KR20150112419A - Composition for promoting bone growth comprising quince tree - Google Patents

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KR20150112419A
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손원록
정지훈
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(주)솔빛피앤에프
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Abstract

The present invention relates to a promoting effect of Chaenomeles sinensis on bone growth in length, and more specifically, to a pharmaceutical composition for promoting bone growth, a food composition, and a composition for animal feed, comprising Chaenomeles sinensis as an active ingredient. The composition of the present invention comprising Chaenomeles sinensis as an active ingredient shows effects of promoting the growth of a physeal plate and a long bone, thereby showing effectiveness in promoting growth and skeletal formation in an infant and a juvenile undergoing a growth perioda growth period. Furthermore, the composition of the present invention alone or with a parallel treatment of a growth hormone treatment has an advantageous effect of treating a stature growth.

Description

모과나무를 유효성분으로 포함하는 골 성장 촉진용 조성물{Composition for promoting bone growth comprising quince tree}[0001] The present invention relates to a composition for promoting bone growth,

본 발명은 모과나무의 골 길이성장 촉진 효과에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 모과나무를 유효성분으로 포함하는 골 성장 촉진용 약학적 조성물, 식품 조성물 및 동물 사료용 조성물에 관한 것이다.
More particularly, the present invention relates to a pharmaceutical composition, a food composition, and an animal feed composition for promoting bone growth, which comprises an extract of Prunus mume as an active ingredient.

최근 들어 체형의 서구화 및 평균 신장의 상승으로 인하여 키 성장인자에 대한 관심이 높아지고 있다. 성장을 광의의 개념으로 정의하면 신장의 증가뿐 아니라 신체 각 기관의 크기와 기능의 증대를 포함하는 것이라 할 것이나, 이를 협의의 개념으로 정의하자면 신장의 증가를 의미하는 것으로 볼 수 있다. 이러한 신장의 증가는 영양과 성장 호르몬 등의 여러 요인에 의한 연골 조직의 합성, 골격 길이 성장 및 골격 조직의 광범위한 증식을 포함하는 골격대사를 통하여 이루어진다. 골(뼈) 조직은 특수하게 분화된 형태의 결합 조직으로, 간엽세포, 연골세포, 조골세포, 파골세포, 골수세포 등 여러 종류의 세포로 구성된 결합조직이다. 파골세포에 의한 골흡수 양과 조골세포에 의한 골형성 양 사이에는 균형이 유지되고 있는데, 성장기에는 조골세포에 의한 골 형성 능력이 최고치에 이르러 골형성 양이 골흡수 양을 훨씬 능가하게 되므로 뼈 성장이 이루어지게 된다.
In recent years, there has been a growing interest in key growth factors due to the westernization of body shape and the increase in average height. If growth is defined as broad meaning, it includes increase in size and function of body organs as well as increase in kidney, but it can be considered as an increase of kidney by defining it as the concept of consultation. This increase in kidneys is mediated by skeletal metabolism, including the synthesis of cartilage tissue by various factors, such as nutrition and growth hormone, skeletal length growth, and extensive proliferation of skeletal tissues. Bone tissue is a specifically differentiated connective tissue, which is a connective tissue composed of various kinds of cells such as mesenchymal cells, cartilage cells, osteoblasts, osteoclasts, and bone marrow cells. There is a balance between the amount of bone resorption by osteoclasts and the amount of bone formation by osteoblasts. In the growing period, osteoblast-induced osteoblast production reaches its peak, and the amount of bone formation exceeds the amount of bone resorption. .

성장판(growth plate)은 장골의 양단에 위치해 있는 수평적으로 정형화된 구조를 지닌 연골세포집단으로서 뼈몸통끝(metaphysis)과 뼈끝(epiphysis) 사이에 위치하고 있다. 성장판 내 연골세포(chondrocyte)의 증식, 비대(hypertrophy), 세포외간질(extracellular matrix) 분비, 혈관과 골전구세포의 침입과 이에 따른 골화(ossification)과정을 거쳐 결국 연골이 골로 변화하게 되는 연골내 골화(endochondral ossification) 과정을 거치면서, 성장판의 뼈몸통끝 부위에 새로운 골이 지속적으로 형성되고, 이에 따라 장골의 길이가 길어지게 된다. 성장판은 성장호르몬, 인슐리양 성장인자(insulin-like growth factor,IGF), 갑상샘호르몬, 성호르몬, 글루코코르티코이드 등의 호르몬과 여러 시토카인에 의해 조절을 받으며, 결국 사춘기 후에 골화되면서 주위 뼈와 융합된다(신충호,2006,호르몬의 성장판 조절,대한소아내분비학회지,vol11,117-122).
The growth plate is a group of cartilage cells with a horizontally shaped structure located at both ends of the iliac bone and located between the bone metaphysis and the epiphysis. In the cartilage, the cartilage is changed into bone by hypertrophy, extracellular matrix secretion, invasion of blood vessels and osteoclasts, and subsequent ossification of chondrocytes in the growth plate. Through the process of endochondral ossification, a new bone is continuously formed at the tip of the bony body of the growth plate, and thus the length of the iliac bone becomes longer. The growth plate is regulated by hormones such as growth hormone, insulin-like growth factor (IGF), thyroid hormone, sex hormone, glucocorticoid, and various cytokines, which eventually become ossified after puberty and fused with the surrounding bone Shin Ho Cho, 2006, Growth plate regulation of hormones, Korean Journal of Pediatric Endocrinology, Vol 11, 117-122).

한편, 지금까지 성장을 촉진시키기 위한 방법으로는 성장 호르몬 제제 투여법, 일리자노프 수술법 및 건강보조식품 복용법 등이 사용되어 왔다. 특히 과거 병적인 상태의 성장부진에 쓰이던 성장호르몬 요법이 근래에 키 성장에 대한 관심이 높아져감에 따라 정상 신장을 가지고 있는 성장기 어린이 및 청소년에게도 적용 되고 있다. 그러나 상기 성장 호르몬 제제 투여법은 성장 호르몬이 부족한 사람의 경우에는 뛰어난 효과를 보이지만, 호르몬 분비가 정상적인 대다수의 사람들에게는 말단 비대증, 성장 호르몬 항체 양성, 전신 알레르기 반응, 갑상선기능 저하증 등의 여러 가지 부작용을 야기할 수 있는 문제점이 있다. 뿐만아니라 성장호르몬 요법의 기간과 비용이 과도하고, 암발생 및 다른 성장인자들의 교란을 일으키는 등의 문제점이 발견되고 있다. 또한, 일리자노프 수술은 다리의 뼈를 절단한 후 늘리는 수술로서 환자의 고통 및 비용 측면에서 일반인에게 사용하기에는 많은 무리가 있으며, 성장 촉진용 건강보조식품은 과학적으로 검증되지 않은 경우가 대부분이다.On the other hand, growth hormone preparation, Ilizanov procedure, and supplement of health supplement have been used as methods for promoting growth until now. In particular, growth hormone therapy, which has been used for growth retardation in the past, has been applied to growing children and adolescents with normal height as interest in height growth has increased in recent years. However, the administration method of the above-mentioned growth hormone preparation shows excellent effect in the case of a person lacking growth hormone. However, in the majority of normal hormone secretion, many side effects such as hypertrophy of the endocrine gland, positive antibody of growth hormone, systemic allergic reaction and hypothyroidism There is a problem that can be caused. In addition, there are problems such as excessive growth period and cost of growth hormone therapy, disturbance of cancer development and other growth factors. In addition, Iridizanov surgery is an operation to increase the leg bone after it is cut, and there is a great deal of difficulty in using it for the general public in terms of patient's suffering and cost, and most of the health supplement for growth promotion is not scientifically verified.

따라서, 성장 촉진에 있어서 그 효능이 과학적으로 검증되고, 안전한 식품소재의 개발이 필요한 실정이다.
Therefore, the efficacy of growth promotion is scientifically verified, and it is necessary to develop safe food material.

