KR20150028237A - 중국가시응애 기생 진드기를 제어하기 위한 조성물 및 방법 - Google Patents
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Abstract
본원에서 기재된 바와 같이, 본 발명은 꿀벌에 기생하는 중국가시응애를 제어하기 위한 조성물 및 방법을 제공한다. 또한, 본 발명은 꿀벌통의 중국가시응애 감염의 치료 또는 예방에 유용한 조성물을 특징으로 한다.
Description
본 발명은 중국가시응애 기생 진드기를 제어하기 위한 조성물 및 방법에 관한 것이다.
본 출원서는 2012.06.07에 출원된 미국 특허 출원번호 61/656,629의 우선권을 주장한다. 이 출원은 모두 본 출원 명세서의 내용에 참고로서 포함된다.
꿀벌, 아피스 멜리페라 ( Apis mellifera ), 은 작물의 효과적인 수분작용에 필요하기 때문에 세계의 농업에서 중요하다. 꿀벌은 또한 꿀 및 밀랍을 포함하여 경제적으로 중요한 제품을 생산한다. 꿀벌은, 현재 미국, 유럽 및 많은 다른 나라에서 꿀벌 군집에 막대한 피해를 가하는 외부 기생 응애인, Varroa destructor를 포함하여 많은 기생충 및 병원균에 취약하다. 꿀벌 군집에 새로운 위협이 나타나고 있다. 트로피래랩스 클라래 (Tropilaelaps clareae ), 트로피래랩스 코에니제럼 (Tropilaelaps koenigerum ), 트로피래랩스 메르세데세 (Tropilaelaps mercedesae ) 및 트로피래랩스 타이 (Tropilaelaps thaii) (총괄하여 중국가시응애) (진드기: Laelapidae) 는 성장하는 새끼들 및 성충 벌에 영향을 미치는 아시안 응애이다. 중국가시응애에 의한 체내 침입은 비정상적인 새끼의 성장 및 새끼 및 성충 벌의 죽음을 야기할 수 있다. 중국가시응애의 정상적인 숙주는 거대한 아시안 꿀벌인 아피스 도르사타(Apis dorsata )이지만, 중국가시응애는 서양의 꿀벌인 아피스 멜리페라 (Apis mellifera) 및 아피스 라보리오사(Apis laboriosa ), 아피스 세라나 (Apis cerana) 및 아피스 플로레아(Apis florea)와 같은 아시안 꿀벌의 군집을 손쉽게 감염시킬 수 있다.
수분작용을 가능하게 하기 위한 강한 꿀벌 군집의 공급을 유지하는 것은 농장 작물의 생산을 유지하기 위해 필수적이다. 많은 꿀벌 군집은 이미 바로아(Varroa) 감염 때문에 약해졌다. 이러한 이미 약해진 집단에 중국가시응애의 유입은 꿀벌 군집의 대폭적인 축소를 야기할 수 있다. 현재의 바로아 및 중국가시응애의 감염을 치료하는 방법은 효과적이지 않다는 것이 증명되었다. 또한, 이러한 응애 살충제의 사용은 인간의 소비가 예정되어 있는 꿀에 해로운 화학물질을 유입시킬 수 있다. 응애 감염을 치료하거나 예방하기 위한 새로운 조성물 및 방법이 시급하게 요구된다. 바람직하게, 이러한 조성물은 인간의 건강에 어떠한 해를 가하지 않는 천연 성분만을 포함해야 할 것이다.
하기에 기재된 바와 같이, 본 발명은 꿀벌통에서 중국가시응애의 감염을 감소하기 위한 방법 및 조성물을 제공하는 것을 특징으로 한다.
특정 구현예에서, 본 발명은 용매(예를 들어, 프로필렌글라이콜) 내에 적어도 약 0.1%-20% (예를 들어, 0.1, 0.5, 1.0, 2, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20%)의 홉 베타산(hop beta acid)의 칼륨염 또는 적어도 약 30-35% 베타산 수지 및 유화제 (예를 들어, 폴리소르베이트)를 포함하는 액체 조성물을 포함하는 스트립(strip)을 제공한다. 바람직하게, 상기 스트립은 같은 비율의 베타산 수지, 프로필렌글라이콜 및 폴리소르베이트 60을 포함하는 용액 또는 유화액에 습윤된다. 일 구현예에서, 베타산 수지는 약 10-20% (예를 들어, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20%)의 홉 베타산의 칼륨염을 포함한다. 더 바람직한 구현예에서, 상기 스트립은 약 16%의 홉 베타산의 칼륨염을 포함하는 액체 조성물을 포함한다.
본 발명의 다른 특징 및 이점은 상세한 설명 및 청구항에 의해 더 명확해진다.
본 발명에 있어서 "진드기 (acarid)"는 응애 (mites) 및 진드기 (ticks)를 포함하는 응애목의 거미류를 의미한다. 예를 들어, 상기 진드기는 Tropilaelaps clareae , Tropilaelaps koenigerum, Tropilaelaps mercedesae 및 Tropilaelaps thaii를 포함한다.
본 발명에 있어서 "알파산"은 후물론, 아드후물론, 코후물론, 이의 유사체 또는 이의 유도체와 구조적인 상동성을 가진 홉 식물 (Humulus lupulus)로부터 추출된 유기산을 의미한다. 후물론, 아드후물론 및 코후물론은 세 개의 가장 풍부한 알파산 유사체이다. 알파산의 다른 예의 알파산 유도체는 이소알파산, 로이소알파산, 테트라히드로이소알파산 및 헥사히드로이소알파산을 포함하지만, 이에 한정되지는 않는다.
본 발명에 있어서 "베타산"은 루풀론, 아드루풀론, 코루풀론, 이의 유사체 또는 이의 유도체와 구조적인 상동성을 가진 홉 식물 (Humulus lupulus)로부터 추출된 유기산을 의미한다. 루풀론, 아드루풀론 및 코루풀론은 세 개의 가장 풍부한 베타산 유사체이다. 다른 예의 베타산 유도체는 후루풀론, 헥사히드로베타산 및 헥사히드로후루풀론을 포함하지만, 이에 한정되지는 않는다.
본 발명에 있어서 "생물학적인 기능"은 하나의 생물체의 생리학적인 또는 행동학적인 활성을 의미한다. 예를 들어, 상기 생물학적인 기능은 생식, 호흡, 신경활동 및 운동을 포함한다. 꿀 생산은 꿀벌에게 특정된 생물학적인 활성이다.
본 발명의 개시에서, "포함하다", "포함하는", "구성하는", "가지고 있는" 등은 미국 특허법에서 그들에게 수여된다고 생각되는 의미를 가질 수 있고, "포함하다", "포함하는" 등을 의미할 수 있다; "필수적으로 구성된" 또는 "필수적으로 구성되다"와 같은 용어는 미국 특허법에 수여된 의미를 가지고 있고, 상기 용어는 인용된 것의 기본적이거나 새로운 특성이 인용된 것 이상의 존재에 의해 변하지 않는 이상은 인용된 것의 이상의 존재를 허용하면서 특별한 제약을 두지 않지만, 선행 문헌의 구현예는 제외한다.
본 발명에 있어 "접촉하는"은 어느 조성물에 닿는, 관련이 있는 또는 근접한 것을 의미한다. 예를 들어, 홉 유도체는 벌집 구조의 안 또는 바깥쪽의 벌집과 접촉할 수 있다.
본 발명에 있어 "제어된 방출"은 시간, 일, 주 또는 달 동안 방출되는 것을 의미한다.
본 발명에 있어 "기생하는 응애를 제어하는 것"은 응애 생존을 억제하는 것 또는 응애 수의 증가를 감소시키는 것, 늦추는 것, 또는 일정하게 유지시키는 것을 의미한다. 일 구현예에서, 본 발명은 꿀벌, 꿀벌 군집 또는 벌통 (예를 들어, 상자식 벌통)의 Tropilaelaps clareae , Tropilaelaps koenigerum , Tropilaelaps mercedesae 및 Tropilaelaps thaii 감염을 감소시킨다. 다른 구현예에서, 본 발명은 꿀벌, 꿀벌 군집 또는 벌집 (예를 들어, 상자식 벌통)의 Tropilaelaps clarea 및 Tropilaelaps koenigerum 감염을 감소시킨다. 다른 구현예들에서, 본 발명의 조성물은 기생하는 응애를 죽이거나 퇴치한다.
본 발명에 있어 "벌집(comb)"은 꿀벌 자손 ("새끼들")을 양육하고 꿀 및 화분을 저장하기 위해 사용되는 육각형의 말랍 벌방의 구역을 의미한다.
본 발명에 있어 "유효량의 응애 살충제"는 응애의 생물학적인 기능을 방해하는데 효과적인 양을 의미한다.
본 발명에 있어 "유화액"은 적어도 두 종류의 혼합되지 않는 액체를 포함하는 혼합물을 의미한다. 전형적으로, 상기 액체 중 하나는 두 번째 액체에서 작은 방울로 분산된다. 바람직하게, 상기 유화액은 두 개의 상(phase)이 몇 시간, 몇 일, 몇 주 동안 안정적으로 혼합된 상태로 있는 안정적인 유화액이다. 상기 유화액은 추가의 유화액을 포함할 수도 있고 포함하지 않을 수도 있다.
본 발명에 있어 "벌통(hive)"은 벌 군집을 포함하는 인공의 구조물을 의미한다. 현대의 상자 벌통은 전형적으로 바닥의 판자, 덮개 및 겹쳐서 적층된 하나 이상의 상자들을 포함한다. 안쪽에서, 각각의 상자는 일련의 이동 가능한 벌집의 틀 또는 벌의 공간으로부터 떨어진 수직으로 고정된 틀을 포함한다.
본 발명에 있어 "꿀벌"은 속 Apis의 벌목의 곤충을 의미한다. 상기 용어 "꿀벌"은 상기 곤충의 성충형에 제한되지 않고, 알, 애벌래 및 번데기로 한정되지 않은 모든 꿀벌의 발달 단계를 포함한다. 예를 들어, 꿀벌류는 Apis andreniformis , Apis cerana , Apis dorsata , Apis florea , Apis koschevnikovi , Apis laboriosa 및 Apis mellifera을 포함한다.
본 발명에 있어 "꿀벌 군집"은 벌의 공동체를 의미한다. 꿀벌 군집은 야생에서 발생할 수도 있고 양봉가에 의해 유지될 수 있다.
본 발명에 있어 "꿀벌에 기생하는 응애"는 꿀벌을 마비시키거나 꿀벌집을 감염시키는 모든 진드기를 의미한다. 특정 구현예에서, 상기 응애는 과 Varroidae, 과 Laelapidae 또는 과 Tarsonemidae의 구성원이다. 예를 들어, 꿀벌에 기생하는 응애는 Acarapis woodi , Acarapis dorsalis , Acarapis externus , Euvarroasinhai , Euvarroawongsirii 및 중국가시응애 (예를 들어, Tropilaelaps clareae, Tropilaelaps koenigerum, Tropilaelaps mercedesae, 및 Tropilaelaps thaii), Proctolaelaps regalis , Varroa 응애 (예를 들어, Varroa jacobsonii, Varroa renderer) 및 기관의 진드기류 (tracheal mites)를 포함한다.
