KR20160028032A - 파극천 고온고압 추출물을 함유하는 피부외용제 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 파극천 고온고압 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부외용제 조성물에 관한 것으로서, 좀 더 자세하게는 파극천 추출물을 100~138℃ 및 1.2~2.0 기압의 고온고압 조건에서 추출하여 유효성분의 함량이 향상된 파극천 고온고압 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 피부외용제 조성물로, 피부흡수가 뛰어나며 항산화 효과, 콜라겐 합성 촉진 효과, 주름개선효과, 미백효과, 보습효과, 피부자극 완화효과, 아토피 개선효과 및 항염 효과가 우수하다.

Description

파극천 고온고압 추출물을 함유하는 피부외용제 조성물 {A skin-care agent containing Morinda officinalis extract with high temperature and high pressure treatment}

본 발명은 파극천 고온고압 추출물을 함유하는 피부외용제 조성물에 관한 것으로서, 좀 더 구체적으로는 100~138℃ 온도 및 1.2~2.0 기압에서 추출하여 기존 파극천 추출물과 비교하였을 때 유효성분 함량이 현저히 증가한 것을 특징으로 하는 피부외용제 조성물에 관한 것이다.

자외선에 노출된 피부는 프리라디칼과 활성산소종(Reactive Oxygen Species: ROS)을 생성시켜 피부암, 광독성, 자기면역장애, 광과민증과 피부노화 등을 유발하게 된다(Norins, J. Invest. Dermatol., 39:445, 1962; Cadenas, Ann. Rev. Biochem., 58:79, 1989). 생체 내에서 콜라겐과 같은 세포외기질의 합성과 분해는 적절하게 조절되나, 노화가 진행되면서 그 합성이 점차 감소하며 콜라겐을 분해하는 효소인 기질 금속단백질 분해효소(MMP)의 발현이 촉진되어 피부의 탄력이 저하되고 주름이 형성된다. 또한 이러한 분해효소는 자외선 조사에 의해 활성화되기도 한다. 그러므로 세포 내에서 활성화가 유도되는 MMP 발현을 조절하거나 그 활성을 억제할 수 있는 물질의 개발이 요구되고 있다.

피부질환이란 사람을 포함한 포유동물의 머리털과 손톱, 발톱을 포함하는 모든 피부에 나타나는 이상 소견을 의미하는 것으로, 아토피 알러지를 가진 사람에게서 나타나는 아토피 피부염(atopic dermatitis)이 대표적인 질환이다. 아직까지 아토피 피부염의 원인은 명확히 밝혀지지 않았지만 아토피 피부염 환자의 약 70%에서 아토피의 병력이 있었으며, 알레르기성 체질인 사람에서 호발하고, 특히 다른 알러지 질환인 알러지성 비염, 천식 등을 동반하여 유전적 요인이나 면역 질환의 하나로 이해되고 있다. 아토피 피부염은 초기의 심한 가려움증에 의해 대부분 환자들이 피부를 긁어 이에 따른 2차 감염이 발생하며, 특히 환자의 정신적 불안정 및 감정 상태에 따라 더욱 악화 될 수도 있다. 아토피 피부염은 전 인구의 0.5~1%의 상당히 많은 사람들이 앓고 있고, 어린이의 경우는 5~10%가 고통 받고 있다. 증상이 나타나는 시기는 대체로 생후 2~6개월 내이며, 특히 1세 미만의 영아에게서 가장 많이 나타나고, 85%가 만 5살 안에 나타난다. 아토피성 피부염은 주로 유아기에 자주 발생하지만, 최근에는 사춘기 이후의 환자가 증가하고 있고, 그 병력도 매우 길어지고 있다. 아토피성 피부염의 치료에는 높은 약리효과를 기대할 수 있는 부신피질 호르몬 등의 약제가 사용되고 있다. 그러나, 이와 같은 부신피질 호르몬제의 사용 중지에 의하여 리바운드(약물의 사용정지 후에 일어나는 극적인 환부의 병세약화)가 생기는 것도 잘 알려져 있다. 이와 같은 부작용의 대책으로서, 부신피질 호르몬 등의 호르몬을 포함하지 않는 비스테로이드성 항염증제 또는 항히스타민제 등이 사용되고 있으나 완치가 어려운 상태이다. 따라서 부작용이 없는 아토피 피부염의 경감 또는 치료제 개발이 매우 절실한 실정이다.

사람의 피부는 나이를 먹으면서 끊임없이 변화하게 된다. 피부 노화는 크게 자연노화(혹은 내인성 노화)와 외적 노화로 구분되며(E.B. Doris, Cosmetics & Toiletories, 111, 31-37, 1996), 자연 노화(내인성 노화)는 유전적인 요소에 영향을 받기 때문에 인위적인 조절이 어려운 반면, 외적 노화는 환경적인 요소에 영향을 받기때문에 인위적인 조절이 비교적 용이하다. 대표적인 외적 노화 인자로는 자외선을 들 수 있으며, 가장 두드러진 외적 노화현상이 바로 주름형성이다(H.W. Daniell, Ann Intern Med, 75, 873-880, 1971, G.L. Grove, J AmAcad Dermatol, 21, 631-637, 1989, C.E. Griffiths et al, Arch Dermatol, 128, 347-351, 1992).

한편, 자외선에 노출된 피부는 프리라디칼과 활성산소종을 생성시켜 피부암, 광독성, 자기면역장애, 광과민증과 피부노화 등을 유발하게 된다(Norins, J. Invest. Dermatol., 39:445, 1962; Cadenas, Ann. Rev. Biochem., 58:79, 1989). 생체 내에서 콜라겐과 같은 세포외 기질의 합성과 분해는 적절하게 조절되나 노화가 진행되면서 그 합성이 감소하며 콜라겐을 분해하는 효소인 기질 금속단백질분해효소(MMP)의 발현이 촉진되어 피부의 탄력이 저하되고 주름이 형성된다.

한편, 멜라닌은 색소 세포 내에 존재하는 티로시나제의 작용에 의해 타이로신으로부터 도파(dopa), 도파퀴논(dopaquinone)으로 변환되어 도파크롬(dopachrome) 등을 거처 생성된다. 멜라닌은 피부에 자외선 등으로부터 신체를 보호하고 체내 호르몬 분비 조절에 중요한 기능을 나타낸다. 그러나, 멜라닌이 과잉생산되면 기미, 주근깨 등을 형성하고 피부노화를 촉진하며 피부암 유발에 중요한 작용을 하는 것으로 알려져 멜라닌 과잉생산을 예방하기 위한 연구개발이 활발히 진행되고 있다.

