KR20160133593A - Novel microorganism producing carotinoid - Google Patents

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Abstract

The present invention relates to: a novel Rhodotorula mucilaginosa AY-01 strain which is isolated from the soil, exhibits an ability to decompose proteins, and can produce carotenoid; a composition for producing carotenoid, containing the strain or a culture material thereof; a method for preparing carotenoid, comprising a step for culturing the strain to collect carotenoid therefrom; a composition for preparing chitinase, containing the strain or a culture material thereof; a method for preparing chitinase, comprising a step for culturing the strain to collect chitinase therefrom; an antioxidative composition containing a carotenoid extract derived from the strain; a cosmetic composition for antioxidative activity; an antibacterial composition; a pharmaceutical composition for antioxidative or antibacterial activity; and a food composition for antioxidative or antibacterial activity. An extract or a fraction thereof containing carotenoid produced by the novel Rhodotorula mucilaginosa AY-01 strain provided in the present invention exhibits an antioxidative activity and antibacterial activity against antibiotic-resistant bacteria, and thus can be widely used in the development of an agent having improved antibiotic activity through an antioxidative activity.

Description

신규한 카로티노이드 생산균주{Novel microorganism producing carotinoid}A novel carotenoid-producing strain {Novel microorganism producing carotinoid}

본 발명은 신규한 카로티노이드 생산균주에 관한 것으로, 보다 구체적으로 본 발명은 토양에서 분리된 단백질 분해활성을 나타내고, 카로티노이드를 생산할 수 있는 신규한 로도토룰라 무실라지노사 AY-01(Rhodotorula mucilaginosa AY-01) 균주, 상기 균주 또는 그의 배양물을 포함하는 카로티노이드 제조용 조성물, 상기 균주를 배양하고 이로부터 카로티노이드를 회수하는 단계를 포함하는 카로티노이드의 제조방법, 상기 균주 또는 상기 균주의 배양물을 포함하는 키틴분해효소 제조용 조성물, 상기 균주를 배양하고 이로부터 키틴분해효소를 회수하는 단계를 포함하는 키틴분해효소의 제조방법, 상기 균주로부터 유래된 카로티노이드 추출물을 포함하는 항산화용 조성물, 항산화용 화장료 조성물, 항균용 조성물, 항산화용 또는 항균용 약학조성물 및 항산화용 또는 항균용 식품조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to a novel carotenoid producing strain, more specifically, the present invention represents the proteolytic activity isolated from soil, also new office torulra to produce carotenoids large industrial AY-01 (Rhodotorula mucilaginosa AY-01), a composition for preparing a carotenoid comprising the strain or a culture thereof, a method for producing a carotenoid comprising culturing the strain and recovering carotenoid therefrom, a culture of the strain or the strain A method for producing chitinolytic enzyme comprising culturing the strain and recovering chitinolytic enzyme from the culture, a composition for antioxidation including an extract of carotenoid derived from the strain, a cosmetic composition for antioxidation, A composition for antimicrobial use, a pharmaceutical composition for antioxidation or antimicrobial use, and a composition for antioxidant or antimicrobial use.

카로티노이드(carotenoid)는 항산화 활성을 가지고 있는 C40 이소프레노이드 화합물(isoprenoid compounds)로서 자연계에 널리 분포되어 있는 한 군의 색소를 총칭하며, 현재까지 알려진 카로티노이드는 6백여 종에 이른다. 이들은 각각 다른 형태로 존재하며 분자 구조에 따라서도 노란색, 적색, 주홍색, 주황색 등 여러 색으로 존재한다. 그 예로 β-카로텐(β-carotene; 당근의 주황색 색소), 라이코펜(licopene; 토마토의 적색 색소), 푸코잔틴(fucoxanthin; 해조류의 황갈색 또는 갈색 색소) 등이 있다. 카로티노이드는 인체 내에서 비타민 A의 전구체로서의 역할을 하며, 산화 방지 효과와 유해산소 소거작용, 암세포 증식 억제작용 및 발암 억제작용이 강하여 순환기 질환, 암 및 성인병 등을 예방하는 효능을 가진 것으로 알려져 있다. 최근에는 카로티노이드가 직접적인 자외선에 의한 신체의 면역기능을 향상시켜 자외선 노출로부터 피부의 손상을 줄여주거나 멜라닌 생성을 억제함이 밝혀지면서 유럽이나 미국에서 미용 소재로 각광을 받기 시작했다. 현재 카로티노이드는 건강식품 소재(영양 보충제), 인간을 대상으로 한 약학적 제제와 식품 착색제 또는 동물용 사료의 색소 등으로 사용되고 있다.Carotenoids are C40 isoprenoid compounds that have antioxidant activity. They are a group of pigments widely distributed in the natural world. Up to 600 carotenoids are known to date. They exist in different forms, and depending on the molecular structure, they exist in various colors such as yellow, red, scarlet, and orange. Examples include β-carotene (orange pigment of carrot), licopene (red pigment of tomato), and fucoxanthin (yellowish brown or brown pigment of seaweed). Carotenoids act as precursors of vitamin A in the body and are known to have an antioxidant effect, a harmful oxygen scavenging effect, a cancer cell proliferation inhibitory action, and a carcinostatic action, so as to prevent circulatory diseases, cancer and adult diseases. In recent years, carotenoids have begun to gain popularity as cosmetics in Europe and the United States, as it has been shown that by directly enhancing the immune function of the body by ultraviolet rays, it reduces skin damage from exposure to ultraviolet rays or inhibits melanogenesis. Currently, carotenoids are used as health food materials (nutritional supplements), pharmaceutical preparations for human use, and coloring agents for food coloring or animal feed.

현재 카로티노이드를 생산하는 것으로 알려진 미생물로는 효모인 파피아 로도지마(Phaffia rhodozyma), 녹색조류인 해마토코커스 플루비알리스(Haematococcus pluvialis), 그람-양성균 브레비박테리움 103(Brevibacterium 103) 및 그람-음성균 아그로박테리움 아우란티아컴(Agrobacterium aurantiacum) 등이 알려져 있다. 그러나, 이러한 미생물들은 높은 함량으로 카로티노이드를 생산하지 못하기 때문에, 고농도로 카로티노이드를 생산할 수 있는 균주의 개발이 요구되고 있으며, 이러한 균주를 개발하기 위한 연구가 활발히 진행되고 있다. 예를 들어, 한국공개특허 제2009-0062566호에는 카로티노이드의 일종인 아스타잔틴을 대량으로 생산할 수 있는 변이균주인 파라코커스 RF1 균주 및 이를 이용하여 아스타잔틴을 대량으로 생산하는 방법이 개시되어 있고, 한국공개특허 제2014-0117068호에는 높은 함량으로카로티노이드를 생산할 수 있으면서도 높은 성장속도를 나타내는 변이주인 PAMC25486 균주가 개시되어 있다.Microorganisms currently known to produce carotenoids include yeast, Phaffia rhodozyma ), green alga Haematococcus pluvialis , Gram-positive Brevibacterium 103 and Gram-negative bacteria Agrobacterium ( Agrobacterium sp. aurantiacum ) are known. However, since these microorganisms can not produce carotenoids at a high content, development of strains capable of producing carotenoids at a high concentration is required, and studies for developing such strains have been actively conducted. For example, Korean Patent Laid-Open Publication No. 2009-0062566 discloses a method for mass production of astaxanthin using Paracoccus RF1 strain, which is a mutant strain capable of mass-producing astaxanthin, which is a type of carotenoid, and astaxanthin, Korean Patent Laid-Open Publication No. 2014-0117068 discloses a strain PAMC25486, which is capable of producing carotenoids at a high content and exhibiting a high growth rate.

한편, 카로티노이드의 항산화 활성은 카로티노이드의 종류에 따라, 현저한 차이를 나타낸다고 알려져 있는데, 이러한 항산화 활성의 수준이 높은 경우에는 상기 카로티노이드를 다양한 용도로 활용할 수 있을 것으로 예상되고 있다. 만일, 미생물을 이용하여 항산화 활성이 우수한 카로티노이드를 생산할 수 있다면, 지금까지 사용되어온 카로티노이드의 활용도를 현저히 증가시킬 수 있을 것으로 기대되고 있다.
On the other hand, it is known that the antioxidative activity of carotenoids is remarkably different depending on the type of carotenoid. When the level of antioxidative activity is high, it is expected that the carotenoid can be used for various purposes. If it is possible to produce carotenoids having excellent antioxidative activity using microorganisms, it is expected that the utilization of carotenoids so far used can be significantly increased.

이러한 배경하에서, 본 발명자들은 종래의 카로티노이드에 비하여 우수한 특성을 나타내는 카로티노이드를 생산하는 방법을 개발하기 위하여 예의 연구노력한 결과, 토양에서 신규 분리된 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주로부터 생산된 카로티노이드를 포함하는 추출물이 우수한 항산화활성을 나타낼 뿐만 아니라, 항생제 내성균에 대한 항균활성까지도 동시에 나타냄을 확인하고, 본 발명을 완성하였다.
Under these circumstances, the inventors of the present invention have made extensive efforts to develop a method for producing carotenoids that exhibit superior characteristics to those of conventional carotenoids. As a result, they have found that carotenoids produced from Rhodotorula mucilaginosa strain AY-01 newly isolated from soil Was found to exhibit not only superior antioxidative activity but also antimicrobial activity against antibiotic resistant bacteria at the same time, thus completing the present invention.

본 발명의 하나의 목적은 카로티노이드를 생산할 수 있는 신규한 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주를 제공하는 것이다.It is an object of the present invention to provide a novel Rhodotorula Mucilaginosa strain AY-01 capable of producing carotenoids.

본 발명의 하나의 목적은 상기 균주 또는 그의 배양물을 포함하는 카로티노이드 제조용 조성물을 제공하는 것이다.It is an object of the present invention to provide a composition for preparing carotenoid comprising the strain or a culture thereof.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 균주를 배양하고 이로부터 카로티노이드를 회수하는 단계를 포함하는 카로티노이드의 제조방법을 제공하는 것이다.It is still another object of the present invention to provide a method for producing a carotenoid comprising culturing the strain and recovering the carotenoid therefrom.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 균주 또는 상기 균주의 배양물을 포함하는 키틴분해효소 제조용 조성물을 제공하는 것이다.It is still another object of the present invention to provide a composition for producing chitinase which comprises the strain or a culture of the strain.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 균주를 배양하고 이로부터 키틴분해효소를 회수하는 단계를 포함하는 키틴분해효소의 제조방법을 제공하는 것이다.It is still another object of the present invention to provide a method for producing chitinolytic enzyme comprising culturing the strain and recovering the chitinolytic enzyme from the culture.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 균주로부터 유래된 카로티노이드 추출물을 포함하는 항산화용 조성물을 제공하는 것이다.It is still another object of the present invention to provide an antioxidant composition comprising a carotenoid extract derived from the strain.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 균주로부터 유래된 카로티노이드 추출물을 포함하는 항산화용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.It is still another object of the present invention to provide an antioxidant cosmetic composition comprising a carotenoid extract derived from the strain.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 균주로부터 유래된 카로티노이드 추출물을 포함하는 항균용 조성물을 제공하는 것이다.It is still another object of the present invention to provide an antimicrobial composition comprising a carotenoid extract derived from the strain.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 균주로부터 유래된 카로티노이드 추출물을 포함하는 항산화 또는 항균용 약학조성물을 제공하는 것이다.It is still another object of the present invention to provide a pharmaceutical composition for antioxidant or antimicrobial use comprising a carotenoid extract derived from the strain.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 균주로부터 유래된 카로티노이드 추출물을 포함하는 항산화 또는 항균용 식품조성물을 제공하는 것이다.
It is still another object of the present invention to provide an antioxidant or antimicrobial food composition comprising a carotenoid extract derived from the strain.

