant rate from the right side to the left side.

본 고안의 다른 일 관점에 따르면, 녹은 아가로스 용액을 주형에 부어 아가로스 젤을 형성하는 단계; 상기 젤이 완전히 굳기 전에 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드를 상기 아가로스 젤 상면에 올려놓는 단계; 및 상가 아가로스 젤이 완전히 굳은 후 상기 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드를 탈착시키는 단계를 포함하는 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조방법이 제공된다. According to another aspect of the present invention, there is provided a method of preparing a gel, comprising: pouring a melted agarose solution into a mold to form an agarose gel; Placing the mold for preparing agarose gel for microinjection of the flounder embryo as set forth in any one of claims 1 to 6 on the top surface of the agarose gel before the gel is completely hardened; And a step of desorbing the mold for preparing an agarose gel for microinjection of the flounder embryo, after the gelatinous agarose gel is completely hardened, and a method for producing the agarose gel for microinjection of the flounder embryo.

본 고안의 사상에 따른 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드는 다양한 크기의 넙치 수정란을 대상으로 신속하고 효율적으로 미세주입할 수 있는 효과를 갖는 것이다. 물론 이러한 효과에 의해 본 고안의 범위가 한정되는 것은 아니다.According to the idea of the present invention, the mold for preparing the agarose gel for microinjection of the flounder embryo can be rapidly and efficiently microinjected into various sizes of flounder embryos. Of course, the scope of the present invention is not limited by these effects.

도 1은 상용화되고 있는 제브라피시 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드의 형태를 나타내는 전면도이다.
도 2는 상용화되고 있는 제브라피시 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드의 모습을 나타내고 있는 사진이다.
도 3은 상용화되고 있는 제브라피시 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드를 이용하여 미세주입하는 과정을 나타내고 있는 도면이다.
도 4는 미세주입 틀에 사각형태의 삽입홀 제조를 위한 돌기(bump)가 구성된 상용화되고 있는 제브라피시 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드의 모습을 나타내고 있는 사시도이다.
도 5는 본 고안의 바람직한 일부 실시예들에 따른 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드(100)의 형태를 나타내고 있는 도면이다.
도 6은 본 고안의 바람직한 일부 실시예들에 따른 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드(100)의 형태를 나타내고 있는 사시도이다.
도 7은 본 고안의 다른 실시예들에 따른 손잡이를 부착한 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드(100)의 형태를 나타내고 있는 사진이다.
BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS FIG. 1 is a front view showing a mold for preparing an agarose gel for microinjection of a zebrafish embryo which has been commercialized. FIG.
2 is a photograph showing a mold for preparing an agarose gel for microinjection of a zebrafish embryo which has been commercialized.
3 is a view illustrating a microinjection process using a commercial mold for preparing an agarose gel for microinjection of a zebrafish embryo.
FIG. 4 is a perspective view showing a mold for preparing an agarose gel for microinjection of a zebrafish embryo, which is being commercialized, in which a bump for producing a square-shaped insertion hole is formed in a microinjection mold.
5 is a view showing a mold 100 for preparing an agarose gel for microinjection of a flounder embryo according to certain preferred embodiments of the present invention.
6 is a perspective view showing a mold 100 for preparing an agarose gel for microinjection of a flounder embryo according to certain preferred embodiments of the present invention.
7 is a photograph showing a mold 100 for preparing an agarose gel for microinjection of a flounder embryo with a handle according to another embodiment of the present invention.

고안의 상세한 설명:Detailed description of the design:

본 고안의 일 관점에 따르면, 투명 소재의 사각형 플레이트; 및 상기 플레이트 상면에 형성된 넙치 수정란 고정용 홀 제조를 위한 길이방향의 둘 이상의 복수의 돌기를 포함하는, 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드에 있어서,상기 복수의 돌기는 좌측에서 우측으로 갈수록 또는 우측에서 좌측으로 갈수록 그 폭이 일정한 비율로 증가하거나 감소하는, 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드가 제공된다. According to one aspect of the present invention, a rectangular plate of transparent material; And a plurality of protrusions in the longitudinal direction for producing a hole for fixing the flounder embryo formed on the upper surface of the plate, wherein the plurality of protrusions are arranged in the order from the left to the right, There is provided a mold for preparing an agarose gel for microinjection of a flounder embryo, the width of which is increased or decreased at a constant rate from the right side to the left side.