이미 아스코르빈산(일본특개평 4-9320), 하이드로퀴논(일본특개평 6-192062), 코직산(일본특개소 56-7710), 알부틴(일본특개평 4-93150) 및 식물 추출물 등이 티로시나제 저해 활성을 나타내어 미백 화장료로 이용되고 있으나 화장품 제형 중에서의 안정성이 나빠 분해되어 착색되거나, 이취가 발생하거나, 생체 수준에서의 효능, 효과가 불분명하거나 또는 안전성이 문제가 되어 그 사용이 제한되고 있는 실정이다.

최근 여러 화학물질 등에 의한 피부 자극을 줄이기 위해 천연 추출물로부터 얻어진 항산화, 주름완화, 가려움 완화 등의 기능을 가진 기능성 화장품(functional cosmetics)에 많은 관심이 집중되고 있다. 천연 재료는 피부에 부작용이 적을 뿐 아니라, 최근 천연 재료를 이용한 화장품에 대한 소비자들의 호응이 높아짐에 따라 화장품 원료로서 개발가치가 한층 높아지고 있다. 예를 들어, 미국 특허공보 US5,972,341는 코미포라(Commiphora)속 식물, 특히, 코미포라 무쿨(Commiphora mukul) 추출물의 주름개선 효과에 관하여 기술하고 있고, 일본특허공개 평9-672662는 히알루로니다제(Hyaluronidase)억제 효능을 가지는 해초류 추출물들에 관하여 기술하고 있다. 일본특허공개 평10-85905은 미역으로부터 추출된 푸코이단(Fucoidan)의 피부감촉 개선효과에 관하여 기술하고 있고, 일본특허공개 평2-245087은 사르가숨(Sargassum)속 추출물의 항산화 효과에 관하여 기술하고 있다. 일본특허공개 평3-294384는 히지키아(Hizikia)속으로부터 추출된 항산화 조성물에 관하여 기술하고 있으며, 일본특허공개 평7-10769는 수렴효과 (astringent effect)가 있는 페오피시에강(Phaeophyceae) 추출물에 관하여 기술하고 있다. 또한, 특허등록 제0431076호는 백급, 자소, 에키나시아 및 발효대두 추출물을 포함하는 아토피 피부의 치유 개선용 화장료 조성물을 개시하고 있고, 특허등록 제0511494호는 하수오, 시엽, 일라이트를 포함하는 아토피 피부염 치료를 위한 추출물 및 조성물을 개시하고 있으며, 특허공개 제2004-0065126호는 천연의 영지버섯, 유근피, 감초, 백봉령, 백지마 및 백년초 등으로부터 얻은 한방 식물 추출물을 포함하는 아토피 피부의 치유와 예방에 효과를 갖는 한방 화장료 조성물을 개시하고 있다. 또한, 특허공개 제2004-0011584호는 감초, 창이자, 홍화, 돈지(돼지비계)와 같은 천연성분의 물질을 정제 혼합하여 구성된 아토피성 피부질환의 치료에 우수한 조성물에 관해 개시하고 있다.

파극천(Morinda officinalis)은 꼭두서니과에 속하는 다년생 식물의 뿌리를 건조한 것으로 굽은 원주형으로 길이는 일정하지 않고 지름은 1~2cm이다. 한방에서 보신양(補腎陽), 강근골(强筋骨), 거풍습(祛風濕)의 효능이 있어 양위유정(陽遺精), 궁냉불잉(宮冷不孕), 월경부조(月經不調), 소복냉통(少腹冷痛), 풍습비통(風濕痺痛), 근골위연(筋骨軟)등에 사용된다. 특히, 동의보감에는 파극천의 성질은 약간 따뜻하며 맛은 맵고 달며 독이 없으며 정력에 좋다고 알려져 있다. 포제법은 제파극, 염파극, 거심파극, 주침파극으로 나뉘며, 생약규격집에는 생약명은 Morindae Radix, 기원은 파극천 Morinda officinalis How이며 중국약전(CP)에서 생약명은 Radix Morindae officinalis, 기원은 Morinda offcinalisn How이고 일본약국방(JP)에는 수재되어 있지 않다. 파극천의 주요성분으로 비타민 C와 당류, 루바이딘(rubiadin), 루바아딘-1-메틸에테르(rubiadin-1-methyl ether), physcion, β-스티그마스테롤(β-stigmasterol), 팔미트산(palmitic acid), 노나데칸(nonadecane) 등이 보고되어 있다. 또한, 이리도이드(iridoid)계 물질인 모린돌리드(morindolide)와 모로피시날로사이드 텍토퀴논(morofficinaloside tectoquinone), 알리자린 1-메틸에테르(alizarin 1-methyl ether), 루시딘-ω-메티에테르(lucidin-ω-methyl ether), 1-하이드록시-3-지드록시메틸안트라퀴논(1-hydroxy-3-gydroxymethylanthraquinone), β-시토스테롤(β-sitosterol), 옥소디토스테롤(oxoditosterol), 로툰제닉산(rotungenic acid), (4R,5S)-5-하이드록시헥산-4-올라이드{(4R,5S)-5-hydroxyhexan-4-olide} 등의 성분도 보고된바 있다(Yoshikawa M et al., Chem Pharm Bull 43: 1462-1465, 1995; Joshi KC et al., Planta Medica 32: 71-75, 1977). 이들 성분 가운데 안트라퀴논(anthraquinone)류 화합물은 항바이러스, 항박테리아, 항암활성 등의 치료 효과가 있다고 보고되었다(Kim et al., Kor J Hort Sci Technol 28: 685-690, 2010).

상기 파극천 추출물에 관한 특허문헌은 특허공개 제2010-0090531호 파극천 추출물, 이를 포함하는 치주 질환 개선 및 예방용 구강용 조성물 및 피부 노화 예방 및 개선용 화장료 조성물, 특허공개 제2005-0092313호 멜라닌 생성 억제 활성을 갖는 식물 추출물을 함유하는 피부미백용 화장료 등이 보고되어 있다.

파극천 추출물은 단순 추출의 경우에도 유효한 효능을 나타내기는 하지만, 실제로 이들의 유효성분을 최대한 활용하지 못하여 화장료로 사용될 때 그 효과가 충분히 만족스럽지 못한 문제점이 있다.

이에 본 발명은 파극천의 유효성분을 충분히 추출할 수 있는 추출방법을 모색하여 종래 파극천 추출물을 이용한 피부외용제보다 좀 더 효과가 우수한 피부외용제를 제공하려는 것을 목적으로 한다.