본 발명에 있어 "홉 유도체"는 홉 (Humulus lupulus) 유도체에서 자연적으로 발생하는 모든 분자 및 이의 화학적 유도체를 의미한다. 홉 유도체(예를 들어, 알파산, 베타산)는 홉으로부터 정제되거나 화학적으로 합성될 수 있다.
본 발명에 있어 "감염"은 임의의 부위의 군집화 (colonization) 또는 해충에 의한 생물체의 기생이다.
본 발명에 있어 "분리된 홉산"은 원래 자연적인 상태에서 홉산에 동반되는 하나 이상의 성분으로부터 분리된 본 발명의 홉산을 의미한다. 본 발명의 분리된 홉산은 예를 들어, 원료로부터 추출 또는 화학적인 합성에 의해 얻어질 수 있다. 순도는 예를 들어, 칼럼 크로마토그래피, 분광광도법, 폴리아크릴 젤 전기영동 또는 HPLC 분석과 같은 임의의 적정한 방법에 의해 측정될 수 있다.
본 발명에 있어 "응애 살충제"는 응애의 생물학적인 기능을 억제하는 물질이다. 예를 들어 응애는 Tropilaelaps clareae, Tropilaelaps koenigerum, Tropilaelaps mercedesae, 및 Tropilaelaps thaii를 포함한다.
본 발명에 있어 "응애 살충제의 활성"은 응애 또는 다른 진드기의 성장, 번식 또는 생존을 억제하는 모든 활성을 말한다. 하나의 바람직한 구현예에서, 본 발명의 조성물은 꿀벌집의 중국가시응애류 (예를 들어, Tropilaelaps clareae, Tropilaelaps koenigerum, Tropilaelaps mercedesae, 및 Tropilaelaps thaii)의 감염을 감소시킨다
본 발명에 있어 "핵 군집 (nucleus colony)"은 적어도 하나의 여왕벌, 하나 이상의 벌, 꿀의 틀 및 새끼들을 포함하는 틀을 포함하는 수송에 적합한 포장물을 의미한다. "새끼들"은 벌집 안에서 자라는 하나 이상의 알, 태아, 애벌레 및 번데기 상태를 지칭한다. 전형적으로, 상기 핵 군집은 택배 또는 우편을 통해 운반에 적합한 박스, 상자 또는 다른 용기에 포장된다.
본 발명에 있어 "포장된 벌"은 적어도 하나의 여왕벌 및 하나 이상의 꿀벌을 포함하는 수송에 적합한 포장물을 말한다. 전형적으로, 포장된 벌은 교미 된 또는 알을 낳는 여왕벌 및 다수의 벌들 (예를 들어, 1 lb, 2 lb, 3lb 또는 그 이상)을 포함한다.
본 발명에 있어 "응애 감염을 예방하는 것"은 응애 감염이 Apis 군집에서 발생될 가능성을 낮추는 것을 의미한다.
본 발명에 있어 "응애 감염을 치료하는 것"은 Apis 군집에서 응애 인구의 성장을 감소시키거나, 유지시키거나, 늦추는 것을 의미한다.
본 발명은 꿀벌에 기생하는 중국가시응애를 제어하기 위한 조성물 및 방법을 제공한다.
도 1은 홉 베타산을 처리한 후 시간에 따른 중국가시응애의 사망률을 보여주는 그래프이다.
본 발명은 중국가시응애류 (예를 들어, Tropilaelaps clareae, Tropilaelaps koenigerum, Tropilaelaps mercedesae, 및 Tropilaelaps thaii)를 제어하기 위한 방법 및 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 부분적으로, 홉의 자연적으로 발생하는 성분이 꿀벌에 기생하는 응애의 감염 예방 및 치료에 유용하다는 발견에 기초한다.
본 발명은 꿀벌, 꿀벌 군집 또는 꿀벌통에서 중국가시응애류(예를 들어, Tropilaelaps clareae, Tropilaelaps koenigerum, Tropilaelaps mercedesae, 및 Tropilaelaps thaii)의 감염을 감소시키는 응애 살충제의 방출 장치를 제공한다. 하나의 구현예에서, 상기 장치는 홉산 (예를 들어, 알파, 베타산)을 포함하는 스트립이다. 하나의 구현예에서, 상기 스트립은 용매(예를 들어, 프로필렌글라이콜) 내에 적어도 약 0.1%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%의 홉 베타산의 칼륨염 및 유화제 (예를 들어, 폴리소르베이트)를 포함하는 액체의 조성물을 포함한다. 다른 구현예에서, 상기 스트립은 중국가시응애류의 감염을 치료하고 예방하는데, 상기 스트립은 중국가시응애류를 죽이고 퇴치하는데 필요한 유효량의 홉 베타산, 유화제 및 용매를 포함하는 액체의 조성물을 포함한다. 바람직하게, 상기 스트립은 같은 비율로 프로필렌글라이콜 또는 다른 용매 내에 분산된 베타산 수지 및 폴리소르베이트-60 또는 다른 유화제를 포함하는 용액 또는 안정적인 유화액에 습윤된다. 상기 습윤된 스트립은 기생하는 응애에 감염된 꿀벌과 접촉하게끔 벌집 내에 매달려지거나 벌집 내에 놓여진다. 상기 베타산은 접촉된 기생하는 응애를 죽이고, 상기 벌들은 꿀벌통 전체에 걸쳐 홉 베타산을 확산시킨다. 이론에 의해 얽매이지 않고서도, 상기 벌들은 털 손질 및 신체 접촉으로 상기 벌통 전체에 상기 베타산을 확산시킨다. 하기에 상세하게 기재된 바와 같이, 홉 베타산은 벌통 내에서 기생하는 응애의 집단을 감소시키는데 효과적이다.
꿀벌
(
Apis
)
꿀벌은 네 개의 생애의 단계를 거치는 곤충이다: 알, 애벌레, 번데기 및 성충. 성충벌은 세 개의 계급 중 하나에 속해 있다: 여왕벌, 일벌 또는 수벌. 상기 여왕벌은 번식을 할 수 있고 모든 알의 생산을 책임지고 있는 군집 안에서의 유일한 암컷이다. 상기 일벌들은 꿀을 모으고 여왕벌의 자손 또는 "새끼들"을 돌보는 비생식적인 암컷이다. 상기 수벌들은 상기 여왕벌과 교미하는 수컷 벌이다. 알에서 성충 벌까지의 생명 주기는 일벌에게는 21일이 걸리고 수벌은 24일이 걸린다. 상기 여왕벌은 벌집의 하나의 셀에서 각각의 알을 낳는다. 상기 알은 일반적으로 4일째에 애벌레로 부화하는데, 상기 애벌레는 셀에서 성장을 계속한다. 9일째에 성장하고 있는 애벌레가 있는 셀은 밀랍으로 덮여있고, 상기 애벌레는 번데기 변태를 겪는다. 21일째에 새로운 성충 일벌이 나타난다.
진드기 (
Acarids
)
진드기는 다양한 식물 및 꿀벌을 포함한 동물에서 기생충으로써 활동하는 작은 기생의 거미류이다. 꿀벌을 잡아먹는 기생하는 응애는 아시안 꿀벌 응애 중국가시응애류 (예를 들어, Tropilaelaps clareae, Tropilaelaps koenigerum, Tropilaelaps mercedesae, 및 Tropilaelaps thaii)를 포함한다. 중국가시응애는 아시아 태생이고 그들의 원래의 숙주인 거대한 꿀벌인 Apis dorsata에서 유럽 꿀벌인 A. melllifera까지 퍼져나갔다. 속 중국가시응애 (진드기, Laelapidae)의 응애는 성장하는 새끼들 및 성충 꿀벌 둘 다에 영향을 미치는 기생하는 응애이다. 중국가시응애는 바로아(Varroa)보다 더 높은 번식률을 보여준다. 중국가시응애는 더 빠른 성장 시간 및 생식 시기 사이에서 더 짧은 편승기간(비생식의 이송 단계, 성충벌로 지낸 시간)을 보인다. 결과적으로, 응애의 양쪽 종류가 같은 군집에서 존재할 때 중국가시응애 집단은 바로아보다 현저하게 빠르게 증가한다.
성충 중국가시응애는 밀봉된 새끼들의 셀 내에서 번식이 일어나는 곳에서 애벌레를 포함하는 셀로 들어간다. 전형적으로, 암컷 응애는 성숙한 벌 애벌레에 알을 낳는다. 부화한 즉시, 상기 응애는 번데기 (즉, 성장하는 벌)의 혈림프(혈액)를 섭취한다. 이러한 섭취는 약하고 기형인 성충 벌을 야기한다.
중국가시응애 및 바로아의 종을 구분하는 것은 비교적 간단하다. 바로아 응애는 더 크고, 게 모양이고, 긴 것보다는 더 넓고, 비교적 천천히 움직인다. 중국가시응애의 몸은 가늘고 길고, 새끼들 벌집을 가로질러 빠르게 움직이고 빠르게 이동하는 응애이다. 바로아응애와 다르게, 중국가시응애는 성충 벌을 섭취할 수 없는데 상기 중국가시응애의 구기가 벌의 몸의 벽의 막을 침투할 수 없기 때문이다.
기관의 응애 (tracheal mites)는 벌의 호흡 기관에 사는 미세한 응애이다. 바로아응애는 벌의 혈림프를 섭취하고, 야생 및 길들여진 꿀벌 군집을 감염시키는 외부에 기생하는 기생충이다. 바로아응애의 번식은 성충의 암컷 응애가 밀봉되기 바로 전에 새끼들의 셀로 들어갈 때에 시작된다. 일벌의 새끼들보다 더 큰 셀에서 양육되는 수벌 새끼들은 우선적으로 응애의 감염에 표적이 된다. 상기 암컷 응애는 알을 놓기 전 애벌레의 혈림프를 섭취한다. 바로아 알은 밀봉된 셀에서 부화하고, 성장하는 응애는 벌 번데기를 섭취한다. 암컷 바로아에 의해 낳아진 첫 번째 알은 수컷으로 성장한다. 이후의 알은 그들의 형제와 교미하는 암컷으로 성장한다. 그들의 어미와 마찬가지로 상기 교미 된 응애는 벌이 나타날 때 캡이 쓰인 셀로부터 나온다. 상기 암컷 응애는 일반적으로 그들이 벌의 혈림프를 섭취하는 배의 부분 사이 또는 몸의 부분 사이에서 성충 벌에 들러붙는다. 성충 벌은 중간 숙주 및 새로운 감염 위치로의 이동의 수단으로서의 역할을 한다.
바람직하게, 진드기 제어에 사용되는 응애 살충제는 다음과 같은 네 개의 요구를 다루어야 한다: i) 응애의 생존에 필요한 생리적인 기능에 지장을 주어야 한다; ii) 성충 벌의 죽음을 야기하지 말아야 한다; iii) 사람 양봉업자 또는 사람의 소비가 예정된 꿀에 어떠한 해로운 영향도 없어야 한다; iv) 벌통으로 전달이 가능해야 한다.