본 발명자들은 카로티노이드를 생산할 수 있는 신규한 균주를 발굴하고자, 토양으로부터 분리된 균주 중에서 단백질 분해활성과 카로티노이드 생산활성을 동시에 나타내는 균주를 스크리닝하여, AY-01 균주를 분리하였다. 상기 AY-01 균주의 특성을 조사한 결과, 다양한 배지(LB 배지, PD 배지 또는 YPD(yeast extract peptone dextrose) 배지)에서 증식할 수 있고, 탈지분유를 분해하는 활성을 나타내며, 키틴분해효소의 기질인 pNP-(GlcNAc)2를 분해하는 활성을 나타내고, 형태적으로는 둥글거나 또는 타원형의 돌출세포의 형태를 나타냄을 확인하였다. 또한, 상기 균주로부터 추출된 카로티노이드 추출물은 통상적인 카로티노이드에 의하여 나타나는 항산화활성 뿐만 항생제 내성균에 대한 항균활성을 추가로 나타냄을 확인하였다. 아울러, 상기 AY-01 균주로부터 유래된 16S rDNA 및 28S rDNA의 염기서열을 분석한 결과, 상기 16S rDNA의 서열은 다양한 종류의 Rhodotorula mucilaginosa 균주에서 유래된 16S rDNA의 염기서열과 동일한 반면, 28S rDNA의 서열은 동일한 서열을 갖는 미생물이 검색되지 않았다. 이에, 28S rDNA의 서열의 상동성에 근거하여 분류학적 위치를 확인한 결과, 상기 AY-01 균주는 Rhodotorula mucilaginosa 균주에 속하는 신규한 균주임을 확인하였다. The present inventors screened a strain showing simultaneous proteolytic activity and carotenoid production activity in a strain isolated from soil in order to isolate a novel strain capable of producing carotenoid, thereby isolating strain AY-01. As a result of investigating the characteristics of the strain AY-01, it was found that the strain AY-01 was able to proliferate in various media (LB medium, PD medium or yeast extract peptone dextrose (YPD) medium), exhibited activity of degrading skim milk, (GlcNAc) 2, and showed morphology of round or oval protruding cells. Furthermore, it was confirmed that the carotenoid extract extracted from the strain further exhibited an antimicrobial activity against antibiotic resistant bacteria, as well as an antioxidative activity exhibited by conventional carotenoids. As a result of analysis of the base sequences of 16S rDNA and 28S rDNA derived from the AY-01 strain, the sequence of the 16S rDNA was classified into various types of Rhodotorula The sequence of the 16S rDNA derived from the mucilaginosa strain was the same as that of the 16S rDNA, but the microorganism having the same sequence of the 28S rDNA was not found. Based on the homology of the sequence of 28S rDNA, the taxonomic position was confirmed. As a result, the AY-01 strain was Rhodotorula mucilaginosa strains.

이에, 본 발명자들은 상기 균주를 "로도토룰라 무실라지노사 AY-01(Rhodotorula mucilaginosa AY-01)"이라 명명하고, 이를 2015년 5월 6일자로 한국생명공학연구원 생물자원센터에 기탁하여 기탁번호 KCTC 12809BP를 부여받았다.Therefore, the present inventors named the above strain as " Rhodotorula mucilaginosa AY-01" on May 6, 2015, and deposited it with the BRC of the Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology as deposit number KCTC 12809BP.

상기 본 발명의 균주는 단백질 분해활성을 나타냄과 동시에, 이로부터 추출된 카로티노이드 추출물은 항산화 활성 및 항생제 내성균에 대한 항균활성을 나타내므로, 신규한 항생제의 개발에 활용될 수 있을 것이다.
The strains of the present invention exhibit proteolytic activity and the carotenoid extracts obtained therefrom exhibit antioxidative activity and antimicrobial activity against antibiotic resistant bacteria, so that they can be utilized in the development of novel antibiotics.

상술한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 하나의 양태로서 신규한 균주 로도토룰라 무실라지노사 AY-01(Rhodotorula mucilaginosa AY-01)(KCTC 12809BP)를 제공한다.
In order to achieve the above-mentioned object, the present invention provides, as an embodiment, a novel strain, such as Torulacumililajinosa AY-01 ( Rhodotorula mucilaginosa AY-01) (KCTC 12809BP).

본 발명의 일 실시예에 의하면, 토양으로부터 분리된 AY-01 균주가, 탈지분유를 분해할 뿐만 아니라, 카로티노이드를 생산할 수 있음을 확인하고, 상기 균주의 배지선택성을 비교한 결과, 대부분의 미생물 배양용 배지에서 용이하게 증식함을 확인하였다(도 1). 또한, 상기 증식된 균주의 형태를 조사한 결과, 둥글거나 또는 타원형의 돌출세포의 형태를 나타냄을 확인하였다(도 2). 상기 균주로부터 16S rDNA 및 28S rDNA를 추출하고 이들의 염기서열을 비교분석한 결과, 상기 16S rDNA의 염기서열은 다양한 종류의 Rhodotorula mucilaginosa 균주에서 유래된 16S rDNA의 염기서열과 동일하고, 28S rDNA의 염기서열은 이와 동일한 28S rDNA 염기서열을 포함하는 균주가 검색되지 않아, 분류학적으로 Rhodotorula mucilaginosa에 속하는 신규한 균주임을 확인하였다(도 3). 끝으로, 상기 AY-01 균주의 당분해활성을 조사한 결과, 키틴분해효소의 기질로 알려진 pNP-(GlcNAc)2에 대한 분해활성을 나타냄을 확인하였다(도 4). According to one embodiment of the present invention, it has been confirmed that AY-01 strain isolated from soil can not only degrade skimmed milk but can produce carotenoids. As a result of comparing the medium selectivity of the strain, Lt; RTI ID = 0.0 > (FIG. 1). ≪ / RTI > As a result of examining the morphology of the proliferated strains, it was confirmed that the morphology of the protruding cells was round or oval (FIG. 2). The 16S rDNA and 28S rDNA were extracted from the strain and the nucleotide sequences of these 16S rDNAs were compared and analyzed. As a result, the nucleotide sequence of the 16S rDNA was classified into various types of Rhodotorula The nucleotide sequence of 28S rDNA was the same as the nucleotide sequence of 16S rDNA derived from mucilaginosa strain, and a strain containing the same 28S rDNA nucleotide sequence was not found. Therefore, Rhodotorula mucilaginosa < / RTI > (Fig. 3). Finally, the sugar-degrading activity of the strain AY-01 was examined and it was confirmed that it exhibited a decomposing activity against pNP- (GlcNAc) 2 known as a substrate of chitinase (FIG. 4).

이에, 상기 균주를 "로도토룰라 무실라지노사 AY-01(Rhodotorula mucilaginosa AY-01)"이라 명명하고, 이를 2015년 5월 6일자로 한국생명공학연구원 생물자원센터에 기탁하여 기탁번호 KCTC 12809BP를 부여받았다.
Thus, the strain was designated as " Rhodotorula mucilaginosa AY-01 ", which was deposited on May 6, 2015 with the Korean Society for Biotechnology Research, and deposited with KCTC 12809BP received.

아울러, 상기 균주의 특성을 분석한 결과, 상기 균주로부터 추출된 카로티노이드 추출물이 항산화 활성 및 항생제 내성균에 대한 항균활성을 나타냄을 확인하였다.
As a result of analyzing the characteristics of the strain, it was confirmed that the carotenoid extract extracted from the strain exhibited antioxidative activity and antimicrobial activity against antibiotic resistant bacteria.

본 발명은 다른 양태로서, 상기 균주 또는 상기 균주의 배양물을 포함하는 카로티노이드 제조용 조성물 및 상기 균주를 배양하고 이로부터 카로티노이드를 회수하는 단계를 포함하는 카로티노이드의 제조방법을 제공한다.
In another aspect, the present invention provides a composition for preparing a carotenoid comprising the strain or a culture of the strain, and a method for producing a carotenoid comprising culturing the strain and recovering the carotenoid therefrom.

상술한 바와 같이, 본 발명에서 제공하는 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주는 카로티노이드 화합물을 생산할 수 있음을 확인하였으므로, 상기 균주 또는 그의 배양물을 포함하는 조성물은 카로티노이드 화합물을 제조하기 위한 조성물로서 사용될 수 있다.
As described above, it has been confirmed that the Rhodotorula Mucilaginosa strain AY-01 provided in the present invention can produce a carotenoid compound. Therefore, the composition comprising the strain or a culture thereof can be used as a composition for preparing a carotenoid compound .

일 예로서, 본 발명의 카로티노이드 화합물의 제조방법은 상기 균주를 배양하고, 상기 균주로부터 카로티노이드 화합물을 회수하는 단계를 포함한다. 이때, 배양된 균주로부터 카로티노이드 화합물을 회수하는 방법은 특별히 이에 제한되지 않으나, 일 예로서, 상기 균주를 그대로 사용하거나 또는 상기 균주를 기계적, 화학적 또는 효소적 방법에 의하여 파쇄하여 수득한 파쇄물을 대상으로, 본 발명에 있어서, 상기 보골지 추출물은 보골지 또는 그의 분에틸아세테이트, 물, 탄소수 1 내지 6의 알콜(메탄올, 에탄올, 부탄올 등) 또는 이들의 혼합 용매, 다른 예로서, 에틸아세테이트, 에탄올 등의 용매, 또 다른 예로서 에탄올을 용매로 사용하여 추출하는 방법을 사용할 수 있고, 다른 예로서, 상기 균주를 메탄올로 추출하는 방법을 사용할 수 있다.
As an example, the method for producing a carotenoid compound of the present invention comprises culturing the strain and recovering the carotenoid compound from the strain. Herein, the method for recovering the carotenoid compound from the cultured strain is not particularly limited. However, for example, the method of using the strain as it is or disrupting the strain by mechanical, chemical, or enzymatic method In the present invention, the bonggol extract may be selected from the group consisting of boehmite or its ethylacetate, water, alcohols having 1 to 6 carbon atoms (methanol, ethanol, butanol, etc.) or mixed solvents thereof, and ethyl acetate, Of ethanol as a solvent, and ethanol as a solvent. As another example, a method of extracting the strain with methanol may be used.

본 발명은 또 다른 양태로서, 상기 균주 또는 상기 균주의 배양물을 포함하는 키틴분해효소 제조용 조성물 및 상기 균주를 배양하고 이로부터 키틴분해효소를 회수하는 단계를 포함하는 키틴분해효소의 제조방법을 제공한다.
In another aspect, the present invention provides a method for producing a chitinolytic enzyme comprising culturing the strain or a culture of the strain, and a step of culturing the strain and recovering the chitinolytic enzyme from the culture do.

본 발명에서 제공하는 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주는 키틴분해효소의 기질인 pNP-(GlcNAc)2를 분해하는 활성을 나타냄을 확인하였으므로, 상기 균주 또는 그의 배양물을 포함하는 조성물은 키틴분해효소를 제조하기 위한 조성물로서 사용될 수 있다.
Since the Rhodotorula Mucilaginosa strain AY-01 provided in the present invention has activity to decompose pNP- (GlcNAc) 2, which is a substrate of chitinolytic enzyme, the composition comprising the strain or a culture thereof has chitin degradation Can be used as a composition for producing an enzyme.

