KR20170140001A - 미세조류에서 지질을 추출하는 방법 - Google Patents

미세조류에서 지질을 추출하는 방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 미세조류에서 지질을 추출하는 방법에 관한 것으로, 고온 및 고압 조건에서 미세조류의 세포막을 약화시킨 후, 에탄올 및 에틸아세테이트의 혼합 용매를 사용하여 미세조류 내 지질을 효율적으로 추출하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 독성이 높은 클로로포름을 대량으로 사용하지 않고, 건조단계를 포함하지 않아 경제적이다. 또한, 본 발명의 방법은 높은 수율로 지질을 추출할 수 있다.

Description

미세조류에서 지질을 추출하는 방법{METHOD FOR EXTRACTING LIPID FROM MICROALGAE}
본 발명은 미세조류에서 지질을 추출하는 방법에 관한 것으로, 고온 및 고압 조건에서 미세조류의 세포막을 약화시킨 후, 유기용매를 사용하여 미세조류 내 지질을 효율적으로 추출하는 방법에 관한 것이다.
원유로부터 얻어지는 여러 연료 중에서, 디젤유는 연비가 좋고, 경제적이며, 이산화탄소 발생량이 적으나, 연소 후 대기오염 물질의 발생량이 많다. 따라서, 이와 같은 문제를 해결하기 위해 디젤유와 물성이 유사하며 경제적이고, 대기오염을 방지할 수 있는 대체 연료로 바이오디젤에 관한 연구가 이루어지고 있다. 한편, 바이오디젤은 유채유, 대두유, 해바라기유, 팜유와 같은 식물성 오일의 주성분인 트리글리세리드와 알코올의 에스테르 교환반응으로 제조된다.
그러나, 바이오디젤의 사용량이 급증하면서 식물성 오일의 가격이 폭등하고, 토지자원의 파괴가 우려되면서 비식용 원료를 이용하여 바이오디젤을 제조하는 방법의 개발이 요구되고 있다.
대표적인 비식용 원료인 미세조류(microalgae)는 물, 이산화탄소 및 햇빛을 이용하여 광합성으로 성장하는 단세포성 생물로서, 식물 플랑크톤이라고도 불린다. 미세조류는 높은 효율로 이산화탄소를 고정하고, 성장 속도가 빠르다. 또한, 상기 미세조류(58,700~97,790 ℓ/ha)는 단위 면적당 오일 생산성이 대두(446~635 ℓ/ha) 또는 오일팜(5,336~5,950 ℓ/ha)에 비해 높아 바이오디젤의 생산을 위한 비식용 원료로 주목받고 있다.
미세조류는 수분 함량이 매우 높아, 수확된 미세조류의 건조 중량은 약 1% 미만이다. 그러나, 용매를 이용한 지질 추출방법에 있어서, 미세조류의 높은 수분 함량은 용매 사용량을 증가시킨다. 따라서, 미세조류로부터 지질을 추출하기 위해서는 수분을 제거하는 단계가 필요하며, 이 과정은 바이오디젤을 생산하는데 있어서 경제성을 낮춘다.
이와 관련하여, 대한민국 등록특허 제10-1502355호는 초임계 이산화탄소 추출법을 이용하여 높은 지질 및 지방산메틸에스테르 수율을 나타내는 지질 추출방법에 관해 개시하고 있다.
한편, 본 발명자들은 미세조류로부터 효율적으로 지질을 추출하는 공정을 연구하던 중, 고온 및 고압으로 처리한 미세조류에서 유기용매를 이용하여 효과적으로 지질을 추출함으로써, 본 발명을 완성하였다.
대한민국 등록특허 제10-1502355호
본 발명의 목적은 미세조류에서 효율적으로 지질을 추출하는 방법을 제공하는 것이다.
또한, 본 발명의 다른 목적은 미세조류에서 효율적으로 지질을 추출하는 시스템을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 미세조류 함유용액을 고압하에서 가열하는 단계; 및 가열된 미세조류 함유용액에 에틸아세테이트 및 알코올의 혼합 용매를 첨가하여 지질을 추출하는 단계를 포함하는, 미세조류에서 지질을 추출하는 방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 미세조류 함유용액을 고압하에서 가열하는 제1공정; 가열된 미세조류 함유용액에 에틸아세테이트 및 알코올의 혼합 용매를 첨가하여 용매층을 수득하는 제2공정; 및 용매층에서 지질을 수득하는 제3공정을 포함하는, 미세조류에서 지질을 추출하는 시스템을 제공한다.