응애 제어
꿀벌에 기생하는 응애 감염을 제어하기 위해 사용되는 제품은 벌통에서 중국가시응애류 (예를 들어, Tropilaelaps clareae, Tropilaelaps koenigerum, Tropilaelaps mercedesae 및 Tropilaelaps thaii )의 응애 집단의 성장을 감소하거나, 유지하거나, 늦추거나 또는 중국가시응애류 (예를 들어, Tropilaelaps clareae, Tropilaelaps koenigerum, Tropilaelaps mercedesae 및 Tropilaelaps thaii )의 성장, 생존, 번식, 또는 다른 생물학적인 기능을 억제한다. 바람직하게, 상기 응애 살충제는 응애를 죽인다. 기생하는 응애 감염을 측정하는 방법은 기술 분야에서 알려져 있다. 다수의 변수는 벌 군집에 존재하는 감염의 정도를 나타낼 수 있다: 감염된 벌통으로부터 벌의 샘플에 존재하는 응애의 숫자는 벌통에서 존재하는 감염의 정도에 대한 하나의 측정으로써 사용될 수 있다; 활성적인 감염을 가진 벌통에서 양육된 벌은 감염이 없는 벌통에서 양육된 벌보다 평균적으로 더 작다; 즉, 벌의 크기 또는 무게는 감염의 다른 측정으로써 사용될 수 있다; 감염된 벌통에서 생산된 꿀의 양은 정상적인 벌통에서 생산된 꿀보다 더 적을 수 있다; 따라서, 꿀의 생산은 감염의 정도의 다른 측정으로서의 역할을 할 수 있다; 마지막으로, 심각한 감염은 군집의 완벽한 손실을 야기한다. 즉, 군집의 손실은 벌통에 존재하는 감염의 정도에 대한 측정이 될 수 있다.
하나의 실시예에서, 수벌 새끼들의 샘플링이 진행될 수 있다. 캡이 쓰인 수벌 새끼들은 벌통으로부터 옮겨지고 하얀색 번데기에 대비되어 쉽게 눈으로 보이는 응애의 존재를 위해 검사된다. 이 방법은 응애에 감염된 새끼들의 비율을 측정한다. 끈적끈적한 판 위에 자연의 응애를 떨어뜨리는 것은 응애를 관찰하기 위해 사용되는 가장 일반적인 방법이다. 끈적끈적하거나 바셀린이 덮여진 판은 벌들을 오지 않게 하기 위해 꼭대기에 철망의 스크린을 가지고 벌통의 바닥에 놓이고, 상기 판은 정해진 시간 동안 그 장소에 놓여있다. 1-3일 후에, 상기 판은 옮겨지고 양봉가는 끈적끈적한 판 위에 있는 응애의 숫자를 센다. 24-시간 응애 떨어뜨림은 벌통 감염의 정도에 대한 측정을 제공한다. 아니면, 상기 판은 2, 3 또는 그 이상의 날 동안 그 장소에 놓이고 날마다 떨어지는 응애의 평균 숫자는 측정된다.
분말화 된 당(sugar) 샘플링은 응애의 수를 측정하는 세 번째로 일반적인 방법이다. 이 방법에서, 대략 300개의 살아있는 보모 벌 (벌의 1/2 컵)의 샘플은 병에서 퍼올려 지고, 약 일분 동안 분말화 된 당과 함께 살살 흔들어진다. 당은 응애가 벌에서 떨어지게 하고, 상기 응애는 측정되기 위해 약간의 색깔이 있는 접시로 떨어진다. 벌 또는 1/2 컵 샘플당 응애의 숫자는 감염의 정도의 측정을 제공한다.
다른 방법으로는, 상기 샘플링된 벌들은 알코올 또는 비누투성이의 물로 씻겨져 죽고, 상기 샘플은 이중의 여과기로 부어진다. 굵은 철망은 벌들은 잡지만, 응애가 통과하게 한다; 반면에, 두 번째 더 정교한 스크린은 응애를 잡고 액체가 흘러가게 한다. 상기 샘플에 존재하는 상기 응애는 그런 다음 측정된다.
하나의 구현예에서, 본 발명의 응애 살충제는 벌통에서 감염의 정도를 약 10%, 25%, 50%, 75% 또는 심지어 100%까지 감소시킨다. 다른 구현예에서, 본 발명의 살충제는 적어도 50%, 60%, 70% 응애 치사율을 야기한다. 바람직하게, 상기 응애 살충제는 75%, 80%, 90%, 또는 심지어 95% 또는 100%의 응애의 치사율을 야기한다. 스크리닝 방법은 성충 벌에 치명적인 영향을 최소화하면서 응애에게는 치명적인 (예를 들어, 적어도 70% 응애 치사율을 야기하는) 홉 유도체의 농도를 확인하기 위해 사용된다.
다른 방법으로, 본 발명의 응애 살충제는 응애 번식을 억제한다. 바람직하게, 상기 응애 살충제는 적어도 25%, 50%, 75% 또는 100%까지 응애의 번식을 감소시킨다. 다른 접근법으로, 상기 응애 살충제는 진드기의 운동에 필요한 생물학적인 기능에 지장을 준다; 이러한 치료는 상기 응애가 잡히고, 익사 되고, 고립되거나 또는 하나의 지역으로부터 제거되게 한다. 본 발명은 포장된 벌 및 핵 군집에서 응애의 제어를 가능하게 한다. 포장된 벌 및 핵 군집은 전형적으로 교미된 여왕벌 및 다수의 꿀벌(예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5 lbs)을 포함한다. 포장된 벌 및 핵 군집은 전형적으로 하나 이상의 벌통을 시작하거나, 확장하거나 또는 대체할 때의 사용을 위해 최종 소비자 (예를 들어, 양봉가)에게 수송된다. 많은 벌 군집이 꿀벌에 기생하는 응애에 감염되기 때문에, 포장된 벌 및 군집의 수송은 감염을 퍼트리거나 증가시킬 수 있다. 포장된 벌 및 군집을 본 발명의 조성물로 처리하는 것은 상기 포장물 또는 군집에서 응애의 감염을 감소시키거나 심지어 제거할 수 있다. 하나의 구현예에서, 상기 포장물 또는 군집은 본 발명의 스트립을 포함한다. 다른 구현예에서, 상기 포장물 또는 용기의 어떤 부분은 분리된 홉산 또는 홉산 유도체 (예를 들어, 홉 베타산)를 포함하는 조성물로 담지된다.
응애 살충제의 스크리닝
현재 응애 감염을 제어하기 위해 사용되는 상용 제품들은 높은 농도로 투여될 때 성충 벌에게 치명적일 수 있고, 사람 양봉가에 해로운 영향을 끼칠 수 있고, 사람 소비가 예정된 꿀을 오염시킬 수 있다. 종래의 응애 살충제는 타우-플루발리네이트(선택성 접촉 및 내복독(stomach poison)으로써 사용되는 합성 피레스로이드 화합물) 및 동물의 이, 진드기 및 응애를 제어하기 위해 사용되는 쿠마포스 (침투성의 유기의 포스페이트)를 포함한다. 종래의 응애 살충제와 다르게, 본 발명의 조성물은 홉으로부터 유래한 안전한 천연물을 포함한다. 홉은 맥주의 맛을 내기 위해 몇 세기 동안 사용되어 왔다; 즉, 홉 유도체를 포함하는 제형은 일반적으로 안전하다. 본 발명의 응애 살충제 조성물은 사람 양봉가 또는 사람의 소비가 예정된 꿀에 해로운 영향을 끼치지 않을 것이다.
본 발명의 응애 살충제는 생애 주기 동안 꿀벌에 해로운 영향이 거의 없거나 없지만, 응애의 생물학적인 기능을 죽이거나 방해하는데 효과적인 홉 유도체의 농도를 포함한다. 여기에 기재된 것처럼, 약 4%의 농도로 전달된 홉 유도체인 베타산은 4 시간 후에 성충 벌에서 0%의 치사율을 야기하는 반면, 응애의 87%를 죽였다. 하나의 접근법으로, 응애는 노출된 응애의 50%에서 100%를 죽이는 농도를 발견하기 위해 다양한 농도의 홉 유도체의 다른 농도에 노출된다. 성충 벌은 꿀벌 생존에 최소한의 영향을 가지는 농도를 발견하기 위해 응애 살충제의 활성을 가지는 홉 유도체의 농도에 노출된다. 바람직하게, 성충 벌의 적어도 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 또는 100%는 응애 살충제의 조성물에 노출된 후 살아남을 것이다. 비슷한 접근법으로, 응애 및 꿀벌의 번식에 홉 유도체의 영향은 평가된다. 스크리닝 검증은 암컷 응애가 낳은 알의 숫자를 감소시키거나, 부화하는 알의 숫자를 감소시키거나, 또는 생식이 가능한 성충으로 자라는 응애의 숫자를 감소시키는 응애 살충제의 농도를 결정하기 위해 활용된다; 바람직하게, 상기 감소는 적어도 25%, 50%, 75%, 85%, 95% 또는 100%까지이다.
홉 유도체
홉 유도체는 홉 식물 (Humulus lupulus)에서 자연적으로 발생하거나 화학적으로 합성(자연적인 생합성의 공정 (예를 들어, 살아있는 생명체(예를 들어, 포유류, 식물, 박테리아))의 신진대사) 또는 사람의 발명을 이용한 합성적인 공정(예를 들어, 화학적인 합성)에 의한 화합물이다. 본 발명의 조성물은 홉에서 유래한 하나 이상의 화합물을 포함한다. 그 중 특히 흥미로운 것은 홉산이다. 홉은 두 개의 주요한 유기산 종류인 알파산 및 베타산을 포함한다. 홉산은 맥주 만드는데 사용되는 홉의 쓴 맛이 나는 산의 성분이다. 알파산의 세 개의 주요한 유사물은 후물론, 코후물론 및 아드후물론이 있고, 베타산의 세 개의 주요한 유사물은 루풀론, 코루풀론 및 아드루풀론이 있다. 알파산 및 베타산에 존재하는 유사물의 비율은 다양하다. 따라서, 홉 유도체 및 홉 생산물은 일반적으로 하나 또는 이러한 유사체의 혼합물을 함유한다. 존재하는 유사체의 비율은 유도체 및 생산물을 생산하는데 사용되는 홉 종류에 따라 달라진다. 알파산 및 베타산은 천연의 홉으로부터 정제 또는 전통적인 방법에 따른 화학적인 합성에 의해 얻어질 수 있다. 예를 들어, 홉 유도체는 베타산, 헥사히드로베타산, 로이소알파산, 이소알파산, 테트라히드로이소알파산 및 헥사히드로이소알파산을 포함한다. 홉 유도체를 포함하는 조성물은 또한 상업적으로 이용가능하다. John I. Haas 회사의 홉 유도체를 포함하는 제품들은 레디홉(Redihop)®, 이소홉(Isohop)®, 테트라홉 골드(Tetrahop Gold)®, 헥사홉 골드(Hexahop Gold)®, MgRIAA 및 MgBeta을 포함한다. 이러한 제품들에서 유효성분은 각각 베타산, 로이소알파산(RIAA), 이소알파산(IAA), 테트라히드로이소알파산 (THIAA), 헥사히드로이소알파산 (HHIAA), 로이소알파산의 마그네슘염 (MgRIAA) 및 베타산의 마그네슘 염 (MgBeta)이다. 편의를 위해, 이러한 제품들의 특성은 표 1에 기재되어 있다. 이러한 제품들 또는 홉 유도체는 일반적으로 본 발명의 방법에서 사용에 적합한 농도로 희석된다.