이에 본 발명자들은 파극천 추출물의 우수한 효능을 인식하고, 좀 더 효율적이며 다양하게 이용 가능하도록 하기 위하여 파극천 추출물을 고온고압 처리함으로써 파극천 추출물의 유효성분의 함량을 증가시키고, 또한, 피부자극을 유발하지 않으면서 피부외용제 조성물로 탁월한 효과를 갖는 것을 확인함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.

본 발명은 파극천 고온고압 추출물을 함유하는 피부외용제 조성물을 제공한다.

또한, 상기 고온고압 처리는 100℃ 내지 138℃, 바람직하게는 121℃ 내지 132℃의 온도 조건 및 1.2kgf/㎠ 내지 2.0kgf/㎠, 바람직하게는 1.2kgf/㎠ 내지 1.5kgf/㎠, 좀 더 바람직하게는 1.5kgf/㎠의 압력 조건 하에서 고온고압처리하는 것을 특징으로 한다.

또한, 본 발명의 파극천 고온고압 추출물의 함량이 피부외용제 조성물 전체에 대해서 건조 중량 기준 0.001∼30.0중량%인 것을 특징으로 한다. 상기 추출물의 함량이 0.001중량% 미만인 경우에는 피부개선 효과가 거의 없으며, 30.0중량%을 초과하는 경우에는 함유량 증가에 대한 효과 증대 정도가 미미하여 경제적이지 못하다.

또한, 본 발명은 상기 조성물이 자극완화 기능을 나타냄을 특징으로 한다.

또한, 본 발명은 상기 조성물이 아토피 피부 개선 효능을 나타냄을 특징으로 한다.

또한, 본 발명은 상기 조성물이 노화 방지 효능을 나타냄을 특징으로 한다.

또한, 본 발명은 상기 조성물이 피부 미백 효능을 나타냄을 특징으로 한다.

파극천 고온고압 추출물을 유효성분으로 함유하는 약제학적 조성물은 약제학적 분야에서 통상적으로 허용되는 담체와 함께 배합하여 통상적인 방법에 의해 주사형태 또는 도포제로 제형화할 수 있다. 주사용 조성물은 등장성 수용액 또는 현탁액이 바람직하고, 언급한 조성물은 멸균되고/되거나 보조제(예: 방부제, 안정화제, 습윤제 또는 유화제 용액 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염/또는 완충제)를 함유한다. 또한, 이들은 기타 치료적으로 유용한 물질을 함유할 수 있다.

이와 같이 제조된 약제학적 제제는 목적하는 바에 따라 비경구 방식 즉, 피하 투여, 근육 투여 또는 국소적용(topical application)할 수 있으며, 용량은 일일 투여량이 0.001㎍~10㎎/㎏의 양을 1 내지 수회에 나누어 투여할 수 있다. 특정 환자에 대한 투여용량 수준은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 투여시간, 투여방법, 질환의 중증도 등에 따라 변화될 수 있다.

또한, 본 발명의 파극천 고온고압 추출물을 유효성분으로 하는 도포제는 통상적인 제조방법에 따라 어떤 형태로든 용이하게 제조할 수 있다. 일례로서 크림형 도포제를 제조함에 있어서는 일반적인 수중유형(O/W) 또는 유중수형(W/O)의 크림 베이스에 본 발명의 파극천 고온고압 추출물을 함유시키고 여기에 향료, 킬레이트제, 색소, 산화방지제, 방부제 등을 필요에 따라 사용하는 한편, 물성개선을 목적으로 단백질, 미네랄, 비타민 등 합성 또는 천연소재를 병용할 수 있다.

뿐만 아니라, 본 발명의 파극천 고온고압 추출물은 화장료로서 이용할 수 있는데, pH 조절제, 향료, 유화제, 방부제 등을 필요에 따라 부가하여 통상의 화장료 제조 방법으로 화장수, 젤, 수용성 파우더, 지용성 파우더, 수용성 리퀴드, 로션, 크림, 에센스, 샴푸, 클렌저, 린스, 헤어 컨디셔너 등으로 제형화할 수 있다.

본 발명에 따른 파극천 고온고압 추출물은 피부 흡수력이 뛰어나고, 피부자극이 없으며, 기존의 단순 추출물보다 기미, 주근깨 및 피부 색소 침착의 원인이 되는 물질인 멜라닌 생성억제 효과 등 미백작용 효과를 나타내었다.

또한, 본 발명의 파극천 고온고압 추출물은 활성산소 소거효과와 MMP 저해효과와 자외선 조사에 의한 MMP 발현 조절효과 등 우수한 항노화 효과와 자외선 조사 후 야기되는 피부 자극을 완화시켜 주는 효과를 나타내었다.

또한, 본 발명의 파극천 고온고압 추출물은 염증 매개 물질에 의한 피부자극 완화 및 아토피 개선효과를 나타내었다.

따라서, 이러한 파극천 고온고압 추출물을 함유하는 화장수, 크림, 유액, 팩, 파우더 등의 화장료 조성물은 활성산소 소거효과와 콜라겐 분해효소 활성 조절효과, 피부 잔주름 개선 효과, 미백, 보습, 아토피 개선효과, 피부자극 완화효과 등 우수한 피부 외용제 효과를 나타낸다.

도 1은 단순 파극천 추출물과 고온고압 조건에서 추출한 파극천 고온고압 추출물의 유효성분의 함량변화를 고속액체크로마토그래피한 결과를 나타낸 것이다.

이하, 실시예를 통해 본 발명을 좀더 구체적으로 설명한다. 단, 이들 실시예는 본 발명의 예시적인 기재일 뿐이며, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 국한되는 것은 아니다.

실시예 1: 파극천 추출물 제조

세절한 파극천을 80℃ 증류수에 5시간씩 3회 환류추출하고 냉침한 후, 와트만(Whatman) #5 여과지로 여과하였다. 여과된 추출물은 50℃ 이하에서 감압농축 및 동결건조시켜, 감압농축물 및 동결건조물이 0.001∼30.0중량% 함유되게 정제수를 사용하여 파극천 추출물을 제조하였다.

실시예 2 내지 4: 고온고압 처리를 이용한 파극천 고온고압 추출물 제조

실시예 1에서 수득한 파극천 추출물을 고온고압처리장치(HS-60, HANSHIN, KOREA)에 넣고 1시간 처리한 후, 추출물을 와트만페이퍼로 여과하여 세포 부유물을 제거하여 여액을 수득하고, 상기 여액을 모두 동결건조하여 용기에 담아 사용 전까지 4℃에 냉장보관하였다.