이에 본 발명자들은 부작용 없이 골 성장을 효과적으로 촉진하는 활성을 가진 식품소재를 개발하고자 연구하던 중, 모과를 투여한 실험동물에서 성장판 촉진 및 장골 길이 증가 효과를 확인하고 본 발명을 완성하였다.
Accordingly, the present inventors studied to develop a food material having an activity of effectively promoting bone growth without side effects, and confirmed the effect of promoting the growth plate and increasing the length of iliac bone in the experimental animals to which the quince was administered, and completed the present invention.

따라서 본 발명의 목적은 모과나무를 유효성분으로 포함하는 골 성장 촉진용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
Accordingly, an object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition for promoting bone growth, which comprises a quince tree as an active ingredient.

본 발명의 다른 목적은 모과나무를 유효성분으로 포함하는 골 성장 촉진용 식품 조성물을 제공하는 것이다.
Another object of the present invention is to provide a food composition for promoting bone growth, which comprises an extract of Prunus mume as an active ingredient.

본 발명의 다른 목적은 모과나무를 유효성분으로 포함하는 골 성장 촉진용 동물 사료용 조성물을 제공하는 것이다.
Another object of the present invention is to provide a composition for animal feed for promoting bone growth comprising quinone as an active ingredient.

상기의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 모과나무를 유효성분으로 포함하는 골 성장 촉진용 약학적 조성물을 제공한다.
In order to accomplish the above object, the present invention provides a pharmaceutical composition for promoting bone growth comprising an extract of Prunus mume as an active ingredient.

본 발명의 다른 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 모과나무를 유효성분으로 포함하는 골 성장 촉진용 식품 조성물을 제공한다.
In order to accomplish the other objects of the present invention, the present invention provides a food composition for promoting bone growth, comprising quercetin as an active ingredient.

본 발명의 다른 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 모과나무를 유효성분으로 포함하는 골 성장 촉진용 동물 사료용 조성물을 제공한다.
In order to accomplish another object of the present invention, there is provided an animal feed composition for promoting bone growth comprising an extract of Prunus mume as an active ingredient.

이하 본 발명을 상세히 설명한다.
Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 모과나무를 유효성분으로 포함하는 골 성장 촉진용 조성물을 제공한다.
The present invention provides a composition for promoting bone growth comprising an extract of Prunus mume as an active ingredient.

모과나무(quince tree, Chaenomeles sinensis)는 쌍떡잎식물 장미목 장미과의 낙엽교목으로, Cydonia sinensis , Pseudocydonia sinensis , Cydonia sinensis , Cydonia oblonga 등의 여러 이명을 가진다.
Quince tree ( Chaenomeles sinensis ) is a deciduous arboreous plant of Rosaceae Rosaceae, Cydonia sinensis , Pseudocydonia sinensis , Cydonia sinensis , and Cydonia oblonga .

본 발명의 모과나무는 모과나무를 구성하는 부위라면 어디든지 제한되지 않지만, 바람직하게 모과나무의 열매, 잎, 꽃, 줄기 및 뿌리로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 것 일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 모과나무 열매 일 수 있다.
The quince tree of the present invention is not limited to any part constituting the quince tree but may be preferably at least one selected from the group consisting of fruits, leaves, flowers, stems and roots of the quince tree, It can be a nut.

상기 모과나무의 열매는 목과(Chaenomelis Fructus, 木瓜)라는 생약명으로 주로 불리우며, 상기 목과는 모과, 모과실, 목과실, 향과, 해당, 목이, 모개, 철각리 등으로도 불리우며, 본 발명의 명세서에 있어서 상기 용어들을 혼용하여 지칭할 수 있다.
The fruit of the above-mentioned quince tree is the fruit of the neck ( Chaenomelis Fructus , and squash), and the neck is also referred to as a quince, a fruit, a fruit, a fragrance, a necklace, a trunk, an iron, etc. In the specification of the present invention, .

본 발명의 모과나무는 그대로 또는 동물에게 투여 가능한 형태로 가공되어 사용될 수 있으며, 이에 제한되지 않으나 예를 들어 분말, 현탁액, 추출물 등일 수 있고, 바람직하게 모과나무 추출물일 수 있다.
The prickly wood of the present invention can be used as it is or processed into a form that can be administered to an animal, and can be, for example, a powder, a suspension, an extract and the like.

상기 모과나무 추출물은 공지의 천연물 추출방법에 의하여 추출될 수 있으며, 바람직하게는 물, 탄소수 1 내지 6개의 유기용매 및 아임계 또는 초임계 유체로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 용매로 추출될 수 있으며, 상기 탄소수 1 내지 6개의 유기용매는 탄소수 1 내지 6개의 알코올(alcohol), 아세톤(acetone), 에테르(ether), 벤젠(benzene), 클로로포름(chloroform), 에틸아세테이트(ethyl acetate), 메틸렌클로라이드(methylene chloride), 헥산(hexane), 시클로헥산(cyclohexane), 디에틸에테르(diethyl ether) 및 석유에테르(petroleum ether)로 이루어진 군 중에서 선택된 것일 수 있다. 바람직하게 물 또는 탄소수 1 내지 6개의 알코올을 사용하여 추출할 수 있다.The extract may be extracted by a known natural material extraction method, and may be extracted with at least one solvent selected from the group consisting of water, organic solvents having 1 to 6 carbon atoms, and subcritical or supercritical fluids, The organic solvent having 1 to 6 carbon atoms may be an alcohol having 1 to 6 carbon atoms, acetone, ether, benzene, chloroform, ethyl acetate, methylene chloride chloride, hexane, cyclohexane, diethyl ether, and petroleum ether. Preferably, water or an alcohol having 1 to 6 carbon atoms can be used for extraction.

상기 모과나무 추출물은 추출효율을 증대시키기 위해 전처리 과정을 포함할 수 있으며, 예를 들어 모과나무를 분쇄기로 분쇄하여 사용할 수 있다.
The quince extract may include a pretreatment process to increase the extraction efficiency. For example, the quince tree may be pulverized by a pulverizer.

본 발명의 추출물 추출온도는 특별히 제한되지 아니하며, 예를 들어 0℃ 내지 150℃일 수 있으며, 바람직하게는 80℃ 내지 120℃일 수 있다. 본 발명의 추출물 추출시간은 추출 온도에 따라 특별히 제한되지 아니하며 , 예를 들어 10분 내지 10일일 수 있으며, 바람직하게는 30분 내지 24시간 일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 1시간 내지 6시간 일 수 있다.
The extraction temperature of the extract of the present invention is not particularly limited, and may be, for example, 0 ° C to 150 ° C, preferably 80 ° C to 120 ° C. The extraction time of the extract of the present invention is not particularly limited depending on the extraction temperature, and may be, for example, 10 minutes to 10 days, preferably 30 minutes to 24 hours, more preferably 1 hour to 6 hours have.

본 발명 추출물은 공지의 천연물 추출법으로 추출될 수 있다. 예를 들어 냉침추출, 열수추출, 초음파 추출, 환류냉각 추출, 가열 추출법으로 추출할 수 있으며, 바람직하게는 열수추출 또는 환류 냉각 추출법으로 추출할 수 있으며, 1회 내지 10회, 바람직하게는 2회 내지 7회 반복 추출할 수 있다.
The extract of the present invention can be extracted by a known natural substance extraction method. For example, it can be extracted by cold extraction, hot water extraction, ultrasonic extraction, reflux cooling extraction, or heat extraction, preferably by hot water extraction or reflux cooling extraction. The extraction can be performed once to 10 times, preferably twice To 7 times.

또한 본 발명의 모과나무 추출물의 제조시 처리, 보관 등의 용이함을 위하여 여과 과정, 농축 및 정제과정, 건조과정, 동결과정, 분말화 과정이 임의로 추가될 수 있다.
In addition, the filtration, concentration and purification processes, the drying process, the freezing process, and the pulverization process may be arbitrarily added for ease of processing, storage and the like in the production of the quinceekera extract of the present invention.