식물의 추출물은 식물 (예를 들어, 홉)로부터 화합물의 정제를 위해 종종 사용된다. 추출물은 건조시키고 이어서 상기 건조된 물질을 자르거나 가는 것에 의해 얻어질 수 있다. 본 발명에 있어 용어 "추출물"은 홉과 같은 식물의 본질적인 구성 성분의 농축된 제제를 나타낸다. 일반적으로, 추출물은 식물을 건조하고 분말화 하는 것에 의해 얻어진다. 선택에 따라서는, 상기 식물, 상기 건조된 식물 또는 상기 분말화 된 식물은 용액에서 가열될 수 있다. 상기 추출물은 액체의 형태로 사용될 수도 있고, 다른 액체 또는 고체의 허브의 추출물과 혼합될 수도 있다. 또 다르게는, 상기 추출물은 상기 액체의 형태로부터 고체의 추출물을 침전시키는 것에 의해 얻어질 수 있다. 상기 추출 공정은 적절한 용매의 선택에 의해 수행될 수 있는데, 용매는 일반적으로 에탄올/물 혼합물, 메탄올, 부탄올, 이소-부탄올, 아세톤, 헥세인, 석유 에테르, 또는 침출법, 여과, 재침출, 역류 침출법, 터보-침출법 또는 초임계의 이산화탄소 (온도/압력) 추출법에 의해 얻어진 다른 유기 용매이다. 상기 추출물은 그 다음 증발될 수 있고, 상기 추출물을 공기 건조, 분무 건조, 진공 오븐 건조, 유동층 건조법 또는 냉동 건조하는 것에 의해 산출량으로 농축시킬 수 있다.
조추출물은 여기에서 기재된 바와 같이 응애 살충제의 활성에 대해 테스트 되었다. 응애 살충제의 활성을 가진 양성의 납 추출액의 추가의 분류법은 상기 관찰된 영향에 원인이 되는 화학의 구성 성분을 분리하기 위해 필요하다. 즉, 상기 추출법, 분류법 및 정제 공정의 목표는 응애의 생물학적인 기능을 방해하는 조추출액 내에 있는 화학적인 개체의 세심한 분석 및 식별이다. 이러한 이질의 추출물의 분류 및 정제의 방법은 기술분야에서 알려져 있다. 원한다면, 응애 살충제처럼 유용하다고 보인 화합물들은 기술분야에서 알려진 방법에 따라 화학적으로 변형된다.
많은 방법들이 후보의 화합물의 화학적 합성을 위해 이용 가능하다. 이러한 화합물은 그 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 알려진 일반적인 합성 기술 및 방법론을 사용해 손쉽게 이용 가능한 출발 물질로부터 합성될 수 있다. 여기에 기재된 방법에 의해 확인된 상기 화합물을 합성하는데 유용한 합성적인 화학적 변형 및 보호기 방법론 (보호 및 비보호)은 기술분야에서 알려져 있고, 예를 들어, R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989); T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 2nd ed., John Wiley and Sons (1991); L. Fieser and M. Fieser, Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994); L. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995); 및 M. Verzele and D. De Keukeleire, Chemistry and Analysis of Hop and Beer Bitter Acids, Elsevier: Amsterdam (1991)에 기재되어 있다. 화학적으로 합성된 알파 및 베타산은 혼합물로부터 분리될 수 있고, 칼럼크로마토그래피, 높은 압력의 액체 크로마토그래피(HPLC) 또는 재결정과 같은 방법에 의해 추가적으로 정제될 수 있다. 전문가에 의해 인식될 수 있는 바와 같이, 여기에 기재된 상기 혼합물을 합성하는 것의 추가적인 방법은 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게도 자명할 것이다. 추가적으로, 상기 원하는 화합물을 얻기 위해 상기 다양한 합성 단계는 교체된 순서로 수행될 수 있다.
본 발명의 상기 화합물은 하나 이상의 비대칭 중심을 포함할 수 있으므로 라세미체 및 라세미 혼합물, 거울상이성체, 부분입체 이성질체 및 부분입체이성질체 혼합물을 발생시킬 수 있다. 이러한 화합물의 모든 이성체의 형태는 본 발명에서 명확하게 포함된다. 본 발명의 화합물은 또한 많은 호변이성의 형태로 나타날 수도 있다, 예로써, 본 발명은 명확하게 여기에 기재된 상기 화합물의 모든 호변이성의 형태를 포함한다. 이러한 화합물의 모든 이성체의 형태는 본 발명에서 명확하게 포함된다. 여기에 기재된 상기 화합물의 모든 결정체의 형태는 본 발명에서 명확하게 포함된다. 여기에서 사용된 바와 같이, 여기에 기재된 제조법의 상기 화합물을 포함하는 본 발명의 화합물은 유도체를 포함하는 것으로 정의된다. 유도체는 원하는 특성을 높이기 위해 적절한 기능기를 첨부하는 것에 의해 변형된 본 발명의 화합물을 포함한다.
본 발명의 화합물의 허용 가능한 염은 허용 가능한 무기물 및 유기물의 산 및 염기로부터 유래된 것을 포함한다. 적절한 산 염의 예는 아세테이트, 아디페이트, 알지네이트, 아스파르테이트, 벤조네이트, 벤진설포네이트, 바이설페이트, 뷰티레이트, 시트레이트, 캄포레이트, 캄포르설포네이트, 디글루코네이트, 도데실설페이트, 에탄설포네이트, 포르메이트, 푸마레이트, 글루코헵타노에이트, 글리코레이트, 헤미설페이트, 헵타노에이트, 헥사노에이트, 히드로클로라이드, 히드로브로바이드, 히드로아이오다이드, 2-히드록시에탄설포네이트, 락테이트, 말레인이트, 말로네이트, 메탄설포네이트, 2-나프탈렌설포네이트, 니코티네이트, 나이트레이트, 팔모에이트, 펙티네이트, 퍼설페이트, 3-페닐프로피오네이트, 포스페이트, 피크레이트, 피발레이트, 프로피오네이트, 살리실레이트, 석시네이트, 설페이트, 타르트레이트, 티오사이네이트, 토실레이트 및 언디마노에이트를 포함한다. 옥사릭산과 같은 다른 산은 본 발명의 화합물 및 허용 가능한 산의 부가적인 염을 얻는데 중간체로써 유용한 염의 조제에서 사용될 수 있다. 적절한 염기로부터 얻어진 염은 알칼리 금속 (예를 들어, 나트륨), 알칼리 토금속 (예를 들어, 마그네슘), 암모늄 및 N-(알킬)4 + 염을 포함한다. 본 발명은 또한 여기에 기재된 상기 화합물의 어떠한 염기성의 질소를 포함하는 그룹의 4차화 반응을 고안한다. 물 또는 기름에서 용해 가능하거나 분산 시킬 수 있는 생성물들은 이러한 4차화 반응에 의해 얻어질 수 있다.
특히, 적어도 1년의 저장 후, 본 발명의 상기 조성물은 본 발명의 출원 시의 적어도 약 95%-100%의 홉산을 보유하고 있는 것으로 밝혀졌다.
수용성의 홉산의 알칼리 금속염 (예를 들어, 나트륨, 칼륨, 리튬 염) 및 비수용성의 홉산의 알칼리 토금속 (예를 들어, 칼슘, 마그네슘)은 일반적으로 약 0.1% 내지 약 95%의 범위에 이르는 정도로 희석액 또는 운반체에서 존재한다. 여기에 기재된 상기 방법은 바람직하거나 여기에서 기재된 응애 살충제의 효과를 얻기 위한 화합물 또는 화합물의 조성물의 유효한 양의 투여에 대해 고려한다. 바람직하게는, 유효 성분 (예를 들어, 홉산 알칼리 금속염, 홉산 알칼리 토금속 염 또는 이들의 혼합)의 양은 전달에 적합한 분말을 형성하기 위해 운반체 물질 (예를 들어, 말토덱스트린, 클러스터 덱스트린, 옥수수전분, 고체의 옥수수 시럽, 글루코즈, 사이클로덱스트린, 아라빅검, 칼라지난, 이눌린, 부분적으로 수소화된 대두 기름, 셀룰로즈, 히드록시메틸 셀룰로즈, 히드록시에틸 셀룰로즈, 히드록시프로필 셀룰로스, 로신, 히포멜로즈)과 혼합된다. 어떤 경우에 있어서, 액체 또는 슬러리를 형성하기 위해 본 발명의 응애 살충제는 희석제(예를 들어, 당 또는 포도당 용액, 물, 주스, 다른 수용성 용액, 물 혼합성의 용액 (에탄올, 크레모포르, 디메틸설포사이드 (DMSO), 디메틸포르마마이드(DMF), 이소프로파놀 (IPA) 또는 글리세롤 및 다른 용매들))를 사용해 액체처럼 제형화 될 수 있다.