상기 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드에 있어서, 상기 복수의 돌기는 인접한 2 내지 3개의 돌기를 세트로 하여 동일한 폭을 갖고 다음 세트로 갈수록 일정한 비율로 폭이 증가하거나 감소할 수 있다. In the mold for preparing an agarose gel for microinjection of the flounder embryo, the plurality of protrusions may have the same width with two or three adjacent protrusions as a set, and the width may increase or decrease at a constant rate toward the next set.

상기 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드에 있어서, 상기 돌기의 폭은 0.5 내지 1.2 mm일 수 있고 상기 돌기의 높이는 0.7 내지 1.0 mm일 수 있다. In the mold for preparing agarose gel for microinjection of the flounder embryo, the width of the protrusion may be 0.5 to 1.2 mm and the height of the protrusion may be 0.7 to 1.0 mm.

상기 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드에 있어서, 상기 플레이트의 소재는 유리(glass) 또는 수지제(plastic)일 수 있고 상기 수지제는 우레탄(urethane), 폴리염화비닐(polyvinyl chloride), 폴리에틸렌(polyethylene), 폴리스티렌(polystyrene), 폴리프로필렌(polypropylene),아크릴(acrylic), 나일론(nylon) 또는 메타크릴 수지(pmma)일 수 있다. In the mold for producing the agarose gel for microinjection of the flounder embryos, the material of the plate may be glass or plastic, and the resin may be urethane, polyvinyl chloride, polyethylene for example, polyethylene, polystyrene, polypropylene, acrylic, nylon or methacrylic resin (pmma).

상기 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드에 있어서, 상기 일정한 비율은 돌기 당 0.05 내지 0.2 mm, 돌기당 0.075 내지 0.15 mm 또는 0.09 내지 0.12 mm일 수 있으며 본 고안의 일 실시예에서는 돌기당 0.1 mm의 비율을 사용하였으나, 이에 제한되는 것은 아니다. In the mold for producing the agarose gel for microinjection of the flounder embryos, the predetermined ratio may be 0.05 to 0.2 mm per protrusion, 0.075 to 0.15 mm or 0.09 to 0.12 mm per protrusion, and in one embodiment of the present invention, 0.1 mm , But the present invention is not limited thereto.

본 고안의 다른 일 관점에 따르면, 녹은 아가로스 용액을 주형에 부어 아가로스 젤을 형성하는 단계; 상기 젤이 완전히 굳기 전에 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드를 상기 아가로스 젤 상면에 올려놓는 단계; 및 상가 아가로스 젤이 완전히 굳은 후 상기 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드를 탈착시키는 단계를 포함하는 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조방법이 제공된다. According to another aspect of the present invention, there is provided a method of preparing a gel, comprising: pouring a melted agarose solution into a mold to form an agarose gel; Placing the mold for preparing agarose gel for microinjection of the flounder embryo as set forth in any one of claims 1 to 6 on the top surface of the agarose gel before the gel is completely hardened; And a step of desorbing the mold for preparing an agarose gel for microinjection of the flounder embryo, after the gelatinous agarose gel is completely hardened, and a method for producing the agarose gel for microinjection of the flounder embryo.

이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 고안의 바람직한 여러 실시예들을 상세히 설명하기로 한다.Hereinafter, preferred embodiments of the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings.

본 고안의 실시예들은 당해 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 본 고안을 더욱 완전하게 설명하기 위하여 제공되는 것이며, 하기 실시예는 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 고안의 범위가 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다. 오히려 이들 실시예들은 본 개시를 더욱 충실하고 완전하게 하고, 당업자에게 본 고안의 사상을 완전하게 전달하기 위하여 제공되는 것이다. 또한, 도면에서 각 층의 두께나 크기는 설명의 편의 및 명확성을 위하여 과장된 것이다.Embodiments of the present invention are provided to more fully illustrate the present invention to those skilled in the art, and the following embodiments may be modified in various ways, The present invention is not limited to the embodiment. Rather, these embodiments are provided so that this disclosure will be more thorough and complete, and will fully convey the concept of the invention to those skilled in the art. In the drawings, the thickness and size of each layer are exaggerated for convenience and clarity of explanation.