나아가, 본 발명은 미세조류 함유용액을 고압하에서 가열하는 제1공정; 가열된 미세조류 함유용액을 고액분리하여 용매층 및 펠렛(pellet)을 분리하는 제2공정; 용매층에 에틸아세테이트를 첨가하여 지질을 추출하는 제3공정; 펠렛에 에틸아세테이트 및 알코올의 혼합 용매를 첨가하여 지질을 추출하는 제4공정; 및 제3공정 및 제4공정에서 추출된 지질을 수득하는 제5공정을 포함하는, 미세조류에서 지질을 추출하는 시스템을 제공한다.
본 발명의 미세조류에서 지질을 추출하는 방법은 독성이 높은 클로로포름을 대량으로 사용하지 않고, 건조단계를 포함하지 않아 경제적이다. 또한, 본 발명의 방법은 고온 및 고압의 조건으로 미세조류의 세포벽을 약하게 한 뒤, 유기용매를 이용하여 지질을 추출함으로써, 높은 수율로 지질을 추출할 수 있다.
도 1은 본 발명에 따라 미세조류에서 지질을 추출하는 공정을 나타내는 모식도이다.
도 2는 본 발명에 따라 고액분리한 미세조류에서 지질을 추출하는 공정을 나타내는 모식도이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명은 미세조류 함유용액을 고압하에서 가열하는 단계; 및 가열된 미세조류 함유용액에 에틸아세테이트 및 알코올의 혼합 용매를 첨가하여 지질을 추출하는 단계를 포함하는, 미세조류에서 지질을 추출하는 방법을 제공한다.
본 명세서에서 사용된 용어 "미세조류(microalgae)"는 광합성을 하는 단세포 식물로, 그 크기가 50 ㎛이하인 조류를 의미한다. 상기 배양된 미세조류는 배양액을 포함할 수 있고, 수확된 미세조류는 미세조류의 서식지에 따라 해수 또는 담수를 함께 포함할 수 있다. 상기 미세조류는 배양하거나 수확한 것일 수 있다. 이때, 배양 또는 수확한 미세조류 함유용액을 농축 또는 희석함으로써 미세조류의 건조 중량을 20 중량%로 조절할 수 있다. 상기 농축 또는 희석은 배양 또는 수확한 미세조류의 건조 중량에 따라 통상의 당업자가 적절히 수행할 수 있다.
상기 미세조류는 해양 미세조류 또는 담수 미세조류일 수 있다. 상기 해양 미세조류는 니츠시아 종(Nitzsia sp.), 스피롤리나 종(Spirulina sp.), 두나리에라 종(Dunaliela sp.), 난노클로롭시스 종(Nanochloropsis sp.) 및 이의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나일 수 있다. 한편, 상기 담수 미세조류는 클로렐라 종(Chlorella sp.), 세네데스무스 종(Scenedesmus sp.) 및 이의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나일 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서, 상기 미세조류는 난노클로롭시스 오세아니아(Nannochloropsis oceania)일 수 있다.
상기 미세조류에서 지질을 추출하는 방법은, 수분 함량이 80 중량% 이상인 미세조류 함유용액에서 지질을 추출할 수 있다. 상기 수분 함량은 80 내지 99 중량%, 85 내지 97 중량% 또는 90 내지 95 중량%일 수 있다. 이때, 미세조류 함유용액 중 미세조류의 건조 중량은 20 중량% 이하일 수 있다.
상기 고압은 5 내지 50 바(bar)일 수 있다. 또한, 상기 가열은 160 내지 260℃, 180 내지 260℃, 200 내지 260℃, 220 내지 260℃ 또는 240 내지 260℃의 온도로 수행될 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서, 상기 가열은 약 160, 180, 200, 220, 240 또는 260℃의 온도로 수행될 수 있다. 아울러, 상기 가열은 10초 내지 40분, 5분 내지 20분, 30초 내지 10분 또는 10초 내지 1분 동안 수행될 수 있다. 상기 가열 시간은 반응 온도가 올라갈수록 줄어들 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서, 상기 가열은 배치 반응에서 30분 동안 수행될 수 있다. 미세조류는 종에 따라 다른 조성 및 구조의 세포벽을 갖기 때문에 상기 가열 온도 및 시간은 미세조류의 종류에 따라 달라질 수 있다.
