KR20170020423A - 항-hsv 항체의 국소 적용 - Google Patents

Abstract

본원에는, 구순 단순포진, 성기 단순포진, 만성 또는 파종성 피부 단순포진 감염, 검상포진 및 포진성 습진으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 대상체에서 점막 또는 상피 조직의 급성 감염의 치료에 사용하기 위한 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편으로서, 상기 항체가 국소 투여되는, 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편, 뿐만 아니라 유효량의 상기 항체 또는 이의 항원-결합 단편 및 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물이 기재되어 있다.

Description

항-HSV 항체의 국소 적용 {TOPICAL APPLICATION FOR AN ANTI-HSV ANTIBODY}

본 발명은, 구순 단순포진, 성기 단순포진, 만성 또는 파종성 피부 단순포진 감염, 검상포진 및 포진성 습진으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 대상체에서 점막 또는 상피 조직의 급성 감염의 치료에 사용하기 위한 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편으로서, 상기 항체가 국소 투여되는, 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편, 뿐만 아니라 유효량의 상기 항체 또는 이의 항원-결합 단편 및 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.

단순포진 바이러스(HSV)는 헤르페스비리다에 계열의 밀접하게 관련된 2개 구성원, 단순포진 바이러스 유형 1(HSV-1) 및 단순포진 바이러스 유형 2(HSV-2)를 지칭한다. HSV-1 및 HSV-2는 세계적으로 가장 일반적인 바이러스 감염의 하나이다. HSV-1 감염은 종종 아임상 감염으로서 유아기에서 획득되고, 한편 서브세트는 심각한 질환을 수반한다. HSV-2는 통상 성 행위에 의해 획득되고 주로 성기 영역에서 병변을 유발한다. 헤르페스 바이러스에 의한 감염은 감염 부위에 기반하여 몇가지 상이한 질환 중의 하나로 분류된다. 가시적 증상이 구어체로 구강 발진 또는 발열 수포로 불리우는 구강 헤르페스(구순 단순포진)은 얼굴 또는 입의 감염이다. 구강 헤르페스는 감염의 가장 일반적 형태이다. 성기 헤르페스(성기 단순포진)은 헤르페스의 제2의 가장 일반적 형태이다. 포진성 표저, 검상포진, 안구 포진(단순포진 코레아에 또는 단순포진 각막염), 뇌 헤르페스 감염 뇌염, 몰라렛 수막염, 신생아 헤르페스, 및 가능하게는 벨 마비 등의 기타 질환은 모두 단순포진 바이러스에 의해 유발된다.

일차 감염 후, HSV는 감염된 상피 세포부터 감각 뉴런의 액손까지 확산하여 일차 감염 부위를 자극하고, 이어서, HSV가 삶을 위해 잠재적 저장기를 확립하는 경우, 각각의 후근 신경절로 역행성 수송을 수행한다. 뉴런의 HSV 감염은 가역적 상태로 존재하고, 바이러스 재활성화(발생)가 때때로 발생할 수 있다. 바이러스의 재활성화는, 뉴런에 작용하거나 감염된 신경절에 의해 신경지배되는 말초 부위에서 또는 전신적으로 작용하는, 광범위한 스트레스 자극(예: 면역결핍, 트라우마, 발열, 생리, UV 광 및 성교)에 의해 유발될 수 있다. 간헐적 HSV 재활성화는, 잠복 감염된 뉴런으로부터 감염성 HSV의 생산을 가져 온다. 재활성화되면, 바이러스는 뉴런에 의해 상피에서 신경 말단으로 다시 수송된다.

HSV 감염의 병리는 바이러스의 직접 세포변성 작용에 의해 주로 유발되어, 감염된 부위의 세포 용해 및 국소 괴사를 가져 온다. 단순포진은 감염된 개체의 병변 또는 체액과 직접 접촉함으로써 가장 용이하게 전달된다. 경구 헤르페스는, 환자가 가시적 염증 또는 궤양을 나타내는 경우에 용이하게 진단된다. 무증후성 배설의 기간 동안, 피부와 피부와의 접촉을 통해 전달이 또한 발생할 수 있다. 성기 헤르페스로 감염된 대부분의 개체는 무증후성이지만, 중대한 임상 증상은 특히 근본적 면역 붕괴 상태를 갖는 모집단에서 발생할 수 있다. HSV-2는 이중 감염된 개체에서 HIV 전달 뿐만 아니라 HIV 획득 위험을 2 내지 3배 증가시킨다. 또한, 성기 헤르페스는 주산기로 전달될 수 있고, 생명을 위협하는 신생아 HSV 감염을 유발한다. 장벽 보호 방법은 헤르페스의 전달을 방지하는 가장 신뢰성 있는 방법이지만, 이들은 위험을 제거하는 것이 아니라 단지 감소시킬 뿐이다.

헤르페스의 치료법은 여전히 개발되어 있지 않다. 감염되면, 바이러스는 일생 동안 체내에 잔류한다. 재발 감염(발생)이 때때로 발생할 수 있다. 그러나, 수년 후, 발생은 덜 심각하고 보다 더 산발적으로 되며, 이들이 여전히 다른 사람들에게 전염될 수 있을지라도, 일부 사람들은 영구적으로 무증후성으로 되어 더이상 발생을 경험하지 않을 것이다. 항바이러스제에 의한 치료는 바이러스 배출을 감소시키고 증후성 에피소드의 중증도를 경감시킬 수 있다.

구순 단순포진(또한 구강 발진, 구순 단순포진, 재발 구순포진 또는 구내염 포진)은 입에서 발생하는 단순포진의 유형, 즉 단순포진 바이러스(HSV)에 의해 유발된 감염이다. 발생은 전형적으로 구강 발진 또는 발열 수포로서 공지된 입 위에 또는 주변에 작은 수포 또는 궤양을 유발한다. 궤양은 전형적으로 2 내지 3주 내에 치유되지만, 헤르페스 바이러스는 안면 신경에서 휴면 상태로 잔류하고, 구안면 감염 후, 주기적으로 재활성화(증후성 사람에서)되어 본래 감염 부위에서 입 또는 얼굴의 동일한 영역에서 궤양을 생성한다. 구순 포진은 희귀 에피소드로부터 1년당 12회 이상의 재발까지 변화하는 빈도를 갖는다. 이 상태의 사람은 통상 매년 1 내지 3회 공격을 받는다. 발생 빈도 및 중증도는 일반적으로 시간에 걸쳐 감소한다.

성기 단순포진(또는 성기 헤르페스)은 단순포진 바이러스에 의해 유발된 성기 감염이다. 1998년 조사는 이것이 다수의 증례에 의해 가장 일반적 성 전달된 감염이었음을 나타냈다. 헤르페스를 포함하는 대부분의 개체는 이들이 감염되었음을 알지 못하고, 다수는 구강 발진과 유사한 수포를 수반하는 발생을 겪지 않을 것이다. 헤르페스의 치유는 없지만, 시간 경과와 함께 증상은 점차 온화해지고, 발생은 점차 감소하고 있다. 언급한 바와 같이, HSV는 2가지 상이한 카테고리, HSV-1 및 HSV-2로 분류되어 있다. 성기 헤르페스는 주로 HSV-2에 의해 주로 사전에 유발되지만, 성기 HSV-1 감염은 증가하고 있으며 현재 최대 80%의 감염을 유발한다. 증후성일 경우, 일차 HSV-1 또는 HSV-2 성기 감염의 전형적 증상은, 구강 발진과 유사한, 성기 외표면 상에 염증 구진 및 소포로 이루어진 성기 궤양의 클러스터이다. 이들은 통상 HSV에 대한 성적 노출로부터 4 내지 7일 후에 최초로 나타난다. 성기 HSV-1 감염은 성기 HSV-2의 감염의 약 1/6의 비율로 재발한다.

단순포진 각막염은 각막의 재발 HSV 감염에 의해 주로 유발된 눈의 염증이다. HSV에 의한 안구 감염은 상이한 중증도의 눈 질환을 유발할 수 있고, 이는 결막염 및 수지상 각막염으로부터 간질 부종 및 괴사성 간질 각막염에 이르는 범위이다. HSV-1은 90% 이상의 안구 HSV 감염을 유발하고, 선진국에서 바이러스-유도된 실명의 주요 원인이다.

더욱이, 점막 또는 상피 조직의 기타, 오히려 희귀 HSV 감염이 있고, 이는 하기에서 간단히 취급될 것이다.

구진 또는 생식관으로 한정되지 않는 만성 또는 파종성 피부 단순포진 감염이 공지되어 있다. 대부분의 경우, 면역결핍 환자는, 예를 들면, 저감마글로불린종 환자 또는 피부 T-세포 림프종 환자와 같이 이러한 질환의 영향을 받는다. 만성 피부 단순포진은 감염된 숙주에서 단순포진 바이러스(HSV)의 특징적 임상 제시이다. 이러한 감염은 파종성(전신성) 형태로 잠재적으로 진행할 수 있는 만성 활성 파괴적 피부 병변으로 정의될 수 있다. 대부분의 HSV 감염은 1 또는 2주 이내에 치유를 나타내는 에피소드를 나타내지만, 만성 피부 단순포진의 병변은 수개월 동안 지속할 수 있는 완만한 경과를 갖는다. 면역억제된 환자에서 일반적인 만성 피부 단순포진은 이형성, 만성 및 지속성 병변을 특징으로 하고, 이는 진단을 복잡하게 하고 지연시킨다. 이는 연관된 합병증에 의해 유발된 사망을 유도할 수 있다. 특히 소아에서 장기간의 만성 궤양을 평가하는 경우, 만성 단순포진 바이러스 감염의 가능성이 고려되어야 하는 것이 극히 중요하다.

검상포진은 레슬러 사이에서 사춘기에 발생하는 헤르페스 피부 감염을 지칭하지만, 또한 기타 접촉 스포츠에서도 일반적이다. 이는 통상 머리, 가장 일반적으로는 턱 영역, 목, 가슴, 얼굴, 복부 및 다리에서 발생한다.

단순포진 바이러스(HSV)를 통상 수반하는, 바이러스 감염에 의해 유발된 카포시 정맥류양 발진으로 또한 공지된 포진성 습진은 기존의 피부 질환, 통상 아토피 피부염(AD)으로부터 발생하는 광범위한 피부 수포성 발진이다. AD를 갖는 소아는 포진성 습진의 발증 위험이 높고, 여기서 HSV 유형 1(HSV-1)은 가장 일반적 병원체이다. 포진성 습진은 심각할 수 있고, 치료되지 않는 경우에는 확산 감염 및 사망으로 진행할 수 있다.

HSV에 의해 유발된 질환, 특히 구순 단순포진 및 성기 단순포진은 피부의 가장 일반적 감염 질환을 나타낸다.

현재, 항바이러스 HSV 요법에서 바이러스 억제제(virustatic agent)를 사용하는 것이 표준적이다. 가장 일반적 바이러스 억제제(예: 아시클로비르, 펜시클로비르, 포스카르넷, 이독수리딘)은, 일반적 활성 원리가 바이러스-감염된 세포에서 DNA 합성의 억제에 기반하는 뉴클레오사이드 또는 피로포스페이트 유사체이다. 달리 말하면, 바이러스 억제제는 감염된 세포에서만 효과적인 반면, 바이러스는 활성적으로 복제한다. 급성 구순 단순포진 감염을 앓고 있는 1385명 환자에 대한 이중 맹검 위약-조절된 시험에서, 아시클로비르(Zovirax Creme 형태)는, 위약-처치 환자와 비교하여, 4일 동안 1일 5회 투여시 0.5일(즉, 5일로부터 4.5일까지)까지 감염을 감소시킬 수 있는 것이 입증되었다. 더욱이, 이러한 처치는 헤르페스에 전형적인 병변의 발생이 방지될 수 없는 단점을 갖는다.

최근, HSV 유형 1(HSV-1) 및 HSV-2의 당단백질 B(gB)를 특이적으로 인식하는 뮤린 및 상응하게 인간화된 항체가 기재되어 있다. HSV-gB는 바이러스 침입 및 세포-세포 융합에 요구된 다성분 융합 시스템의 불가결한 부분이다. 이 항체, 모노클로날 항체 MAb 2c는 바이러스 세포로부터 세포로의 확산, HSV-1/2가 항체-의존성 세포 세포독성(ADCC) 및/또는 보체-의존성 세포독성(CDC)으로부터 독립적인 체액성 면역 감시를 회피하는 주요 메카니즘을 저지함으로써 바이러스를 중화시키는 것으로 입증되었다[참조: Eis-Hubinger et al., Intervirology 32:351-360(1991); Eis-Hubinger et al., Journal of General Virology 74:379-385(1993); WO2011/038933 A2; Krawczyk A, et al., Journal of virology(2011);85(4):1793-1803; Krawczyk A, et al., Proc Natl Acad Sci U S A(2013);110(17):6760-6765].

그러나, 이들 항체는, 이들의 크기, 친수성 성질 및 위에서의 분해에 기인하여, 항체의 경구 투여를 배제하는 이론적 근거에 따라 전신적으로(예를 들면, 정맥내, 근육내 또는 피하 투여에 의해) 투여될 뿐이었다. 따라서, 종래 기술의 항체는 피부 표면 상에 국소 투여되지 않고 전신적으로만 투여되어 왔다.

국제공개공보 제WO 2005/023303호는 인간 혈장의 IgA 분획 또는 인간 혈장의 IgG 분획의 정맥내 투여에 의한 HSV의 치료 방법을 개시하고 있지만, 국소 투여 및 구순포진 및 헤르페스 성기 질환이 언급되어 있다.

항체의 국소 투여는 이전에 기재되어 있지만, 이러한 적용은 성적 전달된 HSV-2 질환의 예방에서 예방적 사용을 위해 제안되어 있는데 불과하다. 문헌[참조: Sherwood et al., Nat. Biotechnol. 14(4):468-471(1996)]은 HSV-2에 대한 모노클로날 항체에 의한 질-전달된 HSV-2 감염의 마우스 모델에서 성기 헤르페스에 대한 암컷 마우스의 예방적 국소 수동 면역보호를 기재한다. 유사하게는, 문헌[참조: Zeitlin et al., Virology 225(1):213-215(1996), Zeitlin et al., Contraception 56(5):329-335(1997), Zeitlin et al., J. Reprod. Immunol. 40(1):93-101(1998) and Zeitlin et al., Nat. Biotechnol. 16(13):1361-1364(1998)]은 HSV-2의 성적 전달의 예방에서 항-HSV-2 항체의 예방적 국소 투여를 기재한다.

더욱이, TNF-알파 항체 인플리시맵은 국소 적용시 만성 창상의 치유를 개선시키기 위해 이전에 기재되어 있고[참조: Streit et al., International Wound Journal 3(3):171-179(2006)], 슈도모나스 에루기노사(Pseudomonas aeruginosa)에 대한 폴리클로날 및 모노클로날 항체의 국소 적용은 이전에 기재되어 있었다(US 4,994,269). 추가로, 문헌[참조: Clement et al., ARVO, Abstract/Poster 6155/D1015]은 급성 HSV-1 각막염의 래빗 모델에서 항체 표적화 포스파티딜세린(PS)의 국소 투여를 기재하고, 문헌[참조: Yu et al., Eye Science 12(3):145-150(1996)]은 HSV-1에 의해 감염된 래빗의 급성 헤르페스 각막염에서 항-HSV-모노클로날 당단백질 항체의 국소 용도를 기재한다. 국제공개공보 제WO 2010/128053호는, 안구 각막염과 같은 안구 질환을 치료하는 안구 국소 투여를 위해 HSV-1 및 HSV-2를 중화하는 바이러스 표면 항원 당단백질 D에 결합하는 항체 단편의 용도를 기재한다.

따라서, 당해 기술분야에 공지된 투여 섭생을 촉진시키고 감염의 국소 확산을 방지하는, 급성 단순포진 감염의 치료를 위한 개선된 수단 및 방법을 제공할 필요가 있다.

본 발명은, 구순 단순포진, 성기 단순포진, 만성 또는 파종성 피부 단순포진 감염, 검상포진 및 포진성 습진으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 대상체에서 점막 또는 상피 조직의 급성 감염의 치료에 사용하기 위한 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편으로서, 상기 항체가 국소 투여되는, 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편, 및 유효량의 상기 항체 또는 이의 항원-결합 단편 및 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다.

놀랍게도, 본 발명은, HSV-감염시 입술 조직의 급성 감염에서 인간화 항-HSV 항체의 국소 투여가 24시간 이내에 감염을 제거하고 세포로부터 세포로의 확산에 의한 헤르페스 감염의 국소 확산을 방지하여 병변의 생성을 회피하는 것을 입증한다. 구순 단순포진과 같은 바이러스 감염의 치료에 사용된 상술된 바이러스 억제제와 대조적으로, 본 발명의 항-HSV 항체는, 바이러스 복제와 독립적인 메카니즘에 의해 바이러스를 신속하게 중화시킬 수 있다. 유익하게는, 본 발명의 항체는 바이러스의 용해 경로를 억제하여 피부 병변을 예방하는 것으로 입증된다.

종래 기술에 비추어, 본 발명의 기저에 있는 기술 과제는, 당해 기술분야에 공지된 투여 섭생을 촉진시키고 감염의 국소 확산을 예방하는 급성 단순포진 감염의 치료를 위한 개선된 수단 및 방법의 제공이다.

이러한 기술과제는 특허청구범위에서 특성화된 실시형태의 제공에 의해 해결된다.

본 발명은, 구순 단순포진, 성기 단순포진, 만성 또는 파종성 피부 단순포진 감염, 검상포진 및 포진성 습진으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 대상체에서 점막 또는 상피 조직의 급성 감염의 치료에 사용하기 위한 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편으로서, 상기 항체가 국소 투여되는, 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편에 관한 것이다.

상기 언급한 바와 같이, 놀랍게도, HSV-감염시 입술 조직의 급성 감염에서 인간화 항-HSV 항체의 국소 투여는 24시간 이내에 감염을 신속하게 제거하고 세포로부터 세포로의 확산에 의해 헤르페스 감염의 국소 확산이 방지되어 병변의 생성을 회피하는 것이 첨부 실시예에서 입증되었다.

이러한 발견은 하기 이유로 문헌[참조: Eis-Hubinger et al., Intervirology 32:351-360(1991); Eis-Hubinger et al., Journal of General Virology 74:379-385(1993); WO2011/038933 A2; Krawczyk A, et al., Journal of virology(2011);85(4):1793-1803; Krawczyk A, et al., Proc Natl Acad Sci U S A(2013);110(17):6760-6765]에 기재된 전신 투여; 문헌[참조: Sherwood et al., Nat. Biotechnol. 14(4):468-471(1996); Zeitlin et al., Virology 225(1):213-215(1996); Zeitlin et al., Contraception 56(5):329-335(1997); Zeitlin et al., J. Reprod. Immunol. 40(1):93-101(1998) and Zeitlin et al., Nat. Biotechnol. 16(13):1361-1364(1998)]에 기재된 예방적 치료; 및 문헌[참조: Yu et al., Eye Science 12(3):145-150(1996)(및 Clement et al., ARVO, Abstract/Poster 6155/D1015; 및 WO 2010/128053)]에 기재된 급성 단순포진 각막염 감염에서 항-HSV 당단백질 항체에 의한 국소 치료에 관하여 상기 기재된 종래 기술에 비추어 특히 놀랍고 예상치 못한 것이다.

종래 기술과 대조적으로, HSV-감염시 입술 조직의 급성 감염에서 인간화 항-HSV 항체의 국소 투여는 24시간 이내에 감염을 신속히 제거하고 세포로부터 세포로의 확산에 의해 헤르페스 감염의 국소 확산이 방지되어 병변의 생성을 회피하는 것이 입증되었다.

이러한 발견의 놀라운 성질, 즉 인간화 항-HSV 항체 또는 이의 단편이 점막 또는 피부 상피의 재발 HSV 감염의 국소 요법에 사용될 수 있다는 것은 표피 구조에 대한 기본 지식을 고려할 때에 특히 놀랍고 예상치 못한 것이다.

인간 피부 상피 및 점막 상피의 층은 이의 환경으로부터 물리적으로 생물을 분리하고 탈수, 화학적 물질, 물리적 상해 및 미생물에 대한 구조적 및 기능적 방어의 제1 라인으로서 작용한다. 고도로 분극된 상피 세포는 표피의 정단층을 형성하고, 보다 덜 분화된 세포는 표피 전구 세포가 존재하는 기저 영역을 형성한다. 가장 표면의 살아있는 층의 측방 원형질 막에 위치된, 긴밀 접합(TJ)으로서 불리우는, 접합부를 폐색하면, 과립 층[참조: Brandner, et al., 2002 Eur J Cell Biol 81, 253-263; Furuse et al., 2002, J Cell Biol 156, 1099-1111]은 정단 층(각질 층)과 기저외측 층(유속, 기저층 및 라미나 기저층)과의 사이에 표피 차단 기능을 확보한다.

피부에서 HSV 복제와 자손 바이러스 생성의 주요 부위는 기저 영역(기저층)의 덜 분화된, 증식 각막세포이다[참조: Mingo et al., 2012, J Virol 86, 7084-7097; Schelhaas et al., 2003, J Gen Virol 84, 2473-2484].

일차 감염의 병원성은 HSV가, 예를 들면, 성교를 수반하여 발생하는 표피의 미시적 파괴에 의해 중간 내지 기저 표피에서 허용되는 유핵 세포에 접근하는 것을 필요로 한다.

