KR20160111953A - 약물 전달 시스템 - Google Patents

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KR20160111953A
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val
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KR1020167022391A
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데이빗 쉬마
오웬 앤더슨
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유씨엘 비즈니스 피엘씨
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Abstract

본 발명은 아미노산 서열 B1-X3-10-B2를 가진 적어도 하나의 모티프를 포함하는 펩타이드, 상기와 동일한 펩타이드 및 치료제 또는 진단제를 포함하는 콜라겐 또는 히알루론산 컨쥬게이트 및 이것들의 조성물 및 용도에 관한 것이며, 상기 B1 및 B2는 동일하거나 다르고 각각은 염기성 아미노산이며, 상기 X3- 10는 3 내지 10개의 동일하거나 다른 비-산성 아미노산의 서열이고, 상기 펩타이드의 N-말단은 D-아미노산 및 보호기 중 하나 이상을 포함한다. 본 발명은 또한 인구 질환 또는 안구병태의 치료 또는 예방에 사용되는, 아미노산 서열 B1-X3-10-B2를 가진 적어도 하나의 모티프를 포함하는 펩타이드에 관한 것이며, 상기 식에서 B1 및 B2는 동일하거나 다르고 각각은 염기성 아미노산이며, X3- 10는 3 내지 10개의 동일하거나 다른 비-산성 아미노산의 서열이다. 게다가, 본 발명은 히알루론산 결합 물질의 검출 방법에 관한 것이며, 상기 방법은 히알루론산의 샘플을 제공하는 단계, 상기 히알루론산의 샘플을 테스트 물질과 접촉시키는 단계, 및 상기 테스트 물질 및 상기 히알루론산 사이에서 결합의 존재를 검출하는 단계를 포함한다.

Description

약물 전달 시스템{DRUG DELIVERY SYSTEM}
본 발명은 약물 전달 시스템에 관한 것이다. 독점적인 것은 아니지만, 특히, 본 발명은 디포(depot) 약물 전달 시스템으로서 콜라겐 및/또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트와 관련된다.
유리체(vitreous)로의 직접적인 주사를 통한 눈으로의 약물 전달은 많은 허약성 안구병태, 예를 들어, 나이-관련 황반 변성(age-related macular degeneration; AMD), 당뇨병성 망막증(diabetic retinopathy), 망막 정맥 폐색(retinal vein occlusion), 포도막염(uveitis), 및 녹내장(glaucoma)의 관리를 혁신하였다. 주요 혁신은, 예를 들어, 혈관 내피 성장 인자(VEGF) 억제제의 개발과 함께 이루어졌다. 이 약물들은 보통 유리체 내 주사를 통해 투여되는데, 이는 다른 전달 방식을 통해서는 불량하게 흡수되기 때문이다. 하지만, 이 투여는 종종 여러 번 반복될 필요가 있는데, 이는 VEGF 억제제를 필요로 하는 질환이 종종 사실상 만성적이기 때문이다. 그럼에도 불구하고, VEGF 억제제는, 이전에 적어도 부분적으로 눈이 먼 경우에, 시력을 보존하거나 심지어 개선할 수 있다.
안구병태를 치료하기 위한 차세대 약물의 개발에 큰 관심이 있다. 하지만, 이러한 병태를 치료하기 위한 약물 이용의 중요한 한계점은 눈에서의 그것들의 반감기인데, 이는 그것들이 클리어런스(clearance)를 위해, 유리체에서, 망막을 통해 맥락막 공간으로 신속하게 확산되기 때문이다. 큰 치료제, 예를 들어, 항체는 유리체에서 2-4일의 반감기를 가지며, 최대 치료 효율을 제공하기 위해 매년 9-12 주사로 변환된다. 많은 개발 중인 더 작은 분자의 경우, 유리체에서의 체류 시간은 한 시간 정도이다.
빈번한 유리체 내 주사는 비싸며, 환자 및 의료인에게 많은 시간을 요구한다. 그것들은 또한 주사-관련 합병증, 예를 들어, 감염 또는 망막 박리의 작지만 심각한 위험을 야기하며, 환자의 시력을 위협할 수 있다. 또한, 반복된 주사로 누적되는 위험이 증가하게 된다.
따라서, 유리체 내로 투여된 약물의 작용을 연장하는 방법에 대한 관심이 증가하였다. 이러한 방법은 주사의 빈도 (및 그 이후 합병증의 빈도)를 감소시킬 뿐만 아니라 의료 서비스 제공의 부담을 감소시키는 역할을 할 것이다. 이 방법은 또한 망막에 약물의 고농도 노출을 감소시키는 것을 돕는데, 이는 VEGF 길항제가, 예를 들어, 상기와 같은 상황에서 망막 신경 손실을 악화시키는 것으로 나타났기 때문이다.
조사 중인 많은 방법이 있다(Anderson et al. Delivery of anti- angiogenic molecular therapies for retinal disease. Drug Discov Today. 2010 Apr; 15(7-8): 272-282). 이 방법들은 매트릭스 또는 임플란트(implant)의 활성제를 격리시키는 것을 포함하는데, 이는 상기 활성제의 유리체로의 약물의 방출을 늦추기 위함이다. 이것들은 생분해성 또는 비-생분해성일 수 있다. 임플란트는 유리체로 직접 주사되거나 수술에 의해 유리체로 이식될 수 있다(Haller et al. Randomized, sham-controlled trial of dexamethasone intravitreal implant in patients with macular edema due to retinal vein occlusion. Ophthalmology 2010; 117(6): 1134 -1146, 및 Pavesio et al. Evaluation of an intravitreal fluocinolone acetonide implant versus standard systemic therapy in noninfectious posterior uveitis. Ophthalmology 2010; 117(3): 567 -575). 개발 중인 또 다른 기술은 바이러스 유전자 트랜스펙션을 통한 약학적 활성 분자의 내생적 생산이다(Bainbridge et al. Effect of gene therapy on visual function in Leber's congenital amaurosis. N. Engl . J. Med . 2008; 358: 2231 -2239). 하지만, 치료제의 약학적으로 적절한 수준이 달성될 수 있도록 유전자 발현의 제어가 추후 필요하다.
스테로이드제의 유리체 내 전달은 레저버(reservoir) 디포 디바이스를 사용하여 달성되거나, 수술에 의해 이식되거나(예를 들어, Retisert™, Bausch & Lomb, Inc.) 또는 주사될 수 있는 것으로(예를 들어, Iluvien™, Alimera Sciences/pSivida, Inc.) 밝혀졌다. 하지만, 특이적 주사 디바이스 또는 수술 과정은 이러한 약제를 눈으로 전달할 필요가 있다. 게다가, 이 약제들(Retisert™ 및 Iluvien™)은 비-생분해성이고, 비-치료적 구성요소가 장기간 동안 눈에 남아있다. 더욱이, 이 약제들에 이용된 디바이스들은 페이로드(payload)와 관련하여 제한되므로, 그것들의 사용은 매우 강력한 분자들, 예를 들어, 스테로이드에 한정된다. 생분해성 입자, 예를 들어, 폴리 락틱-코-글리콜산(PLGA) 미소구체가 개발 중이지만, 현재는 페이로드와 관련된 문제점, 그것들의 제조에 사용된 유기 용매로 인한 부적합성, 및 환자들의 시력 저하로 어려움에 봉착해 있다.
약물의 약물동력학적 성질에 영향을 미치기 위한 결합 분자의 사용이 안과학 분야에서 조사되었다. 이것의 한 예는 특정 표적, 예를 들어, 알부민에 결합하도록 디자인된 펩타이드의 사용이다. 알부민은 비교적 큰 분자이고, 신장 사구체를 통해 여과되지 않으므로, 혈액 순환에서 유지된다. 알부민 결합 펩타이드에 컨쥬게이션된 약물은, 비-컨쥬게이션된 약물과 비교하여, 더 긴 기간동안 순환에서 유지된다. 따라서, 그것들은 덜 빈번하게 투여될 수 있다.
히알루론산에 대하여 효과적인 결합 친화도를 나타내는 것으로 확인된, 하나의 결합 모이어티는 HABP35이며, 이는 마우스 RHAMM 수용체(히알루로난-매개된 운동성에 대한 수용체)로부터 유래된 짧은 펩타이드이다. 이 펩타이드는 히알루론산(HA) 결합 도메인 I 서열에 이은 마우스 HA 결합 도메인 II 서열로 구성되고, 그것의 서열은 공개적으로 이용 가능한 공급원으로부터 결정되었다. RHAMM 수용체는 이전에 종양학, 면역학 및 혈관 형성(angiogenesis)의 분야에서 연구되는 한편, HABP35는 특이적으로 상처 감염에 대한 그것의 효과로 인해 연구되었다(Zaleski et al. Hyaluronic acid binding peptides prevent experimental staphylococcal wound infection. Antimicrob Agents Chemother . 2006; 50(11); 3856-3860). 하지만, 이러한 결합 분자는, 약물 전달에 관하여, 안과학, 피부과학 또는 관절학의 분야에서는 조사되지 않았다.
따라서, 본 발명의 구체예에서, 아미노산 서열 B1-X3-10-B2를 가진 적어도 하나의 모티프를 포함하는 단리된 펩타이드가 제공되는데, 상기 식에서 B1 및 B2는 동일하거나 다르고 각각은 염기성 아미노산(예를 들어, 리신 또는 아르기닌)이며, X3-10는 3 내지 10개의 동일하거나 다른 비-산성 아미노산의 서열이고, 상기 펩타이드의 N-말단은 D-아미노산을 포함하고 및/또는 보호 기를 포함한다. 바람직하게는, 펩타이드는 두 개 또는 세 개, 더 바람직하게는 네 개의 모티프 B1-X3-10-B2를 갖는다. 이러한 모티프는 근접한, 순차적인 또는 중첩되는 방식으로 배열될 수 있다. 바람직하게는, 이러한 모티프들은 중첩된다. 게다가, 바람직한 모티프는 구조 B1-X5-10-B2 또는 B1-X6-8-B2, 또는 B1-X6-B2, B1-X7-B2, 또는 B1-X8-B2, 가장 바람직하게는 B1-X7-B2를 갖는다(즉, B1 및 B2는 7개의 동일하거나 다른 비-산성 아미노산의 서열로 구분된다).
바람직한 구체예에서, 상기 펩타이드는 서열 번호 1, 또는 이것의 기능적 일부/단편에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 서열을 갖는다.
서열 번호 1에 따르는 상기 아미노산 서열(HABP35로도 공지되어 있음)은 마우스 히알루로난 매개된 운동성에 대한 수용체(RHAMM)에 관한 것이며, 이것은 마우스 RHAMM 히알루론산 결합 도메인 I 서열에 이은 마우스 RHAMM 히알루론산 결합 도메인 II를 포함하고, 링커(즉, VVV)로 구분된다. 서열 번호 1의 특이적 아미노산 서열은 LKQKIKHVVKLKVVVKLRSQLVKRKQN이다.
유리체의 두 개의 주요 구성요소가 콜라겐 및 히알루론산이기 때문에, 본 발명은 콜라겐 및/또는 히알루론산에 결합하는 능력을 갖고, 이로 인해 활성 치료제 또는 진단제가 가역적으로 부착될 수 있는 고정 기질의 역할을 하는 결합 컨쥬게이트를 제공한다. 이에 더하여, 콜라겐 및 히알루론산이 또한 결합 조직, 상피 조직 및 신경 조직의 풍부한 구성요소인 것을 고려하면, 이러한 결합 컨쥬게이트는 관절학적 및 피부과학적 병태, 뿐만아니라 안구병태의 치료에서 상당한 효과를 갖는다.
예를 들어, 약물, 예를 들어, VEGF 억제제, 항체 또는 새로운 표적화된 작은 분자를 유리체의 구성성분, 주로 콜라겐 및/또는 히알루론산에 결합하는 컨쥬게이트에 결합시킴으로써, 유리체로부터의 약물의 클리어런스(clearance) 속도가 감소하고, 이로 인해 더 긴 기간동안 방출된다. 눈에서의 약물 반감기의 증가는 망막으로의 연장된 약물 전달을 의미한다. 이것은 재정적 보상(주사를 위한 병원 방문의 횟수 감소) 및 환자 안전성 보상(감소된 주사 횟수는 주사 관련된 합병증의 위험을 감소시킴)을 제공한다. 현재는 임상 시험 실행에서 VEGF 억제제(예를 들어, 라니비쥬맙(ranibizumab), 페갑타닙(pegaptanib), 베바시쥬맙(bevacizumab), 및 아플리버셉트(aflibercept))의 전달을 위한 디포 전달 디바이스가 없다.
놀랍게도, 아미노산의 이 서열들이 펩타이드에 콜라겐 및/또는 히알루론산의 화학적 구조, 예를 들어, 섬유 조직, 결합 조직, 상피 조직, 및 신경 조직, 뿐만 아니라 눈의 유리체에 대한 가역적 친화도를 제공한다는 것이 발견되었다. 이에 더하여, 상기 N-말단에서의 D-아미노산의 존재 및/또는 보호기의 포함은 잠재적으로 상기 펩타이드에게, 예를 들어, 생체 내에서 효소에 의한 분해에 대하여 개선된 안정성을 제공할 수 있다.
본 발명의 또 다른 구체예에서, 상기 아미노산 서열 B1-X3-10-B2를 가진 적어도 하나의 모티프를 포함하는 펩타이드를 포함하는 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트가 제공되며, 상기 B1 및 B2는 동일하거나 다르고 각각은 염기성 아미노산이며 X3- 10는 3 내지 10개의 동일하거나 다른 비-산성 아미노산의 서열이고, 상기 펩타이드의 N-말단은 D-아미노산을 포함하고 및/또는 보호기를 포함하며, 치료제 또는 진단제를 포함하며, 상기 치료제 또는 진단제는 선택적으로 링커에 의해 상기 펩타이드에 결합된다. 상기 컨쥬게이트의 결합 작용은 상기 치료제 또는 진단제의 제거 속도(및 따라서 배출 속도)를 크게 늦춘다는 것이 발견되었다. 한 양태에서, 상기 컨쥬게이트는 디포 약물 전달 시스템의 역할을 한다.
바람직하게는, 상기 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트는 서열 번호 1, 또는 이것의 기능적 일부 또는 단편에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 서열을 가진 펩타이드, 및 치료제 또는 진단제를 포함하며, 상기 치료제 또는 진단제는 선택적으로 링커에 의해 상기 펩타이드에 결합된다.
본 발명에 따르는 상기 보호기는 상기 N-말단 아미노산의 α-아미노 기의 보호를 수행한다. 적합한 보호기는 아세틸, 벤조일, 벤질, 삼차-부톡시카르보닐, 카보벤질옥시, p-메톡시벤질 카르보닐, p-메톡시벤질, 9-플루오레닐메틸옥시카르보닐, 3,4-디메톡시벤질, p-메톡시페닐, 토실, 및 노실로 구성된 군으로부터 선택된 것들을 포함한다. 바람직하게는, 상기 보호기는 아세틸, 벤조일, 벤질, 삼차-부톡시카르보닐, 카보벤질옥시, p-메톡시베닐 카르보닐, p-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 또는 p-메톡시페닐이다. 가장 바람직하게는, 상기 보호기는 아세틸이다.
본 명세서에서 사용된, 용어 "콜라겐"은 인간 및 동물, 특히 살 조직 및 결합 조직에서 발견된 자연 발생한 단백질의 군을 말한다. 이것은 연장된 피브릴의 형태로, 섬유 조직, 예를 들어, 힘줄, 인대 및 피부에서 주로 발견되고, 각막, 연골, 뼈, 혈관, 내장, 및 추간판에서 또한 풍부하다.