본 발명에 따른 방법은 상기 가열된 미세조류 함유용액에 에틸아세테이트 및 알코올의 혼합 용매를 첨가하여 지질을 추출할 수 있다. 상기 혼합 용매는 에틸아세테이트 및 알코올이 부피비로 1:1 내지 5:1, 1.5:1 내지 4:1, 1.8:1 내지 3:1로 혼합된 용매일 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서, 상기 혼합 용매는 에틸아세테이트 및 알코올이 부피비로 2:1로 혼합된 용매일 수 있다. 이때, 알코올은 C1 -4의 저급 알코올일 수 있고, 상기 저급 알코올은 에탄올, 메탄올 및 이의 혼합으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나일 수 있다.
상기 용매를 사용하는 본 발명의 지질 추출 방법은 중성지질 및 극성지질을 모두 추출할 수 있다. 상기 중성지질은 모노아실글리세롤, 다이아실글리세롤, 트리아실글리세롤 또는 유리 지방산을 포함할 수 있다. 한편, 상기 극성지질은 인지질 또는 당지질을 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 방법은 가열 후 고액분리 단계를 더 포함할 수 있다. 상기 고액분리 단계는 원심분리, 디캔팅(decanting), 여과 및 이의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나를 통해 수행될 수 있다. 고액분리를 통해 수득된 상층액 및 펠렛 각각에 에틸아세테이트, 또는 에틸아세테이트 및 알코올의 혼합 용매를 첨가하여 지질을 추출할 수 있다. 상기 유기용매는 에틸아세테이트 및 알코올의 혼합 용매일 수 있다.
또한, 본 발명은 미세조류 함유용액을 고압하에서 가열하는 제1공정; 가열된 미세조류 함유용액에 에틸아세테이트 및 알코올의 혼합 용매를 첨가하여 용매층을 수득하는 제2공정; 및 용매층에서 지질을 추출하는 제3공정을 포함하는, 미세조류에서 지질을 추출하는 시스템을 제공한다.
제1공정은 미세조류 함유용액을 고압하에서 가열하는 공정이다. 상기 제1공정의 미세조류 함유용액은 미세조류를 배양하거나 수확한 뒤, 용액에 포함되는 수분의 함량이 80 중량% 이상이 되도록 농축 또는 여과된 것일 수 있다. 상기 미세조류는 열교환기로 유입되면서 5 내지 50 바(bar)의 고압하에서 160 내지 260℃의 온도로 가열될 수 있다.
제2공정은 제1공정에서 가열된 미세조류 함유용액에 에틸아세테이트 및 알코올의 혼합 용매를 첨가하여 용매층을 수득하는 공정이다. 이때, 상기 혼합 용매는 에틸아세테이트 및 알코올이 부피비로 1:1 내지 5:1로 혼합된 것일 수 있다. 알코올 및 에틸아세테이트의 혼합 용매가 첨가된 미세조류 함유용액은 용매층 및 수용액층(물과 침전물)으로 분리될 수 있다. 상기 용매층에 추출하고자 하는 지질이 포함될 수 있고, 수용액층에 미세조류의 잔해인 아미노산, 단백질, 당, 탄수화물, 핵산 등의 물질이 포함될 수 있다.
제3공정은 상기 수득된 용매층으로부터 지질을 수득하는 공정이다. 예를 들어, 상기 용매층을 질소로 퍼지(purge)하여 용매를 제거함으로써 지질을 수득할 수 있다. 상기 공정을 통해 지질을 수득한 후, 에틸아세테이트 및 알코올의 혼합 용매는 분리되어 제2공정에서 다시 사용될 수 있다.
제2공정에서 분리된 침전물층을 디캔팅, 여과, 원심분리 등을 이용하여 고액분리한 뒤, 에틸아세테이트 및 에탄올의 일부를 상층액으로부터 회수할 수 있다. 한편, 침전물층에 일부 녹아있는 에틸아세테이트 및 에탄올의 혼합용매는 펠렛을 제거한 뒤, 증류를 통해 분리할 수 있다. 상기 분리된 혼합 용매는 제2공정에서 다시 사용될 수 있다.