표 1에 나타낸 100℃에서 15분간 1.5kgf/㎠, 121℃에서 15분간 1.5kgf/㎠, 132℃에서 15분간 1.5kgf/㎠의 고온고압 처리 후 유효성분의 함량 변화를 HPLC법에 의한 분석방법으로 측정하였으며, 비교 분석한 결과를 표 1에 나타내었다. 또한, 컬럼 크로마토그래피를 수행하는데 사용된 기기분석 자료는 다음과 같다.

<HPLC 분석 조건>

분석장비는 Waters사의 Alliance 2695와 C-18 컬럼(SHISEIDO)을 사용하였으며, 이동상 용매로는 아세트나이트릴과 증류수를 농도구배로 변화시키면서 분리하였다. 확인은 자외선 흡광도 280nm로 고정하여 PDA(Photodiode array) 분석기로 확인하였다.

표 1과 같이 실시예 1의 파극천 추출물과 비교할 때 파극천 고온고압 추출의 경우 유효성분 함량이 증가하였으며, 실시예 2는 약 1.5배, 실시예 3은 약 3배, 실시예 4는 약 3.5배 이상 증가하였다.

시료명	유효성분 함량(ug/g of extract)
실시예 1 (파극천 추출물)	32.5
실시예 2 (파극천 고온고압 추출물 100℃에서 15분간 1.5kgf/㎠)	44.31
실시예 3 (파극천 고온고압 추출물 121℃에서 15분간 1.5kgf/㎠)	90.47
실시예 4 (파극천 고온고압 추출물 132℃에서 15분간 1.5kgf/㎠)	117.25

실시예 5: 시료의 세포독성

실시예 1에서 수득한 파극천 추출물과 실시예 2 내지 4에서 수득한 파극천 고온고압 추출물의 피부세포에 대한 세포독성을 평가하였다. 96-웰 시험 플레이트에 세포배양 배지(DMEM에 10% FBS가 첨가된 것)에 희석된 섬유아세포(fibroblast)를 1x105cells/㎖개씩 넣고 24시간 동안 부착시켰다. 각 웰에 적절한 농도로 희석한 실시예 2에서 수득한 시료를 처리한 후 24시간 동안 배양하였다. 24시간이 지나면 배지를 제거하고, 각 웰 당 MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide) 용액(2.5mg/㎖)이 함유된 세포배양 배지 200㎕를 넣은 후 2시간 동안 37℃ CO₂ 배양기에서 배양하였다. 배지를 제거하고 DMSO(Dimethyl sulfoxide)를 100㎕씩 넣어주었다. 5분간 진탕하여 세포를 용해시킨 후 마이크로플레이트 판독기에서 565nm 흡광도를 측정하였다. 수학식 1에 의해 세포생존율(%)을 정하였으며, 세포의 생존에 영향을 미치지 않는 시료의 농도를 결정하였다.

시료명	100% 세포 생존 농도
실시예 1	2%
실시예 2	2%
실시예 3	2%
실시예 4	2%

상기 표 2에서 확인할 수 있듯이 피부 섬유아세포의 100% 생존 처리농도는 실시예 1의 파극천 추출물이 2% 이하, 실시예 2 내지 4의 파극천 고온고압 추출물 모두 2% 이하로, 이는 일반적으로 화장품에 사용되는 농도를 고려하였을 때 피부 자극 유발 가능성이 적은 안전한 시료인 것을 말해준다.

실시예 6: 자유라디칼 소거활성 측정 실험

실시예 1에서 수득한 파극천 추출물과 실시예 2 내지 4에서 수득한 파극천 고온고압 추출물의 자유라디칼 소거활성을 측정하기 위해 실험실 조건에서 녹차추출물 같은 우수한 항산화 활성을 갖는 추출물을 비교샘플로 하고 DPPH법을 이용하여 자유라디칼 소거 활성을 측정하였다.

DPPH법은 DPPH(2,2-Di(4-tert-octylphenyl)-1-1picrylhydrazyl free radical)라는 유리기를 사용하여 환원력에 의한 자유라디칼 소거활성을 측정한다. 피검물질에 의해 DPPH가 환원되어 흡광도가 감소하는 정도를 공시험액의 흡광도와 비교하여 파장 560nm에서 자유라디칼 소거율을 측정한다.

DPPH 자유라디칼 소거활성 측정을 위하여 0.2%, 0.1%, 0.05%, 0.005% 농도의 파극천 고온고압 추출물을 준비하였다. 상기 농도의 추출물을 96웰 플레이트에 각각 넣고, 여기에 100uM 메탄올용액으로 제조된 DPPH를 첨가하여 용액의 총 부피가 200㎕가 되도록 하였다. 이것을 37℃에서 30분간 방치한 후 560nm에서 흡광도를 측정하였다.

표 3에서 확인할 수 있듯이 파극천 고온고압 추출물은 항산화활성이 우수하다고 알려진 녹차추출물보다 더 우수한 항산화 효과를 나타냄을 알 수 있다.

시료명	함량	항산화효과(%)
실시예 1	0.2중량%	75%
실시예 2	0.2중량%	92%
실시예 3	0.2중량%	93%
실시예 4	0.2중량%	95%
녹차 추출물	0.2중량%	92%

실시예 7: 자외선 조사 후 파극천 고온고압 추출물에 의한 MMP -1 발현억제 평가

본 실험에서는 실시예 1에서 수득한 파극천 추출물과 실시예 2 내지 4에서 수득한 파극천 고온고압 추출물의 UV 조사 및 시료 첨가 후 MMP-1 농도를 측정하기 위해서 효소면역 시험법(ELISA)을 실시하였다.

UV 챔버를 이용하여 인간 진피 섬유아세포에서 UVA를 6.3J/㎠의 에너지로 조사하였다. 자외선 조사량과 배양시간은 예비실험을 통하여 섬유아세포에서 MMP 발현량이 최대가 되는 조건을 확립하였다. 음성 대조군은 은박지로 싸서 UVA의 환경에 같은 시간을 유지시켰다. UVA 방출량은 IV 라디오미터를 이용하여 측정하였다. UVA가 조사되는 동안의 세포는 이전에 분주된 배지 그대로이고 UVA를 조사한 후 샘플이 들어간 배지로 교환하여 24시간 배양 후 배지를 회수하여 96웰에 코팅하였다. 일차항체(MMP-1 (Ab-5) 단일클론항체)를 처리하고 37℃에서 60분간 반응시켰다. 이차항체인 안티마우스 IgG(whole mouse, alkaline phosphatase conjugated)를 다시 60분 정도 반응시킨 후, 알카린 포스파타제 기질용액(1㎎/㎖ p-나이트로페닐인산을 포함하는 다이에탄올아민 완충용액)을 상온에서 30분간 반응시키고 마이크로플레이트 판독기로 405nm 흡광도를 측정하였다. 대조군으로는 시료를 첨가하지 않은 것을 사용하였다.