문서 전체에 걸쳐서, 막, 영역 또는 기판과 같은 하나의 구성요소가 다른 구성요소 "상에", "연결되어", "적층되어" 또는 "커플링되어" 위치한다고 언급할 때는, 상기 하나의 구성요소가 직접적으로 다른 구성요소 "상에", "연결되어", "적층되어" 또는 "커플링되어" 접촉하거나, 그 사이에 개재되는 또 다른 구성요소들이 존재할 수 있다고 해석될 수 있다. 반면에, 하나의 구성요소가 다른 구성요소 "직접적으로 상에", "직접 연결되어", 또는 "직접 커플링되어" 위치한다고 언급할 때는, 그 사이에 개재되는 다른 구성요소들이 존재하지 않는다고 해석된다. 동일한 부호는 동일한 요소를 지칭한다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "및/또는"은 해당 열거된 항목 중 어느 하나 및 하나 이상의 모든 조합을 포함한다.It is to be understood that when referring to throughout the document that one component, such as a film, region or substrate, is "on", "connected to", "laminated" or "coupled to" another component It will be appreciated that elements may be directly "on", "connected", "laminated" or "coupled" to another element, or there may be other elements intervening therebetween. On the other hand, when one element is referred to as being "directly on", "directly connected", or "directly coupled" to another element, it is interpreted that there are no other components intervening therebetween do. Like numbers refer to like elements. As used herein, the term "and / or" includes any and all combinations of one or more of the listed items.

본 문서에서 제 1, 제 2 등의 용어가 다양한 부재, 부품, 영역, 층들 및/또는 부분들을 설명하기 위하여 사용되지만, 이들 부재, 부품, 영역, 층들 및/또는 부분들은 이들 용어에 의해 한정되어서는 안됨은 자명하다. 이들 용어는 하나의 부재, 부품, 영역, 층 또는 부분을 다른 영역, 층 또는 부분과 구별하기 위하여만 사용된다. 따라서, 이하 상술할 제 1 부재, 부품, 영역, 층 또는 부분은 본 고안의 가르침으로부터 벗어나지 않고서도 제 2 부재, 부품, 영역, 층 또는 부분을 지칭할 수 있다.In this document, the terms first, second, etc. are used to describe various elements, components, regions, layers and / or sections, but these members, parts, regions, layers and / It is obvious that no. These terms are only used to distinguish one member, component, region, layer or section from another region, layer or section. Thus, a first member, component, region, layer or section described below may refer to a second member, component, region, layer or section without departing from the teachings of the present disclosure.

또한, "상의" 또는 "위의" 및 "하의" 또는 "아래의"와 같은 상대적인 용어들은 도면들에서 도해되는 것처럼 다른 요소들에 대한 어떤 요소들의 관계를 기술하기 위해 여기에서 사용될 수 있다. 상대적 용어들은 도면들에서 묘사되는 방향에 추가하여 소자의 다른 방향들을 포함하는 것을 의도한다고 이해될 수 있다. 예를 들어, 도면들에서 소자가 뒤집어 진다면(turned over), 다른 요소들의 상부의 면 상에 존재하는 것으로 묘사되는 요소들은 상기 다른 요소들의 하부의 면 상에 방향을 가지게 된다. 그러므로, 예로써 든 "상의"라는 용어는, 도면의 특정한 방향에 의존하여 "하의" 및 "상의" 방향 모두를 포함할 수 있다. 소자가 다른 방향으로 향한다면(다른 방향에 대하여 90도 회전), 본 명세서에 사용되는 상대적인 설명들은 이에 따라 해석될 수 있다.Also, relative terms such as "top" or "above" and "under" or "below" can be used herein to describe the relationship of certain elements to other elements as illustrated in the Figures. Relative terms are intended to include different orientations of the device in addition to those depicted in the Figures. For example, in the figures the elements are turned over so that the elements depicted as being on the top surface of the other elements are oriented on the bottom surface of the other elements. Thus, the example "top" may include both "under" and "top" directions depending on the particular orientation of the figure. If the elements are oriented in different directions (rotated 90 degrees with respect to the other direction), the relative descriptions used herein can be interpreted accordingly.