상기 여과 과정은 공지의 여과 방법에 의할 수 있으며 이에 제한되지 않으나, 예를 들어 여과망 또는 마이크로필터를 이용한 여과, 원심분리 및 분액깔때기를 이용할 수 있다.
The filtration process may be performed by a known filtration method. For example, filtration using a filter net or a microfilter, centrifugal separation and separation funnel may be used.

상기 농축 과정은 공지의 농축 방법에 의할 수 있으며 이에 제한되지는 않으나, 예를 들어 침전농축, 증발농축, 감압농축, 한외여과법, 역삼투법 및 원심분리법을 이용하여 농축할 수 있다. 상기 농축과정에서 농축 농도는 고형분의 함량을 기준으로 3 내지 50 중량%가 바람직하며, 더 바람직하게는 10 내지 20 중량%의 농도로 농축할 수 있으며, 가장 바람직하게는 14 내지 16중량%의 농도로 농축 할 수 있다. The concentration process may be performed by a conventional concentration process. For example, the concentration process may be performed using precipitation concentration, evaporation concentration, reduced pressure concentration, ultrafiltration, reverse osmosis, and centrifugation. The concentration in the concentration process is preferably 3 to 50 wt%, more preferably 10 to 20 wt%, and most preferably 14 to 16 wt%, based on the solid content. . ≪ / RTI >

상기 고형분이란 추출물의 용매를 모두 증발시켰을 때 남는 유효성분을 의미하는 것으로, 본원 발명에서는 가용성(soluble) 고형분 및 비가용성 고형분을 모두 포함한다.
The solid content means an active ingredient remaining when the solvent of the extract is completely evaporated. In the present invention, both the soluble solid and the non-soluble solid are included.

상기 건조 과정은 공지의 건조 방법에 의할 수 있으며 이에 제한되지 아니하나, 예를 들어 동결 건조, 분무 건조 또는 열풍건조 일 수 있다.  The drying may be performed by a known drying method, but not limited thereto, for example, freeze drying, spray drying or hot air drying.

또한 분말화 과정은 공지의 분말화 방법에 의할 수 있으며 이에 제한되지 아니하나, 예를 들어 덱스트린 포접 등의 과정에 의해 분말화 될 수 있다. 바람직하게 본원 발명의 추출물은 불활성 부형제로서 결정 셀룰로오스를 첨가하여 열풍 건조 하는 방법에 의해 분말화 될 수 있다. 상기 결정 셀룰로오스의 첨가 비율은 고형분 중량 기준으로 1: 0.1 내지 10의 비율로 첨가 될 수 있으며, 바람직하게 1 : 0.1 내지 5일 수 있으며, 가장 바람직하게 1: 0.5 내지 2 일 수 있다.
The pulverization process may be performed by a known pulverization method and is not limited thereto. For example, it may be pulverized by a process such as dextrin inclusion. Preferably, the extract of the present invention can be pulverized by adding crystalline cellulose as an inert excipient and hot-air drying. The addition ratio of the crystalline cellulose may be 1: 0.1 to 10, preferably 1: 0.1 to 5, and most preferably 1: 0.5 to 2, based on the weight of the solid.

본 발명의 가장 바람직한 실시형태는 목과(木瓜) 추출물이다.The most preferred embodiment of the present invention is a neck and quince extract.

상기 목과 추출물은 이에 제한되지 않으나, 바람직하게 물을 용매로 이용하여 열수 추출방법에 의해 제조될 수 있다. 상기 열수 추출시 목과와 물의 비율은 특별히 한정되지 않으나, 목과에 물을 3배∼20배(중량기준)로 첨가할 수 있다. 바람직하게는, 추출효율을 증가시키기 위해서 목과에 대하여 물을 15배∼19배(중량기준)로 첨가할 수 있다. The neck and the extract are not limited thereto, but may be prepared by a hot water extraction method, preferably using water as a solvent. The ratio of the neck to the water in the hot water extraction is not particularly limited, Water may be added to the neck and neck in 3 to 20 times (weight basis). Preferably, water is added to the neck to 15 to 19 times (by weight) to increase the extraction efficiency.

본 발명의 일 실시예에서, 본 발명의 모과나무 추출물은 20∼40mesh의 크기로 분쇄한 목과 600g에 물 10L를 넣고 100℃에서 2시간씩 2회 열수 추출하였다. 상기 열수 추출액을 상온에 방치하여 식힌 후에 여과하여, 연조엑스 전 단계로 고형분이 15±1 중량% 될 때까지 농축하고, 상기 농축액에 결정 셀룰로오스를 혼합 및 건조하여 목과 추출물 분말을 제조하였다.
In one embodiment of the present invention, the extract of Prunus persica L. extract of the present invention was prepared by adding 10 L of water to 600 g of the pulverized tree of 20-40 mesh size, and then conducting hot water extraction twice at 100 ° C for 2 hours. The hot-water extract solution was allowed to cool at room temperature and then filtered. The mixture was concentrated until the solid content reached 15 ± 1 wt% by the softening-extracting step. Crystalline cellulose was mixed with the concentrate and dried to prepare an extract powder.

본 발명의 상기‘골 성장’이란 골(뼈)의 조직의 크기, 굵기, 밀도, 길이 및 기능 증대를 포함하며, 바람직하게는 골의 길이 성장을 의미한다.
The 'bone growth' of the present invention includes the size, thickness, density, length, and function of the tissue of the bone (bone), and preferably means the growth of bone length.

본 발명의 조성물은 모과나무를 유효성분으로 포함하여 골 길이 성장 및 성장판 연골조직 증식 촉진에 효과적이다.
The composition of the present invention is effective for promoting growth of bone length and promotion of growth plate cartilage tissue growth by incorporating quercetin as an active ingredient.

이는 본 발명의 명세서 실시예에 잘 나타나있다.
This is well illustrated in the specification of the present invention.

본 발명의 일실시예에서는 랫트(rat)에 10일간 목과를 투여한 후, 경골(tibia)의 길이 변화를 관찰 하였다. 그 결과 성장호르몬 투여군과 비슷한 수준으로 경골의 길이가 길어진 것을 확인하였다.In one embodiment of the present invention, a change in the length of the tibia was observed after administering the neck and neck for 10 days in a rat. As a result, it was confirmed that the length of the tibia was longer than that of the group treated with growth hormone.

본 발명의 또 다른 일실시예에서는 랫트(rat)에 10일간 목과를 투여한 후, 성장판 조직의 변화를 관찰하였다. 그 결과 성장판의 proliferative zone 및 hypertrophic zone의 길이가 성장 호르몬 투여군과 비슷한 수준으로 증가됨을 확인하였다. In another embodiment of the present invention, the rats were treated with a neck and neck for 10 days, and then the changes of the growth plate tissues were observed. As a result, it was confirmed that the length of the proliferative zone and hypertrophic zone of the growth plate was increased to the level similar to that of the group treated with growth hormone.

본 발명의 또 다른 실시예에서는 랫트(rat)에 10일간 목과를 투여한 후, 연골조직에서 활성화된 연골 세포수의 변화를 BrdU staining으로 확인하였다. 그 결과 BrdU positive cell 비율이 증가된 것을 확인하였고, 이로써 목과 투여군에서 연골세포증식이 촉진됨을 확인하였다.In another embodiment of the present invention, the change in the number of chondrocyte cells activated in the cartilage tissue after BrdU staining was confirmed for 10 days in a rat. As a result, it was confirmed that the ratio of BrdU positive cells was increased, thereby confirming the promotion of chondrocyte proliferation in the neck and the administration group.