일 예로서, 본 발명의 키틴분해효소의 제조방법은 상기 균주를 배양하고, 상기 균주로부터 키틴분해 효소를 회수하는 단계를 포함한다. 상기 키틴분해 효소를 회수하는 방법은 특별히 이에 제한되지 않으나, 컬럼크로마토그래피법, 면역침전법 등을 사용할 수 있다.
As one example, the method for producing a chitinolytic enzyme of the present invention comprises culturing the strain and recovering chitinolytic enzyme from the strain. The method for recovering the chitinolytic enzyme is not particularly limited, but column chromatography and immunoprecipitation can be used.

본 발명은 또 다른 양태로서, 상기 균주로부터 수득한 카로티노이드 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 항산화용 조성물을 제공한다.
According to another aspect of the present invention, there is provided an antioxidative composition comprising a carotenoid extract obtained from the strain or a fraction thereof.

상술한 바와 같이, 본 발명에서 제공하는 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주가 실제적으로 항산화 활성을 나타냄을 확인하였으므로, 상기 균주로부터 생성된 카로티노이드를 포함하는 추출물 또는 그의 분획물은 항산화용 조성물의 유효성분으로 사용될 수 있다.
As described above, it has been confirmed that the Rhodotorula Mucilaginosa strain AY-01 provided by the present invention actually exhibits antioxidative activity. Therefore, the extract or fraction thereof containing the carotenoid produced from the strain can be used as an active ingredient of the antioxidant composition .

본 발명의 용어 "추출물"이란, 상기 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주를 추출하여 수득한 추출물을 의미한다.The term "extract " of the present invention means an extract obtained by extracting the Rhodotorula mucilaginosa strain AY-01.

본 발명에 있어서, 상기 추출물은 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주 또는 그의 분쇄물을 일 예로서 에틸아세테이트, 물, 탄소수 1 내지 6의 알콜(메탄올, 에탄올, 부탄올 등) 또는 이들의 혼합 용매, 다른 예로서, 에틸아세테이트, 에탄올 등의 용매, 또 다른 예로서 메탄올을 용매로 사용하여 추출하여 수득한 결과물이 될 수 있으나, 이에 제한되지는 않고, 상기 결과물은 추출액, 추출액의 희석액 또는 농축액, 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 또는 이들 조정제물 또는 정제물 등을 모두 포함한다. 상기 메탄올 추출물 역시 특별히 이에 제한되지 않으나, 일 예로서, 상기 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주를 파쇄하지 않고, 균주를 메탄올로 추출하여 수득한 추출물, 상기 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주를 파쇄하고 상기 파쇄물을 메탄올로 추출하여 수득한 추출물을 포함할 수 있고, 다른 예로서, 상기 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주를 파쇄하지 않고, 균주를 메탄올로 추출하여 수득한 추출물을 포함할 수 있다.
In the present invention, the extract may be obtained by cultivating Rhodotorula mucilaginosa strain AY-01 or a pulverized product thereof in an organic solvent such as ethyl acetate, water, alcohols having 1 to 6 carbon atoms (methanol, ethanol, butanol, etc.) As another example, the resultant product may be a solvent such as ethyl acetate, ethanol or the like, or a product obtained by extracting methanol with a solvent, but the present invention is not limited thereto. The resultant may be a diluted solution or concentrate of the extract, Or a dried product obtained by drying the above-mentioned dried product, or these adjusted products or refined products. The methanol extract may also be, for example, but not limited to, an extract obtained by extracting the strain with methanol without breaking the Rhodotorula mucilaginosa strain AY-01, the Rhodotorula mucilaginosa strain AY-01 The extract may be obtained by extracting the strain with methanol without crushing the Rhodotorula mucilaginosa strain AY-01. Alternatively, the extract may be obtained by extracting the strain with methanol, have.

본 발명의 용어 "분획물"이란, 다양한 구성성분을 포함하는 혼합물로부터 특정성분 또는 특정 그룹을 분리하는 분획방법에 의하여 얻어진 결과물을 의미한다. The term "fraction " of the present invention means a product obtained by a fractionation method for separating a specific component or a specific group from a mixture containing various constituents.

본 발명에 있어서, 상기 분획물은 상기 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주의 추출물을 용매 분획법, 한외여과 분획법, 크로마토그래피 분획법 등의 다양한 방법으로 분획한 결과물이 될 수 있다.
In the present invention, the fraction may be obtained by fractionation of the extract of Rhodotorula mucilaginosa strain AY-01 by various methods such as solvent fractionation method, ultrafiltration fractionation method, and chromatographic fractionation method.

본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주의 메탄올 추출물을 사용하여 DPPH 라디칼 흡수활성 측정법, FRAP 분석법 및 ABTS 분석법으로 상기 추출물의 항산화활성을 측정한 결과, 상기 추출물이 아스코르브산 보다도 월등히 우수한 항산화 활성을 나타냄을 확인하였다(표 1).
According to one embodiment of the present invention, the antioxidative activity of the extract was measured by DPPH radical absorption assay, FRAP analysis and ABTS analysis using the methanol extract of Rhodotorula mucilaginosa strain AY-01, Ascorbic acid (Table 1). ≪ tb >< TABLE >

본 발명은 또 다른 양태로서, 상기 균주로부터 수득한 카로티노이드 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 항산화용 화장료 조성물을 제공한다.
In another aspect, the present invention provides an antioxidant cosmetic composition comprising a carotenoid extract obtained from the strain or a fraction thereof.

상술한 바와 같이, 본 발명에서 제공하는 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주로부터 생성된 카로티노이드를 포함하는 추출물 또는 그의 분획물은 우수한 항산화 활성을 나타내므로, 산화지질 또는 자유라디칼에 의하여 유발되는 피부손상, 피부흑화, 피부주름 등의 증상을 억제하거나 또는 개선시키는 효과를 나타내는 항산화용 화장료 조성물의 유효성분으로 사용될 수 있다.
As described above, the extract or fraction thereof containing carotenoids produced from the Rhodotorula Mucilaginosa strain AY-01 provided by the present invention exhibits excellent antioxidative activity, and thus can be used as an antioxidant for skin damages caused by oxidized lipids or free radicals, It can be used as an effective ingredient of an antioxidant cosmetic composition exhibiting an effect of suppressing or improving symptoms such as skin blackening and wrinkles of the skin.

상기 항산화용 화장료 조성물은 피부미백, 주름개선 등의 효과를 나타내는 기능성 화장품의 유효성분으로 사용될 수 있는데, 상기 기능성 화장품에 포함되는 상기 추출물 또는 그의 분획물의 함량은 특별히 제한되지 않으나 일 예로서, 0.01 내지 99.9 중량%가 될 수 있다.
The cosmetic composition for antioxidation may be used as an effective ingredient of functional cosmetics showing effects of skin whitening and wrinkle improvement. The content of the extract or its fraction contained in the functional cosmetics is not particularly limited, 99.9% by weight.

본 발명의 기능성 화장품은 상기 추출물 또는 그의 분획물을 유효성분으로 포함하고, 통상적으로 사용되는 화장료를 추가로 함유할 수 있는데, 예를 들면 수용성 스킨제제화를 위하여 글리세롤, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 솔비톨, 폴리에틸렌글리콜, 카르복시비닐 폴리머, 잔탄검, 카르복시메틸셀룰로오스, 하이드록시에틸셀룰로오스, 하이드록시메틸셀룰로오스, 로커스트빈검, 알란토인, 카라기난 등을 첨가할 수 있으며; 점도와 경도조절제로 밀납, 파라핀 왁스, 스테아릴알콜, 카르나우바 왁스, 칸데릴라 왁스 및 칼슘스테아레이트, 알루미늄스테아레이트, 아연스테아레이트, 위치하젤(witchhazel) 등을 사용할 수 있고; 자외선 흡수제로 부틸메톡시디벤조일메탄, 옥틸메톡시신나메이트 등을 사용할 수 있으며; 안료로는 이산화티탄, 미립자 이산화디탄, 카올린, 나이론 파우다, 탈크, 세리사이트, 마이카, 폴리메틸메타크릴레이트 등의 체질 안료와 황색산화철, 흑색산화철, 적색산화철, 울트라마린, 산화크롬, 수산화크롬 등의 착색안료를 사용할 수 있고; 보습제로 1,3-부틸렌글리콜, 농글리세린, 에틸렌글리콜 등과 키틴, 키토산, 히아론산, 하이알루로닌산, 젖산, 글리콜산 등의 천연보습 물질들을 이용할 수 있으며; 방부제로 파라옥시안식향산 에스테르류, 이미다졸리디닐우레아 등을 사용할 수 있을 뿐만 아니라, 상기한 성분들을 제품특성에 따라 1종 또는 2종이상 혼용 배합할 수도 있다.
The functional cosmetic composition of the present invention may further contain cosmetics conventionally used by containing the above extract or its fraction as an active ingredient. For example, glycerol, propylene glycol, 1,3-butylene Glycols, sorbitol, polyethylene glycols, carboxyvinyl polymers, xanthan gum, carboxymethyl cellulose, hydroxyethyl cellulose, hydroxymethyl cellulose, locust bean gum, allantoin, carrageenan and the like may be added; Paraffin wax, stearyl alcohol, carnauba wax, candelilla wax and calcium stearate, aluminum stearate, zinc stearate, and witchhazel can be used as the viscosity and hardness adjusting agent; As the ultraviolet absorber, butylmethoxydibenzoylmethane, octylmethoxycinnamate and the like can be used; Examples of the pigment include extender pigments such as titanium dioxide, fine particulate dioxides, kaolin, nylon powder, talc, sericite, mica and polymethyl methacrylate, and pigments such as yellow iron oxide, black iron oxide, red iron oxide, ultramarine, chromium oxide, Of a coloring pigment; Natural moisturizing agents such as 1,3-butylene glycol, concentrated glycerin, ethylene glycol, and chitin, chitosan, hypalonic acid, hyaluronic acid, lactic acid and glycolic acid can be used as the moisturizing agent; As the preservative, p-hydroxybenzoic acid esters, imidazolidinyl urea, and the like can be used. In addition, one or more of the above-mentioned components may be blended according to the characteristics of the product.

본 발명의 기능성 화장품은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.The functional cosmetic composition of the present invention may be prepared in any form conventionally produced in the art and may be in the form of a solution, a suspension, an emulsion, a paste, a gel, a cream, a lotion, a powder, a soap, , Oil, powder foundation, emulsion foundation, wax foundation and spray, but is not limited thereto. More specifically, it can be manufactured in the form of a soft lotion, a nutritional lotion, a nutritional cream, a massage cream, an essence, an eye cream, a cleansing cream, a cleansing foam, a cleansing water, a pack, a spray or a powder.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, an animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, tracant, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc or zinc oxide may be used as the carrier component .

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.When the formulation of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as a carrier component. In the case of a spray, in particular, / Propane or dimethyl ether.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.When the formulation of the present invention is a solution or an emulsion, a solvent, a dissolving agent or an emulsifying agent is used as a carrier component, and examples thereof include water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, , 3-butyl glycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or sorbitan fatty acid esters.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.In the case where the formulation of the present invention is a suspension, a carrier such as water, a liquid diluent such as ethanol or propylene glycol, a suspending agent such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester, Cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracant, etc. may be used.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
When the formulation of the present invention is an interfacial active agent-containing cleansing, the carrier component may include aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivative, methyltaurate, sarcosinate, fatty acid amide Ether sulfates, alkylamidobetaines, aliphatic alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, lanolin derivatives or ethoxylated glycerol fatty acid esters.

본 발명은 또 다른 양태로서, 상기 균주로부터 수득한 카로티노이드 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 항균용 조성물을 제공한다.
In another aspect of the present invention, there is provided an antimicrobial composition comprising a carotenoid extract obtained from the strain or a fraction thereof.