아울러, 본 발명은 미세조류 함유용액을 고압하에서 가열하는 제1공정; 가열된 미세조류 함유용액을 고액분리하여 용매층 및 펠렛(pellet)을 분리하는 제2공정; 용매층에 에틸아세테이트를 첨가하여 지질을 추출하는 제3공정; 펠렛에 에틸아세테이트 및 알코올의 혼합 용매를 첨가하여 지질을 추출하는 제4공정; 및 제3공정 및 제4공정에서 추출된 지질을 수득하는 제5공정을 포함하는, 미세조류에서 지질을 추출하는 시스템을 제공한다.
제1공정은 미세조류 함유용액을 고압하에서 가열하는 공정이다. 상기 제1공정의 미세조류 함유용액은 미세조류를 배양하거나 수확한 뒤, 용액에 포함되는 수분의 함량이 80 중량%이 이상 되도록 농축 또는 여과된 것일 수 있다. 상기 미세조류는 열교환기로 유입되면서 5 내지 50 바(bar)의 고압하에서 160 내지 260℃의 온도로 가열될 수 있다.
제2공정은 가열된 미세조류 함유용액을 고액분리하여 용매층 및 펠렛(pellet)을 분리하는 공정이다. 상기 고액분리는 디캔팅, 여과, 원심분리 및 이의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 방법을 이용하여 수행될 수 있다. 이때, 용매층에는 제1공정에서 미세조류 밖으로 유출된 소량의 지질을 포함할 수 있다.
제3공정은 상기 분리된 용매층에 에틸아세테이트를 첨가하여 미세조류 밖으로 유출된 소량의 지질을 추출하는 공정이다. 상기 에틸아세테이트는 지질을 추출한 후 분리되어 다시 제3공정에서 사용될 수 있다.
제4공정은 상기 분리된 펠렛에 에틸아세테이트 및 알코올의 혼합 용매를 첨가하여 지질을 추출하는 공정이다. 이때, 상기 혼합 용매는 에틸아세테이트 및 에탄올이 부피비로 1:1 내지 5:1로 혼합된 것일 수 있다. 상기 공정을 통해 지질을 추출한 후, 에틸아세테이트 및 에탄올의 혼합 용매는 분리되어 제4공정에서 다시 사용될 수 있다.
제5공정은 제3공정 및 제4공정에서 추출된 지질을 수득하는 공정이다. 예를 들어, 제3공정의 에틸아세테이트 추출액 및 제4공정의 에틸아세테이트 및 알코올의 혼합 용매 추출액을 각각 질소로 퍼지하여 용매를 제거함으로써 지질을 수득할 수 있다.
이하, 본 발명을 하기 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명이 이들에 의해 제한되는 것은 아니다.
비교예 1. 열수 전처리를 하지 않은 경우의 지질 추출 함량 확인
Bligh & Dyer 방법을 사용하여, 미세조류인 난노클로롭시스 오세아니아(Nannochloropsis oceania)로부터 지질을 추출하였다.
먼저, 수분 함량이 93.3%(건조 중량 6.7%)인 난노클로롭시스 오세아니아 5 ㎖에 50 ㎖의 이소프로판올을 첨가하고 80℃에서 5분 동안 가열하였다. 여기에 25 ㎖의 클로로포름을 첨가하여 4℃에서 하루 동안 반응시켰다. 상기 반응물을 25℃, 3,000 rpm의 조건으로 10분 동안 원심분리하여 1차 추출액을 수득하였고, 여기에 25 ㎖의 클로로포름을 추가로 첨가하여 2차 추출을 하였다. 상기 2차 추출액에 50 ㎖의 0.9 %(w/v) KCl 용액을 첨가하여 층을 분리한 뒤, 분리된 클로로포름 층을 상기 1차 추출액과 혼합하였다. 상기 혼합액을 질소로 퍼지(purge)하여 용매를 제거하고, 전체 지질을 수득하였다. 수득한 지질은 황산 및 메탄올을 이용하여 전이에스테르화(transesterification)하고, 가스크로마토그래피(GC) 방법으로 지방산의 함량을 분석하였다.
그 결과, 355 ㎎의 미세조류 건중량에서 26.2 ㎎의 지방산이 추출되었다(7.8%).
비교예 2. 열수 전처리를 한 경우의 지질 추출 함량 확인
수분 함량이 93.3%(건조 중량 6.7%)인 난노클로롭시스 오세아니아 100 ㎖를 160℃의 온도로, 6 바의 조건하에서 30분 동안 열수 전처리한 것을 제외하고는, 비교예 1과 동일한 조건 및 방법으로 지질을 추출하고 추출된 지방산의 함량을 분석하였다.