본 발명의 또 다른 실시예에서는 랫트(rat)에 10일간 목과를 투여한 후, 혈장 속의 오스테오칼신(osteocalcin) 농도를 측정하였다. 그 결과 목과 투여군에서 혈장 속 오스테오칼신 농도가 증가된 것을 확인하였고, 이로써 목과 추출물이 골형성 및 골아세포 활성을 증가시키는 것을 확인하였다.
In another embodiment of the present invention, after administering the neck and neck for 10 days in a rat, the concentration of osteocalcin in the plasma was measured. As a result, it was confirmed that the concentration of osteocalcin in the plasma was increased in the neck and the administration group, and it was confirmed that the neck and the extract increased bone formation and osteoclast activity.

따라서 본 발명은 모과나무를 유효성분으로 포함하는 골 성장 촉진용 약학적 조성물을 제공한다.
Accordingly, the present invention provides a pharmaceutical composition for accelerating bone growth comprising an extract of Prunus mume as an active ingredient.

본 발명에 따른 약학적 조성물은 본 발명의 모과나무를 단독으로 함유하거나 또는 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 추가로 함유할 수 있다. 상기에서 "약학적으로 허용되는" 이란 생리학적으로 허용되고 인간에게 투여될 때, 활성성분의 작용을 저해하지 않으며 통상적으로 위장 장애, 현기증과 같은 알레르기 반응 또는 이와 유사한 반응을 일으키지 않는 비독성의 조성물을 말한다.
The pharmaceutical composition according to the present invention may contain the germinated wood of the present invention alone or may further contain at least one pharmaceutically acceptable carrier, excipient or diluent. The term "pharmaceutically acceptable" as used herein means a non-toxic composition which is physiologically acceptable and which, when administered to humans, does not inhibit the action of the active ingredient and does not normally cause an allergic reaction such as gastrointestinal disorder, dizziness, .

약학적으로 허용되는 담체로는 예컨대, 경구 투여용 담체 또는 비경구 투여용 담체를 추가로 포함할 수 있다. 경구 투여용 담체는 락토스, 전분, 셀룰로스 유도체, 마그네슘 스테아레이트, 스테아르산 등을 포함할 수 있다. 아울러, 펩티드 제제에 대한 경구투여용으로 사용되는 다양한 약물전달물질을 포함할 수 있다. 또한, 비경구 투여용 담체는 물, 적합한 오일, 식염수, 수성 글루코오스 및 글리콜 등을 포함할 수 있으며, 안정화제 및 보존제를 추가로 포함할 수 있다. 적합한 안정화제로는 아황산수소나트륨, 아황산나트륨 또는 아스코르브산과 같은 항산화제가 있다. 적합한 보존제로는 벤즈알코늄 클로라이드, 메틸- 또는 프로필-파라벤 및 클로로부탄올이 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현택제 등을 추가로 포함할 수 있다. 그 밖의 약학적으로 허용되는 담체 및 제제는 다음의 문헌에 기재되어 있는 것을 참고로 할 수 있다(Remington's Pharmaceutical Sciences, 19th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1995).
The pharmaceutically acceptable carrier may further include, for example, a carrier for oral administration or a carrier for parenteral administration. Carriers for oral administration may include lactose, starch, cellulose derivatives, magnesium stearate, stearic acid, and the like. In addition, it may contain various drug delivery materials used for oral administration to peptide preparations. In addition, the carrier for parenteral administration may contain water, a suitable oil, a saline solution, an aqueous glucose and a glycol, and may further contain a stabilizer and a preservative. Suitable stabilizers include antioxidants such as sodium hydrogen sulfite, sodium sulfite or ascorbic acid. Suitable preservatives include benzalkonium chloride, methyl- or propyl-paraben and chlorobutanol. The pharmaceutical composition of the present invention may further contain a lubricant, a wetting agent, a sweetening agent, a flavoring agent, an emulsifying agent, a suspending agent, etc. in addition to the above components. Other pharmaceutically acceptable carriers and preparations can be found in Remington's Pharmaceutical Sciences, 19th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1995).

본 발명의 조성물은 인간을 비롯한 포유동물에 어떠한 방법으로도 투여할 수 있다. 예를 들면, 경구 또는 비경구적으로 투여할 수 있다. 비경구적인 투여방법으로는 이에 한정되지는 않으나, 정맥내, 근육내, 동맥내, 골수내, 경막내, 심장내, 경피, 피하, 복강내, 비강내, 장관, 국소, 설하 또는 직장내 투여일 수 있다.
The composition of the present invention can be administered to mammals including humans by any method. For example, it can be administered orally or parenterally. Parenteral administration methods include, but are not limited to, intravenous, intramuscular, intraarterial, intramedullary, intrathecal, intracardiac, transdermal, subcutaneous, intraperitoneal, intranasal, enteral, topical, sublingual or rectal administration Lt; / RTI >

본 발명의 약학적 조성물은 상술한 바와 같은 투여 경로에 따라 경구 투여용 또는 비경구 투여용 제제로 제형화 할 수 있다.The pharmaceutical composition of the present invention can be formulated into oral preparations or parenteral administration preparations according to the administration route as described above.

경구 투여용 제제의 경우에 본 발명의 조성물은 분말, 과립, 정제, 환제, 당의정제, 캡슐제, 액제, 겔제, 시럽제, 슬러리제, 현탁액 등으로 당업계에 공지된 방법을 이용하여 제형화될 수 있다. 예를 들어, 경구용 제제는 활성성분을 고체 부형제와 배합한 다음 이를 분쇄하고 적합한 보조제를 첨가한 후 과립 혼합물로 가공함으로써 정제 또는 당의정제를 수득할 수 있다. 적합한 부형제의 예로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨 및 말티톨 등을 포함하는 당류와 옥수수 전분, 밀 전분, 쌀 전분 및 감자 전분 등을 포함하는 전분류, 셀룰로즈,메틸 셀룰로즈, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오즈 및 하이드록시프로필메틸-셀룰로즈 등을 포함하는 셀룰로즈류, 젤라틴, 폴리비닐피롤리돈 등과 같은 충전제가 포함될 수 있다. 또한, 경우에 따라 가교결합 폴리비닐피롤리돈, 한천, 알긴산 또는 나트륨 알기네이트 등을 붕해제로 첨가할 수 있다. 나아가, 본 발명의 약학적 조성물은 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제 및 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다.In the case of a preparation for oral administration, the composition of the present invention may be formulated into a powder, a granule, a tablet, a pill, a sugar, a tablet, a liquid, a gel, a syrup, a slurry, . For example, an oral preparation can be obtained by combining the active ingredient with a solid excipient, then milling it, adding suitable auxiliaries, and then processing the mixture into a granular mixture. Examples of suitable excipients include, but are not limited to, sugars including lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol and maltitol, and starches including corn starch, wheat starch, rice starch and potato starch, Cellulose such as methylcellulose, sodium carboxymethylcellulose and hydroxypropylmethyl-cellulose and the like, fillers such as gelatin, polyvinylpyrrolidone and the like. In addition, crosslinked polyvinylpyrrolidone, agar, alginic acid or sodium alginate may optionally be added as a disintegrant. Further, the pharmaceutical composition of the present invention may further comprise an anti-coagulant, a lubricant, a wetting agent, a flavoring agent, an emulsifying agent and an antiseptic agent.

비경구 투여용 제제의 경우에는 주사제, 크림제, 로션제, 외용연고제, 오일제, 보습제, 겔제, 에어로졸 및 비강 흡입제의 형태로 당업계에 공지된 방법으로 제형화할 수 있다. 이들 제형은 모든 제약 화학에 일반적으로 공지된 처방서인 문헌(Remington's Pharmaceutical Science, 19th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA,1995)에 기재되어 있다.
In the case of a preparation for parenteral administration, it can be formulated by a method known in the art in the form of injection, cream, lotion, external ointment, oil, moisturizer, gel, aerosol and nasal aspirate. These formulations are described in Remington's Pharmaceutical Science, 19th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1995, which is a commonly known formulary for all pharmaceutical chemistries.