본 발명에서 제공하는 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주로부터 수득한 카로티노이드를 포함하는 추출물 또는 그의 분획물은 항생제 내성균에 대한 항균활성을 나타내므로, 상기 추출물 또는 그의 분획물은 항균용 조성물의 유효성분으로 사용될 수 있다. 이때, 상기 항균용 조성물이 항균활성을 나타낼 수 있는 균주는 특별히 이에 제한되지 않으나 일 예로서, 항생제 내성균이 될 수 있고, 다른 예로서, 돼지 정장액으로부터 분리되고, 일정농도(약 50 ㎍/㎖) 이하의 앰피실린 등의 항생제가 처리된 조건에서도 생존할 수 있는 항생제 내성균주 등이 될 수 있다.
Since the extract or fraction thereof containing the carotenoid obtained from the Rhodotorula Mucilaginosa strain AY-01 provided by the present invention exhibits an antimicrobial activity against antibiotic resistant bacteria, the extract or its fraction can be used as an active ingredient of an antimicrobial composition . In this case, the strain capable of exhibiting the antimicrobial activity of the antimicrobial composition is not particularly limited. For example, the strain may be an antibiotic resistant bacterium. As another example, the strain may be isolated from the sucking liquid, ) Or less of antibiotics such as ampicillin can survive the treatment.

본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주의 메탄올 추출물을 돼지 정장액으로부터 분리된 2종의 앰피실린 내성균주인 PWG 및 F1 균주의 배양시 처리한 결과, 상기 2종 균주의 성장이 억제됨을 확인하였다
According to one embodiment of the present invention, the methanol extract of Rhodotorula Mucilaginosa strain AY-01 was treated in the culture of two strains of ampicillin-resistant bacteria PWG and F1 isolated from porcine formulations, It was confirmed that the growth of the strain was inhibited

본 발명은 또 다른 양태로서, 상기 균주로부터 수득한 카로티노이드 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 항산화 또는 항균용 약학조성물을 제공한다.
In another aspect, the present invention provides an antioxidant or antimicrobial pharmaceutical composition comprising a carotenoid extract obtained from the strain or a fraction thereof.

상술한 바와 같이, 상기 균주로부터 수득한 카로티노이드 추출물 또는 그의 분획물은 항산화 활성 및 항균활성을 나타내므로, 상기 활성에 의하여 예방, 치료, 경감 또는 개선될 수 있는 질환에 대한 약학조성물의 유효성분으로서, 상기 카로티노이드 추출물 또는 그의 분획물을 사용할 수 있다. 예를 들어, 항생제 내성균의 감염에 의한 감염증을 치료하는데 사용될 수 있다.
As described above, the carotenoid extract or fraction thereof obtained from the strain exhibits antioxidant activity and antibacterial activity, and therefore, as an active ingredient of a pharmaceutical composition for a disease which can be prevented, treated, alleviated or ameliorated by the activity, Carotenoid extracts or fractions thereof can be used. For example, it can be used to treat infections caused by infection with antibiotic resistant bacteria.

상기 본 발명의 조성물은, 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 또는 희석제를 추가로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물의 형태로 제조될 수 있다. 상기 담체는 비자연적 담체(non-naturally occuring carrier)를 포함할 수 있다. 구체적으로, 상기 약학 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 본 발명에서, 상기 약학적 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화 할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출물과 이의 분획물들에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘 카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는 데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
The composition of the present invention may be prepared in the form of a pharmaceutical composition for the prophylaxis or treatment of inflammatory diseases, which further comprises an appropriate carrier, excipient or diluent conventionally used in the production of a pharmaceutical composition. The carrier may comprise a non-naturally occuring carrier. Specifically, the pharmaceutical composition may be formulated in the form of powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols and the like, oral preparations, suppositories and sterilized injection solutions according to a conventional method . In the present invention, the carrier, excipient and diluent which may be contained in the pharmaceutical composition include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, acacia rubber, alginate, gelatin, calcium phosphate , Calcium silicate, cellulose, methylcellulose, microcrystalline cellulose, polyvinylpyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil. In the case of formulation, a diluent or excipient such as a filler, an extender, a binder, a wetting agent, a disintegrant, or a surfactant is usually used. Solid formulations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, capsules and the like, which may contain at least one excipient such as starch, calcium carbonate, Sucrose, lactose, gelatin and the like. In addition to simple excipients, lubricants such as magnesium stearate and talc are also used. Liquid preparations for oral use may include various excipients such as wetting agents, sweetening agents, fragrances, preservatives, etc. in addition to water and liquid paraffin, which are simple diluents commonly used in suspension, liquid solutions, emulsions and syrups have. Formulations for parenteral administration include sterilized aqueous solutions, non-aqueous solutions, suspensions, emulsions, freeze-dried preparations, and suppositories. Examples of the suspending agent include propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil such as olive oil, injectable ester such as ethyl oleate, and the like. Examples of the suppository base include witepsol, macrogol, tween 61, cacao butter, laurin, glycerogelatin and the like.

본 발명의 약학 조성물에 포함된 상기 추출물 또는 그의 분획물의 함량은 특별히 이에 제한되지 않으나, 최종 조성물 총 중량을 기준으로 0.0001 내지 50 중량%, 보다 바람직하게는 0.01 내지 20 중량%의 함량으로 포함될 수 있다.
The content of the extract or the fraction thereof contained in the pharmaceutical composition of the present invention is not particularly limited but may be in the range of 0.0001 to 50% by weight, more preferably 0.01 to 20% by weight, based on the total weight of the final composition .

상기 본 발명의 약학 조성물은 약제학적으로 유효한 양으로 투여될 수 있는데, 본 발명의 용어 "약제학적으로 유효한 양"이란 의학적 치료 또는 예방에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료 또는 예방하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 질환의 중증도, 약물의 활성, 환자의 연령, 체중, 건강, 성별, 환자의 약물에 대한 민감도, 사용된 본 발명 조성물의 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율 치료기간, 사용된 본 발명의 조성물과 배합 또는 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 약학 조성물은 단독으로로 투여하거나 공지된 지방간 개선제와 병용하여 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하다.
The pharmaceutical composition of the present invention can be administered in a pharmaceutically effective amount. The term "pharmaceutically effective amount " of the present invention means a therapeutic or prophylactic treatment of a disease at a reasonable benefit / risk ratio applicable to medical treatment or prevention And the effective dose level refers to the level of the disease to be treated, the severity of the disease, the activity of the drug, the age, body weight, health, sex, sensitivity of the patient to the drug, Duration, duration of administration, factors involved in combination with or contemporaneously with the composition of the present invention, and other factors well known in the medical arts. The pharmaceutical composition of the present invention may be administered alone or in combination with a known fatty liver improvement agent. It is important to take into account all of the above factors and administer an amount that will achieve the maximum effect in the least amount without side effects.

본 발명의 약학 조성물의 투여량은 사용목적, 질환의 중독도, 환자의 연령, 체중, 성별, 기왕력, 또는 유효성분으로서 사용되는 물질의 종류 등을 고려하여 당업자가 결정할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 약학 조성물은 성인 1인당 약 0.1 ng 내지 약 100 mg/kg, 바람직하게는 1 ng 내지 약 10 mg/kg로 투여할 수 있고, 본 발명의 조성물의 투여빈도는 특별히 이에 제한되지 않으나, 1일 1회 투여하거나 또는 용량을 분할하여 수회 투여할 수 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
The dosage of the pharmaceutical composition of the present invention can be determined by those skilled in the art in consideration of the purpose of use, the degree of addiction to the disease, the age, body weight, sex, history, or kind of the substance used as the active ingredient. For example, the pharmaceutical composition of the present invention may be administered at about 0.1 ng to about 100 mg / kg, preferably 1 ng to about 10 mg / kg, per adult, and the frequency of administration of the composition of the present invention is particularly It is not limited, but it can be administered once a day or divided into several doses. The dose is not intended to limit the scope of the invention in any way.

본 발명은 또 다른 양태로서, 상기 균주로부터 수득한 카로티노이드 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 항산화 또는 항균용 식품조성물을 제공한다.
In another aspect, the present invention provides an antioxidant or antimicrobial food composition containing a carotenoid extract or a fraction thereof obtained from the strain.

상기 추출물은 항산화 효과 또는 항균 효과를 나타낼 수 있는 식품의 형태로 제조되어 섭취할 수 있다. 이때, 상기 식품에 포함되는 상기 추출물 또는 그의 분획물의 함량은 특별히 이에 제한되지 않으나, 식품 조성물의 총 중량에 대하여 0.001 내지 10 중량%, 보다 바람직하게는 0.1 내지 1 중량%로 포함될 수 있다. 식품이 음료인 경우에는 100㎖를 기준으로 1 내지 10g, 바람직하게는 2 내지 7g의 비율로 포함될 수 있다. 또한, 상기 조성물은 식품 조성물에 통상 사용되어 냄새, 맛, 시각 등을 향상시킬 수 있는 추가 성분을 포함할 수 있다. 예를 들어, 비타민 A, C, D, E, B1, B2, B6, B12, 니아신(niacin), 비오틴(biotin), 폴레이트(folate), 판토텐산(panthotenic acid) 등을 포함할 수 있다. 또한, 아연(Zn), 철(Fe), 칼슘(Ca), 크롬(Cr), 마그네슘(Mg), 망간(Mn), 구리(Cu) 등의 미네랄을 포함할 수 있다. 또한, 라이신, 트립토판, 시스테인, 발린 등의 아미노산을 포함할 수 있다. 또한, 방부제(소르빈산 칼륨, 벤조산나트륨, 살리실산, 데히드로초산나트륨 등), 살균제(표백분과 고도 표백분, 차아염소산나트륨 등), 산화방지제(부틸히드록시아니졸(BHA), 부틸히드록시톨류엔(BHT) 등), 착색제(타르색소 등), 발색제(아질산 나트륨, 아초산 나트륨 등), 표백제(아황산나트륨), 조미료(MSG 글루타민산나트륨 등), 감미료(둘신, 사이클레메이트, 사카린, 나트륨 등), 향료(바닐린, 락톤류 등), 팽창제(명반, D-주석산수소칼륨 등), 강화제, 유화제, 증점제(호료), 피막제, 검기초제, 거품억제제, 용제, 개량제 등의 식품 첨가물(food additives)을 첨가할 수 있다. 상기 첨가물은 식품의 종류에 따라 선별되고 적절한 양으로 사용된다.
The extract may be prepared in the form of a food that can exhibit an antioxidative or antimicrobial effect and may be ingested. At this time, the content of the extract or the fraction thereof contained in the food is not particularly limited, but may be in the range of 0.001 to 10% by weight, more preferably 0.1 to 1% by weight based on the total weight of the food composition. When the food is a beverage, it may be contained in a proportion of 1 to 10 g, preferably 2 to 7 g based on 100 ml. In addition, the composition may contain additional ingredients which are commonly used in food compositions and which can improve odor, taste, vision and the like. For example, vitamins A, C, D, E, B1, B2, B6, B12, niacin, biotin, folate, panthotenic acid and the like. In addition, it may include minerals such as zinc (Zn), iron (Fe), calcium (Ca), chromium (Cr), magnesium (Mg), manganese (Mn) and copper (Cu) It may also include amino acids such as lysine, tryptophan, cysteine, valine, and the like. In addition, it is also possible to use antiseptics (such as potassium sorbate, sodium benzoate, salicylic acid, and sodium dehydroacetate), disinfectants (such as bleaching powder and highly bleached white powder, sodium hypochlorite), antioxidants (butylhydroxyanilide (BHA), butylhydroxytoluene BHT), etc.), coloring agents (such as tar pigments), coloring agents (such as sodium nitrite and sodium acetic acid), bleaching agents (sodium sulfite), seasoning (such as MSG sodium glutamate), sweeteners (such as hypoglycemia, , Food additives such as flavorings (vanillin, lactones, etc.), swelling agents (alum, potassium hydrogen D-tartrate), emulsifiers, emulsifiers, thickeners, encapsulating agents, gum bases, foam inhibitors, ) Can be added. The additives are selected according to the type of food and used in an appropriate amount.