용어 "히알루론산(HA)"은 결합 조직, 상피 조직, 및 신경 조직에 걸쳐 널리 분포된 음이온성, 비황산화된 글리코사미노글리칸을 말한다. 이것은 유리체에서도 발견된다. 이것은 세포 외 매트릭스의 주요 구성요소 중 하나이고, 세포의 증식 및 이동에 크게 기여하며, 또한 일부 악성 종양의 진행에 수반될 수 있다. 이 용어는 용어 "히알루로난" 및 "히알루로네이트"와 동의어로 사용될 수 있다. 이것은 d-글루쿠론산 및 d-N-아세틸-글루코사민의 반복 유닛으로 구성된 선형 비-분지형 분자이며, 하기 나타난 바와 같다.
Figure pct00001
용어 "유리체(vitreous)"는 수정체와 인간 및 다른 척추동물의 안구 뒤를 라이닝하는(lining) 망막 사이의 공간을 채우고 있는 투명한, 무색의 겔을 말한다. 이 용어는 용어 "유리체(vitreous humour)" 및 "유리체(vitreous body)"와 동의어로 사용될 수 있다.
용어 "연골"은 인간 또는 동물 신체의 많은 면적에서 발견되는 플렉시블(flexible)한 결합 조직을 말하며, 뼈 사이의 관절, 흉곽, 귀, 코, 기관지 및 추간판을 포함한다. 이 조직은 뼈만큼 단단하고 견고하지는 않지만 근육보다는 더 뻣뻣하고 덜 플렉시블하다. 이것은 콜라겐 섬유, 프로테오글리칸에 많은 풍부한 세포간 물질(ground substance), 및 엘라스틴 섬유로 구성된 대량의 세포 외 매트릭스를 생산하는, 연골 세포로 불리는 특수한 세포로 구성되어 있다. 연골은 세 가지 유형, 탄성 연골(elastic cartilage), 초자 연골(hyaline cartilage), 및 섬유 연골(fibrocartilage)로 분류되며, 이러한 세 가지 주요 구성요소의 상대적인 양이 다르다.
본 발명은 약물 전달 시스템에 관한 것이며, 이것에서 콜라겐 및/또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트는 치료를 위한 특정 부위를 표적화하고 치료제 또는 진단제를 특정 부위에 가역적으로 부착하는데 이용될 수 있다. 이 부착의 결과, 상기 치료제 또는 진단제가 상기 치료 부위로부터 너무 쉽게 제거되지 않고 따라서 그것들의 효과를 발휘할 더 긴 체류 시간을 갖는다.
놀랍게도, 이것은 아미노산 서열 B1-X3-10-B2를 가진 적어도 하나의 모티프를 포함하는 단리된 펩타이드를 사용하여 달성될 수 있다는 것이 발견되었는데, 상기 식에서 B1 및 B2는 동일하거나 다르고 각각은 염기성 아미노산이며 X3- 10는 3 내지 10개의 동일하거나 다른 비-산성 아미노산의 서열이고, 상기 펩타이드의 N-말단은 D-아미노산을 포함하고 및/또는 보호기, 바람직하게는 서열 번호 1, 또는 이것의 기능적 일부 또는 단편에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 단백질 서열을 가진 펩타이드를 포함한다. 하지만, 상기 서열 번호 1의 정확한 서열은 업계에 공지되어 있으며 펩타이드 그 자체로서 청구된 주제의 일부를 형성하는 것은 아니다. 그럼에도 불구하고, 약물 전달 시스템으로서 그것의 유용성은 이전에 특정 상황에서 고려된 적이 없다.
상기 펩타이드의 기능적 단편 및 일부는 모체 펩타이드의 하나 이상의 기능을 유지하는 상기 단편 및 일부를 포함한다. 펩타이드를 암호화하는 cDNA에 대한 유전자는 상기 펩타이드 기능 중 하나 이상을 실질적으로 변경하지 않으면서 상당히 돌연변이될 수 있음이 확인되었다. 첫째, 유전 암호는 변성되는 것으로 잘 알려져있으며, 따라서 다른 코돈이 동일한 아미노산을 암호화한다. 둘째, 아미노산 치환이 도입되는 경우, 상기 돌연변이는 보존적일 수 있고 상기 단백질의 본질적인 기능에 대하여 중요한 영향을 미치지 않을 수 있다. 셋째, 펩타이드 사슬의 일부는 그것의 기능 모두를 손상시키거나 제거하지 않으면서 결실될 수 있다. 넷째, 삽입 또는 결실은, 예를 들어, 그것의 기능을 손상시키거나 제거하지 않으면서 에피토프 태그를 첨가한 펩타이드 사슬에서 이루어질 수 있다. 기능적 단편 및 일부는 또한 기능이 향상된 것들을 포함한다.
상기 펩타이드의 하나 이상의 기능을 실질적으로 손상시키지 않으면서 이루어질 수 있는 다른 변형은, 예를 들어, 생체 내 또는 시험관 내 화학적 및 생화학적 변형을 포함하거나 특이한 아미노산을 포함한다. 이러한 변형은, 예를 들어, 아세틸화, 카복실화, 인산화, 글리코실화, 유비퀴틴화, 방사성 핵종(radionuclide)(예를 들어, 32P)으로의 라벨링(labelling), 및 다양한 효소적 변형을 포함한다.
펩타이드는 이러한 변형의 결과로서 분지될 수 있고, 분지되거나 분지되지 않은 환형일 수 있다. 환형, 분지형 및 분지된 환형 펩타이드는 번역 후 자연적인 과정으로부터 발생할 수 있거나 합성 방법에 의해 만들어질 수 있다.
구체예에서, 상기 펩타이드의 C-말단, 또는 이것의 기능적 단편 또는 일부는 아미드로 전환될 수 있다. 특히, 상기 펩타이드의 기능적 단편 및 일부에 관하여, 이것은 상기 펩타이드의 한 부위에서의 대전된 기의 비자연적인 도입을 방지하여, 모체 펩타이드에서의 같은 부위가 이러한 전하를 갖지 않게 한다. 게다가, 이는 상기 펩타이드가 그것이 선택되는 전체 단백질의 일부인 것으로 인식될 가능성이 클 수 있다는 것을 의미한다. 이에 더하여 또는 대안으로, 상기 C-말단에서의 이러한 작용기의 존재는 엑소펩티다제의 작용에 기인하는 고장에 대하여 더 큰 저항성을 제공할 수 있다.
본 발명의 단백질 상동체는 전형적으로 적어도 60%, 예를 들어, 적어도 70%, 80%, 90%, 95%, 또는 98% 서열 상동성의 소유를 특징으로 하며, NCBI Basic Protein Blast 2.0을 사용하여 아미노산 서열과의 전장 정렬이 다시 계수된다. 바람직하게는, 상기 단리된 펩타이드는 서열 번호 1에 대하여 적어도 80% 상동성, 더 바람직하게는 90% 상동성, 가장 바람직하게는 95% 상동성을 가진 단백질 서열을 갖거나, 또는 이것의 기능적 일부 또는 단편이다. 바람직하게는, 용어 "상동성"은 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 동일한 아미노산 또는 같은 화학적 부류, 예를 들어, 극성, 염기성, 산성, 소수성 아미노산 유형의 아미노산의 존재를 말한다. 상기 아미노산 유형의 특성화는 당업자에게 잘 공지되어 있다.
바람직한 구체예에서, 본 발명의 단백질 상동체는 전형적으로 적어도 60%, 예를 들어, 적어도 70%, 80%, 90%, 95%, 또는 심지어 98% 서열 동일성의 소유를 특징으로 하며, NCBI Basic Protein Blast 2.0을 사용하여 아미노산 서열과의 전장 정렬이 다시 계수된다. 바람직하게는, 상기 단리된 펩타이드는 서열 번호 1에 대하여 적어도 80% 동일성, 더 바람직하게는 90% 동일성, 가장 바람직하게는 95% 동일성을 가진 단백질 서열을 갖거나, 또는 이것의 기능적 일부 또는 단편이다.
서열 번호 1의 기능적 단편 또는 일부에 관하여, 본 발명의 상기 펩타이드는 이러한 단편 또는 일부가 히알루론산에 대하여 서열 번호 1에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 펩타이드의 친화도의 적어도 70% 및/또는 콜라겐에 대하여 서열 번호 1에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 펩타이드의 친화도의 적어도 70%를 소유하면 서열 번호 1로부터 적어도 5개의 인접한 아미노산을 포함할 수 있다. 바람직한 양태에서, 펩타이드는 적어도 6, 7, 8, 또는 9개의 인접한 아미노산, 더 바람직하게는 적어도 10, 11, 또는 12개의 인접한 아미노산을 포함하고, 히알루론산에 대한, 서열 번호 1에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 펩타이드의 친화도의 적어도 70% 및/또는 콜라겐에 대한, 서열 번호 1에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 펩타이드의 친화도의 적어도 70%를 나타낸다. 상기 펩타이드의 기능적 단편 및 일부는 모티프 B1-X3-10-B2를 가진 아미노산의 적어도 하나, 바람직하게는 두 개 또는 세 개의 서열을 함유한다.
상기 펩타이드의 친화도는 히알루론산 및/또는 콜라겐에 대한 그것의 결합 친화도와 관련하여 정의될 수 있고, 이러한 결합 펩타이드의 부재시 유리체 물질(예를 들어, 히알루론산)을 함유하는 미세 평형 투석기의 한 챔버로부터 유리체 물질을 함유하는 또 다른 챔버로의 확산에 의해 평가될 수 있다. 따라서, 시간이 흐름에 따라 초기 챔버에 남아있는 펩타이드의 농도는 유리체에 남아있는 펩타이드의 양을 평가하기 위한 정량적 파라미터를 제공하며, 이 파라미터는 본래 히알루론산에 대한 펩타이드 결합 성질에 의해 지배된다. 상기 서열 번호 1의 펩타이드의 결합 특성을 비교함으로써 상대적인 친화도를 결정한다(예를 들어, 도 3 참조).
본 발명에 따르는 상기 펩타이드, 또는 이것의 기능적 일부 또는 단편의 친화도는 히알루론산에 대한, 서열 번호 1에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 펩타이드의 친화도의 적어도 70% 및/또는 콜라겐에 대한, 서열 번호 1에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 펩타이드의 친화도의 적어도 70%이다. 그럼에도 불구하고, 상기 친화도는 이것보다 더 클 수 있고, 예를 들어, 적어도 75%, 80%, 및 95%의 친화도 수준이 가능하다. 바람직한 구체예에서, 상기 펩타이드의 친화도는 히알루론산에 대한, 서열 번호 1에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 펩타이드의 친화도의 적어도 85% 및/또는 콜라겐에 대한, 서열 번호 1에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 펩타이드의 친화도의 적어도 85%, 더 바람직하게는 적어도 90%, 더 바람직하게는 적어도 95% 또는 97%이다.
언급될 수 있는 서열 번호 1의 특이적 단편 또는 일부는 표 1에 나열된 것들을 포함한다. 이 펩타이드들의 상기 N-말단은 D-아미노산을 포함할 수 있고 및/또는 보호기를 포함할 수 있으며, 상기 C-말단은 아미드로 전환될 수 있다.