신경절 내에서 잠복으로부터 HSV 게놈의 재활성화는 진피-표피 접합부에서 또는 표피의 중간층 내에서 시냅스 종점에서 방출하기 위해 액손 미소관 하류로 새롭게 형성된 비리온의 수송을 유도한다[참조: Diefenbach et al., 2008, Rev Med Virol 18, 35-51]. HSV는 표피의 기저 영역에서 후속 복제를 위해 액손-상피 갭을 횡단해야 한다.

체액성 면역은 HSV 감염의 조절에 중요한 역활을 담당한다. 바이러스 침입에 필요한 바이러스 외피 당단백질에 결합할 수 있는 순환 혈청 단백질은 감염 동안 발달한다[참조: Cohen et al., 1984, Journal of virology 49, 102-108]. HSV에 특이적인 모체 혈청 항체의 존재는 HSV-2의 신생아 전달을 감소시키는 것으로 밝혀졌다[참조: Brown et al., 1991, N Engl J Med 324, 1247-1252]. 중화 혈청 항체는 신경 말단과 상피 세포 사이의 갭에서 바이러스에 결합할 수 있고, 이들 조직 사이에서 쌍방향 바이러스 전이를 제한한다[참조: Mikloska et al., 1999, Journal of virology 73, 5934-5944]. 명백하게는, 혈청 항체 또는 전신 적용된 항체는 HSV 감염의 정도를 제한한다.

그러나, 과립층으로 한정되는, 긴밀 접합부(TJ)는 보다 큰 분자를 위한 장벽을 형성한다[참조: Helfrich et al., 2007, J Invest Dermatol 127, 782-791; Mertens et al., 2005, J Cell Biol 170, 1029-1037; Yuki et al., 2007, Exp Dermatol 16, 324-330]. 따라서, 외피에 대한 항체 등의 거대 분자의 국소 적용이 재발 HSV 감염을 효과적으로 제거할 수 있고 병변의 형성을 방지한다는 것은 매우 놀라운 것이다. 따라서, 이러한 이유로, 전신 투여와 반대로, 국소적 국소 투여가 실시예에 예시된 바와 같이 감염을 신속하게 제거한다는 것은 놀라운 것이다.

더욱이, 종래 기술이 항-HSV 항체의 국소 예방적 적용에 의해 성적으로 전달된 일차 HSV-2 감염의 보호를 기재하고 있지만, 급성 감염의 치료는, 상기 언급된 종래 기술의 실험 설정에서, 항-HSV 항체가 바이러스 접종물의 전달 전에 질에 국소 적용되었기 때문에 놀라운 것이다. 바이러스 부하는, 중화 항체가 표적 세포에 대한 유리 바이러스 입자의 부착을 방지하고 바이러스 복제가 실제로 발생하지 않는, 시험관내 중화 검정에서 2차원으로 중화된다. 이는, 놀랍게도, 실시예에서 예시된 본 발명의 항체의 국소 투여에 의해 감염을 신속하게 제거하는 것으로 밝혀진 급성 감염의 치료와는 뚜렷하게 대조적이다.

더욱이, 종래 기술이 급성 단순포진 각막염에서 항-HSV 당단백질 항체를 사용한 국소 치료를 기재하고 있지만, 구순 단순포진, 성기 단순포진, 만성 또는 파종성 피부 단순포진 감염, 검상포진 및 포진성 습진으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 대상체에서 점막 또는 상피 조직의 급성 감염의 치료에 사용하기 위한 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편으로서, 상기 항체가 국소 투여되는, 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 하기 이유로 놀라운 것이다. 피부에서 HSV 복제 및 자손 바이러스 생성의 주요 부위는 기저 영역의 덜 분화된, 증식 각막세포이다[참조: Mingo et al., 2012, J Virol 86, 7084-7097; Schelhaas et al., 2003, J Gen Virol 84, 2473-2484]. 과립층으로 한정된 긴밀 접합부(TJ)는 거대 분자를 위한 장벽을 형성하는 것으로 밝혀졌다[참조: Helfrich et al., 2007, J Invest Dermatol 127, 782-791; Mertens et al., 2005, J Cell Biol 170, 1029-1037; Yuki et al., 2007, Exp Dermatol 16, 324-330]. 따라서, 외피에 대한 항체 등의 거대 분자의 국소 적용이 재발 HSV 감염을 효과적으로 제거할 수 있고 병변의 형성을 방지한다는 것은 매우 놀라운 것이다.

피부 상피 및 점막 상피와는 대조적으로, 눈의 각막은, 과도하게 얇고 급속 성장 및 용이하게 재생된 세포로 이루어진 비-각화 층상 편평 상피이다. 눈 상피의 모든 층은 항상 유사분열을 받고 있다. 각막 상피는 평활한 표면을 제공하고, 이는 눈물로부터 산소 및 세포 영양소를 흡수하고, 이어서 이들 영양소를 각막의 나머지 부분으로 분배한다. 피부 상피 및 점막 상피에 대한 또 다른 주요 차이는 각막 내피의 어느 정도의 누출이고, 이는 영양소 확산에 필수이다. 각막 내피에 대한 초구조 연구는, 특정의 긴밀 접합부 단백질에서 갭이 존재하고 각막의 긴밀 접합부가 "누출" 접합부인 것을 확인했다[참조: Barry et al., 1995, Invest Ophthalmol Vis Sci 36, 1115-1124; Noske et al., 1994, Ger J Ophthalmol 3, 253-257; Petroll et al., 1999, Curr Eye Res 18, 10-19]. 눈의 각막은 면역학적으로 특권이 있는 부위이다. 안구 표면은 물로 주로 이루어진 눈물 막에 의해 항상 덮여 있지만, 면역글로불린 A 항체, 리소자임, 보체 및 아밀라제 등의 항바이러스 활성을 갖는 다수의 단백질을 함유한다. 항-HSV 항체의 존재는 눈물에서 입증되었다[참조: Centifanto et al., 1970, Ann NY Acad Sci 173, 649-656; Fox et al., 1986, The British journal of ophthalmology 70, 584-588; Shani et al., 1985, Curr Eye Res 4, 103-111]. 따라서, 재조합 항체의 국소 적용은 안구 헤르페스 감염의 치료에 유리할 수 있다. 그러나, 상기의 이유로, 외피에 대한 항체 등의 거대 분자의 국소 적용이 재발 HSV 감염을 효과적으로 제거할 수 있고 병변의 형성을 방지한다는 것은 예상외였다.

HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발되는, 항-HSV 항체 또는 항원-결합 단편에 의해 치료되는 점막 또는 상피 조직의 감염, 즉 구순 단순포진, 성기 단순포진, 만성 또는 파종성 피부 단순포진 감염, 검상포진 및 포진성 습진으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 감염은 당해 기술분야의 숙련가에게 공지되어 있고, 명확하게 정의된 질환을 나타낸다. 이미 상기 언급한 바와 같이, 구순 단순포진(또한 구강 발진, 구순 단순포진, 재발 구순포진 또는 구내염 포진으로 불리움)은 입술 위에서 발생하는 단순포진의 유형, 즉 단순포진 바이러스(HSV)에 의한 감염이다. 발생은 일반적으로, 구강 발진 또는 발열 수포로서 통상 공지된 입 위에 또는 입 주위에 작은 수포 또는 궤양을 유발한다. 궤양은 통상 2 내지 3주 이내에 치유되지만, 헤르페스 바이러스는 안면 신경에서 휴면 상태로 잔류하고, 구안면 감염 후, 주기적으로 재활성화(증후성 사람)하여 본래 감염 부위에서 입 또는 얼굴의 동일한 영역에 궤양을 생성한다. 구순포진은, 희귀 에피소드로부터 1년간 12회 이상의 재발까지 변화하는 빈도를 갖는다. 이러한 상태의 사람은 통상 매년 1 내지 3회의 공격을 경험한다. 발생 빈도 및 중증도는 일반적으로 시간과 함께 감소한다.

성기 단순포진(또는 성기 헤르페스)은 단순포진 바이러스에 의해 유발된 성기 감염이다. 1998년의 조사는, 다수의 사례에 의해 가장 일반적 성적 전달된 감염이었음을 나타냈다. 헤르페스를 포함하는 대부분의 개인은 이들이 감염되었음을 깨닫지 못하고, 다수는 구강 발진과 유사한 수포를 수반하는 발생을 결코 겪지 않는다. 헤르페스에 대한 치유는 없지만, 시간 경과와 함께 증상은 점차 온화해지고 발생은 점차 감소한다. 언급된 바와 같이, HSV는 2개 상이한 카테고리, HSV-1 및 HSV-2로 분류된다. 성기 헤르페스는 이미 HSV-2에 의해 주로 유발되지만, 성기 HSV-1 감염은 증가하고 있고 최대 80%의 감염을 유발한다. 증후성인 경우, 일차 HSV-1 또는 HSV-2 성기 감염의 전형적 증상은, 구강 발진과 유사한, 성기 외면 상의 염증 구진 및 소포로 이루어진 성기 궤양의 클러스터이다. 이들은 통상 HSV에 대한 성적 노출 4 내지 7일 후에 최초로 나타난다. 성기 HSV-1 감염은 성기 HSV-2의 것의 약 1/6의 비율로 재발한다.

만성 또는 파종성 피부 단순포진 감염은 공지되어 있고, 이는 구진 또는 성기 관으로 한정되지 않는다. 대부분의 경우, 면역결핍 환자, 예를 들면, 저감마글로불린종 환자 또는 피부 T-세포 림파종 환자 등은 이러한 질환으로 영향을 받는다. 만성 피부 단순포진은 감염된 숙주에서 단순포진 바이러스(HSV)의 특징적 임상 제시이다. 이러한 감염은 파종성(전신성) 형태로 잠재적으로 진행할 수 있는 만성적으로 활성 파괴적 피부 병변으로서 정의될 수 있다. 대부분의 HSV 감염은 1 또는 2주 내에 치유를 나타내는 에피소드를 나타내지만, 만성 피부 단순포진의 병변은 수개월 동안 지속할 수 있는 완만한 경과를 갖는다. 면역억제된 환자에서 통상적인 만성 피부 단순포진은 이형성, 만성 및 지속성 병변을 특징으로 하고, 이는 진단을 복잡하게 하고 지연시킨다. 이는 연관된 합병증에 의해 유발된 사망을 유도할 수 있다. 특히 소아에서 장기간의 만성 궤양을 평가하는 경우, 만성 단순포진 바이러스 감염의 가능성이 고려된다는 것은 극히 중요하다.

검상포진은 레슬러 사이에서 청년기에 발생하는 헤르페스 피부 감염이지만, 또한 다른 접촉 스포츠에서도 일반적이다. 이는 통상 머리, 가장 일반적으로는 턱 영역, 목, 가슴, 얼굴, 복부 및 다리에서 발생한다.

바이러스 감염, 통상 단순포진 바이러스(HSV)에 의해 유발된 카포시 정맥류양 발진의 형태로도 공지되어 있는 포진성 습진은, 기존의 피부 질환, 통상 아토피성 피부염(AD)으로부터 발생하는 광범위한 피부 수포성 발진이다. AD를 갖는 소아는 포진성 습진의 발증 위험이 높고, 여기서 HSV 유형 1(HSV-1)은 가장 일반적 병원체이다. 포진성 습진은 심각하고, 치료되지 않는 경우에는 확산 감염 및 사망으로 진행할 수 있다.

HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 대상체에서 점막 또는 상피 조직의 급성 감염을 치료하는데 사용하기 위한 본 발명의 문맥에서 사용된 항체 또는 이의 단편은, 그것이 "항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편"인 한, 특별히 한정되지 않는다. 따라서, 항체는 HSV에 특이적으로 결합하거나 이를 특이적으로 인식하거나 이와 상호작용하는 임의의 항체, 즉 HSV의 도메인 또는 항원일 수 있다.

본 발명의 문맥에서 사용된 용어 "~ 결합하는"은 서로 적어도 2개의 "항원-상호작용-부위"의 결합(상호작용)을 정의한다. 용어 "항원-상호작용-부위"는, 본 발명에 따라, 폴리펩티드의 모티프, 즉 본 발명의 항체 또는 이의 항원-결합 부위의 일부를 정의하고, 이는 HSV의 특이적 항원 또는 항원의 특정 그룹과 특이적 상호작용의 능력을 나타낸다. 상기 결합/상호작용은 또한 "특이적 인식"을 정의하는 것으로 이해된다. 용어 "특이적으로 인식하는"은 본 발명에 따라 항체가 본원에 정의된 각각 HSV의 적어도 2개 아미노산과 특이적으로 상호작용하고/하거나 이에 결합할 수 있는 것을 의미한다. 항체는 HSV 상의 상이한 에피토프를 인식, 상호작용 및/또는 결합할 수 있다. 이 용어는 항체 분자의 특이성, 즉 HV의 특이적 영역을 식별하는 이의 능력에 관한 것이다.

본 발명에 따라 사용된 용어 "특이적 상호작용"은 본 발명의 항체 또는 이의 항원-결합 단편이 유사한 구조의 (폴리) 펩티드와 교차 반응하지 않거나 본질적으로 교차 반응하지 않는 것을 의미한다. 따라서, 본 발명의 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 HSV, 바람직하게는 HSV-1 또는 HSV-2의 구조와 특이적으로 결합/상호작용한다. 상기 제1 및 제2 Ig-유래된 도메인이 지시되는 이러한 분자의 구체적 예는 본원에서 하기 제공되어 있다.

조사하의 항체 또는 이의 항원-결합 단편의 패널의 교차-반응성은, 예를 들면, 통상의 조건하에 목적하는 (폴리)펩티드 및 또한 보다 많거나 적은(구조적으로 및/또는 기능적으로) 밀접하게 관련된 (폴리)펩티드에 대한 항체 또는 이의 항원-결합 단편의 상기 패널의 결합을 평가함으로써 시험할 수 있다[참조: Harlow and Lane, Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press,(1988) and Using Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press,(1999)]. HSV의 특정 구조, 예를 들면, HSV의 특이적 에피토프 또는 (폴리) 펩티드/단백질에 결합하지만 동일한 HSV의 임의의 기타 에피토프 또는 (폴리) 펩티드/단백질에 결합하지 않거나 실질적으로 결합하지 않는 이들 작제물(즉, 항체, 이의 항원-결합 단편 등)만이 목적하는 에피토프 또는 (폴리) 펩티드/단백질에 특이적인 것으로 간주되고, 본원에 제공된 방법에 따라 추가 연구를 위해 선택된다. 이들 방법은, 특히 결합 연구, 구조적 및/또는 기능적으로 밀접하게 관련된 분자와의 차단 및 경쟁 연구를 포함할 수 있다. 이들 결합 연구는 또한 FACS 분석, 표면 플라즈몬 공명(SPR, 예를 들면, BIAcore®에 의해), 분석 초원심분리, 등온 적정 열량측정, 형광 이방성, 형광 분광법 또는 방사선표지 리간드 결합 분석을 포함한다.

용어 "~에 결합하는"은 선형 에피토프에 관련될 뿐만 아니라, 입체배좌 에피토프, 구조 에피토프, 또는 인간 표적 또는 이의 일부의 2개 영역으로 이루어진 불연속 에피토프와 관련될 수 있다. 본 발명의 문맥에서, 입체배좌 에피토프는, 폴리펩티드가 천연 단백질로 중첩하는 경우, 분자의 표면 상에서 함께 오는 일차 서열에서 분리된 2개 이상의 별개의 아미노산 서열에 의해 정의된다[참조: Sela, Science 166(1969), 1365 and Laver, Cell 61(1990), 553-536]. 더욱이, 용어 "~ 결합하는"은 본 발명의 문맥에서 용어 "~와 상호작용하는" 또는 "인식하는"과 호환적으로 사용된다.

따라서, 특이성은 당해 기술분야에 공지된 방법 및 본원에 기재된 방법에 의해 실험적으로 결정될 수 있다. 이러한 방법은, 이로써 한정되는 것은 아니지만, 웨스턴 블롯, ELISA-, RIA-, ECL-, IRMA-시험 및 펩티드 스캔을 포함한다.

본 발명의 치료는 급성 감염의 치료에 관한 것이다. 이와 관련하여, "급성"은 대상체가 질환의 증상을 나타내는 것을 의미한다. 달리 말하면, 치료되는 대상은 치료의 실제 필요성이 있고, 본 발명의 문맥에서 용어 "급성 치료"는 질환의 개시 또는 발생 후에 질환을 실제로 치료하기 위해 취해진 조치에 관한 것이다. 본 발명의 문맥에서 지칭되는 용어 "급성"은, 예를 들면, 질환의 감염 및/또는 개시/발생을 방지하기 위해 예방적 치료 또는 방지적 치료, 즉 질환 방지를 위해 취해진 조치와는 반대이다. 보다 구체적으로, 예방적 치료는 이것이 표적 세포에 대한 유리 바이러스 입자(신체 외부로부터)의 부착을 방지하고 또한 바이러스 복제를 방지하는 방식으로 이해될 수 있다. 대조적으로, 급성 감염(이는 일차 또는 재발 감염일 수 있다)에서, 자손 바이러스는 HSV 복제시에 참가했다. 따라서, 본 발명에서 지칭되는 "급성 치료"는 명백하게는 HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 감염의 예방적 또는 방지적 치료에 관한 것은 아니다.

급성 감염을 나타낼 수 있는 점막 조직은 상피에서 덮힌 대부분의 상피 기원의 라이닝인 점막의 조직을 지칭하고, 이는 흡수 및 분비에 관여한다. 이들은 외부 환경 및 내부 기관에 노출되는 강의 막을 형성한다. 이들은 피부에 연속하는 몇몇 장소, 예를 들면, 비공, 입의 입술, 눈꺼플, 귀, 성기 영역 및 항문에 존재한다.

급성 감염을 나타낼 수 있는 상피 조직은 표피의 조직, 즉 피부와 함께 진피를 형성하는, 피부 중의 세포의 최외층을 지칭한다. 표피는, 병원체가 침입하는 것을 방지하고 피부를 감염에 대한 천연 장벽으로 되게 함으로써 불가항력적 환경에 대한 신체의 주요 장벽으로서 작용하는 증식하는 기저 및 분화된 기저상 각막세포로 구성된 중층 편평 상피이다. 이는 또한 경표피 수분 손실을 통해 신체로부터 대기로 방출된 수분의 양을 조절한다.

언급된 바와 같이, 구순 단순포진, 성기 단순포진, 만성 또는 파종성 피부 단순포진 감염, 검상포진 및 포진성 습진으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 대상체에서 점막 또는 상피 조직의 급성 감염을 치료하는데 사용하기 위한 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 국소 투여되어야 한다.

본 발명에 따르는 용어 "국소 투여"는, 이로써 한정되는 것은 아니지만, 크림, 폼, 겔, 로션 및 연고를 포함하는 투여 형태의 광범위한 부류를 통해 상기 지칭된 감염을 치료하기 위해 피부 또는 점막 등의 신체 표면에 적용되는 의약, 적용 또는 투여에 관한 것이다. 바람직한 실시형태에서, 국소 투여는 피부인 것으로 이해되고, 이는 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편이 피부에 직접 적용되는 것을 의미한다. 이론에 구속시키지 않고 일부 추가 비제한적 예를 제공하기 위해, 국소 투여는 또한 흡입, 예를 들면, 천식 의약일 수 있거나, 또는 피부 이외의 조직의 표면에 적용될 수 있고, 예를 들면, 결막에 적용된 점안액, 또는 귀에 위치된 귀 액적, 또는 치아 표면에 적용된 의약일 수 있다. 투여 경로로서, 국소 투여는 장용(소화관에서) 및 혈관/정맥내(순환계로 주입)와 대비된다. 이의 가장 넓은 의미에서, 국소 효과는 약력학적 의미에서 전신이 아닌 국소 의약 표적과 관련되는 방식으로 이해될 수 있다.

바람직한 실시형태에서, 본 발명에 따라 사용하기 위한 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 모노클로날 또는 폴리클로날 항체이다. 추가의 바람직한 실시형태에서, 본 발명에 따라 사용하기 위한 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 인간화 또는 완전 인간 항체이다. 추가의 바람직한 실시형태에서, 본 발명에 따라 사용하기 위한 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 뮤린 항체이다.

본원에 사용된 용어 "모노클로날 항체"는 실질적으로 균질한 항체의 모집단으로부터 수득된 항체를 지칭하고, 즉 모집단을 포함하는 개개 항체는 미량으로 존재할 수 있는 가능한 천연 발생 돌연변이를 제외하고는 동일하다. 모노클로날 항체는 고도로 특이적이고, 단일 항원성 부위에 대해 지시되어 있다. 모노클로날 항체는 이들이 특히 다른 면역글로불린에 의해 오염되지 않은 하이브리도마 배양물에 의해 합성될 수 있다는 점에서 유리하다. 변형된 "모노클로날"은 항체의 실질적으로 균질한 모집단 중에 있는 것으로 항체의 특징을 나타내고, 임의의 특정 방법에 의한 항체의 생성을 필요로 하는 것으로 간주되지 않아야 한다. 상기 언급한 바와 같이, 본 발명에 따라 사용되는 모노클로날 항체는 문헌[참조: Kohler, Nature 256(1975), 495]에 기재된 하이브리도마 방법에 의해 제조할 수 있다.