한편, 상기 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 항산화 또는 항균용 식품 조성물을 이용하여 항산화 또는 항균용 건강기능성 식품을 제조할 수 있다.On the other hand, a health functional food for antioxidant or antimicrobial activity can be produced using the antioxidant or antimicrobial food composition containing the extract or the fraction thereof.

구체적인 예로, 상기 식품 조성물을 이용하여 항산화 효과를 나타낼 수 있는 가공식품을 제조할 수 있는데, 예들 들어, 과자, 음료, 주류, 발효식품, 통조림, 우유가공식품, 육류가공식품 또는 국수가공식품의 형태인 건강기능성 식품으로 제조될 수 있다. 이때, 과자는 비스킷, 파이, 케익, 빵, 캔디, 젤리, 껌, 시리얼(곡물푸레이크 등의 식사대용품류 포함) 등을 포함한다. 음료는 음용수, 탄산음료, 기능성이온음료, 쥬스(예들 들어, 사과, 배, 포도, 알로에, 감귤, 복숭아, 당근, 토마토 쥬스 등), 식혜 등을 포함한다. 주류는 청주, 위스키, 소주, 맥주, 양주, 과실주 등을 포함한다. 발효식품은 간장, 된장, 고추장 등을 포함한다. 통조림은 수산물 통조림(예들 들어, 참치, 고등어, 꽁치, 소라 통조림 등), 축산물 통조림(쇠고기, 돼지고기, 닭고기, 칠면조 통조림 등), 농산물 통조림(옥수수, 복숭아, 파일애플 통조림 등)을 포함한다. 우유가공식품은 치즈, 버터, 요구르트 등을 포함한다. 육류가공식품은 돈까스, 비프까스, 치킨까스, 소세지. 탕수육, 너겟류, 너비아니 등을 포함한다. 밀봉포장생면 등의 국수를 포함한다. 이 외에도 상기 조성물은 레토르트식품, 스프류 등에 사용될 수 있다.
As a specific example, the food composition can be used to produce a processed food which can exhibit an antioxidative effect. For example, it can be used in the form of confectionery, beverage, liquor, fermented food, canned food, milk processed food, ≪ / RTI > health functional food. The sweets include biscuits, pies, cakes, breads, candies, jellies, gums, cereals (including dinner utensils such as cereal flakes). Drinks include drinking water, carbonated beverages, functional ionic beverages, juices (such as apples, pears, grapes, aloes, citrus fruits, peaches, carrots, tomato juices, etc.) and sikhye. The mainstream includes sake, whiskey, shochu, beer, liquor, and fruit wine. Fermented foods include soy sauce, miso, and kochujang. Canned products include canned products (eg, tuna, mackerel, saury, canned fish, etc.), canned products (canned beef, pork, chicken, turkey canned food) and canned products (corn, peach and canned pineapple). Milk processed foods include cheese, butter, yogurt and the like. Meat-processed foods include pork cutlet, beef cutlet, chicken cutlet, sausage. Sweet and sour pork, nuggets, and nubani. And noodles such as sealed packaging raw noodles. In addition, the composition may be used in retort food, soup and the like.

본 발명의 용어 "건강기능성 식품(functional food)"이란, 특정보건용 식품(food for special health use, FoSHU)와 동일한 용어로, 영양 공급 외에도 생체조절기능이 효율적으로 나타나도록 가공된 의학, 의료효과가 높은 식품을 의미하는데, 상기 식품은 항산화 활성에 의한 유용한 효과를 얻기 위하여 정제, 캡슐, 분말, 과립, 액상, 환 등의 다양한 형태로 제조될 수 있다.
The term "functional food " of the present invention refers to a food for special health use (FoSHU) . The food may be prepared in various forms such as tablets, capsules, powders, granules, liquids, and circles to obtain useful effects by antioxidant activity.

본 발명에서 제공하는 신규한 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주에서 생산되는 카로티노이드를 포함하는 추출물 또는 그의 분획물은 항산화 활성 뿐만 아니라 항생제 내성균에 대한 항균활성을 나타내므로, 항산화 활성에 의하여 항생제의 활성이 개선된 제제의 개발에 널리 활용될 수 있을 것이다.
The extract or fraction thereof containing carotenoids produced by the novel Rhodotorula Mucilaginosa strain AY-01 provided by the present invention exhibits an antimicrobial activity against antibiotic resistant bacteria as well as antioxidative activity, It can be widely used for the development of improved formulations.

도 1은 본 발명에서 제공하는 AY-01 균주를 3종의 배지(LB 배지, PD 배지 또는 YPD 배지)에 접종하고 그의 성장수준을 비교한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 2는 YPD 고체배지에서 배양된 AY-01 균주의 사진(A) 및 상기 배양된 균주의 현미경 사진(x 400)이다.
도 3은 본 발명에서 제공하는 AY-01 균주의 당분해활성을 각 기질별로 측정한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 4는 AY-01 균주의 28S rDNA 서열분석을 통한, AY-01 균주의 분류학적 위치를 나타내는 계통수이다.
도 5는 카로티노이드 추출물을 대상으로 FT-IR 분석을 수행한 결과를 나타내는 FT-IR 스펙트럼이다.
도 6은 본 발명에서 제공하는 카로티노이드 추출물을 대상으로 TLC 분석을 수행한 결과를 나타내는 사진이다.
도 7은 본 발명에서 제공하는 카로티노이드 추출물이 항생제 내성균인 PWG 및 F1 균주의 증식에 미치는 효과를 나타내는 사진으로서, 1번은 카로티노이드 추출물을 처리한 실험군이고, 2번은 메탄올을 처리한 실험군이며, 3번은 에리트로마이신을 처리한 실험군이고, 4번은 앰피실린을 처리한 실험군을 나타낸다.FIG. 1 is a graph showing the results obtained by inoculating AY-01 strain provided in the present invention into three kinds of medium (LB medium, PD medium or YPD medium) and comparing their growth levels.
2 is a photograph (A) of the strain AY-01 cultured in YPD solid medium and a micrograph (x 400) of the cultured strain.
FIG. 3 is a graph showing the results of measurement of the sugar disintegration activity of the AY-01 strain provided by the present invention for each substrate.
4 is a phylogenetic tree showing the taxonomic position of strain AY-01 through 28S rDNA sequence analysis of strain AY-01.
FIG. 5 is an FT-IR spectrum showing the results of performing FT-IR analysis on carotenoid extract. FIG.
FIG. 6 is a photograph showing the result of performing TLC analysis on the carotenoid extract provided in the present invention. FIG.
FIG. 7 is a photograph showing the effect of the carotenoid extract provided by the present invention on the proliferation of the antibiotic-resistant PWG and F1 strains, wherein 1 is an experimental group treated with a carotenoid extract, 2 is an experimental group treated with methanol, Experimental group treated with micin and group 4 treated with ampicillin.

이하 본 발명을 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to examples. However, these examples are for illustrative purposes only, and the scope of the present invention is not limited to these examples.

실시예Example 1:  One: 신규한New 카로티노이드  Carotenoid 생산균주의Production strain 분리 및 동정 Isolation and identification

인천시 토양으로부터 분리된 균주를 1% 탈지분유를 포함하는 LB 고체배지에 접종하고, 실온에서 7일 동안 배양하면서, 카로티노이드를 생산하여 적색을 나타내는 콜로니를 형성하는 균주를 선별하였다. 상기 선별된 균주를 다시 LB 고체배지에 접종하고, 실온에서 7일 동안 배양하면서, 카로티노이드를 생산하여 적색을 나타내는 콜로니를 선별하는 과정을 반복하여 1종의 균주(AY-01 균주)를 순수분리하였다. 이어, 상기 순수분리된 AY-01 균주를 3종의 배지(LB 배지, PD 배지 또는 YPD 배지)에 접종하고 그의 성장수준을 비교하였다(도 1).The strains isolated from the soil of Incheon city were inoculated into LB solid medium containing 1% defatted milk powder and cultured for 7 days at room temperature to select strains which produce carotenoids and form colonies showing red color. One of the strains (strain AY-01) was purified by repeating the process of inoculating the selected strains into LB solid medium and culturing for 7 days at room temperature to produce carotenoids and selecting colonies showing red color . Then, the purely isolated strain AY-01 was inoculated into three kinds of media (LB medium, PD medium or YPD medium) and their growth levels were compared (FIG. 1).

도 1은 본 발명에서 제공하는 AY-01 균주를 3종의 배지(LB 배지, PD 배지 또는 YPD 배지)에 접종하고 그의 성장수준을 비교한 결과를 나타내는 그래프이다. 도 1에서 보듯이, 상기 AY-01 균주는 3종의 배지에서 특별한 차이 없이 성장할 수 있음을 확인하였다. 그러나, 배지에 따라 성장속도와 균주의 크기가 달라짐을 확인하였다. 예를 들어, PD 배지에서 배양된 균주는 다른 배지에서 배양한 균주보다 빠르게 성장하였으나, 세포의 크기는 다른 배지에서 배양한 균주보다 작은 크기를 나타내었다. 이에 따라, 성장속도와 균주의 크기가 균형을 이루는 YPD 배지를 사용하여 이후의 실험을 수행하였다.
FIG. 1 is a graph showing the results obtained by inoculating AY-01 strain provided in the present invention into three kinds of medium (LB medium, PD medium or YPD medium) and comparing their growth levels. As shown in FIG. 1, it was confirmed that the AY-01 strain can grow in three kinds of medium without any difference. However, it was confirmed that the growth rate and the size of the strain vary depending on the medium. For example, strains cultured on PD media grew faster than strains cultured on other media, but cell sizes were smaller than strains cultured on other media. Thus, subsequent experiments were performed using a YPD medium in which the growth rate and the size of the strain were balanced.

상기 결과에 따라, YPD 배지에서 배양된 AY-01 균주를 현미경(x 400, OLYMPUS, Co., Japan)으로 관찰하였다(도 2).According to the above results, the AY-01 strain cultured in YPD medium was observed under a microscope (x 400, OLYMPUS, Co., Japan) (Fig. 2).

도 2는 YPD 고체배지에서 배양된 AY-01 균주의 사진(A) 및 상기 배양된 균주의 현미경 사진(x 400)이다. 도 2에서 보듯이, 상기 AY-01 균주는 둥글거나 또는 타원형의 돌출세포의 형태를 나타냄을 확인하였다.
2 is a photograph (A) of the strain AY-01 cultured in YPD solid medium and a micrograph (x 400) of the cultured strain. As shown in FIG. 2, it was confirmed that the AY-01 strain exhibited the shape of round or oval-shaped protruding cells.

아울러, 상기 AY-01 균주의 생화학적 활성을 규명하기 위하여, 다양한 효소의 기질인 pNP-글루코스(p-nitrophenyl-glucose), pNP-갈락토스 또는 pNP-(GlcNAc)2를 포함하는 각각의 YPD 배지를 제작하고, 상기 제작된 각 배지에 AY-01 균주를 접종한 다음, 이의 대사적 활성을 측정하였다(도 3).In order to investigate the biochemical activity of the AY-01 strain, each YPD medium containing pNP-glucose, pNP-galactose or pNP- (GlcNAc) 2, which is a substrate of various enzymes, , And the AY-01 strain was inoculated into each of the prepared media, and its metabolic activity was measured (FIG. 3).