서열 식별자 펩타이드 서열
서열 번호 2 LKQKIKHVVKLKVVVKLRSQLVKRKQ
서열 번호 3 LKQKIKHVVKLKVVVKLRSQLVKRK
서열 번호 4 LKQKIKHVVKLKVVVKLRSQLVKR
서열 번호 5 LKQKIKHVVKLKVVVKLRSQLVK
서열 번호 6 LKQKIKHVVKLKVVVKLRSQLV
서열 번호 7 LKQKIKHVVKLKVVVKLRSQL
서열 번호 8 LKQKIKHVVKLKVVVKLRSQ
서열 번호 9 LKQKIKHVVKLKVVVKLRS
서열 번호 10 LKQKIKHVVKLKVVVKLR
서열 번호 11 LKQKIKHVVKLKVVVKL
서열 번호 12 LKQKIKHVVKLKVVVK
서열 번호 13 LKQKIKHVVKLKVVV
서열 번호 14 LKQKIKHVVKLKVV
서열 번호 15 LKQKIKHVVKLKV
서열 번호 16 LKQKIKHVVKLK
서열 번호 17 LKQKIKHVVKL
서열 번호 18 LKQKIKHVVK
서열 번호 19 LKQKIKHVV
서열 번호 20 LKQKIKHV
서열 번호 21 LKQKIKH
서열 번호 22 LKQKIK
서열 번호 23 KQKIKHVVKLKVVVKLRSQLVKRKQN
서열 번호 24 QKIKHVVKLKVVVKLRSQLVKRKQN
서열 번호 25 KIKHVVKLKVVVKLRSQLVKRKQN
서열 번호 26 IKHVVKLKVVVKLRSQLVKRKQN
서열 번호 27 KHVVKLKVVVKLRSQLVKRKQN
서열 번호 28 HVVKLKVVVKLRSQLVKRKQN
서열 번호 29 VVKLKVVVKLRSQLVKRKQN
서열 번호 30 VKLKVVVKLRSQLVKRKQN
서열 번호 31 KLKVVVKLRSQLVKRKQN
서열 번호 32 LKVVVKLRSQLVKRKQN
서열 번호 33 KVVVKLRSQLVKRKQN
서열 번호 34 VVVKLRSQLVKRKQN
서열 번호 35 VVKLRSQLVKRKQN
서열 번호 36 VKLRSQLVKRKQN
서열 번호 37 KLRSQLVKRKQN
서열 번호 38 LRSQLVKRKQN
서열 번호 39 RSQLVKRKQN
서열 번호 40 KQKIKHVVKLKVVVKLRSQLVKRKQ
서열 번호 41 QKIKHVVKLKVVVKLRSQLVKRK
서열 번호 42 KIKHVVKLKVVVKLRSQLVKR
서열 번호 43 IKHVVKLKVVVKLRSQLVK
서열 번호 44 KHVVKLKVVVKLRSQLV
서열 번호 45 HVVKLKVVVKLRSQL
서열 번호 46 VVKLKVVVKLRSQ
서열 번호 47 VKLKVVVKLRS
서열 번호 48 KLKVVVKLR
서열 번호 49 LKVVVKL
서열 번호 50 KVVVK
서열 번호 51 QKIKHVVKLKVVVKLRSQLVKRKQ
서열 번호 52 KIKHVVKLKVVVKLRSQLVKRKQ
서열 번호 53 IKHVVKLKVVVKLRSQLVKRKQ
서열 번호 54 KHVVKLKVVVKLRSQLVKRKQ
서열 번호 55 HVVKLKVVVKLRSQLVKRKQ
서열 번호 56 VVKLKVVVKLRSQLVKRKQ
서열 번호 57 VKLKVVVKLRSQLVKRKQ
서열 번호 58 KLKVVVKLRSQLVKRKQ
서열 번호 59 LKVVVKLRSQLVKRKQ
서열 번호 60 KVVVKLRSQLVKRKQ
서열 번호 61 VVVKLRSQLVKRKQ
서열 번호 62 VVKLRSQLVKRKQ
서열 번호 63 VKLRSQLVKRKQ
서열 번호 64 KLRSQLVKRKQ
서열 번호 65 LRSQLVKRKQ
서열 번호 66 RSQLVKRKQ
서열 번호 67 QKIKHVVKLKVVVKLRSQLVKRK
서열 번호 68 KIKHVVKLKVVVKLRSQLVKRK
서열 번호 69 IKHVVKLKVVVKLRSQLVKRK
서열 번호 70 KHVVKLKVVVKLRSQLVKRK
서열 번호 71 HVVKLKVVVKLRSQLVKRK
서열 번호 72 VVKLKVVVKLRSQLVKRK
서열 번호 73 VKLKVVVKLRSQLVKRK
서열 번호 74 KLKVVVKLRSQLVKRK
서열 번호 75 LKVVVKLRSQLVKRK
서열 번호 76 KVVVKLRSQLVKRK
서열 번호 77 VVVKLRSQLVKRK
서열 번호 78 VVKLRSQLVKRK
서열 번호 79 VKLRSQLVKRK
서열 번호 80 KLRSQLVKRK
서열 번호 81 LRSQLVKRK
서열 번호 82 RSQLVKRK
서열 번호 83 QKIKHVVKLKVVVKLRSQLVKR
서열 번호 84 KIKHVVKLKVVVKLRSQLVKR
서열 번호 85 IKHVVKLKVVVKLRSQLVKR
서열 번호 86 KHVVKLKVVVKLRSQLVKR
서열 번호 87 HVVKLKVVVKLRSQLVKR
서열 번호 88 VVKLKVVVKLRSQLVKR
서열 번호 89 VKLKVVVKLRSQLVKR
서열 번호 90 KLKVVVKLRSQLVKR
서열 번호 91 LKVVVKLRSQLVKR
서열 번호 92 KVVVKLRSQLVKR
서열 번호 93 VVVKLRSQLVKR
서열 번호 94 VVKLRSQLVKR
서열 번호 95 VKLRSQLVKR
서열 번호 96 KLRSQLVKR
서열 번호 97 LRSQLVKR
서열 번호 98 RSQLVKR
서열 번호 99 QKIKHVVKLKVVVKLRSQLVK
서열 번호 100 KIKHVVKLKVVVKLRSQLVK
서열 번호 101 IKHVVKLKVVVKLRSQLVK
서열 번호 102 KHVVKLKVVVKLRSQLVK
서열 번호 103 HVVKLKVVVKLRSQLVK
서열 번호 104 VVKLKVVVKLRSQLVK
서열 번호 105 VKLKVVVKLRSQLVK
서열 번호 106 KLKVVVKLRSQLVK
서열 번호 107 LKVVVKLRSQLVK
서열 번호 108 KVVVKLRSQLVK
서열 번호 109 VVVKLRSQLVK
서열 번호 110 VVKLRSQLVK
서열 번호 111 VKLRSQLVK
서열 번호 112 KLRSQLVK
서열 번호 113 LRSQLVK
서열 번호 114 RSQLVK
서열 번호 115 QKIKHVVKLKVVVKLRSQLV
서열 번호 116 KIKHVVKLKVVVKLRSQLV
서열 번호 117 IKHVVKLKVVVKLRSQLV
서열 번호 118 KHVVKLKVVVKLRSQLV
서열 번호 119 HVVKLKVVVKLRSQLV
서열 번호 120 VVKLKVVVKLRSQLV
서열 번호 121 VKLKVVVKLRSQLV
서열 번호 122 KLKVVVKLRSQLV
서열 번호 123 LKVVVKLRSQLV
서열 번호 124 KVVVKLRSQLV
서열 번호 125 QKIKHVVKLKVVVKLRSQL
서열 번호 126 KIKHVVKLKVVVKLRSQL
서열 번호 127 IKHVVKLKVVVKLRSQL
서열 번호 128 KHVVKLKVVVKLRSQL
서열 번호 129 HVVKLKVVVKLRSQL
서열 번호 130 VVKLKVVVKLRSQL
서열 번호 131 VKLKVVVKLRSQL
서열 번호 132 KLKVVVKLRSQL
서열 번호 133 LKVVVKLRSQL
서열 번호 134 KVVVKLRSQL
서열 번호 135 QKIKHVVKLKVVVKLRSQ
서열 번호 136 KIKHVVKLKVVVKLRSQ
서열 번호 137 IKHVVKLKVVVKLRSQ
서열 번호 138 KHVVKLKVVVKLRSQ
서열 번호 139 HVVKLKVVVKLRSQ
서열 번호 140 VVKLKVVVKLRSQ
서열 번호 141 VKLKVVVKLRSQ
서열 번호 142 KLKVVVKLRSQ
서열 번호 143 LKVVVKLRSQ
서열 번호 144 KVVVKLRSQ
서열 번호 145 QKIKHVVKLKVVVKLRS
서열 번호 146 KIKHVVKLKVVVKLRS
서열 번호 147 IKHVVKLKVVVKLRS
서열 번호 148 KHVVKLKVVVKLRS
서열 번호 149 HVVKLKVVVKLRS
서열 번호 150 VVKLKVVVKLRS
서열 번호 151 VKLKVVVKLRS
서열 번호 152 KLKVVVKLRS
서열 번호 153 LKVVVKLRS
서열 번호 154 KVVVKLRS
서열 번호 155 QKIKHVVKLKVVVKLR
서열 번호 156 KIKHVVKLKVVVKLR
서열 번호 157 IKHVVKLKVVVKLR
서열 번호 158 KHVVKLKVVVKLR
서열 번호 159 HVVKLKVVVKLR
서열 번호 160 VVKLKVVVKLR
서열 번호 161 VKLKVVVKLR
서열 번호 162 KLKVVVKLR
서열 번호 163 LKVVVKLR
서열 번호 164 KVVVKLR
서열 번호 165 VVVKLR
서열 번호 166 VVKLR
서열 번호 167 QKIKHVVKLKVVVKL
서열 번호 168 KIKHVVKLKVVVKL
서열 번호 169 IKHVVKLKVVVKL
서열 번호 170 KHVVKLKVVVKL
서열 번호 171 HVVKLKVVVKL
서열 번호 172 VVKLKVVVKL
서열 번호 173 VKLKVVVKL
서열 번호 174 KLKVVVKL
서열 번호 175 LKVVVKL
서열 번호 176 KVVVKL
서열 번호 177 QKIKHVVKLKVVVK
서열 번호 178 KIKHVVKLKVVVK
서열 번호 179 IKHVVKLKVVVK
서열 번호 180 KHVVKLKVVVK
서열 번호 181 HVVKLKVVVK
서열 번호 182 VVKLKVVVK
서열 번호 183 VKLKVVVK
서열 번호 184 KLKVVVK
서열 번호 185 LKVVVK
서열 번호 186 QKIKHVVKLKVVV
서열 번호 187 KIKHVVKLKVVV
서열 번호 188 IKHVVKLKVVV
서열 번호 189 KHVVKLKVVV
서열 번호 190 HVVKLKVVV
서열 번호 191 QKIKHVVKLKVV
서열 번호 192 KIKHVVKLKVV
서열 번호 193 IKHVVKLKVV
서열 번호 194 KHVVKLKVV
서열 번호 195 HVVKLKVV
서열 번호 196 QKIKHVVKLKV
서열 번호 197 KIKHVVKLKV
서열 번호 198 IKHVVKLKV
서열 번호 199 KHVVKLKV
서열 번호 200 HVVKLKV
서열 번호 201 QKIKHVVKLK
서열 번호 202 KIKHVVKLK
서열 번호 203 IKHVVKLK
서열 번호 204 KHVVKLK
서열 번호 205 HVVKLK
서열 번호 206 QKIKHVVKL
서열 번호 207 KIKHVVKL
서열 번호 208 IKHVVKL
서열 번호 209 KHVVKL
서열 번호 210 QKIKHVVK
서열 번호 211 KIKHVVK
서열 번호 212 IKHVVK
서열 번호 213 KHVVK
서열 번호 214 KIKHVV
서열 번호 215 IKHVV
서열 번호 216 QKIKHV
서열 번호 217 KIKHV
서열 번호 218 QKIKH
서열 번호 219 LKQKIKHVVKLK
서열 번호 220 KQKIKHVVKLK
서열 번호 221 KQKIKHVVKL
서열 번호 222 KQKIKHVVK
서열 번호 223 KQKIKHVV
서열 번호 224 KQKIKHV
서열 번호 225 KQKIKH
서열 번호 226 KQKIK
서열 번호 227 QKIKHVVKLK
서열 번호 228 KIKHVVKLK
서열 번호 229 IKHVVKLK
서열 번호 230 KHVVKLK
서열 번호 231 HVVKLK
서열 번호 232 KLRSQLVKRKQN
서열 번호 233 KLRSQLVKRKQ
서열 번호 234 KLRSQLVKRK
서열 번호 235 KLRSQLVKR
서열 번호 236 KLRSQLVK
서열 번호 237 LRSQLVKRKQ
서열 번호 238 RSQLVKRKQ
본 발명의 상기 펩타이드 형성 부분은 구성요소가 자연적으로 발생할 수 있는 유기체의 세포에서 다른 생물학적 구성요소, 즉, 다른 염색체 또는 염색체 외 DNA 및 RNA, 단백질 및 세포 기관으로부터 실질적으로 구분된다는 점에서 단리된 생물학적 구성요소이다. 단리된 핵산 및 단백질은 표준 정제 방법에 의해 정제된 핵산 및 단백질을 포함한다. 용어 "단리된(isolated)"은 또한 숙주 세포에서의 재조합 발현에 의해 제조된 핵산 및 단백질, 뿐만아니라 화학적으로 합성된 핵산 및 단백질을 포함한다.
본 발명의 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트에서, 상기 치료제 또는 진단제는 공유 결합에 의해 또는 비-공유 결합에 의해 펩타이드에 결합될 수 있다.
상기 치료제 또는 진단제가 비-공유 결합에 의해 펩타이드에 결합될 때, 결합은 비오틴-스트렙타비딘 복합체에 의해 달성될 수 있다. 예를 들어, 상기 펩타이드는, 선택적으로 링커를 통해, 비오틴 모이어티에 공유 결합에 의해 결합될 수 있고, 상기 치료제 또는 진단제는, 선택적으로 링커를 통해, 스트렙타비딘 모이어티에 공유 결합에 의해 결합될 수 있다. 대안으로, 상기 펩타이드는, 선택적으로 링커를 통해, 상기 스트렙타비딘 모이어티에 공유 결합에 의해 결합될 수 있고, 상기 치료제 또는 진단제는, 선택적으로 링커를 통해, 상기 비오틴 모이어티에 공유 결합에 의해 결합될 수 있다. 이 경우에서 상기 선택적 링커 군은 상기 펩타이드를 상기 치료제 또는 진단제에 선택적으로 결합시키는 상기 링커와 동일한 것일 수 있다.
상기 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트는 상기 펩타이드를 상기 치료제 또는 진단제에 결합시키는 링커를 함유할 수 있다. 상업적으로 이용 가능한 가교제는 모두 적절한 링커일 수 있다. 이러한 가교제는 전형적으로 선형 분자이며, 각각의 단부에 화학적 반응성 기를 갖는다. 적절한 조건 하에, 이러한 가교제들은 두 개의 분자, 즉, 상기 펩타이드 및 상기 치료제 또는 진단제 사이에서 공유 결합에 의한 부착을 형성할 수 있다. 중요하게는, 상기 가교제는 한 단부를 상기 펩타이드에 결합시키고 다른 단부를 상기 치료제 또는 진단제에 결합시키는 한편, 각각의 생물학적 기능을 유지한다. 바람직하게는, 상기 본 발명의 링커는, 존재하는 경우, 각각의 단부에 다른 반응성 기를 가진 헤테로이기능성(heterobifunctional) 가교제이다. 이것은 더 특이적이고 순차적인(2-단계) 컨쥬게이션을 허용하며, 유사한 기, 예를 들어, 치료제와 치료제 결합, 또는 펩타이드와 펩타이드 결합의 폴리머화 또는 다이머화 가능성을 최소화한다.
특히, 존재하는 경우, 상기 링커는 단쇄 펩타이드(예를 들어, 1 내지 10개의 아미노산), 폴리에틸렌 글리콜 올리고머(예를 들어, 2 내지 10개의 폴리에틸렌 글리콜 유닛), C1-20 알킬렌 기(예를 들어, C1-10 알킬렌 기), C2-20 알케닐렌 기(예를 들어, C2-10 알케닐렌 기), C1-10 알킬렌 기(예를 들어, C1-10 알킬렌 기) 또는 C2-10 알케닐렌 기(예를 들어, C2-10 알케닐렌 기)로 구분된 말레이미드 및 히드라지드 작용기(예를 들어, 도 9 참조), 또는 이것들의 조합을 포함할 수 있다. 바람직하게는, 상기 링커는 1 내지 10개의 아미노산의 단쇄 펩타이드, C1-10 알킬렌 기로 구분된 말레이미드 및 히드라지드 작용기, 또는 이것들의 어떤 조합을 포함한다. 이러한 링커는 상기 펩타이드 및 상기 치료제 또는 진단제 사이에서 발생하는 입체 장해(steric hindrance)를 방지한다.
용어 'Cx -y 알킬렌'은 본 명세서에서 사용된 바와 같이 x 내지 y개의 탄소 원자를 함유하는 선형 또는 분지형 포화 탄화수소 기인 2가 탄화수소 기(예를 들어, -CH2- 또는 >CCH3)를 말한다. C1-10 알킬렌 기의 예는 메틸렌, 에틸렌, 프로필렌, 부틸렌, 헥실렌 등을 포함한다.
용어 'Cx -y 알케닐렌'은 본 명세서에서 사용된 바와 같이 하나 이상의 탄소-탄소 이중 결합을 함유하고 x 내지 y개의 탄소 원자를 가진 선형 또는 분지형 탄화수소 기인 2가 탄화수소 기(예를 들어, -CH=CH- 또는 >C=CH2)를 말한다. C2-10 알케닐렌 기의 예는 비닐렌, 프로페닐렌, 부테닐렌, 헥세닐렌 등을 포함한다.
링커의 일부를 형성할 수 있는 폴리에틸렌 글리콜 올리고머는 에틸렌 옥사이드, 즉, 식 H-(O-CH2-CH2)n-OH의 2 내지 10개의 반복 유닛을 가진 올리고머를 말하며, 상기 식에서 n은 2 내지 10의 정수이다.
바람직하게는, 상기 단쇄 펩타이드는 아미노산 글리신, 세린, 리신, 시스테인, 글루탐산 및/또는 아스파르트산, 예를 들어, -GGGS-, GGGSK, GGGSKC 등을 포함한다. 이에 더하여, 상기 링커는, 존재하는 경우, 바람직하게는 상기 펩타이드의 C-말단에 위치한다.
상기 링커는 또한 라벨링 모이어티를 더 포함할 수 있다. 적합한 라벨링 모이어티는 형광, 발광, 또는 방사성 핵종 라벨을 포함한다. 예를 들어, 플루오레세인 아이소티오시아네이트(FITC)는 결합 성질의 정량적 분석을 제공하기 위해 형광 라벨로서 이용될 수 있다. 다른 적합한 라벨링 모이어티는 Alexa Fluor 염료, 시아닌 염료, 및 콴텀 닷(quantum dot)을 포함한다. 이에 더하여, 비오틴은 검출 수단용 라벨로서 이용될 수 있다.
본 발명의 상기 펩타이드는 상기 유리체에서 넓고 다양한 치료제를 보유하기 위해 사용될 수 있다. 이러한 약제들은 항체(예를 들어, 베바시쥬맙), FAB 항체 단편(예를 들어, 라니비쥬맙), 융합 단백질(예를 들어, 아플리버셉트), 펩타이드(예를 들어, 키네스타틴), 압타머(예를 들어, 페갑타닙), 및 소분자 치료제를 포함한다.