본원에 사용된 용어 "폴리클로날 항체"는 하나 이상의 기타 동일하지 않은 항체 중에서 또는 이의 존재하에 생성되는 항체를 지칭한다. 일반적으로, 폴리클로날 항체는 동일하지 않은 항체를 생성하는 몇몇 기타 B-림파구의 존재하에 B 림파구로부터 생성된다. 통상, 폴리클로날 항체는 면역화된 동물로부터 직접 수득된다.

본원에 사용된 용어 "완전-인간 항체"는 인간 면역글로불린 단백질 서열만을 포함하는 항체를 지칭한다. 완전 인간 항체는, 마우스, 마우스 세포 또는 마우스 세포로부터 유래된 하이브리도마에서 생성되는 경우, 뮤린 카보하이드레이트 쇄를 함유할 수 있다. 유사하게는, "마우스 항체" 또는 "뮤린 항체"는 마우스/뮤린 면역글로불린 단백질 서열만을 포함하는 항체를 지칭한다. 또는, "완전-인간 항체"는, 랫트, 랫트 세포, 랫트 세포로부터 유래하는 하이브리도마에서 생성되는 경우, 랫트 카보하이드레이트 쇄를 함유할 수 있다. 유사하게는, 용어 "랫트 항체"는 랫트 면역글로불린 서열만을 포함하는 항체를 지칭한다. 완전-인간 항체는, 예를 들면, 완전 인간 항체의 생성 및 스크리닝을 가능하게 하는 광범위하게 사용되는 스크리닝 기술인 파지 디스플레이에 의해 또한 생성될 수 있다. 또한, 파지 항체가 본 발명의 문맥에서 사용될 수 있다. 파지 디스플레이 방법은, 예를 들면, 미국 특허 제US 5,403,484호, 제US 5,969,108호 및 제US 5,885,793호에 기재되어 있다. 완전-인간 항체의 개발을 가능하게 하는 또 다른 기술은 마우스 하이브리도마 기술의 변형을 수반한다. 마우스는, 그들 자신의 마우스 유전자의 교환에 있어서 인간 면역글로불린 유전자좌를 함유하도록 유전자도입으로 제조된다(참조: 제US 5,877,397호).

용어 "키메라 항체"는, 또 다른 인간 또는 비-인간 종(예: 마우스, 말, 래빗, 개, 소, 닭)으로부터의 항체 영역(예: 불변 영역)과 융합 또는 키메라화된 본 발명의 가변 영역을 포함하는 항체를 지칭한다.

용어 항체는 또한 재조합 인간 항체, 이종성 항체 및 헤테로하이브리드 항체에 관한 것이다. 용어 "재조합 인간 항체"는 재조합 수단에 의해 제조, 발현, 생성 또는 단리되는 모든 인간 서열 항체, 예를 들면, 인간 면역글로불린 유전자에 대한 유전자도입된 동물(예: 마우스)로부터 단리된 항체; 숙주 세포 내로 형질감염된 재조합 발현 벡터를 사용하여 발현된 항체; 재조합체, 조합 인간 항체 라이브러리로부터 단리된 항체, 또는 인간 면역글로불린 유전자 서열의 다른 DNA 서열로의 스플라이싱을 수반하는 임의의 기타 수단에 의해 제조, 발현, 생성 또는 단리된 항체를 포함한다. 이러한 재조합 인간 항체는 인간 생식계 면역글로불린 서열로부터 유래된 가변 및 불변 영역(존재하는 경우)을 갖는다. 그러나, 이러한 항체는 시험관내 돌연변이유발(또는 인간 Ig 서열에 대해 유전자도입 동물이 사용되는 경우)에 제공될 수 있고, 따라서 재조합 항체의 VH 및 VL 영역의 아미노산 서열은, 인간 생식계 VH 및 VL 서열로부터 유래되고 이와 관련되지만, 생체내 인간 항체 생식계 레퍼토리 내에 자연적으로 존재하지 않을 수도 있는 서열이다.

"이종성 항체"는 이러한 항체를 생성하는 유전자도입 비-인간 생물과 관련하여 정의된다. 이 용어는, 유전자도입 비-인간 동물로 이루어지지 않는 생물에서, 및 일반적으로 유전자도입 비-인간 동물의 것 이외의 종으로부터 발견된 것에 상응하는 아미노산 서열 또는 코딩 핵산 서열을 갖는 항체를 지칭한다.

용어 "헤테로하이브리드 항체"는 상이한 생물 기원의 경쇄 및 중쇄를 갖는 항체를 지칭한다. 예를 들면, 뮤린 경쇄와 연관된 인간 중쇄를 갖는 항체는 헤테로하이브리드 항체이다. 헤테로하이브리드 항체의 예는 키메라 및 인간화 항체를 포함한다.

용어 항체는 또한 인간화 항체에 관한 것이다. "인간화" 형태의 비-인간(예: 뮤린 또는 래빗) 항체는, 비-인간 면역글로불린으로부터 유래된 최소 서열을 함유하는, 키메라 면역글로불린, 면역글로불린 쇄 또는 이의 단편(예: Fv, Fab, Fab', F(ab')2 또는 항체의 기타 항원-결합 아서열)이다. 종종, 인간화 항체는 인간 면역글로불린(수용체 항체)이고, 여기서 수용체의 상보성 결정 영역(CDR)의 잔기는 비-인간 종(공여체 항체), 예를 들면, 목적하는 특이성, 친화성 및 능력을 갖는 마우스, 랫트 또는 래빗의 CDR로부터의 잔기에 의해 치환되어 있다. 일부 예에서, 인간 면역글로불린의 Fv 프레임워크 잔기는 상응하는 비-인간 잔기에 의해 치환되어 있다. 추가로, 인간화 항체는, 수용체 항체에서도 수입된 CDR 또는 프레임워크 서열에서도 발견되지 않는 잔기를 포함할 수 있다. 이들 변형은 항체 성능을 추가로 정련하고 최적화하기 위해 이루어진다. 일반적으로, 인간화 항체는 실질적으로 모든 적어도 하나 및 전형적으로 2개의 가변 도메인을 포함할 것이고, 여기서 모든 또는 실질적으로 모든 CDR 영역은 비-인간 면역글로불린의 것들에 상응하고, 모든 또는 실질적으로 모든 FR 영역은 인간 면역글로불린 공통 서열의 것들이다. 인간화 항체는 또한 면역글로불린 불변 영역(Fc)의 일부, 전형적으로 인간 면역글로불린의 것을 적어도 포함할 수 있다. 추가의 상세에 대해서는 문헌[참조: JonesNature 321(1986), 522-525; Reichmann Nature 332(1998), 323-327 and Presta Curr Op Struct Biol 2(1992), 593-596]을 참조한다.

항체의 인간화를 위한 일반적 방법은, 비-인간 "공여체" 항체로부터의 기능적 항원-결합 부위가 인간 "수용체" 항체에 이식되는, CDR 이식을 수반한다. CDR 이식 방법은 당해 기술분야에 공지되어 있고, 예를 들면, 제US 5,225,539호, 제US 5,693,761호 및 제US 6,407,213호에 기재되어 있다. 또 다른 관련 방법은, 유전자 재구성 및 유전자 전환을 겪을 수 있는 하나 이상의 인간화 면역글로불린 유전자좌를 함유하도록 유전적으로 조작되는 유전자도입 동물로부터 인간화 항체의 생성이다(참조: 제US 7,129,084호).

따라서, 본 발명의 맥락에서, 용어 "항체는, 이러한 면역글로불린 분자(즉, "이의 항원-결합 단편") 뿐만 아니라 완전 면역글로불린 분자에 관한 것이다. 추가로, 이 용어는, 상기 논의된 바와 같이, 변형된 및/또는 변화된 항체 분자에 관한 것이다. 이 용어는 또한 재조합 또는 합성에 의해 생성된/합성된 항체에 관한 것이다. 이 용어는 또한 이의 항체 단편 뿐만 아니라 순수한 항체, 예를 들면, 단리된 경쇄 및 중쇄, Fab, Fv, Fab', Fab'-SH, F(ab')2에 관한 것이다. 이 용어는 또한, 이로써 한정되는 것은 아니지만, 완전-인간 항체, 키메라 항체, 인간화 항체, CDR-이식된 항체 및 항체 작제물, 예를 들면, 단일 쇄 Fvs(scFv) 또는 항체-융합 단백질을 포함한다.

바람직한 실시형태에서, 구순 단순포진, 성기 단순포진, 만성 또는 파종성 피부 단순포진 감염, 검상포진 및 포진성 습진으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 대상체에서 점막 또는 상피 조직의 급성 감염의 치료에 사용하기 위한 항-HSV 항체로서, 상기 항체가 국소 투여되는, 항-HSV 항체는 전장 항체, 즉 종종 완전 항체로서 또한 지칭되는 완전 면역글로불린 분자이다.

"단일 쇄 Fv" 또는 "scFv" 항체 단편은, 본 발명의 문맥에서, 항체의 V_H 및 V_L 도메인을 갖고, 이들 도메인은 단일 폴리펩티드 쇄에 존재한다. 일반적으로, scFv 폴리펩티드는, scFv가 항원 결합을 위한 목적하는 구조를 형성하는 것을 가능하게 하는, V_H 및 V_L 도메인 사이의 폴리펩티드 링커를 추가로 포함한다. 단일 쇄 항체의 제조를 위해 기재된 기술은 문헌[참조: Pluckthun in The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, Rosenburg and Moore eds. Springer-Verlag, N.Y.(1994), 269-315]에 기재되어 있다.

본원에 사용된 "Fab 단편"은 하나의 경쇄 및 C_H1 및 중쇄의 가변 영역으로 구성되어 있다. Fab 분자의 중쇄는 또 다른 중쇄 분자와 디설파이드 결합을 형성할 수 없다.

"Fc" 영역은 항체의 C_H2 및 C_H3 도메인을 포함하는 2개의 중쇄 단편을 함유한다. 2개의 중쇄 단편은 2개 이상의 디설파이드 결합 및 C_H3 도메인의 소수성 상호작용에 의해 함께 유지된다.

"Fab' 단편"은 하나의 경쇄, 및 V_H 도메인 및 C_H1 도메인 및 또한 C_H1과 C_H2 사이의 영역을 함유하는 하나의 중쇄의 일부를 함유하고, 이에 의해 쇄간 디설파이드 결합이 2개 Fab' 단편의 2개 중쇄 사이에서 형성되어 F(ab')₂ 분자를 형성할 수 있다.

"F(ab')₂ 단편"은 2개의 경쇄 및, C_H1 및 C_H2 도메인 사이의 불변 영역의 일부를 함유하는 2개의 중쇄를 함유하고, 이에 의해 쇄간 디설파이드 결합이 2개 중쇄 사이에서 형성된다. 따라서, F(ab')₂ 단편은 2개 중쇄 사이의 디설파이드 결합에 의해 함께 유지되는 2개 Fab' 단편으로 구성된다.

"Fv 영역"은 중쇄 및 경쇄 둘 다로부터의 가변 영역을 포함하지만, 불변 영역을 결여한다.

본 발명에 따라 사용되는 항체, 항체 작제물, 항체 단편, 항체 유도체(모두 Ig-유래됨) 또는 이들의 상응하는 면역글로불린 쇄(들)는 당해 기술분야에 공지된 통상의 기술, 예를 들면, 단독으로 또는 조합하여 당해 기술분야에 공지된 아미노산 결실(들), 삽입(들), 치환(들), 부가(들) 및/또는 재조합(들) 및/또는 임의의 기타 변형(들)을 사용하여 추가로 변형시킬 수 있다. 면역글로불린 쇄의 아미노산 서열의 기초로 되는 DNA 서열에 이러한 변형을 도입하는 방법은 당해 기술분야의 숙련가에게 공지되어 있다[참조: Sambrook(1989), loc. cit]. 용어 "Ig-유래 도메인"은 특히 적어도 하나의 CDR을 포함하는 (폴리) 펩티드 작제물에 관한 것이다. 인용된 Ig-유래 도메인의 단편 또는 유도체는, 상기 항체 분자의 일부이고/이거나 화학적/생화학적 또는 분자 생물학 방법에 의해 변형되는 (폴리) 펩티드를 정의한다. 상응하는 방법은 당해 기술분야에 공지되어 있고, 특히 실험 매뉴얼[참조: Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual; Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2nd edition(1989) and 3rd edition(2001); Gerhardt et al., Methods for General and Molecular Bacteriology ASM Press(1994); Lefkovits, Immunology Methods Manual: The Comprehensive Sourcebook of Techniques; Academic Press(1997); Golemis, Protein-Protein Interactions: A Molecular Cloning Manual Cold Spring Harbor Laboratory Press(2002)]에 기재되어 있다.

구순 단순포진, 성기 단순포진, 만성 또는 파종성 피부 단순포진 감염, 검상포진 및 포진성 습진으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 대상체에서 점막 또는 상피 조직의 급성 감염의 치료에 사용하기 위한 본 발명의 맥락에서 사용된 항체 또는 이의 단편으로서, 상기 항체가 국소 투여되는, 항체 또는 이의 단편은, 그것이 "항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편"인 한, 특별히 한정되지 않는다. 따라서, 항체는 HSV에 특이적으로 결합하거나 이를 특이적으로 인식하거나 이와 상호작용하는 임의의 항체, 즉 도메인, 항원, 바람직하게는 HSV의 표면-항원일 수 있다. 당해 기술분야의 숙련가는, 숙련가의 통상의 일반 지식 및 상기 기재된 방법에 기반하여, 제공된 도메인에 대해 지시된 이러한 항체(즉, 항원, 바람직하게는 HSV의 표면-항원)을 생성하고 각각의 항체가 제공된 도메인, 항원, 바람직하게는 HSV의 표면-항원, 바람직하게는 HSV-1 및/또는 HSV-2를 검출/결합할 수 있는지를 결정하는데 용이한 위치에 있다.

바람직한 실시형태에서, 본 발명의 항체는 바이러스 항원 당단백질 D, B, C, H, L, E 또는 I(즉, gD, gB, gC, gH, gL, gE, gI)를 결합/인식한다. 당단백질 D, B, C, H, L, E 및 I는 HSV-1 및/또는 HSV-2의 표면 또는 외피 단백질이다. 이들 단백질은 HSV-1 및/또는 HSV-2의 표면 또는 외피 구조에서, 즉 방출된 감염성 입자의 표면(즉, 유리 비리온의 외피) 상에서 발견될 뿐만 아니라, 이들은 또한 감염된 세포의 표면, 즉 세포의 표면 상에 존재할 수 있다. 또한, 보다 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 항체는 HSV-1 및/또는 HSV-2 외피의 바이러스 표면 항원 당단백질 D, B, C, H, L, E 또는 I(즉, gD, gB, gC, gH, gL, gE 또는 gI)을 결합/인식한다. 바람직한 실시형태에서, 본 발명에 따라 사용하기 위한 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 HSV-1 및/또는 HSV-2 외피의 표면 당단백질 B(gB), 바람직하게는 이의 에피토프를 인식한다. HSV-1 및/또는 HSV-2의 당단백질 B는 충분히 특성화되어 있고, 특정한 서열에 구속되지 않지만, 다양한 HSV-1 및 HSV-2 균주의 예시적 서열은 각각 서열번호 11 내지 16에 제시되어 있다. 서열번호 11은 HSV-1 균주 F의 당단백질 B의 서열을 나타내고, 서열번호 12는 HSV-1 균주 KOS의 당단백질B의 서열을 나타내고, 서열번호 13은 HSV-1 균주 gC-39-R6의 당단백질 B의 서열을 나타내고, 서열번호 14는 HSV-2 균주 HG52의 당단백질 B의 서열을 나타내고, 서열번호 15는 HSV-2 균주 333의 당단백질 B의 서열을 나타내고, 서열번호 16은 HSV-2 균주 MMA의 당단백질 B의 서열을 나타낸다. 이들 당단백질 B 아미노산 서열의 서열 정렬은 HSV-1 및 HSV-2의 gB의 전체 아미노산 상동성이 85%이고, 서열이 단백질의 N- 및 C-말단 영역에 적어도 보존되어 있음을 나타낸다.

바람직한 실시형태에서, 구순 단순포진, 성기 단순포진, 만성 또는 파종성 피부 단순포진 감염, 검상포진 및 포진성 습진으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 대상체에서 점막 또는 상피 조직의 급성 감염의 치료에 사용하기 위한 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편으로서, 상기 항체가 국소 투여되는, 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 감염된 세포로부터 인접한 제2 비-감염된 세포까지 HSV의 확산을 억제할 수 있다(세포로부터 세포로의 확산).

세포로부터 세포로의 확산은, 세포-유리 입자를 방출하지 않고서, 인접한 제2 비-감염된 세포로 확산하는 헤르페스 바이러스의 능력이다. 인접한 세포로 확산하는 헤레페스 바이러스의 능력을 감소 또는 제거하는 것은 병변의 생성을 회피하는 유리한 효과를 갖는다. 항체가 감염된 세포로부터 인접한 제2 비-감염된 세포로 HSV의 확산(세포로부터 세포로의 확산)을 억제할 수 있는지를 조사하기 위해, 당해 기술분야의 숙련가에게 공지된 방법을 사용할 수 있다. 예로서, 하기 검정을 사용할 수 있다: 24-웰 조직 배양 플레이트 중의 유리 커버 슬립 상에서 컨플루언시로 성장시킨 베로 세포를 400 TCID₅₀/웰의 일정한 바이러스 양으로 4시간 동안 37℃에서 감염시킨다. 하나의 중앙 조직 배양 감염 용량(1 TCID₅₀)은 세포변성제, 예를 들면, 바이러스의 양이고, 이는 접종된 세포 배양물의 50%에서 세포변성 효과를 생성할 것이다. 바이러스 접종물을 후속적으로 제거하고, 세포를 PBS로 2회 세척하고, 상청액을 통한 바이러스 확산을 방지하기 위해, 과량의 상이한 항-HSV 항체 또는 폴리클로날 항-HSV 대조군 혈청을 함유하는 1ml DMEM, 2% FCS, Pen/Strep에서 2일 동안 37℃로 추가로 배양했다. HSV-감염된 세포의 바이러스 항원은 형광 표지된 폴리클로날 염소-항-HSV-혈청(BETHYL Laboratories, Montgomery, TX USA, Catalog No. A190-136F, Lot No. A190-136F-2)으로 검출한다. 바람직하게는, 항체는, 20% 미만의 인접한 세포가 감염되는 경우, 바람직하게는 15% 미만, 10% 미만, 5% 미만, 보다 바람직하게는 3% 미만 및 가장 바람직하게는 1% 미만의 인접한 세포가 상기 검정에서 감염되는 경우에 세포로부터 세포로의 확산을 억제한다.

세포로부터 세포로의 확산은 또한 다음과 같이 검정할 수 있다: 중화 항체의 존재는 헤르페스비리다에의 세포로부터 세포로의 확산을 반드시 방지하는 것은 아니다. HSV-1 및 HSV-2 세포로부터 세포로의 확산의 파괴에 대해 항체를 비교하기 위해, 이러한 특정 전파 모드는 표준 시험 방법을 사용하여 시험관내에서 모방할 수 있다. 예를 들면, 개개 세포를 감염시키기 위해, 컨플루언트 베로 세포 단층을 초기에 낮은 MOI(예: 100 TCID50)으로 각각 HSV-1 또는 HSV-2와 함께 배양한다. 37℃에서 흡수 4시간 후, 바이러스 접종물을 제거한다. 개개 감염된 세포로부터 직접 세포로부터 세포로의 전달을 촉진시키지만 세포 배양 상청액을 횡단하여 바이러스 입자를 통한 바이러스 확산을 방지하기 위해, 베로 세포 단층을 과량의 중화 항-gB 항체, 대조군 또는 배지 단독으로 처리한다. 48시간 후, 바이러스 확산은 HSV-1 및 HSV-2의 당단백질 D 상의 공통 에피토프에 특이적인 마우스 모노클로날 항체[참조: Acris Antibodies, San Diego, CA, USA] 및 형광-접합된 2차 항체로 면역염색함으로써 검출할 수 있다. 면역형광 이미지는 100 또는 400배 배율로 형광 현미경을 사용하여 취득할 수 있다.

더욱이, 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 항-HSV 항체는 HSV를 중화시킬 수 있다. 본원에서 "중화"는, 임의의 추가 세포를 감염시킬 수 없도록, 항체가 바이러스를 옵소닌화하는 것을 의미한다. 예를 들면, 최대 20nM 농도의 항체가, 예를 들면, 100 TCID₅₀의 소정량의 HSV를 중화시킬 수 있는지를 시험하는 검정은 문헌[참조: Eis-Hubinger et al., Intervirology 32:351-360(1991); Eis-Hubinger et al., Journal of General Virology 74:379-385(1993)] 및 국제공개공보 제WO2011/038933 A2호의 실시예 1 및 2을 참조한다. 따라서, 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 항체는 최대 20nM, 바람직하게는 최대 16nM, 보다 바람직하게는 최대 12nM, 예를 들면, 최대 10nM, 예를 들면, 최대 8nM 또는 최대 6nM 및 가장 바람직하게는 최대 4nM에서 100 TCID₅₀의 소정량의 HSV를 80% 이상, 바람직하게는 90% 이상, 예를 들면, 95%, 보다 바람직하게는 96% 이상, 예를 들면, 97% 이상, 및 가장 바람직하게는 98% 이상, 예를 들면, 99% 이상 또는 심지어 100%까지 중화시킬 수 있다.