도 3은 본 발명에서 제공하는 AY-01 균주의 당분해활성을 각 기질별로 측정한 결과를 나타내는 그래프이다. 도 3에서 보듯이, 본 발명에서 제공하는 AY-01 균주는 pNP-(GlcNAc)2에 대하여만 분해활성을 나타냄을 확인하였다. 상기 pNP-(GlcNAc)2는 키틴분해효소의 기질로 알려져 있고, 상기 키틴은 효모 세포의 주요 구성요소 중의 하나로서, 외부 환경의 스트레스에 대항하여 세포 구조를 유지하는 역할을 수행하는 것으로 알려져 있다.
FIG. 3 is a graph showing the results of measurement of the sugar disintegration activity of the AY-01 strain provided by the present invention for each substrate. As shown in FIG. 3, it was confirmed that the strain AY-01 provided by the present invention shows a degradative activity only against pNP- (GlcNAc) 2. The above-mentioned pNP- (GlcNAc) 2 is known as a substrate of chitinolytic enzyme. The chitin is one of the main components of yeast cells, and plays a role of maintaining the cell structure against the stress of the external environment.

한편, 상기 AY-01 균주를 동정하기 위하여, 상기 균주로부터 16S rDNA를 추출하고, 이의 염기서열을 결정한 다음, 블라스트 검색을 수행하였다(표 1).
On the other hand, in order to identify the AY-01 strain, 16S rDNA was extracted from the strain, the base sequence thereof was determined, and blast search was performed (Table 1).

AY-01 균주로부터 유래된 16S rDNA의 서열분석 결과Sequence analysis result of 16S rDNA derived from strain AY-01 균주Strain 등록번호Registration Number 유사성Similarity 염기의 차이(bp)Difference in base (bp) Rhodotorula mucilaginosa R-4685
Rhodotorula mucilaginosa KDLYH2-1
Rhodotorula mucilaginosa KYZYP14
Rhodotorula mucilaginosa GXZJP34
Rhodotorula mucilaginosa YDMYY52
Rhodotorula mucilaginosa YM24532
Rhodotorula mucilaginosa 217
Rhodotorula mucilaginosa YM24379 Rhodotorula mucilaginosa R-4685
Rhodotorula mucilaginosa KDLYH2-1
Rhodotorula mucilaginosa KYZYP14
Rhodotorula mucilaginosa GXZJP34
Rhodotorula mucilaginosa YDMYY52
Rhodotorula mucilaginosa YM24532
Rhodotorula mucilaginosa 217
Rhodotorula mucilaginosa YM24379 KF726104
KF633183
KC160628
KC160605
KC160581
JQ964226
JN417628
HQ416922KF726104
KF633183
KC160628
KC160605
KC160581
JQ964226
JN417628
HQ416922 100.00
100.00
100.00
100.00
100.00
100.00
100.00
100.00100.00
100.00
100.00
100.00
100.00
100.00
100.00
100.00 0/560
0/560
0/560
0/560
0/560
0/560
0/560
0/5600/560
0/560
0/560
0/560
0/560
0/560
0/560
0/560

상기 표 1에서 보듯이, Rhodotorula mucilaginosa R-4685(KF726104), Rhodotorula mucilaginosa KDLYH2-1(KF633183), Rhodotorula mucilaginosa KYZYP14(KC160628), Rhodotorula mucilaginosa GXZJP34(KC160605), Rhodotorula mucilaginosa YDMYY52(KC160581), Rhodotorula mucilaginosa YM24532(JQ964226), Rhodotorula mucilaginosa 217(JN417628) 및 Rhodotorula mucilaginosa YM24379(HQ416922)와 같은 Rhodotorula mucilaginosa 균주의 16S rDNA와 동일한 서열임을 확인하였다.As shown in Table 1, Rhodotorula mucilaginosa R-4685 (KF726104), Rhodotorula mucilaginosa KDLYH2-1 (KF633183), Rhodotorula mucilaginosa KYZYP14 (KC160628), Rhodotorula mucilaginosa GXZJP34 (KC160605), Rhodotorula mucilaginosa YDMYY52 (KC160581), Rhodotorula mucilaginosa YM24532 (JQ964226), Rhodotorula such as mucilaginosa 217 (JN417628) and Rhodotorula mucilaginosa YM24379 (HQ416922) Rhodotorula mucilaginosa strain 16S rDNA.

이에, 상기 AY-01 균주로부터 28S rDNA를 추출하고, 이의 염기서열을 결정한 다음, 블라스트 검색을 통해 상기 균주의 분류학적 위치를 확인한 결과, 이와 동일한 28S rDNA 서열은 확인되지 않았으므로, Clustal W 소프트웨어를 사용하여 이의 분류학적 위치를 분석하였다(도 4).Thus, 28S rDNA was extracted from the AY-01 strain, and the nucleotide sequence thereof was determined. Then, the taxonomic position of the strain was confirmed through blast search. As a result, the same 28S rDNA sequence was not confirmed. And its taxonomic position was analyzed (FIG. 4).

도 4는 AY-01 균주의 28S rDNA 서열분석을 통한, AY-01 균주의 분류학적 위치를 나타내는 계통수이다. 도 4에서 보듯이, 본 발명에서 제공하는 AY-01 균주는 Rhodotorula mucilaginosa에 속하는 신규한 균주인 것으로 확인되었다.
4 is a phylogenetic tree showing the taxonomic position of strain AY-01 through 28S rDNA sequence analysis of strain AY-01. As shown in FIG. 4, the AY-01 strain provided in the present invention was confirmed to be a novel strain belonging to Rhodotorula mucilaginosa .

이에, 본 발명자들은 상기 균주를 "로도토룰라 무실라지노사 AY-01(Rhodotorula mucilaginosa AY-01)"이라 명명하고, 이를 2015년 5월 6일자로 한국생명공학연구원 생물자원센터에 기탁하여 기탁번호 KCTC 12809BP를 부여받았다.
Therefore, the present inventors named the above strain as " Rhodotorula mucilaginosa AY-01" on May 6, 2015, and deposited it with the BRC of the Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology as deposit number KCTC 12809BP.

상기 R. mucilaginosa AY-01 균주를 1.0 ㎖의 YPD 배지에서 25℃조건에서 48시간 동안 배양하고, 이로부터 얻어진 배양물을 50 ㎖의 YPD 배지에 재접종한 다음, 25℃ 및 150rpm의 회전배양기에서 150시간 동안 배양하였다.The strain of R. mucilaginosa AY-01 was cultured in 1.0 ml of YPD medium at 25 ° C for 48 hours, and the resulting culture was re-inoculated into 50 ml of YPD medium and then cultured in a rotary incubator at 25 ° C and 150 rpm And cultured for 150 hours.

상기 배양이 종료된 후, 상기 배양물을 원심분리(3,500 rpm 및 20분)하여, R. mucilaginosa AY-01 균주를 수집하고, 상기 수집된 균주를 증류수로 세척하였으며, 이를 동결건조기(-55℃ 및 48시간)에 적용하여 건조균주를 수득하였다. 상기 수득한 건조균주를 이하의 실험에서 사용하였다.
After completion of the cultivation, the culture was centrifuged (3,500 rpm and 20 minutes) to collect the strain of R. mucilaginosa AY-01, and the collected strain was washed with distilled water. And 48 hours) to obtain a dry strain. The obtained dry strain was used in the following experiment.

실시예Example 2:  2: 로도토룰라Loreto Torula 무실라지노사Mushroom Rajinosa AY-01 균주로부터 카로티노이드 추출방법의 최적화 Optimization of carotenoid extraction method from strain AY-01

상기 실시예 1에서 분리동정된 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주로부터 카로티노이드를 추출하는 최적 방법을 개발하고자 하였다.
An optimal method for extracting carotenoids from Rhodotorula mucilaginosa strain AY-01 identified and isolated in Example 1 was developed.

실시예Example 2-1: 메탄올 추출법 2-1: Methanol extraction method

상기 실시예 1에서 분리 동정된 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 0.2g의 건조 균주에 3 ㎖ 메탄올을 가하여 현탁시켜서, 균주를 파쇄하지 않고 상기 균주로부터 (평균 180 ± 0.5 ㎍/g 건조 중량) 카로티노이드를 추출하였다. 이어, 상기 현탁액을 원심분리하여 상층액을 수득하여, 카로티노이드 추출물을 수득하였다.
3 ml of methanol was added to a dry strain of 0.2 g of Rhodotorula mucilaginosa AY-01 isolated and isolated in Example 1 to suspend the strain from the strain (average 180 ± 0.5 μg / g dry weight) without breaking the strain, Respectively. The suspension was then centrifuged to obtain a supernatant to obtain a carotenoid extract.

실시예Example 2-2: 기계적 파쇄 추출법 2-2: Mechanical fracture extraction method

상기 실시예 1에서 분리동정된 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주를 대상으로, 초음파 처리 또는 바다모래를 이용하여 마쇄하는 방법으로, 상기 균주를 파쇄하였다.
The strain was disrupted by ultrasonication or by sanding with sea sand in the Rhodotorula Mucilaginosa strain AY-01 identified and isolated in Example 1 above.

먼저, 초음파 처리방법은 다음과 같이 수행하였다. 실시예 1에서와 같이 0.2g의 건조균주에 3 ㎖의 증류수를 가하고, 40 kHz의 초음파를 30분 동안 처리하는 과정을 5회 반복하여 균주를 파쇄하였다. 이어 파쇄된 균주를 원심분리(13,000 rpm 및 10분)하여, 상층액을 제거하고, 침전물을 수득하였다. 상기 수득한 침전물을 증류수로 2회 세척하여 잔류물을 제거하였다. 상기 세척된 침전물에 3 ㎖의 메탄올을 가하고, 원심분리(13,000 rpm 및 10분)하여 카로티노이드를 포함하는 상층액을 수득하고, 상기 상층액을 대상으로 450nm에서의 흡광도를 측정한 다음, 하기식에 적용하여 카로티노이드의 농도를 산출하였다.
First, the ultrasonic treatment was performed as follows. 3 ml of distilled water was added to 0.2 g of the dried strain as in Example 1, and the process of treating the ultrasonic wave at 40 kHz for 30 minutes was repeated 5 times to disrupt the strain. The crushed strain was then centrifuged (13,000 rpm and 10 minutes) to remove the supernatant, and a precipitate was obtained. The precipitate obtained was washed twice with distilled water to remove the residue. 3 ml of methanol was added to the washed precipitate and centrifuged (13,000 rpm and 10 minutes) to obtain a supernatant containing carotenoid. Absorbance at 450 nm of the supernatant was measured, And the concentration of carotenoid was calculated.

카로티노이드 농도(㎍/g 균주건조중량) = (450 * A * V)/(2500 * W) Carotenoid concentration (占 퐂 / g strain dry weight) = (450 * A * V) / (2500 * W)

A: 450 nm에서의 흡광도 A: absorbance at 450 nm

V(㎖): 메탄올 부피V (ml): methanol volume

W(g): 균주의 건조중량
W (g): Dry weight of the strain

또한, 바다모래를 이용한 마쇄방법은 다음과 같이 수행하였다. 0.2g의 건조균주에 1.0 g/㎖의 바다모래(15-20 mesh)를 가하고, 30분 동안 볼텍스하여 마쇄하는 과정을 5회 반복하여 균주를 파쇄하였다. 이어, 상술한 바와 동일한 방법으로, 카로티노이드의 농도를 산출하였다. 그 결과, 상기 두 가지 방법으로 추출한 카로티노이드의 량은 평균 98.4 ± 0.8 ㎍/g 건조중량 의 수율을 보여, 유의적 차이를 나타내지 않음을 확인하였다.
Also, the method of crushing with sea sand was carried out as follows. 0.2 g of the dried strain was added with 1.0 g / ml of sea sand (15-20 mesh), vortexed for 30 minutes, and then crushed, and the strain was disrupted five times. Then, the concentration of carotenoid was calculated in the same manner as described above. As a result, it was confirmed that the carotenoids extracted by the above two methods showed an average yield of 98.4 ± 0.8 ㎍ / g dry weight, showing no significant difference.