특히, 상기 치료제는 VEGF 억제제, 알파2-아드레날린 작용제, 베타-아드레날린 길항제, 안지오텐신 II 길항제, ACE 억제제, NSAID, 항말라리아제, 코르티코스테로이드, 면역 억제제, 단클론성 항체, 레티노이드, DMARD, 생물학적 치료제, 나이트레이트, 프로스타글란딘, 및 엔도텔린 길항제로 구성된 군으로부터 선택될 수 있다.
적합한 VEGF 억제제는 단클론성 항체, 예를 들어, 베바시쥬맙(Avastin), 항체 유도체, 예를 들어, 라니비쥬맙(Lucentis), 또는 VEGF에 의해 자극된 티로신 키나제를 억제하는 분자, 예를 들어, 라파티닙(Tykerb), 수니티닙(Sutent), 소라페닙(Nexavar), 악시티닙, 및 파조파닙을 포함한다. 이러한 요법의 일부는 VEGF 대신에 VEGF 수용체를 표적화한다. 테트라하이드로칸나비놀(THC) 및 칸나비디올는 둘 다 VEGF를 억제하고 신경 교종 성장을 둔화시킨다.
적합한 알파2-아드레날린 작용제는 아프라클로니딘, 브리모니딘, 클로니딘, 데토미딘, 덱스메데토미딘, 구아나벤즈, 구안파신, 로펙시딘, 메데토미딘, 로미피딘, 티자니딘, 톨로니딘, 자일라진, 파돌미딘, 자일로메타졸린, 및 옥시메타졸린(부분적 α2 작용제)을 포함한다.
적합한 베타-아드레날린 길항제는 알프레놀롤, 부신돌롤, 카르테올롤, 카르베딜롤, 라베날롤, 나돌롤, 옥스프레놀롤, 펜부톨롤, 핀돌롤, 프로프라놀롤, 소탈롤, 티몰롤, 유코미아, 아세부톨롤, 아테놀롤, 베탁솔롤, 비소프롤롤, 셀리프롤롤, 에스몰롤, 메토프롤롤, 네비볼롤, 부탁사민, ICI-118,551, 및 SR 59230A를 포함한다.
적합한 안지오텐신 II 길항제는 로사탄, 이르베사탄, 올메사탄, 칸데사탄, 발사탄 및 텔미사탄을 포함한다.
적합한 ACE 억제제는 캅토프릴(Capoten), 조페노프릴, 에날라프릴(Vasotec/Renitec), 라미프릴(Altace/Prilace/Ramace/Ramiwin/Triatec/Tritace), 퀴나프릴(Accupril), 페린도프릴(Coversyl/Aceon), 리시노프릴(Listril/Lopril/Novatec/Prinivil/Zestril), 베나제프릴(Lotensin), 이미다프릴(Tanatril), 조페노프릴(Zofecard), 트란돌라프릴(Mavik/Odrik/Gopten), 및 포시노프릴(Fositen/Monopril)을 포함한다.
적합한 NSAID는 아스피린(아세틸살리실산), 디플루니살, 살살레이트, 이부프로펜, 덱시부프로펜, 나프록센, 페노프로펜, 케토프로펜, 덱스케토프로펜, 플루비프로펜, 옥사프로진, 록소프로펜, 딘도메타신, 톨메틴, 술린닥, 에토돌락, 케토롤락, 디클로페낙, 나부메톤, 피록시캄, 멜록시캄, 테녹시캄, 드록시캄, 로르녹시캄, 이속시캄, 메페남산, 메크로메남산, 플루페남산, 톨페남산, 셀레콕시브, 로페콕시브, 발데콕시브, 파레콕시브, 루미라콕시브, 에토리콕시브, 피로콕시브, 니메술리드, 리코펠론, 리신 클로닉시네이트, 하이퍼포린, 및 현삼(figwort)을 포함한다.
적합한 항말라리아제는 퀴닌, 클로로퀸, 아모디아퀸, 피리메타민, 프로구아닐, 술폰아미드, 메플로퀸, 아토바쿠온, 프리마퀸, 아르테미시닌 (및 유도체), 할로판트린, 독시사이클린, 및 클린다마이신을 포함한다.
적합한 코르티코스테로이드는 하이드로코르티손, 하이드로코르티손 아세테이트, 코르티손 아세테이트, 틱소코르톨 피발레이트, 프레드니솔론, 메틸프레드니솔론, 프레드니손, 트리암시놀론 아세토니드, 트리암시놀론 알콜, 모메타손, 암시노니드, 부데소니드, 데소니드, 플루오시노니드, 플루오시놀론 아세토니드, 할시노니드, 베타메타손, 베타메타손 나트륨 포스페이트, 덱사메타손, 덱사메타손 나트륨 포스페이트, 플루오로코르톨론, 하이드로코르티손-17-발러레이트, 아클로메타손 디프로피오네이트, 베타메타손 발러레이트, 베타메타손 디프로피오네이트, 프레드니카바메이트, 클로베타손-17-부티레이트, 클로베타솔-17-프로피오네이트, 플루오로코르톨론 카프로에이트, 플루오로코르톨론 피발레이트, 플루프레드니덴 아세테이트, 하이드로코르티손-17-부티레이트, 17-아세포네이트, 17-부테프레이트, 및 프레드니카바메이트를 포함한다.
적합한 면역 억제제는 글루코코르티코이드, 예를 들어, 하이드로코르티손, 코르티손, 프레드니손, 프레드니솔론, 메틸프레드니솔론, 덱사메타손, 베타메타손, 트리암시놀론, 베클로메타손, 플루드로코르티손 아세테이트, 데옥시코르티코스테론 아세테이트(DOCA), 안달도스테론, 세포 증식 억제제, 예를 들어, 질소 머스타드(사이클로포스파미드), 나이트로소유레아, 백금 화합물, 등, 폴산 유사체(메토트렉세이트), 퓨린 유사체(아자티오프린 및 머캅토퓨린), 피리미딘 유사체, 세포 독성 항생제, 예를 들어, 닥티노마이신, 안트라사이클린, 미토마이신 C, 블레오마이신, 및 미트라마이신, 칼시뉴린 억제제(CNI), 예를 들어, 타크롤리무스, 및 시클로스포린, 마크롤리드 락톤, 예를 들어, 시롤리무스(라파마이신, 상표명 Rapamune), 인터페론, 예를 들어, IFN-β, 오피오이드, 예를 들어, 코데인, 모르핀, 테바인, 오리파빈, 디아세틸모르핀, 니코모르핀, 디프로파노일모르핀, 디아세틸디하이드로모르핀, 아세틸 프로피오닐모르핀, 데소모르핀, 메틸데소르핀, 디벤조일모르핀, 디하이드로코데인, 에틸모르핀, 헤테로코데인, 부프레노르핀, 에토르핀, 하이드로코돈, 하이드로모르핀, 옥시코돈, 옥시모르폰, 펜타닐, 알파메틸 펜타닐, 알펜타닐, 술펜타닐, 레미펜타닐, 카펜타닐, 오메펜타닐, 페티딘(메페리딘), 케토베미돈, 알릴프로딘, 프로딘, 프로폭시펜, 덱스트로프로폭시펜, 덱스트로모르아미드, 벤지트라미드, 피리트라미드, 메타돈, 디피파논, 레보메타딜 아세테이트(LAAM), 디페녹신, 디페녹실레이트, 로페라미드, 데조신, 펜타조신, 페나조신, 부프레노르핀, 디하이드로에토르핀, 에토르핀, 부토르판올, 날부핀, 레보르판올, 레보메토르판, 레페타민, 메프타지놀, 틸리딘, 트라마돌, 타펜타돌, 날메펜, 날록손, 및 날트렉손, TNF 결합 단백질, 예를 들어, 인플릭시맙(Remicade), 에타너셉트(Enbrel), 아달리무맙, 커큐민(강황의 성분), 및 카테킨(녹차에 있음), 이노신-5'-모노포스페이트 데하이드로게나제(IMPDH) 억제제, 예를 들어, 마이코페놀산, 및 다른 작은 생물학적 약제, 예를 들어, 핑골리모드, 및 미리오신을 포함한다.
적합한 단클론성 항체는 베바시쥬맙, 세툭시맙, 파니투무맙, 트라스투쥬맙, 인플릭시맙, 아달리무맙, 바실릭시맙, 다클리쥬맙, 및 오말리쥬맙을 포함한다.
적합한 레티노이드는 레티놀, 레티날, 트레티노인(레티노산, Retin-A), 아이소트레티노인, 알리트레티노인, 에트레티네이트 및 그것의 대사산물 아시트레틴, 타자로텐, 벡사로텐, 및 아다팔렌을 포함한다.
적합한 질환-변형 항-류머티스제(DMARD)는 아달리무맙, 아자티오프린, 시클로스포린, 클로로퀸 및 하이드록시클로로퀸, D-페니실아민, 에타너셉트, 골리무맙, 금염(나트륨 오로티오말레이트, 오라노핀), 인플릭시맙, 레플루노미드, 메토트렉세이트(MTX), 미노사이클린, 리툭시맙, 및 설파살라진(SSZ)을 포함한다.
적합한 생물학적 치료제는 압식시맙, 에타너셉트(Enbrel), 인플릭시맙(Remicade), 리툭시맙(Rituxan), 트라스투쥬맙(Herceptin), 및 오크리플라스민(Jetrea)을 포함한다.
적합한 나이트레이트는 글리세릴 트리나이트레이트(GTN), 아이소소르비드 디나이트레이트, 및 아이소소르비드 모노나이트레이트를 포함한다.
적합한 프로스타글란딘은 프로스타사이클린 I2(PGI2), 프로스타글란딘 E2(PGE2), 및 프로스타글란딘 F2α(PGF2α)를 포함한다.
적합한 엔도텔린 길항제는 시탁센탄, 암브리센탄, 아트라센탄, BQ-123, 지보텐탄, 보센탄, 마시텐탄, 테조센탄, BQ-788, 및 A192621을 포함한다.
특히, 본 발명의 상기 결합 컨쥬게이트는 VEGF 억제제와 함께 이용될 수 있다. 이 배열은 특정 병태에 대하여 다른 잠재적인 치료보다 많은 이점을 갖는다. 예를 들어, VEGF 억제제의 장기간 유리체 내 전달을 위한 잠재적 유전자 치료 방법과는 달리, 단순 생물학적 약제의 부작용 프로파일은 상대적으로 잘 이해된다(라니비쥬맙, 페갑타닙, 베바시쥬맙, 및 아플리버셉트와 관련하여 전세계적으로 공유된 사항). 따라서, 본 발명의 기술을 사용한 이러한 생물학적 약제의 전달은 투여된 약제의 생물학적 프로파일이 정확하게 예측되고 관리될 수 있다는 것을 의미한다. 게다가, 거부반응이 발생하면, 유리체 절제술(vitrectomy)을 수행하여 본 발명의 제형을 제거할 수 있지만, 유전자 치료를 사용하는 경우 유사한 폐기 처치는 현재 이용 가능하지 않다.
상기 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트의 진단제는 형광, 발광, 또는 방사성 핵종 라벨을 포함할 수 있다. 예를 들어, 특이적 진단제는 나트륨 플루오레세인 및 인도시아닌 그린을 포함한다.
본 발명의 또 다른 구체예에서, 본 발명에 따르는 펩타이드, 또는 본 발명에 따르는 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트, 및 적어도 하나의 약학적으로 허용 가능한 부형제를 포함하는 약학 조성물이 제공된다.
특히, 인간 또는 동물 신체의 특정 조직을 표적화하는 결합 모이어티의 능력으로 인해, 본 발명에 따르는 상기 펩타이드, 본 발명에 따르는 상기 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트, 또는 본 발명에 따르는 상기 약학 조성물이 치료, 구체적으로 나이-관련 황반 변성, 당뇨병성 망막증, 당뇨병성 황반 부종(diabetic macular edema), 망막 정맥 폐색, 미숙아 망막증(retinopathy of prematurity), 병적 근시 황반 부종(pathologic myopia macular edema), 황반부 모세혈관 확장증(macular telangiectasia), 맥락막 신생 혈관(choroidal neovascularization), 포도막염, 녹내장, 전신성 홍반 루푸스(systemic lupus erythematosus), 관절염(arthritis), 류머티스성 관절염(rheumatoid arthritis), 경피증(scleroderma), 다발성 근염(polymyositis), 또는 피부 근염의 예방 또는 처치에서의 사용에 적합하다는 것이 발견되었다. 바람직하게는, 안구 질환 또는 안구병태, 예를 들어, 나이-관련 황반 변성, 당뇨병성 망막증, 당뇨병성 황반 부종, 망막 정맥 폐색, 미숙아 망막증, 병적 근시 황반 부종, 황반부 모세혈관 확장증, 맥락막 신생 혈관, 포도막염, 또는 녹내장에 적용 가능하다. 특히, 나이-관련 황반 변성, 당뇨병성 망막증, 망막 정맥 폐색, 포도막염, 및 녹내장은 상기 본 발명에 따르는 펩타이드, 컨쥬게이트 또는 약학 조성물로 예방되거나 치료될 수 있는 바람직한 의학적 징후이다.
상기 약학 조성물은 상기 결합 컨쥬게이트가 적절한 사용 부위에 전달되게 하는 부형제를 포함할 수 있다. 상기 부형제는 특정 부위를 표적화하거나, 상기 부위로의 전달을 개선할 수 있다. 상기 약학 조성물은 또한 상기 결합 컨쥬게이트를 안정화하는 부형제를 포함할 수 있다. 적절한 안정화제가 사용될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체, 보조제 또는 비히클(vehicle)을 포함할 수 있다. 상기 약학 조성물에 사용될 수 있는 약학적으로 허용 가능한 담체, 보조제 및 비히클은 이온 교환기, 알루미나, 알루미늄 스테아레이트, 레시틴, 혈청 단백질, 예를 들어, 인간 혈청 알부민, 완충 물질, 예를 들어, 포스페이트, 글리신, 소르브산, 칼륨 소르베이트, 포화 식물성 지방산의 부분적 글리세리드 혼합물, 물, 염 또는 전해질, 예를 들어, 프로타민 설페이트, 이나트륨 하이드로겐 포스페이트, 칼륨 하이드로겐 포스페이트, 나트륨 클로라이드, 아연 염, 콜로이드 실리카, 마그네슘 트리실리케이트, 폴리비닐 피롤리돈, 셀룰로스-기반 물질, 폴리에틸렌 글리콜, 나트륨 카복시메틸셀룰로스, 폴리아크릴레이트, 왁스, 폴리에틸렌- 폴리옥시프로필렌-블록 폴리머, 폴리에틸렌 글리콜 및 양모지(wool fat)를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
상기 본 발명의 약학 조성물은 경구로, 비경구로, 흡입 스프레이에 의해, 국소적으로, 직장으로, 비강으로, 볼에, 질로 또는 이식된 레저버를 통해 투여될 수 있다. 바람직하게는, 상기 약학 조성물은 국소적으로, 이식된 레저버를 통해 또는 주사에 의해 (더 바람직하게는 주사에 의해) 투여된다. 상기 약학 조성물은 통상적인 비-독성 약학적으로 허용 가능한 담체, 보조제 또는 비히클도 함유할 수 있다. 본 명세서에서 사용된 용어 비경구는 피하, 피 내, 정맥 내, 근육 내, 관절 내, 활막 내, 흉골 내, 척추강 내, 안 내, 병소 내 및 두개 내 주사 또는 투입 기술을 포함한다. 바람직하게는, 상기 조성물의 투여 경로는 안 내 또는 관절 내 투여이다.