표 4에서 확인할 수 있듯이, 자외선 조사시 발현이 유도되는 MMP-1에 대하여 실시예 1의 파극천 추출물에 비하여 실시예 2 내지 4의 파극천 고온고압 추출물은 MMP-1 억제율이 증가된 것을 보였고, 시료를 처리하지 않은 대조군에 비하여 실시예 2 내지 4의 파극천 고온고압 추출물은 65% 이상의 억제율을 보였다. 특히, 실시예 3 및 실시예 4의 MMP-1 억제율은 각각 60%, 65%를 나타내었으며, 이는 대조군으로 사용한 레티놀의 억제율에 비해 상당히 우수한 결과이다.

시험군	함량	MMP-1 발현억제율(%)
대조군	-	-
실시예 1	0.1중량%	28
실시예 2	0.1중량%	39
실시예 3	0.1중량%	60
실시예 4	0.1중량%	65
레티놀	0.1중량%	36

실시예 8: in vitro MMP -1 활성저해 실험

MMP-1 활성 저해 효과를 측정하기 위하여 형광 분석법을 이용하였다. 실험에 사용한 기질은 형광물질이 표지된 DQ-Collagen, 효소(collagenase)는 Molecular probe사(Eugene, OR, USA)에서 시판중인 제품을 사용하였으며, 반응완충액(0.5 M Tris-HCl, 1.5 M NaCl, 50 mM CaCl2, 2 mM sodium azide, pH 7.6)은 10배 희석 후 사용하였다. 반응완충액 100㎕에 0.25㎎/㎖로 반응완충액에 용해한 DQ 콜라겐 20㎕와 실시예 2 내지 4에서 수득한 각각 파극천 고온고압 추출물(0.1중량%) 40㎕을 첨가하고 0.5unit로 희석한 콜라게나아제(collagenase) 40㎕을 첨가한다. 암소, 실온에서 20분 경과 후 형광 분광광도계(Perkin Elmer, UK)를 이용하여 흡수파장 495nm, 방출파장 515nm로 형광값을 측정하며, 대조군으로서 효소액 대신 반응완충액을 효소와 동량 첨가하여 형광값을 측정하였으며 시료 자체의 형광값도 측정하여 효소활성 계산시 보정하였다.

결과는 표 5에 나타냈으며 실시예 2 내지 4의 파극천 고온고압 추출물을 각각 0.1% 처리시 클로스트리디움 콜라게나제의 콜라겐 분해활성을 각각 50%, 63% 및 79% 억제하였으며 이는 녹차추출물의 저해 효과보다 우수하게 나타났다.

시험군	함량	MMP-1 발현억제율(%)
대조군	-	-
실시예 1	0.1중량%	34
실시예 2	0.1중량%	50
실시예 3	0.1중량%	63
실시예 4	0.1중량%	79
녹차추출물	0.2중량%	65

실시예 9: 티로시나제 활성 억제 실험

티로시나제는 버섯에서 분리 및 정제된 것으로 Sigma 사에서 구입하여 사용하였다. 기질인 L-티로신(Sigma)은 0.05M 인산나트륨 완충용액(pH 6.8)에 용해하여 0.1㎎/㎖ 용액으로 만들어 사용하였다. 실시예 1의 파극천 추출물 및 실시예 2 내지 4의 파극천 고온고압 추출물은 0.05M 인산나트륨 완충용액(pH 6.8)에 적당한 농도로 조절하여 용해한 후 사용하였다. L-티로신 용액 0.5㎖를 시험관에 넣고 여기에 파극천 추출물 및 파극천 고온고압 추출물 시료액 0.5㎖을 가하고 37℃에서 25분간 반응시켰다. 이 반응액이 든 시험관을 얼음 위에 놓고 급냉시켜 반응을 중지시킨 후 파장 475nm 흡광도를 측정하였다. 대조군으로는 상기 시료 대신 완충용액 0.5㎖를 넣은 것을 사용하였다.

상기 각 시료의 티로시나아제 활성 저해율은 수학식 3에 따라 계산하였다.

결과는 표 6에 나타냈으며 실시예 2 내지 4의 파극천 고온고압 추출물 처리 시 티로시나아제 저해율은 알부틴과 유사하다.

시험군	함량	티로시나제 저해율(%)
대조군	-	-
실시예 1	0.2중량%	20
실시예 2	0.2중량%	27
실시예 3	0.2중량%	44
실시예 4	0.2중량%	50
알부틴	0.2중량%	54

실시예 10: B16F1 멜라닌 세포를 이용한 멜라닌 합성억제 실험

본 실험에서는 실시예 1에서 수득한 파극천 추출물과 실시예 2 내지 4에서 수득한 파극천 고온고압 추출물의 미백효과를 확인하기 위해 B16F1 멜라닌 세포에 대한 멜라닌 합성억제 효과를 측정하였다.

B16F1 멜라닌 세포의 멜라닌 합성 억제효과 측정은 다음과 같이 행하였다. B16F1 멜라닌 세포를 6웰 플레이트에 각 웰당 2 x 10⁶ 농도로 분주하고 세포를 부착시킨 후 독성을 유발하지 않는 농도로 시료를 처리하여 72시간 동안 배양하였다. 72시간 배양하고 세포를 트립신(trypsin)-EDTA로 떼어낸 다음 세포수를 측정하고 원심분리하여 세포를 회수하였다. 세포 내 멜라닌의 정량은 로탄[Lotan : Cancer Res ., 40, 3345-3350(1980)]의 방법을 약간 변형하여 실시하였다. 셀 펠릿을 PBS로 1회 세척한 후 균질화 완충용액(50mM 소듐 포스페이트, pH 6.8, 1% Triton X-100, 2mM PMSF(phenylmethylsulfonyl fluoride)) 1㎖를 첨가하여 5분간 와류하여 세포를 파쇄하였다. 원심분리(3,00rpm, 10분) 하여 얻은 세포여액에 1N NaOH(10% DMSO(Dimethyl Sulfoxide))를 첨가하여 추출된 멜라닌을 용해한 후 마이크로 플레이트 판독기로 405nm에서 멜라닌의 흡광도를 측정한 다음 멜라닌을 정량하여 시료의 멜라닌 생성 저해율(%)을 측정하였다. B16F1 멜라닌 세포의 멜라닌 생성 저해율(%)은 수학식 4에 의하여 계산하였다.