실시예Example 2-3: 화학적 파쇄 추출법 2-3: Chemical Fragmentation Extraction Method

먼저, 상기 실시예 1에서 분리동정된 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주 0.2g의 건조균주에 2 ㎖의 DMSO를 가하고 50℃를 유지한 다음, 10분 동안 격렬히 교반하여 세포를 파쇄하였다. 이어, 실시예 2-2의 방법으로 상기 파쇄된 균주로부터 카로티노이드를 회수한 결과, 가장 높은 농도(평균 253.9 ± 0.7 ㎍/g 건조중량)의 카로티노이드를 수득하였다.First, 2 ml of DMSO was added to a dry strain of Rhodotorula mucilaginosa AY-01 strain isolated in Example 1 (0.2 g), the temperature was maintained at 50 ° C, and the mixture was vigorously stirred for 10 minutes to disrupt the cells. Then, the carotenoid was recovered from the crushed strain by the method of Example 2-2 to obtain a carotenoid having the highest concentration (average 253.9 占 0.7 占 퐂 / g dry weight).

그러나, 상기 DMSO를 처리하여 수득한 카로티노이드는 항산화활성을 전혀 나타내지 않아서, 상기 방법을 카로티노이드의 추출시에 사용할 수 없음을 확인하였다.
However, it was confirmed that the carotenoid obtained by treating the DMSO showed no antioxidative activity, so that the method could not be used in the extraction of carotenoids.

다음으로, 상기 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주에 염산 또는 초산을 처리하여 균주를 파쇄하고, 실시예 2-2의 방법으로 상기 파쇄된 균주로부터 카로티노이드를 회수한 결과, 낮은 농도의 카로티노이드를 수득하였다. 그 결과, 산 처리 방법으로 추출한 카로티노이드의 량은 평균 34.7 ± 0.2 ㎍/g 건조중량의 수율을 나타냄을 확인하였다.
Next, the Rhodotorula mucilaginosa strain AY-01 was treated with hydrochloric acid or acetic acid to disrupt the strain, and the carotenoid was recovered from the crushed strain by the method of Example 2-2. As a result, a low concentration of carotenoid was obtained Respectively. As a result, it was confirmed that the amount of carotenoid extracted by the acid treatment method showed an average yield of 34.7 ± 0.2 μg / g dry weight.

실시예Example 2-4:  2-4: 효소적Enzymatic 파쇄 추출법 Crushing extraction method

상기 실시예 1에서 분리동정된 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주의 0.1g의 건조균주에 1.0 U/㎖의 β-1,3 glucanase를 포함하는 소듐아세테이트 완충액(50 mM, pH 5.5)을 가하고, 이를 교반하면서(150 rpm), 50℃에서 1시간 동안 반응시켰다. 상기 반응이 종료된 후, 상기 반응물을 원심분리(13,000 rpm 및 10분)하여 침전물을 수득하고, 상기 침전물을 증류수로 세척하여 상기 효소를 제거하였다. 상기 세척된 침전물을 실시예 2-2의 방법에 적용하여 카로티노이드를 회수하고, 이의 농도를 측정하였다. 그 결과, 실시예 2-1의 방법으로 추출한 것과 유의한 차이를 나타내지 않았다.
Sodium acetate buffer (50 mM, pH 5.5) containing 1.0 U / ml of? -1,3 glucanase was added to 0.1 g of the dried strain of Rhodotorula mucilaginosa strain AY-01 identified in Example 1, , And the mixture was reacted at 50 DEG C for 1 hour while stirring (150 rpm). After completion of the reaction, the reaction product was centrifuged (13,000 rpm and 10 minutes) to obtain a precipitate, and the precipitate was washed with distilled water to remove the enzyme. The washed precipitate was applied to the method of Example 2-2 to recover the carotenoid and its concentration was measured. As a result, there was no significant difference from that obtained by the method of Example 2-1.

한편, 실시예 2-2의 기계적인 파쇄를 수행한 다음, 이로부터 얻어진 세포파쇄물을 대상으로 상술한 효소적 파쇄를 수행한 결과, 카로티노이드의 추출수율에 별다른 차이를 나타내지 않음을 확인하였다.
On the other hand, after performing the mechanical pulverization of Example 2-2, the cell lysate obtained therefrom was subjected to the enzymatic shredding as described above. As a result, it was confirmed that the extraction yield of carotenoid did not show any significant difference.

상기 실시예 2-1 내지 2-4의 결과를 종합하면, 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주로부터 카로티노이드를 추출하는 최적 방법은 상기 균주를 파쇄하지 않고 메탄올로 추출하는 방법임을 알 수 있었다.
Taken together, the results of Examples 2-1 to 2-4 show that an optimal method for extracting carotenoid from Rhodotorula mucilaginosa strain AY-01 is a method of extracting the strain with methanol without breaking it.

상기 효소적 파쇄 추출법 또는 기계적/효소적 조합방법으로 수득한 카로티노이드의 평균 농도는 건중 중량 당 각각 122.3 ± 0.6 ㎍/g 과 106.2 ± 0.5 ㎍/g 임을 확인하였다.
The average concentration of carotenoids obtained by the enzymatic shredding extraction method or the mechanical / enzymatic combination method was 122.3 ± 0.6 μg / g and 106.2 ± 0.5 μg / g, respectively, per the dry weight.

실시예Example 3: 카로티노이드 화합물의 화학적 구조 분석 3: Chemical structure analysis of carotenoid compounds

먼저, 상기 실시예 2-1의 방법으로 수득한 카로티노이드 추출물을 대상으로 FT-IR 분석을 수행하여, 상기 카로티노이드 화합물의 화학적 구조를 분석하고자 하였다(도 5).First, FT-IR analysis was performed on the carotenoid extract obtained by the method of Example 2-1 to analyze the chemical structure of the carotenoid compound (FIG. 5).

도 5는 카로티노이드 추출물을 대상으로 FT-IR 분석을 수행한 결과를 나타내는 FT-IR 스펙트럼이다. 도 5에서 보듯이, FT-IR 스펙트럼의 주요 피크로서 C-H 영역(2938.98), C=C 영역(1654.62), 링구조의 C-C 영역(1419.35), 링과 C-H 밴드에서의 C-C 영역(1450.21), C-O 영역(1114.65), C-O 영역(1022.09) 및 C-H 밴드(651.82)가 확인되었다. 또한, 아노머 글루코스에 민감한 800-950/cm과 β-아모너 글루코스의 899/cm 영역에서는 어떠한 피크도 확인되지 않았다.
FIG. 5 is an FT-IR spectrum showing the results of performing FT-IR analysis on carotenoid extract. FIG. As shown in FIG. 5, as main peaks of the FT-IR spectrum, the CH region 2938.98, the C = C region 1654.62, the CC region 1419.35 of the ring structure, the CC region 1450.21 in the ring and CH bands, Region 1114.65, CO region 1022.09, and CH band 651.82 were identified. Further, no peak was observed in the 800-950 / cm region sensitive to anomeric glucose and 899 / cm region of? -Ammonar glucose.

다음으로, TLC 분석을 수행하여 상기 카로티노이드 추출물에 포함된 기능그룹을 분석하고자 하였다.Next, TLC analysis was performed to analyze the functional groups contained in the carotenoid extract.

구체적으로, 상기 실시예 2-1의 방법으로 수득한 카로티노이드 추출물 10㎕를 TLC 분석용 플레이트(silica gel size: 0.063~0.2 mm, Merck, Germany)에 적용하고, TLC 이동상으로는 에틸아세테이트:프로판올:암모니아:물이 1:6:1:3(v/v/v/v)으로 혼합된 혼합용매를 사용하여, 이동상을 전개시킨 다음, 상기 플레이트를 뜨거운 공기로 건조시키고, UV(365 nm)를 조사하거나 또는, 상기 플레이트를 당 검출액(8% 인산 및 3% 황산구리 수용액)에 침지하고, 스팟이 나타날 때까지 200℃ 이상의 온도로 가열하였다(도 6).Specifically, 10 μl of the carotenoid extract obtained by the method of Example 2-1 was applied to a TLC analysis plate (silica gel size: 0.063-0.2 mm, Merck, Germany), and the TLC mobile phase was eluted with ethyl acetate: The mobile phase was developed using a mixed solvent in which water was mixed at a ratio of 1: 6: 1: 3 (v / v / v / v), and then the plate was dried with hot air and irradiated with UV (365 nm) Alternatively, the plate was immersed in a sugar detection solution (8% phosphoric acid and 3% aqueous solution of copper sulfate) and heated to a temperature of 200 ° C or higher until a spot appeared (FIG. 6).

도 6은 본 발명에서 제공하는 카로티노이드 추출물을 대상으로 TLC 분석을 수행한 결과를 나타내는 사진으로서, A는 UV(365 nm)를 조사하여 얻어진 결과를 나타내는 사진이고, B는 당 검출액에 침지하여 얻어진 결과를 나타내는 사진이다. 도 6에서 보듯이, 본 발명에서 제공하는 카로티노이드 추출물은 배당체성 카로티노이드임을 확인하였다.
FIG. 6 is a photograph showing the result of performing TLC analysis on the carotenoid extract provided in the present invention, wherein A is a photograph showing the result obtained by irradiating with UV (365 nm), and B is a photograph obtained by immersing in a sugar detection solution This is a photograph showing the result. As shown in FIG. 6, the carotenoid extract provided in the present invention was found to be a glycoside carotenoid.

따라서, 상기 카로티노이드는 글루코스와 다른 단당류를 포함하는 안토시아닌과 유사한 화학적 구조를 갖는 것으로 분석되었다.
Therefore, the carotenoid was analyzed to have a chemical structure similar to that of anthocyanins including glucose and other monosaccharides.

실시예Example 4: 카로티노이드 추출물의 항산화 활성 4: Antioxidant activity of carotenoid extract

상기 실시예 2-1의 방법으로 수득한 카로티노이드 추출물을 대상으로 항산화 활성을 측정하였다. 이때, 항산화 활성은 공지된 DPPH 라디칼 흡수활성 측정법, FRAP 분석법 및 ABTS 분석법을 이용하여 각각 개별적으로 측정하였다(표 1).
The antioxidant activity of the carotenoid extract obtained by the method of Example 2-1 was measured. At this time, the antioxidant activity was individually measured using known DPPH radical absorption activity assay, FRAP assay, and ABTS assay (Table 1).

먼저, DPPH(α,α-diphenyl-β-picrylhydrazyl) 라디칼 흡수활성 측정법은 20 ㎕의 카로티노이드 시료를 180 ㎕의 DPPH 용액에 가하고, 실온의 암소에서 20분 동안 반응시키고, 반응물 100 ㎕의 520 nm에서의 흡광도를 측정하여 확인하는 방식으로 수행하였다. 이때, 아스코르브산(6 mg/㎖)을 양성 대조군으로 사용하였다.
First, DPPH (α, α-diphenyl-β-picrylhydrazyl) radical scavenging activity was measured by adding 20 μl of carotenoid sample to 180 μl of DPPH solution, reacting at room temperature for 20 minutes, Was measured and confirmed. At this time, ascorbic acid (6 mg / ml) was used as a positive control.