따라서, 바람직한 실시형태에서, 본 발명은 또한, 구순 단순포진, 성기 단순포진, 만성 또는 파종성 피부 단순포진 감염, 검상포진 및 포진성 습진으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 대상체에서 점막 또는 상피 조직의 급성 감염의 치료에 사용하기 위한 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편으로서, 상기 항체가 국소 투여되고, 상기 항체가 항체-의존성 세포독성(ADCC) 및/또는 보체-의존성 세포독성(CDC)과는 독립적으로 세포로부터 세포로의 확산을 억제할 수 있는, 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편에 관한 것이다.

항체가 세포로부터 세포로의 확산을 억제할 수 있는지의 능력을 시험하기 위한 상기한 검정은 보체 및/또는 세포독성 작동제 세포를 함유하지 않기 때문에, 동일한 검정은 항체가 항체-의존성 세포독성(ADCC) 및/또는 보체-의존성 세포독성(CDC)으로부터 독립적으로 세포로부터 세포로의 확산을 억제할 수 있는지를 결정하기 위해 사용될 수 있다.

바람직한 실시형태에서, 본 발명에 따라 사용하기 위한 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 서열번호 1을 포함하는 상보성 결정 영역 V_HCDR1, 서열번호 2를 포함하는 V_HCDR2, 서열번호 3을 포함하는 V_HCDR3, 서열번호 4를 포함하는 V_LCDR1, 서열번호 5를 포함하는 V_LCDR2 및 서열번호 6을 포함하는 V_LCDR3을 포함한다.

본원에서 사용된 용어 "CDR"은 당해 기술분야에 공지되어 있는 "상보성 결정 영역"에 관한 것이다. CDR은, 상기 분자의 특이성을 결정하고 특정 리간드와 접촉하는 면역글로불린 부분이다. CDR은 분자의 최고 가변 부분이고, 이들 분자의 다양성에 기여한다. 각각의 V 도메인에는 3개 CDR 영역, CDR1, CDR2 및 CDR3이 있다. CDR-H는 가변 중쇄의 CDR 영역을 나타내고, CDR-L은 가변 경쇄의 CDR 영역에 관한 것이다. VH는 가변 중쇄를 의미하고, VL은 가변 경쇄를 의미한다. Ig-유래된 영역의 CDR 영역은 문헌[참조: Kabat “Sequences of Proteins of Immunological Interest”, 5th edit. NIH Publication no. 91-3242 U.S. Department of Health and Human Services(1991); Chothia J. Mol. Biol. 196(1987), 901-917 or Chothia Nature 342(1989), 877-883]에 기재된 바와 같이 결정할 수 있다.

따라서, 본 발명의 맥락에서, 상기 본원에 기재된 항체 분자는 완전 항체(면역글로불린, 예를 들면, IgG1, IgG2, IgG2a, IgG2b, IgA1, IgGA2, IgG3, IgG4, IgA, IgM, IgD 또는 IgE), F(ab)-, Fab'-SH-, Fv-, Fab'-, F(ab')2-단편, 키메라 항체, CDR-이식 항체, 완전 인간 항체, 이가 항체-작제물, 항체-융합 단백질, 합성 항체, 이가 단일 쇄 항체, 삼가 단일 쇄 항체 및 다가 단일 쇄 항체로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

"인간화 접근법"은 당해 기술분야에 공지되어 있고, 특히 항체 분자, 예를 들면, Ig-유래 분자에 대해 기재되어 있다. 용어 "인간화"는, 비-인간 항체로부터 유래된 일부를 함유하는, 인간화 형태의 비-인간(예: 뮤린) 항체 또는 이의 단편(예: Fv, Fab, Fab', F(ab'), scFvs, 또는 항체의 기타 항원-결합 부분 서열)을 지칭한다. 인간화 항체는 인간 면역글로불린을 포함하고, 여기서 인간 면역글로불린의 상보성 결정 영역(CDR)으로부터의 잔기는 목적하는 결합 특이성, 친화성 및 능력을 갖는 마우스, 랫트 또는 래빗 등의 비-인간 종의 CDR로부터의 잔기로 치환되어 있다. 일반적으로, 인간화 항체는 실질적으로 모든 적어도 하나의 및 일반적으로 2개의 가변 도메인을 포함하고, 여기서 모든 또는 실질적으로 모든 CDR 영역은 비-인간 면역글로불린의 것에 상응하고, 모든 또는 실질적으로 모든 FR 영역은 인간 면역글로불린 공통 서열의 것이다. 인간화 항체는, 최적으로는, 면역글로불린 불변 영역(Fc)의 적어도 일부, 전형적으로 인간 면역글로불린의 것을 포함한다[참조: Jones et al., Nature 321(1986), 522-525, Presta, Curr. Op. Struct. Biol. 2(1992), 593-596]. 비-인간 항체를 인간화하는 방법은 당해 기술분야에 공지되어 있다. 일반적으로, 인간화 항체는, 비-인간인 공급원으로부터 도입된 하나 이상의 아미노산을 갖고, 여전히 항체의 본래 결합 활성을 보유한다. 항체/항체 분자의 인간화를 위한 방법은 추가로 문헌[참조: Jones et al., Nature 321(1986), 522-525; Reichmann et al., Nature 332(1988), 323-327; and Verhoeyen et al., Science 239(1988), 1534-1536]에 기재되어 있다. 인간화 항체, 예를 들면, EpCAM에 대해 지시된 항체의 구체적 예는 당해 기술분야에 공지되어 있다[참조: LoBuglio, Proceedings of the American Society of Clinical Oncology Abstract(1997), 1562 and Khor, Proceedings of the American Society of Clinical Oncology Abstract(1997), 847].

따라서, 본 발명의 맥락에서, 인간화되고 약제학적 조성물에 성공적으로 사용될 수 있는 항체 분자 또는 이의 항원-결합 단편이 제공된다.

더욱이, 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 항체는, HSV-1 및/또는 HSV-2의 당단백질 B(gB)에 결합하는 항체 또는 이의 항원-결합 단편이고, 이는 VH 도메인(중쇄 가변 영역) 및 VL 도메인(경쇄 가변 영역), 즉 서열번호 9에 제시된 항체의 중쇄의 가변 영역의 아미노산 서열 및 서열번호 10에 제시된 항체의 경쇄의 가변 영역의 아미노산 서열을 포함하거나 이들로 이루어진다.

그러나, 본 발명에 사용된 바와 같은 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 이러한 가변 중쇄 및 경쇄 영역으로 특별히 한정되지 않고, 또한, 항체 또는 항원-결합 단편이 본 발명의 측면에서 HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 대상체에서 점막 또는 상피 조직의 급성 감염을 치료하거나 감염된 세포로부터 인접한 2차 비-감염된 세포로의 HSV의 확산(세포로부터 세포로의 확산)을 억제하거나 상기 및 하기에 기재된 항체-의존성 세포독성(ADCC) 및/또는 보체-의존성 세포독성(CDC)으로부터 독립적으로 세포로부터 세포로의 확산을 억제할 수 있는데 효과를 갖는 한, 각각 서열번호 9 및 10의 서열과 적어도 95%, 90%, 85%, 75%, 70%, 65%, 60%, 55% 또는 50% 서열 상동성을 갖는 VH 도메인 및 VL 도메인을 포함하거나 이들로 이루어진 HSV-1 및/또는 HSV-2 외피의 당단백질 B(gB)에 결합하는 항체 또는 이의 항원-결합 단편일 수 있다. 추가로, 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 서열번호 9 및 10의 서열에 대하여 최대 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10개 또는 그 이상의 보존적 아미노산 치환을 갖는 VH 및 VL 도메인을 포함하는 분자이다. 더욱이, 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 Fab, Fab', Fab'-SH, FV, scFV, F(ab')2, 및 디아바디로 이루어진 그룹으로부터 선택된 항체 단편이다.

아미노산 서열이 서열번호 9 및 10의 서열과 어느 정도의 동일성을 갖는지를 결정하기 위해, 당해 기술분야의 숙련가는 당해 기술분야에 공지된 수단 및 방법, 예를 들면, 수동으로 또는 당해 기술분야의 숙련가에게 공지된 컴퓨터 프로그램을 사용하여 정렬을 사용할 수 있다. 이러한 정렬은, 예를 들면, Lipman-Pearson 방법(Science 227(1985), 1435) 또는 CLUSTAL 알고리즘 등의 공지된 컴퓨터 알고리즘을 사용하여 당해 기술분야의 숙련가에게 공지된 수단 및 방법으로 수행할 수 있다. 이러한 정렬에서 최대 상동성은 아미노산 서열에 존재하는 보존된 아미노산 잔기에 할당하는 것이 바람직하다. 바람직한 실시형태에서, ClustalW2가 아미노산 서열의 비교를 위해 사용된다. 짝짓기 비교/정렬의 경우에, 하기 설정이 바람직하게 선택된다: 단백질 중량 매트릭스: BLOSUM 62; 갭 개방: 10; 갭 확장: 0.1. 다중 비교/정렬의 경우에, 하기 설정이 바람직하게 선택된다: 단백질 중량 매트릭스: BLOSUM 62; 갭 개방: 10; 갭 확장: 0.2; 갭 거리: 5; 말단 갭 없음.

본 발명에 따라서, 2개 이상의 핵산 또는 아미노산 서열의 맥락에서 용어 "동일한" 또는 "퍼센트 동일성"은, 비교 윈도우에 걸쳐 또는 당해 기술분야에 공지된 서열 비교 알고리즘을 사용하여 측정된 지시된 영역에 걸쳐 또는 수동 정렬 또는 가시적 검사에 의해 비교 및 정렬하는 경우, 동일하거나, 동일한 아미노산 잔기 또는 뉴클레오티드의 특정한 퍼센트(예를 들면, HSV-1 또는 HSV-2의 gB에 결합할 수 있고 본 발명의 측면에서 HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 대상체에서 점막 또는 상피 조직의 급성 감염을 치료하는 능력을 갖거나 감염된 세포로부터 인접한 2차 비-감염된 세포로의 HSV의 확산(세포로부터 세포로의 확산)를 억제할 수 있거나 상기 및 하기에서 본원에 기재된 항체-의존성 세포독성(ADCC) 및/또는 보체-의존성 세포독성(CDC)과 독립적으로 세포로부터 세포로의 확산을 억제할 수 있는, 상기 기재된 핵산 서열 또는 아미노산 서열과 60% 또는 65% 동일성, 바람직하게는 70 내지 95% 동일성, 보다 바람직하게는 적어도 95% 동일성)을 갖는 2개 이상의 서열 또는 서열들을 지칭한다. 예를 들면, 60% 내지 95% 또는 그 이상의 서열 동일성을 갖는 서열은 실질적으로 동일한 것으로 간주된다. 이러한 정의는 또한 시험 서열의 보체에도 적용된다. 바람직하게는, 기재된 동일성은 적어도 약 15 내지 25개 아미노산 또는 뉴클레오티드 길이인 영역에 걸쳐, 보다 바람직하게는 약 50 내지 100개 아미노산 또는 뉴클레오티드 길이인 영역에 걸쳐 존재한다. 당해 기술분야의 숙련가는, 당해 기술분야에 공지된 바와 같이, CLUSTALW 컴퓨터 프로그램(Thompson Nucl. Acids Res. 2(1994), 4673-4680) 또는 FASTDB(Brutlag Comp. App. Biosci. 6(1990), 237-245)에 기반한 것들 등의 알고리즘을 사용하여 서열 사이/중의 퍼센트 동일성을 결정하는 방법을 알 것이다.

FASTDB 알고리즘은 전형적으로 서열, 즉 갭에서 내부 비-정합 결실 또는 부가를 이의 계산에서 고려하지 않지만, 이는 % 동일성의 과대평가를 회피하기 위해 수동으로 보정할 수 있다. 그러나, CLUSTALW는 이의 동일성 계산에 서열 갭을 고려한다. 또한, 당해 기술분야의 숙련가는 BLAST 및 BLAST 2.0 알고리즘을 이용할 수 있다[참조: Altschul, (1997) Nucl. Acids Res. 25:3389-3402; Altschul(1993) J. Mol. Evol. 36:290-300; Altschul(1990) J. Mol. Biol. 215:403-410]. 핵산 서열에 대한 BLASTN 프로그램은 디펄트로서 11의 단어 길이(W), 10의 기대치(E), M=5, N=4 및 양 가닥의 비교를 사용한다. 아미노산 서열의 경우, BLASTP 프로그램은 디펄트로서 3의 단어 길이(W) 및 10의 기대치(E)를 사용한다. BLOSUM62 스코어 매트릭스(Henikoff(1989) PNAS 89:10915)는 50의 정렬(B), 10의 기대치(E), M=5, N=4, 및 양 가닥의 비교를 사용한다.

바람직하게는, 아미노산 치환(들)은 "보존적 치환(들)"이고, 이는 단백질 중의 아미노산이 유사한 특성(예: 전하, 측쇄 크기, 소수성/친수성, 골격 형태 및 강성 등)을 갖는 다른 아미노산으로 치환되는 것을 지칭하고, 이러한 변화는 종종 단백질의 생물학적 활성의 변화 없이 이루어질 수 있다. 당해 기술분야의 숙련가는, 일반적으로, 폴리펩티드의 비-필수 영역에서 단일 아미노산 치환이 실질적으로 생물학적 활성을 변화시키지 않음을 인식한다[참조: Watson Molecular Biology of the Gene, The Benjamin/Cummings Pub. Co. 4th Ed.(1987), 224]. 또한, 구조적 또는 기능적으로 유사한 아미노산의 치환은 생물학적 활성을 파괴할 가능성이 낮다. 본 발명의 문맥 내에서, 본 발명의 결합 화합물/항체는, 본원에 개시된 특정 아미노산 서열, 예를 들면, 서열번호 9(항체의 항체 중쇄의 가변 영역을 지칭) 및 서열번호 10(항체의 경쇄의 가변 영역을 지칭)와 비교하는 경우, 최대 0(변화 없음), 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 12, 15, 20 또는 그 이상의 보존적 아미노산 치환을 포함하는 서열을 갖는 폴리펩티드 쇄를 포함한다. 본원에 사용된 바와 같이, 문구 "최대 X" 보존적 아미노산 치환은 0개 치환 및 최대 10개의 임의 수의 치환을 포함하고, 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10개 치환을 포함한다.

이러한 예시적 치환은 바람직하게는 하기 표 1에 기재된 것들에 따라 이루어진다:

예시적 보존적 아미노산 치환

본래 잔기	보존적 치환
Ala(A)	Gly; Ser
Arg(R)	Lys; His
Asn(N)	Gln; His
Asp(D)	Glu; Asn
Cys(C)	Ser; Ala
Gln(Q)	Asn
Glu(E)	Asp; Gln
Gly(G)	Ala
His(H)	Asn; Gln
Ile(I)	Leu; Val
Leu(L)	Ile; Val
Lys(K)	Arg; His
Met(M)	Leu; Ile; Tyr
Phe(F)	Tyr; Met; Leu
Pro(P)	Ala
Ser(S)	Thr
Thr(T)	Ser
Trp(W)	Tyr; Phe
Tyr(Y)	Trp; Phe
Val(V)	Ile; Leu

더욱이, 바람직한 실시형태에서, 본 발명에 따라 사용하기 위한 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편은, 서열번호 7의 위치 1 내지 30, 38 내지 51, 68 내지 99 및 112 내지 122 및 서열번호 8의 위치 1 내지 23, 41 내지 55, 63 내지 94 및 104 내지 114에 제시된 아미노산 잔기와 적어도 70% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다.

추가의 바람직한 실시형태에서, 본 발명에 따라 사용하기 위한 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편은, 서열번호 7의 위치 1 내지 30, 38 내지 51, 68 내지 99 및 112 내지 122 및 서열번호 8의 위치 1 내지 23, 41 내지 55, 63 내지 94 및 104 내지 114에 제시된 아미노산 잔기와 비교하여 프레임워크 영역에서 적어도 75%, 적어도 80%, 보다 바람직하게는 적어도 85%, 적어도 90%, 보다 더 바람직하게는 적어도 95%, 및 가장 바람직하게는 98%의 전체 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 이러한 항체는, 항체 또는 항원-결합 단편이 HSV-1 또는 HSV-2의 gB에 결합하고 본 발명의 측면에서 HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 대상체에서 점막 또는 상피 조직의 급성 감염을 치료하거나 감염된 세포로부터 인접한 제2 비-감염된 세포까지 HSV의 확산(세포로부터 세포로의 확산)을 억제할 수 있거나 상기 및 하기에서 본원에 기재된 항체-의존성 세포독성(ADCC) 및/또는 보체-의존성 세포독성(CDC)으로부터 독립적으로 세포로부터 세포로의 확산을 억제할 수 있는 효과를 갖는 한, 본 발명의 의학적 사용에 적합하다.

따라서, 바람직한 실시형태에서, 본 발명에 따라 사용하기 위한 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 경쇄 및 중쇄의 상기 가변 영역을 갖는 아미노산 서열(즉, 상기 정의된 CDR, 즉 서열번호 1을 포함하는 V_HCDR1, 서열번호 2를 포함하는 V_HCDR2, 서열번호 3을 포함하는 V_HCDR3, 서열번호 4를 포함하는 V_LCDR1, 서열번호 5를 포함하는 V_LCDR2 및 서열번호 6을 포함하는 V_LCDR3)을 포함하는 반면, 아미노산 서열은, 서열번호 7의 위치 1 내지 30, 38 내지 51, 68 내지 99 및 112 내지 122 및 서열번호 8의 위치 1 내지 23, 41 내지 55, 63 내지 94 및 104 내지 114에 제시된 아미노산 잔기와 비교하여, 적어도 75%, 적어도 80%, 보다 바람직하게는 적어도 85%, 적어도 90%, 보다 더 바람직하게는 적어도 95%, 및 가장 바람직하게는 98%의 프레임워크 영역 내의 전체 서열 동일성과 함께 프레임워크 영역 내의 가변성을 갖는다.

이러한 문맥에서, 폴리펩티드는, 서열번호 7 또는 서열번호 8이 목적하는 폴리펩티드의 가장 정합하는 서열로 정렬되고 이들 2개 정렬된 서열 사이의 아미노산 동일성이 서열번호 7의 위치 1 내지 30, 38 내지 51, 68 내지 99 및 112 내지 122 및 서열번호 8의 위치 1 내지 23, 41 내지 55, 63 내지 94 및 104 내지 114에 대해 적어도 X%인 경우, 서열번호 7 또는 8에 대해 프레임워크 영역에서 "적어도 X% 서열 동일성"을 갖는다. 상기 언급한 바와 같이, 아미노산 서열의 이러한 정렬은, 예를 들면, 본원에 제공된 디펄트 설정을 사용하여 국립 바이오테크놀로지 정보 센터(National Centre for Biotechnology Information; NCBI) 홈페이지에 제공된 "BLAST" 프로그램 등의 공적 입수가능한 컴퓨터 상동성 프로그램을 사용하여 수행할 수 있다. 아미노산 서열 또는 핵산 서열 세트의 서열 동일성 퍼센트를 계산하는 추가의 방법은 당해 기술분야에 공지되어 있다.

더욱이, 바람직한 실시형태에서, 본 발명에 따라 사용하기 위한 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 서열번호 9의 V_H 및 서열번호 10의 V_L을 포함한다.

본 발명의 항체 또는 항원-결합 단편의 특이성은 상기 정의된 항체 또는 항원-결합 단편의 아미노산 서열의 성질에 의해 발현될 뿐만 아니라, 항체가 결합할 수 있는 에피토프에 의해 발현될 수 있다. 따라서, 본 발명은 바람직한 실시형태에서 상기 기재된 항체와 동일한 에피토프, 바람직하게는 mAbhu2c를 인식하는 본 발명에 따라 사용하기 위한 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 이용한다. 실시예 부분에 제시되고 국제공개공보 제WO2011/038933 A2호의 도 13A 및 13B에 설명된 바와 같이, 이러한 에피토프는 불연속적이거나, 오히려 HSV-1 및 HSV-2의 당단백질 B의 아미노산 172 내지 195 및 295 내지 313에 위치된 변성에 대해 부분적으로 내성인 위연속적 에피토프이다. 본 출원의 맥락에서, mAb 2c 항체의 에피토프는 gB 단백질의 최초 487개 아미노-말단 잔기 내에 위치될 수 있다. 바람직하게는, 에피토프는 gB 단백질의 위치 172와 307 사이의 아미노산 서열 내에 위치된 적어도 하나의 아미노산 서열을 포함할 수 있다.

에피토프는 gB 단백질의 연속 아미노산 서열 ₃₀₁YGYRE₃₀₅, 바람직하게는 연속 아미노산 서열 ₃₀₁YGYREG₃₀₆ 또는 ₃₀₀FYGYRE₃₀₅를 포함할 수 있고, 보다 바람직하게는 서열은 말단(즉, ₂₉₉PFYGYRE₃₀₅ 또는 ₃₀₀FYGYREGS₃₀₇)에서 추가로 확장될 수 있다. 본 발명의 항체의 에피토프는 gB의 연속 아미노산 서열 298-313(₂₉₈SPFYGYREGSHTEHTS₃₁₃)을 포함할 수 있다.