상기 약학 조성물은, 예를 들어, 멸균 주사 가능 수성 또는 유성 현탁액으로서 멸균 주사 가능 조제물의 형태일 수 있다. 이 현탁액은 적합한 분산제 또는 습윤제(예를 들어, Tween 80) 및 현탁화제를 사용하는 업계에 공지된 기술에 따라 제형화될 수 있다. 상기 멸균 주사 가능 조제물은 또한, 예를 들어, 1,3-부탄디올 중의 용액으로서 비-독성 비경구로 허용 가능한 희석제 또는 용매 중의 멸균 주사 가능 용액 또는 현탁액일 수 있다. 상기 허용 가능한 비히클 및 용매 중에서, 만니톨, 물, 링거 용액(Ringer's solution) 및 등장성 나트륨 클로라이드 용액이 이용될 수 있다. 이에 더하여, 멸균, 고정유는 통상적으로 용매 또는 현탁화 배지로서 이용된다. 이러한 목적으로, 합성 모노- 또는 디글리세리드를 포함하는, 무자극(bland) 고정유가 이용될 수 있다. 폴리옥시에틸화된 버젼의 약학적으로 허용 가능한 천연 오일, 예를 들어, 올리브유 또는 피마자유처럼, 지방산, 예를 들어, 올레산 및 그것의 글리세리드 유도체는 주사 가능 물질의 제조에 유용하다. 이 오일 용액 또는 현탁액들은 또한 장쇄 알콜 희석제 또는 분산제, 예를 들어, Ph. Helv 또는 유사한 알콜을 함유할 수 있다.
상기 본 발명의 약학 조성물의 국소적 투여는 원하는 처치가 국소적 적용에 의해 쉽게 접근 가능한 지역 또는 기관을 수반할 때 특히 유용하다. 피부에 국소적으로 적용할 때, 상기 약학 조성물은 담체에 현탁되거나 용해된 활성 구성요소를 함유하는 적합한 연고로 제형화되어야 한다. 본 발명의 분자의 국소적 투여를 위한 담체는 미네랄 오일, 액화 석유, 백색 석유, 프로필렌 글리콜, 폴리옥시에틸렌 폴리옥시프로필렌 화합물, 에멀젼화 왁스 및 물을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 대안으로, 상기 약학 조성물은 담체에 현탁되거나 용해된 상기 활성 화합물을 함유하는 적합한 로션 또는 크림으로 제형화될 수 있다. 적합한 담체는 미네랄 오일, 소르비탄 모노스테아레이트, 폴리소르베이트 60, 세틸 에스터 왁스, 세테아릴 알콜, 2-옥틸도데카놀, 벤질 알콜 및 물을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 상기 본 발명의 약학 조성물은 또한 직장 좌제 제형에 의해 또는 적합한 관장 제형으로 하부 위장관에 국소적으로 적용될 수 있다. 국소적-경피성 패치가 또한 본 발명에 포함된다.
특히, 상기 본 발명의 결합 컨쥬게이트는 투명한 용액으로 제형화될 수 있다. 따라서, 이것은 모이어티가 안구병태를 치료하는데 이용될 때 시각적 혼탁이 일어나지 않는다는 것을 보장하고, 기존의 치료와 관련된 페이로드 문제를 완화한다.
상기 결합 컨쥬게이트가 본 발명에 따르는 펩타이드를 포함하는 경우, 제형이 내재적 항균/항-염증 성질을 갖는다는 것이 또한 장점으로 발견되었다. 이것은 상기 제형이 비경구로 투여될 때 후천적 감염의 가능성을 더욱 최소화한다.
한 구체예에서, 상기 약학 조성물이 적어도 하나의 추가적인 컨쥬게이션되지 않은, 즉, 상기 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트에 공유 결합에 의해 결합되지 않은 치료제를 포함하는 것이 또한 바람직할 수 있다. 이 경우, 컨쥬게이션된 및 컨쥬게이션되지 않은 치료제의 혼합물을 포함하는 제형은 단작용(즉, 컨쥬게이션되지 않은 약제) 및 지효성 구성요소(즉, 컨쥬게이션된 약제) 모두가 같은 제형에 존재하게 한다.
적합한 추가적인 컨쥬게이션되지 않은 치료제는 VEGF 억제제, 알파2-아드레날린 작용제, 베타-아드레날린 길항제, 안지오텐신 II 길항제, ACE 억제제, NSAID, 항말라리아제, 코르티코스테로이드, 면역 억제제, 단클론성 항체, 레티노이드, DMARD, 생물학적 치료제, 나이트레이트, 프로스타글란딘, 및 엔도텔린 길항제로 구성된 군으로부터 선택된 것들을 포함한다.
본 발명의 추가의 구체예에서, 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트를 제조하기 위한, 아미노산 서열 B1-X3-10-B2를 가진 적어도 하나의 모티프를 포함하는 단리된 펩타이드의 용도가 제공되며, 상기 식에서 B1 및 B2는 동일하거나 다르고 각각은 염기성 아미노산이며 X3- 10는 3 내지 10개의 동일하거나 다른 비-산성 아미노산의 서열이고, 상기 펩타이드의 N-말단은 D-아미노산을 포함하고 및/또는 보호기를 포함한다.
바람직하게는, 이러한 용도는 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트를 제조하기 위한, 서열 번호 1, 또는 이것의 기능적 일부 또는 단편에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 서열을 가진 펩타이드에 관한 것이다. 더 바람직하게는, 상기 기능적 일부 또는 단편은 서열 번호 1로부터 적어도 5개의 인접한 아미노산을 포함하고 히알루론산에 대한, 서열 번호 1에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 펩타이드의 친화도의 적어도 70% 및/또는 콜라겐에 대한, 서열 번호 1에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 펩타이드의 친화도의 적어도 70%를 나타낸다. 이에 더하여 또는 대안으로, 상기 펩타이드는 표 1에서 나타난 것들 중 어느 것에 따르는 서열을 가지며, 히알루론산에 대한, 서열 번호 1에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 펩타이드의 친화도의 적어도 70% 및/또는 콜라겐에 대한, 서열 번호 1에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 펩타이드의 친화도의 적어도 70%를 나타내는, 이것의 기능적 일부 또는 단편이다.
본 발명의 또 다른 구체예에서, 안구 질환 또는 안구병태, 예를 들어, 나이-관련 황반 변성, 당뇨병성 망막증, 당뇨병성 황반 부종, 망막 정맥 폐색, 미숙아 망막증, 병적 근시 황반 부종, 황반부 모세혈관 확장증, 맥락막 신생 혈관, 포도막염, 또는 녹내장의 예방 또는 치료에 사용을 위한, 아미노산 서열 B1-X3-10-B2를 가진 적어도 하나의 모티프를 포함하는 단리된 펩타이드가 제공되며, 상기 식에서, B1 및 B2는 동일하거나 다르고 각각은 염기성 아미노산이며 X3- 10는 3 내지 10개의 동일하거나 다른 비-산성 아미노산의 서열이다. 바람직하게는, 이 방식으로 사용되는 상기 펩타이드는 서열 번호 1, 또는 이것의 기능적 일부 또는 단편에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 서열을 가진 단리된 펩타이드이다. 상기 펩타이드의 N-말단은 D-아미노산을 포함하고 및/또는 보호기를 포함하는 것이 또한 바람직하다.
안구 질환 또는 안구병태, 예를 들어, 나이-관련 황반 변성, 당뇨병성 망막증, 당뇨병성 황반 부종, 망막 정맥 폐색, 미숙아 망막증, 병적 근시 황반 부종, 황반부 모세혈관 확장증, 맥락막 신생 혈관, 포도막염, 또는 녹내장의 예방 또는 치료에 사용을 위한, 아미노산 서열 B1-X3-10-B2를 가진 적어도 하나의 모티프를 포함하는 펩타이드를 포함하는 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트가 또한 제공되며, 상기 식에서 B1 및 B2는 동일하거나 다르고 각각은 염기성 아미노산이며 X3- 10는 3 내지 10개의 동일하거나 다른 비-산성 아미노산의 서열이고, 치료제 또는 진단제를 포함하며, 상기 치료제 또는 진단제는 선택적으로 링커에 의해 상기 펩타이드에 결합된다.
본 발명의 추가의 구체예에서, 히알루론산 결합 물질을 검출하는 방법이 제공되는데, 이 방법은 히알루론산 샘플을 제공하는 단계, 상기 히알루론산 샘플을 테스트 물질과 접촉시키는 단계, 및 상기 테스트 물질 및 히알루론산 사이에서의 결합의 존재를 검출하는 단계를 포함한다. 특히, 상기 히알루론산은 고체 지지물에 비-공유 결합에 의해 결합될 수 있다. 이러한 경우에는, 상기 고체 지지물은 바람직하게는 아민 표면이다.
이에 더하여 또는 대안으로, 상기 방법은 바람직하게는 차단제 및/또는 희석제로서 소 혈청 알부민을 이용한다.
상기 검출의 수단은 특별히 제한되지 않으며 유사한 효소-결합 면역흡착 검정(ELISA)에 사용되는 어떤 흔한 검출 방법도 수반할 수 있다. 하지만, 바람직하게는, 상기 검출 방법은 퍼옥시다제 기질, 예를 들어, 테트라메틸벤지딘 클로라이드의 첨가와 함께 비오티닐화된 기질(예를 들어, 비오티닐화된 재조합 단백질) 및 스트렙타비딘-호스 래디쉬(horse radish) 퍼옥시다제를 사용하여 수행된다. 비오티닐화된 재조합 인간 아그레칸(aggrecan)이 양성 대조군으로 사용될 수 있다.
본 발명의 또 다른 구체예에서, 나이-관련 황반 변성, 당뇨병성 망막증, 당뇨병성 황반 부종, 망막 정맥 폐색, 미숙아 망막증, 병적 근시 황반 부종, 황반부 모세혈관 확장증, 맥락막 신생 혈관, 포도막염, 녹내장, 전신성 홍반 루푸스, 관절염, 류머티스성 관절염, 경피증, 다발성 근염, 또는 피부 근염과 관련된 병태를 예방하거나 치료하는 방법이 제공되며, 이 방법은 본 발명에 따르는 펩타이드(즉, 아미노산 서열 B1-X3-10-B2를 가진 적어도 하나의 모티프를 포함하는 펩타이드, 상기 식에서 B1 및 B2는 동일하거나 다르고 각각은 염기성 아미노산이며 X3- 10는 3 내지 10개의 동일하거나 다른 비-산성 아미노산의 서열이고, 상기 펩타이드의 N-말단은 D-아미노산을 포함하고 및/또는 보호기를 포함함), 본 발명에 따르는 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트, 또는 본 발명에 따르는 약학 조성물을, 이것을 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.
또한, 안구 질환 또는 안구병태, 예를 들어, 나이-관련 황반 변성, 당뇨병성 망막증, 당뇨병성 황반 부종, 망막 정맥 폐색, 미숙아 망막증, 병적 근시 황반 부종, 황반부 모세혈관 확장증, 맥락막 신생 혈관, 포도막염, 또는 녹내장을 예방하거나 치료하는 방법이 제공되며, 이 방법은 아미노산 서열 B1-X3-10-B2를 가진 적어도 하나의 모티프를 포함하는 펩타이드를, 이것을 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하고, 상기 식에서 B1 및 B2는 동일하거나 다르고 각각은 염기성 아미노산이며 X3- 10는 3 내지 10개의 동일하거나 다른 비-산성 아미노산의 서열이다.
추가의 구체예에서, 안구 질환 또는 안구병태, 예를 들어, 나이-관련 황반 변성, 당뇨병성 망막증, 당뇨병성 황반 부종, 망막 정맥 폐색, 미숙아 망막증, 병적 근시 황반 부종, 황반부 모세혈관 확장증, 맥락막 신생 혈관, 포도막염, 또는 녹내장을 예방하거나 치료하는 방법이 제공되며, 이 방법은 아미노산 서열 B1-X3-10-B2를 가진 적어도 하나의 모티프를 포함하는 펩타이드 및 치료제 또는 진단제를 포함하는 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트를, 이것을 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는데, 상기 식에서 B1 및 B2는 동일하거나 다르고 각각은 염기성 아미노산이며 X3- 10는 3 내지 10개의 동일하거나 다른 비-산성 아미노산의 서열이고, 상기 치료제 또는 진단제는 선택적으로 링커에 의해 상기 펩타이드에 결합된다.
본 발명은 단지 예시의 방법으로 및 다음 도면을 참조하여 더 상세히 기술된다.
도 1은 Harvard Fast Micro-Equilibrium Dialyzer에 대한 도이다. 각각의 투석기는 폴리테트라플루오로에틸렌(PTFE)으로 만들어져 있고 100 kDa 분자량 컷 오프(MWCO) 셀룰로스 아세테이트 막의 측면에 250 μl 챔버를 포함한다. 상기 챔버는 실온에서 최대 8시간 동안 배양되었고, 한 챔버에서 다른 챔버로의 확산이 평가되었다. 펩타이드가 배치된 측면은 공여 챔버로 칭한다. 펩타이드가 확산되는 다른 측면은 수신 챔버로 칭한다.
도 2는 Harvard Fast Micro-Equilibrium Dialyzer를 사용한, 토끼 유리체에서의 HABP35-F(바깥쪽 선) 및 RP2-F(안쪽 선)의 확산에 대한 도이다. 실험 시작시, 공여 챔버는 20 mole/ml HABP35-F 또는 RP2-F와 함께 토끼 유리체 200 μl를 포함하였고, 수신 챔버는 펩타이드 없이 토끼 유리체 200 μl를 포함하였다. 100 kDa MWCO 셀룰로스 아세테이트 필터를 통한 펩타이드 확산이 시간이 흐름에 따라 측정되었다. 각 시점에서, 각 챔버의 유리체가 제거되고 펩타이드 농도는 형광 발광을 측정함으로써 정량화되었다. 각 시점에 대하여 네 개의 챔버가 준비되었다(n = 4). 공여 챔버에서, HABP35-F 농도는 2, 4, 6 및 8시간에서 RP2-F보다 훨씬 더 높다(*p<0.05 - One-way ANOVA, 본페로니 사후 검사(Bonferroni post test)). 그러므로 HABP35-F는, 공여 챔버에서, 대조군 펩타이드 RP2-F보다 훨씬 더 큰 정도로 유지되었다. 오차 막대는 표준 편차를 나타낸다.
도 3은 Harvard Fast Micro-Equilibrium Dialyzer를 사용한, 토끼 유리체에서의 HABP35-F(윗선) 및 RP2-F(아랫선)의 확산에 대한 도이다. 이 그래프는 각 시점에서의 공여 챔버 및 수신 챔버 사이의 농도 구배(농도 차이)를 나타낸다. 농도 구배 = 공여 챔버 내 농도 - 수신 챔버 내 농도. 2, 4, 6 및 8시간에서, HABP35-F에 대한 농도 구배는 대조군 펩타이드 RP2-F에 대한 것보다 훨씬 더 높다(*p<0.05 - One-way ANOVA, 본페로니 사후 검사). 그러므로 HABP35-F는, 공여 챔버에서, 대조군 펩타이드 RP2-F보다 훨씬 더 큰 정도로 유지되었다. 오차 막대는 표준 편차를 나타낸다.