전형적인 응애 살충제 조제물은 약 1% 내지 약 95%의 홉산을 포함할 것이다; 상기 범위의 하한치는 5 및 94 사이의 어떤 정수이고, 상기 범위의 상한치는 6 및 95 사이의 정수이며, 상기 홉산은 응애 살충제의 활성을 가진 생성물을 제조하는 방법에서 유용한 운반체 (예를들어, 말토덱스트린, 클러스터 덱스트린, 옥수수전분, 고체의 옥수수 시럽, 글루코즈, 사이클로덱스트린, 아라빅검, 칼라지난, 이눌린, 부분적으로 수소화된 대두 기름, 셀룰로즈, 히드록시메틸 셀룰로즈, 히드록시에틸 셀룰로즈, 히드록시프로필 셀룰로스, 로신, 히포멜로즈)로 제공된다. 비수성 응애 살충제의 조성물이 필요한 곳에서는, 본 발명의 응애 살충제 조성물은 바람직하게 로신 또는 부분적으로 수소화된 대두 기름으로 제형화 될 수 있다. 이러한 조성물은 예를 들어, 수분이 함유된 슬러리에서 활성적인 응애 살충제의 조성물의 느린 방출을 위해 사용될 수 있다. 또 다른 구현예에서, 본 발명의 응애 살충제의 조성물은 셀룰로즈 분말로 분산된다. 앞서 기재된 구현예의 각각에서, 상기 홉산 알칼리 금속 (예를 들어, 나트륨, 칼륨, 리튬), 알칼리 토금속 염 (예를 들어, 칼슘, 마그네슘) 또는 다른 홉산염은 물, 에탄올, 또는 다른 희석제에서 말토덱스트린, 클러스터 덱스트린, 옥수수전분, 고체의 옥수수 시럽, 글루코즈, 사이클로덱스트린, 아라빅검, 칼라지난, 이눌린, 부분적으로 수소화된 대두 기름, 셀룰로즈, 히드록시메틸 셀룰로즈, 히드록시에틸 셀룰로즈, 히드록시프로필 셀룰로스, 고신 및 히포멜로즈 중 하나 이상의 물질과 함께 분산되거나 용해된다. 상기 조성물은 그런 다음 1 mm보다 작은 크기의 입자의 형성을 용이하게 하기 위해 선택적으로 분무 건조될 수 있다. 바람직하게는, 분무 건조를 위해 사용된 조건은 상기 입자가 적어도 약 1 μm, 5 μm, 25 μm, 50 μm, 75 μm, 100 μm, 150 μm, 200 μm, 500 μm, 1 mm, 2 mm 또는 5 mm 크기가 될 수 있게 조절될 수 있다. 홉산 대 운반체의 비율은 약 1:2 내지 1:100이다. 바람직한 비율은 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, 1:6, 1:7, 1:8, 1:9, 1:10, 1:20, 1:30, 1:50, 1:75, 및 1:100을 포함한다. 아니면, 본 발명의 조성물은 희석액 또는 운반체 내에 적어도 약 1%, 10%, 20%, 30%, 50%, 60%, 75%, 80%, 90% 또는 95%의 홉산의 알칼리 금속 (예를 들어, 나트륨, 칼륨, 리튬) 또는 홉산의 알칼리 토금속 염 (예를 들어, 칼슘, 마그네슘)을 포함한다. 상기 홉산의 모든 성분이 금속의 형태일 필요는 없다. 상기 조성물에 존재하는 5% 내지 100%의 홉산은 주어진 시간에 금속 형태로 존재할 수 있고, 95% 내지 0%는 유리산으로써 존재할 수도 있다. 다양한 구현예에서, 본 발명의 조성물은 90%가 금속 형태로 존재하고 10%가 산의 형태로 존재하거나; 50%가 금속의 형태로 존재하고 50%가 산의 형태로 존재하거나; 또한 10%가 금속의 형태로 존재하고 90%가 산의 형태로 존재하는 홉산을 포함한다.
바람직한 구현예에서, 상기 조제물은 운반체 또는 희석액 내에 1 내지 95% (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 25%, 75%, 80%, 90%, 95%)의 홉산을 포함한다. 또한, 이러한 조제물은 약 20% 내지 약 80%의 홉산을 포함한다. 알파 또는 베타산을 포함하는 조성물은 일반적인 방법에 의해 제조된다. 생성물에 첨가를 위해 적합한 홉산은 제형화 시, 제형화 후 그러나 저장 전에, 또는 판매원 또는 소비자에게 판매하기 전 임의의 시간에 생성물에 투여에 적합한 일반적인 정제, 캡슐, 고체, 액체, 유화제, 슬러리, 미세한 과립 또는 분말로 제형화 될 수 있다. 상기 기재된 것보다 더 적거나 더 많은 양이 요구될 수 있다. 여기에서 기재된 상기 조성물은 만약 존재하면 부가적인 응애 살충제의 물질뿐만 아니라 응애의 성장 또는 생존을 억제하는데 유효량으로 여기에서 기재된 제조법의 조성물을 포함한다. 본 발명의 응애 살충제의 조성물은 응애의 억제가 필요한 거의 모든 적용에서 이용될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 조성물은 응애의 성장, 번식 또는 생존을 막거나, 감소하거나, 억제하거나, 늦추거나, 유지시키기 위해 사용된다.
꿀벌에 해로운 영향을 끼치는 것 없이 효과적으로 응애를 죽이기 위해 여기에 기재된 것보다 더 낮거나 높은 투여량이 요구될 수 있다. 특정한 투여량 및 치료 양생법은 여기에 기재된 바와 같이 경험에 기인하여 결정된다. 또한, 본 발명의 조성물은 진드기 감염의 발병을 예방하고, 발병된 진드기 감염을 치료하고, 진드기 감염에 대해 전에 치료가 된 벌통의 상태를 유지하는데 효과적이다.
제형
홉 유도체는 다수의 간편한 제형으로 벌 또는 벌통에 제공될 수 있다. 일반적으로, 벌통 내에서 치료상 또는 예방의 물질을 분산시키기 위한 전략은 i) 음식 공급원 (예를 들어, 액체 또는 고체의 음식물)으로 상기 물질을 제공하는 것; ii) 군집으로부터 조성물을 제거하기 위해 설계된 위생적인 행동을 야기하는 상기 조성물로 상기 물질을 제공하는 것 (벌들에 의해 찢어지도록 설계된 통; 또는 iii) 상기 벌이 군집 전체로 퍼트릴 형태 (예를 들어, 벌통의 입구에서 제공되는 추적용 가루)로 상기 물질을 제공하는 것에 의존할 수 있다. 본 발명의 제형은 성충 벌의 몸에 있거나, 새끼들 셀에 있거나 또는 벌통 안에 있는 응애를 겨냥하기 위해 사용된다. 바람직하게, 본 발명의 조성물은 적어도 41일 동안 벌통에서 유효하다. 그것은 일반적으로 21 내지 30일에 걸쳐서 완성되는 상기 응애 삶의 주기의 전체 동안 응애 살충제가 존재하는 것을 의미한다. 활성이 더 짧은 기간 (예를 들어, 7, 14, 21 또는 30일) 동안 유지되는 곳에서, 본 발명의 조성물의 계속적인 투여가 바람직하거나 요구될 수 있다. 더 오랜 기간 (예를 들어, 2, 3, 6, 9 또는 12달) 동안 유효한 조성물은 또한 고안된다. 이러한 조성물은 응애 감염의 오랜 기간의 치료 또는 예방에 사용될 수 있다.
유화액
본 발명의 응애 살충제는 또한 유화액 또는 용액으로써 제공될 수 있다. 유화액 제형은 유중 수적형 (w/o) 또는 수중 유적형 (o/w)일 수 있다. 작은 방울의 크기는 나노미터 크기 (콜로이드의 확산)에서 몇 백의 미크론까지 다양할 수 있다. 다양한 계면활성제 및 증점제는 보통 상기 작은 방울의 크기를 변경하고, 유화액을 안정화 시키고, 방출을 변경하기 위한 제형에 포함된다. 일 구현예에서, 홉 베타산 (예를 들어, 홉 베타산 수지, 홉 베타산의 칼륨염)은 유화액을 형성하기 위해 용매 (프로필렌 글라이콜)에서 분산된다. 원한다면, 상기 유화액은 유화제 (예를 들어, 폴리소르베이트 60, 레시틴)를 사용하여 안정화 된다. 유화제는 기술 분야에서 알려져 있고 여기에서 기재되어 있다. 꿀벌에 기생하는 응애 감염을 치료하는데 사용되는 하나의 바람직한 제품은 HopGuard®이다. Hop Guard는 33.3% 칼륨 홉 베타산 수지, 33.3% 프로필렌 글라이콜 및 33.3% 폴리소르베이트-60을 포함하는 액체의 용액 또는 유화액이다. 바람직하게, 홉 베타산은 유화제로써 첨가된 폴리소르베이트-60을 포함한 프로필렌 글라이콜 용액에서 분산된다. 상기 유화액을 포함하는 생분해성의 스트립은 상기 벌통으로 운반된다. 상기 스트립은 예를 들어, 홉 베타산 수지, 프로필렌 글라이콜 및 폴리소르베이트-60과 접촉하는 것에 의해 촉촉해진다.
분말화
된 제형
현재의 응애 살충제는 약 1" 넓이, 9" 길이 및 1/4" 두께인 비생분해성의 플라스틱 스트립으로 벌통에 주입된다. 유사한 방법들은 홉 유도체의 운반을 위해 사용될 수 있다. 다른 스트립 조성물은 멤브레인, 종이, 플라스틱 및 고분자 스트립을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다. 하나의 구현예에서, 홉 유도체를 포함하는 조성물은 분말화된 제형으로 제공된다. 기질의 물질은 홉산의 분말화된 제형으로 코팅되며, 상기 코팅은 벌에게 매력적인 분말화 된 당과 같은 물질의 층으로 매입된다. 상기 스트립은 상기 성충 벌이 분말화 된 당을 씹고, 상기 분말화된 홉산을 노출하는 벌통 안쪽에 놓여진다. 상기 분말화 된 홉산은 상기 성충 벌의 몸으로 들어가고, 상기 성충 벌에 존재하는 응애와 접촉해 상기 응애가 죽는 것을 야기한다. 또한, 상기 홉산은 벌에 의해 섭취되어, 상기 벌의 혈 림프에 들어가고, 그곳에서 응애에 의해 섭취되어 상기 응애가 죽는 것을 야기한다.
다른 접근법에서, 상기 분말화 된 혼합물은 "티백"과 유사한 반 투과성의 주머니 내에서 벌통으로 운반된다. 이러한 외부의 물질을 벌통으로부터 제거하기 위해, 상기 벌들은 주머니를 찢으면서, 분말이 방출되게 한다. 상기 분말화 된 홉산은 성충 벌의 몸으로 들어가고 벌통을 통해 확산하여 벌에 존재하는 응애를 죽이고 (그렇지 않으면 응애 번식 또는 생존을 방해하면서), 응애 감염을 억제한다.
캡슐화된 제형
하나의 접근법으로, 홉 유도체는 캡슐화된 제형 (액체 또는 분말)으로 제공된다. 바람직하게, 액체 또는 파우더 형태의 홉 유도체는 상기 벌통 안쪽에서 천천히 분해되는 코팅으로 캡슐화된다. 상기 코팅은 홉 유도체의 장기적인 방출을 가능하게 한다. 바람직하게, 상기 조성물은 2 내지 6 주 (예를 들어, 2, 3, 4, 5, 6주) 동안 방출된다. 캡슐 물질로 사용에 적합한 특정한 물질은 실리카, 진주암, 활석, 진흙, 엽락석, 규조토, 젤라틴 및 젤, 중합체 (예를 들어, 폴리요소, 폴리우레테인, 폴리아미드, 폴리에스테르 등), 고분자 입자 또는 셀룰로즈 같은 다공성의 미립자 또는 기질을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 이러한 것들은 예를 들어, 벽, 배관의 구멍으로부터 화합물을 방출하는 모세형 배관, 고분자 매트릭스로부터 화합물을 방출하는 다른 모양의 고분자 블록, 예를 들어, 스트립, 블록, 정제, 디스크, 불침투성의 용기 내에 화합물을 갖고 있고 측정된 침투성의 멤브레인을 통해 화합물을 방출하는 멤브레인 시스템 및 앞서 말한 것의 조합을 통해 위에 명시된 홉 유도체 또는 다른 화합물을 방출하는 속이 빈 섬유, 속이 빈 관 또는 배관을 포함한다. 이러한 투여조제 조성물의 예는 고분자 라미네이트, 폴리비닐 클로라이드 펠렛 및 미세 모세관이다. 양봉에서 사용에 적합한 캡슐화 방법은 예를 들어 Rieth et. al., Journal of Apiculture Research 25(2):78-84 (1986)에 기재되어 있다.