또는, 에피토프는 연속 아미노산 서열 ₁₇₂QVWFGHRYSQFMGIFED₁₈₈에 위치할 수 있다. 에피토프는 연속 아미노산 서열 ₁₇₂QVWFGHRYSQFMG₁₈₄를 포함할 수 있다.

바람직하게는, 하나 이상의 연속 아미노산 서열로 이루어질 수 있다. 에피토프는 부분적으로 불연속 에피토프일 수 있다. 보다 바람직하게는, 에피토프는 2개의 연속 아미노산 서열을 포함할 수 있다. 2개의 아미노산 서열로 이루어진 이러한 에피토프는 "듀오토프"로서 지정될 수 있다. 항체는 양 아미노산 서열에 결합할 수 있다.

보다 바람직하게는, 듀오토프의 아미노산 서열은 아미노산 서열 ₃₀₀FYGYRE₃₀₅ 및 아미노산 위치 172와 188 사이에 위치된 아미노산 서열을 포함할 수 있다. 보다 더 바람직하게는, 에피토프는 gB 단백질의 아미노산 서열 ₃₀₀FYGYRE₃₀₅ 및 아미노산 서열 ₁₇₉YSQFMG₁₈₄를 포함할 수 있다. 또는, 에피토프 또는 듀오토프는 화학적으로 합성할 수 있다. 에피토프는 서열 YSQFMG-βA-FYGYRE을 갖는 화학적으로 합성된 에피토프일 수 있다. 본원에서 사용된 약어 βA는 베타-알라닌을 지칭한다.

가장 바람직하게는, 에피토프는 gB 단백질의 아미노산 서열 FYGYRE 및 아미노산 서열 FED를 포함할 수 있다. 에피토프는 서열 FED-βA-βA-FYGYRE 또는 PFYGYREGFEDF를 갖는 화학적으로 합성된 에피토프일 수 있다.

에피토프는 gB 단백질에 포함될 수 있지만 또한 이의 분해 생성물에 포함될 수 있거나 화학적으로 합성된 펩티드일 수 있음은 당해 기술분야의 숙련가에게 이해될 수 있다. 아미노산 위치는 단지 gB 단백질의 상응하는 아미노산 서열에서 위치를 입증하기 위해 나타낸다. 본 발명은 에피토프를 포함하는 모든 펩티드를 포함한다. 펩티드는 100개 이상 아미노산 길이의 폴리펩티드의 일부일 수 있거나, 100개 미만, 바람직하게는 50개 미만, 보다 바람직하게는 25개 미만 아미노산, 보다 더 바람직하게는 16개 미만 아미노산의 작은 펩티드일 수 있다. 이러한 펩티드의 아미노산은 천연 아미노산 또는 비천연 아미노산(예: 베타-아미노산, 감마-아미노산, D-아미노산) 또는 이의 조합일 수 있다. 추가로, 본 발명은 에피토프의 각각의 레트로-인베르소 펩티드를 포함할 수 있다. 펩티드는 결합되지 않거나 결합될 수 있다. 이는, 예를 들면, 소분자(예: 약물 또는 형광단), 고분자량 폴리머(예: 폴리에틸렌 글리콜(PEG), 폴리에틸렌 이민(PEI), 하이드록시프로필메타크릴레이트(HPMA) 등) 또는 단백질, 지방산, 당 잔기에 결합될 수 있거나, 막에 삽입될 수 있다.

문제의 항체 및 본 발명의 항체가 동일한 에피토프를 인식하는지를 시험하기 위해, 하기 경쟁 연구를 수행할 수 있다: 3moi(감염 다중도)로 감염된 베로 세포를 20시간 후 경쟁자로서 상이한 농도의 문제의 항체와 함께 1시간 동안 배양한다. 제2 배양 단계에서, 본 발명의 항체를 100nM의 일정 농도로 적용하고, 이의 결합은 본 발명의 항체의 불변 도메인에 대해 지시된 형광-표지된 항체를 사용하여 유동-세포계수법으로 검출한다. 문제의 항체의 농도에 반-비례하는 결합은 양 항체가 동일한 에피토프를 인식하는 것을 나타낸다. 그러나, 사용될 수 있는 다수의 기타 검정법은 당해 기술분야에 공지되어 있다.

따라서, 바람직한 실시형태에서, 본 발명에 따라 사용하기 위한 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 mAb 2c와 동일한 에피토프를 인식하고, 상기 에피토프는 HSV-1 및 HSV-2의 당단백질 B의 아미노산 172 내지 195 및 295 내지 315에 위치되어 있다. 아미노산 31 내지 505으로부터 gB 영역을 신장하는 중첩 15-머(mer) 펩티드를 사용하여, mAb 2c가, HSV-1 및 HSV-2의 당단백질 B의 아미노산 175 내지 195 및 298 내지 315에 위치되어 있는 에피토프를 인식할 수 있다는 것은 문헌[참조: Daumer et al., Med Microbiol Immunol 2011(200):85-97]에 기재되어 있다. 고해상도 13-머 펩티드 마이크로어레이[참조: Krawczyk et al., Journal of Virology 2011(85):1793-1803]를 사용하는 것은 mAb 2c에 의해 인식된 에피토프를 HSV-1 및 HSV-2의 당단백질 B의 아미노산 172 내지 195 및 295 내지 313으로 맵핑했다.

HSV-1 및/또는 HSV-2의 당단백질 B의 서열은 충분히 특성화되어 있고, 상기 정의된 바와 같이, 특정 서열에 결합되지 않고서, 다양한 HSV-1 및 HSV-2 균주의 예시적 서열은 각각 서열번호 11 내지 16에 제시되어 있다. mAb 2c 항체에 의해 인식된 에피토프는 HSV-1과 HSV-2 사이 뿐만 아니라 다양한 HSV-균주 중에서 고도로 보존되어 있다.

본 발명에 개시된 치료에 사용될 수 있는 이러한 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 HSV-1 및 HSV-2의 당단백질 B의 상기 에피토프를 검출하는 항체로 한정되지 않는다. 실제로, HSV-1 및 HSV-2의 당단백질 B의 또 다른 에피토프 또는 심지어 또 다른 단백질 또는 폴리펩티드의 에피토프를 검출하는 기타 항체는, 이러한 항체가 본 발명의 측면에서 HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 대상체에서 점막 또는 상피 조직의 급성 감염을 치료하거나 감염된 세포로부터 인접한 제2 비-감염된 세포까지 HSV의 확산(세포로부터 세포로의 확산)을 억제할 수 있거나 상기 및 하기에서 본원에 기재된 항체-의존성 세포독성(ADCC) 및/또는 보체-의존성 세포독성(CDC)으로부터 독립적으로 세포로부터 세포로의 확산을 억제할 수 있는 한, 본 발명의 치료에서 사용될 수 있다.

당해 기술분야의 숙련가의 통상의 기술 및 일반적 방법으로, 당해 기술분야의 숙련가는, 폴리클로날 및 모노클로날 항체 등의 항체의 생성에 유용한 HSV의 폴리펩티드의 관련 에피토프(또는 기능적 단편)를 본원에 제공된 서열로부터 용이하게 추정할 수 있다. 그러나, 당해 기술분야의 숙련가는 또한 CDR-이식된 항체 또는 인간화 및 완전 인간 항체 등의 조작된 항체를 용이하게 제공하는 위치에 있다.

본 발명의 문맥에서 특히 바람직한 것은 모노클로날 항체이다. 모노클로날 항체의 제조를 위해, 연속 세포주 배양물에 의해 생성된 항체를 제공하는 임의의 기술을 사용할 수 있다. 이러한 기술의 예는 인간 모노클로날 항체를 생성하기 위한 하이브리도마 기술, 트리오마 기술, 인간 B-세포 하이브리도마 기술 및 EBV-하이브리도마 기술을 포함한다[참조: Shepherd and Dean(2000), Monoclonal 날 Antibodies: A Practical Approach, Oxford University Press, Goding and Goding(1996), Monoclonal Antibodies: Principles and Practice - Production and Application of Monoclonal Antibodies in Cell Biology, Biochemistry and Immunology, Academic Pr Inc, USA].

항체 유도체는 또한 펩티드모방체에 의해 생성할 수 있다. 추가로, 단일 쇄 항체의 생성에 대해 기재된 기술[참조: US 특허 제4,946,778호]은 HSV의 항원을 특이적으로 인식하는 단일 쇄 항체를 생성하기 위해 적용할 수 있다. 또한, 유전자도입 동물을 사용하여 HSV의 폴리펩티드에 대한 인간화 항체를 발현시킬 수 있다.

본 발명은 또한, HSV-1 및 HSV-2의 당단백질 B의 천연 폴리펩티드 및 재조합 폴리펩티드 또는 임의의 또 다른 단백질 또는 폴리펩티드에 대한 특이적 항체의 생성을 포함한다. 이러한 생성은, 예를 들면, 마우스 등의 동물의 면역화에 기반한다. 그러나, 또한 항체/항혈청의 생성을 위한 기타 동물은 본 발명 내에 포함된다. 예를 들면, 모노클로날 및 폴리클로날 항체는 래빗, 마우스, 염소, 당나귀 등에 의해 생성될 수 있다. HSV-1 또는 HSV-2의 상응하게 선택된 폴리펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드는 적절한 벡터 내로 서브클로닝시킬 수 있고, 여기서 재조합 폴리펩티드는, 발현을 가능하게 하는 생물, 예를 들면, 세균에서 발현되어야 한다. 따라서, 발현된 재조합 단백질은 마우스 내로 복강내 주입될 수 있고, 수득되는 특이적 항체는, 예를 들면, 심장내 혈액 천공에 의해 제공되는 마우스 혈청으로부터 수득할 수 있다. 본 발명은 또한 첨부된 실시예에서 예시된 바와 같이 DNA 백신 전략을 사용함으로써 천연 폴리펩티드 및 재조합 폴리펩티드에 대한 특이적 항체의 생성을 상정한다. DNA 백신 전략은 당해 기술분야에 공지되어 있고, 유전자 총 또는 제트 주입 및 근육내 또는 피내 주사에 의한 리포솜-매개된 전달을 포함한다. 따라서, HSV-1 및 HSV-2의 폴리펩티드 또는 단백질 또는 에피토프에 대해 지시된 항체는 HSV-1 및 HSV-2의 목적하는 폴리펩티드 또는 단백질 또는 에피토프, 특히 gB의 에피토프를 발현하는 벡터를 근육내에 직접 주입하여 동물을 직접 면역화시킴으로써 수득할 수 있다. 수득된 특이적 항체의 양은 ELISA를 사용하여 정량할 수 있고, 이는 또한 하기에서 본원에 기재되어 있다. 항체를 생성하는 추가의 방법은 당해 기술분야에 공지되어 있다[참조: Harlow and Lane, "Antibodies, A Laboratory Manual", CSH Press, Cold Spring Harbor, 1988].

용어 "특이적으로 결합하는"은, 본원에 사용된 바와 같이, HSV-1 및 HSV-2의 목적하는 폴리펩티드 또는 단백질 또는 에피토프, 특히 gB의 에피토프의 존재, 및 단백질 및 기타 생물제제의 이종성 모집단의 존재하에 항체를 결정하는 결합 반응을 지칭한다.

따라서, 지정된 검정 조건하에, 특정의 항체 및 HSV-1 및 HSV-2의 상응하는 폴리펩티드 또는 단백질 또는 에피토프, 특히 gB의 에피토프는 서로 결합하고, 샘플에 존재하는 다른 성분과 유의한 양으로 결합하지 않는다. 이러한 조건하에 표적 분석물에 대한 특이적 결합은 특정 표적 분석물에 대한 이의 특이성을 선택하는 결합 잔기를 필요로 할 수 있다. 다양한 면역검정 포맷을 사용하여 특정 항원과 특이적으로 반응하는 항체를 선별할 수 있다. 예를 들면, 고체-상 ELISA 면역검정을 통상 사용하여 분석물과 특이적으로 면역반응하는 모노클로날 항체를 선별할 수 있다. 특이적 면역반응성을 결정하기 위해 사용될 수 있는 면역검정 포맷의 기재에 대해서는 문헌[참조: Shepherd and Dean(2000), Monoclonal Antibodies: A Practical Approach, Oxford University Press and/ or Howard and Bethell(2000) Basic Methods in 항체 Production and Characterization, Crc. Pr. Inc.]을 참조한다. 전형적으로, 특이적 또는 선택적 반응은 노이즈에 대해 적어도 2배 배경 신호 및 보다 전형적으로 배경보다 10 내지 100배 이상일 것이다. 당해 기술분야의 숙련가는 신규한 폴리펩티드에 대해 지시된 특이적 결합 분자를 제공하고 생성하는 위치에 있다. 특이적 결합-검정에 있어서, 이는 목적하지 않는 교차-반응성을 회피하기 위해 용이하게 사용될 수 있고, 예를 들면, 폴리클로날 항체는 공지된 방법에 의해 용이하게 정제 및 선별할 수 있다[참조: Shepherd and Dean, loc. cit.].

용어 "항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편"은 본 발명에 따라 항체 분자 또는 이의 항원-결합 단편이 HSV-1 및 HSV-2의 목적하는 폴리펩티드 또는 단백질 또는 에피토프, 특히 gB의 에피토프의 적어도 2개 아미노산을 특이적으로 인식하거나 특이적으로 상호작용하고/하거나 결합할 수 있음을 의미한다. 상기 용어는 항체 분자의 특이성, 즉 HSV-1 및 HSV-2의 목적하는 폴리펩티드 또는 단백질 또는 에피토프, 특히 gB의 에피토프를 특이적 영역 사이에서 식별하는 이의 능력에 관한 것이다. 따라서, 특이성은 당해 기술분야에 공지된 방법 및 본원에 개시 및 기재된 방법에 의해 실험적으로 결정될 수 있다. 이러한 방법은, 이로써 한정되는 것은 아니지만, 웨스턴 블롯, ELISA-, RIA-, ECL-, IRMA-시험 및 펩티드 스캔을 포함한다. 이러한 방법은 또한, 특히 첨부된 실시예에 설명된 바와 같이 K_D-값의 결정을 포함한다. 펩티드 스캐(펩스팟 검정)은 폴리펩티드 항원에서 선형 에피토프를 맵핑하기 위해 통상 사용된다. 폴리펩티드의 일차 서열은 서로 중첩하는 펩티드로 활성화 셀룰로즈 상에서 성공적으로 합성된다. 특이적 항원/에피토프를 검출하거나 인식하는 이의 능력에 대해 시험되는 항체에 의한 특정 펩티드의 인식은 통상의 발색(서양고추냉이 퍼옥사이드 및 4-클로로나프톨 및 과산화수소에 의한 2차 항체)에 의해, 화학 발광 반응 또는 당해 기술분야에 공지된 유사한 수단에 의해 스코어화한다. 특히, 화학발광 반응의 경우에, 반응을 정량화할 수 있다. 항체가 중첩 펩티드의 특정 세트와 반응하는 경우, 반응에 필요한 아미노산의 최소 서열을 추정할 수 있다. 동일한 검정은 반응성 펩티드의 2개의 상이한 클러스터를 나타낼 수 있고, 이는 항원성 폴리펩티드에서 불연속적, 즉 구성적 에피토프의 인식을 나타낸다[참조: Geysen(1986), Mol. Immunol. 23, 709-715].

항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편의 바람직한 에피토프는 상기 및 하기 정의되어 있고, mAb2c에 의해 인식되는 것과 동일하다.

바람직한 실시형태에서, 본 발명에 따라 사용하기 위한 항-HSV 항체(또는 이의 항원-결합 단편)은 mAb 2c 항체(또는 이의 항원-결합 단편)이다. 이러한 모노클로날 항체 MAb 2c는 다른 개소에 기재되어 있고, 바이러스 세포로부터 세포로의 확산을 억지함으로써, HSV-1/2가 항체-의존성 세포독성(ADCC) 및/또는 보체-의존성 세포독성(CDC)으로부터 독립적으로 체액성 면역 감시를 회피하는 주요 메카니즘에 의해 바이러스를 중화시키는 것으로 입증되었다[참조: Eis-Hubinger et al., Intervirology 32:351-360(1991); Eis-Hubinger et al., Journal of General Virology 74:379-385(1993); WO2011/038933 A2; Krawczyk A, et al., Journal of virology(2011);85(4):1793-1803; Krawczyk A, et al., Proc Natl Acad Sci U S A(2013);110(17):6760-6765].

상기 정의된 항체 및 이의 항원-결합 단편은 국소 투여를 수반하는 의료 설정에 특히 유용하다. 따라서, 상기 언급한 바와 같이, 본 발명은, 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편의 의학적 용도로서, 상기 항체 또는 이의 항원-결합 단편이 국소 투여되는, 의학적 용도에 관한 것이다. 따라서, 본 발명은, 구순 단순포진, 성기 단순포진, 만성 또는 파종성 피부 단순포진 감염, 검상포진 및 포진성 습진으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 대상체에서 점막 또는 상피 조직의 급성 감염의 치료에 사용하기 위한 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편으로서, 상기 항체가 국소 투여되는, 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편에 관한 것이다.

용어 "치료" 등은 목적하는 약리학적 및/또는 생리학적 효과를 수득하는 것을 일반적으로 의미하기 위해 본원에서 사용된다. 이미 상기 기재된 바와 같이, 본 발명의 치료는 급성 감염의 치료에 관한 것이고, 따라서 상기 효과가 질환 또는 이의 증상을 완전히 또는 부분적으로 방지한다는 측면에서 예방적인 것을 배제한다. 오히려, 용어 "치료"는 상기 정의된 바와 같은 급성 HSV 감염의 질환에 기여하는 질환 및/또는 부작용 및/또는 증상을 부분적으로 또는 완전히 치료한다는 측면에서 치료적인 것으로 이해되어야 한다. 따라서, 본 발명의 치료는 급성 감염의 치료에 관한 것이다. 이와 관련하여 "급성"은 대상체가 질환의 증상을 나타내는 것을 의미한다. 달리 말하면, 치료되는 대상체는 치료의 실제 필요성이 있고, 본 발명의 문맥에서 용어 "급성 치료"는 질환의 개시 또는 질환의 발생 후에 질환을 실제로 치료하기 위해 취해진 조치에 관한 것이다. 본 발명의 문맥에서 지칭된 바와 같이 용어 "급성"은 예방적 치료 또는 방지적 치료, 즉 질환 예방, 예를 들면, 감염 및/또는 질환의 개시를 예방하기 위해 취해진 조치와 반대이다. 보다 구체적으로, 예방적 치료는 이것이 표적 세포에 대한 유리 바이러스 입자(신체 외부로부터)의 부착을 방지하고 또한 바이러스 복제를 방지하는 방식으로 이해될 수 있다. 대조적으로, 급성 감염(이는 일차 또는 재발 감염일 수 있다)에서, 자손 바이러스는 HSV 복제시에 참가한다. 따라서, 본 발명에서 지칭되는 "급성 치료"는 명백하게는 HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 감염의 예방적 또는 방지적 치료에 관한 것이 아니다.

본 발명에 따르는 국소 투여는, 이로써 한정되는 것은 아니지만, 크림, 폼, 겔, 로션 및 연고를 포함하는 투여 형태의 광범위한 부류를 통해 상기 지칭된 감염을 치료하기 위해 피부 또는 점막 등의 신체 표면에 적용되는 의약, 적용 또는 투여에 관한 것이다. 바람직한 실시형태에서, 국소 투여는 피부인 것으로 이해되고, 이는 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편이 피부에 직접 적용되는 것을 의미한다. 이론에 구속시키지 않고 일부 추가 비제한적 예를 제공하기 이해, 국소 투여는 또한 흡입, 예를 들면, 천식 의약일 수 있거나, 또는 피부 이외의 조직의 표면에 적용될 수 있고, 예를 들면, 결막에 적용된 점안액, 또는 귀에 위치된 귀 액적, 또는 치아 표면에 적용된 의약일 수 있다. 투여 경로로서, 국소 투여는 장용(소화관에서) 및 혈관/정맥내(순환계로 주입)과 대비된다. 이의 가장 넓은 의미에서, 국소 효과는 약력학적 의미에서 전신이 아닌 국소 의약 표적과 관련되는 방식으로 이해될 수 있다.

본 발명에 따르는 국소 투여 방식, 즉 구순 단순포진, 성기 단순포진, 만성 또는 파종성 피부 단순포진 감염, 검상포진 및 포진성 습진으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 대상체에서 점막 또는 상피 조직의 급성 감염의 감염을 치료하기 위해 피부 또는 점막 등의 신체 표면에 적용되는 의약, 약제학적 조성물 또는 적용 또는 투여는 특별히 한정되지 않고, 당해 기술분야의 숙련가는 국소 투여에 적합할 수 있는 다수의 형태 및 제제를 알고 있다. 이론에 구속되고 한정되는 것은 아니지만, 하기 실시예가 제공된다. 다수의 일반 부류가 있고, 국소 의약에 적합한 유사 제형 사이에 명확한 분할선은 없다. 예로서, 국소 용액이 사용될 수 있다. 국소 용액은 일반적으로 저점도의 것이고, 종종 기재 중의 물 또는 알콜을 사용한다.

또 다른 예로서, 로션을 사용하여 항-HSV 항체를 국소 투여할 수 있다. 로션은 용액과 유사하지만, 보다 농후하고, 용액보다 자연적으로 더욱 진정성인 경향이 있다. 이들은 통상 물과 혼합된 오일이고, 보다 종종 용액보다 알콜이 적다.