도 4는 Harvard Fast Micro-Equilibrium Dialyzer를 사용한, 히알루론산에서의 HABP35-F(각각의 경우에서 왼쪽 컬럼) 및 RP2-F(각각의 경우에서 오른쪽 컬럼)의 확산에 대한 도이다. 토끼 유리체 대신에, 각각의 챔버에 2.5 mg/ml 히알루론산(HA), 또는 HEPES 완충된 식염수(HBS)가 로딩되었다. 공여 챔버 및 수신 챔버에서, HABP35-F 또는 RP2-F의 농도는 8시간 시점에 측정되었다(n = 3). 그 다음에 농도 구배가 결정되었다(공여 챔버 및 수신 챔버의 농도 간의 차이). HA의 존재시, HABP35-F는, 공여 챔버에서, 훨씬 더 큰 농도 구배로 나타난 바와 같이 대조군 펩타이드 RP2-F보다 훨씬 더 큰 정도로 유지되었다(*p<0.05 - One-way ANOVA, 본페로니 사후 검사). 이러한 결과는 HBS가 단독으로 존재하는 경우에서는 나타나지 않았다. 그러므로 토끼 유리체에서의 HABP35-F의 체류는 HA와의 상호작용에 기인한 것이다. 오차 막대는 표준 편차를 나타낸다.
도 5는 48시간 후 래트 유리체에서의 HABP35-F 및 RP2-F의 체류에 대한 도이다. HABP35-F 또는 RP2-F(250 nmole/ml) 2.5 μl이 성체 수컷 Sprague Dawley 래트의 유리체로 주사되었다. 48시간 후 눈이 제거된다. 각막 및 수정체가 제거되고 안배(eye cup)는 말타 십자(Maltese cross)를 향해 열린다. 유리체 및 망막은 형광 현미경을 사용하여 사진 촬영되었다(동일한 노출 설정 사용). A) 주사 후 48시간에 유리체에서의 HABP35-F의 형광 발광. B) 주사 후 48시간에 유리체에서의 RP-F의 형광 발광. C) 주사 후 48시간에 유리체에서의 HABP35-F의 형광 발광을 나타내는 콜라주(Collage) 사진. 48시간 후 대조군 펩타이드 RP2-F와 대조적으로 HABP35-F의 주사 후 유리체에서 눈에 띄게 더 형광인 펩타이드가 보인다.
도 6은 시간이 흐름에 따른 래트 유리체에서의 HABP35-FP(윗선) 및 RP2-F(아랫선)의 생체 내 확산 연구에 대한 도이다. HBS 중 250 nmole/ml 펩타이드 2.5 μl가 성체 수컷 Sprague Dawley 래트의 유리체로 주사되었다. 다른 시점(0, 8, 24, 72, 168시간)에 래트가 희생되고 유리체 내 펩타이드의 농도가 형광 발광에 의해 측정되었다. 각각의 펩타이드에 대하여 세 개의 안구가 각 시점에 사용되었다(n = 3). 래트 유리체에서, RP2-F와 비교하여, 시간이 흐름에 따라, HABP35-FP의 체류가 증가되었다. 두 개의 펩타이드 간의 농도 차이는 24, 72 및 168시간에 통계적으로 유의하였다(각각 p=0.034, 0.011 및 0.006 - 언페어드 t 테스트(unpaired t test)). 오차 막대는 표준 편차를 나타낸다.
도 7은 비-공유 결합에 의해 결합된 HA로의 Pep1-B, HABP42-B, HABP35-B 및 RP-B의 결합에 대한 도이다. 네 개의 그래프는 HA의 존재(각각의 경우에서 윗선) 및 부재시(각각의 경우에서 아랫선)(각각 총 결합 및 비-특이적 결합) 차단된 웰로의 결합을 나타낸다. 세 번의 ELISA가 각각의 농도에 대하여 수행되었다(n = 3). 오차 막대는 표준 편차를 나타낸다.
도 8은 비-공유 결합에 의해 결합된 HA로의 HABP35-B, HABP42-B, Pep1-B, 및 RP-B의 특이적 결합(원점에서 가장 높은 초기 반응의 순서)에 대한 도이다. 특이적 결합은 도 7에서 나타난 측정값으로부터, HA 로딩된 웰의 A450에서 블랭크(blank) 웰의 A450을 뺌으로써 얻어졌다. 각각의 농도에 대하여 세 번의 ELISA가 수행되었다(n = 3). HABP42-B 및 Pep1-B는 둘 다 히알루론산으로의 특이적 결합을 나타냈으며, 이것은 25 내지 50 nmole/ml의 농도에서 포화에 도달했다(플래토(plateau) 형성으로 나타남). RP-B와 비교하면, HABP42-B 및 Pep1-B는 둘 다 테스트된 모든 농도에서 훨씬 더 큰 특이적 결합을 나타냈다(p<0.0001 - One-way ANOVA). HABP35-B는 HABP42-B 또는 Pep1-B보다 10배 낮은 농도에서 특이적 결합을 나타냈다. 하지만 높은 비-특이적 결합으로 인해, 그것의 특이적 신호는 더 높은 농도에서는 악화되었다. 오차 막대는 표준 편차를 나타낸다.
도 9는 교차 결합의 화학 반응에 대한 도이다. A) 항-IL-1β 항체(마우스 항-인간)(왼쪽)는 가교제(EMCH)(중간)를 사용하여 히알루론산 결합 펩타이드(HABP35)(오른쪽)에 공유 결합에 의해 결합되었다. 반응성 기는 세 문자 약어로 나타낸다: Ald = 알데하이드, Hyd = 히드라지드, Mal = 말레이미드, Sul = 설프히드릴. 반응 1은 반응 2 이전에 일어났다. B) 반응 1. C-말단에 시스테인 잔기를 가진 HABP35가 제조되었다. 이것은 시스테인 잔기 상의 설프히드릴 기 및 가교제 상의 말레이미드 반응 기 사이의 교차 결합을 허용하며, 안정한 티오에테르 결합을 형성한다. C) 반응 2. 항체 상의 당 잔기는 산화되어 알데하이드 기를 형성하였다. 그 다음에 이것은 가교제 상의 히드라지드 반응성 기와 교차 결합되었으며, 안정한 히드라존 결합을 형성한다(Piercenet Ltd에서 제공한 도면 부분 B & C). 케톤 또는 알데하이드 기는 나트륨 메타-페리오데이트로와 다당류 번역후 변형(글리코실화)을 산화시킴으로써 당단백질에서 생성될 수 있다. 카르보닐 기가 항체의 당 잔기 상에 존재하기 때문에, 이 기들의 교차 결합은 항체의 항원-결합 부위를 변경하지 않는 이점을 갖는다.
도 10은 토끼 유리체에 의한 HABP35-F의 변성에 대한 베스타틴의 효과에 대한 도이다. 베스타틴(250 μM)은 토끼 유리체에서 6시간 배양 후 UPLC-MS에 의해 검출 가능한 HABP35-F의 양(10 nmole/ml)을 크게 증가시켰다(p=0.01). UPLC-MS = 초고성능 액체 크로마토그래피 - 질량 분석법.
도 11은 토끼 유리체에서 6시간 배양 후, UPLC-MS에 의한 HABP35-F 검출에 대한 프로테아제 억제제 아프로티닌(8 μM), 베스타틴(500 μM), E-64(150 μM), 및 류펩틴(200 μM)의 효과에 대한 도이다. 프로테아제 억제제 칵테일은 검출된 HABP35-F의 양을 증가시키는 것으로 보였다. 실험은 세 번 수행되었다(n = 3). UPLC-MS = 초고성능 액체 크로마토그래피 - 질량 분석법.
도 12는 Harvard Fast Micro-Equilibrium Dialyzer를 사용한, 토끼 유리체에서의 HABP35-FP의 확산에 대한 도이다. 각 시점에서, 각각의 챔버의 유리체가 제거되었고 펩타이드 농도는 형광 발광을 측정함으로써 정량화되었다. HABP35-FP는 공여 챔버에서 상당한 정도로 유지되었고, 펩타이드의 총량(각 챔버에서)은 펩타이드의 최소한의 변성이 관찰되었다는 것을 나타냈다. TC-A는 공여 챔버에 해당한다. BC-A는 수신 챔버에 해당한다. T-A는 펩타이드의 총량에 해당한다.
도 13은 Harvard Fast Micro-Equilibrium Dialyzer를 사용한, 히알루론산에서의 HABP35-F의 확산에 대한 도이다. 각 시점에서, 각 챔버의 히알루론산이 제거되었고 펩타이드 농도는 형광 발광을 측정함으로써 정량화되었다. HABP35-F는 공여 챔버에서 상당한 정도로 유지되었고, 펩타이드의 총량(각 챔버에서)은 펩타이드의 최소한의 변성이 관찰되었다는 것을 나타냈다. TC-A는 공여 챔버에 해당한다. BC-A는 수신 챔버에 해당한다. T-A는 펩타이드의 총량에 해당한다.
도 14는 Harvard Fast Micro-Equilibrium Dialyzer를 사용한, 토끼 유리체에서의 HABP35-F의 확산에 대한 도이다. 각 시점에서, 각각의 챔버의 유리체가 제거되었고 펩타이드 농도가 측정되었다. HABP35-F는 공여 챔버에서 유지되었지만, 공여 챔버 및 수신 챔버에서 HABP35-F의 농도 간의 불일치는 펩타이드의 일부 변성이 일어났다는 것을 제안한다.
실시예
실시예 1 - 유리체에서의 HABP35-F의 확산 성질
라벨링 분자 및 HABP35 사이에서 입체 장해를 방지하기 위해 C-말단 영역에 첨가된 링커 서열(GGGS)을 가진 라벨링된 HABP35를 제조하였다(GenScript Inc, USA). C-말단 리신 잔기를 플루오레세인 아이소티오시아네이트(FITC)로 라벨링하였다. 변형된 HABP35 펩타이드(HABP35-F)의 서열은 다음과 같다:
HABP35-F
LKQKIKHVVKLKVVVKLRSQLVKRKQN-GGGS-K(FITC)-아미드
순도: 95.3%
분자량: 4013.9
HABP35와 유사한 분자량을 가진 대조군 펩타이드(RP2-F)를 또한 제조하였다. 그것을 이미 나타난 서열을 사용하여 히알루론산으로의 유의한 결합이 없음을 나타내도록 디자인하였다(Mummert et al. Development of a peptide inhibitor of hyaluronan-mediated leukocyte trafficking. J Exp Med . 2000; 18; 192(6): 769-779):
RP2-F
SATPASAPYPLAGGGSSATPASAPYPLAGGGS-K(FITC)-아미드
순도: 95.1%
분자량: 3305.61
두 펩타이드의 순도를 고성능 액체 크로마토그래피를 사용하여 확인하였다. 분자 질량을 전기 분무 질량 분석법(electrospray mass spectrometry)을 사용하여 확인하였다. 펩타이드를 각각 HABP35-F 및 RP2-F로 칭했다.
유리체에서의 HABP35-F의 확산 성질을 연구하기 위해서, Fast Micro-Equilibrium Dialyzers(250μl 챔버 부피)를 Harvard Apparatus Ltd(UK)로부터 구입하였다. 각각의 투석기는 셀룰로스 아세테이트 막(100 kDa의 분자량 컷 오프)으로 구분된 두 개의 250 μl 챔버를 포함한다(도 1). 20 nmole/ml HABP35-F 또는 RP2-F를 함유하는 토끼 유리체(Pel-freez Ltd, USA) 200 μl를 투석기의 한 측면(공여 챔버)에 배치하는 한편, 토끼 유리체(펩타이드 없음) 200 μl를 다른 측면(수신 챔버)에 배치하였다. HABP35-F 및 RP2-F가 투석기의 한 측면에서 다른 측면으로 확산되는 속도를 시간이 흐름에 따라 평가하였다. 각각의 확산 실행에 대하여 네 개의 투석기를 설정하여 2, 4, 6, 및 8시간에 샘플링하였다(시점 당 하나의 투석기).
각 시점에서 한 투석기의 각각의 측면으로부터 유리체를 샘플링하였다. 각 챔버에서 형광 발광(여기 파장 490 nm, 방사 파장 510 - 570 nm)(플루오레세인의 피크 형광 발광에 해당함)을 측정함으로써 펩타이드의 농도를 정량화하였다. 농도 값을 얻기 위해 형광 발광을 각 펩타이드에 대한 표준 농도 곡선과 비교하였다.
대조군 펩타이드 RP2-F는 8시간 동안 막을 통해 확산되어, 평형에 거의 도달하였다(수신 챔버에서의 농도와 동일한 공여 챔버에서의 농도)(도 2). 또한, 농도 구배(공여 챔버 및 수신 챔버 간의 농도 차이)는 거의 0에 도달하였다(도 3). HABP35-F는 막을 통해 더 느리게 확산되어, 8시간까지는 공여 챔버에 더 높은 농도가 남겨져 있다(RP2-F와 비교하여)(도 2). 또한, 농도 구배는 HABP35-F에 대하여 훨씬 더 높게 유지되었으며, 이는 공여 챔버에서의 체류를 나타낸다(도 3).
신생 토끼 유리체를 상기 기술된 실험에 사용하였다(Pel-freez Biologicals Ltd). 그것을 먼저 해동하고, 앨리쿼트하여, -20℃에서 다시 냉동시켰다. 그 다음에, 1.8% HCl를 첨가하여 해동된 샘플을 7.2 - 7.4의 생리학적 pH로 만들었다. 그 다음에, Heraeus Biofuge Fresco 원심분리기(Kendro Laboratory Products Ltd)에서 토끼 유리체를 13,000으로 10분 동안 원심분리하여, 불용성 재료를 제거하였다.
실시예 2 - 히알루론산으로의 HABP35-F의 결합 성질
공여 챔버에서의 체류가 히알루론산 (HA)과의 상호작용 때문인지를 평가하기 위해서, 2.5 mg/ml HA의 용액(HEPES 완충된 식염수 중)을, 토끼 유리체 대신에, 각 챔버에 첨가하였다. 20 nmole/ml HABP35-F 또는 RP2-F를 공여 챔버에 첨가하였고 확산을 8시간 동안 측정하였다. 각 시점에 대하여 세 개의 챔버를 사용하였다(n = 3). 대조군으로서, HEPES 완충된 식염수(HBS)만에서의 확산을 또한 평가하였다. 8시간 후, HA에서의 HABP35-F에 대한 농도 구배가 RP2-F에 비해 더 컸다. 펩타이드 확산이 HBS 단독에서 평가될 때는 그렇지 않았다(도 4). 이것은 토끼 유리체에서 HABP35-F 체류가, 적어도 부분적으로는, HA와의 상호작용 때문일 수 있다는 것을 나타낸다.
실시예 3 - 변성 연구
토끼 유리체에 존재하는 프로테아제에 의한 HABP35-F의 변성을 평가하기 위해서, HABP35-F를 12시간 동안 토끼 유리체에서 배양하였다. 토끼 유리체 내 HABP35-F의 샘플을 0 및 12시간에 채취하였고 HABP35-F에 대한 질량 스펙트럼 흔적을 비교하였다. 0시간에서, 질량 스펙트럼은 온전한 HABP35-F를 나타내는 이온을 함유하였다. 12시간에서, 이 이온들은 여전히 존재하였다(502.3, 574.1, 669.5, 및 803.7의 m/z 값, 4012의 MW를 가진 분자를 나타냄). 하지만, 새로운 이온 세트가 또한 12시간에 검출되었다(557.9, 651.0 및 781.0의 m/z 값, 3899의 MW를 가진 새로운 분자를 나타냄). 이 새로운 분자는 온전한 HABP35-F보다 113 Da 더 가벼웠다. 펩타이드 가수분해를 통한 N-말단 류신 잔기의 손실은 HABP35-F보다 113 Da 더 가벼운 펩타이드 단편으로 이어질 것이다. 그러므로, 이 새로운 분자는 N-말단 류신이 손실된 HABP35-F인 것으로 생각되었다.