그 결과, 335 ㎎의 미세조류 건중량에서 26.1 ㎎의 지방산이 추출되었다(7.8%).
실시예 1. 열수 전처리 온도에 따른 지질 추출 함량 확인
난노클로롭시스 오세아니아로부터 지질을 추출하는 과정에 열수 전처리 과정을 추가하고, 열수 전처리 온도에 따른 지질 추출 함량을 비교하였다.
먼저, 수분 함량이 93.3%(건조 중량 6.7%)인 난노클로롭시스 오세아니아 100 ㎖를 160℃/6 바, 180℃/10 바, 200℃/16 바, 220℃/23 바, 240℃/34 바 또는 250℃/40 바의 조건하에서 30분 동안 열수 전처리한 것을 제외하고는, 비교예 1과 동일한 조건 및 방법으로 지질을 추출하고 추출된 지방산의 함량을 분석하였다. 산출된 지방산의 함량은, 비교예 1에서 추출된 지방산 함량을 기준으로 백분율로 계산하여 하기 표 1에 나타내었다.
비교예 1 160℃ 180℃ 200℃ 220℃ 240℃
지방산
함량(%)
100 114.5 86.3 69.1 28.2 14.9
비고 차 생성 차 생성 차 생성 차 생성
그 결과, 160℃로 열수 전처리한 경우가 비교예 1과 비교하여 추출된 지방산 함량이 14.5% 증가하였다. 한편, 180℃ 이상으로 열수 전처리한 경우에는 지방산 함량이 감소하였다. 상기 결과는 발생한 고형분의 차(char)에 지질이 결합하였기 때문인 것으로 보였다.
실시예 2. 에틸아세테이트 및 에탄올의 혼합 용매로 추출된 지질의 함량 확인
먼저, 비교예 2와 동일한 조건 및 방법으로 열수 전처리한 5 ㎖의 나노클로롭시스 오세아니아에 에틸아세테이트 및 에탄올을 부피비로 2:1이 되도록 혼합한 혼합 용매를 5 ㎖ 첨가하였다. 이를 85℃에서 10분 동안 반응시킨 뒤, 25℃, 3,000 rpm의 조건으로 10분 동안 원심분리하여 상층액을 수득하였다. 수득한 상층액을 질소로 퍼지(purge)하여 용매를 제거하고, 전체 지질을 추출하였다. 추출한 지질을 황산 및 메탄올을 이용하여 전이에스테르화하고, GC 방법으로 지방산의 함량을 분석하였다. 산출된 지방산의 함량은, 비교예 2에서 추출된 지방산 함량을 기준으로 백분율로 계산하여 하기 표 2에 나타내었다.
열수 전처리 여부 지방산 함량(%)
비교예 2 100
실시예 2 107.3
상기 표 2에 나타난 바와 같이 열수 전처리를 한 뒤, 에틸아세테이트 및 에탄올의 혼합 용매로 추출한 경우가, 비교예 2와 비교하여 추출된 지방산 함량이 7.3% 증가하였다.
실시예 3. 고액분리 후, 유기용매의 종류에 따라 추출된 지질의 함량 확인
비교예 2와 동일한 조건 및 방법으로 열수 전처리한 난노클로롭시스 오세아니아를 고액분리하여 펠렛(pellet) 및 상층액을 각각 수득하여, 이들 각각으로부터 지질을 추출하였다.
구체적으로, 펠렛에 2 ㎖의 에틸아세테이트, 에틸아세테이트 및 에탄올의 혼합 용매(부피비 2:1), 헥산, 부틸아세테이트, 부틸아세테이트 및 에탄올의 혼합 용매(부피비 2:1)를 첨가하고, 85℃에서 10분 동안 반응시켰다. 이를 2회 반복하여, 총 4 ㎖의 펠렛 반응물을 수득하였다. 한편, 상층액에 3 ㎖의 헥산, 클로로포름 또는 에틸아세테이트를 각각 첨가하고 상온에서 5분 동안 반응시켜 상층액 반응물을 수득하였다. 수득한 펠렛 또는 상층액의 반응물을 이용하여 이후의 과정은 상기 실시예 2와 동일한 방법 및 조건으로 수행하였다. 또한, 펠렛을 사용하여 Bligh & Dyer 방법으로 지질을 추출하여 추출된 지질의 함량을 비교하였다. 산출된 지방산의 함량은, 비교예 2에서 추출된 지방산 함량을 기준으로 백분율로 계산하여 하기 표 3에 나타내었다.