본 발명의 조성물의 총 유효량은 단일 투여량(single dose)으로 환자에게 투여될 수 있으며, 다중 투여량(multiple dose)으로 장기간 투여되는 분할 치료 방법(fractionated treatment protocol)에 의해 투여될 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 질환의 정도에 따라 유효성분의 함량을 달리할 수 있다. 바람직하게 본 발명의 약학적 조성물의 바람직한 전체 용량은 1일당 환자 체중 1㎏ 당 약 0.01㎍ 내지 10,000mg, 가장 바람직하게는 0.1㎍ 내지 1000mg일 수 있다. 그러나 상기 약학적 조성물의 용량은 제제화 방법, 투여 경로 및 치료 횟수뿐만 아니라 환자의 연령, 체중, 건강 상태, 성별, 질환의 중증도, 식이 및 배설율등 다양한 요인들을 고려하여 환자에 대한 유효 투여량이 결정되는 것이므로, 이러한 점을 고려할 때 당 분야의 통상적인 지식을 가진 자라면 본 발명의 조성물의 적절한 유효 투여량을 결정할 수 있을 것이다. 본 발명에 따른 약학적 조성물은 본 발명의 효과를 보이는 한 그 제형, 투여 경로 및 투여 방법에 특별히 제한되지 아니한다.
The total effective amount of the composition of the present invention may be administered to a patient in a single dose and may be administered by a fractionated treatment protocol administered over a prolonged period of time in multiple doses. In the pharmaceutical composition of the present invention, the content of the active ingredient may be varied depending on the degree of the disease. Preferably, the total preferred dose of the pharmaceutical composition of the present invention may be from about 0.01 μg to 10,000 mg, and most preferably from 0.1 μg to 1000 mg per kg body weight of the patient per day. However, the dosage of the pharmaceutical composition may be determined depending on various factors such as the formulation method, administration route and frequency of treatment, as well as the patient's age, body weight, health condition, sex, severity of disease, diet and excretion rate, It will be possible to determine the appropriate effective dose of the composition of the present invention by those of ordinary skill in the art in view of this point. The pharmaceutical composition according to the present invention is not particularly limited to the formulation, administration route and administration method as long as the effect of the present invention is exhibited.

본 발명은 모과나무를 유효성분으로 포함하는 골 성장 촉진용 식품 조성물을 제공한다.
The present invention provides a food composition for accelerating bone growth comprising an extract of Prunus mume as an active ingredient.

본 발명의 식품 조성물은 기능성 식품(functional food), 영양 보조제(nutritional supplement), 건강식품(health food) 및 식품 첨가제(food additives) 등의 모든 형태를 포함한다. 상기 유형의 식품 조성물은 당 업계에 공지된 통상적인 방법에 따라 다양한 형태로 제조할 수 있다.The food composition of the present invention includes all forms such as functional food, nutritional supplement, health food and food additives. Food compositions of this type may be prepared in a variety of forms according to conventional methods known in the art.

예를 들면, 건강식품으로는 본 발명의 모과나무를 차, 쥬스 및 드링크의 형태로 제조하여 음용하도록 하거나, 과립화, 캡슐화 및 분말화 하여 섭취할 수 있다. 또한, 본 발명의 모과나무를 골성장 촉진 효과가 있다고 알려진 공지의 물질 또는 활성 성분과 함께 혼합하여 조성물의 형태로 제조할 수 있다. 예를 들어 본 발명의 식품 조성물은 모과나무 또는 모과나무 추출물 성분 이외에 미량의 미네랄, 비타민, 지질, 당류 및 공지의 성장촉진 활성을 가진 성분 등을 추가로 함유할 수 있다. 상기 미네랄로는 칼슘, 철 등 성장기에 필요한 영양성분이 함유될 수 있으며 비타민으로는 비타민 C, 비타민 E, 비타민 B1, 비타민 B2, 비타민 B6 등이 함유될 수 있다. 지질로는 알콕시글리세롤 또는 레시틴 등이 함유될 수 있으며 당류로는 프락토올리고당 등이 함유될 수 있다.
For example, as a health food, the fruit of the present invention can be prepared in the form of tea, juice, and drink and then consumed, or granulated, encapsulated and powdered. In addition, the ginseng of the present invention can be prepared in the form of a composition by mixing it with a known substance or an active ingredient known to have a bone growth promoting effect. For example, the food composition of the present invention may further contain a trace amount of minerals, vitamins, lipids, saccharides, and a component having known growth promoting activity, in addition to a component of a quince tree or a quince tree extract. The minerals may include nutrients necessary for growing period such as calcium and iron. Vitamins may include vitamin C, vitamin E, vitamin B1, vitamin B2, and vitamin B6. The lipid may include alkoxyglycerol or lecithin, and the saccharides may include fructo-oligosaccharides and the like.

또한, 기능성 식품으로는 음료(알콜성 음료 포함), 과실 및 그의 가공식품(예: 과일통조림, 병조림, 잼, 마아말레이드 등), 어류, 육류 및 그 가공식품(예: 햄, 소시지콘비이프 등), 빵류 및 면류(예: 우동, 메밀국수, 라면, 스파게티, 마카로니 등), 과즙, 각종 드링크, 쿠키, 엿, 유제품(예: 버터, 치이즈 등), 식용식물유지, 마아가린, 식물성 단백질, 레토르트 식품, 냉동식품, 각종 조미료(예: 된장, 간장, 소스 등) 등에 본 발명의 모과나무를 첨가하여 제조할 수 있다.Functional foods also include beverages (including alcoholic beverages), fruits and their processed foods (e.g., canned fruits, bottled, jam, maalmalade, etc.), fish, meat and processed foods such as ham, Etc.), breads and noodles (eg udon, buckwheat noodles, ramen noodles, spaghetti, macaroni, etc.), fruit juice, various drinks, cookies, , Retort food, frozen food, various kinds of seasoning (for example, soybean paste, soy sauce, sauce, etc.) and the like.

또한, 본 발명의 모과나무를 식품 첨가제의 형태로 사용하기 위해서는 분말 또는 농축액 형태로 제조하여 사용할 수 있다.
In addition, in order to use the germanium of the present invention in the form of a food additive, it may be used in the form of powder or concentrate.

본 발명의 식품 조성물 중 모과나무의 바람직한 함량은 식품 조성물 총 중량에 대하여 식품의 전체 중량을 기준으로 0.01∼90%, 바람직하게는 0.1∼50%의 비율로 함유될 수 있다.
The preferred content of the germinated wood in the food composition of the present invention may be 0.01 to 90%, preferably 0.1 to 50%, based on the total weight of the food, based on the total weight of the food composition.

본 발명은 모과나무를 유효성분으로 포함하는 골 성장 촉진용 동물 사료용 조성물을 제공한다.
The present invention provides an animal feed composition for promoting bone growth, comprising an extract of Prunus mume as an active ingredient.

본 발명에 따른 사료용 조성물은 발효사료, 배합 사료, 펠렛형태 및 사일레지(silage) 등의 형태로 제조될 수 있다. 상기 발효사료 는 본 발명의 모과나무를 포함하고, 추가적으로 여러 가지 미생물 균 또는 효소들을 첨가함으로써 유기물을 발효시켜 제조될 수 있다. 상기 배합사료는 여러 종류의 일반 사료와 본 발명의 모과나무 를 혼합하여 제조될 수 있다. 펠렛 형태의 사료는 상기 발효사료 또는 배합사료를 펠렛기로 제형화하여 제조될 수 있다. 사일레지는 청예사료와 본 발명의 모과나무를을 혼합하여 유산균으로 발효시킴으로서 제조될 수 있다.
The composition for feed according to the present invention can be produced in the form of a fermented feed, a compounded feed, a pellet form, a silage or the like. The fermented feed includes the fruit tree of the present invention and can be produced by fermenting organic matter by addition of various microorganisms or enzymes. The compound feed can be prepared by mixing various kinds of general feeds and the quince tree of the present invention. Feeds in the form of pellets can be prepared by formulating the fermented feed or the compound feed into a pelletizer. The silage can be produced by mixing the quail feed and the quince tree of the present invention and fermenting them with lactic acid bacteria.