이 새로운 분자는 HABP35-F의 부재시엔 나타나지 않았으며, 따라서 이 펩타이드로부터 기원했다는 것을 나타낸다. 단편화가 N-말단에서 일어났다는 것을 확인하기 위해서(C-말단과 대조적으로), HABP35-B를 토끼 유리체와 함께 12시간 동안 배양하였다. HABP35-B와 함께 새로운 이온이 또한 나타났는데, HABP35-F로 보이는 것과 비슷한 MW 손실을 함유한다. 이것은 HABP35-F 및 HABP35-B 둘 다 다른 C-말단(다른 라벨링 변형으로 인해 다른)과는 대조적으로 동일한 N-말단에서 변경을 거친다는 것을 나타냈다.
HABP35-F가 N-말단에서 효소에 의해 분해되고 있다는 것을 추가로 확인하기 위해서, 배양 후 검출될 수 있는 HABP35-F의 비율을 베스타틴을 가지고 또는 베스타틴 없이 평가하였다. 베스타틴은 아미노펩티다제 억제제이다. 아미노펩티다제는 펩타이드/단백질의 N-말단으로부터 아미노산의 분열을 촉진한다. 베스타틴은 토끼 유리체와 함께 6시간 배양 후 검출되는 HABP35-F의 비율을 크게 증가시켰다(p = 0.01 - 언페어드 스튜던트 t-테스트(unpaired student t-test))(도 10). 이것은 아미노펩티다제가 HABP35-F의 효소적 분해에 수반된다는 것을 확인하였다.
이 변성이 펩타이드를 임상적 처치에 대하여 비효율적으로 만드는 것은 아니지만, 토끼 유리체에서 효소적 분해에 대한 N-말단 류신 잔기의 취약성은 문제가 되는데, 이는 SIM 방식의 질량 분석법을 사용하여 남아있는 모든 펩타이드(온전한 및 단편화된 버전 둘 다)를 정량화하는 능력을 감소시키기 때문이다. HABP35-F 단편은 SIM 방식을 사용하여 HABP35-F를 스캔할 때 검출되지 않을 것이다. 따라서, 검출을 최적화하기 위해서, 추가의 다른 프로테아제 억제제를 첨가하였다(아프로티닌, 베스타틴, E-64, 류펩틴). 이 프로테아제 억제제들은 HABP35-F를 보호하는 경향을 나타냈다(도 11).
이 변성은 펩타이드의 N-말단이 D-아미노산을 포함하고 및/또는 보호기를 포함할 때는 보이지 않았다. 예를 들어, 토끼 유리체에서의 확산 연구에서 HABP35-FP의 수준이 공여 챔버 및 수신 챔버 사이에서 거의 일정한 것으로 관찰되었고, 공여 챔버에서의 체류가 분명히 드러났다(도 12). 유사한 결과가 히알루론산에서의 HABP35-F의 확산에 대하여 관찰되었지만(도 13), 토끼 유리체에서의 HABP35-F의 확산은 펩타이드의 총량의 큰 손실을 나타냈다(도 14).
실시예 4 - HABP35 체류의 생체 내 모델
D-구조로의 말단 류신의 전환을 통해 및 아세틸화에 의해, 효소적 분해로부터 N-말단을 보호하기 위해 HABP-35-F를 변형시켰다. 새로운 펩타이드는 HABP35-FP로 칭한다. 성체 수컷 Sprague Dawley 래트를 생체 내 모델로서 사용하였다. 250 nmole/ml HABP35-FP 또는 RP2-F 2.5 μl를 유리체로 주사하였고 동물을 다양한 시점에 도태시켰다. 유리체를 추출하였고 추출된 유리체의 형광 발광을 평가함으로써 펩타이드 농도를 측정하였다. 각각의 펩타이드에 대하여, 각각의 시점에, 세 개의 안구를 평가하였다. 이에 더하여, 유리체의 형광 발광을 안대 플랫 마운트(flat mount) 상에서 형광 현미경을 사용하여 직접 평가하였다.
48시간에, 형광 현미경 상에서, RP2-F에 비해, HABP35-FP의 체류가 증가하였다(도 5). 이 체류는 주사 후 적어도 168시간까지 이어졌다(도 6).
실시예 5 - 펩타이드-항체 복합체의 제조
각각의 시스테인 라벨링된 펩타이드(HABP35-C 또는 RP2-C)를 250 μM의 농도로 탈기된(degassed) 포스페이트 완충된 식염수(PBS, pH 7.2, Invitrogen Ltd) 1000 μl에 용해시켰다. 디메틸 설폭시드(DMSO, Sigma-Aldrich Ltd)에 용해된 50 mM 3,3'-N-[ε-말레이미도카프로산] 히드라지드, 트리플루오로아세트산 염(EMCH) 50 μl를 즉시 첨가하였다. 혼합물을 아르곤으로 덮고 밀봉하여 이황화 결합의 산화 형성을 방지하였다. 그것을 빛으로부터 보호하였고 실온에서 2시간 동안 배양하였다.
결합되지 않은 EMCH를 제거하기 위해서, 반응 혼합물을 3 ml 2 kDa 분자량 컷-오프(MWCO) Slide-A-Lyzer Dialysis Cassette(Thermo Fisher Scientific/Pierce Ltd)에서 500 ml PBS에 대하여 투석하였다. PBS를 6 및 12시간에 교환하였으며, 투석을 24시간에 완료하였다. 투석을 4℃에서 수행하였다.
250 μg 마우스 단클론성 항 인간 IL-1β 항체(R&D Systems Ltd)를 500 μl 차가운 멸균 PBS에 용해시켰다. 나트륨 메타-페리오데이트(Thermo Fisher Scientific/Pierce Ltd)를 산화 버퍼(20 mM 나트륨 아세테이트, pH 5.5)에서 20 mM의 농도로 용해시켰다. 항체의 부피(500 μl)와 동일한 부피를 제조하였다. 이 용액을 얼음 위에서 유지하였고 빛으로부터 보호하였다. 차가운 나트륨 메타-페리오데이트 용액 500 μl를 항체 용액 500 μl에 첨가하였다. 그것을 재빨리 실온으로 만들었고 SB3 Variable Speed Rotary Mixer(Stuart Ltd) 상에서 20 rpm으로 30분 동안 배양하였으며, 빛으로부터 보호하였다. 버퍼 교환(PBS로 대체된 산화 버퍼)을 제조사의 지시에 따라 7 kDa MWCO Zeba Spin Desalting Columns(Thermo Fisher Scientific/Pierce Ltd) 5 ml을 사용하여 수행하였다.
펩타이드-EMCH 복합체를 산화된 항체와 혼합하였다. 혼합물을 회전 교반기(orbital shaker)(Heidolph Ltd) 상에서 30 rpm으로 실온에서 2시간 동안 배양하였다. 결합되지 않은 펩타이드-EMCH 복합체를 제거하기 위해서, 반응 혼합물을 3 ml 20 kDa MWCO Slide-A-Lyzer Dialysis Cassette에서 500 ml PBS에 대하여 투석하였다. PBS를 6 및 12시간에 교환하였으며, 투석을 24시간에 완료하였다. 투석을 4℃에서 수행하였다.
그 다음에, 펩타이드-EMCH-항체 복합체를 Costar Spin-X 0.22 μm 셀룰로스 아세테이트 원심분리 튜브 필터(Corning Ltd)를 사용하여 여과 멸균하였다. 그 다음에, 그것을 Amicon Ultra 30 kDa MWCO 원심분리 필터 유닛(Millipore Ltd)을 사용하여 농축하였다.
실시예 6 - HA 바인더 스크리닝 방법
투명한 폴리스티렌 Amine Surface 96 웰 ELISA 플레이트(Corning Life Sciences Ltd)의 웰에 0.1 M 2-[N-모르폴리노] 에탄 설폰산(MES, pH 4.5-5, Sigma-Aldrich Ltd) 중 1 mg/ml HA 나트륨 염(Sigma-Aldrich Ltd) 100 μl를 로딩하였다. 웰을 회전 교반기 상에서 실온에서 3시간 동안 배양하였다. 모든 추가 배양은 회전 교반기 상에서 실온에서 일어났다.
그 다음에, 웰을 세척 버퍼(포스페이트 완충된 식염수(PBS) 중 0.05% Tween 20 (Sigma-Aldrich Ltd), pH 7.2 - 7.4)로 세 번 세척하였다. PBS를 하기에 따라 제조하였다: 137 mM 나트륨 클로라이드, 2.7 mM 칼륨 클로라이드, 8.1 mM 나트륨 포스페이트 2염기, 1.5 mM 칼륨 포스페이트 1염기, pH 7.2-7.4, 0.22 μm 여과됨. PBS 중 3% BSA(Sigma-Aldrich Ltd) 300 μl를 사용하여 각 웰을 차단하였다. 90분 배양 후 웰을 다시 세 번 세척하였다. 그 다음에, 다른 농도의 비오티닐화된 HA 결합 펩타이드, 또는 대조군 펩타이드를 첨가하여, 3% BSA PBS 100 μl에 용해시켰고 1시간 동안 배양하였다. 세 번의 추가 세척을 수행하였다. 결합된 비오티닐화된 펩타이드를 검출하기 위해, 스트렙타비딘-호스 래디쉬 퍼옥시다제(S-HRP)(R&D Systems Ltd)(PBS에서 1:200의 작용 농도로 희석됨) 100 μl를 각 웰에 첨가하였다. 웰을, 빛으로부터 보호하면서, 20분 동안 배양한 후 이어서, 추가로 세 번 세척하였다. 테트라메틸벤지딘(TMB)/H2O2 100 μl를 각 웰에 첨가하였다. 웰들을 10분 동안 배양하였으며, 빛으로부터 보호하였다. 반응을 1 M H2SO4 50 μl로 중단시켰다. 각 웰의 광학적 밀도를 450 nm로 설정된 Modulus Microplate Reader를 사용하여 즉시 판독하였다. 일원 분산 분석법(ANOVA)을 사용하여 군들 사이에서 통계적 유의성을 결정하였다(GraphPad Prism 5, GraphPad software Ltd).
표 2는 이 방법의 파라미터를 요약한다.
단계 시약 / 생성물 희석제 기간 (분) 온도 (℃)
플레이트 아민 표면 플레이트 NA NA NA
샘플 1 mg/ml HA 0.1 M MES (pH 4.5-5.0) 180 21
차단 3% BSA PBS 90 21
검출 HABP (가변적 농도) PBS 중 3% BSA 60 21
1:200 S-HRP PBS 20 21
TMB/H2O2 NA 10 21
H2SO4 NA NA 21
약어: HA = 히알루론산, MES = 2-(N-모르폴리노)에탄설폰산, PBS = 포스페이트 완충된 식염수, S-HRP = 스트렙타비딘-호스 래디쉬 퍼옥시다제, TMB = 테트라메틸벤지딘.
실시예 7 - 펩타이드 및 컨쥬게이트
HABP35:
LKQKIKHVVKLKVVVKLRSQLVKRKQN-아미드 (서열 번호 1)
HABP35-F:
LKQKIKHVVKLKVVVKLRSQLVKRKQN-GGGS-K(FITC)-아미드 (서열 번호 239)
HABP35-FP
아세틸 d-(L) KQKIKHVVKLKVVVKLRSQLVKRKQN-GGGS-K(FITC)-아미드 (서열 번호 240)
HABP35-C
아세틸 d-(L) KQKIKHVVKLKVVVKLRSQLVKRKQN-GGGS-K(비오틴)-C-아미드 (서열 번호 241)
N-말단에서 비오틴 라벨링:
비오틴-LKQKIKHVVKLKVVVKLRSQLVKRKQN-아미드 (서열 번호 242)
C-말단에서 비오틴 라벨링:
LKQKIKHVVKLKVVVKLRSQLVKRKQN-GGGS-K(비오틴)-아미드 (서열 번호 243)
N-말단에서 보호:
아세틸 D-(L) KQKIKHVVKLKVVVKLRSQLVKRKQN-GGGS-K(FITC)-아미드 (서열 번호 244)
키네스타틴-HABP35
{pGlu}IPGLGPLR-GGGS-LKQKIKHVVKLKVVVKLRSQLVKRKQN-아미드 (서열 번호 245)
HABP35-키네스타틴
아세틸-{d-Leu}KQKIKHVVKLKVVVKLRSQLVKRKQN-GGGS-QIPGLGPLR-아미드 (서열 번호 246)
참조 펩타이드:
HABP42-F:
d-(STMMSRSHKTRSHHV) l-(GGGS-K(FITC)-아미드) (서열 번호 247)
Pep1-B:
GAHWQFNALTVR-GGGS-K(비오틴)-아미드 (서열 번호 248)
RP-F:
SATPASAPYPLA-GGGS-K(FITC)-아미드 (서열 번호 249)
RP2-F:
SATPASAPYPLAGGGSSATPASAPYPLAGGGS-K(FITC)-아미드 (서열 번호 250)
RP2-C
SATPASAPYPLA-GGGS-K(비오틴)-C-아미드 (서열 번호 251)
SEQUENCE LISTING <110> UCL Business PLC <120> Drug Delivery System <130> P116046PCT <160> 251 <170> BiSSAP 1.3 <210> 1 <211> 27 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> peptide derived from the mouse RHAMM receptor <220> <223> residue 1 can be L or D amino acid <400> 1 Leu Lys Gln Lys Ile Lys His Val Val Lys Leu Lys Val Val Val Lys 1 5 10 15 Leu Arg Ser Gln Leu Val Lys Arg Lys Gln Asn 20 25 <210> 2 <211> 26 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> peptide derived from the mouse RHAMM receptor <220> <223> residue 1 can be L or D amino acid <400> 2 Leu Lys Gln Lys Ile Lys His Val Val Lys Leu Lys Val Val Val Lys 1 5 10 15 Leu Arg Ser Gln Leu Val Lys Arg Lys Gln 20 25 <210> 3 <211> 25 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> peptide derived from the mouse RHAMM receptor <220> <223> residue 1 can be L or D amino acid <400> 3 Leu Lys Gln Lys Ile Lys His Val Val Lys Leu Lys Val Val Val Lys 1 5 10 15 Leu Arg Ser Gln Leu Val Lys Arg Lys 20 25 <210> 4 <211> 24 <212> PRT 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Claims (44)

  1. 아미노산 서열 B1-X3-10-B2를 가진 적어도 하나의 모티프(motif)를 포함하는 단리된 펩타이드로, 상기 B1 및 B2는 동일하거나 다르고 각각은 염기성 아미노산이며, 상기 X3- 10는 3 내지 10개의 동일하거나 다른 비-산성 아미노산의 서열이고, 상기 펩타이드의 N-말단은 D-아미노산 및 보호기 중 하나 이상을 포함하는 펩타이드.
  2. 제1항에 있어서, 상기 펩타이드는 서열 번호 1, 또는 이것의 기능적 일부 또는 단편에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 서열을 갖는, 펩타이드.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 펩타이드의 N-말단은 D-아미노산을 포함하는 펩타이드.
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 펩타이드의 N-말단은 보호기를 포함하는 펩타이드.