또 다른 예로서, 크림을 사용하여 항-HSV 항체를 국소 투여할 수 있다. 크림은 통상 대략 동등한 비율의 오일과 물의 에멀젼이다. 이는 또한 피부의 각질층 외층을 투과한다. 크림은 로션보다 더욱 농후성이고, 이의 용기로부터 제거하는 경우, 이의 형상을 유지한다. 이는 습윤 경향이 중간인 경향이 있다.

또 다른 예로서, 연고를 사용하여 항-HSV 항체를 국소 투여할 수 있다. 연고는 통상 균질성, 점성, 반고체 제제, 가장 통상적으로 고점도를 갖는 지성, 농후 오일(오일 80% 내지 물 20%)이고, 이는 피부 또는 점막에 대한 외부 적용을 의도한다. 연고는 이것이 함유할 수 있는 물의 최대량을 한정하는 물 수를 갖는다. 이들은 에몰리언트로서, 또는 보호, 치료 또는 예방적 목적으로 및 어느 정도의 폐색이 요구되는 경우, 피부에 대한 본 발명에 따르는 항-HSV 항체의 적용을 위해 사용할 수 있다. 연고의 비히클은 연고 기제로서 공지되어 있다. 기제의 선택은 연고에 대한 임상 적응에 의존하고, 당해 기술분야의 숙련가의 지식에 기반하여 적절히 선택된다. 상이한 유형의 연고 기제는 탄화수소 기제, 예를 들면, 경질 파라핀, 연질 파라핀, 미정질 왁스 및 크레신; 흡수 기제, 예를 들면, 양모지, 밀랍; 수용성 기제, 예를 들면, 마크로골 200, 300, 400; 유화 기제, 예를 들면, 유화 왁스, 세트리미드; 식물성유, 예를 들면, 올리브유, 코코넛유, 참깨유, 아몬드유 및 땅콩유일 수 있다. 통상, 의약, 즉 본 발명에서 항-HSV 항체는 기제에 분산되고, 이후에 이들은 피부의 살아있는 세포 내로 약물 투과 후에 분할된다. 연고는 통상 소수성, 친수성 또는 물-유화 기제를 사용하여 제형화되어, 피부 분비물과 비혼화성, 혼화성 또는 유화가능한 제제를 제공한다. 이들은 또한 탄화수소(지방), 흡수, 물-제거가능한 또는 가용성 기제로부터 유래할 수 있다.

또 다른 예로서, 겔을 사용하여 항-HSV 항체를 국소 투여할 수 있다. 겔은 통상 용액보다 더욱 농후성이다. 겔은 종종 알콜 기제 중의 반고체 에멀젼이다. 일부는 체온에서 용해할 것이다. 겔은 알콜 또는 아세톤으로 셀룰로즈 절단되는 경향이 있다.

또 다른 예로서, 발포체를 사용하여 항-HSV 항체를 국소 투여할 수 있다.

또 다른 예로서, 경피 패치를 사용하여 항-HSV 항체를 국소 투여할 수 있다. 경피 패치는 약물을 전달하는 매우 정확한 시간 방출 방법일 수 있다. 경피 전달 시스템(패치)으로부터 활성 성분의 방출은 전체 패치를 피복하는 접착제를 통한 확산, 패치 림 상에 단지 접착제를 가질 수 있는 막을 통한 확산에 의해 조절될 수 있거나, 약물 방출은 폴리머 매트릭스로부터 방출에 의해 조절될 수 있다.

또 다른 예로서, 분말을 사용하여 항-HSV 항체를 국소 투여할 수 있다. 분말은 자체(활석 분말)에 의한 순수한 약물이거나, 옥수수 전분 또는 옥수수대 등의 담체에서 혼합된 약물로 제조된다(Zeosorb AF - 마이코나졸 분말).

또 다른 예로서, 고체 형태를 사용하여 항-HSV 항체를 국소 투여할 수 있다. 따라서, 항-HSV 항체는 고체 형태로 배치할 수 있다. 예는 탈취제, 제한제, 수렴제 및 지혈제이다. 바람직한 실시형태에서, 특히 성기 단순포진의 HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 점막 또는 상피 조직의 치료에서 항-HSV 항체의 국소 투여의 문맥에서, 항-HSV 항체는 좌제의 형태로 투여할 수 있다. 좌제는, 단순포진 성기의 치료의 문맥에서 항-HSV 항체를 포함하는 약물 전달 시스템이고, 이것이 용해 또는 용융하여 항-HSV 항체를 방출하고 따라서 항-HSV-항체를 국소 전달하도록 작용하는 질(즉, 질 좌제의 형태)에 삽입된다.

또 다른 예로서, 증발 장치를 사용하여 항-HSV 항체를 국소 투여할 수 있다. 따라서, 항-HSV 항체는 연고 또는 겔로서 적용하고, 증발을 통해 점막에 도달할 수 있다.

또 다른 예로서, 페이스트를 사용하여 항-HSV 항체를 국소 투여할 수 있다. 페이스트는 3개 제제 - 오일, 물 및 분말을 조합한다. 이는 분말이 현탁되어 있는 연고이다.

마지막 비제한적 예로서, 팅크제를 사용하여 항-HSV 항체를 국소 투여할 수 있다. 팅크제는 높은 퍼센트의 알콜을 갖는 피부 제제이다.

또 다른 실시형태에서, 구순 단순포진, 성기 단순포진, 만성 또는 파종성 피부 단순포진 감염, 검상포진 및 포진성 습진으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 대상체에서 점막 또는 상피 조직의 급성 감염의 치료에 사용하기 위한 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 감염된 점막 또는 상피 조직에 국소 적용된다. 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편이 적용되는 영역은 특별히 한정되지 않는다. 바람직하게는, HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 감염의 급성 증상을 나타내는 점막 또는 상피 조직의 영역이 선택된다. 바람직하게는, 대상체 신체의 이들 영역 또는 부분은 신체 전체의 입술, 성기, 코, 귀, 눈, 손가락, 발가락 및/또는 피부 영역, 바람직하게는 머리, 턱 영역, 목, 가슴, 얼굴, 복부 및/또는 다리이다. 특히, 상기된 바와 같은 피부 단순포진 감염에서는 통상적으로 신체 전체의 (보다 큰) 피부 영역이 영향을 받을 수 있고, 상기 기재된 검상포진에서는 통상 머리, 가장 통상적으로 턱 영역, 목, 가슴, 얼굴, 복부 및 다리 상에서 발생한다. 따라서, 이들 질환에서, 본 발명에 따르는 국소 투여는 이들 신체 부분 또는 점막 또는 상피 조직의 영역에 대해 수행되는 것이 바람직하다.

추가의 바람직한 실시형태에서, 본 발명에 따라 사용하기 위한 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 감염된 점막 또는 상피 조직의 주변의 영역에 국소 적용된다. 감염된 점막 또는 상피 조직의 주변의 영역은 조직의 소정 감염 위치 주변의 영역으로 이해되어야 한다. 주변 영역의 범위는 특별히 한정되지 않지만, 예를 들면, 감염된 영역 크기의 대략 0.5배, 감염된 영역의 동일한 크기, 감염된 영역 크기의 1.5배, 바람직하게는 2배 또는 심지어 보다 더 바람직하게는 3, 4 또는 5배를 갖는 감염된 조직에 인접한/주변의 영역을 피복할 수 있다.

구순 단순포진, 성기 단순포진, 만성 또는 파종성 피부 단순포진 감염, 검상포진 및 포진성 습진으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 점막 또는 상피 조직의 급성 감염의 치료에 사용하기 위한 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편으로서, 상기 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편이 국소 적용되는, 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 바이러스 정지제와 병용하여 투여할 수 있다. 바람직하게는, 병용 요법은 본 발명에 따르는 치료에 대한 상승작용 효과를 발휘한다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "병용"은 상기 개략된 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편 및 하기 본원에서 기재된 바이러스 정지제의 조합에 관한 것이다. 바람직한 실시형태에서, 동시 적용이 상정된다. 또한, 병용은 또한 2개 성분, 즉 상기 개략된 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편 및 하기 본원에 기재된 바이러스 정지제의 후속 적용을 포함한다. 따라서, 이들 성분 중의 하나를 조합물 중의 다른 하나의 전에, 동시에 또는 후에 투여할 수 있거나, 그 반대일 수 있다. 따라서, 본원에 사용된 바와 같은 "조합하여"는 상기 개략된 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편 및 하기 본원에 기재된 바이러스 정지제의 투여 사이의 타이밍을 제한하지 않는다. 따라서, 2개 성분을 동시에/병행하여 투여하지 않는 경우, 투여는 1분, 5분, 15분, 30분, 45분, 1시간, 2시간, 4시간, 6시간, 12시간, 24시간, 48시간 또는 72시간까지 또는 당해 기술분야의 숙련가에 의해 용이하게 결정되고/되거나 본원에 기재된 임의의 적합한 시간차에 의해 분리할 수 있다.

바이러스 정지제는 당해 기술분야의 숙련가에게 공지되어 있고, 바이러스 감염을 치료하기 위해 구체적으로 사용된 의약 부류인 항바이러스 약물로서 일반적으로 또한 지칭된다. 구체적 항바이러스제는 특정의 바이러스를 위해 사용된다. 대부분의 항생물질과 달리, 항바이러스 약물은 이들의 표적 병원체를 파괴하지 않고; 대신에 이들은 이들의 발달을 억제한다.

HSV 감염과 관련하여, 당해 기술분야의 숙련가는 본 발명에 따르는 바이러스 발달을 억제하는데 적합한 적절한 바이러스 정지제를 선택하는 위치에 있다. 예로서, 바이러스 정지제는 뉴클레오사이드 유사체, 피로포스페이트 유사체, 뉴클레오티드 유사체, 아만타딘 유도체 및 헬리카제-프리마제 억제제의 약물 부류로 이루어진 그룹으로부터 선택될 수 있다. 따라서, 본 발명은, 구순 단순포진, 성기 단순포진, 만성 또는 파종성 피부 단순포진 감염, 검상포진 및 포진성 습진으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 대상체에서 점막 또는 상피 조직의 급성 감염의 치료에 사용하기 위한 항-HSV 단편 또는 이의 항원-결합 단편으로서, 상기 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편이 뉴클레오사이드 유사체, 피로포스페이트 유사체, 뉴클레오티드 유사체 및 헬리카제-프리마제 억제제의 약물 부류로 이루어진 그룹으로부터 선택된 바이러스 정지제와 조합하여 국소 적용되는, 항-HSV 단편 또는 이의 항원-결합 단편에 관한 것이다.

뉴클레오사이드 유사체는 당해 기술분야에 공지되어 있고, DNA 합성에서 뉴클레오사이드와 같이 작용하는 분자에 관한 것이다. 이들은, 감염된 세포에서 바이러스 복제를 방지하기 위해 사용된 다양한 항바이러스 생성물을 포함한다. 이들이 포스포릴화되는 경우, 이들은 뉴클레오티드가 성장하는 DNA 가닥으로 도입되도록 하기에 충분히 유사하게 됨으로써 항대사물로서 작용하지만, 이들은 쇄 종결인자로서 작용하고 바이러스 DNA 폴리머라제를 중지한다. 뉴클레오사이드, 뉴클레오티드 및 피로포스페이트 유사체는 일반적으로 바이러스 복제를 차단하는 바이러스 핵산 합성을 억제하는 것으로 공지되어 있다. 뉴클레오사이드, 뉴클레오티드 유사체는 항대사물질 약물이다. 피로포스페이트 유사체(예: 포스카르넷)은 음이온 피로포스페이트와 구조적으로 유사하고, 세포 DNA 폴리머라제에 영향을 받지 않는 농도에서 바이러스-특이적 DNA 폴리머라제에 대한 피로포스페이트 결합 부위의 선택적 억제에 의해 항바이러스 활성을 발휘한다. 뉴클레오티드 및 피로포스페이트 유사체는 세포 내로 흡수되기 전에 티미딘 키나제 또는 기타 키나제에 의한 초기 활성화(포스포릴화)를 필요로 하지 않는다. 헬리카제-프리마제 억제제는 바이러스 헬리카제-프리마제를 표적화하는 비-뉴클레오사이드 억제제이다.

바람직하게는, 일반적으로 공지되고 승인된 바이러스 정지제는 하기에 개략된 바와 같이 사용할 수 있다. 뉴클레오사이드 유사체로서는 아사이클로비르, 펜시클로비르, 발라사이클로비르 및 파마시클로비르로 이루어진 그룹으로부터 선택된 화합물이 예시적으로 언급될 수 있고, 상기 기재된 병용 요법에서 사용될 수 있다. 피로포스페이트 유사체로서는 포스카르넷이 사용될 수 있다. 뉴클레오티드 유사체로서는 시도포비르가 사용될 수 있다. 헬리카제-프리마제 억제제로서는 프리텔리비르가 예시적으로 언급된다. 아만타딘 유도체로서는 트로만탄딘이 사용될 수 있다.

아사이클로구아노신(ACV) 또는 2-아미노-9-(2-하이드록시에톡시메틸)-3H-퓨린-6-온으로서 또한 공지된 아사이클로비르는, 상품명(예: ACERPES®, Acic®, Aciclobeta®, AcicloCT®, Aciclostad®, Aciclovir, Acic®, Ophtal®, Acivir®, AciVision, 아사이클로비르®, Aviral®, Cyclovir, Helvevir®, Herpex, Supraviran®, Virucalm®, Virupos® Virzin, Zoliparin®, Zovir 및 Zovirax®)하에 시판되고 있는 구아노신 유사체 항바이러스 약물이다.

펜시클로비르(2-아미노-9-[4-하이드록시-3-(하이드록시메틸)부틸]-6,9-디하이드로-3H-퓨린-6-온)은 상품명(예: Denavir 및 Fenistil)하에 시판되고 있는 구아닌 유사체 항바이러스 약물이다.

팜시클로비르(2-[(아세틸옥시)메틸]-4-(2-아미노-9H-퓨린-9-일)부틸 아세테이트)는 승인된 경구 생체활성을 갖는 펜시클로비르의 프로드럭이다.

포스카르넷은 화학식 H0₂CP0₃H₂를 갖는 화학적 화합물의 접합체 기제이고, 상품명(Foscavir® 및 Triapten®)하에 시판되고 있다.

(S)-2-[(2-아미노-6-옥소-6,9-디하이드로-3H-퓨린-9-일)메톡시]에틸-2-아미노-3-메틸부타노에이트로서 또한 공지된 발라사이클로비르는 상표명(예: Valtrex®)하에 시판된 구아노신 유사체 항바이러스 약물 ACV의 프로드럭이다.

(S)-1-[3-하이드록시-2-(포스포닐메톡시프로필)]사이토신으로 또한 공지된 시도보비르(CDV)는 상표명(예: Visitde®)하에 시판되는 뉴클레오티드 유사체 항바이러스 약물이다.

프리텔레비르는 AIC-316 또는 BAY 57-1293로서 또한 공지된 티아졸릴아미드이고, 성기 HSV-2 감염의 치료를 위해 현재 임상 II 시험하의 헬리카제-프리마제 억제제이다.

국소 치료 약물 트로만탄딘(Viru-Merz Serol Gel)은 명백하게는 HSV 피부 감염의 국소 치료를 위해 명시적으로 사용된다. 트로만탄딘은 아만타딘 유도체이다. 그리핀(Griffin)의 미국 특허 제4,351,847호는 아만타딘 유도체가 단순포진 바이러스에 대해 효과적임을 개시한다.

더욱이, 본 발명은, 상기에 따르는 유효량의 항체 또는 이의 항원-결합 단편 및 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.

부형제는, 강력한 활성 성분을 함유하는 벌크-업 제형을 목적으로, 활성 성분, 즉 상기에 따르는 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편과 함께 제형화되는 불활성 물질이다. 부형제는 종종 "벌크화제", "충전제" 또는 "희석제"로서 지칭된다. 벌크 업은, 용량형을 생성할 때, 약물 물질의 편리한 및 정확한 분배를 가능하게 한다. 이들은 또한 다양한 치료제-증강 목적, 예를 들면, 약물 흡수 또는 용해도를 촉진시키거나 기타 약물동태학적 고려사항을 위해 작용할 수 있다. 부형제는 또한, 예상된 저장 수명에 걸쳐 변성의 방지 등의 시험관내 안정성을 보조하는 것에 추가하여, 분말 유동성 또는 비-점착 특성을 촉진시킴으로써 관련된 활성 물질의 취급성을 보조하기 위해 제조 프로세스에서 유용할 수 있다. 적절한 부형제의 선택은 또한 활성 성분 및 기타 인자 뿐만 아니라 투여 경로 및 용량형에 의존한다.

따라서, 상기에 따라, 유효량의 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 포함하는 약제학적 조성물은 고체, 액체 또는 기체 형태일 수 있고, 특히 분말(들), 정제(들), 용액(들) 또는 에어로졸(들)의 형태일 수 있다. 상기 약제학적 조성물은 약제학적으로 허용되는 담체 및/또는 희석제를 임의로 포함하는 것이 바람직하다.

적합한 약제학적 담체, 부형제 및/또는 희석제의 예는 당해 기술분야에 공지되어 있고, 인산염 완충된 식염수 용액, 물, 에멀젼, 예를 들면, 오일/물 에멀젼, 다양한 유형의 습윤제, 멸균 용액 등을 포함한다. 이러한 담체를 포함하는 조성물은 공지된 통상의 방법에 의해 제형화할 수 있다. 이들 약제학적 조성물은 적합한 용량, 즉 당해 기술분야의 숙련가에 의해 용이하게 결정될 수 있는 "유효량"으로 대상체에게 투여할 수 있다. 적합한 약제학적 조성물의 투여는 국소 투여에 의해 본 발명에 따라 수행된다. 용량 섭생은 주치의 및 임상적 인자에 의해 결정될 것이다. 의료 분야에 공지된 바와 같이, 임의의 한 환자에 대한 용량은, 환자 또는 대상체 크기, 체표면적, 연령, 투여되는 특정 화합물, 성별, 시간 및 투여 경로, 일반 건강, 및 동시에 투여되는 기타 약물을 포함하는, 다수의 인자에 의존한다. 단백질성의 약제학적 활성 물질은 용량당 0.1 내지 10㎍/체중 kg의 양으로 존재할 수 있지만, 이러한 예시적 범위 상하의 용량은 특히 상술된 인자를 고려하여 상정된다. 본 발명의 맥락에서 특히 바람직한 국소 투여의 경우, 0.1 내지 10mg/ml, 바람직하게는 0.5 내지 5mg/ml의 항체 농도를 함유하는 상기 및 하기 추가로 본원에서 정의된 국소 투여에 적합한 약제학적 활성 물질이 특히 상정된다. 이는, 액체 용액(PBS) 중의 항체 또는 0.5 내지 5mg/ml의 농도로 크림과 1:2로 혼합된 항체가 사용된, 하기에 추가로 예시된 실시예에 사용된 범위에 상응하고, 이는 PBS 또는 동일한 밀도의 PBS를 갖는 크림 중의 0.5 내지 5mg/g에 상응한다.

따라서, 바람직하게는, 항체 또는 이의 항원-결합 단편 및/또는 바이러스 정지제는 유효량으로 포함된다. 용어 "유효량"은 약제학적 조성물이 투여되는 대상체에서 검출가능한 치료학적 반응을 유도하기에 충분한 양을 지칭한다. 상기에 따라, 약제학적 조성물 중의 항체의 함량은, 이것이 상기 기재된 치료에 유용한 한 한정되지 않지만, 바람직하게는 전체 조성물당 0.0000001 내지 10중량%를 함유한다. 추가로, 본원에 기재된 항체는 바람직하게는 담체에서 사용된다. 일반적으로, 적절한 양의 약제학적으로 허용되는 염이 담체에 사용되어 조성물을 등장성으로 되게 한다. 담체의 예는, 이로써 한정되는 것은 아니지만, 식염수, 링거액 및 덱스트로즈 용액을 포함한다. 바람직하게는, 허용되는 부형제, 담체 또는 안정화제는 사용된 용량 및 농도에서 무독성이고, 완충제(예: 시트레이트, 포스페이트 및 기타 유기 산); 염-형성 카운터-이온(예: 나트륨 및 칼륨); 저분자량(> 10 아미노산 잔기) 폴리펩티드; 단백질(예: 혈청 알부민 또는 젤라틴); 친수성 폴리머(예: 폴리비닐피롤리돈); 아미노산(예: 히스티딘, 글루타민, 리신, 아스파라긴, 아르기닌 또는 글리신); 탄수화물(글루코즈, 만노즈 또는 덱스트린 포함); 일당류; 이당류; 기타 당(예: 슈크로즈, 만니톨, 트레할로즈 또는 솔비톨); 킬레이트제(예: EDTA); 비-이온성 계면활성제(예: 트윈, 플루오닉스 또는 폴리에틸렌 글리콜); 항산화제(메티오닌, 아스코르브산 및 토코페롤 포함); 및/또는 보존제(예: 옥타데실디메틸벤질 암모늄 클로라이드); 헥사메토늄 클로라이드; 벤즈알코늄 클로라이드, 벤즈에토늄 클로라이드; 페놀, 부틸 또는 벤질 알콜; 알킬 파라벤(예: 메틸 또는 프로필 파라벤); 카테콜; 레조르시놀; 사이클로헥산올; 3-펜탄올; 및 m-크레졸을 포함한다. 적합한 담체 및 이들의 제형은 문헌[참조: Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., 1985, Mack Publishing Co]에 보다 상세히 기재되어 있다.