표 7에서 나타나듯이 B16F1 멜라닌 세포의 멜라닌 합성 억제효과를 시험한 결과 실시예 2 내지 4의 파극천 고온고압 추출물은 0.02%에서 각각 19%, 26% 및 30%의 멜라닌 합성 저해 효과를 나타내었다. 특히 실시예 4의 파극천 고온고압 추출물은 알부틴과 유사한 정도의 멜라닌 합성 저해 효과를 나타내었다.

시험군	함량	멜라닌 합성 저해효과(%)
대조군	-	-
실시예 1	0.02중량%	14
실시예 2	0.02중량%	19
실시예 3	0.02중량%	26
실시예 4	0.02중량%	30
알부틴	0.2중량%	34

실시예 11: 자외선조사에 의한 세포독성 완화 효과

본 실시예는 실시예 1에서 수득한 파극천 추출물과 실시예 2 내지 4에서 수득한 파극천 고온고압 추출물의 자외선 조사에 의한 세포독성의 완화 효과를 평가하기 위하여 실시되었다. 섬유아세포(fibroblast)를 24-웰 시험 플레이트에 1x105개씩 넣고 24시간 동안 부착시켰다. 각 웰을 PBS로 1회 세척하고 각 웰에 500㎕의 PBS를 넣었다. 이 섬유아세포에 자외선 B(UVB) 램프(Model: F15T8, UV B 15W, Sankyo Dennki사, Japan)를 이용하여 자외선 10mJ/㎠를 조사한 후 PBS를 덜어내고 세포배양 배지(DMEM에 10% FBS가 첨가된 것) 1㎖을 첨가하였다. 여기에 평가하고자 하는 실시예 1 내지 4의 파극천 추출물을 처리한 후 24시간 동안 배양하였다. 24시간이 지나면 배지를 제거하고, 각 웰 당 세포배양 배지 500㎕배지와 MTT 용액(2.5㎎/㎖) 60㎕를 넣은 후 2시간 동안 37℃ CO₂ 배양기에서 배양하였다. 배지를 제거하고 이소프로판올-HCl(0.04N)을 500㎕씩 넣어주었다. 5분간 진탕하여 세포를 용해시키고 상등액 100㎕씩을 96-웰 시험 플레이트에 옮긴 후, 마이크로플레이트 판독기에서 565nm 흡광도를 측정하였다. 수학식 5에 의해 세포생존율(%)을 측정하고 자외선에 의한 세포독성 완화율은 수학식 6에 의하여 계산하였다.

표 8에서 확인할 수 있듯이 실험 결과 실시예 2 내지 4의 파극천 고온고압 추출물은 0.02% 농도에서 각각 20%, 27% 및 29%의 자외선에 의한 세포 독성 완화율을 나타내었다. 실시예 1의 파극천 추출물과 비교하여 세포독성 완화가 증가한 것으로 확인하여 자외선에 의한 세포독성을 낮은 농도에서도 효과적으로 방어함을 알 수 있었다.

시험군	함량	세포독성 완화율(%)
실시예 1	0.02중량%	13
실시예 2	0.02중량%	20
실시예 3	0.02중량%	27
실시예 4	0.02중량%	29

실시예 12: 자외선 조사에 의한 염증성 사이토카인 발현 억제효과

실시예 1에서 수득한 파극천 추출물과 실시예 2 내지 4의 파극천 고온고압 추출물의 자외선 조사에 의해 발현되는 염증성 사이토카인 발현 억제효과를 평가하기 위하여 사람의 표피조직에서 분리한 섬유아세포(Fibroblast)를 24-웰 시험 플레이트에 5X10⁴개씩 넣고 24시간 동안 부착시켰다. 각 웰을 PBS로 1회 세척하고 각 웰에 500㎕의 PBS를 넣었다. 이 섬유아세포에 자외선B(UVB) 램프(Model : F15T8, UV B 15W, Sankyo Dennki사, Japan)를 이용하여 자외선 10mJ/㎠를 조사한 후 PBS를 덜어내고 세포배양 배지(DMEM에 FBS가 첨가되지 않은 배지) 350㎕를 첨가하였다. 여기에 평가하고자 하는 실시예 1 내지 4 시료를 각각 처리한 후 5시간 동안 배양하였다. 배양 상층액을 150㎕ 취하여 IL-1α를 정량함으로써 실시예 1 내지 4 시료 각각의 염증성 사이토카인 발현억제효과를 판단하였다. IL-1α의 양은 효소면역분석법 (Enzyme-linked Immunosorbent Assay)을 이용하여 정량화하였으며, IL-1α의 생성율은 수학식 7에 의해 계산하였다.

실험 결과 파극천 고온고압 추출물은 자외선에 의한 염증성 사이토카인인 IL-1α의 생성을 0.02% 농도에서 47% 억제하여, 자외선에 의한 염증 발생을 낮은 농도에서 효과적으로 방어함을 알 수 있다(표 9).

시험군	함량	염증성 사이토카인 발현 억제율(%)
실시예 1	0.02중량%	25
실시예 2	0.02중량%	32
실시예 3	0.02중량%	40
실시예 4	0.02중량%	47

실시예 13: 타입 1 프로콜라겐 생합성 촉진 효과

실시예 2 내지 4에서 수득한 파극천 고온고압 추출물을 첨가 후 피부기질 성분인 타입 1 프로콜라겐의 생합성을 촉진하는 효과를 알아보기 위하여 프로콜라겐 분석(procollagen assay)을 아래와 같은 방법으로 실시하였다.

신생아의 포피조직에서 분리한 사람진피섬유아세포(human dermal fibroblast)는 Modern Tissue Technology(MTT, Korea)로부터 분양받아 DMEM/F-12(3:1)배지에 10% 우태아혈청(FBS)을 첨가하여 1×104cell/cm²농도로 배양하였다. 70~80% 정도 자라면 1:3의 비율로 분주하여 계대 배양하였고, 3~4차 계대배양된 세포를 실험에 이용하였다. 프로콜라겐의 양을 측정하는 실험을 위해서 섬유아세포를 48 웰 플레이트(well plate)에 90% 이상 배양한 후 실시예 2 내지 4의 파극천 고온고압 추출물을 각각 0.02% 농도로 가하고, 24시간 후에 배지 중에 유리된 프로콜라겐의 양을 프로콜라겐타입-1C-펩타이드 EIA 키트(procollagen type-1 C-peptide EIA kit)(MK101, Takara, Japan)를 사용하여 측정하였다.