  5. 제4항에 있어서, 상기 보호기는 아세틸, 벤조일, 벤질, 삼차-부톡시카르보닐, 카보벤질옥시, p-메톡시베닐 카르보닐, p-메톡시벤질, 9-플루오레닐메틸옥시카르보닐, 3,4-디메톡시벤질, p-메톡시페닐, 토실, 및 노실로 구성된 군으로부터 선택되는 펩타이드.
  6. 제5항에 있어서, 상기 보호기는 아세틸인 펩타이드.
  7. 제2항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 기능적 일부 또는 단편은 서열 번호 1로부터 적어도 5개의 인접한 아미노산을 포함하고, 히알루론산에 대한, 상기 서열 번호 1에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 펩타이드의 친화도의 적어도 70% 및 콜라겐에 대한, 서열 번호 1에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 펩타이드의 친화도의 적어도 70% 중 하나 이상을 나타내는 펩타이드.
  8. 제2항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 펩타이드는 표 1에서 나타난 것들 중 어느 것에 따르는 서열을 갖고, 히알루론산에 대한, 상기 서열 번호 1에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 펩타이드의 친화도의 적어도 70% 및 콜라겐에 대한, 상기 서열 번호 1에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 펩타이드의 친화도의 적어도 70% 중 하나 이상을 나타내는, 이것의 기능적 일부/단편인 펩타이드.
  9. 아미노산 서열 B1-X3-10-B2를 가진 적어도 하나의 모티프를 포함하는 펩타이드를 포함하는 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트로, 상기 B1 및 B2는 동일하거나 다르고 각각은 염기성 아미노산이며, 상기 X3- 10는 3 내지 10개의 동일하거나 다른 비-산성 아미노산의 서열이고, 상기 펩타이드의 N-말단은 D-아미노산 및 보호기 중 하나 이상을 포함하고, 치료제 또는 진단제를 포함하며, 상기 치료제 또는 진단제는 선택적으로 링커에 의해 상기 펩타이드에 결합되는, 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트.
  10. 제9항에 있어서, 상기 펩타이드는 서열 번호 1, 또는 이것의 기능적 일부 또는 단편에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 서열을 갖는 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트.
  11. 제9항 또는 제10항에 있어서, 상기 보호기는 상기 펩타이드의 N-말단 아미노산의 질소 상에 위치한 질소 보호기이고, 아세틸, 벤조일, 벤질, 삼차-부톡시카르보닐, 카보벤질옥시, p-메톡시베닐 카르보닐, p-메톡시벤질, 9-플루오레닐메틸옥시카르보닐, 3,4-디메톡시벤질, p-메톡시페닐, 토실, 및 노실로 구성된 군으로부터 선택되는, 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트.
  12. 제11항에 있어서, 상기 보호기는 아세틸인 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트.
  13. 제9항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 치료제 또는 진단제는 상기 펩타이드에 공유 결합에 의해 결합되는 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트.
  14. 제9항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 치료제 또는 진단제는 상기 펩타이드에 비-공유 결합에 의해 결합되는 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트.
  15. 제14항에 있어서, 상기 치료제 또는 진단제는 비오틴-스트렙타비딘 복합체에 의해 상기 펩타이드에 비-공유 결합에 의해 결합되는, 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트.
  16. 제15항에 있어서, 상기 펩타이드는, 선택적으로 링커를 통해, 상기 비오틴 모이어티에 공유 결합에 의해 결합되고, 상기 치료제 또는 진단제는, 선택적으로 링커를 통해, 상기 스트렙타비딘 모이어티에 공유 결합에 의해 결합되는 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트.
  17. 제15항에 있어서, 상기 펩타이드는, 선택적으로 링커를 통해, 상기 스트렙타비딘 모이어티에 공유 결합에 의해 결합되고, 상기 치료제 또는 진단제는, 선택적으로 링커를 통해, 상기 비오틴 모이어티에 공유 결합에 의해 결합되는 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트.
  18. 제9항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 링커가 존재하는 경우, 상기 링커는 단쇄 펩타이드, 폴리에틸렌 글리콜 올리고머, C1-20 알킬렌 기, C2-20 알케닐렌 기, C1-20 알킬렌 또는 C2-20 알케닐렌 기로 구분되는 말레이미드 및 히드라지드 작용기, 또는 이것들의 어떠한 조합도 포함하는 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트.
  19. 제18항에 있어서, 상기 링커의 단쇄 펩타이드는 아미노산으로 글리신, 세린, 리신, 시스테인, 글루탐산 및 아스파르트산 중 하나 이상을 포함하는 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트.
  20. 제9항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 링커가 존재하는 경우, 상기 링커는 상기 펩타이드의 C-말단에 위치하는 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트.
  21. 제10항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 기능적 단편은 서열 번호 1로부터 적어도 5개의 인접한 아미노산을 포함하고, 히알루론산에 대한, 상기 서열 번호 1에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 펩타이드의 친화도의 적어도 70% 및 콜라겐에 대한, 상기 서열 번호 1에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 펩타이드의 친화도의 적어도 70% 중 하나 이상을 나타내는 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트.
  22. 제10항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 펩타이드는 표 1에서 나타난 것들 중 어느 것에 따르는 서열을 갖고, 히알루론산에 대한, 상기 서열 번호 1에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 펩타이드의 친화도의 적어도 70% 및 콜라겐에 대한, 서열 번호 1에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 펩타이드의 친화도의 적어도 70% 중 하나 이상을 나타내는, 이것의 기능적 일부/단편인 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트.
  23. 제9항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 진단제는 형광, 발광, 또는 방사성 핵종 라벨을 포함하는 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트.
  24. 제9항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 치료제는 VEGF 억제제, 알파2-아드레날린 작용제, 베타-아드레날린 길항제, 안지오텐신 II 길항제, ACE 억제제, NSAID, 항말라리아제, 코르티코스테로이드, 면역 억제제, 단클론성 항체, 레티노이드, DMARD, 생물학적 치료제, 나이트레이트, 프로스타글란딘, 및 엔도텔린 길항제로 구성된 군으로부터 선택된 적어도 하나인 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트.
  25. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따르는 펩타이드, 또는 제9항 내지 제24항 중 어느 한 항에 따르는 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트, 및 적어도 하나의 약학적으로 허용 가능한 부형제를 포함하는 약학 조성물.
  26. 제25항에 있어서, VEGF 억제제, 알파2-아드레날린 작용제, 베타-아드레날린 길항제, 안지오텐신 II 길항제, ACE 억제제, NSAID, 항말라리아제, 코르티코스테로이드, 면역 억제제, 단클론성 항체, 레티노이드, DMARD, 생물학적 치료제, 나이트레이트, 프로스타글란딘, 및 엔도텔린 길항제로 구성된 군으로부터 선택된 적어도 하나의 추가적인 컨쥬게이션되지 않은 치료제를 더 포함하는 약학 조성물.
  27. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항, 제9항 내지 제24항 중 어느 한 항, 또는 제25항 또는 제26항에 있어서, 치료에 사용되는 것인 펩타이드, 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트, 또는 약학 조성물.
  28. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항, 제9항 내지 제24항 중 어느 한 항, 또는 제25항 또는 제26항에 있어서, 나이-관련 황반 변성, 당뇨병성 망막증, 당뇨병성 황반 부종, 망막 정맥 폐색, 미숙아 망막증, 병적 근시 황반 부종, 황반부 모세혈관 확장증, 맥락막 신생 혈관, 포도막염, 녹내장, 전신성 홍반 루푸스, 관절염, 류머티스성 관절염, 경피증, 다발성 근염, 또는 피부 근염의 예방 또는 처치에 사용되는, 펩타이드, 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트, 또는 약학 조성물.
  29. 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트를 제조하기 위한, 아미노산 서열 B1-X3-10-B2를 가진 적어도 하나의 모티프를 포함하는 단리된 펩타이드의 용도로서, 상기 식에서 B1 및 B2는 동일하거나 다르고 각각은 염기성 아미노산이며, X3- 10는 3 내지 10개의 동일하거나 다른 비-산성 아미노산의 서열이고, 상기 펩타이드의 N-말단은 D-아미노산 및 보호기 중 하나 이상을 포함하는, 용도.
  30. 제29항에 있어서, 상기 펩타이드는 서열 번호 1, 또는 이것의 기능적 일부 또는 단편에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 서열을 갖는 용도.
  31. 제30항에 있어서, 상기 기능적 일부 또는 단편은 서열 번호 1로부터 적어도 5개의 인접한 아미노산을 포함하고, 히알루론산에 대한, 상기 서열 번호 1에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 펩타이드의 친화도의 적어도 70% 및 콜라겐에 대한, 상기 서열 번호 1에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 펩타이드의 친화도의 적어도 70% 중 하나 이상을 나타내는 용도.
  32. 제30항 또는 제31항에 있어서, 상기 펩타이드는 표 1에서 나타난 것들 중 어느 것에 따르는 서열을 갖고, 히알루론산에 대한, 상기 서열 번호 1에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 펩타이드의 친화도의 적어도 70% 및 콜라겐에 대한, 상기 서열 번호 1에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 펩타이드의 친화도의 적어도 70% 중 하나 이상을 나타내는, 이것의 기능적 일부 또는 단편인, 용도.
  33. 아미노산 서열 B1-X3-10-B2를 가진 적어도 하나의 모티프를 포함하는 단리된 펩타이드로, 상기 B1 및 B2는 동일하거나 다르고 각각은 염기성 아미노산이며, 상기 X3-10는 3 내지 10개의 동일하거나 다른 비-산성 아미노산의 서열이고, 안구 질환 또는 안구병태, 예를 들어, 나이-관련 황반 변성, 당뇨병성 망막증, 당뇨병성 황반 부종, 망막 정맥 폐색, 미숙아 망막증, 병적 근시 황반 부종, 황반부 모세혈관 확장증, 맥락막 신생 혈관, 포도막염, 또는 녹내장의 예방 또는 처치에 사용되는 펩타이드.
  34. 제33항에 있어서, 상기 펩타이드는 서열 번호 1, 또는 이것의 기능적 일부 또는 단편에 대하여 적어도 60% 상동성을 가진 서열을 갖는 펩타이드.
  35. 제33항 또는 제34항에 있어서, 상기 펩타이드의 N-말단은 D-아미노산 및 보호기 중 하나 이상을 포함하는 펩타이드.
  36. 안구 질환 또는 안구병태, 예를 들어, 나이-관련 황반 변성, 당뇨병성 망막증, 당뇨병성 황반 부종, 망막 정맥 폐색, 미숙아 망막증, 병적 근시 황반 부종, 황반부 모세혈관 확장증, 맥락막 신생 혈관, 포도막염, 또는 녹내장의 예방 또는 치료에 사용되는, 아미노산 서열 B1-X3-10-B2를 가진 적어도 하나의 모티프를 포함하는 펩타이드를 포함하는 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트로, 상기 B1 및 B2는 동일하거나 다르고 각각은 염기성 아미노산이며, 상기 X3- 10는 3 내지 10개의 동일하거나 다른 비-산성 아미노산의 서열이고, 치료제 또는 진단제를 포함하며, 상기 치료제 또는 진단제는 선택적으로 링커에 의해 상기 펩타이드에 결합되는, 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트.
  37. 히알루론산 결합 물질의 검출 방법으로, 상기 방법은 히알루론산 샘플을 제공하는 단계, 상기 히알루론산 샘플을 테스트 물질과 접촉시키는 단계, 및 상기 테스트 물질 및 상기 히알루론산 사이에서 결합의 존재를 검출하는 단계를 포함하는 방법.
  38. 제37항에 있어서, 상기 히알루론산은 고체 지지물에 비-공유 결합에 의해 결합되는 방법.
  39. 제38 항에 있어서, 상기 고체 지지물은 아민 표면인 방법.
  40. 제37항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 소 혈청 알부민이 차단제 및 희석제 중 하나 이상으로서 이용되는 방법.
  41. 제37항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 검출은 퍼옥시다제 기질의 첨가와 함께 비오티닐화된 테스트 기질 및 스트렙타비딘-호스 래디쉬 퍼옥시다제를 사용하여 수행되는, 방법.
  42. 나이-관련 황반 변성, 당뇨병성 망막증, 당뇨병성 황반 부종, 망막 정맥 폐색, 미숙아 망막증, 병적 근시 황반 부종, 황반부 모세혈관 확장증, 맥락막 신생 혈관, 포도막염, 녹내장, 전신성 홍반 루푸스, 관절염, 류머티스성 관절염, 경피증, 다발성 근염, 또는 피부 근염과 관련된 병태의 예방 또는 치료 방법으로, 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따르는 펩타이드, 제9항 내지 제24항 중 어느 한 항에 따르는 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트, 또는 제25항 또는 제26항에 따르는 약학 조성물을, 이것을 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 방법.
  43. 안구 질환 또는 안구병태, 예를 들어, 나이-관련 황반 변성, 당뇨병성 망막증, 당뇨병성 황반 부종, 망막 정맥 폐색, 미숙아 망막증, 병적 근시 황반 부종, 황반부 모세혈관 확장증, 맥락막 신생 혈관, 포도막염, 또는 녹내장의 예방 또는 치료 방법으로, 아미노산 서열 B1-X3-10-B2를 가진 적어도 하나의 모티프를 포함하는 펩타이드를, 이것을 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하며, 상기 B1 및 B2는 동일하거나 다르고 각각은 염기성 아미노산이며, 상기 X3- 10는 3 내지 10개의 동일하거나 다른 비-산성 아미노산의 서열인 방법.
  44. 안구 질환 또는 안구병태, 예를 들어, 나이-관련 황반 변성, 당뇨병성 망막증, 당뇨병성 황반 부종, 망막 정맥 폐색, 미숙아 망막증, 병적 근시 황반 부종, 황반부 모세혈관 확장증, 맥락막 신생 혈관, 포도막염, 또는 녹내장의 예방 또는 치료 방법으로, 아미노산 서열 B1-X3-10-B2를 가진 적어도 하나의 모티프를 포함하는 펩타이드, 및 치료제 또는 진단제를 포함하는 콜라겐 또는 히알루론산 결합 컨쥬게이트를, 이것을 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하며, 상기 B1 및 B2는 동일하거나 다르고 각각은 염기성 아미노산이며, 상기 X3- 10는 3 내지 10개의 동일하거나 다른 비-산성 아미노산의 서열이고, 상기 치료제 또는 진단제는 선택적으로 링커에 의해 상기 펩타이드에 결합되는 방법.
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Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2015278744B2 (en) * 2014-06-25 2018-09-27 Alcon Inc. Compositions and methods for visualization of the vitreous
SG10201911226QA (en) 2015-09-23 2020-01-30 Genentech Inc Optimized variants of anti-vegf antibodies
JP7008793B2 (ja) * 2018-03-09 2022-01-25 株式会社マンダム 免疫関連疾患の指標の検出方法
AU2019411278A1 (en) * 2018-12-21 2021-08-12 Sapreme Technologies B.V. Saponin conjugates

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040037834A1 (en) * 2000-04-20 2004-02-26 Woloski B. Michael R. Rhamm peptide conjugates
CA2610791C (en) * 2005-06-08 2015-12-01 Cangene Corporation Hyaluronic acid binding peptides enhance host defense against pathogenic bacteria
EP2349339A4 (en) * 2008-10-16 2015-01-07 Kathleen Cogan Farinas EXTENDED MEDICATION DELIVERY SYSTEM
US20150119343A1 (en) * 2011-11-04 2015-04-30 The Texas A & M University System Production of TSG-6 Protein

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