본 문서에서 사용된 용어는 특정 실시예를 설명하기 위하여 사용되며, 본 고안을 제한하기 위한 것이 아니다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 단수 형태는 문맥상 다른 경우를 분명히 지적하는 것이 아니라면, 복수의 형태를 포함할 수 있다. 또한, 본 명세서에서 사용되는 경우 "포함한다(comprise)" 및/또는 "포함하는(comprising)"은 언급한 형상들, 숫자, 단계, 동작, 부재, 요소 및/또는 이들 그룹의 존재를 특정하는 것이며, 하나 이상의 다른 형상, 숫자, 동작, 부재, 요소 및/또는 그룹들의 존재 또는 부가를 배제하는 것이 아니다.The terminology used herein is for the purpose of describing particular embodiments only and is not intended to be limiting of the invention. As used herein, the singular forms "a," "an," and "the" include singular forms unless the context clearly dictates otherwise. Also, " comprise "and / or" comprising "when used herein should be interpreted as specifying the presence of stated shapes, numbers, steps, operations, elements, elements, and / And does not preclude the presence or addition of one or more other features, integers, operations, elements, elements, and / or groups.

이하, 본 고안의 실시예들은 본 고안의 이상적인 실시예들을 개략적으로 도시하는 도면들을 참조하여 설명한다. 도면들에 있어서, 예를 들면, 제조 기술 및/또는 공차(tolerance)에 따라, 도시된 형상의 변형들이 예상될 수 있다. 따라서, 본 고안 사상의 실시예는 본 문서에 도시된 영역의 특정 형상에 제한된 것으로 해석되어서는 아니 되며, 예를 들면 제조상 초래되는 형상의 변화를 포함하여야 한다.Hereinafter, embodiments of the present invention will be described with reference to the drawings schematically illustrating ideal embodiments of the present invention. In the figures, for example, variations in the shape shown may be expected, depending on manufacturing techniques and / or tolerances. Accordingly, the embodiments of the present invention should not be construed as being limited to any particular shape of the regions shown in this document, but should include, for example, changes in shape resulting from manufacturing.

도 1은 미세주입을 위해 아가로즈 겔(agarose gel)에 홈을 만들고 제브라피시의 수정란(eggs)을 정렬하기 위한 상용화되고 있는 제브라피시 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드(microinjection mold for agarose gel)를 도시하고 있다(zebrafish guide book, https://zfin.org/zf_info/zfbook/chapt5/5.1.html). 도시한 바와 같이, 아가로즈 겔 상에서 삼각 또는 사각형태의 홈이 형성되도록 삼각 도는 사가형의 돌기(bump)가 구성되어 있고 도 2를 참고하면 제브라피시 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드의 구성을 용이하게 이해할 수 있다. 1 shows a microinjection mold for agarose gel for microinjection of a zebrafish embryo which is commercially available for making grooves in an agarose gel for microinjection and for sorting eggs of a zebrafish. (Zebrafish guide book, https://zfin.org/zf_info/zfbook/chapt5/5.1.html). As shown in the figure, a triangular or triangular shaped bump is formed on the agarose gel to form a triangular or quadrangular groove. Referring to FIG. 2, the structure of the mold for preparing the agarose gel for microinjection of the zebrafish embryo It can be easily understood.