결과는 표 10에 나타냈으며 실시예 2와 실시예 4의 파극천 고온고압 추출물 0.02% 처리시 프로콜라겐의 생합성이 각각 39%, 46% 및 48% 촉진되었으며, 세포신호전달 물질인 TGF-β와 유사한 정도의 효과를 나타내었다.

시험군	함량	프로콜라겐 생합성촉진효과(%)
실시예 1	0.02중량%	25
실시예 2	0.02중량%	39
실시예 3	0.02중량%	46
실시예 4	0.02중량%	48
TGF-β	0.001중량%	42

실시예 14 및 비교예 1

본 실시예는 실시예 4에서 수득한 파극천 고온고압 추출물을 함유한 화장료를 제조하여 사람을 대상으로 피부 탄력 개선 효과 및 주름 개선 효과를 비교예 1과 비교실험을 행하여 평가하였다.

비교실험에 사용된 화장료는 크림형태이고, 그 조성은 표 11에 나타낸 바와 같다. 우선 표 11에 기록되어 있는 나)상을 가열하여 70℃에 보존한다. 이것에 가)상을 가하여 예비유화 후 호모믹서로 균일하게 유화하고 다음에 서서히 냉각하여 크림(실시예 14, 비교예 1)을 제조한다. 실험자(20세~35세의 여성) 20명을 대상으로 얼굴 오른쪽 부위에는 실시예 14에서 제조된 크림을 얼굴 왼쪽 부위에는 비교예 1에서 제조된 크림을 각각 1일 2회씩 연속 2개월간 도포하였다.

실험완료 후 피부 탄력 개선 효과는 제품 사용 전과 2개월간 사용 후에 피부탄력측정기(cutometer SEM 575, C+K Electronic Co., Germany)를 이용하여 측정하였다. 실험결과는 하기 표 11에 Cutometer SEM 575의 △R7값으로 기재하였는데 R7값은 피부의 점탄성(viscoelasticity)의 성질을 나타낸다. 표 12에서 나타난 바와 같이 파극천 고온고압 추출물을 함유한 크림을 도포한 실험자의 피부 탄력개선 효과가 우수함을 알 수 있다.

원료		실시예 14	비교예 1
가	스테아릴 알콜	8	8
	스테아린산	2	2
	스테아린산 콜레스테롤	2	2
	스쿠알란	4	4
	2-옥틸도데실알콜	6	6
	폴리옥시에틸렌(25몰부 가)알콜에스테르	3	3
	글리세릴모노스테아린산 아스테르	2	2
나	실시예 4의 파극천 고온고압 추출물	1	-
	프로필렌글리콜	5	5
	적량	적량	적량

주)단위: 중량%

실험제품	피부탄력효과(△R7)
실시예 14	0.32
비교예 1	0.11

n=20, p＜0.05

실험자(20세~35세의 여성) 20명을 대상으로 얼굴 오른쪽 부위에는 실시예 14에서 제조된 크림을 얼굴 왼쪽 부위에는 비교예 1에서 제조된 크림을 각각 1일 2회씩 연속 2개월간 도포하였다.

실험완료 후 피부 주름 개선 효과는 제품 사용 전과 2개월간 사용 후에 피부의 주름개선효과를 알아보기 위하여 실리콘 재질의 모사판(replica)을 제작하여 지정 부위의 주름의 상태를 화상분석기인 비지오 미터(visiometer: SV60, C+K Electronic Co., Germany)로 측정하였다. 그 결과를 하기 표 13에서 나타내었으며, 이 결과는 2개월 후의 각각의 파라미터(parameter)값에서 2개월 전 파라미터 값을 뺀 것의 평균을 나타낸 것이다. 즉, 이 값이 음수가 나올수록 주름 개선 효과가 높다는 것을 의미한다. 따라서 표 13에서 나타나듯 실시예 4의 파극천 고온고압 추출물을 함유한 실시예 14의 피부 주름 개선 효과가 크게 증진되었음을 확인할 수 있었다.

실험제품	R1	R2	R3	R4	R5
실시예 14	-0.22	-0.19	-0.11	-0.09	-0.07
비교예 1	-0.12	-0.07	-0.05	-0.04	-0.03
R1: 주름 등고선의최고치와 최저치의 차이값 R2: 주름 등고선을 임의로 5칸씩 나눈 후 그 중 R1값 들의 평균 R3: 5개씩 나눈 R1값 중 최고치 R4: 주름 등고선의 기선(baseline)에서 각각의 꼭대기와 계곡의 값을 뺀 평균값 R5: 주름 등고선의 기선에서 각각의 주름 윤곽을 뺀 값의 평균값

실시예 15 및 비교예 2

본 실시예는 실시예 4에서 수득한 파극천 고온고압 추출물을 함유한 화장료를 제조하여 사람을 대상으로 피부 미백효과를 비교예 2와 비교실험을 행하여 평가하였다.

비교실험에 사용된 화장료는 크림형태이고, 그 조성은 표 14에 나타낸 바와 같다. 우선 표 14에 기록되어 있는 나)상을 가열하여 70℃에 보존한다. 이것에 가)상을 가하여 예비유화 후 호모믹서로 균일하게 유화하고 다음에 서서히 냉각하여 크림 (실시예 15, 비교예 2)을 제조한다. 실험자 (20세~35세의 여성) 20명을 대상으로 얼굴 오른쪽 부위에는 실시예 14에서 제조된 크림을, 얼굴 왼쪽 부위에는 비교예 2에서 제조된 크림을 각각 1일 2회씩 연속 2개월간 도포하였다. 시험 완료 후 얼굴 좌우 양편의 도포 부위 피부를 화상분석기 및 피부색의 변화를 크로마미터(Minolta CR300)를 이용하여 색의 밝기변화(ΔL)를 측정하고, 복수의 숙련자에 의한 객관적 육안 관찰과 피검자에 의한 주관적 육안관찰을 실시하여 하기 등급 분류에 따라 효과를 측정하였다. 그 결과를 하기 표 14에 나타내었다. 이때 미백효능 정도를 다음의 7등급으로 분류하여 평가하였다 (미백효능 평가 기준 : -3:매우 악화, -2:악화, -1:약간 악화, 0:변화 없음, 1:약간 개선, 2:개선, 3:매우 개선).

표 15에서 나타낸 바와 같이 파극천 고온고압 추출물을 함유한 크림을 도포한 실험자의 안면 피부에서 미백효과가 우수함을 알 수 있다.