본 발명의 모과나무를 유효성분으로 포함하는 조성물은 성장판 및 장골(long bone)의 성장 촉진 효과가 있어, 성장기의 유소아 및 청소년의 성장 및 골격 형성을 촉진하는데 효과적이다. 뿐만 아니라 본 발명의 조성물 단독으로 또는 성장호르몬 치료와 병행요법을 통해 키 성장 치료에 효과적이다.
The composition comprising the ginseng extract of the present invention as an active ingredient is effective for promoting the growth of the growth plate and the long bone and promoting the growth and skeletal formation of the young children and adolescents during the growing season. In addition, the composition of the present invention is effective alone or in combination with growth hormone therapy and concurrent therapies to treat key growth.

도 1은 투여 군별로 10일간 랫트(rat)의 몸무게 변화 추이를 나타낸 도식이다.
도 2는 투여 군별로 랫트 경골(tibia)의 micro-CT 촬영 결과를 나타낸다.
도 3은 투여 군별로 랫트 경골의 X-ray 촬영 결과를 나타낸다.
도 4는 투여 군별로 랫트 총 경골 길이(total tibia length)를 나타낸 것이다.
도 5는 각 투여 군별로 랫트의 성장판에서 증식부(proliferative zone) 및 비대부(hypertrophic zone)의 위치 및 상대적 길이를 나타낸 것이다(control: saline 투여군, GH: 성장호르몬 투여군, 목과: 목과 추출물 투여군).
도 6은 각 투여군의 성장판(growth plate) 영역 중 증식부(proliferative zone)의 길이를 나타낸 도식이다(control: saline 투여군, 성장: 성장호르몬 투여군, 목과: 목과 추출물 투여군).
도 7은 각 투여군의 성장판(growth plate) 영역 중 비대부(hypertrophic zone)의 길이를 나타낸 도식이다(control: saline 투여군, 성장: 성장호르몬 투여군, 목과: 목과 추출물 투여군).
도 8은 각 투여군의 연골조직을 BrdU staining한 결과를 이미지로 나타낸다.
도9는 각 투여군의 연골조직에서 BrdU positive cell의 비율을 나타낸다.
도 10은 각 투여군에서 혈장속의 오스테오칼신(osteocalcin)농도를 측정한 결과를 나타낸다.
FIG. 1 is a schematic diagram showing the change in weight of a rat for 10 days in each administration group.
Fig. 2 shows micro-CT images of the rat tibia by administration group.
Fig. 3 shows X-ray photographs of the rat tibia by administration groups.
Fig. 4 shows the total tibia length of the rats by administration group.
FIG. 5 shows the positions and relative lengths of the proliferative zone and the hypertrophic zone in the growth plate of rats according to each administration group (control: saline administration group, GH: growth hormone administration group, neck: neck and extract administration group) .
FIG. 6 is a graph showing the length of the proliferative zone in the growth plate region of each administration group (control: saline administration group, growth: growth hormone administration group, neck: neck and extract administration group).
FIG. 7 is a graph showing the length of a hypertrophic zone in the growth plate region of each administration group (control: saline administration group, growth: growth hormone administration group, neck: neck and extract administration group).
FIG. 8 is an image of BrdU staining of cartilage tissue of each administration group.
FIG. 9 shows the ratio of BrdU positive cells in cartilage tissue of each administration group.
FIG. 10 shows the results of measurement of osteocalcin concentration in plasma in each administration group.

이하 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
However, the following examples are illustrative of the present invention, and the present invention is not limited to the following examples.

<실시예 1> &Lt; Example 1 >

모과나무(목과) 추출물의 제조 Manufacture of extracts of quince trees

목과는 동양산업제약사(충북 보은군 보은읍 풍취리 18번지)에서 구입하였다. 50L 추출기(가압추출기, 고려산업)를 이용하여 20∼40mesh의 크기로 분쇄한 목과 600g(건조중량), 물 10L를 넣고 100℃에서 2시간씩 2회 열수 추출한다. 상기 열수 추출액을 실온에서 방치하여, 실온으로 식힌 후 여과한다. 여과한 추출액을 20L evaporator(Rotory Evaporator, HEIDOLPH)로 고형분이 15±1 중량% 될 때까지 농축(연조엑스 전 단계로 고형분 33.27g)하여 농축액을 제조한다. 상기 농축액에 고형분과 동일한 중량의 결정셀룰로오스를 혼합한 후, 건조기로 2일 동안 건조(100℃ 열풍건조)하여 수분이 모두 증발하고 남은 66.79g의 목과 추출물 분말을 수득했다.
The neck and neck were purchased from Dong Yang Pharmaceutical Co., Ltd. (18, Bokseok, Buk-eup, Bo-eun, Chungbuk). Using a 50-L extractor (pressurized extractor, KOREA INDUSTRIAL CO., LTD.), Weigh 20 ~ 40mesh and 600g (dry weight) of water and 10L of water. Extract 2 times at 100 ℃ for 2 hours. The hot water extract solution is allowed to stand at room temperature, cooled to room temperature, and then filtered. The concentrated extract is concentrated by using a 20 L evaporator (Rotary Evaporator, HEIDOLPH) until the solid content reaches 15 ± 1 wt% (solid content is 33.27 g by the pre-stage of soft extraction). The concentrate was mixed with crystalline cellulose having the same weight as the solid content, and then dried (100 ° C hot air drying) for 2 days in a drier to evaporate all of the water, thereby obtaining 66.79 g of the neck and extract powder.

<실험예 1> <Experimental Example 1>

동물모델을 이용한 모과나무 추출물의 골 성장 촉진 효과 조사Investigation of Bone Growth Promoting Effect of Fruit Tree Extract Using Animal Model

<1-1> 모과나무(목과) 추출물의 투여&Lt; 1-1 > Administration of extract of corn (tree)

3주령의 Male Sprague-Dawley rat를 구입하여 사흘 동안 안정화시켰다. 사육 환경은 24±2℃, 명암주기는 12시간 간격을 유지하고 사료는 항생제가 첨가되지 않은 일반 고형사료를 사용하였다. Control 군에는 saline을 주입하며, 목과 추출물을 경구투여로써 일일 1회 경구 투여하였다(상기 <실시예 1>에서 제조한 목과 추출물 분말을 물에 녹여 투약함). Positive 군에는 유트로핀주(LG생명과학)를 20μg/ kg의 용량으로써 일일 1회 피하 주사하였다. 본 발명의 목과 추출물 투여 방법은, Rat에게 positive 군을 제외한 모든 군에서 oral cavity에 투여하며 모든 동물은 daily 1회 투여한다. 각 군의 구성은 아래와 같다.Three-week-old male Sprague-Dawley rats were purchased and stabilized for three days. The incubation environment was maintained at 24 ± 2 ℃ and the light and dark cycles were maintained at 12 hour intervals. The control group was orally administered saline, and the neck and the extract was orally administered once a day (the neck and extract powder prepared in Example 1 were dissolved in water). Positive group was subcutaneously injected once daily at a dose of 20 μg / kg of eutrophin (LG Life Science). The method for administering the extract of the present invention to the neck is administered to an oral cavity in all groups except Rat positive group, and all animals are administered once daily. The composition of each group is as follows.

- Control 투여군 : Normal saline 1ml - Control administered group: Normal saline 1ml

- Positive Control : growth hormone, 20μg/ kg Positive Control: growth hormone, 20 μg / kg

- 목과 투여군 200mg/ kg
- neck and administration group 200 mg / kg

10일간의 사료의 섭취와 목과 추출물의 투여가 끝난 후에 부검하여 아래 내용을 확인한다.
After 10 days of feeding and neck and extract administration, autopsy should be done to confirm the following.