도 3은 상용화되고 있는 제브라피시 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드를 이용하여 미세주입하는 과정을 나타내고 있는 도면이다. 제브라피시 수정란의 미세주입을 위해 판매되고 있는 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드를 살펴보면 홈(furrow)의 형태가 삼각형의 경우, 미세주입(microinjection)시 인젝션 니들(injection needle)이 수정란(egg) 내부의 세포질(cytoplasm)에 주입되고 이후 니들을 회수할 때 수정란(egg)이 니들로부터 분리되지 않는 상황이 종종 발생한다. 이때 배양액(media)과 함께 투명 플라스틱 덮개로 미는 방법을 이용하여 수정란을 분리하면서 자주 인젝션 니들이 부러짐에 따라 인젝센 니들과 주입액(injection solution)을 다시 준비해야 하고 상기 인젝션 니들의 미세주입 볼륨(microinjection volume)을 다시 정량(quantification)해야 하는 번거로움과 경제적인 문제가 발생한다. 이러한 문제점을 일차적으로 해결하고자 도 4에 도시한 바와 같이, 미세주입 틀에 사각형태의 삽입홀 제조를 위한 돌기(bump)를 만들고 상기 삽입홀 제조를 위한 돌기에 제브라피시 수정란(zebrafish embryo)을 삽입하는 방식의 몰드(mold)가 개발되었으나 수정란의 크기(egg size)를 고려하지 않고 삽입홀 제조를 위한 돌기를 제작하여 아가로즈 겔에 삽입홀을 제조한 후 미세수입 작업 시 제브라피시 수정란이 제대로 삽입되지 않는 문제 즉 수정란의 크기가 각 개체별로 0.7~1.2 mm 정도로 차이가 있으므로 너무 큰 수정란이 삽입홀에 삽입된 경우, 약한 니들을 이용하여 인젝션할 위치를 쉽게 고정할 수 없으며 수정란이 너무 작은 경우에도 수정란이 제대로 고정이 되지 않는 문제점이 발생한다. FIG. 3 is a view showing a process of microinjection using a mold for producing agarose gel for microinjection of zebrafish, which is being commercialized. In the case of a mold for preparing microaglyceride agarose gels for microinjection of a zebrafish embryo, if the shape of the furrow is a triangle, the injection needle at the time of microinjection is inside the egg Often occurs when the egg is injected into the cytoplasm of the needle and then the egg is not separated from the needle when the needle is withdrawn. At this time, the injection needle and the injection solution should be prepared again as the injection needle breaks frequently while separating the embryo using a method of pushing with the transparent plastic cover together with the culture medium, and the microinjection volume of the injection needle volume and quantification of the volume of the sample. In order to solve such a problem, as shown in FIG. 4, a bump for manufacturing a rectangular insertion hole is formed in a microfiltration frame, and a zebrafish embryo is inserted into a protrusion for manufacturing the insertion hole A mold was developed, but a protrusion for manufacturing an insertion hole was manufactured without considering the size of the embryo, so that an insertion hole was formed in the agarose gel. After the embedding process, the zebrafish embryo was correctly inserted In other words, the size of fertilized egg differs by 0.7 ~ 1.2 mm for each individual. Therefore, when too large fertilized eggs are inserted in the insertion hole, it is not possible to easily fix the injection site using the weak needle, There is a problem that embryo is not fixed properly.