원료		실시예 15	비교예 2
가	스테아릴 알콜	8	8
	스테아린산	2	2
	스테아린산 콜레스테롤	2	2
	스쿠알란	4	4
	2-옥틸도데실알콜	6	6
	폴리옥시에틸렌(25몰부 가)알콜에스테르	3	3
	글리세릴모노스테아린산 아스테르	2	2
나	파극천 고온고압 추출물	1	-
	프로필렌글리콜	5	5
	적량	적량	적량

주)단위: 중량%

	피부색의 밝기 변화(ΔL)		숙련자의 객관적 평가		피검자의 주관적 평가
	실시예 15	비교예 2	실시예 15	비교예 2	실시예 15	비교예 2
평균값	3.97	1.47	2.8	1.9	3.1	1.7

실시예 16: SLS 에 의한 피부자극 완화 효과

본 실험에서는 실시예 4에서 수득한 파극천 고온고압 추출물을 함유한 화장료의 자극 완화 효과를 인체 첩포 시험으로 평가하였다.

일반적 화장품 처방(크림, 로션, 스킨, 에센스)에 자극을 일으키는 SLS(Sodium lauryl sulfate) 1%와 실시예 14에서 제조된 제품을 혼용하여 24시간, 48시간, 72시간 동안 첩포하여 자극 유발지수를 바탕으로 자극완화 효과를 평가한 것이다.

20~50세의 건강한 남녀 50명의 팔 상박 부위에 FINN CHAMBER(FINLAND)를 이용하여 각각의 제품을 0.3 mg씩 첩포하고, 24시간 후 급성 자극 지수를 평가하였다. 평가 후 재차 동일한 부위에 동량의 제품을 첩포하여 48시간 및 72시간 후의 지연성 자극 지수를 평가하였다.

시험 결과, SLS를 단독으로 첩포한 부분은 24시간 후부터 피부에 붉게 자극이 나타났으나, 파극천 고온고압 추출물을 함유하는 제품을 첩포한 경우에는 24시간, 48시간, 72시간 경과 후에도 아무런 피부 발작을 일으키지 않았다.

이 평가의 결과는 파극천 고온고압 추출물이 화장료에 혼용되었을 때 자극을 유발시키는 기재(계면 활성제, 향, 알콜)에 의한 피부 자극을 감소시킬 수 있는 유의한 효과가 있음을 나타내는 것이다.

이하에 그 외의 실시예를 나타내었다. 즉, 실시예 4에서 수득한 파극천 고온고압 추출물을 함유한 화장수, 유액 및 미용액을 실시예 17 내지 19과 같이 제조하였다. 이들 파극천 고온고압 추출물을 함유한 화장수, 유액 및 미용액은 항산화 효과, 콜라겐 합성 촉진 효과, 피부 잔주름 개선 효과, 미백효과, 보습효과, 피부자극 완화효과, 아토피 개선효과 및 항염효과 등 피부개선에 우수한 효과를 나타내었다.

실시예 17: 파극천 고온고압 추출물을 함유하는 화장수 제조

95% 에탄올 8g에 폴리피로리돈 0.05g, 올레일알콜 0.1g, 폴리옥시에틸렌모노올레이트 0.2g, 향료 0.2g, 파라옥시안식향산메틸에스테르 0.1g, 소량의 산화방지제, 소량의 색소를 혼합용매 한다. 실시예 2에서 수득한 파극천 고온고압 추출물 10g, 글리세린 5g을 정제수 85.33g에 용해한 것에 상기 혼합액을 첨가한 후 교반하여 피부개선효과가 있는 화장수를 얻었다.

실시예 18: 파극천 고온고압 추출물을 함유한 유액 제조

세틸알콜1.2g, 스쿠알란 10g, 바세린 2g, 파라옥시안식향산에틸에스테르 0.2g, 글리세린모노에스테아레이드 1g, 폴리옥시에틸렌(20몰 부가)모노올레이트 1g및 향로 0.1g을 70℃에서 가열혼합용해하고, 실시예 2에서 수득한 파극천 고온고압 추출물 0.5g, 디프로필렌글리콜 5g, 폴리에틸렌글리콜-1500 2g, 트리에탄올아민 0.2g, 정제수 76.2g을 75℃로 가열해서 용해시킨다. 양자를 혼합하여 유화시킨 후 냉각하여 수중유(O/W)형의 피부개선효과가 있는 유액을 얻었다.

실시예 19: 파극천 고온고압 추출물을 함유한 미용액 제조

95% 에틸알콜 5g에 폴리옥시에틸렌솔비탄모노올레이트 1.2g, 키툴로오즈 0.3g, 히아루론산나트륨 0.2g, 비타민 E-아세테이트 0.2g, 감초산 나트륨 0.2g, 파라옥시안식향산에틸에스테르 0.1g, 실시예 2에서 수득한 파극천 고온고압 추출물 1g 및 적량의 색소를 혼합하여 피부개선효과가 있는 미용액을 얻었다.

Claims (8)

1. 파극천을 100℃ 내지 138℃의 온도 및 1.2kgf/㎠ 내지 2.0kgf/㎠의 압력으로 고온고압 추출하여 얻은 추출물을 함유하는 아토피 피부염 예방 및 치료용 조성물.
   
2. 청구항 1에 있어서,
   상기 파극천 고온고압 추출물은 조성물 전체에 대하여 0.001∼30.0중량%로 함유되는 것을 특징으로 하는 아토피 피부염 예방 및 치료용 조성물.
   
3. 청구항 1 또는 청구항 2에 있어서,
   상기 조성물은 피부 외용제 조성물인 것을 특징으로 하는 아토피 피부염 예방 및 치료용 조성물.
   
4. 파극천을 100℃ 내지 138℃의 온도 및 1.2kgf/㎠ 내지 2.0kgf/㎠의 압력으로 고온고압 추출하여 얻은 추출물을 함유하는 화장료 조성물.
   
5. 청구항 4에 있어서,
   상기 조성물은 자극완화 기능을 나타냄을 특징으로 하는 화장료 조성물.
   
6. 청구항 4에 있어서,
   상기 조성물은 아토피 피부 개선 효능을 나타냄을 특징으로 하는 화장료 조성물.
   
7. 청구항 4에 있어서,
   상기 조성물은 노화 방지 효능을 나타냄을 특징으로 하는 화장료 조성물.
   
8. 청구항 4에 있어서,
   상기 조성물은 피부 미백 효능을 나타냄을 특징으로 하는 화장료 조성물.

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