<1-2> 실험동물의 체중 변화<1-2> Weight change in experimental animals

상기 실험예 <1-1>의 각 그룹의 식이 투여 전 체중과 10일간 식이 투여 후 체중을 측정하였다. 측정은 주 2회 실시되었다. 측정된 값은 통계처리하여 평균값과 표준편차를 계산하였다.
The body weight of each group in the above Experimental Example < 1-1 > and the body weight after 10 days of dietary administration were measured. Measurements were performed twice a week. The measured values were statistically processed to calculate mean value and standard deviation.

[도 1]에서 보는바와 같이, 10일간 관찰한 결과 Control군, 실험군, 성장호르몬 투여군 모두에서 몸무게의 차이가 거의 없는 것으로 나타났다. 이는 마우스의 몸무게가 목과 투약의 효과와 상관관계가 크게 없다는 것을 나타낸다.As shown in FIG. 1, 10 days of observation showed that there was almost no difference in weight in the control group, the experimental group, and the growth hormone treated group. This indicates that the weight of the mouse is not highly correlated with the effect of the neck and medication.

<1-3> 뼈의 이상 증식 및 골다공증(Osteoporosis) 독성 평가<1-3> Excessive bone growth and evaluation of osteoporosis toxicity

상기 실험예 <1-1>에서 10일 간의 투여가 완료된 후 본 발명에 따른 모과나무 추출물을 섭취시킨 실험군 및 대조군에서, 뼈의 과잉성장 또는 골다공증(osteoporosis) 이상 유무를 micro-CT 방법으로 평가하였다. After completion of administration for 10 days in Experimental Example 1-1, osteoporosis abnormality or osteoporosis abnormality was evaluated by micro-CT method in the experimental group and the control group in which the extract of Fagus crenata according to the present invention was ingested .

왼쪽 경골의 골밀도와 관련된 소주골(trabecular bone)의 용적 및 두께를 micro-CT 검사로 확인하였다. 랫트를 치사시켜 왼쪽 경골을 추출한 상태에서 micro-CT를 이용하여 소주골 용적 및 소주골 두께를 측정하였다. Micro-CT시스템은 SKYSCAN 1172 micro-CT 기기를 사용하였으며 X-ray source는 50kV, 200mA로 하였다. 소스와 디텍터가 고정되어 있고 그 사이에 물체가 회전함으로 투영데이테를 얻는다. 영상은 0.8um ~ 25um 픽셀의 크기를 가진다. Micro-CT로 왼쪽 경골부 목부분에 전체적 FOV(field of view) 스캔하고 제한된 영역(region of interest (ROI)의 부분 FOV 스캔하여 정확한 ratios 를 파악한다. (Chunet al 2004). 이 FOV영역을 재구성하여 골소주(trabeculae)의 비율과 두께를 구한다. 2D 영상의 왼쪽 대퇴골의 직사각형의 내부에 있는 소주골(trabecula)의 용적비율(BV/TV, %)과 골소주 두께(Tb.Th, mm)을 계산하기 위해 fuzzy distance transform (FDT) 알고리즘을 적용하였다(In Kon Chun1.,et al., In vivo trabecular thickness measurement in cancellous bones : longitudinal rat imaging studies. Physiol. Meas. 27(2006)695-702)
The volume and thickness of the trabecular bone associated with BMD of the left tibia were verified by micro-CT. The rats were sacrificed and the left tibia was extracted and micro-CT was used to measure the shochu bone volume and the shoal bone thickness. The micro-CT system was a SKYSCAN 1172 micro-CT device and the X-ray source was 50 kV, 200 mA. The source and detector are fixed and the object rotates between them to obtain the projection data. The image has a size of 0.8um ~ 25um pixel. Micro-CT scans the entire field of view (FOV) of the left tibial neck and identifies the exact ratios by performing a partial FOV scan of the region of interest (ROI) (Chun et al 2004). Calculate the volume ratio (BV / TV,%) and trabecula thickness (Tb.Th, mm) of the trabecula inside the rectangle of the left femur of the 2D image, and calculate the ratio and thickness of the trabeculae. 27 (2006) 695-702). In vivo trabecular thickness measurement in cancellous bones: longitudinal rat imaging studies, Physiol. Meas. 27 (2006)

micro-CT를 통해 살펴본 골 부피의 백분율(percentage bone volume), 골소주 간극(trabecular separation), 골소주 두께(trabecular thickness) 등은 주로 osteoporosis 유무 및 뼈 이상을 평가하는 지표로 사용된다. [도 2] 및 표 1에서 보는 바와 같이, 각 군 간의 차이가 거의 없는 것으로 보아, 실험 기간 동안 이 생약들이 뼈의 이상증식 또는 골다공증(Osteoporosis) 독성 등에 영향이 없음을 알 수 있다.
Percent bone volume, trabecular separation, trabecular thickness, etc., as measured by micro-CT, are mainly used as an index to assess osteoporosis presence and bone abnormality. As shown in FIG. 2 and Table 1, there is almost no difference between the groups, and it can be seen that the herbal medicines do not affect bone abnormalities or osteoporosis toxicity during the experiment.

controlcontrol 목과Neck and neck GHGH Percent bone volume (%)Percent bone volume (%) 28.6628.66 26.0926.09 27.8727.87 Bone surface / volume ratio(1/mm)Bone surface / volume ratio (1 / mm) 32.5632.56 32.0632.06 31.2631.26 Trabecular thickness(mm)Trabecular thickness (mm) 0.130.13 0.130.13 0.130.13 Trabecular number(1/mm)Trabecular number (1 / mm) 2.202.20 2.002.00 2.132.13 Trabecular separation(mm)Trabecular separation (mm) 0.320.32 0.340.34 0.340.34

<1-4> 실험동물의 경골(<1-4> Tibia of experimental animals tibiatibia ) 길이 변화 측정) Length change measurement

상기 실험예 <1-1>에서 10일 간의 투여가 완료된 후, 본 발명에 따른 모과나무 추출물을 섭취시킨 실험군 및 대조군의 좌우 경골(정강이뼈)를 적출하여 뼈 조직에 부착되어 있는 근육, 지방, 인대 등을 전부 제거하고 70% 알코올에 보관하고 X-ray 촬영기기(OM-FORTE -10121, DK 메디칼시스템)를 이용하였다. X-ray source는 55kV, 320mA로 하였다. 경골의 X-ray 촬영을 통해 경골 길이(tibia length)를 측정하였다.
After 10 days of administration in the experimental example <1-1>, the left and right tibia (shinbone) of the experimental group and the control group in which the extract of Fagus crenata according to the present invention was taken were extracted and the muscle, fat, All ligaments were removed and stored in 70% alcohol, and X-ray imaging equipment (OM-FORTE-10121, DK Medical System) was used. The X-ray source was set at 55 kV, 320 mA. Tibial length was measured by X-ray of the tibia.

[도 3] 및 [도 4]에서 보는 바와 같이, Control 군에 비해 성장호르몬을 투여한 군의 total tibia length가 증가하였으며, 목과를 투여한 군에서도 Control 군에 비하여 total tibia length가 증가하는 효과를 보였다.
As shown in FIG. 3 and FIG. 4, the total tibia length of the group treated with growth hormone was increased compared with that of the control group, and the effect of increasing the total tibia length in the group treated with throat was greater than that of the control group It looked.

<1-5> 실험동물의 성장판 연골조직 변화 측정<1-5> Measurement of growth plate cartilage texture of experimental animals

성장판 영역(Growth plate zone)의 길이는 부검 후 연골조직을 고정하여 H&E staining 기법으로 염색 후 현미경을 이용한다. 각 zone의 길이를 한 sample당 5번씩 측정하여 평균을 낸 값을 대표값으로 사용하여 유의성을 평가한다.
The length of the growth plate zone is determined by autogenous staining of the cartilage tissue after H & E staining, followed by microscopy. The length of each zone is measured five times per sample and the significance is evaluated by using the average value as a representative value.