도 5는 본 고안의 바람직한 일부 실시예들에 따른 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드(100)의 구성을 도시하고 있다. 도시한 바와 같이, 종래 아가로즈 겔 삽입홀 제조를 위한 균일한 크기의 돌기를 가진 미세주입용 몰드와 달리 수정란 크기에 따른 다양한 크기의 수정란을 고정할 수 있는 다양한 폭을 가진 삽입홀 제조를 위한 돌기(105)가 형성되어 있어 효율적인 실험수행이 가능하다. 넙치 수정란의 경우, 장막(cholion)의 특성상 인젝션 후 니들이 쉽게 빠지지 않기 때문에 사각형태의 삽입홀 제조를 위한 돌기(105)가 구성된 아가로즈 플레이트(agarose plate)를 사용해야 하고 미세주입할 수정란이 고정되어 쉽게 움직이지 않아야 하지만 페트리디쉬(petridish)상의 같은 크기의 삽입홀 제조를 위한 돌기(105)를 가진 기존 제품의 경우 각 크기별로 틀(mold)을 제작하여 산란된 수정란의 크기에 맞는 삽입홀 제조를 위한 돌기(105)를 가진 아가로즈 플레이트를 사용해야한다. 그러나 본 고안의 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드(100)는 일반적으로 사용되고 있는 페트리디쉬(ID100mm)를 이용할 수 있는 크기로 수정란의 크기를 고정시키기 위한 사각의 삽입홀 제조를 위한 돌기(105)가 구성되어 있고 삽입홀 제조를 위한 돌기(105)의 폭은 다양한 크기의 넙치 수정란에 적용 가능하도록 0.5 내지 1.0 mm으로 조절하여 제조할 수 있고 높이는 0.7 내지 1.0 mm로 제조될 수 있다. 이는 도 6 참고하면 다양한 폭을 가진 삽입홀 제조를 위한 돌기(105)가 구성된 본 고안의 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드의의 구조를 쉽게 이해할 수 있다. 또한, 본 고안에서는 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드의 구성을 쉽게 이해시키기 위해 편의상 6개의 삽입홀 제조를 위한 돌기(105)의 구성을 도시하였고 폭도 0.7 내지 0.9 및 높이는 0.9로 도시하였으나 이는 연구자의 목적 및 작업 환경에 따라 적절히 조절 가능하다. 또한, 삽입홀 제조를 위한 돌기(105)의 길이도 55 mm가 실험수행을 위한 최적의 구성(도 5 참조)이나 이 또한 연구자의 목적 및 작업 환경에 따라 적절히 조절 가능하다.FIG. 5 shows a configuration of a mold 100 for producing an agarose gel for microinjection of a flounder embryo according to some preferred embodiments of the present invention. As shown in the figure, unlike a mold for microinjection having a uniform size protrusion for manufacturing an agarose gel insertion hole, protrusions for manufacturing an insertion hole having various widths capable of fixing various sizes of embryo according to the size of embryo (105) are formed. Thus, it is possible to perform experiments efficiently. In the case of the flounder embryo, since the needle does not easily fall out after injection due to the nature of the cholion, it is necessary to use an agarose plate having protrusions (105) for producing a rectangular insertion hole, In the case of conventional products having protrusions 105 for manufacturing the same size of insertion holes on petridish, it is necessary to manufacture molds for each size and to manufacture insertion holes corresponding to the size of the scattered embryos. An agarose plate having protrusions 105 should be used. However, in the present invention, the mold 100 for preparing an egg-shaped agarose gel for microinjection of a flounder embryo is provided with protrusions 105 for manufacturing a rectangular insertion hole for fixing the size of the embryo to a size that can be used for petridish (ID100 mm) And the width of the protrusion 105 for manufacturing an insertion hole can be adjusted to 0.5 to 1.0 mm so as to be applicable to flounder embryos of various sizes and can be manufactured to have a height of 0.7 to 1.0 mm. 6, it is easy to understand the structure of the mold for preparing the agarose gel for microinjection of the flounder embryo of the present invention, in which the protrusions 105 for producing insertion holes having various widths are formed. In the present invention, for the sake of easy understanding of the structure of the mold for preparing the agarose gel for microinjection of the flounder embryos, the configuration of the protrusions 105 for the production of six insertion holes is shown for convenience, and the width is 0.7 to 0.9 and the height is 0.9. And can be appropriately adjusted according to the purpose and work environment of the researcher. In addition, the length of the protrusion 105 for manufacturing the insertion hole is also 55 mm, which can be appropriately adjusted according to the optimum configuration (see FIG. 5) for experiment execution and also according to the researcher's purpose and work environment.

아울러, 도 7에 도시한 바와 같이, 연구의 효율성을 위해서 미세주입용 몰드의 일면은 사각형의 삽입홀 제조를 위한 돌기(105)로 제조하고 타면은 아가로즈 겔(agarose gel) 제작 시 취급의 용이성을 위해 손잡이 등을 구성할 수도 있다. In addition, as shown in FIG. 7, for the sake of research efficiency, one surface of the mold for microinjection is made of protrusions 105 for the production of a rectangular insertion hole, and the ease of handling in the manufacture of agarose gel A knob or the like may be constructed for the purpose.

본 고안의 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드(100)를 이용하면 다양한 크기를 가진 넙치 수정란을 이용한 미세주입 시 수정란의 크기에 맞게 미세주입 위치를 쉽게 고정할 수 있으므로 신속하고 효율적인 미세주입이 가능하다. Using the mold (100) for preparing the flounder embryo for microinjection of flounder embryos, it is possible to easily fix the microinjection position according to the size of the embryo during microinjection using various sizes of flounder embryos, so that rapid and efficient microinjection It is possible.

본 고안은 도면에 도시된 실시예를 참고로 설명되었으나 이는 예시적인 것에 불과하며, 당해 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 이로부터 다양한 변형 및 균등한 다른 실시예가 가능하다는 점을 이해할 것이다. 따라서 본 고안의 진정한 기술적 보호 범위는 첨부된 실용신안등록청구범위의 기술적 사상에 의하여 정해져야 할 것이다.Although the present invention has been described with reference to the embodiments shown in the drawings, it is to be understood that various modifications and equivalents may be made thereto by those skilled in the art. Therefore, the true scope of technical protection of the present invention should be determined by the technical idea of the appended utility model registration claim scope.