캡슐화 공정은 일반적으로 화학적 또는 기계적으로 분류된다. 캡슐화에 대한 화학적인 공정의 예는 복합 코아세르베이션, 중합체-중합체 불친화성, 액체 매개체에서 계면의 중합, 인-시투(in situ) 중합, 액체에서 건조, 액체의 매개체에서 열적 및 이온적 젤화, 액체 매개체에서 탈용매화, 전분-기반 화학 공정, 사이클로덱스트린에서 트래핑 및 리포좀의 형성을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다. 캡슐화에 대한 기계적인 공정의 예는 분무 건조, 분무 냉각, 유동층, 정전기를 이용한 증착법, 원심 압출법, 회전하는 디스크 또는 회전의 현탁액 분리법, 환형분사 캡슐화, 액체-가스 또는 고체-가스 경계면에서의 중합, 용매 증발, 압력 압출 또는 용매 추출 용기로 분무하는 것을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
미소캡슐은 또한 응애 살충제의 장기적인 방출에 적합하다. 미소캡슐은 코팅 또는 쉘에 의해 둘러싸인 코어 물질 또는 유효 물질을 포함하는 작은 입자이다. 미소캡슐의 크기는 나노캡슐로 분류되는 1 미크론보다 더 작은 캡슐 및 마크로 캡슐과 같이 1000 미크론보다 더 큰 캡슐을 포함하여, 1 내지 1000 미크론까지 다양하다. 코어 페이로드(payload)는 0.1 내지 98wt%로 다양하다. 미소캡슐은 다양한 구조 (계속되는 코어/쉘, 다핵성 또는 단일체) 를 가질 수 있고 불규칙적이거나 기하학적인 모양을 가질 수 있다.
다른 접근법으로, 상기 홉 유도체는 오일-기반의 전달 시스템으로 제공된다. 상기 오일-홉 유도체 혼합은 고체의 기질에 증착되고 상기 홉 유도체를 포함하는 기질은 벌통에 놓이고 그 뒤에 응애와 접촉해 죽이게 된다. 기름 방출 기질은 식물성유 및/또는 광유를 포함한다. 일 구현예에서, 기질은 조성물을 물에서 쉽게 분산 가능하게 하는 계면활성제를 포함한다; 이러한 물질들은 습윤제, 유화제, 분산제 등을 포함한다.
또한, 본 발명의 응애 살충제는 또한 고체의 정제로 제형화 될 수 있고 기름, 단백질/탄수화물 물질 (바람직하게 식물유-기반), 감미료 및 꿀 벌의 기생충 감염의 예방 또는 치료에 유용한 유효 성분을 포함한다 (바람직하게는 이로 구성된다). 이러한 조성물을 만드는 방법은 기술분야에서 알려져 있고 예를 들어, U.S. 공개 특허 No.20060008492에 기재되어 있다. 일 구현예에서, 본 발명은 고체의 정제를 제공하고, 기름, 단백질/탄수화물 물질 (바람직하게 식물유-기반) 감미료 및 응애 감염의 예방 또는 치료에 유용한 유효 성분 (예를 들어, 홉 알파 및/또는 베타산 또는 이들의 혼합물 및 유도체)을 포함한다 (바람직하게는 이로 구성된다). 정제는 일반적으로 약 4-40wt% (예를 들어, 5wt%, 10wt%, 20wt%, 30wt%, 40wt%)의 기름 (예를 들어, 옥수수, 해바라기, 땅콩, 올리브, 포도 씨, 유동, 튤립, 대두, 목화 씨, 호두, 야자나무, 피마자, 아몬드, 헤이즐넛, 아보카도, 깨, 파두, 카카오, 아마씨, 평지씨, 카놀라유와 그들의 수소화 된 유도체와 같은 식물성 기름; 석유 유래된 기름 (예를 들어, 파라핀 및 석유 젤리), 및 물에 혼합되지 않는 탄화수소 (예를 들어, 파라핀))을 포함한다. 정제는 또한 약 5-40wt% (예를 들어, 5wt%, 10wt%, 20wt%, 30wt%, 40wt%)의 식물유-기반 단백질/탄수화물 물질을 포함한다. 상기 물질은 탄수화물 부분 (예를 들어, 밀, 호밀, 보리, 오트, 옥수수, 쌀, 기장, 수수, 버드시드, 메밀, 알팔파, 미엘가, 옥수수 가루, 대두가루, 곡물 밀가루, 밀미들링, 밀기울, 옥수수 글루틴 가루, 알개 가루, 건조된 이스트, 콩, 쌀과 같은 곡물로부터 유래된) 및 단백질 부분을 함유한다. 상기 물질을 이루는 각각의 부분의 상대적인 분율은 다양한 반면, 상기 물질은 탄수화물 및 단백질의 적어도 한 부분을 포함해야한다.
상기 정제는 또한 약 10-75 wt% (10, 15, 20, 25, 50, 75%)의 감미료를 함유한다. 여기에서 사용된 바와 같이, 본 발명에 있어 "감미료"는 천연적이고 인공적인 감미료 둘 다를 나타낸다. 바람직하게, 상기 감미료는 포도당, 과당, 자당, 갈락토오스, 락토오스와 같은 당(sugar) 및 역당(reversed sugar)이다. 당은 바람직하게는 과립당 (백설탕), 갈색 설탕, 분말 설탕, 미세한 설탕, 아이싱 설탕 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된다. 글리세린과 같은 알코올 및 전분과 같은 복합 탄수화물 또한 "감미료" 성분으로써 사용될 수 있다. 감미료는 벌레들에 대한 유인물질로써 주로 사용되지만, 감미료는 또한, 특히 감미료가 당일 때, 정제가 입상 구조를 가질 수 있도록 하는데 기여한다. 전에 기재된 바와 같이, 입상 구조는 정제가 충분한 힘을 가함에 의해 바스러지게 한다.
선택적으로, 유효 성분의 전달을 돕기 위해 또는 적당한 모양을 정제에 제공하기 위해 다양한 부형제 및 결합체가 사용될 수 있다. 바람직한 부형제 및 결합체는 무수의 락토오스, 미세결정 셀룰로오스, 옥수수 전분, 마그네슘 에스테아레이트, 칼슘 에스테아레이트, 징크 에스테아레이트, 나트륨을 포함한 카복시메틸셀룰로오스, 에틸 셀룰로오스, 히드록시프로필 메틸 셀룰로오스 및 이들의 혼합물을 포함한다.
본 발명에 따른 정제는 모든 이러한 성분을 혼합하고 상기 혼합물을 특정한 적용에 적합한 모양 및 크기의 정제로 압축하는 것에 의해 제조된다. 바람직하게, 정제는 약 2-5 인치 사이의 지름 및 약 0.5-2 인치의 두께를 가진 원반 모양이다. 상기 압축은 수동적 또는 자동적인 압축 장치에 의해 수행된다. 상기 혼합물에 주입된 압력은 상기 정제를 자립하는 형체로 생성할 만큼 충분해야한다.
본 발명에 따른 유효 성분을 곤충에 전달하는 방법은 전에 기재된 바와 같이, 상기 유효 성분을 포함하는 고체의 정제를 제공하는 단계 및 상기 정제를 상기 곤충이 직접적인 접촉을 할 수 있는 위치에 놓는 단계를 포함한다. 일반적으로 제조된 벌통에 서식하는 꿀벌을 치료에 있어서, 상기 정제는 바람직하게 벌통 안쪽에 놓여진다.
정제가 벌통에 놓인 다음 몇 주 후에, 벌들은 정제를 씹고 바스러뜨려 상기 유효 성분을 다른 벌들에게 노출하게 된다. 부스러기들은 꿀 생산용 셀로부터 떨어진 새끼들이 있는 셀로 떨어진다. 바람직하게, 정제는 약 30-45일 안에 산산조각이 난다.
본 발명의 응애 살충제는 또한 벌을 유인하고 섭식 행동을 유발하는 시럽의 형태로 전달될 수 있다. 본 발명에서 사용되는 시럽은 바람직하게 당 및 물을 포함한다. 특히 바람직한 것은 50% w/v 자당 용액이다. 액체의 조성물은 물에 50% 자당을 포함하는 당 시럽에 홉산을 분산시키는 것에 의해 제조된다. 상기 조성물은 벌들을 위한 원료 공급으로써 이용되고, 벌통에 가깝거나 벌통 안에서 적당한 위치에 놓여질 수 있다.
본 발명의 응애 살충제는 또한 벌에서 위생적인 행동을 야기하는데 적합한 패킷으로 전달될 수 있다. 이러한 패킷은 홉산 및 당의 미세한 가루를 벌에 의해 찢어질 수 있는 다공성의 물질에 넣어 제조된다. 바람직하게, 상기 다공성의 물질은 왁스지 또는 필터 종이로 만들어진다. 적합한 필터 종이는 아바카 섬유, 목재펄프 및 셀룰로오스 레이온 섬유를 포함하는 종이이다. 필요에 따라, 상기 종이는 공중합체와 혼합된 폴리에틸렌, 공중합체와 혼합된 폴리프로필렌 또는 100% 폴리프로필렌으로 코팅된다.
다른 구현예에서, 응애 살충제는 분진 조성물 또는 분말로써 제조된다. 분진 조성물은 일반적으로 당을 미세한 분말로 갈고 홉산 분말과 혼합하는 것에 의해 제조된다. 또한, 분진 조성물은 분말이 분무 건조에 의해 얻어지는 말토덱스트린에 대한 실시예 3에서 기재된 바와 같이 제조된다. 숙련된 기술자는 벌들에게 전달이 용이한 크기의 입자 또는 알갱이를 만들기 위해 분무 건조 공정에 사용되는 조건을 조절한다. 바람직하게, 분말은 벌 및 벌의 모든 몸의 부분 (예를 들어, 마디, 홈, 털)을 코팅할 수 있는 미세한 입자로 구성된다. 분진 조성물은 소광(bee frame)의 상부, 벌통 내의 벌집(comb) 또는 벌통의 안쪽 표면에 직접적으로 적용되거나, 벌 무리(bee cluster)에 직접적으로 적용될 수 있다.
또한, 응애 살충제는 임의의 적당한 액체에 홉산을 분산하는 것에 의해 제조된 액체의 분무 조성물로 제조된다. 바람직하게, 상기 홉산은 물에 분산된다. 필요에 따라, 상기 분무 조성물은 또한 분무기가 막히지 않도록 효과적으로 분무가 확산 되게 하는 계면활성제를 포함할 수 있다. 상기 조성물은 벌통 안쪽 또는 소초에 살포되기 위해 사용될 수 있고, 벌 무리에 직접적으로 살포될 수 있다.
다른 접근법으로, 본 발명의 응애 살충제는 수증기의 형태로 전달된다. 벌통으로 이러한 수증기를 전달하는 방법은 예를 들어, 미국 공개 특허 No.20020151249에 기재되어 있다.