구분 추출 용매 지방산 함량(%)
비교예 2 Bligh & Dyer 100
펠렛 Bligh & Dyer 77.5
에틸아세테이트 41.4
에틸아세테이트:에탄올 83.2
핵산 32.1
부틸아세테이트 62.3
부틸아세테이트:에탄올 73.5
상층액 핵산 2.7
클로로포름 7.7
에틸아세테이트 17.2
상기 표 3에 나타난 바와 같이, 에틸아세테이트 및 에탄올의 혼합 용매를 사용하여 펠렛에서 추출된 지질이 비교예 2를 기준으로 하였을 때 83.2%의 지방산을 포함하였다. 한편, 상층액에서 지질을 추출하는 경우에는 에틸아세테이트를 용매로 사용하였을 때 가장 많은 양인 17.2%의 지방산이 추출되었다.

Claims (15)

  1. 미세조류 함유용액을 고압하에서 가열하는 단계; 및
    가열된 미세조류 함유용액에 에틸아세테이트 및 알코올의 혼합 용매를 첨가하여 지질을 추출하는 단계를 포함하는, 미세조류에서 지질을 추출하는 방법.
  2. 제1항에 있어서, 상기 미세조류 함유용액의 수분함량이 80% 내지 99%인, 미세조류에서 지질을 추출하는 방법.
  3. 제1항에 있어서, 상기 미세조류가 해양 미세조류 또는 담수 미세조류인, 미세조류에서 지질을 추출하는 방법.
  4. 제3항에 있어서, 상기 미세조류가 난노클로롭시스 오세아니아(Nannochloropsis oceania)인, 미세조류에서 지질을 추출하는 방법.
  5. 제1항에 있어서, 상기 고압이 5 내지 50 바(bar)인, 미세조류에서 지질을 추출하는 방법.
  6. 제1항에 있어서, 상기 가열이 160 내지 260℃의 온도로 수행되는, 미세조류에서 지질을 추출하는 방법.
  7. 제1항에 있어서, 상기 혼합 용매가 에틸아세테이트 및 알코올이 부피비로 1:1 내지 5:1로 혼합된 것인, 미세조류에서 지질을 추출하는 방법.
  8. 제7항에 있어서, 상기 혼합 용매가 에틸아세테이트 및 알코올이 부피비로 2:1로 혼합된 것인, 미세조류에서 지질을 추출하는 방법.
  9. 제1항에 있어서, 상기 알코올이 C1 -4의 저급 알코올인, 미세조류에서 지질을 추출하는 방법.
  10. 제1항에 있어서, 상기 추출된 지질이 중성지질 및 극성지질인, 미세조류에서 지질을 추출하는 방법.
  11. 미세조류 함유용액을 고압하에서 가열하는 제1공정;
    가열된 미세조류 함유용액에 에틸아세테이트 및 알코올의 혼합 용매를 첨가하여 용매층을 수득하는 제2공정; 및
    용매층에서 지질을 수득하는 제3공정을 포함하는, 미세조류에서 지질을 추출하는 시스템.
  12. 미세조류 함유용액을 고압하에서 가열하는 제1공정;
    가열된 미세조류 함유용액을 고액분리하여 용매층 및 펠렛(pellet)을 분리하는 제2공정;
    용매층에 에틸아세테이트를 첨가하여 지질을 추출하는 제3공정;
    펠렛에 에틸아세테이트 및 알코올의 혼합 용매를 첨가하여 지질을 추출하는 제4공정; 및
    제3공정 및 제4공정에서 추출된 지질을 수득하는 제5공정을 포함하는, 미세조류에서 지질을 추출하는 시스템.
  13. 제11항 또는 제12항에서, 상기 고압이 5 내지 50 바(bar)인, 미세조류에서 지질을 추출하는 시스템.
  14. 제11항 또는 제12항에서, 상기 가열이 160 내지 260℃의 온도로 수행되는, 미세조류에서 지질을 추출하는 시스템.
  15. 제11항 또는 제12항에서, 상기 혼합 용매가 에틸아세테이트 및 알코올이 부피비로 1:1 내지 5:1로 혼합된 것인, 미세조류에서 지질을 추출하는 시스템.
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