100: 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드
105: 삽입홀 제조를 위한 돌기
100: mold for producing agarose gel for microinjection of flounder embryos
105: projection for manufacturing an insertion hole

Claims (8)

투명 소재의 사각형 플레이트; 및
상기 플레이트 상면에 형성된 넙치 수정란 고정용 홀 제조를 위한 길이방향의 둘 이상의 복수의 돌기를 포함하는, 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드에 있어서,
상기 복수의 돌기는 좌측에서 우측으로 갈수록 또는 우측에서 좌측으로 갈수록 그 폭이 일정한 비율로 증가하거나 감소하는, 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드.
Square plate of transparent material; And
And two or more protrusions in the length direction for producing a hole for fixing a flounder embryo formed on an upper surface of the plate, wherein the mold for preparing an egg-
Wherein the plurality of protrusions are increased or decreased in width from a left side to a right side or from a right side to a left side at a constant rate.
제1항에 있어서,
상기 복수의 돌기는 인접한 2 내지 3개의 돌기를 세트로 하여 동일한 폭을 갖고 다음 세트로 갈수록 일정한 비율로 폭이 증가하거나 감소하는, 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드.
The method according to claim 1,
Wherein the plurality of protrusions have the same width with two or three adjacent protrusions as a set, and the width is increased or decreased at a constant rate toward the next set, the mold for preparing the olive floss gel for microinjection.
제1항에 있어서,
상기 돌기의 폭은 0.5 내지 1.2 mm인, 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드.
The method according to claim 1,
Wherein the width of the protrusions is 0.5 to 1.2 mm, wherein the mold for preparing the agarose gel for microinjection of the flounder embryo.
제1항에 있어서,
상기 돌기의 높이는 0.7 내지 1.0 mm인, 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드.
The method according to claim 1,
The height of the protrusions is 0.7 to 1.0 mm. The mold for preparing the agarose gel for microinjection of the flounder embryo.
제1항에 있어서,
상기 플레이트의 소재는 유리(glass) 또는 수지제(plastic)인, 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드.
The method according to claim 1,
Wherein the material of the plate is glass or plastic. The mold for producing an agarose gel for microinjection of a flounder embryo.
제5항에 있어서,
상기 수지제는 우레탄(urethane), 폴리염화비닐(polyvinyl chloride), 폴리에틸렌(polyethylene), 폴리스티렌(polystyrene), 폴리프로필렌(polypropylene),아크릴(acrylic), 나일론(nylon) 또는 메타크릴 수지(pmma)인, 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드.
6. The method of claim 5,
The resin may be selected from the group consisting of urethane, polyvinyl chloride, polyethylene, polystyrene, polypropylene, acrylic, nylon or methacrylic resin (pmma) , Mold for preparing agarose gel for microinjection of flounder embryo.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 일정한 비율은 돌기당 0.05 내지 0.2 mm인, 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드.
7. The method according to any one of claims 1 to 6,
Wherein the constant rate is 0.05 to 0.2 mm per lobe, wherein the mold for preparing the agarose gel for microinjection of the flounder embryo.
녹은 아가로스 용액을 주형에 부어 아가로스 젤을 형성하는 단계; 및
상기 젤이 완전히 굳기 전에 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드를 상기 아가로스 젤 상면에 올려놓는 단계; 및
상가 아가로스 젤이 완전히 굳은 후 상기 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조용 몰드를 탈착시키는 단계를 포함하는 넙치 수정란 미세주입용 아가로스 젤 제조방법.

Pouring the molten agarose solution into a mold to form an agarose gel; And
Placing the mold for preparing agarose gel for microinjection of the flounder embryo as set forth in any one of claims 1 to 6 on the top surface of the agarose gel before the gel is completely hardened; And
The method for preparing agarose gel for microinjection of olive flounder embryo, comprising the step of desalting the mold for preparing the agarose gel for microinjection of the flounder embryo after the gelatin agarose gel is completely hardened.

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