응애 살충제 전달
벌 또는 벌통에 해충 제어 물질을 전달하는 장치는 기술분야에서 알려져 있다. 이러한 전달 장치는 스트립, 제어된 방출 스트립, 정제, 저장포, 중합체 디스크, 접시 및 증발 장치를 포함한다. 필요에 따라, 상기 전달 장치는 생분해성의 형태로 제공된다. 하나의 바람직한 구현예에서, 본 발명은 홉 베타산을 포함하는 생분해성의 스트립을 제공한다. 바람직하게, 스트립은 약 16%의 홉 베타산의 칼륨염을 포함하는 액체 조성물에 습윤된다. 하나의 구현예에서, 상기 액체 조성물은 같은 비율의 (즉, 33.3%) 홉 베타산 수지, 프로필렌 글라이콜 및 폴리소르베이트-60을 포함하는 유화액이다. 홉 베타산을 포함하는 습윤된 스트립은 상자식 벌통의 틀에 걸려진다. 일 실시예에서, 치료는 1, 2, 3, 5, 6, 10일 동안 수행된다. 다른 실시예에서, 치료는 2, 3, 4, 5, 6, 8, 10 또는 12 주동안 수행된다. 필요에 따라, 스트립은 건조된 후에 교체된다. 상기 치료는 필요한 만큼 반복된다. 더 많거나 적은 숫자가 사용될 수도 있지만, 일반적으로 10개의 틀 당 2개의 스트립이 사용된다. 일 구현예에서, 상기 사용되었던 스트립은 약 17" 길이이고 1 1/4" 넓이이다. 특정한 구현예에서, 상기 스트립은 쉽게 액체를 흡수하는 섬유를 포함하는 생분해성의 스트립이다. 예를 들어, 상기 스트립은 종이, 카드보드, 합판 또는 다른 비슷한 물질로부터 만들어진다. 상기 스트립은 액체의 홉 베타산 조성물 (예를 들어, 33.3% 홉베타산 수지, 33.3% 프로필렌 글라이콜, 33.3% 폴리소르베이트-60)에 습윤되어 운송되거나 습기에 강한 포일 패킷으로 최종 소비자 (예를 들어, 벌통 관리자)에게 전달된다. 일 구현예에서, 상기 스트립은 넓이로 약 1-2" (예를 들어, 1, 1.25, 1.5, 1.75, 2.0")이고 길이로 약 1-2 피트 (예를 들어, 12, 16, 18, 20, 24")이다.
다른 구현예에서, 본 발명은 꿀벌통에서 응애 감염을 치료하거나 예방하는데 사용되는 홉 베타산을 포함하는 액체 조성물을 포함하는 물결 모양의 스트립을 제공한다. 일 구현예에서, 상기 골판 스트립은 같은 비율로 베타산 수지, 용매 (예를 들어, 프로필렌 글라이콜) 및 유화제 (예를 들어, 폴리소르베이트)를 포함한다. 일 구현예에서, 상기 베타산 수지는 적어도 약 15%의 베타산 및 다른 추출물의 칼륨염을 포함한다. 바람직하게 상기 물결 모양의 스트립은 같은 비율로 프로필렌 글라이콜 또는 다른 용매에 분산된 베타산 수지 및 폴리소르베이트-60 또는 다른 유화제를 포함하는 용액 또는 안정적인 유화액에 적어도 약 24 시간 동안 또는 바람직한 포화 상태가 도달할 때까지 습윤된다. 상기 습윤 된 골판 스트립은 양봉장으로 운반되기 위해 포장된다. 습윤 된 골판 스트립은 기생하는 응애에 감염된 꿀벌과 접촉할 수 있는 벌통 안의 공간에 매달려진다. 상기 베타산은 접촉한 기생하는 응애를 죽이고, 상기 꿀벌은 꿀벌통 전체에 상기 홉 베타산을 분산시킨다.
다른 구현예에서, 본 발명은 중국가시응애류의 감염을 치료하고 예방하는 골판 스트립을 제공하고, 상기 스트립은 중국가시응애를 죽이고 퇴치하는데 효과적인 양으로 홉 베타산, 유화제 및 용매를 포함하는 액체 조성물을 포함한다. 일 구현예에서, 상기 골판 스트립은 같은 비율로 베타산 수지, 용매 (예를 들어, 프로필렌 글라이콜) 및 유화제 (예를 들어, 폴리소르베이트)를 포함한다. 일 구현예에서, 상기 베타산 수지는 적어도 약 15%의 베타산 및 다른 추출물의 칼륨염을 포함한다. 바람직하게 상기 물결 모양의 스트립은 같은 비율의 프로필렌 글라이콜 또는 다른 용매에 분산된 베타산 수지 및 폴리소르베이트-60 또는 다른 유화제를 포함하는 용액 또는 안정적인 유화액에 적어도 약 24 시간 동안 또는 바람직한 포화 상태가 도달할 때까지 습윤된다. 상기 습윤 된 물결 모양의 스트립은 양봉장으로의 배달을 위해 포장된다. 상기 습윤 된 골판 스트립은 기생하는 응애에 감염된 꿀벌과 접촉할 수 있는 벌통 안의 공간에 매달려진다. 상기 베타산은 접촉한 기생하는 응애를 죽이고, 상기 꿀벌은 꿀벌통 전체에 상기 홉 베타산을 분산시킨다.
본 발명의 방법에서 유용한 물결 모양의 시트는 바람직하게 편면의 시트 (즉, 물결 모양의 시트가 고정되는 한 측면 상에 평평한 시트를 가진 카드보드)이다. 바람직하게, 본 발명의 방법에 유용한 골판 카드보드는 두께로는 약 1-2 mm 사이이고, 바람직하게 인치 당 약 5, 6, 7 또는 8의 세로홈으로 구성된다. 다른 구현예에서, 본 발명의 물결 모양의 스트립은 두께로 약 1mm, 2mm, 3mm, 4mm, 5mm, 6mm, 7mm, 8mm, 9mm, 10mm, 15mm, 20mm, 30mm, 40mm이다. 단일벽 및 이중벽 벌통의 카드보드가 사용될 수 있다.
다른 구현예에서, 물결 모양의 시트는 본 발명의 방법에서 유용한 다음과 같은 사양을 가지고 있다:
본 발명의 방법에서 유용한 물결 모양의 시트는 단면 또는 이중면일 수 있고, 종이를 기본 물질로 하는 물질, 나무 섬유를 포함하는 제조된 나무 제품, 플라스틱, 중합체 또는 기술분야에서 알려진 임의의 다른 물질로부터 만들어진다.
포장된 꿀벌의 치료를 위해, 홉 베타산을 포함하는 스트립은 운송 동안 상기 벌 포장물 안에 매달려 있다.
특히, 본 발명의 조성물을 기생하는 응애, 꿀벌, 또는 꿀벌통으로 전달하는데 적합한 장치들은, 예를 들어, 미국 공개특허 20070059333; 20070026765; 20060141904; 20060009122; 20060008492; 20050095954; 20050090560; 20050048093; 20040229542; 20040077291; 20030190860; 20030044443; 20030027490; 20020182977; 20020151249; 20020094756; 20010014346 및 20020151249에 기재되어 있다. 제어된 방출에 적합한 조제하는 방법 및 조성물은 미국 특허 6,843,985; 5,750,129; 4,775,534; 5,849,317; 5,348,511; 6,037,374; 7,137,864; 6,837,770; 6,820,773; 6,702,645; 6,646,014; 6,620,025; 6,595,828; 6,585,557, 6,475,061, 6,468,129; 6,277,371; 6,221,375; 6,204,283; 6,096,350; 6,037,374; 6,010,390; 5,312,622; 5,230,894; 5,227,162; 5,135,758; 5,070,091; 5,069,651; 5,023,359; 4,876,265; 4,867,731; 4,837,216; 4,682,380; 및 4,299,816에 기재되어 있고, 상기 특허들은 참고 문헌으로 여기에 포함되어 있다.
키트
본 발명은 중국가시응애류(예를 들어, Tropilaelaps clareae, Tropilaelaps koenigerum, Tropilaelaps mercedesae, 및 Tropilaelaps thaii)의 감염의 치료 또는 예방을 위한 키트를 제공한다. 일 구현예에서, 상기 키트는 감염의 위치 (예를 들어, 벌통)로의 전달에 적합한 형태로 유효량의 홉 유도체를 함유하는 조성물을 포함한다. 임의의 구현예에서, 상기 키트는 응애 살충제를 함유하는 용기를 포함한다; 이러한 용기는 상자, 앰플, 병, 유리병, 관, 가방, 주머니, 블리스터 팩 또는 기술분야에서 알려진 다른 적당한 형태의 용기일 수 있다. 이러한 용기는 플라스틱, 유리, 적층된 종이, 금속 호일 또는 응애 살충제를 보관하는데 적합한 다른 물질로부터 만들어질 수 있다.
특정 구현예에서, 본 발명은 홉 베타산으로 습윤되거나, 담겨지거나 또는 잔뜩 스며든 물결 모양의 스트립 (예를 들어, 종이, 카드보드, 합판 또는 다른 비슷한 물질 또는 기술분야에서 알려진 다른 흡수가능한 물질)을 특징으로 하는 키트를 제공한다. 예를 들어, 상기 스트립은 약 15-20% (예를 들어, 15, 16, 17, 18, 19, 20%)의 홉 베타 산 (예를 들어, HopGuard®)만을 포함하거나 다른 홉 유도체와 조합으로 포함할 수 있다. 일 구현예에서, 상기 스트립은 기생하는 응애의 감염을 치료하거나 예방하는 제어된 방출 조성물을 포함하고, 상기 조성물은 꿀벌에 기생하는 응애에게 전달하는데 적합한 형태로 유효량의 홉 유도체를 포함한다. 바람직하게, 상기 스트립은 생분해성의 형태이다. 일 구현예에서, 상기 스트립은 홉산 조성물에 미리 담가진 다음 촉촉한 환경에서 상기 스트립을 보존하기 위해 호일, 플라스틱 또는 비슷한 물질로 포장된다. 필요에 따라, 본 발명의 응애 살충제는 감염의 위치에 응애 살충제를 투여하는 것에 대한 설명서와 함께 제공된다. 상기 설명서는 일반적으로 진드기 감염의 치료 또는 예방에 대한 조성물의 사용에 관한 정보를 포함하고 있을 것이다. 다른 구현예에서, 상기 설명서는 다음 중 적어도 하나를 포함한다: 응애 살충제에 대한 설명, 응애 감염의 치료 또는 예방을 위한 복용량 스케쥴 및 투여방법; 주의 사항; 경고; 연구에 대한 설명; 및/또는 참고 문헌. 상기 설명서는 용기에 바로 개제될 수도 있고, 용기에 적용되는 라벨로써, 또는 용기 (있다면)와 함께 또는 안에 제공되는 분리된 시트, 팜플렛, 카드 또는 폴더로써 제공될 수 있다.
실시예
실시예
1: 홉
베타산은
하기에 기재된 표 및 도 1에서 보인 바와 같이
중국가시응애
제어에 효과적이다.