[도 5] 내지 [도 7]에서 보는 바와 같이, Control 군에 비해 성장호르몬을 투여한 군의 proliferative zone 및 hypertrophic zone의 길이가 증가하였으며, 목과 투여군의 경우도 proliferative zone 및 hypertrophic zone의 길이가 Control 군에 비해 유의성 있게 증가하였다.
As shown in FIGS. 5 to 7, the proliferative zone and the hypertrophic zone of the growth hormone-treated group were increased compared to the control group, and the proliferative zone and the hypertrophic zone length were increased Compared with the control group.

<1-6> 연골세포(<1-6> Chondrocytes ( chondrocytechondrocyte ) 증식 효과 ) Propagation effect

chondrocyte proliferation의 정도를 측정하기 위하여, Rat 경골(tibia)의 연골조직을 이용하였고 이 부위의 성장판에 있는 S phase상태의 proliferative cell에 brdU staining 방법을 적용하였다. Sigma사의 5-Bromo-2′-deoxyuridine(제품번호:B9285)를 ammonium hydroxide(NH4OH)0.1M에 30mg/kg의 용량으로 녹여 실험종료 1시간 전에 복강 투여하였으며, 부검 후 연골조직을 고정하여 paraffin embedded tissue를 만들었고 BrdU staining kit (Invitrogen, 93-3943)의 방법대로 staining을 진행하였다. BrdU positive cell은 cell counter를 이용하여 counting 하였다.
In order to measure the degree of chondrocyte proliferation, cartilage tissue of Rat tibia was used and brdU staining method was applied to S phase proliferative cells in the growth plate of this region. 5-Bromo-2'-deoxyuridine (product number: B9285) from Sigma was dissolved in 0.1 M ammonium hydroxide (NH 4 OH) at a dose of 30 mg / kg. After 1 hour of the experiment, paraffin embedded tissue and staining was performed according to the method of BrdU staining kit (Invitrogen, 93-3943). BrdU positive cells were counted using a cell counter.

그 결과 [도 8] 및 [도 9]에서 보는 바와 같이, Control군에 비해 성장호르몬군과 목과 투여군 모두 비슷한 수준으로 BrdU positive cell 비율이 증가하였다. 이는 목과 투여군이 연골세포 증식효과가 있음을 나타낸다.
As a result, as shown in FIG. 8 and FIG. 9, the proportion of BrdU positive cells in the growth hormone group and the neck and the treatment group was increased to a similar level as compared with the control group. This indicates that the neck and the administration group have a chondrocyte proliferative effect.

<1-7> <1-7> 골아세포Osteoblast 활성인자Active factor 혈장  plasma 오스테오칼신Osteocalcin (( osteocalcinosteocalcin ) 측정) Measure

rat의 혈액을 투약이 끝난 후 심장에서 채취하여 응고시킨후 serum을 분리하여 샘플을 만들었고, Rat Ostecalcin/Bone Gla Protein. OT/BGP ELISA Kit (Cusabio, 제품번호: CSB-E05129r)를 사용하여 serum내 total osteocalcin level을 측정하였다.
After the blood was taken from the rat, the blood was collected from the heart and solidified, and the serum was separated to make a sample. Rat Ostecalcin / Bone Gla Protein. Total osteocalcin levels in the serum were measured using the OT / BGP ELISA Kit (Cusabio, Cat. No. CSB-E05129r).

그 결과 [도 10]에서 보는 바와 같이, 성장호르몬 투여군 및 목과 추출물 투여군 모두에서 혈장 내 오스테오칼신 레벨이 control 군에 비하여 유의적으로 증가하는 것을 확인하였다. 특히, 목과 투여군에서 성장호르몬 투여군과 비교하여 오스테오칼신 레벨이 조금 더 높은 결과가 나타났다. 오스테오칼신은 골아세포에서 형성된 후에 골기질속에 침착되며 새로이 형성되는 오스테오칼신의 일부는 혈액 내로 방출되므로 혈중 농도를 측정하면 골형성 정도를 알 수 있어, 혈장내 오스테오칼신 농도는 골아세포의 활성을 반영하는 것으로 보고 있다. 본 발명의 목과 추출물이 혈장내 오스테오칼신의 농도를 유의성있게 증가시는 것으로 보아, 골형성 및 골아세포 활성이 증가되는 것으로 보여진다.
As a result, as shown in FIG. 10, it was confirmed that plasma osteocalcine level was significantly increased in both the growth hormone-treated group and the neck-extract-administered group as compared with the control group. In particular, there was a slightly higher level of osteocalcin in the neck and the administration group compared to the growth hormone administration group. Osteocalcin is deposited in bone cells after being formed in osteoblasts, and a part of the newly formed osteocalcin is released into the blood, so that the degree of osteogenesis can be determined by measuring the blood concentration, so that the concentration of osteocalcin in plasma reflects the activity of osteoblast . As the neck and the extract of the present invention significantly increase the concentration of osteocalcin in the plasma, bone formation and osteoblast activity are increased.

이상 살펴본 바와 같이, 본 발명은 모과나무의 골 길이성장 촉진 효과에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 모과나무를 유효성분으로 포함하는 골 성장 촉진용 약학적 조성물, 식품 조성물 및 동물 사료용 조성물에 관한 것이다.As described above, the present invention relates to the effect of promoting the growth of bone length of querceta, and more particularly, to a pharmaceutical composition, a food composition, and an animal feed composition for accelerating bone growth comprising quercetin as an active ingredient.

본 발명의 모과나무를 유효성분으로 포함하는 조성물은 성장판 및 장골의 성장 촉진 효과가 있어, 성장기의 유소아 및 청소년의 성장 및 골격 형성을 촉진하는데 효과적일뿐만 아니라 본 발명의 조성물 단독으로 또는 성장호르몬 치료와 병행요법을 통해 키 성장 치료에 효과적이므로 산업상 이용가능성이 크다.
The composition comprising the ginseng extract of the present invention as an active ingredient is effective for promoting the growth and skeletal formation of infants and adolescents at the growing stage and has the effect of promoting the growth of the growth plate and the iliac bone. And it is effective for treatment of key growth through concurrent therapy.

Claims (6)

모과나무를 유효성분으로 포함하는 골 성장 촉진용 약학적 조성물.
A pharmaceutical composition for accelerating bone growth, comprising as an effective ingredient, quercetin.
모과나무를 유효성분으로 포함하는 골 성장 촉진용 식품 조성물.
A food composition for promoting bone growth, comprising quercetin as an active ingredient.
모과나무를 유효성분으로 포함하는 골 성장 촉진용 동물 사료용 조성물.
A composition for animal feed composition for promoting bone growth, comprising quercetin as an active ingredient.
제1항 내지 제3항 중 어느 한항에 있어서, 상기 모과나무는 모과나무의 열매, 잎, 꽃, 줄기 및 뿌리로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 것임을 특징으로 하는 골 성장 촉진용 조성물.
4. The composition for promoting bone growth according to any one of claims 1 to 3, wherein the quince is at least one selected from the group consisting of fruit, leaves, flowers, stems and roots of a quince tree.
제1항 내지 제3항 중 어느 한항에 있어서, 상기 모과나무는 모과나무 추출물인 것을 특징으로 하는 골 성장 촉진용 조성물.
4. The composition for promoting bone growth according to any one of claims 1 to 3, wherein the quince is an extract of Morus alba.
제5항에 있어서, 상기 모과나무 추출물은 물, 탄소수 1 내지 6개의 알코올, 아세톤, 에테르, 클로로포름, 에틸아세테이트, 메틸렌클로라이드, 헥산, 시클로헥산, 석유에테르(petroleum ether), 디에틸에테르, 벤젠 및 아임계 또는 초임계 유체로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 용매에 의한 추출물인 것을 특징으로 하는 조성물. 6. The method of claim 5, wherein the quince extract is selected from the group consisting of water, an alcohol having 1 to 6 carbon atoms, acetone, ether, chloroform, ethyl acetate, methylene chloride, hexane, cyclohexane, petroleum ether, diethyl ether, Wherein the composition is an extract of at least one solvent selected from the group consisting of subcritical or supercritical fluids.
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