다음으로, FRAP(fluorescence recovery after photobleaching) 분석은 0.3 M 아세테이트 완충액(pH 3.6)에 용해된 40 mM TPTZ(2,4,6-Tris (2-pyridyl)-s-triazine) 및 20 mM 염화제이철로 구성된 FRAP 제제를 준비하고, 상기 준비된 FRAP 제제 180 ㎕와 20 ㎕의 카로티노이드 시료를 혼합하였으며, 37℃에서 5분 동안 반응시킨 다음, 반응물 100㎕의 593 nm에서의 흡광도를 측정하여 확인하는 방식으로 수행하였다. 이때, 아스코르브산(6 mg/㎖)을 양성 대조군으로 사용하였다.
Next, the fluorescence recovery after photobleaching (FRAP) analysis was performed using 40 mM TPTZ (2,4,6-Tris (2-pyridyl) -s-triazine) and 20 mM ferric chloride dissolved in 0.3 M acetate buffer 180 占 퐇 of the prepared FRAP preparation and 20 占 퐇 of carotenoid sample were mixed and reacted at 37 占 폚 for 5 minutes and then the absorbance at 593 nm of 100 占 퐇 of the reactant was measured and confirmed Respectively. At this time, ascorbic acid (6 mg / ml) was used as a positive control.

끝으로, ABTS(2,2'-azobis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)) 분석은 7 mM ABTS 및 7.35 mM 과황화칼륨을 2:1(v/v)로 혼합한 반응액에 카로티노이드 시료를 혼합하고, 실온의 암소에서 6분 동안 반응시킨 다음, 반응물의 630 nm에서의 흡광도를 측정하여 확인하고, 베타-카로틴에 대한 상대적 활성으로 환산한 다음, 이를 비교하였다(표 2). 이때, 아스코르브산(6 mg/㎖)을 양성 대조군으로 사용하였다.
Finally, ABTS (2,2'-azobis- (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)) analysis was performed by adding 7 mM ABTS and 7.35 mM potassium sulfide in 2: 1 (v / v) Samples were mixed and reacted for 6 minutes at room temperature in a dark place. The absorbance at 630 nm of the reactants was then measured and converted to the relative activity against beta-carotene and compared (Table 2). At this time, ascorbic acid (6 mg / ml) was used as a positive control.

카로티노이드 추출물의 항산화 활성Antioxidative activity of carotenoid extract 측정방법How to measure 항산화 활성(%)Antioxidant activity (%) DPPH
FRAP
ABTSDPPH
FRAP
ABTS 1533.5
5871.9
32137.61533.5
5871.9
32137.6

상기 표 2에서 보듯이, 상기 3가지 방법으로 카로티노이드 추출물의 항산화 활성을 측정한 결과, 모두 양성대조군인 아스코르브산 보다도 15배 내지 321배의 항산화 활성을 나타냄을 확인하였다.As shown in Table 2, the antioxidative activity of the carotenoid extract was measured by the above-mentioned three methods, and it was confirmed that the antioxidative activity of carotenoid extract was 15 to 321 times higher than that of ascorbic acid, which is a positive control.

따라서, 본 발명에서 제공하는 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주의 카로티노이드 분획은 항산화제제로서 사용할 수 있음을 알 수 있었다.
Therefore, it was found that the carotenoid fraction of Rhodotorula Mucilaginosa strain AY-01 provided in the present invention can be used as an antioxidant agent.

실시예Example 5: 카로티노이드 추출물의 항균 활성 5: Antibacterial activity of carotenoid extract

돼지 정장액으로부터 분리된 2종의 균주인 PWG 및 F1 균주를 LB 배지에 접종하고 37℃에서 12시간 동안 배양하여 배양물을 수득하였다. 이어, 상기 실시예 2-1의 방법으로 수득한 카로티노이드 추출물, 메탄올, 에리트로마이신 또는 앰피실린을 포함하는 3.0 ㎖의 LB 배지에 상기 배양물 30 ㎕를 혼합하고, 37℃에서 24시간 동안 배양한 다음, 상기 각 균주의 성장 수준을 비교하였다(도 7).Two strains of PWG and F1 strains isolated from pig sucking liquid were inoculated into LB medium and cultured at 37 DEG C for 12 hours to obtain a culture. Next, 30 μl of the culture was mixed with 3.0 ml of LB medium containing carotenoid extract, methanol, erythromycin or amphicillin obtained by the method of Example 2-1, and cultured at 37 ° C. for 24 hours , And the growth levels of the above strains were compared (Fig. 7).

도 7은 본 발명에서 제공하는 카로티노이드 추출물이 돼지 정장액으로부터 분리된 2종의 균주인 PWG 및 F1 균주의 증식에 미치는 효과를 나타내는 사진으로서, 1번은 카로티노이드 추출물을 처리한 실험군이고, 2번은 메탄올을 처리한 실험군이며, 3번은 에리트로마이신을 처리한 실험군이고, 4번은 앰피실린을 처리한 실험군을 나타낸다. 도 7에서 보듯이, 상기 PWG 및 F1 균주는 에리트로마이신에 대하여는 내성을 나타내지 않지만, 앰피실린에 대하여는 내성을 나타내는 항생제 내성균임을 확인하였다. 또한, 상기 앰피실린에 대하여 내성을 나타내는 항생제 내성균인 PWG 및 F1 균주에 본 발명에서 제공하는 카로티노이드 추출물을 처리하면, 상기 PWG 및 F1 균주의 증식을 억제할 수 있음을 확인하였다.
FIG. 7 is a photograph showing the effect of the carotenoid extract provided by the present invention on the proliferation of two strains PWG and F1 isolated from pig sucking liquid, wherein No. 1 is an experimental group treated with carotenoid extract and No. 2 is methanol Experimental group treated with erythromycin 3, Experimental group 4 treated with ampicillin. As shown in FIG. 7, the PWG and F1 strains did not show resistance to erythromycin, but were resistant to ampicillin as antibiotic resistant bacteria. Further, it was confirmed that the proliferation of the PWG and F1 strains could be inhibited by treating the carotenoid extracts provided in the present invention with the antibiotic resistant bacteria, PWG and F1, resistant to ampicillin.

따라서, 본 발명에서 제공하는 카로티노이드 추출물은 항생제 내성균에 대하여 항균활성을 나타냄을 알 수 있었다.
Therefore, the carotenoid extract provided in the present invention showed antibacterial activity against the antibiotic resistant bacteria.

한국생명공학연구원 생물자원센터Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology KCTC12809BPKCTC12809BP 2015050620150506

Claims (18)

KCTC 12809BP의 기탁번호를 갖는 로도토룰라 무실라지노사 AY-01(Rhodotorula mucilaginosa AY-01) 균주.
 Rhodotorula mucilaginosa AY-01 strain with a deposit number of KCTC 12809BP.
제1항의 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주 또는 상기 균주의 배양물을 포함하는 카로티노이드 제조용 조성물.
A composition for the production of carotenoids comprising the roots of the roots of the present invention, said strains being AY-01 strain or a culture of said strains.
제1항의 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주를 배양하고, 상기 균주로부터 카로티노이드 화합물을 회수하는 단계를 포함하는, 카로티노이드 화합물의 제조방법.
A method for producing a carotenoid compound, comprising culturing a roasted Torula mucilaginosa strain AY-01 of claim 1, and recovering a carotenoid compound from the strain.
제3항에 있어서,
상기 배양은 YPD(yeast extract peptone dextrose) 배지를 사용하여 수행되는 것인 방법.
The method of claim 3,
Wherein the culture is performed using yeast extract peptone dextrose (YPD) medium.
제3항에 있어서,
상기 카로티노이드 화합물의 회수는 균주를 메탄올로 추출하여 수행되는 것인 방법.
The method of claim 3,
Wherein the recovery of the carotenoid compound is carried out by extracting the strain with methanol.
제1항의 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주 또는 상기 균주의 배양물을 포함하는 키틴분해효소 제조용 조성물.
A composition for the production of chitinolytic enzyme according to claim 1, comprising a strain of Toro la Mucilagonia AY-01 or a culture of said strain.
제1항의 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주를 배양하고, 상기 균주로부터 키틴분해효소를 회수하는 단계를 포함하는, 키틴분해효소의 제조방법.
A method for producing a chitinolytic enzyme, comprising culturing the roasted Torula mucilaginosa strain AY-01 of claim 1, and recovering the chitinolytic enzyme from the strain.
제7항에 있어서,
상기 배양은 YPD 배지를 사용하여 수행되는 것인 방법.
8. The method of claim 7,
Wherein the culture is performed using YPD medium.
제7항에 있어서,
상기 카로티노이드 화합물의 회수는 균주를 메탄올로 추출하여 수행되는 것인 방법.
8. The method of claim 7,
Wherein the recovery of the carotenoid compound is carried out by extracting the strain with methanol.
제1항의 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주로부터 수득한 카로티노이드 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 항산화용 조성물.
A composition for antioxidation comprising the carotenoid extract or fraction thereof obtained from the Rhodotorula mucilaginosa strain AY-01 of claim 1.
제10항에 있어서,
상기 추출물은 상기 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주를 에틸아세테이트, 물, 탄소수 1 내지 6의 알콜 또는 이들의 혼합 용매를 사용하여 추출하여 수득한 것인 조성물.
11. The method of claim 10,
Wherein the extract is obtained by extracting the Rhodotorula mucilaginosa strain AY-01 with ethyl acetate, water, an alcohol having 1 to 6 carbon atoms, or a mixed solvent thereof.
제10항에 있어서,
상기 추출물은 상기 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주 또는 그의 파쇄물을 메탄올로 추출하여 수득한 추출물인 것인 조성물.
11. The method of claim 10,
Wherein the extract is an extract obtained by extracting the Rhodotorula mucilaginosa strain AY-01 or a lysate thereof with methanol.
제1항의 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주로부터 수득한 카로티노이드 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 항산화용 화장료 조성물.
A cosmetic composition for antioxidation comprising the carotenoid extract or fraction thereof obtained from the Rhodotorula mucilaginosa strain AY-01 of claim 1.
제1항의 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주로부터 수득한 카로티노이드 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 항균용 조성물.
An antimicrobial composition comprising the carotenoid extract or fraction thereof obtained from the Rhodotorula mucilaginosa strain AY-01 of claim 1.
제14항에 있어서,
상기 추출물 또는 그의 분획물은 항생제 내성균에 대하여 항균활성을 나타내는 것인 조성물.
15. The method of claim 14,
Wherein said extract or fraction thereof exhibits an antimicrobial activity against antibiotic resistant bacteria.
제15항에 있어서,
상기 항생제 내성균은 돼지의 정장액으로부터 유래된 앰피실린 내성균주인 것인 조성물.
16. The method of claim 15,
Wherein the antibiotic-resistant microorganism is an ampicillin-resistant microorganism strain derived from a formalin solution of a pig.
제1항의 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주로부터 수득한 카로티노이드 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 항산화 또는 항균용 약학조성물.
A pharmaceutical composition for antioxidant or antimicrobial use comprising the carotenoid extract or fraction thereof obtained from the Rhodotorula mucilaginosa strain AY-01 of claim 1.
제1항의 로도토룰라 무실라지노사 AY-01 균주로부터 수득한 카로티노이드 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 항산화 또는 항균용 식품조성물.
An antioxidant or antimicrobial food composition comprising the carotenoid extract or fraction thereof obtained from the Rhodotorula mucilaginosa strain AY-01 of claim 1.
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