베타 분획은 10%의 베타산 수용액을 제조하기 위해 사용되었다. 본 발명에 있어, 용어 "베타 분획"은 홉 추출물의 대부분의 알파산을 제거하기 위해 알카리 수용액으로 세척될 때 얻어지는 홉 추출물의 기름지고, 왁스의, 수지 같은 부분을 의미한다. 상기 베타 분획은 주로 베타산, 수지, 기름 및 왁스를 함유한다. 상기 베타 분획은 또한 베타산 기름으로도 불린다. 상기 베타 분획은 그대로 사용되거나, 베타 분획에서 알파산의 농도를 감소시키기 위하여 알카리 수용액으로 세척되어 HPLC 분석법에 의한 알파산:베타산의 비율을 0.05 또는 그 이하로 하여 사용될 수 있다. 상기 베타 분획의 온도는 계속되는 혼합으로 60℃까지 증가하였고, 알카리성 수용액은 pH를 10-11로 만들기 위해 KOH의 형태로 첨가되었다. HPLC 분석법으로 베타 분획에서 베타산 함유량을 분석한 후, 액체 상에서 상기 베타산 농도가 10% 내지 50%가 되게 하기 위해 다량의 60℃ 물이 혼합되면서 첨가되었다. 상기 용액의 pH는 필요에 따라 60℃에서 pH 10-11로 조절되었다. pH 조절을 위해 계산된 물의 양으로부터 첨가되는 KOH의 양을 뺄 필요가 있다. 또한, 비록 60℃의 온도가 최적이지만, 55-70℃의 온도 범위는 용인되었다. 혼합은 멈추어 졌고, 상기 혼합물은 상기 용액의 온도가 60℃로 유지하면서 45분 동안 그대로 놓여졌다. 상기 베타산 수용액 층은 수지층으로부터 분리되었다. 상기 베타산 수용액 층은 온도를 60℃로, pH를 10-11로 유지하면서 HPLC에 의해 측정될 때 10% 베타산의 농도로 희석되었다. 상기 수용액 층은 1-13℃로 냉각되었고 (혼합은 선택적이다), 적어도 2 시간 동안 그대로 놓여졌다. 상기 용액은 그런 다음 옮겨지거나 여과되었다.
상기 기재된 바와 같이 제조되거나 상업적으로 이용 가능한 10% 베타산인 Betastab 10A®를 사용하든, 10% 베타산은 1wt%, 2.5wt%, 5wt%, 7.5wt%, 및 10wt%의 베타산 용액을 생산하기 위해 희석되었다. 이러한 홉 베타산 용액 (1%, 2.5%, 5%, 7.5%, 및 10% w/w) 및 아무것도 처리되지 않은 대조군은 중국가시응애에 대한 효능에 대해 실험되었다. 각각의 실험되는 용액의 1 mL는 분리된 페트리 디쉬에 여과 종이 위에 놓여졌고, 각각의 실험 용액은 3 번 반복적으로 테스트 되었다. 중국가시응애의 사망률은 24시간 동안 모니터 되었다.
표 1, 표 2 및 도 1은 중국가시응애의 사망률에 대한 홉 베타산의 효과를 나타내고, 각각은 증가하는 홉 베타산 농도에 따라 중국가시응애의 사망률의 비율의 증가뿐만 아니라 중국가시응애의 절대적인 사망률의 분명한 중가를 보여준다. 10% w/w 홉 베타산의 최고 농도를 테스트하는 것은 24 시간 시점에서 100% 사망률 (즉, 94%) 에 도달한 처리되지 않은 대조군과 비교해 3 시간 안에 중국가시응애의 100% 사망률을 나타냈다. 심지어 가장 낮은 1% w/w 홉 베타산 농도에서도, 상기 중국가시응애의 100% 사망률은 13 시간의 시점에서 나타났고, 처리되지 않은 대조군에서 관찰된 것보다 두 배 이상 더 빠른 사망률이다.
본 발명의 화합물은 본질적으로 상기 기재된 바와 같은 방법 및 일반적인 방법으로 제조된다. 본 명세서의 변수에 관한 정의에 있어서 화학 그룹의 리스트에 대한 설명은 임의의 하나의 그룹 또는 리스팅된 그룹의 조합과 같은 변수의 정의를 포함한다. 여기에 기재된 변수에 대한 구현예의 설명은 임의의 하나의 구현예, 다른 구현예와의 조합, 또는 그들의 부분으로써의 구현예를 포함한다. 다른 구현예는 여기에 기재된 공정에 의해 만들어진 제형 중에 임의의 화합물을 일컫는 것이며, 상기 공정은 여기에 있는 방법 및 실시예에 의해 구현된 공정을 일컫는다. 본 발명의 다른 측면은 여기에 기재된 바와 같이 응애 살충제로써 사용을 위한 제형 중 임의의 화합물에 관한 것이다. 본 발명의 다른 측면은 여기에 기재된 바와 같이 응애 살충제 조성물의 제조에서 사용되는 제형 중 임의의 화합물이다.
하기 표 1은 24시간 동안 홉 베타산의 투여 후 죽은 중국가시응애의 평균수를 나타낸다.
하기 표 2는 24시간 동안 홉 베타산의 투여 후 죽은 중국가시응애의 평균 비율을 나타낸다.
다른
구현예
전술한 설명으로부터, 다양한 사용 및 조건에 적용되기 위해 여기 기재된 본원발명의 변형 및 수정이 가능하다는 것은 분명하다. 이러한 실시예는 또한 기재된 청구항의 범위 내에 있다.
본 명세서의 변수에 관한 정의에 있어서 화학 그룹의 리스트에 대한 설명은 임의의 하나의 그룹 또는 리스팅된 그룹의 조합과 같은 변수의 정의를 포함한다. 본원 기재된 변수에 대한 구현예의 설명은 임의의 하나의 구현예, 다른 구현예와의 조합, 또는 그들의 부분으로서의 구현예를 포함한다.
이 명세서에 기재된 모든 특허 및 공개자료는 각각의 독립적인 특허 및 공개자료가 명확하게 각각으로 참조문헌에 포함되는 것과 같은 정도로 참조문헌에 의해 포함된다.
Claims (31)
- 꿀벌에 기생하는 응애인 중국가시응애류(Tropilaelaps spp.)를 제어하기 위하여 유효량의 홉 유도체를 포함하는 조성물을 상기 중국가시응애류에 접촉하는 단계를 포함하는 꿀벌 기생 응애인 중국가시응애류 제어 방법.
- 제1항에 있어서, 상기 중국가시응애류에 접촉하는 단계는 중국가시응애류가 꿀벌과 접촉하는 동안 일어나는 중국가시응애류 제어방법.
- 꿀벌통에서 기생하는 응애 감염을 치료하고 예방하기 위하여 유효량의 홉 유도체를 포함하는 조성물을 상기 꿀벌 집에 접촉하는 단계를 포함하는 꿀벌통의 중국가시응애류 감염 치료 또는 예방 방법.
- 꿀벌 포장물에서 기생하는 응애 감염을 치료하고 예방하기 위하여 유효량의 홉 유도체를 포함하는 조성물을 상기 꿀벌 포장물에 접촉하는 단계를 포함하는 꿀벌 포장물의 중국가시응애류 감염 치료 또는 예방 방법.
- 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중국가시응애류는 트로피래랩스 클라래 (Tropilaelaps clareae) 또는 트로피래랩스 코에니제럼(Tropilaelaps koenigerum) 응애인 방법.
- 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 꿀벌은 아피스류( Apis spp.)인 방법.
- 제6항에 있어서, 상기 아피스류(Apis spp.)는 아피스 멜리페라(Apis mellifera), 아피스 도르사타(Apis dorsata), 또는 아피스 세라나(Apis cerana)인 방법.
- 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 홉 유도체는 베타산인 방법.
- 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 적어도 0.1%의 베타산을 포함하는 방법.
- 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 베타산 수지를 포함하는 방법.
- 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 적어도 33.3% (중량비)의 베타산 수지를 포함하는 방법.
- 제11항에 있어서, 상기 베타산 수지는 적어도 약 15%의 베타산의 칼륨염 및 다른 홉 추출물을 포함하는 방법.
- 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 홉 추출물은 알파산인 방법.
- 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 적어도 약 16%의 홉 베타산을 포함하는 스트립인 방법.
- 제14항에 있어서, 상기 스트립은 홉 베타산 수지, 폴리소르베이트 60 및 프로필렌 글라이콜을 포함하는 방법.
- 제15항에 있어서, 상기 스트립은 30-35 wt%의 프로필렌 글라이콜, 30-35wt%의 모노옥타디카노에이트, 및 적어도 약 30-35 wt%의 홉 베타산 수지를 포함하는 방법.
- 제15항에 있어서, 상기 접촉은 상기 응애를 죽이거나 퇴치하는 방법.
- 중국가시응애류를 죽이거나 퇴치하기에 필요한 유효량의 홉 베타산, 유화제 및 용매를 포함하는 액체의 조성물을 포함하는 중국가시응애류 감염 치료 또는 예방을 위한 스트립.
- 제18항에 있어서, 상기 베타산 수지는 약 16wt%의 베타산을 포함하는 스트립.
- 제18항에 있어서, 상기 유화제는 폴리소르베이트 60인 스트립.
- 제18항에 있어서, 상기 용매는 프로필렌 글라이콜인 스트립.
- 제18항에 있어서, 상기 스트립은 멤브레인, 종이, 플라스틱, 중합체 스트립, 카드보드, 편면의 골판 시트, 양면의 골판 시트 또는 섬유를 포함하는 스트립.
- 제22항에 있어서, 상기 스트립은 약 15-20%의 홉 베타산의 칼륨염을 포함하는 스트립.
- 제25항에 있어서, 상기 편면의 골판 시트는 골판 시트가 고정된 한 측면 상에 평평한 시트를 가지고 있는 카드보드를 포함하는 스트립.
- 제24항에 있어서, 상기 골판 시트는 약 2mm 두께인 스트립.
- 제24항에 있어서, 상기 골판 시트는 인치 당 5, 6, 7 또는 8개의 세로홈을 포함하는 스트립.
- 30-35 wt%의 프로필렌 글라이콜, 30-35 wt%의 모노옥타디카노에이트, 및 적어도 약 30-35 wt%의 홉 베타산 수지를 포함하는 액체의 조성물을 포함하는 흡수성 물질을 포함하는 스트립.
- 제18항 내지 제27항 중 어느 한 항에 기재된 스트립을 포함하는 벌통.
- 제28항에 기재된 벌통에서 생산된 꿀벌 제품.
- 포장물 내에 꿀벌 및 중국가시응애류 감염을 줄이는데 충분한 양의 분리된 홉산을 포함하는 포장물.
- 벌통을 중국가시응애류를 죽이기 위한 유효량의 홉산 조성물과의 접촉 후에 중국가시응애류 감염 정도가 홉산 조성물과 접촉 전에 벌통의 중국가시응애류 감염 정도 보다 더 낮은 것을 특징으로 하는 벌통.
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