진행은 주기적 평가에 의해 모니터링할 수 있다. 본 발명의 항체, 이의 항원-결합 단편 또는 약제학적 조성물은 전신 투여와 대조적으로 상기 정의된 바와 같이 국소 투여된다. 국소 투여를 위한 제제는 이미 상기 기재되어 있고, 특히 크림 및 좌제 뿐만 아니라 멸균 수성 또는 비수성 용액, 현탁액 및 에멀젼을 포함한다. 비수성 용매의 예는 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 식물성 오일(예: 올리브유) 및 유기 에스테르(예: 에틸 올레에이트)이다. 수성 담체는 물, 알콜성/수성 용액, 에멀젼 또는 현탁액을 포함하고, 식염수 및 완충된 매질을 포함한다. 보존제 및 기타 첨가제, 예를 들면, 항균제, 항산화제, 킬레이트제 및 불활성 기체 등이 또한 존재할 수 있다. 추가로, 본 발명의 조성물은 약제학적 조성물의 의도된 용도에 따라 추가 제제를 포함할 수 있다. 상기 제제는, 예를 들면, 트윈, EDTA, 시트레이트, 슈크로즈, 또한 당해 기술분야의 숙련가에게 공지된 약제학적 조성물의 의도된 사용에 적합한 기타 제제일 수 있다.

본 발명에 따라서, 용어 "약제학적 조성물"은 환자, 바람직하게는 인간 환자에게 투여하기 위한 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 맥락에서, 의약/약제학적 조성물은 본 발명에 따르는 HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 점막 또는 상피 조직의 급성 감염을 앓고 있는 환자에게 국소 투여된다. 본 발명의 맥락에서, 대상체, 즉 환자는 인간 환자를 지칭한다. 따라서, 본 발명은 또한, 구순 단순포진, 성기 단순포진, 만성 또는 파종성 피부 단순포진 감염, 검상포진 및 포진성 습진으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 대상체에서 점막 또는 상피 조직의 급성 감염의 치료에 사용하기 위한 유효량의 항체 또는 이의 항원-결합 단편 및 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다. 약제학적 조성물의 바람직한 실시형태와 관련하여, 동일한 것은, 구순 단순포진, 성기 단순포진, 만성 또는 파종성 피부 단순포진 감염, 검상포진 및 포진성 습진으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 대상체에서 점막 또는 상피 조직의 급성 감염의 치료에 사용하기 위한 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편으로서, 상기 항체가 국소 투여되는, 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편, 뿐만 아니라 상기 정의된 바와 같은 약제학적 조성물의 맥락에서 상기 기재된 바와 같은 변경 사항을 준용한다.

본 발명은 또한, 상기 정의된 바와 같은 항체 또는 항원-결합 단편을 국소 투여하는 단계를 포함하는, 구순 단순포진, 성기 단순포진, 만성 또는 파종성 피부 단순포진 감염, 검상포진 및 포진성 습진으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 대상체에서 점막 또는 상피 조직의 급성 감염의 치료 방법에 관한 것이다. 따라서, 본 발명은, 대상체에서 구순 단순포진, 성기 단순포진, 만성 또는 파종성 피부 단순포진 감염, 검상포진 및 포진성 습진으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 대상체에서 점막 또는 상피 조직의 급성의 감염의 치료 방법으로서, 항체 또는 이의 항원-결합 단편이 치료학적 유효량으로 대상체에게 국소 투여되는, 방법에 관한 것이다. 치료 방법의 바람직한 실시형태와 관련하여, 동일한 것은, 구순 단순포진, 성기 단순포진, 만성 또는 파종성 피부 단순포진 감염, 검상포진 및 포진성 습진으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 대상체에서 점막 또는 상피 조직의 급성 감염의 치료에 사용하기 위한 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편 또는 약제학적 조성물로서, 상기 항체가 국소 투여되는, 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편 또는 약제학적 조성물, 뿐만 아니라 상기 정의된 바와 같은 약제학적 조성물의 맥락에서 상기 기재된 바와 같은 변경 사항을 준용한다.

본 발명에서, 대상체는 바람직한 실시형태에서 포유동물, 예를 들면, 개, 고양이, 돼지, 소, 양, 말, 설치류, 예를 들면, 랫트, 마우스 및 기니아 피그, 또는 영장류, 예를 들면, 고릴라, 침팬지 및 인간이다. 가장 바람직한 실시형태에서, 대상체는 인간이다.

본 발명의 다른 양태 및 잇점은, 설명을 목적으로 제공되고 한정하는 것이 아닌, 하기 실시예에서 기재될 것이다. 본 출원에서 인용된 각각의 간행물, 특허, 특허원 또는 기타 문헌은 이에 의해 이의 전체가 참조로서 도입된다.

도 1은 인간화 모노클로날 항체 hu2c 또는 아사이클로비르를 사용한 국소 치료 후에 급성 성기 HSV-2 감염을 갖는 면역결핍 마우스의 생존률을 비교한 것이다. 암컷 마우스(NOD.CB17-Prkdc^scid/NCrHsd)는 HSV-2 감염에 대한 감수성을 증가시키고 발정 주기에 의해 유발된 차이를 제거하기 위해 바이러스 챌린지 7일 전에 장기간 작용하는 프로제스틴(Depo-Clinovir, Pharmacia)으로 처리했다. 마취된 마우스는 5×10⁵ PFU의 HSV-2 G(20㎕)의 치사 용량으로 질내 챌린지했다. 가시적 감염(회음부 탈모, 발적, 팽창)을 나타내는 마우스를 (A) 40㎕ hu2c(5mg/ml)(●) 또는 40㎕ 대조군 IgG(5mg/ml)(□)로 1회 또는 (B) 40㎕ ACV(25mg/ml)(Δ) 또는 40㎕ PBS(x)로 4일 동안 1일 2회 바이러스 챌린지 1일 후에 처리했다. 약물 용액 또는 PBS는 외부 성기 상피에 국소 적용했다. 마우스는 바이러스 접종후 36일 동안 모니터링했다. 중증 전신 징후 및/또는 중증 병변/대상포진을 나타내는 마우스는 도살했다. 생존 마우스는 36일에서 희생시켰다. 시험 그룹은 각각 8마리 동물을 함유했고, 대조군 그룹은 각각 5마리 동물을 함유했다. 카플란-마이어(Kaplan-Meier) 생존 곡선은 로그랭크(Mantel-Cox) 시험에 의해 분석했다. 양측 유의성 시험을 사용하여 양 그룹 사이의 유의성 수준을 비교했다. 모든 프로토콜은 동물 실험 위원회(Animal Care and Use Committee)에 의해 승인되었다.
도 2는 인간화 모노클로날 항체 hu2c 또는 아사이클로비르를 사용한 국소 치료 후에 급성 성기 HSV-2 감염의 임상 스코어를 나타낸다. 5×10⁵ PFU의 HSV-2 G(20㎕)의 치사 용량으로 질내 챌린지 1일 후에 가시적 감염(회음부 탈모, 발적, 팽윤)을 나타내는 마우스는 (A) 40㎕ PBS 또는 (C) 40㎕ ACV(25mg/ml)로 1일 2회 처리하거나(A 및 C), (B) 40㎕ hu2c(5mg/ml) 또는 (D) 40㎕ 대조군 IgG(5mg/ml)로 감염 24시간 후에 1회 처리했다(B 및 D). 약물 용액 또는 PBS는 외부 성기 상피에 국소 적용했다.
감염된 동물은 매일 관찰하고, 이들의 임상 상태를 다음과 같이 스코어화했다: 0, 증상 결여, 병변 없음; 1-2, 발적 및/또는 팽윤(침식); 3, 국소화 병변 < 1mm; 4-5, 국소화 병변 2-3mm; 6-7, 국소화 병변 4-5mm; 8-9, 중증 충혈, 괴사와 함께 상피 및 간질의 파괴; 10, 전신 징후, 사망. 등급 >8을 갖는 동물을 도살하여 과도한 고통을 방지한다. 시험 그룹은 각각 8마리 동물을 함유했고, 대조군 그룹은 각각 5마리 동물을 함유했다. 화살표는 처리 시점을 나타낸다.

실시예

실시예 1: 인간화 항-HSV 항체의 국소 적용

1. 대상체, 재료, 방법

1.1 HSV 중화 인간화 모노클로날 항체의 생성 및 제조

최근, 뮤린 모노클로날 항체 mAb 2c를 통한 HSV-1/2의 고도 보존된 당단백질 B 에피토프의 가교결합은 유리 비리온의 매우 효율적 중화를 제공할 뿐만 아니라 감염된 세포로부터 비-감염된 세포로의 직접 바이러스 확산의 억제를 제공하는 것으로 입증되었다[참조: Krawczyk A, et al., Journal of virology 2011;85(4):1793-1803]. 인간에서 치료학적 사용을 위한 이들 독특한 특성을 이용하기 위해, 본 발명자들은 mAb 2c의 인간화 유도체를 생성했다.

인간화된 항체의 대부분에 있어서, 인간 프레임워크 내의 잠재적 면역원성 뮤린 잔기 세트의 체류는 이식된 항원 결합 루프의 구조적 완전성을 유지하는데 일반적으로 필요하다. 가능한 낮은 면역원성을 갖는 인간화 항체를 생성하기 위해, 임의의 가능한 프레임워크 조작은 적절한 인간 생식계 서열의 주의 깊은 선별 및 이미 기재된 서열 다중-정렬 접근법의 동시 사용에 의해 회피되었다[참조: Krauss J, et al., Protein Eng 2003;16(10):753-759].

mAb 2c 상보성 결정 영역(CDR)을 이식하기 위한 적절한 인간 생식계 수용체 스캐폴드를 동정하기 위해, mAb 2c의 가변 도메인 프레임워크 서열을 V 베이스 데이터베이스의 상응하는 인간 서열에 정렬시켰다(http://vbase.mrc-cpe.cam.ac.uk/). 상응하는 뮤린 mAb 2c 가변 경쇄(V_L) 및 가변 중쇄(V_H) 서열에 대한 최고 프레임워크 서열 동일성은 각각 인간 생식계 서열 DP28(88.5%) 및 DPK13(88.9%)을 나타냈다. 따라서, 뮤린 공여체-항체 2c(즉, 2c V_L-CDR1/2/3 및 2c V_H-CDR1/2/3)의 CDR 코딩 유전자 세그먼트를 각각 DP28 및 DPK13을 코딩하는 수용체 프레임워크에 이식시켰다. 키메라 및 인간화 V_L 쇄 및 V_H 쇄의 가변 도메인 코딩 유전자는 각각 인간 불변 중쇄 γ1 및 인간 불변 κ 쇄를 함유하는 면역글로불린 발현 벡터 내로 후속적으로 클로닝시켰다. 인간화 항체는 혈청-비함유 조건하에 안정하게 형질감염된 Sp2/0 마우스 골수종 세포주 또는 일시 형질감염된 HEK293 세포로부터 생성되었고, 단백질 A 크로마토그래피에 의해 배양 상청액으로부터 균질성으로 정제했다. 순도는 겔 여과 크로마토그래피(Superdex 200GL, GE Healthcare)에 의해 ≥95%로서 평가되었다[참조: Krawczyk A, et al., Proc Natl Acad Sci USA 2013;110(17):6760-6765].

1.2 실험 기재

2010년 내지 2013년 사이에, 구강 헤르페스 감염(구강 발진)의 급성 재발을 갖는 12명의 건강한 30 내지 59세 지원자(7명 여성, 5명 남성)을 치료했다. 지원자는, 초기 HSV 증상(입술의 가려움, 입술 또는 입 영역 주위의 따끔거림 또는 얼얼함)의 개시가 발생하거나 외부 입술 상의 가시적 피부 질환으로 진행한 경우를 스스로 제시했다. 관찰된 피부 질환은 투명한 황색 유체로 충전된 소형 내지 거대 수포 또는 누출 적색 수포를 포함하는 외부 헤르페스 병변을 포함했다.

입 영역의 구강 헤르페스 감염은 주로 단순포진 바이러스 유형 1(HSV-1)에 의해 유발된다. 그러나, 종종 HSV-2는 구강 성교 동안 입으로 확산되어 구강 헤르페스를 유발한다. HSV 감염의 유형(HSV-1 또는 HSV-2)는 분석하지 않았다.

항체를 0.7 내지 1mg/ml의 농도로 PBS 또는 PBS/회분 크림(1:1)으로 멸균 용액으로 팩키징했다. 참가자들은 1회, 2일 동안 1일 1회 또는 전체 최대 3회에 대해 항체 약 10㎕를 국소 적용했다.

2. 결과

ZOVIRAX 크림은 2개의 이중-블라인드, 랜덤화 위약(비히클)-조절된 실험으로 평가했다[참조: Zovirax N-. Zovirax Prescribing Information. http://wwwaccessdatafdagov/drugsatfda_docs/label/2002/21478_zovirax_lblpdf#page=1&zoom=auto,0,792].

Zovirax 연구에서, 대상체는 징후 또는 증상을 알아차린지 1시간 이내에 치료를 개시하고, 1일 5회의 연구 약물의 적용과 함께 4일 동안 지속하도록 지시되었다. 양 연구에서, 재발 구순포진 에피소드의 평균 기간은 위약(n=703)으로 치료된 대상체와 비교하여 ZOVIRAX 크림(n=682)으로 치료된 대상체에서 대략 1/2일 더 짧았다(각각 대략 4.5일 대 5일). 구순포진 병변의 진행의 예방에 있어서 ZOVIRAX 크림 또는 비히클을 제공받은 대상체 사이에서 유의차는 관찰되지 않았다.

아시클로비르(Zovirax 크림)으로 치료된 이전 HSV 발생과 비교하면, 항체 용액을 사용한 모든 참가자는 항체 적용후 24시간 이내에 신속한 증상 및 통증 경감을 보고했다. 아시클로비르 요법을 사용한 경험과 대조적으로, 항체로 국소 치료한 경우, 활성 수포가 퇴보했고 진물 수포로 변하지 않았다. 항체 치료를 가시적 외부 헤르페스 병변의 단계에서 개시한 경우, 참가자는 신속한 치유 및 딱딱한 영역의 소실을 보고했다. 모든 참가자들은, Zovirax를 사용한 이들의 경험과 대조적으로, 감염된 영역이 항체 치료시 확산되지 않았음을 보고했다.

1명의 지원자는 동시에 상부 및 하부 입술에서 구순포진을 경험했고, 상부 입술에 대해 항체 치료(3회) 및 하부 입술에 대해 Zovirax 치료(3일 동안 1일 3 내지 4회)를 개시했다. 치료 시점에서 작은 수포가 가시적이었다. 항체 치료된 HSV 감염의 경우에는 신속한 회복이 관찰되었다. 상부 입술의 수포는 24시간 이내에 소실되었고, 팽윤은 48시간 이내에 가라앉았고, 어떠한 병변도 발생하지 않았다. Zovirax로 치료한 하부 입술의 감염은 3일 동안 통증을 수반했고, 수포는 최종적으로 개방 파괴된 보다 큰 블리스터로 함께 성장했다. 발생한 병변은 치유에 2주가 걸렸다.

치료 효과는 항체 제형(PBS 또는 PBS/회분 크림)으로부터 독립적인 것으로 보였다.

흥미롭게도, 참가자들은 임상적 재활성화의 전체 속도가 감소되는 경향이 있는 인상을 갖는다.

실시예 2: 동물 실험에서 항-HSV mAb hu2의 국소 적용

200㎍ mAb hu2c(5mg/ml)를 사용한 단일 국소 치료 후에 면역결핍 마우스에서 급성 성기 HSV-2 감염의 임상 경과를 변경시키는 인간화 모노클로날 항체 hu2c의 능력을 조사했다. 가시적 병변 및 질 세정의 배양물에 의해 평가한 바와 같이 100%의 마우스를 감염시키기 위해, 5×10⁵ PFU의 HSV-2 G의 바이러스 접종물을 마취된 마우스의 질에 전달했다.

급성 HSV-1 또는 HSV-2 감염은, 면역경쟁 마우스에서 70 내지 90% 사망률과 비교하는 경우, 중증 복합 면역결핍성을 갖는 100%의 마우스에서 치명적 결과를 제공하지만, 면역결핍 모델은 그럼에도 불구하고 마우스의 면역 작동제 세포에 기인하여 바이러스 감염의 제거로부터 가능한 임상적 치료 유효성을 구별하도록 선택되었다[참조: Minagawa et al., Arch Virol 103, 73-82 (1988); Nagafuchi et al., J Gen Virol 44, 715-723 (1979)]. 성기 점막 내에서 HSV-2의 확장율은 매우 신속하다. 바이러스 챌린지 후 24시간에서, 감염된 마우스는 1mg 아사이클로비르(ACV)(25mg/ml) 또는 40㎕ 완충제(PBS)를 4일 동안 1일 2회 또는 200㎍ mAb hu2c(5mg/ml) 또는 200㎍ 대조군 mAb(5mg/ml)의 단일 치료를 감염된 영역에 국소 제공했다. HSV-특이적 mAb의 임상 유효성은, 카플란-마이어(Kaplan-Meier) 생존 곡선 및 성기 및 항문 영역의 점막의 임상 상태의 매일 평가에 의해 무관계 mAb(isotypcontrol), ACV 및 PBS 치료와 비교했다. 가시적 감염(회음부 탈모, 발적, 팽윤), 및 감염 24시간 후 검출가능한 주변 복제를 나타내는 마우스로부터의 결과를 평가했다.

예상된 바와 같이, 전체 생존률에서 어떠한 유의차도 무관계 mAb 대 PBS로 치료한 대조군 그룹에서 관찰되지 않았고, 모든 마우스는 감염후 7일까지 사망했다(도 1A 및 B). 놀랍게도, 외부 성기 감염된 상피에 대한 mAb hu2c의 단일 국소 적용은, 대조군 그룹(도 1A)와 비교하는 경우, 생존률 곡선에서 통계학적으로 유의한 차를 제공했고(P=0.003), 심지어 1마리 마우스에서 감염의 치명적 결과를 방지했다. 항체 hu2c 치료된 그룹(도 1A) 및 ACV 치료된 그룹(1B)의 생존률 곡선은, ACV가 4일 동안 1일 2회 적용했지만, 어떠한 유의차(P>0.5)도 나타내지 않았다.

ACV를 사용한 표준 요법에 비해 국소 항체 요법의 의학적 잇점은, 14일의 기간에 걸쳐 급성 성기 감염의 임상 상태를 평가할 때에 보다 더욱 명백해졌다(도 2). 임상적 스코어 등급은 감염의 임상 경과가 치료시 변경될 수 있는지를 조사하기 위해 적용할 수 있다[참조: Minagawa et al., Arch Virol 103, 73-82(1988); Sanna et al., Virology 215, 101-106 (1996)].

질염/외음부염의 임상 상태는 다음과 같이 스코어화했다: 0, 증상의 결여, 병변 없음; 1-2, 발적 및/또는 팽윤(침식); 3, 국소 병변 < 1mm; 4-5, 국소 병변 2-3mm; 6-7, 국소 병변 4-5 mm; 8-9, 중증 충혈, 괴사와 함께 상피 및 간질의 파괴; 10, 전신 징후, 사망.

급성 성기 HSV-2 감염은 항-HSV mAb hu2c를 사용한 단일 국소 치료후 48시간 이내에 8마리 마우스중 7마리(88%)에서 해결되었다(도 2D).

대조적으로, ACV로 치료한 동물은 매우 이종성 임상 등급을 나타냈다. ACV로 치료 개시(1일 2회, 4일)하에 48시간에서, 국소 성기 증상은 8마리 마우스중 1마리(13%)에서만 해결되었고, ACV 치료의 개시 72시간 후에 8마리 마우스중 5마리(63%)에서만 국소 징후가 없었다(도 2C). 양 hu2c 항체 및 ACV 둘 다를 단지 국소 적용했지만, HSV-2 치명적 뇌염은 양 경우에 8마리 중의 1마리에서 방지할 수 있었다.

완충제 또는 무관계 대조군 mAb로 치료한 마우스는 성기 및 항문 영역에 대해 확산하는 진행성 국소 HSV-2 감염을 가졌고, 바이러스의 전신 파종은 7일에서 모든 동물의 사망을 제공했다(도 2A 및 B).

<110> HEIDELBERG IMMUNOTHERAPEUTICS GMBH <120> Topical application for an anti-HSV antibody <130> IPA161527-DE <150> EP 14174174.4 <151> 2014-06-26 <160> 16 <170> BiSSAP 1.2 <210> 1 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 2cVH CDR1 <400> 1 Thr Ser Gly Met Ser Val Gly 1 5 <210> 2 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 2cVH CDR2 <400> 2 His Ile Trp Trp Asn Asn Asp Lys Tyr Tyr Lys Pro Ala Leu Lys Ser 1 5 10 15 <210> 3 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 2cVH CDR3 <400> 3 Ile Tyr Tyr Gly Tyr Arg Pro Tyr Ala Met Asp Tyr 1 5 10 <210> 4 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 2cVL CDR1 <400> 4 Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu 1 5 10 15 <210> 5 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 2cVL CDR2 <400> 5 Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser 1 5 <210> 6 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 2cVL CDR3 <400> 6 Phe Gln Gly Ser His Val Pro Trp Ser 1 5 <210> 7 <211> 122 <212> 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650 655 Ser Arg Ala Asp Val Thr Thr Val Ser Thr Phe Ile Asp Leu Asn Ile 660 665 670 Thr Met Leu Glu Asp His Glu Phe Val Pro Leu Glu Val Tyr Thr Arg 675 680 685 His Glu Ile Lys Asp Ser Gly Leu Leu Asp Tyr Thr Glu Val Gln Arg 690 695 700 Arg Asn Gln Leu His Asp Leu Arg Phe Ala Asp Ile Asp Thr Val Ile 705 710 715 720 Arg Ala Asp Ala Asn Ala Ala Met Phe Ala Gly Leu Cys Ala Phe Phe 725 730 735 Glu Gly Met Gly Asp Leu Gly Arg Ala Val Gly Lys Val Val Met Gly 740 745 750 Val Val Gly Gly Val Val Ser Ala Val Ser Gly Val Ser Ser Phe Met 755 760 765 Ser Asn Pro Phe Gly Ala Leu Ala Val Gly Leu Leu Val Leu Ala Gly 770 775 780 Leu Val Ala Ala Phe Phe Ala Phe Arg Tyr Val Leu Gln Leu Gln Arg 785 790 795 800 Asn Pro Met Lys Ala Leu Tyr Pro Leu Thr Thr Lys Glu Leu Lys Thr 805 810 815 Ser Asp Pro Gly Gly Val Gly Gly Glu Gly Glu Glu Gly Ala Glu Gly 820 825 830 Gly Gly Phe Asp Glu Ala Lys Leu Ala Glu Ala Arg Glu Met Ile Arg 835 840 845 Tyr Met Ala Leu Val Ser Ala Met Glu Arg Thr Glu His Lys Ala Arg 850 855 860 Lys Lys Gly Thr Ser Ala Leu Leu Ser Ser Lys Val Thr Asn Met Val 865 870 875 880 Leu Arg Lys Arg Asn Lys Ala Arg Tyr Ser Pro Leu His Asn Glu Asp 885 890 895 Glu Ala Gly Asp Glu Asp Glu Leu 900 <210> 15 <211> 904 <212> PRT <213> HSV2 strain 333 <400> 15 Met Arg Gly Gly Gly Leu Ile Cys Ala Leu Val Val Gly Ala Leu Val 1 5 10 15 Ala Ala Val Ala Ser Ala Ala Pro Ala Ala Pro Ala Ala Pro Arg Ala 20 25 30 Ser Gly Gly Val Ala Ala Thr Val Ala Ala Asn Gly Gly Pro Ala Ser 35 40 45 Arg Pro Pro Pro Val Pro Ser Pro Ala Thr Thr Lys Ala Arg Lys Arg 50 55 60 Lys Thr Lys Lys Pro Pro Lys Arg Pro Glu Ala Thr Pro Pro Pro Asp 65 70 75 80 Ala Asn Ala Thr Val Ala Ala Gly His Ala Thr Leu Arg Ala His Leu 85 90 95 Arg Glu Ile Lys Val Glu Asn Ala Asp Ala Gln Phe Tyr Val Cys Pro 100 105 110 Pro Pro Thr Gly Ala Thr Val Val Gln Phe Glu Gln Pro Arg Arg Cys 115 120 125 Pro Thr Arg Pro Glu Gly Gln Asn Tyr Thr Glu Gly Ile Ala Val Val 130 135 140 Phe Lys Glu Asn Ile Ala Pro Tyr Lys Phe Lys Ala Thr Met Tyr Tyr 145 150 155 160 Lys Asp Val Thr Val Ser Gln Val Trp Phe Gly His Arg Tyr Ser Gln 165 170 175 Phe Met Gly Ile Phe Glu Asp Arg Ala Pro Val Pro Phe Glu Glu Val 180 185 190 Ile Asp Lys Ile Asn Ala Lys Gly Val Cys Arg Ser Thr Ala Lys Tyr 195 200 205 Val Arg Asn Asn Met Glu Thr Thr Ala Phe His Arg Asp Asp His Glu 210 215 220 Thr Asp Met Glu Leu Lys Pro Ala Lys Val Ala Thr Arg Thr Ser Arg 225 230 235 240 Gly Trp His Thr Thr Asp Leu Lys Tyr Asn Pro Ser Arg Val Glu Ala 245 250 255 Phe His Arg Tyr Gly Thr Thr Val Thr Cys Ile Val Glu Glu Val Asp 260 265 270 Ala Arg Ser Val Tyr Pro Tyr Asp Glu Phe Val Leu Ala Thr Gly Asp 275 280 285 Phe Val Tyr Met Ser Pro Phe Tyr Gly Tyr Arg Glu Gly Ser His Thr 290 295 300 Glu His Thr Ser Tyr Ala Ala Asp Arg Phe Lys Gln Val Asp Gly Phe 305 310 315 320 Tyr Ala Arg Asp Leu Thr Thr Lys Ala Arg Ala Thr Ser Pro Thr Thr 325 330 335 Arg Asn Leu Leu Thr Thr Pro Lys Phe Thr Val Ala Trp Asp Trp Val 340 345 350 Pro Lys Arg Pro Ala Val Cys Thr Met Thr Lys Trp Gln Glu Val Asp 355 360 365 Glu Met Leu Arg Ala Glu Tyr Gly Gly Ser Phe Arg Phe Ser Ser Asp 370 375 380 Ala Ile Ser Thr Thr Phe Thr Thr Asn Leu Thr Gln Tyr Ser Leu Ser 385 390 395 400 Arg Val Asp Leu Gly Asp Cys Ile Gly Arg Asp Ala Arg Glu Ala Ile 405 410 415 Asp Arg Met Phe Ala Arg Lys Tyr Asn Ala Thr His Ile Lys Val Gly 420 425 430 Gln Pro Gln Tyr Tyr Leu Ala Thr Gly Gly Phe Leu Ile Ala Tyr Gln 435 440 445 Pro Leu Leu Ser Asn Thr Leu Ala Glu Leu Tyr Val Arg Glu Tyr Met 450 455 460 Arg Glu Gln Asp Arg Lys Pro Arg Asn Ala Thr Pro Ala Pro Leu Arg 465 470 475 480 Glu Ala Pro Ser Ala Asn Ala Ser Val Glu Arg Ile Lys Thr Thr Ser 485 490 495 Ser Ile Glu Phe Ala Arg Leu Gln Phe Thr Tyr Asn His Ile Gln Arg 500 505 510 His Val Asn Asp Met Leu Gly Arg Ile Ala Val Ala Trp Cys Glu Leu 515 520 525 Gln Asn His Glu Leu Thr Leu Trp Asn Glu Ala Arg Lys Leu Asn Pro 530 535 540 Asn Ala Ile Ala Ser Ala Thr Val Gly Arg Arg Val Ser Ala Arg Met 545 550 555 560 Leu Gly Asp Val Met Ala Val Ser Thr Cys Val Pro Val Ala Pro Asp 565 570 575 Asn Val Ile Val Gln Asn Ser Met Arg Val Ser Ser Arg Pro Gly Thr 580 585 590 Cys Tyr Ser Arg Pro Leu Val Ser Phe Arg Tyr Glu Asp Gln Gly Pro 595 600 605 Leu Ile Glu Gly Gln Leu Gly Glu Asn Asn Glu Leu Arg Leu Thr Arg 610 615 620 Asp Ala Leu Glu Pro Cys Thr Val Gly His Arg Arg Tyr Phe Ile Phe 625 630 635 640 Gly Gly Gly Tyr Val Tyr Phe Glu Glu Tyr Ala Tyr Ser His Gln Leu 645 650 655 Ser Arg Ala Asp Val Thr Thr Val Ser Thr Phe Ile Asp Leu Asn Ile 660 665 670 Thr Met Leu Glu Asp His Glu Phe Val Pro Leu Gly Val Tyr Thr Arg 675 680 685 His Glu Ile Lys Asp Ser Gly Leu Leu Asp Tyr Thr Glu Val Gln Arg 690 695 700 Arg Asn Gln Leu His Asp Leu Arg Phe Ala Asp Ile Asp Thr Val Ile 705 710 715 720 Arg Ala Asp Ala Asn Ala Ala Met Phe Ala Gly Leu Cys Ala Phe Phe 725 730 735 Glu Gly Met Gly Asp Leu Gly Arg Ala Val Gly Lys Val Val Met Gly 740 745 750 Val Val Gly Gly Val Val Ser Ala Val Ser Gly Val Ser Ser Phe Met 755 760 765 Ser Asn Pro Phe Gly Ala Leu Ala Val Gly Leu Leu Val Leu Ala Gly 770 775 780 Leu Val Ala Ala Phe Phe Ala Phe Arg Tyr Val Leu Gln Leu Gln Arg 785 790 795 800 Asn Pro Met Lys Ala Leu Tyr Pro Leu Thr Thr Lys Glu Leu Lys Thr 805 810 815 Ser Asp Pro Gly Gly Val Gly Gly Glu Gly Glu Glu Gly Ala Glu Gly 820 825 830 Gly Gly Phe Asp Glu Ala Lys Leu Ala Glu Ala Arg Glu Met Ile Arg 835 840 845 Tyr Met Ala Leu Val Ser Ala Met Glu Arg Thr Glu His Lys Ala Arg 850 855 860 Lys Lys Gly Thr Ser Ala Leu Leu Ser Ser Lys Val Thr Asn Met Val 865 870 875 880 Leu Arg Lys Arg Asn Lys Ala Arg Tyr Ser Pro Leu His Asn Glu Asp 885 890 895 Glu Ala Gly Asp Glu Asp Glu Leu 900 <210> 16 <211> 901 <212> PRT <213> HSV2 strain MMA <400> 16 Met Arg Gly Gly Gly Leu Ile Cys Ala Leu Val Val Gly Ala Leu Val 1 5 10 15 Ala Ala Val Ala Ser Ala Ala Pro Ala Ala Pro Arg Ala Ser Gly Gly 20 25 30 Val Ala Ala Thr Val Ala Ala Asn Gly Gly Pro Ala Ser Arg Pro Pro 35 40 45 Pro Val Pro Ser Pro Ala Thr Thr Arg Ala Arg Lys Arg Lys Thr Lys 50 55 60 Lys Pro Pro Glu Arg Pro Glu Ala Thr Pro Pro Pro Asp Ala Asn Ala 65 70 75 80 Thr Val Ala Ala Gly His Ala Thr Leu Arg Ala His Leu Arg Glu Ile 85 90 95 Lys Val Glu Asn Ala Asp Ala Gln Phe Tyr Val Cys Pro Pro Pro Thr 100 105 110 Gly Ala Thr Val Val Gln Phe Glu Gln Pro Arg Arg Cys Pro Thr Arg 115 120 125 Pro Glu Gly Gln Asn Tyr Thr Glu Gly Ile Ala Val Val Phe Lys Glu 130 135 140 Asn Ile Ala Pro Tyr Lys Phe Lys Ala Thr Met Tyr Tyr Lys Asp Val 145 150 155 160 Thr Val Ser Gln Val Trp Phe Gly His Arg Tyr Ser Gln Phe Met Gly 165 170 175 Ile Phe Glu Asp Arg Ala Pro Val Pro Phe Glu Glu Val Ile Asp Lys 180 185 190 Ile Asn Ala Lys Gly Val Cys Arg Ser Thr Ala Lys Tyr Val Arg Asn 195 200 205 Asn Met Glu Thr Thr Ala Phe His Arg Asp Asp His Glu Thr Asp Met 210 215 220 Glu Leu Lys Pro Ala Lys Val Ala Thr Arg Thr Ser Arg Gly Trp His 225 230 235 240 Thr Thr Asp Leu Lys Tyr Asn Pro Ser Arg Val Glu Ala Phe His Arg 245 250 255 Tyr Gly Thr Thr Val Asn Cys Ile Val Glu Glu Val Asp Ala Arg Ser 260 265 270 Val Tyr Pro Tyr Asp Glu Phe Val Leu Ala Thr Gly Asp Phe Val Tyr 275 280 285 Met Ser Pro Phe Tyr Gly Tyr Arg Glu Gly Ser His Thr Glu His Thr 290 295 300 Ser Tyr Ala Ala Asp Arg Phe Lys Gln Val Asp Gly Phe Tyr Ala Arg 305 310 315 320 Asp Leu Thr Thr Lys Ala Gln Ala Thr Ser Pro Thr Thr Arg Asn Leu 325 330 335 Leu Thr Thr Pro Lys Phe Thr Val Ala Trp Asp Trp Val Pro Lys Arg 340 345 350 Pro Ala Val Cys Thr Met Thr Lys Trp Gln Glu Val Asp Glu Met Leu 355 360 365 Arg Ala Glu Tyr Gly Gly Ser Phe Arg Phe Ser Ser Asp Ala Ile Ser 370 375 380 Thr Thr Phe Thr Thr Asn Leu Thr Glu Tyr Ser Leu Ser Arg Val Asp 385 390 395 400 Leu Gly Asp Cys Ile Gly Arg Asp Ala Arg Glu Ala Ile Asp Arg Met 405 410 415 Phe Ala Arg Lys Tyr Asn Ala Thr His Ile Lys Val Gly Gln Pro Gln 420 425 430 Tyr Tyr Leu Ala Thr Gly Gly Phe Leu Ile Ala Tyr Gln Pro Leu Leu 435 440 445 Ser Asn Thr Leu Ala Glu Leu Tyr Val Arg Glu Tyr Met Arg Glu Gln 450 455 460 Asp Arg Lys Pro Arg Asn Ala Thr Pro Ala Pro Leu Arg Glu Ala Pro 465 470 475 480 Ser Ala Asn Ala Ser Val Glu Arg Ile Lys Thr Thr Ser Ser Ile Glu 485 490 495 Phe Ala Arg Leu Gln Phe Thr Tyr Asn His Ile Gln Arg His Val Asn 500 505 510 Asp Met Leu Gly Arg Ile Ala Val Ala Trp Cys Glu Leu Gln Asn His 515 520 525 Glu Leu Thr Leu Trp Asn Glu Ala Arg Lys Leu Asn Pro Asn Ala Ile 530 535 540 Ala Ser Ala Thr Val Gly Arg Arg Val Ser Ala Arg Met Leu Gly Asp 545 550 555 560 Val Met Ala Val Ser Thr Cys Val Pro Val Ala Pro Asp Asn Val Ile 565 570 575 Val Gln Asn Ser Met Arg Val Ser Ser Arg Pro Gly Thr Cys Tyr Ser 580 585 590 Arg Pro Leu Val Ser Phe Arg Tyr Glu Asp Gln Gly Pro Leu Ile Glu 595 600 605 Gly Gln Leu Gly Glu Asn Asn Glu Leu Arg Leu Thr Arg Asp Ala Leu 610 615 620 Glu Pro Cys Thr Val Gly His Arg Arg Tyr Phe Ile Phe Gly Gly Gly 625 630 635 640 Tyr Val Tyr Phe Glu Glu Tyr Ala Tyr Ser His Gln Leu Ser Arg Ala 645 650 655 Asp Val Thr Thr Val Ser Thr Phe Ile Asp Leu Asn Ile Thr Met Leu 660 665 670 Glu Asp His Glu Phe Val Pro Leu Glu Val Tyr Thr Arg His Glu Ile 675 680 685 Lys Asp Ser Gly Leu Leu Asp Tyr Thr Glu Val Gln Arg Arg Asn Gln 690 695 700 Leu His Asp Leu Arg Phe Ala Asp Ile Asp Thr Val Ile Arg Ala Asp 705 710 715 720 Ala Asn Ala Ala Met Phe Ala Gly Leu Cys Ala Phe Phe Glu Gly Met 725 730 735 Gly Asp Leu Gly Arg Ala Val Gly Lys Val Val Met Gly Val Val Gly 740 745 750 Gly Val Val Ser Ala Val Ser Gly Val Ser Ser Phe Met Ser Asn Pro 755 760 765 Phe Gly Ala Leu Ala Val Gly Leu Leu Val Leu Ala Gly Leu Val Ala 770 775 780 Ala Phe Phe Ala Phe Arg Tyr Val Leu Gln Leu Gln Arg Asn Pro Met 785 790 795 800 Lys Ala Leu Tyr Pro Leu Thr Thr Lys Glu Leu Lys Thr Ser Asp Pro 805 810 815 Gly Gly Val Gly Gly Glu Gly Glu Glu Gly Ala Glu Gly Gly Gly Phe 820 825 830 Asp Glu Ala Lys Leu Ala Glu Ala Arg Glu Met Ile Arg Tyr Met Ala 835 840 845 Leu Val Ser Ala Met Glu Arg Thr Glu His Lys Ala Arg Lys Lys Gly 850 855 860 Thr Ser Ala Leu Leu Ser Ser Lys Val Thr Asn Met Val Leu Arg Lys 865 870 875 880 Arg Asn Lys Ala Arg Tyr Ser Pro Leu His Asn Glu Asp Glu Ala Gly 885 890 895 Asp Glu Asp Glu Leu 900

Claims (18)

1. 구순 단순포진, 성기 단순포진, 만성 또는 파종성 피부 단순포진 감염, 검상포진 및 포진성 습진으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 HSV-1 또는 HSV-2에 의해 유발된 대상체에서 점막 또는 상피 조직의 급성 감염의 치료에 사용하기 위한 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편으로서, 상기 항체가 국소 투여되는 것인, 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편.
2. 제1항에 있어서, 상기 항-HSV 항체가 모노클로날 또는 폴리클로날 항체인, 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편.
3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 항-HSV 항체가 인간화 또는 완전 인간 항체인, 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편.
4. 제1항 내지 제3항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 항-HSV 항체가 HSV-1 및/또는 HSV-2의 당단백질 B(gB)를 인식하는 것인, 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편.
5. 제4항에 있어서, 상기 항체가 감염된 세포로부터 인접한 제2 비-감염된 세포로의 확산(세포로부터 세포로의 확산)을 억제할 수 있는 것인, 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편.
6. 제4항 또는 제5항에 있어서, 상기 항체가 항체-의존성 세포독성(ADCC) 및/또는 보체-의존성 세포독성(CDC)과는 독립적으로 세포로부터 세포로의 확산을 억제할 수 있는 것인, 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편.
7. 제4항 내지 제6항 중의 어느 한 항에 있어서, 서열번호 1을 포함하는 상보성 결정 영역 V_HCDR1, 서열번호 2를 포함하는 V_HCDR2, 서열번호 3을 포함하는 V_HCDR3, 서열번호 4를 포함하는 V_LCDR1, 서열번호 5를 포함하는 V_LCDR2 및 서열번호 6을 포함하는 V_LCDR3을 포함하는, 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편.
8. 제7항에 있어서, 상기 항체가 서열번호 7의 위치 1 내지 30, 38 내지 51, 68 내지 99 및 112 내지 122, 및 서열번호 8의 위치 1 내지 23, 41 내지 55, 63 내지 94 및 104 내지 114에 제시된 아미노산 잔기와 적어도 70% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인, 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편.
9. 제7항 또는 제8항에 있어서, 상기 항체가 서열번호 9의 V_H 및 서열번호 10의 V_L을 포함하는 것인, 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편.
10. 제7항 내지 제9항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 mAb 2c와 동일한 에피토프를 인식하고, 상기 에피토프가 HSV-1 및 HSV-2의 당단백질 B의 아미노산 172-195 및 295-313에 위치하는 것인, 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편.
11. 제6항 내지 제10항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 mAb 2c 항체인, 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편.
12. 제1항 내지 제10항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 입술, 성기, 코, 귀, 눈, 손가락, 발가락의 감염된 점막 또는 상피 조직 및/또는 신체 전체, 바람직하게는 머리, 턱 영역, 목, 가슴, 얼굴, 복부 및/또는 다리 위의 피부 영역에 국소 적용되는 것인, 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편.
13. 제1항 내지 제12항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 감염된 점막 또는 상피 조직 주위의 영역에 국소 적용되는 것인, 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편.
14. 제1항 내지 제13항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 바이러스 정지제(virostatic agent)와 병용하여 투여되는 것인, 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편.
15. 제14항에 있어서, 상기 바이러스 정지제가 뉴클레오사이드 유사체, 피로포스페이트 유사체, 뉴클레오티드 유사체, 아만타딘 유도체 및 헬리카제-프리마제 억제제의 약물 부류로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 것인, 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편.
16. 제15항에 있어서, 상기 뉴클레오사이드 유사체가 아사이클로비르, 펜시클로비르, 발라사이클로비르 및 파마시클로비르로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    상기 피로포스페이트 유사체가 포스카르넷이고;
    상기 뉴클레오티드 유사체가 시도포비르이고;
    상기 아만타딘 유도체가 트로만탄딘이고;
    상기 헬리카제-프리마제 억제제가 프리텔레비르인, 항-HSV 항체 또는 이의 항원-결합 단편.
17. 제1항 내지 제16항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 항-HSV 항체가 전장 항체/완전 항체인, 항-HSV 항체.
18. 제1항 내지 제17항 중의 어느 한 항에 따라 사용하기 위한 유효량의 항체 또는 이의 항원-결합 단편 및 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는, 약제학적 조성물.

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